DIG试剂盒说明书(CSPD)中文翻译版
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SABC(小鼠IgG)- FITC (POD )双标试剂盒说明书货号:AC15835产品内容:封闭液(5% BSA ) 10ml Bio-羊抗小鼠IgG 浓缩液 100ul SABC-FITC 浓缩液 100ul SABC-POD 浓缩液 100ul 稀释液30ml 20×DAB 显色液A 1ml 20×DAB 显色液B 1ml 抗荧光衰减封片剂10ml 保存:如果长时间不使用,请将所有试剂存放于-20℃,如经常使用,可将封闭液,稀释液, 20×DAB 显色液B 和抗荧光衰减封片剂存放于2-8℃以方便使用。
产品简介: 本试剂盒适合于一抗为小鼠IgG 来源的免疫组化实验. DAB 及FITC 显色。
SABC 是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的,用以显示组织和细胞中抗原分布。
链霉亲和素(StreptAvidin)是一种从链霉菌中提取的蛋白质,同亲和素一样,对生物素有极高的亲和力,亲和素是一个碱性蛋白质(PI=10),经改造后可以转变成中性蛋白质。
链霉亲和素等电点接近中性,对组织和细胞的非特异吸附很低,基于链霉亲和素的免疫组化方法背景很低。
SABC 即StreptAvidin —Biotin Complex ,SABC 大约可形成一百个左右的过氧化物酶或者FITC 和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物。
大量的酶与FITC 将保证SABC 具有很高的敏感性。
操作步骤:(以石蜡切片热修复为例)1. 切片常规脱蜡至水。
3%H2O2室温5-10分钟以灭活内源性酶(如果FITC ,可省掉此步)。
蒸馏水洗3次。
2. 热修复抗原:将切片浸入0.01M 枸橼酸盐缓冲液(PH6.0),电炉或微波炉加热至沸腾后断电,间隔5-10分钟后,反复1-2次。
冷却后PBS (pH7.2-7.6)洗涤1-2次。
3. 滴加5%BSA 封闭液,室温20分钟。
甩去多余液体, 免洗。
4. 用稀释液将一抗按一定比例稀释(稀释后的一抗4℃可保存一周),也可另行购买抗体稀释液。
【产品名称】通用名称:他克莫司检测试剂盒(电化学发光法)英文名称:Tacrolimus【包装规格】100测试/盒【预期用途】主要用途主要用于定量测定人全血中他克莫司的含量。
本检测有助于接受他克莫司治疗的心、肝、肾移植病人的治疗。
电化学发光免疫测定试剂“ECLIA”,适用于罗氏Elecsys 和cobas e免疫测定分析仪。
临床应用他克莫司(又称KF506)是一种大环内酯类抗生素,1984年在日本被发现,是链霉菌属的代谢产物1.2,3。
研究表明他克莫司的免疫抑制活性是环孢霉素的10-100倍。
4他克莫司产生免疫抑制效应的主要原理在于它可以抑制T细胞的激活和增殖。
细胞内的他克莫司可结合一种抑免蛋白FK506-结合蛋白(FKBP-12),这种免疫复合物可抑制磷酸酶的活性。
5抑制磷酸酶可限制激活的T细胞(NFAT)的核因子的去磷酸化和核转位,由此调节包括IL-2、IL-4、TNF-α和γ-干扰素在内的多种细胞因子的转录,进一步限制淋巴细胞的激活和增殖。
6,7,8,9,10他克莫司具有很高的亲脂性,吸收不完全并且不稳定。
吸收后,他克莫司高效结合蛋白和红细胞,血浆中99%的药物都与白蛋白或α-1-糖蛋白结合。
11他克莫司的生物利用度和代谢主要受细胞色素P450药物代谢同工酶CYP3A4和CYP3A5以及流出泵P-糖蛋白的影响,在表达和功能方面在同一个体以及不同个体之间都变现出明显的差异。
12,13,14他克莫司在同一病人和不同病人间都表现出很大的变异性,无论剂量高低都可能出现严重不良反应。
他克莫司浓度不足可能导致对抑制器官的排异反应。
浓度过高又可导致严重不良反应。
他克莫司的主要不良反应包括肾毒性、神经毒性、胃肠道损害、糖尿病、高血压病和恶性肿瘤。
15,16为了让每个病人的体内药物浓度都维持在狭窄的治疗窗范围内,治疗药物监测的应用和浓度控制下给药作为标准临床实践的一部分已在临床上应用多年,它也是病人治疗的主要手段。
植物DNA试剂盒说明书植物DNA试剂盒Cat. No. 5次样品320100550次制备3201050250次制备3201250核酸纯化柱2 ml离心管Buffer PLBuffer KBuffer WA(浓缩液)Buffer WB(浓缩液)Buffer TE说明书5个5个3 ml2 ml1.9 ml1.5 ml1.2 ml1份50个50个30 ml20 ml12 ml9.5 ml12 ml1份250个250个150 ml100 ml56 ml50 ml60 ml1份产品储存试剂盒如果储存于室温(15~25℃),可在两年内保持使用性能无明显变化;如果将产品储存于2~8℃,可延长产品的有效期至两年以上。
技术支持杭州新景生物试剂开发有限公司研发部:e-mail: technical@, 电话:400-0099-857。
产品介绍本产品适合从50~100 mg新鲜植物组织(或者10~20 mg干燥的植物组织)中分离纯化总DNA。
植物组织经液氮冷冻后研磨破碎细胞,加入裂解液释放基因组DNA,再经Buffer K沉淀植物组织的蛋白及多糖等杂质。
将含有DNA的上清液加入核酸纯化柱后,DNA结合在核酸纯化柱上,残留的蛋白与PCR抑制物则被过滤除去,DNA经Buffer WA和Buffer WB 洗涤后,用Buffer TE洗脱,即可用于各种分子生物学实验。
用户需自备的试剂与物品1.无水乙醇2.液氮与研钵3.1.5ml离心管与移液器吸头4.乳胶手套、一次性口罩等防护用品和纸巾5.台式小量离心机(可配离心1.5ml离心管和2ml离心管的转子)6.旋涡震荡器7.水浴锅使用前准备1)如果离心机有制冷功能,请将温度设置到25℃。
2)将水浴锅温度设置到65℃,并将Buffer PL和Buffer TE温育至65℃。
3)根据试剂瓶标签上的指示在Buffer WA和Buffer WB中加入无水乙醇,并在标签的方框中打勾作好“乙醇已加”的标记。
790000116人份试剂盒Cell Search循环肿瘤细胞检测试剂盒(上皮细胞)IVD使用须知本试剂盒仅用于体外诊断CellSearch循环肿瘤细胞检测试剂盒用于外周血中循环肿瘤细胞(CTC)的计数,这些细胞来源于上皮细胞,即表现为CD45阴性(CD45-),EpCAM阳性(EpCAM+),细胞角蛋白8,18阳性(CK8,18+)和(或者)CK19阳性(CK19+)的细胞。
用CellSearch循环肿瘤细胞检测试剂盒检测的CTC,存在于外周血中,这类细胞与乳腺癌、结直肠癌和前列腺癌*转移患者的无进展生存期和总生存期相关。
因此,CTC可以用来监控乳腺癌、结直肠癌和前列腺癌患者的肿瘤细胞是否发生转移。
CTC应该进行持续检测,并与其他临床诊断方式联合起来监控上述肿瘤细胞的转移。
在肿瘤发生过程中的任何时间段,对CTC数量进行评估,可以预估肿瘤患者治疗后的无进展生存期和总生存期。
*在该研究中,转移性前列腺癌患者定义为血清标志物PSA在标准激素基准上,高于参考水平具有两次连续增加。
这些患者通常描述为具有非雄激素依赖性,激素抗性,或去势抗性的前列腺癌。
摘要说明肿瘤转移是指当肿瘤细胞从原发灶或转移灶剥落后,这些肿瘤细胞进入循环系统并在机体的远端定植生长的情况。
血液循环中的肿瘤细胞源自于上皮细胞,而这类细胞在血液循环系统中是极罕见的。
基于此,本公司推出的细胞自动化捕获仪(CELLTRACKS○R AUTOPREP○R System)通过预设程序并配合使用CellSearch循环肿瘤细胞检测试剂盒(CELLSEARCH○R Kit)可以对样本进行标准化和自动化检测。
用CELLTRACKS II分析仪或者CellSpotter分析仪,一种半自动荧光显微镜,可以对肿瘤细胞进行分析和计数。
这种方法只计具有上皮细胞特性(EpCAM+, CK8,18+,和/或者CK19+)的细胞数量。
检测原理CellSearch循环肿瘤细胞检测试剂盒包括磁流体捕获试剂和荧光免疫试剂。
Q I A G E N-D N A甲基化试剂盒说明中文版-CAL-FENGHAI.-(YICAI)-Company One1QIAGEN EpiTect® Bisulfite•重亚硫酸盐处理DNA时,需要经高盐浓度、高温和低PH条件,会导致DNA断裂和片段化,并在随后的纯化过程中丢失,所以需要大量的input DNA•重亚硫酸盐转化未甲基化的胞嘧啶,转化率超过99%•Bisulfite Mix 足够做8个反应,用时要将Bisulfite Mix溶于800μl RNase-freewater中,溶解的Bisulfite Mix 在-20℃可以保存4周•DNA Protect Buffer 能保护重亚硫酸盐处理的DNA在高温、低ph条件下被片段化•Carrier RNA 能提高小量DNA(小于500pg,体积大于40μl)绑定在回收柱滤膜上的效率,帮助核酸沉淀;总量大于100ng的基因组DNA没有必要加Carrier RNA•EpiTect Bisulfite Kit在-20℃可以保存3年;可以适用于大范围的DNA量,input DNA范围为1ng~2μg;模板DNA片段范围可以在500bp~30kb 之间ProtocolDNA量在1ng~2μg之间,体积20μl以上开始前的准备重点:•Bisulfite Mix 足够做8个反应,如果样本少于8个,可以把溶解的Bisulfite Mix 保存于-20℃,4周内并不会影响其性能•DNA Protect Buffer在加入DNA–Bisulfite Mix后会由绿变蓝(step 2),表明溶液混合很充分且PH值正确•所有的离心分离步骤均在室温(15–25°C)下完成开始前准备的东西:•加入30ml乙醇(96%~100%)到Buffer BW中,室温(15–25°C)保存,使用之前摇匀•加入27ml乙醇(96%~100%)到Buffer BD中,2~8℃保存,使用之前摇匀,使用之后要立即盖上盖子。
ApplicationThe kit is specially designed for the generation of highly sensitive hybridization probes that are suitable for the detection of low- (single-) copy target sequences. Thus, it should be considered as an alternative to random-primed labeling when either the amount of template DNA is limited or only a specific part of the sequence of the template is required for hybridization. The nucleotide concentration in the PCR DIG Probe Synthesis Kit ensures the identification of single-copy genes in the genomic blots following hybridization to DIG-labeled PCR products. Human single-copy genes are detectable in 10 µg of genomic DNA.PCR products can be directly generated and labeled from small amounts of genomic DNA (100 ng–1 µg), and subsequently used as hybridization probes.The PCR DIG Probe Synthesis Kit contains an alkali-labile DIG-11-dUTP formulation. This enables simple removal of the DIG label following chemiluminescent detection, and allows the subsequent rehybridization of blots with multiple DIG-labeled probes.Background InformationThe nonradioactive DIG system uses digoxigenin, a steroid hapten, to label DNA, RNA, or oligonucleotides for hybridization, and subsequent color- or luminescent detection. The digoxigenin is coupled to dUTP via an alkali-labile ester bond. The labeled dUTP can be easily incorporated by enzymatic nucleic-acid synthesis using DNA polymerases.The polymerase chain reaction (PCR) allows the amplification of minute amounts of DNA to levels above 1 µg. The only prerequisite is that some sequence information of the target sequence is needed in order to synthesize the appropriate primers.The combination of nonradioactive labeling with PCR is a powerful tool for the analysis of PCR products, and also for the preparation of labeled probes from small amounts of a respective target sequence. The detection sensitivity of these labeled probes can be adjusted by the ratio of the unlabeled nucleotides to DIG-dUTP. Whereas a low ratio of DIG-dUTP to dTTP of 1:19, as in the PCR DIG Labeling Mix, ensures a high-yield amplification reaction with good sensitivity for direct detection, the hybridization to single-copy genes in complex genomes may not be successful. The PCR DIG Probe Synthesis Kit, therefore, contains a high ratio of DIG-dUTP to unlabeled nucleotides of 1:2, ensuring reliable detection of single-copy genes. However, PCR yield may be decreased by up to 50%. Nevertheless, this ratio will yield enough product for several hybridizations.Contents1.Enzyme Mix, Expand High Fidelity, 30 µl (105 U) Enzyme Mix, 3.5 U/µl in storage buffer, 20 mMTris-HCl, pH 7.5 (25o C), 100 mM KCl, 1 mM dithiothreitol (DDT), 0.1 mM EDTA, 0.5% Tween 20 (v/v), 0.5%Nonidet P40 (v/v), 50% glycerol (v/v)2.PCR DIG Probe Synthesis Mix, 10x conc., 125 µl of a mixture containing dATP, dCTP, dGTP (2 mMeach), 1.3 mM dTTP, 0.7 mM DIG-11-dUTP, alkali-labile, pH 7.03.PCR Buffer with MgCl2, 10x conc., 1 ml Expand High Fidelity Buffer, 10x conc. with MgCl24.dNTP Stock Solution, 10x conc., 125 µl of a mixture containing dATP, dCTP, dGTP, dTTP (2 mM each),pH 7.05.Control Template, 50 µl (1 ng) plasmid DNA (20 pg/µl) in Tris/EDTA buffer, pH 8.0. The 5-kb plasmidcontains the cDNA for the human tissue-type plasminogen activator (tPA)6.Control PCR Primer Mix, 25 µl (containing 50 pmol of each primer) control PCR primer 1 and 2 (2 mMeach)QualityFunction test: Each lot of the PCR DIG Probe Synthesis Kit is function-tested in PCR. Amplification products are assayed in genomic Southern blots.Under PCR conditions described in the pack insert, the control reaction generates an amplification product of 442 bp. Due to multiple incorporations of DIG-dUTP during the PCR process, the molecular weight of the PCR products is significantly increased compared to the unlabeled PCR product.A specific fragment pattern is detected after hybridization of the PCR product to 10 µg human genomic DNA and chemiluminescent detection as described in the pack insert.。
七项呼吸道病毒检测试剂盒(鉴定)使用说明书【产品名称】通用名称:七项呼吸道病毒检测试剂盒英文名称:D3 Ultra DFA Respiratory Virus Screen & ID Kit【包装规格】鉴定试剂:80人份/盒【预期用途】用于临床定性检测7种呼吸道病毒:甲型(A型)流感病毒,乙型(B型)流感病毒,呼吸道合胞病毒,腺病毒,副流感病毒1、2和3型。
【检验原理】荧光素(FITC)标记的单克隆抗体与病毒抗原结合,形成稳定的抗原-抗体复合物,在荧光显微镜下观察,呈现特异性绿色荧光。
【主要组成成份】组份名称规格主要成分1 DFA染色试剂鉴定试剂流感A试剂:2 mL每试剂瓶为一项与病毒抗原相对应的荧光单克隆抗体流感B试剂:2 mL腺病毒试剂:2 mL呼吸道合胞病毒试剂:2 mL副流感1试剂:2 mL副流感2试剂:2 mL副流感3试剂:2 mL2 40X浓缩洗液25 mL PBS3 固定液15 mL 甘油4 阳性质控板5块包被病毒抗原【储存条件及有效期】2ºC-8ºC避光保存18个月。
【适用仪器】荧光显微镜,激发波长490 nm,发射波长520 nm。
【样本要求】鼻咽部取样后保存于生理盐水中,应在24小时内送检。
【检验方法】1、取样:用鼻咽拭子从病人的鼻咽部取样或者使用鼻腔灌洗液,将鼻咽拭子放入储存管中(含有生理盐水)。
2、样本准备步骤:①将样本充分震荡混匀约10-15秒。
②在400-600xg转速下离心5-10分钟。
③弃上清。
④在沉淀中加2-3 mL PBS缓冲液(不能使用试剂盒中的浓缩洗液),充分震荡混匀约10-15秒。
⑤在400-600xg转速下离心5-10分钟。
⑥吸走上清和黏液层,小心不要吸到沉淀。
⑦重复步骤4到6,直至黏液层被完全去除。
⑧在沉淀中加0.5-1 mL的PBS缓冲液。
⑨用移液器反复吹吸来重悬细胞沉淀,形成一个略混浊的悬液。
3、直接样本测试步骤:①在8孔板上的孔内滴加25 µL的细胞悬浊液,每样本需滴加七孔。
1 只用于生命科学研究,不能用于诊断程序 仅用于体外实验 DIG High Prime DNA Labeling and Detection Starter Kit Ⅱ 采用地高辛-dUTP进行随机引物DNA标记,碱性标记,利用CSPD化学发光检测,随时即用。 货号:11 585 614 910 此试剂盒储存条件:-15℃到-25℃。 此试剂盒可对10ng-3μgDNA进行12次标记反应, 可检测10×10cm2面积的杂交膜24张。
指导手册 2005.12 版 1 前言 1.1 内容表 1 前言 1.1 内容表 1.2 试剂盒成分 2.介绍 2.1 产品简介 3. 操作步骤和所需材料 3.1 在你开始前 3.2 流程图 2
3.3 地高辛标记DNA 3.4 标记效率的确定 3.5 DNA的转移和固定 3.6 杂交 3.7 免疫检测 3.8 DNA印记的洗脱和再杂交 4. 附录 4.1 故障排除 4.2 参考文献 4.3 订购信息 1.2 试剂盒的成分
瓶号 标记 内容 包括功能
1 DIG-高效引物 50μL 地高辛标记的高效引物 5×浓度的标记混合物:优化的浓度的随机引物,核苷酸,地高辛标记的dUTP(碱标记的),Klenow酶和缓冲液成分
随时可用 澄清的粘液 用于DNA的高效随机引物标记 3
2 DIG标记的对照DNA
20μL 5μg/mL 质粒pBR328 DNA (用Bam HI线性化)
澄清溶液 用于确定标记效率
3 DNA稀释缓冲液 3管1mL 50μg/mL鱼精DNA,10mM Tris-HCl,1mM EDTA, pH8.0 在25℃
澄清溶液
4 抗地高辛的碱性磷酸酶结合物
50μL 750U/mL 从羊中获取的,Fab段,结合碱性磷酸酶
澄清溶液
5 CSPD 随时可用 50mL CSPD
澄清溶液
6 封闭液 4×100mL 4
10×浓度 黄色,粘液
7 地高辛杂交颗粒 100mL地高辛杂交液共4瓶,用于DNA杂交
附加仪器与所需试剂 除了上表中列出的试剂外,你必须准备一些溶液。在下表中,你可以找到不同操作程序需要准备的设备概要。 在每个操作程序的前面提供了详细的信息。
操作程序 仪器设备 试剂 3.3 DIG-DNA标记 水浴 灭菌的双蒸水 0.2M pH8.0 灭菌的EDTA
3.4 标记效率的半定量 带正电荷的尼龙膜* 地高辛洗涤和封阻缓冲组合*或者
洗涤缓冲液 马来酸缓冲液 检测缓冲液 5
3.5 DNA转移和固定 紫外光盒 或者商业化可用于紫外交联的其他设备 20×SSC 或者10×SSC
3.6 杂交 尼龙膜,带正电荷* 杂交袋*, 或者耐热的塑料袋或者滚筒瓶 注意:当用地高辛杂交缓冲液工作时,不要用开口的托盘。
3.7 免疫检测 耐热的塑料袋或者滚筒瓶 杂交袋* 地高辛洗涤和封阻缓冲液组合*,或者
洗涤缓冲液 马来酸缓冲液 检测缓冲液 3.8 DNA 斑点的脱色和重新标记探针 大的托盘 水浴 10×SSC 10%SDS 0.2M NaOH 6
*标记的产品可以从Roche Applied Science 获得。 2.介绍 2.1 产品概况 实验原则 此试剂盒采用DIG(地高辛),一种甾类半抗原,steroid hapten去标记DNA探针用于杂交和后续的免疫检测[1,2,3]。
步骤 描述
DNA 标记 根据随机引物标记技术采用地高辛标记引物获得了地高辛标记的DNA探针。地高辛标记的高效引物是一种专门生产的反应混合物,其中含有地高辛dUTP,碱性标记(图1)和所有的试剂,包括随机引物标记所必须的酶,已预先混合优化的5×浓度反应缓冲液。
杂交 根据标准方法,地高辛标记的探针可以与固定在膜上的核酸杂交。采用碱标记形式的地高辛-11-dUTP能够更加容易和有效的被洗脱下来,使固定在膜上的核酸可以与其他的地高辛标记探针再次杂交。
免疫检测 杂交探针可以用抗地高辛的碱性磷酸酶进行免疫检测,Fab段,然后采用即时可用的化学发光底物CSPD可以看到杂交结果。采用碱性磷酸酶可以对 7
CSPD进行,酶的脱磷酸化,导致在最大波长477nm处有光的发射(图2),这一现象可以用适合的图像仪或者X光片进行记录。胶片的曝光时间范围只在5-30分钟内。
图1 DIG-dUTP ,碱性标记 图2 CSPD反应 应用 地高辛标记DNA探针可以用于: 所有类型的滤膜杂交 总基因组DNA中单拷贝基因的检测,甚至对于高度复杂的生物体也可以进行检测,如人,大麦和小麦。
样品材料 至少100bp的DNA片段 线性的质粒,cos质粒或者DNA 超螺旋的DNA 实验时间 此表格列出了每一步实验所需的反应时间。
步骤 反应时间 DNA标记 1小时-过夜 8
杂交 6小时或者过夜 免疫检测 1.5小时 化学荧光信号检测 5-30分钟
检测数量 一个试剂盒足够用于: 12个标准的标记反应,每个反应的膜板DNA不超过3μg;并可以检测24张10×10cm2的杂交膜。
质量控制 根据操作步骤中的说明对未标记的对照DNA pBR328进行标记,并按照下面的标准检测操作方法在点杂交中用50ng的异源的DNA稀释0.1pg 同源DNA,用即时可用的CSPD,X光片曝光30分钟进行检测。
试剂盒的储存和稳定性 未开封的试剂盒在保质期内可以稳定的存放在-15℃到-25℃(保质期印在标签上)。在干冰中运输。
一旦开封,请根据下表选择适宜的储存条件。 试剂盒成分 储存条件 抗地高辛碱性磷酸酶结合物(4号管) 2-8℃稳定。注意:不要冻存 9
CSPD 随时即用 (5号管) 2-8℃,避光保存。 封阻液(6号管) 未开封时 15℃-25℃ 稳定。 一旦开封,应分装并储存在-15℃到-25℃或者无菌条件下2-8℃间可以稳定保存1个月。 工作溶液都应是新鲜配制的。 地高辛杂交颗粒 储存在15℃-25℃ 一旦开封,无菌条件下溶液可以稳定存在1个月。 地高辛高效引物混合物 保质期12个月,-15℃到-25℃。 避免反复冻融。 灵敏度和特异性
采用southern杂交从0.3μg人胎盘 DNA(经Bgl Ⅱ或EcoRⅠ酶切)中检测到单拷贝基因(组织纤溶酶原激活因子tPA)。
优点 此表描述了这个试剂盒的优点和特征 优点 特征 精确、快速 预先已混好的地高辛高效引物混合物减少了标记DNA 时手动操作的时间,同时提高了产量,重复性好 灵敏 在复杂的总人DNA及植物基因组中能够检测到单拷贝基因。 10
省时 地高辛标记的探针可以至少储存一年。 杂交溶液可以重复利用3-5次,重复次数主要取决于每次杂交中产生信号的标记探针的量。 3. 实验步骤和所需材料
3.1 在你开始前 主要的操作要求 此表中描述了地高辛标记和检测中主要的提示:
要求 指引 在清洁的条件下进行操作 高压灭菌地高辛系统的试剂 过滤灭菌的溶液包括:SDS,吐温20,并应该加入到已灭菌的溶液中。
用干净的孵育托盘 每次使用前都要严格地清洗实验托盘 处理膜的要求 带无粉手套 处理膜的时候,只能够用干净的镊子夹膜的边缘
3.2 流程图 11
3.3部分 地高辛标记DNA ↓ 3.4部分 标记效率的检测 ↓ 3.5部分 DNA固定 ↓ 3.6部分 杂交 ↓ 3.7部分 免疫检测 ↓ 3.8部分 洗脱和DNA斑点与另一探针的杂交
3.3 地高辛标记DNA 介绍 随机引物标记的DNA带有地高辛-11-dUTP,这一标记采用的是地高辛高效引物试剂,这是一种含有随机六碳糖,dNTP混合物的5×浓度标记混合物,其中dNTP混合物包括碱性标记的地高辛-11-dUTP, 12
标记级的Klenow酶和适合的反应缓冲液。 附加设备和所需试剂 此表中列出了成分,储存条件和除了试剂盒成分外所需试剂的用途。
溶液 成分 储存条件/稳定性 用途
水 高压灭菌的双蒸水 15-25℃,稳定 稀释DNA EDTA(乙二胺四乙酸) 0.2M EDTA,pH 8.0 15-25℃,稳定 终止标记反应 模板DNA 下表中列出了模板DNA所需特征:
特征 详细信息
纯度 模板DNA应该采用the High Pure Plasmid Isolation Kit进行制备。
当采用其他商业化的纯化试剂盒进行纯化时,我们建议额外进行一次苯酚/氯仿抽提以去除残余的蛋白质。