操作前请认真检查冷水机、空压机、反应器、进出水管、气管情况。填好使用说明书。
开机：先打开其他单元上的开关，再打开主机背后的开关。
关机：先把控制器上所有单元的参数状态调到off，把进气开关打开后关机；关机时先
关控制器后面的开关，再关其他单元上的开关。
灭菌操作
1、取下马达，平放于桌上。罐顶端套上黑色保护帽。
2、由罐上取下温度传感器，该传感器不需要灭菌。
3、取下PH电缆线，盖上红色保护帽；将PH电极要插到底。务必拧紧电极的上下两个固定螺帽。PH电极灭菌前要标定。PH电极标定：接好电缆后拧开电极的固定螺帽（第一个），将PH电极取出后用去离子水冲洗干净后，轻轻用面纸吸干上面的水后先放入标准溶液4.01中校正，等控制器上数据稳定后在set zero处输入4.01（不管实际数值的微弱差别）；输入完闭后从标准液中取出电极，冲洗、吸干后放入7.00的标准溶液中，等控制器上数据稳定后在set span处输入7.00（不管实际数值的微弱差别）。PH电极校正后不要关控制器。
4、取下DO电缆线，DO电缆接口处用锡箔纸包好后套上黑色帽。DO电极灭菌完后标定。DO电极要插到底，拧紧电极的上下两个固定螺帽。灭菌前要注意溶氧电极里头的保护液是否还有，没有则要进行添加。
5、取下消泡或液位电缆线，将消泡或液位电缆插到底，灭菌后定位到所需要的高度后就不要再压下去。消泡电极的高度离液面约1.5cm处。
6、拆下发酵罐上和冷凝器上的进、出水管，拆下的同时要用夹子夹住拆下水管的接头处，以防水流出。
7、发酵罐上的过滤器的两端多要用夹子夹死，过滤器的出口处用锡箔包好，所有过滤器的两端多要用夹子夹住。发酵完毕倒罐后注意检查过滤器是否被打湿，若有则赶快用吸球将其中的液体吹出。
8 、用铁夹夹死收获管上的硅胶管以防在灭菌锅内跑液。收获管不用时上面一定要卡死不移走。
9、在灭菌前.将发酵罐的六个固定螺帽拧松出气，其他螺帽一定要拧紧！灭菌完后打开高压锅后立刻将其拧紧，注意戴上手套防止被烫伤。
10、酸不要放高压锅内灭菌，将空的酸液瓶上的过滤器用锡箔包好，并将瓶盖拧松出汽。灭菌完后去掉锡箔过滤器上的锡箔纸作为出汽口。（注意与酸瓶相连的硅胶管不要卡死）；碱液瓶和硅胶管可以一起灭菌（与碱液瓶相连的硅胶管要卡死）。
11、取下电热夹套将其平铺于桌面。
12、灭菌前调整好搅拌叶的位置，底下的搅拌叶尽量靠近空气分布器，上面的一个位置调整到所加发酵液的中间位置。
13、取样器的位置不要靠近挡板的位置，尽量靠中间位置。
14、灭菌前将取样器的吸球取下。所有的硅胶管不要靠到高压锅的内壁上。
灭菌完毕后
1、将六个松开的固定螺帽和酸碱瓶盖拧紧。
2、去掉包在过滤器上的锡箔纸和卡硅胶管的夹子。
3、装上马达，若马达内侧润滑油干了，涂上适量的凡士林。
4、接上溶氧电缆线后进行DO电极标定：灭菌完后接上DO电极的电缆线后在set zero处输入0；将反应器的空气流量控制在1L/min,Agitation调到100r/min过夜，早上开在set span 处输入100后按确认键。
5、等温度降到发酵所需温度时接好各进出水管、PH电缆线，消泡电缆线。
6、在放入温度电极之前，先往温度电极的进口里滴加甘油，插入电极后继续滴加到冒出止。注意温度电极要插到底。
7、.检查空压机的输出压力，应在0.7~1.0kg/cm3 范围内。
8、消泡剂的硅胶管要按从下往上顺序在泵上安装。
冷水机工作温度的设定
开机：接好进出水管→打开总电源→进行温度设计→打开循环泵→开始制冷
关机：先关制冷开关→关循环泵开关→同时将进、出水口阀门关闭→关上电源
温度设定：开机→面板显示“PP0.0” →按“移位键”和“调整键”后显示“PP0.1”
→按SET键确认→此时面板显示上限值，按“移位键”和“调整键”设定上限值→按SET键确认→此时面板显示下限值，按“移位键”和“调整键”设定下限值→按SET键确认→再按SET 键→再按SET键→面板显示结束标志“---”，按SET键回到测量显示，设置结束。
上述操作结束后准备接种
接种准备：准备好铁挡板、打火机、酒精喷壶、接种圈、装95%乙醇的搪瓷缸容器、尖头钳子、活动扳手，接种瓶。
接种操作
1、移开接种口附近的胶管，将铁挡板围住接种口后用酒精喷壶朝接种口处喷酒精后点着，（注意：如果有火焰顺着酒精溢出铁板外，则需要吹灭铁板两侧溢出的火焰。）
2、将接种圈沾酒精点着后套住接种口处，将扳手或钳子沾酒精后拧开螺帽后用钳子将其夹住拿出，吹灭螺帽和钳子上的火焰后迅速放入装95%乙醇的搪瓷缸容器里。
3、将接种瓶在火焰处拔开后迅速倒入发酵罐内。完毕后用钳子夹出螺帽拧上。整个过程确保无菌操作！
溶氧设定：发酵模式下溶氧的控制由有四种情况：按off键→按control键→ 按Auto键→setup→cascade→选择以下四种模式。
1、None状态：溶氧的控制主要通过增加空气流量和设定好固定的转速来控制。
2、Agit状态：溶氧的控制主要通过提高转速来控制，此状态在空气流量保持不变的情况下溶氧随着细胞消耗降低时通过增加转速来提高溶氧水平。直到转速达到设订的转速上限值为止。该过程为自动控制。
3、02 状态：该状态主要通过控制氧气与空气的混合百分比来控制。溶氧随着氧气百分比的增加而增加。为自动控制过程。
4、Agit/ 02 状态：该状态中溶氧的控制先是通过提高转速来增加的，当转速达到设定的上限值时若实际溶氧值仍没达到所需要的设定值，此时转速控制在上限值，开始以从小到大的百分比自动提高氧气的进入量，直到达到所设定的溶氧值附近为止。该过程亦为自动控制过程。
注意：在使用Agit状态和Agit/ 02 状态时，若实际溶氧值与设定值相差太大，则要确保所设定的搅拌转速上限值不要太大，否则转速会瞬间内增大带来太大的剪切力和大量的泡沫。实际操作中可以同时通过空气流量计的手动控制来辅助操作。
按off键→按control键→ 按Auto键→setup→此时界面中出现的P Gain和l Gain为两个出厂设定好的参数，不要改动。
其他控制操作：
选择U1：1、开机后→按use键→按U1～U4单元的Fermentation 或cell culture键选择发酵模式或细胞培养模式；连续按翻阅键→分别对U1～U4单个单元进行控制操作。
2、Tem→按off键→按control键→ 按Auto键→ 按setpoint键，输入设定值→按确定键→按Disp Hi输入上限值后按确定键→ 按DispLo输入下限值后按确定键；输入值若有错误按删除键后更改。
搅拌设定：按off键→按control键→ 按Auto键→ 按setpoint键→输入设定转速值→按确定键→Disp Hi和DispLo值的设定如上。
Pump A: 1、off→按control键→按manual→按setpoint 设定百分比（以10秒为单位，如键入20%表示转2秒停8秒：100%表示连续运转）→Disp Hi和DispLo的设定同上。PumpB 和PumpC的设定与PumpA相同。
2、off→按control键→按Antiforma(消泡)键→wet on和wet off 分别调节液位的高低。
3、PumpC暂时没有连接蠕动泵；蠕动泵3与碱相连，蠕动泵4与酸相连。
PH值设定：1.off→按control键→ 按Auto键→ 按setpoint键→输入设定值后按确定键→Disp Hi和Disp Lo值的设定如上。
dO2值设定：按off键→按control键→ 按Auto键→ 按setpoint键→输入设定值后按确定键。
O2流量设定：按control键→ 按Auto键→按setpoint键输入设定的百分比。
Unit2、Unit3、Unit4的操作同上。
发酵罐指工业上用来进行微生物发酵的装置。
发酵罐的分类:
按照发酵罐的设备,分为机械搅拌通风的和非机械搅拌通风发酵罐。
按照微生物的生长代谢需要,分为好气型发酵罐和厌气型发酵灌。
发酵罐广泛应用于乳制品、饮料、生物工程、制药、精细化工等行业，罐体设有夹层、保温层、可加热、冷却、保温。罐体与上下填充头（或雏形）均采用旋压R角加工，罐内壁经镜面抛光处理，无卫生死角，而全封闭设计确保物料始终处一无污染的状态下混合、发酵，设备配备空气呼吸孔，CIP清洗喷头，人孔等装置。
发酵罐的主要部件：
传动部件：是传动装置，是电动机和搅拌器链接部件
机械密封：阻止外界气体，微生物进入发酵罐
电动机：搅拌器的动力来源
入孔：加料
取样口：取小量样品检验
冷却水出口：导出冷却水
温度计口：放置温度计进行温度监测
视镜：观察发酵罐内部
进气口、排料口：通入洁净空气，放出发酵物出口
仪表口：搁置仪器显示器
热电偶口：热和电的传感器将热信号转换为电信号
PH电极口：PH的监测器，就是酸碱度的检测器
冷却水进口：输入冷却水，当发酵温度高是进水
打泡器：可以产生气泡，使空气中的氧气溶解在发酵液中
搅拌机构：搅拌，使发酵物分散均匀，使温度，氧气，PH 分散均匀
罐体：主要用来培养发酵各种菌体，密封性要好（防止菌体被污染）
罐体当中有搅拌浆，用于发酵过程当中不停的搅拌
底部通气的Sparger，用来通入菌体生长所需要的空气或氧气
罐体的顶盘上有控制传感器，最常用的有pH电极和DO电极，用来监测发酵过程中发酵液pH和DO的变化控制器，用来显示和控制发酵条件等等.
发酵罐的使用方法操作步骤：
1）校正pH电极和溶氧电极。
2) 罐体灭菌。根据需要将培养基配入罐体，按要求封好后将罐体放入大灭菌锅灭菌（115℃，30分钟）。
3) 待罐体冷却后，将其置于发酵台上，安装完好；打开冷却水，打开气泵电源，连接通气管道开始通气，调节进气旋钮使通气量适当；打开发酵罐电源，设置温度、pH、搅拌速度等，640r/min下开机转动30min，设定溶氧电极为100。
4)．待温度稳定，各项参数都正确后，将预摇好的种子接入，开始发酵计时，并开始记录各种参数。
5)．发酵完毕后清洗罐体和电极，将电极插入有4M氯化钾的三角瓶中待用。
注意事项：
1)罐体灭菌前务必检查其中液面高度，要求所有的电极都没于液面以下。
2)打开发酵罐电源前务必检查冷却水是否已打开，温度探头是否已插入槽中，否则会烧坏加热电路。
3)发酵过程中一定要保持工作台的清洁，用过的培养瓶及其它物品及时清理，因故溅出的酸碱液或水应立即擦干。
4)对罐体安装，拆卸和灭菌时要特别小心pH电极和罐体的易损又昂贵部件。
目录 1 概述及基本情况 (2) 2 目的 (2) 3 范围 (2) 4 职责 (2) 4.1 验证小组 (2) 4.2 设备部 (3) 4.3 质量保证部 (3) 4.4 生产技术部 (3) 5 验证实施 (3) 5.1 预确认 (3) 5.2 安装确认 (4) 5.3 运行确认 (6) 5.4 性能确认 (6) 5.5 再验证与验证周期 (7) 6 漏项与偏差 (7) 7 验证的结论 (7) 8 验证最终分析与评价 (7) 9 附表 (7)
1 概述 该设备为，可用于制药、食品、化工行业的发酵工艺操作。 基本情况如下： 设备编号： 名称： 型号： 生产厂家： 出厂日期： 供货厂家： 到货日期： 使用部门： 工作间： 设备负责人： 维修服务： 2 目的 确定设备的技术指标、型号和设计规范要求。 对设备安装过程进行检查，安装后进行试运行，以证明设备能够达到设计要求及规定的技术指标。 在确认设备能够达到设计要求或规定的技术指标的前提下，进行模拟生产，证明其能够满足生产操作需要，而且符合工艺要求。 3 范围 本规程适用于发酵罐的验证管理。本方案包括预确认(DQ)、安装确认（IQ）、运行确认（OQ）、性能确认（PQ）。 4 职责 4.1 验证小组 4.1.1 负责验证方案的审批。 4.1.2 负责验证的协调工作，以保证本验证方案规定项目的顺利实施。
4.1.3 负责验证数据及结果的审核。 4.1.4 负责验证报告的审批。 4.1.5 负责发放验证证书。 4.2 设备部 4.2.1 负责验证方案的起草、设计及实施。 4.2.2 负责提供本设备的详细资料及相关SOP。4.2.3 负责提供设备的计量器具校验的详细情况。 4.3质量保证部 4.3.1 负责验证方案相关的检验及结果分析报告。 4.3.2 负责数据的选择与评价。 4.4 生产技术部 协助以上部门进行本设备的验证 5 验证实施 5.1 预确认：根据发酵罐的要求，进行设备选型。 5.2 安装确认
仅供参考[整理] 安全管理文书 发酵罐安全检修及维护操作规程 日期：__________________ 单位：__________________ 第1 页共8 页
发酵罐安全检修及维护操作规程 1．目的通过建立发酵罐安全检修及维护操作规程并严格执行，确保发酵罐安全检修及维护操作。2．适用范围本规程用于机械搅拌（皮带轮减速装置）和无机械搅拌钢制发酵罐的维护、检修操作。3．职责3．1生产部负责本规程的组织制定。3．2操作人员负责本规程的实施。4．内容4．1检修类别及间隔期4．1．1检修类别发酵罐的检修类别分小修、中修和大修。4．1．2检修间隔期A．小修：每2个月进行一次。B．中修：每10个月进行一次。C．大修：每30个月进行一次。D．发酵罐在定期检修间隔期内，还应根据其实际运转情况，确定检修类别、内容和期限。4．2检修内容4．2．1小修A．检查紧固各部件连接螺栓。B．检查、调整机械密封端面的压力。C．检查、消除人孔、视镜、接管口、阀门等处的泄漏点，更换老化的密封垫。D．检查、检修转动部件的磨损件。E．检查、调整传动皮带的松紧度。F．检查附属的仪器仪表和电控装置。G．检查润滑部位，并按规定加注或更换润滑油。H．检查并局部修补保温层，对油漆脱落处涂漆。4．2．2中修A．包括小修内容；B．检查、清洗、修理机封装置，必要时更换磨损部件；C．检查、调整传动皮带轮的运转情况，必要时更换传动皮带、轴承等易损件；D．检查、修理、调整搅拌系统，更换损坏的联轴器、轴瓦、搅拌器轴承；E．按劳动部《在用压力容器检验规程》检测罐壁厚、裂纹、变形和焊缝质量，必要时进行局部修补，更换或修理损坏的人孔、视镜、接管、档板等附件；F．对降温盘管及空气管件进行试漏检查，并修补泄漏点；G．检查、修理各仪表及控制装置；H．整体修补保温层及涂漆。4．2．3大修（包括中修内容）A．检查、修理减速装置，更换轴承；B．检查、修理或更换搅拌系统的主轴、联轴器轴瓦、拉杆、搅拌器、轴承等附件；C．调 第 2 页共 8 页
发酵罐使用注意事项： 1)在操作工程中严格遵循发酵罐使用说明书进行操作，不得私自更改操作规范。 2)罐体灭菌前务必检查其中液面高度，要求所有的电极都没于液面以下。 3)打开发酵罐电源前务必检查冷却水、压缩空气是否已打开，温度探头是否已插入槽中，否则会烧坏加热电路。 4)发酵过程中一定要保持工作台的清洁，用过的培养瓶及其它物品及时清理，因故溅出的酸碱液或水应立即擦干。 5)对罐体安装，拆卸和灭菌时要特别小心pH电极和罐体的易损又昂贵部件；谨防锐利零部件造成人身损伤；谨防高温烫伤。 6)必须确保所有单件设备能正常运行时使用本系统。 7) 在空消及实消时，尽量排空管道内冷凝水，防止其进入夹层对罐体造成损伤。 8)在实消过程中，夹套通蒸汽预热时，必须控制进汽压力在设备的工作压力范围内(不应超过0.15MPa)，否则会引起发酵罐的损坏。 9)在空消及实消时，一定要排尽发酵罐夹套内的余水。否则可能会导致发酵罐内筒体压扁，造成设备损坏;在实消时，还会造成冷凝水过多导致培养液被稀释，从而无法达到工艺要求。 10)在空消、实消结束后冷却过程中，严禁发酵罐内产生负压，以免造成污染，甚至损坏设备。 11)在发酵过程中，罐压应维持在0.2～0.3bar之间，以免引起污染。 12)在各操作过程中，必须保持空气管道中的压力大于发酵罐的罐压，否则会引起发酵罐中的液体倒流进入过滤器中，堵塞过滤器滤芯或使过滤器失效。 13)在空消过程中，及时打开底阀向罐内进入蒸汽，防止空消过程中因内壁干燥损伤罐体。 14)发酵罐在日常清洁过程中应双人进行，发酵罐盖再升起或下降过程中严谨将身体任何部位置于发酵罐盖下方，防止因设备失灵造成人身损伤。 15)如果遇到自己解决不了的问题请直接与公司售后服务部门联系。请勿强行拆卸或维修。
2018年度验证计划 编号：VMP-001-2018 **************有限公司
目录
1.概述............................................................................................ 错误!未定义书签。 确认/验证方针..................................................................... 错误!未定义书签。 指导原则 .............................................................................. 错误!未定义书签。 参考文件 .............................................................................. 错误!未定义书签。 2.目的............................................................................................ 错误!未定义书签。 3.组织机构及职责........................................................................ 错误!未定义书签。 验证组织机构....................................................................... 错误!未定义书签。 验证职责 .............................................................................. 错误!未定义书签。 4.简介............................................................................................ 错误!未定义书签。 厂房、设施和设备简介 ....................................................... 错误!未定义书签。 工艺简介 .............................................................................. 错误!未定义书签。 品种目录 .............................................................................. 错误!未定义书签。 5.风险评估.................................................................................... 错误!未定义书签。 6.验证计划.................................................................................... 错误!未定义书签。 1.概述 确认/验证方针 为了确保影响产品质量的关键要素，包括厂房设施、生产设备、生产工艺、分析方法等符合GMP规定的要求，保证患者的用药安全。因此，本公司特制订如下情况需进行验证： 所有新的关键方法、规程、工艺及新的关键系统、设备在投入使用前应经
-- - 发酵系统操作规程 一、发酵前准备工作 （1）检查电源是否正常，空压机、蒸汽发生器和循环水系统是否正常工作。 （2）检查系统上的阀门、接头及紧固螺钉是否拧紧。 （3）开动空压机，用0.15Mpa压力，检查发酵罐、过滤器、管路、阀门等密封性是否良好，有无泄漏。罐体夹套与罐内是否密封（换季时应重 点检测），确保所有阀门处于关闭状态。 （4）检查冷却水压、电压、气（汽）压能否正常供应。进水压维持在0.12Mpa，允许在0.15-0.2MpaX围变动，不能超过0.2Mpa，温度应低于发酵温 度10℃以上；电源AC220V±10%，零地分开，频率50Hz，罐体可靠接 地；输入蒸汽压力应维持在0.4Mpa，进入系统后通过阀门控制压力为 0.12-0.13MPa；空压机压力值0.7Mpa，空气进入压力应控制在 0.25-0.30MP（空气初级过滤器的压力值）。 （5）检查电机能否正常运转。电磁阀能否正常吸合。 二、灭菌 1.发酵系统安装好后的初次清洗 罐内的清洗：种子罐可将罐体上方的法兰卸开，由操作工采用洁净布手动清洗，结束后排尽罐内的污水，在多冲洗几遍即可。发酵罐的清洗可采用自来水管通过手孔向罐体内壁冲洗，当水位上升到搅拌轴的第二片叶轮时停止冲洗，开动电机搅拌清洗。各管路的清洗，可以先采用清水冲洗，再根据
相应功能采用相应的清洗介质（清洗管路时应以保护管路中的各种元件为前提），具体步骤可参考“空气管路的灭菌”。如果发酵系统长时间不用或培养的菌体与上一批次的不相同时，可采用2%NaOH清洗，清洗结束后应对发酵系统灭菌。 2.发酵罐空消 （1）空气精过滤器的空消：将所有阀门均关闭，然后微开J3、J4、J5、打开Q9，通过调节J3、J4、J5阀门的开启度保持空气精过滤器上端压 力表读数为0.12-0.125Mpa，维持30分钟，空气经过滤器消毒完成。 （2）发酵罐空消：打开G2、J2、G3、J1、J9、Q6、Q7及Q9，通过调节G2和J1阀门的开启度调节发酵罐压力控制在0.12-0.125Mpa，温度121 度-125度。维持30分钟，发酵罐空消结束。 （3）当空消时间达到30分钟后，关闭J2、J3、J5，然后迅速打开Q2、Q3，通空气吹扫空气精过滤器，待J4阀门出口空气干燥后关闭J2、J3、J4、 J5，保持空气精过滤器压力表读数为0.1Mpa。 3.发酵罐实消 实消是当罐内加入培养基后，用蒸汽对培养基进行灭菌的过程。 (1)空消结束后，将校正好的PH电极装好，尽快将配好的培养基从加料口加入罐内。 (2)培养基在进罐之前，应先糊化，一般培养基的配方量应根据工艺要求确定，发酵液的最终容积为罐体全容积的70％左右计算(泡沫多的培养基为60％左右，泡沫少的培养基可达75～80％)，考虑到冷凝水和接种量因素，以及是否流加，
发酵罐的结构系统及使用.txt28 生活是一位睿智的长者，生活是一位博学的老师，它常常春风化雨，润物无声地为我们指点迷津，给我们人生的启迪。不要吝惜自己的爱，敞开自己的胸怀，多多给予，你会发现，你也已经沐浴在了爱河里。实验十五发酵罐的结构系统及使用方法一、实验目的： 1 ．了解发酵罐（气升式、搅拌式）的几大系统组成，即空气系统、蒸汽系统、补料系统、进出料系统、温度系统、在线控制系统。2．掌握发酵罐空消的具体方法及步骤3．掌握发酵罐进料及实消的具体方法及步骤4．掌握发酵罐各系统的控制操作方法 二、实验原理： 1．蒸汽系统：三路进汽——空气管路、补料管路、罐体） 2．温度系统： （1）夹套升温：蒸汽通入夹套。 （2）夹套降温：冷水通入夹套，下进水，上出水。 （3）发酵过程自动控温系统：热电偶控温，马达循环，只能加热，发酵设定温度低于室温时，由夹套进冷水降温。 3．空气系统： 取气口T空压机：往复式油泵获得高脉冲的压缩空气 粗过滤器：由沙布包裹棉花压实成块状叠加制得，作用是去除部分细菌及大部分灰尘 （贮气罐）：空压机压缩使气体温度升高，经贮气使气体保温杀菌；压缩空气中有油污、水滴，且压力不稳，有一定的脉冲作用，会冲翻后面的过滤介质，贮气后可使油滴重力沉降，减小脉冲。 冷却塔）：有降温并稳定作用，同时经旋风分离器进行气液分离 （丝网分离器）：通过附着作用，逐步累积沉降而分离5 微米以上的微粒其作用介质为铜丝网 （加温器）：对压缩空气升温，除湿，使湿度达50%-60% 总过滤器：纱布包裹棉花加活性炭颗粒，逐层压紧而成。 分过滤器：平板式纤维，中间为玻璃纤维或丝棉，下面放水阀应适时打开放出油、水，再用压缩空气控干。
BIOSTATDL-50型发酵罐验证方案
目录 1、概述.......................................................................................................... 错误!未定义书签。 2、验证目的.................................................................................................. 错误!未定义书签。 3、验证范围 (3) 4、验证合格标准 (5) 5、验证人员及职责 (6) 6、验证时间安排 (6) 7、验证前准备 (6) 8、验证 (6) 9、偏差处理与变更 (6) 10、验证结果 (8) 11、验证结果分析 (8) 12、评价及建议 (8) 13、验证结论 (9) 14、再验证周期 (9) 15、相关文件 (9) 16、附件 (9)
1、概述 BIOSTATDL-50型发酵罐是德国B.Braun.Biotechinternational公司生产，是药品原液生产中的菌体发酵工序采用的发酵罐。介绍设备的构造说 本设备为微生物的生长和一系列生化反应提供最适环境的场所。通入无菌空气，保证纯种发酵，通过调节空气流量和压力可以保证发酵罐的正压环境和微生物对溶氧的要求，微生物最适生长环境可通过控制温度、酸碱度、搅拌转速，溶解氧等参数来实现。通过对微生物生长环境的控制，最终得到最大量的目的产物。本发酵罐用于车间菌体的发酵 设备的参数 2、验证目的 根据GMP要求，每年应对本设备进行验证，以证明本设备各项功能符合设计要求，各项性能指标能满足我公司产品的生产需求和产品质量要求。 此生物反应器是用于微生物扩大培养和目的产物表达的密封性设备，如果罐体内不在生产使用前消毒灭菌完全，非生产用微生物会在良好的营养条件下竞争目的工程菌的生长，从而影响正常工程菌的生长和目的蛋白的表达。在进行纯培养之前，其内容物即培养基必须保证无菌，因此在发酵罐投入使用前，对其灭菌效果进行验证。 3、验证范围
发酵罐安全操作流程 Prepared on 24 November 2020
发酵罐安全操作流程 一、准备工作 1、检查蒸汽发生器，确保已开启； 2、检查空气源，保证供气压力在~之间，相对湿度应小于60%；再调节空 气减压阀，使其出口压力在~之间； 3、检查各管道、阀门是否有泄漏，进料口、补料口硅胶垫是否需要更换， 如有请及时修整； 4、检查各压力表是否归零，不能归零的予以更换； 5、检查罐内是否清洗干净； 6、查看控制系统、传动系统是否良好； 7、检查完毕进行打压试漏：压力保持30min，如果出现压力下降，请用肥 皂水查找泄漏点，并进行修复； 8、安装已标定的PH电极、溶氧电极等其他检测设备，确保已安装到位、螺母旋紧； 9、检查一切无问题，如实填写记录并签字； 二、空气过滤器消毒 1、首先关闭空气过滤器前的进蒸汽阀，缓慢卸掉空气过滤器内压力； 2、打开蒸汽过滤器下端的排污阀（排净冷凝水后微开），缓缓开启蒸汽 阀，排净管道内冷凝水后调整蒸汽阀大小，保证蒸汽压力以上； 3、打开空气过滤器下端的排污阀，慢慢打开过滤器前的蒸汽阀，待排尽冷 凝水后排污阀微开；
4、开启过滤器后的排气阀门，通过调整其与蒸汽阀的大小，维持压力~消毒 30min； 5、消毒结束调小排气阀与排污阀的开度，迅速关闭蒸汽阀同时打开进空气 阀（换气过程中保证压力不掉零），调整空气阀大小保持压力在~，以便吹干空气过滤器； 6、约20~30min过滤器吹干后（过滤器外壁温度降至常温，手试吹出的空气 干燥、细腻、滑润），关闭过滤器下端的排污阀及排气阀，保持正压； 三、罐空消 1、首先打开夹套下端的排水阀，排尽夹套中的水； 2、依次打开取样阀、蒸汽阀，排尽管道内冷凝水后将取样阀转为微开；稍 开罐排气阀，再缓慢开启罐底隔膜阀使蒸汽徐徐进入发酵罐； 3、在灭菌过程中时刻注意并控制罐压在~内，罐压的控制通过蒸汽阀和排气 阀来实现； 4、空消30~50min后，关闭蒸汽阀和罐底隔膜阀，关闭后压力会迅速下降， 为防止罐内产生负压，需将进空气阀打开，维持罐压~或者压力下降至零时将排气阀打开自然冷却；待温度降至80℃以下时排尽罐内冷凝水； 四、实消 1、将标定好的PH电极、溶氧电极等检测设备安装，检查确保安装到位，旋紧螺母； 2、关闭罐底隔膜阀，微通风、开低转速，按工艺要求将配制好的培养基加 入罐内，检查无漏加原料后将加料口螺母适度拧紧；
10L-在位灭菌发酵罐操作规程 一、灭菌（在位灭菌） 1、水箱中装入足够的蒸馏水； 2、检查罐线连接是否完好； 3、打开蒸汽发生器、至排气口有蒸汽冒出时关闭排汽口； 4、在蒸汽工作时，把培养基加入到发酵罐中，关紧各阀门； 5、用钟罩罩上发酵罐，并用螺母固定结实； 6、蒸汽发生器达到设定的压力时，打开通气阀门使蒸汽通入发酵罐的下部； 7、然后打开发酵罐上下的连接阀门，使蒸汽通入上部至钟罩顶有蒸汽冒出； 8、关闭钟罩顶的阀门，使温度上升； 9、调整蒸汽通入的速度，使温度以比较快的速度升至95℃； 10、用比较慢的速度升至120℃，并维持15min； 11、关闭通气阀，停止通入蒸汽，待钟罩内温度降至室温时，打开钟罩顶的阀门排汽； 12、汽排净后，拿下钟罩，把各罐线连接好。 二、发酵培养 1、在控制器上设定好发酵的温度pH、搅拌转速等参数； 2、连接好pH电极、温度电极，打开相应控制软件； 3、调整无菌空气的流量； 4、在酒精火焰的保护下，将菌种加入到发酵罐中； 5、打开冷却水，在控制器上按键开始发酵，控制系统自动记录数据。 三、发酵完毕 1、停止发酵，记录数据保存； 2、把发酵液排出进行后续处理，用水洗净发酵罐； 3、在计算机上记录的数据存盘，关闭控制器； 4、在计算机上处理记录的数据。 5L-玻璃发酵罐操作规程 一、发酵准备 1、检查各罐电路及罐体供水； 2、注入培养基，安装好pH电极、DO电极； 3、设定发酵条件； 4、pH电极零点和斜率进行标定，DO电极零点标定； 5、连接好公用罐线，并保证安全可靠； 6、过滤器胶管用弹簧夹夹紧，防止在消毒过程中培养基倒流进入空气过滤器； 7、用闷冒盖紧pH电极上端口，防止因电缆插口受潮导致电极故障； 8、溶氧电极上端口用吕铂纸包裹，防止因电缆插口受潮导致电极故障； 9、盖紧其它罐盖接口，移去排汽冷凝器冷却水进出口的水管； 10、离位实罐灭菌：玻璃罐体及各补料瓶盖好牛皮纸放入灭菌锅，灭菌过程温度升降要缓慢； 11、灭菌结束，尽快将罐体放回原位，并尽快通入空气。 12、培养基温度至发酵温度时，pH电极pH值进行修正，DO电极斜率标定零点。 二、发酵 1、接种：调节空气流量，旋松接种口，在火焰保护下进行接种，旋紧接种盖，移去火焰圈； 2、连接好各补料瓶、酸碱液及消泡剂瓶；
BIOSTATDL-50型发酵罐验证方案
目录 1、概述....................................................................................................... 错误！未定义书签。 2、验证目的............................................................................................... 错误！未定义书签。 3、验证范围 (3) 4、验证合格标准 (5) 5、验证人员及职责 (6) 6、验证时间安排 (6) 7、验证前准备 (6) 8、验证 (6) 9、偏差处理与变更 (6) 10、验证结果 (8) 11、验证结果分析 (8) 12、评价及建议 (8) 13、验证结论 (9) 14、再验证周期 (9) 15、相关文件 (9) 16、附件 (9)
1、概述 BIOSTATDL-50型发酵罐是德国B.Braun.Biotechinternational公司生产，是药品原液生产中的菌体发酵工序采用的发酵罐。介绍设备的构造说 本设备为微生物的生长和一系列生化反应提供最适环境的场所。通入无菌空气，保证纯种发酵，通过调节空气流量和压力可以保证发酵罐的正压环境和微生物对溶氧的要求，微生物最适生长环境可通过控制温度、酸碱度、搅拌转速，溶解氧等参数来实现。通过对微生物生长环境的控制，最终得到最大量的目的产物。本发酵罐用于车间菌体的发酵 设备的参数 2、验证目的 根据GMP要求，每年应对本设备进行验证，以证明本设备各项功能符合设计要求，各项性能指标能满足我公司产品的生产需求和产品质量要求。 此生物反应器是用于微生物扩大培养和目的产物表达的密封性设备，如果罐体内不在生产使用前消毒灭菌完全，非生产用微生物会在良好的营养条件下竞争目的工程菌的生长，从而影响正常工程菌的生长和目的蛋白的表达。在进行纯培养之前，其内容物即培养基必须保证无菌，因此在发酵罐投入使用前，对其灭菌效果进行验证。 3、验证范围
一、电控箱面板上按钮和指示灯说明 电控柜面板图 在电控箱面板上有以下按钮和指示灯：进料阀开、进料阀关、排料阀开，排料阀关，系统运行和系统停止以及急停。具体的使用说明如下： 1、进料阀开/关：当按下进料阀开按钮时，进料电动阀打开，当阀门全部打开后， 进料阀开的按钮上的绿色指示灯亮，同时进料泵自动启动，当按下进料阀关时，进料阀关闭，同时进料泵停，当进料阀完全关闭后，进料阀关的按钮上的红色指示灯亮。 2、排料阀开/关：当按下排料阀开按钮时，排料电动阀打开，当阀门全部打开后， 排料阀开的按钮上的绿色指示灯亮；当按下排料阀关时，排料阀关闭，当排料阀完全关闭后，排料阀关的按钮上的红色指示灯亮。
3、排料阀开/关：当按下系统运行按钮后，整个系统按照设定的参数自动运行， 同时系统运行指示灯亮；当按系统停止按钮后，系统停止运行，同时系统停止运行指示灯亮。 4、急停按钮：出现紧急情况时可以按下急停按钮，使整个系统停机。 二、触摸屏上相应的参数设定说明 主画面 1、系统上电后，触摸屏自动进入主画面，此画面中显示发酵罐内 当前的温度，压力以及搅拌的转速和热水罐的温度以及液位状态；进出料状态也在此画面中显示。按下参数设定键进入参数设定画面。
参数设定一 2、在此画面中设定热水罐和发酵罐的工作参数，说明如下：（参数 都在系统运行时生效） 1）热水罐加热器启动/停止温度：当热水管内温度低于启动温度时，并且热水罐内的水位超过了中液位时，电加热器自动启动，加热到设定的停止温度后，电加热器自动停止运行。注意：停 止温度应大于启动温度。 2）发酵罐加热泵启动/停止温度：当发酵罐内的温度低于启动温度时，并且热水罐内的水位超过了中液位时，加热泵启动循环， 给发酵罐加热，当温度到停止温度时，加热泵停止。注意：停 止温度应大于启动温度。 3）发酵罐排气阀开/关压力：当发酵罐内的压力大于开阀压力时，排气电磁阀自动打开，当发酵罐内压力降到关阀压力时，排气 电磁阀自动关闭。注意：开阀压力应大于关阀压力。 4）搅拌器转速设定：通过此参数来设定变频器的频率。从而设定发酵罐搅拌器的转速。 按下一页进入参数设定二画面，按返回，回到主画面。
内部编号：AN-QP-HT158 版本/ 修改状态：01 / 00 The Procedures Or Steps Formulated T o Ensure The Safe And Effective Operation Of Daily Production, Which Must Be Followed By Relevant Personnel When Operating Equipment Or Handling Business, Are Usually Systematic Documents, Which Are The Operation Specifications Of Operators. 编辑：__________________ 审核：__________________ 单位：__________________ 发酵罐操作规程通用范本
发酵罐操作规程通用范本 使用指引：本操作规程文件可用于保证本部门的日常生产、工作能够安全、稳定、有效运转而制定的，相关人员在操作设备或办理业务时必须遵循的程序或步骤，通常为系统性的文件，是操作人员的操作规范。资料下载后可以进行自定义修改，可按照所需进行删减和使用。 1、进罐前准备工作：清洗发酵罐；电极标定；装好pH电极、溶氧电极；放出蒸汽发生器中的污水；贮水箱中加满水；培养基配制好后倒入发酵罐，调至适当体积及pH；打开搅拌；检查罐上各种盖帽，旋紧。 2 灭菌操作： 2.1打开蒸汽发生器，机器自动进水，水位达到要求后开始加热。 2.2 打开蒸汽发生器后面的球阀。 2.3 夹层进汽预热。打开夹层进汽阀门，打开夹层排汽阀门，夹层开始进汽预热。打开排气阀，排出冷空气。待温度上升至95-
一、准备 1、检查蒸汽管道、阀门、电机、电源、饮用水管是否有泄漏点或接通；如果有的管有泄漏点，及时更换乳胶管！ 2、检查发酵罐轴封、夹层、搅拌、视镜阀是否正常；出现异常则及时添加甘油（密封用）。 3、用自来水清洗洁净本机内壁；一般上午开机后清洗3-5次，直至流出的水清亮为止。 4、用蒸汽空消发酵罐设施及相关管道系统； 5、拧开投料口盖镙栓，启动饮用水泵电源按钮，按工艺要求加入饮用水和投入生产用原、辅物料，拧紧投料口盖镙栓； 6、关循环水进水阀，开排水阀，将夹层储水排干净； 7、检查机器各部份紧固件是否松动和齐全。乳胶塞子要及时更换新的，避免染菌造成不必要的麻烦！！ 补充：空消 在投料前，气路、料路、种子罐、发酵罐、碱罐、消泡罐必须用蒸汽进行灭菌，消除所有死角的杂菌，保证系统处于无菌状态。 1. 空气管路的空消 (1) 空气管路上有三级预过滤器，冷干机和除菌过滤器。预过滤器和冷干机不能用蒸汽灭菌，因此在空气管路通蒸汽前，必须将通向预过滤器的阀门关闭，使蒸汽通过减压阀、蒸汽过滤器然后进入除菌过滤器。 (2) 除菌过滤器的滤芯不能承受高温高压，因此，蒸汽减压阀必须调整在0.13Mpa，不得超过0.15MPa。 (3) 空消过程中，除菌过滤器下端的排气阀应微微开启，排除冷凝水。
(4) 空消时间应持续40分钟左右，当设备初次使用或长期不用后启动时，最好采用间歇空消，即第一次空消后，隔3～5小时再空消一次，以便消除芽孢。 (5) 经空消后的过滤器，应通气吹干，约20～30分钟，然后将气路阀门关闭。 2. 种子罐、发酵罐、碱罐及消泡罐空消 (1) 种子罐、发酵罐、碱罐及消泡罐是将蒸汽直接通入罐内进行空消。 (2) 空消时，应将罐上的接种口，排气阀，及料路阀门微微打开，使蒸汽通过这些阀门排出，同时保持罐压为0.13～0.15Mpa。 (3) 空消时间为30～40分钟，特殊情况下，可采用间歇空消。 (4) 种子罐、发酵罐、碱罐及消泡罐空消前，应将夹套内的水放掉。 (5) 空消结束后，应将罐内冷凝水排掉，并将排空阀门打开，防止冷却后罐内产生负压、损坏设备。 (6) 空消时，溶氧、PH电极取出，可以延长其使用寿命。 二、开机 置设备状态标志为使用状态；启动搅拌控制键按钮。 三、使用 1 、空气分过滤器灭菌； 2 、关空气进气阀，开排气阀，待压力降为零； 3、开蒸汽进汽阀，排汽阀开1/4圈，压力升至0.2Mpa时，进入实罐灭菌；
化工单位发酵罐制作安 装施工方案 Standardization of sany group #QS8QHH-HHGX8Q8-GNHHJ8-HHMHGN#
一、编制说明： 1．1 本工程为宿州中粮生物化学有限公司酒精装置优化提升设备、管道及钢结构安装工程，2台1200m3发酵罐现场制作安装，为确保工程安全、优质、高效，特编制此方案。 1．2 此方案中对施工准备、施工程序、施工方法和技术要求、质量标准、施工质量、安全保证措施、冬雨季施工措施等均作了详细地说明。 二、编制依据： 2．1 《钢制焊接常压容器》JG/T4735-1997； 2．2 《工业设备、管道焊接工程施工验收规范》GB50235-97； 2．3 宿州中粮生物化学有限公司发酵罐制作施工图； 2．4 焊接结构技术要求（HG20583-1998）； 2．5 焊缝射线探伤标准（JB4735-97）。 2．6《石油化工立式圆筒形钢制焊接储罐设计规范》（SH3046-92）。 2．7《立式圆筒形钢制焊接贮罐施工及验收规范》（GB50128-2005）。 2．8《钢制压力容器焊接规程》（JB/4709-2000）。 三、工程概况： 3．12台1200m3发酵罐是酒精装置优化提升设备、管道及钢结构安装工程中的重要设备，为立式圆柱体上封头下锥底裙座设备。它主要由裙座、下锥底、筒体、上封头、接管等附件组成，发酵罐本体材料为Q235B。 3．2 设备实物工作量如下表：
四、施工准备： 4．1 技术准备 4．1．1 组织有关人员对图纸进行会审，及时发现并解决图纸中存在的问题。 4．1．2 施工方案已经审批，并对施工人员进行技术交底和技术培训，明确施工方法/施工程序及质量标准要求。 4．1．3 审查原材料质量证明书，组织材料验收、清点，现场的原材料应对其规格、数量、质量进行检查。 4．1．4 确认焊工资格，凡参加发酵罐制作施工的焊工，必须持劳动部门颁发的且钢材组别、焊接方法和焊接位置与实际工程相一致的焊接资格证，否则不得上岗。 4．2 施工现场准备 4．2．1 施工用的水、电、气可满足需要，并能保证连续施工。 4．2．2 设备基础及预埋件已完成，施工区域空间满足设备预制条件。 4．2．3 施工所需材料供应到75%以上。 4．2．4 施工所需工、机具已齐全，并处于完好状态。 五、施工方法的选择： 采用群桅杆倒链多点倒装施工法，即在发酵罐基础环板φ=直径单台对称均布12根高3m的金属桅杆（φ219×6的无缝钢管，材料利用甲方材料制作）焊接在发酵罐基础环板上，桅杆两侧焊接拉撑（∠75×75×10）并焊在发酵罐基础环板上，每根桅杆的顶部配一个10T的倒链作为起吊工具，每次起吊的高度稍高于带板宽度。罐壁吊点设在距壁板上口1/3位置处。上部带板首先组装，同时将连接其上的角钢圈装好。吊时，由12人同时操
发酵罐安全操作规程 1．目的 通过建立发酵罐安全操作规程并严格执行，确保发酵罐安全运行。 2．适用范围 本规程用于机械搅拌（皮带轮减速装置）和无机械搅拌钢制发酵罐的维护、检修操作。 3．职责 3．1生产部负责本规程的组织制定。 3．2操作人员负责本规程的实施。 4．内容 4．1检修类别及间隔期 4．1．1 检修类别 发酵罐的检修类别分小修、中修和大修。 4．1．2 检修间隔期 A．小修：每2个月进行一次。 B．中修：每10个月进行一次。 C．大修：每30个月进行一次。 D．发酵罐在定期检修间隔期内，还应根据其实际运转情况，确定检修类别、内容和期限。 4．2检修内容 4．2．1小修 A．检查紧固各部件连接螺栓。 B．检查、调整机械密封端面的压力。 C．检查、消除人孔、视镜、接管口、阀门等处的泄漏点，更换老化的密封垫。 D．检查、检修转动部件的磨损件。 E．检查、调整传动皮带的松紧度。 F．检查附属的仪器仪表和电控装置。 G．检查润滑部位，并按规定加注或更换润滑油。
H．检查并局部修补保温层，对油漆脱落处涂漆。 4．2．2中修 A．包括小修内容； B．检查、清洗、修理机封装置，必要时更换磨损部件； C．检查、调整传动皮带轮的运转情况，必要时更换传动皮带、轴承等易损件； D．检查、修理、调整搅拌系统，更换损坏的联轴器、轴瓦、搅拌器轴承； E．按劳动部《在用压力容器检验规程》检测罐壁厚、裂纹、变形和焊缝质量，必要时进行局部修补，更换或修理损坏的人孔、视镜、接管、档板等附件； F．对降温盘管及空气管件进行试漏检查，并修补泄漏点； G．检查、修理各仪表及控制装置； H．整体修补保温层及涂漆。 4．2．3大修（包括中修内容） A．检查、修理减速装置，更换轴承； B．检查、修理或更换搅拌系统的主轴、联轴器轴瓦、拉杆、搅拌器、轴承等附件； C．调整罐体、减速装置、搅拌轴的位置偏差和间隔； D．换热系统和空气系统的管件试漏，更换腐蚀严重的管道、管件及阀门； E．检查、修理筒体、封头。 4．3检修前的准备 4．3．1技术准备 A．设备使用说明书，图纸、有关标准、检修记录； B．设备运行时间、缺陷、隐患、事故等状况记录。 4．3．2物资准备 A．检修用的材料、备件； B．检测仪器、拆装工具和起重设施； C．切断发酵罐电机总电源，并设有禁止启动的警示牌； D．清洗发酵罐，隔断与其它设备各连接管路，并悬挂标志牌； E．进罐前，应彻底将罐内气体排除，人员在罐内作业过程中，应不断换进新鲜空气，必要时检修人员应配带防毒呼吸器，罐外必须设人监护；
发酵罐操作流程 1 技术准备 发酵罐使用之前，应先检查电源是否正常，空压机、循环水系统是否能正常工作。同时要检查管道是否通畅及废水废气管道的完好情况。 2 空消 在投料前，气路、料路、发酵罐罐体必须用蒸汽进行灭菌，消除所有死角的杂菌，保证系统处于无菌状态。 2.1 空消步骤 打开蒸汽总开关----打开排冷凝水阀-------打开蒸汽过滤器开关------关闭预过滤器开关---打开空气精过滤器开关---打开进罐空气阀---打开空气排气阀---打开上分气包进发酵罐蒸汽阀---打开取料口进罐蒸汽阀---打开取样口排气----打开上分汽包进下分汽包阀---打开下分汽包总开关---打开下面进罐体蒸汽阀---打开接菌口和流量计出的排气阀。 2.2 空消注意事项 2.2.1 空气管路上有预过滤器和空气过滤器，预过滤器不能用蒸汽灭菌，因此在空气管路通蒸汽前，必须将预过滤器的阀门关闭。 2.2.2 空消时，应将罐上的接种口、排气阀及料路阀门微微打开，使蒸汽通过这些阀门排出，同时保持罐压为 0.13~0.15Mpa,空消时间为50分钟，夹层排水阀一直打开。 2.2.3 经常用手感受进蒸汽管道的畅通。 2.2.4 发酵罐空消前，应将夹套内的水放掉。空消结束后，应将罐内冷凝水排掉。 2.2.5空消结束后要通入无菌风吹干管路，并且管路和罐体要始终保持正压，以免杂菌的进入。 3 罐体实消 实消是当罐内加入培养基后，用蒸汽对培养基进行灭菌的过程。空消结束后，罐体压力降至0.03Mpa,打开罐体下面出料口排水阀排冷凝水，待排完后，关紧出料口阀门。打开进料口，加入培养基，拧紧。 3.1 实消步骤 开启机械搅拌装置---打开蒸汽总开关---打开拍冷凝水阀---打开上分气包进发酵罐蒸汽阀---打开夹层蒸汽阀 ---打开排气口排罐体冷空气---夹层温度达到95℃时关闭夹层蒸汽阀---打开罐体上面进蒸汽阀---打开上分汽包进下分汽包阀---打开下分汽包总开关---打开下面进罐体蒸汽阀---罐体压力达到0.15Mpa时开始计时，通过调节蒸汽阀保压30分钟。
发酵罐基本操作流程 一.启动电脑 1.连接电源插座，打开电脑电源开关。 2.进入电脑操作界面，密码1155。 3.小罐为编号1,最大容积10L,装入液体最少5L,最多8L。 4.大罐为编号2,最大容积50L,装入液体最少20L,最多40L。 二.灭菌 1.使用前准备:必须对蒸汽发生器及空气压缩机进行排污,发酵罐所有阀门关闭,但最下面排水阀门打开（黑色直形搬到和管道平行）。 2.升温阶段:打开蒸汽发生器,等达到0.4MPa,打开进夹套蒸汽开关（红色园形）至最大，搅拌打开，温度到80度以后关闭搅拌，排水阀关小一点，打开进罐蒸汽阀门（红色园形），在灭菌过程中进气压力要始终高于罐后压力。在接近121度时把尾气排气阀（黑色园形）和排水阀（黑色直形）稍微开点，以振动低温蒸汽和夹套中的冷凝水，有利于升温。 3．保温阶段：若T>121度，先关进小夹套蒸汽开关和进罐蒸汽阀门（微调），若继续升温，打开排水阀（微调），确保温度维持在119-123度之间。 5.吹干过滤器: 关闭蒸汽发生器，关闭进夹套蒸汽阀门和进罐蒸汽阀门（红色园形），关闭气体进罐球阀（黑色园形）。打开过滤器后面的排水阀门（一黑一蓝两个圆形阀门）；找开空压机，打开进气阀（黑色直形）和气体流量计开关（黑色园形），等待两个白色胶管变凉（不
烫手，约5min）后，关闭一黑一蓝两个排水阀。 6. 降温阶段：打开空气进罐开关至最大，打开尾气阀至适当开度，使空气进罐。在控制面板上将加热开关关闭。打开总进水阀门（黑色直形）、出水阀和加热器进水阀（兰色直形），进行降温，温度低于90度时可适当开搅拌加速降温。 7．接种：温度降至需要温度时进行接种。关闭空气，点上火圈，在火焰保护下接种，接种完毕后将接种口盖灼烧灭菌后盖上。打开空气，将气体流量和罐压调至合适的值后开始发酵。 注意事项： 整个过程中防止烫伤！ 发酵过程中罐压不能掉零！ 操作过程比较复杂，生手一定要在有经验的人指导下进行操作！ 设置参数不能随便改动！ 空压机定期排水、蒸汽发生器每用完一批排污！
目录 发酵罐清洗SOP (10) 2.1.2清洁实施的条件及频次 (12) 2.1.3清洁的地点 (12) 2.1.4清洁工具及设施 (12) 2.1.5使用的清洁剂 (13) 2.2清洁程序 (13) 2.2.1常规清洁 (13) 2.2.2彻底清洁 (13) 2000L配料罐（1）清洁再验证方案
目录1 再验证组织及各部门职责 2概述 3再验证目的 4再验证计划及进度 5资料文件确认 6验证内容 6.1清洁规程的建立 6.2设备清洁验证中参照物质的选定 6.3 关键部位 6.4 验证方法 6.5 验证的实施 7再验证周期
1 再验证组织及各部门职责 1.1 再验证小组： 组长： 组员： 质量管理部： 设备工程部： 1.2 再验证小组职责 1.2.1 负责组织再验证方案的编写和审定 1.2.2 负责再验证工作的组织、协调和实施，以确保再验证工作的顺利进行。 1.2.3 负责再验证数据及有关资料的收集及审核 1.2.4 负责再验证结果的审核 1.2.5 负责再验证周期的确定 1.2.6 负责再验证报告的审批和发放 1.3 再验证小组职责分工 组长：负责组织再验证方案的编写，并对再验证方案进行审批；负责再验证工作
的组织、协调和实施，对再验证结果进行评价。 设备工程部：负责再验证方案的编写、2000L配料罐清洁再验证运行及性能确认的验证工作。 质量管理部：负责2000L配料罐清洁再验证运行及性能确认的各项检测验证工作,负责再验证合格证书的审批和发放。 1.3.1 运行确认： 参与部门：设备工程部、生产车间 1.3.2 性能确认： 参与部门：质量管理部、设备工程部、生产车间 1.3.3 检定周期的确定 参与部门：质量管理部 1.3.4 再验证结果及评价： 参与部门：质量管理部、设备工程部、生产车间 1.3.5 再验证合格证书的审批和发放： 审批和发放部门：质量管理部 2概述 2000L配料罐用于液体制剂车糖浆剂配料，该机的清洁验证同清热解毒口服液的工艺验证同时进行（每批工艺验证后进行清洁验证）为证实所制订清洁SOP能有效防止交叉污染，对该设备的清洁效果具有良好的稳定性和可靠性，在设备按《2000L配料罐清洁SOP》清洁后对关键清洁部位进行取样检测，并对各检测结果进行综合评估。3再验证目的 证明经过清洁程序清洁后，设备上残留物（可见的和不可见的：包括前一产品的残留物或清洗过程中洗涤剂的残留物）达到了规定的清洁限度要求，不会对将生产的
发酵罐操作 操作前请认真检查冷水机、空压机、反应器、进出水管、气管情况。填好使用说明书。 开机：先打开其他单元上的开关，再打开主机背后的开关。 关机：先把控制器上所有单元的参数状态调到off，把进气开关打开后关机；关机时先 关控制器后面的开关，再关其他单元上的开关。 灭菌操作 1、取下马达，平放于桌上。罐顶端套上黑色保护帽。 2、由罐上取下温度传感器，该传感器不需要灭菌。 3、取下PH电缆线，盖上红色保护帽；将PH电极要插到底。务必拧紧电极的上下两个固定螺帽。PH电极灭菌前要标定。PH电极标定：接好电缆后拧开电极的固定螺帽（第一个），将PH电极取出后用去离子水冲洗干净后，轻轻用面纸吸干上面的水后先放入标准溶液4.01中校正，等控制器上数据稳定后在set zero处输入4.01（不管实际数值的微弱差别）；输入完闭后从标准液中取出电极，冲洗、吸干后放入7.00的标准溶液中，等控制器上数据稳定后在set span处输入7.00（不管实际数值的微弱差别）。PH电极校正后不要关控制器。 4、取下DO电缆线，DO电缆接口处用锡箔纸包好后套上黑色帽。DO电极灭菌完后标定。DO电极要插到底，拧紧电极的上下两个固定螺帽。灭菌前要注意溶氧电极里头的保护液是否还有，没有则要进行添加。 5、取下消泡或液位电缆线，将消泡或液位电缆插到底，灭菌后定位到所需要的高度后就不要再压下去。消泡电极的高度离液面约1.5cm处。 6、拆下发酵罐上和冷凝器上的进、出水管，拆下的同时要用夹子夹住拆下水管的接头处，以防水流出。 7、发酵罐上的过滤器的两端多要用夹子夹死，过滤器的出口处用锡箔包好，所有过滤器的两端多要用夹子夹住。发酵完毕倒罐后注意检查过滤器是否被打湿，若有则赶快用吸球将其中的液体吹出。 8 、用铁夹夹死收获管上的硅胶管以防在灭菌锅内跑液。收获管不用时上面一定要卡死不移走。 9、在灭菌前.将发酵罐的六个固定螺帽拧松出气，其他螺帽一定要拧紧！灭菌完后打开高压锅后立刻将其拧紧，注意戴上手套防止被烫伤。 10、酸不要放高压锅内灭菌，将空的酸液瓶上的过滤器用锡箔包好，并将瓶盖拧松出汽。灭菌完后去掉锡箔过滤器上的锡箔纸作为出汽口。（注意与酸瓶相连的硅胶管不要卡死）；碱液瓶和硅胶管可以一起灭菌（与碱液瓶相连的硅胶管要卡死）。 11、取下电热夹套将其平铺于桌面。 12、灭菌前调整好搅拌叶的位置，底下的搅拌叶尽量靠近空气分布器，上面的一个位置调整到所加发酵液的中间位置。 13、取样器的位置不要靠近挡板的位置，尽量靠中间位置。 14、灭菌前将取样器的吸球取下。所有的硅胶管不要靠到高压锅的内壁上。 灭菌完毕后 1、将六个松开的固定螺帽和酸碱瓶盖拧紧。 2、去掉包在过滤器上的锡箔纸和卡硅胶管的夹子。 3、装上马达，若马达内侧润滑油干了，涂上适量的凡士林。 4、接上溶氧电缆线后进行DO电极标定：灭菌完后接上DO电极的电缆线后在set zero 处输入0；将反应器的空气流量控制在1L/min,Agitation调到100r/min过夜，早上开在set span 处输入100后按确认键。 5、等温度降到发酵所需温度时接好各进出水管、PH电缆线，消泡电缆线。