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甜茶素对棕榈酸诱导INS—1细胞超微结构及Cyt C易位表达的保护作用
作者：郑华计可为周莲清孟春梅苏志恒
来源：《中国民族民间医药·下半月》2015年第12期
【摘要】目的：探索甜茶素对棕榈酸诱导INS -1细胞损伤的保护机制。方法：MTT法检测正常对照组、棕榈酸模型组、不同浓度甜茶素组细胞存活率，透射电镜观察各组细胞超微结构，免疫电镜观察各组细胞色素C的易位表达。结果：不同浓度甜茶素对棕榈酸诱导的INS -1细胞具有保护作用，超微结构保存较好；模型组细胞凋亡增多且超微结构损伤严重，Cyt C蛋白从线粒体释放人细胞质。结论：甜茶素可以提高棕榈酸诱导INS-1损伤的细胞存活率，抑制细胞凋亡的发生，其机制可能与抑制棕榈酸引起的氧化应激和阻碍Cyt C从线粒体转位入细胞质，激活细胞凋亡蛋白酶级联反应有关。
【关键词】甜茶素；棕榈酸；INS -1细胞；超微结构；细胞色素C
【中图分类号】R285.5
【文献标志码】A
【文章编号】1007-8517（2015）24-0016-04
广西甜茶（Rubus suavissimus S.Lee）为蔷薇科悬钩子属多年生有刺灌木，民间主要用于
糖尿病和肥胖症的治疗，甜茶素是甜茶叶中最具价值的成分。近年有研究报道胰岛素抵抗导致的血脂水平紊乱可使胰岛B细胞处于持续的氧化应激状态，最终可导致胰岛B细胞凋亡。有
研究表明，甜茶素能显著降低高脂饮食模型大鼠血糖水平，但具体作用机制尚未见文献报道。基于此，我们以棕榈酸模拟机体胰岛素抵抗所导致的高血脂产生的内环境改变，并应用透射电镜和免疫电镜技术，观察甜茶素干预大鼠胰岛细胞瘤细胞INS-1后亚细胞超微结构及细胞色素C（Cy-tochrome C，Cyt C）表达的影响，探讨甜茶素抑制脂毒性的作用机制，为开发防治糖
尿病新药提供依据。
1 材料与方法
1.1 细胞株大鼠胰岛细胞瘤INS-l细胞购自中国医学科学院基础医学细胞中心，资源编号
为3111 COOOICCC000378。
1.2 药物与试剂棕榈酸、甜茶素（Sigma公司）；DMEM培养基、胎牛血清（Gibco公司）；兔抗Cyt C多克隆抗体（美国Santa Cruz公司）；羊抗兔IgG胶体金lOnm（武汉博士
德生物试剂有限公司）；LR White树脂（英国RESIN公司）；其余试剂均为分析纯。