基底细胞癌(basal cell carcinoma，BCC) 是皮肤癌最常见类型之一，又称基底细胞上皮瘤(basal cell epithelioma) 、基底样细胞瘤侵蚀性溃疡等，是源于表皮基底细胞或毛囊外根鞘的上皮性低度恶性肿瘤本病由Jacob于1827年首先描述，但到1902年才由Krompecher将其与其他上皮性肿瘤明确区分。
基底细胞癌多发于50岁以上。好发部位以表皮皮脂腺及经常受阳光照射的暴露部位为最多见，如鼻翼、眼睑、上下唇、额部、颏部等处，耳前、颈部和手背等处少见，发生于躯干者占10%左右。基底细胞癌生长缓慢，初起为淡黄色或粉红色略高于皮面的小结，常呈现珠状结节，伴有明显的毛细血管扩张，质地硬，常无疼痛或压痛，缓慢向周围浸润，在较大病灶中间可有浅表溃疡，溃疡边参差不齐，呈虫蚀样，经久不愈，但在肿瘤边缘仍保持珠状特征。有的病变有鳞状脱屑。部分基底细胞癌伴有黑色素沉着，黑色素播散于病灶，融合成黑色或棕色，称为色素性基底细胞癌，易被误诊为恶性黑色素瘤。基底细胞癌主要呈局部浸润生长，鼻翼、耳廓的基底细胞癌可破坏软骨，发生于头皮可浸润颅骨及硬脑膜，一般没有区域淋巴结转移。
黑色素瘤源于皮肤，粘膜，眼和中枢神经系统色素沉着区域的黑素细胞的恶性肿瘤。每年美国有25000个恶性黑素瘤新增病例，死亡约6000人。发病率在急速上升。日光照射是危险因素，同样危险因素还包括家族史，发生恶性斑痣，较大的先天性黑素细胞痣和发育不良性痣综合征。黑人少见。
恶性黑色素瘤是由皮肤和其他器官黑素细胞产生的肿瘤。原发性黑素瘤均由表皮内的黑素细胞增生所致，其表现为色素浓重的逐渐增大的结节，周围可绕以红晕。其发病率相对低，但恶性度大，转移发生早，死亡率高，恶性黑素瘤大多发生在成年后。初起为一色素斑，棕色至黑色不等，且色泽常不均匀，深浅不一，边缘不甚规则，以后可逐渐扩大，隆起成斑块、结节或肿块，甚至溃破、出血，最后发生转移。根据临床表现，恶性黑素瘤可分为以下4型：原位黑素瘤、浅表散播性黑素瘤、结节性黑素瘤、恶性雀斑样痣黑素瘤。一旦确诊，应及时作手术切除。对怀疑有转移的病例，术后还应配合化疗。
皮肤癌不同症状的表可以区分三种皮肤癌的类型。其中以基底细胞癌是最常见的，其次是鳞状细胞癌，最后才是恶性黑色素瘤。而80%的皮肤癌致死病例都是恶性黑色素瘤造成的。基底细胞癌和鳞状细胞癌是能够被治愈的。早期诊断是皮肤癌治疗成功的关键。
生物治疗是继手术、放疗和化疗后发展的第四类癌症治疗方法，系利用和激发机体的免疫反应来对抗、抑制和杀灭癌细胞。与传统的治疗方法不同，生物治疗主要是调动人体的天然抗癌能力，恢复机体内环境的平衡，相当于中医的“扶正培本，调和阴阳”。免疫疗法和基因疗法均属于生物治疗，目前临床上应用得较多的是免疫疗法。
由于生物治疗技术是利用人体自身的免疫细胞，而不是传统的化学药品来杀伤肿瘤细胞的，因此该技术安全无毒副作用，适用于癌症各阶段的治疗，专家提醒大家，在平时的日常生活中加强体育锻炼，多吃蔬菜水果，及早注意和发现一些癌前期病变，及时予以处理，这在预防上有很大的意义。
?基础论著? 两种黑色素瘤B16细胞肺转移小鼠模型的 构建和比较 李佳悦朱欣凯王萍钮利喜 【摘要】 目的 采用尾静脉接种法建立C57BL/6小鼠和KM小鼠两种黑色素瘤B16细胞肺转移 动物模型，观察小鼠肺部成瘤过程，并对两种模型进行比较。制作肿瘤切片，通过HE染色分析两种 肿瘤模型的组织病理学特征。方法培养B16黑色素瘤细胞至对数生长期时收集细胞，用生理盐水 调整浓度为5×106/ml备用。将备好的B16细胞通过尾静脉接种小鼠，每只注射0.2 ml。接种后，两种 小鼠每隔一定时间随机各取一只小鼠处死，解剖取肺，观察成瘤情况，计数肺表面的瘤结节数，测 量瘤结节大小。以出现瘤结节开始计时，记录小鼠荷瘤时间。形成稳定的肿瘤模型后，制作肿瘤组 织切片，HE染色进行病理学观察分析。结果B16细胞尾静脉接种C57BL/6小鼠和KM小鼠，均能形 成肺转移模型，但两种小鼠成瘤情况差异较大。KM小鼠的荷瘤时间比C57BL/6小鼠荷瘤时间长。HE 染色结果显示黑色素瘤B16细胞在两种小鼠的肺组织中均形成巢团状的转移瘤，且两种模型肺转移 瘤均多分布在支气管周围。结论通过对C57BL/6小鼠和KM小鼠两种黑色素瘤B16细胞肺转移小鼠 模型的成瘤特点的分析比较，可以看出KM小鼠更适合用于研究新的肺肿瘤治疗药物，为研究黑色素 瘤的发生发展提供依据。 【关键词】 B16细胞；肺转移小鼠模型；尾静脉 Establishment and comparison of two kinds of lung metastasis mouse models Li Jiayue, Zhu Xinkai, Wang Ping, Niu Lixi. Institute of Biotechnology, Shanxi University, Taiyuan 030006, China Corresponding author: Niu Lixi, Email: nlx@https://www.doczj.com/doc/d612765976.html, 【Abstract】 Objective To observe the tumorigenic process, two pulmonary metastatic models of melanoma B16 cells were established and compared using C57BL/6 and KM mice, respectively. Methods Tail intravenous injection of 1×106 melanoma B16 cells/mouse resulted in macroscopic disease by 4-9 days and a randomly selected mouse was sacrificed in a certain interval to survey the morphologic characteristics of melanoma. The number of tumor nodules in the lung surface was counted and the size of tumor nodules was measured. The tumor-burdened time of mice was recorded and the tumor sections were made for pathological observation and analysis. Results HE staining showed that each mouse in the B16 cell injection groups had nest-shape metastatic foci distributed around the bronchi in the lung, but the tumor-burdened time was significantly different which was longer in KM mice than in C57BL/6 mice. Conclusion By comparing the characteristics of two pulmonary metastatic models of C57BL/6 mice and KM mice, we can concluded that the B16 melanoma models in KM mice were ideal tumor models which were suitable for researching the new drugs in lung cancer treatment. Our research would provide evidence for the occurrence and development of melanoma. 【Key words】 B16 cells; Pulmonary metastatic mouse model; Tail vein 肺肿瘤又叫支气管肺癌（lung carcinoma）是常见的恶性肿瘤之一，近年来肺癌的发病率和死亡 DOI:10.3877/cma.j.issn.1674-0785.2015.19.022 基金项目：山西省青年基金资助项目（2011021035-5） 作者单位：030006 太原，山西大学生物技术研究所 通讯作者：钮利喜，Email: nlx@https://www.doczj.com/doc/d612765976.html, 率都有明显增高的趋势，已成为人类因癌症死亡的主要原因[1-2]。但其发病机制目前尚未完全阐明，目前治疗方法以化疗和放疗为主，治疗带来的不良反应给患者造成极大的痛苦，治疗效果亦不尽人意。新的有效的肺肿瘤治疗的方法一直在探索中。肿瘤模型是研究恶性肿瘤病因、发展过程和探索肿瘤治
皮肤 表皮：细胞分为两大类，一类是角质形成细胞，占表皮细胞的绝大多数；另一类是非角质形成细胞，散在于角质形成细胞之间，包括黑色素细胞、朗格汉斯细胞和梅克尔细胞。 表皮的分层和角化： 手掌和足底的表皮结构，从基底到表面可分为基底层、棘层、颗粒层、透明层和角层五层。薄皮的表皮，颗粒层和透明层不明显，并且角质层较薄。
1、基底层：附着于基膜上，由一层矮柱状的基底细胞组成。胞质内因有丰富的游离核糖体而呈嗜碱性，有散在或成束的角蛋白丝。 2、棘层 由4-10层多边形、体积较大的棘细胞组成。细胞表面有许多短小的棘状突起。相邻细胞的突起镶嵌，并以大量的桥粒相连。胞质呈弱嗜碱性。 3、颗粒层 由3-5层梭形细胞组成。颗粒层细胞的核与细胞器已退化，胞质内板层颗粒增多，出现许多形状不规则、强嗜碱性的透明角质颗粒。 4、透明层 由2-3层扁平细胞组成。细胞界限清楚，本层强嗜酸性。 5、角质层 由多层扁平的角质细胞组成。细胞完全角化，干硬，嗜酸性。 非角质形成细胞 1、黑素细胞 是生成黑色素的细胞。包体多分散在基底细胞之间，其突起伸入基底细胞和棘细胞之间。HE染色胞体呈圆形，核深染而胞质透明，突起不能辨认。 2、朗格汉斯细胞 散在与棘层浅部，HE染色呈圆形、核深染、胞质清亮。 真皮 1、乳头层 是紧靠表皮的薄层疏松结缔组织，向表皮突出形成真皮乳头。含有丰富的毛细血管和游离神经末梢，在手指掌侧的真皮乳头内含较多触觉小体。
2、网织层 为乳头层下放较厚的致密结缔组织，内有粗大的胶原纤维束交织成网，并有许多弹性纤维，。此层内有较多血管、淋巴管和神经，深部常可见环层小体。
原位恶性黑色素瘤 1、恶性雀斑 表皮基底层色素细胞增多，可呈单排或大小不等巢状增生。增生细胞有不同程度的异型性。异型性细胞单个或成群侵及表皮，特别是单个异型性黑色素细胞侵及表皮浅层具有诊断意义。增生黑色素细胞呈梭形、多角形、上皮样，有多形性、多为梭形，胞浆大多透明，内常可见多少不等色素。在表皮内细胞团与其周表皮界限不清，呈浸润性，胞核较大，深染，形状不规则，极向紊乱。
恶性黑色素瘤 一、 流行病学恶性黑色素瘤是一种来源于黑色素细胞的高度恶性肿瘤。该病起病隐袭、高度恶性、预后很差，临床上也比较少见，约占皮肤恶性肿瘤的1%左右。恶性黑色素瘤可见于任何年龄，较多见于中年和老年，女性稍多于男性。该病多发生于白色人种，尤其是有日晒史的人群，美国的年发病率约为10-15/10万，澳大利亚的昆士兰邦的年发病率高达16／10万，而我国的发病率较低，约为0.4-0.5/10万。但是近年来，不论国内或国外，恶性黑色素瘤的发病率均在不断上升。同样，死亡率也在不断增加，澳大利亚、新西兰的恶性黑色素瘤死亡率最高（5－6/10万），中国和日本较低（约0.2/10万）。 二、 临床表现 （一）发生部位 恶性黑色素瘤可发生于身体的任何部位，最常见于女性的四肢和男性的躯干，多发生于皮肤和邻近皮肤的粘膜，故而也常称皮肤恶性黑色素瘤。亦可见于眼球的色素膜、脑膜的脉络膜丛、以及消化道粘膜等皮肤以外的部位。皮肤黑色素瘤起源于与黑色素细胞有关的皮损，起初通常为棕色或蓝黑色小点，呈浸润性生长，生长迅速，质韧无毛，大小不等，迅速破溃，沿淋巴管可见细线状色素沉着，围绕原发灶可出现多发的隆起型卫星结节。 （二）皮肤恶性黑色素瘤分型： 1．表浅播散型黑色素瘤（SSM）：占所有皮肤恶性黑色素瘤的70%，早期为扁平状，至垂直生长期时皮损进一步增大，周边呈锯齿状。 2．结节型黑色素瘤（NM）：占所有皮肤恶性黑色素瘤的15-30%，侵袭性较强，颜色较深，多为蓝黑色，类似血泡或血管瘤，也有红色、灰色、紫色，甚至无色。 3．雀斑型黑色素瘤（LMM）：较少见，约占所有皮肤恶性黑色素瘤的4-10%，几乎均局限于头颈部，多为棕黄色皮损，周边纤细迂曲，呈锯齿状，较少出现转移。 4．肢端雀斑型黑色素瘤（ALM）：仅占所有皮肤恶性黑色素瘤的2-8%，病变特征性出现于手掌、足底或甲床下，呈棕黄色或褐色，可突然出现颜色改变。多发生于老年人，发病较快，侵袭性强，容易出现转移。除了皮肤以外，约有10%的恶性黑色素瘤发生于皮肤以外的部位，其中常见的部位包括眼球的色素膜、脑膜的脉络膜丛、以及消化道粘膜等。其中色素膜黑色素瘤是眼内最常见的恶性肿瘤，根据发生的部位可以分为虹膜、睫状体和脉络膜黑色素瘤，一般生长缓慢、恶性程度较低、预后优于皮肤黑色素瘤。消化道粘膜黑色素瘤发生率不高，主要发生于肛门区，临床无特异性症状，淋巴结常受累，预后较差，还可发生于口腔粘膜或食管粘膜。淋巴结是恶性黑色素瘤最常见的转移部位，主要表现为区域淋巴结转移，远处转移常见的部位包括皮肤及软组织、肺、肝脏等。 三、诊断与鉴别诊断 皮肤黑色素瘤可发生于皮肤的任何部位，多见于白皙或光亮的皮肤，尤其有日光暴露史的人群。与含色素的皮损密切相关，当皮损出现以下变化时，常提示早期皮肤恶性黑色素瘤的可能：①颜色改变，尤其以蓝黑色、灰色、棕色和杂色最为重要；②表面不规则隆起、粗糙、脱屑和渗液等；③周边参差不齐，呈锯齿状；④皮损迅速增大、持续瘙痒、结痂或出现卫星
黑色素瘤一般指恶性黑素瘤，是一种能产生黑色素的高度恶性肿瘤。大多见于30岁以上成年人，发生于皮肤、粘膜和内脏器官。黑色素瘤的预后多数较差，晚期可有淋巴道及血液转移。是由皮肤和其他器官黑素细胞产生的肿瘤。虽其发病率低，但其恶性度高，转移发生早，死亡率高，因此早期诊断、早期治疗很重要。下面就给大家介绍一下指甲黑色素瘤的早期症状，帮助患者更好治疗疾病。 指甲黑色素瘤早期症状 指甲下黑线或黑褐色病变突然增大，尤其在45岁以上者;甲下损伤治疗经久不愈者;指(趾)外伤后持续存在甲下损害症状者;病情发展迅速，局部溃烂严重者。当患者发现以上几种情况时，应及时切取甲下组织行病理学检查，这样就可以及早明确诊断。 指甲黑色素瘤真正要担心的是只有一个指甲出现黑色条纹，此时可能是良性黑色素瘤、指甲下出血或恶性黑色素瘤，或反复局部外伤、摩擦刺激甚至是甲癣的结果。由此可见，指甲黑色素瘤患者要时刻注意自己的身体健康，当发现以上现象时一定要及时到正规的皮肤病医院进行检查治疗，以免引起慢性肾衰竭，进而威胁到患者朋友们的生命健康。 指甲黑色素瘤一旦诊断，患者一定要及时治疗，临床上治疗黑色素瘤的方法主要有手术、放化疗和中医治疗等。手术是黑色素瘤的首选治疗方法，尤其是早期患者。通过手术对癌肿的切除可快速、有效控制病情发展，提高患者的5年生存率。由于黑色素瘤对放化疗不敏感，放化疗多作为手术治疗的辅助治疗方法或晚期患者的姑息治疗方法，通过对机体内癌细胞的杀伤控制病情扩散、转移，在一定程度上延长患者的生存期。但需要注意的是，手术不仅会对机体造成较大创伤，而且还无法完全切除病灶，术后会伴随多种并发症，甚至出现复发、转移。而放化疗由于在杀伤癌细胞过程中也会损伤正常细胞，从而造成严重的毒副作用，需要患者特别警惕。 中医治疗是我国传统医学治疗方法，中医治疗的最大优势在于标本兼治，治疗过程中不仅能够杀伤机体内癌细胞，控制病情发展，而且还能够调理机体，增强机体的免疫力和抵抗力，对促进患者康复，降低其复发、转移几率有重要作用。如中医中口碑较好的三联平衡疗法，既可以单独作用于患者，而且还能够辅助其他治疗方法，如辅助手术、放化疗可达到增效排毒功效，促进患者早日实现康复或长期带瘤生存。 以上就是关于指甲黑色素瘤早期症状的介绍，希望对广大患者有帮助，总之患者一旦发现以上症状，及时的到正规的医院做检查，做到早发现早治疗，减少黑色素瘤对人们的伤害。
《中国黑色素瘤诊断治疗共识》 恶性黑色素瘤(MM)是恶性程度较高,临床预后较差的恶性肿瘤。在西方国家属于发病率前5位而死亡率第1位的恶性肿瘤。在我国,由于以前MM发病率较低,未引起人们足够重视,近年来其发病率增长迅速,而临床医生对其诊断和治疗与其它恶性肿瘤相比较为生疏。在MM的规范化诊断治疗方面,与西方国家也存在较大差距。 为宣传普及黑色素瘤知识并促进中国MM诊断治疗的规范化,2007年5月,在解放军南京八一医院秦书逵教授及北京肿瘤医院郭军教授的倡导下,CSCO黑色素瘤专家委员会正式成立,并先后在杭州、南京等地召开了专家组会议。小组十几位专家教授以循证医学证据为基础,综合分析评价了国内外相关资料, 于2008年8月正式发布第一版《中国黑色素瘤诊断治疗共识》,并希望通过循证医学证据的不断补充,最终制定出适合中国患者的黑色素瘤诊治指南,为国内临床医生提供实用的临床实践工具。 1. 概述 MM是皮肤肿瘤的一种,由位于表皮基底部的黑色素细胞恶变而成,多由痣或色素斑发展而来,一旦进入快速生长期,则预后差、死亡率高。90%的MM发生于皮肤,最常见于背部、胸腹部和腿部,可见于足底、指趾、甲下和头皮,少数发生于外阴、消化道和眼内。MM与鳞癌和基底细胞癌不同,后两种起源于表皮的角质细胞,预后较好。 早期MM经外科扩大切除后95%-100%可治愈。因此,早期发现与早期诊断非常重要。皮肤MM的早期临床表现为痣或色素斑迅速增大、隆起、破溃不愈、边缘不整或有切迹和锯齿、颜色改变、局部形成水疱、瘙痒、刺痛等。进而可出现卫星灶、局部淋巴结肿大、移行转移(经由淋巴管在原发病灶与区域引流淋巴结之间形成皮下结节)和远处转移。常见的远处转移部位包括远处皮肤、淋巴结、肺、脑、肝、骨等。 MM预后与患者性别、年龄、肿瘤部位、厚度、淋巴结转移个数及乳酸脱氢酶(LDH)等相关。通常,女性患者预后好于男性;发生于四肢的MM预后最好,躯干其次,头颈部最差;分期较早者预后较好;LDH较低者预后较好,LDH<0.8正常值者生存期较长;有1个淋巴结转移者5年生存率为75%,有3个转移者为15%;浸润深度<1 mm者10年生存率>90%,浸润深度>4.5 mm者10年生存率为30%。 2. 流行病学与病因学 MM是所有恶性肿瘤中发病率增长最快的肿瘤,年增长率约3%-5%。MM平均发病年龄为45岁,50岁以后发病率随年龄增长而升高。 白种人发病率高于其他肤色人种。英国近5年来MM男性发病率增加了28%,女性增加了12%。美国2007年估计MM新发病例59940人,死亡约8110人。澳大利亚昆士兰和美国的南亚利桑那州为MM高发地区,发病率分别为40例/10万和30例/10万。中国和日本等亚洲国家发病率较低,但增长迅猛。北京市八城区统计资料显示,2000年MM发病率为0.2例/10万,2004年已达1例/10万。 MM的病因学在白种人中研究较多,主要认为其与日照相关。日光中的紫外线灼伤皮肤诱导DNA突变。紫外线中的UV A和UVB均可诱导MM的发生,但UVB在破坏黑色素细胞的某种基因并诱导MM发病中起主要作用。研究已证实,位于9号染色体短臂的p16或CDKN2A的基因突变是造成黑色素瘤高遗传易感性的主要原因。 亚洲和非洲地区的MM患者原发病灶多位于足跟、手掌、指趾和甲下等接触紫外线极少的地方,其病因尚不明确。不恰当的处理有可能诱导黑色素瘤的迅速生长,如刀割、绳勒、盐腌、激光和冷冻等。内分泌、化学、物理因素对MM的发生是否有影响尚不清楚。 3. 病理类型 MM常见病理类型有浅表扩散型、结节型、恶性雀斑样和肢端雀斑样;少见类型有促纤
黑色素瘤，又称恶性黑色素瘤，是来源于黑色素细胞的一类恶性肿瘤，常见于皮肤，亦见于黏膜、眼脉络膜等部位。是皮肤肿瘤中恶性程度最高的瘤种，容易出现远处转移。特别是发展到了晚期出现脑转移，危及患者的生命安全，很多患者和家属想了解一下黑色素瘤出现脑转移会有哪些症状，下面一起来看一下。 黑色素瘤的早期特征包括：现有皮肤色素痣的形态或颜色改变、皮肤表面出现隆起物、色素痣瘙痒、局部出现破溃出血、指（趾）甲开裂等。早期皮肤黑色素瘤进一步发展可出现卫星灶、溃疡、反复不愈、区域淋巴结转移和移行转移。晚期黑色素瘤根据不同的转移部位症状不一，容易转移的部位为肺、肝、骨、脑。而脑转移是晚期黑色素瘤常见的转移部位，下面一起来看一下黑色素瘤脑转移的典型症状有哪些。 1、颅内压增高症状表现为头痛，呈进行性加重，伴恶心、呕吐。 2、蛛网膜下腔出血或肿瘤卒中症状当肿瘤侵及血管时，可发生肿瘤内脑实质内或蛛网膜下腔出血。临床上可出现突发性意识障碍、呕吐，甚至发生脑疝。 3、神经系统损害定位症状肿瘤发生于脑实质内或侵入脑室内可发生偏瘫、失语、偏盲、癫痫、精神症状等。发生于脊髓可出现相应脊髓节段感觉、运动障碍。 4、其他肿瘤位于颅底可侵及多组脑神经，出现多组脑神经损害。肿瘤代谢产物对软脑膜或蛛网膜的刺激可产生蛛网膜炎或脑膜炎症状。蛛网膜炎性反应及肿瘤细胞在蛛网膜下腔扩散、聚集可引起脑积水，继而出现颅内压增高症状。 另外，由于颅内黑色素瘤生长快、病程短，常易误诊为蛛网膜炎、脑血管病、颅内胶质瘤及癫痫等。临床上凡病程短，颅内压增高症状发展快，CT及MRI检查明显占位效应，体表或内脏有黑色素瘤手术史，应想到颅内黑色素瘤的可能性。术中发现肿瘤区域的硬脑膜、脑组织或肿瘤呈黑色病变，为诊断颅内黑色素瘤的可靠依据。但术前很难达到定性诊断。 袁希福院长介绍，黑色素瘤由于病情发展较快，当出现早期症状的时候一定要注意，同时生活中也要养成良好的习惯，积极段炼身体，减少疾病的发生。
【病理改变】恶性黑素瘤的典型病理特征是在真皮表皮交界处不不典型的黑素细胞增生，且瘤细胞侵犯表皮和真皮。瘤细胞呈双相分化，上皮细胞型与梭形细胞型。细胞核呈显著异形性，核形怪异。还可见单核、双核或多核，常见核分裂象。恶黑的组织病理形态因不同类型而不尽相同。 1.恶性雀斑样痣黑素瘤：表皮萎缩，基底层有较多不典型黑素细胞，并向下侵袭真皮，瘤细胞内或细胞间质中噬色素细胞含有相当多的黑素。 2.浅表扩散性黑素瘤：表皮突向下不规则增生，真皮表皮交界处和真皮内可见不典型的痣细胞巢，除上皮细胞型与梭形细胞型的黑素细胞外，有时表皮上部还可见少数paget样黑素细胞。真皮炎症细胞浸润明显。 3.结节性黑素瘤：不典型黑素细胞垂直向下增生侵入真皮，而不向表皮侵犯。上皮细胞型的黑色素细胞常排成腺泡状；梭形细胞型则类似成纤维细胞，有时作束状排列。 4.肢端雀斑样痣黑素瘤：表皮增厚，含大量色素的不典型黑素细胞巢位于表皮下部，常见梭形黑素细胞。表皮上部也可见paget样的黑素细胞，真皮乳头可见噬色素细胞。无黑素性恶性黑素瘤的细胞形态结构具备恶黑特点，HE染色中无明显黑素，用多巴（Dopa）试验可呈阳性反应，银染色可显示少量黑素。对恶黑的组织学诊断除了确诊、分型外，还应观察其侵袭程度，瘤细胞侵犯愈深则预后愈差。通常采用Clork深度和Breslow厚度两个主要参数来表示。（1）Clork分级：Ⅰ级：瘤细胞限于表皮内；Ⅱ级：侵入真皮乳头；Ⅲ级：充满真皮乳头；Ⅳ级：侵入真皮网状层；Ⅴ级：侵入皮下脂肪层。从Ⅰ级到Ⅴ级的5年存活率依次为99%，95%，90%，65%和25%。（2）Breslow测定法是用目镜测微器测量肿瘤厚度。肿瘤厚度与患者5年存活率的关系为：厚度小于0.85mm为98%；0.8～1.69mm为90%；1.7～3.59mm为70%；大于3.6mm为45%。
药学基础期末论文 实验名称黑色素瘤药物Opdivo介绍与分析学生姓名郭明岳 学号1253370 学院生命科学与技术学院
黑色素瘤药物Opdivo介绍与分析 摘要：Opdivo是2014年12月22日美国食品与药品监督管理局（Food and Drug Administration，FDA）批准上市的一款用于治疗不可切除或晚期黑色素瘤的抗体药物，其作用原理是抑制PD-1与PD-L的结合。与同类药物相比，在临床试验中Opdivo表现出较高药物效果，并且药物副作用较小。由于PD-1/PD-L通路的广谱性，Opdivo治疗其他多种肿瘤的试验正在进行当中，预测Opdivo在未来几年将在肿瘤的治疗当中发挥重要的作用。 关键词：黑色素瘤药物；Opdivo；nivolumab；PD-1抑制剂 一、药物基本介绍 Opdivo（图1）的通用名是nivolumab， 是由日本小野制药与美国百时美施贵宝 公司（Bristol Myers Squibb）合作开发的 一种实验性全人源化单克隆抗体IgG4药 物，主要用于治疗不能切除或对已有药 物无应答的晚期黑色素瘤，作用原理是 通过抑制PD-1与程序性死亡配体1 ( PD-L1 ) 和程序性死亡配体2 ( PD-L2) 图1 的结合，使T 细胞恢复对肿瘤的免疫应 答能力[1]。2014年7月4日，Opdivo 率先在日本获批，成为全球首个批准上市的抗PD-1药物。2014 年6月24 日，美国百时美施贵宝公司宣布Opdivo用于黑色素瘤的Ⅲ期临床试验因显著延长患者总存活期而提前终止，2014 年12 月22 日，Opdivo获FDA 批准，成为自2011年以来第七个获得FDA批准的黑色素瘤药物，同时也是第二个在美国上市的PD-1 抑制剂[2]。 二、背景知识 1.黑色素瘤 恶性黑色素瘤是由皮肤或其他器官黑素细胞产生的肿瘤。皮肤黑色素瘤表现为色素性皮损在数月或数年中发生明显改变。在欧美地区，黑色素瘤的发病率较高，并且其恶性度高，转移发生早，死亡率高。2010 年全球黑色素瘤新发病例199 627例，死亡例数为46372例[3]。黑色素瘤的病因目前还没有被完全阐明，基因和环境等多种因素导致了黑色素瘤的恶性转化，已知恶性转化的关键细胞通路有：Rb通路、p53通路、PI3K/AKT通路和RAS/MAPK通路（20～30%NRAS突变，55～60%BRAF突变）。 2.PD-1/PD-L通路 PD-1是一种表达在细胞表面的免疫球蛋白超家族分子，因最初发现PD-1的表达与细胞程序性死亡相关而被命名为PD（Programmed Death）[4]。后来研究发现HIV病毒特异性攻击的T细胞上有PD-1的表达，PD-1与其配体PD-L结合会抑
恶性黑色素瘤有哪些常见的临床表现呢?恶性黑色素瘤的它一部分是从黑痣(特别是交界痣和复合痣)演变而来;另一部分则发源于皮肤或雀斑的基础上。黑痣演变为黑色素瘤的真正原因仍然不详，外伤或各种外在刺激常被视为诱因。虽然恶性黑色素瘤是一个发展迅速，容易广泛转移的高度恶性肿瘤。然而其生物行为也有很大变异性，病变可以静止多年，或仅缓慢增大;也可以很快增大，并在短期内转移。 恶性黑色素瘤常见的临床表现有以下几点： 1.良性交界痣镜下所见为良性大痣细胞。并无异性细胞，仅在真皮内生长，其炎性反应不明显。 2.幼年性黑色素瘤于小孩面部呈生长缓慢的圆形结节。镜下见细胞呈多形性，有核分裂，瘤细胞不向表皮浸润，且瘤体表面亦不形成溃疡。 3.细胞性蓝痣好发于臀、尾骶及腰部。呈淡蓝色结节，表面光滑而不规则，镜下可见树枝状突的深黑色细胞，大棱形细胞，并集合成细胞岛。有核分裂相或坏死区时，应考虑到有恶变的可能。 4.基底细胞癌是上皮细胞的恶性肿瘤。由表皮的基底层向深部浸润，癌巢周围为一层柱状或立方形细胞，癌细胞染色深，无一定排列，癌细胞内可含黑色素。 5.老年痣见于老年人体表呈疣状的痣。表皮过度角化，粒层部分增厚或萎缩，棘层肥厚，基层完整。亦可有色素增加，真皮乳头增殖，外观呈乳头瘤样增生。 6.硬化性血管瘤表皮过度角化。真皮乳状增殖，扩张的毛细血管常被向下延伸的表皮突围绕，貌似表皮内血肿一样。 7.脂溢性角化病病灶亦呈乳头瘤样增生。表皮下界限清楚，角化不完全。粒层先增厚，后变薄甚或消失，增生的表皮细胞内可有少量或较多的黑色素。 8.甲床下血肿多有相应外伤史。镜下为干枯的血细胞，可有上皮成纤维细胞增生。 据了解，以上这些恶性黑色素瘤常见的临床表现，对于及时发现和诊断恶性黑色素瘤是有很大作用的。
对小鼠黑色素瘤细胞肺转移的抑制作用mGM 作者：田蓉，程绍辉，于继云，李巍，刘玉峰 【关键词】黑色素瘤 Inhibition of lung metastasis of B16 melanoma cells transfected with murine granulocytemacrophage colonystimulating factor in mice 【Abstract】AIM: To investigate the inhibition of lung metastasis of melanoma by a tumor vaccine of B16 melanoma cells transfected with murine granulocytemacrophage colonystimulating factor (mGMCSF). METHODS: The murine melanoma cell line B16 was transfected with the recombinant plasmid containing mGMCSF. A cell line stably expressing mGMCSF was obtained by G418 selection. The Balb/c mice were administered i.v. with B16 cells transfected with or without mGMCSF respectively and the lung metastasis was examined 2 weeks later. RESULTS: The recombinant cell line B16TR was established after mGMCSF tranfection and the expression of mGMCSF was confirmed by RTPCR. The number of lung metastatic lesions of mice treated
肺原发性恶性黑色素瘤一例 病情简介：患者女，49岁，因胸壁疼痛不适3个月余，于2012年8月15日入院。临床表现：前上胸壁疼痛不适，呈持续性牵扯痛，伴气促，左上肺呼吸音稍减低；脊柱呈"S"形改变，全身浅表淋巴结未扪及，其他部位未见皮疹及结节。影像检查：胸部CT平扫示左肺上叶前段一大小约4．3 cm×2．8 cm × 3．5 cm团状软组织肿块，CT值48 HU，形态不规则，呈分叶状，边界清楚，部分与胸膜粘连，其内见斑片状稍低密度影，脊柱呈"s"形侧弯畸形。增强扫描示动脉期病灶呈中度强化，CT值66 HU，纵隔及肺门未见肿大淋巴结；延迟300 S后扫描病灶呈持续强化，CT值64 HU。CT诊断考虑为左肺上叶周围性肺癌。头颅CT平扫未见异常。全身PET骨显像：静脉注射锝一亚甲基二磷酸盐(99Tc m一MDP)74 MBq后全身骨骼未见明显对比剂异常浓聚和稀疏缺损。腹部彩色超声示：肝、胆、胰腺、脾脏、双侧肾上腺、肾脏、子宫、卵巢、膀胱未见异常。手术病理：肿块位于左肺上叶前段边缘，直径约3．0 cm，类圆形，质韧，边界清，剖面呈黑色均质结构，左肺门未见肿大淋巴结，行左肺上叶楔形切除送检。免疫组织化学：细胞角蛋白20(CK20)阴性，肿瘤增殖抗原(Ki-67)阳性(35％)，黑色素瘤单克隆抗体(HMB-45)、黑色素 A(Melan-A)、波形蛋白(Vimemtin)、S-100蛋白均阳性。病理诊断：左肺上叶原发性恶性黑色素瘤。 诊断：肺原发性黑色素瘤
诊断依据： 1. 女性患者，49岁。 2. 主要表现为胸部疼痛不适，左上肺呼吸音稍减低，全身浅表淋巴 结未扪及。 3. 辅助检查：胸部CT提示左肺上叶前段一大小约4．3 cm×2．8 cm × 3．5 cm团状软组织肿块，CT值48 HU，形态不规则，呈分叶状，边界清楚，部分与胸膜粘连，其内见斑片状稍低密度影，脊柱呈"s"形侧弯畸形。增强扫描示动脉期病灶呈中度强化，CT值 66 HU，纵隔及肺门未见肿大淋巴结；延迟300 S后扫描病灶呈 持续强化，CT值64 HU。手术病理：肿块位于左肺上叶前段边缘，直径约3．0 cm，类圆形，质韧，边界清，剖面呈黑色均质结构，左肺门未见肿大淋巴结，行左肺上叶楔形切除送检。免疫组织化学：细胞角蛋白20(CK20)阴性，肿瘤增殖抗原(Ki-67)阳性(35％)，黑色素瘤单克隆抗体(HMB-45)、黑色素A(Melan-A)、波形蛋白(Vimemtin)、S-100蛋白均阳性。 鉴别诊断：须首先除外转移性恶性黑色素瘤。肺转移性恶性黑色素瘤可表现为多结节、孤立肿块、支气管内肿块或弥散的黏膜黑变病，也可能出现原位的Paget样播散，这时应重视是否有准确的皮肤色素性损害病史，进行仔细全面体检以排除其他部位的转移。肺原发性恶性黑色素瘤外观上与其他肿瘤无明显区别，其切面常呈灰黄色与灰黑色相问，具有一定特征。光镜下细胞异型性明显，核分裂象易见，但
不同微环境下黑色素瘤细胞三维结构差异癌症是一种衰老的疾病。从临床来看，老年癌症患者的预后往往比年轻人差。这可能是由于细胞损伤累积、适应性免疫下降和慢性炎症。然而，老年微环境对肿瘤进展的影响在很大程度上尚未被探索。由于真皮成纤维细胞对黑色素瘤进展有深远的影响，研究了真皮成纤维细胞的年龄相关变化是否可以驱动黑色素瘤转移和靶向治疗的反应。 目前关于老化的微环境对黑色瘤的发展，其中是否对黑色素瘤的三维结构差异效果未知，因此我们设计此实验达到如下两个目的： （1）不同肿瘤微环境下对黑色瘤的三维结构变化产生的影响 （2）尝试寻找老化微环境下对黑色瘤的作用机制，通过哪条通路上关键基因进而调控一系列基因表达变化起保护作用。 Part I. 老化微环境黑色瘤细胞模型构建 利用2个黑色素瘤细胞系（WM35和WM793）、年轻（<35岁）或衰老（>55岁）的成纤维细胞系构建了器官型皮肤重建。 （1）WM35+年轻（<35岁）成纤维细胞系 （2）WM35+衰老（>55岁）成纤维细胞系 （3）WM793+年轻（<35岁）成纤维细胞系 （4）WM793+衰老（>55岁）成纤维细胞系 测定指标： a. CCK8 测增殖（不同组分） b. 检测MDA、SOD 及ROS 含量的变化 C. 黑色瘤细胞形态变化 Part II. 不同微环境下黑色瘤动物模型构建及三维结构变化 实验材料：实验室构建小鼠黑色瘤模型（依据“Dankort, D. et al. BrafV600E cooperates with Pten loss to induce metastatic melanoma. Nature Genet. 41, 544–552 (2009).”) 实验分组：每组尽量多做生物学重复，减少个体误差。 Yumm1.7细胞来自于Braf V600E /Cdkn2a - / - /Pten - / - 小鼠黑色素瘤模型 （1）8周龄小鼠（幼龄）（注射Yumm1.7）
中国黑色素瘤诊断治疗共识 （2008年第一版） 目录 一、概述 二、流行病学与病因学 三、病理 四、临床病理分期 五、治疗流程及原则 六、辅助治疗 七、手术治疗 八、放疗 九、全身治疗 十、随访 1
一、概述 恶性黑色素瘤(malignant melanoma, MM)是皮肤肿瘤的一种，与鳞癌和基底细胞癌不同。后两种起源于表皮的角质细胞，预后较好。皮肤恶性黑色素瘤是由位于表皮基底部的黑色素细胞恶变形成的，多由痣或色素斑发展而来，一旦进入快速生长期，则预后差、死亡率高。恶性黑色素瘤90%发生于皮肤，最常见于背部，胸腹部和腿部，足底、指趾、甲下、头皮等部位也不少见；少数发生于外阴、消化道和眼内。 早期恶性黑色素瘤经外科扩大切除术后95%-100%可治愈。因此早期发现与早期诊断非常重要。皮肤MM的早期临床表现为痣或色素斑迅速增大，隆起，破溃不愈，边缘不整或有切迹、锯齿，颜色改变、局部形成水泡、瘙痒、刺痛等。进而可出现卫星灶、局部淋巴结肿大，移行转移（原发病灶与区域引流淋巴结之间的皮下结节，通过淋巴管转移）和远处转移1。常见的远处转移部位包括远处皮肤淋巴结、肺、脑、肝、骨等部位，有文献报道仅发生肺转移的预后好于其它远处转移2。 恶性黑色素瘤的预后与性别、年龄、部位、肿瘤厚度、淋巴结转移个数及LDH等相关3。通常来说女性预后好于男性，四肢最好，躯干其次，头颈部预后最差；分期越早预后越好，LDH 越高预后越差。淋巴结有1个转移的5年生存率为75%，有3个转移的为15%；浸润深度<1mm的10年生存率>90%，浸润深度>4.5mm的10年生存率为30%；2008年ASCO会上报道LDH<0.8正常值的患者较LDH高的患者总生存明显延长4。 二、流行病学与病因学：恶性黑色素瘤是所有恶性肿瘤中发病率增长最快的肿瘤，年增长率约3-5%5。英国近5年来MM男性发病率增加了28%，女性增加了12%。据报道美国2007年估计MM 新发病例59940人，死亡约8110人。澳大利亚昆士兰和美国的南亚利桑那州为MM的高发地区，发病率分别为40/10万，30/10万6。白种人发病率高于其他肤色人种。中国和日本等亚洲国家发病率低，但是增长迅猛。北京市八城区统计资料显示2000年恶性黑色素瘤发病率为0.2/10万7，2004年其发病例率已达1/10万。MM平均发病年龄为45岁，50岁以后随年龄 2
恶性黑色素瘤晚期4大症状 恶性黑素瘤是由皮肤和其他器官黑素细胞产生的肿瘤。皮肤黑素瘤表现为色素性皮损在数月或数年中发生明显改变。虽其发病率低，但其恶性度高，转移发生早，死亡率高，因此早期诊断、早期治疗很重要。很多患者对于晚期黑色素瘤的症状不了解，下面详细看一下。 恶性黑色素瘤晚期症状 1、发热：其病因繁多，如细菌、病毒的感染，结缔组织病，还有功能性发热，这就是恶性黑色素瘤晚期症状。 2、疼痛：当正常组织收到肿瘤的破坏和浸润，导致对邻近的神经根受到压迫和破坏，局部组织缺血坏死，血液回流受阻，骨与骨膜受到浸润均可引起疼痛。因此，疼痛是恶性黑色素瘤晚期症状。 3、恶病质这种恶性黑色素瘤晚期症状是特指晚期肿瘤患者出现的极度消瘦、精神萎糜、体力虚衰。 4、恶性腔内积液：恶性腔内积液是恶性黑色素瘤晚期症状，在临床上并不少见，但如处理不当可致迅速恶化以致死亡。 黑色素瘤发展到了晚期，选择合适的治疗方案是比较重要的，晚期黑色素瘤手术、放化疗等治疗，对于黑色素瘤晚期淋巴结转移及多个内脏发生病弯和转移者，疗效差，无法从根本上杀灭癌细胞，常造成残存的癌细胞，发生复发和转移的高危并发症。 晚期黑色素瘤中医治疗比较普遍，中医有非常强的整体观念，往往能从病人全身的特点加以考虑，而不只是局限在癌症病灶本身。中医调理能纠正机体的某些失调，中药对健康细胞的伤害比较小，一般不会因治疗本身的原因对体力产生新的破坏，在癌症好转的同时，体力也会渐渐得到恢复，逐步增强免疫力。 晚期黑色素瘤往往并发症比较多，中医治疗从整体出发，治疗“肿”、“痛”、“水”这些“标”症的同时，更注重辨病因、病机，重点治疗肿瘤“虚”、“瘀”、“毒”三大本质，并且调整全身的免疫和阴阳平衡，达到标本兼治的目的。 中医治疗讲究辩证论治，对症治疗，想要取得比较好的效果，需要中医有深厚的中医功底和丰富的经验，要有行之有效的方药，才能起到良效。并不是每个中医都能治疗癌症，那是对癌症病人生命的极不负责。 在临床上，很多患者和家属都推荐出身于中医世家的袁希福教授，行医30多年，医治过的病人不计其数，其中各种肿瘤病人数以万计，积累了丰富的临床经验。其独创的中医三联平衡疗法治疗注重从患者整体入手，采用天然中草药，通过对不同病人，病因病机的辩证治疗，起到“培元固本”“化痰散结”“排毒减毒”的功效，从而减轻病人痛苦，延长病人生命的效果。 在临床上，有很多患者通过中医药的长期调理，不仅症状得以改善，饮食恢复，体重增加，患者也过上正常的生活，生命也得以延长，有的被判了几个月的生存期，生活不能自理，但是通过中医药的长期调理，过上了正常的生活，生命也得以延长，生存期可达3-10年，甚至长期带瘤生存，因此晚期患者也要积极治疗。 通过上述介绍大家应该对黑色素瘤晚期的症状有了更多的了解了，黑色素瘤发展到了晚期，往往病情比较严重，建议患者及时治疗，保持良好的心态，选择合适的治疗方案都有助于减少患者的痛苦，让晚期患者也能过上正常的生活。
文章编号：１００７－４２８７（２０１０）０４－０５２６－０２ 参一胶囊（Ｒｇ３）诱导小鼠黑色素瘤细胞凋亡 孙宝胜１，张 矛２，刘林林２，孙 晶３，侯吉光４ （１．吉林省肿瘤医院放疗三科，吉林长春１３００２１；２．吉林大学第二医院肿瘤生物治疗科； ３．吉林大学第二医院药剂科；４畅吉林大学第二医院放疗科） 摘要：目的 探讨参一胶囊（Ｒｇ３）对小鼠黑色素瘤细胞的生长抑制及其诱导凋亡的作用。方法 ＭＴＴ法检测参一胶囊（Ｒｇ３）对黑色素瘤细胞生长的影响；流式细胞仪检测细胞凋亡。结果 参一胶囊（Ｒｇ３）对小鼠黑色素瘤细胞生长有显著的抑制作用，并能显著诱导细胞发生凋亡，其作用呈明显的量效和时间依赖性关系。结论 参一胶囊（Ｒｇ３）诱导小鼠Ｂ１６－４Ａ５黑色素瘤细胞凋亡，抑制细胞增殖。 关键词：参一胶囊；黑色素瘤细胞；细胞凋亡 中图分类号：Ｒ９６５文献标识码：Ａ ＭｅｌａｎｏｍａｃｅｌｌａｐｏｐｔｏｓｉｓｉｎｄｕｃｅｄｗｉｔｈＲｇ３ ＳＵＮＢａｏ－ｓｈｅｎｇ１，ＺＨＡＮＧＭａｏ２，ＬＩＵＬｉｎ－ｌｉｎ２，ｅｔａｌ．（１．ＪｉｌｉｎＰｒｏｖｉｎｃｉａｌＴｕｍｏｒＨｏｓ－ｐｉｔａｌ，Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ１３００１２，Ｃｈｉｎａ；２．ＴｈｅＳｅｃｏｎｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＪｉｌｉｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ ＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆＲｇ３ｏｎｔｈｅａｐｏｐｔｏｓｉｓｏｆｍｅｌａｎｏｍａＢ１６－４Ａ５ｃｅｌｌｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ＴｈｅｃｅｌｌｇｒｏｗｔｈａｎｄａｐｏｐｔｏｓｉｓｗｅｒｅａｓｓｅｓｓｅｄｗｉｔｈＭＴＴｍｅｔｈｏｄａｎｄｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｒｇ３ｈａｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｅｆｆｅｃｔｏｎＢ１６－４Ａ５ｃｅｌｌｇｒｏｗｔｈ，ａｎｄｉｎｄｕｃｅｄｔｈｅａｐｏｐｔｏｓｉｓｗｉｔｈａｄｏｓｅ－ａｎｄｔｉｍｅ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔｍａｎｎｅｒ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｒｇ３ｃａｎｉｎｈｉｂｉｔＢ１６－４Ａ５ｃｅｌｌｇｒｏｗｔｈａｎｄｉｎｄｕｃｅａｐｏｐｔｏｓｉｓ． Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｒｇ３；ｍｅｌａｎｏｍａｃｅｌｌ；ａｐｏｔｏｓｉｓ （ＣｈｉｎＪＬａｂＤｉａｇｎ，２０１０，１４：０５２６） 人参皂苷Ｒｇ３是从人参中提取的有效单体成分。研究证明，人参皂苷Ｒｇ３可通过抑制肿瘤血管形成，阻断肿瘤的浸润和转移［１，２］；提高肿瘤病人免疫力，抑制转移，并降低肿瘤病人放、化疗后毒副作用［３］。本文通过观察人参皂苷Ｒｇ３对黑色素瘤细胞的存活率及细胞凋亡的变化，为其临床应用提供重要的实验依据。 １ 材料与方法 １．１ 试剂 细胞培养液、小牛血清、青霉素、链霉素、谷氨酰胺、胰酶和磷酸盐缓冲液均购自Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ公司（Ｐａｉｓｌｅｙ，Ｓｃｏｔｌａｎｄ，ＵＫ）。Ｔａｕｒｏｌｉｄｉｎｅ（Ｔａｕｒｏｌｉｎ）溶剂由ＧｅｉｓｔｌｉｃｈＰｈａｒｍＡＧ（Ｗｏｌｈｕｓｅｎ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）赠送。其他的化学试剂均购于ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ公司（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）。 １．２ 细胞及培养 小鼠黑色瘤细胞（Ｂ１６－４Ａ５）购于美国细胞库（Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ）。Ｂ１６－４Ａ细胞均在含有１０％小牛血清、青霉素（１００Ｕ?ｍｌ－１）和谷氨酰胺（２ｍｍｏｌ?Ｌ－１）的ＤＭＥＭ培养液培养，并在３７℃、５％ＣＯ２孵箱中贴壁生长。１×１０５?ｍｌ－１。将Ｂ１６－４Ａ５细胞种植在９６孔培养板（１００μｌ?ｗｅｌｌ－１）２４ｈ后，分别给予不同浓度的ｔａｕｒｏｌｉ－ ｄｉｎｅ，并确定最终浓度分别为０、１０、２５、５０、１００和２００μｍｏｌ?Ｌ－１。５％的ＰＶＰ作为空白对照组。Ｂ１６－４Ａ５细胞在３７℃、ＣＯ２孵箱中培养２４和４８ｈ后，给予１００μｌＭＴＴ（５．０ｇ?Ｌ－１），３７℃继续培养３ｈ，终止培养，吸去上清，每孔加入１５０μＬ二甲基亚砜，振荡１０ｍｉｎ在酶联免疫吸附仪上测量各孔光吸收值（ＣＰＭ）。细胞生长抑制率（％）＝（１－实验组ＣＰＭ值／对照组ＣＰＭ值）×１００％。 １．４ 流式细胞术检测细胞凋亡 待Ｂ１６－４Ａ５细胞接近对数生长期，常规消化细胞，制成２．５×１０５?ｍＬ－１细胞悬液，接种于６孔培养板中。２４ｈ后，实验组给予上述不同浓度的ｔａｕｒｏｌｉ－ｄｉｎｅ。５％的ＰＶＰ作为空白对照组。Ｂ１６－４Ａ５细胞在３７℃，ＣＯ２孵箱中培养２４和４８ｈ后，将贴壁及悬浮的细胞离心，收集后震荡、混匀，在碘化丙啶（ＰＩ）混合溶液中（５０ｍｇ?Ｌ－１ＰＩ，３．４ｍｍｏｌ?Ｌ－１ｓｏｄｉｕｍｃｉｔ－ｒａｔｅ，１．０ｍｍｏｌ?Ｌ－１Ｔｒｉｓ，０．１ｍｍｏｌ?Ｌ－１ＥＤＴＡ，０．１％ＴｒｉｔｏｎＸ－１００），并在４℃环境中避光培养４－６ｈ。流式细胞仪（ＢＤｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，ＭｏｕｎｔａｉｎＶｉｅｗ，ＣＡ）进行 — ６２５ —ＣｈｉｎＪＬａｂＤｉａｇｎ，Ａｐｒｉｌ，２０１０，Ｖｏｌ１４，Ｎｏ．４
易摩擦部位有黑痣警惕癌变 *导读：由于恶性黑色素瘤几乎60%是由黑痣恶变而来，所以如何识别黑痣恶变，对于黑色素瘤的早期诊断尤为重要。…… 小包今年28岁，这两年她发现下巴上有一颗黑痣不但随着年龄的增长而增长，而且还逐渐长出了毛，这让小包感到非常忧心，做为女孩子，她也觉得脸上有长毛的痣，形象很不好，于是就经常拔。 90％以上的人身上有痣 “痣”在医学上称作痣细胞或黑素细胞痣，是表皮、真皮内黑素细胞增多引起的皮肤表现。医生解释，人的皮肤上布满了无数的毛孔，皮肤通过毛孔进行呼吸和排泄。如果痣刚好长在一个或几个毛孔的位置上，那痣上面就有毛了。痣上面的毛最好不要去拔它，痣也不要老是去摸，因为摩擦与刺檄是促使癌变的原因之一，摩擦、腐蚀、刺激黑痣，会使癌细胞的迅速分化造成癌变。 在医学上常见有色素痣，属于黑色素细胞系统的良性肿瘤，90％以上的人身上可以寻到痣，只是大小、多少不同而已。良性肿瘤均有恶变的可能，痣也不例外，但是据统计这种可能性微乎其微，大约只有百万分之一的痣转变为瘤。如果你的痣表面长有毛发，就更可放心，因为有毛的痣，多属良性倾向。 早期诊断尤为重要 由于恶性黑色素瘤几乎60%是由黑痣恶变而来，所以如何识
别黑痣恶变，对于黑色素瘤的早期诊断尤为重要。医生说，一般与生俱来的、存在10年或10年以上没有发生明显变化的黑痣发生恶性黑色素肿瘤恶变的情况不多，若黑痣在短期内很快长大，色素变深或变浅，呈放射状向周围扩展，黑痣毛突然自行脱落，无故疼痛或不适等症状，均应高度警惕黑痣恶变的可能。一旦确诊，应尽快就诊。因此，要密切关注自己皮肤上出现的黑痣，要注意观察其颜色、边缘状况、生长速度等。尤其对出现在大关节、腹股沟、手部、脚部、面部及其他易摩擦部位的黑痣，应尽早到正规的肿瘤专科医院就诊，绝不能擅自乱处理，如用腐蚀药物、冷冻、激光等剧烈刺激的方法，以免酿成大祸。 由于恶性黑色素瘤的发病与紫外线辐射有关，一般人认为这是长年累月在阳光下暴晒的成年人的疾病。其实不然，出生时即有较大痣，有黑色素瘤家史，或有皮肤过敏的孩子，都易患此症。所以，父母应发现孩子身上有哪几处黑痣，并注意检查它们的变化，如有出血性痣或已超过铅笔橡皮头直径的就应及早就医。 年过40每月查一次 黑痣虽有癌变，但发生率非常低，我们不能把所有的痣都切除。为了防患于未然，有关专家建议，年过40岁的人，每月应进行一次自我检查：脱掉全身衣服，手持小镜在全身镜前，查看一下全身皮肤上的黑痣，特别是有没有新发现的黑痣。 黑色素瘤的特点是：边缘不整齐、不规则的迂回和扭曲；不是清一色的黑色，而是杂色，相互交错；通常无法用一条直线将