2008年中科院动物所生物化学与分子生物学博士题
一名词解释
密码子的变偶性程序性死亡冈崎片断单克隆抗体基因治疗 SD序列
移码突变 Z型DNA 蛋白质组学反向PCR
二大题
简述真核生物5’帽子结构和功能。
简述NO作为信号分子的调节作用。
运用你所学的知识和可能的实验经验，研究一个新基因的生理功能。
已知A和B蛋白质作用于同一生理功能，至少用三种方法证明A和B之间有无相互作用，并给出所用原理。
结合当前科学前沿，阐述真核生物基因表达调控。
2008年浙江大学分子生物学考博试题
问答题：双向电泳的原理及应用
三种分子标记方法
描述两种大规模研究ＤＮＡ的方法
２００７年诺贝尔生理与医学奖授予什么技术，该技术的应用
人类基因组中有一基因为２Ｋｂ，提到的基因组为１０微克，计算该基因的含量名词解释：免疫沉淀，ＲＮＡ剪切，核糖开关，分子伴侣，
浙江大学2006秋博分子生物学考题
分子生物学（甲）
名词解释（每个4分）
原位杂交、顺式作用元件、信号肽、选择性剪接、C-值矛盾（c-value paradox）
问答题（每个20分）
1、RNAi的优缺点，如何避免改正
2、何为正向遗传学、反向遗传学，阐述一条反向遗传学研究功能基因的方法
3、真核生物基因表达调控的途径
4、近年分子生物学中诺贝尔奖有哪些，请举二例，说明内容和意义
2008年华中科技大学生化与分子考试试题
生化与分子共七道题：
1. 蛋白质的结构原则
2. 进化中为什么选择蛋白和RNA作为酶
3.关于盐浓度对蛋白与DNA结合能力的影响（具体的题太长，叙述难免出错，所有把考点给出来大家斟酌）
4.基因功能的研究方法，简述3类及原理
5.真核与原核细胞的启动子的结构和功能及翻译起始的差异与共同点
6.关于基因CDNA克隆和蛋白表达的方法的实验设计题！有一植物中共有的基因与某重要功
能有关。请设计试验并叙述相关试验技术和方法，在烟叶中克隆该基因的CDNA全长，并获得用于获取抗体的蛋白！
7.基因靶向技术的原理和意义！（这个话题这两年很火，情理之中，呵呵！）
2008年最新协和医科大学博士生入学专业分子生物学考试试题
第一部分：填空
疯牛病的致病原因
什么是原病毒
SD序列
信号肽识别序列的组成-----部分和-----部分
乳糖操纵子的调控序列——————————————————————
第二部分：大题，2道
1.给了一段序列要求涉及合适的引物，扩增出改序列，（考点为引物设计原则）
2.给了一个质粒序列，和一段待插入的基因组DNA片段，然后酶切后电泳，酶切后电泳，三个泳道有三种不同的条带，分析其产生情况（考点为克隆部分）
第三部分：
1.紫外线过度照射后容易引发皮肤癌，正常机体通过何种机制修复
2.介绍酵母双杂交的原理和应用
3.举例说明小RNA在发育中的作用和意义
4.目前一种观点认为“转录后调控”这种说法不妥，你认为呢
5.（1）转座子和内含子序列是不是“垃圾序列”
（2）随着表观遗传学和小分子RNA的研究进展，许多人认为“中心法则”已经过时，请谈一下你对此观点的看法
中科院微生物所分子生物学（专业）
一、英文缩写，要求写出英文全称，共15个，
RT-PCR、MHC、EST、AUS、
二、解释并比较，共5个，全是英文名词。
1。antigenic shift 和 antigenic drift
其他的记不得了
三、简答题6个
2。σ因子和ρ因子在转录过程中的作用。
3。16SrRNA的分子大小、结构特点和生物学作用。
4。在古细菌和动物细胞中各有一种蛋白质，已知它们的cDNA 3‘端序列，设计试验分别找出其5’端序列。
6。什么是宏基因组？基本研究路线策略如何？
四、问答题4个
2。已知某质粒中寺×艘欢涡蛄校⊿-D），这段序列两端为两个不同的酶切位点（同尾酶S、D位点），序列附近的质粒序列中有另外一个酶切位点，请设计试验，克隆出四个首尾相连的S-D序列的质粒。
第三军医大学2001年分子生物学（博士）
一、名词解释：
1． SNP 2． Cistron 3． Competent cell 4． Tm 5． cDNA
二、简要说明下列实验原理
1． PCR
2． Lowry法测蛋白质浓度
3． SDS－PAGE
4．紫外线吸收法测核酸浓度
三、说明下列酶的作用特点与性质
1． DNA连接酶
2． DNA内切酶：
3．光复合酶：
4．大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ
四、问答题
1．试述蛋白组学研究对医学可能产生的影响。
2．试总结将外源基因导入细胞的各种方法并简要评价它的优缺点。
3．假如从一个成人的正常饮食中仅去除核酸成份一年后，对此人会有那些影响，试根据核酸代谢的知识说明判断的理由。
第三军医大学2000年分子生物学（博士）
一．名词解释：
二．1．调节酸： 2．受体下向调节： 3． RT－PCR： 4． Northern blot： 5． cDNA 文库： 6． hnRNA： 7．分子克隆： 8． ATP－泛素蛋白质降解系统：三．二．问答题：
四．1．试举例说明蛋白质的结构与功能关系：
五．2．试述糖异生原料的来源，糖异生途径的调节及其意义？
六．3．试述真核细胞基因表达转录水平调节机制？
中科院遗传所博士研究生入学考试试题
一九九六年分子遗传学
一、请说明高等动植物的基因工程与大肠杆菌基因工程的异同。什么是当前真核生物基因工程的前沿？你认为目前动植物基因工程进一步发展的瓶颈是什么？（20分）
二、在遗传学的发展中模式生物的应用起了重要的作用，请用一种你最熟悉的模式生物，较为系统地阐述应用该模式生物进行研究对分子遗传学的贡献。（15分）
三、从突变产生的机制看能否实现定向突变？试从离体和活体两种情况予以说明。（15分）
四、什么是基因组大小与C值的矛盾？造成这种矛盾的因素有哪些？如何估计真核生物基因组的基因数目？在进化过程中自然选择是否作用于基因组的大小，请阐述你的观点。（15分）
五、水稻黄矮病毒含有负链RNA基因组，在完成对该病毒核衣壳蛋白基因（N）序列测定的基础上，将N的编码序列置于水稻Actl基因（是一种组成性表达的基因）的启动子下游，通过基因枪方法导入一个水稻的粳稻品种，研究结果表明转基因的水稻植株在攻毒试验中表现出对黄矮病毒的抗性。请你进一步设计实验，证明以下两点：
1．转基因水稻的抗性确实是由于N基因导入水稻基因组表达的结果，而不是在转化过程中由于突变造成的；
2．转基因水稻的抗性是由于N基因的转录产物造成的，而不是该基因的翻译产物造成的。（20分）
六、限制性核酸内切酶在分子遗传学中广泛地用于各类研究，请具体地说明限制性内切酶在研究工作中的应用范围。
（15分）
1997年博士研究生入学试题
分子遗传学（A卷）
一、在通过测序获得一个基因组克隆的DNA序列后，怎样才能了解该序列可能具有的基因功能，请提出你的研究方案。（20分）
二、请简单介绍你的硕士论文研究（或相当于硕士论文研究）的工作。如果这些工作涉及分子遗传学，请提出你深入研究的设想；如果你以前的工作与分子遗传学无关，也请你提出深入到分子水平的设想。（20分）
三、请指出目前阶段基因工程技术的局限性，并分析这些局限性的原因（你可以在人类基因冶疗，动物基因工程和植物基因工程三个方面任选一个来回答，也可以都回答）。（20分）
四、请说明基因组计划与生物技术的关系。（20分）
五、请说明真核生物染色体的结构和组成在分子水平上的特征。（20分）
1997年博士研究生入学试题
分子遗传学（B卷）
一、请简单介绍你的硕士论文研究（或相当于硕士论文研究）的工作。如果这些工作涉及分子遗传学，请提出你深入研究的设想，如果你以前的工作与分子遗传学无关，也请你提出深入到分子水平的设想。（20分）
二、请说明真核生物染色体的结构和组成在分子水平上的特征。（20分）
三、目前在遗传图谱和物理图谱的研究中使用哪些分子标记？请说明每种标记的性质和特征。（20分）
四、在与遗传学有关的许多研究工作中都需要使用核酸的分子杂交技术，请举出这些研究工作及相应的分子杂交技术（至少三个），并尽你的可能，给以较具体的说明（如原理，关键技术和存在的问题等）。（20分）
五、请介绍人工产生突变的各种方法，并举实例说明突变在分子遗传学研究中的重要作用。（20分）
1998年博士学位研究生入学考试试题
分子遗传学A卷? ，B卷?
注： A卷考生可从六题中选五题回答，每题满分为20分；
B卷考生可从六题中选四题回答，每题满分为25分。
一、什么是DNA的半保留复制和半不连续复制？它们是如何被证明的？真核生物染色体的DNA复制与大肠杆菌的DNA复制有哪些不同？请具体说明。
二、在分子遗传学的研究中，被克隆的基因有两种不同的形式，genomic基因和cDNA基因，请问在这二者之间可能会有哪些不同？为什么？从方法学的角度看，在基因的结构与功能的研究中，二者各有什么作用？可以举例说明。
三、什么是基因转录水平上的顺式调控成分与反式调控因子？它们与近代遗传学中的基因概念“顺反子”有何差异或联系？如何鉴定一个基因表达的顺式调控成分与反式调控因子？最好能举例说明。
四、在基因组研究中应用哪些分子标记？请说明这些标记的生物化学性质和遗传学特征。并进一步回答以下两个问题：1、为什么在比较基因组研究中常用RFLP标记，而不用其他标记？
2、为什么在个体、品系和品种的鉴别中一般不用RFLP标记？
五、在人类中线粒体DNA是母系遗传的，Y染色体是父系遗传的，因此有人说通过对线粒体DNA的研究可以追溯到人类共同的祖先母亲?夏娃，通过对Y染色体DNA的研究可以追溯到人类共同的祖先父亲?亚当。请你提出较为具体的技术路线。如你不同意上述看法，也请提出自己的设想和技术路线。
六、如何证明在转基因的动植物中导入的外源基因在宿主染色体上的整合？如果导入外源基因的功能是在研究之中的，你如何证明在转基因动植物中表现的新性状是外源基因决定的？你可以任选某种动物或植物举例说明。
1999年博士学位研究生入学考试试题
分子遗传学
注: A卷考生可以六题中选五道题回答，每题满分为20分，
B卷考生可以六题中选四道题回答，每题满分为25分。
一、请简单介绍DNA双螺旋结构的变性、复性、构象和超螺旋化。并回答以下二个问题：
1. 在活体条件下，DNA的变性、复性、构象和超螺旋化与DNA复制及基因表达有何关系？（最好能举例说明）
2. 在离体条件下，如何利用DNA的变性复性进行分子遗传学研究？
二、rRNA基因、tRNA基因与一般的编码蛋白质的基因在结构组成和转录上有哪些不同的特征？为什么rRNA基因可以用于系统发育和分子进化的研究？在实验室中是如何运用rRNA 基因进行分子进化研究的？
三、有哪些研究说明真核生物基因组的稳定性只是相对的？请举一例较详尽地说明真核生物基因组流动性的分子机制。
四、在未知基因产物的情况下，如何从高等动物或植物中克隆一个行使某种可观察的功能的基因？请就你所了解的一篇文献上的实例对有关的技术路线进行剖析，并说明该研究成功的技术关键。
五、在普通遗传学和细胞遗传学中提到的各种现象，概念和假设中，已有不少在分子遗传学中被进一步阐明，请举例说明。请问在普通遗传学和细胞遗传学中，我们对哪些重要的现象、概念或假设的理解，迄今仍未上升到分子水平？
六、在真核生物的基因中哪些区段的序列、哪些核苷酸的变异会显著地影响该基因编码和蛋白质的功能？为什么？这些变异是如何影响蛋白质的功能的？可以举例说明。
2000年博士研究生入学考试
分子遗传学试题
（A卷考生回答下列五题，每题20分；B卷考生可任选四题回答，每题25分）
一、“一个基因一个蛋白”的假说是如何提出来的？从今天的观点看该假说有哪些问题？应该如何表述才比较确切？最好能举实例说明。
二、在真核生物的基因工程中，有时会出现这样的情况：通过Southern分析证明了携带外源基因的载体已整合到转化受体的基因组中，但是在转基因受体的当代或后代个体中未能检测出该外源基因的表型。请问有哪些原因会导致这种负的结果？如何分析才能判断该基因不产生表型的原因？
三、目前有哪些电泳技术可用于DNA的分析？请说明这些技术是如何推动分子遗传学研究的。
四、南京大学孙乃恩等编著的《分子遗传学》是1990年出版的高等学校试用教材，迄今已过去10年了，如果要对该著进行修改补充，你觉得有哪些研究进展的内容是必须补充的？
有哪些内容是可以基本上不变的？请说明你的理由。
一、五、我国是一个历史悠久的大国，在北京周口店曾发现五十万年前的“北京人”头盖骨化石，在长江流域多次发现6000年至8000年前墓葬中的稻谷。为了证明“北京人”就是现代中国人的祖先，墓葬中的稻谷就是现代的水稻品种的原始材料，你觉得有没有必要提供遗传学的证据？为什么？请你任选上述二个问题中的一个，提出你设计的研究方案。
博士学位研究生2001年入学考试
分子遗传学试题
（A卷考生必须回答下列五题，每题20分；B卷考生任选四题回答，每题25分）
一、Crick在1958年提出了中心法则，请对以下四个方面进行论述：
1. 中心法则对分子遗传学研究的理论意义和指导作用；
2. 中心法则的修正；
3. 中心法则面临的挑战；
4. 你对中心法则的看法。
二、目前已被阐明基因组全序列的生物有哪些？请在这些生物中选择你最熟悉的一种，提出如何用分子遗传学的方法来揭示该基因组中序列已知、但功能未知的某个基因的功能。
三、请解释以下概念：操纵子、诱导物、阻遏物、正调控、负调控。并详细地说明乳糖操纵子和色氨酸操纵子的调控机理。
四、请举出5种不同的基因文库，说明文库的载体组成、性质、特点和应用范围，并用实例说明。
五、就你所熟悉的一种生物的基因工程，提出使异源基因高表达的具体策略，可以举例说明。
分子遗传学2002年博士入学考题
注：1、A卷考生必须回答下列5题，每题20分。 B、卷考生任选四题回答，每题25分。
一、请举出细胞中的各种RNA分子的名称、特征和功能。如何从RNA出发开展功能基因组的研究。
二、真和生物的基因表达控制（control of gene expression）和信号传导（signal transduction）有密切的关系，请举出一个你熟悉的例子分别说明这两个概念的含义及其联系。
三、目前已经有一些现成的软件用来预测基因组全序列中的基因。为了设计这些软件，你觉得哪些关于基因和基因组的分子遗传学知识是必须的？请说明理由。
四、在真核生物中转座子可以分为几种类型？请分述每种类型的结构和特征。如何利用转座子进行分子遗传学的研究和功能基因组的研究。
五、自从克隆的多利羊诞生以来，报界经常传播所谓克隆动物的缺陷，有一种说法是克隆动物会早衰，有人推测早衰的原因可能是：（1）被克隆的体细胞核的染色体端粒变短或（2）被克隆的体细胞核的基因表达程序已经处在发育上成熟的阶段。现在请你从染色体DNA复制的角度作支持第（1）种可能的阐述，并从基因表达调控的角度做反对第（2）中可能的阐述。
中国科学院遗传与发育生物学研究所
博士研究生遗传学入学试题
2003年
一、今年是DNA双螺旋模型发表五十周年。请回答以下问题（20分）：
1、在双链DNA分子中A+T/G+C是否等于A+C/G+T ？（4分）
2、DNA双链的两条链中是否含有相同的遗传信息？为什么？（4分）
3、大肠杆菌的基因组DNA的长度约为1100微米。请根据DNA模型估计其基因组的碱基对数目。（4分）
4、如果两种生物基因组DNA在四种碱基的比率上有显著差异，那么预期在它们编码的tRNA、rRNA和mRNA上是否也会在四种碱基的比率上呈现同样的差异？（8分）
二、在一牛群中，外观正常的双亲产生一头矮生的雄犊。请你提出可能导致这种矮生的各种原因，并根据每种原因提出相应的调查研究的提纲（注意整个调查研究工作必须在两个月内完成）。（20分）
三、请给出以下6种分子标记的中文全称、定义、检测方法及其在遗传分析中的特征。（20分）
RFLP , microsatellite , STR , SSLP , SNP , InDeL .
四、在普通遗传学中，非等位基因间的相互作用有哪几种？请举例说明其中的两种相互作用？请从分子遗传学和分子生物学的角度对非等位基因间的相互作用的分子机制进行阐述，并举例说明。（20分）
五、有哪些诱变剂可以诱发基因突变？基于突变被辨认的方法，可以将突变分为哪几种类型？哪些类型的突变对功能基因组的研究最有意义？为什么？对一个已完成基因组测序的真核生物，如何构建一个突变体库，以揭示基因组中预测基因的功能？（20分）
中国科学院遗传与发育生物学研究所
博士研究生遗传学入学试题（2004年）
注意：（1）答题必须简明扼要。如有必要，可以图示辅助说明；
（2）答题时可以不必抄题，但需注明题目序号；
（3）所有答题不要写在试卷上，请全部书写在答题纸上；
（4）第一题为选答题，第二至五题为必答题。
一、选答题：请在第1与第2题间选答一题。若两题均答，只按其中得分最低的一题记入总分。（每题20分）
1. 列举动物遗传研究中常见的两种模式实验动物，它们各有哪些特点？对遗传学的发展有哪些主要贡献？
2. 在植物遗传研究中，经典遗传学实验材料常采用豌豆和玉米，而现代遗传研究则更趋向利用拟南芥菜和水稻，试述发生这种转变的主要原因，以及它们在植物遗传学发展史上的主要贡献。
二、对于突变体的诱导有许多种方法，请分别列举一种化学的、物理的以及生物的突变体诱变方法。对于表型相同的一组突变体，请设计一遗传试验，验证这些突变属于相同位点（alleles）突变还是不同位点(non-alleles)的突变。（20分）
三、转座(transposition)与易位(translocation)有什么不同？它们各自有哪些类型？对
于基因组的进化各有哪些意义？（20分）
四、简述你所从事过的一项最主要研究工作。如果给你以足够的研究条件，以及3-4年的时间，你将如何进一步深化你的研究工作？（20分）
五、负调控在生命活动中有重要的意义，除经典的操纵子模型以外，近年来还发现有泛素（ubiquitin）介导的蛋白质降解机制和micro RNA(miRNA)介导的转录和翻译抑制机制，请从后两者中任选一种举例说明其作用机制与生物学意义。（20分）
中国科学院遗传与发育生物学研究所
博士研究生遗传学入学试题（2005年）
注意：（1）答题必须简明扼要。如有必要，可以图示辅助说明；
（2）答题时可以不必抄题，但需注明题目序号；
（3）所有答题不要写在试卷上，请全部书写在答题纸上。
（4）每题20 分。
一、试述有丝分裂和减数分裂对于保持物种稳定以及遗传多样性的意义。
二、基因组学研究是近年来生命科学领域的热点之一。简述结构基因组学与功能基因组
学的概念，以及利用模式物种进行基因组学研究的意义。
三、已知某物种的两个连锁群如下图所示：cM cM
图中的数字为相应遗传学位点的遗传距离（cM）。
试回答：
（1）杂合体AaBbCc 可能产生的配子类型和比例；
（2）设计一个实验验证另一基因X 是否位于图示中的两个连锁群上。
四、转录因子包括什么主要的功能结构域？其主要的结构特点与功能是什么？
五、下述是一个虚拟的分子遗传学问题。
表皮毛具有重要的生物学意义。典型的表皮毛结构包括一根主干(main stem) 以及
主干顶端的三个分枝(branches) 组成。形态学研究表明如果主干生长过长，通常导致顶
端分枝减少至两个或更少。相反，如果主干生长过短导致分枝增加。因此主干的长度与
顶端的分枝数目成负相关。
为了研究表皮毛发育的机制，某研究生筛选到一个表皮毛发育异常的突变体。该突
变体的表皮毛主干较野生型长，且只有两个分枝。该突变体被命名为abnormal branching (abc)。遗传分析表明abc 是一个核基因隐性突变。之后，该研究生克隆了ABC 基因，
发现ABC基因编码一个转录因子。DNA测序分析发现在abc突变体中，一个单碱基的突
变导致了在一个富含碱性氨基酸的区段（5 个连续的赖氨酸或精氨酸）中的一个赖氨酸
突变为甘氨酸。
该研究生制备了抗ABC 蛋白的多克隆抗体。通过原位免疫荧光技术，该研究生发
现在野生型中ABC 蛋白完全定位在细胞核中，而在abc 突变体中ABC 蛋白同时定位在
细胞质和细胞核中。
为了更深入的研究表皮毛发育的机制，该研究生又筛选了abc 突变的抑制子突变(suppressors of abc; sab)。sab 突变能够抑制abc 突变体的表型（即abc/sab 双突变体
的
表型为正常）。但在野生型背景下(即sab 单突变)，表皮毛变短，分枝增多（4－6 个分枝）。分子遗传学实验证明SAB 基因编码一个F-box 蛋白(F-box protein)。该研究生
证明在体外和体内(both in vitro and in vivo) ABC 均与SAB 互作(interaction)。Western blot 表明ABC 蛋白在sab 突变体细胞中高水平富集。
根据上述结果，简要回答下述问题（第1－4 小题，答案请勿超过50 个字；第5
小题请勿超过200 字）：
（1）该研究生可能通过什么方法制备了抗原（即用于制作抗体用的ABC 蛋白）？
（2）请解释为什么部分ABC 突变蛋白（即赖氨酸突变为甘氨酸后）会定位在细
胞质中而不是完全定位与细胞核中？
（3）过量表达ABC 基因的可能表型是什么？
（4）过量表达SAB 基因的可能表型是什么？
（5）请提出一个模型解释ABC 和SAB 在调控表皮毛发育中的作用机制。
分子生物学试题及答案 一、名词解释 1．cDNA与cccDNA：cDNA是由mRNA通过反转录酶合成的双链DNA；cccDNA是游离于染色体之外的质粒双链闭合环形DNA。 2．标准折叠单位：蛋白质二级结构单元α－螺旋与β－折叠通过各种连接多肽可以组成特殊几何排列的结构块，此种确定的折叠类型通常称为超二级结构。几乎所有的三级结构都可以用这些折叠类型，乃至他们的组合型来予以描述，因此又将其称为标准折叠单位。 3．CAP：环腺苷酸（cAMP）受体蛋白CRP（cAMP receptor protein ），cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP（cAMP activated protein ） 4．回文序列：DNA片段上的一段所具有的反向互补序列，常是限制性酶切位点。 5．micRNA：互补干扰RNA或称反义RNA，与mRNA序列互补，可抑制mRNA的翻译。 6．核酶：具有催化活性的RNA，在RNA的剪接加工过程中起到自我催化的作用。 7．模体：蛋白质分子空间结构中存在着某些立体形状和拓扑结构颇为类似的局部区域 8．信号肽：在蛋白质合成过程中N端有15~36个氨基酸残基的肽段，引导蛋白质的跨膜。 9．弱化子：在操纵区与结构基因之间的一段可以终止转录作用的核苷酸序列。 10．魔斑：当细菌生长过程中，遇到氨基酸全面缺乏时，细菌将会产生一个应急反应，停止全部基因的表达。产生这一应急反应的信号是鸟苷四磷酸(ppGpp)和鸟苷五磷酸（pppGpp）。PpGpp与pppGpp的作用不只是一个或几个操纵子，而是影响一大批，所以称他们是超级调控子或称为魔斑。 11．上游启动子元件：是指对启动子的活性起到一种调节作用的DNA序列，-10区的TATA、-35区的TGACA 及增强子，弱化子等。 12．DNA探针：是带有标记的一段已知序列DNA，用以检测未知序列、筛选目的基因等方面广泛应用。13．SD序列：是核糖体与mRNA结合序列，对翻译起到调控作用。 14．单克隆抗体：只针对单一抗原决定簇起作用的抗体。 15．考斯质粒：是经过人工构建的一种外源DNA载体，保留噬菌体两端的COS区，与质粒连接构成。16．蓝-白斑筛选：含LacZ基因（编码β半乳糖苷酶）该酶能分解生色底物X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)产生蓝色，从而使菌株变蓝。当外源DNA插入后，LacZ基因不能表达，菌株呈白色，以此来筛选重组细菌。称之为蓝-白斑筛选。 17．顺式作用元件：在DNA中一段特殊的碱基序列，对基因的表达起到调控作用的基因元件。18．Klenow酶：DNA聚合酶I大片段，只是从DNA聚合酶I全酶中去除了5’→3’外切酶活性 19．锚定PCR：用于扩增已知一端序列的目的DNA。在未知序列一端加上一段多聚dG的尾巴，然后分别用多聚dC和已知的序列作为引物进行PCR扩增。 20．融合蛋白：真核蛋白的基因与外源基因连接，同时表达翻译出的原基因蛋白与外源蛋白结合在一起所组成的蛋白质。 二、填空 1． DNA的物理图谱是DNA分子的（限制性内切酶酶解）片段的排列顺序。 2． RNA酶的剪切分为（自体催化）、（异体催化）两种类型。 3．原核生物中有三种起始因子分别是（IF-1）、（IF-2）和（IF-3）。 4．蛋白质的跨膜需要（信号肽）的引导，蛋白伴侣的作用是（辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质）。5．启动子中的元件通常可以分为两种：（核心启动子元件）和（上游启动子元件）。 6．分子生物学的研究内容主要包含（结构分子生物学）、（基因表达与调控）、（DNA重组技术）三部分。7．证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是（肺炎球菌感染小鼠）、（ T2噬菌体感染大肠杆菌）这两个实验中主要的论点证据是：（生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能）。 8．hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点：（hnRNA在转变为mRNA的过程中经过剪接，）、 （mRNA的5′末端被加上一个m7pGppp帽子，在mRNA3′末端多了一个多聚腺苷酸(polyA)尾巴）。 9．蛋白质多亚基形式的优点是（亚基对DNA的利用来说是一种经济的方法）、（可以减少蛋白质合成过程中随机的错误对蛋白质活性的影响）、（活性能够非常有效和迅速地被打开和被关闭）。 10．蛋白质折叠机制首先成核理论的主要内容包括（成核）、（结构充实）、（最后重排）。 11．半乳糖对细菌有双重作用；一方面（可以作为碳源供细胞生长）；另一方面（它又是细胞壁的成分）。所以需要一个不依赖于cAMP—CRP的启动子S2进行本底水平的永久型合成；同时需要一个依赖于cAMP—CRP的启动子S1对高水平合成进行调节。有G时转录从（ S2）开始，无G时转录从（ S1）开
中国疾控中心2005年分子生物学（博士） 一、名词解释 1.EST 2.YAC 3.Sense DNA 4.RNAi 5.Race 二、问答题 1、乳糖操纵子的结构。IPTG如何诱导结构基因表达？ 2、正向突变、抑制突变及回复突变的定义及与突变的关系。 3、PUC18克隆载体的结构特征。 4、在做PCR过程中，常遇到的问题及解决方法。 5、已知蛋白A、B之间相互作用，C、D分别与A、B 相似，如何签定C、D之间的相互作用，两种方法说明之。 6、试用分子生物学相关知识建立动物模型的方法，如何建立病原生物学的动物模型。 军事医学科学院1995年分子生物学试题（博士） 1. Apoptosis的生物学意义及其调控基因。 2.基因转移的概念及基因转移载体应具备的条件。 3.原癌基因的功能及其转化为癌基因的机理。 4.人主要组织相容性抗原在细胞识别中的作用及原理。 5.染色体重排对生物体的影响及其主要类型。 6.噬菌体显示技术原理及其在生物学研究中的意义。 军事医学科学院1996年分子生物学试题（博士） 1.什么是原癌基因？它们怎样被反转录病毒激活？ 2.什么是tumor supperssor gene？举例说明它的调控功能。 3.细胞染色体的异常如何导致癌基因的激活？ 4 解释以下名词：(1) gene knock-out (2) molecular hybridization (3) restriction fragment length polymorphism (4) human genome project 5.G蛋白的结构特点信其功能. 6 .apoptosis的特征与其生理及病理意义,已知它的调控基因有哪些？ 2006 协和生物化学与分子生物学专业博士试题 一、填空（24空24分） 1.---------年，由-------和-------（英文姓）首次提出了DNA的双螺旋模型，其结果发表在----杂志，他们提出的实验依据是-------和--------。 2.蛋白质浓度测定在--------nm, 原因是---------但有时候也在220nm处测量，原因是--------。 3.表皮生长因子受体具有-------酶的活性。 4.嗅觉、视觉、味觉和细胞膜上的------蛋白结合，这种受体具有-------的结构特点，产生的第二信使是。 二、名词解释（4题16分） 1. CpG island 2.CTD of RNA Pol II 3. SiRNA 三、问答题（4题40分） 1. 基因组DNA有时会产生G:T错配，DNA复制时有时会发生A:C错配，他们产
分子生物学技术信息 关于筹建一个分子生物学实验室所需的仪器 一、上游分子克隆 分子克隆技术是分子生物学的核心技术，这项技术的主要目的是获得某一基因或DNA片段的大量拷贝，从而可以深入分析基因结构与功能，并可达到人为改造细胞及物种个体的遗传性状的目的。 1. 分子克隆的基本技术路线： 1) 分离制备目的基因或DNA片段； 2) 目的DNA与载体在体外进行连接； 3) 重组DNA分子转入宿主细胞； 4) 筛选及鉴定阳性重组体； 5) 重组体的扩增。 2. 分子克隆常用仪器：
二、核酸分子杂交 核酸分子杂交技术是分子生物学领域中最常用的技术之一。其基本原理是具有一定同源性的两条核酸单链在一定的条件下可按碱基互补原则形成双链。由于核酸分子杂交的高度特异性及检测方法的高度灵敏性，使其在分子生物学领域中被广泛应用于分子克隆的筛选，基因组中特定基因序列的定量定性检测，基因表达和基因突变分析及疾病的基因诊断等。根据核酸种类分为Southern印迹法和Northern印迹法。 核酸分子杂交中常用的仪器： 三、下游蛋白的表达及分离纯化 目的基因能否发挥其效应,只能通过其表达有功能的蛋白质来实现,因此蛋白质的表达及分析方法成为分子生物学中必不可少的组成部分。 1. 蛋白的表达 大肠杆菌是自然界中最为人知的生物体之一。由于其具有操作简易，产量高和成本低廉等优点，使其成为蛋白质表达的首选宿主。缺点是：表达缺乏翻译后加工，得到的蛋白可能缺乏某些天然蛋白所具有的活性。 酵母作为单细胞低等真核生物，具有易培养，繁殖快，便于基因操作等优点，渐渐被开发作为目的基因的表达系统。其中甲基酵母作为外源基因的表达
一、名词解释 1.分配常数：又称分配系数，是指一种分析物在两种不相混合溶剂中的平衡常数。 2.多肽链的末端分析：确定多肽链的两末端可作为整条多肽链一级结构测定的标志，分为氨基端分析和羧基端分析。 3.连接酶：指能将双链DNA中一条单链上相邻两核苷酸连接成一条完整的分子的酶。 4.预杂交：在分子杂交实验之前对杂交膜上非样品区域进行封闭，用以降低探针在膜上的非特异性结合。 5.反转录PCR：是将反转录RNA与PCR结合起来建立的一种PCR技术。首先进行反转录产生cDNA,然后进行常规的PCR反应。 6.稳定表达：外源基因转染真核细胞并整合入基因组后的表达。 7.基因敲除：是指对一个结构已知但功能未知或未完全知道的基因，从分子水平上设计实验，将该基因从动物的原基因组中去除，或用其它无功能的DNA片断取代，然后从整体观察实验动物表型，推测相应基因的功能。 8.物理图谱：人类基因组的物理图是指以已知核苷酸序列的DNA片段为“路标”，以碱基对(bp，kb，Mb)作为基本测量单位(图距)的基因组图。 9.质谱图：不同质荷比的离子经质量分析器分开后，到检测器被检测并记录下来，经计算机处理后所表示出的图形。 10.侧向散射光：激光束照射细胞时，光以90度角散射的讯号，用于检测细胞内部结构属性。
11.离子交换层析：是以离子交换剂为固定相，液体为流动相的系统中进行的层析。 12.Edman降解：从多肽链游离的N末端测定氨基酸残基的序列的过程。 13.又称为限制性核酸内切酶(restriction endonuclease)：是能够特异识别双链DNA序列并进行切割的一类酶。 14.电转移：用电泳技术将凝胶中的蛋白质，DNA或RNA条带按原位转移到固体支持物，形成印迹。 15.多重PCR：是在一次反应中加入多对引物，同时扩增一份模板样品中不同序列的PCR 过程。 16.融合表达: 在表达载体的多克隆位点上连有一段融合表达标签（Tag），表达产物为融合蛋白（有分N端或者C端融合表达），方便后继的纯化步骤或者检测。 17.同源重组：发生在DNA同源序列之间，有相同或近似碱基序列的DNA分子之间的遗传交换。 18.遗传图谱又称连锁图谱(linkage map)，它是以具有遗传多态性的遗传标记为“路标”，以遗传学距离为图距的基因组图。 19.碎片离子：广义的碎片离子为由分子离子裂解产生的所有离子。 20.前向散射光：激光束照射细胞时，光以相对轴较小角度向前方散射的讯号用于检测细胞等离子的表面属性，信号强弱与细胞体积大小成正比。 21.亲和层析:利用共价连接有特异配体的层析介质分离蛋白质混合物中能特异结合配体的目的蛋白或其他分子的一种层析法。(利用分子与其配体间特殊的、可逆性的亲和结合
分子生物学备选考题 名词解释: 1.功能基因组学 2.分子生物学 3.epigenetics 4.C值矛盾 5.基因簇 6.间隔基因 7.基因芯片 8.基序（Motifs） 9.CpG岛 10.染色体重建 11.Telomerase 12.足迹分析实验 13.RNA editing 14.RNA干涉（RNA interference） 15.反义RNA 16.启动子（Promoter） 17.SD序列(SD sequence) 18.碳末端结构域（carboxyl terminal domain，CTD） 19.single nucleotide polymorphism，SNP 20.切口平移（Nick translation） 21.原位杂交 22.Expressing vector 23.Multiple cloning sites 24.同源重组 25.转座 26.密码的摆动性 27.热休克蛋白嵌套基因 28.基因家族增强子 29.终止子 30.前导肽RNAi 31.分子伴侣 32.魔斑核苷酸 33.同源域 34.引物酶 35.多顺反子mRNA 36.物理图谱、 37.载体（vector） 38.位点特异性重组 39.原癌基因（oncogene） 40.重叠基因、 41.母源影响基因、
42.抑癌基因（anti-oncogene）、 43.回文序列（palindrome sequence）、 44.熔解温度（melting temperature, Tm） 45.DNA的呼吸作用（DNA respiration） 46..增色效应（hyperchromicity）、 47.C0t曲线（C0t curve）、 48.DNA的C值（C value） 49.超螺旋(superhelix) 、 50.拓扑异构酶（topoisomerase）、 51.引发酶(primase) 、 52.引发体(primosome) 53.转录激活(transcriptional activation) 54.dna基因(dna gene)、 55.从头起始(de novo initiation) 、 56.端粒（telomere） 57.酵母人工染色体（yeast artificial chromosome, YAC）、 58.SSB蛋白（single strand binding protein）、 59.复制叉(replication fork)、 60.保留复制(semiconservative replication) 61.滚环式复制(rolling circle replication)、 62.复制原点(replication origin)、 63.切口(nick) 64.居民DNA (resident DNA) 65.有义链(sense strand) 66.反义链(antisense strand) 67.操纵子(operon) 、 68.操纵基因(operator) 69.内含子(内元intron) 70.外显子(外元exon) 、 71.突变子(muton) 、 72.密码子（codon）、、 73.同义密码（synonymous codons）、 74.GC盒(GC box) 75.增强子(enhancer) 76.沉默子(silencer) 77.终止子(terminator) 78.弱化子（衰减子）(attenuator) 79.同位酶(isoschizomers) 、 80.同尾酶(isocandamers) 81.阻抑蛋白（阻遏蛋白）(repressor) 82.诱导物（inducer）、 83.CTD尾（carboxyl-terminal domain ） 84.载体（vector）、 85.转化体(transformant)
华中科技大学同济医学院考博分子生物学（专业基础）简答题历年试题汇总 1.顺式作用元件有哪些，并加以解释。2015，2012考 2.人类基因组计划的4张图，各自的意义是什么？ 3.癌基因激活的主要途径？ 问答：1.什么是基因治疗，基因治疗的主要策略是什么？基因治疗的技术及主要内容，2015，2014，2013考 问答2.蛋白质组学的主要技术有哪些并解释？2015，2012考 2014简问答题 1.PCR原理，步骤，写出6种PCR衍生技术 2013，2014，2009考 2.何谓基因克隆？简述其基本过程。09年 3.重组DNA技术，问答题20分，14年考 4.举例说明基因表达的调控机制。题目太大，原核调控，真核调控？13年 问答5.人类基因定位的常用方法及原理。12年，09年考 简问6.简述反式作用因子的结构特点及作用方式 09年 简问7.简述逆转录病毒的结构特点 09年考 问答：真核细胞中基因表达的特异性转录调控因子是指什么？根据他们的结构特征可以分为哪些类型？它们和DNA相互识别的原理是什么？2013年考 问答：试述大肠杆菌中表达蛋白质产物的步骤。 2013年考 试比较克隆载体、原核载体和真核载体的特点 2012年考 2016年真题 英译中名词解释（20分） 反义RNA；操纵子；限制性核酸内切酶；选择性剪切；抑癌基因；基因诊断； RNA干扰；质粒； gene maping；管家基因 简答题。 真核基因组的结构和功能特点20分 分15人类基因组的结构特征． 原癌基因的特点15分 蛋白质组研究常用技术有那些，简介其作用。15分 当前基因治疗技术面临的技术问题有哪些？15分 以下为2001-2004年试题及网上答案 一、若要获得IL-2的基因工程产品，你应该怎么做？ 基因工程是在分子水平上对基因进行操作的复杂技术，是将外源基因通过体外重组后导入受体细胞内，使这个基因能在受体细胞内复制、转录、翻译表达的操作，又叫分子克隆，DNA重组技术。 1. 在GENBANK中检索IL-2的mRNA序列；在genecard里检索IL-2高表达的组织；同时检索一下有关文献； 2. 如果考虑使用原核表达系统（通常是大肠杆菌表达系统），将IL-2的成熟肽的基因序列找出（呵呵，我没有检索，不清楚是否有信号肽）进行分析；
分子生物学试题（一） 一.填空题(,每题1分,共20分) 一.填空题(每题选一个最佳答案,每题1分,共20分) 1. DNA的物理图谱是DNA分子的（）片段的排列顺序。 2. 核酶按底物可划分为（）、（）两种类型。 3．原核生物中有三种起始因子分别是（）、（）和（）。 4．蛋白质的跨膜需要（）的引导，蛋白伴侣的作用是（）。5．真核生物启动子中的元件通常可以分为两种：（）和（）。6．分子生物学的研究内容主要包含（）、（）、（）三部分。 7．证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是（）、（）。 8．hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点：（）、（）。 9．蛋白质多亚基形式的优点是（）、（）、（）。 10.蛋白质折叠机制首先成核理论的主要内容包括（成核）、（结构充实）、（最后重排）。 11.半乳糖对细菌有双重作用；一方面（可以作为碳源供细胞生长）；另一方面（它又是细胞壁的成分）。所以需要一个不依赖于cAMP-CRP的启动子S2进行本底水平的永久型合成；同时需要一个依赖于cAMP-CRP的启动子S1对高水平合成进行调节。有G时转录从（S2 ）开始，无G时转录从（S1 ）开始。 12．DNA重组技术也称为（基因克隆）或（分子克隆）。最终目的是（把一个生物体中的遗传信息DNA转入另一个生物体）。典型的DNA重组实验通常包含以下几个步骤： ①提取供体生物的目的基因（或称外源基因），酶接连接到另一DNA分子上（克隆载体），形一个新的重组DNA分子。 ②将这个重组DNA分子转入受体细胞并在受体细胞中复制保存，这个过程称为转化。 ③对那些吸收了重组DNA的受体细胞进行筛选和鉴定。 ④对含有重组DNA的细胞进行大量培养，检测外援基因是否表达。 13、质粒的复制类型有两种：受到宿主细胞蛋白质合成的严格控制的称为（严紧型质粒），不受宿主细胞蛋白质合成的严格控制称为（松弛型质粒）。 14．PCR的反应体系要具有以下条件： a、被分离的目的基因两条链各一端序列相互补的 DNA引物（约20个碱基左右）。 b、具有热稳定性的酶如：TagDNA聚合酶。 c、dNTP d、作为模板的目的DNA序列 15．PCR的基本反应过程包括：（变性）、（退火）、（延伸）三个阶段。 16、转基因动物的基本过程通常包括： ①将克隆的外源基因导入到一个受精卵或胚胎干细胞的细胞核中； ②接种后的受精卵或胚胎干细胞移植到雌性的子宫；
第2章染色体与DNA 名词解释 原癌基因：细胞内与细胞增殖相关的正常基因，是维持机体正常生命活动所必须的，在进化上高等保守。当原癌基因的结构或调控区发生变异，基因产物增多或活性增强时，使细胞过度增殖，从而形成肿瘤。 复制：以亲代DNA或RNA为模板，根据碱基配对的原则，在一系列酶的作用下，生成与亲代相同的子代DNA或RNA的过程。 转座子 (transposon 或 transposable element)：位于染色体DNA上可自主复制和位移的基本单位。包括插入序列和复合转座子。 半保留复制：以亲代DNA双链为模板以碱基互补方式合成子代DNA，这样新形成的子代DNA 中，一条链来自亲代DNA，而另一条链则是新合成的，这种复制方式叫半保留复制。 染色体：染色体是遗传信息的载体，由DNA、RNA和蛋白质构成，其形态和数目具有种系的特性。在细胞间期核中，以染色质形式存在。在细胞分裂时，染色质丝经过螺旋化、折叠、包装成为染色体，为显微镜下可见的具不同形状的小体。 核小体：是构成真核生物染色体的基本单位，是DNA和蛋白质构成的紧密结构形式，包括200bp左右的DNA和9个组蛋白分子构成的致密结构。 填空题 1.真核细胞核小体的组成是 DNA和蛋白 2.天然染色体末端不能与其他染色体断裂片段发生连接，这是因为天然染色体末端存在端粒结构。 3.在聚合酶链反应中，除了需要模板DNA外，还需加入引物、DNA聚合酶、dNTP和镁离子。 4.引起DNA损伤的因素有自发因素、物理因素、化学因素。 5.DNA复制时与DNA解链有关的酶和蛋白质有拓扑异构酶Ⅱ、解螺旋酶、单链DNA结合蛋白。 6.参与DNA切除修复的酶有DNA聚合酶Ⅰ、DNA连接酶、特异的核酸内切酶。 7.在真核生物中DNA复制的主要酶是DNA聚合酶δ。在原核生物中是DNA聚合酶Ⅲ。 8.端粒酶是端粒酶是含一段RNA的逆转录酶。 9.DNA的修复方式有错配修复、碱基切除修复、核苷酸切除修复、DNA的直接修复。 选择题 1.真核生物复制起点的特征包括（B） A. 富含G-C区 B. 富含A-T区 C. Z-DNA D. 无明显特征 2.插入序列（IS）编码（A） A.转座酶 B.逆转录酶 C. DNA合成酶 D.核糖核酸酶 3.紫外线照射对DNA分子的损伤主要是(D) A.碱基替换 B.磷酸脂键断裂 C。碱基丢失 D.形成共价连接的嘧啶二聚体 4.自然界中以DNA为遗传物质的大多数生物DNA的复制方式（C） A.环式 B.D环式 C.半保留 D.全保留 5.原核生物基因组中没有（A） A.内含子 B.外显子 C.转录因子 D.插入序列 6.关于组蛋白下列说法正确的是(D)
2009年山东大学考博–分子生物学试题 by admin on 2010年01月25日· 2 comments in 专业真题 一、名词解释： 1、顺式作用元件； 2、模序与结构域； 3、岗崎片段； 4、Southern Blotting； 5、遗传密码的简并性和摇摆性 二、简答： 1、基因治疗中常用病毒载体类型及特点？ 2、IP3-PKB介导的受体信号转导途径？ 3、蛋白质（酶）活性的快速调节方法有哪些？举三例说明磷酸/脱磷酸化是酶活性快速调节的重要方式。 4、细胞死亡受体蛋白的分类，组成成员的作用？ 5、细胞周期Cdk的调控作用。 6、原核生物DNA复制后随链合成中参与的酶和蛋白质及作用？ 7、举出5种类型RNA并简述其作用。 三、论述： 1、原核生物和真核生物表达调控的层次有哪些？调控机制。 2、原核生物和真核生物DNA复制的起始、延长和终止有哪些不同点？复制过程参与的因子及功能？ 08中科院分子生物学试题 1、表观遗传，及调控方式，还有蛋白质通过哪些共价修饰调控其功能？ 2、蛋白质与DNA结合的方法和比较，EMSA和DNase1足迹法？ 3、密码子改造研究新蛋白药物，原理，关键和方法 4、设计研究未知基因（预测两个跨膜区域）功能的实验方案（不低于4个） 5、质粒改造原则 6、诱导全能干细胞的方法，实验方案等。（去年的nature上发表的） 个人认为除了第二和五题之外，其它的题目都属于一骑绝尘的，要么会，要么不会，想蒙是绝对没门的。 这门专业课能及格，我想都不错了，特别是1，3，6题。 不知道大家做的如何，反正第一题，我是意思都没看懂，不知道连续的3问是不是指1个东西。还是最后1问是单独的，与前面的2问无关
绪论 思考题：（P9） 1.从广义和狭义上写出分子生物学的定义？ 广义上讲的分子生物学包括对蛋白质和核酸等生物大分子结构与功能的研究，以及从分子水平上阐明生命的现象和生物学规律。 狭义的概念，即将分子生物学的范畴偏重于核酸（基因）的分子生物学，主要研究基因或DNA结构与功能、复制、转录、表达和调节控制等过程。其中也涉及与这些过程相关的蛋白质和酶的结构与功能的研究。 2、现代分子生物学研究的主要内容有哪几个方面？什么是反向生物学？什么是 后基因组时代？ 研究内容： DNA的复制、转录和翻译；基因表达调控的研究；DNA重组技术和结构分子生物学。 反向生物学：是指利用重组DNA技术和离体定向诱变的方法研究已知结构的基因相应的功能，在体外使基因突变，再导入体内，检测突变的遗传效应，即以表型来探索基因结构。 后基因组时代：研究细胞全部基因的表达图式和全部蛋白质图式，人类基因组研究由结构向功能转移。 3、写出三个分子生物写学展的主要大事件（年代、发明者、简要内容） 1953年Watson和Click发表了?脱氧核糖核苷酸的结构?的著名论文，提出了DNA的双螺旋结构模型。 1972~1973年，重组DNA时代的到来。H.Boyer和P.Berg等发展了重组DNA 技术，并完成了第一个细菌基因的克隆，开创了基因工程新纪元。 1990~2003年美、日、英、法、俄、中六国完成人类基因组计划。解读人类遗传密码。 4、21世纪分子生物学的发展趋势是怎样的？ 随着基因组计划的完成，人类已经掌握了模式生物的所有遗传密码。又迎来了后基因组时代，人类基因组的研究重点由结构向功能转移。相关学说理论相应诞生，如功能基因组学、蛋白质组学和生物信息学。生命科学又进入了一个全新的时代。 第四章 思考题：（P130） 1、基因的概念如何？基因的研究分为几个发展阶段？ 概念：基因是原核、真核生物以及病毒的DNA和RNA分子中具有遗传效应的核苷酸序列，是遗传的基本单位和突变单位以及控制形状的功能单位。 发展阶段：○120世纪50年代以前，主要从细胞的染色体水平上进行研究，属于基因的染色体遗传学阶段。 ○220世纪50年代以后，主要从DNA大分子水平上进行研究，属于分
问答题： 1 衰老与基因的结构与功能的变化有关，涉及到：（1）生长停滞；（2）端粒缩短现象；（3）DNA损伤的累积与修复能力减退；（4）基因调控能力减退。 2 超螺旋的生物学意义：（1）超螺旋的DNA比松驰型DNA更紧密，使DNA分子体积变得更小，对其在细胞的包装过程更为有利；（2）超螺旋能影响双螺旋的解链程序，因而影响DNA分子与其它分子（如酶、蛋白质）之间的相互作用。 3 原核与真核生物学mRNA的区别： 原核：（1）往往是多顺反子的，即每分子mRNA带有几种蛋白质的遗传信息（来自几个结构基因）。（2）5端无帽子结构，3端一般无多聚A尾巴。（3）一般没有修饰碱基，即这类mRNA分子链完全不被修饰。 真核：（1）5端有帽子结构（2）3端绝大多数均带有多聚腺苷酸尾巴，其长度为20-200个腺苷酸。（3）分子中可能有修饰碱基，主要有甲基化，（4）分子中有编码区与非编码区。 4 tRNA的共同特征： （！）单链小分子，含73-93个核苷酸。（2）含有很多稀有碱基或修饰碱基。（3）5端总是磷酸化，5末端核苷酸往往是pG。（4）3端是CPCPAOH序列。（5）分子中约半数的碱基通过链内碱基配对互相结合，开成双螺旋，从而构成其二级结构，开头类似三叶草。（6）三级结构是倒L型。 5 核酶分类：（1）异体催化的剪切型，如RNaseP；（2）自体催化的剪切型，如植物类病毒等；（3）内含子的自我剪接型，如四膜虫大核26SrRNA前体。 6 hnRNA变成有活性的成熟的mRNA的加工过程： （1）5端加帽；（2）3端加尾（3）内含子的切除和外显子的拼接；（4）分子内部的甲基化修饰作用，（5）核苷酸序列的编辑作用。 7 反义RNA及其功能： 碱基序列正好与有意义mRNA互补的RNA称为反意义或反义RNA，又称调节RNA，这类RNA是单链RNA，可与mRNA配对结合形成双链，最终抑制mRNA作为模板进行翻译。这是其主要调控功能，还可作为DNA复制的抑制因子，与引物RNA互补结合抑制DNA的复制，以及在转录水平上与mRNA5末端互补，阻止RNA合成转录。 8 病毒基因组分型：（1）双链DNA（2）单链正股DNA（3）双链RNA（4）单链负股RNA（5）单链正股RNA 9 病毒基因组结构与功能的特点： （1）不同病毒基因组大小相差较大；（2）不同病毒的基因组可以是不同结构的核酸。（3）病毒基因组有连续的也有不连续的；（4）病毒基因组的编码序列大于90%；（5）单倍体基因组，（6）基因有连续的和间断的，（7）相关基因丛集；（8）基因重叠（9）病毒基因组含有不规则结构基因，主要类型有：a几个结构基因的编码区无间隔；bmRNA没有5端的帽结构；c结构基因本身没有翻译起始序列。 10 原核生物基因组的结构的功能特点： （1）基因组通常仅由一条环状双链DNA分子组成。 （2）基因组中只有1个复制起点。 （3）具有操纵子结构。（4）编码顺序一般不会重叠。（5）基因是连续的，无内含子，因此转录后不需要剪切。（6）编码区在基因组中所占的比例（约占50%）远远大于真核基因组，但又远远小于病毒基因组。（7）基因组中重复序列很少（8）具有编码同工酶的基因。（9）细菌基因组中存在着可移动的DNA序列，包括插入序列和转座子。 （10）在DNA分子中具有多种功能的识别区域。 11??真核生物基因组结构与功能的特点：
2009 年山东大学考博–分子生物学试题by admin on 2010年01月25日·2 comments in专业真题 一、名词解释： 1、顺式作用元件； 2、模序与结构域； 3、岗崎片段； 4、Southern Blotting； 5、遗传密码的简并性和摇摆性 二、简答： 1、基因治疗中常用病毒载体类型及特点？ 2、IP3-PKB 介导的受体信号转导途径？ 3、蛋白质（酶）活性的快速调节方法有哪些？举三例说明磷酸 / 脱磷酸化是酶活性快速调节的重要方式。 4、细胞死亡受体蛋白的分类，组成成员的作用？ 5、细胞周期 Cdk 的调控作用。 6、原核生物 DNA复制后随链合成中参与的酶和蛋白质及作用？ 7、举出 5 种类型 RNA并简述其作用。 三、论述： 1、原核生物和真核生物表达调控的层次有哪些？调控机制。 2、原核生物和真核生物 DNA复制的起始、延长和终止有哪些不同点？复制过程 参与的因子及功能？ 08 中科院分子生物学试题 1、表观遗传，及调控方式，还有蛋白质通过哪些共价修饰调控其功能？ 2、蛋白质与DNA结合的方法和比较，EMSA和 DNase1足迹法？ 3、密码子改造研究新蛋白药物，原理，关键和方法 4、设计研究未知基因（预测两个跨膜区域）功能的实验方案（不低于 4 个） 5、质粒改造原则 6、诱导全能干细胞的方法，实验方案等。（去年的nature上发表的） 个人认为除了第二和五题之外，其它的题目都属于一骑绝尘的，要么会，要么不会，想蒙是 绝对没门的。 这门专业课能及格，我想都不错了，特别是1， 3， 6 题。 不知道大家做的如何，反正第一题，我是意思都没看懂，不知道连续的 3 问是不是指 1 个东西。还是最后 1 问是单独的，与前面的 2 问无关
分子生物学实验技术 目录 实验一细菌的培养 2 实验二质粒DNA的提取 3 实验三紫外吸收法测定核酸浓度与纯度 4 实验四水平式琼脂糖凝胶电泳法检测DNA 5 实验五质粒DNA酶切及琼脂糖电泳分析鉴定 7 实验六植物基因组DNA提取、酶切及电泳分析 8 实验七聚合酶链反应（PCR）技术体外扩增DNA 9 实验八 RNA提取与纯化 11 实验九 RT-PCR扩增目的基因cDNA 13 实验十质粒载体和外源DNA的连接反应 15 实验十一感受态细胞的制备及转化 16 实验十二克隆的筛选和快速鉴定 18 实验十三 DNA分析——Southern杂交 19 一基本操作 实验一、细菌培养 实验二、质粒DNA提取 实验三、紫外吸收法测定核酸浓度与纯度 实验四、水平式琼脂糖凝胶电泳法检测DNA 实验五、质粒DNA酶切及琼脂糖电泳分析鉴定 实验六、植物基因组DNA提取、定量、酶切及电泳分析实验八、植物RNA提取及纯化 二、目的基因获取
实验七、聚合酶链式反应（PCR）技术体外扩增DNA 实验九、RT-PCR扩增目的基因cDNA 三、目的基因的克隆和表达 实验十、质粒载体和外源DNA的连接反应 实验十一、感受态细胞的制备及转化 实验十二、克隆的筛选和快速鉴定 实验十三、DNA分析——Southern杂交 实验一细菌的培养 一、目的 学习细菌的培养方法及培养基的配置。 二、原理 在基因工程实验和分子生物学实验中，细菌是不可缺少的实验材料。质粒的保存、增殖和转化；基因文库的建立等都离不开细菌。特别是常用的大肠杆菌。 大肠杆菌是含有长约3000kb的环状染色体的棒状细胞。它能在仅含碳水化合物和提供氮、磷和微量元素的无机盐的培养基上快速生长。当大肠杆菌在培养基中培养时，其开始裂殖前，先进入一个滞后期。然后进入对数生长期，以20~30min复制一代的速度增殖。最后，当培养基中的营养成分和氧耗尽或当培养基中废物的含量达到抑制细菌的快速生长的浓度时，菌体密度就达到一个比较恒定的值，这一时期叫做细菌生长的饱和期。此时菌体密度可达到 1×109~2×109/mL。 培养基可以是固体的培养基，也可以是液体培养基。实验室中最常用的是LB培养 基。 三、实验材料、试剂与主要仪器 （一）实验材料 大肠杆菌 （二）试剂 1、胰蛋白胨 2、酵母提取物
核酸结构与功能 一、填空题 1．病毒ΦX174及M13的遗传物质都是单链DNA 。 2．AIDS病毒的遗传物质是单链RNA。 3．X射线分析证明一个完整的DNA螺旋延伸长度为 3.4nm 。 4．氢键负责维持A-T间（或G-C间）的亲和力 5．天然存在的DNA分子形式为右手B型螺旋。 二、选择题（单选或多选） 1．证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是：肺炎球菌在老鼠体内的毒性和T2噬菌体感染大肠杆菌。 这两个实验中主要的论点证据是（C ）。 A．从被感染的生物体内重新分离得到DNA作为疾病的致病剂 B．DNA突变导致毒性丧失 C．生物体吸收的外源DNA（而并非蛋白质）改变了其遗传潜能 D．DNA是不能在生物体间转移的，因此它一定是一种非常保守的分子 E．真核心生物、原核生物、病毒的DNA能相互混合并彼此替代 2．1953年Watson和Crick提出（ A ）。 A．多核苷酸DNA链通过氢键连接成一个双螺旋 B．DNA的复制是半保留的，常常形成亲本-子代双螺旋杂合链 C．三个连续的核苷酸代表一个遗传密码 D．遗传物质通常是DNA而非RNA E．分离到回复突变体证明这一突变并非是一个缺失突变 3．DNA双螺旋的解链或变性打断了互补碱基间的氢键，并因此改变了它们的光吸收特性。以下哪些是对DNA的解链温度的正确描述？（ CD ） A．哺乳动物DNA约为45℃，因此发烧时体温高于42℃是十分危险的 B．依赖于A-T含量，因为A-T含量越高则双链分开所需要的能量越少 C．是双链DNA中两条单链分开过程中温度变化范围的中间值 D．可通过碱基在260nm的特征吸收峰的改变来确定 E．就是单链发生断裂（磷酸二酯键断裂）时的温度 4．DNA的变性（ACE ）。A．包括双螺旋的解链 B．可以由低温产生C．是可逆的D．是磷酸二酯键的断裂E．包括氢键的断裂 5．在类似RNA这样的单链核酸所表现出的“二级结构”中，发夹结构的形成（AD ）。 A．基于各个片段间的互补，形成反向平行双螺旋 B．依赖于A-U含量，因为形成的氢键越少则发生碱基配对所需的能量也越少 C．仅仅当两配对区段中所有的碱基均互补时才会发生 D．同样包括有像G-U这样的不规则碱基配对 E．允许存在几个只有提供过量的自由能才能形成碱基对的碱基 6．DNA分子中的超螺旋（ACE ）。
《分子生物学》考试试题B 课程号：66000360 考试方式：闭卷 考试时间： 一、名词解释（共10题，每题2分，共20分） 1. SD 序列 2. 重叠基因 3．ρ因子 4．hnRNA 5. 冈崎片段、 6. 复制叉(replication fork) 7. 反密码子(anticodon)： 8. 同功tRNA 9. 模板链(template strand) 10. 抑癌基因 二、填空题（共20空，每空1分，共20分） 1.原核基因启动子上游有三个短的保守序列,它们分别为____和__区. 2.复合转座子有三个主要的结构域分别为______、______、________。 3.原核生物的核糖体由_____小亚基和_____大亚基组成，真核生物核糖糖体由_____小亚基和_______大亚基组成。 4.生物界共有___个密码子，其中__ 个为氨基酸编码，起始密码子为__ _______；终止密码子为_______、__________、____________。 5. DNA生物合成的方向是_______，冈奇片段合成方向是_______。 6.在细菌细胞中，独立于染色体之外的遗传因子叫_______。它是一
种_______状双链DNA，在基因工程中，它做为_______。 三．判断题（共5题，每题2分，共10分） 1.原核生物DNA的合成是单点起始，真核生物为多点起始。( ) 2.在DNA生物合成中，半保留复制与半不连续复制指相同概念。( ) 3.大肠杆菌核糖体大亚基必须在小亚基存在时才能与mRNA结合。( ) 4.密码子在mRNA上的阅读方向为5’→ 3’。( ) 5.DNA复制时，前导链的合成方向为5’→ 3’，后随链的合成方向也是5’→ 3’。（） 四、简答题（共6题，每题5分，共30分） 1.简述三种RNA在蛋白质生物合成中的作用。 2.蛋白质合成后的加工修饰有哪些内容? 3.简述人类基因组计划的主要任务。 4.简述现代分子生物学的四大研究热点。 5.何谓转座子?简述简单转座子发生转座作用的机理。 6.简述大肠杆菌乳糖操纵子与色氨酸操纵子在阻遏调控机制上有那些区别？ 四、问答题（共2题，共20分） 1.叙述蛋白质生物合成的主要过程。（10分） 2.请叙述真核基因的表达调控主要发生在那些环节？分别是怎样进行 的？（10分）
浙江大学医学博士考试分子生物学（乙）2005-2015年真题2015年分子生物学（乙） 1.什么是基因转录？什么是基因表达？两者区别？（10分） 2.染色质状态改变的机制，基因选择性开关的可能临床应用。（10分） 3.什么是RNA剪接？什么是RNA编辑？什么是选择性剪接？（10分） 4.如果组织中某种蛋白表达量很低，如何获得高浓度的这种蛋白？（10分） 5.什么是非编码RNA？有哪些？长链非编码RNA的功能。（10分） 6.什么是遗传？什么是表观遗传？表观遗传的分子机制。（10分） 7.核酸测序的发展史，当代最主流的测序技术在分子生物学中的应用。（10分） 8.如何确定P53蛋白和蛋白X有相互作用。（10分） 9.什么是超分辨率荧光显微镜（2014年诺贝尔化学奖）？在分子生物学中的应用？你想拥有怎样的显微镜？（10分） 10.从分子水平上设计试验证明镉对血管有损伤作用。（10分） 2014年分子生物学（乙） 1.图示基因表达过程并指出调控关键点。10分 2.蛋白质现实中以三级以上结构存在，为什么教科书中从蛋白质一、二级结构写起？10分 3.什么是siRNA、miRNA，其作用的异同点？10分 4.什么是γH2AX，为什么可用于DNA损伤的检测？8分 5.解释细胞自噬过程。7分 6.DNA、RNA、蛋白质相互作用的方式及涉及的分子生物学现象。10分 7.设计试验使得人源性基因在大肠杆菌中高表达。10分 8.什么是PM2.5？设计试验从细胞水平研究其特点及作用机制。10分 9.曹操家族基因研究发现，曹操非汉相曹参后代，同时推翻了曹操为夏侯氏抱养而来的说法。 请你写一篇科普小论文介绍其中的一些分子生物学知识并证明你的结论。10分10.2013诺贝尔奖，囊泡运输的知识。15分 2013年分子生物学（乙） 浙大考博分子生物学 名词解释（全中文，9题，36分）： 细胞骨架、细胞增殖、干细胞、细胞分化、 细胞膜的跨膜转运、信号肽、自噬小体、蛋白激酶、呼吸链。 1.细胞连接的概念，分类及特点。 2.线粒体在细胞死亡中的作用：
2006 年《分子生物学实验技术》实验内容 RT-PCR （一）总 RNA的提取 实验安排：每两人抽提一管。为了使操作同步以节省时间，各组样品请一起离心。 操作步骤： TM（苯冰预冷的900μlLS -Biotragents液体样品加入 1.5ml Ep管中，再加入1、将100μ l 酚和异硫氰酸胍的混合物）。 2、将样品剧烈混合后，在室温放置5min。 3、加入200μl 氯仿，颠倒Ep 管混和两次，并剧烈振荡混和10s。 4、在4℃条件下，以10000×g 离心15min。 5、将上层水相转移到一个新的Ep 管中，加入等体积的异丙醇（Isopropanol）并混匀，然后在4℃放置至少10min。 6、在4℃条件下，以10000×g离心15min 后，小心并尽可能地去除全部上清夜。 7、用1ml 75%乙醇洗涤RNA 沉淀和管壁。 8、将RNA 沉淀进行干燥（不能完全干燥）处理后，用10μl 无RNase污染的水（RNase- Free Water）将RNA 溶解并于-20℃保存。 注意事项： 1、所有的玻璃器皿均应在使用前于180℃的高温下干烤6hr 或更长时间。 2、所用的塑料材料，如吸头、离心管等需用0.1% DEPC 水浸泡过夜。 3、配制的溶液应尽可能用0.1% DEPC，在37℃处理12hr 以上。然后用高压灭 菌除去残留的DEPC。不能高压灭菌的试剂，应当用DEPC 处理过的无菌双蒸水 配制，然后经0.22μm 滤膜过滤除菌。 4、操作人员需在超净工作台上操作，并戴一次性口罩、手套，实验过程中手套要勤换。 二）反转录 实验安排： 每人做一管反应体系（20μ l）：按下列顺序加样 μl4 5× Buffer