粗脂肪测定方法 1、简述：本标准适用于各种单一、混合饲料和预混料中粗脂肪的测定方法。 2、方法原理：索氏脂肪提取器中用乙醚提取试样，称提取物的重量，除脂肪外还有有机酸，磷脂、脂溶性维生素，叶绿素等，因而测定结果称粗脂肪或乙醚提取物。 3、试剂与仪器 2) 无水乙醚（AR） 3) 索氏脂肪提取器（带球形冷凝管）：100或150ml。 4) 索氏脂肪提取仪。 4、使用索氏脂肪提取器测定： 索氏提取器应干燥无水。抽提瓶（内有沸石数粒）在105±2℃烘箱中烘干60min，干燥器中冷却30min，称重，再烘干30min，同样冷却称重，两次重量之差小于0.0008g为恒重。（可直接烘1.5-2h，冷却后将抽提瓶称重编号） 称取试样1-5g，于滤纸筒中，或用滤纸包好，放入105℃烘箱中，烘干120min（或称测水分后的干试样，折算成风干样重），滤纸筒应高于提取器虹吸管的高度，滤纸包长度应以可全部浸泡于乙醚中为准。将滤纸筒或包放入抽提管，在抽提瓶中加无水乙醚60--100ml，在60--75℃的水浴（用蒸馏水）上加热，使乙醚回流，控制乙醚回流次数为每小时约10次，共回流约50次（含油高的试样约70次）
或检查抽提管流出的乙醚挥发后不留下油迹为抽提终点。（将试样在无水乙醚中浸泡三小时，效果更佳） 取出试样，仍用原提取器回收乙醚直到抽提瓶全部收完，取下抽提瓶，在水浴上蒸去残余乙醚，擦净瓶外壁。将抽提瓶放入105+-2℃烘箱中烘干120min，干燥器中冷却30min称重，再烘干30min，同样冷却称重，两次重量之差小于0.001g这恒重。（延长烘干时间至3h，称重一次即可） 5、计算： 粗脂肪（%）= 式中：m--风干试样重量，g m1--已恒重的抽提瓶重量，g； m2--已恒重的盛有脂肪的抽提瓶重量，g. 6、重复性 每个试样取两平行样进行测定，以其算术平均值为结果。 粗脂肪含量在10%以上（含10%）允许相对偏差为3%。 粗脂肪含量在10%以下时，允许相对偏差为5%。 【下载本文档，可以自由复制内容或自由编辑修改内容，更多精彩文章，期待你的好评和关注，我将一如既往为您服务】
实验三食品中粗脂肪含量的测定（索氏抽提法） 一、目的与要求 1、学习索氏抽提法测定脂肪的原理与方法. 2、掌握索氏抽提法基本操作要点及影响因素. 二、原理 利用脂肪能溶于有机溶剂的性质，在索氏提取器中将样品用无水乙醚或石油醚等溶剂反复萃取，提取样品中的脂肪后，蒸去溶剂,所得的物质即为脂肪或称粗脂肪。 三、仪器与试剂 1、仪器 （1）、索氏提取器如图3-3所示 （2）、电热恒温鼓风干燥箱 （3）、干燥器 （4）、恒温水浴箱 2、试剂 （1）无水乙醚（不含过氧化物）或石油醚（沸程30-60°C） （2）滤纸筒 四、测定步骤 1、样品处理 (1)固体样品: 准确称取均匀样品2-5g（精确至0.01mg），装入 滤纸筒内。 (2)液体或半固体: 准确称取均匀样品5-10g（精确至0.01mg）， 置于蒸发皿中,加入海砂约20 g,搅匀后于沸水浴上蒸干,然 后在95-105°C下干燥。研细后全部转入滤纸筒内，用沾有 乙醚的脱脂棉擦净所用器皿，并将棉花也放入滤纸筒内。 2、索氏提取器的清洗 将索氏提取器各部位充分洗涤并用蒸馏水清洗后烘干。脂肪烧瓶在103°C±2°C的烘箱内干燥至恒重（前后两次称量差不超过2mg）。 3、样品测定 (1) 将滤纸筒放入索氏提取器的抽提筒内，连接已干燥至恒重的脂肪烧瓶，由抽提器冷凝管上端加入乙醚或石油醚至瓶内容积的2/3处，通入冷凝水，将底瓶浸没在水浴中加热，用一小团脱脂棉轻轻塞入冷凝管上口。 (2) 抽提温度的控制：水浴温度应控制在使提取液在每6-8min回流一次为宜。 (3) 抽提时间的控制: 抽提时间视试样中粗脂肪含量而定，一般样品提取6-12h，坚果样品提取约16h。提取结束时，用毛玻璃板接取一滴提取液，如无油斑则表明提取完毕。 (4) 提取完毕。取下脂肪烧瓶，回收乙醚或石油醚。待烧瓶内乙醚仅剩下1—2mL时，在水浴上赶尽残留的溶剂，于95—105°C下干燥2h后，置于干燥器中冷却至室温，称量。继续干燥30min后冷却称量，反复干燥至恒重（前后两次称量差不超过2mg）。
脂类的测定 一)食品中的脂类物质和脂肪含量 1)脂肪（真脂） 2)类脂质（脂肪酸、磷脂、糖脂等）油脂的伴随物。 大多数动、植物食品都含有天然脂肪或类脂化合物，但含量各不相同。植物性或动物性油脂中脂肪含量最高，而水果蔬菜脂肪含量很低 二)脂肪在食品加工中的作用： 1、脂肪是食品中重要的营养成分之一。 2、每克脂肪在体内可提供37.62k j(9k c a l)热能，比碳水化合物和蛋白质高一倍以上； 3、脂肪可提供必需脂肪酸，如亚油酸等 4、脂肪是脂溶性维生素的良好溶剂，有助于脂溶性维生素的吸收。 5、脂肪与p r o结合生成的脂蛋白，在调节人体生理机能和完成体内生化反应方面都起着十分重要的作用。 6、在食品加工过程中，原料、半成品、成品的脂类含量对产品的风味、组织结构、品质、外观、口感等都有直接的影响。所以脂肪含量是一项重要的控制指标。 三)脂类的测定 常用测定脂类的有机溶剂（特点、适用范围和注意事项）： 1.乙醚 1)溶解脂肪的能力强，应用最多。2)乙醚沸点低（34.6℃），易燃。3)乙醚可饱和2%的水。含水乙醚在萃取脂肪的同时，会抽提出糖分等非脂成分。4)含乙醇的乙醚能溶解非脂成分,使结果偏高 2.石油醚 吸收水分比乙醚少，允许样品含微量的水分。石油醚具有较高的沸点，它没有胶溶现象，不会夹带胶态的淀粉、蛋白质等物质。石油醚抽出物比较接近真实的脂类。但乙醚、石油醚都只能提取样品中游离态的脂肪。 3.氯仿—甲醇 一种有效的溶剂，对脂蛋白、磷脂提取效率较高。特别适用于水产品、家禽、蛋制品中脂肪的提取。 样品的预处理 1. 固体样品要粉碎，颗粒大小要合适，注意粉碎过程中的温度，防止脂肪氧化。 2.样品要干燥 温度低——酶活力高，脂肪易降解。 温度高——脂肪易氧化成结合态。 较理想的方法是冷冻干燥法。 3. 酸水解或碱处理 对于乙醚不能渗入内部的或含结合态脂肪。 4.加入海砂或无水硫酸钠 二.脂类的测定方法 一)索氏提取法（索克斯列特抽提法） （一）原理：将经前处理的、分散且干燥的样品用乙醚或石油醚等溶剂回流提取，使样品中的脂肪进入溶剂中，回收溶剂后所得到的残留物，即为粗脂肪。粗脂肪——残留物中除游离脂肪外，还含有色素、树脂、蜡状物、挥发油等。 （二）适用范围与特点适用于游离态脂类含量较高，结合态脂类含量少或经水解处理过的（结合态已转变成游离态），样品应能烘干，磨细，不易吸湿结块。 此法经典，对大多数样品的测定结果比较可靠。但费时长（8—16h）溶剂用量大，需要专门的仪器,索氏提取器。
饲料粗脂肪测定方法 Method for the determination of crude fat feedstuffs 1 主题内容与适用范围 本标准规定了饲料粗脂肪的测定方法。 本标准适用于各种单一、混合、配合饲料和预混料。 2 原理 索氏(Soxhlet)脂肪提取器中用乙醚提取试样，称乙醚提取后的重量，重量之差即为脂肪。除脂肪外还有有机酸，磷脂，脂溶性维生素，叶绿素等，因而测定结果称粗脂肪或乙醚提取物。 3 试剂 3.1无水乙醚（分析纯）。 4 仪器设备 4.1实验室用样品粉碎机或研钵。 4.2 分样筛：孔径0.45nm。 4.3分析天平：感量0.0001g。 4.4电热恒温水浴锅：室温～100℃。 4.5 恒温烘箱：50～200℃。 4.6索氏脂肪提取器（带球形冷凝管）：100或150mL。 4.7索氏脂肪提取仪。 4.8滤纸或滤纸筒：中速，脱脂。 4.9干燥器：用氯化钙（干燥级）或变色硅胶干燥剂。 5 试样的制备 选取有代表性的试样，用四分法经试样缩减至500g，粉碎至40目。再用四分法缩减至200g，于密封容器中保存。 6 分析步骤 使用索氏脂肪提取器测定，索氏提取器（4.6）应干燥无水。 称取试样1～5g（准确至0.0002g），于滤纸筒中，或用滤纸包好，放入105℃烘箱（4.5）中，烘干120min。取出放入干燥器中冷却30min称重（m1）。 将滤纸筒或滤纸包放入提取器中，滤纸筒应高于提取器（4.6）虹吸管的高度，滤纸包长度应以全部浸泡于乙醚（3.1）中为准。将滤纸筒或包放入抽提管，在抽提瓶中加无水乙醚（3.1）60～100mL，在60～75℃的水浴（用蒸馏水）上加热，使乙醚（3.1）回流，控制乙醚（3.1）回流次数为每小时约10次，共回流约50次（含油高的试样约70次）或检查抽提管流出的乙醚（3.1）挥发后不留下油迹为抽提终点。 取出试样置干燥洁净的瓷托盘中，放置在通风橱，待多余的乙醚挥发完后放入
血清脂类测定 血浆中的脂类包括胆固醇、胆固醇脂、甘油三酯、磷脂和非酯化脂肪酸等。 目前，对有关脂类代谢疾患的诊断和治疗过程，均必须检测血浆（清）中的脂类，通过其含量的变化，对临床疾患提供协助诊断的依据。有关医学科研工作，脂类的定量检测也是一项必备的研究项目。 1．胆固醇测定 血浆中胆固醇及其酯的含量检测，从方法学上可分为两大类：一类是化学法包括抽提法和直接测定法，这类方法目前仍在沿用；另一类是酶法测定，方法敏感特异快速，并能自动化分析，已常规应用。化学测定法种类多，由于显色反应的特异性不同，其结果有一定的差异。目前公认的参考方法是Abell-Kendall(L-B反应)法。另外，三氯化铁-硫酸反应法（Zak法）具有显色稳定法、操作简便、灵敏度约5倍于L-B反应法，胆固醇酯与游离胆固醇显色程度比较接近等优点，缺点是特异性差，干扰因素比L-B法多，如冰醋酸中含有的乙醛酸，血清样品中的血红蛋白，胆红素以及硫酸的质量等因素均可影响Zak方法的准确性，Zak法更适合于科研使用。酶法测定血清胆固醇的方法已被广泛采用，国产试剂已能满足临床的需要。胆固醇测定用的标准品，按美国国家标准局（NBS）出品纯度达%,是国际公认的参考物，国内李健斋等已纯化制成符合这一要求的胆固醇纯品，已供临床检测血清胆固醇使用。 2．甘油三酯测定 血浆甘油三酯的测定，目前多以化学法和酶法定量。化学法测定甘油三酯是以脂蛋白变性，水解成甘油，并以甘油为计算依据。酶法是以特异酶水解甘油三酯，除去脂肪酸，再测定甘油，方法特异，准确而快速，临床广为应用。目前甘油三酯测定的方法主要以定量甘油为依据，然而血清样品中存在有游离甘油，如何从反应过程中的总甘油中减去游离甘油，多年来一直在研究讨论这一问题。若不减去，其测定值将会高于血清样品中的真值，如果要减去，就必须先测出血清样品中的游离甘油，甘油三酯的测定方法将增加一个繁杂的步骤，实际工作中难以做到。有报道血清样品中的游离甘油实际量是～L，相当于甘油三酯的～L，为此建议，实测的甘油三酯量减去一个校正系数即：甘油三酯（mmol/L）=[×总甘油（mmol/L）]（mmol/L）。 这一校正系数也仅适用于健康人，对临床病人并不一定适用。据报道，血清样品的游离甘油一直是个未知数，无法测准。为此，目前临床测定血清甘油三酯时，基本上未考虑游离甘油，因为其含量很少，暂且忽略不记。甘油三酯测定的参考物，推荐三油酸甘油酯和三软脂酸甘油酯混合物（2：1，W/W），此参考物适用于化学法。在酶法测定中，仍以高纯度的三油酸甘油酯为参考物。 3．磷脂测定 血清磷脂包括卵磷脂、溶血卵磷脂、神经磷脂、脑磷脂和其他少量磷脂。如需要分别检测各种磷脂，可以通过薄层层析法、柱层析法和高压液相色谱法。目前，临床仅测定血清磷脂总量。血清磷脂总量的测定方法有化学方法和酶法两大类。化学法是以磷脂中的磷为定量依据，因为每磷脂分子中都含有一个磷酸根，故将磷脂的磷称为脂性磷。由于血清中磷脂大部分为卵磷脂，其分子量中磷约占4%，故将脂性磷换算成磷脂的系数，一般为25。由于化学法均需要抽提，再测抽提液中的磷脂的磷，血清中的磷酸盐不可能混入抽提液中，因此血清中的磷酸盐对磷脂测定的干扰很少。酶法是利用磷脂酶进行定量测定。生物体中磷脂酶包括磷脂酶A1、A2、C和D四种。磷脂酶D特异性差，均可水解卵磷脂、溶血卵磷脂和神经磷脂，三者约占血清总磷脂的95%，临床多用含磷脂酶d 的试剂进行磷脂的定量测定。 4．游离脂肪酸测定
脂肪的国标检测方法—索氏萃取法 【GB/T 5009.6 —1985】牛奶中脂肪的测定方法 本标准适用于各类食品中脂肪含量的测定。 第一法索氏抽提法 1原理 样品用无水乙醚或石油醚等溶剂抽提后，蒸去溶剂所得的物质，在食品分析上称为脂肪或粗脂肪。因为除脂肪外，还含色素及挥发油、蜡、树脂等物。抽提法所测得的脂肪为游离脂肪。 2试剂 2.1无水乙醚或石油醚。 2.2 海砂：同GB 5009.3 —85《食品中水分的测定方法》2.3。 3仪器 索氏提取器。 4操作方法 4.1样品处理 4.1.1固体样品：精密称取2?5g（可取测定水分后的样品），必要时拌以海砂，全部移入滤纸筒内。 4.1.2液体或半固体样品：称取 5.0?10.0g，置于蒸发皿中，加入海砂约20g于沸水浴上蒸干后，再于95?105C干燥，研细，全部移入滤纸筒内。蒸发皿及附有样品的玻棒，均用沾有乙醚的脱脂棉擦净，并将棉花放入滤纸筒内。 4.2抽提 将滤纸筒放入脂肪抽提器的抽提筒内，连接已干燥至恒量的接受瓶，由抽提器冷凝管上端加入无水乙醚或石油醚至瓶内容积的2/3 处，于水浴上加热，使乙醚或石油醚不断回流提取，一般抽提6?12h。 4.3称量 取下接受瓶，回收乙醚或石油醚，待接受瓶内乙醚剩1 ?2ml 时在水浴上蒸干，再于95?105C干燥2h,放干燥器内冷却0.5h后称量。 4.4 计算
式中：X ——样品中脂肪的含量，%； ml――接受瓶和脂肪的质量，g; m0 -- 接受瓶的质量，g; m2――样品的质量（如是测定水分后的样品，按测定水分前的质量计）,go 第二法酸水解法 5原理 样品经酸水解后用乙醚提取，除去溶剂即得游离及结合脂肪总量。 6试剂 6.1盐酸 6.295%乙醇 6.3乙醚。 6.4石油醚。 7仪器 100ml具塞刻度量筒。 8操作方法 8.1 样品处理 8.1.1固体样品：精密称取约2g,置于50ml大试管内，加8ml水，混匀后再加10ml 盐酸。 8.1.2 液体样品：称取10.0g，置于50ml大试管内，加10ml盐酸。 8.2将试管放入70?80C水浴中，每隔5?10min以玻璃棒搅拌一次，至样品消化完 全为止，约40?50min。 8.3取出试管，加入10ml 乙醇，混合。冷却后将混合物移于100ml 具塞量筒中，以 25ml乙醚分次洗试管，一并倒入量筒中。待乙醚全部倒入量筒后，加塞振摇1min，小心开塞，放出气体，再塞好，静置12min，小心开塞，并用石油醚一乙醚等量混合液冲洗塞及筒口附着的脂肪。静置10?20min，待上部液体清晰，吸出上清液于已恒量的锥形瓶内，再加5ml 乙醚于具塞 量筒内，振摇，静置后，仍将上层乙醚吸出，放入原锥形瓶内。将锥形瓶置水浴上蒸干，置95?105
食品中的脂类主要包括脂肪（甘油三酯）和一些类脂质，如脂肪酸、脂、糖脂和固醇类k食物中的脂类 95％是甘油三酯，5％是其他脂类。人体贮存的脂类中，甘油三酯高达 99％。脂类的共同特点是具有脂溶性，不仅易溶解于有机溶剂，还可溶解其他脂溶性物质如脂溶性维生素等。人类膳食脂肪主要来源于动物的脂肪组织和肉类以及植物的种子。动物脂肪相对饱和脂肪酸和单个不饱和脂肪酸多，而多不饱和脂肪酸含量较少。植物油主要不饱和脂肪酸。 脂肪是食品中重要的营养成分之一。脂肪可为人体提供体内不能产生而是必需的脂肪酸；脂肪是一种富含热能营养素，是人体热能的主要来源，每克脂肪在体内可提39.7kj（9.46kcal）热能，比碳水化合物和蛋白质高一倍以上；脂肪还是脂溶性维生素的良好溶剂，有助于脂溶性维生素的吸收；脂肪与蛋白质结合生成的脂蛋白，在调节人体生理机能和完成体内生化反应方面都起着十分重要的作用。但过量摄人脂肪对人体健康也是有害的。食品中脂肪的存在形式有游离态的，如动物性脂肪及植物性油脂；也有结合态的。，如天然存在的磷脂。糖脂、脂蛋白及某些加工食品（如焙烤食品及麦乳精等）中的脂肪，与蛋白质或碳水化合物等成分形成结合态。对大多数食品来说，游离态脂肪是主要的，结合态脂肪含量较少。在食品加工生产过程中，原料、半成品、成品的脂类含量对产品的风味、组织结构、品质、外观、口感等都有直接的影响。蔬菜本身的脂肪含量较低在生产蔬菜罐头时，添加适量的脂肪可以改善产品的风味，对于面包之类焙烤食品，脂肪含量特别是卵磷脂等成分，对于面包心的柔软度、面包的体积及其结构都有影响。因此，在含脂肪的食品中，其含量都有一定的规定，是食品质量管理中的一项重要指标。测定食品中的脂肪含量，可以用来评价食品的品质，衡量食品的营养价值，而且对实行工艺监督，生产过程的质量管理，研究 食品的储藏方式是否恰当等方面都有重要的意义。 食品的种类不同，其中脂肪的含量及其存在形式就不相同，测定脂肪的方法也就不同。常用的测定脂类的方法有：索氏提取法、酸分解法、罗紫一哥特里法、巴布科克氏法、盖勃氏法和氯仿一甲醇提取法等。过去普遍采用的是索氏提取法，此法至今仍被认为是测定多种食品脂类含量的有代表性的方法，但对于某些样品测定结果往往偏低。酸水解法能对包括结合态脂类在内的全部脂类进行定量n而罗紫一哥特里法主要用于乳及乳制品中脂类的测定。 二、提取剂的选择及样品的预处理 （一）提取法的选择： 天然的脂肪并不是单纯的甘油三酯，而是各种甘油三酯的混合物，它们在不同溶剂中的溶解度因多种因素而变化，这些因素有脂肪酸的不饱和性、脂肪酸的碳链长度、脂肪酸的结构以及甘油三酸酯的分子构型等。显然，不同来源的食品，由于它们结构上的差异，不可能企图采用一种通用的提取剂。脂类不溶于水，易溶于有机溶剂。测定脂类大多采用低沸点的有机溶剂萃取的方法。常用的溶剂直乙醚、石油醚、氯仿一甲醇混合溶剂等。其中乙醚溶解脂肪的能力强，应用最多。但它沸点低（34．6℃），易燃，可含有约 2％的水分，含水乙醚会同时抽出糖分等非脂类成分，所以实用时，必须采用无水乙醚做提取剂，并要求样品无水分。石油醚溶解脂肪的能力比乙醚弱些，但含水 分比乙醚少，没有乙醚易燃，使用时允许样品含有微量水分。这两种溶剂只能直接提取游离的脂肪，对于结合态脂类，必须预先用酸或碱破坏脂类和非脂成分的结合后才能提取。因二者各有特点，故常常混合使用。具体提取这些结合脂类时，要根据各种食品不同情况作具体处理，并无固定不变的程式，因此，只能对基本原理和共同性的规律作简单介绍。一般说来，在提取之前，必须首先破坏脂类与其他非脂成分的结合，不然就无法得到满意的提取效果。
第八章脂类的测定 一、选择题 1．下列不是索氏提取法常用的溶剂为（）。 （1）乙醚（2）石油醚（3）乙醇（4）氯仿－甲醇 2．测定花生仁中脂肪含量的常规分析方法是（）。 （1）索氏提取法（2）酸性乙醚提取法 （3）碱性乙醚提取法（4）巴布科克法 3．用乙醚提取脂肪时，所用的加热方法是（）。 （1）电炉加热（2）水浴加热（3）油浴加热（4）电热套加热 4．用乙醚作提取剂时，（）。 （1）允许样品含少量水（2）样品应干燥 （3）浓稠状样品加海砂（4）应除去过氧化物 5．索氏提取法测定脂肪时，抽提时间是（）。 （1）虹吸20次（2）虹吸产生后2小时 （3）抽提6小时（4）点滴试验 6．索氏提取法是测定样品中（）脂肪含量。 （1）结合态（2）游离态（3）结合态和游离态的总量（4）不确定 7．脂肪测定时，样品包的高度应（）。 （1）高出抽提管，以便于脂肪的抽提 （2）与抽提管高度相同，以便于脂肪的抽提 （3）以虹吸管高度的2/3为宜，以便于脂肪的抽提 8．脂肪测定过程中，所使用的加热温度是（）。 （1）75℃～85℃（2）200℃～300℃（3）550℃～600℃。 二、填空题 1．提取脂肪常用的有机溶剂为、和。 2．索氏提取法适用脂肪含量的测定。 3．脂类主要以和的形式存在。能溶于乙醚、石油醚等有机溶剂的是。 4．测定脂类常用的提取剂有、和。 5．常用的脂类测定方法为、和。 6．索氏提取器由三部分组成即、和。 7．储存后食用油脂品质可通过和指标来鉴定。 三、名词解释 1．粗脂肪 四、简答题 1．简述脂肪在人体生理方面的作用。 2．简要叙述索氏提取法的操作步骤。 3．简要叙述索氏提取法应注意的问题。 4．简述浸提剂选用乙醚的优劣。 5．简述测定油脂中碘价的作用。 6．脂肪测定过程中应该怎样选择提取液？现有的提取液分别具有哪些特点？
脂类的测定习题 一、填空题 1、索氏提取法提取脂肪主要是依据脂肪的特性。用该法检验样品的脂肪含量前一定要对样品进行处理，才能得到较好的结果。 2、用索氏提取法测定脂肪含量时，如果有水或醇存在，会使测定结果偏(高或低或不变），这是因为_ 。 3、罗紫-哥特里法测定乳类脂肪时，需先加入氨水-乙醇溶液的目的是_ 。 4、索氏提取法恒重抽提物时，将抽提物和接受瓶置于100℃干燥2小时后，取出冷却至室温称重为45.2458g，再置于100℃干燥小时后，取出冷却至室温称重为45.2342g，同样进行第三次干燥后称重为45.2387g，则用于计算的恒重值为_ _。 5、索氏提取法使用的提取仪器是_ ___，罗紫－哥特里法使用的抽提仪器是_ __，巴布科克法使用的抽提仪器是__ ___，盖勃法使用的抽提仪器是_ __。 6、索氏提取法测定的是态脂肪。酸水解法测定的是态脂肪含量。 7、检查乙醚中是否有过氧化物的方法是在乙醚中，振摇后水层是否出现。 二、不定项选择题 1、索氏提取法常用的提取溶剂有（） （1）乙醚（2）石油醚（3）乙醇（4）氯仿－甲醇
2、测定花生仁中脂肪含量的常规分析方法是（），测定牛奶中脂肪含量的常规方法是（）。 （1）索氏提取法（2）酸性乙醚提取法 （3）碱性乙醚提取法（4）巴布科克法 3、用乙醚提取脂肪时，所用的加热方法是（）。 （1）电炉加热（2）水浴加热（3）油浴加热（4）电热套加热4、用乙醚作提取剂时，说法错误的是（）。 （1）允许样品含少量水（2）样品应干燥 （3）浓稠状样品加海砂（4）应除去过氧化物 5、索氏提取法测定脂肪时，抽提时间是（）。 （1）虹吸20次（2）虹吸产生后2小时 （3）抽提6小时（4）用滤纸检查抽提完全为止 6、下列哪种试样不适合用酸水解法测脂肪含量（） （1）麦乳精（2）谷物（3）鱼肉（4）奶粉 三、简答题 1.简述索氏提取法测脂肪的原理、适用范围及注意事项。 2.为什么索氏抽提法测得脂肪为粗脂肪？ 3.在脂肪测定中对使用的抽提剂乙醚有何要求？为什么？如何提纯乙醚？ 4.说明脂肪的存在形式、及其与测定方法的关系。 5.脂类测定最常用哪些提取剂？各有什么优缺点？
脂肪酸检测方法 脂肪酸（fatty acid），是指一端含有一个羧基的长的脂肪族碳氢链，是有机物，直链饱和脂肪酸的通式是C(n)H(2n+ 1)COOH，低级的脂肪酸是无色液体，有刺激性气味，高级的脂肪酸是蜡状固体，无可明显嗅到的气味。脂肪酸是最简单的一种脂，它是许多更复杂的脂的组成成分。脂肪酸在有充足氧供给的情况下，可氧化分解为CO2和H2O，释放大量能量，因此脂肪酸是机体主要能量来源之一。 科标检测参照国标及各种文献将脂肪酸衍生化成脂肪酸甲酯，使用十九酸内标，用正己烷提取后稀释后用气相色谱质谱联用仪，外标法结合内标法定量分析。科标检测出具专业脂肪酸检测报告。 检测方法： 1、样品提取 称取适量样品，加入4mL的甲醇/CH2Cl2（1:3）混合溶液，摇匀；恒温在30℃以下超声抽提10min。取出离心管，放于离心机中离心（1800rpm，10min），收集上清液，重复3次；将萃取液在柔和氮气流下吹干。 2、萃取液的皂化 加入3mL 6%KOH的甲醇溶液（配制：6gKOH/甲醇118mL左右），超声10min，放置30min，重复3次，室温放置过夜（瓶盖盖紧）进行碱水解；加入2mL正己烷，超声10min，摇匀，震荡离心，弃除上层正己烷萃取液，重复3次。在上述萃取完剩下的溶液中（水相），加入约1mL 4N的HCl使pH<2，再用2mL正己烷萃取3次。 3、脂肪酸的衍生化 将上述萃取液，转移到带盖玻璃管中，用氮气吹干后，加入约2mL BF3-MeOH，玻璃管上空间冲入氮气后盖盖密闭，于90℃下加热2h；待样品冷却后，加入5%NaCl溶液约1ml，用2ml正己烷萃取3次，并将萃取液转移到2mL进样瓶中，氮气吹干，待分析。 4、色谱条件 色谱柱：Thermo TG-5MS 30m x 0.25mm x 0.25μm 升温程序：80度起始温度，保持1分钟；10度/min升温到200度，5度/min升温到225度，2度/min升温到250度，保持5min。 MS，EI源， 分流模式：不分流
脂类的测定 食品中的脂类主要包括脂肪（甘油三酸脂）和一些类脂质如脂肪酸、磷脂、糖脂、甾醇、固醇等，大多数动物性食品及某些植物性食品（如种子，果实，果仁）都含有天然脂肪或类脂化合物。 各种食品含脂量各不相同，其中植物性或动物性油脂中脂肪含量最高，而水果蔬菜中脂肪含量很低。 几种食物100g中脂肪含量（g）如下：猪肉（肥）90.3，核桃66.6，花生仁39.2，黄豆20.2，青菜0.2，柠檬0.9，苹果3以上，全脂炼乳8以上，全脂乳粉 25~30。 脂类的提取 ①脂类不溶于水，易溶于有机溶剂。测定脂类大多采用低沸点的有机溶剂萃取方法。 常用的溶剂：乙醚、石油醚、氯仿—甲醇混合溶剂等。 乙醚:溶解脂肪的能力强，应用最多。但沸点低(34.60C），易燃，且可含约2%的水分，含水乙醚会同时抽出糖分等非脂成分，所以使用时必须采用无水乙醚作提取剂，且要求样品无水分。 石油醚:溶解脂肪能力比乙醚弱些，但吸收水分比乙醚少，没有乙醚易燃，使用时允许样品含有微量水分. 注:乙醚和石油醚只能直接提取游离的脂肪,对于结合态脂类，必须预先用酸或碱破坏脂类和非脂成分的结合后才能提取。 氯仿—甲醇:是一种有效的溶剂，它对于脂蛋白、磷脂的提取效率较高，特别适用于水产品、家禽、蛋制品等食品脂肪的提取。 用溶剂提取食品中的脂类时，要根据食品种类、性状及所选取的分析方法，在测定之前对样品进行预处理： ?有时需将样品粉碎、切碎、碾磨等； ?有时需将样品烘干；
?有的样品易结块，可加入4-6倍量的海砂； ?有的样品含水量较高，可加入适量无水硫酸钠,使样品成粒状。 ?预处理目的：为了增加样品的表面积，减少样品含水量，使有机溶剂更 有效的提取出脂类。 常用的测定脂类的方法 常用的脂肪测定方法：索氏提取法、酸分解法、罗紫-哥特里法、巴布科克氏法、盖勃氏法和氯仿—甲醇提取法等。 ?索氏提取法是最经典的方法。 ?酸水解法能对包括结合态脂类在内的全部脂类进行定量。 ?罗紫-哥特里法主要用于乳及乳制品中脂类的测定。 索氏提取法 适用范围与特点 适用于脂类含量较高，结合态的脂类含量较少，能烘干磨细，不易吸湿结块的样品的测定。 索氏提取法测得的只是游离态脂肪，而结合态脂肪测不出来。 仪器 ①索氏提取器。 ②电热恒温水浴（50~80℃） ③电热恒温烘箱（80~120℃） 试剂 无水乙醚或石油醚 实验操作 1. 将滤纸裁成8cm×15cm大小，以直径为 2.0cm的大试管为模型，将滤纸紧靠试管壁卷成圆筒型，把底端封口，内放一小片脱脂棉，用白细线扎好定型，在 100~1050C烘箱中烘至恒量（准确至0.0002g）。 2. 样品制备
脂肪的测定方法 第—法索氏抽提法 1原理 样品用无水乙醚或石油醚等溶剂抽提后，蒸去溶剂所得的物质，在食品分析上称为 脂肪或粗脂肪。因为除脂肪外，还含色素及挥发油、蜡、树脂等物。抽提法所测得的脂 肪为游离脂肪。 2 试剂 无水乙醚或石油醚。 海砂:同GB 《食品中水分的测定方法》。 3仪器 索氏提取器。 4操作方法 样品处理 4.1.1固体样品：精密称取2～5g(可取测定水分后的样品)，必要时拌以海砂，全部移入 滤纸筒内。 液体或半固体样品：称取～，置于蒸发皿中，加入海砂约20g于沸水浴上 蒸干后，再于95～105℃干燥，研细，全部移入滤纸筒内。蒸发皿及附有样品的玻棒，均用沾有乙醚的脱脂棉擦净，并将棉花放入滤纸筒内。 抽提 将滤纸筒放入脂肪抽提器的抽提筒内，连接已干燥至恒量的接受瓶，由抽提器冷凝管上端加入无水乙醚或石油醚至瓶内容积的2／3处，于水浴上加热，使乙醚或石油醚不断回流提取，一般抽取6～12h。 称量 取下接受瓶，回收乙醚或石油醚，待接受瓶内乙醚剩1～2mL时在水浴上蒸干，再于，95～105℃干燥2h，放干燥器内冷却后称量。 计算 m1-m0 X = ─────── × 100 m2 式中，X——样品中脂肪的含量，％； m1——接受瓶和脂肪的质量，g; m0——接受瓶的质量，g; m2——样品的质量(如是测定水分后的样品，按测定水分前的质量计)，g。 第二法酸水解法 5原理 样品经酸水解后用乙醚提取，除去溶剂即得游离及结合脂肪总量。 6试剂 盐酸 95%乙醇。 乙醚。 石油醚。 7仪器
100mL具塞刻度量筒。 8操作方法 样品处理 8.1.1固体样品：精密称取约2g，置于50mL大试管内，加8mL水，混匀后再加10mL盐酸。液体样品：称取，置于50mL大试管内，加10mL盐酸。 将试管放入70～80℃水浴中，每隔5～10min以玻璃棒搅拌一次，至样品消化完全为 止，约40～50min。 取出试管，加入10mL乙醇，混合。冷却后将混合物移于100mL具塞量筒中，以25mL乙醚分次洗试管，一并倒入量筒中。待乙醚全部倒入量筒后，加塞振摇1min，小心开塞，放出气体，再塞好，静置12min，小心开塞，并用石油醚-乙醚等量混合液冲洗塞及筒口附着的脂肪。静置10～20min，待上部液体清晰，吸出上清液于已恒量的锥形瓶内，再加5mL 乙 醚于具塞量筒内，振摇，静置后，仍将上层乙醚吸出，放入原锥形瓶内。将锥形瓶置水浴上蒸干，置95～l05℃烘箱中干燥2h，取出放干燥器内冷却后称量。 计算 同 三、巴布科克法（Babcock 法） 巴布科克法是用来测定乳及乳制品的一种方法，测定牛奶前我们首先搞清牛奶的营养成分牛奶的平均成分： 牛乳100%：水分%，总固体%，维生素，免疫体和酶； 总固体%：非脂固体%，乳脂肪%； 非脂固体%：蛋白质%，乳糖%，矿物质等； 蛋白质%：酪蛋白%，白蛋白%，球蛋白% 在成分表中乳脂肪%是需要我们检测。在牛乳中蛋白质比人乳蛋白质高。乳糖含量比人乳少，矿物质中Ca 的含量比人乳多，而Fe的含量比人乳少 牛乳中脂肪含量标准如下 生鲜牛乳： （1）特级≥ % （2）一级≥ % （3）二级≥ % 消毒牛乳≥ % 众所周知牛乳是乳浊液。它的脂类在牛乳中并不是以溶解状态存在，而是以脂肪球呈乳浊液状态存在，在它周围有一层膜，这层膜使脂肪球得以在乳中保持乳浊液的稳定状态，这层膜其中含蛋白质。磷脂等许多物质，通常用浓H2SO4时非脂成分溶解，脂肪球膜就被软化破坏，于是乳浊液就破坏，脂肪即可分离出来，这是公认的标准分析法。 巴布科克法和盖勃氏法这两种方法是有两个科学家研制出来，一个是美国的Babcock在1890年研究出测牛乳的脂肪，后来经过2年，即1892年由英国的盖勃液研究出测牛乳的脂肪。
这两种方法都是用来提取乳制品中的脂肪，此法也叫湿法提取，因为样品不需要事先烘干，脂肪在牛乳中以乳胶体形式存在，要测定脂肪必需要破坏乳胶体脂肪与其它非脂成分分离，分离出来的非脂成分一般用浓H2SO4分解，用容量法定量，操作简便，为许多国家用于乳制品的常规分析。 Babcock法原理 利用硫酸溶解乳中的乳糖浴蛋白质等非脂成分使脂肪球膜破坏，脂肪游离出来，在乳脂瓶中脂肪与脂肪油测定法 液体供试品如因析出硬脂发生浑浊时，应先置50℃的水浴上加热，使完全熔化成澄清液体；加热后如仍显浑浊，可离心沉降或用干燥的保温滤器滤过使澄清；将得到的澄清液体搅匀，趁其尚未凝固，用附有滴管的称量瓶或附有玻勺的称量杯，分别称取下述各项检验所需的供试品。固体供试品应先在不高于其熔点10℃的温度下熔化，离心沉降或滤过，再依法称取。 相对密度的测定照相对密度测定法（附录10）测定。 折光率的测定照折光率测定法（附录24）测定。 熔点的测定照熔点测定法（附录22第二法）测定。 脂肪酸凝点的测定（1）脂肪酸的提取取20％（g／g）氢氧化钾的甘油溶液75g，置800ml烧杯中，加供试品50g，于150℃在不断搅拌下皂化15分钟，放冷至约100℃，加入新煮沸的水500ml，搅匀，缓缓加入硫酸溶液（1→4）50ml，加热至脂肪酸明显分离为一个透明层；趁热将脂肪酸移入另一烧杯中，用新煮沸的水反复洗涤，至洗液加入甲基橙指示液显黄色，趁热将澄清的脂肪酸放入干燥的小烧杯中，加无水乙醇5ml，搅匀，用小火加热至无小气泡逸出，即得。 （2）凝点的测定取按上法制成的干燥脂肪酸，照凝点测定法（通则0613）测定。 酸值的测定酸值系指中和脂肪、脂肪油或其他类似物质1g中含有的游离脂肪酸所需氢氧化钾的重量（mg），但在测定时可采用氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）进行滴定。
除另有规定外，按表中规定的重量，精密称取供试品，置250ml锥形瓶中，加乙醇-乙醚（1∶1）混合液﹝临用前加酚酞指示液 1.0ml，用氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）调至微显粉红色﹞50ml，振摇使完全溶解（如不易溶解，可缓慢加热回流使溶解），用氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）滴定，至粉红色持续30秒钟不褪。以消耗氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）的容积（ml）为A，供试品的重量（g）为W，照下式计算酸值： 供试品的酸值 W 61 . 5 A? = 滴定酸值在10以下的油脂时，可用10ml的半微量滴定管。 皂化值的测定皂化值系指中和并皂化脂肪、脂肪油或其他类似物质1g中含有的游离酸类和酯类所需氢氧化钾的重量（mg）。 取供试品适量[其重量（g）约相当于250/供试品的最大皂化值]，精密称定，置250ml锥形瓶中，精密加入0.5mol/L氢氧化钾乙醇溶液25ml，加热回流30分钟，然后用乙醇10ml冲洗冷凝器的内壁和塞的下部，加酚酞指示液 1.0ml，用盐酸滴定液（0.5mol/L）滴定剩余的氢氧化钾，至溶液的粉红色刚好褪去，加热至沸，如溶液又出现粉红色，再滴定至粉红色刚好褪去；同时做空白试验。以供试品消耗的盐酸滴定液（0.5mol/L）的容积（ml）为A，空白试验消耗的容积（ml）为B，供试品的重量（g）为W，照下式计算皂化值：
脂类的测定 一、判断题。 1、巴布科克法测定牛乳脂肪含量时，需经过两次离心。 2、盖勃法测定牛乳脂肪含量时，所用的异戊醇无需鉴定便可直接使用。 3、巴布科克法测定牛乳脂肪含量时，加热、离心的作用是形成重硫酸酪蛋白钙盐和硫酸钙沉淀。 4、食品中脂肪的测定是采用索氏法，它属于挥发法。 5、酸水解法测定的脂肪量是游离及结合脂肪的总量。 二、选择题。 1、测定牛乳中脂肪含量的基准方法是（） A.盖勃法 B.罗兹－哥特里法 C.巴氏法 D.索氏抽提法 2、以下测定牛乳中脂肪含量的各种方法中，属于质量法的是（） A.盖勃法 B.罗兹－哥特里法 C.巴氏法 D.红外扫描法 3、以下测定脂肪的方法中，不适合牛乳脂肪测定的是（） A.巴氏法 B. 罗兹－哥特里法 C.盖勃法 D.酸水解法 4、用罗兹－哥特里法测定牛乳中的脂肪含量时，加入石油醚的作用是（） A.易于分层 B.分解蛋白质 C.分解糖类 D.增加脂肪极性 5、用罗兹－哥特里法测定牛乳中的脂肪含量时，溶解乳蛋白所用的试剂是（） A.盐酸 B.乙醇 C.乙醚 D.氨水 6、用罗兹－哥特里法测定牛乳中的脂肪含量时，烘干温度为（） A.90～100℃ B.80～90℃ C.100～102℃ D.110℃ 7、巴布科克法测定牛乳中脂肪含量时，加入硫酸的量为（） A.17.5ml B.20ml C.10.0ml D.15.0ml 8、巴布科克法测定牛乳中脂肪含量时，取样量为（） A.17.6ml B.20ml C.10.75ml D.15ml 9、巴布科克法测定牛乳中脂肪含量时，离心速度为（）r/min。 A.2000 B.1500 C.1000 D.500 10、盖勃法测定牛乳脂肪含量时，加入异戊醇的作用是（） A.调节样品比重 B.形成酪蛋白钙盐 C.破坏有机物 D.促进脂肪从水中分离出来 11、盖勃法测定牛乳脂肪含量时，水浴温度是（） A.约65℃ B.约80℃ C.约50℃ D.约100℃ 12、盖勃法测定牛乳脂肪含量时，乳脂计的读数方法是（）
1 目的 熟练掌握索氏法的原理、操作步骤、注意事项。 2 原理样品用无水乙醚或石油萃取后，蒸去溶剂所得的物质，在食品分析上称为脂肪或粗脂肪。因为除脂肪外，还含色素及挥发油、蜡、树脂等脂溶性物质。索氏抽提法所测得的脂肪为游离脂肪。 3 试剂无水乙醚或石油醚海砂：同实验二《食品中水分的测定》 4 仪器 索氏提取器、干燥箱、干燥器、分析天平 5 样品奶粉 6 操作 6.1 样品称量 6.1.1 精密称取经恒重处理后的收集瓶，m 瓶（准至0.0001g） 6.1.2 固体样品 精密称取2~5g样品m样（可取测定水分后的样品），必要时拌以海砂，全部移入滤纸筒内。 6.1.3 液体或半固体样品 精密称取5~10g，至于蒸发皿中，加入海砂约20g （准至土O.OOOIg）于沸水浴上蒸干后，再于95~105C干燥，研细，全部移入滤纸筒内。蒸发皿及附有样品的玻棒，均用沾有乙醚的脱脂棉擦净，并将棉花放入滤纸筒内。 6.2 萃取 将滤纸筒放入脂肪萃取器的样品室内，连接已干燥至恒重的收集瓶，从萃取器冷凝管上端加入无水乙醚或石油醚至瓶内容积的2/3 处，于水浴上加热，使乙醚或石油醚不断回流提取1~1.5h, —般在条件允许的情况下提取6~12h . 6.3 称量 取下收集瓶，回收乙醚或石油醚，待收集瓶内乙醚剩1~2mL时在水浴上蒸干，再于95~1C干燥20min,放干燥器内冷却0.5h后称量m总' 7数据记录
7.1原始数据 7.2可疑值弃留 8计算 m总'- m瓶 x 100 m样 式中：X —样品中脂肪含量，% m瓶一收集瓶的质量，g m样一样品的质量（如果是测定水分后的样品，应按测定水分前的湿润样品质量计），g m总’一收集瓶和脂肪的质量，g m总'- m 瓶114.7979 -114.4616 x 100 = 16.81% x 100 = 2.000 9 结果 样品中脂肪含量为16.81%