第1章遗传因子的发现
第1节孟德尔的豌豆杂交实验(一)
第1课时一对相对性状的杂交实验过程和解释
测控导航表
知识点题号
1.豌豆的特点与人工杂交实验 1
2.遗传学相关概念2,3
3.对豌豆一对相对性状杂交实验的理解与解释4,5,6
4.综合应用7,8,9,10
1.下列有关孟德尔豌豆杂交实验的叙述,正确的是( C )
A.孟德尔研究豌豆花的构造,但无须考虑雌蕊、雄蕊的发育程度
B.孟德尔在豌豆开花时进行去雄和授粉,实现亲本的杂交
C.孟德尔利用了豌豆自花传粉、闭花受粉的特性
D.孟德尔根据亲本中不同个体表现型来判断亲本是否纯合
解析:花蕊发育成熟,花粉和卵细胞才有受精能力,因此需考虑雌蕊、雄蕊的发育程度;豌豆花是自花传粉、闭花受粉,开花时已经完成受粉,此时进行去雄和受粉,无法实现亲本的杂交;豌豆自花传粉、闭花受粉的特性保证了亲本在自然条件下是纯种;根据表现型不能判断是否
纯合。
2.下列关于遗传学基本概念的叙述,正确的是( C )
A.只有决定显性性状的遗传因子纯合才叫纯合子
B.纯合子自交产生的子一代所表现的性状就是显性性状
C.性状相同,遗传因子组成不一定相同
D.兔的白毛和黑毛,狗的长毛和卷毛都是相对性状
解析:纯合子是指遗传因子组成相同的个体,包括显性纯合子和隐性纯合子;具有相对性状的纯合子杂交产生的子一代所表现的性状就是显性性状;性状相同,遗传因子组成不一定相同,如DD和Dd都表现为高茎;狗的长毛和卷毛是同一种生物的不同性状,不属于相对性状。
3.在一对相对性状杂交实验中,性状分离是指( D )
A.AA×aa→Aa
B.AA×Aa→Aa、AA
C.Aa×aa→Aa、aa
D.Aa×Aa→AA、Aa、aa
解析:性状分离是指杂种子代中,同时出现显性性状和隐性性状的现象,亲代杂种的遗传因子组成相同。
4.若一对杂合黑毛动物一胎的前三只子代都是黑色,则第四只子代的颜色是( B )
A.一定是白色
B.是黑色的可能性大
C.是白色的可能性大
D.白色和黑色的可能性一样大
解析:根据孟德尔的一对相对性状杂交实验,F1自交后代出现3∶1的分
离比,所以这对黑毛动物子代中为白色的可能性是1/4,为黑色的可能性是3/4,因此是黑色的可能性大。
5.有关下面遗传图解的说法,错误的是( C )
A.①②只能发生在有性生殖过程中
B.③表示雌雄配子随机结合的过程
C.亲代Aa产生的雄配子∶雌配子=1∶1
D.子代中,Aa个体在显性个体中所占的比例为2/3
解析:分析图示,①②为亲本形成配子的过程,只有有性生殖才能产生雌、雄配子;③表示雌、雄配子随机结合的过程;每个遗传因子组成为Aa的亲本产生配子A∶a=1∶1,但雄配子数目远远多于雌配子数目;子代中,Aa个体在显性个体(AA∶Aa=1∶2)中所占的比例为2/3。
6.两株高茎豌豆杂交,后代高茎和矮茎植株数量的比例如图所示,则亲本的遗传因子组成可表示为( C )
A.GG×gg
B.GG×Gg
C.Gg×Gg
D.gg×gg
解析:由图中信息可知,两株高茎豌豆杂交后代中,高茎∶矮茎=3∶1,符合杂合子自交的实验结果,故推测亲本遗传因子组成为Gg×Gg。7.某二倍体植物中,有毛和无毛这对相对性状由一对等位基因控制,要确定这对性状的显隐性关系,应该选用最佳的杂交组合是( B )
A.有毛株×无毛株
B.有毛纯合体×无毛纯合体
C.有毛株×有毛株
D.有毛纯合体×有毛纯合体,或无毛纯合体×无毛纯合体
解析:有毛株×无毛株,若子代有两种性状,则不能判断显隐性关系;有毛纯合体×无毛纯合体,后代表现出来的性状即为显性性状,据此可以判断显隐性关系;有毛株×有毛株,只有后代出现性状分离时才能判断显隐性;有毛纯合体×有毛纯合体,或无毛纯合体×无毛纯合体,后代肯定为有毛(或无毛),据此不能判断显隐性关系。
8.番茄果实的颜色由一对遗传因子A、a控制,下表是3个杂交实验及结果。下列分析正确的是( B )
F1的表现型和植株数目实验组亲本表现型
红果黄果
1 红果×黄果49
2 504
2 红果×黄果997 0
3 红果×红果 1 511 508
A.番茄的果实黄色为显性性状
B.黄果的遗传因子组成为aa
C.实验2的F1红果番茄均为纯合子
D.实验3的F1中红果番茄均为杂合子
解析:实验2中红果×黄果的后代只有红果,说明红果为显性性状,亲本遗传因子组成为AA、aa,子代红果遗传因子组成为Aa,即均为杂合子,黄果遗传因子组成为aa;实验3中红果×红果的后代性状分离比为3∶1,说明亲本红果都是Aa,后代红果遗传因子组成为AA或Aa。
9.某种羊的毛色有黑色和白色两种,由一对遗传因子A、a控制,如图为该种羊的遗传图解,请完成下列问题:
(1)毛色的显性性状是色,隐性性状是色。
(2)白毛羊与白毛羊通过有性生殖产生的后代中出现了黑毛羊,这种现象在遗传学上称为。产生这种现象的原因是(填“白毛羊”或“黑毛羊”)为杂合子,杂合子在自交时(填“会”或“不会”)产生这种现象。
解析:(1)据图分析,白毛羊与白毛羊通过有性生殖产生的后代中出现了黑毛羊,说明黑色在亲代中隐而未现,属于隐性性状,则白色属于显性性状。(2)白毛羊与白毛羊通过有性生殖产生的后代中出现了黑毛羊,这种现象在遗传学上称为性状分离。产生这种现象的原因是两只白毛羊都是杂合子(Aa),都含有黑色的隐性遗传因子(a),杂合子在自交时会产生性状分离现象,生出黑毛羊与白毛羊。
答案:(1)白黑(2)性状分离白毛羊会
10.玉米是一种雌雄同株的植物,其顶部开雄花,下部开雌花。在一个育种实验中,采用A、B两棵植株进行如图所示的三组实验:
实验一:将植株A的花粉粒转移到同一植株的雌花上,授粉后,雌花发育成穗轴上的玉米粒。
实验二:将植株B的花粉粒转移到同一植株的雌花上,进行授粉。
实验三:植株A的花粉粒被转移到与植株B具有相同的遗传因子组成的另一植株的雌花上进行授粉。
上述三组实验所获得玉米粒的颜色如下表所示:
实验紫红玉米粒黄玉米粒
一587 196
二0 823
三412 396
(1)在玉米粒颜色这一对相对性状中,隐性性状是。
(2)用G代表显性遗传因子,g代表隐性遗传因子,则植株A的遗传因子组成为,植株B的遗传因子组成为。实验一的子代中,紫红玉米粒的遗传因子组成为。
(3)实验一的子代中,紫红玉米粒中杂合子所占比例为。
解析:(1)实验一表示植株A自交,后代发生性状分离,且性状分离比为
紫红色玉米粒∶黄色玉米粒=3∶1,说明紫红色是显性性状,黄色为隐性性状。
(2)由题意可推知,植株A的遗传因子组成为Gg,植株B的遗传因子组成为gg;实验一是Gg的自交,则后代紫红色玉米粒的遗传因子组成有GG、Gg。
(3)实验一是Gg的自交,后代GG∶Gg∶gg=1∶2∶1,因此后代紫红色玉米粒中杂合子所占比例为2/3。
答案:(1)黄色(2)Gg gg GG、Gg (3)2/3
实验指导 目录 实验一分子生物学实验室常用仪器及使用方法实验二质粒DNA的提取－碱裂解法 实验三琼脂糖凝胶电泳 实验四限制性内切核酸酶的酶切与鉴定 实验五大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 实验六动物组织细胞基因组 DNA提取 实验七 DNA的定量 实验八 PCR基因扩增 实验九琼脂糖凝胶电泳分离与纯化目的DNA 实验十 DNA重组 实验十一动物组织细胞总RNA的提取 实验一分子生物学实验室常用仪器及使用
事实证明，在科学飞速发展的今天，无论从事哪个领域的研究，要想突破，除了有良好的理论基础外，更重要的是依赖于先进的技术和优良的仪器设备以及良好的研究环境。一个标准的分子生物学实验室除了具有一般生物学实验室的常规仪器设备外，还具有一些特殊用途的仪器，这些仪器一般较精密，价格昂贵。下面介绍这些仪器的使用方法和注意事项。 一、冷冻离心机 低温分离技术是分子生物学研究中必不可少的手段。基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物样品的分离制备实验中都离不开低温离心技术，因此低温冷冻离心机成为分子生物学研究中必备的重要仪器。在国内，有多个厂家生产冷冻离心机，本实验室的高速冷冻离心机为GL-20G-Ⅱ型（上海安亭），落地式。配有角式转头：6×50ml、12×10ml和12×1.5ml。极限转速20000rpm。 1. 安装与调试 离心机应放置在水平坚固的地面上，应至少距离10cm以上且具有良好的通风环境中，周围空气应呈中性，且无导电性灰尘、易燃气体和腐蚀性气体，环境温度应在0～30℃之间，相对湿度小于80%。试转前应先打开盖门，用手盘动转轴，轻巧灵活，无异常现象方可上所用的转头。转子准确到位后打开电源开关，然后用手按住门开关，再按运转键，转动后立即停止，并观察转轴的转向，若逆时针旋转即为正确，机器可投入使用。 2. 操作程序 （1）插上电源，待机指示灯亮；打开电源开关，调速与定时系统的数码管显示的闪烁数字为机器工作转速的出厂设定，温控系统的数码管显示此时离心腔的温度。 （2）设定机器的工作参数，如工作温度，运转时间，工作转速等。 （3）将预先平衡好的样品放置于转头样品架上，关闭机盖。 （4）按控制面板的运转键，离心机开始运转。在预先设定的加速时间内，其运速升至预先设定的值。 （5）在预先设定的运转时间内（不包括减速时间），离心机开始减速，其转速在预先设定的减速时间内降至零。 （6）按控制面板上的停止键，数码管显示dedT，数秒钟后即显示闪烁的转速值，这时机器已准备好下一次工作。 3. 注意事项 （1）离心机应始终处于水平位置，外接电源系统的电压要匹配，并要求有良好的接地线，机器不使用，要拔掉电源插头。
原位杂交组织（或细胞）化学（In situ Hybridization Histochemistry，ISHH）简称原位杂交（In Situ Hybridization），属于固相分子杂交的范畴，它是用标记的DNA或RNA为探针，在原位检测组织细胞内特定核酸序列的方法。根据所用探针和靶核酸的不同，原位杂交可分为DNA-DNA杂交，DNA-RNA杂交和RNA-RNA 杂交三类。 根据探针的标记物是否直接被检测，原位杂交又可分为直接法和间接法两类。直接法主要用放射性同位素、荧光及某些酶标记的探针与靶核酸进行杂交，杂交后分别通过放射自显影、荧光显微镜术或成色酶促反应直接显示。间接法一般用半抗原标记探针，最后通过免疫组织化学法对半抗原定位，间接地显示探针与靶核酸形成的杂交体。 原位杂交最初是以同位素标记探针进行的。尽管同位素标记（如35S，3H，32P等）仍然广泛使用，但非同位素标记探针的迅速发展（尤其是生物素标记探针和地高辛标记探针），更引起科技工作者的极大兴趣。 一、基本要求 1. 组织取材：组织取材应尽可能新鲜。由于组织RNA降解较快，所以新鲜组织和培养细胞最好在30 min 内固定。 2. 固定目的是： （1）保持细胞结构； （2）最大限度地保持细胞内DNA或RNA的水平； （3）使探针易于进入细胞或组织。 最常用的固定剂是多聚甲醛，与其它醛类固定剂（如戊二醛）不同，多聚甲醛不会与蛋白质产生广泛的交叉连接，因而不会影响探针穿透入细胞或组织。 3. 增强组织的通透性和核酸探针的穿透性： （1）稀酸处理和酸酐处理：为防止探针与组织中碱性蛋白之间的静电结合，以降低背景，杂交前标本可用0.25%乙酸酐处理10 min，经乙酸酐处理后，组织蛋白中的碱性基团通过乙酰化而被阻断。组织和细胞标本亦可用0.2 M HCl处理10 min，稀酸能使碱性蛋白变性，结合蛋白酶消化，容易将碱性蛋白移除。 （2）去污剂处理：去污剂处理的目的是增加组织的通透性，利于杂交探针进入组织细胞，最常应用的去污剂是Triton X-100。注意：过度的去污剂处理不仅影响组织的形态结构，而且还会引起靶核酸的丢失。
必修一化学实验题
1.（16分）在实验室里可用下图所示装置制取氯酸钾、次氯酸钠和探究氯水的性质。 图中：①为氯气发生装置；②的试管里盛有15 mL 30% KOH溶液，并置于水浴中；③的试管里盛有15 mL 8% NaOH溶液，并置于冰水浴中；④的试管里加有紫色石蕊试液；⑤为尾气吸收装置。请填写下列空白： （1）装置①是氯气发生装置，蒸馏烧瓶中盛放MnO2固体，其反应的化学方程式为。 （2）工业上常用氯气与熟石灰反应制漂白粉，漂白粉的有效成分为（填化学式）。（3）比较制取氯酸钾和次氯酸钠的条件，二者的差异是。 （4）反应完毕经冷却后，②的试管中有大量晶体析出。下图中符合该晶体溶解度曲线的是（填写编号字母）； 从②的试管中分离出该晶体的方法是（填写实验操作名称）。（5）根据④的试管里紫色石蕊试液的颜色变化可否证明氯气的强氧化性。为什么？。 （6）若②的试管溶液中不但有KClO3生成还有KClO生成，且二者的物质的量之比为1∶2，则该反应中氧化剂和还原剂的物质的量之比为：。 2. 在实验室里可用右图所示装置来制取氯酸钠、次氯酸钠和探究氯水的性质。图中： ①为氯气发生装置；②的试管里盛有15 mL 30% NaOH溶液来制取氯酸钠，并置于热水浴中； ③的试管里盛有15 mL 8% NaOH溶液来制取次氯酸钠，并置于冰水浴中； ④的试管里加有紫色石蕊试液；⑤为尾气吸收装置。请填写下列空白： （1）制取氯气时，在烧瓶里加入一定量的二氧化锰，通过（填
写仪器名称）向烧瓶中加入适量的浓盐酸。实验室制Cl2的化学方程式； 实验时为了除去氯气中的HCl气体，可在①与②之间安装盛有_______（填写下列编号字母）的净化装置。 A.碱石灰 B.氢氧化钠溶液 C.饱和食盐水 D.浓硫酸 （2）如果将过量二氧化锰与20 mL 12 mol·L－1的浓盐酸混合加热，充分反应后生成的氯气0.06 mol。（填“大于”“小于”“等于”），若有17.4g 的MnO2被还原，则被氧化的HCl质量为。 （3）比较制取氯酸钠和次氯酸钠的条件，二者的差异是 ①；②。 （4）实验中可观察到④的试管里溶液的颜色发生了如下变化，请填写下表中的空白。 实验现象原因 溶液最初从紫色逐渐变为红色氯气与水反应生成的H+使石蕊变色 随后溶液逐渐变为无色______________________________________ 然后溶液从无色逐渐变为_______色______________________________________ 3. 实验室里需要纯净的氯化钠溶液，但只有混有硫酸钠、碳酸氢铵的氯化钠固体。某学生设计了如下方案： 请根据操作流程回答下列问题： （1）操作①在加热时可选择仪器盛装混合物。 （2）操作②是否可改为加硝酸钡溶液？为什么？。 （3）进行操作②后，如何判断SO42-已沉淀完全？。 （4）操作③的目的是 。 （5）操作④的目的是 。 4. (8分)某同学用某种粗盐进行提纯实验，步骤见下图。请回答下列问题：
微生物试验操作步骤 1.前期准备工作（红色字体需要购买） 10ml离心管（80管）、培养皿（预实验36板，正式试验648板，共计684板）、EP管（预实验36管，正式试验108管，144管）、枪头（5ml、1ml、200ul）、生理盐水现配现用（0.85）2.，灭菌处理 将离心管、枪头、生理盐水、培养基放入高压灭菌锅中灭菌处理后待用。 3.制备不同梯度的样品溶液 预实验 a.梯度稀释试验前一天晚上取置于-80℃盲肠食糜样品于4℃冰箱融化，将需要用到的离心管和EP管分别编号待用。试验期间取盲肠食糜0.5~1g于灭菌后的10ml离心管中，按1：10比例加入生理盐水，制成10-1浓度的样品溶液。然后取0.5ml10-1浓度的样品溶液于下一离心管，按1：10比例加入生理盐水，制成10-2浓度的样品溶液。然后然后取0.1ml10-2浓度的样品溶液于EP管中，按1：1010-3比例加入生理盐水，制成10-3浓度的样品溶液。然后依次如上分别配制10-4、10-5、10-6、10-7、10-8样品溶液。每一次取样前离心管和EP管都要在微型振荡器上震荡混匀。 b.接种和培养：按照平板涂布法进行。分别取各稀释管溶液100μl接种到选择性培养基，大肠杆菌选择性培养基置普通培养箱，37℃培养24h。乳酸菌选择性培养基置5%CO2培养箱，37℃培养48h。双歧杆菌选择性培养基置厌氧发酵罐内，37℃培养48h。沙门氏菌选择性培养基置普通培养箱，37℃培养24h。 c. 微生物计数与鉴定：采用常规微生物平板菌落计数法，选择长有30-300个菌落的平板较为合适，用每克肠道内容物中细菌个数的对数表示( 1gCFU /g) 正式试验 按照预实验操作步骤及适宜梯度进行试验。 4.培养基 总需氧菌营养琼脂（NA）34567 乳酸菌MRS琼脂碱性厌氧234567 双歧杆菌BL琼脂厌氧234567产气袋 大肠杆菌麦康凯需氧234567 沙门氏菌XLD 需氧2345
原位杂交原理及具体操作
原位杂交实验原理与方法 一、目的 本实验的目的是学会原位杂交的使用方法。了解各种原位杂交的基本原理和优缺点。 二、原理 原位杂交组化（简称原位杂交，in situ hybridization histochemistry；ISHH）属于分子杂交的一种，是一种应用标记探针与组织细胞中的待测核酸杂交，再应用标记物相关的检测系统，在核酸原有的位置将其显示出来的一种检测技术。原位杂交的本质就是在一定的温度和离子浓度下，使具有特异序列的单链探针通过碱基互补规则与组织细胞内待测的核酸复性结合而使得组织细胞中的特异性核酸得到定位，并通过探针上所标记的检测系统将其在核酸的原有位置上显示出来。 当然杂交分子的形成并不要求两条单链的碱基顺序完全互补，所以不同来源的核酸单链只要彼此之间有一定程度的互补顺序（即某种程度的同源性）就可以形成杂交双链。 探针的种类按所带标记物可分为同位素标记探针和非同位素标记探针两大类。目前，大多数放
射性标记法是通过酶促反应将标记的基因掺入DNA中，常用的同位素标记物有3H、35S、125I 和32P。同位素标记物虽然有灵敏性高，背底较为清晰等优点，但是由于放射性同位素对人和环境均会造成伤害，近来有被非同位素取代的趋势。非同位素标记物中目前最常用的有生物素、地高辛和荧光素三种。 探针的种类按核酸性质不同又可分为DNA探针、cDNA探针、cRNA探针和合成寡核苷酸探针。cDNA 探针又可分为双链cDNA探针和单链cDNA探针。原位杂交又可分为菌落原位杂交和组织原位杂交。 菌落原位杂交（Colony in situ hybridization）菌落原位杂交是将细菌从培养平板转移到硝酸 纤维素滤膜上，然后将滤膜上的菌落裂菌以释出DNA。将NDA烘干固定于膜上与32P标记的探针杂交，放射自显影检测菌落杂交信号，并与平板上的菌落对位。 组织原位杂交（Tissue in situ hybridization）组织原位杂交简称原位杂交，指组织或细胞的原位杂交，它与菌落的原位杂交不同。菌落原位杂交需裂解细菌释出DNA，然后进行杂交。而原位
生物实验操作步骤 一、安装显微镜和对光： A 、操作步骤： 1.一手握住镜臂，一手托住镜座，把显微镜轻轻地放在实验台上，镜臂靠近身体略偏左，镜座距实验台边缘约5厘米。安装好目镜和物镜。 2.转动转换器，使低倍物镜对准通光孔。转动遮光器，使最大的光圈对准通光孔。 3、左眼注视目镜内，同时双手转动反光镜（光强用使用平面镜、光弱使用凹面镜），使光线反射到镜筒里，直到整个视野呈雪白色为止。 4.整理复位：把显微镜的外表擦拭干净。取下镜头放入镜盒内，并将镜筒缓缓下降到最低处。最后把显微镜放进镜箱里，放回原处。 B 、去年考卷： C 、评分标准： （1）安装好物镜和目镜（1分） （2）能将显微镜对好光观察（2分） 记录：雪白色或亮白色（1分） （3）整理器材（1分） 二、制作并观察洋葱鳞片叶临时玻片标本： A 、操作步骤： 1、用干净的纱布把载玻片和盖玻片擦干净。 2、用滴管在载玻片中央滴一滴清水。 3、用刀片在洋葱内表面划一个“井”字，用镊子撕下表皮，然后把它放在载玻片中央的水滴中，用解剖针轻轻地将其展平； 4、用镊子夹起盖玻片，使其一边接触载玻片上面的液滴，然后缓缓地盖在液滴上，盖片时要防止装片上出现气泡； 5、在载玻片的一侧滴一滴碘液，在另一侧用吸水纸吸引，重复几次，使染液浸润到整个标本； 6、安装显微镜和对光； 7、将制作的装片安放在显微镜的载物台上，然后将镜筒缓缓下降直到物镜接近玻片； 8、用左眼注视目镜，调节粗准焦螺旋使镜筒缓缓上升，直到在视野中看到细胞图像，然后旋转细准焦螺旋，使物像更清晰； 9、移动装片，在视野中找到一个完整的细胞进行仔细观察； 10、整理复位：取下玻片标本，平移方式（防止折断盖玻片）取下盖玻片并连同载玻片一起放回原处。取下镜头放入镜盒内，将镜筒下降到最低处，然后把显微镜放进镜箱里。把其他废弃物放入垃圾桶并把实验桌抹干净。 B 、去年考卷： C 、评分标准： （1）用纱布将载玻片、盖玻片擦拭干净（1分） （2）在载玻片中央滴一滴清水（1分） （3）用刀片切取一块洋葱鳞片叶，用镊子撕取鳞片叶的内表皮置于载玻片上清水中并用解剖针将表皮展平，盖上盖玻片（1分） （4）将一滴碘液滴在盖玻片的一侧，用吸水纸从对侧引流使碘液扩散到整个标本（1分） （5）将制作好的临时装片放在显微镜下观察（1分） 记录：气泡（1分） 细胞核（1分） 细准焦螺旋（1分） 左上方（1分） （6）整理器材（1分） 三、制作并观察口腔上皮细胞临时玻片标本： A 、操作步骤： 1、用干净的纱布把载玻片和盖玻片擦干净； 2、用滴管在载玻片中央滴一滴生理盐水； 3、用清水漱口，清除口腔中食物碎屑，用消毒牙签粗的一端在口腔侧壁上轻轻刮几下； 4、将牙签上附着的碎屑放在载玻片的生理盐水中涂抹几下； 用镊子夹起盖玻片让一侧先接触生理盐水在轻轻放平，避免出现 。 你观察到的细胞内染色最深的结构是 如果想让物像更清晰，应转动 。如果物像在视野的左上方，应将玻片标本向 移动，才能使物像移到视野中间。
高一化学必修一化学实验基本操作【自主学习】 一、化学实验安全 1、常见危险化学药品的标志 2、点燃可燃性气体之前应先检验气体的纯度，防止爆炸；H 2还原CuO或者CO还原Fe 2 O 3 等 实验，在加热之前应先排空气；制备有毒气体应在通风橱中，尾气应吸收；用加热法制取气体且用到排水法时，反应完毕后，应该先移导管再停止加热。 3、意外事故的处理
二、常见的基本操作 1、试纸的使用： ⑴检验溶液：取试纸放在表面皿上，玻棒蘸取液体，沾在试纸中心 ⑵检验气体：用镊子夹取或粘在玻璃棒的一端，先用水湿润，再放在集气瓶口或导管口处 2、仪器的洗涤： ⑴洗净的标准：玻璃仪器内壁附着的水，既不聚成水滴，也不成股流下。 ⑵常见残留物的洗涤
3、药品的取用： ⑴取用粉末状或小颗粒状固体用药匙，若药匙不能伸入试管，可用小纸槽，要把药品送入试管底部，而不能沾在管口和管壁。块状和大颗粒固体用镊子夹取。 ⑵取少量液体可用胶头滴管。取用较多的液体用倾注法，注意试剂瓶上的标签向手心。向容量瓶、漏斗中倾注液体时，要用玻璃棒引流。 4、浓硫酸的稀释： 把浓硫酸沿着器壁慢慢的注入水里，并不断搅动，使产生的热量迅速的扩散，切不可把水注入浓硫酸中。 5、沉淀的洗涤及检验 ⑴是否沉淀完全的判断： (如检验溶液中的SO 42－是否沉淀完全)取少量静置后的上层清液，滴加BaCl 2 ，若有白色沉 淀生成，则说明SO 4 2－沉淀不完全。 ⑵沉淀的洗涤： 沿玻璃棒向漏斗中加蒸馏水至水面没过沉淀，等水滤出后，再次加水洗涤，连续几次，即
可把固体洗涤干净。 ⑶判断沉淀是否洗净： (如沉淀中沾附有Cl－)取少量洗涤液，向其中加入HNO 3酸化的AgNO 3 溶液，若有白色沉淀， 则说明沉淀未洗净。反之，已洗净。 6、结晶： 常用的结晶方法有冷却结晶（适合于溶解度随温度变化较大的溶质）和蒸发结晶（适合于溶解度随温度变化不大的溶质）；将析出的晶体再进一步提纯的方法是重结晶。 【合作探究】 一、实验安全常识 1、防倒吸： 用试管加热固体时，试管底部要略高于管口，如实验室制O 2、NH 3 等，加热液体时试管要向 上倾斜，加热法制取并用排水法收集气体或吸收溶解度较大气体时，要注意熄灯顺序或加装安全瓶。 2、防爆炸： 点燃可燃性气体（如H 2、CO、CH 4 、C 2 H 4 ）或用H 2 还原CuO或者CO还原Fe 2 O 3 之前，要检验 气体纯度，普通玻璃制品都有受热不均匀易炸裂的特性，因此①试管加热时先要预热，②做固体在气体中燃烧实验时要在集气瓶底加少量水或铺一层细沙。 3、防爆沸：
原位杂交实验操作步骤 一质粒制备 1质粒的转化和扩增 1.1制备XL1-Blue感受态细菌 1.取400uLXL1-Blue菌种加入到含200mlLB培养基的锥形瓶中，37℃、100rpm 培养4h，离心，倒置，以冰冷的0.1mol/LCaCl_2重悬细菌，冰浴30min，离心，弃上清，倒置，再加4ml(含15%甘油)冰冷的CaCl2重悬细菌，分装(200μ/tube)，-80℃保存。 2.转化：在冰浴中将1管XL1-Blue感受态菌解冻，将浓度为2ng/μ1的质粒DNA4μ1加入到8Oμ1感受态菌中。 3.轻轻摇匀，冰浴30min。 4.42℃热激9O秒，然后迅速冰浴2min。 5.加入LB培养液(无氨苄青霉素)0.8ml，在37℃，100转/min水浴孵育60min。 6.取200μl菌液铺于琼脂板上(涂有X-Gal(20mg/ml)-IPTG(200mg/ml)的LB-氨苄青霉素50mg/ml,1μl/ml培养基)，待菌液全部被吸收后，倒置平板于37℃培养12-16h。 1.2鉴定和挑选含重组质粒的菌落 1.用无菌牙签挑取单菌落，接种到10ml含氨苄青霉素的LB培养液的离心管中，于37℃，200转/分培养2h，取1ml之一Eppendorf离心管，加 50μl10mmol/L EDTA(pH8.0)。 2.加入50μl新配置的0.2mol/LNaOH、0.5%SDS、20%蔗糖溶液后，振荡30秒。 3.在70℃温育5min，然后冷却到室温。 4.加1.5μ14mol/LKCl和0.5μ1含0.4%溴酚兰染液，振荡3O秒后，冰浴5min。 5.12000g，4℃离以3min，以除去细菌碎片。 6.制备1%的琼脂糖凝胶(含EB0.5μg/ml)，取50μl上清液加入到样品孔中，其中一孔加入中等分子量DNAMarker。恒压50V，进行电泳。 7.当溴酚兰迁移到凝胶全长的2/3-3/4时，停止电泳，在紫外灯下检查质粒DNA 分于量的大小是否与转入质粒相符。
实验一：粗盐提纯 一、实验仪器与用品 仪器：烧杯、玻璃棒、蒸发皿、酒精灯、漏斗、药匙、量筒（10mL）、铁架台（带铁圈）、滤纸、火柴、托盘天平（带砝码） 用品：粗盐，蒸馏水 二、实验步骤 ①溶解：用量筒量取约10mL水倒入烧杯中。用托盘天平称量越4g。将称取烦人粗盐逐渐加入水中，并用玻璃棒 不断搅拌，直至粗盐不再溶解为止 现象：固体Nacl逐渐溶解而减少，食盐水略显浑浊 ②过滤：用滤纸和漏斗制作一个过滤器。将烧杯中的液体沿玻璃棒倒入过滤器中（引流），进行过滤，若滤液仍 浑浊，应再过滤一次。 现象：不溶物残留在滤纸上，液体透过滤纸到入烧杯中 ③蒸发：把得到的澄清滤液导入蒸发皿中。把蒸发皿放在铁架台的铁圈上，用酒精灯加热，同时用玻璃杯不断搅拌滤液。等到蒸发皿中出现较多的固体时，停止加热，利用蒸发皿的余热使滤液蒸干。 现象：水分蒸发，逐渐出现固体 三．注意事项 滤纸与漏斗的使用：一贴二低三靠 “一贴”是指滤纸折叠角度要与漏斗内壁口径吻合，使湿润的滤纸紧 贴漏斗内壁而无气泡，因为如果有气泡会影响过滤速度． “二低”是指滤纸的边缘要稍低于漏斗的边缘，二是在整个过滤过程 中还要始终注意到滤液的液面要低于滤纸的边缘。这样可以防止杂质未经 过滤而直接流到烧杯中，这样未经过滤的液体与滤液混在一起，而使滤液 浑浊，没有达到过滤的目的。 “三靠”一是指待过滤的液体倒入漏斗中时，盛有待过滤液体的烧杯的 烧杯嘴要靠在倾斜的玻璃棒上（玻璃棒引流），防止液体飞溅和带过滤液 体冲破滤纸；二是指玻璃棒下端要轻靠在三层滤纸处以防碰破滤纸（三层 滤纸一边比一层滤纸那边厚，三层滤纸那边不易被弄破）；三是指漏斗的 颈部要紧靠接收滤液的接受器的内壁，以防液体溅出 实验二：制作蒸馏水 一、实验仪器 仪器：酒精灯、石棉网、蒸馏烧瓶、冷凝管、牛角管、锥形瓶、铁架 台（带铁圈） 其他：火柴、自来水、碎瓷片、温度计 二、注意事项 加入碎瓷片可防止液体暴沸而冲进导管。导管要适当长些兼作冷凝管 用。试管中液体不能太多，以防沸腾时沿导管流入接收器中。当液体 沸腾后，酒精灯火焰要稍远离试管，使液体保持沸腾状态即可，如加 热过猛液体会沿导管冲出。 实验三：萃取 一、原理 用一种溶把溶质从它与另一溶剂所组成的溶液里提取出来。 二、仪器 分液漏斗, 烧杯 三、实验步骤： ①检验分液漏斗是否漏水。 ②量取10mL碘的饱和溶液倒入分液漏斗, 注入4mLCCl4,盖好瓶塞。 ③用右手压住分液漏斗口部, 左手握住活塞部分, 把分液漏斗倒转过来用力振荡。 ④将分液漏斗放在铁架台上,静置。 ⑤待液体分层后, 将分液漏斗上的玻璃塞打开,从下端口放出下层溶液,从上端口倒出上层溶液.
原位杂交操作流程 1、使用地高辛标记的核酸探针进行石蜡切片的RNA原位杂交第一天 1）二甲苯于37℃脱蜡2次，每次15分钟； 2）无水乙醇浸泡2次，每次3分钟； 3） 95%乙醇浸泡2次，每次3分钟； 4） PBS清洗3分钟； 5） 2%焦碳酸二乙酯室温下浸泡10分钟； 6） PBS清洗10分钟； 7）加入胃蛋白酶25ul/ml，37℃孵育15分钟； 8） PBS清洗2次，每次3分钟； 9） 0.2N的HCl孵育30分钟； 10）PBS清洗2次，每次3分钟； 11）0.25%无水乙酸和0.1M三乙醇胺孵育10分钟； 12）PBS清洗2次，每次5分钟； 13）预杂交缓冲液孵育30分钟； 14）准备核酸探针混合物：使用预杂交缓冲液稀释探针，85℃加热5分钟，置于冰块中10分钟； 15）杂交；第二天 16）将玻片置于SSC中2次，每次5分钟以去除封片； 17）PBS清洗3分钟； 18）RNA酶A溶液中（或0.1-1ng/mlPBS中），37℃孵育30分钟； 19）PBS清洗5分钟； 20）室温，2×SSC清洗10分钟； 21）37℃，1×SSC清洗10分钟； 22）37℃，0.5×SSC清洗10分钟； 23）缓冲液A孵育10分钟； 24）缓冲液A（1%正常绵羊血清和0.03%三重氢核X-100）孵育30分钟； 25）加入抗地高辛抗体（1/200的上述缓冲液，来自Boehringer Mannheim），37℃孵育3 小时； 26）缓冲液A清洗2次，每次10分钟； 27）缓冲液B清洗2次，每次5分钟； 28）制成NBT/BCIP暗处保存30-60分钟，显微镜下进行观察，如果背景尚佳，显色时间可延长到16小时；29）停止缓冲液B的反应，用水进行简单的清洗； 30）固红，脱水以及封片进行核的复染。 2、使用地高辛标记的寡核苷酸探针进行石蜡切片的原位DNA杂交第一天 1）二甲苯于37℃脱蜡2次，每次15分钟； 2）无水乙醇浸泡2次，每次5分钟； 3） 95%乙醇浸泡2次，每次5分钟； 4） PBS清洗5分钟； 5） 2%焦碳酸二乙酯室温下浸泡10分钟； 6） PBS清洗5分钟； 7）加入胃蛋白酶25ul/ml，37℃孵育10分钟； 8） PBS清洗2次，每次5分钟； 9） 0.2N的HCl孵育30分钟； 10）PBS清洗2次，每次5分钟； 11）0.25%无水乙酸和0.1M三乙醇胺孵育10分钟；
考点1 化学实验基本方法 1.化学实验常用仪器 (1)可加热的仪器 ①可直接加热的仪器-------------试管、坩埚、蒸发皿、燃烧匙 ②可间接加热(加垫石棉网加热、水浴加热等)但不能直接加热的仪器： 烧杯、烧瓶（圆底烧瓶、平底烧瓶、蒸馏烧瓶）、锥形瓶。 (2)测量液体体积的仪器 ①测量物质质量的仪器-------------托盘天平(有砝码镊子与之配套)。 ②测量液体体积的仪器 A.粗测量筒、量杯。 B.精测容量瓶(限用于配制一定体积、浓度准确的溶液)。 ③测量物体温度的仪器-------------温度计。 (3)用于物质分离的主要玻璃仪器 ①分液----------分液漏斗、烧杯。 ②过滤----------漏斗、玻璃棒、烧杯。 ③液体分离---------蒸馏烧瓶(必要时要配备温度计、冷凝管、牛角管)、酒精灯。 (4)物质储存仪器①储存气体---------集气瓶、储气瓶。 ②储存固体------广口试剂瓶③储存液体------细口试剂瓶 2.常用试剂的存放 见光分解的物质用棕色试剂瓶避光存放（氯水、硝酸银溶液）； 钠、钾等活泼金属放煤油中封存；少量液溴、白磷用水封存； 酸碱不能混放且要密封置于凉暗处；易燃物质不与氧化剂、易爆剂混放； 空气中易变质物质不能长期露置于空气中；碱性物质不用玻璃瓶塞塞盖； 氢氟酸不用玻璃试剂瓶存放。 3．物质的分离、和提纯-----过滤、蒸发结晶、降温结晶、蒸馏、萃取、分液等方法。（1）、不溶性杂质的去除————过滤、蒸发 A、过滤是分离不溶性固体与液体的一种方法（即一种溶，一种不溶，一定用过滤方法） 如：粗盐提纯、氯化钾和二氧化锰的分离。 B、实验用品：漏斗、滤纸、玻璃棒、烧杯、铁架台（含铁圈、铁夹） C、操作：1、溶解 2 过滤 3．蒸发滤液 （如果要得到不溶性杂质，则步骤为：溶解、过滤、洗涤、干燥） 在进行过滤和蒸发时应注意 “一贴”：指用水润湿后的滤纸应紧贴漏斗内壁； “二低”：指①滤纸边缘稍低于漏斗边缘②滤液液面稍低于滤纸边缘； “三靠”：指①烧杯紧靠玻璃棒②玻璃棒紧靠三层滤纸一边③漏斗末端紧靠烧杯内壁蒸发是浓缩或蒸干溶液得到固体的操作，仪器用蒸发皿、玻璃棒、酒精灯、铁架台注意点：①在蒸发过程中要不断搅拌，以免液滴飞溅出来 ②当出现大部分晶体时就停止加热（液体接近蒸干时） ③使用蒸发皿应用坩埚钳夹持，后放在铁架台的铁圈上
人教部编版高中生物孟德尔的豌豆杂交实验详解 知识点 1. 基因的分离定律 相对性状：同种生物同一性状的不同表现类型，叫做相对性状。 显性性状：在遗传学上，把杂种F1中显现出来的那个亲本性状叫做显性性状。 隐性性状：在遗传学上，把杂种F1中未显现出来的那个亲本性状叫做隐性性状。 性状分离：在杂种后代中同时显现显性性状和隐性性状（如高茎和矮茎）的现象，叫做性状分离。 显性基因：控制显性性状的基因，叫做显性基因。一般用大写字母表示，豌豆高茎基因用D表示。 隐性基因：控制隐性性状的基因，叫做隐性基因。一般用小写字母表示，豌豆矮茎基因用d表示。 等位基因：在一对同源染色体的同一位置上的，控制着相对性状的基因，叫做等位基因。（一对同源染色体同一位置上，控制着相对性状的基因，如高茎和矮茎。） 显性作用：等位基因D和d，由于D和d有显性作用，所以F1（Dd）的豌豆是高茎。 等位基因分离：D与d一对等位基因随着同源染色体的
分离而分离，最终产生两种雄配子。D∶d=1∶1；两种雌配子D∶d=1：1。） 非等位基因：存在于非同源染色体上或同源染色体不同位置上的控制不同性状的不同基因。 表现型：是指生物个体所表现出来的性状。 基因型：是指与表现型有关系的基因组成。 纯合体：由含有相同基因的配子结合成的合子发育而成的个体。可稳定遗传。 杂合体：由含有不同基因的配子结合成的合子发育而成的个体。不能稳定遗传，后代会发生性状分离。 2. 基因的自由组合定律 基因的自由组合规律：在F1产生配子时，在等位基因分离的同时，非同源染色体上的非等位基因表现为自由组合，这一规律就叫基因的自由组合规律。 对自由组合现象解释的验证：F１（YyRr）X隐性（yyrr）→（1YR、1Yr、1yR、1yr）Xyr →F２：1YyRr：1Yyrr：1yyRr：1yyrr。 基因自由组合定律在实践中的应用：基因重组使后代出现了新的基因型而产生变异，是生物变异的一个重要来源；通过基因间的重新组合，产生人们需要的具有两个或多个亲本优良性状的新品种。 3. 孟德尔获得成功的原因：
万鹏网络生物辅导资料二 孟德尔的豌豆杂交实验（一） 【自主探究】 一．与遗传有关的知识 1.遗传学的奠基人通过发现了遗传的基本规律。 2.豌豆作为遗传实验材料的优点 ⑴传粉和受粉，自然状态下一般都是。 ⑵豌豆有很多子代，便于。⑶具有易于区分的。 ⑷花大，易操作。 孟德尔取得成功的另外一个重要原因是他首先对分别进行研究。 3.人工异花传粉的操作步骤→套袋→→套袋。 4.遗传中的常用符号 （1）杂交：；自交：；正交：♂甲×♀乙→反交：。 （2）亲本：；父本：；母本：；子一代：；子二代：。 5.纯合子和杂合子 （1）纯合子是指遗传因子组成的个体，如DD和dd。 （2）杂合子是指的个体，如Dd。 二．一对相对性状的杂交实验 1.实验过程 互称为 高茎豌豆×矮茎豌豆 F1豌豆（此性状为性状） 性状____豌豆_____豌豆 F22此现象为 比例 2．对分离现象的解释——孟德尔对分离现象提出的假说 ⑴生物的性状是由决定的。⑵体细胞中遗传因子是存在的。 ⑶形成配子时，成对遗传因子，分别进入不同的配子中。 ⑷受精时，的结合是。 3．对分离现象解释的验证 （1）实验方法：（2）测交含义：让F1与杂交。 结果：高茎（Dd）：矮茎(dd)=：。
4．分离定律（1）描述对象：。 （2）发生时间：在形成时。 （3）实质：控制同一性状的成对的发生分离，分离后的分别进入不同的中，随遗传给后代。 5.杂交实验过程中假说—演绎法的体现 【典型例题】 1.下列各组中属于相对性状的是（） A.水稻早熟和玉米晚熟 B.豌豆的白花和红花 C.小麦的抗锈病和抗旱性 D.绵羊的长毛和细毛 2.在进行豌豆杂交试验时，为保证杂交实验成功，孟德尔采取的措施是（ ） ①花蕾期，不去雄蕊 ②花蕾期，去雄蕊 ③去雄后，套上纸袋④去雄后，不套纸袋 ⑤待花成熟时，采集另一株植物的花粉涂在去雄蕊植株的柱头上⑥待花成熟时，拿开纸袋任其在自然状况下传粉受精 A.②④⑥ B.①③⑥ C.②③⑤ D.②④⑥ 3.下列杂交组合产生的后代，哪一组会发生性状分离（ ） A.EE ×ee???? B.EE ×Ee C.EE ×EE??? D.Ee ×Ee 4.玉米开单性花，可进行异株异花传粉和同株异花传粉，把黄和白玉米隔行种植在一块试验田里，让它们在自然的条件下传粉，结果黄玉米植株上结出的果穗上子粒全部是黄色，白玉米植株果穗上子粒有黄有白。则以下叙述，正确的是（） A ．黄色对白色是显性，黄玉米是纯合子，白玉米是杂合子 B ．黄色对白色为显性，黄玉米和白玉米都是纯合子 C ．白色对黄色为显性，白玉米是纯合子，黄玉米是杂合子 D ．白色对黄色为显性，白玉米和黄玉米都是纯合子 5．分离定律的实质是（） A.F 2遗传因子组成类型的比为1：2：1 B.子二代性状分离比为3：1 C.杂合子形成1：1的两种配子 D.测交后代性状分离比为1：1 6.几组杂交中，哪组属于纯合子之间的杂交（） A.DD ×DdC.DD ×ddC.Dd ×DdD.Dd ×dd 7．书写圆豌豆（Rr ）自交的遗传图解 【基础过关】 1.豌豆的传粉方式和传粉时间分别为（） A.自花传粉，开花前 B.自花传粉，开花后 C.异花传粉，开花前 D.异花传粉，开花后 2.孟德尔利用豌豆作为实验材料进行植物杂交实验，成功地发现了生物的遗传规律。下列各项中不是豌豆作为遗传实验材料的优点是（） A.豌豆是严格的闭花自花授粉植物 B.豌豆在自然状态下一般是纯种 C.豌豆具有许多明显的相对性状 D.杂种豌豆自交后代容易发生性状分离 进行豌豆 杂交实验 对分离现象的解释 设计测 交实验 进行测 交实验 分离定律 提出问题
原位杂交 1 探针的设计与合成 1)根据实验室已有的p8基因cDNA全长序列，用premier primer5.0设计引物p81和p82， 以卤虫cDNA为模板，PCR扩增得到346bp的产物，用Takara胶回收试剂盒回收纯化。引物编号引物序列长度 p81 TGCGGACGAAACAGGAAG 18 bp p82 GCTCAAACAGTGA TGCCAGT 20 bp 2)目的片段克隆 a. 在无菌离心管中加入连接载体的各种成分，载体与片段的摩尔比控制在1:3-1:8，根据凝胶电泳检测后的浓度及载体与片段分子大小来计算摩尔比。加入成分及比例如下： 目的PCR片段 5 μl pGM-T载体（约50ng/uL） 1 μl 10×T4 DNA Ligation Buffer 1 μl T4 DNA Ligase（3U/uL） 1 μl 无菌去离子水 3 μl 总体积10 μl b. 轻轻弹动离心管以混合内容物，短暂离心。置于PCR仪中16℃过夜连接，反应结束后将离心管置于冰上。 c. 向铺好的含有氨苄青霉素的固体平板表面加入16 μl的IPTG（50mg/ml）、40 μl的X-gal （20mg/ml），使用无菌的弯头玻璃棒将其均匀的涂开，避光置于37℃培养箱1-3小时，使溶解X-gal的二甲基甲酰挥发干净。 d. 将10 μl的连接产物加到100 μl DH5 感受态细胞中，轻弹混匀，冰浴半小时，将离心管置于42℃水浴90秒，取出管后立即置于冰浴上放置2-3分钟，其间不要摇动离心管。向离心管加入500 μl 37℃预热的LB（不含抗生素）培养基，150rpm摇床37℃振荡培养45分钟。目的是使质粒上相关的抗性标记基因表达，使菌体复苏。将菌液于4000g下离心10分钟，去掉上清，加入100 μl培养液重溶并加入到配制好的LB固体培养基上，用无菌的弯头玻璃棒轻轻将细胞均匀涂开。待平板表面干燥后，倒置平板，37℃培养12-16小时。 e. 挑取白色菌落直接进行PCR检测，筛选转化子。 f. 将转化子接种于LB液体培养基中培养24小时，吸取1mL菌液送至大连宝生物公司进行序列测序。 3)重组质粒的线性化 取6 μl以测序的重组质粒，选取NcoI内切酶37℃酶切4h。酶切反应体系为20 μl： 质粒 6 μl 10xK Buffer 2 μl NcoI酶 1 μl 0.1% BSA 2 μl 灭菌水9 μl 终体积20 μl 取酶切前后的质粒各4 μl，经1%琼脂糖电泳检测，确认酶切完全，将酶切产物用Takara胶回收试剂盒回收纯化，作为探针合成的模板。 4)探针合成 按罗氏DIG RNA Labeling Kit (SP6/T7)试剂盒使用指南，标记反义RNA探针。 使用的所有试剂和器皿均经去RNase处理，合成方法如下:先准备反应体系。冰上向RNase-Free的微离心管中顺序加入下列试剂:
实验现象总结 1．镁条在空气中燃烧：发出耀眼强光，放出大量的热，生成白烟同时生成一种白色物质。2．木炭在氧气中燃烧：发出白光，放出热量。 3．硫在氧气中燃烧：发出明亮的蓝紫色火焰，放出热量，生成一种有刺激性气味的气体。4．铁丝在氧气中燃烧：剧烈燃烧，火星四射，放出热量，生成黑色固体物质。 5．加热试管中碳酸氢铵：有刺激性气味气体生成，试管上有液滴生成。 6．氢气在空气中燃烧：火焰呈现淡蓝色。 7．氢气在氯气中燃烧：发出苍白色火焰，产生大量的热。 8．在试管中用氢气还原氧化铜：黑色氧化铜变为红色物质，试管口有液滴生成。 9．用木炭粉还原氧化铜粉末，使生成气体通入澄清石灰水，黑色氧化铜变为有光泽的金属颗粒，石灰水变浑浊。 10．一氧化碳在空气中燃烧：发出蓝色的火焰，放出热量。 11. 向盛有少量碳酸钾固体的试管中滴加盐酸：有气体生成。 12．加热试管中的硫酸铜晶体：蓝色晶体逐渐变为白色粉末，且试管口有液滴生成。13．钠在氯气中燃烧：剧烈燃烧，生成白色固体。 14．点燃纯净的氢气，用干冷烧杯罩在火焰上：发出淡蓝色火焰，烧杯内壁有液滴生成。15．向含有Cl-的溶液中滴加用硝酸酸化的硝酸银溶液，有白色沉淀生成。 16．向含有SO42-的溶液中滴加用硝酸酸化的氯化钡溶液，有白色沉淀生成。 17．带锈铁钉投入盛稀硫酸的试管中并加热：铁锈逐渐溶解，溶液呈浅黄色，并有气体生成。18．在硫酸铜溶液中滴加氢氧化钠溶液：有蓝色絮状沉淀生成。 19．将Cl2通入无色KI溶液中，溶液中有褐色的物质产生。 20．在三氯化铁溶液中滴加氢氧化钠溶液：有红褐色沉淀生成。 21．盛有生石灰的试管里加少量水：反应剧烈，发出大量热。 22．将一洁净铁钉浸入硫酸铜溶液中：铁钉表面有红色物质附着，溶液颜色逐渐变浅。23．向盛有石灰水的试管里，注入浓的碳酸钠溶液：有白色沉淀生成。 25．细铜丝在氯气中燃烧后加入水：有棕色的烟生成，加水后生成绿色的溶液。 26．强光照射氢气、氯气的混合气体：迅速反应发生爆炸。 27. 红磷在氯气中燃烧：有白色烟雾生成。 28．氯气遇到湿的有色布条：有色布条的颜色退去。 29．加热浓盐酸与二氧化锰的混合物（实验室制Cl2）：有黄绿色刺激性气味气体生成。31. 在溴化钠溶液中滴加硝酸银溶液后再加稀硝酸：有浅黄色沉淀生成。 32．在碘化钾溶液中滴加硝酸银溶液后再加稀硝酸：有黄色沉淀生成。 33．I2遇淀粉，生成蓝色溶液。 35．铁粉与硫粉混合后加热到红热：反应继续进行，放出大量热，生成黑色物质。 38．在集气瓶中混合硫化氢和二氧化硫：瓶内壁有黄色粉末生成。 39．二氧化硫气体通入品红溶液后再加热：红色退去，加热后又恢复原来颜色。 40．过量的铜投入盛有浓硫酸的试管，并加热，反应毕，待溶液冷却后加水：有刺激性气味的气体生成，加水后溶液呈天蓝色。 41．加热盛有浓硫酸和木炭的试管：有气体生成，且气体有刺激性的气味。 42．钠在空气中燃烧：火焰呈黄色，生成淡黄色物质。 43．钠投入酚酞溶液中：反应激烈，钠浮于水面，放出大量的热使钠溶成小球在水面上游动，有“嗤嗤”声，溶液变红。 44．把水滴入盛有过氧化钠固体的试管里，将带火星木条伸入试管口：木条复燃。 45. 加热碳酸氢钠固体，使生成气体通入澄清石灰水：澄清石灰水变浑浊。
实验名称：观察植物细胞 1、用洁净的纱布把载玻片和盖玻片擦拭干净 2、把载玻片放在试验台上，用滴管在载玻片的中央滴一滴清水。 3、①用镊子从洋葱鳞片叶内侧撕取一小块透明薄膜内表皮。②把撕下的内表皮浸入载玻片的水滴中，用镊子把它展平。 4、用镊子夹起盖玻片，使它的一边先接触载玻片上的水滴，然后缓缓地放下，盖在要观察的材料上。 5、把一滴稀碘液滴在盖玻片的一侧。染 6、用吸水纸从盖玻片的另一侧吸引，使染液浸润标本的全部。 观察人的口腔上皮细胞 1、用干净的纱布把载玻片和盖玻片擦拭干净。 2、把载玻片放在实验台上，用滴管在载玻片的中央滴一滴生理盐水 3、用凉开水把口漱净。用消毒牙签从口腔侧壁处轻轻刮几下，牙签上就附着了一些碎屑。把牙签放在载玻片的生理盐水滴中均匀地涂抹几下。 4、用镊子夹起盖玻片，使它的一侧先接触载玻片上的液滴，然后缓缓放平。 5、在盖玻片的一侧滴加稀碘液（染），另一侧用吸水纸吸引，使染液浸润到标本的全部。 观察鸡卵的结构 1.取一个鸡卵，观察其外部形态。（放大镜，气孔） 2.将鸡卵的钝段轻轻敲出裂纹，将碎裂的卵壳连同紧贴壳的膜除去，观察鸡卵的气室。（镊子，卵壳，外卵壳膜和气室） 3.用剪刀将气室下的内卵壳膜剪破。（剪刀） 4.将卵壳膜内的卵白和卵黄转移到培养皿中，卵黄完整。（培养皿） 5.观察鸡卵的结构。若未见胚盘，可用镊子夹起细系带把卵黄轻轻翻转。 观察种子的结构 1.观察菜豆种子的结构 ⑴取一粒浸软的菜豆种子，观察它的外形[来源:学|科|网Z|X|X|K] ⑵剥去种子最外面的一层薄皮-------种皮，分开合拢着的两片子叶。 ⑶用放大镜仔细观察子叶.胚根.胚轴和胚芽，看看它们各有什么特点？ 2观察玉米种子的结构 ⑵一粒浸软的玉米种子，观察它的外形。 ⑵用刀片将这粒种子从中央纵向剖开。 剖面上滴一滴碘液，在用放大镜仔细观察被碘液染成蓝色的胚乳以及未被染成蓝色的果皮和种皮，胚芽，胚根，胚轴和子叶，看看它们各有什么特点？ 测定某种食物中的能量 1．取一只锥形瓶（50毫升），量筒量取30毫升水注入其中，再将它固定在铁架台上。 2.再锥形瓶里放入一支温度计（温度计下端要浸入水中，但不要接触锥形瓶的瓶底） 3.参照右图安装好试验装置，并测定水温。 4.称出一粒干燥花生种子的质量，将这粒种子放倒火焰上点燃， 5.将刚刚燃烧的花生种子尽快放倒锥形瓶底部。待这粒花生种子完全燃烧后，测量水温。 6.计算：Q=CM△T=30×4.2×（t2－t1）(把测量的温度代入，得出数据)
原位杂交实验操作步骤 撰写人：范为民 一、实验原理 原位杂交是指借助于核酸分子杂交的方法，在显微镜水平检测和定位特异的核苷酸片段。现在原位杂交已经成为在分子水平研究肿瘤和遗传性疾病的发生，发展和调控等根本性问题的有力工具。 二、试剂盒 本实验室常用的原位杂交试剂盒是博士德公司生产的敏感加强型原位杂交检测试剂盒，此试剂盒分为两种，一种为过氧化物酶（POD）检测（MK1030型），一种为碱性磷酸酶(AP)检测系统（MK1032型），用于mRNA的杂交。过氧化物酶（POD）检测的最终信号为棕黄色，而碱性磷酸酶(AP)检测的信号为紫色，因后者信号比较突出，所以一般采用后一种检测方法。两种检测方法的实验步骤相差不多，所用洗脱缓冲液也大同小异。用于杂交的探针也可以分为两种，一种是DNA探针，即是用DNA与组织中的mRNA杂交，另一种是RNA 探针，即用RNA与组织中的mRNA杂交。DNA探针处理操作简单，但杂交信号一般不如RNA探针强烈，所以条件允许的话一般采用RNA探针。下面先介绍碱性磷酸酶(AP)检测试剂盒，采用RNA作为探针的操作步骤。 三、实验步骤 原位杂交实验主要包括三大部分，即组织冰冻切片、RNA探针标记、原位杂交三部分。 （一）组织冰冻切片 1. 实验准备 （1）原位杂交专用载玻片：用多聚赖氨酸处理后的载玻片，使切片紧密粘附在玻片上，可以用于后面的洗脱。一般一张载玻片上可以贴至多十张切片（可以是不同组织的切片），所以需要玻片的数目需要根据实验的要求而定。这种专用载玻片可以从中杉金桥公司购买，目前价格是每片2.2元，玻片有一面的一端是毛玻璃，用于标记组织名称等，切片应该贴在此面，切勿贴到反面。 （2）缓冲液配备 1.1器具准备 剪刀、镊子各三把，开壳钳一把，100ml量筒一个，磁力搅拌子一个；100ml试剂瓶一个，250ml试剂瓶三个。以上器具均洗净后置于180摄氏度以上烘烤6小时以上。铅笔、显微镜、冰、吸水纸、一次性塑料手套等。 1.2 溶液配制 0.1M PB缓冲液：Na2HPO4?12H2O 5.8021g,NaH2PO4?2 H2O 0.5928 g,加入200ml ddH2O溶解于之前准备的250ml试剂瓶中，再加入200ūl DEPC，充分摇匀后过夜，高压灭菌。以上溶液配制两份，其中一份瓶中放入磁力搅拌子。