实验五霉菌的形态观察、微生物的测微与计数 一．实验目的 1.学习并掌握观察霉菌形态的基本方法，初步了解霉菌的形态特征及鉴别依据。 2.学习使用目镜测微尺和镜台测微尺在显微镜下测定微生物大小的方法。 3.了解血球计数板的构造和使用方法。学习使用血球记数板测定微生物数量的方法。 4.总结并掌握细菌、放线菌和霉菌的鉴别方法。 二、实验原理 1. 霉菌定义及用途 ?霉菌不是真菌分类中的名词，而是丝状真菌的统称。 ?霉菌在自然界中广泛分布，与食品的关系密切，是人类在实践活动中最早利用的一 种微生物，如早期进行的酱和酱油的制作等。 ?霉菌也可以使食品发生腐败变质或产生毒素，影响人体健康甚至危及生命。 2.霉菌特征 ?霉菌可产生分支的菌丝体，分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化 产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。 ?菌丝体（尤其是繁殖菌丝）及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。 ?霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗的多（约3-10um)，常是细菌菌体宽 度的几倍至几十倍。因此，用低倍镜即可观察。 3.霉菌的菌落 ?松：由于霉菌的菌丝较粗较长，菌丝体疏松，因而形成的菌落也比较疏松，呈绒毛 状、棉絮状或蜘蛛网状； ?大：菌落形态较大，一般比细菌和放线菌的菌落大几倍到几十倍，有时会长满整个 培养皿； ?干：外观干燥，不透明； ?挑：菌落与培养基间的连接紧密，不易挑取； ?颜色：由于基内菌丝、气生菌丝、孢子颜色不同，不同的霉菌菌落表面呈现不同的 颜色，菌落正反面、边缘与中心颜色常不一致。 同一种霉菌在不同的培养基上或不同的培养条件下所形成的菌落特征可能有所不同。但同一种霉菌在相同的培养条件下和培养基上所形成的菌落特征相对稳定。菌落特征是霉菌鉴定的重要依据之一。 4、霉菌的菌丝形态 ?构成霉菌营养体的基本单位是菌丝。菌丝的宽度一般为3-10μm，比放线菌菌丝宽 很多倍，其菌可伸长并产生分枝。 许多分枝的菌丝相互交织在一起，称为菌丝体。
sdu 霉菌的培养及形态观察 一、实验目的： 1、学习并掌握霉菌形态观察法—小室培养。 2、初步了解四类霉菌（青霉、毛霉、根霉、黑曲霉）的基本形态特征。 3、学习并掌握马铃薯培养基的配制方法和载玻片培养的基本技术。 4、巩固显微镜操作技术及无菌操作技术。 二、实验原理： 1、霉菌是可产生复杂分枝的菌丝体。霉菌菌丝体由基内菌丝、气生菌丝 和繁殖菌丝组成，其菌丝比细菌粗几倍到几十倍，可以采取直接制片 和透明胶带法观察，也可以采取载玻片培养观察法，通过无菌操作将 薄层培养基琼脂置于载玻片上，接种后盖上盖玻片培养，使菌丝体在 盖玻片和载玻片之间的培养基中生长，将培养物直接置于显微镜下可 观察到霉菌自然生长状态并可连续观察不同发育期的菌体结构特征 变化。 2、霉菌菌丝体（尤其是繁殖菌丝）及孢子的形态特征是识别不同种类霉 菌的重要依据。霉菌与人类的生活息息相关，如：根霉（Rhizopus sp.） 是酿造工作中常用糖化菌；毛霉（Mucor sp.）常出现在药酒中，能糖 化淀粉并能生成少量乙醇，产生蛋白酶。黑曲霉（Aspergillusniger） 是重要的发酵工业菌种，可生产淀粉酶、酸性蛋白酶、纤维素酶等； 青霉（Penicillium sp.）在工业上，它可用于生产柠檬酸，延胡索酸， 葡萄糖酸等有机酸和酶制剂；最著名的抗生素—青霉素就是从青霉的
某些品系中提取出来的。 3、本实验采用载玻片培养观察法，通过无菌操作将薄层培养基琼脂置于 载玻片上，接种后盖上盖玻片培养，使菌丝体在载玻片和盖玻片之间 的营养基中生长，将培养物直接放在显微镜下观察霉菌在自然生长下 的形态特征。 4、放线菌的菌落特征：干燥、不透明，表面呈紧密的丝绒状，上有一层 色彩鲜艳的干粉；菌落与培养基的连接紧密，难以挑取。其孢子的表 面结构、形状及颜色在一定条件下比较稳定，是鉴定菌种的重要依据。 放线菌在自然界分布很广，绝大多数为腐生，少数寄生。 三、实验仪器： 1、菌种：在马铃薯琼脂斜面上培养7天的根霉、毛霉、黑曲霉和青霉。 2、培养基：马铃薯培养基（PDA） 3、仪器和其他用品：载玻片、盖玻片、显微镜、镊子、平皿、接种环、 U型玻璃棒、20%甘油、5mL移液管、马铃薯、蔗糖、琼脂、纱布、 解剖刀 四、操作步骤： 1、马铃薯琼脂薄层平板的制备 （1）将马铃薯去皮，称量约40g，切成小块煮沸半个小时。 （2）用纱布过滤，再加入4g蔗糖及4g琼脂，溶化后补足水至200mL。 （3）将配置好的培养基倒入试管中约100mL，塞紧棉塞，用牛皮纸包好并做上记号。 （4）将上述试管置于高压蒸汽灭菌锅内于121°C中灭菌30min。
霉菌的形态观察实验 一．实验目的 1．掌握配制合成马铃薯培养基（PDA）的一般方法。 2．学习并掌握观察霉菌形态的基本方法。 3．了解并掌握四类霉菌（根霉、毛霉、曲霉、青霉）的基本形态特征。 二．实验原理 1．霉菌 霉菌可产生复什分枝的菌丝体，分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。霉菌菌丝体（尤其是繁殖菌丝）及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多（约 3-10μm ），常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，因此，用低倍显微镜即可观察。 观察霉菌的形态有多种方法，常用的有直接制片观察法、载玻片培养观察法和玻璃培养观察法三种方法，本节课用载玻片培养观察法。 2．载玻片培养法（小培养法） 用无菌操作将培养基琼脂薄层小块（约1cm2）置于载玻片上，接种后盖上盖玻片培养，霉菌即在载玻片和盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长。培养一定时间后，将载玻片上的培养物置于显微镜下观察。这种方法既可以保持霉菌自然生长状态，还便于观察不同发育期的培养物。 三．实验器材 1．菌种：曲霉 ( Aspergillus sp. ) ，青霉（Penicillium sp.），根霉( Rhizopus sp. ) 和毛霉（Mucor sp. ）培养 2-5d 的斜面 培养物。 2. 培养基：马铃薯培养基（PDA） 3. 仪器或其他用具：超净台，无菌吸管，接种环，酒精灯，平皿，载玻片， 盖玻片， U 型玻棒，解剖刀，镊子， 50% 乙醇， 20% 的甘油，滤纸片，以及显微镜等。 四．实验步骤 载玻片培养观察法（小培养法） 1．培养小室的准备及灭菌 在平皿皿底铺一张略小于皿底的圆滤纸片，再放一 U 形玻棒，其上放一块洁净载玻片和两块盖玻片，盖上皿盖、包扎后于 110 ℃ 灭菌 20-30min ，不烘干，备用。 2．琼脂块的制作 取已灭菌的马铃薯培养基（PDA）无菌操作注入两个已灭菌平皿中，使之凝固成薄层。用解剖刀切成 0.5-1cm2的琼脂块，并用镊子将其移 至上述培养小室中的载玻片上（每片放两块 )。 3．接种
生物迷：介绍点我的经验：真菌大多悬浮于液体表面,如果发现有少量真菌污染可用大量PBS或D-HANKS冲洗,加含有双抗的培养基培养观察3天,然后看有没有真菌.我用这种方法救了一瓶非常宝贵的细胞(用GIBCO胎牛血清外加FGF-2培养了一个月的MSC). seaman_wang：如果你霉菌污染，有两种方法，一种是你制备一些小鼠的饲养细胞加入板上，一起培养，让饲养细胞中的巨噬细胞吃到霉菌。第二种，在培养基中加入制菌霉素。 PINX：是真菌污染，可以用两性酶素B试试看，不要用国产的，因为试剂不纯，有较大毒性，GIBCO有商品化的两性酶素，我师妹用过效果不错。 heimukai13：请问:我先配置DMEM,然后过滤,吸3ml检菌三天,若无菌,添加FBS和双抗,过滤后贮存备用.(不知这样对否?因为我是从别的实验室学的,我连续几次配,检菌时都发现培养基表面有一层薄薄的如雪花形状的东西,它在配完培养基第二天下午六七点还看不到,而到九十点就能看到好多,非常迅速,但往后几天却又不怎么长了,培养液一直是清澈的,很纳闷,不知是什么东西,) 若配置DMEM后不检菌,而直接加FBS和双抗,成为全培养基,过滤备用,可以吗? asd1191：双抗要在配DMEM时就要加，然后过滤！过滤后最好在DMEM中加一点血清在培养，这样长菌的话快！过滤前是不加血清的，因为血清是很难过滤的！培养基表面的如雪花形状的东西可能是长菌的，你摇晃一下瓶子，若浑浊了，则很有可能污染了！另外培养基最好不要反复过滤！这样营养成分会丢失的！另外反复过滤的话会偏碱！ heimukai13：哦,原来要先加双抗的!加了双抗,还需要检菌吗,我想一般就生不了细菌了吧!我不加血清都有漂浮物了,会不会是真菌呢,是的话,怎么防止呢?那些雪花状的东东,摇一下,还是在表面荡来荡去,培养液清澈.(见图)我过滤加FBS后的培养液很好过滤的!怎么回事呢? hualey：加双抗也只是防止一般染菌，但像支原体等污染就很难起作用，所以加了双抗之后还是要验菌的。感觉你那东西像染菌，因为1）你没加双抗；2）开始没有，第二天才出现（除非你的培养基pH发生大的变化，一般不可能）。鉴于你每次都出现这种情况，你是否可考虑环境或操作有问题，你也没说具体，所以只能作为建议。小牛血清不好滤是相对的，我滤过小牛血清，只是比不加血清的培养基难滤，有时含血清培养基用久了，我还用滤器滤过呢！ heimukai13：我第一次配时没有发现这种情况,后面三次操作都一样,而且用的都是刚灭过菌的东西,而出现照片上这种东西了,会不会是培养液里的氨基酸什么的析出来了呢,因为这雪花样东西过上几天还是这么多,是菌的话应该长疯了吧!而如果是支原体的话,应该肉眼看不见的了. scp：应该不是氨基酸析出，若是氨基酸析出的话沉淀是在底部的。漂浮在上面会不会是霉菌呀？你有没有用这种培养基养过细胞呀？不妨尝试一下看看有没有污染，如果没有污染的话，大可继续使用。还有。双抗一定要在过滤之前就加上，血清最好也是这样（虽然过滤速度会慢一些）。 heimukai13：应该不是霉菌吧,霉菌是丝丝连连的,绒球球样,长起来好多就悬浮在培养液里了,有一瓶细胞曾经污染过,这个就不一样了!我试试看用它来培养细胞! 朱晶：：双抗一定在要滤之前加，对于DMEM培养基我建议在-20冻存后，如果想用
山东大学实验报告2017年11月6日 ________________________________________ _________________________科目：微生物学实验题目：霉菌的培养及形态观察姓名：丁志康 一、目的要求 1.学习并掌握观察霉菌形态的基本方法。 2.了解四类常见霉菌的基本形态特征。 二、基本原理 霉菌可产生复什分枝的菌丝体，分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。霉菌菌丝体（尤其是繁殖菌丝）及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗的多（约为3-10μm），常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，因此，用低倍镜即可观察。观察霉菌的形态有多种方法，常用的有下列三种： 1. 直接制片观察法：是将培养物置于乳酸石碳酸棉蓝染色液中，制成霉菌制片镜检。用此染色制成的霉菌制片的特点是：细胞不变形；具有防腐作用，不易干燥，能保持较长时间；能防止孢子飞散；染色的蓝色能增强反差。必要时，还可用树胶封固，制成永久标本长期保存。 2．载玻片培养观察法：用无菌操作将培养基琼脂薄层置于载玻片上，接种后盖上盖玻片培养，霉菌就在载玻片和盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长。培养一定时间后，将载玻片上的培养物置显微镜下观察。这种方法既可以保持霉菌自然生长状态，还便于观察不同发育期培养物。 3．玻璃纸培养观察法：玻璃纸是一种透明的半透膜，将灭菌的玻璃纸覆盖在琼脂平板表面，然后将霉菌接种于玻璃纸上，经培养，霉菌在玻璃纸上生长形成菌苔。观察时，揭下玻璃纸，固定在载玻片上直接镜检。这种方法既能保持霉菌的自然生长状态，也便于观察不同生长期的形态特征。
家中哪些地方容易生长霉菌和处理霉菌在我们的生活中无处不在，他比较青睐于温暖潮湿的环境，一有合适的环境就会 大量的繁殖。而在我国南方地区，夏季气温高，相对湿度大，持续时间长。最热月平均相对湿度为78%～83%，属典型的高温高湿区域，墙体易吸收空气中水分；北方地区冬季严寒漫长，墙体冷桥导致的结霜结露很普遍，墙体积水严重，墙体受潮、积水后极易产生墙体霉菌，我国广大南方高湿和北方严寒地区的墙体霉菌滋生现象非常普遍，对人们的身体健康和财产造成严重危害。 霉菌喜欢生长在潮湿的地方。在地板、浴帘、浴室或地下室墙面或浴室用品、空调滤网、室内长久搁置的食物或水果皮上，没晒干的衣服上且碰上梅雨天气，书籍、皮质品等均有可能受霉菌侵蚀，当你看见白色、黑色或绿色斑点时，说明这些地方有霉菌生长了。这些霉菌都是常见生长地方，而且只多不少。 霉菌一般是随着湿气而来的，只要保证室内不过于潮湿就能很好的预防霉菌的发生，而霉菌怕光、怕氧、怕冷、怕燥，我们可针对霉菌的特点来制定真正的祛霉： 1、在衣橱、鞋柜、书柜、洗手间放一些防虫防霉制品，例如樟脑丸，活性炭等。 因为不仅仅衣物会受到侵害，书籍、皮质品等均有可能受霉菌、蛀虫腐蚀，只在衣橱里放是不够的，配合吸湿器使用。因为潮湿的环境容易滋生霉菌和蛀虫，所以应配合使用吸湿器，吸走湿气，发挥更大的防霉、防虫效果。在炎热的天气多通空气，让干燥的空气进入室内。 2、在霉雨的天气尽可能的不要打开窗户，空气中的湿气会进入室内，附着在一些 家具用品、阴暗角落中，等待着生长。 3、室内的干燥和环境要进口能的调节好，在一些环境潮湿的点，一定要保持室内 的长时间的干燥，在环境干燥的地方可以适当的用加湿器。 4、有时间可以让家中进行太阳光的直接暴晒。特别是在夏天，很多人喜欢晒被子，也可以晒晒家具，书籍等在允许范围内的放在室外进行暴晒，太阳光中的紫外线有很强的杀菌功能也是天然的、最有效的杀菌方法。 5、家中的报纸是个宝。不仅具有阅读功能，还可以吸湿防霉。在橱柜底部铺上报纸，甚至在橱门内侧贴上报纸也行。报纸能吸湿防霉、油墨味道，还能驱虫。 6、墙体发霉不严重或者小部分有霉菌，这可能是梅雨天造成的，或者是经常潮湿 不干燥的地方，可以进行简单的处理就行，，如果大面积发霉就是墙体漏水或涂料的防 霉防水功能不够好要重新进行涂刷。 7、在环境潮湿的住所或霉雨天气是可以用生石灰、黑木炭、竹炭放在房间较为潮 湿的地方，生石灰遇水会发生化学反应，发热让温度升高，但是家中有小孩的不要用，避免烧伤，而木炭、竹炭有很多气孔可以很好的吸附湿气。 8、家中的食物特别实在夏天时候，最容易发生变质发霉，霉菌在5℃以下就不能 繁殖，可以放在冰箱进行冷藏，可以有效的防霉，也可减少对食物的浪费。 注意：因为霉变的细菌在繁殖到一定程度上会对身体造成一定的危害，如果经呼吸 道吸入和摄食被霉菌污染的食物,容易引起急性或者慢性中毒，大家在家里一定要时时刻刻防止霉菌的产生，无论是家具还是衣物被褥、或者是长时间需要储存的物件记得要经常拿出来晒晒太阳杀杀菌，为了家人的健康，多多动手。
霉菌的形态观察 一、【实验目的】 1、学习并掌握观察霉菌形态的基本方法 2、了解四类常见霉菌（曲霉、毛霉、青霉、根霉）的基本形态特征 二、【实验原理】 1、霉菌 霉菌可产生复什分枝的菌丝体，分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。霉菌菌丝体（尤其是繁殖菌丝）及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多（约 3~10μm ），常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，因此，用低倍显微镜即可观察。 2、观察方法 观察霉菌的形态有多种方法，常用的有直接制片观察法、载玻片培养观察法和玻璃培养观察法三种方法，本次实验采用载玻片培养观察法（小室培养法）。 3、载玻片培养观察法（小室培养法） 用无菌操作将培养基琼脂薄层置于载玻片上，接种后盖上盖玻片培养，霉菌即在载玻片和盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长。培养一定时间后，将载玻片上的培养物置于显微镜下观察。这种方法既可以保持霉菌自然生长状态，还便于观察不同发育期的培养物。 三、【实验器材】 1、菌种：曲霉 ( Aspergillus sp. ) ，青霉，根霉 ( Rhizopus sp. ) ，毛霉（ Mucor sp. ），培养 7d 的马铃薯琼脂平板培养物 2、培养基：马铃薯培养基（简称PDA）（配方见附表） 3、仪器或其他用具：平皿，载玻片，盖玻片，无菌吸管，U 型玻棒，解剖刀，镊子， 50%乙醇，20%甘油，显微镜，接种环，酒精灯等 四、【操作步骤】 1、载玻片培养观察法（小室培养法） （1）、培养小室的灭菌：在平皿皿底铺一张略小于皿底的圆滤纸片，再放一Ｕ形 玻棒，其上放一洁净载玻片和两块盖玻片，盖上皿盖，包 扎后于110℃灭菌20~30分钟，烘干备用。 （2）、琼脂薄片的制作：取已灭菌的马铃薯琼脂培养基各6~7ml 注入另两个灭菌 平皿中，使之凝固成薄层。通过无菌操作，用解剖刀将其 切成 1cmx1cm的琼脂块，并将其移至上述培养室中的载玻 片上（每片放两块 )。 （3）、接种：通过无菌操作，用接种环从斜面培养物上挑取很少量的孢子，接种
题目如何控制食物的霉菌生长 作者姓名：张文涛 全安平 制作单位：平昌界牌小学
摘要：日常生活中，人类的许多食物在经历一段时间的搁置后容易变质，发霉，甚至腐烂。那么，到底是什么原因引起食物的以上变化，我们做了以下的一些对比试验来一探究竟。 关键词：食物霉菌控制生长对比实验
如何控制食物的霉菌生长 一、问题的提出 一些食物十分容易发霉，像面包、蛋糕、月饼、桔子等。食物在发霉后，就有很多细菌，不能吃了，得扔掉，非常可惜。如果我们有办法让霉菌不生长，或霉菌生长的速度慢一点，买过来的食物一时吃不了，就可以过几天吃。那我们该如何抑制这些食物霉菌的生长呢？我对此进行了研究。 月饼发霉桔子发霉 二、实验的准备 1、到超市买了两袋无馅面包。 2、准备了塑料袋、水、胶布、牙签、滴管、白纸等实验工具。 3、拍摄工具：数码照像机。 三、实验的过程 实验一：与储藏地方有关的实验 我把四块面包分别用滴管滴上水放在干净的白纸上，然后放在桌子、冰箱、卫生间、阳台四个地方，观察他们的发霉情况。
第一天情况第二天情况 第三天情况
实验一的情况分析：通过以上实验，我发现冰箱里的面包三天了都没有发霉，桌子上、卫生间和阳台上的面包都有不同程度的发霉。我猜测，面包上的霉菌生长可能和水分、温度、阳光、空气有关。于是我又进行了一系列的实验： 实验二：与水有关的实验 我用牙签划一些已经发霉面包上的霉菌在一小 块新的面包里，再用滴管滴上十滴水，放入塑料袋， 用胶布密封，然后放在桌子上。另一块也一样，但 它不滴水，也把它放在桌子上，一起观察。
第一天情况第二天情况 第三天情况： 实验二的情况分析：滴了水的面包三天后有很大一部分发霉，没滴水的面包三天后只有一点点发霉，看起来食物霉菌生长与水分有关，潮湿的食物霉菌生长的快。 实验三：与温度有关的实验 接着，我做了关于温度的实验。我分别用牙签划一些霉菌嵌在两块面包里，再分别在两块面包上用滴管滴十滴水放入塑料袋，都用胶布密封，一个放在桌子上，一个放在冰箱里。
霉菌试验 ?一、概述 ?二、霉菌的试验方法 ?三、防霉措施 ?四、有关标准 概述 ?霉菌的危害 ?霉菌试验的定义 ?霉菌试验的目的 霉菌对材料和产品的影响 ?直接危害是霉菌生长食取材料中的有机成分，直接导致结构破坏、强度降低、物理性质变化等。间接危害是霉菌分泌的新代排泄物有机酸和其他离子化合物，造成电解或老化效应，某些触媒剂，还促成氧化或分解作用的发生，间接导致材料及部件的损坏。长霉造成的故障模式： ---引起电子或电气设备失灵 ---减低绝缘材料的电性能 ---造成燃油系统的腐蚀和堵塞 ---破坏密封 ---使金属件腐蚀 ---使玻璃产生蚀刻 低压与霉菌 这两个因素的组合不会增大二者本身的影响太阳辐射与霉菌因为太阳辐射产生热，所以这个组合不可能产生影响，和高温与霉菌的组合相同。此外未经过滤的太阳辐射中的紫外线具有显著的杀菌作用盐雾与霉菌这是一个相容的组合湿度与霉菌湿度有助于霉菌和微生物的生长，但不会增大它们的影响高温与霉菌霉菌和微生物的生长，需要比较高的温度，但是，在71℃（160 ℉）以上，霉菌和微生物就不能生长了 低温与霉菌 低温影响霉菌的生长。在零度以下，霉菌保持在假死状态 霉菌试验的定义 ?霉菌试验是气候环境试验的一个项目。用于考核产品或材料抵抗霉菌侵袭的能力。它于一般环境试验一样，考虑产品在实际运输、储存或使用中，最易遭受霉菌危害的环境条件，在试验室中用人工模拟创造霉菌生长最适宜环境进行试验。 霉菌试验的目的 ?为确定产品抗霉菌侵蚀能力，必须制定一个与实际工作条件相似，能判断霉菌的侵蚀作用和给出正确评价的试验方法。它将为产品的选材、结构和设计提供依据以保证产品能在有大量霉菌存在的气候环境中安全可靠地运行
实验四酵母菌和霉菌的形态观察 一、目的要求 1、观察酵母菌、老菌的个全形态以及它们之间的区别。 2、学会用水浸法观察酵母菌和霉菌的技术。 3、了解酵母菌和霉菌细胞的构造和繁殖方式的特点。 二、实验材料 1、接种针、接种杯、酒精杯、载玻片、盖玻片、吸管。 2、0.1%美蓝液、乳酸-石炭酸液（配方见附录）。 3、菌种啤酒酵母、假丝酵母、黑根霉、毛霉、青霉、木霉、曲霉。 三、方法步骤 （一）酵母菌的形态观察 酵终菌是单细胞真核核微生物，细胞核和细胞质有明显分化，个体比细菌大得多，有的能形成假菌丝。繁殖方式较复杂，无性繁殖以出芽生殖为主，有性繁殖是通过接合产生子囊孢子。 1、酵母菌的形态与出芽生殖的观察在载片上滴一滴蒸馏水，以无菌操作，用接种环挑取少许啤酒酵母置于载片上蒸馏水中，取一块盖片，小心地将盖玻片一端与菌液接触，然后缓慢地将盖玻片放下；这样可避免产生气泡。先用低倍镜观察，再用高倍镜观察酵母细胞的形状、大小、构造、内含物及出芽方式。 2、子囊孢子的观察将啤酒酵母接种于麦芽汁液体培养中，于28-30℃培养24小时，连续传代3-4次，最后转接到培养子囊孢子的培养基上（也可用肉法蛋白胨培养基）。25-28℃培养3天左右，涂片
染色（按芽孢染色法）观察子囊孢子开关和特点，并注意每一个子囊内的孢子数等。 3、假丝酵母观察用划线法将假丝酵母接种在麦芽汁平板上。在划线部分加盖玻于25-30℃培养3天先观察菌落边缘，再取下盖玻片，在显微镜下观察呈树枝状分枝的假菌丝细胞的形状，或将皿盖打开，直接将培养皿放在载物台上，在低倍镜下观察。 4、酵母菌菌落观察取啤酒酵母、假丝酵母、园酵母以三点点植法接种于麦芽汁平板上，于28-30℃坟3天。观察菌落表面、高度、边缘、质地和颜色等。 5、酵母菌死活的检查在载片上加一滴0.1%美蓝，把酵母培养液滴加在美蓝液上，加盖玻片观察，死细胞为兰色，活细胞无色。 （二）霉菌形态观察 霉菌形态比细菌、酵母菌复杂，个体比较大，具有分枝的菌丝体和分化的繁殖器官。在观察时要注意细胞的大小，菌丝构造和繁殖方式。菌丝体有无隔膜，营养菌丝有无假根，无性孢子是怎样着生在孢子梗上及有性孢子如何生成。 由于霉菌菌丝较粗大，孢子很容易飞出，如果放在水中观察时容易收缩变形，所以在制标本时不用水，而用乳酸-石炭酸溶液，使细胞不致变形，并有杀菌作用。 1、取培养有青老、木霉、毛霉、曲霉的平皿，挑取一团菌丝，置于滴有一滴乳酸-石炭酸液的载片上，加盖玻片，由于霉菌是由菌丝组成的，许多菌丝交错在一起形成菌丝体。在高倍镜下观察菌丝分隔情况，分成孢子着生情况（要求辨认分生孢子子梗、顶囊、小梗及
一、针对于外部环境霉菌易产生地方和原因 1．生产车间墙壁潮湿，在潮湿部位容易生长霉菌。 2．车间存在冷凝水的管路、墙壁等容易生长霉菌，水管的破裂，也会导致霉菌的产生。 3．空气中总是包含一定水蒸气，只不过大部分情况下我们看不到，不过，当水蒸气液化的时候，比如当我们沐浴或是泡澡的时候，浴室内镜子的表面就会变得潮湿，这时候我们就能够看到他们。热空气中包含很多的水分，当热空气冷却时，水分就会冷凝、液化。冷凝、液化通常是发生在房屋中温度最低的部位，比如墙壁上温度低的部位，正是在这些温度低的部位，最容易产生霉菌。 4．车间里无法保证正常的换气，无法让车间保证在规定湿度情况下，容易生长霉菌。 5．车间忽冷忽热，容易产生冷凝水的地方，容易糟到霉菌侵害。 6．离墙近的设备容易产生冷凝水，容易产生霉菌。 GAGGAGAGGAFFFFAFAF
7．温度相对较低的车间的门，请一直保持关闭状态。如果这些温度较低车间的门没有关闭的话，那么旁边车间传过来的热空气涌进行，就形成很高的湿度，从而在空气冷却的时候形成液化，容易生长霉菌。 8．保证空调的正常运转，保证车间内部空气能够达到要求指标，空调的换气程度好坏直接影响到霉菌的产生。如果车间能保证及时将含有大量水份的空气排出车间，则极大程度缩小了可能存在霉菌的可能性。 二、霉菌一旦进入食品， 影响霉菌生长繁殖及产毒的因素是很多的，与食品关系密切的有水份、温度、基质、通风等条件，为此，控制这些条件，可以对食品中霉菌分布及产毒造成很大的影响。 1．水份 霉菌生长繁殖主要的条件之一是必须保持一定的水份，一般来说，米麦类水份在14%以下，大豆类在11%以下，干菜和干果品在30%以下，微生物是较难生长的。食品中真正 GAGGAGAGGAFFFFAFAF
实验五霉菌形态及菌落特征的观察 一、目的要求 1.掌握观察霉菌形态的基本方法，并观察其形态特征。 2.掌握常用的霉菌制片方法 二、基本原理 霉菌菌丝较粗大，细胞易收缩变形，而且孢子很容易飞散，所以制标本时常用乳酸石炭酸棉蓝染色液。此染色液制成的霉菌标本片其特点是：(a)细胞不变形；(b)具有杀菌防腐作用，且不易干燥，能保持较长时间；(c)溶液本身呈蓝色，有一定染色效果。 霉菌自然生长状态下的形态，常用载玻片观察，此法是接种霉菌孢子于载玻片上的适宜培养基上，培养后用显微镜观察。此外，为了得到清晰、完整、保持自然状态的霉菌形态还可利用玻璃纸透析培养法进行观察。此法是利用玻璃纸的半透膜特性及透光性，将霉菌生长在覆盖于琼脂培养基表面的玻璃纸上，然后将长菌的玻璃纸剪取一小片，贴放在载玻片上用显微镜观察。 三、器材 曲霉（Aspergillussp．），青霉（Penicillium sp．），根霉（Rhizopus sp．），毛霉（Mucor sp．）； 乳酸石炭酸棉蓝染色液，20％甘油，查氏培养基平板，马铃薯培养基；无菌吸管，载玻片，盖玻片，U形棒，解剖刀，玻璃纸，滤纸等。 四、操作步骤 1．一般观察法 于洁净载玻片上，滴一滴乳酸石炭酸棉蓝染色液，用解剖针从霉菌菌落的边缘处取小量带有孢子的菌丝置染色液中，再细心地将菌丝挑散开，然后小心地盖上盖玻片，注意不要产生气泡。置显微镜下先用低倍镜观察，必要时再换高倍镜。 2．载玻片观察法 (1)将略小于培养皿底内径的滤纸放入皿内，再放上U形玻棒，其上放一洁净的载玻片，然后将二个盖玻片分别斜立在载玻片的两端，盖上皿盖，把数套（根据需要而定）如此装置的培养皿叠起，包扎好，用1．05kg/cm2，121．3℃灭菌20分钟或干热灭菌，备用。 (2)将6—7ml灭菌的马铃薯葡萄糖培养基倒入直径为9cm的灭菌平皿中，待凝固后，用无菌解剖刀切成0．5—1cm2的琼脂块，用刀尖铲起琼脂块放在已灭菌的培养皿内的载玻片上，每片上放置2块。 (3)用灭菌的尖细接种针或装有柄的缝衣针，取（肉眼方能看见的）一点霉菌孢子，轻轻点在琼脂块的边缘上，用无菌镊子夹着立在载玻片旁的盖玻片盖在琼脂块上，再盖上皿盖。
糕点、面包等为消费者最为喜欢的产品，常用原料为面粉、马铃薯淀粉、蜂蜜、鸡蛋、奶粉、米糊粉、木薯粉、糖粉、膨松剂等为原料，经过面团调制、成型、焙烤、包装而成的一种半球形烘焙类等食品。目前，糕点、面包等等烘焙类食 品的微生物卫生安全性问题已是产品销售的主要问题之一，国家标准菌落总数 小于1500cfu/g，产品水份控制在3%以下。其工艺流程如下：原料验收→筛分 →配料→面团调制→压面切割成型→焙烤→冷却包装 在糕点、烘焙食品的加工过程中“微污染源”很多，如何防止糕点、烘焙食品 的被污染乃是一重要课题。霉菌作为为微污染源中的一种，如果不加以控制势 必会影响到糕点、烘焙食品的质保期的长短，那又如何控制霉菌超标呢？ 杀菌消毒专家周立法先生认为：控制霉菌污染，首先要了解霉菌的生长环境、 污染食品的条件。在此基础上，方可以提出合理的防控措施，提高糕点、烘焙 食品的卫生质量。 一、霉菌的生长环境 1、生产车间的墙壁，比较潮湿部位容易生长霉菌。 2、加工设备存在冷凝水的管路、机壳等容易生长霉菌， 3、空气中所包含的水蒸气，在冷凝、液化时最容易产生霉菌，如车间中温度最低的部位，含天花板、地面、设备表面、墙面等温度低的部位， 4、车间内无法保证正常换气，无法让车间湿度保持在55%情况下时，容易生长 霉菌。 5、车间忽冷忽热，容易产生冷凝水的地方，容易遭到霉菌侵害。 6、离墙近的设备、制冷风机容易产生冷凝水，容易产生霉菌。 7、温度相对较低的车间速冻库门，请一直保持关闭状态。如果这些温度较低车间的门没有关闭的话，那么旁边车间传过来的热空气涌进行，就形成很高的湿度，从而在空气冷却的时候形成液化，容易生长霉菌。 8、车间的空调系统、净化管道系统等，其自身容易产生霉菌。 二、霉菌的生长习性
霉菌生长的环境要求及对食品的影响 一、针对于外部环境霉菌易产生地方和原因?1、生产车间墙壁潮湿，在潮湿部位容 易生长霉菌。 2、车间存在冷凝水的管路、墙壁等容易生长霉菌，? 3、空气中总是包含一定水蒸 气，冷凝、液化通常是发生在车间中温度最低的部位,比如墙壁上温度低的部位，这是在这些温度低的部位,最容易产生霉菌。?4、车间里无法保证正常的换气,无法让车间保证在规定湿度情况下,容易生长霉菌。 5、车间忽冷忽热,容易产生冷凝水的地方，容易遭到霉菌侵害。? 6、离墙近的设备、 制冷风机容易产生冷凝水，容易产生霉菌。?7、温度相对较低的车间速冻库门，请一直保持关闭状态。如果这些温度较低车间的门没有关闭的话,那么旁边车间传过来的热空气涌进行，就形成很高的湿度,从而在空气冷却的时候形成液化，容易生长霉菌。 8、保证车间风机的正常运转,保证车间内部空气能够达到要求指标,空调的换气程 度好坏直接影响到霉菌的产生。如果车间能保证及时将含有大量水份的空气排出车间,则极大程度缩小了可能存在霉菌的可能性。?二、霉菌污染产品的条件 影响霉菌生长繁殖及产毒的因素是很多的，与食品关系密切的有水份、温度、基质、通风等条件，为此，控制这些条件，可以对食品中霉菌分布及产毒造成很大的影响。１、水份?霉菌生长繁殖主要的条件之一是必须保持一定的水份,所以保持车间相对干燥很重要。禁止水管冲地。?2、温度 温度对霉菌的繁殖及产毒均有重要的影响,不同种类的霉菌其最适温度是不一样的，大多数霉菌繁殖最适宜的温度为２5-30℃,在0℃以下或30℃以上,不能产毒或产毒力减弱。如黄曲霉的最低繁殖温度范围是6-８℃,最高繁殖温度是４4-46℃，最适生长温度37℃左右。但产毒温度则不一样,略低于生长最适温度,如黄曲霉的最适产毒温度为28-32℃。？ ３、食品基质 与其它微生物生长繁殖的条件一样,不同的食品基质霉菌生长的情况是不同的，一般而言,营养丰富的食品其霉菌生长的可能性就大,天然基质比人工培养基产毒为好。实验证实，同一霉菌菌株在同样培养条件下，以富于糖类的小麦、米为基质比油料为基质的黄曲霉毒素产毒量高。另外,缓慢通风较快速风干霉菌容易繁殖产毒。 4、霉菌种类?
霉菌 一、霉菌的相关知识：[ méijùn ] mould 霉菌其实并不是一个生物分类学的名称，而是一些丝状真菌的通称，可能属于真菌，也有可能属于放线菌门。霉菌的菌丝呈长管、分枝状，无横隔壁，具多个细胞核，并会聚成菌丝体。霉菌常用孢子的颜色来称呼，如黑霉菌、红霉菌或青霉菌。 霉菌是丝状真菌的俗称，意即“发霉的真菌”，它们往往能形成分枝繁茂的菌丝体，但又不象蘑菇那样产生大型的子实体。在潮湿温暖的地方，很多物品上长出一些。肉眼可见的绒毛状、絮状或蛛网状的菌落，那就是霉菌。 霉菌有着极强的繁殖能力，而且繁殖方式也是多种多样的。 霉菌的预防 霉菌在我们的生活中无处不在，他比较青睐于温暖潮湿的环境，一有合适的环境就会大量的繁殖，必须采取措施来阻止霉菌的繁殖或切断其传播途径，就可以摆脱霉菌的感染：1．注意身体某部位霉菌的滋生，比如指甲，有时霉菌会侵入指甲造成灰指甲，所以指甲不要留长，经常清理。多汗的皮肤褶皱里，特别是胖人皮肤褶皱比较多，如果是夏季出汗多，有可能在褶皱处滋生霉菌。还有就是脚部也是霉菌滋生的有利环境，有脚气的人就更应该注意，防止引起其他部位感染。 2．自己的内裤要单独洗，特别是家人或自己有足癣或灰指甲时更应该注意，为了防止交叉感染都应该分开来洗。 3．不要滥用抗生素，大量吃抗生素可能会将有益人体健康的菌群给抑制住，破坏人体的天然防御屏障，造成霉菌的的大量繁殖。 4．警惕洗衣机中隐藏霉菌，洗衣机用的久了肯定会滋生霉菌，最简单的方法就是用60度左右的水来彻底清洗就行了。同时洗完的衣物一定要在太阳下晾晒，阳光中的紫外线可以
杀死残存的霉菌。 5．在公共场所最好不要用公用的或者别人用过的洗具。同时选用适宜的个人清洁护理产品。 6．正确的避孕，避孕药中的雌激素有促进霉菌侵袭的作用。如果反复发生霉菌性阴道炎，就尽量不要使用药物避孕。 7．如果患有霉菌性阴道炎，自己治疗的同时，男方也应同时接受治疗，避免交叉感染。 9．穿着全棉内裤。紧身化纤内裤会使阴道局部的温度及湿度增高，这可是霉菌拍手称快的“居住”环境！还是选用棉质的内裤吧! 10．控制血糖，碱性产品清洗外阴.女性糖尿病人阴道糖原含量和酸度偏高，易于被霉菌侵害。所以，在控制血糖的同时，还要注意清洗外阴，选用pH值弱碱性产品。 霉菌试验就是检测产品抗霉菌的能力和在有利于霉菌生长的条件下（即高湿温暖的环境中和有无机盐存在的条件下），设备是否受到霉菌的有害影响。 霉菌试验的标准主要有： GJB 150.10-1986军用设备环境试验方法霉菌试验 HB 6167.11-1989 民用飞机机载设备环境条件和试验方法霉菌试验。 GJB4.10 舰船电子设备环境试验霉菌试验 GB T 2423.16-1999 电工电子产品环境试验第2部分试验方法试验J和导则长霉 GB/T10588-2002 GB 10588-89 目前能进行霉菌试验的实验室很少，知道的就环境可靠性与电磁兼容试验中心、某空军研究所等 霉菌环境对食品影响 一、针对于外部环境霉菌易产生地方和原因 1．生产车间墙壁潮湿，在潮湿部位容易生长霉菌。 2．车间存在冷凝水的管路、墙壁等容易生长霉菌，水管的破裂，也会导致霉菌的产生。 3．空气中总是包含一定水蒸气，只不过大部分情况下我们看不到，不过，当水蒸气液化的时候，比如当我们沐浴或是泡澡的时候，浴室内镜子的表面就会变得潮湿，这时候我们就能够看到他们。热空气中包含很多的水分，当热空气冷却时，水分就会冷凝、液化。冷凝、液化通常是发生在房屋中温度最低的部位，比如墙壁上温度低的部位，正是在这些温度低的部位，最容易产生霉菌。 4．车间里无法保证正常的换气，无法让车间保证在规定湿度情况下，容易生长霉菌。 5．车间忽冷忽热，容易产生冷凝水的地方，容易糟到霉菌侵害。
霉菌分类及生长条件 霉菌是一种多细胞微生物，广泛存在于自然界中，在微生物学上属于真菌。其通过孢子的形式繁衍。霉菌孢子普遍存在于土壤和一些腐烂植物中，经由空气、水及昆虫传播到植物上，一旦孢子接触到破裂的种子，就会迅速发生霉变现象。 霉菌按其生活习性分为田间霉菌和仓储霉菌两种。田间霉菌是指青霉菌属、麦角菌属和镰孢菌属（梭霉菌属），此类霉菌属野外菌株，通常谷物在未采收前就已感染，最适生长温度为5℃~25℃，该类霉菌在低温环境中也会繁殖，阴冷潮湿的天气更易于这些霉菌生长。仓储霉菌主要是指储存的饲料或原料，在适宜的温度、湿度等条件下产生的霉菌，以曲霉菌属为主，该类霉菌最适宜的生长温度为25℃~30℃，相对湿度为80％~90％。但是，田间霉菌若在适宜条件下、在仓储环境中也会快速繁殖，造成严重污染。 霉菌生长条件四要素：碳水化合物（如玉米等谷物、饲料）、充足的水分（湿度在85%以上）、适宜的温度（12℃~25℃）、氧气。 霉菌毒素产生、分类及危害 霉菌毒素是谷物或者饲料中的霉菌在适宜的条件下，在农田里、在收获时、在储存或加工过程中生长产生的、有毒的二次代谢产物。 迄今为止已经分离和鉴定出来的霉菌毒素有300多种。一般而言，霉菌毒素主要是由4种霉菌属所产生：曲霉菌属（主要分泌黄曲霉毒素、赭曲霉毒素等）、青霉菌属（主要分泌橘霉素等）、麦角菌属（主要分泌麦角毒素）、镰孢菌属（主要分泌玉米赤霉烯酮、呕吐毒素、T －2毒素、串珠镰孢菌毒素），也是最见的几种霉菌毒素。不同霉菌毒素的危害能对动物产生危害的、最多见到的霉菌毒素多达20多种，分别亲嗜一种或多种组织与器官，并且多能对动物免疫系统产生损害，尤其是黄曲霉毒素和玉米赤霉烯酮，造成免疫复合性损害，这种病理作用一方面与这些霉菌毒素的免疫毒理有关，也与它们泛嗜性的病理损害有关。霉菌毒素中毒在猪病发生学中的地位，全世界的谷物有25%以上受到霉菌毒素污染，我国的污染更为严重，中国农科院畜牧所的一项调查检测表明，配合饲料中不同程度霉菌毒素的污染高达80%以上。这说明生猪中少有不受霉菌毒素危害的，霉菌毒素中毒的患病率（包括显性患病率和隐性患病率之和）远远高于任何一种侵袭性疾病。 现代研究表明，饲料霉菌毒素无论是在许多传染病的发生上还是非传染病的发生上经常扮演“始作俑者”的角色。在饲料霉菌毒素中毒的基础上发生猪瘟（CSF）、猪伪狂犬病（PR）、蓝耳病（PRRS）、圆环病毒病（PCVⅠ）已是常见之事。在霉饲料中毒的基础上发生的肝肾
霉腐微生物的生长条件(3-1) 微生物虽然是最低等的生物，但也和其它生物一样，在生命活动过程中，与周围环境有着密切的关系。环境条件的改变可使微生物的形态、生理、生长、繁殖特征引起改变；另一方面微生物也能抵抗、适应环境的某些改变。在适宜的环境中，微生物能旺盛地生长繁殖；在不适宜的环境中，微生物生长繁殖受到抑制或改变原有的特性；在恶劣的环境下，微生物可能会死亡。 研究环境因素与微生物间的相互影响，有助于了解霉腐微生物在自然界、工业制品、物品、食品等中的分布及作用，使我们有可能采取抑制，甚至完全破坏霉腐微生物生命活动的有效措施，从而防止疾病的传染以及工业制品、物品、食品等的腐败霉变。 影响微生物生长繁殖的环境因素是复杂的，多方面的，相互之间有密切关系。本节主要介绍营养、空气、水分、温度、pH和渗透压等对微生物生长繁殖的影响。 2.1 营养物质 微生物具有一般生物所具有的生命活动规律，需要从外界环境不断吸收营养物质并加以利用，从中获得进行生命活动所需要的能量，并合成新的细胞物质，同时排出废物。 从各类微生物细胞物质成分的分析中得知：微生物细胞的化学组成和其它生物的化学组成并没有本质的区别，主要组成元素是碳、氢、氧、氮（占全部干重的90～97%）和矿质元素（占全部干重的3～10%）。由这些元素组成细胞中的蛋白质、核酸、碳水化合物、脂类等各种有机物质，以及无机成分（表1-3）。 表1-3 微生物细胞的化学组成
碳素在各类微生物细胞中含量比较稳定，一般占干物质的45～55%。氮素在各类微生物细胞中含量差异比较大，细菌和酵母菌含氮量较高，一般约占干重的7～13%；霉菌含氮量较低，约占5%。 在矿质元素中，以磷的含量为最高，在大多数微生物中其含量可达全部灰分的50%，其次为钾、镁、钙、硫、纳等，而铁、铜、锰、硼、钼、硅等含量极微，称为微量元素。这些微量元素含量虽少，但在各类微生物生命活动中是不可缺少的，它们具有特殊的功能。 根据微生物细胞的化学组成，可以确定微生物对营养物质的需要。尽管各种微生物的营养要求千差万别，微生物所需的营养物质主要包括碳素化合物、氮素化合物、水分、无机盐类和生长素等。这些营养物质能给微生物提供生命活动所必需的能量；提供合成菌体和代谢产物（包括微生物毒素等）的原料；调节代谢活动的正常进行；提供适宜的代谢环境。 2.1.1 碳源 凡可构成微生物细胞和代谢产物中碳架来源的营养物质称为碳源。碳源（碳素化合物）是构成菌体成分的重要物质，又是产生各种代谢产物和细胞内贮藏物质的主要来源。微生物对碳素化合物的需要极其广泛，从简单的无机碳化物到复杂的天然有机碳化物都能被不同的微生物所利用。 自养微生物以CO2或碳酸盐为唯一碳源，合成碳水化合物，进而再合成蛋白质，核酸和类脂等细胞物质。CO2是被彻底氧化的物质，从CO2转化成有机物质是一个还原的过程，需要能量。而自养微生物的能源是光能或氧化无机物（如NH3、H2S、S、Fe2+等）所释放的化学能。引起管道或金属腐蚀的氧化硫硫杆菌和氧化铁硫杆菌就是这类微生物。 化能异养型微生物以有机碳素化合物作为碳源和能源，例如糖类、醇类、有机酸、脂肪、烃类。 其中糖类是最好的碳源。在单糖中，以己糖的利用最为普遍。几乎每种微生物都能利用葡萄糖和果糖。甘露糖和半乳糖虽能利用，但一般较为缓慢。其它己糖能否被微生物所利用，主要决定微生物体内有
微生物学实验报告 题目：霉菌的形态观察 姓名：学号：年级班级：组别： 同组者：时间： 【实验器材】 1．菌种 曲霉( Aspergillus sp. ) ，青霉，根霉( Rhizopus sp. ) 和毛霉（Mucor sp. ）培养2~5d 的马铃薯琼脂平板培养物。 2．培养基 马铃薯培养基（简称PDA） 3．仪器或其他用具 无菌吸管，平皿，载玻片，盖玻片，U型玻棒，解剖刀，镊子，50%乙醇，20%的甘油以及显微镜等。 【目的要求】 1．学习并掌握观察霉菌形态的基本方法。 2．了解四类常见霉菌的基本形态特征。 【基本原理】 霉菌菌丝体由基内菌丝、气生菌丝和繁殖菌丝组成，其菌丝比细菌及放线菌粗几倍到几十倍。可以采取直接制片和透明胶带法观察，也可以采取载玻片培养观察法，通过无菌操作将薄层培养基琼脂置于载玻片上，接种后盖上盖玻片培养，使菌丝体在盖玻片和载玻片之间的培养基之间的培养基中生长，将培养物直接置于显微镜下可观察到霉菌自然生长状态并可连续观察不同发育期的菌体结构特征变化。 【操作步骤】 1．培养小室的灭菌 在平皿皿底铺一张略小于皿底的圆滤纸片，再放一U形玻棒，其上放一洁净载玻片和两块盖玻片，盖上皿盖、包扎后于110℃灭菌20~30min，烘干备用。2．琼脂块制备 通过无菌操作，用解剖刀由马铃薯琼脂薄层平板上切下1cm2左右的琼脂块，将其移至培养小室的载玻片上，每片两块。 3．接种 通过无菌操作，用接种针从黑曲霉或黑根霉马铃薯琼脂平板培养物中挑取很少量孢子，接种于小室中琼脂块边缘上，将盖玻片覆盖在琼脂块上。 4．培养 通过无菌操作，在培养小室中圆滤纸片上加3~5mL灭菌的20%甘油（用于保持湿度），盖上皿盖，于28℃培养7天。 5．镜检 取出载玻片用低倍镜和高倍镜镜检。 【实验结果】
实验四酵母菌与霉菌的形态观察一.实验目的 1. 2. 3. 4.观察酵母菌的形态与结构并掌握其特征。 观察霉菌的菌落特征，学会霉菌的一般制作方法。 观察并掌握各种霉菌的个体形态及生长繁殖方式。 进一步熟悉xx的使用。 二.实验原理 酵母菌是一类单细胞真菌，一般呈圆形、椭圆形，无性繁殖以芽孢为主，也有少数是裂殖，有些酵母菌能产生囊孢子，有的能形成假菌丝。酵母菌的菌落似细菌菌落，但较大且厚，多呈白色，少数为红色。酵母菌在液体中生长可形成菌膜、菌环、沉淀和浑浊。酵母菌的细菌结构较完善，即有壁、膜、质、核等结构。酵母菌的细胞形态、繁殖方式和培养特征均为菌种鉴定的依据。 酵母活细胞新陈代谢旺盛，活力强，还原力也强，若无毒的染料进入细胞，既被还原脱色，但死细胞及代谢作用缓慢的老弱细胞无此还原力。美兰是无毒染料，且能被活细胞还原成无色，故可用来区别细胞的死活。 霉菌是一些小型丝状真菌、单细胞（根霉、毛霉）或多细胞（曲霉、青霉），其细胞结构与酵母类似，同属真核细胞。 霉菌形态较复杂，个体较大，具有分枝的菌丝体和分化的繁殖器官。其菌丝分为气生菌丝与营养菌丝（菌丝比放线菌粗得多）观察时请注意菌丝是否具有横膈膜、有无假根、无性繁殖时形成何种孢子，孢子着生方式以及孢子头的构造等，以区别各种不同霉菌的形态。 霉菌菌落由分枝状菌丝组成，较疏松，呈毛状、棉絮状、绒毛状或毡状。由于不同霉菌形成的孢子均有不同颜色、构造、性状，故菌落表面呈现出不同
的结构和色泽特征。菌丝一般呈白色或灰白色，菌落中心的菌丝较老，先产生孢子，故常形成同心圆。 三.实验器材 1.菌种： 面包酵母、根霉、曲霉、青霉。 2.仪器： xx。 3.其它： 生理盐水、乳酸酚棉兰染液、载玻片、盖玻片、接种环、酒精灯、美兰、镊子、大头针。 四.步骤与方法 1.酵母菌细胞形态观察 （1）制片： 用接种环挑取一环面包酵母菌种于载玻片上的一滴美兰染液中混匀，盖上盖玻片静置4~5分钟。盖时先将盖玻片的一边与液滴接触，然后慢慢放下，避免产生气泡。 （2）镜检： 用高倍镜观察，光线弱些，绘图表示个体细胞的大小、形状、芽孢或裂殖情况，并观察死活酵母情况。 2.霉菌的形态观察 （1）制片方法： 在洁净的载玻片加一滴乳酸酚棉兰染液，用大头针或镊子从