※工艺技术食晶科学捌ｚ坳￡２最Ⅳ口∞，９９香菇多糖的提取工艺比较
刘宁－?：，李健ｚ
（１．东北林业大学材料科学与工程学院，黑龙江哈尔滨１５００３６
２．哈尔滨商业大学食品工程学院，黑龙江哈尔滨１５００７６１
捕要：本实验以香菇为原料，应用酶解法提取香菇多糖。考察了影响实验的因素即酶用量、酶制剂作用时间、作用温度和ｐＨ值对酶解法提取率的影响。并将酶解提取方法与传统提取方法进行分析比较。利用红外光谱和紫外吸收光谱分析浸提物。混合酶解提取法香菇多糖最高提取率为１２．９０％，比传统水浴浸提法高出６．２６％，在时间上仅用了传统方法的１，３。其产品在紫外吸收时，粗产品杂质含量少，比传统浸提方法更接近标准品。研究结果表明，混合酶解法提取香菇多糖的方法优于传统水浴漫提法．
关键词：香菇：香菇多糖；酶解法；提取
ＳｔＩｌｄｙｏｎＣｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆＥｘｔｍ棚ｏｎＭｅ山ｏｄｓｏｆＩ棚ｄｎａｎ
ＬＩＵＮｉｎｇ”，ＵＪｉ∞２
（１．ｃｏｕ。ｇｅｏｆＭａ魄“ｓｃｉｅｎ∞孤ｄＥ玎ｇｉＩ獬：ｒｉＩｌｇ，Ｎｏ曲髓吐Ｆｏｌｅｇ乜ｙｕⅡｉｖ啪畸．Ｈａｌｂ．ｍ１５００３６，ｃｂｉ吐；
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中国分类号；ｓ６４６文献标识码；Ａ文章编号：１００２．６６３０（２００７）０９．０１９９．０４
香菇多糖（１ｃｎ“ｎａｎ）系从担子菌纲、伞菌科真菌香菇犯ＰｎｆｆⅡ“ｊｅｄＤ如ｓ（Ｂｅｒｋ）ｓｉｎｇ）子实体中提取分离纯化获得的均一组分的多糖，它具有广泛的药理学活性，如免疫调节作用，抗肿瘤、抗衰老作用等Ⅲ。以往对香菇中有效成分的提取主要利用水浴浸提法，这种传统方法不仅浸提时间长，而且提取率不高．近年来，酶制剂越来越多地应用于化学化工领域．酶制剂可以提高一些化学反应的速率、增加产率，改善目标产物的选择性。因此广大的科研工作者开始越来越关注酶制剂对天然植物的提取和半合成的促进作用．
本实验利用酶制剂提取香菇中的香菇多糖，采用纤维素酶和蛋白酶来提取多糖．考察了影响酶制剂提取的条件，即酶制剂作用时间、料液比和原料粒度对提取物产率的影响，在此基础上将酶制剂提取方法与传统提取方法进行分析比较，同时利用红外光潜和紫外吸收光谱分析浸提物。
１材料与方法
１．１仪器
紫外可见分光光度计、红外光谱、真空冷冻干燥机。１２试剂与材料
‘
香菇哈尔滨市售。
纤维素酶无锡生物制剂厂；木瓜蛋白酶北京化学试剂公司；中性蛋白酶无锡生物制剂厂；强酸性阳离子交换树脂、强碱性阴离子交换树脂、葡聚糖凝胶Ｇ．５０中国医学科学院血液学研究所Ｉ其它化学试剂均为化学分析纯试剂。
ｌ＿３香菇多糖的提取工艺
收稿日期：２００７—０７—２４
作者简介：刘宁（１９７８一），女，讲师，博士研究生．研究方向为食品化学。
传统提取方法；原料一烘干一粉碎一称重一调配一热水抽提一过滤一浓缩一滤液醇析一复溶一去除杂蛋白（ｓｅｖａｇ法）一真空冷冻干燥一香菇多糖【２ｌ
酶解提取方法：原料称重一烘干一粉碎一称重一酶水解一灭酶一过滤一浓缩一阴阳离子交换柱一葡秉糖凝胶柱一氧化铝凝胶柱一酵沉一真空冷冻干燥一香菇多糖Ⅲ１．４香菇多糖的结构鉴定㈣
本研究利用傅里叶红外光谱（ＫＢｒ压片法）分析香菇多糖产品的结构。将１ｍｇ左右经干燥的糖样，与１００～２００ｍｇ经干燥的ＫＢｒ粉末在玛瑙研钵中研细后压片，在４０００～４００ｃｍ一’范围内进行扫描。
ｌｊ香菇多糖纯度的检测Ⅲ
本研究多糖所含杂质为蛋白质、核酸等大分子物质，可以根据结构特征利用紫外光谱吸收，检测所含杂质的相对量。将香菇多糖配成５００ｕ计Ｄｌ的溶液，４００～１５０ｎｍ范围内进行扫描。
２结果与分析
ｚｌ水提取最佳工艺的确定
针对香菇粉末大小（不过筛、２０目、６０目）、溶剂体积、提取温度和提取时间设计以下四因素三水平表。根据因素水平表，分九组实验，每组取千香菇粉１０９提取多糖．
寰１木握因素水平表
Ｔａｂｌｅ１Ｆａｃｔｏ哺ａｎｄＩｅｖｅｌ０ｆｏ佣ｏｏｆｗａｔ●＾ａｘｔ删ｉＯｎ
水平１丙丽广百丽丽丽蚤童瓦丽ｒ丽ｌ不过筛１５９０３．２∞∞９６‘
３６０２５１００５
采用苯酚．硫酸法对香菇多楮含量进行测定，以葡萄糖为标准样品。
根据极差Ｒ值的大小知．水浸提工艺影响因素的主
因素水平
圈１永攫正交试验结果直观图Ｆｉａ．１Ｖｂｕ副ｄＩａａｍｍｓｏｒＯｎｈｏｇ佣剐旭ｓｔｆ。ｒｗａＩ。Ｐ∞捌ｉｏｎ
次顺序为Ａ＞Ｄ＞Ｂ＞Ｃ，即粉碎颗粒大小＞时问＞溶
剂体积＞温度．最佳提取工艺为Ａ，Ｄ－ｃ，Ｂ，，但是正交
表里的最佳条件为Ａ扭，ｃ，Ｄｔ，即香菇粉碎颗科大小为６０
目、溶剂加入体积为１５倍、温度为１００℃、时间为４ｈ。
所以需要进一步做验证实验，实验发现，验证结果与
正交表里的最佳条件相同。
２．２酶提取最佳工艺的确定
２２１纤维素酶酶解条件确定
香菇细胞是由多糖和蛋白质组成，纤维素酶水解纤
维素，细胞壁破裂，多糖易于从细胞内释放出来，酶
用量、温度和ｐＨ值以及反应时间影响酶解的主要因
素，对这四种因素做单因素试验。酶活力的测定采用
滤纸法．
２．２．１．１酶用量的确定
其他反应参数不变，仅改变纤维素酶添加量，酶
浓度为０．０５％、Ｏ．１０％、Ｏ．１５％、０．２０％、Ｏ．２５％，测
定其粗多糖提取率，然后以纤维素酶用量为横坐标，实
测吸光度值为纵坐标作图，选出最佳的区间。
２．２．１．２ｐＨ值的确定
其他反应参数不变．分荆在口Ｈ值３．５、４．Ｏ、４．５、
５．０、５．５的缓冲溶液中进行水解，以ｐＨ值．Ａ值作图，
找出最适ＤＨ值。
２．２．１３温度的确定
其他条件不变，分别在３５、４０、４５、５０、５５、
６０℃下水解，以Ｔ．Ａ作图，选出最佳区间。
２．２．１．４．反应时间的确定
因素水平
田２纤维素酶酶解正交试验结果直观圈
Ｆｉ口．２Ｖｌｓｕ圳ｄｉａｇｍｍｓｏｆｏｎｈＯｇＯｎａＩｔ鹊ｔｆｏｒｅｎ叫ｍ８ｔｉｃ
ｈｙｄ∞ｌｙ８ｉｏｗ帅∞¨ｕｂｓｏ
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一
其他条件不变，分别在２、４、６、８、１０ｈ下反应．以ｔ—Ａ作图，选出最佳区间。
根据单因素试验结果选择纤维素水解条件，做正交试验．
根据极差Ｒ值的大小知，纤维素酶水解工艺影响因素的主次顺序为Ｄ＞Ｂ＞Ｃ＞Ａ，即时间＞温度＞ｐＨ＞酶浓度，得出纤维素酶解最佳条件为Ａ，Ｂ，ｃｚＤｚ，即酶浓度为ｍ２５％、温度为５５℃、ｐＨ为４．５，时间为２ｈ。２２．２木瓜蛋白酶酶解条件的确定
由文献【５】提供的木瓜蛋白酶作用条件：有效ｐＨ范围３～９，最佳ｐＨ范围５～７，有效温度范围６０～９５℃，最佳温度范围６０～７５℃，设计酶浓度：０．２５％、０．５０％、１，００％、２．ｏｏ％、４．００％的单因素试验。酶活力的测定采用福林法。正交试验设计及结果如表３和图３所示。
襄３木瓜蛋白酶酶解因素水平衰
１ｈｂｌ０３ＦａｃＩｏ侣卸ｄｂ坩ｌｓｆｏｎｎｓｏｆｅｍ＝ｙｒｎｄｙ５ｌｓｗ嘶阻ｐａｌｎ
因素水平
田３术瓜蛋白酶正交结果直观图
Ｆ幻．３Ｖｂ‘倒ｄｉ雄”Ⅱｎ０。ｆａｍ嵋ｐ憎Ｊ协Ｉ
ｆ吖甜Ｉｚ＇＂咖ｂ岫ｐ￡Ｉｐａｈ
根据极差Ｒ值大小知，影响木瓜蛋白酶水解工艺各因素的主次顺序为：Ｄ＞ｃ＞Ａ＞Ｂ，即ｐＨ＞温度＞酶浓度＞时间，最佳的工艺条件为Ａ，Ｂｚｃ，轨，而芷交的试验最佳工艺条件为Ａ，Ｂ，ｃ，ｍ，经过验证实验，得出最佳酶解条件为：酶浓度０．２５％、时间４ｈ、温度７０℃、ｐＨ７．０．２．２３中性蛋白酶酶解条件确定
文献【５】显示，中性蛋白酶的热稳定性，ｐＨ值在７．Ｏ～８．０条件下，３７℃以下比较稳定，２ｈ酶存活率８０％，超过４５℃酶活力不稳定，６０℃以上失活；ｐＨ值稳定性，在ｐＨ６．５～７．５之间足稳定的，ｐＨ值低于５．Ｏ或者高于９．０就很快失活；最佳作用温度，对于０．５％酪蛋白，在ｐＨ值７．２左右，最佳作用温度为５０℃左右．因此对酶用量做单因素试验，取酶浓度Ｏ．１０％、Ｏ，２０％、０．２５％、０．３０％、０．４０％．其它条件不变，得到最佳酶用量区间．酶活力的测定方法采用福林法。正交试验设汁及结果如表４和图４所示．
寰４中性番白酶酶解因素水平蠢
ＴｈｂＩｅ４Ｆａｃｔｏ懵帅ｄＩｇｖｅｂｆｏｍ悟０ｆ帅珂ｍＯｌｙｓ随ｗｉｍｎｅｕｔ删
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因素水平
田●中性蛋白酶正交结果直观圈
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根据极差Ｒ值大小得知，影响因素间的主次关系为：Ｄ＞ｃ＞Ａ＞Ｂ。最佳的工艺条件为Ａ－Ｂ，ｃⅢｚ，而正交试验的最佳结果为ＡｔＢ：ｃ。Ｄ２，经过验证实验，得出最佳实验条件为酶浓度Ｏ．２％、时间６ｈ、温度４５℃、ｐＨ７．０．２．Ｚ４复合酶提取
采用纤维素酶和木瓜蛋白酶、纤维素酶和中性蛋白酶在各自最佳的提取条件下进行复合酶提取实验。
用复合酶的提取率明显高于单酶提取，这是因为香菇细胞壁由蛋白质、几丁质和纤维素等构成，很坚固，通常食用时，人体只能消化吸收２０％～４０％，使用纤维素酶和蛋白酶先后水解，共同作用于香菇的细胞壁，使其破裂，多糖易从胞内释放，比单一酶作用提高了香菇多糖的提取率，但是如果蛋白酶和纤维素酶同时使用，由于各自的最适条件不同，不能达到最佳水解效果．同时蛋白酶对纤维素酶的水解作用，导致某些文献报道取酶水解比纤维素酶水解效果没有明显提高Ⅲ。２．２．５水捉与酶解香菇多糖的结果比较及分析
表５复台尊提取香菇多糖结果衰
Ｔａｂｌｅ５ＲｅｏｕｈＯｆ培ｎｔＩｎａｎｅｍ删ｉＯｎｗｍ∞ｍｐＩｅｘ●ｎｚｙｍ●复合形式：鬈嚣嚣；黧骠嚣＋中然譬＋多糖得率（％）１２９０７．０２９４６６．３４
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香菇多糖的提取工艺比较
作者：刘宁， 李健， LIU Ning， LI Jian
作者单位：刘宁,LIU Ning(东北林业大学材料科学与工程学院,黑龙江,哈尔滨,150036;哈尔滨商业大学食品工程学院,黑龙江,哈尔滨,150076)， 李健,LI Jian(哈尔滨商业大学食品工程学院,黑
龙江,哈尔滨,150076)
刊名：
食品科学
英文刊名：FOOD SCIENCE
年，卷(期)：2007，28(9)
被引用次数：6次
参考文献(8条)
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2.王卫国香菇多糖分离纯化技术研究[期刊论文]-中国食用菌 2002(02)
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相似文献(10条)
1.期刊论文滕利荣.孟庆繁.陈佳.秦毅.徐越驰.吴雷.刘兰英香菇真菌发酵的最佳氮源及香菇多糖的纯化-吉林大
学学报(理学版)2003,41(1)
通过正交设计法对香菇真菌发酵培养基中氮源最佳配比进行探索, 结果表明, 豆饼粉为菌体生长的最佳氮源. 几种氮源物质的质量最佳配比为:
w(豆饼粉)∶w(酵母膏)∶w(蛋白胨)=1∶1.5∶0.2. 在此条件下, 香菇多糖的产量在发酵130 h时最大, 其浓度可达25.1 mg/mL. 该多糖经乙醇沉淀、Sevag法除杂蛋白, 用Sephadex G-75柱层析分离, 得到两种组分的香菇多糖.
2.期刊论文杨冬梅.王秋霜.冯丽丹.曹耀香菇多糖抑菌作用初探-中国食品工业2009,""(4)
对干香菇及鲜香菇分别采用三氯乙酸法提取获得干香菇粗多糖提取物和鲜香菇粗多糖提取物,对两种提取物的抑菌作用进行比较,并对两种香菇多糖抑菌作用的热稳定性进行了考察.结果表明,干、鲜香菇粗多糖提取效果分别为11.79mg/g和5.37mg/g香菇干物质重.2种提取物均对3种酵母菌(Saccharomgces cerevislae、Saccharomyces fruit、Sac-charomyces ellipsoideus)和2种细菌(Bacillus subtilis、Escheirchia coli)有一定的抑制作用,但是对粉红单端孢和青霉无抑菌作用.不同温度的热处理对两种香菇多糖的抑菌作用没有影响.
3.期刊论文王玢.任清.李奇.董银卯.赵云云香菇多糖的提取及其抗氧化性和保湿性评价-食用菌2008,30(5)
利用热水浸提法从新鲜香菇中提取香菇多糖,通过L9(34)正交实验对提取香菇多糖的工艺条件进行优化,确定提取香菇多糖的最佳工艺条件为:提取温度90℃,料液比1:7,提取时间6 h,pH6.0,最优产品得率1.46%;并采用体外法、体内法对香菇多糖的保湿性能进行评价,采用结晶紫分光光度法测定香菇多糖对羟自由基的清除率,结果表明香菇多糖具有保湿效果.
4.期刊论文王卫国.赵永亮.Wang Weiguo.Zhao Yongliang香菇多糖分离最佳工艺及最佳原料探讨-中草药
2000,31(8)
对香菇多糖提取、纯化条件进行优化研究,结果表明:香菇多糖提取最佳工艺条件为:pH7.0,96 ℃浸提4h,料水比为1:20,醇析浓度为70%,蛋白质去除时样品-氯仿+正丁醇(V:V)为1:1,氯仿-正丁醇(V/V)为1:0.25,萃取时间为30min效果最好.不同类型的香菇原料的提取结果表明:椴栽和袋栽香菇、花菇和板菇,其香菇多糖含量相差不大.从经济角度和工艺的简易性考虑,分离制备香菇多糖应以袋栽板菇为最佳.
5.学位论文阮征香菇多糖的分离、结构分析与抑制肿瘤生物活性的研究2005
香菇(Lentinusedodes)属于担子菌纲侧耳科(Pleurotaceae)真菌，是世界名贵食用兼药用菌之一，它含有多种有效药用成分，尤其是含有抗病毒、抗肿瘤、调节免疫功能和降血糖等生物活性功能的香菇多糖。虽然有众多研究者对从香菇中提取的香菇多糖进行了多方面的研究，但是其抑制肿瘤的机制还不是很清晰。本课题以香菇子实体为原料，研究了提取和纯化香菇多糖的条件；对纯化后得到的香菇多糖级分进行抑制肿瘤的初步筛选；较系统地研究了香菇多糖对恶性肉瘤S180(Sarcomal80，S180)的抑制作用；香菇多糖对人宫颈癌Hela细胞的凋亡作用，并且对其进行了初步的结构分析。主要结果如下：
1香菇多糖的分离和纯化通过文献与预试验，以水提取温度、提取次数、提取时间、料液比(v/w)为因素，先通过单因素实验确定水平，最后通过正交实验分析得到香菇多糖提取的最佳工艺条件为采用于香菇子实体10倍量(v/w)的水在100℃条件下提取5次，每次1小时。香菇粗多糖LS的得率为
3.34％。
香菇粗多糖分别经过DEAE-纤维素和DEAE-SephadexA-25柱层析获得四个多糖级分(L-Ⅰ、L-Ⅱ、L-Ⅲ、L-Ⅳ)，得率分别为
0.25％，0.48％，0.17％和0.35％。经过SephadexG-200检验，香菇多糖L-Ⅰ、L-Ⅱ和L-Ⅳ为单一级分，L-Ⅲ则含有两个亚级分。
2香菇多糖级分抑制肿瘤的筛选香菇粗多糖和纯化后的香菇多糖级分分别与肿瘤细胞S180在CO2培养箱中共同培养后，体外实验显示香菇多糖对
S180的抑制作用微弱。在10mg/L浓度下香菇粗多糖与四个多糖级分的抑制率分别为4.06％、4.73％、5.32％、3.81％和4.05％，阳性对照组(化学药物5-Fu)的抑制效果为56.23％。
以荷S180小鼠为动物模型，香菇多糖级分在体内均有一定的抑制肿瘤的作用，在10mg.kg-1.d-1剂量下，香菇粗多糖与四个多糖级分的抑制率分别为19.39％、18.53％、35.45％、26.49％和23.74％。在10mg.kg-1.d-1剂量范围内，香菇多糖四种级分都显示剂量依赖关系。其中，香菇多糖级分L-Ⅱ体内抑制肿瘤的效果最好。另外，在10mg.kg-1.d-1剂量范围内发现香菇粗多糖的抑制效果比香菇多糖L-Ⅰ的抑制效果好而比其他级分抑瘤效果差，在
10mg.kg-1.d-1浓度下，含有亚级分的香菇多糖L-Ⅲ比香菇多糖级分L-Ⅰ和L-Ⅳ的抑制效果好，揭示香菇多糖的纯度与体内抑制肿瘤的效果不具有正相关。
3香菇多糖L-Ⅱ对S180细胞的抑制作用3.1香菇多糖L-Ⅱ在体外对肿瘤细胞S180的抑制作用微弱分别用1，5，10mg/L的香菇多糖L-Ⅱ处理S180细胞
24小时后MTT法测定，结果显示香菇多糖L-Ⅱ对S180细胞的生长抑制作用不明显，抑制率分别仅仅为3.68％，4.45％和4.91％。与空白对照组相比较，香菇多糖剂量组的细胞膜唾液酸含量都有一定程度的降低，但是没有达到显著差异水平，分别为107.86±15.10mg/g蛋白，103.25±13.83mg/g蛋白
，97.42±14.02mg/g蛋白(空白组116.34±15.12mg/g蛋白)。香菇多糖L-Ⅱ能提高实体瘤S180细胞膜流动性，使其趋向正常细胞，说明香菇多糖体外能部分改变S180细胞膜的生化特性。
3.2香菇多糖L-Ⅱ体内对肿瘤细胞具有很强的抑制作用以荷瘤S180小鼠为免疫力低下模型，香菇多糖L-Ⅱ低、中、高剂量组(1，5，10mg/L)的抑瘤率分别为18.46％，25.02％，33.64％，各个剂量组与对照组相比有显著性差异，显示在体内香菇多糖L-Ⅱ具有很好的抑制作用。与对照组相比，香菇多糖能显著增加小鼠胸腺、脾指数，揭示香菇多糖能恢复小鼠免疫器官功能。香菇多糖能显著增加小鼠巨噬细胞的吞噬能力，揭示香菇多糖具有恢复小鼠非特异性免疫的作用。香菇多糖能增加DNFB诱导的迟发性超敏反应，显示多糖能提高小鼠机体T细胞介导的免疫能力。但是香菇多糖不能增强荷瘤小鼠体液免疫功能。
运用ELISA和RT-PCR等方法测定多糖对细胞因子及其基因表达的影响，香菇多糖增加小鼠血清中TNF-α和IFN-γ的含量，但是对IL-2含量没有影响；并且能上调脾淋巴细胞中TNF-α和IFN-γmRNA的表达，揭示香菇多糖抑制肿瘤的机理包括了细胞因子TNF-α和IFN-γ的参与。
香菇多糖能增加巨噬细胞产生NO的量，增加细胞分泌的过氧化氢酶(CAT)的活力，揭示香菇多糖可能通过巨噬细胞释放CAT来清除细胞内的自由基来抑制肿瘤。
以上实验揭示香菇多糖L-Ⅱ是一种通过特异性和非特异性免疫方式，有淋巴细胞和单核巨噬细胞参与的免疫调节剂，并且能诱导细胞因子TNF-α和IFN-γ以及NO参与神经网络调节。
4香菇多糖L-Ⅱ对Hela细胞的凋亡作用以人宫颈癌Hela细胞作为离体实验模型，应用MTT法测定发现四个香菇多糖级分对Hela细胞生长有一定的抑制作用。倒置显微镜和吖啶橙/溴乙锭双染色等实验结果表明香菇多糖对Hela细胞凋亡的发生有诱导作用，提示这可能是香菇多糖体内抑制肿瘤作用的一个机制。单细胞电泳实验及原位末端标记法(TUNEL)检测证明香菇多糖对Hela细胞中DNA有损伤作用，且与处理的浓度存在一定的相关性。流式细胞仪检测发现香菇多糖诱导Hela细胞凋亡的发生机制可能是细胞周期S期受阻所致。
5香菇多糖L-Ⅱ的初步结构分析香菇多糖L-Ⅱ的糖含量为90.14％，蛋白质含量为6.63％。运用液相色谱测得香菇多糖L-Ⅱ重均分子量为
2.03×105Da，经过两种方法(GPC和SephadexG200)检验纯度结果显示其纯度高。香菇多糖L-Ⅱ具有D-葡萄吡喃糖构型，运用气相色谱测得单糖组成主要是葡萄糖。香菇多糖L-Ⅱ多糖含有O-糖苷键，且大量是O-Ser连接方式。通过刚果红实验发现香菇多糖具有螺旋结构。揭示香菇多糖L-Ⅱ为具有螺旋结构、含有O-Ser糖苷键的D-吡喃型葡聚糖。
6.期刊论文潘冉香菇多糖临床应用研究进展及香菇的药用价值-海峡药学2005,17(4)
目的香菇是纯天然真菌类植物,福建特产,资源丰富,不但可食用,而且有很高的药用价值;香菇多糖(Lentinau)具有很好的的生物反应调节作用.开发香菇多糖更广泛的用于临床和香菇广泛的食用药用价值.方法根据近年来文献综述香菇多糖的药理作用和临床应用.结果在提高免疫、抗肿瘤、抗感染、保护肝损伤、抗氧化、降血糖、抑制血小板聚集等作用方面都有很好的效果.结论香菇多糖可广泛的应用于临床,香菇也有很好的药用价值.
7.期刊论文张福明.张淑芹.孙非.刘志屹.陈显秋香菇多糖对单纯疱疹病毒的抑制作用-长春中医药大学学报
2007,23(1)
目的:探讨香菇多糖的抗病毒作用.方法:应用不同浓度及不同的给药方式探讨香菇多糖对单纯疱疹病毒的抑制作用及机理,用MTT法检测香菇多糖对病毒感染细胞的保护率.结果:香菇多糖对单纯疱疹病毒有明显的抑制作用,对病毒感染细胞的保护率最高可达89.4%.结论:香菇多糖具有抗病毒作用.
8.期刊论文潘丽元.陈国静.杨洁茹.丁军富硒香菇多糖的药理活性研究-中医药信息2000,17(6)
香菇为侧耳科植物[lentinus edodes(Berk)singl香蕈的子实体.本品性味甘、平.归胃、肝经.笔者应用生物工程方法,栽培富硒香菇,控制硒含量干品为1 ppm,鲜品0.1～0.2 ppm.
9.学位论文张难香菇的深层培养及其多糖的结构修饰2008
香菇多糖(lentinan，LNT)具有抗肿瘤、抗凝血和免疫调节活性等多种功能，是优良的天然食用和药用活性成分来源，具有广阔的应用前景。本文以香菇多糖为研究对象，考察了香菇深层发酵香菇多糖的工艺条件，研究了香菇多糖的磷酸化修饰及香菇多糖与Zn2+螯合的最优工艺，并对产物进行了理化性质分析。主要研究结果如下：
1、确定了深层培养香菇产胞外粗多糖的工艺条件。香菇培养8天后，其胞外粗多糖产量达到最大0.476g/100mL；当香菇进一步培养到第10天，则其生物量达到最大值1.233g／100mL。另外，实验考察了培养基对香菇深层发酵的影响，结果表明葡萄糖、蛋白胨和NaCl三个因子对胞外粗多糖的产量有显著影响，培养基的最适碳源为葡萄糖，最适氮源为蛋白胨。当葡萄糖、蛋白胨、NaCl分别为25g／L、16g／L、0.8g／L时，胞外多糖含量达到
0.8460g/1100mL。
2、通过正交实验确定了香菇多糖磷酸化修饰的最佳条件.选择质量分数为8％的三聚磷酸钠(STPP)和三偏磷酸钠(STMP)混合液作为磷酸化试剂，控制温度80℃，于pH8.0条件下反应5h。检测结果表明，磷酸化香菇多糖衍生物的磷酸根接枝量为7.771％，粘度测定表明香菇多糖经磷酸化后，粘度几乎没有变化.
3、香菇多糖与Zn2+螯合的最佳反应条件为：质量分数为25％的ZnSO4·7H2O，温度90℃，pH值7.0，时间4h.在该工艺条件下，香菇多糖中Zn2+的含量增加了9.7363％。
4、对深层发酵培养的香菇多糖及其修饰后的产物进行了理化性质分析和结构表征。研究结果表明，胞外粗多糖、磷酸化香菇多糖和Zn2+螯合的香菇多糖均溶于水，含有还原糖、单糖或二糖，不含淀粉物质。胞外粗多糖中，多糖和糖醛酸含量分别为86.25-88.40％和4.298-4.952％.香菇多糖经磷酸化和Zn2+螯合后，其多糖和糖醛酸含量变化微小，说明香菇多糖结构修饰后，其结构几乎没有被破坏。
5、抗氧化活性实验表明，香菇多糖具有抗氧化活性，且经磷酸化和Zn2+螯合后的香菇多糖均较未修饰前的抗氧化活性强。抗补体实验证明，磷酸化香菇多糖的抗补体活性比未修饰的香菇多糖强.
10.期刊论文边洪荣.孙广利.张海岚用正交试验法研究超声提取香菇多糖的最佳工艺-中药材2006,29(3)
目的:摸索超声提取法从香菇中提取香菇多糖的工艺条件,为香菇多糖提取的工业化提供理论依据.方法:采用正交试验法对香菇多糖的提取工艺进行研究.结果:最佳工艺为用1～2 mm粒度药材,95%乙醇醇沉,超声80 min.结论:此方法是一种简单、快捷、高效的提取方法.
引证文献(6条)
1.史德芳.高虹.谭洪卓.关健.何建军.薛淑静.周明.王少华香菇柄多糖的微波辅助提取及其活性研究[期刊论文]-食品研究与开发 2010(2)
2.白岚真菌多糖的研究进展——真菌多糖的结构、提纯和应用[期刊论文]-河北林果研究 2009(4)
3.张楷正.杨跃寰.李光辉.李杰俊.张泽炎.李刚香菇多糖提取方法研究进展[期刊论文]-四川理工学院学报（自然科学版） 2009(6)
4.廖伟玲.徐晓飞.冯金源.翟旭峰纤维素酶协同超声波法提取香菇多糖的研究[期刊论文]-湖南中医杂志 2008(6)
5.郑丹.孙培龙.邵平.张安强酶法提取食药用菌多糖的研究进展[期刊论文]-食品科技 2008(10)
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