世界知名工业品牌 1．可编程控制器（PLC）： 日本：欧姆龙OMRON、松下电工NAIS、三菱MITSUBISHI、富士FUJI、美国：AB、GE、Modicon 德国：西门子SIEMENS、金钟-默勒MOELLER、韩国LG。 2．低压电器及配电产品：法国：施耐德TE、梅兰日兰MERLIN GERIN 、方块D SQUARE D、溯高美SOCOMEC、台湾：士林SHIHLIN 德国：默勒MOELLER 、F&G、西门子SIEMENS、海格HAGER、日本：富士FUJI、三菱MITSUBISHI、ABB 美国：AB、LK ATS电源转换装置、韩国LG。 3．自控器件与传感元件： 日本：欧姆龙OMRON、松下电工NAIS、和泉IDEC、富士FUJI、山武YAMATAKE、三菱MITSUBISHI 神视SUNX、理化RKC、法国：施耐德TE、 德国：施克电子SICK、倍加福P+F、图尔克TURCK、巴鲁夫BALLUFF 爱福门IFM、美国：AB、霍尼韦尔HONEYWELL、 德国：西门子SIEMENS、金钟-默勒MOELLER、F＆G 台湾：士林SHIHLIN、松菱CKC、马可MACK。 4．变频调速器（VVVF）： 日本：松下电工NAIS、三菱MITSUBISHI、安川YASKAWA、三肯
SANKEN、富士FUJI、欧姆龙OMRON 松下电器PANASONIC、法国：施耐德TE、 德国：西门子SIEMENS，丹麦：丹佛斯DANFOSS、瑞典：ABB 英国：CT、美国：AB、韩国：LG、深圳：华为， 台湾：台达DELTA。 5．伺服控制系统： 日本：松下电器PANASONIC、三菱MITSUBISHI、安川YASKAWA、英国：CT。 6．开关电源、UPS电源：台湾：明纬电源MW、日本：欧姆龙OMRON、 德国：西门子SIEMENS、梅兰日兰MG、山特。 7．触摸屏： 日本：欧姆龙OMRON、DIGITAL、松下电工NAIS、台湾：台达DELTA、HITECH、EasyView500。 8．液压气动： 日本：SMC、CKD、 美国：PARKER、ASCO、 德国：宝得BURKERT、费斯托FESTO、英国：HERION。 9．仪器仪表：德国：E+H、 美国：HONEYWELL、山武YAMATAKE、森纳士Senex。
中国著名作家简介 中国现代、当代作家 鲁迅（1881-1936）原名周树人，浙江绍兴人，我国现代伟大的文学家、思想家和革命家。1918年第一次以“鲁迅”为笔名发表中国现代文学史每一篇白话小说《狂人日记》，随后连续发表《孔乙已》《药》《阿Q正传》，成功地塑造了阿Q这一典型形象，成为具有世界影响的不朽名著。1923年集成小说集《呐喊》，为革命现实主义的新小说奠定了基础，其后又发表了《祝福》等著名小说和《藤野先生》《范爱农》《野草》等著名散文。“四?一二”大屠杀后，定居上海，专门从事写作，成为坚定的无产阶级战士，先后主编刊物和写作杂文《记念刘和珍君》《“友邦惊诧”论》等，此外还翻译果戈里、法捷耶夫等外国作家的作品。他是现代世界文坛最有成就的作家之一，建国后出版《鲁迅全集》二十卷。（1）作品集简况： ①小说集两部：《呐喊》（1918-1922）；《彷徨》（1924-1926） ②历史小说集一部：《故事新篇》（1922-1935） ③散文集一部：《朝花夕拾》（1928，原名《旧事重提》） ④散文诗集一部：《野草》（1927） ⑤杂文集十六部： 《热风》《坟》《华盖集》《华盖集续编》（1926）《而已集》（1927）《三闲集》《二心集》（1930）《南腔北调集》（1922-1933）《伪自由书》《准风月谈》《花边文学》《且介亭杂文》（1934-1936）《且介亭杂文二集》《且介亭杂文末编》《集外集》《集外集拾遗》 ⑥翻译了俄国作家果戈里的《死魂灵》，原苏联作家法捷耶夫的《毁灭》等作品。 （2）鲁迅小说集所收作品 ①《呐喊》：《狂人日记》《孔乙己》《药》《明天》《一件小事》《头发的故事》《风波》《故乡》《阿Q正传》《端午节》《白光》《免和猫》《鸭的喜剧》《社戏》。 ②《彷徨》：《祝福》《在酒楼上》《幸福的家庭》《肥皂》《长明灯》《示众》《高老夫子》《孤独者》《伤逝》《涓生、子君》《弟兄》《离婚》。 ③《故事新编》：《序言》《补天》《奔月》《理水》《采薇》《铸剑》《出关》《非攻》《起死》《怀旧》。 周作人(1884-1967)浙江绍兴人，现代散文家。“文学研究会”发起人之一，“五四”运动时期提倡“人的文学”，三十年代和林语堂一起鼓吹“闲适幽默”小品，抗战时期曾任伪职，著有《自己的园地》及《中国新文学的源流》等。 柳亚子（1887-1958）江苏吴江人，现代著名诗人。工于旧诗，尤长于七言，诗词具有爱国精神，著有《磨剑室诗集、词集、文集》。 胡适（1891-1962）安徽绩溪人，现代文学家、学者。首先在《新青年》杂志上发表《文学改良刍议》，提倡白话，揭开了“五四”文学革命运动的序幕；发表新诗集《尝试集》。对“五四”运动有一定贡献。主要作品有《胡适文存》等。 郭沫若（1892-1978）我国现代杰出作家、诗人、历史学家、剧作家、考古学家、古文字学家、社会活动家。原名郭开贞，笔名沫若，一署郭鼎堂。四川乐山人，1918年开始新诗创作。1921年与郁达夫、成仿吾等组织“创造社“，并出版了第一本诗集《女神》。抗日战争时期，创作了《屈原》《虎符》《棠棣之花》等历史剧。解放后，发表了《蔡文姬》等戏剧，著有《奴隶制时代》等书，他是我国新诗的奠基人，是继鲁迅之后革命文化界公认的领袖。叶圣陶（1894-1988）我国现代著名作家、教育家、出版家、社会活动家，中央文史研究馆馆长。原名叶绍钧，江苏苏州人。他编过《小说月报》和《中学生》等刊物，1921年，他
食品生物技术课程论文原生质体细胞融合技术
原生质体细胞融合技术 摘要：细胞融合技术作为细胞工程的一项核心基础技术己在农业、医药、环保等领域得到了迅速发展和应用。综述了细胞融合技术中的常用方法:细胞融合仙台病毒诱导法、细胞融合PEG（聚乙二醇)诱导法、细胞融合电场诱导法、细胞融合激光诱导法;以及最新研究进展:基于微流控芯片的细胞融合技术、高通量细胞融合芯片、空间细胞融合技术、离子束细胞融合技术、非对称细胞融合技术等，并对它们的优缺进行简要的评述。 关键词：原生质体细胞融合技术影响因素融合方法发展 正文： 原生质体融合也称细胞杂交、细胞融合或体细胞杂交，是指细胞通过介导和培养，在离体条件下用人工方法将不同种的细胞通过无性方式融合成一个核或多核的杂合细胞的过程。利用现代科学技术，把来自于不同种生物的单个细胞融合成一个细胞，这个新细胞得到了来自两个细胞的遗传物质，具有新的遗传或生物特性。原生质体融合技术起源于20世纪60年代。1960年法国的Karski研究小组在两种不同类型的动物细胞混合培养中发现了自发融合现象。1974年匈牙利的Ferenczy 等采用离心力诱导的方法，报道了白地霉营养缺陷型突变株的原生质体融合，从而使原生质体融合技术成为微生物育种的一项新技术，并从微生物种内融合扩展到界间的融合。目前，通过原生质体融合进行体细胞杂交已成为细胞工程研究的重要内容之一。细胞融合核技术不仅为核质相互关系、基因调控、遗传互补、肿瘤发生、基因定位、衰老控制等理念领域的研究提供了有力的手段，而且在遗传学、动植物远缘杂交育种、发生生物学、免疫医学以及医药、食品、农业等方而都有广泛的应用价值。特别是在单克隆抗体的制备、哺乳动物的克隆以及抗癌疫苗的研发等技术中细胞融合技术已成为关键技术。 1 原生质体融合技术 微生物原生质体融合技术的整个过程包括:原生质体的制备，原生质体融合，原生质体再生。 1. 1 原生质体制备与再生过程中的影响因素 制备原生质体的最大障碍就是细胞壁，现在去除细胞壁的主要方法是使用酶法，使用的酶主要为蜗牛酶或溶菌酶，具体根据所用微生物的种类而定。影响原生质体制备的因素很多，不同的微生物有其较为适当的形成条件。在菌龄选择上，多采用对数生长中后期的细菌，这主要是由于对数生长期细菌的细胞壁中肤聚糖含量最低，细胞壁对酶的作用最敏感。对双亲灭活米曲霉进行原生质体制备的过程中，用纤维素酶、溶壁酶、蜗牛酶混合浓度比为5:3: 1的酶液混合使用能提高去壁效果。使用微生物产生的酶复合物或商品酶的混合液比单独使用
根据谢华锟先生《影像测量仪发展与点评》的论文整理！ 下面几款测量仪器品牌中，你使用，熟悉或者听闻的有哪些？！ 回复品牌序号，参与本次调查，并提出你宝贵的意见和建议。将有机会赢的我们纪念品！ 1、蔡司（德国品牌） 德国蔡司公司是工业测量领域的著名企业, 具有丰富的产品线, 其CMM 更曾是高端CMM 的代名词。蔡司旗下最有代表性的影像测量仪产品为OINSPECT。O-INSPECT 采用固定桥式结构, 产品美观、稳重, 具备影像式测头和接触式测头两种检测手段。 2、三丰（日本品牌） 日本三丰公司作为世界著名的精密测量仪器制造商, 其影像测量仪产品线广、型号齐全, 为其代表性产品QV- ELF202PRO。该产品采用固定桥式结构, 产品外观稳重、大气。 3、天准（中国品牌） 天准中国苏州的天准精密技术有限公司多年来专注于精密测量仪器的研发, 是中国技术领先的影像测量仪品牌, 两项国家校准规范的起草单位。其代表性产品VMU322 具有测量精度高、测量速度快、功能丰富等优点。 4、海克斯康（瑞士品牌） 海克斯康瑞典的海克斯康是全球知名的长度测量仪器厂商, 2010 年初推出了Optive 系列影像测量仪, 其中的Performance222 是其代表性产品。该产品源自Mahr 技术, 采用立柱式结构, 结构稳定、精度高,是一款优秀的影像测量仪产品。 5、OGP（美国品牌） OGP美国OGP 公司一直致力于影像测量仪产品的开发、生产与销售, 拥有影像测量仪的多项核心技术, 其典型产品ZIP250 如图7 所示。它采用了固立柱式结构, 仪器技术水平较高。 6、尼康（日本品牌） 尼康日本尼康在光学测量仪器领域技术实力雄厚、产品众多。其典型产品VMR3020 产品美观、精致,测量精度高, 功能全面 谢华锟老先生寄语（详情请参见《影像测量仪发展与点评》）： 这些产品测量精度高、测量速度快、测量功能完备, 代表了当今工业级影像测量仪行业的先进水平。我们可喜地看到, 天准精密技术有限公司作为国产影像测量仪产品的领先品牌, 其主导产品在测量精度、测量速度、软件功能等多个方面都具备了和国际一流品牌相当的指标, 在国外品牌具有主导和优势的高端工业级图像测量仪领域中占据了一席之地; 而在为用户提供优质快速服务、开发定制专用软件等方面, 天准公司占有明显优势, 具备很强的
☆现代散文体式：“闲话”与“独语”的开创者——鲁迅 “闲话风”的散文追求一种日常交流的语境，以聊天、闲谈的方式结构文章，通常有种开放的格局，风格上也讲求娓娓而谈，“信口信腕”。（《朝花夕拾》） “独语”则与“闲话”相对，是一种内敛式的话语方式，注重内心的自我满足，强调独立、孤独的生命体验，风格上也比较偏向奇崛与沉思。（《野草》） ☆新小说大体可分为两大类 人生派写实小说；“自叙传”抒情小说 （新小说发端于五四前后的“问题小说”，之后过渡到人生派写实小说，乡土写实小说也可归入此类。） 问题小说：它是一个很宽泛的概念，在此特指五四前后三四年间的一股小说的“题材热”，当时作家们借小说的形式提出有关社会、人生的诸多问题，并探讨解决问题的方法，代表作家有冰心、叶圣陶、王统照、庐隐、许地山等。 ☆人生派写实小说 随着1921年文学研究会的成立，人生派写实小说成为了新文学第一个十年气度最为开阔的一个小说流派，在艺术宗旨上它坚持为人生而创作，尽管起初艺术追求颇为多样化，但或迟或早都开始趋向现实主义的创作方法，这一派的作者最众，作品也最丰富，主要代表作家有叶圣陶、王统照、许地山及鲁彦等乡土派小说家们。 ☆乡土写实派小说 乡土写实小说于1923年前后陆续出现，鲁迅是首次使用“乡土文学”(即“侨寓文学”)这个术语来概括这个以现实主义的创作方法为主忆述故乡情与事之流派的人，并把王鲁彦、台静农、许钦文、蹇先艾等作家归入其中，而他本人也在创作实践上成为乡土写实小说流派的艺术楷模。 ☆“自叙传”抒情小说 它是在19世纪欧洲浪漫主义文学与20世纪二十年代日本的“私小说”影响下形成的小说体式，是中国现代抒情小说的最初体式，以郁达夫的小说为主要代表，作者多集中于创造社，为中国后来的现代小说发展开了重要的源头。 （抒情小说的先行者――民初“诗僧”苏曼殊，其小说《断鸿零雁记》以旧形式始创了近世的浪漫主义） ☆前期新月派：指1927年以前，以徐志摩、闻一多和朱湘等为代表的诗人群。为使新诗走向规范化，他们提出了“理性节制情感”的美学原则与新诗格律化的主张，强调诗的“三美”即“音乐美、绘画美、建筑美”，新诗创作于是进入了一个“自觉”的时期。 ☆后期新月派：是前期新月派的继续与发展，它以1928年创刊的《新月》为标志，主要以徐志摩为核心而形成的诗歌流派。前后期新月派一致之处在于其超功利的、自我表现的、贵族化的“纯诗”立场，不同之处在于后期“诗感”更趋近现代派了。 ☆社会剖析小说 三十年代，一种主要依靠理性分析来开拓形象思维的深广度的创作方法，从典型环境来解释并塑造典型人物，在戏剧性强的情节中突现人物性格及其成长史的写法，逐渐成为“左翼”文学公认的主流，而且影响深远，这一类小说以矛盾为主要代表。
#专题综述# 细胞融合技术的发展及应用* 霍乃蕊a,韩克光b (山西农业大学a.食品科学与工程学院;b.动物科技学院,山西太谷030801) 摘要:细胞工程是四大生物工程之一,细胞融合技术作为细胞工程的一项核心基础技术已在农业、医药、环保等领域取得了开创性的研究成果,而且应用领域不断扩大。细胞融合技术的不断改进一方面表现在融合剂上,另一方面体现在新方法上,再者体现在融合对象的不断扩展上。现在新的细胞融合方法正在尝试将各种物理、化学手段综合应用,使细胞融合的方法和手段向操作更为简便,便于量化研究,同时又能使融合率得到不断提高的方向发展。本文以细胞融合技术的发展历史为主线,对上述内容做了简要综述。 关键词:细胞融合技术;发展;应用 中图分类号:Q813.2 文献标识码:A 文章编号:100727146(2006)022******* C ell Fu si on T echn iqu e:its D eve l opm en t and App lica ti on s H U O N a i2ru i a,HA N Ke2guang b (Shanxi Agr i cu lt ura lUn i ve rs it y a.College of Food Sc i ence and Eng i neering; b.College ofAn i m a l Sc ience and Technol ogy,Ta i gu030801,Shanx,i Ch i na) Ab stra ct:C ell u l a r engi neer i ng i s o ne of t he f our techniques of biote chnolo gy,and as t he core of ce ll ular engi neering, the cell fusi on technique ha s acqu ired outstand i ng ach ieve m ents i n m any fields such as agr icu lt ure,m ed icine and envi2 ron m enta l protecti on.Its app licati on i s still i ncreasi ng i n nu m ber.The i m prove m ent of t he ce ll fusi on techn i que i nvol ves the fusi on agent,new m e t hods and the cells used i n fusi on.No w new cell fusi on m ethods are re sorti ng to the co m b i ned usage of phys i ca l and chem i ca lm ethods to deve l op a s i m p le and co nven i ent,easy quantificati on and a t t he sam e ti m e can i ncrease the fusi on rate.A ll these aspects were d i scussed i n th i s pape r centered aro und the h i story of the cell f usio n te ch2 n i que. K ey word s:ce ll fus i on techn i que;deve l op m ent;app licati on 细胞工程是生物工程主要组成之一,出现于20世纪70年代末至80年代初,是在细胞水平上改变细胞的遗传特性或通过大规模细胞培养以获得人们所需物质的技术过程。细胞融合技术作为细胞工程的核心基础技术之一,已在农业、医药、环保等领域取得了开创性的研究成果,而且应用领域不断扩大。细胞融合技术不仅为核质关系、基因调控、遗传互补、细胞免疫学、肿瘤发生、基因定位、衰老控制等理论领域的研究提供了有力的手段,而且被广泛应用于免疫学、遗传学、发生生物学,特别是在单克隆抗体及动植物远缘杂交育种等方面具有十分重要的意义。随着细胞融合技术研究的不断深入,细胞融合 第15卷第2期2006年4月 激光生物学报 ACTA LAS ER BI O LOGY SI NI CA Vo.l15No.2 Ap r.2006 *收稿日期:2005203210;修回日期:2005209222 基金项目:山西省科委攻关项目(04105523);山西省自然科学基金项目(20041094) 作者简介:霍乃蕊(1972)),女,博士,现为澳大利亚纽卡斯尔大学访问学者,主要从事生物工程方面研究. (电子信箱)sxndkgh@163.co m
知名品牌的主要仪器市场 1、安捷伦（Agilent）：在气相色谱仪、液相色谱仪、单级气质联用仪、单级液质联用仪均是全球最大供应商，主要产品高效液相色谱、气相色谱、原子吸收光谱仪、液-质联用仪（LC-MS）、气-质联用仪（GC-MS）、电感耦合等离子体质谱仪（ICP-MS）、LC-MS-MS液相色谱-串联质谱仪、高效毛细管电泳仪、自动溶出仪等受广大用户青睐。 Q:安捷伦，日立，岛津的高效液相色谱比较? Answer1：使用安捷伦的用户较多，安捷伦最大的优点就是人性化的设计，而且其价格也比较合理，一般不容易出问题，即使出问题也容易自己解决，不像其它牌子，出问题就得求售后，相信以后仪器出问题也要由你负责解决的吧。日立的不用考虑，各方面都不好，口碑烂。我们学校购置设备都是安捷伦的，包括气相、液相。岛津的一般，还好用，但是设计没有安捷伦的好，用过的就有感觉了，尤其是工作站不好用。 Answer2: Waters的软件应用及其丰富，硬件质量也不错，机器价格和售后都灰常贵，适合高端科研；Agilent的软件规范，机器质量一般，但都是德国产的哦，机器价格适中，售后灰常贵，适合规范的、实施国际认证的GLP和GMP实验室；津的机器软件功能单一（相对来说），硬件皮实，售后价格适中，适合国内企业。 Q: 气相色谱仪有哪些型号? 国内做气相的很多，福立GC9790，仪盟A90（和安捷伦接轨，安捷伦的色谱可以使用仪盟的配件）这两家的这两种色谱在国内算是不错的，年销量也可以，价格略高！鲁南GC2060，GC6890价格上算是比较实惠。国外的比较出名的岛津2014C（苏州），2010（日本）；安捷伦（美国）Agilent7820。进口色谱较贵，如果没有特殊需求还是建议买国内的。 Q: 比较好的气相色谱仪的价位? 功能、配置、性价比比较好的国产常规气相色谱仪价位在3至6万元之间，比如北分瑞利、上海天美、沈阳光正、温岭福利等；日本岛津的气相色谱仪在10至20万之间；美国安捷伦的气相色谱仪在20至40万之间；不是价格高就是最好的，这要看你分析的需要，一般常规分析国产仪器完全可以满足。 Q：白酒行业适用气象色谱仪还是液相色谱仪? 白酒行业适用气相色谱仪，如分析醇、酯、酫等组份，气相色谱仪配填充柱进样器、FID检测器即可;如分析醇、酯、酫、酸等组份，气相色谱仪需配毛细管柱进样器、FID检测器。 Q：气相色谱优缺点？ 优点：高分离性能；高检测性能；分析时间相对较快。 不足之处：不能直接给出定性分析结果；对无机物和易分解的高沸点有机物分析比较困难Q:气相色谱与液相色谱的区别？
姓名班级 13级生命基地班学号同组者： 科目细胞生物学实验实验题目动物细胞融合 【实验题目】 动物细胞融合 【实验目的】 1.了解动物细胞融合的常用方法。 2.学习化学融合的基本操作过程。 3.观察动物细胞融合过程中细胞的行为与变化。 【实验材料与用品】 1、材料 鸡血红细胞 2、试剂 50%PEG、GKN溶液、Alsever’s细胞保存液、0.85%氯化钠溶液。 3、器材 倒置显微镜、离心机、载玻片、盖玻片、离心管、废液缸、滴管等。 【实验原理】 细胞融合是指在自发或者诱导条件下，两个或两个以上细胞合并为双核或者多核细胞的过程。目前人们已经发现有很多方法可以诱导细胞融合，包括：病毒诱导融合、化学诱导融和和电激诱导融合。 1、病毒诱导融合 仙台病毒、牛痘病毒、新城鸡瘟病毒和疱疹病毒等可以介导细胞的融时也可介导细胞与细胞的融合。用紫外线灭活后，这些病毒即可诱导细胞发生融合。 2、化学诱导融合 很多化学试剂能够诱导细胞融合，如聚乙二醇(PEG)、二甲基亚砜、山梨醇、甘油、溶血性卵磷脂、磷脂酰丝氨酸等。这些物质能够改变细胞膜脂质分子的排列，在去除这些物质之后，细胞膜趋向于恢复原有的有序结构。在恢复过程中想接触的细胞由于接口处脂质双分子层的相互亲和与表面张力，细胞膜融合，胞质流通，发生融合。化学诱导方法，操作方便，诱导融合的概率比较高，效果稳定，适用于动、植物细胞，但对细胞具有一定的毒性。PEG 是广泛使用的化学融合剂。 3、电激诱导融合
姓名班级 13级生命基地班学号同组者： 科目细胞生物学实验实验题目动物细胞融合 包括电诱导、激光诱导等。其中，电诱导是先使细胞在电场中极化成为偶极子，沿电力线排布成串，再利用高强度、短时程的电脉冲击破细胞膜，细胞膜的脂质分子发生重排，由于表面张力的作用，两细胞发生融合。电诱导方法具有融合过程易控制、融合概率高、无毒性、作用机制明确、可重复性高等优点。 【实验步骤】 在本次实验中采用的是化学诱导融合的方法，利用PEG使鸡血红细胞发生融合。具体实验步骤如下： 1、取鸡血2ml+2mlAlsever液，再加入6mlAlsever液，混匀后制悬液（4℃保存）【老师已做好，可直接使用】 2、取（1）中悬液1ml+4ml的0.85%的NaCl溶液，进行以下三次离心处理： ①在1200r/min下离心5min，去掉上清液，再加入0.85%的NaCl溶液至5ml； ②1000-1200r/min下离心5min，去掉上清液，再加入0.85%的NaCl溶液至5ml； ③1000-1200r/min下离心7min 【因时间关系此次实验只离心一次】 3、将离心后的沉降血球（去上清后约0.1-0.2ml）加入GKN至1-2ml，使之成为10%的细胞悬液； 4、取上述10%的血球悬液1ml,加入3mlGKN液，使每毫升含血球15000000个； 5、分别取（4）1ml+0.5ml50%PEG，（4）0.5ml+0.5ml50%PEG，（4）0.5ml+1.0ml50%PEG，混匀滴片，编号分别为①②③号溶液。在常温下2-3min后，显微镜下观察。 【实验结果】 1、实验中可观察到两个和多个细胞发生质膜融合现象,可看到不同融合状态的细胞： ①两细胞的细胞膜相互接触、粘连； ②接触部分的细胞膜崩解，两细胞的细胞质相同，形成一个细胞质的通道，呈现哑铃状； ③通道扩大，两个细胞连成一体，呈现一个长椭圆形细胞； ④细胞融合完成形成含有双核或者多核的细胞，呈圆形。 比较典型的细胞融合时的形态如下图：
河北科技师范学院学报 第19卷第1期,2005年3月 Jo ur nal o f Hebei N or mal U niver sity of Science&T echnolog y Co llege V o l.19 No1.1M arch2005 植物细胞融合的研究进展(综述) 郭学民1,2,徐兴友1,2,王同坤1,王华芳2,尹伟伦2 (1河北科技师范学院生命科学系,河北秦皇岛,066600;2北京林业大学生物科学与技术学院)摘要:概述了原生质体分离和培养的影响因素,介绍了近年来国内外原生质体培养与融合及杂种细胞、筛选和鉴定的动态。 关键词:细胞融合;原生质体;筛选与鉴定 中图分类号:Q321+.2 文献标识码:A 文章编号:1672-7983(2005)01-0065-05 细胞融合(cy to mixis),亦称细胞杂交(cell fusio n),是指亲本的两个细胞在特定的物理和化学因子处理下合并为一个杂种细胞的过程[1]。植物细胞融合可分为体细胞杂交(somatic hybridizatio n)和配子-体细胞杂交(gameto-somatic hy br idizatio n),前者是指不经过有性过程,而直接由体细胞原生质体融合产生杂种细胞,形成愈伤组织,并再生出植株的过程[2],后者是指性细胞(如小孢子四分体、精子、精细胞、幼嫩花粉、成熟花粉、卵细胞、助细胞和中央细胞等)原生质体和二倍体原生质体融合产生三倍体杂种细胞,形成愈伤组织,并再生出植株的过程[3]。植物细胞融合是植物细胞工程的一个重要分支,是一种突破物种生殖隔离、创造远缘杂种的新途径,原生质体技术还可用于细胞突变体的筛选、细胞器移植和外源DNA的导入。 自1960年Cocking[4]用酶法分离出番茄根原生质体后,Natag a和T akebe[5]1970年首次利用烟草叶分离原生质体,经培养获得再生植株;1975年以色列的Vardi等[6]首次从木本植物Sham onti甜橙珠心组织诱导胚性愈伤组织,并从愈伤组织分离原生质体,经培养通过胚状体再生出植株;在禾本科植物中,除在珍珠谷、紫狼尾草用悬浮细胞为材料,较早获得原生质体再生植株外,直到1985年Fujim ur a[7]等率先在水稻原生质体培养中获得了再生植株,才出现了重大突破。现已从许多种内、种间、属间甚至亚科间的体细胞杂交获得杂种细胞系或杂种植株。随着多种植物原生质体的成功培养和融合技术的不断改进,植物细胞融合获得了巨大成功。植物细胞融合包括原生质体的制备、细胞融合的诱导、杂种细胞的筛选和培养,以及植株的再生和鉴定等环节。 1 原生质体的分离和培养 1.1 起始材料 起始材料及其生理状态对原生质体的制备及其活力有很大的影响。在以往的双子叶植物培养中,大多以叶片为分离原生质体的材料,近年来,起始材料的适用范围有了较大扩展。目前,以愈伤组织、悬浮细胞和体细胞胚为材料制备原生质体是最主要的方式;禾本科植物原生质体培养获得成功的试验,几乎都是用从幼胚或成熟胚诱导形成的胚性愈伤组织或胚性细胞系来游离原生质体。采用这些材料制备原生质体方法简便、产量高、不污染、不易破碎。 1.2 基因型 同一植物不同基因型的原生质体脱分化与再分化所要求的条件不同,所以在相同条件下,不同品种的再生能力不同。王光远和夏镇澳[8]在水稻原生质体培养中曾用26个品种进行组织培养,其中仅有3个品种(粳稻农虎6号、国香1号和上农香糯)能成功地用于原生质体培养,获得再生植株。据统计,小麦获得原生质体再生植株的基因型只有大约10个[9]。基因型的选择在植物原生质体培养中起着重要作用,它不仅影响原生质体的产量和活力,而且还影响植株的再生。Cheng和Veillenux证明芙薯(Solanum phureja)从原生质体培养到愈伤组织形成受2个独立位点的显性基因的调控[10]。因此,现有 收稿日期:2004-03-09;修改稿收到日期:2004-12-12
细胞融合技术的应用与前景 人们很早就注意到了在自然条件下发生的细胞融合现象，首先在病料组织中发现了由细胞融合产生的多核细胞，紧接着发现在脊椎动物和无脊椎动物的正常细胞中也可发生细胞融合，随后在体外组织培养中也发现了离体细胞的融合现象。自从发现活病毒可在体内介导癌细胞融合后，人们又实现了利用灭活病毒促进动物异种细胞融合，从而打破了细胞融合的种属屏障，推动细胞融合技术跃上新的 台阶。原生质体的大量制备较为困难，限制了植物细胞融合技术的发展，因此植物细胞融合的起步较动物细胞融合要迟10年左右。直到用酶法大量制备有活力的原生质体获得成功后，才使植物原生质体的融合工作迅速发展起来。由于病毒诱导细胞融合存在着病毒制备困难、操作复杂、灭活病毒的效价差异大等原因，人们又找到了比病毒简便、快速和高效且比病毒更易制备和控制，活性稳定，使用方便的化学物质PEG作为病毒的替代物诱导细胞融合，但在PEG诱导细胞融合的有效的浓度范围内(50～55)对细胞毒性很大，因此人们又找到了新的方法来替代PEG，这些新方法有电脉冲诱导细胞融合技术和激光融合技术以及空间融合技术等。纵观细胞融合技术的发展历史，该技术的不断改进首先表现在融合剂上，从致癌活病毒到灭活病毒再到化学物质，其次体现在新方法上，再者体现在融合对象的不断扩展上。现在新的细胞融合方法一般采用将化学法和物理法结合起来进行，如将磁、超声、机械等和激光、电相结合，同时添加化学剂以便进一步提高融合率，细胞融合的方法和手段始终朝操作方便、简单，便于量化研究，同时融合率又能得到不断提高的 方向发展。 1．细胞融合的意义 所谓细胞融合就是指在外力(诱导剂或促融剂)作用下，两个或两个以上的异源(种、属间)细胞或原生质体相互接触，从而发生膜融合、胞质融合和核融合并形成杂种细胞的现象称为细胞融合或细胞杂交口]。如取材为体细胞则称体细胞杂交，体细胞融合后可形成四倍体或多倍体细胞，由此形成的杂交细胞，其特性会有很大的变化。细胞融合不受种属的局限，可实现种间生物体细胞的融合，使远缘杂交成为可能，因而是改造细胞遗传物质的有力手段。它的意义在于从此打破了仅仅依赖有性杂交重组基因创造新种的界限和生殖壁垒，极大地扩大了遗传物质的重组范围；细胞融合技术避免了分离、提纯、剪切、拼接等基因操作，在技术和仪器设备上的要求不象基因工程那样复杂，投资少，有利于广泛开展研究和推广，有着重大的实践意义，正得到科学界的日益重视[2_引。经过长期反复研究和实践，细胞融合技术逐步发展和完善起来，已成为生物工程的基础技术之一。特别是近20年来，从理论和实践两个方面，有力地推动了生物科学各领域的发展。细胞融合方法得到了不断的更新，融合率也得到逐步的提高。 2．动物细胞融合技术 动物细胞融合是从细胞水平来改变动物细胞的遗传性，用于生产单克隆抗体、疫苗等特定的生物制品，改良培育动物新品种，缩短动物的育种过程。动物细胞融合的应用范围已广及生物学的各个分支学科，特别是在绘制人类基因图谱方面取得了显著成绩。虽然细胞杂交属于理论生物学范畴，但在实际应用方面也有重大突破。在基础理论研究上，动物细胞融合技术对研究细胞分化、基因定位、肿瘤发生机制等方面都有重要意义。在实际应用方面，动物细胞融合技术在药物定向释放系统、细胞治疗以及抗肿瘤免疫等方面起到重要的用。动物体细
品牌标志中英文对译隶属公司产地品牌简介 古驰Gucci 历峰集团意大利始人Guccio Gucci古琦欧·古琦于1923年创立Gucci。位于佛罗伦萨的Gucci集团是当今意大利最大时装集团，Gucci除时装外也经营皮包、皮鞋、手表、家饰品、宠物用品、丝巾、领带、皮带、香水等。 米索 尼 Missoni 服饰意大利 品牌线：1、米索尼(Missoni)，1958年2、米索尼·尤莫(Missoni Uomo)，1985年 3、米索尼·运动装(Missoni Sports)，1985年针织系列为世界顶级产品 高田贤三 KENZO 服饰法国 高田贤三这位日本籍的法国时装设计师用自己的名贤三命名的KENZO品牌，已经不仅仅是时装业的精品， 在化妆品、香水领域一们是大名鼎鼎。KENZO的时装不是那种标新立异的拔高，它有一点点传统，有许多 热情的颜色，有活生生的图案，还有几分狂野。几乎每一款都能找到实际穿着的场合，但吸引力之强却使你 绝不厌倦。当高田贤三还是青年的时候，他远赴巴黎开始他的国际时装设计师生涯，他有备而来，已经在 日本对服装有了深入的研究，虽然，他设计的服务对象从东方人转为西方人，但丝毫没有碍障，而从此，他 开始了不以国界为设计范畴的国际性工作 雅格狮丹Aquascutum 服饰英国 英国Aquascutum「雅格狮丹」于1851年在伦敦创立。YGM贸易于1998年成为Aquascutum大中华地 区、星加坡及马来西亚的总代理、特许制造及经销商。品牌专走高档路线，顾客对象是企业家、专业人士及 行政人员等。现时Aquascutum的专门店逾140间，遍布香港、澳门、台湾及中国各大小城市。 鳄鱼 Lacoste 服饰法国在国际市场众多的服装品牌中，将一第张嘴的鳄鱼绣在上衣左胸前的服装最引人注目，虽然其售价不菲，但相当抢手，它行销世界80个国家，每年销量约2500万套（件）。上个世纪30年代初期，法国网球名将 文档
无缝克隆与基因融合 基因融合技术是基因功能研究的关键工具。准确拼接的杂合分子，没有任何无关的序列，使我们可以对分子进行精确的研究。本篇综述介绍了无缝融合基因和蛋白的应用，以及获得这些杂交分子的方法 前言 随着各种基因组测序项目的完成，人们越来越关注基因产物的功能分析。基因融合技术在基因功能研究的许多方面具有重要的作用，包括基因和蛋白标记，报告基因的研究，结构域互换研究，突变研究和基因敲除或者插入实验。传统的基因融合技术涉及到type II 限制酶消化和DNA连接反应（所谓的剪切/粘贴反应），曾被用来作为构建杂交基因的标准方法。然而，这种方法常常会在接合处留下操作的序列，例如酶切位点。这些多余的序列可以改变DNA元件的间隔，在接合处引入多余的氨基酸残基，可能对融合蛋白的结构和功能产生不需要的影响，因此影响对融合基因精确的研究。这篇综述讨论了精确融合基因的应用之处，概括了实现无缝基因融合的方法。 无缝基因融合及其应用 无缝克隆和基因融合就是将两个或者更多DNA片段精确结合在一起，在DNA片段的接合处没有任何不需要的序列。这是获得杂交基因的理想情况。以下强调几个例子，以表明无缝基因融合的重要性。 启动子和外显子研究 基因启动子含有许多调控元件。转录因子与它们结合并互相影响来调控转录。启动子删除分析使我们鉴定到这些功能元件，获得关于基因调控机制的重要信息。然而，因为不同调控元件之间的间隔常常是非常重要的，通常需要长度不变的linker来维持这些元件的间隔和螺旋面。基因启动子的linker扫描分析需要无缝DNA融合或者序列替换技术。分子演化方法例如外显子和DNA转移来获得具有需要生化和/或生理特征的蛋白也需要不同功能元件的无缝拼接。在真核细胞中，通过内含子介导的RNA拼接可以构建嵌合体基因和/或蛋白。在这些实验中RNA底物的合成和/或外显子标记核酶需要认真的设计，得到嵌合体前体基因。只要杂合基因形成正确，无缝融合就可以通过拼接实现。 蛋白质功能研究和蛋白质工程 蛋白质由有功能结构域构成。为了阐述一个蛋白某个结构域的功能，需要构建该结构域删除或者被相似结构域替换的突变体。这种结构域删除或者互换实验将在很大程度上得益于相关元件的无缝融合，来消除有操作序列所带来的潜在的负面影响。更加概括地说，不同结构域的无缝融合对于蛋白质工程是非常重要的，包括获得新的杂交分子和抗体改造。对于抗体改造，互补决定区嫁接（CDR-grafting）和定点突变是经常要做的。嵌合体蛋白也可以通过內含肽介导的蛋白拼接和连接获得。只要含有內含肽的前体蛋白没有多余的序列，精确蛋白融合就可以实现。 蛋白质表达 标签和融合伴侣的使用促进了蛋白质的表达。它们赋予蛋白的可溶性和稳定性并促进接下来的目的蛋白的亲和纯化。在目的蛋白的活性不受到融合伴侣或者标签影响的情况下，整个融合蛋白可以直接用到接下来的研究中。对于酶学研究和测定，通常是这种情况。然而，在许多情况下，移除融合蛋白是必要的，这可以通过改造的蛋白酶酶切位点来完成。这个过程需要蛋白酶切位点和目的蛋白之间无缝的连接。为了进行功能研究，在一些情况下携带一个短标签（比如his标签）的融合蛋白被成功地结晶，移除这个标签是不必要的。然而，如果带有标签的蛋白无法结晶，就难以估量标签的影响，标签的切除通常是必要的。 在表达成熟和有活性蛋白的过程中，常常需要表达蛋白氨基酸序列与原来的一样。例如
任天堂、世嘉、Skype、沃达丰、诺基亚、夏普、索尼……你知道这些商标名称最初的来历吗? 以下是20个知名品牌名字的由来： 1. 3M 3M原来的全称是“Minnesota Mining and Manufacturing Company(明尼苏达矿业及制造公司)”，首字母是三个“M”，因此“3M”缩写顺理成章成了公司的品牌名称。 2. 7-Eleven 关于“7-Eleven”的名字来源应该追溯到1964年，那一年由于营业时间延长为从上午7：00至下午11：00，因此改名为7-Eleven.改名之前，这家连锁便利店叫“UtoteM”。 3. Lego “Lego”由丹麦语“Leg Godt”拼缀而成，意味“尽情地玩”;在拉丁语中，“Lego”还有“组合在一起”的意思。不过乐高集团表示公司的名字绝非来源于任何拉丁词汇。
4. Nintendo “Nintendo”是日语“Nintenduo(任天堂)”的音译，“Nin”意为“信任”，“ TEN-DUO”意为“天堂”。 5. Sega “Sega”的名字来自“Service Games of Japan”，“Sega”即由“Service Game”拼缀而成。
6. Skype “Skype”这个品牌名来源于“Sky Peer to Peer”的概念，缩写为“Skyper”，后来由于“Skyper”域名已被注册，后去掉“r”成了“Skype”。 7. Vodafone Vodafone(沃达丰)的名字来自三个词语的有趣组合“Voice”“Data”和“Telephone”，分别表示“语音”“数据”以及“电话”。
独幕话剧《终身大事》 作者胡适。1919年3月发表于《新青年》6卷3号是中国最早运用现代话剧形式表现五四时代精神的剧作。剧本描写一个中产家庭的独生女田亚梅为争取婚姻自主而离家出走的故事。剧情简单，受易卜生的影响，但反封建的主题鲜明，它的出现对以后的社会问题剧的创作和演出有推动意义。 爱美剧 “五四”文学革命开展了对中国旧剧的讨论，批判堕落的文明戏，翻译介绍欧美话剧。在此基础上，一些以陈大悲为代表的戏剧家提出了“爱美”的口号（英文Amate ur 的音译，意为非职业戏剧，不以营利为目的。）由此肇始了20年代初期遍及南北各地的“爱美剧”运动，打破了因为文明戏衰落儿形成的新剧舞台的沉寂，成为五四以后创造现代话剧的重要实践。 中国左翼作家联盟 于1930年成立于上海霞飞路。代表作家有鲁迅、冯雪峰、柔石等。代表刊物有《创造月刊》《拓荒者》《萌芽》等。左联以《中国左翼作家联盟理论纲领》为纲，以鲁迅《对左翼作家联盟的意见》为总结，提倡和实践无产阶级革命文学，对中国现代文学的发展产生的影响是深远而持久的 汉园三诗人 30年代中国现代派诗歌创作中三位风格独异的诗人：何其芳、李广田、卞之琳，1936年出版了合集《汉园集》（商务印书馆），内收何其芳《燕泥集》、李广田《行云集》、卞之琳《数行集》，因此而得名。他们注重以诗歌传达独特的气质：何其芳主要表现青年人朦胧的理想和淡淡的忧伤；李广田的诗歌，风格质朴，蕴藉深沉；卞之琳善于在不露声色中深含着情感与哲理，对现代诗歌的客观化、非个人化等艺术手法进行了有益的探索，文字奇巧。 新感觉派 新感觉派是30年代海派文学中重要的一支，是活跃于20年代末至30年代前半期的一个现代主义小说流派。新感觉派的主要阵地是《无轨列车》、《新文艺》和《现代》等刊物，主要作家是施蛰存、刘呐鸥、穆时英，此外还有黑婴、徐霞村、叶灵凤等。是中国最完整的一支现代派小说。
细胞融合技术研究进展 年级专业 课程 学生姓名 学号 指导教师
摘要：人们对细胞融合的机理、融合方法的了解越来越多，其应用范围也越来越广。对细胞融合的机理、方法、应用及目前存在的问题进行了综述。 关键词：细胞融合;机理;方法;应用 细胞融合不仅为细胞的起源、核质关系、肌肉骨骼胎盘的发育[1]、肿瘤发生、干细胞介导的组织再生等理论领域的研究提供了有力的手段[2],而且被广泛应用于微生物学、育种学、发生生物学,特别是在单克隆抗体[3-4]及动植物远缘杂交育种方面具有重要意义。 1细胞融合的机理 最近研究表明,细胞融合与病毒和细胞之间的融合以及细胞内的膜泡融合有许多相似之处,即带包被的病毒(或细胞)通过转膜病毒蛋白介导与宿主细胞的细胞膜进行融合。I类病毒融合蛋白包括流感病毒红血球凝集素(HA)和人类免疫缺陷病毒包被蛋白,它们都具有相似的结构域,即都具有a-螺旋结构。病毒和细胞之间正是通过这些蛋白来完成融合过程(伴随有构象的变化)的。细胞内的膜泡融合也是如此,其相关融合蛋白包括GTPases及SNARE家族。因此推测细胞融合采用相似的机理。然而细胞融合蛋白并不全具有a-螺旋结构,提示a-螺旋并非融合所必需[2]。 2细胞融合的方法 2.1生物法 自从发现活的仙台病毒可在体内介导癌细胞融合后,人们又实现了利用灭活的病毒促进动物异种细胞融合,从而打破了细胞融合的种属屏障,推动细胞融合技术跃上新台阶。解决病毒制备困难、操作复杂、灭活病毒的效价差异等问题是病毒诱导细胞融合新的研究方向。 2.2化学法 2.2.1盐类融合法 此法是应用最早的诱导原生质体融合的方法。盐类融合剂对原生质体的破坏小。今后研究应提高其融合率,使其对液泡化发达的原生质体能够诱发融合。2.2.2高钙和高pH值融合法 Keller首先发现高Ca2+和高pH值可以诱发融合。Melchers用此法将烟草种内2个光敏感突变体诱导融合成功并获得100余株体细胞杂种。提高该方法的使用范围是亟待解决的问题。 2.2.3聚乙二醇融合法(PEG法) 加拿大籍华人高国楠(1974)用聚乙二醇(PEG)为融合剂诱发大豆与大麦、大豆与玉米、哈加野豌豆与豌豆的融合[5]。此法比病毒更易制备和控制,活性稳定,用PEG作为病毒的替代物诱导细胞融合。在PEG诱导细胞融合的有效浓度范围内(50%～55%)对细胞的毒性应进一步减小。 2.3物理法 2.3.1电脉冲诱导细胞融合技术 电脉冲诱导细胞融合技术,产生于20世纪80年代,目前已成为细胞融合的有效手段之一。该技术融合效率高,是PEG的100倍,操作简便、快速,对细胞无毒无害,可在显微镜下观察融合全过程[6]。