Journal of Chromatography A,1097(2005)
183–187
Short communication
Simultaneous determination of carbamate and organophosphorus
pesticides in fruits and vegetables by liquid
chromatography–mass spectrometry
Min Liu a,Yuki Hashi b,?,Yuanyuan Song b,Jin-Ming Lin a,?
a State Key Laboratory of Environmental Chemistry and Ecotoxicology,Research Center for Eco-Environmental Sciences,
Chinese Academy of Sciences,P.O.Box2871,Beijing100085,China
b Shimadzu(HongKong)Limited,Beijing Of?ce,Analytical Applications Center14F No.16,Chao Yang Men Wai Street,
Beijing China,Life Tower Chao Yang District,Beijing100020,China
Received15July2005;received in revised form8October2005;accepted13October2005
Available online27October2005
Abstract
A liquid chromatography–mass spectrometry(LC–MS)method was established for the purpose of simultaneous determination of carbamate and organophosphorus(OPPs)pesticides in fruits and vegetables.Samples were extracted with acetonitrile;and then prepared by dispersive solid-phase extraction(dispersive-SPE)with primary secondary amine(PSA)as the sorbent.Four common representative samples(tomato,apple,carrot,and cabbage)were selected from the supermarket to investigate the effect of different matrices on pesticides recoveries and assay precision after spiking samples with0.05mg/kg.Matrix composition did not interfere signi?cantly with the determination of the pesticides.The obtained recoveries were, with a few exceptions,in the range of70–110%with RSDs less than8%.It was applied to pesticide residue monitoring in vegetables and fruits from local markets.
?2005Elsevier B.V.All rights reserved.
Keywords:Carbamates;Organophosphorus;Liquid chromatography–mass spectrometry;Dispersive solid-phase extraction
1.Introduction
Carbamates and organophosphorus(OPPs)pesticides are the most widely used pesticides.Therefore,it has been necessary to develop accurate analytical method for the identi?cation and quanti?cation of OPPs and carbamate pesticides in fruits and vegetables.Due to their physical chemical properties such as thermal instability and polarity,carbamates are dif?cult or even impossible to be analyzed using GC techniques without the time-consuming process of derivatization.Due to lower sensitivity of LC/UV,HPLC with?uorescence detection by post-column derivatization is the most widely used method for the analysis of carbamate pesticides in foods[1].Most OPPs are easily analyzed by GC.Therefore,carbamates and OPPs are usually analyzed by ?Corresponding authors.Tel.:+861062841953;fax:+861062841953.
E-mail addresses:y-hashi@shimadzu.co.jp(Y.Hashi),
jmlin@https://www.doczj.com/doc/e315542452.html,(J.-M.Lin).liquid chromatography and gas chromatography,respectively. Just so,the procedure is time-consuming.
LC–MS has now emerged as an excellent alternative tech-nique for simultaneous analysis of these compounds.Several reports attempted to use LC–MS methods for the simultane-ous determination of carbamates and organophosphorus pesti-cides in vegetables and fruits[2–6].However,these works were mainly based on traditional extraction with organic solvent.It is simple yet time-consuming and consumes much toxic solvents as well[2–6].
Anastassiades et al.[7]?rstly established dispersive-SPE for the determination of pesticides in vegetables and fruits by GC/MS.Lehotay et al.[8–10]developed the method to analyze pesticides by gas chromatography/mass spectrome-try(GC/MS)and liquid chromatography/tandem mass spec-trometry(LC–MS/MS).Posyniak et al.[11]recently applied the procedure to analyze sulfonamides in chicken by liquid chromatography with?uorescence detection.LC–MS with a single quadrupole has also been widely reported to deter-
0021-9673/$–see front matter?2005Elsevier B.V.All rights reserved. doi:10.1016/j.chroma.2005.10.022
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mine pesticides.However,the combination extraction proce-dure/determination technique has not been reported yet.
The purpose of this study was to establish a dispersive-SPE method for the simultaneous determination of carbamates and OPPs in fruits and vegetables by LC–MS with a single quadrupole instead of the tripe one.Method validation was pre-sented in terms of recovery and precision,and then it was applied to monitor real samples from local market.
2.Experimental
2.1.Chemicals and reagents
The HPLC grade-water was obtained by puri?cation of de-ionized water through a Milli-Q system(Bedford,USA). Methanol and acetonitrile(LC grade)were purchased from Fisher(New Jersey,USA).Pesticides standards including methiocarb-sulfone,aldicarb,carbaryl,ethiofencarb,isopro-carb,methidathion,azinphos-methyl,baycarb,methiocarb, malathion,pirimiphos-methyl,etrimfos,pyraclofos,phosalone, and formic acid were purchased from Wako(Osaka,Japan). Stock solutions of each pesticide at1mg/mL were prepared in methanol and working standard solutions were obtained at various concentrations by dilution of the stock solutions in methanol.These solutions were stored at?25?C.Analytical grade anhydrous magnesium sulfate(MgSO4)and NaCl were obtained from local reagent supplier in Beijing.Primary secondary amine(PSA)was obtained from Varian(Tokyo, Japan).
2.2.Sample preparation
Ten grams of sample was dissolved in10mL acetonitrile and homogenized by vortex for1min in a40mL centrifuge tube.Four grams of anhydrous MgSO4and1g of NaCl were then added and vortexed immediately for1min.It followed by centrifugation at3000rpm for10min.
One milliliter supernatant aliquot in acetonitrile was trans-ferred into1.5mL micro-centrifuge tubes containing50mg PSA sorbent and100mg anhydrous MgSO4.The vial was tightly sealed and vortexed for1min,and then centrifuged for5min at5000rpm to separate solution from solid.The solution was transferred into the1.5mL sample vial and then placed in the autosampler and analyzed by LC–MS.
2.3.Liquid chromatography–mass spectrometry
A Shimadzu LC/MS2010A system was employed.It con-sisted of two LC-10ADvp pumps,a DGU-14A degasser,a SIL-HTc autosampler with volume injection set at10?L,and a single quadrupole MS.Data acquisition and processing were performed with the LC–MS solution Ver3.0Workstation.
The chromatographic separation was performed on a Shim-Pack VP-ODS(150mm×2.0mm i.d.,5?m).The mobile phase was methanol–water(containing0.2%formic acid)at total?ow-rate of0.2mL/min.LC gradient program:0–25min,methanol concentration from20%to90%;25–30min,methanol concen-tration holds at90%;30–40min,methanol concentration holds at20%.
Operating condition of the ESI interface in positive ionization mode:CDL temperature,250?C,block heater,200?C;nebulizer gas(N2),1.5L/min,drying gas(N2),0.04MPa;detector voltage, 1.5kV;Probe voltage,4.5kV.
Selected-ion monitoring(SIM)of the most abundant ions of each compound was used for quanti?cation.However,when two compounds gave similar transitions,another product ion was selected.Therefore,protonated molecular ion(MH+)was?rstly chosen as the precursor ion.In some cases,when the intensity of the molecular ion was too low,the sodium or water adduct ion were chosen as precursor ions such as methiocarb-sulfone, phosalone,and so on.
2.4.Validation study
Linear dynamic range,precision,recovery,selectivity,and uncertainty for the analytical methodology were evaluated.Lin-earity was determined by calibration curves created with con-centrations of0.01,0.02,0.05,0.10,0.20,and0.50?g/mL by mixture standard solutions.For sample matrix testing,tomato, apple,cabbage,and carrot obtained from supermarket were spiked and tested for recovery,precision at0.05mg/kg for each pesticide with?ve replicates.Before spiked testing,the blank samples were analyzed.If contaminated,the recoveries were calculated by subtraction of blank samples.
3.Results and discussion
3.1.Optimized LC–MS method
Flow-injection testing of individual standard solutions was performed to select ion source.The results demonstrated higher responses in positive mode than in negative mode for both ESI and APCI.In addition,the signal responses were10–20times higher by ESI than APCI for all tested pesticides.Therefore,ESI in positive mode was selected for next experiment.
To improve the chromatographic resolution and ionization ef?ciency of MS,analytical conditions such as LC gradient pro-gram,mobile phase composition,and?ow rate of drying-gas were optimized.Chromatographic resolution did not change dramatically and the MS signal for most pesticides decreased by a factor of5–10when acetonitrile/water was compared to that of methanol/water[6].This is most likely due to the fact that acetonitrile is a weaker proton donor than methanol(both in aqueous phase and in gaseous phase as well).Methanol was suitable for obtaining high intensity of all carbamates since it is liable to provide hydrogen to the radical ion of carbamates [12].For optimal LC separation,the more formic acid that was added to the mobile phase,the better resolution obtained for pesticides especially for those solute pairs such as pirimiphos-methyl and etrimfos which were dif?cult to be separated.The addition of formic acid increased the signal of MH+ions,how-ever,the signal-to-noise ratio(S/N)of analytes decreased since the baseline noise increased when formic acid was over0.2% (v/v)in the mobile phase.Regarding MS sensitivity and optimal
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Fig.1.The chromatograms of pesticides mixture(A)unspiked tomato,(B)spiked tomato(0.05mg/kg),and(C)standard solution(0.05?g/mL).(1)Methiocarb-sulfone;(2)aldicarb;(3)carbaryl;(4)ethiofencarb;(5)isoprocarb;(6)methidathion;(7)azinphos-methyl;(8)baycarb;(9)methiocarb;(10)malathion;(11) pirimiphos-methyl;(12)etrimfos;(13)pyraclofos;(14)phosalone.
mobile phase composition for separation,a mixture of methanol and water with the addition of0.2%formic acid was chosen as eluting solvent.In addition,the?ow-rate of drying-gas also played an important role in MS sensitivity.Perfect sensitivity appeared at?ow-rate of0.04MPa.
After optimization,limits of detection(LODs)were obtained by injection of the standard mixture and calculated with S/N≥3 in SIM mode.Pesticides can be detected at the level of 0.5–10ng/mL depending on the type of the analytes,which could meet requirements of residue analysis.
3.2.Validation of the method
Calibration curves were established through the range of 0.01–0.5?g/mL with correlation coef?cients from0.9950 to0.9999.For real samples such as tomato,credible deter-mination of the pesticide studied were achieved due to the lack of interfering peaks and the low background noise as shown in blank sample(Fig.1(A)).Chromatograms obtained from LC–MS analysis tomato spiked with0.05mg/kg and 0.05?g/mL standard solution are,respectively,illustrated in Fig.1(B and C).Compared with the two chromatograms,it is easy to observe an obvious trend that pirimiphos-methyl and etrimfos were separated completely in tomato sample,while only partial separation was achieved by injection of the standard solution.It is thought that pirimiphos-methyl was protonated in the acid tomato matrix which resulted in decreasing the retention on the column.For other types of samples matrices, there is some concern that target pesticides co-eluted with other components at about the same retention time originating from the matrix itself.As a result,with the aid of selection ion chromatogram,co-chromatography of each pesticide enabled the selective and positive identi?cation of peaks of interest.No interfering peaks from endogenous compounds of matrices were found.
Due to the fact that MRLs of most carbamates and OPPs pes-ticides are over or equal0.05mg/kg as shown in Table1,the precision and accuracy of the above-mentioned method are val-idated by four samples spiked with0.05mg/kg(Table1).The low recoveries of pirimiphos-methyl may have resulted from the hydrophilic structure which led to considerable solubility in water phase.Methiocarb-sulfone and aldicab showed relatively low recoveries and high RSDs.The reasons could come from two asides.One is that these compounds are liable to degrade during the extraction process[13];on the other hand,many polar com-pounds from the matrices exhibited weak retention on column, resulting in the suppression to some pesticides having similar retention behavior.As reported by Jansson et al.[6],the matrix effect is very compound-dependent,probably due to co-eluting matrix components which might interact with the target pesticide within the ionization interface.In addition,the high mean recov-ery of azinphos-methyl and phosalone could be partly explained by the lower ionization ef?ciency of the compounds contain-ing an acryl group in working solutions of pure methanol than those ionized from the matrices containing water.These effects demonstrate a different matrix af?nity for pesticides as suppres-sion and enhancement for one speci?c combination of pesticide and matrix.On the whole,the recoveries and RSDs were not in?uenced adversely by the kind of sample,and the method could serve as a quantitative method to identify and determine the pesticides in vegetables and fruits with reliable results at MRLs.
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Table1
Recovery and RSD of the pesticides in different samples spiked with0.05mg/kg(n=5)and maximum residue limits(MRLs)established by Japan(a)and EU(b) Pesticides Cabbage Tomato Carrot Apple MRLs(mg/kg) Recovery(%)RSD(%)Recovery(%)RSD(%)Recovery(%)RSD(%)Recovery(%)RSD(%)Values Matrixes Methiocarb-sulfone72 2.8100 5.573 6.287.0 5.70.05a Lettuce Aldicarb91 5.189 3.388 2.893 2.40.05a Grape Carbaryl90 3.3101 2.4101 2.4120 6.50.10a Potato Ethiofencarb89 2.1103 1.997 1.7113 3.90.50a Potato Isoprocarb86 4.079 4.785 1.7103 5.90.05b Pear Methidathion81 1.4109 2.294 2.7115 1.50.30b Pear Azinphos-methyl1050.3116 1.795 1.7120 2.00.50b Apple Baycarb90 3.598 2.493 2.9104 2.20.30a Peach Methiocarb102 2.3104 1.2100 1.4117 4.30.05a Cabbage Malathion90 2.699 3.094 2.6107 3.20.50b Apple Pirimiphos-methyl680.8580.358 1.071 1.40.05b Apple Etrimfos93 1.999 2.598 1.0114 2.20.05a Cauli?ower Pyraclofos81 1.994 1.296 1.8112 4.20.05a Potato
Phosalone110 2.3111 3.686 3.4119 3.3 2.00b
Apple
Fig.2.The typical chromatogram of peach sample.
3.3.Application to real samples
Twenty-?ve representative samples were collected from local markets including root vegetables(carrot and potato), leafy vegetables(lettuce,cabbage,and spinach),bulb vegeta-bles(onion,pumpkin-squash,and eggplant),fruit vegetables (cucumber and tomato),bean vegetables(kidney bean-legume), and prome fruits(apple,melon,and peach).In those fruits and vegetables above,the pesticides studied were usually monitored by Japan or EU that established the corresponding MRLs as shown in Table1.Those samples were determined by method established above,and the distribution and concentration of main pesticide residues were shown in Table2.Some pesticides were also detected in one or two samples at different levels (e.g.12.7?g/kg methidathion in one potato);others pesticides (carbaryl,baycarb,methiocarb,pyraclofos,and etrimfos)were not found in any samples.The concentrations found in the samples except for two peaches were always lower than MRLs (see Table1).Representative chromatogram of peach sample is shown in Fig.2.On the whole,70%of samples contained one or more pesticide residues.More than30%of samples contained multi-residues.In the worst case,there were10different pes-ticides found in a potato sample,but all concentrations found were below MRLs.Obviously,root and leafy vegetables are more susceptible to contamination compared to other samples. Azinphos-methyl and malathion widely existed in almost all types of fruits and vegetables,which indicated these two pesticides are often used.Other pesticides existed in only one or two types of fruits and vegetables,which may be explained by speci?c use of pesticide.For example,aldicarb residues sur-passed the MRLs in two peaches,while it was not found in other samples.
Table2
Distribution and amount of main pesticides residues in all kinds of fruits and vegetables
Residues Root(%)Leafy(%)Fruit(%)Prome(%)Bulb(%)Total(%)Amount(?g/kg)
Azinphos-methyl606020202036 6.02–73.9 Malathion4016–202036 2.13–223 Phosalone60––––280.52–88.6 Pirimiphos-methyl40–20––120.54–6.54 Isoprocarb–60–––129.87–24.3 Aldicarb–––40–8130–173 Methiocarb-sulfone20––––423.5
(–)No residues.
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4.Conclusions
LC–MS in combination with dispersive-SPE produced better selective and sensitive analysis of carbamate and OPPs pesti-cides in fruits and vegetables.It showed satisfactory validation results,such as accuracy,precision,and selectivity.For the pesti-cides studied,the sensitivity of the method developed was good enough to determine reliably at MRLs.It meets the requirement of quickness,simplicity,and economy for routine screening of pesticide residues and monitoring pesticide residues in the fruits and vegetables.
Acknowledgements
The authors gratefully acknowledge?nancial support of the National Science Fund for Distinguished Young Scholars of China(No.20125514),National Natural Science Foundation of China(No.20437020,50273046),and Major Research Program of Chinese Academy of Sciences(KZCX3-SW-432).References
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有机磷农药的测定----气相色谱法 1范围 1.1 本法规定了用气相色谱分析法测定供水水中的敌百虫、敌敌畏、乐果、对硫磷和甲基对硫磷。 1.2 本法适用于城市供水和水源水中的敌百虫、敌敌畏、乐果、对硫磷和甲基对硫磷的测定。 1.3 本法最低检测质量浓度：若取样100mL浓缩至1.0mL，进样量2μL，敌百虫为0.14μg/L、敌敌畏为0.43μg/L、乐果为0.29μg/L、对硫磷为0.10μg/L、甲基对硫磷为0.24μg/L、。 2 原理 本法采用固相萃取技术吸附水中微量有机磷农药，然后用具有一定有机溶剂洗脱，经浓缩至一定体积，样品用火焰光度检测器气相色谱仪进行测定。 火焰光度检测器机理：有机磷化合物氧化燃烧生成磷的氧化物，然后在富氢焰的条件下被氢还原成HPO，被火焰高温激发的磷裂片发射一系列特征波长的光，其最大波长为526nm。通过526nm干涉滤光片，测量其发射光强度而检测磷，其光强度与HPO浓度成正比。 3 试剂 3.1 载气和辅助气体 3.1.1 载气：氮气，99.999%，用5A分子筛净化管净化。 3.1.2 燃烧气：氢气，99.9%，用5A分子筛净化管净化。 3.1.3 助燃气：空气，用5A分子筛净化管净化，干燥。 3.2 标准混合样品：敌百虫、敌敌畏、乐果、对硫磷和甲基对硫磷的混合标准样。 3.2.1 敌百虫：200mg/L。 3.2.2 敌敌畏：200mg/L。 3.2.3 乐果：200mg/L。 3.2.4 对硫磷：100mg/L。 3.2.5 甲基对硫磷：100mg/L。 3.3 试剂 3.3.1 丙酮：经重蒸馏后使用。 3.3.2 甲醇：经重蒸馏后使用。
液相色谱-质谱联用仪 院系：化学学院 液相色谱-质谱联用仪 基于核酸的重大疾病诊断新策略和新技术研究。 基于化学小分子研究STAT3与心力衰竭相关靶基因RLX的相互作用及信号转导的调 三年内利用该仪器作为主要科研手段发表学术论文（三大检索） 15 篇，其中代表论文： 论文题目期刊名年卷（期）起止页码 Mass Spectrometry Of G-Quadruplex DNA: Formation, Recognition, Property, Conversion, and Conformation. Mass Spectrometry Reviews 201136 （6） 1121-1142 The formation and stabilization of a novel G-quadruplex in 5'-?anking region of relaxin gene.PLos One2012 7 （2） 31201- 31205 Spectroscopic probing of recognition of the G4 in c-kit promoter by small-molecule natural products.Int. J. Biol. Macromol.2012 50 （4） 996-1001 Convenient Method for the Synthesis of a Cyclic Polyamide for Selective Targeting of c?myb G4 Seletive Targeting of Org. Lett.201214 （24） 6126-6129 267
传感器与微系统（Transducer and Microsystem Technologies）2011年第30卷第6期 一种用于有机磷农药检测的微流控传感器* 郭红斌1，陈国平1，兰文升2，陆冰睿1，刘冉1 （1．复旦大学微电子系专用集成电路与系统国家重点实验室，上海200433； 2．深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心，广东深圳518045） 摘要：成功制作出一种用于检测有机磷农药的聚二甲基硅氧烷（PDMS）微流控传感器，该传感器集成 了光纤和用于固定有机磷水解酶的SU—8圆柱。检测原理基于反应产物对光的吸收，不同浓度有机磷农药 的实验结果显示：该传感器的线性相关系数为0．9934。实验结果展示了一种将酶固定在微流沟道的简单 方法。简单的制备工艺和便携式的器件为集成化的有机磷农药检测装置提供了低成本和大批量生产的选 择途径。 关键词：聚二甲基硅氧烷；微流控；SU—8；有机磷农药 中图分类号：TP212文献标识码：A文章编号：1000—9787（2011）06—0084—03 A microfluidic sensor for detection of organophosphorus compounds* GUO Hong-bin1，CHEN Guo-ping1，LAN Wen-sheng2，LU Bing-rui1，LIU Ran1 （1．State Key Lab of ASIC and Device，Department of Microelectronics，Fudan University，Shanghai200433，China； 2．The Technical Center of Animal and Plant Inspection and Quarantine，Shenzhen Entry-exit Inspection and Quarantine Bureau，Shenzhen518045，China） Abstract：A polydimethylsiloxane（PDMS）microfluidic sensor with SU—8pillars for immobilizing the enzyme and optical fibers has been successfully fabricated for detecting the organophosphorus compound．The principle of the detection is based on the absorbance to light the enzymatic product and the experimental results of different concentrations organophosphorus with absorbance show a good linear response range and the correlation coefficient is0．9934．The experimental result shows a simple way to bind the enzymes to the microfluidic．The simple process and portable device offers an option of a low cost mass production for integrated organophosphorus compounds． Key words：PDMS，microfluidic，SU—8，organophosphorus compounds 0引言 近年来，有机磷化合物，如甲基对硫磷，因毒性高、环境中持久性低等特点替代了有机氯在农业生产中作为农药广泛使用。有机磷农药的使用范围从杀虫剂扩展到杀菌剂、杀软体动物剂、除草剂、杀鼠剂等各种用途，使用量也成倍增长，造成了环境中地下水、地表水等水资源和土壤的污染［1］，并且其在食物中的残留严重威胁到人类健康［2］。因此，研制出检测有机磷农药快速、可靠、灵敏和实用的分析方法，对人类健康和生态平衡都有至关重要的作用。 有机磷农药传统的检测方法有气相色谱法（GC）、高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱—质谱联用（GC—MS），液相色谱—质谱联用（LC—MS）等［3］，这些方法既能定性又能定量，灵敏度高，已成为实验室常用的分析方法。但这些方法需要对样品进行繁琐的预处理，成本高，所需的仪器昂贵且笨重，并需要专业人员维护，不适合于现场检测。为了简化有机磷农药的检测过程，提高检测效率，新的检测方法也有基于乙酰胆碱酯酶和基于有机磷水解酶的传感器［4 7］，这些检测方法快速方便，但是器件集成度仍不够高。 聚二甲基硅氧烷（PDMS）微流控器件由于其低的制备成本和短的制备周期，广泛应用于各种生物化学量的检测，常用来实现片上实验室（lab-on-a-chip）［8 10］。本文提出一种简单的方法来制备PDMS微流控有机磷农药检测传感器。该传感器集成了用于固定有机磷水解酶的SU—8圆柱和用于传输入射光与出射光的光纤。通过检测反应产物的光吸收可以测出待测有机磷农药的浓度。 收稿日期：2011—04—26 基金项目：高等学校科技创新工程重大项目培育基金资助项目；上海市重点学科建设项目（B112）48
龙源期刊网 https://www.doczj.com/doc/e315542452.html, 有机磷农药残留检测技术 作者：张甜甜孙正阳 来源：《中国科技博览》2017年第19期 [摘要]在农作物病虫害的防治中，人们广泛的应用一种具有高效性的杀虫剂，这种杀虫剂就是会对人和动物产生巨大的危害的有机磷农药。由于有机磷农药对人和动物的危害很大，所以建立起有效、高效并且灵敏的有机磷农药残留在农作物上的检测技术刻不容缓。本文就有机磷农药残留检测技术所包含的技术进行论述，并详细叙述了这一技术的发展趋势和未来。 [关键词]有机磷农药；残留检测；检测技术 中图分类号：O657. 文献标识码：B 文章编号：1009-914X（2017）19-0261-01 有机磷农药在我国的应用范围最广，因为它所发挥的作用是非常巨大的。有机磷农药具有药效高、杀虫效果好并且易降解的特点，这些特点使有机磷农药成为我国使用最频繁的农药品种，而且也是当今世界上使用最多的农药，并且生产这种农药的数量也较其他农药品种多得多。尽管有机磷农药有易降解的特点，但是长期使用也会对环境和人类造成危害。由于农药都是化学制成品，有机磷农药在降解后很有可能会与环境中的一些有机成分结合发生化学反应，生成一种新的对环境有害的化学污染物。残留在瓜果蔬菜上的有机磷农药会对使用他们的人和动物造成很重要的危害。为了环境的保护和人们生命的健康，对其残留的检测技术是有重大意义的。 1 色谱法检测 色谱法又称“色谱分析”、“色谱分析法”、“层析法”，是一种对物质分离和分析的方法，将物质的固定相和流动相进行分离，色谱法利用不同物质在不同相态的选择性分配，以流动相对固定相中的混合物进行洗脱，混合物中不同的物质会以不同的速度沿固定相移动，最终达到分离的效果。利用色谱法对有机磷农药进行检测，把有机磷农药的浓度转换成可以记录下来的电信号，并且使用电信号记录仪记录下来对有机磷农药的监测结果。 1.1 气相色谱法 经过实践证明，气相色谱法是适合测定有机磷农药在果树上的残留的检测技术，同时，气相色谱法是还检测有机磷的国家标准方法，具有相对较高的准确性。这种方法可以对多种农药进行有效快速的分离，具有较高的分离能力，而且还具有较高的灵敏度和对检测物质的准确性。气相色谱法对有机磷的检测检出限可以达到1ng，准确度已经很高了，然而在一些检测器的问世以后，这种准确度也在进一步的被加强。气相色谱法现在最常用的一种检测器是火焰光度检测器，这种检测器使检测的结果更准确，它的检出限可以达到0.00～0.008mg/kg，这种方
液相色谱-质谱联用(LC-MS) LCMS分别的含义是：L液相C色谱M质谱S分离（友情赠送：G是气相^_^） LC-MS/MS就是液相色谱质谱/质谱联用 MS/MS是质谱-质谱联用（通常我们称为串联质谱，二维质谱法，序贯质谱等） LC-MS/MS与LC-MS比较，M（质谱）分离的步骤是串联的，不是单一的。 色谱法也叫层析法，它是一种高效能的物理分离技术，将它用于分析化学并配合适当的检测手段，就成为色谱分析法。 色谱法的最早应用是用于分离植物色素，其方法是这样的：在一玻璃管中放入碳酸钙，将含有植物色素（植物叶的提取液）的石油醚倒入管中。此时，玻璃管的上端立即出现几种颜色的混合谱带。然后用纯石油醚冲洗，随着石油醚的加入，谱带不断地向下移动，并逐渐分开成几个不同颜色的谱带，继续冲洗就可分别接得各种颜色的色素，并可分别进行鉴定。色谱法也由此而得名。 现在的色谱法早已不局限于色素的分离，其方法也早已得到了极大的发展，但其分离的原理仍然是一样的。我们仍然叫它色谱分析。 一、色谱分离基本原理： 由以上方法可知，在色谱法中存在两相，一相是固定不动的，我们把它叫做固定相；另一相则不断流过固定相，我们把它叫做流动相。 色谱法的分离原理就是利用待分离的各种物质在两相中的分配系数、吸附能力等亲和能力的不同来进行分离的。 使用外力使含有样品的流动相（气体、液体）通过一固定于柱中或平板上、与流动相互不相溶的固定相表面。当流动相中携带的混合物流经固定相时，混合物中的各组分与固定相发生相互作用。 由于混合物中各组分在性质和结构上的差异，与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同，随着流动相的移动，混合物在两相间经过反复多次的分配平衡，使得各组分被固定相保留的时间不同，从而按一定次序由固定相中先后流出。与适当的柱后检测方法结合，实现混合物中各组分的分离与检测。 二、色谱分类方法： 色谱分析法有很多种类，从不同的角度出发可以有不同的分类方法。 从两相的状态分类：
超高效液相色谱-串联质谱法快速测定蔬菜中7种氨基甲酸酯类农药残留 孙涛X,刘河疆,胡开峰,乔昆云,周俊 (新疆农业科学院中心实验室,乌鲁木齐830091) 摘要:采用超高效液相色谱-串联质谱联用(UPLC-MS P MS)技术建立了同时检测蔬菜中7种氨基甲酸酯类农药多残留量的快速检测方法。样品经乙腈提取,氨基固相萃取柱净化,Waters C18超高效液相色谱柱分离,进入电喷雾串联四极杆质谱进行检测,采用多反应监测(MRM)分析,对液质分离条件和样品前处理条件进行了优化。结果表明7种氨基甲酸酯类农药在2~500L g P L范围内线性良好(r\019986)。在01005~0101mg P kg范围内,平均加标回收率在7214%~ 11211%之间;相对标准偏差小于13%。该方法检出限范围为1131~3172L g P L,测定结果满足多残留农残的检测要求。 关键词:多残留量检测;氨基甲酸酯类;固相萃取;蔬菜;超高效液相色谱-串联质谱 中图分类号:O657.63文献标识码:A文章编号:1000-0720(2010)04-087-05 氨基甲酸酯类农药是一类广谱杀虫剂,其在蔬菜中的残留以及对人类健康和环境造成的毒害也越来越为人们所关注[1]。目前报道的检测氨基甲酸酯类农药的方法主要有酶联免疫法和快速酶法[2],气相色谱法(GC)[3,4],气相色谱-质谱法(GC-MS)[5],液相色谱法(HPLC)[6,7],液相色谱-质谱法(HPLC-MS)[1,9~14]等法。超高效液相色谱-串联质谱法由于使用了电喷雾离子源和超惯压液相色谱柱Acquity BE H C18,不仅大大提高了检测灵敏度,同时缩短了样品分析时间。本实验研究了蔬菜中克百威、三羟基克百威、涕灭威、涕灭威砜、涕灭威亚砜、灭多威、甲萘威等7种氨基甲酸酯类农药残留分析的样品前处理方法和UPLC-MS P MS 检测条件,715min完成一次分析。结果表明,本方法简便、灵敏度高,大大提高了蔬菜中多种氨基甲酸酯类农药残留检测工作效率。 1实验部分 1.1仪器与试剂 AC QUI TY UPLC超高效液相色谱仪、Micromass Quattro Premier XE三重四极杆串联质谱仪(美国Waters公司),配有电喷雾离子源(ESI)。高速组织捣碎机(德国IKA公司);旋转浓缩仪(日本EYELA 公司);Mill-i Q超纯水设备(美国Millipore公司);漩涡混合器;固相萃取装置(美国Supelco公司); Waters NH2固相萃取柱(60mg P3mL)。 NaCl(AR,用前120e烘4h);乙酸铵、乙腈、C H2Cl2、甲醇等均为色谱纯;其他试剂均为分析纯,水为超纯水。 1.2标准工作液的配制 将克百威、三羟基克百威、涕灭威、涕灭威砜、涕灭威亚砜、灭多威、甲萘威等标准品(1000mg P L,农业部农业环境监测总站)用甲醇配制成质量浓度为20mg P L的标准储备液,依据需要稀释成适当质量浓度的标准工作液,于4e下保存。 1.3色谱条件 色谱柱:Acquity BE H C18(211mm@50mm, 117L m)。柱温:40e,样品室温度:10e;进样 ) 87 ) X收稿日期:2009-06-17;修订日期:2009-08-20 作者简介:孙涛(1978-),男,实验师;E-mail:suntaotxy@https://www.doczj.com/doc/e315542452.html,
摘要：为探讨气相色谱(gc)在食品(菠菜)中有机磷农药残留的检测应用。用体积比1∶1的环己烷和乙酸乙酯提取样品中的有机磷农药，固相萃取柱净化，采用气相色谱fpd检测器进行检测，得出结果：10种有机磷农药在20 min内分离良好，在5～100 μg/l范围内线性良好，相关系数为0.999 2～0.999 8。结果表明：气相色谱法定量准确、操作简便、灵敏度高，可以应用于食品产品的检测中。 关键词：气相色谱;有机磷;农药残留 有机磷是食品安全中需要控制的农药残留，有机磷种类比较多，其中使用比较多得是敌敌畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、甲拌磷、二嗪磷、乐果、毒死蜱、倍硫磷、马拉硫磷和对硫磷等[1]，在食品上的残留量需要控制在一定范围内才不会对人体健康造成伤害。 1 材料与方法 1.1 仪器与试剂 agilent 7890a气相色谱(安捷伦公司)，甲醇、乙睛和正己烷均为色谱纯。标准品：敌敌畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、甲拌磷、二嗪磷、乐果、毒死蜱、倍硫磷、马拉硫磷和对硫磷，纯度≥96.0%，sigma公司产品。样品为菠菜(购于某超市)。 1.2 方法 1.2.1 提取方法 称取25.0 g样品于150 ml烧杯中，用体积比1∶1的环己烷和乙酸乙酯提取，用匀质机匀浆2 min，过滤于100 ml具塞量筒中，加入5～7 g nacl，剧烈震荡1 min后静置约30 min，使其分层，而后吸取10 ml上清液于固相萃取柱净化，收集净化液，利用氮气在70 ℃水浴下将其吹至近干后，用5 ml正己烷分次溶解提取物，经有机滤膜过滤后，用于气相色谱分析[2]。 1.2.2 色谱条件 色谱柱：hp-5毛细柱，30 m×320 μm×0.25 μm;升温程序：80 ℃保持1 min，以25 ℃/min升至200 ℃，保持8 min，再以30 ℃/min升至260 ℃，保持10 min;进样口温度240 ℃，检测器温度240 ℃，进样量为1 μl，不分流进样[3]。 1.2.3 有机磷标准系列溶液 分别量取1 μg/ml有机磷混合标准储备5、10、20、40、80 μl和100 μl到1 ml容量瓶中，用正己烷溶液定容，得到浓度为5、10、20、40、80 ng/ml和100 ng/ml的有机磷标准工作液，以含量为横坐标、峰面积为纵坐标绘制工作曲线[4]。 2 结果 2.1 磺胺类药物标准曲线及线性相关系数 按照1.2.3进行配制，并按照1.2.2色谱条件进行分析，10种有机磷在5～100 μg/l 时具有良好的线性关系，相关系数(r)为0.999 2～0.999 8。其中敌敌畏：y=370.64x+63.48，r=0.999 4;甲胺磷：y=90.21x+121.25，r=0.999 6;乙酰甲胺磷：y=132.31x+245.71，r=0.999 3;甲拌磷：y=106.27x+66.25，r=0.999 8;二嗪磷：y=79.647x+40.60，r=0.999 8;乐果：y=29.41x+38.02，r=0.999 2;毒死蜱：y=21.14x+28.76，r=0.999 5;倍硫磷：y=66.99x+13.83， r=0.999 7;马拉硫磷：y=44.49x+10.43，r=0.999 2;对硫磷：y=89.48x+10.88，r=0.999 5。 2.2 牛奶中磺胺类药物的含量 依据1.2.1样品处理过程对样品进行处理，经0.22 μm滤膜过滤，上机测试。样品得到的10种敌敌畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、甲拌磷、二嗪磷、乐果、毒死蜱、倍硫磷、马拉硫磷和对硫磷有机磷均没有检测到。 3 结论
目录 摘要 (2) Abstract (2) 引言.......................... . (3) 1 有机磷农药及其检测方法 (3) 1.1 有机磷农药的基本概况 (3) 1.2 有机磷农药残留的检测方法 (5) 1.3四种有机磷农药简介 (7) 2 样品采集与预处理 (9) 2.1 实验仪器和材料 (9) 2.2 样品的来源与采集 (10) 2.3 样品预处理 (10) 3 四种有机磷农药标准样品的色谱分离 (11) 3.1 流动相比例、流动相pH和流速的选择 (11) 3.2 四种有机磷农药标准样品的色谱图 (11) 3.3 方法学考察 (13) 4 西瓜样品中有机磷农药残留的测定与分析 (15) 4.1 色谱条件 (16) 4.2 测试样品 (16) 4.3 计算四种有机磷农药残留的方法 (17) 4.4 两种西瓜样品的检测结果分析 (17) 5 结论 (17) 致谢 (18) 参考文献 (18)
高效液相色谱法检测西瓜中四种有机磷农药残留 摘要：本文结合高效液相色谱法对青岛市城阳区大润发中销售的西瓜中有机磷农药残留是否超标进行了检测，并结合有机磷农药的结构特点以及性质建立了一种在高效液相色谱法的基础上能够检测四种有机磷农药残留的方法。 关键词：西瓜；检测；农药 Checking out the Four Kinds Of Organic Phosphorus Pesticide Residues In Watermelon By HPLC Abstract ：In this paper，combined with HPLC method，researched the watermelon of RT-mart supermarket in Chengyang District of Qingdao City. And it established a method combined with the structure characteristics and properties of organophosphorus pesticide to check out four kinds of pesticides. Key words：Watermelon ;Detection; Pesticide 引言青岛市最近发生了毒西瓜事件，以青岛市胶州市和即墨市为主要城市，共有12个人吃了西瓜后，出现头晕、呕吐等症状，经有关部门鉴定该种西瓜名叫“黑美人”，其中含有农药残留涕灭威，涕灭威是一种有机磷农药。如果食用含有涕灭威超标的食物会使人产生恶心等症状，重者会使人昏迷，甚至死亡。尽管城阳地区还没发生西瓜中有机磷农药超标的事件，但已经引起该地区的人恐慌了，所以研究出一种能够检测西瓜中有机磷农药的现实可行的方法是十分重要的。这是本论文的出发点，所以文对青岛市城阳区大润发所售西瓜中有机磷农药残留进行分析，结合HPLC的原理研究出了能够检测西瓜四种有机磷农药残留的方法。另外，现在基本上没有对青岛市城阳区大润发所售西瓜中有机磷农药残留的研究。所以在有机磷残留方面，本论文对青岛市城阳区大润发所售西瓜的质量评价有很重要的作用。 在我国，检测和分析食品中的有机磷农药残留的方法一般都采用气相色谱法。当用气相色谱法检测物质的含量时，尽管在灵敏度方面要优于液相色谱
华南师范大学实验报告 学生姓名学号： 专业：化学师范年级、班级：09级化四 课程名称：近代有机分析方法和实验实验时间：2011年11月9日 实验六：高效液相色谱法用于有机农药残留的分离和分析 【实验目的】 1、应用高效液相色谱法对磺胺类抗生素的定性和定量检测 2、学习谱图和数据的处理方法 【实验原理】 磺胺族抗生素包括磺胺嘧啶，磺胺二甲嘧啶，磺胺甲噁唑，等, 被广泛应用到水产、畜禽类养殖中。它们被添加到动物饲料中, 以促进动物的生长以及防治各种疾病, 如果不能严格控制停药期, 很容易造成在动物肉和组织中残留, 给人体健康带来危害, 因此世界各国对畜禽肉中的磺胺族残留都有严格的限量要求。GB/T 5009.116- 2003 用液相色谱法检测畜禽肉中的磺胺类药物残留量, 操作简单快速,但是该方法灵敏度比较低。 【实验仪器与试剂】 仪器：岛津液相色谱仪，SPD-20A检测器，LC-20AT泵，微量进样器，C18色谱柱 试剂：磺胺嘧啶标准溶液，磺胺吡啶标准溶液，磺胺嘧啶-磺胺吡啶混合液（1：1），乙腈（AR），0.05%甲酸溶液 样品部分物理参数：
【实验步骤】 1、准备 1.1准备所需的流动相，用合适的0.45μm滤膜过滤，超声脱气20min。（这里用的是流 动相是乙腈(B)和0.05%甲酸溶液(A)，分别用有机相系和水相系的0.45μm滤膜过滤，超声脱气20min。） 1.2根据待检样品的需要更换合适的洗脱柱（注意方向）和定量环。 1.3配制样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制），用合适的0.45μm滤膜过滤。（即 分别称取0.10g的磺胺嘧啶、磺胺吡啶用甲醇定容至100.0 mL，用0.45μm滤膜过滤（先在一次性注射器加上0.45μm滤膜，然后把活塞杆拉出来，把要过滤的溶液倒进去再把杆推进滤出溶液。）得到磺胺嘧啶和磺胺吡啶的标准液分别为1 mg/mL（1000ppm）。分别吸取磺胺嘧啶和磺胺吡啶标准溶液各5mL，置于10 mL容量瓶中磺胺吡啶和磺胺嘧啶-磺胺吡啶混合0.5 mg/mL（500ppm）。 1.4检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。 2、开机 接通电源，依次开启不间断电源、B泵、A泵、检测器，待泵和检测器自检结束后，打开打印机、电脑显示器、主机，最后打开色谱工作站（即电脑桌面上的CS-Light Real Time Analysis）。
有机磷农药残留的危害及检测方法 姓名：梅增健学号：201008011053 班级：10生工一班 摘要：近年来由于农药的大量使用致使食品的农药残留问题倍受关注，提高农药残留分析检测技术是解决农药残留问题的重要手段。在农药残留检测中样品前处理技术又是检测过程中耗时最长，最容易出现误差的步骤。因而，发展样品前处理技术能提高农药残留检测的效率和准确率。本文综述了近年来食品中农药有机磷残留分析中超临界流体萃取法、固相萃取、固相微萃取和凝胶渗透色谱几种样品前处理技术。 关键词：农药残留；有机磷农药残留；检测；危害 正文： 一、有机磷类农药的危害及特性： 有机磷类农药自问世到现在已有70 年的历史。因为高效、快速、广谱等特点, 有机磷类农药一直在农药中占有很重要的位置, 对世界农业的发展起了很重要的作用。我国已生产和使用的有机磷类农药达数10种之多,其中最常用的有敌百虫、敌敌畏、乐果、马拉硫磷等。但随着这些有机磷类农药的广泛被使用, 暴露出了很多问题,如高残留、毒性强等,尤其在环保意识日益增强的今天,其暴露的问题也引起了人们的高度重视。部分非持久有机磷类农药在某些环境条件下也会有较长的残留期, 并在动物体内产生蓄积。如马拉硫磷是一种高选择性有机磷类农药,在环境中的残留不容忽视,水体中已有检出。马拉硫磷对水生生物属高毒农药, 对人免疫功能也具有一定的毒性作用, 已成为水环境中重要的监测项目。大多数有机磷类农药都属于磷酸酯类或硫代磷酸酯类化合物,其中有机磷酸脂类化合物纯品多为油状,少数为结晶固体。常用剂型有乳剂、油剂、粉剂及颗粒剂等。有机磷类农药的中毒特征是血液中胆碱酯酶活性下降, 胆碱酯酶的活性受到抑制,导致神经系统机能失调，从而使一些受神经系统支配的脏器,如心脏、支气管、肠、胃等发生功能异常。 二、有机磷农药的检测前处理 1、超临界萃取技术 所谓超临界是物质的一种特殊流体状态：当气液平衡的物质升温升压时，热膨胀会引起液体密度减少，压力升高又会使气相密度变大，当温度和压力达到某一点时，气液两相界面消失成一均相体系，此点即为临界点；当物质的温度和压力高于临界点时，就处于超临界状态，此时该物质为超临界流体。超临界萃取技术(supercritical fluid extraction，SFE)是用超临界液体作为萃取剂，根据样品中组分在不同压力和温度条件下溶解能力变化的性质，通过改变萃取剂流体的压力，从而将不同组分萃取出来。 等流体代替有机溶剂，对人体无害、绿色环保，且SFE最大优点是使用CO 2 有效地防止了热敏性物质的氧化和逸散，提高了样品回收率，因而较适合于萃取热不稳定物质和有毒化合物[1]。D.H.Kim等[2]已将SFE用于萃取面粉里的有机磷残留，避免了样品浓缩和分析过程的干扰，提高了萃取速度，60min有7g的样品萃取量，且联用GC-NPD分析后，检测限低至10ng/s。
食品中有机磷农药检测方法综述 姓名：刘汇芳 食品中有机磷农药检测方法综述 摘要: 有机磷农药作为一类高效、广谱的杀虫剂、除草剂等正被广泛地用于农业生产中, 但其大量使用后对人、动物和环境产生的危害也日益严重。由于近些年来食品安全问题已经引起了越来越多人的关注, 对食品中有机磷农药残留的检测研究已经引起了包括我国在内的世界各国的重视。在总结前人工作的基础上对食品中有机磷农药常用的检测方法做
一综述。 关键词: 有机磷; 检测; 色谱法; 酶抑制法; 酶联免疫吸附分析 ( ELISA) 有机磷农药(OPs)作为一类高效、广谱的杀虫剂、除草剂等正被广泛地用于农业, 但大量使用后对人、动物和环境产生的危害也日益严重。农药残留通过食物链作用在人体累积而引起的致畸、致癌、致突变危害，如农药的急慢性中毒，特别是果蔬食品污染后引发的群体（如家畜、人）中毒事件屡有发生。。为此, 世界各国投入大量资金、人力和物力, 一方面加强无公害绿色农药的研制开发和应用; 另一方面,制定愈来愈严格的农药残留限量标准来控制食品的质量, 使食品的安全性得到提高。 GB5127- 1998 食品中敌敌畏、乐果、马拉硫磷、对硫磷最大残留限量卫生标准规定: 原粮中敌敌畏≤0.1 mg/kg、乐果≤0.05 mg/kg、马拉硫磷≤8 mg/kg、对硫磷≤0.1 mg/kg, 果蔬中敌敌畏≤0.2 mg/kg、乐果≤1.0 mg/kg, 其余两种不得检出。 加强对有机磷农药检测方法的研究, 特别是快速、灵敏、准确、简便的检测方法, 对保护生态环境, 保障人类健康有着重要意义, 在这方面前人作了大量的工作, 因此在总结前人工作的基础上对常见的有机磷农药检测的研究情况作一综述”。 根据有机磷农药的物理化学及生物学特性, 对其检测的常用方法有: 即波谱法、色谱法和酶抑制法,免疫法等。 1 波谱法 该方法是根据OPs中某些官能团或水解、还原产物与特殊的显色剂在一定的条件下，发生氧化、磺酸化、酯化、络合等化学反应，产生特定波长的颜色反应来进行定性或定量（限量）测定。检限在μg级水平，见表1。 表1 各种显色反应类型及灵敏度 显色反应类型颜色灵敏度OPs类别 二氯化钯法黄色5-10μg 含硫OPs 偶氮法橙红色5-10μg 含硝基苯OPs 间·苯二酚法红色1-5μg 含氯OPs 靛蓝法蓝色1-5μg 含对硝基苯OPs 亚硝酰铁氰化钠法紫红色1-10μg 含硫—磷键OPs 表1反映的是微量化学试验法，主要用于商品农药的鉴别试验，灵敏度不高，试验干扰因素多，含不同基团的OPs的反应也不一样，易出现假阴性。为提高灵敏度，用分光光度计等来测定OPs的方法（即波谱法）逐渐代替了微量化学试验。AOAC规定了用红外光谱法检测敌敌畏，保棉磷，甲拌磷，用分光光度法检测马拉硫磷，对硫磷等。Rasulian M.对果蔬样品中的OPs 就采用分光光度法，检出限量小于1μg，回收率为94%。Garcia Sanchez E用分光荧光光度法测定土壤中的OPs检出限为0.01μg，而Raju J.改进了OPs的萃取方法，用分光光度法测定六种OPs，检出限达到ng级。 但波谱法一次只能测定一种或相同基团的一类OPs，且灵敏度不高，一般只能作为鉴别方法粗选，对含有各种不同OPs残留的样品，呈阳性的样品还需用其它检测方法来进行确证试验。 2 色谱法 2.1 薄层色谱法（TLC） TLC法是一种较成熟的、应用也较广的微量快速检测方法，先用适宜的溶剂提取OPs，经纯化浓缩后，在薄层硅胶板上分离展开，显色后与标准OPs比较Rf值进行定性测定，用薄层扫描仪进行定量测定，检出限达0.1~0.01μg。由于样品中农残成份复杂，OPs含量较低，为此，国内外针对该方法的不同实验步骤，如提取方法，纯化，浓缩方法，薄层板的吸附剂种类，展开剂的配制，展开方式（如单向和双向展开）以及显色方法都作了深入的研究和改进。Sherma J.用C18柱固相
液相色谱—质谱联用来进行物质分离的实验 一、实验目的 1.了解液相色谱—质谱联用的基本原理； 2.掌握液相色谱—质谱联用时的操作步骤及实验方法； 3.学习分析色谱图和质谱图。 二、实验原理 利用不同的物质在固定相和流动相中具有不同的分配系数，当两相作相对位移时，使这些物质在两相间进行反复多次分配， 使得原来微小的分配差异产生明显的分离效果，从而依先后次 序流出色谱柱，以此来达到分离多种物质的目的。然后依次流 出的物质进入质谱中被打碎成为各种离子而被检测到。以此达 到分离的目的。 三、实验仪器和材料 高效液相色谱仪及质谱仪（见下图）、甲醇、水、TADB（相对分子量516）、TAIW（相对分子量336）、色谱柱
四、实验步骤 1.将待分离的两种物质的混合物配成溶液加入到2号样瓶中去； 2.启动联机软件，在四元泵模块的空白处右键单击，在弹出的 “方法”选项中编辑好流动相和流速，点击确定，以使体系过 渡到目标状态，直到压力稳定为止； 3.进入“方法”菜单，“编辑完整方法菜单”，按照“方法参考”进行编 辑（“方法参考”中的参数编辑完成后继续进行编辑，编辑质 谱的相关参数：选择正负极及电压等），编辑完成后再次进 入“方法菜单”，选择“方法另存为”命名后点击“确定”进入“序列” 菜单，“序列表菜单”，然后编辑样品瓶位置为1号、样品名称、 使用方法、进样次数、数据文件、进样量，确定后再次进入 “序列菜单”的“序列参数”菜单，再选择文件夹，确定； 4.方法编辑完成且压力稳定后，点击进样器左上方的“序列/开 始序列”按钮，进行测试，等待测试完毕，点击停止按钮。 然后进入“脱机”软件，查看积分测试报告。 五、实验结果及分析 实验时的液相色谱条件统一为：70%的甲醇，流速0.4ml/min，进样量1ul，波长230nm，测试时间15min。在正极性条件下：
第8章土壤中有机磷农药的测定 8.1概述 长期以来，大面积使用化学农药严重破坏环境和生态，而我国化学农药的使用量是世界平均用量的2.5倍，高毒农药使用量占我国农药使用量的30%[1]。 有机磷农药是上世纪三十年代德国G.Schradev首先发现的，有机磷农药是作为取代有机氯农药而发展起来的新型农药，这种农药较有机氯农药容易降解，对自然环境的污染和生态系统的危害、残留没有有机氯农药普遍和持久。但事实上，有机磷农药并不是理想高效、低毒、低残留农药，其在环境中的残留也不容忽视[2]，并在动物体内富集[3]。 有机磷农药一般为硫代磷酸酯类或磷酸酯类化合物，大多呈结晶状或油状，工业品呈棕色或淡黄色，除敌敌畏和敌百虫之外，大多有蒜臭味。这类农药除敌百虫、磷胺、甲胺磷、乙酰甲胺磷等易溶于水，其它不溶于水，易溶于有机溶剂如苯、丙酮、乙醚、三氯甲烷及油类。有机磷农药分子结构一般具有容易断裂的化学键，在酸性和中性溶液中较稳定，遇碱易分解破坏，对光、热、氧均较稳定，略具挥发性，遇高热可异构化，加热遇碱可以加速分解。 有机磷农药是一种神经毒物，作用机制是抑制生物体内的乙酰胆碱酯酶，引起神经系统紊乱，并造成中毒。另外，有机磷农药迟发性毒性还会对生殖系统造成损害。 印度北部Kanpur市，地表水中马拉硫磷含量达2.618mg/L，地下水含量高达29.835mg/L[4]。 近年来，我国农药工业迅速发展，农药年产量居世界第二位。其中，有机磷农药产量占全世界总量的1/3，占全国农药总量的50%以上[5]。 我国近年来用量最大的农药主要是甲拌磷、特丁硫磷、甲胺膦、氧乐果、丙溴磷、乐果、水胺硫磷、杀螟硫磷、辛硫磷、异稻瘟净、马拉硫磷、乙酰甲胺磷、甲基毒死蜱、毒死蜱、三唑磷、敌百虫、敌敌畏、草甘膦等有机磷农药产品年产量约占我国有机磷类农药总产量的90%以上[6]。 8.2相关环保标准和工作需要 8.2.1 国内相关标准 目前我国的各类环境质量标准和污染物排放标准中，除了危险废物毒性标准中有四种有机磷的排放限值，还没有土壤和沉积物中有机磷的相关质量和排放标准，详见表1。 表1 有机磷相关环境质量或排放标准 环境质量或排放标准标准号排放限值浓度单位 土壤环境质量标准GB15618-1995 无相关排放标准 危险废物毒性标准浸出毒性鉴别GB5085.3-2007 乐 果 对硫 磷 甲基对 硫磷 马拉硫磷浸出液 8 0.3 0.2 5.0 mg/L 生活垃圾填埋污染控 制标准 GB16889-2008 无相关排放标准展览馆用地土壤环境 质量标准 HJ350-2007 无相关排放标准
液相色谱-质谱联用技术（LC-MS）的各种模式探索 一、实验目的 1、了解LC-MS的主要构造和基本原理； 2、学习LC-MS的基本操作方法； 3、掌握LC-MS的六种操作模式的特点及应用。 二、实验原理 1、液质基本原理及模式介绍 液相色谱-质谱法（Liquid Chromatography/Mass Spectrometry，LC-MS）将应用范围极广的分离方法——液相色谱法与灵敏、专属、能提供分子量和结构信息的质谱法结合起来，必然成为一种重要的现代分离分析技术。 但是，LC是液相分离技术，而MS是在真空条件下工作的方法，因而难以相互匹配。LC-MS经过了约30年的发展，直至采用了大气压离子化技术（Atmospheric pressure ionization，API）之后，才发展成为可常规应用的重要分离分析方法。现在，在生物、医药、化工、农业和环境等各个领域中均得到了广泛的应用，在组合化学、蛋白质组学和代谢组学的研究工作中，LC-MS 已经成为最重要研究方法之一。 质谱仪作为整套仪器中最重要的部分，其常规分析模式有全扫描模式（Scan）、选择离子监测模式（SIM）。 （一）全扫描模式方式（Scan）：最常用的扫描方式之一，扫描的质量范围覆盖被测化合物的分子离子和碎片离子的质量，得到的是化合物的全谱，可以用来进行谱库检索，一般用于未知化合物的定性分析。实例：（Q1 = 100-259m/z） （二）选择离子监测模式（Selective Ion Monitoring，SIM）：不是连续扫描某一质量范围，而是跳跃式地扫描某几个选定的质量，得到的不是化合物的全谱。主要用于目标化合物检测和复杂混合物中杂质的定量分析。实例：（Q1 = 259m/z） 本实验采用三重四极杆质谱仪（Q1：质量分析器；Q2：碰撞活化室；Q3：
附件：技术参数 一、超高效液相色谱-四极杆飞行时间高分辨质谱联用仪 1.应用范围： 系统主要用于有机化合物的定性和定量分析。可分别通过多目标未知物筛查流程、完全未知物筛查流程等来开展未知物的发现和鉴定工作；还可以开展药物代谢、代谢物鉴定和代谢组学研究等。 2.工作环境条件： 2.1 电源：230Vac，±10%，50/60Hz，30A。 2.2 环境温度：15 ~ 26?C。 2.3 相对湿度：20 ~ 80%。 3.总体要求： 3.1 该系统基本组成包括超高效液相色谱部分和具有超高灵敏度、超快扫描速度的落地式高频四极杆-飞行时间串联质谱仪部分。仪器由计算机控制、配有独立的ESI和APCI离子源。软件包括仪器调节、数据采集、数据处理、定量分析和报告。 3.2 仪器灵敏度要高，性能稳定，重复性好。 3.3 国际知名质谱公司（10年以上商品化四极杆-飞行时间质谱生产经验）推出的主流产品，产品全部为原装进口，其性能达到或超过以下要求。 4. 质谱性能指标： 4.1 离子源：配有电喷雾离子源（ESI）、大气压化学电离源（APCI），离子源切换方便、快速，清洗、维护方便。
4.1.1 插拔式可互换ESI及APCI喷针，可实现ESI源及APCI源的快速更换。 4.1.2 大气压离子源采用锥孔结构，使用气帘气技术，而无毛细管（半径<1mm）设计装置，以同时保持高灵敏度和优异的抗污染能力。（要求提供接口结构图） 4.1.3 电喷雾离子源流速范围：在确保灵敏度不损失的前提下，实现高流速，无需分流，即可达到3ml/min；加快样品的分析速度同时，还可避免分流对样品造成损失。 4.1.4 大气压化学电离源流速范围：在确保灵敏度不损失的前提下，实现高流速，无需分流，即可达到3ml/min；加快样品的分析速度同时，还可避免分流对样品造成损失。 4.1.5 脱溶剂能力：离子源内采用辅助气体加热，气体最高温度可达700℃，确保最佳的离子化效率。（要求提供硬件结构图和软件界面截图作为证明文件） 4.1.6 离子源内废气排放：有主动废气排放装置，防止气体在密闭的离子源腔体中的回流，降低离子源的记忆效应和污染，降低机械泵的负荷延长机械泵泵油使用时间，维护试验环境，保障工作人员健康。 4.1.7 Q0聚焦技术：离子引入部分拥有高压离子聚焦技术，压力至少达7.5mtorr，以确保最佳的离子聚焦效果和离子传输效率，有效消除“记忆效应”和“交叉污染”。 4.1.8 校正方式：外置CDS辅助校正。 4.2 质量分析器：落地式四极杆-飞行时间串联质谱。
有机磷农药快速检测方法研究进展论文导读：酶抑制法是研究最多且相对成熟的一种对部分残留农药进行快速检测的技术。利用有机磷农药可特异性的制昆虫中枢和周围神经系统中乙酰胆碱酯酶的活性，破坏神经的正常传导，使昆虫中毒致死的原理进行检测。关键词：有机磷农药，快速检测 有机磷农药能有效地控制害虫、杂草及细菌的生长，提高农业产量。但农药中有些物质在一定环境条件下能长时间保持其毒活性，若长时间摄取残留农药则会影响人类的健康。残留农药在人体内不断累积，能引起各种严重疾病[1]。因此，研制出有机磷农药快速、可靠、灵敏和实用的农药残留分析方法，使其不受时间、地点、场合等条件限制，有利于及时发现问题，采取措施，控制高残留农药蔬菜的摄入，降低农药中毒发生率，保障消费者的食品安全。 1.气相色谱法 1.1 气相色谱技术 气相色谱法(GC)是一类分离分析方法，它是根据分析物质在固定相和流动相之间的分配系数的不同达到分离目的，并将分析物质的浓度转换成易被测量的电信号，然后送到记录仪记录下来的方法。GC法的分析对象是气体和可挥发物质，其优点是分离效能高、选择性高、分析速度快。目前，GC法已由过去以填充柱为主转到以毛细管为主。但是，对于沸点高和热稳定性差的农药，GC法不能进行分离检测，需先进行衍生化法处理后再进行GC分析检测。 1.2 气相色谱现状
气相色谱法是检测有机磷的国家标准方法，检出限为1 ng，具有既能定性又能定量、准确、灵敏度高，且一次可测定多种成分等优点。其主要通过相对保留值来定型，通过峰高与峰面积并采用内标法和外标法来定量。曲丽萍、张晓波[2～3]等分别对大米样品和小麦样品中残留的有机磷农药，通过较为简便的提取方法和实用有效地净化处理，用毛细管柱气相色谱法进行测定，方法所需时间短、干扰小、准确可靠、易于操作、回收率和检出限均能满足大米、小麦样品中残留农药检测的需要。刘永波[4]等采用选择离子—气相色谱—质谱联用(SM-GC-MS)方式，依据保留时间和特征离子峰度比，对农药进行确证，此方法可在36min之内检测有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯等48种农药,并可同时定性和定量，对蔬菜、水果等多种农产品进行检测。尽管色谱法灵敏且准确，但需要对样品进行前处理，成本高，而且所需仪器昂贵而笨重，需要专业人员维护，不适合在线检测。2.酶抑制法 酶抑制法是研究最多且相对成熟的一种对部分残留农药进行快速检测的技术。利用有机磷农药可特异性的制昆虫中枢和周围神经系统中乙酰胆碱酯酶的活性，破坏神经的正常传导，使昆虫中毒致死的原理进行检测。 2.1 电化学法 电化学方法对有机磷的检测一般有两种传感器。一种是胆碱酯酶电化学生物传感器。常用的又有单酶传感器和双酶传感器。单酶传感器是将乙酰胆碱酯酶(AChE)固定在电极表面，酶催化底物乙酰或丁酰巯基