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扶济复?重组人碱性成纤维细胞生长因子Recombinant Human Basic Fibroblast Growth Factor (rh-bFGF)
加速创伤愈合 减少瘢痕形成
国家一类新药，12年行政保护
国家“863”计划重大成果
“九五”国家重点开发创新药物
荣获国家科技进步二等奖和北京市一等奖
全面促进创伤修复，改善愈合质量
加速神经纤维再生，恢复运动和感觉功能
塑形期抑制胶原合成，减少瘢痕形成
与人内源性bFGF完全相同，使用安全
北京双鹭药业股份有限公司市场部
一、扶济复（重组人碱性成纤维细胞生长因子）简介
本品是对创伤修复起着极其重要作用的生长因子，由北京双鹭药业股份有限公司研发，国家一类新药，主要用于促进各种创面的愈合，并改善愈合质量。是
第一个具有我国自主知识产权与中国人特征的基因工程类药物，拥有12年国家
行政保护，是我国基因工程药物研究开发的一个重大里程碑。
二、扶济复的临床应用
1、规格及推荐用量
规格：35000IU/支。用量：推荐用量150IU/cm2，每次喷出量约350IU。
2、适应症
促进创面愈合，可用于烧伤创面（包括浅Ⅱ度、深Ⅱ度、肉芽创面）、慢性创面（包括慢性肉芽创面、溃疡、褥疮等）和新鲜创面（包括外伤、手术伤口等）。
3、适用科室：
主要用于烧伤科、口腔科、妇科、内分泌科、外科等。
适用科室 临床应用 临床作用
烧伤科 深Ⅱ度、浅Ⅱ度烧伤及肉芽创面等 加快愈合速度，改善愈合质量，缩短住院时间
急诊科、外
科 各种外伤、手术伤、褥疮、静脉曲张溃疡、
瘘、窦道等
加速术后创面愈合，减少病人痛苦
整形科 供皮区创面、移植皮瓣、祛斑、磨削术等 提高愈合质量，抑制病理性瘢痕形成
皮肤科 各种急慢性体表溃疡、激光创面等 促进创面愈合，恢复体表屏障，协助基础治疗防止感染等发生
骨 科 骨、关节及神经损伤 促进皮肤、皮下组织、骨组织修复及血管、神经重建，降低伤残程度
妇 科 会阴侧切伤口、剖宫产术切口、宫颈糜烂等缩短创面愈合时间，抑制病理性瘢痕形成，提高手术切口愈合质量
口腔科 口腔粘膜溃烂、溃疡等 促进溃疡面愈合，减轻患者痛苦
耳鼻喉科 鼓膜穿孔、颜面损伤等 加速鼓膜愈合过程，缩短治疗时间
肿瘤科 放射性溃疡、放化疗所致口腔粘膜溃疡等 减轻炎症程度，促进溃疡面愈合，减少患者痛苦
内分泌科 糖尿病所致难治性溃疡、糖尿病足等 联合基础治疗，缩短难愈性创面愈合时间，改善患者生活质量
4、用法用量：
常规用法：扶济复是无菌冻干制剂，采用喷雾装置。每瓶35000IU用5ml 注射用水或生理盐水溶解后，直接涂抹或用喷雾器喷在清创后的创面，或在创面处用适当大小的消毒纱布，把药液滴加在纱布上，适当包扎。
烧伤创面：常规清创后，直接喷雾于创面，或在创面覆以消毒纱布，将药液滴加于纱布；需要抗感染的创面，创面上再覆盖1％磺胺嘧啶银霜纱布，包扎或半暴露。每日或隔日换药一次。供皮区为无菌创面，自手术日(第一天)给药，从第5天开始隔日换药一次。
口腔溃疡：清洁口腔后，用棉签拭干溃疡表面，将扶济复喷洒于溃疡表面1-2次，每天4次（三餐后和睡前），3天1疗程。不易用药的部位，用棉球蘸药
敷在溃疡面，或用棉棒蘸药局部涂抹。抹药后2小时不易进食。治疗期间，应尽量少饮水，少吃刺激唾液分泌的食物或药物。
宫颈糜烂：扶济复溶解后，用棉球蘸药液涂抹于溃疡面，每天1-2次，7日1疗程。每次上药前阴道依次行稀释活力碘及生理盐水冲洗，继以消毒棉球拭干。
褥疮：生理盐水冲洗疮面后，去除创面上的渗出物及坏死组织，扶济复溶解后，300IU/cm2，均匀喷洒褥疮表面，连续用药22-35天。对Ⅲ度褥疮清创后在伤患处覆盖适当大小的消毒纱布，用药液喷湿纱布并做适当包扎。
手术切口创面：扶济复溶解后，浸透单层干纱布，覆盖创面，包扎，隔日换药1次。
激光治疗后创面：尖锐湿疣激光治疗后遗留创面，扶济复溶解后，用喷雾器喷在清创后的创面，每日一次，直至痊愈。
三、扶济复的临床疗效
在北京积水潭医院、上海长海医院、上海瑞金医院、广州南方医院、华西医科大第一附属医院、西安西京医院、中国医科大学第一临床医院等29家全国大型医院进行的，对2103例各种创面患者，包括浅Ⅱ度创面、深Ⅱ度创面、薄皮片供皮区创面、中厚皮片供皮区创面、慢性创面等，进行了扶济复的Ⅳ期临床试验，在更广泛人群中考察扶济复的临床疗效和安全性。
临床观察结果表明，扶济复对酸碱性创面愈合有显著的促进作用，能加速创面愈合，缩短愈合时间，减少瘢痕形成。适度的碱性环境可加强bFGF促进烧伤创面愈合的作用，所以使用扶济复前，对创面进行清创，并用生理盐水或注射用水冲洗后再用扶济复，可以保持较好的局部PH，减少创面分泌物或清创用药物对扶济复的影响，从而使扶济复更好地发挥促创面愈合作用。
四、扶济复的使用注意事项
1.使用前清创或削痂。
因为扶济复是细胞生长因子，通过与相应受体结合发挥作用，创面结痂时，会影响扶济复与细胞表面受体结合，因此一般在削痂后再使用；
创面感染时，炎性反应引起创面出血、水肿时会影响扶济复的使用效果，因此一般在清创后使用。
2．扶济复外用冻干粉稳定性好，临用前配置充分发挥疗效
扶济复是一种细胞生长因子，它的本质是一种蛋白质，蛋白活性和空间结构有关，对热、酸和酶敏感，并且在水溶液中的稳定性比冻干粉低，所以冻干粉状的外用制剂，稳定性长达2年，利于保存、运输和临床使用。
在临用前配置，有利于充分保持细胞因子活性，产生最佳疗效。从有效期上不难看出，与其他同类的细胞因子的溶液相比，扶济复的有效期更长。
3、扶济复对碘酊、酒精等敏感，配置后在10天使用完毕，以保持最佳疗效
碘酊、酒精、双氧水、重金属等蛋白变性剂会影响其活性，应避免与这些物质混合使用。如果清创时使用这些物质，最好用生理盐水再冲洗下创面，再使用扶济复。另，在配置后请在10内使用完毕，以充分保证蛋白活性并发挥最佳疗效。
4、扶济复对新鲜创面时使用效果更好，慢性难愈合性创面需适当加大用量和
用药次数
对创伤和烧伤后创面，一般应在48小时内应用，已结痂的，削痂后再应用，以保证与细胞受体充分结合，保证扶济复能更好地作用于创面。对于慢性难愈合创面，如慢性溃疡、褥疮等，扶济复的应用优势也很明显，是目前很好的治疗药物，但在使用时需相应增加使用次数和用药量。
5、分泌物多的创面，需增加用药次数，以保证疗效。
扶济复与细胞表面受体的结合为瞬间结合并发挥作用，发挥作用时间不少于24小时，但创面往往有较多的分泌物导致药物流失或不易接触创面，因此推荐一般24小时换药一次，分泌物较多时可一日多次，对于特别清洁而又无分泌物的创面，应用次数可减少或在换药时应用。
五、扶济复与同类产品的比较
1、扶济复与外用重组人表皮生长因子衍生物的异同
外用重组人碱性成纤维细胞生长因子外用重组人表皮生长因子衍生物成分 bFGF EGF
理化特性 146个氨基酸，分子量17KD 53个氨基酸，分子量6216D
受体分布成纤维细胞、上皮细胞、血管内皮细胞、神经元、肌细胞、骨细胞、软骨细胞等上皮细胞、血管内皮细胞、肌细胞、骨细胞等
适应症烧伤、急性创伤、手术切口、慢性溃疡等烧伤、急性创伤、慢性溃疡等生物学作用细胞趋化、细胞增殖、组织重建作用细胞趋化、细胞增殖作用
作用特点具有较强的促成纤维细胞增殖和刺激血管生成作用，迅速形成肉芽组织，填补缺损，对大
创面的深在损伤具有良好的作用对上皮细胞增殖作用为主，对较浅显的损伤效果较好
剂型冻干剂35000IU/瓶外用溶液10000IU/支，30000IU/支用量 150IU/cm2 400IU/cm2
价格 116元 87.5元/10000IU
治疗费用比以100 cm2为例，需15000IU扶济复，折合费用49.7元。以100 cm2为例，需40000IU的EGF，折合费用350元。
剂型外用干粉外用干粉、滴眼液
医保非医保限工伤保险
2、扶济复与重组牛成纤维细胞生长因子的异同
通用名重组人成纤维细胞生长因子重组牛成纤维细胞生长因子（融合蛋白）基因来源人牛
氨基酸序列与体内完全一致与体内有差异
成品蛋白不含融合菌体蛋白含有融合菌体蛋白
活性高低
效价比牛成纤维细胞生长因子高两倍低
长期应用的安全性较为安全不能确定
剂型外用冻干剂，临用前配制，充分
保证蛋白活性，35000IU/瓶外用溶液，外用冻干粉，溶液活性及稳定性较冻干粉差。35000IU/瓶
用量 150IU/cm2（90AU/ cm2） 150AU/
cm2（180IU/ cm2）价格 116元 97.20元
治疗费用比以100 cm2为例，需15000IU扶济
复，折合费用49.7元。以100 cm2为例，需18000IU的rhb-FGF冻干粉，折合费用50元。
医保情况非医保滴眼剂工伤保险在医保
3、扶济复与酸性成纤维细胞生长因子的异同
通用名重组人成纤维细胞生长因子酸性成纤维细胞生长因子
基因来源人人
简写 bFGF aFGF
体内分布垂体脑
体内等电点＞9 5-7 制剂PH 6.5-7.5 6.5-7.5
成品蛋白不含融合菌体蛋白含有融合菌体蛋白
活性比酸性成纤维细胞生长因子高10-100倍低
规格 35000IU/支 25000U/支
用量 150/cm2 100/cm2
零售价 116元 138元
治疗费用比以100 cm2为例，需15000IU扶济复，折合
费用49.7元。以100 cm2为例，需10000IU的aFGF，折合费用55元。
剂型冻干剂冻干剂
六、扶济复在创伤修复中的作用
炎症期：诱导炎性细胞、成纤维细胞、血管内皮细胞等向损伤部位移动；
激活巨噬细胞的吞噬功能，提高机体免疫机能，降低创面感染机会；
增生期（细胞增殖分化及肉芽组织形成期）：
高效促进成纤维细胞的增殖，新生毛细血管的形成；
加速神经纤维再生，恢复运动和感觉功能；
刺激胶原酶的表达，分泌的胶原酶对过度生成的胶原有分解作用；
调节胶原形成平衡，防止形成病理性瘢痕；
塑形期（组织重建期）：
促进上皮细胞增殖和向创面中心覆盖。
七、皮肤及创面的相关介绍
1、皮肤功能：
皮肤是机体与自然界之间的第一道屏障，防止致病微生物入侵和自身体液的丢失，对人体起保护作用。同时，皮肤也具有感觉、交换以及体温调节等作用。是机体的一个非常重要的器官。皮肤由外至内可以分为三层，即表皮层、真皮层及皮下组织。对人体起着重要的保护作用。
2、创面小常识：
创面：是正常皮肤（组织）在外界致伤因子如外科手术、外力、热、电流、化学物质、低温以及机体内在因素如局部血液供应障碍等作用下所导致的损害。常伴有皮肤完整性的破坏以及一定量正常组织的丢失，同时，皮肤的正常功能受损。也称为伤口或者创伤。
常见创面：常见急性创面有手术切口、烧伤、供皮区；慢性创面有褥疮、下肢血管性（动脉性/静脉性）溃疡、糖尿病性足溃疡、其他难愈合创面。创面一旦形成，机体就会迅速作出反应，启动愈合过程进行修复。
创面愈合：创面愈合是指由于致伤因子的作用造成组织缺失后，局部组织通过再生、修复、重建，进行修补的一系列病理生理过程。整个愈合过程分为炎症期、增生期和塑形期。FGF便是在创面愈合中起重要作用的细胞因子之一，全程参与创面愈合的三个时期。
创面PH：人体正常状态下，机体的PH值应维持在7.3～7.4之间，即略呈碱性。正常的液化期创面PH值应接近血浆的PH值7.3～7.5之间，一般说，PH 值低于和高于此值均是细菌感染的前兆。皮肤受损后创面PH值因一些分泌物发生变化，一般创面平均pH值变化在5.4～7.8之间，对需植皮的创面，使创面PH 恢复到7.3～7.5之间对创面的愈合是很重要的。
八、扶济复——外用重组人碱性成纤维细胞生长因子优势
z国家一类新药
z专利产品 12年行政保护
z国家“863”计划重大成果
z国家科技进步二等奖和北京市一等奖
z“九五”国家重点开发创新药物
z与人内源性bFGF完全一致，应用安全，不产生抗体
z无菌冻干粉剂 稳定性好，蛋白活性不衰减
z双向调节胶原，不形成病理性瘢痕
z缩短各项创伤愈合时间
z活性高，对酸碱性创面都适用
z全面修复、均衡调控，塑形期调节胶原形成，减少瘢痕增生
人肝细胞生长因子(HGF)elisa试剂盒使用说明书 Elisa kit规格：48孔配置/96孔配置 标准品稀释液：1.5ml×1瓶 酶标试剂：3 ml×1瓶（48）/6 ml×1瓶（96） 【人肝细胞生长因子(HGF) elisa试剂盒】本试剂仅供研究使用 计算： 以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。 试剂盒组成： 封板膜:2片（48）/2片（96） 说明书:1份 密封袋:1个 标准品： 2700ng/L 0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶 2-8℃保存 酶标包被板: 1×48 1×96 2-8℃保存 样品稀释液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 显色剂A液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 显色剂B液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 终止液: 3ml×1瓶6ml×1瓶 2-8℃保存 浓缩洗涤液:（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶 2-8℃保存 实验原理： 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人肝细胞生长因子(HGF) 水平。用纯化的人肝细胞生长因子(HGF) 抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(HGF) ，再与HRP标记的中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(HGF) 抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，
成纤维细胞的最新用途 一、自体成纤维细胞除皱整形技术的研究应用进展 1、培养的成纤维细胞去皱技术在整形外科上的应用 2005年Anon道在2002年ChelseWestminster医院用Isoagen治疗85％烧伤病人取得了被称为“接近奇迹”的效果。病人康复后说：“瘢痕的皮肤整个不再正常，但治疗后很多的活力回到了她脸上，朋友们见到她认为又回到了她自己，我不能想象有可能用任何其他的方法。” 2、作用原理： 注射培养的自体成纤维细胞制剂能促进软组织的强化作用和促进组织的再生用于除皱和软组织的缺陷，胶原蛋白的氨基酸组成和结构，具有组织细胞的支持功能，是构成皮肤的支架。胶原分子在成纤维细胞内合成并分泌到细胞外，在细胞内先合成多肽链，继之，3条前α链集聚，生成前胶原，即胶原分子的前体。前胶原分子分泌到细胞外间隙内以后受到限制性蛋白水解作用，消除分子的伸展肽而软化为胶原。在细胞外间隙内消除伸展肽后，胶原分子自发地排到成纤维。胶原交联后，纤维获得了所需的张力强度。注射培养的自体成纤维细胞制剂增加了皮肤成纤维细胞，促进胶原分子的合成、交联，使皮肤恢复弹性，皱纹消失。 二、成纤维细胞成骨作用的研究 1、成纤维细胞在骨折愈合中的成骨作用 成纤维细胞在骨缺损等特殊环境下同成骨细胞一起参与成骨过程。Chai
Parrasad]等通过电镜发现成纤维细胞分泌合成胶原纤丝,并在胶原纤丝内沉积钙盐结晶,在纵形排列的胶原纤丝内可以看到64 OA的周期带。软骨细胞合成分泌的是Ⅱ型胶原;而成纤维细胞及成骨细胞合成分泌的是Ⅰ型胶原,两种细胞合成分泌的Ⅰ型胶原,无论在形态上,还是在生化结构上是完全一样的。成纤维细胞形成基质小泡,并引起小泡内的钙盐沉积。钙化的基质小泡形成毛球状钙球,钙球合并融合成为骨组织。金大地在骨缺损修复的超微结构中发现了不同发育阶段的成纤维细胞的成骨现象。 2、作用原理： 在骨折愈合实验及成纤维细胞体外培养实验研究中均已被证实。成纤维细胞在骨折修复中不仅对早期形成的纤维骨痂起到固定作用;在以后阶段中,纤维骨痂中的成纤维细胞两种途径演变为骨组织,成为两种相互联系的细胞。体外培养成纤维细胞证实,成纤维细胞不仅能分泌胶原、软多糖等基质成份,在细胞胞浆内及培养液中, ALP活性检测均为阳性,且能分泌大量骨小结节。成纤维细胞的固有发生性只有在特殊环境特殊需要的条件下才能表现出来;一些成骨因子在成纤维细胞骨化过程中起到诱导作用。这就提示我们在骨诱导因子的作用下,成纤维细胞不仅参与骨折愈合,在病理状态下,这种具有游走性的成纤维细胞可能发生局部浸润及成为组织病理性钙化和骨化的原因之一。
碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）神经再生 1975年Gospodarowicz首先报道运用理化方法从牛的大脑和垂体中分离纯化出碱性成纤维细胞生长因子（Basic Fibroblast Growth Factor，bFGF）。80年代，bFGF的氨基酸序列得到澄清。90年代，国内外相继运用基因工程方法成功获得重组bFGF，有力推动了关于bFGF的研究。系列研究证实，bFGF能刺激和调节血管内皮细胞、上皮细胞、成肌细胞、成骨细胞和神经胶质细胞等多种起源于中胚层、神经外胚层的细胞分化增殖，在胚胎发育、组织愈合中起重要作用。神经方面，关于bFGF的研究集中在中枢神经，发现其神经活性广泛，能保护神经元，促进突起增生，提示在周围神经再生方面的研究意义。现参考近年来bFGF与神经再生的相关文献作一综述。 一、内源性bFGF正常情况下的表达和神经损伤后的变化 (一)中枢神经：正常情况下，内源性bFGF以微量分布于脑、垂体和下丘脑等器官，已证实星形胶质细胞、垂体滤泡及部分神经细胞能分泌bFGF，在海马皮质、中脑、纹状体和小脑颗粒细胞均有其受体。神经损伤后，早期就能观察到内源性bFGF表达增多，是神经损伤后早期反应之一。 叶诸榕用原代培养的大鼠大脑星形胶质细胞作成机械损伤模型，观察发现bFGF在损伤后2小时开始表达，12小时达高峰，2天后开始回落，星形胶质细胞胞体肥大，突起粗大。崔建忠运用Northern杂交、组织学方法动态观察大鼠颅脑弥漫性损伤后bFGF的基因表达和组织学改变，结果发现轻度损伤后12小时，重度损伤后4小时，bFGF基因表达增加，均于第3天达到高峰。Grothe〔1〕研究脊髓神经节bFGF及其Ⅰ型受体（FGFR-1)的表达时发现，正常情况下，bFGF和FGFR-1的mRNA在脊神经节均有表达，原位杂交显示星形胶质细胞产生bFGF，而感觉神经元表达FGFR-1，提示旁分泌作用；坐骨神经损伤后，L4～6感觉神经元bFGF的表达在1天内即上调，7天达高峰，28天后恢复，FGFR-1的变化则不明显。 (二)周围神经：Grothe〔1〕和Meisinger〔2〕1997年报道了bFGF及其受体在周围神经的表达和损伤后变化的研究结果，而此前该领域未见报道。该研究发现，正常情况下，大鼠坐骨神经FGFR-1 mRNA表达高于bFGF mRNA。坐骨神经损伤后，FGFR-1和bFGF的mRNA 在损伤远、近端均于不同的时相点上调，并有时间依赖性；bFGF的表达具有自身正反馈特点，且不影响FGFR-1。这一实验说明，与在中枢神经一致，内源性bFGF表达增多同样是外周神经损伤后的早期反应。 神经损伤后bFGF表达上调的意义是什么?不少学者将bFGF运用于神经细胞培养和神经损伤模型，发现bFGF具有广泛的促神经再生作用，提示bFGF表达增多是神经损伤后的修复反应，且可能具有始动意义。 二、外源性bFGF促进神经再生 (一)中枢神经 (1)离体试验：端礼荣在原代培养的大鼠胚胎中脑神经细胞中加入bFGF，观察发现细胞微团集落形成率明显增加，不同剂量的bFGF表现量效关系，图像分析见神经细胞突起增多，连接丰富呈网状。Miyagawa运用bFGF于原代培养的海马神经元轴突损伤模型，观察发现实验组较对照组轴突增生、突起增多。Himmelseher〔3〕进一步研究了不同浓度的bFGF对如上模型的作用，结果未用bFGF的对照组神经元存活65%，运用不同剂量bFGF的试验组神经元变性均减少，10 mg／L组存活神经元达85%，神经突起亦增多、增长。 由上述试验可见，bFGF能促进培养的神经细胞增生，神经细胞损伤后运用bFGF，变性死亡减少，神经突起增生，说明bFGF在体外具有促进、保护神经细胞的作用。Malgrane 〔4〕研究大鼠背根神经节神经元对神经毒性药物的反应时发现：bFGF不但能刺激轴突再
重组人表皮生长因子治疗压疮临床疗效观察 摘要：目的：探讨重组人表皮生长因子治疗压疮的临床效果。方法：将100例压疮患者随机分为观察组（重组人表皮生长因子）50例和对照组（常规换药治疗）50例，观察组在初步清创基础上用重组人表皮生长因子湿敷，再予以敷料包扎；对照组采用5%呋喃西林或1%碘伏纱块湿敷后方纱敷料包扎，比较两组病人的治疗效果。结果：观察组明显缩短压疮创面愈合时间；不同时间创面平均愈合率明显优于对照组，差异均具有统计学意义（P<0.05 ）；结论：使用重组人表皮生长因子创面湿敷治疗，能显著促进创面愈合，缩短愈合时间，且无毒副作用。 关键词：重组人表皮生长因子；压疮；护理 Abstract：objective to Study of recombinant human epidermal growth factor in the treatment of pressure ulcers. methods 100 cases of patients with pressure ulcers were randomly divided into observation group （recombinant human epidermal growth factor）50 cases and control group （conventional dressing therapy）50 cases，observation group on the basis of preliminary debridement with recombinant human epidermal growth factor shi fu，again be dressing
重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶-说明书以下内容仅供参考，请以药品包装盒中的说明书为准。 重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶说明书 【说明书修订日期】 2006年12月07日 【警告】 运动员慎用 【特殊标记】 外 【药品名称】 重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶 【英文名称】 RecombinantBovine Basic Fibroblast Growth Factor Gel 【汉语拼音】 Chongzu NiuJianxingchengxianweixibao Shengzhangyinziningjiao 【成份】
本品主要成份为重组牛碱性成纤维细胞生长因子。系由含有高效表达牛碱性成纤维细胞生长因子基因的大肠杆菌，经发酵、分离和高度纯化后制成。 【性状】 应为无色透明凝胶。 【适应症】 促进创面愈合，用于烧伤创面(包括浅Ⅱ度、深Ⅱ度、肉芽创面)、慢性创面(包括体表慢性溃疡等)和新鲜创面(包括外伤、供皮区创面、手术伤等)。 【规格】 21000IU/5g/支 【用法用量】 将凝胶直接涂于清创后的伤患处，覆以适当大小的消毒敷料，适当包扎即可。推荐剂量每次约300IU/cm2，每日一次，或遵医嘱。 【不良反应】 未见不良反应。 【禁忌】
对本品过敏者禁用。 【注意事项】 1.本品为无菌包装，用后请立即盖上喷盖，操作过程中，尽量保持无污染。 2.勿将本品置于高温或冰冻环境中。 3.高浓度碘酒、酒精、双氧水、重金属等蛋白变性剂可能会影响本品活性，建议常规清创后用生理盐水冲洗后再使用本品。 【孕妇及哺乳期妇女用药】 孕妇及哺乳期妇女使用本品的疗效和安全性尚未确立，必须使用时请遵医嘱。 【儿童用药】 17岁以下儿童患者使用本品的疗效和安全性尚未确立，必须使用时请遵医嘱。 【老年用药】 60岁上老年患者使用本品的疗效和安全性尚未确立，必须使用时请遵医嘱。 【药物相互作用】
成纤维细胞的成骨作用 成纤维细胞经诱导可以形成骨组织，由于成纤维细胞直接参与了骨折愈合过程中纤维性骨痂的形成，其自身又具备被诱导成骨的能力，在体外大量培养扩增成纤维细胞，并施以有效的诱导因素(如上皮细胞、TNG-α和BMP等)使其具备成骨效能，然后与合适的生物材料载体复合，同时使该复合体在体外或体内保持良好的成骨能力并进行一定程度的成骨，则有望获得具有一定的生物力学支撑强度而成骨作用又保持活跃的“活骨”复合体，用以替代自体骨或异体骨回植体内治疗难以自身修复的较大的骨缺损，这无疑将为骨缺损的修复治疗开辟一条新的有辉煌前景的道路。 成纤维细胞修复受损心脏 美国研究人员通过对成纤维细胞进行重新编程，使其直接变成心肌细胞来修复受损的心脏。该方法一旦在人体试验中获得成功，再生的心肌组织将可用以修复因自然衰老和心脏停搏导致的损伤，同时还可避免干细胞疗法的安全隐患。该研究发表在《细胞》杂志上。 重组人类成纤维细胞生长因子 重组人类成纤维细胞生长因子研究具有非常重要的理论和实用意义，它有助于阐明分子水平的免疫调节机理，有助于疾病的预防、诊断和治疗，特别是利用基因工程技术生产的重组细胞因子已用于治疗肿瘤、感染、炎症、造血功能障碍等，并收到良好疗效，具有非常广阔的应用前景。 在炎症期，重组人类成纤维细胞生长因子对创伤细胞有明显的趋向活性，刺激成纤维细胞，血管内皮细胞等向创伤部位移动。当细胞迁移至损伤部位时，开始进入增殖和修复期，其中最关键的步骤之一是肉芽组织的形成，肉芽组织的本质是大量的毛细血管和丰富的成纤维细胞，重组人类成纤维细胞生长因子正是成纤维细胞、血管内皮细胞及血管平滑肌细胞的高效促生长剂，能够强烈促进新生毛细血管的形成，显著增加肉芽组织毛细血管数量和血液流量，改善创面微循环，为组织修复提供所必须的氧及丰富的营养物质；同时重组人类成纤维细胞生长因子对损伤组织部位神经纤维的再生也有显著的促进作用，加速损伤组织功能的恢复；成纤维细胞也是合成胶原的主要细胞，而胶原是肉芽组织中细胞间质的主要成份，重组人类成纤维细胞生长因子通过调控胶原的不断合成、分泌、改构和更新，而不断改善修复组织的结构和强度。
重组人表皮生长因子对鼻黏膜结构的影响 【摘要】目的：探讨重组人表皮生长因子（rhEGF）对鼻黏膜结构的影响。方法：对21例（42侧）经鼻内窥镜全鼻窦开放术患者进行同体对照实验，一侧直接将人表皮生长因子喷于纱条填于术后窦口鼻道复合体处，另一侧为止血纱条填塞术腔2日后对照，在用药后3天、1周、2周取双侧鼻黏膜进行透视电镜下观察鼻黏膜结构。结果：用药后3天上皮排列不整，细胞间连接松散，表层纤毛紊乱，大量脱落，1周时上皮、表层纤毛明显修复，2周时黏膜基本正常。结论：重组人表皮生长因子对鼻黏膜结构的损坏较小并可促其迅速恢复。 【关键词】重组人表皮生长因子；鼻黏膜；鼻内镜 重组人表皮生长因子（rhEGF）是可调节多类细胞生长的多肽，是极其重要的血管生成因子[1]。其通过控制具有调节上皮化、血管生成和胶原代谢的细胞增生和移行而帮助创面愈合[2]。rhEGF调节障碍将会导致修复延迟，乃至瘢痕的形成[3]。该药物是否会对鼻黏膜产生刺激或损害，以及损害的程度和损害后是否可逆，是该药物在鼻科临床能否应用的关键，本观察则是该药物对鼻黏膜结构的影响情况。 1 资料和方法 1.1 病例选择：选择双侧鼻息肉全鼻窦炎患者21例，男13例，女8例，年龄21~53岁，平均36.28岁，病程1~10年，患者均为初次手术并无明显变态反应病史，每例患者双侧鼻腔病变基本相同，按照鼻息肉慢性鼻窦炎诊疗评定标准（1997，海口）分类：Ⅱ型2期9例，Ⅱ型3期12例。手术前均作副鼻窦CT 扫描。 1.2 药物及使用方法：药品为重组人表皮生长因子（rhEGF），由深圳华生元基因工程发展有限公司提供（批号：19991201）。 21例均采用局麻鼻内窥镜下鼻息肉摘除全鼻窦开放术，术式为Messerklinger 术式，从前至后切除筛窦，再将上颌窦自然口扩大，酌情处理额窦和蝶窦，切除病变组织时尽量保留正常和病变较轻的黏膜，有利于术后功能的恢复，窦口鼻道复合体处经肾上腺素棉片压迫止血后，随机一侧直接将rhEGF喷于纱条填于该处，另一侧为止血纱条填塞术腔2日后对照，12例左侧做对照组，9例右侧做对照组，rhEGF隔日一换，共4~5次后按术后常规清洁处理。 1.3 组织病理学观察：术后用药3天、1周、2周取双侧窦口鼻道复合体处1
产品介绍 贝复济主要成分为重组牛碱性成纤维细胞生长因子（rb-bFGF)。是一种多功能细胞生长因子，具有广泛的生物活性，能促进与创伤修复有关的所有细胞迅速增殖和分化，从而主动促进创面修复，全面提高愈合质量，是一种安全有效的创伤修复治疗新药。 贝复济也是国内唯一，国际上第一个正式批准上市使用bFGF 用于创伤修复的药物。 作用机理 贝复济的主要成分为重组牛碱性成纤维细胞生长因子（rb-bFGF)，对来源于中胚层和外胚层的组织具有促进修复和再生的作用。它与损伤部位的靶细胞（包括角膜上皮细胞、角膜内皮细胞和基质细胞）表面的特异性结合，激发细胞主动修复功能，促进角膜细胞的分裂增殖、移行和分化，加速角膜损伤愈合及改善角膜
愈合质量。 产品特点源于基因工程技术的国家一类新药加快伤口愈合，缩短创面愈合时间减少及避免瘢痕的形成 增加创面的抗撕裂强度 安全有效、无毒副作用 应用 外伤、刀割切、冻伤、手术伤口及激光创面、医学美容术后创面。 各种原因引起的溃疡、伤口延期不愈，糖尿病溃疡、放射性溃疡、褥疮、瘘窦、宫颈糜烂、口腔溃疡等。 烧烫伤、包括浅Ⅱ度、深Ⅱ度、肉芽创面。 产品介绍 贝复济冻干粉主要成分为外用重组牛碱性成纤维细胞生长因子（rb-bFGF)。是一种多功能细胞生长因子，具有广泛的生物活性，能促进与创伤修复有关的所有细胞迅速增殖和分化，从而主动促进创面修复，全面提高愈合质量，是一种安全有效的创伤修复治疗新药。 贝复济冻干粉采用新型专利无菌包装, 滴瓶设计, 使用方便。 产品特点滴瓶设计--使用方便 无菌现配--活性更强 直接作用于修复细胞, 加速创面修复高度安全、无毒副作用 应用普外科
如对您有帮助，可购买打赏，谢谢 肝细胞生长因子是什么 导语：肝细胞可以再生是因为我们的身体里面拥有肝细胞生长因子，如果我们的肝细胞因子受到损伤或者是说肝细胞因子减少了，都会大大地影响我们的肝 肝细胞可以再生是因为我们的身体里面拥有肝细胞生长因子，如果我们的肝细胞因子受到损伤或者是说肝细胞因子减少了，都会大大地影响我们的肝细胞再生的。想要让自己的肝细胞可以再生就要保护好我们的肝细胞再生因子，但是，大家知不知道什么是肝细胞生长因子呢？ 1HGF及其受体的结构 肝细胞生长因子(HGF)[1]最早是1984年由日本的中村敏一教授从大鼠血浆中得到的，其结构实质是含728个氨基酸的肝素结合糖蛋白. 它来自间质细胞，以旁分泌方式作用于邻近细胞，并与细胞表面的受体结合并激活酪氨酸激酶活性，具有较强的促有丝分裂、组织成形、诱导上皮细胞迁移、侵袭以及诱导血管生成等作用[2]. HGF的受体是原癌基因cmet编码的一种跨膜蛋白，称为Met，是由Mr为190000的前体蛋白分裂而得来，由Mr为50000的a链和Mr为145000的3链经二硫键相连而成的杂二聚体. Prat等发现某些癌细胞的Mr为190000 Met 的前体，缺乏裂解过程，不需连接配体就已有活性，因此就失去了HGF的生长控制. 各种瘤细胞和cmet转化后的细胞都过度表达Met，对HGF的反应比正常细胞更敏感强烈. 2HGF及其受体的生物学作用 (1) 启动肝再生实验证明，在众多细胞因子中，HGF是肝再生的启动信号，并在肝细胞增殖过程中起重要作用. (2) 促进细胞分裂作用HGF 在原代肝细胞的无血清培养中可刺激肝细胞DNA合成，1 g/L HGF即可 预防疾病常识分享，对您有帮助可购买打赏
鸡胚成纤维细胞培养 1、准备：取各种已消毒的培养用品置于净化台面，紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、 75%酒精擦拭手至肘部。 2、布局：点燃酒精灯，安装吸管帽。 3、选胚：取9-10日龄鸡胚，（注：鸡胚日龄越小，形成细胞活力越好，但产量较低）用新 洁尔灭消毒蛋壳10分钟后放净化台。用碘酒、酒精消毒蛋壳。用镊子打开气室。 4、用另一套镊子将壳膜打开将鸡胚夹起去头、爪、眼，放灭菌生理盐水中。 5、把组织块置于烧杯中，用Hanks液漂洗2~3次，去除血污；如怀疑组织可能污染，可先 置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。 6、剪切：用眼科剪把组织切成1~2毫米大小的块，以便于消化。 7、处理组织：将已剪碎的组织碎片倒入一个带玻璃珠的灭菌三角瓶中，其中加入0.25%的 胰酶，10个胚约7ml，或加组织消化液，一个胚1ml（组织消化液以及胰酶的配置见微生物指导）结扎瓶口或塞以胶塞。 8、消化：将其置入37℃水浴箱中或用恒温水浴，消化中应不停摇动，如用电磁恒温搅拌器 消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。消化10－15分钟。一般约12分钟。视鸡胚日龄大小而定。越小消化时间越短。见组织松软即可。一般不可消化时间太长否则容易导致细胞活力不足。 9、分离：在消化过程中见消化液发混浊时，可用吸管吸出少许消化液在镜下观察，如组织 已分散成细胞团或单个细胞，立即终止消化，加入0.5％的含5％犊牛血清双抗的的水解乳蛋白Hank，s液少许。（制法见微生物试验实习指导），用力震摇，或用吸管吹打。 使细胞分散，脱落。然后用纱布过滤或随即通过适宜不锈钢筛，滤掉尚未充分消化开的组织块。低速（500~1000转/分）离心消化液5分钟，吸出上清（可以不离心吸掉上清），加入适量含有血清的培养液。 10、计数：用计数板计数，如细胞悬液细胞密度过大，再补加培养液调整后，分装入培 养瓶中。对大多数细胞来说，pH要求在7.2~7.4范围，培养液呈微红色，如颜色偏黄，说明液体变酸，可用NaHCO3调整。分装在细胞培养瓶中。视细胞多少而定加入培养基。 培养基为0.5％的含5％犊牛血清双抗的的水解乳蛋白Hank，s液. 11、将其置入co2细胞培养箱中，37度。瓶口需用纱布棉塞或螺旋帽堵塞，纱布塞易 生霉菌，每次换液时需要换新塞。培养24小时进行观察。一般在24－48小时可形成单层细胞。 传代 1. 倾倒培养瓶内旧培养液。 2. 向瓶内加入胰蛋白酶和EDTA混合液少许，以能覆满瓶底为限。 3. 置温箱中2~5分钟，当发现细胞质回缩，细胞间隙增大后，立即终止消化。 4. 吸除消化液，向瓶内注入Hanks液数毫升，轻轻转动培养瓶，把残余消化液冲掉。注意加Hanks液冲洗细胞时，动作要轻，以免把已松动的细胞冲掉流失，如用胰蛋白酶液单独消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液冲洗，直接加入培养液。 5. 用吸管吸取营养液轻轻反复吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。 6. 计数板计数后，把细胞悬液分成等份分装入数个培养瓶中，置温箱中培养。
成纤维细胞生长因子及其与受体作用机制 的研究进展1 姜媛媛，任桂萍，王文飞，郝建权，李德山 东北农业大学生命科学学院生物制药教研室，哈尔滨（150030） E-mail：deshanli@https://www.doczj.com/doc/e64679167.html, 摘要：成纤维细胞生长因子(FGF)是一类多肽类物质，其中大多数成员可与肝素结合发挥作用。目前已知FGF至少包括23个因子，即FGF1～23。部分FGF家族成员N末端有大约3O个氨基酸残基组成的典型信号肽序列，可以分泌到细胞外。FGF家族成员是一类生理功能较广泛的生长因子，功能包括促进细胞有丝分裂、趋化与血管生成、促进中胚层和神经外胚层细胞的存活与生长等。本文根据最近的研究成果对 FGF因子及其受体研究进展做一综述，并主要对FGF因子特征及其研究趋势进行了探讨。 关键词：FGF，FGF受体，肝素 中图分类号:Q74 引言： 成纤维细胞生长因子最早是从脑和垂体的提取液中发现的，该物质是一种能促进成纤维细胞生长的多肽类活性物质，可以通过与细胞膜特异性受体结合对细胞生长进行调节。从70年代中期到目前已进行了大量广泛的研究，目前已知FGF至少包括23个因子，它们在一级氨基酸序列上有一定的同源性，并有类似的生物学功能，且广泛存在于体内多种组织中。FGF对中胚层和神经外胚层来源的细胞具有十分明显的促细胞分裂增殖作用，并且在机体内的胚胎发育、细胞生长分化、创伤组织愈合及肿瘤发生发展中起着十分重要的作用。 1. 成纤维细胞生长因子（FGF）家族 成纤维生长因子（Fibroblast growth factor, FGF）又被称为肝素亲和生长因子(Heparin binding growth factor, HBGF)，是一类通过与细胞膜特异性受体结合发挥作用的多肽分子。现已知FGF家族至少包括23个成员，即FGF1～FGF23。FGF家族成员之间的氨基酸序列同源性约为25%～50%，其每个成员都有140个氨基酸的中轴，该中轴在不同的成员中有高度的同源性。结构分析表明，此中轴折叠成12条逆向平行的β链，它们又进一步形成圆柱状的结构。部分FGF家族成员N末端有大约3O个氨基酸残基组成的典型信号肽序列，使得它们可通过内质网一高尔基复合体的经典(即自分泌和旁分泌)途径被分泌到细胞外，但其中也有部分FGF则因本身缺乏信号肽结构，不能向外分泌，只能在细胞受损时释放[1]。多数FGF（如FGF3～8、10、15、17～19、21～23）的N末端具有典型的信号肽序列。而FGF16和FGF20虽然没有明确的信号肽序列却也能高效地分泌到细胞外[12]。FGF1 和FGF2也缺乏信号肽序列和正常的分泌途径，却也能出现在胞外基质，推测两者可能来自受伤的细胞，或者通过与内质网-高尔基体通路不同的细胞脱颗粒机制释放至胞外的。此外，FGF 11～14没有典型的信号肽序列，因此认为这些FGF是在胞内发挥作用[13]。由于FGF家族成员之间的氨基酸序列有25％～50％的同源性，分子结构有一定的共性，故FGF不同分子之间的生物学效应既有相似性，又有各自的特点[1-3]。 FGF1(aFGF)和FGF2(bFGF)是最先被发现，也是迄今为止研究最充分的两个成员，因其1本课题得到黑龙江省科技厅重点攻关项目（编号：2006G0461-00）的资助。
重组人表皮生长因子凝胶（酵母） Chongzu Ren Biaopi Shengzhangyinzi Ningjiao (Jiaomu) Recombinant Human Epidermal Growth Factor Gel（Yeast） 本品系由高效表达人表皮生长因子基因的酵母，经发酵、分离和高度纯化后,加入凝胶基质制成。含适宜稳定剂，防腐剂，不含抗生素。 1 基本要求 生产和检定用设施、原料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”的有关要求。 2 制造 2.1 工程菌菌种 2.1.1 名称及来源 重组人表皮生长因子工程菌株，系由带有人工合成的人表皮生长因子基因的DNA片段整合到酵母菌染色体基因组中构建而成。 2.1.2 种子批的建立 应符合“生物制品生产检定用菌毒种管理规程”的规定。 2.1.3 菌种检定 主种子批和工作种子批的菌种应进行以下各项全面检定。 2.1. 3.1 划种BMG1琼脂平板 应呈典型酵母菌菌落形态，无其他杂菌生长。 2.1. 3.2 染色镜检 在光学显微镜下观察，应形状规则，用次甲兰染色，无死亡细胞。 2.1. 3.3 筛选标志检查 应符合该基因表型特征。 2.1. 3.4 人表皮生长因子表达量 在摇床中培养，应不低于原始菌种的表达量。 2.1. 3.5 人表皮生长因子基因稳定性检查 涂BMG1琼脂平板，挑选至少50个克隆，用PCR检测人表皮生长因子基因，阳性率应不低于95％。 2.2 原液 2.2.1 种子液制备 将检定合格的工作种子批菌种接种于适宜的培养基（可含适量抗生素）中培养，供发酵罐接种用。 2.2.2 发酵用培养基 采用适宜的不含任何抗生素的培养基。 2.2.3 种子液接种及发酵培养
肝细胞生长因子及其受体c(一) 【关键词】肝细胞生长因子；受体；c 【摘要】肝细胞生长因子（HGF)是一种多肽生长因子，具有促进包括肝细胞、上皮细胞、内皮细胞、造血细胞等多种类型细胞的生长、迁移和形态发生的作用.它还参与多种细胞的增殖、迁移,对各类肿瘤的侵袭转移有着重要的诱导作用.本文通过对近年来国外有关文献的回顾，希望能够为进一步探讨HGF及其受体在卵巢癌治疗中的具体意义提供新的思路. 【关键词】肝细胞生长因子；受体；cmet；卵巢肿瘤 1HGF及其受体的结构 肝细胞生长因子(HGF)〔1〕最早是1984年由日本的中村敏一教授从大鼠血浆中得到的，其结构实质是含728个氨基酸的肝素结合糖蛋白.它来自间质细胞，以旁分泌方式作用于邻近细胞，并与细胞表面的受体结合并激活酪氨酸激酶活性，具有较强的促有丝分裂、组织成形、诱导上皮细胞迁移、侵袭以及诱导血管生成等作用〔2〕.HGF的受体是原癌基因cmet编码的一种跨膜蛋白，称为Met，是由Mr为190000的前体蛋白分裂而得来，由Mr为50000的a链和Mr为145000的3链经二硫键相连而成的杂二聚体.Prat等发现某些癌细胞的Mr为190000Met的前体，缺乏裂解过程，不需连接配体就已有活性，因此就失去了HGF的生长控制.各种瘤细胞和cmet转化后的细胞都过度表达Met，对HGF的反应比正常细胞更敏感强烈. 2HGF及其受体的生物学作用 (1)启动肝再生实验证明，在众多细胞因子中，HGF是肝再生的启动信号，并在肝细胞增殖过程中起重要作用.(2)促进细胞分裂作用HGF在原代肝细胞的无血清培养中可刺激肝细胞DNA合成，1g/LHGF即可观察到生物活性，最大活性浓度5~10g/L.另有报道HGF对其他许多细胞也有刺激作用，例如能够刺激肾小管细胞、角化细胞、黑色素瘤等细胞的DNA合成.(3)细胞运动作用HGF具有类似散射因子的功能，在一些上皮细胞和内皮细胞培养体系中加入不同浓度，均可促进细胞扩散和迁移HGF具有促进包括肝细胞、上皮细胞、内皮细胞、造血细胞等多种类型细胞的生长、迁移和形态发生的作用，还参与多种细胞的增殖、迁移和形态发生.(4)肿瘤坏死作用高浓度的HGF对某些癌及肉瘤细胞系有抑制作用和肿瘤坏死用，该作用机制尚不完全清楚.（5）cmet原癌基因的RNA表达存在于人类的某些上皮组织:如肝脏、肾脏、胎盘、消化道上皮等〔3〕.共聚焦激光扫描显微镜下证实，cmet基因蛋白表达位于腺样结构细胞的边缘.cmet编码的蛋白属于酪氨酸激酶生长因子的受体家族，在体外细胞恶性转化的过程中可以出现基因扩增、重排和过度表达.对于依赖外生的受体调节生长刺激的，进入细胞周期和分裂进程的正常细胞来说，这就意味着存在着一个调节细胞增生的平衡机制〔4〕.相比较而言，肿瘤细胞通过产生生长因子与受体获得一定水平的自主生长信号（自主分泌）.近年来，已有相关研究表明，与癌形成和发展有关的不同细胞类型之间出现异型信号(非自主分泌)，但目前的体内实验方法不足以说明这种复杂的关系〔4〕.在研究与cMet 蛋白的相关信号通过非自分泌机制促进转移中报告，利用转基因鼠移植模型将过度表达HGF 及受体cmet的肿瘤细胞移植后，直接评估异型信号对转移部位的作用〔5〕.在体内，非自主分泌信号与自主分泌进行的是条件不均衡的竞争.恶性肿瘤细胞的非内部生长因子对体内转移产生重大影响，提供了异型信号对肿瘤进展发挥作用的实验依据. 3HGF及其受体对癌细胞侵袭的影响机制 肿瘤的浸润和转移是一个非常复杂的病理过程，也是患者死亡的主要原因.大量的临床和实验研究表明，HGF和cMet在肿瘤的发生发展中具有重要作用.正常细胞有能力通过减少cmet 的表达控制其对HGF的反应；而在大部分肿瘤细胞中cmet为过表达的状态，并呈现高水平的自体磷酸化.一般来说，cmet的过表达是由于基因的扩增所致.在结，直肠癌、肝癌和脑胶质瘤中，cmet的表达与肿瘤的发生发展有着密切联系.Ivan和Webb等用激活的ras和ret基
细胞生物学实验报告 细胞原代培养 姓名： 学号： 班级： 专业： 同组成员： 一、实验原理
细胞培养是生物学和医学研究中最常用的手段之一，可分为原代培养和传代培养两种。原代培养是直接从生物体获取组织或器官的一部分进行培养。由于培养的细胞刚刚从活体组织分离出来，故更接近于生物体内的生活状态。这一方法可为研究生物体细胞的生长、代谢、繁殖提供有力的手段。同时也为以后传代培养创造条件。 原代培养的方法： 1、组织块法在平皿中用弯头剪把组织尽量剪碎，每个组织块小于1mm3大小。用Hanks 液洗涤2—3次，自然沉淀。用吸管吸去上清液。将组织块贴于培养瓶进行培养。 2、酶消化法将1mm3大小的组织块放入1个三角瓶内加入10—30ml的%的胰蛋白酶。370C磁棒搅拌消化20－30分钟。然后终止消化。用几层无菌纱布过滤。取过滤液，离心800rpm 5—10分钟收集细胞。弃上清，加入带有双抗的培养基，放入培养瓶培养。 取材注意事项： 取材要注意新鲜和保鲜。取材应严格无菌。取材和原代细胞制作时，要用锋利的器械，如手术刀或剃须刀片切碎组织，尽可能减少对细胞的机械损伤。要仔细去除所取材料上的血液（血块）、脂肪、坏死组织及结缔组织，切碎组织时应避免组织干燥，可在含少量培养液的器皿中进行。取材应注意组织类型、分化程度、年龄等，一般来讲，胚胎组织较成熟个体组织容易培养，分化低的较分化高的组织容易生长，肿瘤组织较正常组织容易培养。 二、实验目的 1、理解细胞原代培养原理 2、熟悉细胞原代培养方法与过程 3、了解细胞原代培养的应用 4、独立进行细胞原代培养操作 三、实验材料 手术小直剪刀、眼科直镊子、眼科弯镊子、玻璃平皿、培养瓶、试管、移液管、巴斯德吸管、废液缸、75%酒精棉球、酒精灯。 动物：9-12日龄的鸡胚蛋 四、实验步骤
易孚(重组人表皮生长因子凝胶) 【药品名称】 商品名称：易孚 通用名称：重组人表皮生长因子凝胶 英文名称：Recombinant Human Epidermal Growth Factor Gel 【成份】 重组人表皮生长因子。 【适应症】 本品适用于皮肤烧烫伤创面(浅Π度至深Ⅱ度烧烫伤创面)、残余创面、供皮区创面及慢性溃疡创面的治疗。 【用法用量】 常规清创后，用生理氯化钠溶液清洗创面，取本品适量，均匀涂于患处。需要包扎者，同时将本品均匀涂于适当大小的内层消毒纱布，覆盖于创面，常规包扎，一日一次或遵医嘱。推荐剂量为每lOOcm2创面使用本品10g(以凝胶重量计)。 【不良反应】 未见严重不良反应。 【禁忌】 对本品过敏者 【注意事项】 本品为无菌包装，用后请即旋紧管口，以防污染。本品无抗菌作用，但不会增加创面感染机会。对感染创面，在进行创面清创的前提下，可考虑联合使用抗菌药物控制感染。对于各种慢性创面，如溃疡、褥疮等，在应用本品前，应先行彻底清创去除坏死组织，有利于本品与
创面肉牙组织的充分接触，提高疗效。当本品的外观、性状发生改变，如出现霉变、变质等现象时，应禁止使用。 【特殊人群用药】 儿童注意事项： 无禁忌。 妊娠与哺乳期注意事项： 尚不明确。 老人注意事项： 无禁忌。 【药物相互作用】 本品遇酒精、碘酒等，可能会使EGF变性，而使活性降低。因此使用酒精、碘酒等消毒后，应再用生理氯化钠溶液清洗创面，然后使用本品。 【药理作用】 1.药理作用：本品为外用重组人表皮生长因子(rhEGF)。可促进动物皮肤创面组织修复过程中的DNA、RNA和羟脯氨酸的合成，加速创面肉芽组织的生成和上皮细胞的增殖，从而缩短创面的愈合时间。 2.毒理研究：(1)重复给药毒性：家兔背部破损皮肤涂抹本品(6g凝胶/次，每日1次，浓度200μg/g，相当于临床用药浓度的20倍)，连续36天，给药局部皮肤及各脏器均未见明显毒性反应。本品较长时间局部应用对愈合后创面的远期影响不清楚。 (2)遗传毒性和生殖毒性：尚无动物研究资料。(3)致癌性：研究文献提示，EGF有促进某些肿瘤细胞生长的作用，但也有一些动物和体外研究文献提示，EGF作为一种具有多种功能的细胞因子，可以抑制某些肿瘤细胞的生长。对于烧伤患者(尤其是较大面积烧伤时)局部较长时间使用本品的影响尚不清楚。临床药代动力学研究结果提示患者烧伤面积达5～10％时，
本版药典（三部）新增品种名单 预防类 ?23价肺炎球菌多糖疫苗 ?无细胞百白破b型流感嗜血杆菌联合疫苗 ?黄热减毒活疫苗 ?冻干人用狂犬病疫苗（人二倍体细胞） ?S a b i n株脊髓灰质炎灭活疫苗（V e r o细胞） ?口服I型I I I型脊髓灰质炎减毒活疫苗（人二倍体细胞)治疗类 ?马破伤风免疫球蛋白F(a b')2 ?人凝血酶 ?人干扰素α2b阴道泡腾片 ?外用人粒细胞巨噬细胞刺激因子凝胶 ?康柏西普眼用注射液 ?精蛋白人胰岛素混合注射液（30R) ?精蛋白人胰岛素混合注射液（50R) ?甘精胰岛素 ?甘精胰岛素注射液 ?赖脯胰岛素 ?赖脯胰岛素注射液
?治疗用卡介苗 体外诊断类 ?人类免疫缺陷病毒抗原抗体诊断试剂盒（酶联免疫法） ?乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒1型核酸检测试剂盒 二部转三部品种 ?人胰岛素 ?人胰岛素注射液 ?精蛋白人胰岛素注射液 ?注射用人生长激素 本版药典（三部）采用生物制品通用名称与原通用名称对照
本版药典（三部）新增的生物制品通则/总论/通则和指导原则名单 一、新增的生物制品通则 ?生物制品通用名称命名原则 二、新增的总论 ?人用聚乙二醇化重组蛋白及多肽制品总论 ?人用基因治疗制品总论 ?生物制品病毒安全性控制 ?螨变应原制品总论人用马免疫血清制品总论 三、新增的通则和指导原则 ?3128抗毒素/抗血清制品分子大小分布测定法
?3129单抗电荷变异体测定法 ?3130单抗N糖谱测定法 ?3208人血白蛋白铝残留量测定法（第二法） ?3303鼠源性病毒检査法（第二法） ?3307黄热减毒活疫苗猴体试验 ?3308禽源性病毒荧光定量P C R(Q-P C R)检查法 ?3407外源性D N A残留量测定法（第三法） ?3428人免疫球蛋白类制品I g A残留量测定法 ?3429免疫化学法 ?3503人用狂犬病疫苗效价测定法（第二法） ?3534S a b i n株脊髓灰质炎灭活疫苗效力试验 ?3535康柏西普生物学活性测定法 ?3601生物制品生产及检定用实验动物质量控制 ?3603重组胰蛋白酶 ?3650氢氧化铝佐剂 ?9401生物制品生物活性/效价测定方法验证指导原则?9402生物制品稳定性试验指导原则生物制品术语 本版药典（三部）未收载2015年版药典(三部）及增补本中的品种名单 治疗类 ?注射用重组链激酶
一、鸡胚成纤维细胞的体外培养 鸡胚成纤维细胞在病毒学研究中十分常用。孵化8－12d的鸡胚可用作培养的材料来源。 （一）实验材料 1. 鸡胚：孵化10d的受精蛋数个。孵化方法是将受精蛋放到38.5℃孵卵箱或恒温箱中，静置。每日翻动1—2次，以防止鸡胚粘连到蛋壳上影响发育。箱内湿度(40～70％)可通过在箱底放一盛水盘来维持。鸡胚的孵化期为2ld。孵化前，如遇蛋壳表面污物较多，可用刀片等器具刮除，不要用湿布擦拭，更不能用酒精棉球消毒或者用水洗蛋。孵育前可将受精蛋保存在10℃左右，保存期一般不超过10d。也有人将受精蛋保存在4℃冰箱中。 2. 消化液：含0.25％胰蛋白酶、青霉素100 1U／ml、链霉素100 μg/ml混合消化液。用Hanks 液或HEPES液配制。 3. 培养液：DMEM培养液，添加10％－20％的胎牛血清（FCS）、青霉素100 IU/ml、链霉素100 μg/mL。 4. 其它培养用品：手术器械、平皿、三角瓶或15ml血清瓶、离心管、100目不锈钢筛网、培养瓶或培养板、振荡水浴箱、离心机等。 （二）操作步骤 1)取孵化10d的鸡胚，分别用碘酒与酒精棉球擦拭消毒，晾干。用一已消毒金属器具将受 精蛋大头端击破，用镊子小心夹去破碎蛋壳，然后撕去气室外面的膜，暴露出尿囊绒膜及附着的血管。开口大小以受精蛋内容物不溢出为宜，但不宜太小。用镊子轻轻夹住鸡胚的颈部，小心取出鸡胚，放于无菌培养皿中，除去头部、四肢、内脏和皮肤。 2)胚体用Hanks液或生理盐水清洗3次，切成1－2 mm3的小块，然后转移到容积适中的 三角瓶或15ml血清瓶内。 3)加入适量消化液，一般每10个鸡胚加20 m1消化液，用胶塞密封瓶口。 4)在振荡水浴箱上37℃慢速搅拌5－10 min。加入少量血清钝化胰蛋白酶。然后通过100 目不锈钢筛网，制备细胞悬液，将细胞悬液转移到离心管中。 5)离心（800 rpm，10 min），弃上清液，将细胞沉淀用培养液洗2次。 6)加入培养液，用吸管吹打制成细胞悬液。用血球计数板计数细胞。 7)以0.2～1X06个细胞/ml的密度接种细胞。于37℃、5％CO2培养箱中培养。每2－3d换 液1次。待细胞汇合成片后，可行传代培养。 （三）结果 在倒置显微镜下观察，用8～12d龄鸡胚培养的细胞主要为具有长突起的梭形、星形或三角形的成纤维细胞。用I型和Ⅲ型胶原的抗体作免疫细胞化学分析，培养物以呈阳性反应的成纤维细胞为主。 （四）讨论 鸡胚成纤维细胞在普通培养液中具有生长优势，一般不需特殊处理，经几次传代后就可逐渐排除其它细胞，得到较纯的成纤维细胞。体外培养的胚胎细胞的形态与所取鸡胚的胚龄有关。若用体节前期的胚胎，培养的细胞不是典型的长的或星形的成纤维细胞，而为宽扁的细胞，这可能与胚胎细胞的分化状态有关。
中国组织工程研究 第20卷 第15期 2016–04–08出版 Chinese Journal of Tissue Engineering Research April 8, 2016 Vol.20, No.15 ISSN 2095-4344 CN 21-1581/R CODEN: ZLKHAH 2255 ·综述· www. CRTER .org 苏钰涵，女，1986年生，内蒙古自治区人，汉族，医师，内蒙古医科大学在读硕士。 通讯作者：翁立新，硕士，教授，研究生导师，内蒙古医科大学病理教研室，内蒙古自治区呼和浩特市 010059；内蒙古医科大学附属医院病理科，内蒙古自治区呼和浩特市 010050 中图分类号:R318 文献标识码:A 文章编号:2095-4344 (2016)15-02255-10 稿件接受：2016-02-09 https://www.doczj.com/doc/e64679167.html, 成纤维细胞生长因子的信号通路 苏钰涵1 ，杜 华2 ，牛广明3 ，王 静4 ，翁立新1，2(1 内蒙古医科大学病理教研室，内蒙古自治区呼和浩特市 010059；内蒙古医 科大学附属医院，2病理科，3影像科，内蒙古自治区呼和浩特市 010050；4 内蒙古包头市第四医院ICU ，内蒙古自治区包头市 014030) 引用本文：苏钰涵，杜华，牛广明，王静，翁立新. 成纤维细胞生长因子的信号通路[J].中国组织工程研究，2016，20(15):2255-2264. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.15.018 ORCID: 0000-0002-2684-4178(翁立新) 文章快速阅读： 文题释义： 成纤维细胞生长因子：成纤维细胞生长因子可以由内皮细胞、平滑肌细胞和巨噬细胞分泌。它的作用是促进内皮细胞的游走和平滑肌细胞的增殖，不能使平滑肌细胞游走。能够促进新血管形成，修复损害的内皮细胞。成纤维细胞生长因子被认为是病灶形成促进因子，但从修复角度看它也有有利的一面。 成纤维细胞生长因子亚科：分泌的信号成纤维细胞生长因子基于生化功能、序列相似性和进化关系可以分为一些亚科：旁分泌的成纤维细胞生长因子的5亚科，内分泌的成纤维细胞生长因子的一个亚科，和细胞内成纤维细胞生长因子的一个亚科。 摘要 背景：在最早的胚胎发育阶段和器官形成期间，成纤维细胞生长因子家族成员的功能是维持祖细胞并介导祖细胞的生长、分化、存活和形态。成纤维细胞生长因子常在成熟的组织通过重新激活信号通路介导代谢功能、组织修复和再生。 目的：总结并讨论成纤维细胞生长因子信号通路对组织和器官的作用。 方法：由第一作者用计算机检索中国期刊全文数据库(CNKI ：2010至2016年)和Medline 数据库(2000至2016年)，检索词分别为“成纤维细胞生长因子，信号通路”和“Fibroblast growth factor ，signaling pathway ”语言分别设定为中文和英文。全面阐述成纤维细胞生长因子的信号通路的研究进展。 结果与结论：①共纳入47篇文献；②哺乳动物成纤维细胞生长因子家族的信号是由18个分泌蛋白组成，这18个分泌蛋白与4个信号酪氨酸激酶成纤维细胞生长因子受体相互作用；③成纤维细胞生长因子配体与受体的相互作用是由蛋白质或辅助因子蛋白多糖和胞外结合蛋白来调节的；④活化的成纤维细胞生长因子受体使特定的酪氨酸残基磷酸化，调节与细胞质接头蛋白、RAS-MAPK 、PI3K-AKT 、磷脂酶C γ和STAT 细胞内信号通路的相互作用，4个结构相关的细胞内非信号的成纤维细胞生长因子相互作用来调节电压门控钠离子通道；⑤结果说明，成纤维细胞生长因子存在所有的组织和器官中，成纤维细胞生长因子信号通路异常与发育缺陷、损害对损伤的反应、导致代谢紊乱和癌症发病相关联。 关键词： 组织构建；组织工程；成纤维细胞生长因子；成纤维细胞生长因子受体；信号通路；Klotho 细胞；硫酸乙酰肝素蛋白多糖；成纤维细胞生长因子结合蛋白1；细胞外调节蛋白激酶；微小RNA ；肺动脉高压；原发性乳腺肿瘤；内蒙古自治区自然科学基金 主题词： 组织工程；成纤维细胞生长因子；肿瘤 基金资助： 内蒙古自治区自然科学基金(NJZY12151)