实验1 ArcGIS Desktop入门操作
一、实验目的
1.熟悉ArcMap，ArcCatalog，ArcToolbox的运行环境；
2.掌握ArcMap的对图形和图像的显示、浏览等基本操作；
3.掌握ArcCatalog中空间数据库（Geodatabase）的建立过程；
4.掌握ArcToolbox工具箱的使用方法。
二、实验背景
Desktop简介
ArcMap是一个用于编辑、显示、查询和分析地图数据，以地图为核心的模块，它是一个使用简单、功能强大的集成应用环境。
ArcCatalog提供空间和表格GIS数据的管理、生成和组织。ArcGIS既支持基于文件的特征模型，又支持基于DBMS的特征模型。
ArcToolbox是一个进行空间数据管理、分析和转换的工具箱。ArcToolbox 提供了数据转换、管理坐标系统、以及改变地图投影的工具，对ArcInfo用户而言，ArcToolbox提供了更多更为复杂的数据转换空间分析工具。
需要特别指出的是ArcMap、ArcCatalog及ArcToolbox之间是可以相互协同工作的。通常用ArcCatalog进行数据的创建、组织和管理，用ArcMap进行数据的显示、编辑和制图，而使用ArcToolbox进行各种数据的分析操作。三者相互协同，以满足用户的各种需求。
空间数据库(Geodatabase)
Geodatabase是ArcInfo发展到ArcGIS时候推出的一种全新的数据格式，是建立在关系型数据库管理信息系统之上新的数据模型。Geodatabase中可以包含特征要素集（Feature Dataset）和栅格数据集（Raster dataset）。每一个要素集（Dataset）都可以有自己的坐标系统，Feature Dataset下的要素类（Feature class）默认继承它上一级Dataset的空间参考。通常第一个加入Geodatabase的要素类的坐标系统作为默认的坐标系统，以后加入的会以此坐标系统为标准进行转换。
Feature Class：单一的主题（图层）和几何特征（点、线、面）；Feature Datasets：通常是同一地区，不同的主题的地图数据的集合。
顺便介绍一下Shapefi1e文件格式。Shapefi1e是ArcMap内部使用的一种采用非拓扑结构进行组织的空间数据格式，用于存贮空间及其属性数据。目前很多的图形数据仍然采用该文件格式。它由至少三个文件组成，其扩展名和含义如下：“.SHP”——存储地理数据的几何特征，如坐标、长度、面积等。
“.SHX”——存储地理数据几何特征的索引。
“.DBF”——dBASE文件，存储地理数据的属性信息。
三、实验内容
1.在ArcMap中，加载并浏览石景山地区的空间数据。
2.在ArcCatalog中，建立石景山地区的空间数据库，并通过导入要素类的
方法建立一个空间数据集。这部分是本实验的重点和难点所在，要求掌
握其操作的要领：空间数据集（矢量数据集合Feature Datasets，栅格数
据集合Raster Datasets）的空间参照体系的建立。
3.在ArcToolbox中，熟悉其基本结构框架及功能。
四、实验数据
五、ArcMap环境下的基本操作
1.进入ArcMap环境
(1)启动ArcMap。一般启动ArcMap有两种方法：如果软件在安装过程中已经
创建了桌面快捷键，直接双击ArcMap快捷键。如果没有创建快捷键，则可通过单击开始\程序\ArcGIS \ArcMap。
(2)弹出ArcMap对话框，选择ArcMap的三种不同的开始方式，如图1-1所示。
点击【Ok】按钮进入ArcMap。
创建一幅新的空地图
应用地图模版创建新地图
打开一幅已经存在的地图
图1-1
2.ArcMap的窗口组成
ArcMap的窗口组成包括主菜单（Main Menu）、标准工具条（Standard Toolbar）、内容表（Table of Contents）、地图显示窗口（Display Window）、绘图工具条（Draw Toolbar）、状态栏等，如图1-2所示。其中：内容表（Table of Contents）用于显示地图文档所包括的数据集、数据层，同时它还可以控制数据集、数据层的显示与否，设置数据要素的显示方法，如点状要素符号的大小，线状要素的线型，面状要素的颜色等。
地图显示窗口（Display Window）用于显示地图所包括的所有地理要素。ArcMap提供了两种地图显示方式：一种是数据视图（Data View）；一种是版面视图（Layout View）。
小提示：
ArcMap的操作界面可以根据用户的需求进行适当的变化和调整（除了主菜单），这些变化和调整主要包括：
(1)工具条（Toolbar）的调整和变化：用户可以根据需要改变工具条摆放的
位置或决定某些工具条的显示与否。
(2)内容表的调整和变化：用户可以根据需要改变内容表摆放的位置或决定
某些工具条的显示与否。
标准工具条内容表地图显示窗
状态栏
图1-2
3.加载地图数据
点击标准工具栏上的按钮，在弹出的Add Data对话框中，选中实验目录（E1\vector）下的数据：“主要道路图层”、“居民地图层”、“行政区划图层”，将数据加载到视图窗口，如图1-3所示。
图1-3
ArcMap 不仅可以浏览矢量数据，还可以查看栅格数据，具体操作如下：添加实验目录“E1\raster ”下的栅格数据图层Rasterdata1和Rasterdata2到视图窗口中。
图
1-4 点击这里来
修改渐变色
小提示：
为了更好的数据，点击内容表中Raster Data图层下的颜色带，在弹出的select color对话框中选择一个新的渐变色条带来显示数据，如图1-4所示。
内容表有三种显示状态：Display、Source及Selection。在Display状态下，内容表显示了所有地理要素的类型及显示状态；在Source状态下，内容表还显示了地理要素的存储路径；在Selection状态下，内容表则显示特征要素的选中状态。点击内容表下的Display、Source、Selection标签可以实现不同状态之间的切换。
4.浏览地图数据
ArcMap提供了两种地图显示浏览方式：一种是数据视图（Data View）；另一种是版面视图（Layout View）。
小提示：
在数据视图上，可以进行各种针对地理要素的分析操作，但是该视图没有各种地图辅助要素；在版面视图上，可以加载和编辑地图辅助要素，如比例尺、指北针、图名、图例等。可以通过点击标准工具条上的View\Data View(或Layout View)来实现两种状态之间的切换。
数据视图（Data View）状态
数据显示工具（如图1-5所示）可以对地图进行浏览、查询、检索分析等各种操作。
图1-5
将鼠标置于Tools工具条上的各个工具上，通过查看状态栏中的功能提示信息，了解各个工具的功能，并在地图上实现这些功能。
版面视图(Layout View)状态
在版面视图状态下，可以加载和编辑图名、图例、指北针等地图辅助要素，如图1-5所示，生成一幅完整的地图，如图1-6所示。
图1-6
输出显示工具（如图1-7所示）可以实现输出地图的显示、浏览、编辑等操
作。
5.保存地图文档
点击主菜单上的File\Save，保存地图文档。ArcMap 中使用扩展名为.mxd 的
文件保存地图，这个文件被称为地图文档（或简称为地图）。
小提示：
地图文档是一个ArcMap自带的工程文件，它用于存储用户在当前ArcMap
环境下设置的各项内容。当用户再次在ArcMap中打开地图文档，用户可以在原
有基础上继续编辑完善。
当用户完成地图文档的编辑后，为了避免由于绝对路径的改变导致在地图
文档打开后无法显示地图数据的情况，通常将数据文档数据源的路径设置为相对
路径，设置方法如下：
点击主菜单上的File/Document properties，打开文档属性对话框，点击【Data
source options】按钮，点击选中“store relative path name to data source”前的复选按
钮，然后点击【ok】按钮，最后点击【确定】按钮即可。
六、ArcCatalog环境下的基本操作
1.启动ArcCatalog
单击开始\程序\ArcGIS\ArcCatalog，进入ArcCatalog的界面。
ArcCatalog窗口主要由主菜单、标准工具条、目录树、视图窗口组成（如图1-8所示）。
主菜单
标准工具条
视图窗口
目
录
树
窗
口
图1-8
2.文件夹链接
将实验数据目录加入文件链接：点击标准工具条上的按钮，打开Connect to Folder对话框，如图1-9所示，选择实验数据所在目录，点击【确定】按钮。小提示：
在ArcCatolog的目录树窗口中查找定位地图数据时，有时看不到所需要的盘符，这是因为没有创建到该盘的链接。使用文件夹链接功能，不仅可以看到缺省的盘符，也可以建立指定的文件目录的快捷方式。
图1-9
3.创建空间数据库
在所建目录文件夹上点击右键，在弹出的快捷菜单上点击New\Personal Geodatabase，创建一个空间数据库文件，系统自动将其命名为“New Personal Geodatabase.mdb”，用户也可以将其重命名。
4.添加特征要素
（1）创建一个特征要素集（Feature Datasets）
1)右键点击新建的空间数据库，在弹出的快捷菜单中，点击New\feature
dataset。打开New Feature Dataset对话框，在name文本框中输入要素集
的名称：shijingshan，点击【下一步】按钮。
2)选择地理坐标系（选择Beijing 1954）：在目录树窗口中点击Geographic
Coordinate System\Asia\Beijing 1954，如图1-10所示，点击【下一步】按
钮。
图1-10
3)选择高程坐标系统（选择Yellow Sea 1956）：在目录树窗口中点击Vertical
Coordinate System\Asia\Yellow Sea 1956，如图1-11所示，点击【下一步】按钮。
图1-11
4)选择地理坐标系统及高程坐标系统的容差：在Accept t default resolution
and domain extend前的复选框中打勾，如图1-12所示，然后点击【Finish】按钮，完成要素集的建立。
图1-11
（2）加入特征要素类（Feature class）
特征要素类有两种建立方式：导入已有的矢量数据作为特征要素类或用户独立创建特征要素类。以导入已有的矢量数据为例：右键点击新建的要素集，在弹出的快捷菜单中点击导入单要素import\feature class（single）或者导入多要素feature class（multiple）。
选择feature class（multiple），点击Input文本框右侧的按钮选择实验数
据：主要道路图层.shp、行政区划图层.shp和居民地图层.shp，如图1-13所示，点击【OK】按钮。
图1-13
（3）特征要素的预览
在ArcCatalog目录树窗口中，点击选中shijingshan数据集，在视图窗口上点击“Preview”标签，查看要素集的缩略图，如图1-14所示。
图1-14
1)在视图窗口下方的“Preview”下拉列表中，点击选择“table”查看数据属性
表。
5.添加栅格要素
（1）创建一个栅格要素集（Raster Datasets）
1)右键点击新建的数据库，在弹出的快捷菜单中，点击New\Raster
dataset。打开Create Raster Dataset对话框，在Output Location文本框中设置添加要素集的存储路径；在Raster Dataset Name with Extension文本框中输入要素集的名称，如图1-15所示。
图1-15
2)点击Spatial Reference for Raster文本框右边的坐标系添加按钮，
打开Spatial Reference Properties对话框。点击【Select】按钮，打开Browse for Coordinate Systems对话框，为数据集添加空间坐标系统，如图1-16所示。
在XY Coordinate System和Z Coordinate System两个页面中分别定义平面和高程的参照体系，具体操作可参照上述添加特征要素部分内容。
图1-16
（2）导入栅格要素（Raster）
1)右键点击新建的栅格要素集，在弹出的捷菜单中点击Load\Load Data，
打开Mosiac对话框点击Input Raster文本框右端的按钮，添加北京地
区的两幅高程数据，如图1-17所示。
2)在Nodata Value 文本框中输入0，点击选中Covert 1 bit data to 8 bit data
前的复选框。然后点击【Ok】按钮，进行数据的拼接，并将拼接好的文
件存储于栅格数据集中。
详细的叙述。对于图幅范围的定义(X/Y Domain)有时也非常重要，例如，新建一 个空间数据库，来进行数据的采集，如果事先不获取图幅的范围来定义数据集的 空间范围，会导致建立的要素类无法加载到 ArcMap 中进行显示。 1 查看空间数据的坐标系统：根据已有的坐标信息，确定空间数据的坐标 系统。 2 定义空间数据的坐标系统：正确配置地图的坐标定义。 3 转换空间数据的坐标系统：转换为统一的坐标系统。 七、 ArcToolbox 环境下的基本操作 ArcToolbox 包括了极其丰富的空间数据分析处理工具，它由多个工具集 （Toolset）构成，能够完成各种不同类型的任务，每个主要工具集中又包含着不 同级别的子工具集，包含了数目极多的工具。 1. 打开 ArcToolbox 在 ArcMap 和 ArcCatalog 环境中均可以打开 ArcToolbox ： 在标准工具条上 点击 按钮即可。
带格式的 格式 的
带格式的 格式 的
2. 查看工具箱工具 查看工具箱工具 在 ArcToolbox 窗口的底部有四个标签：Favorite、Index、Search、Results。 Favorite 标签是以一种目录树的分类方式在窗口中显示 ArcToolbox 的各个工具； Index 标签则是将 ArcToolbox 中各个工具按名称字母的先后顺序进行排列显示； Search 标签则是进入工具搜索界面，帮助快速查找所需要的工具；Results 标签 相当于用户的使用日志，它记录了用户的使用信息。如图 1-1920 所示。
带格式的: 字体: Times New Roman 格式 的
小提示： 小提示： 如果用户知道所需使用工具的名称，可以直接借助 Search 搜索功能直接查 找出工具，否则可采用其他方法进行工具定位。
带格式的: 样式 标题 3 + 宋体, 格式 的 左 带格式的: 字体: 非加粗 格式 的 带格式的: 左, 缩进: 首行缩进: 格式 的 2 字符 带格式的 格式的
工具集窗口
查看方式标签 图 1-1920 3. 添加 删除工具箱 添加/删除工具箱 ArcToolbox 里的工具其实是存储在磁盘文件夹里的文件的索引，这些存储 在磁盘上文件以.tbx 为后缀名，用户可以根据需要复制和移动这些工具。此外， 还可以通过添加、删除索引的方式来修改 ArcToolbox 窗口中的工具列表，具体 操作如下： (1) 右键点击 ArcToolbox 窗口中的空白处，在弹出的快捷菜单中点击 Add Toolbox 选项，打开 Add Toolbox 对话框。 (2) 浏览到 Toolboxes 的安装目录下（比如 C:/Program Files/ArcGIS/ ArcToolbox/Toolboxes），如图 1-201 所示。
带格式的 格式 的 带格式的 格式 的 带格式的 格式 的
带格式的 格式 的
图 1-2021 (3) 点击选中需要添加的工具箱（也可以双击打开工具箱，选中其中的子工具箱 或工具），点击【Open】按钮，便可将工具箱（或工具）添加到 ArcToolbox 窗口的列表中了。 (4) 如果需要删除工具箱，则可以直接在 ArcToolbox 窗口中右键点击需要删除 的工具箱，在弹出的快捷菜单中点击 Remove 选项，删除该工具箱的索引。 小提示： 小提示： ArcToolbox 里的工具其实是工具文件的索引，这些文件存储在磁盘上以.tbx 为后缀名， 在 ArcToolbox 窗口中添加删除工具箱仅仅只是添加删除了工具箱的索引， 但如果是删除 ArcToolbox 中的工具，情况则有所不同，该操作会删除该工具在 磁盘上的存储文件，彻底删除该工具。 4. 创建个人工具箱 ArcGIS 允许用户创建自己的工具箱，在新建的工具箱里用户可以放入感兴 趣的工具集或工具，具体操作如下： (1) 在 ArcToolbox 窗口的空白处点击右键，在弹出的快捷菜单中点击 New Toolbox 选项，则在窗口中会生成一个新的工具箱。 (2) 右键点击新生成的工具箱，在弹出的快捷菜单中点击 Add/Tool，打开，然后 弹出 Add Tool 对话框，点击目标工具集或工具前的复选框，然后点击【Ok】 按钮，添加工具。此外，还可以右键点击新生成的工具箱，在弹出的快捷菜 单中点击 New/\ Toolset，给工具箱添加工具子集，结果如图 1-2111 所示。
带格式的 格式 的
带格式的: 编号 + 级别: 1 + 编 格式 的 号样式: 1, 2, 3, … + 起始编号: 1 + 对齐方式: 左侧 + 对齐位置: 0 厘米 + 缩进位置: 0.74 厘米 带格式的 格式 的 带格式的: 缩进: 首行缩进: 格式 的 符 带格式的 格式 的 带格式的 格式 的 带格式的: 字体: 非加粗 格式 的 带格式的 格式 的 带格式的 格式 的 带格式的 格式 的 2 字
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图 1-212 八、 特别提示 ArcGIS 桌面系统提供了全面的帮助，以解决用户在使用过程中遇到的问 题。在 ArcMap 和 ArcCatalog 的主菜单上均设有“help”菜单选项，以方便用户获 取帮助。
带格式的 格式 的
免疫组化技术全程原理 一、概念和常用方法介绍 1、定义 用标记的特异性抗体对组织切片或细胞标本中某些化学成分的分布和含量进行组织和细胞原位定性、定位或定量研究，这种技术称为免疫组织化学（immunohistochemistry）技术或免疫细胞化学（immunocytochemistry）技术。 2、原理 根据抗原抗体反应和化学显色原理，组织切片或细胞标本中的抗原先和一抗结合，再利用一抗与标记生物素、荧光素等的二抗进行反应，前者再用标记辣根过氧化物酶（HRP）或碱性磷酸酶（AKP）等的抗生物素（如链霉亲和素等）结合，最后通过呈色反应或荧光来显示细胞或组织中化学成分，在光学显微镜或荧光显微镜下可清晰看见细胞内发生的抗原抗体反应产物，从而能够在细胞爬片或组织切片上原位确定某些化学成分的分布和含量。 3、分类 1）按标记物质的种类，如荧光染料、放射性同位素、酶（主要有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶）、铁蛋白、胶体金等，可分为免疫荧光法、放射免疫法、免疫酶标法和免疫金银法等。 2）按染色步骤可分为直接法（又称一步法）和间接法（二步、三步或多步法）。与直接法相比，间接法的灵敏度提高了许多。 3）按结合方式可分为抗原-抗体结合，如过氧化物酶-抗过氧化物酶（PAP）法；亲和连接，如卵白素-生物素-过氧化物酶复合物（ABC）法、链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结（SP）法等，其中SP法是比较常用的方法；聚合物链接，如即用型二步法，此方法尤其适合于内源性生物素含量高的组织抗原检测。 4、目前几种常用免疫组化方法简单介绍 1）免疫荧光方法 是最早建立的免疫组织化学技术。它利用抗原抗体特异性结合的原理，先将已知抗体标上荧光素，以此作为探针检查细胞或组织内的相应抗原，在荧光显微镜下观察。当抗原抗体复合物中的荧光素受激发光的照射后即会发出一定波长的荧光，从而可确定组织中某种抗原的定位，进而还可进行定量分析。由于免疫荧光技术特异性强、灵敏度高、快速简便，所以在临床病理诊断、检验中应用较广。 2）免疫酶标方法
初中化学实验基本操作一、认识仪器：
二、安全要求： 1、不要用手接触药品，也不要把鼻孔凑到容器口，去闻药品的气味和尝试任何药品的味道。 2、实验剩余的药品既不要放回原瓶，也不要随意丢弃，更不要拿出实验室，要放入制定
容器内。 3、实验中要特别注意保护眼睛。万一眼睛里溅入了药液（尤其是有腐蚀性或有毒的药液），要立即用水冲洗（切不可用手揉眼睛）。洗的时候要眨眼睛，必要时请医生治疗，提倡使用防护眼镜。 4.在使用酒精灯时，绝对禁止向燃着的酒精灯里添加酒精，也绝对禁止用酒精灯引燃另一只酒精灯，必须用灯帽盖灭，不可用嘴吹灭。向灯内添加酒精时，不能超过酒精灯容积的2/3。万一洒出的酒精在桌面燃烧起来，不要惊慌，应立刻用湿抹布扑火。 三、基本操作： （一）取药品 1、固体药品 （1）粉末状：一横二送三直立，全落底。 （2）块状：一横二放三慢竖，缓缓滑。 2、液体药品 （1）大量：倒，塞倒放，签朝手，口挨口，缓缓倒。 （2）少量：胶头滴管：滴加时在容器正上方，防止玷污试管和污染试剂，不要平放或倒置，不能放在桌子上，用完用清水冲洗（滴瓶上的除外） （3）定量：量筒：量液时，量筒放平，视线与量筒内液体凹液面的最低处保持水平。 俯视：度数偏大仰视：读数偏小 3、气体收集 （1）排气法：向上排气法，适用于密度比空气大的，且不与空气反应的。 向下排气法，适用于密度比空气小的，且不与空气反应的。 （2）排水法：适用于难溶或不易溶于水的气体，且不与水反应。 （二）加热 仪器：酒精灯 1、（1）灯内酒精不多于2/3 （2）用外焰加热 2、给固体加热： （1）仪器：试管，蒸发皿 （2）注意事项：A.先预热，再固定。 B.试管口略向下倾斜（防止冷凝水倒流回热的试管底部使试管炸裂） C.试管外壁不能有水（炸裂） D.热试管不用冷水冲洗（炸裂） E.试管不接触灯芯（防止炸裂） 3、给液体加热 （1）仪器：试管，蒸发皿，烧杯，烧瓶（其中，后两个须垫石棉网） （2）注意事项：A.先预热，一直预热（来回移动试管）。 B.试管内液体不超过容积的1/3 C.试管与桌面成45度 D.试管口不朝着有人的方向 （三）称量：用托盘天平 零件：托盘（两个）平衡螺母，指针，分度盘，游码，标尺，砝码。 称量步骤： 1、称量前先把游码放在标尺的零刻度处，检查天平是否平衡。如果天平未达到平衡，调节平衡螺母，使天平平衡。 2、称量时把称量物放在左盘，砝码放在右盘。砝码用镊子夹取，先加质量大的砝码，再加质量小的砝码，最后移动游码，直到天平平衡为止。记录所加砝码和游码的质量。
免疫组化实验步骤 细胞和组织的固定 （一）固定 为了更好的保持细胞和组织原有的形态结构，防止组织自溶，有必要对细胞和组织进行固定。固定的作用不仅是使细胞内蛋白质凝固，终止或抑制外源性和内源性酶活性，更重要的是最大限度的保存细胞和组织的抗原性，使水溶性抗原转变为非水溶性抗原，防止抗原弥散。不同抗原，其稳定性也不相同，因而对固定剂的耐受性差异较大 （二）固定剂 用于免疫组织化学的固定剂种类较多，性能各异，在固定半稳定性抗原时，尤其重视固定剂的选择，介绍如下。 1．醛类固定剂双功能交联剂，其作用是使组织之间相互交联，保存抗原于原位，其特点是对组织穿透性强，收缩性小。有人认为它对IgM、IgA、J链、K 链和λ链的标记效果良好，背景清晰，是常用的固定剂。 1）4%多聚甲醛为我们常用固定剂 2）Bouin’s液 该固定液为组织学、病理学常用固定剂之一，对组织穿透力较强而收缩性较小，比单独醛类固定更适合免疫组化染色。Kayhko认为用于标记B细胞的J链较好，但Bullock则认为它可导致Igg γ重链变性，故必需加大第一抗体的浓度。 2．丙酮及醇类固定剂 系最初免疫细胞化学染色的固定剂，其作用是沉淀蛋白质和糖，对组织穿透性很强，保存抗原的免疫活性较好。但醇类对低分子蛋白质、多肽及胞浆内蛋白质保存效果较差，解决的办法是和其它试剂混合使用，如加冰醋酸、乙醚、氯仿、甲醛等。 丙酮的组织穿透性和脱水性更强，常用于冰冻切片及细胞涂片的后固定，保存抗原性较好，平时4。C低温保存备用，临用时，只需将涂片或冰冻切片插入冷丙酮内5-10min，取出后自然干燥，贮存于低温冰箱备用。 以上介绍了免疫组织化学中常用的固定液，用于免疫组化的固定剂种类很多，不同的抗原和标本需经过反复试验，选用最佳固定液，迄今尚无一种标准固定液可以用于各种不同的抗原固定。而且同一固定液固定的组织，免疫组化染色标记
免疫组化操作步骤集团标准化工作小组 #Q8QGGQT-GX8G08Q8-GNQGJ8-MHHGN#
免疫组化操作流程 试剂准备 1. PBS缓冲液（～）： NaCl 137mmol/L，KCl L，Na2HPO4 L， KH2PO4 L。 2. L柠檬酸盐缓冲液（CB，，1000ml）：柠檬酸三钠 3g，柠檬酸。即抗原修复液 : PBS+吐温-20（1000:1）洗液可全部运用PBST 4. 3% 甲醇-H2O2溶液：用30%H2O2和80%甲醇溶液配制。 5. 封片剂：中性树脂+二甲苯。 操作流程 免疫组织化学染色 SP法： 1. 脱蜡、水化： 脱蜡前，应将切片在60℃恒温箱中烘烤60~120分钟，观察石蜡应溶解。 从烤箱拿出切片后尽快置于二甲苯中浸泡30分钟，更换二甲苯后再浸泡30分钟； 无水乙醇中浸泡3分钟； 95%乙醇中浸泡3分钟； 70%乙醇中浸泡3分钟（我用80%）； 50%乙醇中浸泡3分钟； 自来水中浸泡3分钟；
梯度脱蜡 2. 抗原修复：（用于福尔马林固定的石蜡包埋组织切片） 高压热修复高压锅里放少许水，用一量杯或容器（大小能容纳玻片架为宜）装抗原修复液放入高压锅里一起煮沸，再放入玻片架，盖上不锈钢高压锅的盖子，将排气阀门套上，待听到阀门冒气时，即可倒计时2min，之后将玻片杯一起放入凉水中，静置15min，平衡至室温。电磁炉1000W 2min。 3.丢弃抗原修复液，将玻片浸泡在去离子水中（时间不限）可省略 4.用组织笔沿组织边缘画线（可与组织边缘留适当间隙），画完立即放入PBST溶液中浸泡3遍X3min（三个容器，每个容器3min，时间不限制）。 5. 3%H2O2滴加在切片上，室温静置15分钟(3%的H2O2用30%的 H2O2加双蒸水稀释10倍，现配现用。目的为阻断内源性过氧化物酶)； 6. PBST洗3次各3分钟(过三缸) 7. 滴加正常山羊血清封闭液,室温30分钟。用与一抗不同源的血清即可，本人用Western-blotting的含胎牛血清封闭液。 8. 甩去封闭液（注：不要冲洗），滴加一抗50ul（至少50ul否则易干片），4℃孵育过夜。4℃过夜后需在37℃复温45分钟（未验证：室温静置1小时或者4℃过夜或者37℃1小时。）。 9. PBST洗3次各3分钟；
§1.3化学实验基本操作 [学习目标：] 1、知识与技能： （1）知道化学实验是进行科学探究的重要手段，正确的实验原理和操作方法是实验成功的关键； （2）能进行药品的取用、加热、洗涤仪器等基本实验操作。 2、过程与方法： （1）学会运用观察、实验等方法获取信息； （2）能用化学语言表述有关的信息，并用比较、观察等方法对获取信息进行加工。[学习重点：]各项实验基本操作。（内容如下） [学习内容：]（主要知识点） 一、常用仪器及使用方法 （一）用于加热的仪器－－试管、烧杯、烧瓶、蒸发皿、锥形瓶 可以直接加热的仪器是－－试管、蒸发皿、燃烧匙 只能间接加热的仪器是－－烧杯、烧瓶、锥形瓶（垫石棉网，目的：使仪器受热均匀） 不可加热的仪器——量筒、集气瓶、漏斗。 （二）测容器－－量筒 量取液体体积时，量筒必须平放。视线与液体凹液面的最低点保持水平。 仰视时读出的数偏小(即：实际的>读数)；俯视读出的数偏大（即：实际的<读数） 量筒不能用来加热，不能用作反应容器。 （三）称量器－－托盘天平（用于粗略的称量，一般能精确到0.1克。） 注意点：称量物和砝码的位置为“左物右码”。 正确放物时读数是：物质质量=砝码质量+游码质量 物码放反时的读数：物质质量=砝码质量-游码质量（即：整数-小数部分） （四）加热器皿－－酒精灯 （1）酒精灯的使用要注意“三不”：①不可向燃着的酒精灯内添加酒精；②不可用燃着的酒精灯直接点燃另一盏酒精灯；③熄灭酒精灯应用灯帽盖熄，不可吹熄。 （2）酒精灯内的酒精量不可超过酒精灯容积的2/3也不应少于1/4。 （3）酒精灯的火焰分为三层，外焰、内焰、焰心。用酒精灯的外焰加热物体。 二、药品的取用 1、药品的存放： 一般固体药品放在广口瓶中，液体放在细口瓶中（少量的液体药品可放在滴瓶中）。 2、药品取用量： 如没有说明用量，应取最少量：固体以盖满试管底部为宜，液体以1～2mL为宜。（多取的试剂不可放回原瓶，也不可乱丢，更不能带出实验室，应放在指定的容器内。） 3、固体药品的取用 （1）粉末状及小粒状药品：用药匙或纸槽②块状及条状药品：用镊子夹取 取块状固体药品操作：一横(先把容器横放)；二平(把药品或金属颗粒放入试管口)；三慢滑（把容器慢慢竖立起来，使其缓缓滑到试管底部，以免打破容器） （2）取块状粉末状药品操作：一倾（先使试管倾斜）二送(小心送至试管底部)三直立（然
免疫组化超详细步骤 Prepared on 22 November 2020
免疫组化 一实验目的：分别用KRAS、NRAS、HRAS蛋白抗体检测肺癌组织中KRAS、NRAS、HRAS蛋白的表达情况 二实验原理:应用基本原理——抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使的（、酶、、）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和），对其进行定位、定性及定量的研究，称为或. 三实验试剂及耗材:经病理医生确认的肺癌组织切片、KRAS、NRAS、HRAS蛋白抗体、DAB显色试剂盒、抗原修复液、PBS、苏木素染料、1%盐酸酒精溶液、%氨水、二甲苯、等 四实验设备：切片机、4℃冰箱、显微镜、烤片机 五主要试剂配置: 缓冲液 应用液配成1000毫升溶液 应用液BNa2HPO4·配成1000毫升溶液 配制1000毫升PBS需要14毫升应用A液，36毫升应用B液，加。 枸橼酸钠抗原修复液 应用液A枸橼酸配成1000毫升溶液 应用液B柠檬酸三钠（三水合柠檬酸三钠）配成1000毫升溶液 配制500毫升抗原修复液需要9毫升应用A液，41毫升应用B液。 苏木素染液配方：苏木素2g,无水乙醇250毫升，硫酸铝蒸馏水750毫升，碘酸钠，冰醋酸20毫升。先将苏木素溶于无水乙醇，再将硫酸铝溶于蒸馏水水中。两液溶解后将其混合，加入碘酸钠，最后加入冰醋酸。 抗体说明书建议的抗体稀释度 N-Ras1:50-1:500 H-Ras1:50-1:500 K-Ras1:20-1:200 六实验步骤： 1组织常规石蜡切片厚度3-5um，防脱片捞片后晾干，放入72℃烤箱烤片2小时。 2切片脱蜡水化程序 ⑴二甲苯Ⅰ、Ⅱ脱蜡各12分钟； ⑵无水乙醇Ⅰ、Ⅱ各3分钟；（洗二甲苯） ⑶95%乙醇3分钟； ⑷85%乙醇3分钟； 3自来水漂洗3分钟，洗涤一定要充分。 4组织修复采用高温高压法：压力锅中加入，抗原修复液约1000ml，切片插入塑料架上，放入压力锅，盖上锅盖（此时不扣上压力阀）1600W预热至沸腾，扣上压力阀1300W，待高压锅阀门喷气开始计时，修复时间为2分钟。 5停止加热并用流水冲洗高压锅以降温，室温冷却。 6将抗原修复后切片置自来水中，浸泡2分钟。将样本置于内源性过氧化物酶阻断剂 3%H2O2，室温放置4分钟。（需要盖盖子）自来水洗2分钟，PBS缓冲液洗涤2分钟。
化学实验室基本操作 化学实验室基本操作2010-07-24 11：54一、常用仪器的主要用途和使用 方法 反应容器：试管、燃烧匙、烧杯、锥形瓶、集气瓶 存放容器：集气瓶(气体)、细口瓶(液体)、广口瓶(固体)、滴瓶(少量液体) 计量仪器：托盘天平(称固体质量)、量筒(量液体体积) 取用仪器：镊子(块状或较大颗粒)、药匙或纸槽(粉末或小颗粒)、胶头滴 管(少量液体) 夹持容器：试管夹、坩埚钳、铁架台(带铁圈、铁夹) 其它仪器：漏斗、长颈漏斗、分液漏斗、石棉网、玻璃棒、水槽、试管刷 可直接加热的：试管、蒸发皿、燃烧匙 能间接加热的(需垫石棉网)：烧杯、烧瓶、锥形瓶 加热仪器：酒精灯 1.烧杯圆柱状玻璃容器，杯口有便于倒出液体的嘴。 常用的有25mL、50mL、100 mL、250 mL、500 mL等 (1)用于大量物质的溶解和配制溶液或者进行化学反应的容器，也常用于接 过滤后的液体。 (2)实验时盛放液体的量不超过烧杯容积的1/2，以防搅拌时溅出。 (3)向烧杯中注入液体的时候，应沿烧杯内壁或玻璃棒引流。
(4)加热时要垫石棉网，也防受热不均而使其破裂。烧杯不能用作加热固体试剂。 2.试管 (1)用于少量物质的溶解或发生化学反应的仪器，也常用于制取或收集少量气体。 (2)振荡试管的方法：手持试管、手腕摆动。 3)实验时盛放液体量不能超过试管容积的1/3，以防振荡或加热时溅出。可直接加热。 (4)用试管夹或者铁夹固定时，要从试管底部向上套，夹持在试管的中上部(或离管口1/3的部位)。 3.蒸发皿 (1)用于溶液的蒸发、结晶 2)蒸发过程中需用玻璃棒不断搅拌，防止液体由于局部温度过高而飞溅 3)当溶液的量减少只有大量晶体析出时，停止加热并放至石棉网上，以防晶体飞溅 (4)取放蒸发皿，要用坩埚钳夹持 4.集气瓶 (1)用于收集气体、短时间贮存气体、用做物质在气体中的燃烧的反应器 (2)在收集气体或贮存气体时，要用毛玻璃片盖住瓶口。 5、试剂瓶 试剂瓶包括滴瓶、细口瓶、广口瓶等。分为无色和棕色两种。
化学实验基本操作专项练习题 一、选择题（下列每小题只有一个选项符合题意，把符合题意的选项填入题后括号中） 1．下列实验操作中，正确的是（） 2．量取8mL水稀释浓硫酸的下列操作错误的是（） 3．下列实验操作中，正确的是（） 4.下列各图是初中化学的几个实验操作，其中正确的是（） 5．化学实验必须规范，否则容易发生安全事故。你认为下列实验操作正确的是（） 6．下列图示实验操作错误的是（） 7．学习化学，我们对商品的标签和标志有了更深层次的认识，以下四枚标志使用不恰当的是 （）
8.徐浩同学准备了下列仪器和用具：烧杯、铁架台、铁圈、石棉网、酒精灯、玻璃棒、蒸发皿、坩埚钳、火柴。从缺乏仪器或用具的角度看，他不能进行的实验操作是（） A．溶解B．过滤C．蒸发D．给溶液加热 9．在实验室中有下列实验用品：①酒精灯、②铁架台、铁圈、石棉网、酒精灯、玻璃棒、蒸发皿、坩埚钳、火柴。从缺乏仪器或用具的角度看，他不能进行的实验操作项目是（） A．溶解B．过滤C．蒸发D．给溶液加热 10．下列实验操作正确的是（） 11．下列实验操作能达到预期目的的是（） A．用10mL的量筒量取9.0mL的水 B．用托盘天平称取10.58克的碳酸钠粉末 C．用向下排空气法收集纯净的氢气 D．用150mL酒精和50mL水精确配制200m L医用消毒酒精 12．做溶解、过滤、蒸发实验均要用到的一种仪器是（）A．试管B．烧杯C．酒精灯Ｄ．玻璃棒 13．配制10%的氯化钠溶液时，不会引起溶液中氯化钠的质量分数偏小的是（） A．用量筒量取水时仰视读数B．配制溶液的烧杯用少量的蒸馏水润洗 C．氯化钠晶体不纯D．转移已配好的溶液时，有少量溶液溅出 14．“神舟7号”载人航天飞船发射成功，极大地增强了我们的民族自豪感。在航天飞船的失重环境中，下列实验操作最难完成的是（）A．结晶B．蒸发C．溶解D．过滤 15．某学生用量筒量取液体，视线与液体凹液面的最低处保持相平，读数为30mL，将液体倒出一部分后，俯视读数为20mL，则该同学实际倒出的液体体积为（） A．大于10m L B．小于10m L D．等于10m L D．无法确定 16．郝颖同学在化学课上提出，可用澄清石灰水检验人呼出的气体是否是二氧化碳气体，就这一过程而言，属于科学探究环节中的（）A．建立假设B．收集证据C．设计实验D．作出结论 17．实验结束后，下列仪器的放置方法正确的是（） 二、填空与简答题 18．在实验室中有下列实验用品：①酒精灯、②试管夹、③10mL量筒、④100mL量筒⑤烧杯、⑥漏斗、⑦蒸发皿、⑧玻璃棒、⑨铁架台（带铁圈）⑩滤纸，请按要求选择相应实验用品填空（填序号） （1）加热试管里的药品应使用； （2）量取5mL液体应使用； （3）过滤操作中应使用； （4）蒸发、结晶操作中应使用。
免疫组化操作方法、原理、步骤以及常见问题处理大总结 1、方法操作不难，最大的难处是出现异常结果时如何解决？这就需要掌握免疫组化实验原理，每一步知道为什么这样做，这样你才敢大胆地改革先前的不对的方法步骤。如抗体孵育条件主要是抗体浓度、温度、时间，这三者一般是相互成反比的（相对），其中浓度是最重要的先决条件，温度决定反应的速度、时间决定反应的量。就拿温度来说，可以有4度、室温、37度，我推荐4度最佳，反应最温和，背景较浅；而37度反应速度较快，时间较短；室温我不太提倡，除非你每次都把环境温度控制在一定的范围，否则，尽量选择前两者。 2、免疫组化最大的优势是定位和定性。相比于其他蛋白检测方法，免疫组化具有定性灵敏度高、定位较直接准确，是定位检测分析首选方法。尤其对于有些因子的转位研究十分有用。 3、免疫组化结果定量分析的前提是高质量的染色切片。免疫组化结果也能定量分析，但必须是背景染色浅而特异性染色较深的情况下，分析最为准确，这种原则可能也是我们日常审稿时判定研究结果的必备条件。 4、免疫组化实验一定要设置阳性对照和阴性对照。阳性对照一般是用肯定表达这种抗原的切片来做；阴性对照一般是用PBS或非一抗替代一抗来进行反应，其余步骤均一致。前者是排除方法和实验系统有无问题；后者是排除有无一抗外的非特异性染色。 5、免疫组化的应用广泛，是当前实验研究的最重要方法之一。如今发SCI论文时，明显感觉仅靠量化的数据来发文章很难，加一些形态学数据或图片，老外十分欢迎，可能是怕你学术造假吧。当然也不能做假阳性或假阴性结果。 6、免疫组化技术掌握与否的鉴定标准是同一切片或不同切片中不同抗原均从摸索浓度或条件而做出优良的染色切片。我在平时带教中就发现许多研究生把我已经摸索很成熟的反应条件、浓度、方法步骤，重复运用于同一性质的切片和同一种抗体，做出来后就觉得自己已经掌握了免疫组化方法，更换一种抗体后，居然连二抗的种属来源都拿错了。失败往往促进你去思考试验原理和过程，成功有时也加快你自傲。 7、实验方法需要动手+动脑。如今我还不敢说我在免疫组化什么都知道。我只所以今天敢在这里说这说那，这是因为我经过了反复的动手+动脑，把理论原理运用于实践，在把实践中发现的问题带到理论知识中去解决，最终把理论与实践融会贯通。 一、概念和常用方法介绍 1、定义用标记的特异性抗体对组织切片或细胞标本中某些化学成分的分布和含量进行组织和细胞原位定性、定位或定量研究，这种技术称为免疫组织化学（immunohistochemistry）技术或免疫细胞化学（immunocytochemistry）技术。 2、原理根据抗原抗体反应和化学显色原理，组织切片或细胞标本中的抗原先和一抗结合，再利用一抗与标记生物素、荧光素等的二抗进行反应，前者再用标记辣根过氧化物酶（HRP）或碱性磷酸酶（AKP）等的抗生物素（如链霉亲和素等）结合，最后通过呈色反应或荧光来显示细胞或组织中化学成分，在光学显微镜或荧光显微镜下可清晰看见细胞内发生的抗原抗体反应产物，从而能够在细胞爬片或组织切片上原位确定某些化学成分的分布和含量。 3、分类 1）按标记物质的种类，如荧光染料、放射性同位素、酶（主要有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶）、铁蛋白、胶体金等，可分为免疫荧光法、放射免疫法、免疫酶标法和免疫金银法等。2）按染色步骤可分为直接法（又称一步法）和间接法（二步、三步或多步法）。与直接法相比，间接法的灵敏度提高了许多。3）按结合方式可分为抗原-抗体结合，如过氧化物酶-抗过氧化物酶（PAP）法；亲和连接，如卵白素-生物素-过氧化物酶复合物（ABC）法、链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结（SP）法等，其中SP法是比较
免疫组化评分标准 This model paper was revised by the Standardization Office on December 10, 2020
免疫组化评分标准： The immunohistochemical staining results were assigned a mean score considering both the intensity of staining and the proportion of tumor cells with an unequivocal positive reaction. Each section was independently assessed by 2 pathologists without prior knowledge of patient data. 免疫组织化学染色结果分配一个平均评分，既考虑一个明确阳性反应染色强度和肿瘤细胞的比例。 Positive reactions were defined as those showing brown signals in the cell cytoplasm. For δ-catenin, a staining index (values, 0-12) was determined by multiplying the score for staining intensity with the score for positive area.阳性反应被定义为那些细胞浆显示棕色信号的。对于δ-catenin，一个染色指数（0-12）被定义为染色强度和染色区域的乘积。 The intensity was scored as follows: 0, negative; 1, weak; 2, moderate; and 3, strong. The frequency of positive cells was defined as follows: 0, less than 5%; 1, 5% to 25%; 2, 26% to 50%; 3, 51% to 75%; and 4, greater than 75%. 染色强度的分数被定为：阴性0分；弱1分；中等2分；强阳性3分。阳性细胞的频率被定义为：少于5%，0分；5%-25%，1分；26%-50%，2分；51%-75%，3分；大于75%，4分。 When the staining was heterogeneous, we scored it as follows: each component was scored independently and summed for the results. For example, a specimen containing 75% tumor cells with moderate int ensity (3 × 2 =6) and another 25%
免疫组化 一实验目的：分别用KRAS、NRAS、HRAS蛋白抗体检测肺癌组织中KRAS、NRAS、HRAS蛋白的表达情况 二实验原理: 应用免疫学基本原理——抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及定量的研究，称为免疫组织化学技术或免疫细胞化学技术. 三实验试剂及耗材:经病理医生确认的肺癌组织切片、KRAS、NRAS、HRAS蛋白抗体、DAB 显色试剂盒、抗原修复液、PBS、苏木素染料、1%盐酸酒精溶液、0.05%氨水、二甲苯、等 四实验设备：切片机、4℃冰箱、显微镜、烤片机 五主要试剂配置: 缓冲液 应用液A NaH2PO4 38.4g配成1000毫升溶液 应用液B Na2HPO4·12H2O 114.8g配成1000毫升溶液 配制1000毫升PBS需要14毫升应用A液，36毫升应用B液，加8.5gNaCl。 枸橼酸钠抗原修复液 应用液A 枸橼酸 10.55g配成1000毫升溶液 应用液B 柠檬酸三钠（三水合柠檬酸三钠） 29.01g 配成1000毫升溶液 配制500毫升抗原修复液需要9毫升应用A液，41毫升应用B液。 苏木素染液配方：苏木素2g,无水乙醇250毫升，硫酸铝17.6g蒸馏水750毫升，碘酸钠0.2g，冰醋酸20毫升。先将苏木素溶于无水乙醇，再将硫酸铝溶于蒸馏水水中。两液溶解后将其混合，加入碘酸钠，最后加入冰醋酸。 抗体说明书建议的抗体稀释度 N-Ras 1:50-1:500 H-Ras 1:50-1:500 K-Ras 1:20-1:200 六实验步骤： 1组织常规石蜡切片厚度3-5um，防脱片捞片后晾干，放入72℃烤箱烤片2小时。 2 切片脱蜡水化程序
免疫组化与免疫荧光 一、两者都是蛋白定位的检测（也就是确定蛋白是表达在细胞核/浆/膜）。 二、区别是： 1、概念和基本原理 免疫组织化学又称免疫细胞化学，是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应，对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来，借助显微镜的现像和放大作用，在细胞，亚细胞水平检测各种抗原物质，并可在原位显示相应的基因和基因表达产物。免疫组织化学技术现已有：免疫荧光组织（细胞）化学技术、免疫酶组织（细胞）化学技术、亲和组织化学技术、免疫金银及铁标记免疫组织化学技术等。 免疫荧光组织（细胞）化学技术是采用荧光素标记的已知抗体（或抗原）作为探针，检测待测组织、细胞标本中的靶抗原（或抗体），形成的抗原抗体复合物上带有荧光素，在荧光显微镜下，由于受高压汞灯光源的紫外光照射，荧光素发出明亮的荧光，这样就可以分辨出抗原（或抗体）的所在位置及其性质，并可利用荧光定量技术计算抗原的含量。以达到对抗原物质定位、定性、定量测定的目的。 2、标本制作： 免疫荧光一般用冰冻切片，减少杂质干扰；而酶免疫组化一般用石蜡切片或冰冻切片均可以。 3、实验步骤：免疫荧光染色步骤简单，而酶免疫组化方法较为复杂，多了DAB显色过程。 4、染色后的标本保存：免疫荧光染色后的标本一般短时间拍照，时间长了荧光衰退；而酶免疫组化染色标本可以长期保存。 5、免疫组化结果除了知道蛋白是在细胞浆还是细胞膜表达高些，还可以用软件做相对定量分析。 6、免疫荧光得到的图片是彩色的，漂亮些，可以发高档次文章。 免疫学三大工具：免疫组化、Western、ELISA，分别用于定位，定性和定量。
检验实验室操作的基本知识 （一）实验室的基本任务和工作准则 1、实验室的基本任务 实验室是组织中负责质量检验工作的专门技术机构，承担着各种检验测试任务。它是组织质量工作、质量控制、质量改进的重要技术手段，是重要的质量信息源。其基本任务是： （1）快速、准确的完成各项质量检验测试工作；出具检测数据（报告）。 （2）负责对购入的原材料、元器件、协作件、配套产品等物品，依据技术标准、合同和技术文件的有关规定，进行进货验收检验。 （3）负责对产品形成过程中，需在实验室进行检验测试的半成品、零部件的质量控制和产成品交付前的质量把关检验。 （4）负责产品的型式试验（例行试验）、可靠性试验和耐久试验。 （5）承担或参与产品质量问题的原因分析和技术验证工作。 （6）承担产品质量改进和新产品研制开发工作中的检验测试工作。 （7）及时反馈和报告产品质量信息，为纠正和预防质量问题，提出意见。 2、实验室的基本工作准则 由于实验室是生产组织进行质量把关的主要技术手段，是为质量控制、质量评价、改进和提高产品质量，开发新产品等项工作提供技术依据的重要的技术机构，其工作质量如何直接关系到产品信誉和组织自身的发展。只有为各项检验任务提供正确的、可靠的检测结果，才可能对质量作出正确的判断和结论，反之亦然。因此，实验室最基本的工作准则，应该是坚持公正性、科学性、及时性，做好检验测试工作。
（1）公正性。就是实验室的全体人员都能严格履行自己的职责，遵守工作纪律，坚持原则，认真按照检验工作程序和有关规定行事。在检测工作中，不受来自各个方面的干扰和影响，能独立的公正的做出判断，始终以客观的科学的检测数据说话。 （2）科学性。就是实验室应具有同检测任务相适应的技术能力和质量保证能力。人员的素质和数量的配备能满足检测工作任务的需要。检测仪器设备和试验环境条件符合检测的技术要求。对检测全过程可能影响检测工作质量的各个要素，都实行有效的控制和管理，能够持续稳定地提供准确可靠的检测结果。 （3）及时性。就是实验室的检测服务要快速及时。为了做到及时性，就要精心安排，严格执行检测计划，做好检测过程各项准备工作，使检测工作能高效有序地进行。试样的制备，仪器设备的校准，环境技术条件的监控，人员的培训以及规范操作等都应按照技术规范的要求正常地进行。检测过程不出和少出现差错、误时、仪器设备故障等影响检测顺利进行的现象，以保证检测工作的及时性。 （二）实验室质量管理体系 建立质量管理体系的基本要求包括： 1、明确质量形成过程 实验室是专门从事检验测试工作的实体。实验室工作的最终成果是检测报告。检测报告就是实验室的产品，同样有一个质量形成过程。为了确保检测数据的准确可靠，以确保检测报告的质量，就必须明确它的质量形成过程和过程的各个阶段可能影响检测报告质量的各项因素。从而对这些因素采取相应的措施，加以管理和控制，使其过程处于受控状态，以保证最终产品--检测报告的质量。由于生产组织的性质不同，产品特性不同，实验室的工作任务不同，因而，其质量形成过程也不尽相同。在建立质量管理体系时，应根据本实验室的工作特点，进行分析研究，以明确其质量形成过程及涉及的要素。比较典型的质量形成过程，大体上包括以下各阶段。
化学实验基本操作同步练习 一、选择题 1、对化学实验剩余的药品，处理方法正确的是（） A.带回家中 B.随意倾倒在水槽中 C.倒入指定的容器中 D.倒回原试剂瓶中 2、下列仪器中，不能在酒精灯上直接加热的是（） A.试管 B.烧杯 C.蒸发皿 D.燃烧匙 3、下列仪器中，不能作为反应容器的是（） A.烧杯 B.集气瓶 C.量筒 D.试管 4、下列仪器中，可与试管、烧杯、蒸发皿归为一类的是（） A.集气瓶 B.漏斗 C.量筒 D.锥形瓶 5、下列基本操作中不正确的是（） A.用酒精灯火焰的外焰部分给物质加热 B.过滤时，液体应沿着玻璃棒流入过滤器 C.一般用药匙或镊子取用固体药品 D.使用天平时，用手取用砝码 6、给试管里的物质加热时，切勿让试管底部接触灯芯，这是因为（） A.将使酒精燃烧不完全 B.易使酒精灯熄灭 C.灯芯温度低，易使已受热后的试管受热不均匀而破裂 D.灯芯温度高，易使试管底部溶化 7、下列基本实验操作正确的是（） A.用药品不定量时，固体一般去1~2克 B.安装过滤器时，滤纸边缘高于漏斗口 C.蒸发食盐水，用玻璃棒不断搅拌液体 D.酒精灯不用的时候，一定要盖上灯帽 8、下列实验操作，不正确的是（） A. 向试管里倾倒液体试剂时，试剂瓶标签应朝向手心 B. 实验剩余的药品必须放回原瓶 C. 取液后的滴管，放置时应保持橡胶乳头在上 D. 用量筒量取液体时，视线要与量筒内凹液面的最低处保持水平 9、下列仪器中，能在酒精灯火焰上直接加热的是（） A. 集气瓶 B. 量筒 C. 试管 D. 烧杯 10、用量筒量取液体时，某同学操作如下：量筒放平稳，面对刻度，仰视液体凹液面最低处，读数为19mL。倾倒出一部分液体，又俯视液体凹液面最低处，读数为11mL。这位同学取出液体的体积是（） A. 8mL B. 大于8mL C. 小于8mL D. 无法判断 11、下列说法中正确的是（） A. 可以用燃着的酒精灯去点燃另一个酒精灯 B. 实验室可以用品尝味道的方法鉴别一些无毒性的试剂 C. 实验过程中，不慎将稀硫酸溅到衣服上，可以不作处理 D. 不小心将酒精灯碰倒在实验台上，致使酒精溢出燃烧，可以立即用湿抹布盖灭 12、下列实验操作①用量筒量取液体时，将量筒放在水平的桌面上，右手握试剂瓶（标签向掌心）慢慢倒入量筒中②用完滴瓶上的滴管要用水冲洗后放回滴瓶中③实验室里两个失去标签的试剂瓶中均装有白色固体，为了分清哪瓶是白砂糖，哪瓶是食盐，可取少量固体品尝味道。其中（） A. 只有①正确 B. 只有②正确 C. 只有③正确 D. 全部错误 13、下列化学实验基本操作正确的是（） A. 取块状固体药品时，如果没有镊子可以用手拿 B. 应该用酒精灯的外焰给物质加热 C. 有腐蚀性的药品应放在纸上称量 D. 用胶头滴管滴加液体时，其下端应紧贴试管内壁 14、用托盘天平称量3.6克食盐，称量中发现指针向右偏转，此时应（） A. 加砝码 B. 加药品 C. 减药品 D. 调节螺丝向左旋 15、量取8毫升稀硫酸应选用的仪器是（） A. 50毫升量筒 B. 50毫升量筒和胶头滴管 C. 10毫升量筒 D. 10毫升量筒和胶头滴管 16、下列各组仪器，能用来加热液体药品的一组是（） A. 量筒、蒸发皿、烧杯 B. 量筒、蒸发皿、试管 C. 集气瓶、蒸发皿、试管 D. 烧杯、蒸发皿、试管 17、在进行过滤操作时，除了使用铁架台、烧杯、玻璃棒以外，还需要的仪器是（） A. 酒精灯 B. 托盘天平 C. 蒸发皿 D. 漏斗 18、下列实验操作中，不正确的是（） A. 向试管里倾倒液体时，试剂瓶口要紧挨试管口 B. 用滴管滴加液体时，滴管不能触及容器的内壁 C. 为节约火柴，用燃着的酒精灯引燃其他酒精灯 D. 用量筒量取液体时，视线要与量筒内液体的凹液面的最低处保持水平 19、给试管里的粉末状物质加热前后的操作，不正确的是（） A. 未说明用量时，取固体只要盖满试管底部 B. 必须使用试管夹，且手拿住试管夹的长柄，拇指不要按在短柄上 C. 加热时试管必须与桌面呈45°角
免疫组化入门实验操作 一、实验目的： 1.了解免疫组化基本原理。 2.了解免疫组化实验操作及注意事项。 3.免疫组化结果判定。 通过实验，让学生熟悉免疫组化操作流程及注意事项，对抗原抗体结合、抗原修复和酶催化底物显色进行研究。要求学生通过查阅文献，在归纳、对比、总结的基础上对免疫组化有进一步的了解。 二、实验原理： 三、实验材料： 一抗：CD5、CK8、Ki67 二抗：MaxVision3 其它：柠檬酸抗原修复液、过氧化物酶阻断剂、PBS缓冲液、DAB、孵育盒、染色架、苏木素、盖玻片、冲洗瓶、中性树胶，孵育盒。 四、实验步骤：
1.脱蜡水化 二甲苯5min，二甲苯5min，二甲苯5min，无水乙醇2min，无水乙醇2min，95%酒精2min，85%酒精2min，自来水冲洗。 2.抗原修复 高压锅中加入1200mL柠檬酸修复液，电磁炉煮沸后放入切片，扣紧锅盖，功率调至800W，至压力阀均匀喷气后计时 1.5min，移开高压锅室温冷却10min，自来水冷却。 3.过氧化物酶阻断 修复结束后，流水冲洗干净，除去自来水，在离组织3mm处用免疫组化油笔画圈或用纸巾擦干组织外残留的液体，滴加50 μL（一滴）过氧化物酶阻断剂，室温孵育10min，PBS冲洗3×3min。 4.一抗 甩去PBS，纸巾擦干组织3mm外的残留液体，每张切片加50 μL（一滴）相应一抗，室温下孵育60分钟，PBS冲洗3×3min。 5.二抗 甩去PBS，纸巾擦干组织3mm外的残留液体，每张切片加50 μL（一滴）MaxVisionTM试剂，室温下孵育30分钟，PBS冲洗3×3min。 6.DAB 甩去PBS液，纸巾擦干组织3mm外的残留液体，每张切片加50 μL（一滴）新鲜配制的DAB，显色5分钟，自来水冲洗。 7.苏木素复染 每张切片滴加50 μL（一滴）苏木素，20-30秒后自来水冲洗30s以上，或浸泡于PBS中30s以上再自来水冲洗。 8.封片 梯度酒精脱水干燥（85%酒精2min，95%酒精2min，无水乙醇2min，无水乙醇2min，二甲苯1min），或直接电吹风吹干，中性树胶封固。
基础化学实验基本操作 （一）玻璃仪器的洗涤 在一般实验中洗涤玻璃仪器主要用水。首先把水注入欲洗的仪器中，用毛刷仔细刷洗仪器内部，再用自来水冲洗几次。若器壁完全透明，表面不附有明显的油污或固态物怎能满足一般实验的要求。如水洗后达不到上述程度，可再用肥皂液或去污粉刷洗，然后用自来水冲净，最后还需用少量蒸馏水洗涤2~3次。洗涤时应特别注意勿使毛刷顶端的铁丝碰破或划伤仪器。洗涤后，玻璃仪器内的水要“空净”，不要用布擦，更不许胡乱甩水。 （二）试剂的取用 1、化学实验中所用的药品，大多有毒或具有腐蚀性。因此，在使用时不能用手直接拿取，更不能随意品尝。 2、药品的取用时应根据《试验规程》的规定，如规程未有用量，则应尽可能少取量。 3、已取出但未用完的药品，不得装回原瓶，以防药品污染。 4、取用固体药品时要用特制的小匙，小匙不得接触仪器和桌面。 5、取用液体试剂时，取下的瓶塞应倒放在桌面上或夹持在手指的背面。如用滴管吸取少量药品，应专药专管取用，并注意不要把滴管插入试管内，以免接触器壁而沾污药品。如用倾注法取药，试剂瓶的标签应向着手心，逐渐倾斜瓶子，让试剂沿着洁净的试管壁流入试管或沿着洁净的玻璃棒缓缓注入烧杯中。试剂取用完毕后应立即盖紧瓶塞。（三）台秤的使用 台秤用于初略称量。它能迅速的称量，但精确度不高。一般能称准至0.1g。使用时，先将游码移到零位，调节小螺丝使台秤左右平衡，即使其指针左右摆幅相等。再在左盘上放一清洁干燥的表面皿，称量瓶或烧杯，称出其质量（W2），被称物放在左盘器皿中，称出质量（W1），其被称物质量=W1-W2（10g以下可调节标尺上的游码）。 （四）过滤操作 1、普通过滤：先把一圆形或方形滤纸对折两次成扇形（方形滤纸需剪成扇形），展开后呈圆锥形，恰能与60°角的漏斗相密合。如果漏斗的角度大于或小于60°，应适当改变滤纸折成的角度使之与漏斗相密合（滤纸边缘应比漏斗口稍低）。用水或溶剂润湿滤纸，再用玻璃棒轻压滤纸四周，赶去滤纸与漏斗壁间的气泡，使滤纸紧贴在漏斗壁上。 过滤时，把漏斗放在漏斗架上，下面的烧杯内壁紧靠着漏斗管末端。然后将滤液沿玻棒小心缓缓倾入漏斗，倾入漏斗的溶液，最多加到滤纸边缘下5-6mm的地方。 2、减压过滤：此法可加速过滤，并使沉淀抽吸的比较干燥。但不宜用
免疫组化 一，免疫组织化学简介 免疫组织化学又称免疫细胞化学，是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应，对相应炕原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来，借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用，在细胞、亚细胞水平检测各种抗原物质(如蛋白质、多肽、酶、激素、病原体以及受体等)。 二，免疫组化技术的基本原理 免疫组化技术是一种综合定性、定位和定量；形态、机能和代谢密切结合为一体的研究和检测技术。在原位检测出病原的同时，还能观察到组织病变与该病原的关系，确认受染细胞类型，从而有助于了解疾病的发病机理和病理过程。 免疫酶组化技术是通过共价键将酶连接在抗体上，制成酶标抗体，再借酶对底物的特异催化作用，生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒，于普通显微镜或电镜下进行细胞表面及细胞内各种抗原成分的定位，根据酶标记的部位可将其分为直接法（一步法）、间接法（二步法）、桥联法（多步法）等，用于标记的抗体可以是用免疫动物制备的多克隆抗体或特异性单克隆抗体，最好是特异性强的高效价的单克隆抗体。直接法是将酶直接标记在第一抗体上，间接法是将酶标记在第二抗体上，检测组织细胞内的特定抗原物质。目前通常选用免疫酶组化间接染色法。 三，免疫组化步骤 1，切片，烤片60℃，1h； 2，脱蜡及复水 二甲苯10min，100％乙醇5min，95％乙醇5min，90％乙醇5min，85％乙醇5min，80％乙醇5min， 75％乙醇5min，60％乙醇5min，50％乙醇5min，30％乙醇5min，自来水1min，双氧水1min； 3，1份30％H2O2加10份蒸馏水，室温10min，蒸馏水洗3次，每次3min； 4，微波修复 将切片浸入0.01M枸橼酸缓冲液，微波中最大火力（98℃-100℃）加热至沸腾，冷却（约5-10min），反复两次； 5，将切片自然冷却至室温，PBS洗涤3次，每次5min；
化学实验基本操作方法 （一）常见计量具的使用 （二）药品的取用 （三）加热、蒸发 （四）溶解、过滤、结晶 （五）蒸馏、升华 （六）分离液体、萃取 （七）纸上层析 （八）渗析 （九）气体的收集、贮存与净化 （一）常见计量具的使用 1.量筒、量杯 实验室中计量取用一定体积的液体用。为准确读出量筒（或量杯）内液体体积，必须把量筒放置在水平的桌面上，使眼睛的视线，刻度、液体凹面的最低点处在同一水平上。 量筒（或量杯）不能用来加热，也不能用来配制或稀释溶液，热溶液须冷至室温时，方可使用量筒（或量杯）量取。 2.滴定管的使用
当需要精确而方便地量取少量液体或做滴定实验时，常使用滴定管。 酸式滴定管使用较多，不能用来盛放碱液。酸式滴定管有无色和棕色两种，见光易分解的试液如硝酸银溶液滴定时，应置于棕色酸式滴定管中。 碱式滴定管下端套有一小段橡皮管，将滴头和管身相接，凡是能与橡皮管作用的物质，如高锰酸钾、碘、硝酸银等溶液，尤其是氧化性酸，不能使用碱式滴定管。 使用滴定管前，先检查是否漏水。将盛水滴定管夹在滴定管架上，仔细观察有无水从活塞隙缝中渗出或尖嘴处滴下。如果发现酸式滴定管活塞有漏水现象，应把塞子拔出来，用滤纸将活塞及活塞槽内的水和凡士林擦干净，然后在活塞的周围重新涂上一薄层凡士林（不要太多堵住小孔），插入塞孔内，向同一方向旋动活塞至外部观察全部透明为止。用一根橡皮筋将活塞套在滴定管上，用蒸馏水将滴定管洗净，再用滴定溶液润洗2～3次，润洗液要从下端放出。加入溶液后，先要把活塞或胶管处的气泡赶出，再调节液面至刻度“0”或“0”以下。排除停留在酸式滴定管内的气泡，可用右手拿住滴定管，左手迅速开足活塞，让急流冲走气泡。如冲不走，可斜拿滴定管，再开大活塞冲。赶走碱式滴定管尖端气泡时，要弯曲橡皮管，让尖嘴管斜向上方，并挤压橡皮管内的玻璃球使液体向上喷出，如果碱式滴定管漏水，应更换橡皮管或玻璃球。 使用酸式滴定管时，应该用左手拇、食、中三指旋转活塞，控制流量。右手拿住接受液体的容器。如图5-15。使用碱式滴定管时，用左手捏在玻璃球外胶管的上部，无名指和小指夹住尖嘴管，使它垂直向下，轻轻挤压胶管，让液体从胶管和玻璃球的隙缝间流出。如图5-16。 3.移液管 移液管又叫吸量管，用以精确移取一定体积的液体。