农杆菌介导玉米转基因的研究
摘要：转基因技术在玉米育种中运用很广泛，本文主要通过查阅文献，结合专业所学知识，从转基因技术、农杆菌介导的受体以及影响农杆菌转化的因素和玉米转基因的现状等方面，综述了在玉米中农杆菌介导转基因的研究进展。
关键词：玉米，转基因，农杆菌介导法，育种
转基因作物指将一种或几种植物、动物乃至人类的基因导人某种作物，使其基因重新组合，增强其抗逆性、抗病虫害、抗杂草等优良性状。转基因玉米的研究与开发已取得了显著进展。许多外源基因已经被导入玉米，以改良玉米的某些性状，并取得了很好的成效。２０世纪８０年代后期，一些研究者尝试用根癌农杆菌接种玉米幼苗。采用病毒感染以及外源DNA与花粉混合授粉等方法，试图将外源DNA导入到玉米中，虽得到一些转化表现，但均未得到分子生物学证据。Fromm 等用电激法把抗除草剂基因Pat转入玉米原生质体中，开创了玉米遗传转化研究的先河。Rhodes等用电激法把NptII基因转入玉米原生质体中，经过抗性筛选、分化再生得到抗Km的转基因植株。Fromm、Gordon－Kamm等利用基因枪轰击原生质体获得可育的玉米转基因植株。农杆菌介导法是转基因技术中经常采用的一种手段。根癌农杆菌是许多双子叶植物肿瘤病的病原菌，它含有Ti质粒，其中的T-DNA能够转移到植物基因组上。农杆菌在双子叶植物中的转化已经十分完善，但是由于玉米等单子叶植物不是其天然的寄主，所以转化工程比较困难。但最近几年的研究表明农杆菌可以介导玉米上的基因转化。
1.常用玉米转基因的方法
在现代育种技术中，常用的转基因方法往往结合使用，以提高转基因的效果。明小天等通过基因枪提高了根癌农杆菌转化水稻的转化效率蚓。花粉管通道法既可以用普通的质粒，也可用农杆菌Ti质粒。另外，还有PEG介导法、超声波法、子房注射法、阳离子转化法和电击法等。
1.1 基因枪法
1989年Klein第1次使用基因枪介导法转化玉米。。Philippe等用山梨糖醇和甘露醇处理A188XB73的胚性悬浮细胞，用基因枪把GUS基因导入玉米，结果表明经山
梨糖醇和甘露醇处理过的细胞转化频率提高2.7-6.8倍。基因枪法是玉米遗传转化的主要方法，受体组织类型对基因枪法的转化有一定的影响。基因枪法具有不受基因型的限制、受体广、转化率高的优点，但外源基因整合的拷贝数多。
1.2 花粉管通道法
花粉管通道法的主要原理是授粉后使外源基因沿花粉管渗入，经过珠心通道进入胚囊，转化尚不具备正常细胞壁的卵、合子或早期胚胎细胞。花粉管通道法始于1975年Pandey对烟草的研究。Hess报道了利用外源DNA花粉得到花色变异的矮牵牛。周光宇在分析远缘杂交成功经验的基础上，提出了DNA片段杂交假设，为花粉管通道法提供了理论基础。花粉管通道法无需建立愈伤组织等组织培养体系，同时不受植株基因型的限制，但由于授粉时间短，使得不能转化大片段的外源DNA。
2.根癌农杆菌介导玉米遗传转化
根癌农杆菌转化系统具有许多优点：成功率高，效果好，外源基因整合位点较稳定，且大多数是单位点整合；显性表达率较高，共抑制现象相对较少；遗传稳定性好，大多符合孟德尔遗传规律等。利用该方法转化植物的研究始于20世纪80年代初。由于单子叶植物不是农杆菌天然受体，所以遗传转化研究落后于双子叶植物。Byteier用带有Nos-nptII的Ti质粒转化刁石柏愈伤组织，得到了抗Km生植株。
2.1 农杆菌介导转化玉米的研究历程
付永彩将农杆菌介导禾本科作物转化的研究历程分为3大阶段，所以农杆菌介导的玉米转基因研究也可分为3个阶段。
第1个阶段，证明农杆菌能够侵染玉米。Grimsley等将带有MSV基因的胭脂碱型根癌农杆菌注入玉米幼苗，发现98%叶片出现感染症状，而条斑病毒与玉米单独共培养时不能感染，说明可以通过农杆菌介导病毒进入玉米细胞。
第2个阶段，获得转化细胞，但未能获得转基因植株。Shen等用农杆菌与芽尖共培养、Tshige用农杆菌转化胚性愈伤都得到了稳定的转化体系但未得到植株。
第3个阶段，获得转基因植株，并有分子杂交证据。Gould报道了农杆菌转化玉米茎尖分生组织获得成功。Ishida等构建农杆菌超级双元载体转化体系，使转化频率高达5%-30%，并且用农杆菌浸染A188的幼胚，得到的转Bar、GUS植株70%可育。Escudero等用农杆菌浸染玉米幼胚，发现不同时期，幼胚感染率不同，而且发现
T-DNA的转移受到基因国内玉米农杆菌的转化研究起步较晚。1999年黄璐、卫志明首次用农杆菌介导法把NptII、GUS、Hpt基因转入玉米，转化率为8.1%。张荣等用农杆菌浸染玉米幼胚，初步建立转化体系，但未获得转化植株。
2.2 农杆菌介导的转基因受体
2.2.1原生质体,Fromm、Rhode、Wang等以玉米的原生质体为受体，对玉米进行遗传转化。作为转化受体，原生质体具有转化效率高、嵌合体少、适宜各种转化系统等优点，但原生质体同时具有培养周期长、再生频率低、遗传稳定性差、再生植株变异大等缺点。马力耕等以黄化叶片为材料，通过2步酶解获得了原生质体。文仁来等通过酶解以花药培养获得的单倍体愈伤组织，得到的原生质体可用于体细胞杂交。支那英等将小麦和玉米的原生质体进行杂交得到体细胞杂种。
2.2.2愈伤组织，Armstrong把玉米愈伤组织分为2种类型：I型，白色，紧密坚硬，干燥，表面皱起，生长慢，易发生器官分化；II型，黄绿色，颗粒状，较紧密，较湿润，生长快，易发生胚状体。II型是目前玉米转化的常用受体：具有较高的转化频率和再生频率。但玉米胚性愈伤组织的诱导明显受到基因型的限制，能诱导较高胚性愈伤组织的报道目前仅局限于A188、B73等少数基因型材料中。目前已经从玉米叶片、幼穗、茎尖、幼胚、花药等外植体诱导出愈伤组织，其中幼胚是较好的外植体。同时，愈伤组织的诱导还受到外植体生理状态和放置方式的影响。
2.2.3丛生芽,丛生芽是由于玉米茎尖伸长受阻，而从叶腋中长出的大量不定芽。每个不定芽都有形成幼苗的能力，而丛生芽的诱导相对愈伤组织容易，并且不用再诱导发芽，从而提高后代的生成率，降低工作量。李国圣等利用玉米丛生芽，结合基因枪法获得转基因植株懈。
2.2.4悬浮细胞,通过细胞悬浮液分散细胞，并将其分散培养，在多次继代培养后，将细胞团诱导成小的愈伤组织，然后在固体培养基上继续培养、分化获得再生植株。孙世孟等利用获白X莱1029的愈伤组织，建立了4个悬浮细胞系，得到7个再生植株。向太和等提出悬浮细胞系建立的几个关键技术及判断胚性悬浮细胞系的参考标准。马莲菊等认为，基因型和培养基对悬浮细胞系的建立有影响，尤其是基因型。
2.2.5子房和幼穗,虽然愈伤组织、悬浮细胞、原生质体、丛生芽都可以获得
转基因植株，但T0代是嵌合体，不容易得到转基因种子，而且在嵌合体中基因易丢失。若通过雌配子或刚刚授精的合子，则T0代就是带有目的基因的转基因种子，而后代基因保存中只是进行自交，基因检测较容易。由于农杆菌具有单细胞侵染能力，所以未授粉的成熟雌配子浸在大量农杆菌液体中，有可能被农杆菌侵染而获得转基因植株。由于雌配子能够忍受外源DNA或变异染色体，所以可以通过雌配子传递以避免嵌合体存在于后代种子，从而得到稳定的后代。
2.3 影响农杆菌转化的因素
农杆菌介导遗传转化主要包括5个过程：①农杆菌在植物细胞上的吸附；②Ti 质粒上的Vir区被激活；③T-DNA切割与T-DNA复合物的形成；④T-DNA复合物进入植物细胞；⑤T-DNA整合到植物染色体上。农杆菌介导遗传转化关键在于农杆菌能否在植物细胞上吸附，Vir区基因是否被诱导，植物感受态细胞是否存在。
2.3.1 Vir区基因的诱导, 单子叶植物与双子叶植物对创伤的反应不同，单子叶伤口附近常发生木质化或硬化，细胞伤流液中不含有Vir基因诱导物。所以，目前主要采用添加诱导物的办法诱导Vir基因的表达。现已发现有７种酚类化合物与Vir基因表达有关，其中AS和OH-AS最为有效。另有报道指出一些小分子量糖类，如半乳糖和葡萄糖等，在AS浓度很低或没有时也可极大地促进Vir基因的有效表达。
2.3.2 感受态细胞,Sehlappi和Hoil用Agroinfection法研究不同发育阶段3个玉米品系幼胚对农杆菌的感受性，发现授粉后14-16d的幼胚感染频率最高。Jesus等在玉米分生细胞的T-DNA转化中发现授粉后10d前的未成熟胚不能被农杆菌感染，而授粉12-30d的未成熟胚转化频率逐渐增高。夏光敏等研究了７种不同基因型小麦不同发育阶段的幼胚及胚性愈伤组织转化，发现生长旺盛的II型愈伤组织是适宜的转化材料。由此可见，不同时期的细胞或组织对于感染的成功与否非常重要。
2.3.3其他因素,不同菌株或载体对玉米的转化有一定的影响。目前玉米上普遍使用的菌株是LBA4404和EHA101。研究发现，玉米幼嫩组织分泌物中有特异阻遏毒性基因表达的物质MDIBOA。研究人员正在寻找一种可抵抗MDIBOA的农杆菌菌株，以期能提高转化效率。受体的基因型也是影响转化效率的一个重要因素。许多试验表明，大多数玉米基因型细胞表面缺乏供农杆菌识别并与之附着的位点。
2.4 标记基因
标记基因的作用是在相应抗生素选择压力下，筛选出转化体。目前玉米遗传转化中使用的标记基因有NptII、npt和Bar等。Hpt和Bar作为标记基因很好，但玉米对Km不敏感，使用NptII选择效果不好。
3.应用
3.1 抗虫基因
张艳贞等以玉米自交系340、4112为材料，用带有PGBII04质粒的根癌农杆菌LBA4404转化幼胚及其初始愈伤组织，培养3d，在PPT培养基上连续筛选3代，获得了再生植株。张艳贞等发现抗性植株平均发生率11.21%，平均转化率2.35%，降低温度至22℃共培养，转化率可达4.44%，部分转化植株已经结实。权瑞党等利用农杆菌AGL0侵染玉米胚性愈伤组织，将雪花莲凝聚素基因转入玉米骨干自交系齐319和掖515中，获得转基因植株。伍晓丽等利用带质粒PBUSCK-Hyg农杆菌LBA4404将豇豆胰蛋白酶抑制剂基因cpti转入玉米自交系18-559中，cpti对玉米螟、粘虫、玉米根叶甲等多种害虫具有广谱抗性。
3.2 抗病毒
美洲商陆抗病毒蛋白是从美洲商陆植物体内提取出来的一种碱性蛋白，属I 型核糖体失活蛋白，具有广谱抗病毒能力。它对7个植物病毒属成员具有抑制作用，并且对细菌、真菌和H/V有一定的抑制作用。孙晓丽等将PAP转入玉米，得到了具有广谱抗性的玉米植株。
3.3抗盐
尹小燕等以玉米骨干自交系DH4866、齐319和AtNttXl和Hpt基因转入玉米培养细胞，经筛选获得了抗潮霉素的愈伤组织和再生植株，经PCR检测和Southem．blot验证，确定了22.8%再生植株为转基因植株。农杆菌液浓度、愈伤组织基因型及共培养时间对转化率均有明显影响。外源基因在转基因植株后代中的分离呈多样性，在部分株系中表现出孟德尔遗传规律。耐盐筛选表明，一些转基因植株及其后代具有很好的耐盐性，部分株系可在0.8%-1.0%NaCl溶液浇灌下萌发和生长。
3.4工程制药上的应用
玉米不仅是重要的粮食，而且是很好的生物反应器，利用玉米可以生产高效
表达、高活性、毒副作用小的细胞因子药物和工程疫苗。王云翠等将GMCSF转入玉米植株，GMSCF适应症表现为自身骨髓移植和化疗导致的血细胞减少症等。余云舟等将口蹄疫病毒蛋白基因转入玉米，得到无毒工程疫苗。
4.存在的问题
4.1 转基因后代的遗传表现
外源基因在转基因后代中的遗传行为和遗传稳定性是转基因研究的一个重要内容，通常通过分子检测和目的基因在后代中的表达情况来分析。被转入外源基因一般作为显性基因遗传，自交后代表现为3:1分离，但也有异常。如果外源基因转入位点在细胞质基因组中，则表现为母性遗传，但可能表达不明显。如果外源基因结合于核基因组DNA，则多表现为3:1分离，可以从中选出双链均有目的基因的后代，最好能有核质均有外源基因的后代。
4.2 基因沉默或失活
有时基因虽已导入但却不表达，但表现为基因沉默。基因沉默是转基因植株中普遍存在的现象，可分为2类：若发生在转录前，则称为转录失活；若发生在转录后，则称为转录后沉默。后沉默(mS)。TGS主要是由多拷贝基因插入引起的，常涉及DNA异染色质化和基因甲基化；PTGS常和CaMV 35S启动子有关，是转入基因过度表达的结果。沉默也可能与异位同源DNA配对、反义RNA效应、RNA降解有关。目的基因的高水平表达非常困难。用玉米Ubi．1启动子驱动外源基因，玉米转化体外源基因的拷贝数较低，可能原因为Ubi．1启动子通过重组内部同源序列而被定点整合进玉米基因组，以避免基因沉默现象的发生。
4.3 基因型的依赖性
农杆菌对不同品种玉米自交系的转化效率存在明显差别，而且在II型愈伤诱导中只有少数基因型的玉米诱导较好，如A188、B37等，大多常用自交系诱导不理想，从而导致转化效率低，重复性差。目前报道的转化效率一般为5％一30％，但在大多数实验室都很难达到这样的转化水平。
5.小结
农杆菌介导的遗传转化过程是自然界发生的完美的基因转化过程。农杆菌的一段DNA(T-DNA)能插入到受体植物细胞基因组，并能稳定地遗传给后代。作为一种天然的植物基因转化系统，农杆菌介导的遗传转化过程具有转化的外源DNA结构
完整，转化机理清楚，整合位点稳定，拷贝数低，聚合后的外源基因结构变异较
小等优点。将DNA直接通过Ti质粒介导转入完整细胞的转化方法转化频率比较高，再生植株可育性比较高，可以转移大片段外源DNA。因此，随着研究的不断深入，农杆菌介导有可能成为玉米转基因的主要导入方法。
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转基因玉米的鉴别方法 转基因玉米的鉴别方法 判断转基因食品的几个标准： 1、个头。按照传统，西红柿也有一定个头的，比如：像大拇指头那么一点大的小西红柿绝对是转基因。再比如大豆，也叫黄豆，就是做豆腐，豆浆那种豆子，形状应该像动物内脏：腰的样子，有点扁，可现在的大豆，全是圆圆的、大不少、就像豌豆一样的大豆，产量很高，就是转基因。 2、色彩。与传统的不一样的绝对是转基因，比如彩色棉花、彩色辣椒。 3、产量。转基因作物一般在开始几年，其产量要比传统作物高不少。 4、季节。除了大棚蔬菜外，其它的反季节食品容易是转基因的。 5、害虫。凡是害虫喜欢光顾的作物就是没转基因的，凡是害虫害怕，也就是没有害虫，或很少害虫的作物，就是转基因。 甜玉米是转基因玉米吗 甜玉米的不同之处在于，它的胚乳中可不只有淀粉，还有相对含量很高的水溶性多糖，这就赋予了其不同于普通玉米的甜味。究其背后的原因，是在甜玉米控制淀粉合成的一系列基因中，有一个或几个基因发生了自然的突变，处于纯合隐性状态，切断了部分还原性糖向淀粉转化的过程。这点小缺陷反而促成了甜玉米可口的味道。 甜玉米并不是最近才有的新作物，它的真正起源时间虽然无法考究，但有文献记载的最早的甜玉米品种是1779年欧洲殖民者从美洲的易洛魁人那里收集到的Papoon玉米，据此可以肯定甜玉米的出现时间还要更早。要知道，那时候可还压根没有转
基因这一说。 现在的甜玉米品种虽然和几百年前的不完全相同，但它同样不是转基因的产物，而是在自然突变的甜玉米品种的基础之上，通过传统育种技术选育自交系、组配杂交种的办法培育出的新的甜玉米品种。 最近几年，与甜玉米有关的几个基因序列和与其关联的分子标记都已经被找到，育种家还可以依靠分子标记辅助选择技术来加快育种进程。此外，还有利用花药组织培养技术来加快隐性基因的纯合进程的选育方法，也开始受到育种家的重视。 这些育种技术并没有涉及到单个或少数几个结构和功能已知的目的基因的插入，也没有对基因进行修饰、敲除、屏蔽等的改变(这些是我们常说的转基因技术手段)。通过这些方法培育出来的甜玉米都不是转基因玉米。很多人因为甜玉米的甜味不同于普通玉米，就认为甜玉米是转基因技术培育的，这其实是没有想到玉米自己的基因突变也会产生不一样的性状。 分辨转基因食品的方法 专家指出，按我国相关立法，若产品的主要原料中含转基因成分，应当在包装上加以注明，如果消费者不想购买转基因食品，一定要认真阅读食品标签，如买大豆油时，往往会看到小字标注原料是转基因大豆。 但若加工食品中含有转基因产品配料，却没有规定必须注明。如美式快餐店里的薯条，用的大都是转基因马铃薯品种;点心里的油脂，饭店里的烹调油，往往是转基因油。 所以在外就餐、购买加工食品时，遇到转基因食品成分的机会较大。相比之下，买国产果蔬(除番木瓜)、用花生油等来做烹调，几乎没有吃进去转基因成分的可能。多吃中国的杂粮杂豆，如小米、红豆等，也不会遇到转基因成分，而且其营养价值高。
农杆菌菌株的培养及感受态细胞的制备 挑取根癌农杆菌LBA4404单菌落于3ml的YEB液体培养基（链霉素100mg/ml），28℃振荡培养过夜 取过夜培养菌液500μl接种于50mlYEB（链霉素100mg/ml）液体培养基中，28℃振荡培养至OD600为0.5 左右。 5000rpm离心5min，集菌。 加10ml0.15MNaCl悬浮细胞，5000rpm离心5min， 加10ml预冷的20mMCaCl2悬浮细胞，冰浴，24小时内使用，或分装成每管200μl，液氮中速冻1min，置于-70℃保存备用。 植物表达载体向农杆菌感受态细胞的转化 取200ml 感受态细胞，加入1μg构建好的质粒DNA加入到，混匀后，冰浴30min。 液氮中速冻2-3min，37℃水浴5min，接着冰浴3min。 加入1mlYEB培养基，28摄氏度慢速震荡培养4h。 5000rpm离心5min，弃上清，集菌。 加入0.1mlYEB培养基重新悬浮细胞，涂布于含有100mg/ml Kan和125mg/ml Sm的YEB 平板上，28℃培养 阳性克隆的鉴定 挑取平板上长出的单菌落，接种于含有100mg/ml Kan和125mg/ml Sm的YEB液体培养基中，28℃振荡培养过夜，小量提取质粒DNA，以质粒DNA为模板进行PCR扩增鉴定。 农杆菌菌液的制备 挑取继代2d后的农杆菌单菌落，在加有相应抗生素的液体YEB培养基中，在28℃黑暗条件下震荡培养16-20h（OD600为0.6-0.8） 将菌液置于离心管中，18-20℃，5000rpm离心5min收集菌体。 将收集到的菌体用2mlD-inf液体培养基悬浮进行洗涤，以去除残余的YEB培养基 18-20℃，5000rpm离心10min收集菌体，将菌体用2mlD-inf液体培养基，加入1‰AS，备用（放1h）
中国市场上的转基因食品及鉴别方法 国内市场上的转基因食品清单 一、我国转基因作物有哪些? 1、已批准安全证书的有棉花、水稻、玉米和番木瓜，只有棉花、番木瓜批准商业化种植 “截至目前，我国批准了转基因生产应用安全证书并在有效期内的作物有棉花、水稻、玉米和番木瓜。”中国农科院植保所副研究员谢家建介绍说。 “目前，转基因水稻和转基因玉米尚未完成种子法规定的审批，没有商业化种植。”谢家建表示，“我国已经进行商业化种植的转基因作物只有棉花和番木瓜。” 我国批准进口用作加工原料的转基因作物有大豆、玉米、油菜、棉花和甜菜。这些食品必须获得我国的安全证书。 2、目前市售圣女果、彩椒、小南瓜、小黄瓜都不是转基因食品 网上流传一份转基因食品名单，包括“圣女果、大个儿彩椒、小南瓜、小黄瓜”。对此专家并不认同。 中国农科院生物所研究员王志兴说，小番茄也叫圣女果、樱桃番茄，是自古就有的番茄品种，只是因为个头小、采摘不便、产量低，最早仅作为观赏用，后来发现食
用方便，口味经过改良后逐渐流行。个头小是天生的基因差异，不是转基因的结果。 中国农科院油料所副研究员吴刚说，小南瓜和小黄瓜也不是转基因食品，仅仅是未充分成熟的南瓜和黄瓜。如果继续在田间种植，小南瓜和小黄瓜最终会生长成普通的大南瓜和老黄瓜。 关于大个儿彩椒，吴刚表示，大个儿彩椒含有不同类型的花青素，表现为更丰富的颜色。花青素的变异在植物中很常见，像鲜花同一个品种就有不同颜色，萝卜也有红萝卜、绿萝卜、白萝卜等。“我国曾经批准过抗病毒甜椒的商业化种植，但与常规甜椒相比，转基因甜椒并没有明显优势，因此被市场自然淘汰。” 3、我国市场转基因食品主要是大豆油和木瓜 中国农业大学食品工程与营养科学院院长罗云波介绍，目前中国市场上的转基因食品主要有两种，一种是转基因食用油，就是我们所说的大豆色拉油，来源主要是从美洲，尤其是从美国、阿根廷、巴西等国家进口的大豆所生产出来的食用油。 还有一种就是转基因木瓜，因为木瓜容易得一种农药很难治的病，用基因的技术能够控制，转基因木瓜也是我们能够吃到的转基因食品。除此之外，我国很少能够见得转基因种类的食品。
转基因食品及其安全 摘要：转基因食品自从出现以来就一直备受争议，近日转基因水稻、玉米等作物获得农业部农业转基因生物安全管理办公室颁发的安全证书，这一事件更是加剧了群众对于转基因食品的质疑，转基因食品的安全性的疑问又被重新摆上台面。本文对转基因食品的来源、分类以及其安全性做了初步探讨，对于帮助了解转基因食品及转基因食品的安全性都具有一定的理论意义和现实意义。 关键词：转基因食品安全性 一、转基因食品的定义 所谓转基因食品，就是通过基因工程技术将一种或几种外源性基因转移到某种特定的生物体中，并使其有效地表达出相应的产物（多肽或蛋白质），此过程叫转基因。以转基因生物为原料加工生产的食品就是转基因食品。根据转基因食品来源的不同可分为植物性转基因食品，动物性转基因食品和微生物性转基因食品。 转基因食品是具有一定的优点的，例如转基因食品可增加作物产量、降低生产成本；可增强作物抗虫害、抗病毒等的能力；提高农产品耐贮性；缩短作物开发的时间、摆脱四季供应、打破物种界限，不断培植新物种，生产出有利于人类健康的食品。 但是，即便转基因食品的优点非常多，其具有的一些缺点也是不容忽视的：所谓的增产是不受环境影响的情况下得出的，如果遇到雨雪的自然灾害，也有可能减
产更厉害。许多转基因食品本身就能产生一定量的有毒物质和某些营养因子以抵抗细菌和害虫的入侵。现有转基因食品中的毒素含量并不一定会引起毒反应，当然如若处理不当，某些食品（如木薯）能引起严重的问题甚至可能引发死亡。 根据《农业转基因生物标识管理办法》规定，我国目前已有5类17种在售转基因生物被列入转基因标识目录并在市场上销售，这17类转基因生物包括：大豆种子、大豆、大豆粉、大豆油、豆粕、玉米种子、玉米、玉米油、玉米粉、油菜种子、油菜籽、油菜籽油、油菜籽粕、棉花种子、番茄种子、鲜番茄、番茄酱。卫生部的《转基因食品卫生管理办法》则规定，食品产品中(包括原料及其加工的食品)含有基因修饰有机体的，要标注“转基因××食品”或“以转基因××食品为原料”。卫生部对转基因食品的生产经营组织定期或者不定期监督抽查，并向社会公布监督抽查结果。 二、转基因食品的分类 转基因食品包括以下几类： 第一类，植物性转基因食品。植物性转基因食品很多。例如，面包生产需要高蛋白质含量的小麦，而目前的小麦品种含蛋白质较低，将高效表达的蛋白基因转入小麦，将会使做成的面包具有更好的焙烤性能。番茄是一种营养丰富、经济价值很高的果蔬，但它不耐贮藏。为了解决番茄这类果实的贮藏问题，研究者发现，控制植物衰老激素乙烯合成的酶基因，是导致植物衰老的重要基因，如果能够利用基因工程的方法抑制这个基因的表达，那么衰老激素乙烯的生物合成就会得到控制，番茄也就不会容易变软和腐烂了。美国、中国等国家的多位科学家经过努力，已培育
美国人究竟吃不吃转基因食物 腾讯科技[微博]2011年04月26日15:31 分享 美国人用于直接食用的转基因食物的比例相对于其生产规模来讲，百分比确实不高，但由于其庞大的农业生产能力，即便很低的比例也可以得出很高的人均消费量 本文作者谭一泓贾鹤鹏 近年来，国内舆论一直被一个问题所困惑，作为转基因作物种植第一大国，美国的公众到底吃不吃转基因食品？围绕着这一问题的各种说辞，让消费者无所适从。 转播到腾讯微博 美国人究竟吃不吃转基因食物
《科学新闻》经过广泛搜集资料和采访，发现美国人的确在大量食用转基因食品，对于大多数人而言，人们一般也意识不到转基因食物有何特别。 而同时，美国作为一个多元化的大国，自然也不乏一些抵制转基因食品的环保组织和社区，只是这种抵制既不能在很大程度上影响公众，也不能让自己的餐桌上杜绝转基因食物。“因为对于大多数美国人来讲，他们不在乎食品中是否有转基因。”康奈尔大学科学传播教授Bruce Lewenstein说。 消费量之辨 中国农业科学院生物技术研究所前任所长黄大昉研究员以及多位专家，在不同的场合指出，从全球角度来说，转基因食品早已在应用了。这一点在中国也不例外。转基因食品是经过严格管理、严格评价的，是可以放心食用的。 “有人讲，在北美市场上有三千种转基因食品，它主要的成分就是转基因的大豆、玉米，所以它也是转基因食品，而且是几亿人吃了十几年了。”黄大昉在一次人民网（603000）的访谈中说。 但是这一说法，最近遭到了一些反对转基因人士的反驳。 网上一篇转载率颇高的博文就列举了很多数字，试图说明美国人没有大规模食用转基因食品。 该文以玉米为例，指出根据美国官方统计，在美国，玉米食用比例大约是总消费量的10.5%，而其中直接食用的比例不到2.5%。
转基因研究的现状及发展 转基因作物是当今世界各国现代生物技术产业研究的热点，中国的转基因生物技术发展一、我国转基因作物的发展现状迅速，由于科学界对转基因作物对人类及生态环世界上最早的转基因作物诞生于年，是一境利与弊的争论，措政府应制定相应的政策、施对到种含有抗生素药类抗体的烟草。世纪年代，其进行安全管理。本文论述了转基因作物在国际农业生物技术已逐渐成为各国现代生物技术产业研国内的发展现状，分析了转基因作物对人类及生态环境的利与弊以及关于我国转基因作物安全管究的热点。 转基因技术的应用 1．在畜牧兽医中的应用 应用于动物抗病育种转基因技术可以用于动物抗病育种，通过克隆特定基因组中的某些编码片段，对之加以一定形式的修饰以后转入畜禽基因组，如果转基因在宿主基因组能得以表达，那么畜禽对该种病毒的感染应具有一定的抵抗能力，或者应能够减轻该种病毒侵染时对机体带来的危害。（其用于遗传育种，不仅可以加速改良的进程，使选择的效率提高，改良的机会增多，并且不会受到有性繁殖的限制。）例如Clements等将绵羊髓鞘脱落病毒的表壳蛋白基因转入绵羊，获得的转基因动物抗病力明显提高；丘才良把一种寒带比目鱼抗冻基因成功地转移到大西洋鲑中，为提高某些鱼类的抗寒能力做了积极的尝试。 2．在医学领域中的应用 用于生产药用蛋白用转基因动物的乳腺生产重组蛋白（乳腺生物反应器）可能是转基因动物的最大应用，这也是世界范围内转基因研究的热点之一。Swamdom （1992）用β-球蛋白的4个核酸酶I的高敏位点与人的两个基因相连，融合基因产生的转基因猪与鼠的原型相似。目前，把转基因动物当作生物反应器来生产药用蛋白已经受到国际社会的极大关注，不仅各国政府投资，一些私人集团也不惜投入大量资金加以研究和开发。 3．转基因的应用存在的问题及展望 （1）转基因表达水平低，许多转基因的表达强烈地位受着其宿主染色体上整合位点的影响，往往出现异位表达和个体发育不适宜阶段表达，影响转基因表达能力或基因表达的组织特异性，从而使大部分转基因表达水平极低，极少部分基因表达水平过高。 （2）难以控制转基因在宿主基因组中的行为，转基因随机整合于动物的基因组中，可能会引起宿生细胞染色体的插入突变，还会造成插入位点的基因片段丢失，插入位点周围序列的倍增及基因的转移，也可能激活正常状态下处于关闭状态的基因。 （3）不了解哪些基因控制多数生理过程，不了解基因表达的发育控制和组织特异性控制的机制。 （4）制作转基因动物的效率低，这是目前几乎所有从事转基因动物研究的实验室都面临的问题，也是制约着这项技术广泛应用的关键。 （5）对传统伦理是一种挑战，对人类的生存有一定的负面作用等。 当然，我们不能因为这些缺点的存在就否定转基因技术的研究价值。因为它作为一种新兴的生物技术，配合其他相关的生物技术将具有广阔的应用前景。随着这一技术日趋成熟，许多问题有望逐步得到解决。
世界转基因玉米种植介绍 转基因玉米是世界上最重要的转基因作物之一。1999年，全球12个国家种植的4个主要转基因作物中，玉米占转基因作物总种植面积的28%。美国种植的转基因玉米（抗虫基因、Bt耐除草剂基因和耐除草剂基因）增加了220万公顷，从1998年的810万公顷增加到1999年的1030万公顷，相当于1999年美国全国玉米种植面积3140万公顷的33%。美国科学家还培育出能抗欧洲玉米螟的转基因玉米，以防欧洲玉米螟威胁玉米种植。到1998年，这种转基因玉米的种植面积已达到美国玉米种植面积的20%。此外，抗根瘤线病的玉米新品种也已研制成功，2～3年内即可大规模栽培。除美国外，欧盟的西班牙和法国也已开始种植转基因Bt玉米，面积分别为3万公顷和1000公顷，而葡萄牙首次在1999年种植转基因Bt玉米 1000公顷以上，此外，德国也有小面积的Bt玉米种植。 (1)玉米的转化：在玉米上，直到80年代后期才在转化方面取得突破。 ①愈伤组织法。第一例成功的玉米自交系（A188）培养出再生植株报道于1975年。一直到1988年，Klein等人用基因枪法把cat基因转移到玉米的胚状体和非胚状体细胞中，并发现有短暂表达。与此同时，基因表达和标记系统也得到发展。到1996年，农杆菌共培养法才成功用于转化瞬息万变交系A188。1986年Fro毫米研究小组获得了第一个转基因玉米愈伤组织。应用基因枪法可用Ⅰ型和Ⅱ型愈伤组织及未成熟胚来做DNA转移。 ②其它玉米转化方法。以组织培养如愈伤组织培养为基础的玉米转化方法存在一些缺点。1993年报道了成功地把DNA转移到早期合子胚的分生组织中，其转化频率4%～45%（随基因型不同而有差异），1995年获得了转基因玉米茎。随后在这方面做了大量工作。 ③玉米转化新技术。pat基因在玉米转化中被广泛用作选择性标记其它标记也有使用。在玉米转化中使用可见标记（报导基因）对基因表达研究和证实转基因的存在是很有意义的。1992年最先从水母中克隆出的绿荧光蛋白（克FP）基因作为选择性标记基因很有利用价值。 (2)转基因表达的调控：理想的转基因表达需要精确控制表达水平、组织和细胞特异性和代间稳定性。其调控因子包括启动子、转录和翻译前导序列、增强子及其它序列。在充分考虑转基因所需条件后，才能正确选择调控因子。影响表
从进口转基因玉米看转基因与非转基因的区别 近来，有关转基因食品的安全性一直争议不断，不同的国家对转基因食品有不同的政策，但均持谨慎态度。近日，中粮进口6万吨美国转基因玉米，已接近整个6月份进口的玉米总量，并远远超过了5月份的进口玉米量。尽管对于如此巨量的进口转基因玉米的原因和安全方面的评价，中粮集团相关发言人暂未作出回应，但是伴随这批转基因玉米进入中国，一些农业方面的研究人士表现出诸多担忧。 为什么人们对中粮进口转基因玉米如此关注？转基因食品和非转基因食品究竟有什么区别？ 慧聪食品工业网为您找到相关资料，来解读非转基因与转基因。 非转基因是通过自然界优胜劣汰选择基因的变化，从而消除了转基因食品对人体可能造成的潜在危害.长期食用，安全可靠. 转基因指的是将某些物种所呈现出优秀性状的基因，转入可满足人类生存需求的动、植物、微生物基因组中，以使物种表现出其自身缺乏的优秀性状。在基因转入过程中，由于不可预见的基因突变，可能会转化为会对人体产生危害的有毒蛋白质等诸多因素，所以涉及到转基因的安全问题。 世界粮农组织、世界卫生组织及经济合作组织表示转基因食品可能带来环境风险和健康风险，人工移植外来基因可能令生物产生“非预期后果”。 世界上最好的大豆生产在中国东北(非转基因)，价格很高，中国把这些大豆出口到美国，这些钱再从美国进口美国大豆，转基因大豆由于产量大所以很便宜，而且出油量也很高，这样回到中国的大豆数量就变成原来的3~4倍，主要做成大豆油，价格便宜，能够保证人民的食用油. 但在英国和日本，95%以上的人都不接受转基因食品，是转基因的要明显标出来，而且价格特别便宜，但是也没有什么人买。 转基因作物，是指那些通过遗传工程进行修饰，根据需要转入某种特定基因的作物。目前最常见的是转入抗除草剂基因，这样的转基因作物可以抵抗普通的、较温和的除草剂，因此农民用这类除草剂就可以除去野草，而不必采用那些毒性较强、较有针对性的除草剂。其次是转入抗虫害基因，用得最多的是从芽孢杆菌克隆出来的一种基因，有了这种基因的作物会制造一种毒性蛋白，对其他生物无毒，但能杀死某些特定的害虫，这样农民就可以减少喷洒杀虫剂。据统计，在过去的四年内，美国由于推广抗虫害转基因作物，少喷洒了270万磅的杀虫剂。转基因作物还能增加产品，例如抗虫害转基因玉米能增产5－15％。转基因技术也可用于改变食物的营养成分，例如减少土豆的水分，这样炸出来的土豆片更脆；降低植物油中的不饱和脂肪酸，能延长储存期限。 转基因西红柿不仅容易运输、保存，而且味道也更佳。菲律宾的国际水稻研究院正在试验“金水稻”，通过转基因技术让水稻制造贝塔胡萝卜素（维生素A的前体），有助于消灭在亚洲地区广泛存在的维生素A缺乏症。转基因技术也可提高水稻中铁元素的含量，以减少亚洲妇女常见的贫血症。
国内市场上的转基因食品清单 一、我国转基因作物有哪些 ? 1、已批准安全证书的有棉花、水稻、玉米和番木瓜，只有棉花、番木瓜批准商业化种 植 “截至目前，我国批准了转基因生产应用安全证书并在有效期内的作物有棉花、水稻、 玉米和番木瓜。”中国农科院植保所副研究员谢家建介绍说。 目前， 转基因水稻和转基因玉米尚未完成种子法规定的审批， 家建表 示，“我国已经进行商业化种植的转基因作物只有棉花和番木瓜。 我国批准进口用作加工原料的转基因作物有大豆、玉米、 必须获得我国的安全证书。 2、目前市售圣女果、彩椒、小南瓜、小黄瓜都不是转基因食品 网上流传一份转基因食品名单，包括“圣女果、大个儿彩椒、小南瓜、小黄瓜”。对此 专家并不认同。 中国农科院生物所研究员王志兴说， 小番茄也叫圣女果、 樱桃番茄， 是自古就有的番茄 品种，只是因为个头小、采摘不便、产量低，最早仅作为观赏用，后来发现食用方便，口味 经过改良后逐渐流行。个头小是天生的基因差异，不是转基因的结果。 中国农科院油料所副研究员吴刚说， 小南瓜和小黄瓜也不是转基因食品， 仅仅是未充分 成熟的南瓜和黄瓜。 如果继续在田间种植， 小南瓜和小黄瓜最终会生长成普通的大南瓜和老 黄瓜。 关于大个儿彩椒， 吴刚表示， 大个儿彩椒含有不同类型的花青素， 表现为更丰富的颜色。 花青素的变异在植物中很常见， 像鲜花同一个品种就有不同颜色， 萝卜也有红萝卜、 绿萝卜、 白萝卜等。 “我国曾经批准过抗病毒甜椒的商业化种植， 但与常规甜椒相比， 转基因甜椒并 没有明显优势，因此被市场自然淘汰。” 3、我国市场转基因食品主要是大豆油和木瓜 中国农业大学食品工程与营养科学院院长罗云波介绍， 目前中国市场上的转基因食品主 要有两种， 一种是转基因食用油，就是我们所说的大豆色拉油，来源主要是从美洲，尤其是 从美国、阿根廷、巴西等国家进口的大豆所生产出来的食用油。 还有一种就是转基因木瓜， 因为木瓜容易得一种农药很难治的病， 用基因的技术能够控 制，转基因木瓜也是我们能够吃到的转基因食品。 除此之外， 我国很少能够见得转基因种类 的食品。 4、吃了转基因大豆豆粕饲料长大的牛羊，其肉制品不是转基因食品 罗云波：这个应该不算，转基因是没有商业化种植。 ”谢 油菜、 棉花和甜菜。这些食品
分辨转基因玉米的方法 可能我们生活中有很多种转基因食品，多食用一些转基因食品可以有效地帮助我们补充体内的各种营养需求，可能很多人对于转基因玉米与非转基因玉米的区别方法还不是很了解，通常转基因玉米通常比非转基因玉米更大，简述一下分辨转基因玉米的方法吧。 转基因大米透明、有光泽，又长又亮，均匀好看，淘米水很清，容易与东北“长粒香”混淆，买的时候一定看清原产地;非转基因大米呈白色，不很齐整，淘米水浑浊。 转基因玉米，颗粒大，有光泽，甜脆，饱满，无虫眼，大小均匀，体形优美，头颗粒尾差不多;非转基因玉米相反。 这是指没有经过加工的粮食，如果是加工过的食品就只能碰运气了。转基因大豆、玉米、大米生产最多、分布最广，因此购买任何大豆、玉米和大米制品都要慎重，哪怕是超市卖的玉米窝头和豆腐，都要敬而远之。用转基因饲料和激素喂养的转基因禽畜，基本都是有腿的毒品了，像那些国际知名的快餐店，基本都是用的这类，尽量少吃或者不吃。坚决不买色拉油、玉米油、豆
油、菜籽油，即使是表明的非转基因大豆油，也不要相信，因为几乎所有超市都大量上市非转基因大豆油，但是这些非转基因大豆是魔法变出来的?目前花生油绝对可靠。 转基因固然可怕，但是还有另外一个很大的致命威胁被人们忽略了，那就是化肥农药，化肥农药的原材料基本上都是剧毒重金属之类，成品之中会有大量的剧毒物残留，之后会随着使用进入土地，进入农作物，进入我们的餐桌。现代的很多疾病其实都是这种剧毒残留物导致的，我们一直在慢性中毒! 以上介绍的分辨转基因玉米的方法可以帮助我们进行很好的分辨，大家都可以尝试一下，多吃一些转基因玉米对于我们自身的身体会产生很多的好处，可以有效地帮助我们提高自身的免疫力和抵抗力，降低出现疾病的几率。
转基因玉米的应用前景 前言: 随着转基因大豆、马铃薯、油菜等许多转基因作物走进人们的生活，转基因玉米也进入人们的视野。玉米是重要的食物、饲料和工业原料，种植面积仅次于小麦和水稻，在世界粮食生产中占有重要的地位。玉米虫害是一个防不胜防的问题,由于虫害的原因,全中国乃至全世界的范围的玉米都在减产。转基因玉米的出现对玉米虫害防止问题有了新的希望。 本文针对转基因玉米基因的研究，转基因玉米对虫害的防止以及转基因玉米的生物安全性等问题进行分析综述。 主题： 一、转基因玉米基因的研究 杀虫蛋白基因Cry1Ab/1Ac的研究 虫害的主要原因是玉米螟,它可以危害玉米的任何部位,致使玉米减产甚至颗粒无收。玉米螟俗名钻心虫,成虫属鳞 翅目螟蛾科( Lepidoptera Pyralididae ) ，为世界性的蛀食 性大害虫，影响玉米产量和品质的重要因素，世界每年因 虫害造成的损失约占农作物产量的15％以上（1）。要解决这 一棘手问题紧靠化学农药的使用不仅不能满足杀虫的目的， 还会给人体和环境带来极大的伤害。而在这种背景下产生的
转基因抗虫玉米则可高效专一控制玉米螟，是防治玉米螟的新途径（1）。常用的方法是从微生物中分离得到目的基因,然后通过转基因技术将目的基因（抗虫基因）导入玉米的细胞(即受体细胞)，再通过筛选得到可以稳定表达形状（即抗虫）的玉米。玉米是最难转化的作物之一，这是因为玉米不是土壤农杆菌的天然寄主，研究初期转化困难；另一方面，由玉米的原生质体悬浮细胞再生可育的植株也比较困难，所以，包括玉米在内的禾本科作物的遗传转化工作进展缓慢。直至1993年Michael成功地用基因枪法将Bt(苏云金芽抱杆菌毒蛋白)基因导入玉米并对转基因玉米植株在田间进行了抗虫试验。 Bt是苏云金芽胞杆菌( Bacillus thuringiensis)的简称，是一种革兰氏阳性土壤芽胞杆菌。该细菌产生的杀虫蛋白能够破坏昆虫肠道内的细胞渗透压，导致昆虫死亡。Bt的一个突出特征就是在芽胞形成过程中，产生由蛋白质组成的且具有杀虫活性的伴胞晶体，人们称这种蛋白质为δ-内毒素(δ-endotoxins)或杀虫晶体蛋白(insecticidal crystal protein，ICP)，而将编码这种蛋白的基因统称为Bt（4）。Bt 基因是第一代抗虫基因的典型代表，它所表达的蛋白统称为Cry晶体蛋白，其中Cry1Ab和Cry1Ac基因对玉米螟等鳞翅目害虫具有专一性毒性（1）。转基因抗虫玉米Bt-176就是具有抗鳞翅目尤其是玉米螟等害虫及耐草铵磷除草剂的特
[转基因玉米的鉴别]转基因玉米的鉴别方法 不知道大家对转基因食品有没有了解呢?今天，小编我向大家介绍介绍转基因玉米，认识转基因玉米对人体的危害，以及让大家懂得如何区分和辨别转基因玉米! 转基因玉米的鉴别如下： 判断转基因食品的几个标准： 1.个头。按照传统，西红柿也有一定个头的，比如：像大拇指头那么一点大的小西红柿绝对是转基因。再比如大豆，也叫黄豆，就是做豆腐，豆浆那种豆子，形状应该像动物内脏：腰的样子，有点扁，可现在的大豆，全是圆圆的、大不少、就像豌豆一样的大豆，产量很高，就是转基因。 2.色彩。与传统的不一样的绝对是转基因，比如彩色棉花、彩色辣椒。 3.产量。转基因作物一般在开始几年，其产量要比传统作物高不少。 4.季节。除了大棚蔬菜外，其它的反季节食品容易是转基因的。 5.害虫。凡是害虫喜欢光顾的作物就是没转基因的，凡是害虫害怕，也就是没有害虫，或很少害虫的作物，就是转基因。 现在的甜玉米品种虽然和几百年前的不完全相同，但它同样不是转基因的产物，而是在自然突变的甜玉米品种的基础之上，通过传统育种技术选育自交系、组配杂交种的办法培育出的新的甜玉米品种。 最近几年，与甜玉米有关的几个基因序列和与其关联的分子标记都已经被找到，育种家还可以依靠分子标记辅助选择技术来加快育种进程。此外，还有利用花药组织培养技术来加快隐性基因的纯合进程的选育方法，也开始受到育种家的重视。
这些育种技术并没有涉及到单个或少数几个结构和功能已知的目的基因的插入，也没有对基因进行修饰、敲除、屏蔽等的改变(这些是我们常说的转基因技术手段)。通过这些方法培育出来的甜玉米都不是转基因玉米。很多人因为甜玉米的甜味不同于普通玉米，就认为甜玉米是转基因技术培育的，这其实是没有想到玉米自己的基因突变也会产生不一样的性状。 转基因玉米的危害： 1.害虫无法被灭杀：转基因食品本身就存在害虫的基因，这些害虫会产生具有更高的防御性，不利于农药的灭杀。 2.影响发育：根据喂养小白鼠转基因食品的实验证明，转基因食品对小白鼠的繁殖和生长发育都带来了严重的影响。 3.营养问题：转基因食品通常存在很多营养问题，科学家们还认为，外来基因会以一种人类还不了解的方式去破坏食物中的营养成分。 感谢您的阅读！
转基因玉米能食用吗？美国人到底吃不吃转基因玉米 美国人到底吃不吃转基因玉米。某科学家说，要弄清这个问题很简单，只需要搞清楚三个问题就行了：第一个问题，美国人种植的转基因玉米占种植总量的比重。相关数据显示，2013年美国转基因玉米种植占总种植率的90%。第二个问题，美国人进口了多少玉米，出口了多少玉米？这个已经无需证明，美国是世界上最大的玉米生产国和出口国。第三个问题，美国人种植的玉米是以什么形式被消费的的？据美国各种报道称，美国人每天直接吃掉的转基因玉米是48克，间接吃掉的是172克。这个48克是以“谷物与谷物制品”形式被消费掉的每日消耗量。包含转基因成分的转基因玉米。172克中因为有“玉米油”这一项，所以不准确，因为转基因玉米油是不含转基因成分的，转基因成分只在蛋白质中有，脂肪中没有。某农业科学家还认为，非转基因的玉米因为有玉米螟虫害。这种虫会钻玉米芯，吃掉玉米芯，导致玉米霉变。发霉的玉米含有黄曲霉素、伏马毒素等致癌，致胎儿畸形的毒素。农药用多了毒人，用少了还是毒人。而转基因抗虫玉米就不用担心这种问题。他还说，说转基因不能食用是没有事实根据的，都是想当然式的说法。蛋白质受热凝固失去生物活性，而且不可逆，因而再怎么样的转基因食品，只要加热煮熟后食
用，会有什么问题呢？综上所述，美国人一直在吃转基因玉米。他赞成研究和推广转基因作物，他说，农业要发展靠的是科学技术，转基因就是将其它作物基因转植到某作物里，以改良它的某种品质，比如我们吃了几十年的转基因大豆油，它是科学家为提高大豆产油率努力的结果，科学技术的进步造福全人类，有人非抱着煤油灯不放，真是可悲。不过，也有人认为，转基因粮食有没有副作用还未知，专利都在西方国家手里，西方国家可以随意添加各种基因杀精绝育癌变这些都是有可能的。一旦全面种植黄种人的命运完全操纵在白种人手中。
中华人民共和国农业行业标准 NY/T720.1~720.3－2003 转基因玉米环境安全检测技术规范 Environmental impact testing of genetically modified maize 2003-12-01发布 2004-03-01实施 中华人民共和国农业部 发 布 NY ICS 65.020.99 B 20
目录 NY/T 720.1-2003 转基因玉米环境安全检测技术规范第1部分：生存竞争能力检测 (1) NY/T 720.2-2003 转基因玉米环境安全检测技术规范第2部分：外源基因流散的生态风险 检测 (5) NY/T 720.3-2003 转基因玉米环境安全检测技术规范第3部分：对生物多样性影响的检测 (9)
中华人民共和国农业行业标准 NY/T 720.1－2003 转基因玉米环境安全检测技术规范 第1部分：生存竞争能力检测 Environmental impact testing of genetically modified maize － Part 1: testing the survival and competitive abilities 2003-12-01发布 2004-03-01实施 中华人民共和国农业部 发 布 NY ICS 65.020.99 B 20
NY/T 720.1－2003 前言 NY/T 720《转基因玉米环境安全检测技术规范》分为以下三个部分： ——第1部分：生存竞争能力检测； ——第2部分：外源基因流散的生态风险检测； ——第3部分：对生物多样性影响的检测。 本部分是NY/T 720的第1部分。 本部分由中华人民共和国农业部提出并归口。 本部分起草单位：中国农业科学院植物保护研究所、农业部科技发展中心。 本部分主要起草人：彭于发、王振营、李宁、杨崇良、董英山、路兴波、付仲文。
转基因玉米MON863品系特异定量PCR方法的建立 摘要:根据转基因玉米MON863外源基因的旁侧序列,设计引物和TaqMan探针,建立了转基因玉米MON863品系特异定量PCR检测方法,并采用该法检测了1%含量的MON863玉米粉末(不确定度为10%)?结果显示,采用构建的方法获得的标准曲线斜率为-3.6~-3.1,相关系数大于0.99,扩增效率为102.2%,在90%~110%内?样品的定量检测结果1.113%接近已知含量1%(不确定度为10%),表明建立的转基因玉米MON863品系特异定量PCR检测方法的灵敏度和准确度高,可以在日常检验中推广应用? 关键词:MON863;zSSⅡb;旁侧序列;定量检测 Establishment of Event-specific Quantitative PCR of Genetically Modified Maize Abstract: Event-specific quantitative PCR detection method of genetically modified maize(Event MON863) was established. PCR primers and Taqman probe were designed according to the flanking sequence of exogenous gene of Event MON863. Sample(CRM) containing 1% of Event MON863 (uncertainty was 10%) was tested. The results showed that the slope of standard curve obtained was in the range of -3.6~-3.1. Correlation coefficient was greater than 0.99; And the amplification efficiency of this method was 90%~110%(averaged at 102.2%). The detection result of sample was 1.113%, closed to the true content(1%). It was proved that the sensitivity and precision of this method was relatively high and could be used to test GMO samples. Key words: event MON863; zSSⅡb; flanking sequence; quantitative detection MON863转基因玉米是美国孟山都公司2003年投放市场的转基因产品,具有防?抗虫害能力?MON863玉米品系是通过DNA重组技术,表达编码一种从苏云金芽孢杆菌中来的抗鞘翅类昆虫的特异杀虫剂蛋白质Cry3Bb1的基因,来控制玉米根蠕虫的横行?Cry3Bb1的基因通过粒子加速转化引入公开可供使用的纯种玉米品系A634?已有的研究成果表明,Cry3Bb1没有与已知蛋白毒素和过敏原有同源序列,该蛋白质不存在潜在的毒性和过敏性[1]?2001年至2004年,美国?日本?加拿大?韩国等国先后批准进口用作食用或饲料?2004年4月,欧盟食品安全局确认MON863安全可靠?2005年8月,欧盟批准将这种转基因玉米用于动物饲料,2006年1月批准其用于人类食品? 2001年6月6日,国务院发布了《农业转基因生物安全管理条例》,2002年1月5日,农业部发布了《农业转基因生物标识管理办法》等3个配套管理办法,明确规定对进入我国流通市场的转基因生物及产品实施标识制度,而对转基因产品的定性或定量检测是贯彻标识制度的重要前提,因此对转基因产品的检测显得十分重要?目前,在我国转基因生物安全检测标准中,只有转基因玉米MON863品系
玉米成分转基因检测知识 转基因玉米就是利用现代分子生物技术，把种属关系十分遥远且有用植物的基因导入需要改良的玉米遗传物质中，并使其后代体现出人们所追求的具有稳定遗传性状的玉米。 转基因食品有很多优点：增加作物产量、降低生产成本；增强作物抗虫害、抗病毒等的能力；提高农产品耐贮性。但转基因食品作为一种新物种，其对人体健康、生态平衡是否具有危害还未确定：可能通过基因漂流影响其他物种；转基因食品可能会引起过敏等等。 比如说水果玉米，就是那种吃起来带甜味的。颗粒大小差不多，金黄色栗粒的，一般路边烧烤的那种玉米。彩色玉米，就是栗粒有紫色白色黄色的哪种，这是最原始的转基因玉米了。 下列是对于其它相关转基因成分物质： ◆大豆◆马铃薯◆木瓜◆青椒 ◆食用菌◆小麦◆烟草 ◆油菜籽◆棉花◆植物性饲料 ◆调味品◆食用油脂◆食品半成品、食品成品 ◆水稻及其产品◆植物及其加工产品 下面我们来看一下实时荧光PCR反应体系： 试剂名称终浓度ЧL/反应 10×PCR反应缓冲液1× 5 MgCl2（25m mol/L） 2.5 m mol/L 5 dATP(10 m mol/L) 200 n mol/L 1 dGTP(10 m mol/L) 200 n mol/L 1 dCTP（10 m mol/L）200 n mol/L 1 dTTP(10 m mol/L) 100 n mol/L 0.5 dUTP(10 m mol/L) 200 n mol/L 1 UNG酶（1 U/чL）0.5U 0.5 上游引物（10чmol/L）200 n mol/L 1
下游引物（10чmol/L）200 n mol/L 1 探针（5 чmol/L）100 n mol/L 1 Taq酶（5U/чL） 2.5U 0.5 DNA模板（40 ng/чL~50ng/чL）- 5 补水至- 50 注：表中DNA模板为原料的模板量，加工产品可视加工程度适当增加模板量；也可根据具体情况或不同的反应总体积进行适当调整。 1×25 TaMan R Universal PCR Master Mix(2×) 上游引物（10 чmol/L）150 nmol/L 0.75 下游引物（10чmol/L）150 n mol/L 0.75 DNA模板（40 ng/Чl~50 ng/чL）- 4.0 探针（5 чmol/L）50 nmol/L 0.50 补水至- 50 注：表中DAN模板为原料的模板量，加工产品可视加工程度适当增加模板量；也可根据具体情况或不同的反应总体积进行适当调整。 实时荧光定量PCR的反应参数为：50℃PCR前去污染2min；预变性95℃15s，60℃1min，45个循环。 待测样品外源基因检测Ct值大于或等于40，内源基因检测Ct值小于或等于24，设置的对照结果正常者，则可判定该样品未检出×××基因； 待测样品外源基因检测Ct值小于或等于36，内源基因检测Ct值小于或等于24，设置的对照结果正常者，则可判定该样品检出×××基因； 待测样品外援基因检测Ct值在36~40之间，应重做实时荧光PCR扩增。再次扩增后的结果Ct值仍小于40，且设置的对照结果正常，则可判定该样品检出×××基因；再次扩增后结果Ct值大于40，且设置的对照结果正常，可判定该样品未检出×××基因。
转基因食品利与弊论文 【—转基因食品利与弊论文】转基因食品利与弊论文的介绍。 转基因食品利与弊论文 关键字：食品目前美国组织基因作物农作物转基因 基因技术①转基因食品概念，产生基理稍有点科学常识的人都知道，基因是控制生物性状的最基本单位，记录着生物生殖繁衍的遗传信息。通过修改基因能改变一个有机体的部分或全部特征。转基因食品就是移动动植物的基因并加以改变，制造出具备新特征的食品种类。譬如利用生物技术将某些动物的基因转移到其它物种上去，
通过改造生物的遗传组织，使其出现原物种原来并不具备的特征，这些转变可以按照人类所需要的目标来完成。举这样的例子来加以说明：人们可以用鲜鱼的基因帮助西红柿、草莓等普通植物来抵御寒冷；把某些细菌的基因接入玉米、大豆的植株中，就可以更好地保护它们不受害虫的侵袭。而以这些转基因生物为原料加工生产的食品就是转基因食品。 ②转基因食品发展状况据联合国粮农组织的材料，1997年全世界转基因作物的播种面积约为1100万公顷，1998年上升到近3000万公顷，1999年底，估计将达4000万公顷，平均增幅超过lO0％。美国是转基因技术采用最多的国家。自20世纪90年代初将基因改制技术实际投入农
业生产领域以来，目前美国农产品的年产量中55％的大豆、45％棉花和40％的玉米已逐步转化为通过基因改制方式生产。目前，大约有20多种转基因农作物的种子已经获准在美国播种，包括玉米、大豆、油菜、土豆、和棉花。据估计，从1999 年到2004年，美国基因工程农产品和食品的市场规模将从40亿美元扩大到200亿美元，到20 19年将达到750亿美元。有专家预计：21世纪初，很可能美国的每一种食品中都含有一定量基因工程的成分。 其它还有阿根廷、加拿大也是转基因农业生产发展迅速的国家。我国的转基因研究也有较大的发展，并且在基因药物、转基因作物、农作物基因图与新品种等方面具有相对比较优势。但真
俄罗斯科学家：转基因玉米滋生植物病毒致2百万美国人死亡！ 译作者：半解一知半解时间：2012年11月23～25日 序：释意---转毒基因。顾名思义，"转毒基因"就是把有毒有害的基因或抗生素基因转入到农作物的种子里，以便让农作物达到抗病、抗虫、抗除草剂等目的。这类转基因已被最新的科研成果和事实证明对环境、动物和人类危害巨大，是一种慢性巨毒品，是典型的食品投毒！而全球转基因作物中，这类转基因占绝大多数，所以，将其称为"转毒基因"或"毒基因"是恰如其分、名副其实的。转毒基因食品化推手们一直在用10年前、20年前甚至更早的最落后的转毒基因错误假说和弥天大谎来否定最近几年有关转毒基因毒害与毒杀的重大事实和科研成果，不择手段、肆无忌惮地欺骗党和政府、全国人民和世界人民，以便掩盖转毒基因全方位危害人类健康、必然导致断子绝孙、亡国灭种的超严重后果以及他们自己和转毒基因利益集团的滔天大罪，所以，说转毒基因食品化推手们是伪科学骗子、食品恐怖分子、刑事犯罪分子和种族灭绝犯罪分子也是恰如其分、名副其实的。 ------------------------------ 俄罗斯报告称：随着神秘死亡加快，已有超过2百万美国人死亡 欧盟时报2010年4月17日 Russia Reports Over 2 Million Dead In US As Mysterious Die-Off Accelerates EU Times on Apr 17th, 2010 今天，由俄罗斯医学科学院为普金总理编写的一个令人不寒而栗的报告正在克里姆林宫传阅，该报告称：自2008年以来，美国一种"神秘死亡"已经夺去了超过2000000人的生命，这很可能与转基因谷物和粮食滋生的一种"跨物种"植物疾病有关。 A most chilling report circulating in the Kremlin today prepared by the Russian Academy of Medical Science for Prime Minister Putin states that a "mysterious die-off" in the United States has claimed over 2,000,000 lives since 2008 and is "more than likely" linked to a "crossover" plant disease linked to genetically modified grains and foods. 报告说，这种造成大规模死亡、尚不明原因的神秘肺部疾病于2008年春天在美国农业大州艾奥华爆发，很讽刺的是，在州长府参加肺协会会议的人中有36人被感染了。 According to these reports this mysterious, and as yet unidentified, lung disease responsible for this mass die-off began during the spring of 2008 in the US agricultural State of Iowa where (very ironically) at least 36 people attending a Lung Association event at the Governors mansion were stricken. 关于艾奥华州重要的一点是，它是世界上最大的玉米产区之一，在近3200万英亩农田上收获20亿蒲式耳这种经济作物，其中99%是美国农业巨头孟山都研发的转基因品种：商标名称分别为Mon 863、产生杀虫剂的Mon 810和吸收农达除草剂的NK 603。 Important to note about Iowa is that it is one of the largest corn producing regions in the World harvesting over 2 billon bushels of this valuable grain farmed on nearly 32 million acres of its farmland, over 99% of which are genetically modified varieties made by the US agricultural giant Monsanto and identified by their trade names of Mon 863, insecticide-producing Mon 810,