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蛋白质的等电点测定与沉淀实验

蛋白质的等电点测定与沉淀实验
蛋白质的等电点测定与沉淀实验

实验项目一、蛋白质的等电点测定及沉淀反应

姓名:指导教师:实验室:

组员:成绩:

第三部分:实验记录与分析

实验现象记录及分析:

(一)蛋白质等电点测定

(二)蛋白质的盐析

1.蛋白质的盐析

2.重金属离子沉淀蛋白质

3.有机酸沉淀蛋白质

4.有机溶剂沉淀蛋白质

5.乙醇引起的变性与沉淀

第四部分:课后研讨题

1.通过本次合作实验后,有否对该项目改进的合理建议。

适当增加对照组和空白组,使实验数据更加科学可信。

2.鸡蛋清为何可做铅、汞中毒的解素剂?

铅、汞是重金属离子,与蛋白质结合能使蛋白质分子内部结构发生重大改变,发生变性而沉淀,不再溶于原来的溶剂中。

3.氯化汞为何能做为杀菌剂?

细菌由蛋白质构成,氧化汞是重金属盐,与蛋白质结合能使蛋白质分子内部结构发生重大改变,发生变性而沉淀,不再溶于原来的溶剂中。

4.在等电点时,蛋白质溶液为什么容易发生沉淀?

蛋白质颗粒上正负电荷的数目相等,在水溶液中的蛋白质分子由于表面生产水化层和双电层而成为稳定的亲水胶体颗粒,在一定的理化因素影响下,蛋白质颗粒可因失去电荷和脱水而沉淀。

5.将本实验中所涉及到的几种蛋白质沉淀方法各举一应用实例加以说明。

(1)盐析:硫酸铵的浓溶液能析出蛋白质。

(2)乙醇引起的变性与沉淀:低温下用乙醇或丙酮短时间作用于蛋白质,用于提纯蛋白质。

(3)重金属离子沉淀蛋白质:取一支离心管,加入2ml的蛋白质溶液,再加入3%硝酸银溶液1-2滴,振荡试管,观察现象。

(4)某些有机酸沉淀蛋白质:取一支离心管,加入2ml蛋白质溶液,再加入1ml 5%三氯乙酸溶液,振荡试管,观察现象。

(5)有机溶剂沉淀蛋白质:取一支离心管,加入2ml蛋白质溶液,再加入2ml 95%乙醇,观察现象。

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