第二章农药残留样品的采集
在农药残留分析中，为了获得正确的、有效的分析结果，取样是非常重要的环节。这一点经常被人忽视或没有足够地理解。在农药残留分析的所有过程中，除了取样，其余所有过程都可以通过质量保证和质量控制以最大限度地减少结果的误差，只有取样，最难受到质量控制的评价和检查。因此，对取样的正确理解和采用正确的取样方法，是保证残留分析结果准确、有效的关键。
2.1样品的种类
残留分析样品按其来源可分为主观样品和客观样品。主观样品是人们为研究农药残留量与各种因素关系，从设计的试验区域内采集的样品。例如，为农药在某种作物上登记需取得残留评价数据、制定农产品中最高残留限量标准、制定农药合理使用准则以及研究农药在动植物体内代谢和在环境中降解规律等设计一系列试验，所采集的各种样品。客观样品多指监测样品和执法样品，这些样品来源于非人为设置的试验区域，测定的农药残留种类是未知的或施药背景不清楚的样品。例如，为市场管理、环境治理、污染事故调查等提供残留数据而采集的样品。其中有水、土、动植物样品等。水样包括农田水、江河水、湖泊水、渠水、池塘水、雨水和地下水等。气样包括大气、小环境气体（车间、仓库、施药现场）等。动物样品包括家畜、家禽、肉蛋奶及其制品、水生动物（鱼、虾、贝等）等。植物样品包括谷物、蔬菜、水果、油料、茶叶、烟草、甜菜、中草药、饲料等陆生植物，以及海带、紫菜、藕、水藻类、水草等水生植物等。土样包括农田土、草原土、森林土、荒原土、淤泥土等。
残留分析的样品（sample）大多数情况下是从静态群体中取出的。如田间试验小区的作物，一堆粮食或集装箱中的货物；但有些情况下要从动态群体中取样，如流动的河水，循环的血液或生产线上的传送带，群体随时间变化，从这类群体中所取出的一小部分称为样本（specimen）。
按照IUPAC和ISO提出的定义，从群体采集的送达残留分析实验室的样品材料称为实验室样品（laboratory sample）；实验室样品经过缩分减量或经过精制后的样品称为检测样品（test sample）；从检测样品中称取出的用于分析处理的试样则称为检测样份（test portion）；检测样份经过提取、净化处理后进入待测状态时则称为检测溶液（test solution）,而不再称为样品溶液（sample solution）。
2.2 取样方法
样品是指统计学意义上代表群体的一个部分。因此，取样须遵照以下原则：采集的样品必须具有代表性；采样方法必须与分析目的保持一致；采样量应满足残留测定的精度要
求；取样和样品贮存过程中尽可能防止和避免欲测定组分发生化学变化或者丢失；要防止和避免样品受到玷污，尽可能减少无关化合物引入样品；样品的采取过程应保持前后的一致性。
以下主要介绍农作物和食品样品的采集，根据不同的目的和样品类型有以下取样方法。
2.2.1农药残留田间试验及取样
1. 农药残留田间试验的目的和要求
农药残留田间试验的目的是了解农药在大田农作物施用后的残留消解动态以及不同施药水平与农药最终残留量的关系，并以此为重要依据，制定农药安全使用标准和满足农药登记的要求。科学、合理、规范化的试验是提供足够数量和具有充分代表性残留分析样品的基础，也是取得完整残留评价资料的保证。它是根据某种农药在防治农作物病虫草害时的实际使用情况，再按残留试验要求设计的试验，而防治对象存在与否并不影响试验方案的实施。
农药残留田间试验的要求包括：一种用于多种作物的农药产品，可选择1~2种农作物进行试验。在试地理位置、气候条件、栽培方式、土壤类型等差异较大的代表性作物产区选择两个以上试验点，进行两年的重复试验；验地应选择作物长势均匀、地势平整的地块，试验地前茬不得施用与供试农药类型相同的农药；试验小区应设足够大，以保证多次重复采样获得有代表性的样品。小区面积可根据作物不同而有所不同，一般水稻不小于30m2，蔬菜不小于15 m2，果树不小于2株。每个处理设3个以上重复，还须设对照小区。施药量（浓度）应设两个以上，在不产生药害的前提下，以药效试验的推荐剂量的高剂量为残留试验的低剂量，以其1.5倍或2倍的剂量为残留试验的变剂量。如某农药防治某种害虫的推荐施药量为270—360克(有效成分)/ 公顷，则残留试验的施药量应为360克(有效成分)/公顷和540克( 有效成分)/公顷或720克(有效成分)/ 公顷。再如某农药防治某病害的推荐施药浓度为120—240毫克/升，则残留试验的施药浓度应为240毫克/升和360毫克/升或480 毫克/升。原则上以推荐的防治次数和增加1～2 次的次数作为残留试验的施药次数，一般要求设两种以上施药次数。有的土壤处理剂、种子处理剂(拌种剂) 、除草剂或植物生长调节剂等，每季作物只施一次药，残留试验的施药次数可不增加。一般施药时间和施药间隔根据实际防治需要确定，有时也可人为设定。
2. 农药残留田间试验的内容
⑴. 农药残留动态试验，为研究农药在农作物、土壤、田水中残留量变化规律而设计的试验，是评价农药在农作物和环境中稳定性和持久性的重要指标。
研究农药残留动态，了解施药至收获时农药残留的消长，可以预测农药残留行为，指导安全、合理使用农药；根据农药残留动态，可以计算安全间隔期、进入施药现场的安全期和半衰期，还可了解它对有害生物的药效期。
农药残留动态是多方面因素综合作用的表现：农药本身物理化学性质，使用方法，施药时期，作物、土壤的类型和性质及环境条件。
农药残留量消解一半时所需的时间，即“半衰期”，可用图示法求半衰期，即以农药本体及其代谢物、降解物残留量总和为纵坐标，以时间(天) 为横坐标绘制消解曲线图求得。有些农药在农作物、环境中的残留量(浓度)随施药后的时间(天) 变化以近似负指数函数递减的规律变化，可用一级反应动力学方程计算：
C=C0e-KT
式中：C ──时间T时的农药残留量(mg/kg)
C0──施药后原始沉积量(mg/kg)
K ──消解系数
T ──施药后时间(天)
通常以残留试验的高剂量(或浓度)作为消解动态试验的施药量(浓度) 。可采用一次施药多次采样，或多次施药一次采样的方法进行试验，施药后分别于当天，1、3、7、14、21、30、45、60 天采样。有的农药消解快，采样间隔时间应以小时计。原则上采样次数不少于5次，最后一次的样本中残留量以消解率大于90%为宜。如果第一次采样残留量很低(<1毫克/千克) 时，可加大施药量，以免因原始沉积量低，残留量偏差大，数据不规律而影响消解规律的评价。颗粒剂、拌种剂(包衣剂)、芽前土壤处理剂等，植株消解试验可在植株长到10cm左右时开始按不同的间隔时间采样，以研究其消解趋势( 可不计算半衰期，或以释放高峰作为原始沉积量计算半衰期) 。旱田作物应做植株(茎杆或籽粒) 、土壤中消解动态试验。水田作物还需做农药在田水中消解动态试验。
⑵. 施药因素与最终残留量水平相关性试验
为评价各种施药因素与收获的农产品以及土壤中的残留量相关性而设计的试验。首先按田间试验设计原则和基本要求选好试验点，确定小区面积、施药量(或浓度) 、施药次数、间隔期等，然后按试验点地形顺序排列小区并绘制试验小区平面图，再按计划施药、采样，以获得田间试验样品(包括农作物可食部位和可作饲料部位样本以及土壤样本) 。样品包括：籽粒(种皮和可食的未成熟的籽粒)、茎杆、果实(果皮、果壳)、土壤等。
3. 农药残留田间试验样品的采集
根据试验目的和样品种类实际情况确定采样方法，通常有随机法、对角线法、五点法、
“Z”形法、“S ”形法、棋盘式法、交叉法等。应避免采有病、过小或未成熟的样品。采果树样时，需在植株各部位(上、下、内、外、向阳和背阴面) 采样。
采样量大小主要取决于样品的种类。
粮食作物：一般每个试验小区采5—10个点，每个点采0.1 平方米面积的植株(离地面约10厘米) ，然后将茎杆和籽粒分开，大粒谷物采2公斤，小粒谷物采1 公斤。
蔬菜：采大个(棵)菜不少于2公斤，不少于5个(棵)；小个( 棵)菜不少于1 公斤；块根、块茎、鳞茎类蔬菜、甜菜等地上和地下部位分别采样。
水果：采大粒水果不少于2公斤，不少于5个，小粒水果采1-2公斤。
种籽类：采0.5-1公斤( 如棉籽、大豆、花生、油菜籽、向日葵籽、芝麻等)。
其它：如茶叶、烟草等采0.5-1公斤。
2.2.2 商品取样
很多情况下，用于残留分析的样品直接取自零售商或批发商的销售食品。这类取样一种是监测调查取样。监测取样分析的目的是了解农药残留在食品中的发生概率、分布趋势和存在水平，或者对进出口食品的农药残留进行抽检，所以监测取样必须是完全随机的。取样数和取样点的选择根据其所代表的生产量，不带任何倾向，样品采集点尽可能接近消费实际。这类取样如果是生产流水线的动态样品，可按一定的时间间隔或数量间隔抽取分样，残留分布不均匀的样品，应适当增加分样数。
另一种是执法取样。其目的是强制性检查取样对象中的残留量水平是否符合或超过农药最大残留限量（MRL）。这类取样根据对事先用药历史的了解、农药残留分析的过去超标情况，和预期农药残留问题较突出的可能地区或可能农产品而制定的，这类取样计划是非统计学的，不代表全面的农药残留情况，样品采集尽可能接近生产点，以便在产品进入消费者之前就截断残留分析后查出的超标产品。
出于经济考虑，商品取样量不可能太大。对这类样品取样量的最低要求是：
小的或轻的产品（如草莓、豌豆、香芹等） 1.0~1.5 kg
中等大小产品（苹果、黄瓜、马铃薯等） 2.0~2.5 kg
大的产品（甘蓝、西瓜等） 4.0~5.0 kg
奶品（牛奶、奶酪、黄油等）0.5~1.0 kg
肉、禽、鱼 1.0~1.5 kg
油和脂肪0.5~1.0 kg
谷物和谷物制品0.5~1.0 kg
2.2.3 不同样品的采集要求
样品的采集部位对于农药残留分析的结果影响很大，在国际贸易中，对于同一种农产品，由于不同的采样部位或处理方式，会导致农药残留量在与MRL比较时造成混乱，如豆类品带豆荚与不带豆荚，杏带核与否所计算出的农药残留量有很大差异。表2.1给出了常见农产品样品的采集部位以及处理方式。
表2.1 重要农产品农药残留分析样品采集部位和处理
样品采样部位和处理
根、茎类蔬菜(root and tuber vegetables)
例如：甜菜、芜菁甘蓝、胡萝卜、糖用甜菜、块根芹、甘薯、马铃薯、芜菁、萝卜、山药采集整个果实，去除顶部部分，用自来水洗涤茎或根，必要时用毛刷去除泥土及其他黏附物，然后用纸巾擦拭干净。对于胡萝卜，干燥后，要用刀切去与叶柄相连的部分。如果根部切面中空，切除部分应重新取回合并处理。
鳞茎类蔬菜(bulb vegetables) 例如：大蒜、洋葱、韭菜、葱鳞茎/干洋葱和大蒜：去除根和外层。韭菜和葱：去除根和黏附物。
叶类蔬菜(leafy vegetables) (芸苔除外)
例如：甜菜叶、萝卜叶、玉米色拉、菠菜、菊苣、
糖用甜菜叶、莴苣、唐莴苣
去除腐烂或枯萎部分。
芸苔(油菜cole)叶类蔬菜(brassica vegetables)
例如：椰菜、球芽甘蓝、甘蓝、大白菜、皱叶甘蓝、羽衣花椰菜、甘蓝、羽衣甘蓝、大头菜去除腐烂或枯萎部分。对于花椰菜和结球茎椰菜，分析其花的头部、茎部，去除叶部。对于抱子甘蓝，只分析“扣状部分”。
茎类蔬菜(stem vegetables)
例如：朝鲜蓟、菊苣、芹菜、大黄、芦笋去除腐烂或枯萎部分。
大黄和芦笋：只取茎部。
芹菜和朝鲜蓟：去除黏附物(用自来水冲洗或毛刷刷除)。
豆类蔬菜(legume vegetables)
例如：蚕豆、菜豆、蚕豆、红花菜豆、法国菜豆、
大豆、绿豆、豌豆、云豆、利马豆
整个果实。
果类蔬菜（果皮可食）（fruiting vegetables - edible peel）
例如：黄瓜、胡椒、茄子、黄瓜、西红柿、黄秋葵、蘑菇
去除茎部。
果类蔬菜（不可食果皮）（fruiting vegetables - inedible peel）
例如：哈密瓜、南瓜、甜瓜、西瓜、南瓜、冬瓜
去除茎部。
柑橘类水果（citrus fruits）
源于芸香科木本植物，有芬芳香味、球状、内部果瓣富含果
汁。在生长期内，果实表面施用农药。食用时，可做成饮料。
以整果保存。
整个果实.
梨果（pome fruits）
例如：苹果、梨
去除茎部。
核果（stone fruits）
例如：杏、油桃、樱桃、桃、酸樱桃、李子、甜樱桃去除茎部和核，但计算残留量时应以去除茎部的果实部分计。
小水果和浆果（small fruits and berries）
例如：黑莓、醋栗、越橘、葡萄、罗甘莓、酸果蔓、悬钩子、黑醋栗、草莓、悬钩子去除顶部和茎部
黑醋莓：取含茎果实
其他水果（果皮可食）（assorted fruits - edible peel）例如：枣、橄榄、无花果枣和橄榄：去除茎部和核，计算残留量时以整个果实计。无花果：整个果实
其他水果（果皮不可食）（assorted fruits - inedible peel）例如：鳄梨、芒果、香蕉、番木瓜果、番石榴、
西番莲果、波萝除非特别说明，否则处理整个果实。
波萝：去除副花冠
鳄梨和芒果：去核，残留量以整个果实计。香蕉：去除冠状组织和茎部
谷物（cereal grains）
例如：大麦、黑麦、玉米、高粱、燕麦、甜玉米、水稻、小麦整个籽粒。
鲜玉米和甜玉米：籽粒加玉米穗轴（去皮）
茎干作物（stalk and stem crops）
例如：大麦饲料、玉米饲料、稻草、高粱饲料、草料
整个植株
豆类油料作物（legume oilseeds）
例如：花生
去壳籽粒
豆类动物饲料（legume animal feeds）
例如：紫花苜蓿饲料、花生饲料、大豆饲料、豌豆饲料、
苜蓿饲料、大豆饲料
整体
坚果（tree nuts）
例如：杏、澳洲坚果、栗子、核桃、榛子、胡桃去壳
栗子：整体
油料（oilseed）
例如：棉籽、亚麻子、葵花籽、油菜籽
整体
热带果（tropical seeds）
例如：可可豆、咖啡豆
整体
草药（herbs）
源于草本植物的叶、茎、根，用量相对较小。主要改善食品
风味。多为汁状和干燥固体。
整体
调味品（spices）
例如：指从各种植物中提取出来的，相对量较小，用于改善
风味的种子、根、果实等。多使用干燥状态加入到食品中。
整体
茶叶（teas）
茶叶源于茶属植物叶片。经一定处理后做成一种饮料消费品。
整体
肉类（meats）
例如：牛（屠宰后）畜体、山羊（屠宰后）畜体、马（屠宰后）畜体、猪（屠宰后）畜体、绵羊（屠宰后）畜体整体(对于脂溶性农药，分析畜体脂肪，制定畜体脂肪MRL)
动物脂肪（animal fats）
例如：牛脂肪、羊脂肪、猪脂肪
整体
肉副产品（meat byproducts）
例如：牛肉、山羊肉、猪肉、绵羊肉副产品(如肝脏、肾等)
整体
奶（milks）整体。对脂溶性化合物，分析类脂部分，但残留量表述以
整体计算（假设奶中脂肪含量为4％）
整体（对脂溶性农药，分析脂肪部分并制定MRL）
家禽肉类（poultry meats）
指家禽畜体中的肌肉组织，包括脂肪和皮
整体
家禽脂肪（poultry fats）
指从家禽畜体脂肪组织中提取出的脂肪
整体
家禽副产品（poultry byproducts）
指从屠宰畜体中除肉和脂肪外的可食组织或器官。
去掉蛋壳后的蛋白和蛋黄混合物
蛋（eggs）
各种禽蛋
2.3 样品的包装、记录和贮存
采集的样品应该用特制的惰性包装袋(盒)装好，写好标签( 包括内外各一个)和编号(伴随样品各个阶段，直至报告结果)。样品及有关样品资料( 样本名称、采样时间、地点及注意事项等)应尽快运送到实验室(一般在24-36小时以内) ，并不得使样品变质、受损、污染或使残留量和水分损失。
样品一旦进入实验室，首先必须做好样品编码和记录，然后依据样品性质或待检测农药的性质，安排在合理时间内进行样品处理、分析。如果不能马上进行处理和分析，就要很好地进行贮存。
样品的记录，无论是试验田间采集的样品，还是实验室内委托检验样品，在进行样品登记时，都要尽可能多地记录样品信息。
样品进入实验室后，首先应进行编号，此编号应该是该样品独有的编号，以便进行样品管理。样品编号从始至终（从样品接收到分析结果报告）不应改变。试验样品或是试验溶液也应该标明编号。样品登记表应该包括以下内容：样品名称、样品性质、样品编号，收样日期，采样日期，采样地点、采样方式、样品类型（市场、田间、出口等）、样品质量、包装方法、样品接收与否、样品接收检验人、送样人、贮存方式、贮存地点、保存时间、分析始末时间、分析人员等信息。
对于样品的贮存，要考虑样品待分析时间、样品性质、待检测农药性质等因素。一般情况下，运到实验室的样品要保存在冷藏条件(1-5℃)下。并应尽快检测(几天之内) ，如需贮存较长时间，则样品必须在冷冻条件下贮存（-18℃以下），解冻后应立即测定，有些农药在贮存时可能会发生降解，需要在相同条件下做添加回收率试验进行验证。取冷冻样品进行检测时，应不使水、冰晶与样本分离，必要时应重新匀浆。检测后的样品需保存一段时间，以供复检。对有些送检样品，如干燥样品或罐头样品必须保存在室温下同时控制环
境湿度。对于水样，只能在冷藏条件下贮存，或者通过萃取等处理，得到提取液，在冷冻条件下贮存。若收到冷冻样品，需继续冷冻状态保存，直至分析检测。
样品贮存不当，就有可能造成样品发生变化，从而失去原有的性质，使其失去代表性。对于某些容易腐烂变质的样品如草莓等，在收到样品1－3天内，必须进行处理以适合分析测定要求，或者满足在一定条件贮存的状态。对于某些罐装或保持原包装样品，就要在阴凉、干燥处保存。但如果保存期超过样品消费保质期，就需要一定处理然后保存在冰箱中。对于某些新鲜的提取液，就必须尽快进行检测，否则某些特殊种类的农药例如甲拌磷等就会在微量水或酶的作用下很快降解。如果不可能马上对样品进行分析，就必须采用脱水等办法除去水分，用溶剂提取后保存在－20℃条件下。这样做的目的主要是去除某些酶的作用。
在实验室内贮存期间，必须避免能导致样品发生变化的物理的、化学的和机械的因素等的影响。例如：氧化、蒸发、酶降解、微生物分解、容器污染等影响。对含有易水解农药的样品，应该保存在干燥的、避光的地方，温度保持在1－5℃。对于易挥发样品，应冷冻保存。
另外，样品的贮存环境也有一定的要求，除温度、湿度、光照等条件外，还应该注意的一点就是样品必须与农药标准品溶液单独存放，即使浓度很低，也不能与样品放在一起，以防污染。
2.4 样品的前处理
在样品分析之前或样品贮存之前，往往要对采集的样品进行缩分和前处理，制备实验室检测样品及备份，以满足进一步处理和分析的需要。
粉状物：首先在包装袋内混合，然后用四分法取样。即将样品堆积成圆锥形，从顶部向下将锥体等分为四份，去除某对角两部分，剩余部分再次混匀成圆锥形，再等分，去除对角部分，剩余部分再混合，如此重复直至剩余合适样品量为止。由于初样本往往量较大，需要将初样本用四方法缩分成实际需要的待测样本，通常将样品粉碎、过40目筛(筛孔宽度0.40mm)或匀浆，最后取约250—500克样本待测。
谷物：研磨后按四分法进行。
小体积水果和蔬菜：混合前切开并捣碎，最方便的方法就是用连续捣碎机或匀浆器对整个样品进行处理。
大体积水果和蔬菜：如果样品体积特别大（如甘蓝等），不能采用或没有合适试验设备进行处理，就要采用人工切碎。此时就要注意，农药残留并不是均匀分布在样品中，尤其是在切碎大样本制备分析样本时更要注意农药残留分布的不均匀性。在处理时，必须要保
证分析样品的代表性。例如采集甘蓝样本时，不能去除外层叶子，也不能只采集外层叶子做样品，应从甘蓝球体顶部对角线切开，取其中对角部分，操作方法类似于四分法。最终取600－800g样品进行匀浆或捣碎处理，依照分析需要取出一定组分进行提取、净化等操作，以保证样品的代表性。
水和其他液体样品：充分混合。过滤去除漂浮物、沉淀物和泥土。在分析过程中，如果存在固体成分，会导致乳化现象，因此应过滤去除固体粒子，去除部分可单独进行分析。在过滤时应该注意在存放期间，固体粒子会沉淀，所以应该首先过滤四分之三的样品，然后在每次转移部分液体进行过滤前剧烈摇动容器，从而去除大部分固体粒子。容器应该用过滤后的样品洗涤几次，再过滤。肉眼观察瓶内壁没有附着物后，用提取滤液时的溶剂洗涤贮液瓶，如果使用SPE进行样品净化，就要考虑过滤时滤纸孔径的大小，研究表明，当粒子在0.063 到2 m大小时，与之结合的污染物浓度最高。在报告结果时，应该指明水样是否包含漂浮物和沉淀物。具体样品体积依照分析方法和待检物浓度的不同而进行。例如对环境水样进行农药污染监测时，一般水样体积为1000ml。
土壤：记录土壤样品重量，风干，粉碎样品，过筛（2－4mm筛），去除土样中石块、动植物残体等杂物，如果杂物重量超过样品总量5％，应记录杂物重量。充分混匀后，以四分法缩分，最后按需要留取1～2Kg，装入容器，附上标签。风干时，在阴凉通风处将土样全部摊开在聚乙烯塑料薄膜上，或干净的瓷盘中，待半干时压碎土块，剔除杂物，再铺成薄层。经常翻动土样，直至风干。分析时，一般称取20－50g土样进行提取、净化等操作。最终检测结果应以土壤干重计。
思考题：
1．什么是实验室样品？样品采集的原则和要求有哪些？
2．农药残留监测取样和执法取样的目的和要求各是什么？
3．样品采集后要注意哪些问题？
4．如何对土壤样品进行前处理？
第二章烟叶样品的采集 、制备、保存及水分测定方法 第一节样品的采集 1正确采样的意义 掌握两个名词： 1)采样： 从大量的分析用烟叶中抽取一部分作为分析材料的过程称为采样2)样品： 所抽取的分析材料称作样品 正确采样意义: 1)不同处理间存在差 2)同一处理内部存在机误 3)样本和总体间存在差异 4)采样误差比分析测量误差大5-10倍 2烟叶的采样方法 2.1田间试验取样 正确采样的要求： 减小实验误差，样本能够代表总体。 控制采样误差的方法有两个： 增加采样点数和获得平均样品1）增加采样点数：
在一块地选取3-5个或更多的采样点。一般采用对角线采样和S形采样两种方法。 选择点数多，测定数也多，工作量增加，但是越能代表总体。 2）获得平均样品 先了解以下三个名次： （1）检样： 从分析对象各部分采取的少量样品 （2）混合样： 若干份（5-10份）等量检样混合在一起得到的样品 （3）平均样： 从混合样中抽取一部分得到的样品。 3）两种采样方法的区别： 增加采样点数： 采样后先测定后平均 获得平均样品： 采样后先平均后测定 二者采样点数是一样的。 4）取检样应该注意的问题 A避免主观性，多点（5-10点）采样，各点之间样品等量 B不同处理之间取样标准要一致 C常规成分：
每一检样10-15片叶就可以了，并应该兼顾大中小叶片的比例 D要取无污染烟叶。烤后烟叶存放在农户家中 应该防止农药，化肥水等污染。 2.2烟叶常规化学成分分析国标法取样 1.了解几个定义： 1）批： 在一个或多个特性被认为一致的条件下产生的一定数量的烟草。 2）小样： 从一个取样单位一次取出的一定数量的烟草。 3）单样： 是由从同一取样单位中抽取的全部小样组成，单样大小取决于： 烟草类型；取样单位的大小；测定项目的类型和数量。 4）实验室样品： 用于实验室检验或测试的样品，其代表总样。 5）试样： 从实验室样品中随机抽取的用于测试的样品，其代表总样。6）试料： 用以进行检验或观测所取的一定量的试样。 2.GB/T19616-2004，ISO4874:2000：烟草成批原料取样的一般原则：1）取样单位的选择： 随机取样法选择取样单位，周期性系统取样法选择取样单位。 2）小样的抽取和单样的组成
第二章食品检验样品的采集与处理
（1学时）教学基本信息 教学进度计划
课堂教学计划（1学时）
第二章食品检验样品的采集与处理 食品微生物检验是根据一小部分样品的结构对整批食品作出判断的。 本单元讲述了无菌取样操作，在讨论无菌取样的原因和采集方法之前，必须要理解“无菌的”的这一术语，“无菌”一般用于取样中，意味着取样过程中，避免操作引起污染。一个无菌样品的采集，应该通过这样一种方式，即：在收集过程中，本身应避免污染，然后放入消毒容器中。 无菌样品的采集基本是为了支持、针对工厂的卫生条件状况的检查结果。 第一节食品检验样品采集的原则 一、检验前的准备工作： 1．包装无菌取样的工具： 拥有正确的采取产品或加工过程的无菌取样器械工具是至关重要的的。除非使用合适的采集工具，否则样品的完整性会被怀疑，甚至样品毫无意义。为了避免没有合适的取样工具，建议建立一个无菌取样的分析清单，来收集取样工具。如果可能盛样品的容器在最初进入加工区之前应当被预先标识，象样品号、取样日期、取样人等。这样可以使在不同的工厂条件下的样品取样更为方便一些。附加样品号码一般在样品采集中被正式确定下来，因此不用预先标明。 人员的工具设施，象工作服、发网或消毒处理过的清洁的鞋靴必须具备有助于证明采集者没有污染到食物产品或样品。 2．生产线样品In-Line Samples： 生产线样品一般是指原材料，原料生产用水、包装材料或其他任何使用在生产线的材料。 生产线样品的采集一般用来确定细菌污染源是否来自于原材料或加工序中的某些地方。 3．环境样品： 环境样品用细菌拭子，（注：细菌拭子样品不能给出／测出微生物的定时结果，因为样品非常小，显著微生物会经常丢失），棉拭子的取样部位一般来自于食品接触面，地板喷溅物。墙壁、顶部管道和检验中考察的其他潜在污染源程序，并且记录可能的联系，在环境样品来源和食物产品的污染方面，可以使样品具有意义，并且是提倡这样做的，例如： 地面喷溅水：工人从有地面污水的地方走过后又回到加工区域吗？ 墙壁：墙壁上面和在制品上面有昆害虫吗？ 天花板：冷凝物或喷漆有无掉落到产品上或被发现与产品相接触？ 4．某些准备
土壤样品采集与处理实 验报告 Document number：WTWYT-WYWY-BTGTT-YTTYU-2018GT
实验一土壤样品的采集与处理 土壤样品的采集是土壤分析工作中的一个重要环节，是关系到分析结果和由此得出的结论是否正确的一个先决条件。由于土壤特别是农业土壤的差异很大，采样误差要比分析误差大若干倍，因此必须十分重视采集具有代表性的样品。此外，应根据分析目的和要求采用不同的采样方法和处理方法。 一、土壤样品的采集 （一）采样时间 土壤中有效养分的含量随季节的改变而有很大变化。分析土壤养分供应情况时，一般都在晚秋或早春采样。同一时间内采取的土样，其分析结果才能相互比较。 （二）采样方法 采样方法因分析目的和要求的不同而有所差别： 1．土壤剖面样品研究土壤基本理化性质，必须按土壤发生层次采样。 2．土壤物理性质样品如果是进行土壤物理性质测定，须采原状样品。 3．土壤盐分动态样品研究盐分在剖面中的分布和变动时，不必按发生层次取样，而自地表起每l0cm 或20cm 采集一个样品。 4．耕层土壤混合样品为了评定土壤耕层肥力或研究植物生长期内土壤耕层中养分供求情况，采用这种方法。 （1）采样要求 在采样时，要求土样有代表性，因此需多点取样，充分混合，布点均匀，混合样品的取样数量应根据试验区的面积以及地力是否均匀而定，通常为5~20个点，采样深度只需耕作层土壤0~20cm ，最多采到犁底层的土壤，对作物根系较深的，可适当增加采样深度。 （2）采样方法 根据地形、样点数量和地力均匀程度布置采样点。面积不大，比较方正，可采用对角线取样法；面积较大，形状方正，肥力不匀的地块可采用棋盘式采样方法（方格取样法）；面积较大，形状长条或复杂，肥力不匀的地块多采用 土时应除去地面落叶杂物。采样深度一般取耕作层土壤20cm 左右，最多采到犁底层的土壤，对作物根系较深的土壤，可适当增加采样深度。 对角线取样法 棋盘式取样法蛇形取样法法
农产品农药残留抽样检测实施方案
农产品农药残留抽样快速检测实施方案 青白江区现有伏季水果8.17万亩（其中梨1.9万亩、桃5.4万亩、杏0.9万亩），蔬菜8万亩，0.49万亩食用菌。为进一步做好农产品农药残留抽样快速检测工作，强化农产品质量安全监督管理，提升农产品质量和市场竞争力，促进农民增收和农业可持续发展，自2008年4月启动农产品质量认证以来，到目前为止，青白江区已有64个农产品获得认证，其中无公害农产品20个、绿色农产品4个、有机转换产品25个、GAP认证15个，更值得一提的是“龙王贡韭”还获得了“地理标识”的认证。根据有关精神，成都市下达各区市县的全年检测任务为1800个样、成都市在各区市县随机抽样督检全年240个样（合计全年2040个样，除开双休日后的工作日为22天，平均每天抽检8个样），以及今年成都市即将实施的“蔬菜、水果、食用菌”市场准入制，面对全区农产品种植大户委托检测带来的巨大压力，特制定了农产品农药残留抽样快速检测实施方案。 一、指导思想 遵循“预防为主、源头治理”的原则，以提高全区农产品质量安全水平，保障人民群众的饮食健康为核心，以无公害农产品生产基地和农产品生产种植地临时批发点为重点，依靠“CNY-258B残留农药测试仪”，对“蔬菜、水果、食用
菌”进行农残快速检测，及时掌握全区农产品质量安全动态，进一步增强农业综合执法的针对性，改进生产管理措施，提高农产品质量安全的防控水平，跨跃式提升全区农产品质量安全水平和市场竞争力，推进农业规模化、标准化建设，加快现代农业发展，促进农民增收。 二、检测单位 农产品农药残留抽样快速检测由青白江区农村发展局农产品质量检测中心承担。 三、实施方案需要的基本要素 该中心需要经过专门的培训、具备相应资质的检测人员3名，需实验室面积70平方米，需配备12通道的农药残留快速测试仪3台套，电子恒温水浴锅3台套，才能够对我区“蔬菜、水果、食用菌”等农产品的农药残留进行快速检测，保证青白江区农产品全履盖开展农药残留快速检验工作。 当前困境：经过专门的培训、具备相应资质的检测人员只有1名，实验室面积23平方米， 2通道的农药残留快速测试仪二台，远远不能肩负起当前农产品农药残留抽样快速检测的重任，亟待加强检测队伍的建设。 四、检测时间 从2010年1月份开始，每月170个样，全年2040个样，对获得“四品（无公害、绿色、良好、有机）认证”的各大农产品生产基地、重点农产品种植户进行质量抽样快速检
实验一食品样品的采集与保存 1.实验目的 掌握苹果、青菜、大米、大排等几种食品原料类型的采集和保存方法； 理解采样的注意事项。 2.实验原理 2.1采样原理 采样是指从整批被检食品中抽取一部分有代表性的样品，供分析化验用。采样是食品分析的首项工作和重要环节。同一类的食品成品由于品种、产地、成熟期、加工或保藏条件不同，其成分及其含量有相当大的差异。同一分析对象，不同部位的成分和含量也可能有较大差异。因此必须掌握科学的采样和保存技术。否则，即使以后的样品处理、检测等一系列环节非常精确、准确，其检测的结果亦毫无价值，以致导出错误的结论。 2.2采样原则 1. 代表性 在大多数情况下，待鉴定食品不可能全部进行检测，而只能抽取其中的一部分作为样品，通过对样品的检测来推断该食品总体的营养价值或卫生质量。因此，所采的样品应能够较好地代表待鉴定食品各方面的特性。若所采集的样品缺乏代表性，无论其后的检测过程和环节多么精确，其结果都难以反映总体的情况，常可导致错误的判断和结论。 2. 真实性 采样人员应亲临现场采样，以防止在采样过程中的作假或伪造食品。所有采样用具都应清洁、干燥、无异味、无污染食品的可能。应尽量避免使用对样品可能造成污染或影响检验结果的采样工具和采样容器。 3. 准确性 性质不同的样品必须分开包装，并应视为来自不同的总体；采样方法应符合要求，采样的数量应满足检验及留样的需要；可根据感官性状进行分类或分档采样；采样记录务必清楚地填写在采样单上，并紧附于样品。 4. 及时性 采样应及时，采样后也应及时送检。尤其是检测样品中水分、微生物等易受环境因素影响的指标，或样品中含有挥发性物质或易分解破坏的物质时，应及时赴现场采样并尽可能缩短从采样到送检的时间。 2.3四分法采样
第二章食品样品的采集与数据处理 食品分析的对象包括各种原材料、农副产品、半成品、各种添加剂、辅料及产品。种类繁多，成分复杂，来源不一，分析的目的，项目和要求也不尽相同，但无论哪种对象，都要按一个共同程序进行，一般为：收集相关资料→制定实验方案→准备所需器材→样品的采集→制备和保存→样品的预处理→成分分析→数据记录、整理→分析报告的撰写。 第一节样品的采集 一、样品的采集：采样——在大量产品（分析对象）中抽取有一定代表性的样品，供分析化验用，这项工作叫采样。（总体、样本、样本容量、样本测定平均值、总体测定平均值）。 1、正确采样的意义：食品采样的目的在于检验样品感官性质上有无变化，食品的一般成分有无缺陷，加入的添加剂等外来物质是否符合国家的标准，食品的成分有无搀假现象，食品在生产运输和储藏过程中有无重金属，有害物质和各种微生物的污染以及有无变化和腐败现象。样品的采集是我们检验分析中的重要环节的第一步，采取的样品必须代表全部被检测的物质。 2、正确采样的原则： （1）采集的样品要均匀、有代表性，能反映全部被检食品的组成、质量和卫生状况。 （2）采样方法要与分析目的一致。 （3）采样过程要设法保持原有的理化指标，防止成分逸散（如水分、气味、挥发性酸等）。 （4）防止带入杂质或污染。 （5）采样方法要尽量简单，处理装置尺寸适当。 3、采样程序（步骤）： ①检样→原始样品→平均样品（检验样品、复检样品、保存样品）； ②检样——由整批食物的各个部分采取的少量样品，称为检样； ③原始样品——把许多份检样综合在一起称为原始样品； ④平均样品——原始样品经过处理再抽取其中一部分作检验用者称为平均样品； ⑤应一式三份，分别供检验、复验及备查使用； ⑥每份样品数量一般不少于0.5公斤。 二、采样的一般方法 1、随机抽样和代表性抽样：第一种采集方法是随机多点抽样。均衡地、不加选择地从全部产品的各个部分取样。但随机≠随意。随机——要保证所有物料各个部分被抽到的可能性均等。第二种采集方法是代表性抽样：可按不同生产日期，也可在流水线上按一定的时间间隔抽样，按分析的目的取样。随机取样可以避免人为倾向，但是，对不均匀样品，仅用随机抽样法是不够的，必须结合代表性取样，从有代表性的各个部分分别取样才能保证样品的代表性。 2、具体的采样方法： ㈠固体样品：例如粮谷类样品，用采样管(双套回转取样管)插入粮袋，回转l80度，取出样品。每一包装须在上、中、下三部分分别取出检样，混合均匀后用四分法缩分为平均样品。 ㈡液体样品：如牛奶、果汁等，用虹吸管法分层取样后混合均匀，再缩减至500ml左右，装入试剂瓶中，贴标签送检。 ㈢半团体样品：如奶油、蜂糖等，可用采样器从上中下三层分别取出检样，然后混合缩减至所需数量的平均样品，约250g左右，装瓶送检。 3、采样量： ㈠均匀的固体样品的采样量：如粮食、面粉、砂糖及其它固态食品，可按不同批号分别进行采样。对同一批次的产品按下式定出取样件数(瓶、袋、箱）。若总件数为n，则当n≤3时，每件取样；当3＜n≤300时， 1取样量随机取样；当n＞300＋1取样量随机取样。 ㈡液体食品的采样量：①食用油脂：16吨以内取1kg，16—50吨采取2kg，50一200吨采取5kg，200—1000吨取20kg，1000吨以上取50kg，最后混合均匀后取样500g。②鲜乳：每次采样200～500ml（2～3瓶），采取桶装鲜奶时，按1公斤取0.5～1.0ml计算，采取的样品装入试剂瓶中，贴上标签，送检。 ㈢不均匀的固体样品(肉、鱼、果蔬等)：应分别采取不同部位的少量样品，混合并经充分捣碎均匀后，取出0.5kg为分析样品。 三、样品的制备：制备目的，在于保证样品的均匀性，使我们在分析时，取任何部分都能代表全部被测物质的成分。制备方法有下面几种：①摇动或搅拌（液体样品，浆体，悬浮液体）、（用玻璃棒、电动搅拌
. 食品样品的采样 现场采样所需的物品准备： 样品种类、采样方法、采样数量、采样标签、送检 一、现场采样所需的物品准备： 1、采样工具：酒精灯、酒精棉球、灭菌棉拭子、消毒纱布、镊子、长柄勺、吸管、吸耳球、捡到、火柴、皮筋、记号笔、标签纸等； 2、样品容器：无菌塑料袋、广口瓶、运送培养基试管、灭菌平皿、一次性小试管、样品冷藏设施等； 3、防护用品：白色工作服或隔离衣、医用手套、口罩、帽子等； 4、取证工具：照相机、摄像机、录音机，采样前需要查看的其他相关专业参考资料。 二、样品的种类：食品样品依包装形式的不同，可分为预包装食品和散包装食品，预包装食品，经预先定量包装，或装入灌入容器中，向消费者直接提供的食品；散装食品，凉菜（含沙拉、果盘、糕点、热加工、冷加工、裱花蛋糕、生食半生食海产品）、冷冻饮品、鲜榨果蔬汁饮料、盒饭等； 三、采集方法：在食品样品采集的全过程中，应该按照国家标准中规定的方式方法和要求进行，其内容详见： 1、GB/T4789.1-2003（食品卫生微生物检验） 2、GB/T5009.1-2003（食品卫生检验方法理化部分） 3、GB14934-94（食<饮>具消毒卫生标准） 采样要无菌操作，以防止外界微生物的污染和病原菌扩散 无菌采样基本步骤： 1、工作人员采样前应对手进行消毒，然后对采样样品开口处及周围消毒后，方可将容器打开； 2、使用灭菌工具和无菌采样容器采样； 3、盛有样品的采样容器要在火焰下燃烧瓶口，加盖封口。 四、采集的数量：采样的数量应能反映该食品的质量和满足检验项目对样品量的需要，兼顾考虑理化检验和生物检验两个方面，所采样品应一式三份，分别供检验、复查、备查和仲裁使用，每份样品不小于检验需要量的两倍，以供检验、备查之用 五、样品标签：采样后每件样品必须贴上标签，明确表明品名、来源、数量、采样地点、采样人及采样时间等内容。 六、样品送检：采样结束，应按规定合理保存和运送样品，样品送到微生物检验室，应越快越好，一般要求4小时内送检到实验室，如果路途遥远，可将不须冷冻样品保持在1-5度环境，如冰壶，如需保持冷冻状态，则需保存在泡沫或冷冻箱内，箱内放有干冰，送检时必须认真填写申请单，以供检验人员参考， 如有侵权请联系告知删除，感谢你们的配合！ 精品
实验一土壤样品的采集与预处理 一、目的和要求 土壤样品(简称土样)的采集与处理，是土壤分析工作的一个重要环节，直接关系到分析结果的正确与否。因此必须按正确的方法采集和处理土样，以便获得符合实际的分析结果。 二、内容与原理 学习土壤农化样品的采样布点方法及分样方法。在大田中，采用蛇形取样法采集1kg 有代表性的土壤样品，采用四分法分样。土样标签书写内容，样品风干要求。 三、主要用具 小土铲、布袋或塑料袋、标签 四、操作方法与实验步骤 (一)土样的采集 分析某一土壤或土层，只能抽取其中有代表性的少部份土壤，这就是土样。采样的基本要求是使土样具有代表性，即能代表所研究的土壤总体。根据不同的研究目的，可有不同的采样方法。 1.土壤剖面样品 土壤剖面样品是为研究土壤的基本理化性质和发生分类。应按土壤类型，选择有代表性的地点挖掘剖面，根据土壤发生层次由下而上的采集土样，一般在各层的典型部位采集厚约l0厘米的土壤，但耕作层必须要全层柱状连续采样，每层采一公斤；放入干净的布袋或塑料袋内，袋内外均应附有标签，标签上注明采样地点、剖面号码、土层和深度。 2.耕作土壤混合样品 为了解土壤肥力情况，一般采用混合土样，即在一采样地块上多点采土，混合均匀后取出一部份，以减少土壤差异，提高土样的代表性。 (1)采样点的选择选择有代表性的采样点，应考虑地形基本一致，近期施肥耕作措施、植物生长表现基本相同。采样点5—20个，其分布应尽量照顾到土壤的全面情况，不可太集中，应避开路边、地角和堆积过肥料的地方。 (2)采样方法：在确定的采样点上，先用小土铲去掉表层3毫米左右的土壤，然后倾斜向下切取一片片的土壤(见图1)。将各采样点土样集中一起混合均匀，按需要量装入袋中带回。 3.土壤物理分析样品 测定土壤的某些物理性质。如土壤容重和孔隙度等的测定，须采原状土样，对于研究土壤结构性样品，采样时须注意湿度，最好在不粘铲的情况下采取。此外，在取样过程中，须
13种农药残留检测常用前处理方法 1.振荡漂洗法 将待测样品浸泡于提取溶剂中，若有必要可加以振荡以加速扩散，适用于附着在样品表面的农药以及叶类样品中的非内吸性农药。 2.匀浆萃取法 将一定量的样品置于匀浆杯中，加入提取剂，快速匀浆几分钟，然后过滤出提取溶剂净化后进行分析。 有时为了使样品更具代表性，需加大样品量，这时可先将大量样品匀浆，然后称取一定量的匀浆后的样品用萃取溶剂萃取。尤其适用于叶类及果实样品，简便、快速。 3.索氏提取法 大多数农药是脂溶性的，所以一般采取提取脂肪的方法，将经分散而干燥的样品用无水乙醚或石油醚等溶剂提取使样品中的脂肪和农残进入溶剂中，再净化浓缩即可分析。 适用谷物及其制品、干果、脱水蔬菜、茶叶、干饲料等样品。无水乙醚或石油醚等溶剂，提取效率高，操作简便。 需要注意：提取时间长，消耗大量的溶剂必须考虑被测物的稳定性；含水量过高的水果蔬菜不宜作为分析对象。 4.液-液萃取法 向液体混合物中加入某种适当溶剂，利用组分溶解度的差异使溶质由原溶液转移到萃取剂的过程，向溶液试样加入非极性或水溶性的溶剂，用振荡等方法来辅助提取试样中的溶质。 适合液态样品，或经过其他方法溶剂提取后的液态基质。常用非极性的溶剂有正己烷、苯、乙酸乙酯；常用的水溶性溶剂有二氯甲烷、甲醇、乙、丙酮以及水。 注意：不需要昂贵的设备和特殊仪器，操作简便；常用到大体积的溶剂，而在振荡分配过程中则要控制溶剂体积，费时费力，容易引起误差。 5.超声波提取方法 （超声波辅助萃取法，Ultrasonic extraction） 超声波是一种高频率的声波，利用空化作用产生的能量，用溶剂将各类食品中残留农药提取出来。
农药残留复习题 1.农药残留：是指由于农药的应用而残存于生物体、农产品和环境中的农药亲 体及其具有毒理学意义的杂质、代谢转化产物和反应物等所有衍生物的总称。 2.初始残留量：在农药施用结束或暴露停止时发生的农药残留程度称为初始残 留量。 3.残留半衰期：即农药初始残留量至降解一半所需的时间来表示。 4.农药残留毒性：因摄入或长时间重复暴露农药残留而对人、畜以及有益生物 产生急性中毒或慢性毒害。 5.最大残留限量：最大残留限量是指农畜产品中农药残留的法定最大允许量， 其单位是mg／kg。 6.提取：指通过溶解、吸着或挥发等方式将样品中的残留农药分离出来的操作 步骤，也常称为萃取。 7.超临界流体的定义：物质处于其临界温度和临界压力以上状态时，向该状态 气体加压，气体不会液化，只是密度增大，具有类似液态性质，同时，还保留 气体性能，这种状态的流体称为超临界流体。 8.净化：是指通过物理的或化学的方法除去提取物中对测定有干扰作用的杂质 的过程。 9.标准物质：具有一种或多种足够均匀和很好确定了的特性值，用以校准设备，评价测量方法或给材料赋值的材料或物质。 10.有证标准物质：附有证书的标准物质。标准物质一般分为两级：一级标准物质、二级标准物质。 11.农药纯品：是指目前对农药提纯和鉴定技术最高水平所能达到的条件下，纯化出的能够真正反映农药化合物本身特性的高纯度物质。 12.吸附容量：指单位质量吸附剂所能吸附有机化合物的总质量。 13.穿透体积：指在固相提取时化合物随样品溶液的加入而不被自行洗脱下来所能流过的最大液样体积。 14.分配系数K：分配系数是在一定温度和压力下组分在固定相和流动相之间分 配达到平衡时的浓度之比值。 15.分配比k：分配比又称容量因子，指在一定温度和压力下，组分在两相间分 配达平衡时，固定相和流动相中的组分的质量比。 16.检测限：检测器能产生2倍于噪声的信号时，组分随载气进入检测器的量为检测器的检测限。
第二章食品样品的采集与处理（答案） 一、选择题 1.（4）； 2.（2）； 3.（1）； 4.（3）； 5.（2）； 6.（2）； 7.（2）； 8.（1）； 9.（3）；10.（4） 二、填空题 1．各组分的挥发性不同 2．从样品的上、中、下分别取样混合均匀 3．消除干扰因素、使被测组分浓缩、完整保留被测组分 4．样品混合均匀后、取适量的样品 5．有机物破坏法、蒸馏法、溶剂提取法、色层分离法、化学分离法、浓缩法 6．检样、原始样品、平均样品 7．原始样品、特点、数量、满足检验的要求、食品分析 8．随机抽样、代表性取样 9．干扰成分、干扰成分、不干扰测定状态、金属元素 三、名词解释 1．随机抽样：按照随机原则，从大批物料中抽取部分样品。操作时，应使所有物料的各个部分都有被抽到的机会。 2．代表性取样：是用系统抽样法进行采样，根据样品随空间（位置）、时间变化的规律，以便采集的样品能代表其相应部分的组成和质量的样品。 3．采样：是从大量的分析对象中抽取有代表性的一部分作为分析材料（分析样品），这项工作又称为样品的采集 4．平均样品：将原始样品按照规定方法经混合平均，均匀的分出一部分样品。 5．检样：是由组批或货批中所抽取的样品称为检样,检样的多少，按该产品标准中检验规则所规定的抽样方法和数量执行。 四、简答题 1．简述采样必须遵循的原则。 ⑴采集的样品必须具有代表性； ⑵采样方法必须与分析目的保持一致； ⑶采样及样品制备过程中高潮保持原有理化指标，避免预测组分发生化学变化或丢失； ⑷要防止和避免预测组分的玷污； ⑸样品的处理过程尽可能简单易行。 2．简述食品分析过程采样的原则及一般步骤。 采样混合处理缩分 待检食品→检样→原始样品→平均样品→分成三分，分保为样测样品、复检样品和保留样品 3．简述样品预处理的目的及要求。 目的：消除干扰因素、使被测组分浓缩、完整保留被测组分 要求：样品在处理过程中，既要排除干扰因素，又要不至于使被测物质受到损失，而且应能使被测定物质达到浓缩，从而使测定能得到理想结果，所以在食品分析测定时，样品的处理是整个分析测定的重要步骤。
样品的采集与处理 样品的采集 样品可分为检样、原始样品、平均样品、试验样品。 由组批或货批中所抽取的样品称为检样。 将许多份检样综合在一起称为原始样品。 将原始样品按照规定方法经过混合平均，均匀地分出一部分，称为平均样品。平均样品一般不少于1kg。 平均样品经过混合分样，根据需要从中称取一部分作为试验用的样品，称为试验样品，简称试样。 对于粮食、油料等固体颗粒状物品，由原始样品充分混合均匀，进而分取平均样品或试样的过程，称为分样。 ⑴采样的要求及注意事项 采样时必须注意样品的生产日期、批号、代表性和均匀性，一式3份供检验、复验与备查用，每一份不少于0.5kg，具体规定如下。 ①外地调入的食品应结合运货单、兽医卫生人员证明、商品检验机关或卫生部门的化验单，了解起运日期、来源地点、数量、品质及包装情况。 ②液体、半流体食品，若用大桶或大罐盛装着，应先行充分混匀后再采样。样品应分别盛装在3个干净的容器中，盛装样品的容器不得含有待测物质及干扰物质。 ③粮食及固体食品应自每批食品的上、中、下三层中的不同部位分别采取部分样品混合后按四分法对角取样，再进行几次混合，最后取有代表性的样品。 ④肉类、水产等食品应按分析项目要求分别采取不同部位的样品或混合后样品。 ⑤罐头、瓶装食品或其他小包装食品应根据批号随机取样。 ⑥要认真填写采样记录。写明采样单位、地址、日期、样品批号、采样条件、包装情况、采样数量、检验项目及采样人。 ⑦样品应按不同检验项目妥善包装、运输、保管，送实验室后，应立即检验。 样品的处理 样品制备的目的是为了保证样品的均匀性，使平均样品在拣取任何部分进行检验时都能代表全部样品的成分，以求得正确的结果。 制备时应注意以下几点： ①对于食品类原料，应先去除去可食部分，然后在进行处理。 ②制备过程中注意不要使物料组分发生变化。 ③防止外来物质对物流的污染。 ④防止鲜活物质中因酶的作用而导致物料组分的变化。 ⑤制备好的样品应尽快地进行检验。 样品预处理的常用方法分为以下几种。 ①有机物破坏法，又分为干法灰化法和湿法灰化法。选择的原则应是： a.方法简便，使用试剂越少越好。 b.方法耗时间越短，有机质破坏越彻底越 好。c.被测元素不受损失，破坏后的溶液容易处理，不影响以后的测定步骤。
第一章样品的采集和处理 1 范围 本章规定了用于人免疫缺陷病毒（HIV）检测的全血、血清、血浆、细胞、唾液、尿液以及滤纸干血斑（DBS）样品的采集和处理方法，适用于HIV抗体检测、抗原检测、核酸检测、耐药检测,CD4+和CD8+T淋巴细胞测定和HIV分离培养。 2 规范性引用文件 《艾滋病和艾滋病病毒感染诊断标准》中华人民共和国卫生行业标准 WS 293-2008 《艾滋病病毒感染者及艾滋病患者CD4+T淋巴细胞检测质量保证指南（试行）》（中国疾病预防控制中心，2006年2月） 《HIV-1病毒载量测定及质量保证指南（试行）》（中国疾病预防控制中心，2008年2月）Guidelines for Using HIV Testing Technologies in Surveillance WHO/CDS/CSR/EDC/2008 《可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定》，卫生部第45号令2006年2月1日 3 样品种类及相应的用途 3.1 全血、血清、血浆、唾液、尿液以及DBS样品可用于HIV抗体检测。 3.2 抗凝全血可用于CD4+和CD8+T淋巴细胞测定。 3.3 血浆可用于HIV-1病毒载量、基因型及耐药检测。DBS样品可用于HIV-1基因型及耐药检测。 3.4 全血、血浆、淋巴细胞富集液、外周血淋巴细胞（PBMC）及DBS样品可用于HIV核酸的定性检测。 3.5 PBMC、全血、淋巴细胞富集液等可用于HIV-1分离培养。 4 操作步骤 4.1 采样前准备 根据检测项目的具体要求，确定采集样品的种类、处理、保存及运输的时限和方法，按照临床采血技术规范的要求操作，遵守生物安全要求（参见本规范第八章实验室生物安全）。 要检查所需物品是否已备齐，是否在有效期内，有无破损，是否足量，特别应检查受检者信息与样品容器表面的标记是否一致，并注明样品采集时间。选择合适的室内（外）采血空间，受检者坐（卧）于合适的位置，准备采血用具、皮肤消毒用品、采血管及试管架、硬质废弃物容器等。 4.1.1 样品的编码和记录 4.1.2 应制定样品编码的标准操作程序（SOP），规定样品编码的原则和方法，为样品制定唯一性编码（编号），保证其唯一性。 4.1.3 采血前，先对装有样品的离心管或滤纸进行标记，核对后编码。要将标签贴在试管的侧面，最好使用预先印制好的、专门用于冷冻储存的耐低温标签。 4.1.4 应使用专门的样品记录本或登记表记录样品，同时录入电脑保存。 4.2 采集和处理样品 4.2.1 血液 4.2.1.1 抗凝全血：消毒局部皮肤，用加有抗凝剂（EDTA钠盐或钾盐、枸橼酸钠、肝素钠）的真空采血管抽取适量静脉血，或用一次性注射器抽取静脉血，转移至加有抗凝剂的试管中，轻轻颠倒混匀6～8次，备用。
农田土壤样品制备及保存方法 一、制样室要求制样室应设在向阳(但严防阳光直射样品)、通风、整洁、无扬尘、无易挥发化学物质的房间。为便于晾样，面积最好不小于10平方米。 二、制样所需的工具与容器晾样用白色搪瓷盘；敲样用木棰、压样用木棒；磨样用样品研磨机、玛瑙研磨机或玛瑙研钵、白色搪瓷研钵；过筛用尼龙筛，规格为20-100目；装样用具塞磨口玻璃瓶、具塞无色聚乙烯塑料瓶或特制牛皮纸袋(装样量不低于200克)；装样用牛角勺；样品标签。三、制样程序１、土样接交：采样人将样品送交管理人员后，样品管理人应进行样品登记，然后填写制样通知单交制样人员，制样人员按下列步骤制样。 2、湿样晾干：在晾干室将湿样放置晾样盘中，摊成2厘米厚的薄层，并间断地用木棰敲碎、翻拌、拣出碎石，砂砾及植物残体等杂质。 3、一个样品准备四个装样瓶(或样品袋)，把装样瓶洗净晾干，填好样品标签并贴好(20目二瓶，60目一瓶，100目一瓶)，标签均一式二份，瓶外贴一份，瓶内装一份。 4、样品缩分：将晾干敲碎的样品反复混合均匀，然后铺成一圆形，过圆心画十字线将圆分为四等分，取对角线二份(另二份弃去)，照此方法继续缩分，最终留500克左右制样。 5、样品粗磨：将风干样于白色搪瓷盘中用木棰、木棒再次压碎样
品，全部过20目尼龙筛。过筛后的样品全部置于有机玻璃板上混匀。6、样品细磨：取粗磨样品100克，用磨样机或研钵磨至全部过60目尼龙筛；再取粗磨样品100克，用磨样机或研钵磨至全部过100目尼龙筛。 7、样品分装：将过20目、60目和100目样品分别装入相应的样品瓶中(各100克)，作为检测样品，剩余的约200克过20目筛样品装入另一个样品瓶中，作为自备库存样备用。过20目筛(孔径0.9毫米)粗磨样可直接用于土壤pH、土壤代换量、土壤速测养分含量、元素有效性含量分析；过60目筛(孔径 0.25毫米)样品用于农药或土壤有机质、土壤全氮等分析；过100目(孔径0.149毫米)土样，用于土壤重金属和元素全量分析。 8、样品制完后，检查所有样品编号、标签、粒径、标签填写等无误，将库存样和检测样一并交样品保管人，双方签字认可。若样品需外送检测，则将检测样送检测单位，库存样自己保存。 四、制样注意事项晾样时不得将样品铺放在报纸等不洁净的纸张上；样品不得在阳光下直接暴晒；因时间关系需烘干样品时，需在45℃以下温度烘烤；不得在晾样前缩分样品；制样中，采样时的土壤样品标签与土壤样品始终放在一起，严禁混错；每个样品经风干、磨碎、分装后送到实验室的整个过程中，使用的工具与盛样容器的编号必须始终一致，以免搞错；制样所用工具每制备一份样品后擦洗一次，
第一章样品的采集和处理 1范围 本章规定了用于人免疫缺陷病毒（HIV ）检测的全血、血清、血浆、细胞、唾液、尿液以及滤纸干血 斑（DBS ）样品的采集和处理方法，适用于 HIV 抗体检测、抗原检测、核酸检测、耐药检测 ，CD4+ 和CD8+T 淋巴细胞测定和HIV 分离培养。 2规范性引用文件 《艾滋病和艾滋病病毒感染诊断标准》中华人民共和国卫生行业标准 WS 293-2008 《艾滋病病毒感染者及艾滋病患者 CD4+T 淋巴细胞检测质量保证指南（试行）》（中国疾病预防控 制中心，2006年2月） 《HIV-1病毒载量测定及质量保证指南（试行）》（中国疾病预防控制中心， 2008年2月） Guideli nes for Usi ng HIV Test ing Tech no logies in Surveilla nee WHO/CDS/CSR/EDC/2008 《可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定》，卫生部第 45号令2006年 2月1日 3样品种类及相应的用途 3.1全血、血清、血浆、唾液、尿液以及 DBS 样品可用于HIV 抗体检测 3.5 PBMC 、全血、淋巴细胞富集液等可用于 HIV-1分离培养。 4操作步骤 4.1采样前准备 根据检测项目的具体要求，确定采集样品的种类、处理、保存及运输的时限和方法，按照临床采血技 术规范的要求操作，遵守生物安全要求（参见本规范第八章实验室生物安全）。 要检查所需物品是否已备齐，是否在有效期内，有无破损，是否足量，特别应检查受检者信息与样品 容器表面的标记是否一致，并注明样品采集时间。选择合适的室内（外）采血空间，受检者坐（卧） 于合适的位置，准备采血用具、皮肤消毒用品、采血管及试管架、硬质废弃物容器等。 4.1.1样品的编码和记录 4.1.2应制定样品编码的标准操作程序（SOP ），规定样品编码的原则和方法，为样品制定唯一性编 码（编号），保证其唯一性。 4.1.3采血前，先对装有样品的离心管或滤纸进行标记，核对后编码。要将标签贴在试管的侧面，最 好使用预先印制好的、专门用于冷冻储存的耐低温标签。 4.1.4应使用专门的样品记录本或登记表记录样品，同时录入电脑保存。 4.2采集和处理样品 4.2.1血液 4.2.1.1抗凝全血：消毒局部皮肤，用加有抗凝剂（ EDTA 钠盐或钾盐、枸橼酸钠、肝素钠）的真空 采血管抽取适量静脉血，或用一次性注射器抽取静脉血，转移至加有抗凝剂的试管中，轻轻颠倒混匀 6 ~ 8次，备用。 421.2末梢全血：消毒局部皮肤（成人和 1岁以上儿童可选择耳垂、中指、无名指或食指。 1岁以 3.2抗凝全血可用于CD4+和CD8+T 淋巴细胞测定 3.3血浆可用于HIV-1病毒载量、基因型及耐药检测＜ 3.4全血、血浆、淋巴细胞富集液、外周血淋巴细胞 （ 检测。 DBS 样品可用于HIV-1基因型及耐药检测。 PBMC ）及DBS 样品可用于HIV 核酸的定性
食品样品的采集、制备与保存 (一)、采样要求 进行食品检验，是在整批被检食品中抽取一部分作为检验样品，而对样品进行检验的结果用来说明整批食品的性状。因此，采样时必须注意样品的代表性和均匀性。要认真填写采样记录。写明样品的生产日期、批号、采样条件、包装情况等，外地调入的食品应结合运货单、兽医卫生人员证明、商品检验机关或卫生部门的化验单、厂方化验单了解起运日期、来源地点、数量、品质情况，并填写检验项目及采样人。 (二)、采样数量和方法 采样数量应能反映该食品的卫生质量和满足检验项目对试样量的需要，一式三份，供检验、复验、备查或仲裁，一般散装样品每份不少于0.5Kg。 鉴于采样的数量和规则各有不同，一般可按下述方法进行。 (1)液体、半流体饮食品。如植物油、鲜乳、酒或其它饮料，如用大桶或大罐盛装者，应先行充分混匀后采样。样品应分别盛放在三个干净的容器中，盛放样品的容器不得含有待测物质及干扰物质。 (2)粮食及固体食品应自每批食品的上、中、下三层中的不同部位分别采取部分样品混合后按四分法对角取样，再进行几次混合，最后取有代表性样品。 (3)肉类、水产等食品应按分析项目要求分别采取不同部位的样品或混合后采样。 (4)罐头、瓶装食品或其它小包装食品，应根据批号随机取样。同一批号取样件数，250g以上的包装不得少于6个，250g以下的包装不得少于10个。掺伪食品和食物中毒的样品采集，要具有典型性。 由于食品数量较大，而且目前的检测方法大多数具有破坏作用，故不能对全部食品进行校验，必须从整批食品中采取一定比例的样品进行校验。从大量的分析对象中抽取具有代表性的一部分样品作为分析化验样品，这项工作即称为样品的收集或采样。食品的种类繁多，成分复杂。同一种类的食品，其成分及其含量也会因品种、产地、成熟期、加工或保藏条件不同而存在相当大的差异；同一分析对象的不同部位，其成分和含量也可能有较大差异。从大量的、组成成分不均匀的被检物质中采集能代表全部被检物质的分析样品(平均样品)，必须采用正确的采样方法。如果采取的样品不足以代表全部物料的组成成分，即使以后的样品处理、检测等一系列环节非常精密、准确，其检测的结果亦毫无价值，甚至导出错误的结论。可见，采样是食品分析工作非常重要的环节。 正确采样，必须遵循以下两个原则：第一，采集的样品要均匀一致、有代表性，能够反映被分析食品的整体组成、质量和卫生状况；第二，在采样过程中，要设法保持原有的理化指标，防止成分逸散或带入杂质。 1.采样步骤 样品通常可分为检样、原始样品和平均样品。采集样品的步骤一般分五步，依次如下。 (1)获得检样由分析的整批物料的各个部分采集的少量物料成为检样。 (2)形成原始样品许多份检验综合在一起称为原始样品。如果采得的检验互不一致，则不能把它们放在一起做成一份原始样品，而只能把质量相同的检样混在一起，作成若干份原始样品。 (3)得到平均样品原始样品经过技术处理后，再抽取其中一部分供分析检验用的样品称为平均样品。
样本采集 样本采集要注意的重点就是,所采集的临床标本一定要正确与采集的时间合适,并注意采用正确的标本容器,采集的方法程序对有些临床标本非常重要。在疾病发展过程中,标本采集过早或过晚都可能会给出假阴性结果。 尽可能在最短的时间内完成样本的采集(应该保证30min内完成,不适当的处理时间将直接影响与干扰研究的结果),应尽快降低所采集组织样本的温度。 肿瘤组织标本的采集与处理应遵循严格的生物安全处理规范,也可根据研究者所提出的特殊要求,按照对方提供的操作模式进行相关处理。 (1)患者入院后进行生物安全性检查。检测HIV以及嗜肝病毒HBV及HCV感染情况。HIV 感染患者不列为采集对象。HBV及HCV感染者,须在样本上明确注明。 (3)组织标本取材时间肿瘤外科手术后,标本离体30min内。 (4)标本采集 每种肿瘤主要采集3 类生物样本,并要保证这些样本的质量与数量能够用于DNA、RNA 与蛋白质提取及满足相关的实验分析。 1)新鲜组织(包括手术与活检组织) 实体组织样本采集包括外科手术切除的或活检与尸检得到的正常、良性与恶性肿瘤 组织。手术结束后,在临床肿瘤病理专家的指导下,在不影响病理诊断取材需要的前 提下,采集组织样本。 A。标本取材部位:肿瘤组织、癌旁组织(癌组织旁1cm)与正常组织(癌组织旁5cm以外或最远处)。 a) 临床诊断明确,未经放疗与化疗的手术切除标本,在病理医生指导下取材。 b) 尽量保证癌组织没有坏死(有坏死的标本很难提取高质量的RNA 与蛋白)。 c) 配对“癌旁组织”,选择距离癌灶边缘3 cm 范围内的组织样本,配对“正常组织”, 要选择距癌灶边缘5 CM 以上或距离癌灶边缘最远段(或手术切缘处)取组织样本,应注明距离。对于空腔器官,如食管、胃、肠、胆囊、膀胱等,“癌旁组织”“正常组织”应取相应部位的“粘膜组织”样本。 d) 在保障病理学检测所需标本的前提下,尽量提供足量的肿瘤与癌旁正常组织,一般不 少于200mg 或10E7 细胞。 e)手术切除的组织样本必须迅速置于液氮中,然后保存于液氮罐或-80℃冰箱,这一过程 尽量在手术标本离体后30 分钟内完成。 f) 其中一块组织可用OCT 处理后冻存,可用于形态学观察与显微切割。 (OCT(Optimal Cutting Temperature)包埋剂就是一种常用的固形剂。用其包埋组织进行速冻后,能与组织固定成形,有利于保存组织结构完整性,便于其形态结构的分析) B。过程:使用数码相机拍摄标本外观后,将标本切成小块(直径0、5cm×0、5cm,厚度<0、5cm),为减少处理时间,标本不应切得太小,然后放入冻存管中,标记后放入标本盒中,盒盖上附有记录标本编号、采集时间及标本类型的标签。每例病人样本保存3-5份冻存管标本。每份组织重量原则上不低于2g。 2) 石蜡包埋组织 a)中性福尔马林固定手术切除标本按病理学操作规范进行取材 b)取材部位包括癌灶,以及癌灶周围3cm 以内的癌旁组织,3~5cm 的近癌组织与5cm以 外的远癌组织或距癌灶边缘最远段分别取2-3 块。取材尽量以癌灶为中心水平向两侧取材,尽量保证足够大的组织样本。取材应该以“远癌-近癌-癌灶”的顺序。癌灶处取材包括癌与正常组织的交界及肿瘤浸润最深处。所有取材的组织块应标明取材部位。
第二章烟叶样品的采集、制备、保存及水分测定方法 第一节样品的采集 1 正确采样的意义 掌握两个名词： 1)采样：从大量的分析用烟叶中抽取一部分作为分析材料的过程称为采样 2)样品：所抽取的分析材料称作样品 正确采样意义: 1)不同处理间存在差 2)同一处理内部存在机误 3)样本和总体间存在差异 4)采样误差比分析测量误差大5-10倍 2 烟叶的采样方法 2.1田间试验取样 正确采样的要求：减小实验误差，样本能够代表总体。 控制采样误差的方法有两个：增加采样点数和获得平均样品 1）增加采样点数：在一块地选取3-5个或更多的采样点。一般采用对角线采样和S形采样两种方法。 选择点数多，测定数也多，工作量增加，但是越能代表总体。2）获得平均样品 先了解以下三个名次： （1）检样：从分析对象各部分采取的少量样品
（2）混合样：若干份（5-10份）等量检样混合在一起得到的样品（3）平均样：从混合样中抽取一部分得到的样品。 3）两种采样方法的区别： 增加采样点数：采样后先测定后平均 获得平均样品：采样后先平均后测定 二者采样点数是一样的。 4）取检样应该注意的问题 A 避免主观性，多点（5-10点）采样，各点之间样品等量 B 不同处理之间取样标准要一致 C 常规成分：每一检样10-15片叶就可以了，并应该兼顾大中小叶片的比例 D 要取无污染烟叶。烤后烟叶存放在农户家中 应该防止农药，化肥水等污染。 2.2烟叶常规化学成分分析国标法取样 1.了解几个定义： 1）批：在一个或多个特性被认为一致的条件下产生的一定数量的烟草。 2）小样：从一个取样单位一次取出的一定数量的烟草。 3）单样：是由从同一取样单位中抽取的全部小样组成，单样大小取决于：烟草类型；取样单位的大小；测定项目的类型和数量。 4）实验室样品：用于实验室检验或测试的样品，其代表总样。 5）试样：从实验室样品中随机抽取的用于测试的样品，其代表总样。