用紫外吸收光谱法测定水中的总酚X
侍霞
( 盐城生物工程高等职业技术学校, 江苏盐城224051)
摘要: 采用紫外吸收光谱法测定水中的总酚, 是以同一个水样酸化后作参比液, 碱化后作测定液,
在选定的波长处进行测定。对对硝基酚、邻硝基酚、2, 4- 二硝基酚和苯酚进行了研究, 并与国家标准方
法4- 氨基安替比林法进行比较。该方法测定结果的准确度、精密度、回收率都较高, 能满足分析的要求,
且快速、简便、成本低、易于实现自动化分析, 可用于测定含酚量较高的水样。
关键词: 紫外吸收光谱法; 4- 氨基安替比林法; 硝基酚; 苯酚
引言
工业废水中含有酚类。水体遭受酚污染后, 低浓
度时会影响鱼类的回流繁殖, 浓度为0. 1～0. 2mg / L
时, 鱼肉有酚味, 浓度更高会引起鱼大量死亡。人长
期饮用被酚污染的水会引起头晕、贫血及各种神经
系统病症, 许多酚及衍生物对人有显著的致突变作
用。硝基酚对人体和哺乳动物都有毒性, 在生物体内
易被酶转化为亚硝基和羟胺基衍生物, 这些衍生物
可生成亚铁血红蛋白或亚硝基胺, 前者能与氧结合,
后者是致癌物〔2〕。一些硝基酚毒性大且难以生物降
解, 会在环境中产生积累, 如2- 硝基酚、4- 硝基酚
和2, 4- 二硝基酚毒性较大, 被美国环保局列入“优
先控制污染物名单”,
美国环保局建议自然水体中这
3 种物质的浓度控制在0. 1mg / L 以下。美国环保局
还制定了硝基酚排放的预处理标准, 用于限制合成
纤维、热塑树脂、热固树脂等日用有机化学品和特殊
有机化合物生产过程中硝基酚的排放。因此, 急需找
到一种简便快速准确地监测水中酚含量的分析方
法。
目前, 酚类的检测方法较多, 有4- 氨基氨替比
林- 直接分光光度法、4- 氨基氨替比林- 氯仿萃取
分光光度法、溴酸钾法等〔1〕。
一般化验室对水中酚的测定是采用4- 氨基氨
替比林- 直接分光光度法。此法的分析原理是在
pH10±2 的介质中, 在氧化剂铁氰化钾的存在下,
与4- 氨基氨替比林反应, 生成橙红色的吲哚酚氨替
比林染料, 在最大吸收波长处进行测定。这种方法的
缺点是所采用的试剂不稳定, 当羟基对位或邻位有
取代基时, 有些取代基阻止显色反应〔3〕〔10〕。
本文采用紫外吸收光谱法测定水中的总酚, 以
同一个水样酸化后作参比液, 碱化后作测定液, 在选
定的波长处, 对样品进行测定。并对这种方法测定的
准确度和精密度等进行了讨论, 并与4- 氨基氨替比
林光度法进行对照〔5〕。
1 实验部分
1. 1 仪器与试剂
1. 1. 1 仪器
紫外可见分光光度计( U V/ VIS916, 澳大利亚
GBC 公司) ; 1cm 石英比色皿电子天平( FAL004N,
上海民桥精密科学仪器有限公司) 。
1. 1. 2 试剂
1邻硝基酚、对硝基酚、2, 4- 二硝基酚、苯酚
( 均为分析纯) 。
o邻硝基酚标准液: 准确称取邻硝基酚0. 1000
～0. 1500g 于100mL 小烧杯中, 加水溶解后移入
100ml 容量瓶中, 用水稀释至标线, 得邻硝基酚的贮
备液, 再从该溶液中移取10. 00mL 溶液定容至
100ml 容量瓶中。( C= 1. 0245mmol / L )
?对硝基酚标准液: 配制方法同( 2) 。( C = 1.
0302mmol / L )
?2, 4- 二硝基酚标准液: 配制方法同( 2) 。( C
= 0. 2196mmol / L )
?苯酚标准液: 配制方法同( 2) 。( C = 1.
105mmol/ L )
?盐酸溶液( C= 0. 1mol/ L )
?氢氧化钠溶液( C= 0. 1mol / L )
à实验用水均为二次蒸馏水。
á缓冲溶液: 称取10g 氯化铵溶于50mL 氨水
中, 得pH = 10±2 的缓冲溶液〔4〕。
○10 铁氰化钾溶液: 称取4g 铁氰化钾溶于50mL
2008 年第19 期内蒙古石油化工 11
X 收稿日期: 2008- 05- 12
作者简介: 侍霞( 1973- ) , 女, 江苏盐城人, 盐城生物工程高等学校讲师, 在读硕士研究生, 主要从事化工产品对环境的
影响研究。
水中, 得80g/ L 铁氰化钾溶液〔4〕。
○11 4- 氨基氨替比林溶液: 称取1g 4- 氨基氨替
比林溶于50mL 水中; 得20g / L 4- 氨基氨替比林溶
液, 使用后应放入冰箱中保存〔4〕。
1. 2 测定方法
1. 2. 1 测定波长的确定
移取对硝基酚、邻硝基酚、2 , 4- 二硝基酚、苯酚
标准使用液各0. 80mL , 分别置于10. 0mL 比色管
中, 加水稀释至刻度, 摇匀。以水为空白, 用紫外可见
分光光度计, 在波长200nm～500nm 范围内扫描, 绘
制吸收曲线, 确定几种硝基酚的最大吸收波长。
移取对硝基酚、邻硝基酚、2 , 4- 二硝基酚、苯酚
标准使用液各0. 80ml , 分别置于10. 0ml 比色管中,
加入几滴N aOH ( pH = 10) , 此时硝基酚已成为硝
基酚钠, 加水稀释至刻度, 以水为空白, 用紫外可见
分光光度计, 在波长200nm～500nm 范围内扫描, 绘
制吸收曲线, 确定几种硝基酚钠的最大吸收波长〔6〕。
1. 2. 2 标准曲线的绘制
( 1) 对硝基酚钠标准曲线的绘制
分别移取0. 00ml、0. 10ml、0 . 20ml、0. 30ml、0.
40ml、0. 50ml、0. 60ml 对硝基酚标准溶液各两份,
分别放入10. 0ml 比色管中, 向第一份中加入几滴0.
1mol/ L 盐酸, 向第二份中加入几滴1mol/ L 氢氧化
钠溶液加水稀释至标线, 混Ks4XDTA5MT匀。以酸性标样作参比, 以碱性标样作测定样, 用1cm 石英比色皿, 在波长
400nm 处, 测定各自的吸光度〔6〕〔8〕〔11〕。以浓度为横坐标, 吸光度为纵坐标, 绘制标准曲线, 得浓度校正方
程( 1) 。
( 2) 邻硝基酚钠标准曲线的绘制
分别移取0. 00ml、0. 50ml、1 . 00ml、1. 50ml、2.
00ml、2. 50ml、3. 00ml 邻硝基酚标准溶液各两份,
分别放入10. 0ml 比色管中, 向第一份中加入几滴0.
1mol/ L 的盐酸, 向第二份中加入几滴1mol / L 的氢
氧化钠溶液加水稀释至标线, 密塞、混匀。以酸性标
样作参比, 以碱性标样作测定样, 在波长414nm 处用
1cm 石英比色皿测定各自的吸光度〔6〕〔12〕。以浓度为
横坐标, 吸光度为纵坐标绘制标准曲线, 得浓度校正
方程( 2) 。
( 3) 2, 4- 二硝基酚钠标准曲线的绘制
分别移取0. 00ml、0. 40ml、0 . 80ml、1. 20ml、1.
60ml、2. 00ml、2. 50ml 对硝基酚标准溶液各两份,
分别放入10. 0ml 比色管中, 向第一份中加入几滴0.
1mol/ L 的盐酸, 向第二份中加入几滴1mol / L 的氢
氧化钠溶液加水稀释至标线, 密塞、混匀。以酸性标
样作参比, 以碱性标样作测定样, 在波长378nm 处用
1cm 石英比色皿测定各自的吸光度〔6〕〔9〕。以浓度为
横坐标, 吸光度为纵坐标绘制标准曲线, 得浓度校正
方程( 3) 。
( 4) 苯酚钠标准曲线的绘制
分别移取0. 00ml、0. 10ml、0. 20ml、0 . 30ml、0.
40ml、0 . 50ml、0 . 60ml 苯酚标准溶液各两份, 分别
放入10. 0ml 比色管中, 向第一份中加入几滴0.
1mol / L 的盐酸, 向第二份中加入几滴1mol / L 的氢
氧化钠溶液加水稀释至标线, 密塞、混匀。以酸性标
样作参比, 以碱性标样作测定样, 在波长233nm 处用
1cm 石英比色皿测定各自的吸光度〔5〕。以浓度为横
坐标, 吸光度为纵坐标绘制标准曲线, 得浓度校正方
程( 4) 。
1. 2. 3 含酚试样的测定
1. 2. 3. 1 紫外吸收光谱法( UV 法)
取含酚试样两份, 一份酸化作为参比, 另一份碱
化作测定样, 在选定的波长处测定吸光度, 根据浓度
校正方程( 4) 计算水样中总酚含量( mol / L ) 。
1. 2. 3. 2 4- 氨基氨替比林( 4- A A P 法)
4- 氨基氨替比林分光光度法测定水中挥发酚
含量是国家标准方法。它是根据酚类化合物在pH
= 10. 0±0. 2 的介质中, 在铁氰化钾的存在下, 与4
- 氨基氨替比林反应, 生成橙红色的吲哚酚氨替比
林染料, 在510nm 处有最大吸收峰〔3〕〔10〕。
显色反应受酚环上取代基的种类、位置、数目等
影响, 邻硝基酚、对硝基酚、2, 4- 二硝基酚与4- 氨
基氨替比林不产生显色反应。这主要是因为硝基阻
止了酚类氧化成醌型结构。因此本文主要讨论, 用4
- 氨基氨替比林分光光度法测定苯酚的含
量〔2〕〔3〕〔10〕。
( 1) 标准曲线
分别移取0. 00ml、0. 10ml、0. 20ml、0. 30ml、0.
40ml、0. 50ml 苯酚标准使用液各一份, 分别放入10.
0ml 比色管中, 加2- 3 滴缓冲溶液, 摇匀; 加3- 4 滴4-
氨基氨替比林溶液, 摇匀; 再加3- 4 滴铁氰化钾溶液, 再
加水至标线, 摇匀, 放置10min 立即于510nm 波长处, 以
水为参比测定其吸光度。以浓度为横坐标, 吸光度为纵坐标, 绘制标准曲线〔4〕。得到浓度校正方程( 5) : A = 11. 664C- 0. 0017, R 2= 0. 9998。
( 2) 对照试验
分别移取0. 15ml、0. 25ml、0. 45ml、0. 55ml 苯
酚标准溶液( C = 1. 105mmol / L ) 各两份, 分别置于
10. 0ml 比色管中, 向第一份中加入几滴0. 1mol / L
盐酸, 向第二份中加入几滴1mol / L 氢氧化钠溶液,
加水稀释至标线, 混匀。以酸性标样作参比, 以碱性
标样作测定样, 在波长233nm 处, 用1cm 比色皿, 分
别测定吸光度。根据浓度校正方程( 4) 计算相应的浓
12 内蒙古石油化工2008 年第19 期度。
分别移取0. 15ml、0. 25ml、0. 45ml、0. 55ml 苯
酚标准使用液( C = 1. 105mmol / L ) 各一份, 分别放
入10. 0mL 比色管中, 加2- 3 滴缓冲溶液, 摇匀; 加3
- 4 滴4- 氨基氨替比林溶液, 摇匀; 加3- 4 滴铁氰
化钾溶液, 加水至10ml 标线, 摇匀, 放置10min。立即
于510nm 波长处, 以水为参比测定其吸光度〔4〕。根据
浓度校正方程( 5) 计算相应的浓度。
2 结果与讨论
2. 1 测定波长的确定
4 种硝基酚在水溶液和碱性介质中的最大吸收
波长见表1。
表1 4 种硝基酚及其钠盐的最大吸收波长( nm)
对硝基酚邻硝基酚2, 4- 二硝基酚苯酚
硝基酚314 278 261 211
钠盐400 414 378 233
从表1 可以看出, 在碱性介质中, 4 种硝基酚已
成为硝基酚钠, 其最大吸收峰发生了红移, 且吸收峰
强度增加, 特征性强、灵敏度高。
2. 2 标准曲线及线性范围
4 种硝基酚钠的标准曲线及线性范围, 见图1～
图4。
从图1～图4 可以看出, 对硝基酚钠的线性范围
在0. 051～0. 51mmol / L , 邻硝基酚钠线性范围0～0.
2561mmol / L , 2, 4- 二硝基酚钠线性范围在0～0.
0549mmol / L , 苯酚钠线性范围在0～0. 0663mmol/
L 。
2. 3 准确度与精密度
2. 3. 1 对硝基酚钠的准确度和精密度
表2 不同浓度的对硝基酚钠测定结果
吸光度0. 206 0. 197 0. 204 0. 204 0. 208 0. 197
浓度
( mol/ L )
0. 01045 0. 00999 0. 01035 0. 01035 0. 01056 0. 01004
吸光度0. 616 0. 599 0. 593 0. 623 0. 597 0. 623
浓度
( mol/ L )
0. 03184 0. 03095 0. 03064 0. 0322 0. 03085 0. 0322
分别移取0. 10ml、0. 30ml 对硝基酚( C = 1.
0302mmol / L ) 各6 份, 稀j?猍j?skj?释至10. 0ml, 浓度分别为0. 01030mmol / L 、0. 03091mmol / L 分别测定其吸光
度, 根据浓度校正方程( 1) 计算相应的浓度, 结果见
表2。
不同浓度的对硝基酚钠水样, 6 次平行测定结
果见表3。
表3 对硝基酚的准确度及精密度
配制浓度
( mol / L )
测得浓度
均值( mol/ L )
相对误差
( %)
标准偏差
S
相对标准
偏( %)
t 值
0. 01030 0. 01029 - 0. 1 0. 00023 2. 2 0. 13
0. 03091 0. 03145 0. 8 0. 00072 2. 3 1. 85
P = 0. 95, f = 5 时t= 2. 57。用t 检验法检查发
现, 对硝基酚的样本平均值与标准值之间无显著性
差异。结果表明, 本法具有较好的准确度和精密
度〔13〕。
2008 年第19 期侍霞用紫外吸收光谱法测定水中的总酚 13 2. 3. 2 邻硝基酚钠准确度和精密度
分别移取0. 50ml、1 . 50ml、2 . 50ml 邻硝基酚钠
( C= 1. 0245mmol/ L ) 各6 份, 稀释至10. 0ml , 浓度分
别为0. 05122mmol / L 、0. 1537mmol / L 、0.
2561mmol / L 分别测定其吸光度, 根据浓度校正方
程( 2) 计算相应的浓度, 结果见表4。
表4 不同浓度的邻硝基酚测定结果
吸光度0. 09 0. 091 0. 089 0. 089 0. 089 0. 092
浓度(mol / L ) 0. 0504 0. 0510 0. 0498 0. 0498 0. 0498 0. 0516 吸光度0. 264 0. 257 0. 268 0. 268 0. 257 0. 264
浓度(mol / L ) 0. 1520 0. 1479 0. 1543 0. 1543 0. 1479 0. 1520 吸光度0. 436 0. 441 0. 435 0. 422 0. 434 0. 424
浓度(mol / L ) 0. 2524 0. 2553 0. 2518 0. 2442 0. 2512 0. 2454 不同浓度的邻硝基酚钠水样, 6 次平行测定结
果见表5。
表5 邻硝基酚的准确度及精密度
配制浓度
( mol/ L )
测得浓度
均值( mol/ L )
相对误差
( %)
标准偏差
S
相对标准
偏差( %)
t 值
0. 051 23 0. 05042 - 1. 7 0. 00085 1. 7 2. 29
0. 1537 0. 1514 - 1. 4 0. 0033 2. 1 1. 71
0. 2561 0. 2500 - 1. 7 0. 0059 2. 4 2. 52
P= 0. 95, f = 5 时t= 2. 57。〔13〕用t 检验法检查
发现, 邻硝基酚的样本平均值与标准值之间无显著
性差异。结果表明, 本法具有较好的准确度和精密
度。
2. 3. 3 2, 4- 二硝基酚钠准确度和精密度
分别移取0. 20ml、1. 50ml、2. 50ml 2, 4- 二硝
基酚钠( C = 0. 2196mmol / L ) 各6 份, 稀释至10.
0ml , 浓度分别为0. 004392mmol/ L 、0. 03294mmol/
L 、0. 0549mmol / L 分别测定其吸光度, 根据浓度校
正方程( 3) 计算相应的浓度, 结果见表6。
表6 不同浓度的2, 4- 二硝基酚测定结果
吸光度0. 060 0. 061 0. 062 0. 063 0. 061 0. 062
浓度(mol / L ) 0. 00422 0. 00430 0. 00439 0. 00447 0. 00430 0. 00439 吸光度0. 398 0. 414 0. 413 0. 400 0. 410 0. 412
浓度(mol / L ) 0. 0323 0. 0336 0. 0335 0. 0335 0. 0333 0. 0335
吸光度0. 665 0. 655 0. 665 0. 674 0. 633 0. 666
浓度(mol / L ) 0. 0545 0. 0536 0. 0545 0. 0552 0. 0518 0. 0545 不同浓度的2, 4- 二硝基酚水样, 6 次平行测定
结果见表7。
表7 2, 4- 二硝基酚的准确度及精密度
配制浓度
( mol/ L )
测得浓度
均值( mol/ L )
相对误差
( %)
标准偏差
S
相对标准
偏差( %)
t 值
0. 004 39 0. 00434 - 1. 1 0. 000087 2. 0 1. 38
0. 0329 0. 0331 0. 5 0. 00058 1. 8 0. 67
0. 0549 0. 0540 - 0. 5 0. 00137 2. 5 1. 58
P= 0. 95, f = 5 时t= 2. 57。〔13〕用t 检验法检查
发现, 2, 4- 二硝基酚的样本平均值与标准值之间无
显著性差异。结果表明, 本法具有较好的准确度和精
密度。
2. 3. 4 苯酚准确度和精密度
分别移取0. 10ml、0. 30ml、0. 50ml 邻硝基酚钠
( C= 1. 105mmol / L ) 各6 份, 稀释至10. 0ml , 浓度分
别为0. 01105mmol/ L 、0. 05525mmol / L 、0.
05525mmol / L 分别测定其吸光度, 根据浓度校正方
程( 4) 计算相应的浓度, 结果见表8。
表8 0. 1ml 0. 01105mmol/ L 的苯酚
吸光度0. 123 0. 119 0. 117 0. 118 0. 117 0. 12
浓度( mol/ L) 0. 01152 0. 01113 0. 01095 0. 01104 0. 01095 0. 01123 吸光度0. 347 0. 352 0. 345 0. 348 0. 347 0. 341
浓度( mol/ L) 0. 03284 0. 03331 0. 03265 0. 03293 0. 03284 0. 03226 吸光度0. 58 0. 574 0. 579 0. 581 0. 579 0. 582
浓度( mol/ L) 0. 05501 0. 05444 0. 05492 0. 05511 0. 05492 0. 05520 对高中低含量的苯酚水样, 6 次平行测定结果
见下表。
表9 苯酚的准确度、精密度实验
配制浓度
(mol / L )
测得浓度
均值( mol/ L)
相对误差
( %)
标准偏差
S
相对标准
偏差(%)
t 值
0. 01105 0. 01114 0. 7 0. 00022 1. 9 1. 01
0. 03315 0. 03280 - 1. 0 0. 00034 1. 05 2. 49
0. 05325 0. 05493 - 0. 5 0. 00027 0. 48 1. 57
P = 0. 95, f = 5 时t= 2. 57。用t 检验法检查发
现: 苯酚的样本平均值与标准值之间无显著性差异。
结果表明, 本法具有较好的准确度和精密度〔13〕。
2. 4 加标回收试验
以无酚水为空白, 加入一定量的硝基酚钠标准
溶液进行回收试验, 结果见表10〔10〕。
表10 4 种硝基酚钠加标回收试验结果( mol / L )
对硝基酚浓度0. 01545 0. 02576 0. 03606 0. 04636 0. 05 151
测定结果0. 01625 0. 02699 0. 03617 0. 04618 0. 05 275
回收率( %) 105 105 100 99 10 2
邻硝基酚浓度0. 06147 0. 08196 0. 1229 0. 1434 0. 1844
测定结果0. 06327 0. 08135 0. 1310 0. 1444 0. 1841
回收率( %) 102 99 106 100 99
2, 4- 二硝基酚浓度0. 01098 0. 01318 0. 02196 0. 03074 0. 03 294
测定结果0. 01053 0. 01327 0. 02398 0. 03146 0. 03 345
回收率( %) 96 101 109 102 10 1
苯酚浓度0. 016575 0. 02763 0. 03868 0. 04973 0. 05 525
测定结果0. 01704 0. 02693 0. 03893 0. 04844 0. 05 482
回收率( %) 102 97 100 97 99
从表10 可以看出, 对硝基酚钠样品的回收率在
99%～105%, 邻硝基酚钠样品的回收率在99% ～
106% , 2, 4- 二硝基酚钠样品的回收率在96% ～
109% , 苯酚钠样品的回收率在97% ～102%, 均满足
14 内蒙古石油化工2008 年第19 期样品分析的要求。
2. 5 含酚试样测定结果
两种方法测定结果见表11。
表11 两种方法测定结果( mol/ L )
试样浓度0. 01658 0. 02763 0. 04973 0. 05525
UV 法0. 01628 0. 02722 0. 04921 0. 05492
4- AA P 法0. 01640 0. 02755 0. 04941 0. 05515 用4- A A P 法及本法测定不同样品中的酚, 将
测定的结果用F 检验法进行检验〔7〕。
S ( UV 法) = 0. 000461, S ( 4 - A A P ) = 0. 000224, F= 4. 22。当f 大= 3, f 小= 3 时, 从文献〔13〕中查得F= 9. 28> 4. 22。结果表明, 两种方法的测定
值之间无显著性差异。
3 结论
紫外吸收光谱法测定水中的总酚, 为保证准确
度是以同一个水样酸化后作参比液, 碱化后作测定
液, 在选定的波长处进行测定, 该方法可测定含酚量
较高的水样。与4- A A P 法相比具有以下的优点:
( 1) 本法操作简单, 不需要显色剂, 分析成本低,
易于实现自动化分析。
( 2) 分析时所用样品少, 分析过程中不需要显
色, 简化了操作手续, 提高了分析速度。
( 3) 4- 氨基氨替比林溶液不稳定容易变质, 紫
外吸收光谱法可使用稳定而廉价的试剂, 避免了由
于试剂变质而造成的浪费。
( 4) 本法对于生活水, 轻度污染水及工业废水都
能进行测定, 扩大了对酚的测定范围。
( 5) 本法对于硝基酚类也能进行测定, 所测得的
酚含量结果更加准确可靠。
〔参考文献〕
[ 1] 魏振宏. 紫外分光光度法直接测定废水及污染
水中酚[ J ] . 学术园地, 2005, 1: 40- 41.
[ 2] 吴国林. 水污染的监测与控制[ M] . 北京: 科学
出版社, 2003. 131- 137.
[ 3] 奚旦立, 孙裕生, 刘秀英. 环境监测( 第三版) [ M] . 北京: 高等教育出版社, 1994, 119 -
120.
[ 4] 刘淑荣. 4- 氨基氨替比林直接光度法测定废
水中挥发酚的改进[ J ] . 福建分析测试, 2005,
14( 1) : 2128- 2129.
[ 5] 王乃岩, 毕卫东. 水中总酚量的紫外分光度法
的测定[ J ] . 环境监测管理与技术, 1994, 6
( 2) : 36- 38.
[ 6] 张剑荣, 戚苓, 方惠群等. 仪器分析实验[ M] . 北京: 科学出版社, 1999. 132- 133.
[ 7] 章鸾. 紫外分光光度法检测污水中的酚[ J ] . 嘉兴学院学报, 2002, 14( 6) : 30- 31.
[ 8] 吕成军, 魏文义, 李成华. 分光光度法测定废水中对硝基酚的含量[ J ] . 辽宁省交通高等专科
学校学报, 2004 , 6( 3) : 56- 57.
[ 9] 陈渊, 谢祖芳. 树脂相分光光度法测定水中痕
量2, 4- 二硝基苯酚[ J ] . 应用化工, 2004, 33
( 4) : 46- 48.
[ 10] 侯丽. 紫外差值分光光度法测定水中挥发酚
含量[ J ] . 环境科学与技术, 2001, 11: 34 -
35.
[ 11] 郭坤梅, 邓友军. 紫外分光光度法测定对硝基
苯酚的适宜条件的探讨[ J ] . 环境污染与防
治, 1998, 20( 1) : 47- 48.
[ 12] 刘国珍, 于力. 紫外分光光度法分别测定对
位、邻位硝基酚[ J ] . 化工给排水设计, 1996,
4: 49- 51.
[ 13] 武汉大学. 分析化学( 4 版) [ M] . 北京: 高等教育出版社, 1998, 242- 255.
思考题与练习题 1.有机化合物分子中电子跃迁产生的吸收带有哪几种类型？各有什么特点？在分析上较有实际 应用的有哪几种类型？ 2.无机化合物分子中电子跃迁产生的吸收带有哪几种类型？何谓配位场跃迁？请举例加以说 明。 3.采用什么方法可以区别n－π*和π－π*跃迁类型？ 4.何谓朗伯－比耳定律(光吸收定律)?数学表达式及各物理量的意义如何？引起吸收定律偏离 的原因是什么? 5.试比较紫外可见分光光度计与原子吸收分光光度计的结构及各主要部件作用的异同点。 6.试比较常规的分光光度法与双波长分光光度法及导数分光光度法在原理及特点是有什么差 别。 7. 分子能发生n－σ*跃迁，为227nm(ε为900)。试问：若在酸中测量时，该吸收峰会怎样变化？为什么？ 答案: n－σ*跃迁产生的吸收峰消失。 8. 某化合物的为305nm，而为307nm。试问：引起该吸收的是n－π*还是π－π*跃迁？ 答案:为π－π*跃迁引起的吸收带。 9.试比较下列各化合物最大吸收峰的波长大小并说明理由。 (a) (b) (c) (d) 答案: d > c > a > b。 10.若在下列情况下进行比色测定，试问：各应选用何种颜色的滤光片？(1) 蓝色的Cu(Ⅱ)－NH3 配离子；
(2) 红色的Fe(Ⅲ)－CNS－配离子； (3) Ti(Ⅴ)溶液中加入H2O2形成黄色的配离子。 答案: (1)黄色；（2）蓝绿色；（3）蓝色。 11. 排列下列化合物的及的顺序：乙烯、1,3,5－己三烯、1,3－丁二烯。 答案: 1,3,5－己三烯 > 1,3－丁二烯 > 乙烯。 12. 基化氧(4－甲基戊烯酮，也称异丙又丙酮)有两种异构体，其结构为：(A)CH2=C(CH3)－CH2－CO(CH3),(B)CH3－C(CH3)=CH－CO(CH3)。它们的紫外吸收光谱一个为235nm(ε为12000)，另一个在220nm以后无强吸收。判别各光谱属于何种异构体？ 答案:。 13.紫罗兰酮有两种异构体，α异构体的吸收峰在228nm(ε＝14000)，β异构体吸收峰在 296nm(ε＝11000)。该指出这两种异构体分别属于下面的哪一种结构。 (Ⅰ)(Ⅱ) 答案: I为β，II为α。 思考题与练习题 14.如何用紫外光谱判断下列异构体： (a) (b) (c) (d)
利用紫外吸收光谱检查物质的纯度 一、目的要求： (1)学习利用紫外吸收光谱检查物质纯度的原理和方法； (2)熟练紫外－可见分光光度计的操作。 二、基本原理： 由于物质的紫外吸收光谱是物质分子中生色团和助色团的贡献，也是物质整个分子的特征表现。例如具有л键电子的共轭双键化合物、芳香烃化合物等，在紫外光谱区都有强烈吸收，其摩尔吸光系数ε可达104～105数量级，这与饱和烃化合物有明显的不同。利用这一特性，可以很方便地检查纯饱和烃化合物中是否含有共轭双键、芳香烃等化合物杂质。 从图10－5的曲线1和曲线2可以看出由于乙醇中含有微量苯，故在波长230～270nm处出现B吸收带而纯乙醇在该波长范围内不出现苯的B吸收带。因此可利用物质的紫外吸收光谱的不同，检查物质的纯度。如图10－6所示的蒽醌和邻苯二甲酸酐的紫外吸收光谱，由于在蒽醌分子结构中的双键共轭体系大于邻苯二甲酸酐，因此，蒽醌的吸收带红移比邻苯二甲酸酐大，且吸收带形状及其最大吸收波长各不相同，由此得到鉴定。
三、实验试剂： 1、苯、蒽醌、邻苯二甲酸酐、甲醇、乙醇、正庚烷等均为分析纯 2、苯的正庚烷溶液和乙醇溶液 3、蒽醌的甲醇溶液（0.01g·100mL-1） 4、邻苯二甲酸酐的甲醇溶液（0.01g·100mL-1）。 四、实验步骤： 1、根据实验条件，将730型仪器按操作步骤（见本章10.3.3节）进行调节，若仪 器状态正常，即可测定各试液的紫外吸收光谱，如果测得紫外吸收光谱的吸收 峰为平头峰或太小，可适当改变试液浓度。 2、使用751G型分光光度计测定时，因751G型仪器无自动波长扫描及记录装置， 因此应先测定各试液在不同波长下的吸光度，然后绘制吸光度对波长的曲线， 即得紫外吸收光谱。测定时要求先间隔10nm测量一次吸光度，在峰值吸收附近，间隔逐步改为5nm、2nm、1nm、0.5nm等，以便较准确测绘紫外吸收光谱。五、数据记录与处理 浓度mg/L 吸光度 0 0.127 10 0.139 20 0.302 40 0.636 60 0.943 80 1.275
保健食品中总蒽醌的测定 1 仪器及试剂 1.1仪器 （1）分析天平（感量0.00001g）； （2）分光光度计（751型）； （3）水浴锅； （4）刻度吸管。 1.2试剂 1.2.1对照品：1，8-二羟基蒽醌（中国生物制品鉴定所）； 1.2.2 5%氢氧化钠—2%氢氧化铵混合碱液：10%氢氧化钠溶液与4%氢氧化铵溶液等量混合； 1.2.3标准品溶液：精密城区25mg 1，8—二羟基蒽醌对照品，置200ml容量瓶中，用乙醚溶解并稀释至刻度，摇匀，备用； 1.2.4氯仿； 1.2.5乙醚； 1.2.6 5N硫酸； 1.2.7蒸馏水。 2 测定步骤中 2.1标准曲线的绘制：精密量取上述标准溶液1ml、2ml、3ml、4ml、5ml，分别至于25ml容量瓶中，在水浴上挥净乙醚，放凉，分别加5%氢氧化钠—2%氢氧化铵混合碱液至刻度，摇匀，以5%氢氧化钠—2%氢氧化铵混合碱液为空白对照，在490nm下，以1cm比色杯测定吸光度，用回归法求标准曲线方程。 2.2供试品溶液的制备及总蒽醌含量的测定：取本品50粒，倾出内容物，精密称定供试品内容物3g，于250ml 烧瓶中，加5N硫酸45ml，直火加热水解2h，加入氯仿40ml，萃取3次（40ml，30ml，30ml），萃取液用蒸馏水洗涤2次（20ml，20ml），再用5%氢氧化钠—2%氢氧化铵混合碱液振摇萃取4次（30ml，20 ml ，20ml，20ml），合并萃取液，用氯仿洗涤数次至氯仿层无色，弃去氯仿层，用5%氢氧化钠—2%氢氧化铵混合碱液定容至100ml，摇匀，以5%氢氧化钠—2%氢氧化铵混合碱液为空白对照，在490nm下，以1cm比色杯测定吸光度，由线性方程计算即得供试品溶液的浓度。 2.3结果计算： C1（μg/ml）×5ml×100ml C2 =————————————×（μg/100mg） m ×10 C=C2×1×100(g/Kg) 式中 C：1kg分析样品中含蒽醌量（g） C2：100mg分析样品中含蒽醌量（μg） C1：由回归方程计算所得5ml容量瓶中蒽醌的浓度（μg/ml） M：所用分析样品的重量（g） 蒽醌类化合物按结构的不同可分成羟基蒽醌类、氧化蒽酚及蒽酚类、二蒽酮类。目前其提取方法主要采用溶剂提取法，如浸渍、渗漉、连续回流提取等方式，所用的溶剂主要有乙醇、甲醇、氯仿、乙醚、苯、石油醚、吡啶、丙酮、硫酸溶液、盐酸溶液及氢氧化钠、碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化铵等溶液。其含量测定方法有重量法、荧光法、比色法、极谱法、薄层扫描法、高效液相色谱法等，而单味植物药或其复方制剂中的蒽醌化合物含量，一般以大黄素或大黄酸、1，8-二羟基蒽醌为标准测定游离蒽醌或总蒽醌，结合蒽醌的量等于总蒽醌减去游离蒽醌。 1 比色法 根据蒽醌类及其苷大多数是黄色或橙红色的，羟基蒽醌能溶于碱溶液中而显红或紫红色；蒽酚和二蒽醌与碱液不显红色，只能呈黄色，需经氧化成羟基蒽醌后才与碱作用显红色；羟基蒽醌类因结构不同与醋酸镁的
五、紫外可见分子吸收光谱法(277题) 一、选择题( 共85题) 1、 2 分(1010) 在紫外－可见光度分析中极性溶剂会使被测物吸收峰( ) (1) 消失(2) 精细结构更明显 (3) 位移(4) 分裂 2、 2 分(1019) 用比色法测定邻菲罗啉－亚铁配合物时,配合物的吸收曲线如图1所示,今有a、b、c、d、e滤光片可供选用,它们的透光曲线如图2所示,您认为应选的滤光片为( ) 3、 2 分(1020) 欲测某有色物的吸收光谱,下列方法中可以采用的就是( ) (1) 比色法(2) 示差分光光度法 (3) 光度滴定法(4) 分光光度法 4、 2 分(1021) 按一般光度法用空白溶液作参比溶液,测得某试液的透射比为10%,如果更改参 比溶液,用一般分光光度法测得透射比为20% 的标准溶液作参比溶液,则试液的透 光率应等于( ) (1) 8% (2) 40% (3) 50% (4) 80% 5、 1 分(1027) 邻二氮菲亚铁配合物,其最大吸收为510 nm,如用光电比色计测定应选用哪一种 滤光片？( ) (1) 红色(2) 黄色(3) 绿色(4) 蓝色 6、 2 分(1074) 下列化合物中,同时有n→π*,π→π*,σ→σ*跃迁的化合物就是( ) (1) 一氯甲烷(2) 丙酮(3) 1,3-丁二烯(4) 甲醇 7、 2 分(1081) 双波长分光光度计的输出信号就是( ) (1) 试样吸收与参比吸收之差(2) 试样在λ1与λ2处吸收之差 (3) 试样在λ1与λ2处吸收之与(4) 试样在λ1的吸收与参比在λ2的吸收之差8、 2 分(1082) 在吸收光谱曲线中,吸光度的最大值就是偶数阶导数光谱曲线的( ) (1) 极大值(2) 极小值(3) 零(4) 极大或极小值 9、 2 分(1101) 双光束分光光度计与单光束分光光度计相比,其突出优点就是( ) (1) 可以扩大波长的应用范围(2) 可以采用快速响应的检测系统 (3) 可以抵消吸收池所带来的误差(4) 可以抵消因光源的变化而产生的误差
62 第15卷 第2期 2013 年 2 月 辽宁中医药大学学报 JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCM Vol. 15 No. 2 Feb .，2013 皮炎洗剂是我院自制剂，由大黄、黄芩、黄连 和苦参四味药等量组成，具有燥湿止痒的功效，临床上主要用于治疗夏季皮炎、急性湿疹、湿热、黄 水症等[1] 。皮炎洗剂主要含有蒽醌、 生物碱、黄酮等有效成分，本文选用紫外分光光度法，以大黄素和小檗碱为参照，对样品总蒽醌和总生物碱含量进行测定。 1 仪器与材料 高效液相色谱仪（LC 2130，上海天美集团）、色 谱柱：Diamonsil C 18（2） 5u 250 mm×4.6 mm、760MC 型双光束紫外分光光度计（上海精密科学仪器有限公司）、电子天平、旋转蒸发仪。 皮炎洗剂（医院自制剂），大黄素标准品（中国药品生物制品检定所，批号110756-200110），小檗碱标准品（中国药品生物制品检定所，批号110713-200911），乙醇、醋酸镁、磷酸二氢钾、浓硫酸均为分析纯。 2 实验方法与结果 2.1 总蒽醌含量测定方法[2-3] 2.1.1 标准溶液的制备 精密称取大黄素标准品11.2 mg，置100 mL 容 量瓶，加无水乙醇定容到刻度（112 μg/mL），备用。 2.1.2 供试液制备 精密称取皮炎洗剂10 mg，加入70%乙醇80 mL，加热回流提取2次，每次2 h，提取液合并水浴蒸干。取50 mg 残渣加蒸馏水溶解，定容至50 mL 容量瓶中，吸取4 mL 溶液加5 mL 1%乙酸镁乙醇溶液，无水乙醇定容至10 mL 容量瓶，即得。2.1.3 检测波长的选择 精密吸取大黄素标准品溶液和水1 mL，分别加入5 mL 1%醋酸镁乙醇溶液，无水乙醇定容至10 mL 容量瓶中，摇匀，静置显色30 min，在300~700 nm 波长范围内扫描，结果显示大黄素标准品于505 nm 处有最大吸收，以水为空白的对照液于此处无吸收，故选择505 nm 为测定波长。2.1.4 标准曲线制备 精密量取大黄素标准品溶液0.1、0.2、0.4、0.8、1.0、1.6 mL，同2.1.3项下操作，水为空白对照，在505 nm 波长处测定吸光度，以浓度（C）为横坐标，吸光度（A）为纵坐标，绘制标准曲线，当浓度分别为1.12、2.24、4.48、8.96、11.2、17.92μg/mL，吸光度分别为0.152、0.201、0.304、0.474、0.587、0.882。计算 皮炎洗剂中总蒽醌和总生物碱含量测定 王健明，蒋洁君，金燕，汪怡 （昆山市中医医院，江苏 昆山 215300） 摘 要：目的：建立总蒽醌含量的紫外分光光度和总生物碱含量的高效液相色谱测定方法。方法：以大黄素和 小檗碱为参照，采用显色反应和高效液相色谱法分别测定皮炎洗剂中总蒽醌和总生物碱含量。结果：皮炎洗剂中所含总蒽醌和总生物碱的吸收度与浓度呈现良好的线性关系。结论：紫外分光光度法和高效液相色谱法均灵敏、快速、准确、成本较低，适用于皮炎洗剂中总蒽醌和总生物碱的含量测定。 关键词：皮炎洗剂；大黄素；小檗碱；总蒽醌；总生物碱 中图分类号：R284.1 文献标志码：A 文章编号：1673-842X (2013) 02- 0062- 02 收稿日期：2012-08-21 基金项目：苏州药学会—常州四药临床药学科研基金项目（SYSD2010164）作者简介：王健明（1964-），男，江苏昆山人，副主任中药师，学士，研究方向：中药制剂。 Determination of Contents of Total Anthraquinones and Alkaloid in Piyan Lotion WANG Jianming，JIANG Jiejun，JIN Yan，WANG Yi （Kunshan Hospital of Traditional Chinese Medicine，Kunshan 215300，Jiangsu，China） Abstract ： Objective ：To determine the ultraviolet spectrophotometric method for the anthraquinones and high-performance liquid chromatography method for the alkaloid in Piyan Lotion. Method ：The contents of total anthraquinones and alkaloid in Piyan Lotion were measured by direct ultraviolet spectrophotomet and high-performance liquid chromatography method with the contents of emodin and berberine as the markers，respectively. The absorption values of the sample solution were measured at 505 nm and 345 nm，respectively. Result ：The absorptivities of anthraquinones and alkaloid were linearly correlated with concentrations，respectively. Conclusion ：Direct ultraviolet spectrophotometry and HPLC methods are accurate，sensitive，quick and have little cost and they can be used to determine total anthraquinones and alkaloid in Piyan Lotion. Key words ：Piyan Lotion ；archen ；berberine ；anthraquinones ；alkaloid
紫外-可见分光光度法 一、单项选择题 1．可见光的波长范围是 A、760~1000nm B、400~760nm C、200~400nm D、小于400nm E、大于760nm 2．下列关于光波的叙述，正确的是 A、只具有波动性 B、只具有粒子性 C、具有波粒二象性 D、其能量大小于波长成正比 E、传播速度与介质无关 3．两种是互补色关系的单色光，按一定的强度比例混合可成为 A、白光 B、红色光 C、黄色光 D、蓝色光 E、紫色光 4．测定Fe3+含量时，加入KSCN显色剂，生成的配合物是红色的，则此配合物吸收了白光中的 A、红光 B、绿光 C、紫光 D、蓝光 E、青光 5．紫外-可见分光光度计的波长范围是 A、200~1000nm B、400~760nm C、1000nm 以上 D、200~760nm E、200nm以下 6．紫外-可见分光光度法测定的灵敏度高，准确度好，一般其相对误差在 A、不超过±％ B、1%~5% C、5%~20%
D 、5%~10% E 、%~1% 7．在分光光度分析中，透过光强度（I t ）与入射光强度（I 0）之比，即I t / I 0称 为 A 、吸光度 B 、透光率 C 、吸光系数 D 、光密度 E 、 消光度 8．当入射光的强度（I 0）一定时，溶液吸收光的强度（I a ）越小，则溶液透过光的 强度（I t ） A 、越大 B 、越小 C 、保持不变 D 、等于0 E 、以 上都不正确 9．朗伯-比尔定律，即光的吸收定律，表述了光的吸光度与 A 、溶液浓度的关系 B 、溶液液层厚度的关系 C 、波长的关系 D 、溶液的浓度与液层厚度的关系 E 、溶液温度的关系 10．符合光的吸收定律的物质，与吸光系数无关的因素是 A 、入射光的波长 B 、吸光物质的性质 C 、溶 液的温度 D 、溶剂的性质 E 、在稀溶液条件下，溶液的浓度 11．在吸收光谱曲线上，如果其他条件都不变，只改变溶液的浓度，则最大吸收波长的位置和峰的 高度将 A 、峰位向长波方向移动，逢高增加 B 、峰位向短波方向移 动，峰高增加
实验一邻二氮菲分光光度法测定铁 一、实验目的 1、掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的原理和方法； 2、熟悉吸收曲线绘制及最大吸收波长选择； 3、学会标准曲线绘制及应用。 4、了解721型分光光度计的主要构造，并掌握其使用方法。 二、实验原理 邻二氮菲(phen)和Fe2+在pH3～9的溶液中，生成一种稳定的橙红色络合物Fe(phen) 32+，其lgK=21.3，κ 508 =1.1 × 104L·mol-1·cm-1，铁含量在0.1～6μg·mL-1范围内遵守比尔定律。其吸收曲线如下图所示。显色前需用盐酸羟胺或抗坏血酸将Fe3+全部还原为Fe2+，然后再加入邻二氮菲，并调节溶液酸度至适宜的显色酸度范围。有关反应如下： 2Fe3+ + 2NH 2OH·HC1＝2Fe2+ + N 2 ↑+ 2H 2 O + 4H+ + 2C1－ 图1-1 邻二氮菲一铁(Ⅱ)的吸收曲线 用分光光度法测定物质的含量，一般采用标准曲线法，即配制一系列浓度的标准溶液，在实验条件下依次测量各标准溶液的吸光度(A)，以溶液的浓度为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。在同样实验条件下，测定待测溶
液的吸光度，根据测得吸光度值从标准曲线上查出相应的浓度值，即可计算试样中被测物质的质量浓度。 三、仪器和试剂 1、仪器：721型分光光度计，50mL容量瓶，10mL吸量管，滴定管，洗瓶。 2、试剂：(1) 100ug·mL-1铁标准溶液； (2) 1.0×10-3mol·L-1铁标准溶液； (3) 100g·L-盐酸羟胺水溶液（新配）； (4) 1.5g·L-1邻二氮菲水溶液； (5) 1.0mol·L-1乙酸钠溶液； (6) 0.1mol·L-1氢氧化钠溶液。 四、实验步骤 1、显色标准溶液的配制 取6只 50 mL 容量瓶，并且对其编号(1-6号)。用吸量管依次加入 0,0.20,0.40,0.60,0.80,1.0 mL 100ug·mL-1铁标准溶液，分别加入1 mL 100g· L-盐酸羟胺溶液，摇匀后放置2 min，再各加入5 mL 1.0mol·L-1乙酸钠溶液和2mL 1.5g·L-1邻二氮菲水溶液，以水稀释至刻度，摇匀。 2、吸收曲线的绘制 在分光光度计上，用 lcm 吸收池，以试剂空的溶液(1号)为参比，在440-560 nm 之间，每隔 10 nm 测定一次待测溶液(5号)的吸光度A，以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸收曲线，从而选择测定铁的最大吸收波长。 3、显色剂用量的确定 取 7 只 50 mL 容量瓶，并且对其编号(1-7号)。各加入2 mL1.0×10-3mol·L-1铁标准溶液和1 mL100g·L-盐酸羟胺水溶液，摇匀后放置2 min，分别加入 0.20,0.40,0.60,0.80,1.0，2.0,4.0 mL1.5g·L-1邻二氮菲水溶液，再各加入5 mL 1.0mol·L-1乙酸钠溶液，以水稀释至刻度，摇匀。在分光光度计上，用 l cm 吸收池，在选定波长下，以水为参比溶液，测定以上七个溶液的吸光度。以显色剂邻二氮菲的体积 (mL) 为横座标，相应的吸光度为纵座标，绘制吸光度-显色剂用量曲线，确定显色剂的用量。
五、紫外可见分子吸收光谱法（277题) 一、选择题 ( 共８5题) 1．２分（101０） 在紫外－可见光度分析中极性溶剂会使被测物吸收峰( ） （１）消失（２) 精细结构更明显 (３）位移 (4）分裂 ２。 2 分（1019） 用比色法测定邻菲罗啉-亚铁配合物时，配合物的吸收曲线如图1所示,今有a、b、 c、ｄ、e滤光片可供选用,它们的透光曲线如图2所示,你认为应选的滤光片为 ( ） ３。 2 分 (１０20) 欲测某有色物的吸收光谱,下列方法中可以采用的是（ ) (1) 比色法 (2) 示差分光光度法 （３) 光度滴定法 (4）分光光度法 4。２分 (1021） 按一般光度法用空白溶液作参比溶液，测得某试液的透射比为10％,如果更改参 比溶液,用一般分光光度法测得透射比为 2０％的标准溶液作参比溶液,则试液的透 光率应等于( ) （1）８% （2) ４0％ (３) 5０％ (4）８０% 5. 1 分（１027) 邻二氮菲亚铁配合物，其最大吸收为 510 nm，如用光电比色计测定应选用哪一种 滤光片？（ ) （1）红色(2) 黄色 (3）绿色 (4) 蓝色 6. 2 分（1０74) 下列化合物中,同时有ｎ→π*,π→π*，σ→σ＊跃迁的化合物是( ) (1) 一氯甲烷 (2) 丙酮(3) 1,3-丁二烯（４) 甲醇 7． 2 分（1081) 双波长分光光度计的输出信号是 ( ） (1) 试样吸收与参比吸收之差 (２) 试样在λ1和λ２处吸收之差 （３) 试样在λ１和λ２处吸收之和 (４）试样在λ1的吸收与参比在λ２的吸收之差 8. ２分 (10８2) 在吸收光谱曲线中,吸光度的最大值是偶数阶导数光谱曲线的( ） (１) 极大值 (2) 极小值 (3) 零（4) 极大或极小值 ９。 2 分 (1101) 双光束分光光度计与单光束分光光度计相比,其突出优点是 ( ) (1) 可以扩大波长的应用范围 (2) 可以采用快速响应的检测系统
决明子中蒽醌类成分的含量测定 作者：张小梅，杨荣平，励娜，王宾豪，梁旭明 【关键词】紫外分光光度法；,,决明子；,,蒽醌 摘要：目的建立决明子中蒽醌类成分的含量测定方法。方法采用聚酰胺吸附纯化样品，醋酸镁显色，紫外分光光度法测定。结果在4.6~18.4 μg/ml 浓度范围内对照品1，8-二羟基蒽醌的吸收度与浓度线性关系良好，相关系数r ＝0.999 8。平均回收率为101.0％，RSD＝2.48％（n＝9）。结论该法快速， 灵敏，重现性好，能准确测定决明子中蒽醌类成分的含量。 关键词：紫外分光光度法；决明子；蒽醌 Determination of the Content of Anthraquinones in Semen Cassiae by Ultraviolet Spectrophotometry Abstract：ObjectiveTo estabish a method for the determination of the content of anthraquinones in Semen Cassiae.MethodsSample was purified by polyamide,colored with magnesium acetate and it's content was determined by ultraviolet spectrophotometry.Results The absorbency and concentration of 1，8-dihydroxy anthraquinone have good linearity in the range of 4.6~18.4 μg/ml(r＝0.999 8). The average recovery was 101.0%.ConclusionThe method is sensitive,reliable,reproducible and can be applied to determine anthraquinones in Semen Cassiae accurately. Key words：UV spectrophotometry; Semen Cassiae; Anthraquinones 决明子为豆科植物决明Cassia obtusifolia L.或小决明Cassia tora L.的干燥成熟种子。具有清肝明目、润肠通便之功效，为临床常用中药。其主要化学成分为蒽醌类化合物。本实验采用紫外分光光度法，首次采用聚酰胺树脂对其进行纯化，以醋酸镁乙醇溶液为显色剂，对决明子中结合蒽醌、总蒽醌类化合物进行了含量测定。现将结果报道如下。 1 仪器与材料 UV-1601紫外-可见分光光度计（日本岛津公司），AEG-45SM 电子天平（十万分之一，日本岛津公司），决明子（由本院生药室提供并鉴定），1，8-二羟基蒽醌( 中国药品生物制品检定所，批号：0829 9702)，聚酰胺（无锡光明化工有限公司），所用试剂均为分析纯〔重庆川东化工（集团）有限公司化学试剂厂〕。 2 方法与结果 2.1 对照品溶液的制备取1,8-二羟基蒽醌对照品适量，精密称定，加乙醇制成每毫升中含0.23 mg的溶液，即得。 2.2 供试品溶液的制备 2.2.1 总蒽醌供试品溶液的制备取本品粉末（过4号筛）约1 g，精密称定。置索氏提取器中，加乙醇100 ml回流提取至无色。提取液经减压回收后，残渣加浓度为1 mol/L盐酸溶液40 ml回流水解3 h，然后用120 ml氯仿分4次回流萃取，30 ml/次。合并氯仿萃取液并加适量蒸馏水洗至中性，回收氯
专业资料 值得拥有 一、选择题(共85题) 1. 2 分(1010) 在紫外-可见光度分析中极性溶剂会使被测物吸收峰 () (1) 消失 (2) 精细结构更明显 (3) 位移 (4) 分裂 2. 2 分(1019) 用比色法测定邻菲罗啉-亚铁配合物时 ,配合物的吸收曲线如图 1所示,今有a 、b 、 c 、 d 、 e 滤光片可供选用，它们的透光曲线如图 2所示，你认为应选的滤光片为 () 3. 2 分(1020) 欲测某有色物的吸收光谱，下列方法中可以采用的是 () (1) 比色法 (2) 示差分光光度法 (3)光度滴定法 (4) 分光光度法 4. 2 分(1021) 按一般光度法用空白溶液作参比溶液，测得某试液的透射比为 10% ,如果更改参 比溶液，用一般分光光度法测得透射比为 20%的标准溶液作参比溶液，则试液的透 光率应等于 () (1) 8% (2) 40% (3) 50% ⑷ 80% 5. 1 分(1027) 邻二氮菲亚铁配合物，其最大吸收为 510 nm ,如用光电比色计测定应选用哪一种 滤光片？ () (1)红色 (2) 黄色 (3) 绿色 (4) 蓝色 6. 2 分(1074) 下列化合物中，同时有 n →d ， τ→d , C → 附录AIII （标准的附录） 总蒽醌衍生物的测定 1 材料与方法 1.1试剂与仪器 无水乙醚、盐酸、冰乙酸、氢氧化钠、氨水均为分析纯，蒸馏水 标准对照溶液：称取于105℃干燥2小时的1,8-二羟基蒽醌27.5 mg置于200 mL 容量瓶中，加少量冰乙酸溶解，用无水乙醚定容至刻度，混匀，该溶液1.00 mL 含1,8-二羟基蒽醌0.138 mg。 混合酸溶液：25%盐酸+冰乙酸=2+18 混合碱液： 10%氢氧化钠+4%的氨水=1+1 2501P紫外分光光度计 1.2 方法 1.2.1标准曲线绘制 精密吸取标准对照溶液0.00mL、0.25mL、0.50 mL、1.00 mL、2.00 mL、3.00 mL、4.00 mL、5.00 mL至25mL比色管中，水浴挥去乙醚，加混合碱液溶解并定容至刻度，摇匀，放置30分钟，以混合碱溶液为空白，1cm比色杯，于525nm比色测定吸光度，绘制标准曲线，计算曲线回归方程。 1.2.2 样品测定 精密称取25mg样品，置于100 mL平底烧瓶中，加混合酸溶液6.0mL，于沸水浴回流15分钟，放冷，加乙醚30 mL提取，提取液通过脱脂棉滤入分液漏斗中，继续用乙醚洗涤残渣2次，每次5.0mL，残渣再加4.0 mL混合酸溶液，于沸水浴回流15分钟，放冷，加乙醚20提取，并用乙醚洗涤残渣2次，每次5.0mL，过滤合并提取液，提取液用水30mL，20mL洗2次，弃去水洗液，乙醚层再加混合碱液50mL，20mL，20mL提取3次，合并碱提取液，置于100 mL容量瓶中，用混合碱液定容至刻度，混匀，放置30分钟后，以混合碱溶液为空白，1cm比色杯，于525nm比色测定吸光度。 1.3 计算公式： C×100×1000×100 X= m×1000×1000 1 第二章、紫外可见分子吸收光谱法 一、选择题( 共20题) 1. 2 分 在吸收光谱曲线中，吸光度的最大值是偶数阶导数光谱曲线的( ) (1) 极大值(2) 极小值(3) 零(4) 极大或极小值 2. 2 分 在紫外光谱中，λmax最大的化合物是( ) 3. 2 分 用实验方法测定某金属配合物的摩尔吸收系数ε，测定值的大小决定于( ) (1) 配合物的浓度(2) 配合物的性质 (3) 比色皿的厚度(4) 入射光强度 4. 2 分 1198 有下列四种化合物已知其结构，其中之一用UV 光谱测得其λmax为302nm，问应是哪种化合物？( ) CH 3CH CHCOCH 3 CH 3CH 3(4)(3) (2) Br O HO O CH 3 3 CH 3(1) 5. 5 分 下列四种化合物中,在紫外光区出现两个吸收带者是 ( ) (1)乙烯 (2)1,4-戊二烯 (3)1,3-丁二烯 (4)丙烯醛 6. 2 分 助色团对谱带的影响是使谱带 ( ) (1)波长变长 (2)波长变短 (3)波长不变 (4)谱带蓝移 7. 5 分 对化合物 CH 3COCH=C(CH 3)2的n — *跃迁,当在下列溶剂中测定,谱带波长最短的 是 ( ) (1)环己烷 (2)氯仿 (3)甲醇 (4)水 8. 2 分 紫外-可见吸收光谱主要决定于 ( ) (1) 分子的振动、转动能级的跃迁 (2) 分子的电子结构 (3) 原子的电子结构(4) 原子的外层电子能级间跃迁 9. 1 分 下面哪一种电子能级跃迁需要的能量最高? ( ) (1) σ→σ*(2) n→σ * (3) π→π* (4) π→σ* 10. 2 分 化合物中CH3--Cl在172nm有吸收带,而CH3--I的吸收带在258nm处,CH3--Br 的吸收 带在204nm ,三种化合物的吸收带对应的跃迁类型是( ) (1) σ→σ*(2) n→π* (3) n→σ * (4)各不相同 11. 2 分 某化合物在乙醇中λmax乙醇=287nm,而在二氧六环中λmax二氧六环=295nm，该吸收峰的跃迁类型是（） (1) σ→σ* (2) π→π* (3) π→σ* (4) π→π* 12. 2 分 一化合物溶解在己烷中,其λmax己烷=305 nm，而在乙醇中时，λ乙醇=307nm，引起该吸收的电子跃迁类型是( ) (1) σ→σ * (2)n→π * (3) π→π* (4) n→σ* 13. 2 分 紫外吸收光谱法测定双组分混合物 一、实验目的 1、 掌握单波长双光束紫外可见分光光度计的使用。 2、 学会用解联立方程组的方法，定量测定吸收曲线相互重叠的二元混合物。 二、方法原理 根据朗伯—比尔定律，用紫外--可见分光光度法很容易定量测定在此光谱区有吸收的单一成分。由两种组分组成的混合物中，若彼此都不影响另一种物质的光吸收性质，可根据相互间光谱重叠的程度，采用相对的方法来进行定量测定。如：当两组分吸收峰部分重叠时，选择适当的波长，仍可按测定单一组分的方法处理；当两组分吸收峰大部分重叠时（见图1），则宜采用解联立方程组或双波长法等方法进行测定。 图1 高锰酸钾、重铬酸钾标准溶液吸收曲线 解联立方程组的方法是以朗伯--比尔定律及吸光度的加和性为基础，同时测定吸收光谱曲线相互重叠的二元组分的一种方法。 从图2可看出，混合组分在λ1处的吸收等于A 组分和B 组分分别在λ1处的吸光度之和A A+B λ1 ，即： A A+B λ1 = κA λ1bc A + κB λ1bc B 同理，混合组分在λ2处吸光度之和A A+B λ2 应为： A A+B λ2 = κA λ2bc A + κB λ2bc B 若先用A 、B 组分的标样，分别测得A 、B 两组分在λ1和λ2处的摩尔吸收系数κA λ1、κA λ2和κB λ 1 、κB λ2；当测得未知试样在λ1和λ2的吸光度A A+B λ1和A A+B λ2后，解下列二元一次方程组： A A+B λ1 = κA λ1 b c A + κB λ1 b c B A A+Bλ2 = κAλ2 b c A + κBλ2 b c B 即可求得A、B两组分各自的浓度c A和c B。 c A= (A A+Bλ1 ·κBλ2 - A A+Bλ2 ·κBλ1) / ( κAλ1 ·κBλ2 - κAλ2 ·κBλ1) c B= (A A+Bλ1 - κAλ1 · c A) /κBλ1 一般来说，为了提高检测的灵敏度，λ1和λ2宜分别选择在A、B两组分最大吸收峰处或其附近。 图2高锰酸钾、重铬酸钾标准溶液及混合溶液的吸收曲线 三、仪器和试剂 1．紫外可见分光光度计（UV/VIS 916型）；1cm比色皿； 2．容量瓶、移液管、烧杯； 3．0.0200mol/L KMnO4标准溶液（其中含H2SO4 0.5mol/L，含KIO4 2g/L）； 4．0.0200mol/L K2Cr2O7标准溶液（其中含H2SO4 0.5mol/L，含KIO4 2g/L）。 四、实验步骤 1．分别吸取一定量的0.0200mol/L K2Cr2O7标准溶液，稀释配制成浓度为0.0008 mol/L、0.0016 mol/L、0.0024 mol/L、0.0032 mol/L、0.0040 mol/L的系列标准溶液。编号1~5。 2．分别吸取一定量的0.0200mol/L KMnO4标准溶液，稀释配制成浓度为0.0008 mol/L、0.0016 mol/L、0.0024 mol/L、0.0032 mol/L、0.0040 mol/L的系列标准溶液。编号6~10。 3．按照分光光度计操作规程，开启仪器。 4．绘制标准溶液在375～625nm围的吸收光谱图，找到最大吸收波长（λ1和λ2）。并测定它们在最大吸收波长（λ1和λ2）处的吸光度。 操作步骤： 4.1 波长扫描(定性) A．用去离子水作为空白，做基线； 紫外吸收光谱测定蒽醌试样中蒽醌的含量 一、[实验目的及要求] 1．学习应用紫外吸收光谱进行定量分析方法及ε值的测定方法； 2．掌握测定粗蒽醌试样时测定波长的选择方法。 二、[实验原理] 利用紫外吸收光谱进行定量分析时，同样须借助朗伯—比耳定律，而选择合适的测定波是紫外吸收光谱定量分析的重要环节。在蒽醌粗品中含有邻苯二甲酸酐，它们的紫外吸收光谱如下。 图1 蒽醌(曲线1)和邻苯二甲酸酐(曲线2)在甲醇中的紫外吸收光谱 由于在葸醌分子结构中的双键共轭体系大于邻苯二甲酸酐，因此蒽醌的吸收峰红移比邻苯二甲酸酐大，且两者的吸收峰形状及其最大吸收波长各不相同，蒽醌在波长251 nm处有一强吸收峰（κ=4.6×104L·moI-1·cm-1），在波长323 nm处有一中等强度的吸收峰（κ=4.7×103L·moI-1·cm-1），而在25 l nm波长附近有一邻苯二甲酸酐的强烈吸收峰λmax（κ=3.3×104L·moI-1·cm-1），为避开其干扰，选用323 nm处作为测定蒽醌的工作波长。由于甲醇在250—350nm无吸收干扰，因此可用甲醇为参比溶液。 κ是衡量吸光度定量分析方法灵敏度的重要指标，可利用求标准曲线斜率的方法求得。 三、[实验仪器及用品] 1、仪器：各种类型紫外一可见分光光度计 2、试剂： （1）蒽醌、甲醇、邻苯二甲酸酐。 （2）蒽醌试样。 （3）4．0 g/L蒽醌标准贮备液准确称取0．400 0 g蒽醌置于100 mL烧杯中，用甲醇溶解后，转移到100 mL容量瓶中，以甲醇稀释至刻度，摇匀。 （4）0．040 0 g·L‘蒽醌昆标准溶液吸取1．0 mL上述蒽醌贮备液于100 mL容量瓶中， 实验八紫外吸收光谱测定蒽醌 粗品中蒽醌的含量和摩尔吸收系数ε 实验目的 1．学习应用紫外吸收光谱进行定量分析方法及ε的测定方法；2．掌握测定粗蒽醌试样时测定波长的选择方法。 基本原理 利用紫外吸收光谱进行定量分析，同样须借助郎伯—比耳定律，而选择合适的测定波长是紫外吸收光谱定量分析的重要环节。在蒽醌粗品中含有邻苯二甲酸酐，它们的紫外吸收光谱如图10-6所示， 图10-6 蒽醌和邻苯二甲酸酐的紫外线吸收光谱 恩醌在波长251nm处有一强烈吸收蜂（ε 4.6×104），在波长323nm 处有一中等强度的吸收蜂（ε 4.7×103）。若考虑测定灵敏度，似应选择251nm作为测定恩醌的波长，但是在251nm波长附近有一邻苯二甲酸酐的强烈吸收峰λmax224nm（ε 3.3×104）,测定 将受到严重干扰。而在323波长处邻苯二甲酸酐却无吸收，为此选用323nm波长作为蒽醌定量分析的测定波长更为合适。 摩尔吸光系数ε是吸收光度分析中的一个重要参数，在吸收蜂的最大吸收波长处的ε，既可用于定性鉴定，也可用于衡量物质对光的吸收能力，且是衡量吸光度定量分析方法灵敏程度的重要指标，其值通常利用求取标准曲线斜率的方法求得。 一、仪器 730G型紫外—可见光分光光度计，或其它型号仪器 二、试剂 1．蒽醌、乙醇、邻苯二甲酸酐均为分析纯 2．蒽醌粗品生产厂提供 3．蒽醌标准储备液（2.000mg.ml-1）准确称取0.2000g蒽醌置于100mL烧杯中，用乙醇溶解后，转移到100mL容量瓶中，并用乙醇稀释至刻度，摇匀备用 4．蒽醌标准使用液（0.040mg.mL-1）吸取1mL上述蒽醌标准储备液于50mL容量瓶中，并用乙醇稀释至刻度，摇匀备用 三、实验条件 蒽醌和邻苯二甲酸酐的紫外线吸收光谱绘制 蒽醌的定量分析及ε测定 1．测定波长 323.0nm 2．狭缝 0.01～2mm 3. 参比溶液乙醇 四、实验步骤 1. 配制蒽醌标准溶液系列用吸量管分别吸取0.00mL， 2.00mL，4.00mL，6.00mL，8.00mL，10.00mL上述蒽醌标准使用液于6只10mL容量瓶中，然后分别用乙醇稀释至刻度，摇匀备用。 2. 称取0.0500g蒽醌粗品于50mL烧杯中，用乙醇溶解，然后转移到25mL容量瓶中，并用乙醇稀释至刻度，摇匀备用。 3. 根据实验条件，将730G型分光光度计或或其它型号仪器按其操作步骤进行调节。 4. 取蒽醌标准溶液系列中一份溶液，以乙醇做参比溶液，测量蒽醌的紫外吸收光谱。 第二章：紫外吸收光谱法 一、选择 1. 频率（MHz）为4.47×108的辐射，其波长数值为 （1）670.7nm （2）670.7μ（3）670.7cm （4）670.7m 2. 紫外-可见光谱的产生是由外层价电子能级跃迁所致，其 能级差的大小决定了 （1）吸收峰的强度（2）吸收峰的数目 （3）吸收峰的位置（4）吸收峰的形状 3. 紫外光谱是带状光谱的原因是由于 （1）紫外光能量大（2）波长短（3）电子能级差大 （4）电子能级跃迁的同时伴随有振动及转动能级跃迁的原因 4. 化合物中，下面哪一种跃迁所需的能量最高 （1）σ→σ*（2）π→π*（3）n→σ*（4）n→π* 5. π→π*跃迁的吸收峰在下列哪种溶剂中测量，其最大吸收 波长最大 （1）水（2）甲醇（3）乙醇（4）正己烷6. 下列化合物中，在近紫外区（200～400nm）无吸收的是 （1）（2）（3）（4） 7. 下列化合物，紫外吸收λmax值最大的是 （1）（2）（3）（4） 二、解答及解析题 1.吸收光谱是怎样产生的？吸收带波长与吸收强度主要由什 么因素决定？ 2.紫外吸收光谱有哪些基本特征？ 3.为什么紫外吸收光谱是带状光谱？ 4.紫外吸收光谱能提供哪些分子结构信息？紫外光谱在结构 分析中有什么用途又有何局限性？ 5.分子的价电子跃迁有哪些类型？哪几种类型的跃迁能在紫 外吸收光谱中反映出来? 6.影响紫外光谱吸收带的主要因素有哪些？ 7.有机化合物的紫外吸收带有几种类型？它们与分子结构有什 么关系？ 8.溶剂对紫外吸收光谱有什么影响？选择溶剂时应考虑哪些 因素？ 9.什么是发色基团？什么是助色基团？它们具有什么样结构 或特征？ 10.为什么助色基团取代基能使烯双键的n→π*跃迁波长红 移？而使羰基n→π*跃迁波长蓝移？ 11.为什么共轭双键分子中双键数目愈多其π→π*跃迁吸收带 波长愈长？请解释其因。 12.芳环化合物都有B吸收带，但当化合物处于气态或在极性溶剂、非极性溶剂 中时，B吸收带的形状有明显的差别，解释其原因。 13.pH对某些化合物的吸收带有一定的影响，例如苯胺在酸性介质中它的K吸收带和B吸收带发生蓝移，而苯酚在碱性介质中其K吸收带和B吸收带发生红移,为什么？羟酸在碱性介质中它的吸收带和形状会发生什么变化？ 14.某些有机化合物，如稠环化合物大多数都呈棕色或棕黄色，许多天然有机 化合物也具有颜色，为什么？蒽醌的测定方法
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