土壤微生物有细菌、放线菌、真菌、藻类、病毒、原生动物。土壤微生物的数量和分布主要受到营养物的种类和浓度、含水量、氧气分压、温度、pH 、抗菌因子等因子的影响（土壤类型、土层的深度、受季节和土壤中的其它生物的影响）1g土壤中大概有108个细菌,107个放线菌,106个真菌;含N量较高的中性土壤中细菌和放线菌较多;真菌在土壤表层分布较多，细菌和放线菌则相对可以分布更深一些。
淡水水质检测中如果发现细菌很多，可能出现水华：微囊藻、鱼腥藻、囊丝藻；水变成蓝色或蓝绿色。海洋赤潮：单细胞鞭毛藻、沟藻、硅藻（真核单细胞）；细菌主要有芽孢杆菌类。
海洋微生物的特点：嗜盐性：2.4～4.0％；嗜压性：耐100大气压；嗜冷性：0～4℃能生长，最适生长温度为18℃左右；耐贫瘠、广食性；增殖很慢，代时很长（几十～100多小时）；趋化性与附着生长；多形性；发光性。空气微生物的特点：具有各种孢子和孢囊及其他处于非营养生长状态；具有抗性结构；致病性强（细菌、病毒、衣原体、支原体）；可变性（种类和浓度的变化大）；可控性（环境小，消毒措施效果好）；一般不繁殖，生存能力强（耐干燥）。
植物与微生物的关系？有益的关系如何？有害的关系如何?
植物对微生物——根圈效应；植物茎叶果实上——附生微生物保护作用；共生——菌根、根瘤菌共生固氮、弗兰克氏菌；真菌细菌病毒病害ti质粒
在正常情况下，人和动物的体表及与外界相通的体腔(如口腔、呼吸道、消化道和泌尿生殖道等)中都有特定种类和数量的微生物生活，它们以动物皮肤或腺体的分泌物、粘液、脱落的细胞及食物消化物或残渣等作为养料，人和动物同时还为微生物提供了具有适宜温度、水分、O2和pH等条件的良好生态环境，并对微生物的生活提供了适应的保护作用。通常将这些微生物称为人或动物的正常微生物区系或正常菌群。
正常菌群的作用：1拮抗作用：正常菌群在生物体的特定部位生长后，对其他的菌群有生物拮抗的作用。产生这种生物屏障的往往是一些厌氧菌。正常菌群通过紧密与黏膜上皮细胞结出来占领位置，由于在这些部位数量很大，在营养竞争中处于优势，并通过自身代谢来改变环境的pH值或释放抗生素，来抑制外来菌的生长。2营养作用：正常菌群的存在影响着生物体的物质代谢与转化。如蛋白质、碳水化合物、脂肪及维生素的合成，胆汁的代谢、胆固醇的代谢及激素转化都有正常菌群的参与。3免疫作用：正常菌群的抗原刺激可以使宿主产生免疫，从而减少了本身的危害。已有实验表明，某些诱发的自身免疫过程具有抑癌作用。
瘤胃微生物主要为细菌、原生动物（主要包括鞭毛虫、纤毛虫）、真菌、细菌噬菌体，但在消化中以厌氧性纤毛虫和细菌为主。瘤胃细菌可分为消化纤维素的细菌、消化半纤维素的细菌、分解淀粉的细菌、利用糖的细菌、利用酸的细菌、分解蛋白质的细菌、产氨的细菌、产甲烷的细菌、分解脂肪的细菌、分解果胶的细菌及分解尿素的细菌。作用：瘤胃内多种细菌之间和细菌与纤毛虫之间，彼此存在着相互共生，共同作用，组成微生物区系。在各类微生物协同作用下，完成饲料营养物的分解和利用。1纤维素的分解与合成：反刍动物饲料中的纤维素，主要依靠瘤胃内的细菌、纤毛虫和真菌来分解，在瘤胃微生物协同作用下，纤维素逐段被分解，最终产生挥发性脂肪酸，被反刍动物所吸收利用。瘤胃微生物能合成维生素B族和维生素K等，所以日粮中缺乏此类维生素并不
和影响反刍动物的健康。2糖的分解和合成：瘤胃微生物分解淀粉、葡萄糖和其他糖类，产生低级脂肪酸、CO
2
甲烷等，同时利用饲料分解产生的单糖和双糖合成糖元，储存于微生物体内，待微生物随食糜进入小肠被消化后，这种糖元又可被利用作为反刍动物体的葡萄糖来源之一。3蛋白质的分解与合成：瘤胃微生物能利用简单的含氮物合成微生物蛋白质，细菌能够用氨基酸或尿素作为氮源来合成氨基酸，因此，在反刍动物中可以用尿素或铵盐来代替日粮中一部分蛋白质饲料。没有细菌的这一转化过程，氨和尿素对反刍动物将是无用的。瘤胃中合成的细菌蛋白在小肠中被消化从而成为反刍动物所需氨基酸的主要来源。瘤胃中的细菌、纤毛虫等能将饲料中的蛋白质分解为氨基酸、氨和酸类等，因此将饲料蛋白经甲醛处理后，使其不易被瘤胃微生物分解，待排入小肠后再被消化，可提高饲料蛋白的利用率。5微生物对瘤胃内容物pH值的调节瘤胃菌群的代谢产物可调节瘤胃内容物的酸碱度，对防止产生酸中毒以及部分地缓解精料代替草料而引起的pH值下降导致纤维消化下降有重要意义。6瘤胃微生物的解毒功能：瘤胃纤毛虫和细菌具有降低硝酸盐、亚硝酸盐的致毒作用。
采样的随机处理或统计如何设计？如何保证样品均一性？
分析结果能否说明问题,关键在于样品的采集和处理1样品的代表性和采样误差的控制土壤的不均一性是造成采样误差的最主要原因土壤是固、气、液三相组成的分散体系,各种外来物进入土壤后流动、迁移、混合较难,所以采集的样品往往具有局限性一般情况下,采样误差要比分析误差高得多为保证样品的代表性,必须采取以下两点技术措施控制采样误差:1)采样前要进行现场勘察和有关资料的收集,根据土壤类型、肥力等级和地形等因素将研究范围划分为若干个采样单元,每个采样单元的土壤要尽可能均匀一致2)要保证有足够多的采样点,使之能充分代表采样单元的土壤特性采样点的多少,取决于研究范围的大小,研究对象的复杂程度和试验研究所要求的精密度等因素采样点设置过少,所采样品的偶然性增加,缺乏足够的代表性;采样点设置过多,则增大了采样的工作量,浪费了人力、物力和财力
（保存
土壤采样：包括采样的布设和取样技术。采剖面土样，应在剖面观察记载结束后进行。在采样前应先将剖面整修、清理，削去最表层的浮土，然后再按层次自上而下逐层从中心典型部位取样。若要分析土壤中金属含量，则应避免使用金属器具取样。在田间采样时，由于土壤本身存在着空间分布的不均一性，因此应以地块为单位，多点取样，再混合成一个混合样品，这样才能更好地代表取样区域的土壤性状。采样方法一般有以下几种。对角线采样法：适宜于污水灌溉地块，在对角线各等分中央点采样。梅花形采样法：适宜于面积不大、地形平坦、土壤均匀的地块。棋盘式采样法：适宜于中等面积、地势平坦、地形基本完整、土壤不太均匀的地块。蛇形采样法：适应于面积较小地形不太平坦、土壤不够均匀须取采样点较多的地块。如果田块不大、形状规则，可用对角线法和梅花形法；如田块形状不规则，地形有变化,或面积较大,可用棋盘式法或蛇形法。力求采样点的情况能代表主要的土壤类型及其污染程度；同时要采集未受污染的土壤作为对照。
重复，随机排列，局部控制，有对照，随机设计？
植物根际细菌的分离筛选；植物内生细菌的分离筛选（纯化；繁殖；保存）
选取附着在植物根上的土壤；系列稀释涂布平板培养法；选择性培养基；选择性培养条件
先用自来水将植物表面清洗干净，然后用无菌水清洗一遍；接着用75％乙醇浸泡消毒5 min，无菌水冲洗后再浸入2.5％次氯酸钠溶液中消毒5 min，无菌水冲洗数遍；将表面消毒的叶片置于研钵内研磨至匀浆，取0.1 ml匀浆液涂布于LB平板，28℃培养3 d，挑取单菌落在LB平板上划线纯化后保存。
植物病原微生物的分离筛选
植物病原细菌一般用稀释分离方法。因为在病组织中病原细菌数量巨大，分离材料中所带的杂菌又大多是细菌，用稀释培养的方法就可以使病原细菌与杂菌分开，形成分散的菌落，从而较容易获得植物病原细菌的纯培养。
真菌用组织分离和稀释分离法。切取小块病健交界处的病组织，经表面消毒和灭菌水洗过以后，移在琼胶培养基平板上培养，待真菌长出后挑取菌丝进行纯化，得到植物病原真菌的分离方法。囊菌和半知菌等大多数真菌用常规组织分离法分离；适用于分离细菌和酵母,一般很少用于分离真菌，但大量产孢的病原真菌和霉菌也用?将孢子悬浮液与熔化并冷却到45℃的培养基混匀，倒平板，但难于掌握温度，也可平板涂布。
水体微生物的富集分离
必要时可采用适当的方法进行浓缩，如：离心法，自然沉降法，过滤法等；沉降剂；使用过滤法浓缩时，可根据目的采用各种过滤基质，如脱脂棉，
空气采集器
微孔滤膜吸附技术;多价金属氢氧化物或盐沉淀;玻璃粉或不溶多聚电解质吸附;透吸袋浸泡于高分子吸水剂中脱水;超速离心，冷冻，超滤，电泳；撞击式；沉降式；过滤式；静电吸附式；旋风式；离心撞击式
比较重要的有：Andersen采样器；Bourdillon采样器；各种改良式Andersen采样器等
Andersen采样器（六级空气生物采样器）
撞击式；高约20cm，直径约11cm，重量约5Kg；6节带有400个小孔的筛版，下面各设一层平板培养基；流量1 in3 /min.,(约28L/min.)；可将1-8.2um的粒子中的绝大部分采集，但是总会有逃逸。
大容量Andersen分级采样器采用经典的Andersen 多级冲击式分级系统，多级分离，通过内置的冲击器有效分离和采集不同粒径的的粒子。AH-600 有五级冲击器和大流量采样泵组成，颗粒物分离粒径从11μm 到7.0 μm。分离纯化技术，如何保证做到菌落纯？
有时加入50-100 U的放线菌酮或制霉菌素抑制真菌或放线菌的生长；在培养基上反复划线纯化，分离单菌落。重复3次以上。
稀有放线菌的诱导捕获法
由于稀有放线菌在自然界中存在的数量比链霉菌少得多，所以常规的土壤分离方法往往较难分离得到它们。有目的的分离稀有放线菌的工作可以采取如下一些措施：一是采用选择性培养基，抑制链霉菌的生长；二是将土样作适当的处理，杀死土样中敏感的微生物。由此创造出让不敏感的稀有放线菌生长出来的条件；三是从某些具有特殊微生物区系的土样、水样、动植物残体或活体中分离其特殊的放线菌。
利用目的菌的某些特征，在土壤等样品中加入一些特殊物质，诱导目标菌大量富集，提高选择性分离效果。
1.多相分类技术：（Polyphasic taxonomy）Colwell1970年提出，指利用微生物多种不同的信息，包括表型的、基因型的和系统发育的信息，综合起来研究微生物分类和系统进化的过程。
表型信息来源于各种生物功能分子的效应，包括蛋白质及其功能，不同的化学标识，以及大量其它的表达特征；遗传信息来源于细菌中的遗传物质核酸，包括DNA和RNA。
2.观察微生物形态注意方面：在观察细菌的个体形态时，应注意有些细菌在生活周期中有多形性变化，要注意观察其幼龄菌体（６～８小时）、生长对数期的菌体及老龄菌体的形态变化及革兰氏染色反应的变化。
3.生理生化反应特征在鉴定中起什么作用
碳源和氮源的利用：试验多种糖类、醇类或有机酸能否被利用作为碳源或能源，以及对一定的有机化合物或CO2利用的能力。氮源的利用看取自蛋白质、蛋白胨、氨基酸、铵盐及硝酸盐或能否固定大气中游离的氮。
代谢产物测定：不同种的细菌，由于生理特性和酶系的不同而产生各种不同的代谢产物。因此，检查代谢产物，可以作为鉴别菌种的重要依据。（在培养基中，测定细菌是否形成有机酸、乙醇、碳氢化合物、气体与其他化合物。测定细菌能否分解色氨酸产生吲哚，能否分解糖类产生３-羟基-２-丁酮；能否使硝酸盐还原成亚硝酸盐或氨；是否产生色素等。）
在牛乳培养基中生长的反应：不同的细菌对于牛乳中的乳糖和蛋白质的分解利用情况不同。
因此，在利用牛乳鉴定细菌时，可以观察牛乳是凝固还是胨化，是产酸还是产碱等反应。在牛乳中加入石蕊作指示剂时，还能观察石蕊的颜色变化。
4.沙门氏菌（国标法 GB 4789.4-2010）：用于沙门氏菌分析的传统方法是食物样品分步增菌，以增加病原的可检出率，这种培养方法总体可分3个不同阶段或步骤。第一步(预增菌)，将样品加到缓冲蛋白胨水中，进行前增菌，对未加工食品无需前增菌。然后接到TTB培养基或SC培养基上。第二，是选择性增菌步骤，目前应用的主要有如下2种类型：亚硫酸铋琼脂平板、XLD琼脂平板（或HE琼脂平板、WS琼脂平板或SS琼脂平板）。由于没有任何一种培养基可以全面地保持所有食品基质或各种沙门氏菌血清型，所以，较适当的做法就是使用两种培养基平行地进行试验。第三步是分离步骤，即选择性培养物在含一种或多种抑制非沙门氏菌生长制剂的琼脂平板上划线培养，然后对平板上肉眼可见的特征性菌落进行确认，并对该菌落分离物进行一系列生化试验和血清学检测，以作出鉴定。传统沙门氏菌检测法全过程需时至少4～7 d，才能得出明确的诊断结果。
阪崎肠杆菌
前增菌和增菌：取检样100 g（mL）加入已预热至44 ℃装有900 mL缓冲蛋白胨水的锥形瓶中，用手缓缓地摇动至充分溶解，36℃±1℃培养18h±2h。移取1 mL转种于10 mLmLST-Vm肉汤，44℃±0.5℃培养24 h±2h；分离：轻轻混匀mLST-Vm肉汤培养物，各取增菌培养物1环，分别划线接种于两个阪崎肠杆菌显色36℃±1℃，培养24 h±2 h；挑取1 个～5 个可疑菌落，划线接种于TSA平板。25 ℃±1 ℃培养48 h±4 h；鉴定：自TSA平板上直接挑取黄色可疑菌落，进行生化鉴定。阪崎肠杆菌的主要生化特征见表1 。可选择生化鉴定试剂盒或全自动微生物生化鉴定系统；结果与报告：综合菌落形态和生化特征，报告每100 g（mL）样品中检出或未检出阪崎肠杆菌。
5.16S rDNA同源性分析方法的作用
细菌的16S rRNA基因包括可变区和恒定区，可变区序列因不同细菌而异，恒定区序列基本保守，所以可以利用恒定区序列设计引物将16S rDNA 片段扩增出来，利用可变区序列的差异来对不同菌属、菌种的细菌进行分类鉴定。但较其它方法而言，16S rDNA序列测定分析更适用于确定属及属以上分类单位的亲缘关系。
步骤方法：
（1）16S rDNA PCR产物直接测序
完整的16S rRNA序列（1540 bp）分析过程：分离和纯化总DNA，以总DNA为模板，使用通用保守引物PCR 扩增16S rDNA。PCR产物经1％琼脂糖凝胶电泳检测，呈1.5 kb左右的带，并有足够的浓度（>50 ng/μl）。纯化后的PCR产物使用自动测序仪进行序列测定。
（2）16S rDNA PCR产物与特点的质粒连接，进行克隆测序
克隆后有利于重复测序及以后的工作。
根据对大部分细菌16S rDNA序列的检索，选择合适的酶切位点，在设计引物时在引物的5’修饰进行粘端克隆。常用的克隆载体为pUC系列及M13系列。
可利用PCR扩增产物的3’总带有一个A的特点，选择一个5’端带有一个T的载体。一般采用pGEM-T V ector 系统进行克隆。
（3）构建进化树
取得16S rDNA序列后，从基因数据库中调取所需16S rDNA序列，利用一些必要的计算机分析软件对它们进行同源性比较，进而绘制系统进化树。
核酸序列数据库Genbank EMBL DDBJ
比较通用的序列分析软件Clustal X1.8 ，MAGE（4.0），DNASTAR，PHYLIP，Treecon和GCG
以细菌系统学研究中最为常用的16S rDNA系统发育树为例介绍进化树的构建方法：
得到的16S rDNA序列送GenBank；根据返回的结果，从GenBank调序列作Alignment并生成PHYLIP格式文件（常用软件为ClustalX1.8）；用生成的PHYLIP格式文件构建Neighbeor-Joinjing（NJ）树，并进行Bootstrap分析（常用软件为PHYLIP package，MEGA 4.0），构建系统发育树；观察比较生成的进化树.
6..四种商业化检测系统
微量生化系统较传统生化试验方法具有快速性、准确性、微量化和操作简便等优点。在微量生化试验的基础上再配制一套有计算机编码的细菌鉴定手册，就可以对某类细菌进行大量的菌种鉴定工作。用于鉴定肠杆菌科以外的一些微生物，如厌氧菌、淋球菌、酵母菌及不发酵的革兰氏阴性细菌等。
API系统是由Analytab Products Inc前三个字头拼写而成。用于肠道菌检验的为API20E。该装置为一块塑料板上有20个小杯，每个杯内装有生化试验用的酶作用物和指示剂，试验用的菌悬液是用蒸馏水制备的，使用时可用细管滴入各个小杯内，然后即可将塑料板放入湿润的塑料箱中，于35℃温箱中培育20、24h，取出后观察颜色变化，根据厂方提供的图表判定菌株的属种。另外，又出现
了一种API50的研究装置，包括50个小杯，是API20E的补充装置，以鉴定API20E不能鉴定的菌株。
原理：一种能同时测定20项以上生化指标，可用作快速鉴定细菌的长形卡片（24 cm×4.5 cm，法国生产），其上整齐地排列着20个塑料小管，管内加有适量糖类等生化反应底物的干粉（有标签说明）和反应产物的显色剂。每份产品都有薄膜覆盖，保证无杂菌污染。
Enterotube系统：Enterotube系统是用无菌的互相间隔开的塑料管组成一个整体，其中八个小室，分别装有不同酶作用物和指示剂，每个塑料管两端各有一个帽盖并封存一只接种针，接种时除去接种针外端的帽盖，并用该针从原始培养平皿上挑取菌落，然后伸入进塑料管中，将菌种接种到培养基上，再将针体部分抽出，拆掉留在管外的部分。遗留在管内的部分针体有助于保持厌氧条件，接种针抽出部分则可提供给需氧条件。盖上帽盖，将接种管孵育过夜。实验结果可直接进行判断或查阅专门设计的结果判定表。该装置可做下列试验：葡萄糖产酸产气、赖氨酸和鸟氨酸脱羧酶、硫化氢、靛基氢、乳糖和卫矛醇发酵、苯丙氨酸脱氢酶、尿素酶和柠
檬酸盐等试验
VITEK AMS：鉴定原理是根据不同微生物的理化性质不同，采用光电比色法，测定微生物分解底物导致pH改变而产生的不同颜色，来判断反应的结果。在每张卡上有30项生化反应。由计算机控制的读数器，每隔1h对各反应孔底物进行光扫描，并读数一次，动态观察反应变化。一旦鉴定卡内的终点指示孔到临界值，则指示此卡已完成。系统最后一次读数后，将所得的生物数码与菌种数据库标准菌的生物模型相比较，得到相似系统鉴定值，并自动打印出实验报告。
获得细菌的纯培养后，调整菌悬液浓度，根据不同的细菌选择相应的药敏试验卡片，在充液仓中对卡片进行充液。置孵育箱／读数器中孵育，自动定时测试、读取数据和判断结果。VITEK可快速鉴定包括各种肠杆菌科细菌、非发酵细菌、苛氧菌、革兰阳性球菌、革兰阴性球菌、厌氧菌和酵母菌等500种临床病原菌。具有20多种药敏测试卡、97种抗生素和测定超广谱β-内酰胺酶测试卡，快速检测细菌药敏情况。
该系统有根据细菌耐药规律而设定的专家系统，可帮助校正和修改结果。对于专家系统提示的不可能的或极少见的耐药表型应予以充分重视，需采用确认试验重新鉴定。如对万古霉素耐药的金黄色葡萄球菌，对泰能耐药的肠杆菌，对青霉素耐药的β溶血性链球菌等。
VITEK-2是生物-梅里埃公司开发的新一代微生物分析仪，其工作原理与VITEK AMS没有大的差别，但它的容量更大，自动化程度更高，并且使用64孔的反应卡片，鉴定更准确可靠，可同时测定20种抗生素的药敏试验。“Biolog”全自动和手动系统
一块有96孔的细菌培养板，其中95孔中各加有氧化还原剂和不同的发酵性碳源的培养基干粉，另一孔为清水对照。利用细菌对95种不同碳源的代谢情况来鉴定菌种，即每种细菌形成各自特有的代谢指纹图谱，选用四唑紫
作为细菌能否利用供试碳源的指示剂。
缺点：1．自动化鉴定系统是根据数据库中所提供的背景资料鉴定细菌，数据库资料的不完整将直接影响鉴定的准确性。目前为止，尚无一个鉴定系统能包括所有的细菌鉴定资料。对细菌的分类是根据传统的分类方法，因此鉴定也以传统的手工鉴定方法为“金标准” 。使用自动化鉴定仪的实验室，应对技术人员进行手工鉴定基础与操作技能培训。
2．细菌的分类系统随着人们对细菌本质认识的加深而不断演变，使用自动化鉴定仪的实验室应经常与生产厂家联系，及时更新数据库。实验室技术人员应了解细菌分类的最新变化，便于在系统更新之前即可进行手工修改。3．通过自动化鉴定仪得出的结果，必须与其它已获得的生物性状（如标本来源、菌落特征及其它的生理生化特征）进行核对，以避免错误的鉴定。
注意：
（1）数据库资料的不完整将直接影响鉴定的准确性。
（2）使用自动化鉴定仪的实验室应经常与生产厂家联系，及时更新数据库。
（3）通过自动化鉴定仪得出的结果，必须与其它已获得的生物性状（如标本来源、菌落特征及其它的生理生化特征）进行核对，以避免错误的鉴定。
7.分子指纹图谱检测：限制性片段长度多型性RFLP；选择性扩增片段长度多样性AFLP；随机扩增DNA片段的多型性RAPD；基因外重复的回文因子REP和肠杆菌基因间重复一致序列ERIC PCR扩增指纹图谱分析
RFLP原理：16S或23S rDNA基因序列分析ARDRA方法限制性内切酶识别双链分子中的特定序列，并在特定位点将DNA切开。将两个个体的DNA分子用酶解离后，即形成不同长度的DNA片段。当这些大小不等的片段通过凝胶电泳时就形成不同的带。用分子探针杂交并利用放射自显影在感光底片上成像，就会找到不同带的位置。目前常常采用PCR技术将特定的DNA片段（如rDNA）扩增出来，然后对扩增产物进行限制性酶切，最后电泳分离酶切后的DNA片段。这样得到的电泳图谱中条带数少，可以进行直接比较。
目前较为常用的是对16S rDNA、23S rDNA保守区或可变区进行PCR扩增，并对其产物作RFLP分析。
RELP步骤：DNA提取——限制性内切酶酶切ＤＮＡ——用凝胶电泳分开DNA片段——把DNA片段转移带滤膜上——利用放射性标记的探针杂交显示特定的DNA片段和结果分析。
AFLP原理：对基因组DNA进行限制酶切片段的选择性扩增，使用双链人工接头(adapter)与基因组DNA的酶切片段相连接，作为扩增反应的模板，通过接头序列和PCR引物3′端的识别进行选择性扩增并进行电泳分离。AFLP步骤：制备高分子量（HMW）基因组DNA，用两种限制性内切酶酶切；酶切完成后，经加热把限制性内切酶失活，再把酶切片段连接到特定的接头（adapter）上，形成扩增反应的模板；酶切片段要经过预扩增反应（preamplification）和选择性扩增（selective amplification）连续两次PCR扩增。
AFLP可以检测种及种以下水平上的差异。
RAPD原理：根据DNA聚合酶连续反应技术（PCR），由人工随机合成的DNA分子为引物，以基因组DNA为模板，先进行2个循环的随机扩增，再以低循环扩增的DNA片段作为模板进行多个循环扩增，从而产生一些离散的、可重复的、能反映基因组特征的一些扩增片段。
RAPD步骤：DNA提取及其纯度和浓度检测；PCR扩增；PCR产物琼脂糖凝胶电泳；试验数据分析（利用适应的统计软件，如SPSS分析实验数据。在电泳胶板上，相同位置出现的带记为1.没有带的记为0，失败或者缺失的记为9，将所有RAPD引物所扩增的带的结果输入数据表，利用统计软件统计分析。）
RAPD优点：和RFLP相比，RAPD所需模板量少，操作快，无须知道DNA序列的信息，而且获得基因图谱较迅速；标记密度也较大。目前，RAPD已不限于用单引物来扩增，双引物的RAPD技术比单引物RAPD具有扩增次数少，重复性好的优点。
REP-PCR和ERIC-PCR原理：
扩增细菌基因组中广泛分布的短重复序列，通过电泳条带比较分析，揭示基因组间的差异。
REP-PCR和ERIC-PCR优点：
①实验无需属、种和菌株专一性的探针，只须有一套引物就可进行相近菌株甚至相差较大的菌株之间的分析；
②通过不同引物的组合可以简化REP-PCR和ERIC-PCR分析，从而获得同种和不同种甚至不同属的菌株的差异信息；
③无需进行Southern杂交。REP-PCR和ERIC-PCR的扩增产物可直接用于电泳分析；
④REP-PCR和ERIC-PCR只需少量悬浮于PCR缓冲液中的细胞就可进行。
REP-PCR和ERIC-PCR有可能无需获得细菌的纯培养和无需提取DNA就可进行分析。
作用：系统发生及进化学、统计学在微生物鉴定中发挥重要作用
核酸分析技术应该与基因组学和生物信息学技术结合
核酸分析技术仍需以微生物流行病学为基础，易感人群的流行病学表现。
8.分析微生物技术通常以什么为检测物反映微生物种类？
微生物细胞成份分析；细菌代谢产物分析；培养基中代谢产物分析；微生物的快速鉴定（凡可气化或设法保持有挥发性的物质均可分析）
细菌细胞壁和细胞膜上有哪些组分可以用于检测指标？分别用什么方法和仪器检测？
肽聚糖的分析方法：一种是纯细胞壁制备物的组分分析，主要用于细菌分类；
另一种是全细胞水解物的组分分析，方法简便、速度快，常用于放线菌的分类。
两种方法都是将水解物用纸层析或薄层层析来分析其中的糖和氨基酸
醌组分分析：细菌细胞膜上的醌：泛醌（Ubquinone，辅酶Q）甲基萘醌（Menaquinone，MK）。甲基萘醌的侧链由不同的异戊烯单位构成。常用来分析醌的方法有薄层层析（TLC）和高压液相法等。
9.如何制备趋势分析图？从趋势图上分析得到哪些判断？
将测得的检测参数绘制成质量控制图使数据形象化，通常按时间顺序分布的对应数据点组成；可为评审数据提供便利，便于评价异常或超标数据，能及时发现偏差并防止再次发生；有利于促进检测项目以及整个检验质量的持续性提高，将良性变化付诸实施，确保了质量的保证体系的完善与健全。
生产洁净区域或微生物检验洁净区域的定期、不定期进行的环境监控数据；按生产区域、不同要求的各个水系统、取样点划分而进行的各种水介质的微生物（含化学）分析的结果数据；
微生物检测用各批号（次）不同来源等的培养基的灵敏度试验数据；不合格的无菌检查结果数据；对照或阳性对照不合格的试验结果数据；按产品类型划分的各种原料、产品含菌量检查；各批次的微生物检测数据；按检验方法、分析人员、班次等归类所进行的无菌检查中的阳性结果记录数据；人为性的工作偏差记录数据；微生物检测用的各类仪器、设备或系统的故障记录数据；其他检查试验数据等；
特异反应检测值的剔除；t检验；F检验；χ2检验；统计软件：SPSS,SAS,BMDP,EPISTAT,Epi Info,Office Excel 10.通常数据分析要如何进行统计处理，才能达到微生物检验检测所遵循的准确性原则？
重复，随机排列，局部控制，有对照，随机设计
11.医学微生物检验中的报告方式主要分为哪两类？以什么特征为主？
形态学检验报告；细菌培养过程中的分级报告；细菌培养后的终极报告
形态学检验报告：脑脊液、胸腹水、浓汁、分泌物标本涂片染色镜检，检出细菌应报告“检出革兰染色XX菌”；尿液、泌尿生殖道分泌物标本涂片染色镜检，检出细胞内G-双球菌应报告“检出G-双球菌，疑似淋球菌”；痰液、尿液、脑脊液、胸腹水标本涂片抗酸染色，检出细菌应报告“检出抗酸杆菌（±、+、++、+++、++++）”；上述标本涂片染色未检出细菌应报告“未检出细菌或抗酸菌”
细菌培养过程中的分级报告：直接涂片染色的细菌形态；直接药敏试验结果；及早给临床提供参考依据
细菌培养后的终极报告：微生物检验最后的结果报告，是临床微生物检验申请单的正式结果报告，是临床微生物检验申请之目的；内容：病原微生物种类鉴定报告；该病原微生物对抗菌药物的敏感性报告；方式：正式检验报告单；意义：为临床提供准确的鉴定和药敏报告
食源性疾病：凡是通过摄食而进入人体的病原体使人体患上感染性或中毒性的疾病，统称为食源性疾病。
食品中可能造成食源性疾病的生物性危害主要分为三类：一类是致病菌及其毒素，比如沙门氏菌、副溶血性弧菌、单增李斯特菌、金葡菌肠毒素等，它们主要导致胃肠道疾病，严重的会造成肝、脑、肾等脏器的损害，甚至死亡；第二类是产毒真菌和真菌毒素，包括黄曲霉毒素、伏马菌素、展青霉素等，它们或造成人的急性中毒事件，或因长期摄入，造成消化道癌症和某些地方病；第三类是病毒和寄生虫。
2012.9.25《食品中致病菌限量》征求意见稿:沙门氏菌、单核细胞增生李斯特氏菌、副溶血性弧菌、大肠埃希氏菌在各类食品中的限量值均为0；金黄色葡萄球菌在各类食品中的限量则均为100 CFU/g；（副溶血性弧菌熟制水产皮0，生制水产品100MPN/g)
2006年饮用水国家标准中微生物指标总大肠菌群不得检出；耐热大肠菌群不得检出；大肠埃希氏菌不得检出；菌落总数<100CFU/ml;贾第鞭毛虫<1个/10L;隐孢子虫<1个/10L
菌落总数aerobic plate count食品检样经过处理，在一定条件下（如培养基、培养温度和培养时间等）培养后，所得每g（mL）检样中形成的微生物菌落总数。
大肠菌群coliforms在一定培养条件下能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌。
粪大肠菌群Faecal coliform一群在44.5℃培养24h-48h能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽孢杆菌。该菌群来自人和温血动物粪便，作为粪便污染指标评价食品的卫生状况，推断食品中肠道致病菌污染的
可能性。
大肠杆菌：广泛存在于人和温血动物的肠道中，能够在44.5℃发酵乳糖产酸产气，IMV iC（靛基质、甲基红、VP 试验、柠檬酸盐）生化试验为＋＋－－或－＋－－的革兰氏阴性杆菌。以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生状况，推断食品中肠道致病菌污染的可能性。
MPN（最可能数）基于泊松分布的一种间接计数方法。是食品检验中常用的方法。其生化反应基础为乳糖发酵，革兰阴性菌的无芽胞杆菌，如大肠菌群，一般在37℃、24h 发酵乳糖、产酸产气。利用此原理，将供试液加到发酵培养基中，37℃培养24h.若不产气，则报告控制菌阴性；若产气，则需划线接种于平板上，37℃培养24h 后，观察菌落形态、革兰染色和重发酵验证。优点：操作简便、灵敏度较高，时间短，可直接观察试管得出结论，若发酵培养基不产气，24h 即可报告控制菌阴性。缺点：要求样品具有均一性，适合检验液体样品，且只能用于检验在发酵培养基中产气的菌种。注意事项：需选择合适的稀释度和接种量。CFU法即平板计数法，是食品和药品检验中常用的方法。原理为lg 或lml 样品中所含的活菌数量，通过将处理后的样品在一定条件下培养后计算生长出来的菌落数（CFU），即在一定体积的细菌培养液在固态培养基上形成的菌落数。液体样品可直接稀释成供试液，固体样品需在灭菌的生理盐水中浸泡制成供试液。将不同稀释度的供试液吸取lml，放入灭菌的平皿内，再倾注融化的营养琼脂，待琼脂凝固后，翻转平皿，37℃培养4d，计算平皿内的菌落数。CFU法应用广泛，但检验过程必须严格无菌，以防污染杂菌，而且检验所需时间较长，同时也需选择合适的稀释度和接种量。（大肠埃希氏菌计数）
食品安全国家标准食品安全法，新食品微生物检测标准2009年，国家颁布“食品安全法”。2010年初，国家食品安全标准审评委员会成立，并陆续发布了新的食品安全微生物检验方法标准。
食品安全国家标准
未培养微生物至今不能用人工的方法在实验室进行大量培养，这是微生物的主要存在状态。目前这些微生物主要用针对核酸或者呼吸链的方法染色后，在荧光显微镜下直接观察的方法进行检测和计数，主要通过Metagenome 的方法建立基因库，再从这个这个基因库中筛选目的基因，可以通过Metagenome的方法从样品中提取总DNA，采用适当的引物对特定的DNA片段进行PCR扩增后用DGGE或SSPE的方法进行检测。
难培养植物病原微生物：锈病菌Uredinales；霜霉病菌Peronosporceae；白粉病菌Erysiphales内生菌根菌；一部分外生菌根菌
食品安全法，新食品微生物检测标准2009年，国家颁布“食品安全法”。2010年初，国家食品安全标准审评委员会成立，并陆续发布了新的食品安全微生物检验方法标准。
食品安全国家标准
第一章绪论 一、名词解释 1、微生物 2、微生物学 二、填空题 1、微生物学的先驱者是____，微生物学的奠基人是_____，细菌学的奠基人是_____ 。 2、微生物都是些个体微小、构造简单的低等生物，包括属于原核类的细菌(____和古生菌)、放线菌、蓝细菌、____、立克次氏体、____；属于真核类的真菌（____、____和蕈菌）、原生藻类和显微藻类；以及属于非细胞类的病毒和____（____、拟病毒和____）。 3、微生物由于其体形都极其微小，因而导致了一系列与之密切相关的五个重要共性，即体积小，____；____，____；生长旺，繁殖快；____，____；____，____。 4、微生物的种类多主要体现在________、生理代谢类型的多样性、代谢产物的多样性、________、________等五个方面。 5、微生物学是一门在细胞、分子或群体水平上研究微生物的形态构造、生理代谢、________、________和分类进化等生命活动基本规律，并将其应用于工业发酵、医药卫生、生物工程和环境保护等实践领域的科学。 6、按是否具有细胞结构，微生物可分为________型微生物和________型微生物。 7、细胞型微生物根据其细胞结构特征又可分为________微生物和________微生物。 8、按照Carl Woese 的三界论，微生物可分为________、________和________。 9、原核微生物主要包括________、________、________、________、________、________和________。 10、微生物的主要特点有：________、________、________、________和________。 三、选择题 1、适合所有微生物的特殊特征是( )。 A.它们是多细胞的 B.细胞有明显的核 C.只有用显微镜才能观察到 D.可进行光合作用 2、第一位观察到微生物的科学家是( )。 A. Robert Hooke B. Louis Pasteur C. Joseph Lister D. James T.Watson 3、细菌学的奠基人是( )。 A. Louis Pasteur B. Robert Koch C. van Dyck D. van Leeuwenhoek 4、Louis Pasteur对微生物学的贡献在于他( )。 A. 发现了病毒 B. 提出了自然发生说理论 C. 抨击了进化论 D. 号召人们关注微生物在日常生活中的重要性 5、Louis Pasteur采用曲颈瓶试验来( )。 A. 驳斥自然发生说 B. 证明微生物致病 C. 认识到微生物的化学结构 D. 提出细菌和原生动物分类系统 6、微生物学中铭记Robert Koch是由于( )。 A. 证实病原菌学说 B. 在实验室中成功地培养了病毒 C. 发展了广泛采纳的分类系统 D. 提出了原核生物术语 7、微生物学的奠基人是( )。 A. Louis Pasteur B. Robert Koch C. van Dyck D. van Leeuwenhoek 四、是非题
《微生物学教程》考试试卷 （B 卷） （本试卷共 3 页） 要求：开卷考试；答案写在答题纸上，标清楚题号；答案和试题全交。 一、解释名词（每个2分，本题满分20分） 1、菌落 2、病毒 3、生长因子 4、微生物典型生长曲线 5、灭菌 6、质粒 7、营养缺陷型 8、水体自净作用 9、微生物的种 10、培养基 二、填空（每个空0.5分，40个满分20分） 1、微生物与生物环境间的相互关系分为五种： （1） 、 （2） 、 （3） 、 （4） 、 （5） 。 2、单细胞微生物典型生长曲线由 （1） 、 （2） 、（3） 、（4）四个时期组成。 3、防止霉腐微生物引发食品腐败的常用措施有： （1） 、 （2） 、 （3） 、 （4） 、 （5） 。 4、微生物的五大共性包括： （1） 、 （2） 、 （3） 、 （4） 、 （5） 。 5、微生物根据对氧的需求可分为5种类型： （1） 、（2） 、（3） 、 （4） 、 （5） 。 6、葡萄糖经EMP 代途径10步反应产生的3种产物是： （1） 、 （2） 、 （3） 。 7、真菌（霉菌类）无性孢子有多种类型。比如（1） 、 （2） 、 （3） 、 （4） 。 8、列举对微生物学发展做出过巨大贡献的科学家名字： （1） 、 （2） 、 （3） 。 第1页 9、三域学说将整个生物划分为3个域，即 （1） 、 （2） 、 （3） 。
10、常用的消毒剂有： （1） 、 （2） 、 （3） 。 三、判断题（每小题1分，满分10分） 1、冷冻干燥保藏和液氮保藏是长期有效保藏各种微生物的 基本方法。 2、青霉素可以杀死正在旺盛生长繁殖的细菌细胞，但无法杀死正处于休止状态的营养缺陷型细胞。 3、黑曲霉、红曲霉、黄曲霉、根霉、毛霉，其中有些是单细胞微生物。 4、食品的水活度值越低，越不利于腐败（病原）微生物的生长，因此降低含水量有利于食品的保藏。 5、因为细菌是低等原核生物，所以，它没有有性繁殖，只有无性繁殖形式。 6、大肠杆菌F +细胞通过接合作用向受体细胞转移F 质粒，结果导致原供体细胞失去了F 质粒。 7、国家规定：引用水中的微生物数应低于100个细胞/mL, 大肠菌群数不能超过3个细胞/L 。 8、黄曲霉毒素是由黄曲霉菌产生的剧毒、致癌物质，它要在人或动物体经过代活化后才引起致癌作用。 9、地衣实际上是蓝细菌与真菌或藻类与真菌形成的共生体。 10、青霉菌发酵时，产青霉素的最佳温度与菌体生长最适温度完全一致。 四、简答题（4道题，每小题10分，满分40分 ） 1、简述常用化学消毒剂的种类及其杀菌机制。 2、简述艾姆氏试验的原理和实践意义。 3、比较同型乳酸发酵与异型乳酸发酵在产物、产能和菌种上的差异。 4、常用的高温灭菌方法及其适用对象。 第2页
常见的微生物检测 方法
摘要：微生物的检测，无论在理论研究还是在生产实践中都具有重要的意义，本文分生长量测定法，微生物计数法，生理指标法和商业化快速微生物检测简要介绍了利用微生物重量，体积，大小，生理代谢物等指标的二十余种常见的检测方法，简要介绍了这些方法的原理，应用范围和优缺点。 概述： 一个微生物细胞在合适的外界条件下，不断的吸收营养物质，并按自己的代谢方式进行新陈代谢。如果同化作用的速度超过了异化作用，则其原生质的总量（重量，体积，大小）就不断增加，于是出现了个体的生长现象。如果这是一种平衡生长，即各细胞组分是按恰当的比例增长时，则达到一定程度后就会发生繁殖，从而引起个体数目的增加，这时，原有的个体已经发展成一个群体。随着群体中各个个体的进一步生长，就引起了这一群体的生长，这可从其体积、重量、密度或浓度作指标来衡量。微生物的生长不同于其它生物的生长，微生物的个体生长在科研上有一定困难，一般情况下也没有实际意义。微生物是以量取胜的，因此，微生物的生长一般指群体的扩增。微生物的生长繁殖是其在内外各种环境因素相互作用下的综合反映。因此生长繁殖情况就可作为研究各种生理生化和遗传等问题的重要指标，同
时，微生物在生产实践上的各种应用或是对致病，霉腐微生物的防治都和她们的生长抑制紧密相关。因此有必要介绍一下微生物生长情况的检测方法。既然生长意味着原生质含量的增加，因此测定的方法也都直接或间接的以次为根据，而测定繁殖则都要建立在计数这一基础上。微生物生长的衡量，能够从其重量，体积，密度，浓度，做指标来进行衡量。 生长量测定法 体积测量法：又称测菌丝浓度法。 经过测定一定体积培养液中所含菌丝的量来反映微生物的生长状况。方法是，取一定量的待测培养液（如10毫升）放在有刻度的离心管中，设定一定的离心时间（如5分钟）和转速（如5000 rpm），离心后，倒出上清夜，测出上清夜体积为v，则菌丝浓度为（10-v）/10。菌丝浓度测定法是大规模工业发酵生产上微生物生长的一个重要监测指标。这种方法比较粗放，简便，快速，但需要设定一致的处理条件，否则偏差很大，由于离心沉淀物中夹杂有一些固体营养物，结果会有一定偏差。 称干重法：
第二章真核微生物的形态、构造和功能习题A部分 一、选择题 1. 青霉（Penicillium）和曲霉（Aspergillus）的无性繁殖产生（）。 A.外生的孢囊孢子 B.外生的分生孢子 C.外生的节孢子 D.外生的游动孢子 2. 酵母菌的菌落类似于（）。 A.霉菌菌落 B.链霉菌菌落 C.细菌菌落 3. 指出错误的回答，真菌的无性孢子有：（）。 A.分生孢子 B.接合孢子 C.游动孢子 D.节孢子 4. 酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）的无性繁殖是：（）。 A.裂殖 B.芽殖 C.假菌丝繁殖 D.子囊孢子繁殖 5. 指出错误的回答，根霉菌的孢子囊具有：（）。 A.囊轴 B.囊托 C.囊领 D.囊梗 6. 酿酒酵母的无性繁殖是：（）。 A.一端出芽 B.二端出芽 C.多边出芽 D.三端出芽 7. 指出错误的回答，真核微生物包括有：（）。 A.真菌 B.粘菌 C.枝原体 D.原生动物 8. 木耳（Auricularia）的有性孢子是：（）。 A.担孢子 B.子囊孢子 C.接合孢子 D.卵孢子 9. 子囊孢子总是：（）。 A.单倍体 B.二倍体 C.a或b兼有 10. 某些酵母菌上下两细胞连接处呈细腰状，通常称为：（）。 A.有隔菌丝 B.无隔菌丝 C.假菌丝 11. 寄生真菌靠吸器吸收养料，吸器存在于：（）。 A.寄主体外表上 B.寄主细胞外表上 C.寄主细胞间隙中 D.寄主细胞里面 12. 根霉菌的假根是长在：（）。 A.基内菌丝上 B.气生菌丝上 C.匍匐菌丝上 D.附属菌丝上 13. 指出错误的回答，青霉菌的无性结构有：（）。 A.足细胞 B.分生孢子梗 C.梗基 D.副枝
第一章 一.微生物有哪些主要类群？有哪些特点？ 答：类群：1.真核细胞型；2.原核细胞型：细菌，放线菌，衣原体，支原体，立克次式体； 3.非细胞型：病毒。 特点：1.体小，面积大 2.吸收多，转化快3.生长旺，繁殖快4.分布广，种类多 5.适应强，易变异二.你认为现代微生物学的发展有哪些趋势？ 答：研究领域有制药、治理环境污染等，微生物的基因科学，微生物病毒学，现代微生物学已发展出很多的分支学科，如病毒学，微生物基因组学，应用微生物（生物农药，浸矿微生物等），病源微生物（主要指细菌），海洋微生物，古细菌等，现代微生物学的研究主要集中在菌种的遗传背景，市场化应用等，食品微生物快速检测技术、食用菌的生产、功能性成分的提取等。 三.简述微生物与制药工程的关系。 答：1.人类除机械损伤外的疾病都是由微生物造成的 2.微生物又是人用来防治疾病的常用方法 3.微生物在自然环境中分布广泛来源很多 4.微生物的代谢产物相当多样，可用于生物制药 5.微生物和人之间的关系，涉及人、微生物、植物的协同进化 6.遗传学与生态学 名词对照： 古菌域：Archaea 三域学说分为古菌域、细菌域、真核生物域，古菌域为其中一大类别。（不确定）细菌域：bacteria 三域学说分为古菌域、细菌域、真核生物域，细菌域为其中一大类别。（不确定）真核生物域：Eukarya 三域学说分为古菌域、细菌域、真核生物域，真核生物域为其中一大类别。（不确定） 微生物：microorganism 是所有形态体积微小的单细胞或者个体结构简单的多细胞以及没有细胞结构的低等生物的通称。 第二章 一.比较下列各队名词 ①.原核微生物与真核微生物：原核微生物没有明显的细胞核，无核膜，核仁，无染色体，其细胞核为拟核，细胞内么有恒定的内膜系统，核糖体为70S型，大多为单细胞微生物。真核微生物有明显细胞核，有各种细胞器，核糖体为80S型。 ②.真细菌与古菌：相同点：以甲硫氨酸起始蛋白质的合成，核糖体对氯霉素不敏感，RNA聚合酶和真核细胞的相似，DNA具有内含子并结合组蛋白。 不同点：细胞膜中的脂质是不可皂化的，细胞壁不含肽聚糖等。 ③.原生质体与球形体：原生质体是脱去细胞壁的细胞，是由原生质分化而来，具体包括细胞膜和细胞质以及细胞器；球形体：指在螯合剂等存在的条件下用溶菌酶部分除去革兰氏阴性菌的细胞壁而形成的缺损型细胞。 ④.鞭毛、菌毛和性菌毛：鞭毛是一端连于细胞膜，一端游离的、细长的波形纤丝状物。菌毛为一些菌体表面的非鞭毛的细毛状物，菌毛是许多革兰氏阴性菌菌体表面遍布的比鞭毛更为细、短、直、硬、多的丝状蛋白附属器。其化学组成是菌毛蛋白，菌毛与运动无关；性菌毛在少数革兰阴性菌，比普通菌毛略微稍粗，一个菌体只有1～4根，通常由质粒编码。带有性菌毛的细菌具有致育能力。 ⑤.芽孢与孢子：芽孢是有些细菌（多为杆菌）在一定条件下，细胞质高度浓缩脱水所形成的一种抗逆性很强的球形或椭圆形的休眠体。孢子是细菌、原生动物、真菌和植物等产生的一种有繁殖或休眠作用的生殖细胞。能直接发育成新个体。 二.比较革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌细胞壁结构，并说明革兰氏染色的原理。
一. 名词解释 1.芽孢： 2.糖被： 3.静息孢子： 4．菌落： 5．基内菌丝： 6. 孢囊: 7.质粒: 8.微生物： 9.鞭毛： 10.菌落： 11枯草芽孢杆菌 12鞭毛Flagella 13 Actinomyces 14荚膜： 二. 填空 1 芽孢的结构一般可分为、、和、四部分. 2 细菌的繁殖方式主要是，少数种类进行。 3 放线菌产生的孢子有、两种。 4 细菌的核糖体的沉降系数是 5 细菌的鞭毛有三个基本部分，，， 6 微生物修复受损DNA的作用有__ _和__ __. 7 基因工程中取得目的基因的途径有_条。 8 在低渗溶液中，G+ 菌的肽聚糖被破坏，细胞将 9原核细胞通过其附属物称为从一个细胞向另一个细胞转移DNA. 10支原体细胞膜中含有，与动物相似. 11.脂多糖是革兰氏阴性菌细胞壁特有成分,它由三部分组成,即、、 12.革兰氏阴性菌的细胞壁有层,内层称为,约厚，以_ 为主要成分,外层称为_,约_ 厚,不含_. 13.革兰氏阳性菌的细胞壁有_层,其厚度为_ 是革兰氏阳性细菌特有的化学成分 14.在周质空间中,存在着多种蛋白质,包括: _ , _, _ 和. 15.芽孢是某些细菌在生活史的一定阶段形成的没有_ 的休眠体,对_, 和_具有抗性. 16.芽孢具有_, _, _, _, _和_等多层结构 17.大肠杆菌鞭毛基体由四个盘状物构成,他们分别称为、_ 、、
18.荚膜的主要成分有_等,常采用_进行荚膜染色. 19.有些细菌细胞质内含有聚β－羟基丁酸，这是_贮藏物质，而异染色颗粒主要成分是_的聚合物，它是一种无机磷酸的贮藏物质 20.蓝细菌的异形胞仅含少量藻胆素,缺乏异形胞,他们不在产生氧气或固定CO2.这样,它们从结构和代谢上提供一个_ 环境,使_保持活性. 21细菌基本形态有_，_ 和_三种。 22细菌的大小是以_作为计量单位，而病毒的大小是以_ 作为计量单位。 23细菌细胞壁的主要成分是_,它主要由_、_二部分组成。 24测定微生物细胞大小的单位为_ 、_。 25微生物学的奠基人是_、_ 。 26根据放线菌菌丝形态和功能，其菌丝可分为 _、 _和 _三种。 27革兰氏染色操作的关键步骤是 _ 28 Bacillus thuringiensis是苏云金杆菌的学名， _是种名。（注:第十章） 29每种微生物都有自己的最适宜的pH值和一定的pH适宜范围。大多数细菌的最适pH 为_，放线菌的最适pH为_. 30、在人为条件下，用溶菌酶除尽革兰氏阳性菌原有细胞壁后所得到的仅有一层细胞膜包裹着的圆球状渗透敏感细胞称为_。 31细菌荚膜的作用是_ _ _，__ 32原核微生物的细胞壁特有的组分是_，它是由_、__四肽尾或四肽侧链__和__肽桥或肽间桥___组成的亚单位聚合而成。 33微生物的特点是 _， _ _， _， _ 34 Staphylococcus aureusBacillus 是金黄色葡萄球菌的学名，其中 _是属名， _是种名。（注:第十章） 35鞭毛主要化学成分为 _，鞭毛主要功能为 _。 36脂多糖(LPS)是革兰氏_菌细胞壁_层的主要成分，它由_，_，_三部分构成。 37细菌的糖被是指_。包括三种类型，其中包裹在细胞群上的称_。 38细菌的明胶柱穿刺培养特征常用来鉴别菌株 _性能 39在菌体形态观察中，需要进行制片后才能在显微镜下观察，观察细菌时采取的制片方法是_，观察放线菌时采取的制片方法是_，观察真菌采取的制片方法是_ 40原核细胞的细胞膜内陷所形成的囊状或管状结构称_。 41是芽孢所特有的化学物质。一般它随着芽孢的形成而形成，随芽孢的萌发而消失。 42 是一类介于
微生物习题与答案填空重点 螺纹理论(填写答案版本) 1，选择题 1。适用于所有微生物的特殊特性是() A。它们是多细胞的。细胞有明显的细胞核。只有显微镜才能观察到光合作用。人类通过微生物生产的食物有()A.牛奶b .火腿c .酸奶d .黄瓜c. 3。第一个观察微生物的科学家是() a。罗伯特·路易斯·巴斯德·约瑟夫·李斯特·詹姆斯·t·沃森a4。自然发生理论认为() A。微生物来自无生命的物质。在大型动物中发现了系统发育。人类从猿进化而来。病毒从细菌退化而来。细菌学的创始人是() a . Louis pasteur b . robertkoch c . van dyck d . van leeuwenhoek b 6 . Louis pasteur对微生物学的贡献在于他的(d) a。病毒b .自然发生理论c .攻击进化b. d .唤起人们注意微生物在日常生活中的重要性。阐明微生物是传染病起因的概念，称为() A。进化理论，病原体理论，生物细胞理论，收益递减理论。巴斯德用过的烧瓶试验() a .驳斥自然发生论 b .证明微生物是致病的 c .认识微生物的化学结构 d .提出细菌和原生动物的分类系统A 9。提议在微生物学中使用化学治疗剂来治疗传染病是由于() A。胡克的工作发展了基因工程，阐明了脱氧核糖核酸的结构，发
现了抗生素D 10。在微生物学中记住罗伯特·科赫是由于() A。确定病原体理论；成功培养病毒；开发广泛采用的分类系统；提出原核术语A 2和匹配问题 1。巴斯德D 2。罗伯特·科赫)..李斯特G 4。列文虎克)H 5..惠塔克)F 6..唐樊菲E 7..弗莱明)B 8..王A 9..沃森和克里克10。六结合理论发现青霉素c创造了分离、染色等技术和方法d驳斥了自然发生的理论e 成功地培养了鸡胚胎中的沙眼衣原体f五结合理论g手术消毒h显微镜发明I脱氧核糖核酸双螺旋模型j转化实验3，判断 1。致病微生物引起疾病的一种方式是通过产生强毒素来干扰全身系统()T 2。路易斯.巴斯德年轻时完成的实验证实了肉变酸的原因。病原菌理论是由科学家罗伯特·科赫首先提出的病原菌理论建立后，阻止流行病的发生成为可能。真菌是基因工程中最受欢迎的工具。()f 6。来自各行各业的微生物和其他有机体的共同特征是它们都有细胞器。()F 7..真菌、原生动物和单细胞藻类都属于莫内拉王国()f 8。这种病毒由核酸和碳水化合物的缠结外壳组成。()f9。微生物的二项式方法由属名加种的修饰语组成。蘑菇、霉菌和酵母属于原生动物群落。()F11。细菌是缺少真核的原核生物藻类是一组有点类似动物的微生物。()f
微生物学课后习题及答案 第一章绪论 1.什么是微生物和微生物学 答：微生物是指肉眼难以看清的微小生物，包括病毒，亚病毒，细菌，古生菌，真菌，单细胞藻类和原生动物。 微生物学指研究微生物在一定条件下的形态结构，生理生化，遗传变异，基因和基因组以及微生物的进化，分类，生态等生命活动规律以及其应用的一门学科。 2.微生物的主要特征是什么 答：个体小，结构简单，繁殖快，易培养，易变异，分布广 3.为什么说微生物与人类的关系非常重要并不能被其他生物所代替 答：微生物给人类带来了巨大的利益，也涉及到人类的生存。许多重要产品如面包，奶酪，抗生素，疫苗，维生素和酶的生产离不开微生物，同时参与地球上的物质循环，是人类生存环境中必不可少的成员。但它也给人类带来许多灾难，许多疾病及食品腐败等也是由微生物引起的。 4.虎克，巴斯德和柯赫对微生物学形成与发展的重要贡献 答：虎克：利用自制显微镜发现了微生物世界 巴斯德：a.彻底否定了“自然发生”学说b.发现将病原菌减毒可诱发免疫性，首次制成狂犬病疫苗，进行预防接种c.证实发酵是由微生物引起的d.创立巴斯德消毒法 柯赫：a.证实了炭疽病菌是炭疽病的病原菌b.证实肺结核的病原菌c.提出柯赫原则d.创立了分离纯化微生物的技术等 5.简述微生物学在生命科学发展中的地位，根据你的观点描述发展前景 答：a.20世纪40年代，随着生物学的发展，许多生物学难以解决的理论和技术问题十分突出，特别是遗传学上的争论问题，是微生物这样一种简单而又具有完整生命活动的小生物成了生物学研究的“明星”，微生物学被推到生命科学发展的前沿，获得迅速发展，为声明科学的发展做出了突出贡献。 b.未来微生物学更加绚丽多彩，多学科交叉，基因组研究的深入和扩展将使微生物的基础研究及其应用将呈现前所未有的局面 第二章微生物的纯培养和显微技术 1、为什么要进行微生物的分离纯化？什么叫无菌技术？ 因为在天然条件下，所采集的用于培养的材料中，多种微生物呈共生关系，而一般情况下只有纯培养物才能提供可重复的结果，故需进行微生物的分离纯化。 无菌技术指在分离、转接及培养纯种微生物时，防止其被环境中微生物污染，其自身也不污染环境的技术，它是保证微生物研究正常进行的关键。 2、采用固体培养基和液体培养基分离纯化细菌的主要方法。 固体培养基分离纯化细菌方法：涂布平板法；稀释倒平板法；平板划线法；稀释摇管法；液体培养基分离纯化细菌方法：稀释法；富集培养。 3、微生物的保藏方式有哪些？ 传代培养保藏；冷冻保藏法；干燥保藏法。 4、显微镜有哪几种类型？ 明视野显微镜；暗视野显微镜；相差显微镜；荧光显微镜；共聚焦显微镜；透射显微镜；扫描电镜；隧道扫描显微镜；原子力显微镜。 5、产芽孢的细菌主要属于哪些细菌？目前发现的最大和最小的细菌是什么细菌？ 产芽胞的细菌主要属于好氧性的芽孢杆菌属和厌氧性的梭菌属；最大细菌：纳米比亚硫磺珍
食品微生物检验的内容及检测技术 食品安全检验过程的主要内容 食品微生物的检验。食物在生产过程中以及放置过程中会受到环境中微生物的损坏或影响，在部分研究中，将食品中细菌数量对食品的损坏程度作为食品安全检测的首 要内容。在食品微生物的检验过程中，我们主要对人体有害微生物进行检验，其中在食品安全检验过程中，因为食品中有多种微生物共存现象，所以在检验前，微生物检验员要把不同的菌体进行分离，这样才能更加清楚的了解各种微生物的数量及菌体的分布情况，包括生产型食品微生物，如醋酸杆菌，酵母菌等和使食物变质的微生物，如霉菌、细菌等和食源性病原微生物如溶血性大肠杆菌，肉毒杆菌等。对食品原辅料微生物的控制和产成品微生物的检验是保证食品安 全的重要途径。 针对食品致病菌的相关检验。不同的致病菌会对人们的身体健康有不同程度的危害，像我们在生活中经常吃到的大米，有些不法商家将发霉的大米加工后再次放入市场进行二次销售，虽然经加工后，在外表上和普通大米没啥两样，但这种大米中含有黄曲霉这一致病菌，据可靠信息表明，黄曲霉的危害性十分巨大，如果人们长时间吃这样的大米，出
现癌症的风险要比常人高出很多倍，由此可见，食品中致病菌的检验是保证我们能吃到放心食品十分关键的微生物检 测技术，所以我们在致病菌的检验上对不同种类的致病菌进行定量严格检验。如乳制品和肉制品的致病菌主要是黄曲霉菌和大肠杆菌，而蛋制品中则容易出现染沙门菌、大肠菌群、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌，罐头食品容易出现肉毒梭菌、产气荚膜梭菌、蜡样芽胞杆菌。 食品微生物检验中的主要特点 对食品检测要求相对较高。在食品微生物的一系列检验中，由于食品中涉及的微生物种类较多，因此加大了食品微生物检验的难度。国家标准或行业标准对不同食品中微生物的含量特别是致病菌的含量有明确的要求。在食品的运输过程中，食品致病菌以及其他微生物对相应的食品有一定的污染，随着微生物种类的增多，检测人员需要对食品受致病菌影响的程度、食品保质期以及其他相关的标准进行测量，难度会随着微生物种类的增多而复杂。所以在微生物检验上我们对每一阶段的食品安全检测都要重视，在各个微生物的测量上，相关的检测技术要求就有所提高。 食品微生物检验效率。随着食品市场的商品流通提高，人们对食品需求不断增加，而食品安全问题却在日益严重，为了保障人们在能够及时满足食品种类和数量要求的同时，进一步促进食品安全的保障措施落实，必须加强食品安
微生物学练习题 绪论 一,填空题 1.微生物根据大小,细胞结构与化学组成分为____原核细胞型微生物真核细胞型微生物非细胞型微生物______三大类型. 2.属于原核细胞型微生物的是__细菌放线菌支原体衣原体立克次体螺旋体__. 3.属于真核细胞型微生物的是___真菌___. 4.属于非细胞型微生物的是___病毒___. 二,判断改错题 3.非细胞型微生物含有两种类型核酸,既含DNA,又含RNA. 3.错,只含一种核酸.三,选择题 1.下列病原体中属于真核细胞型微生物的是 A.支原体 B.放线菌 C.白色念珠菌 D.细菌 E.病毒 2.下列病原体中属于非细胞型微生物的是 A.立克次体 B.衣原体 C.噬菌体 D.螺旋体 E.支原体 3.下列病原体中属于原核细胞型微生物的是 A.噬菌体 B.酵母菌 C.流感病毒 D.细菌 E.真菌 1.原核细胞型微生物是指 A.细菌 B.放线菌 C.支原体 D.衣原体 E.螺旋体 2.真核细胞型微生物是指
A.新型隐球菌 B.白色念珠菌 C.真菌 D.放线菌 E.立克次体 四,名词解释 2.菌株(strains of bacteria)是指从不同来源或从不同时间或地区所分离的同一种细菌. 五,问答题 1.微生物根据大小,结构,化学组成分为哪三大类微生物各大类微生物有何特点包括哪些种类的微生物 细菌的形态与结构 1. 答:根据微生物的大小,结构,化学组成可将其分为以下三大类: (1)原核细胞型微生物:仅仅只有原始的核质,无核膜,核仁,缺乏完整的细胞器,只有核糖体,DNA和RNA同时存在.它包括细菌,放线菌,支原体,衣原体,立克次体,螺旋体. (2)真核细胞型微生物:细胞核的分化程度高,有核膜和核仁,胞质内细胞器完整.如真菌属于此类. (3)非细胞型微生物:是最小的一类微生物,结构简单,只有一种核酸(DNA或者是RNA)存在.缺乏完整的酶系统,必须要在活细胞内增殖.如病毒属于此类.
微生物试题 62.设计一个酿酒酵母营养缺陷型的科研方案，并加以必要的说明。（要求写出酿酒酵母的基本培养基和完全培养基） 22.微生物按能源和基本碳源来分，可将微生物分为哪四种类型？你们感分析它们各自的能源、氢供体和基本碳源分别是什么？ 59.简述革兰氏阳性细菌和阴性细菌在细胞壁的结构和化学组成上的异同点，并指出与此相关的主要特性。 63.简述微生物细胞膜的组成、结构与功能。 82.试述革兰氏染色的机制及其重要意义。 80.单细胞微生物的典型生长曲线可分为几期？如何缩短延滞期？ 86.微生物生长需要哪些基本条件？ 135. 简述微生物营养类型及其特点。 187. 水在微生物细胞中的生理功能。 223. 试述比较单纯扩散、协助扩散、主动运输和基团转位四种运输营养物质方式的异同点。 229. 描述并分析生长曲线，并说明生长曲线对科研和生产的意义。 241. 试拟一个实验，证明在噬菌体侵染细菌过程中决定遗传的物质基础是DNA。 二,简答题 1,试述微生物与当代人类实践的重要关系 2,简述革兰氏染色的机制 3.微生物有哪五大共性其中最基本的是哪一个为什么 三,填空(每空1分,共15分) 1.真核微生物核糖体类型为 _______ .. 3.研究细菌遗传,代谢性能常采用 _____ 时期的细胞. 4.酵母菌细胞壁的主要成份_____和_______. 5.侵染寄主细胞后暂不引起细胞裂解的噬菌体称 ________ . 6.微生物细胞的主要组成元素是______,_____,_______和_______. 7.食用菌是由 ______和 ____ 组成.. 9.细菌细胞的碳,氮营养比为______. 10.根瘤菌可与 _________共生固氮 微生物学试题(一)答案: 一,1,革兰氏阳性菌:细菌经革兰氏染色染色后最终染成紫色的菌 2,伴胞晶体:少数芽孢杆菌,在形成芽孢的同时,会在芽孢旁形成一颗菱形,方形,或不规则形的碱溶性蛋白质晶体称为半胞晶体 3,菌落:当单个细菌细胞或者一小堆同种细胞接种到固体培养基表面,当它占有一定的发展空间并处于适宜的培养条件下时,该细胞就会迅速生长繁殖并形成细胞堆,此即菌落. 4,生命周期:指的是上一代生物个体经过一系列的生长,发育阶段而产生下一代个体的全部过程. 5,荚膜:包被于某些细菌细胞壁外的一层厚度不定的透明胶状物质 6,芽孢:某些细菌在其生长发育的后期,在细胞内形成的一个圆形或椭圆形,厚壁,含水量低,抗逆性强的休眠构造. 二,1,①在微生物与工业发展的关系上,通过食品罐藏防腐,酿造技术的改造,纯种厌氧发酵的建立,液体深层通气搅拌大规模培养技术的创建以及代谢调控发酵技术的发明,使得古老的酿造技术迅速发展成工业发酵新技术; ②微生物在当代农业生产中具有十分显著的作用,例如,以菌治害虫和以菌治植病的生物防治技术;以菌增肥效和以菌促生长的微生物增产技术;以菌做饲料和以菌当蔬菜的单细胞蛋白和食用菌生产技术;以及以菌产沼气等生物能源技术. ③微生物与环境保护的关系越来越受到当代全人类广泛的重视.微生物是占地球面积70%以上的海洋和其他水体中光合生产力的基础;是一切食物链的重要环节;是污水处理中的关键角色;是生态农业中最重要的一环;是自然界重要元素循环的首要推动者;以及是环境污染和监测的重要指示生物;等等. ④微生物与在食品上的应用.调味品,发酵食品,酸乳,蔬菜加工.
微生物检测手段及注意事项
微生物检测手段及注意事项 微生物的检测，无论在理论研究还是在生产实践中都具有重要的意义，本文对生长量测定法、微生物计数法、生理指标法和商业化快速微生物检测简要介绍了利用微生物重量，体积，大小，生理代谢物等指标的二十余种常用的检测方法，简要介绍了这些方法的原理，应用范围和优缺点。 一个微生物细胞在合适的外界条件下，不断的吸收营养物质，并按自己的代谢方式进行新陈代谢。如果同化作用的速度超过了异化作用，则其原生质的总量（重量，体积，大小）就不断增加，于是出现了个体的生长现象。如果这是一种平衡生长，即各细胞组分是按恰当的比例增长时，则达到一定程度后就会发生繁殖，从而引起个体数目的增加，这时，原有的个体已经发展成一个群体。随着群体中各个个体的进一步生长，就引起了这一群体的生长，这可从其体积、重量、密度或浓度作指标来衡量。微生物的生长不同于其他生物的生长，微生物的个体生长在科研上有一定困难，通常情况下也没有实际意义。微生物是以量取胜的，因此，微生物的生长通常指群体的扩增。微生物的生长繁殖是其在内外各种环境因素相互作用下的综合反映。因此生长繁殖情况就可作为研究各种生理生化和遗传等问题的重要指标，同时，微生物在生产实践上的各种应用或是对致病，霉腐微生物的防治都和他们的生长抑制紧密相关。所以有必要介绍一下微生物生长情况的检测方法。既然生长意味着原生质含量的增加，所以测定的方法也都直接或间接的以次为根据，而
测定繁殖则都要建立在计数这一基础上。微生物生长的衡量，可以从其重量，体积，密度，浓度，做指标来进行衡量。 1. 微生物计量法 1.1 体积测量法 又称测菌丝浓度法，通过测定一定体积培养液中所含菌丝的量来反映微生物的生长状况。方法是，取一定量的待测培养液（如10 mL）放在有刻度的离心管中，设定一定的离心时间（如5 min）和转速（如5000 rpm），离心后，倒出上清夜，测出上清夜体积为v，则菌丝浓度为（10-v）/10。菌丝浓度测定法是大规模工业发酵生产上微生物生长的一个重要监测指标。这种方法比较粗放，简便，快速，但需要设定一致的处理条件，否则偏差很大，由于离心沉淀物中夹杂有一些固体营养物，结果会有一定偏差。 称干重法 可用离心或过滤法测定。一般干重为湿重的10~20%。在离心法中，将一定体积待测培养液倒入离心管中，设定一定的离心时间和转速，进行离心，并用清水离心洗涤1~5次，进行干燥。干燥可用烘箱在105 ℃或100 ℃下烘干，或采用红外线烘干，也可在80 ℃或40 ℃下真空干燥，干燥后称重。如用过滤法，丝状真菌可用滤纸过滤，细菌可用醋酸纤维膜等滤膜过滤，过滤后用少量水洗涤，在40 ℃下进行真空干燥。称干重发法较为烦琐，通常获取的微生物产品为菌体时，常采用这种方法，如活性干酵母（Activity Dry Yeast, ADY）,一些以微生物菌体为活性物质的饲料和肥料。
卫生微生物(一) 一、名词解释 1.指示微生物:就是在常规卫生监测中,用以指示样品卫生状况及安全性的(非致病)微生物(或细菌)。 2.消毒:就是指杀灭或清除传播媒介上病原微生物,使其达到无害化的处理。 3.生物战剂:在战争中用来伤害人、畜与毁坏农作物、植被等的致病微生物及其毒素称为生物战剂。 4.土著微生物:就是指一个给定的生境中能生存、生长繁殖、代谢活跃的微生物,并能与来自她群落的微生物进行有效的竞争。它们已经适应了这个生境。 5.高效消毒剂:可杀灭所有种类微生物(包括细菌芽胞),达到消毒合格要求的消毒剂,如戊二醛、过氧乙酸等。 6.微生物气溶胶:以固体或液体微小颗粒分散于空气中的分散体系称为气溶胶。其中的气体就是分散介质。固体或液体微小颗粒如尘埃、飞沫、飞沫核及其中的微生物称为分散相,分散悬浮于分散介质(空气)中,形成所谓微生物气溶胶。 7.水分活性值:就是指食品在密闭容器内的水蒸气压与相同温度下的纯水蒸气压的比值。 二、填空 1.微生物与环境相互作用的基本规律有限制因子定律、耐受性定律、综合作用定律。P12 2.菌落总数包括细菌菌落总数、霉菌菌落总数与酵母菌菌落总数。P43 3.紫外线消毒的影响因素有照射剂量、照射距离、环境温度。P68 4.生物战剂的生物学特性就是繁殖能力、可传染性、防治困难、稳定性较差。P86 5.生物战剂所致传染病的特点就是流行过程异常、流行特征异常。P90 6.用于食品霉菌、酵母菌计数的培养基为马铃薯-葡萄糖琼脂、孟加拉红与高盐察氏培养基P289 7.按微生物要求,将药品分为规定灭菌药品与非规定灭菌药品两大类。P233 8.我国评价化妆品细菌安全性指标包括、、与特定菌的检验 三、简答题 1、简述水微生物的生态功能。P101 答:水微生物的生态学功能大体可概括为以下几个方面:1)能进行光能与化能自养;2)能降解有机物为无机物,这些无机物可作为生产者的原料;3)能同化可溶性有机物并把它们重新引入食物网;4)能进行无机元素的循环;5)细菌可以作为原生动物的食物;6)土著微生物能攻击外来微生物,使后者很难生存。 2.鲜蛋的抑菌物质及其抑菌作用P181 答:禽蛋含有丰富的营养物质,就是微生物生长繁殖的良好环境。但就是禽蛋又具有良好的防御微生物侵入的结构及各种天然抑菌条菌物质。蛋壳有保护作用,蛋壳表面有壳胶膜,可保护鲜蛋不受微生物侵入。蛋白内含有许多溶菌、杀菌等作用的因子,如溶菌酶,这就是一种碱性蛋白,作用于革兰阳性菌的胞壁肽聚糖,使之裂解而溶菌。此外,在蛋白中还有一种伴清蛋白,它能螯合重金属离子,特别就是铁、铜、锌等离子,结果使这些离子不能被细菌利用,就是一种重要的抑菌物质。 四、问答
微生物学试卷二 选择题（在四个答案中选择一个正确的） 1、第一个被广泛应用于治疗链球菌等细菌性传染的有效化学治疗剂是： A.砷凡纳明（“606”）； B.磺胺； C.青霉素； D.链霉素。 2、人类最早利用的“家养微生物”是： A.曲霉； B.酵母； C.毛霉； D.根霉。答：（） 3、在微生物学工作中，哪种类型的纯培养常被用于分离、纯化、鉴定、计数以及选种、育种等方面。 A.菌苔； B.菌落； C.菌膜； D.菌液。答：（） 4、衣原体与病毒的共同特性是： A.具核糖体，能合成蛋白质； B.依赖宿主获得ATP； C.对抗生素不敏感； D.二分裂方式繁殖。 5、在细胞培养中，通常污染传代细胞，并给细胞培养及病毒实验带来困难的微生物是： A.支原体； B.衣原体； C.立克次氏体； D.螺旋体。答：（） 6、酿酒酵母营养体是： A.单倍体； B.二倍体； C.单倍体和二倍体同在； D.多倍体。 7、观察酵母菌细胞染色体的方法是： A.草兰氏染色法； B.姬姆萨染色法； C.酸性复红； D.吖啶黄。 8、在自然界放线菌主要通过下列哪种方式进行繁殖？ A.形成有性孢子； B.有性接合； C.形成无性孢子； D.菌丝体断裂。 9、烟草花叶病毒粒子所含有的核酸是： A.±RNA； B.+RNA； C.－RNA； D.+DNA。答：（） 10、EMP途径中的一个关键酶是： A.已糖激酶 B.磷酸已糖异构酶 C.磷酸果糖激酶 D.果糖二磷酸醛缩酶 11、在以下四条二氧化碳同化途径中，未能在自养微生物中发现的一条是： A.卡尔文循环； B.厌氧乙酰辅酰A途径； C.4碳途径； D.还原性TCA途径。 12、在以下4属微生物中，能使豆科植物结根瘤的共生固氮菌是： A.弗兰克氏菌； B.固氮菌； C.根瘤菌； D.德克氏菌。答：（） 13、运到细胞膜外的肽聚糖单体要进一步合成肽聚糖网套，其合成的引物为 A.Park核苷酸； B.肽聚糖； C.细菌萜醇； D.磷壁酸。答：（） 14、拟病毒是利用下列一种RNA聚合酶进行复制的，它是： A.植物细胞内依赖于DNA的RNA聚合酶； B.植物细胞内依赖于RNA的RNA聚合酶； C.拟病毒自身的依赖于DNA的RNA聚合酶； D.拟病毒自身的依赖于RNA的RNA聚合酶。 答：（） 15、在分支代谢途径中，每一分支途径的末端产物按一定百分率单独抑制共同途径中第一个酶的反馈抑制作用，称为： A.协同反馈抑制； B.合作反馈抑制； C.累积反馈抑制； D.顺序反馈抑制。 填空题（将正确答案填写在横线上方。）（本大题共10 小题，每小题3分，总计30 分） 1、微生物调节其代谢流的大小有两种方法，其中的“粗调”指调节_____________，而其中的“细调”则是指调节__________________。
-/ 微生物学试题十二套 微生物学试题（一） 三、填空(每空1分,共15分) 1.真核微生物核糖体类型为 _ 80S _____ 。 2.大肠杆菌长为2.0μm,宽为0.5μm,其大小表示为__ 0.5μm x2.0μm ___ 。 3.研究细菌遗传、代谢性能常采用 _对数生长____ 时期的细胞。 4.酵母菌细胞壁的主要成份__葡聚糖和甘露聚糖____。 5.侵染寄主细胞后暂不引起细胞裂解的噬菌体称 __.温和噬菌体______ 。 6.微生物细胞的主要组成元素是_蛋白质_____，_核酸____，类脂和碳水化合物_。 7.食用菌是由 ___营养菌丝和生殖菌丝豆科植物共生固氮___ 组成。 8.用物理或化学方法杀死物品上大部分微生物的过程称 __灭菌____ 。 9.细菌细胞的碳、氮营养比为__ 6/1____。 10.根瘤菌可与 ___豆科植物______共生固氮 四、学名互译 1.A.niger.黑曲霉 2.B.subtilis 枯草芽孢杆菌 3. B.thuringiensis 苏云金芽孢杆菌 4. A.oryzae 米曲霉 微生物学试题（二） 一. 是非题（共10分。只需注明“对”或“错”） 1.大多数嗜热菌的G-C含量高于中温菌。 2.大肠杆菌属低等原核生物，所以其遗传物质只是一条松散的环状双链DNA，不存在DNA高级结构。 3.当菌体生长、氧吸收和糖利用的比速度下降时，青霉素的合成达到最高值。 4.初生F'菌株和次生F'菌株都属于部分二倍体。 5.分批培养时，细菌首先经历一个适应期，此期间细胞处于代谢活动的低潮，所以细胞数目并不增加。 6.渗透酶( permease)属于诱导酶，而其它种类的酶往往属于组成酶。 7.恒化培养与恒浊培养的区别在于前者的培养物群体始终处于对数生长期。 8.将HR病毒的外壳蛋白与TMV病毒的RNA混合，去感染烟草，则会出现TMV型病灶。若在感染前，用TMV抗体处理，则会钝化病毒，不出现TMV型病灶。 霉菌的基因重组常发生于准性生殖时，较少出现在有性生殖过程中。9. -/ 10.营养物跨膜的主动运输必需依靠载体和能量，而被动扩散不需要载体和能量。 二填充题（30分） 1 突变率10-10表示_ _ _ _ a_ _ _ 。 2 我们常采用_ _ a_ _ _ 浓度的NaCl 或0.1M_ _ _ b_ _ _ 来稀释菌液或清洗菌体细胞。因为_ _ c_ _ _ 。 3 在有机物为基质的生物氧化反应中，以氧为电子传递最终受体的方式称_ _ _ _ a_ _ _ _ ；以无机氧化物为最终电子受体的称_ _ b_ _ ；以有机物为最终电子受体的称_ _ _ _ c_ _ _ _ 。 4 常见的菌种保藏方法有_ _ _ _ a_ _ _ _ 、_ _ _ b_ _ _ 和_ _ _ c_ _ _ 等，其中_ _ _ d_ _ 方法保藏菌种的时间最长久。 5 对细菌简单染色法的一般步骤是_ _ _ a_ _ _ 。常用的染料有_ _ b_ _ 和_ _ c_ _ _ 等。 6 在混合菌样中获得纯菌株的方法主要有_ _ _ a_ _ _ 和_ _ b_ _ 等。
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练习题 一、一、名词解释 1、原生质 指在人为条件下，用溶菌酶除尽原有细胞壁或用青霉素抑制新生细胞壁合成后，所得到的细胞膜包裹的圆球状渗透敏感细 胞。HVhrXjn2Wt 2、PHB 聚—β—羟丁酸，是一种存在于许多细菌细胞质内属于类脂性质的炭源类贮藏物，不溶水，而溶于氯仿，可用尼罗蓝或苏丹黑染色，具有贮藏能量、炭源和降低细胞内渗透压等 作用。HVhrXjn2Wt 3、芽孢 某些细菌在其生长发育后期，在细胞内形成的一个圆形或椭圆形、壁厚、含水量低、抗屈性强的休眠构造。 4、菌落 将单个细菌<或其他微生物）细胞或一小堆同种细胞接种到固体培养基表面<有时为内层），当它占有一定的发展空间
并处于适宜的培养条件下时，该细胞会迅速生长繁殖并形成细胞堆，此即菌落 一般指一种小型生物生活在另一种较大型生物的体内<包括细胞内）或体表，从中夺取营养并进行生长繁殖，同时使后者蒙受损害甚至被杀死的一种相互关系。HVhrXjn2Wt 10、腐生 以无生命的有机物作为营养物质进行生长繁殖的生活 方式。 11、包涵体 始体通过二分裂可在细胞内繁殖成一个微菌落即“包 涵体” 12、巴斯特效应 酵母菌的乙醇发酵是一种厌氧发酵，如将发酵条件改变成好氧条件，葡萄糖分解速度降低，乙醇停止生产，但当重新回到厌氧条件时，葡萄糖的分解速度增加，并伴随大量的乙 醇产生。HVhrXjn2Wt 13、噬菌斑 由噬菌体在菌苔上形成的“负菌落” 14、伴孢晶体
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