第十章复制
名词解释：
半保留复制：DNA复制是以DNA的两条链为模板，以dNTP为原料，在DNA聚合酶的作用下按照碱基配对规律合成新的互补连，这样形成的两个子代DNA分子与原来的DNA分子完全相同，故称之为复制。又因子代DNA分子的双链其中一条来自亲代，另一条是新合成的，故名半保留复制。
冈崎片段：DNA复制时，随从链复制中的不连续片段，命名为冈崎片段。
端粒：是真核生物染色体线性DNA分子末端的结构。形态学上，DNA末端与它的结合蛋白质紧密结合，像两顶帽子那样盖在染色体两端，使染色体DNA末端膨大成粒状。
框移突变：指三联体密码的阅读方式改变，造成蛋白质氨基酸排列顺序发生改变，其后果是翻译出的蛋白质可能完全不同。
切除修复：细胞内最重要的修复机制，主要是DNA聚合酶Ⅰ及连接酶执行。
反转录：以RNA为模板在反转录酶作用下合成DNA的过程叫做反转录。反转录在病毒致癌过程中起着重要作用；在基因工程中，可用于mRNA为模板合成cDNA的实验中。
引发体：是复制起始时形成的，原核生物DnaB（解螺旋酶）、DnaC、DnaG（引物酶）等蛋白质结合到DNA复制起始区域形成的复合结构，称为引发体。
Klenow片段：是原核生物DNA-polI经特异的蛋白质酶水解后产生的大片段，具有3’→5’核酸外切酶活性和聚合活性，实验室合成DNA及分子生物学研究上，常用Klenow片段代替DNA聚合酶。
1. 试述参与原核生物DNA复制过程所需的物质及其作用
①双链DNA：解开成单链的两条链都作为模板指导DNA的合成；
②dNTP：复制的原料；
③DNA聚合酶：即依赖于DNA的DNA聚合酶，合成子链；原核生物中DNA-polⅢ是真正的复制酶，DNA-polⅠ的作用是切除引物、填补空隙和修复。
④引物：一小段RNA，提供游离的3’-OH。
⑤其他的一些酶和蛋白因子：解链酶，解开DNA双链；DNA拓扑异构酶Ⅰ、Ⅱ，松弛DNA超螺旋，理顺打结的DNA链；引物酶，合成RNA引物；单链DNA结合蛋白（SSB），结合并稳定解开的单链；DNA连接酶，连接随从链中两个相邻的DNA片段。
2. 原核生物复制起始的相关蛋白质有哪些？各有何功能？
蛋白质（基因）通用名功能
DnaA（dnaA）辨认起始点
DnaB（dnaB）解螺旋酶解开DNA双链
DnaC（dnaC）运送和协同DnaB
DnaG（dnaG）引物酶催化RNA引物生成
SSB 单链DNA结合蛋白稳定已解开的单链
拓扑异构酶（gyrA，B）理顺DNA链
3. 端粒酶的分子组成有何特点？有什么功能？
端粒酶是一种由RNA和蛋白质组成的反转录酶，它能在没有DNA模板的情况下，以自身的RNA为模板，通过反转录作用，延伸端粒3’-末端的寡聚脱氧核苷酸片段，催化合成端粒DNA，保证染色体复制的完整性。
4.简述反转录的基本过程，反转录现象的发现在生命科学研究中有何重大研究价值？
过程：（1）以RNA为模板，在反转录酶催化下合成RNA-DNA杂化双链；
（2）由RnaseH水解RNA-DNA杂化双链中的RNA链。合成的DNA称cDNA；
（3）以新合成的cDNA链为模板，由反转录酶催化合成cDNA双链。
意义（1）补充并完善了中心法则；
（2）反转录病毒中有致癌病毒，人类免疫缺陷病毒（HIV）等；其研究关系到严重危害人类健康的某些疾病发病机制、诊断、治疗。
（3）反转录病毒是分子生物学研究的重要工具，广泛应用于真核基因表达，基因转染等重要研究方法上，是一种基因治疗的重要基因载体。
5. 复制和转录过程异同点（2004）
相异相同或相似
复制转录
模板 2 股链均复制模板链转录DNA
原料dNTP NTP核苷三磷酸
配对A-T；G-C A-U；T-A；G-C遵从碱基配对
聚合酶DNA聚合酶RNA聚合酶依赖DNA的聚合酶产物半保留复制mRNA，tRNA，rRNA多核苷链
6.讨论复制保真性的机制
复制的保真性可由以下三种机制保证：①子链DNA链依照母链模板按碱基配对规律生成，保证子代DNA与母链DNA双链在碱基序列上的一致性，从而保留了亲代的全部遗传信息。这是最基本的机制。②碱基选择功能：DNA-polⅢ能依据碱基的化学构型表现不同的亲和力，实现正确的碱基选择，保证了在各种底物都存在下，能选择正确配对的碱基合成子链；③复制中如出现错配，DNA-polⅠ有即时校读功能，切除错配碱基，使正确配对的碱基掺入子链。
7.什么是冈崎片段？合成结束时，冈崎片段是如何连接的？
冈崎片段是随从链上不连续合成的片段，原核生物长度约1000-2000个核苷酸，真核生物较短，约数百个核苷酸，其合成方向也是5’→3’，每个冈崎片段都带有1个RNA引物。
复制终止时冈崎片段的连接需要以下三个步骤：①RNA酶水解引物；②留下的空缺由DNApolI填补；③DNA连接酶连接缺口。
第十一章转录
练习题
名词解释：
转录启动子：位于转录起始5’上游端，由RNA-pol识别并结合的DNA序列。
不对称转录：转录以基因的一条链为模板，另一条链为编码链（不转录）；染色体DNA的各种基因转录并不都在同一条链上，故称为不对称转录。
编码链：转录中与模板链互补的DNA链，因其碱基序列、走行方向与转录产物RNA一致，仅T换为U而已，故名为编码链。
内含子：DNA及hnRNA分子中的能转录而不能编码氨基酸的序列。
外显子：DNA及hnRNA分子中的能转录又能编码氨基酸的序列。
真核转录因子：RNA聚合酶Ⅱ启动转录时，需要一些称为转录因子的蛋白质，才能形成有
活性的转录复合体。所有的RNA聚合酶Ⅱ都需要通用转录因子（general transcription factors），这些通用转录因子有TFⅡA、TFⅡB、TFⅡD、TFⅡE、TFⅡF、TFⅡH，在真核生物进化中高度保守。
mRNA splicing：取出初级转录产物上的内含子，把外显子连接成为成熟的RNA，称为剪接。核酶（ribozyme）：是一类特殊构型的RNA，具有酶的特性，能自我催化分解。
TATA盒：大肠杆菌RNA聚合酶与DNA结合的范围是从转录起始点的上游约70bp至转录起始点下游约30bp处，也就是某基因的启动子的区域是该基因的-70至+30.分析比较了许多种细菌由最常见的RNA聚合酶全酶（具有δ70亚基）识别结合的启动子序列发现：这些启动子在-10和-35区域的短序列相似，这种短序列对δ70亚基和启动子的识别与结合十分重要。-10区域的共有序列（congsensus sequence）是TATAA T，此序列称为pribnow box。
羧基末端结构域（carboxyl-terminal domain,CTD）：RNA聚合酶Ⅱ最大亚基的羧基末端有一段共有序列为Tyr（酪）-Ser-Pro-Thr（苏）-Ser-Pro（脯）-Ser（丝）的重复片段，称为羧基末端结构域。RNA聚合酶Ⅰ和Ⅲ没有CTD。所有真核生物的RNA聚合酶Ⅱ都具有CTD，只是7个氨基酸共有序列的重复程度不同。
问答题：
1.简述原核生物的转录过程
①起始阶段：RNA聚合酶在相关因子协助下，识别并结合于转录起始位点，DNA局部形成转录空泡。
②延长阶段：RNA-pol的核心酶催化为主，使RNA5’→3’延伸。
③终止阶段：在ρ因子作用下或DNA模板转录终止区有特殊序列RNA3’端易形成茎环状及出现polyU而促使RNA合成终止与DNA分离。
2.RNA复制：以RNA为模板合成RNA。反转录病毒以外的RNA病毒在宿主细胞以病毒的单链RNA为模板合成RNA，由RNA依赖的RNA聚合酶RNA- dependent RNA polymerase）催化，常见于病毒。
3.转录产物为5’-ACGUAU-3’，写出与之对应的模板链、编码链（注明其两端）
模板链：5’-ATACGT-3’
编码链：5’-ACGTAT-3’
4. 试比较DNA聚合酶、RNA聚合酶、反转录酶和RNA复制酶在不同核酸生物合成中的作用有哪些异同？
5.试述原核RNA的生物合成主要过程
RNA生物合成包括转录与RNA复制。
原核生物的转录过程包括：
（1）起始阶段：RNA聚合酶在相关因子协助下，识别并结合于转录起始位点，DNA局部形成转录空泡。
（2）延长阶段：RNA聚合酶核心酶催化为主，使RNA5’→3’延伸。
（3）终止阶段：在ρ因子作用下或DNA模板转录终止区有特殊序列RNA3’端易形成茎环状及出现polyU而促使RNA合成终止与DNA分离。
RNA复制是以RNA为模板合成RNA。反转录病毒以外的RNA病毒在宿主细胞以病毒的单链RNA为模板合成RNA，由RNA依赖的RNA聚合酶催化，常见于病毒。
6.RNA转录体系中有哪些主要成分，各有何重要功能？
DNA的完整转录单位-启动子与结构基因（双链DNA中一条链为模板链）；
NTP:合成RNA的原料；
RNA-pol：促进转录的起始与延长；
Ρ因子：促进转录的终止。
7.真核生物RNA转录后如何加工修饰？
mRNA前体：5’端加m7Gppp“帽”；3’端加polyA尾；去掉内含子，拼接外显子；tRNA前体：（1）剪去5’和3’端多余碱基；（2）3’端加-CCA尾；（3）柄环结构的一些碱基经化学修饰后形成稀有碱基，如嘌呤甲基化为甲基嘌呤；某些尿嘧啶还原为二氢尿嘧啶（DHU）；某些腺嘌呤脱去氨基形成次黄嘌呤核苷酸（I）；尿嘧啶核苷变成假尿嘧啶核苷（Ψ）等。（4）中间剪接除去内含子。
rRNA前体：剪切（如45S→5.8S、18S、28S）与蛋白质结合。
8.预计在真核生物RNA转录物中的5’（AAUAAA）序列发生突变可能造成的影响
5’（AAUAAA）为转录终止修饰点，其变异会引起polyA尾及帽子结构产生异常，会导致RNA降解。
第十二章蛋白质的生物合成
思考题
1.AUG为异亮氨酸的遗传密码，在tRNA异亮氨酸，其相应的反密码子
A. UAG；
B. TAG；
C. CAU；
D. GAT；
E. IAG
2.rRNA
A.属于细胞内最小的一种RNA；
B.是蛋白质生物合成的场所；
C.与多种蛋白质形成核蛋白体；
D.不含有稀有碱基
3.tRNA在发挥其功能时的两个重要部位是
A.氨基酸的臂和反密码子环；
B.氨基酸臂和DHU环；
C.Ψ环和反密码子环；
D.氨基酸臂和Ψ环；
4.tRNA中携带氨基酸的部位是
A.3’-CCA-OH末端；
B.5’-p端；
C.DHC环；
D.反密码子环.
5.氨基酰-tRNA合成酶的特点是
A.只对氨基酸的识别有专一性；
B.存在于细胞核内；
C.只对tRNA的识别有专一性；
D.对氨基酸、tRNA的识别有专一性.
6.按照Chargaff规则，下列关于DNA碱基组成的叙述，正确的是
A.A与C的含量相等；
B.A+T=G+C；
C.同一生物体，不同组织的DNA碱基组成不同；
D.不同生物来源的DNA，碱基组成不同.
7.摆动配对指下列碱基之间配对不严格
A.反密码子第一碱基与密码子第三亚基；
B.反密码子第三亚基与密码子第一碱基；
C.反密码子和密码子的第三个亚基；
D.反密码子和密码子的第一个碱基.
8.大肠杆菌的多肽链合成中氨基端的氨基酸残基是
A.丝氨酸；
B.蛋氨酸；
C.N-甲酰蛋氨酸；
D.N-甲酰丝氨酸
9.蛋白质生物合成中氨基酸的活化部位是
A.羟基；
B.烷基；
C.羧基；
D.巯基
10.蛋白质生物合成中多肽链的氨基酸排列顺序取决于
A.相应氨基酰-tRNA合成酶的专一性；
B.相应tRNA的专一性；
C.相应tRNA上的反密码子；
D.相应mRNA中核苷酸的排列顺序.
11.对于氨基酸密码子的描述哪一项是不正确的
A.密码子有种属特异性，所以不同生物合成不同的蛋白质；
B.密码子阅读有方向性，从5’端起始，3’终止；
C.密码子第1，2位碱基与反密码子的第3，2位碱基结合严格按碱基互补原则；
D.一种氨基酸可有一组以上的密码子.
12.对于遗传密码的叙述哪一项是恰当的
A.由tRNA结构中相邻的三个核苷酸组成；
B.由DNA链中相邻的三个核苷酸组成；
C.由mRNA上相邻的三个核苷酸组成；
D.由rRNA中相邻的三个核苷酸组成.
13.翻译起始复合物的组成
A.Dna蛋白+开链DNA；
B.DNA模板+RNA+RNA聚合酶；
C.核糖体+蛋氨酰tRNA+mRNA；
D.翻译起始因子+核糖体.
14.能出现在蛋白质分子中的下列氨基酸，哪一种没有遗传密码
A.色氨酸；
B.蛋氨酸；
C.谷氨酰胺；
D.脯氨酸；
E.羟脯氨酸
15.人体内不同细胞可以合成不同蛋白质是因为
A.各种细胞的基因不同；
B.各种细胞的基因相同，而表达基因不同；
C.各种细胞的蛋白激酶活性不同；
D.各种细胞的蛋白质活性不同.
16.下列关于氨基酸密码的描述，哪一项是不正确的
A.密码有种属特异性，所以不同生物合成不同的蛋白质；
B.密码阅读有方向性，5’端起始3’端终止；
C.一个氨基酸可有一个以上的密码；
D.一组密码只代表一种氨基酸；
E.密码第3位（即3’端）碱基在决定掺入氨基酸的的特异性方面重要性较小.
17.下列关于核蛋白体的叙述，正确的是
A.是遗传密码的携带者；
B.由rRNA和蛋白质构成；
C.由snRNA与hnRNA构成；
D.由DNA与蛋白质构成；
E.由引物、DNA和蛋白质构成.
18.下列关于tRNA的叙述中，不正确的是
A.为RNA分子中最小的；
B.分子中含稀有碱基较多；
C.分子中含有遗传密码子；
D.一种tRNA只能转运一种氨基酸.
19.下列属于终止密码子的是
A.UCA；
B.UCG；
C.UAC；
D.UAA；
E.UGC.
20.遗传密码的兼并性是指
A.蛋氨酸密码可做起始密码；
B.一个密码子可代表多个氨基酸；
C.多个密码子可代表同一氨基酸；
D.密码子与反密码子之间不严格配对；
E.所有生物可使用同一套密码.
21.没有遗传密码的氨基酸
A.鸟氨酸；
B.胱氨酸；
C.胍氨酸；
D.羟脯氨酸.
22.A.肽键；B.磷酸二酯键；C.N-C糖苷键；D.酯键；
（1）氨基酸之间的连接；（2）核苷酸之间的连接；（3）氨基酸与tRNA连接；
（4）碱基与核糖之间
1.C（2000）
2.C
3.A
4.A
5.D
6.D（2007，Chargaff指出不同来源的DNA，碱基组成不同）
7.A
8.C
9.C 10.D 11.A 12.C 13.C 14.E（1994羟脯氨酸是在合成蛋白质后，将组合在蛋白质肽链中的脯氨酸羟化而成）15.B 16.A（1998）17.B（2006）18.C 19.D（2003）20.C（2005）21.ABCD（鸟氨酸和胍氨酸不是参与蛋白质组成的氨基酸，胱氨酸、羟脯氨酸是翻译后生成的氨基酸）22.ABDC
1.分子伴侣可以协助蛋白质形成正确的空间构象。下列分子中，属于分子伴侣的是： A.胰岛素原；B.热休克蛋白；C.组蛋白；D.DNA结合蛋白
2.关于核蛋白体上的移位，下列哪种陈述是正确的？
A.空载tRNA的脱落发生在A位上；
B.肽链rRNA的转位要求EFG和GTP;
C.核蛋白体沿mRNA3’→5’方向相对移动；
D.肽酰-tRNA由A位转向P位.
3.能识别终止密码的是：A. polyA；B.EF-G；C.RF；D.m7GTP
4.细菌蛋白的翻译过程①mRNA，起始因子，核蛋白体亚基的结合；②氨基酸活化；③肽键的形成；④肽酰-tRNA的移位；⑤GTP，延长因子，氨基酰-tRNA结合在一起等，它们出现的顺序是：
A.①⑤②③④；
B. ②①⑤③④；
C. ②①⑤④③；
D. ⑤①②③④.
5.合成蛋白质后才由前体转变而成的氨基酸
A.脯氨酸；
B.羟脯氨酸；
C.丝氨酸；
D.赖氨酸
6.干扰素抑制蛋白质合成是因为
A.活化蛋白激酶，使eIF2磷酸化；
B.抑制肽链延长因子；
C.阻碍氨基酰tRNA与小亚基结合；
D.抑制转肽酶
7.氯霉素抑制原核生物的蛋白质合成，其原因是
A.特异性的抑制肽链延长因子2（EFT2 ）的活性；
B.与核蛋白体的大亚基结合，抑制转肽酶活性，阻断翻译延长过程；
C.活化一种蛋白激酶，从而影响起始因子磷酸化；
D.阻碍氨基酰tRNA与核蛋白体小亚基结合.
8. A.链霉素；B.氯霉素；C.嘌呤霉素；D.白喉霉素
（1）主要抑制哺乳动物蛋白质合成的是（）
（2）对真核及原核生物的蛋白质合成都有抑制作用的是（）
1.B(2007)
2.D(1988)
3.C
4.B
5.B（1998）
6.B（1997）
7.B（1999）A.特异性的抑制肽链延长因子2（EFT2 ）的活性-白喉毒素； B.与核蛋白体的大亚基结合，抑制转肽酶活性，阻断翻译延长过程-氯霉素；C.活化一种蛋白激酶，从而影响起始因子磷酸化-干扰素。干扰素还可间接活化一种核酸内切酶，使mRNA降解；D.阻碍氨基酰tRNA与核蛋白体小亚基结合-四环素类.
8.D；C（2001）
练习题
名词解释
翻译：细胞内以mRNA为模板、按照mRNA分子中由核苷酸组成的密码信息合成蛋白质，由于mRNA中的核苷酸排列顺序与蛋白质中的氨基酸排列顺序是两种不同的分子语言，所以将蛋白质的生物合成称为翻译。
密码子（codon）：在mRNA的开放阅读框架区，以每3个相邻的核苷酸为一组，代表一种氨基酸或其他信息，这种三联体形式的核苷酸序列称为密码子。共有64个密码子，密码子阅读方向是5’→3’。
开放阅读框架（open reading frame，ORF）：从mRNA序列5’的起始密码子AUG到3’端终止密码子之间的核苷酸序列，称为开放阅读框架，通常的ORF包含500个以上的密码子。
简并密码子（synonymous codon）：被同一种氨基酸编码的各密码子称为兼并密码子或同义密码子。
核蛋白体循环（ribosomal cycle）：在肽链合成的延长阶段，经进位、成肽和转位三个步骤而使氨基酸依次进入核蛋白体并聚合成多肽链的过程。这一过程在核蛋白体上连续循环进行，直至终止阶段，称为核蛋白体循环。每经过一次核蛋白体循环，肽链中增加一个氨基酸残基。广义的核蛋白体循环是指翻译的全过程。
多聚核蛋白体（polysome）：由多个核蛋白体结合在一条mRNA链上同时进行多肽链的合成（翻译）所形成的聚合物称为多聚核蛋白体。
分子伴侣（molecular chaperon）：分子伴侣是细胞内一类可识别肽链的非天然构象、促进各功能域和整体蛋白质正确折叠的保守蛋白质。
信号序列（signal sequence）：所有靶向输送的蛋白质结构中存在分选信号，主要是存在于N-末端的可被细胞转运系统识别的特征性氨基酸序列，可引导蛋白质转移到细胞的适当靶部位，这类序列称为靶序列。
问答题
1参与蛋白质生物合成体系的组分有哪些？它们具有什么功能？
（1）mRNA：蛋白质合成的模板；
（2）tRNA：合成蛋白质的氨基酸的运载工具；
（3）核蛋白体：蛋白质合成的场所；
（4）辅助因子，包括①起始因子：参与蛋白质合成起始复合物的形成；②延长因子：延长肽链；③释放因子，终止肽链合成并使之从核蛋白体上释放出来。
2试述分子伴侣在蛋白质折叠中的作用。
蛋白质在细胞质中合成时，未折叠的肽段有许多疏水集团暴露在外，具有分子内部或分子间聚集的倾向。而细胞内存在一类称为分子伴侣的蛋白质，可识别肽链的非天然构象、可逆的与未折叠肽段的疏水部分结合，促进各功能域和整体蛋白质正确折叠。
3遗传密码有哪些特性？
①方向性：阅读方向是5’→3’；
②连续性：密码子间无标点，既无间隔又不重叠；
③简并性：除色氨酸和蛋氨酸只有1个密码子外，其余氨基酸都有2-6个密码子为其编码；
④通用性：不同生物共有1套密码，从病毒、原核生物到人类几乎都使用相同的遗传密码；
⑤摆动性：密码子的第3位碱基与反密码子的第1位碱基的配对不严格遵循碱基互补原则。4试比较原核生物和真核生物翻译的特点。
原核细胞真核细胞
mRNA 一条mRNA编码几种蛋白（多顺反子）转录后很少加工一条mRNA编码一种蛋白（单顺反子）
转录、翻译和mRNA的降解可同时发生转录后进行首尾修饰及剪接
mRNA在核内合成，加工后进入胞
液，再作为模板指导翻译
核蛋白体30S小亚基+50S大亚基←→70S核蛋白体40S小亚基+60S大亚基←→80S核
蛋白体
起始阶段起始氨基酰-tRNA为fMet-tRNA f Met
核蛋白体小亚基先与mRNA结合，再与
fMet-tRNA f Met结合
mRNA中的S-D序列与16SrRNA3’端的
一段序列结合
有三种起始因子（IF）参与起始复合物的
形成起始氨基酰-tRNA为Met-tRNA i Met 核蛋白体小亚基先与Met-tRNA i Met 结合，再与mRNA结合
mRNA中的帽子结构与帽子结合蛋白复合物结合结合
有至少10种起始因子（eIF）参与起始复合物的形成
延长阶段延长因子为EF-Tu、EF-TS和EF-G 延长因子为eIF-1α、eIF-1βγ和
eIF-2
终止阶段释放因子为RF-1、RF-2和RF-3 释放因子为eRF
5氨基酸在蛋白质生物合成过程中是怎样被活化的？
①活化：需Mg2+，由ATP供能，由氨基酰、tRNA合成酶催化，生成氨基酰-AMP-酶复合物。
②转移：继续在氨基酰-tRNA合成酶催化下将氨基酸从氨基酰-AMP-酶复合物上转移到相应的tRNA分子上，形成氨基酰-tRNA。
6试述干扰素抗病毒的作用机制。
①干扰素在某些病毒双链RNA存在时，能诱导特异的蛋白激酶活化，该活化的蛋白激酶使真核细胞的主要起始因子eIF-2磷酸化而失活，从而抑制病毒蛋白质合成；
②干扰素能与双链RNA共同活化特殊的2’-5’A合成酶，催化ATP聚合，生成单核苷酸间以2’-5’磷酸二酯键连接的2’-5’寡聚腺苷酸（2’-5’A），而活化的2’-5’A可活化一种核酸内切酶RNase L，后者可降解病毒mRNA，从而阻断病毒蛋白质合成。
7试述多肽链合成后一级结构修饰的主要内容。
①末端修饰；②水解修饰，包括信号肽的切除；③个别氨基酸残基的共价修饰。
8RNA主要有哪三种？它们在蛋白质生物合成过程中各有什么功能？
RNA主要有mRNA、rRNA和tRNA3种：①mRNA是合成蛋白质多肽链的直接模板，mRNA 开放阅读框架中每相邻的三个核苷酸组成密码子，它们代表氨基酸或肽链合成的起始、终止等信号；②rRNA与多种蛋白质分子构成核蛋白体（包括大亚基和小亚基），是蛋白质合成的场所。核蛋白体复合物中有A位和P位，可相应结合氨基酰-tRNA和肽酰-tRNA，并具有生成肽键的酶活性部位；③tRNA是氨基酸的运载体，tRNA既可通过其反密码子与mRNA序列中的密码子结合，又可借助其氨基酸臂与氨基酸结合，因而能够按mRNA的遗传密码指令将特定的氨基酸运载到核蛋白体上合成多肽链。.
9试述原核生物蛋白质合成的主要步骤。
①氨基酸的活化：游离的氨基酸必须经过活化以获得能量才能参与蛋白质合成，由氨基酰-tRNA合成酶催化，消耗两个高能磷酸键，形成氨基酰-tRNA。
②肽链合成的起始：由起始因子参与，mRNA与30S小亚基、50S大亚基及起始甲酰甲硫氨酰-tRNA（fMet-tRNA f Met）形成70S起始复合物，需要GTP。
③肽链的延长：氨基酰-tRNA结合到核蛋白体的A位，在转肽酶的催化下，核蛋白体P位上起始氨基酰-tRNA的N-甲酰甲硫氨酰基或肽酰-tRNA的肽酰基转移到A位并与A位上氨基酰-tRNA的α-氨基结合形成肽键，然后，核蛋白体沿mRNA序列的5’→3’方向移动一个密
码子距离，A位上延长了一个氨基酸单位的肽酰-tRNA转移到P位，需延长因子EF-T、EF-G 及GTP参与。
④肽链合成的终止：当核蛋白体移至终止密码子UAA、UAG或UGA时，释放因子识别并结合终止密码子，将转肽酶活性转变为酯酶活性，水解新生肽链与结合在P位的tRNA之间的酯键，释放肽链，合成终止。
10试述蛋白质合成过程中如何保证其产物的正确性。
（1）氨基酰-tRNA合成酶一方面对底物氨基酸和tRNA都有高度特异性，另一方面具有校读功能，可将任何错误的氨基酰-tRNA的酯键水解，再催化形成正确产物，保证tRNA携带正确的氨基酸；
（2）携带氨基酸的tRNA对mRNA的识别，mRNA序列上的密码子与tRNA序列上的反密码子的相互识别，保证了遗传信息被准确无误的转译；
（3）起始因子保证了只有起始氨基酰-tRNA能进入核蛋白体P位与起始密码子结合；（4）延长因子EF-Tu在促进氨基酰-tRNA进位时有校读作用，可以正确的氨基酰-tRNA 取代错者，保证了起始氨基酰-tRNA不参与肽链延长。
（5）部分能量消耗用于翻译的保真性。
11试分析为什么阅读密码从5’-端到3’端，而肽链合成是从N端到C端。
从mRNA序列的5’-端起始密码子AUG到3’-端的终止密码子之间的序列称为开放阅读框架，阅读方向是从5’-端到3’端，编码肽链的一级结构。肽链合成时，氨基酸经α-羧基活化为氨基酰-tRNA，延长过程中处于核蛋白体P位的第一个氨基酸的酰基与处于A位的下一个氨基形成肽键，第一个氨基酸的氨基保留，成为新生肽链的N-末端。如此肽酰基再不断和下一个氨基酸的氨基以肽键结合，使肽链向C-端延伸，直到终止。
12 为什么说蛋白质靶向输送的信息存在于其一级结构中？
所有靶向输送的蛋白质的一级结构中都含有特定氨基酸序列，称为信号序列，主要为N-端特异序列，如分泌型蛋白质的信号肽；胞核蛋白质的核定位序列可存在于肽链的不同部位；它们是决定蛋白质靶向输送的重要元件，可引导蛋白质靶向输送到适当部位。因此可以认为，蛋白质的一级结构中既有决定形成天然空间构象的信息，也有决定蛋白质靶向输送到适当部位的信息。
第十三章基因表达调控
练习题
1.插入序列（IS）是
A.全是相同的；
B.具有转位酶基因；
C.每代每个IS转座103；
D.旁侧重复序列
2.对于Alu顺序的叙述中，恰当的是
A.Alu顺序是由RNA聚合酶Ⅱ转录的；
B.所有Alu顺序都是相同的；
C.Alu顺序永远不会存在于结构基因中；
D.Alu顺序是灵长类基因组特有的标记.
3.对于共有序列的叙述不正确的是
A.启动序列中所有的核苷酸排列顺序；
B.TTGACA是共有序列；
C.启动序列中部分的核苷酸排列顺序；
D.CAAT盒是共有序列.
4.基因组是指
A.以转录组学为基础的研究领域；
B.一种生物体具有的所有遗传信息的总和；
C.研究基因的结构、功能及表达产物的学科领域；
D.包括转录组学和蛋白组学等内容的学科领域.
5.某蛋白质有100个氨基酸残基，其基因有两个外显子、外显子之间相隔100bp，其mRNA5’和3’端分别有70个和30个核苷酸的不翻译区段，从该成熟mRNA获得的cDNA大小与哪一项相符
A.500bp；
B.400bp；
C.100bp；
D.300bp
6.染色体端粒的结构是下列哪一类物质形成的复合体
A.RNA和DNA的嵌合体；
B.RNA和蛋白质；
C.DNA和蛋白质；
D.DNA模板和RNA引物的复合体
7.人类基因组包括
A.核基因组和线粒体基因组；
B.核基因组和微粒体基因组；
C.溶原态病毒基因组和核基因组；
D.质粒基因组和核基因组.
8.下列关于“基因表达”概念的叙述，不正确的是
A.基因表达具有组织特异性；
B.基因表达具有阶段特异性；
C.基因表达均经历基因转录和翻译过程；
D.某些基因表达产物是蛋白质分子；
E.有些基因表达水平受环境变化影响
9.下述哪项决定基因表达的时间性和空间性
A.特异基因的启动子（序列）和增强子与调节蛋白的相互作用；
B.DNA聚合酶；
C.管家基因；
D.RNA聚合酶
10.关于基因启动子的叙述，正确的是
A.开始转录生成mRNA的那段DNA序列；
B.编码mRNA翻译起始的那段DNA序列；
C.RNA聚合酶最初结合模板DNA的部位；
D.分解（代谢）物基因激活蛋白结合的DNA部位
11.有些基因在一个生物个体的几乎所有细胞持续表达，这类基因称为
A.可诱导基因；
B.可阻遏基因；
C.操纵基因；
D.启动基因；
E.管家基因
12.A.顺式作用元件；B.反式作用因子；C.操纵子；D.调节蛋白
（1）增强子属于（）；（2）能调控多个操纵子的是（）；
（3）沉默子属于（）
13.操纵子
A.只在真核生物中存在；
B.一定含有结构基因；
C.原核、真核生物中均存在；
D.只在原核生物中存在
14.人类基因组的串联重复序列存在于下列哪些结构中
A.编码区；
B.非编码区；
C.A和B；
D.两者均有
15.下列基因表达具有组织特异性的是
A.磷酸甘油醛脱氢酶；
B.血红蛋白；
C.胰岛素；
D.HMG-CoA裂解酶
16.下述蛋白质基因表达具有组织特异性的是
A.磷酸甘油醛脱氢酶；
B.血红蛋白；
C.胰岛素；
D.丙酮酸脱氢酶
17.转录因子的结构包括
A.转录激活域；
B.DNA结合域；
C.共有序列；
D.结构基因
18.cAMP与CAP结合，CAP介导正性调节发生在
A.有葡萄糖及cAMP较低时；
B.有葡萄糖及cAMP较高时；
C.没有葡萄糖及cAMP较高时；
D.没有葡萄糖及cAMP较低时
19.乳糖操纵子中的I基因编码产物是
A.β-半乳糖苷酶；
B.透酶；
C.乙酰基转移酶；
D.一种阻遏蛋白
20.下列关于TATA盒的叙述，正确的是
A.是与RNA-pol稳定结合的序列；
B.是蛋白质翻译的起始点；
C.是DNA复制的起始点；
D.是与核蛋白体稳定结合的序列；
E.是远离转录起始点，增强转录活性的序列
21.下列哪种乳糖操纵子序列能与RNA聚合酶结合
A. P序列；
B. O序列；
C. CAP结合位点；
D. I基因；
E.Z基因
22.共同参与构成乳糖操纵子的组分
A.三个结构基因；
B.一个操纵序列；
C.一个启动序列；
D.一个调节序列
23.下列选项中，属于顺式作用元件的有
A.启动子；
B.增强子；
C.沉默子；
D.操纵子
24.下列属于基因表达终产物的是
A.蛋白质；
B.mRNA；
C.tRNA；
D.rRNA
25.小分子RNA对翻译的调节机制实际是
A.反义脱氧寡核苷酸的作用；
B.在翻译水平上阻遏基因的表达；
C.互补RNA片段与mRNA特定位点的结合；
D.小分子正义RNA与mRNA特定序列的结合
26.真核基因的结构特点有
A.基因的不连续性；
B.单顺反子；
C.含重复序列；
D.一个启动基因后有几个编码基因
1.B
2.B
3.A
4.B(2007)
5.B
6.C
7.A
8.C（2002）
9.A 10.C 11.E（2003）12.ADA 13.BD 14.CD 15.BCD 16.BC 17.AB 18.C 19.D（2000）20.A（2006）21. A （2006）22.ABCD（2003）23.ABC（2006）24.ACD
25.BC（小分子RNA的调节作用实质是由于一小段互补RNA（反义RNA）通过碱基互补的方式与mRNA特定位点结合，从而在翻译水平上阻遏基因的表达）
26.ABC（2007）
名词解释
基因表达gene expression;
管家基因housekeeping gene；
乳糖操纵子lac operon；
顺式作用元件cis-acting element；
反式作用因子trans-acting factor;
单顺反子monocistron
基因表达：基因转录及翻译的过程，即生成具有生物学功能产物的过程。
管家基因：某些基因产物对生命全过程都是必需的或必不可少的。这类基因在一个生物个体的几乎所有细胞中持续表达，称谓管家基因。
乳糖操纵子：大肠杆菌中与乳糖代谢相关的基因成簇的串连在一起共同组成一个转录单位即乳糖操纵子，包括：Z、Y、A三个结构基因，一个操纵序列O，一个启动序列P及一个调节基因I。
顺式作用元件：指可影响自身基因表达活性的DNA序列。
反式作用因子：真核转录调节因子由它的编码基因表达后，通过与特异的顺式作用元件的识别、结合，反式激活另一基因的转录，故称为反式作用蛋白或反式作用因子。
单顺反子：真核基因的一个编码基因转录只生成一个mRNA分子、经翻译生成一条mRNA 分子、经翻译生成一条多肽链。
问答题
1. 简述基因表达的规律与方式。
基因表达具有严格的规律性，即时间和空间特异性。时间特异性是指基因表达按一定的时间顺序发生，空间特异性是指多细胞生物个体在某一特定生长发育阶段，同一基因在不同的组织器官表达不同。有些基因几乎在所有细胞中持续表达，或变化很小，即基本（组成性）表达。有些基因受到环境变化的诱导和阻遏，即基因的诱导表达和阻遏表达。
2.简述乳糖操纵子的结构及调控原理
乳糖操纵子含Z、Y及A三个结构基因，分别编码β-半乳糖甘酶、透酶和乙酰基转移酶，一个操纵序列O、一个启动序列P及一个调节基因I.I基因具有独立的启动序列（PI），编码一种阻遏蛋白，后者与O序列结合，使操纵子受阻遏而处于关闭状态。在启动序列P 上游还有一个分解（代谢）物基因结合蛋白（CAP）结合位点。在没有乳糖存在时，lac操纵子处于阻遏状态。当有乳糖存在时，乳糖经β-半乳糖甘酶催化转变为半乳糖，结合阻遏蛋白，使蛋白质构象变化，lac操纵子即可被诱导。当没有葡萄糖及cAMP浓度较高时，cAMP 与CAP结合，CAP结合在lac启动序列附近的CAP位点，可刺激RNA转录活性；当有葡萄糖存在时，cAMP浓度降低，cAMP与CAP结合受阻，因此lac操纵子表达下降。
3.转录激活调节的基本要素是什么？
特异DNA序列决定基因的转录活性，在原核生物中包括：启动序列（promoter）、操纵序列（operator）以及其他调节序列；真核基因中包括：启动子、增强子和沉默子等顺式作用元件。转录调节蛋白可以增强或抑制转录活性，原核生物基因转录调节蛋白分为三类：特异因子、阻遏蛋白和激活蛋白；真核基因转录调节蛋白又称转录调节因子或转录因子，可分为基本转录因子和特异转录因子。DNA元件与调节蛋白对转录激活的调节最终是由RNA聚合酶体现。
4.真核基因表达调控的特点是什么？
真核基因转录有三种RNA聚合酶，多种转录因子参与；活性染色体发生结构变化：核酸酶敏感，碱基修饰变化，组蛋白乙酰化，拓扑结构变化；以正性调节为主；转录和翻译分开进行；在转录及翻译后的修饰、加工及运输等环节均可进行调控。
5.简述真核基因启动子、增强子和沉默子的概念、结构与功能。
真核基因启动子指的是RNA聚合酶结合位点周围的一组转录控制组件，包括TATA盒，它的共有序列是TATAAAA。位于转录起始点上游-25— -30bp，控制和转录起始的准确性及频率。TATA盒是基本转录因子TFⅡD结合位点。GC盒（GGGCGG）和CAAT盒（GCCAAT，位于转录起始点上游-30—-110bp区域。）典型的启动子则由TATA盒和（或）GC盒组成，具有一个转录起始点及较高的转录活性。
增强子是指远离转录起始点（1-30kb）、决定基因的时间、空间特异性表达、增强启动子转录活性的DNA序列，其发挥作用的方式通常与方向、距离无关。增强子和启动子常交错
覆盖或连续。从功能上讲，没有增强子存在，启动子通常不能表现活性；没有启动子时，增强子也无法发挥作用。
沉默子是指某些基因含有的负性调节元件，当其结合特异蛋白因子时，对基因转录起阻遏作用。
6.RNAi是在什么水平上对基因表达进行调控的？
细胞内存在一类双链RNA（doble-stranded RNA,dsRNA），通过一定酶切机制，转变为双链-22个核苷酸的小（分子）干扰RNA（siRNA），参与RNA诱导的沉默复合体（RNA-induced silencing complex，RISC）组成。RISC是一种多成分核酸酶，可使特异mRNA降解，阻断翻译过程。因此RNAi实际上是通过降解特异的mRNA，在转录后/翻译水平发生的一种基因表达调节机制。
第十四章基因重组与基因工程
1.不能用作克隆载体的DNA是
A.噬菌体DNA；
B.质粒DNA；
C.细菌基因组DNA；
D.腺病毒DNA
2.基因工程中，将目的基因与载体DNA拼接的酶是
A.DNA聚合酶Ⅰ；
B.DNA聚合酶Ⅲ；
C.限制性内切核酸酶；
D.DNA连接酶；
E.反转录酶
3.能识别DNA特异序列并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类酶是
A.核酸外切酶；
B.核酸内切酶；
C.限制性核酸外切酶；
D.限制性核酸内切酶；
E.核酸末端转移酶
4.确切的说，cDNA文库包含
A.一种物种的全部mRNA信息；
B.一种物种的全部遗传信息；
C.一种生物组织或细胞的全部遗传信息；
D.一种生物体组织或细胞的全部mRNA信息.
5.下列DNA中，一般不用做克隆载体的是
A.质粒DNA；
B.大肠杆菌DNA；
C.病毒DNA；
D.噬菌体DNA；
E.酵母人工染色体
6.下列关于限制性内切酶的叙述哪一项是不正确的？
A.它能识别DNA特定的碱基顺序，并在特定的位点切断DNA；
B.切割点附近的碱基顺序一般呈回文结构；
C.它能专一降解经甲基化修饰的DNA；
D.是重组DNA的重要工具酶；
E.主要从细菌中获得
7.下述双链DNA序列（仅列出其中一条链序列）中，不属于完全回文结构的是
A.TGAATTCA；
B.AGAATTCT；
C.GGAATTCC；
D.CGTTAAGC.
8.已知序列的情况下，获得目的DNA最常用的方法是
A.筛选cDNA文库；
B.化学合成法；
C.DNA合成仪合成；
D.聚合酶链反应.
9. A.RNA聚合酶；B.末端转移酶；C.碱性磷酸酶；D.反转录酶
（1）能在DNA3’-羟基末端进行同聚物加尾的是
（2）能切除DNA末端磷酸基的是
（3）合成cDNA用的是
10.A.转化；B.转导；C.转座；D.转染
（1）插入序列和转座子介导的基因位移或重排
（2）将表达载体导入真核细胞的过程
（3）通过自动获取或人为供给外源DNA，使细胞获得新的表型
11.进行基因工程实验时，常用的技术有
A.分子杂交技术；
B.DNA探针技术；
C.质粒重组技术；
D.基因调控技术
12.可用于基因工程载体的DNA分子有
A.染色体DNA；
B.噬菌体DNA；
C.细菌DNA；
D.病毒DNA
13.下列关于质粒载体的叙述，正确的是
A.具有自我复制能力；
B.有些质粒常携带抗药性基因；
C.为小分子环状DNA；
D.含有克隆位点
14.重组DNA技术中常用的工具酶
A.限制性核酸内切酶；
B.DNA连接酶；
C.DNA解链酶；
D.转转录酶.
15.以同聚物加尾连接法连接目的基因与载体需要
A.限制性核酸内切酶；
B.DNA连接酶；
C.DNA拓扑异构酶；
D.末端核苷酸转移酶
1.C
2.D（2002）
3.D（2004）
4.D
5.B（2006）
6.C（1993）
7.D
8.D
9.B；C；D 10.C；D;A 11.ABC 12.BD 13.ABCD(2003) 14.ABD（2001）15.BD
名词解释
基因工程：在体外，用酶学方法将各种来源的DNA与载体DNA连接成为重组DNA，继而通过转化和筛选得到含有目的基因的宿主细胞，最后进行扩增得到大量相同重组DNA分子的过程称为基因工程，又称基因克隆、DNA克隆和重组DNA等。
cDNA文库：以mRNA为模板，利用反转录酶合成与mRNA互补的DNA，即cDNA，再复制成双链的cDNA片段，与适当载体连接后转入受体菌。不同的细菌包含了不同的mRNA 为模板的cDNA分子或片段，故生长的全部细菌所携带的各种cDNA分子或片段就代表了整个组织或细胞表达的各种mRNA信息，这就是cDNA文库。
基因组DNA文库：利用限制性核酸内切酶将染色体DNA切割成许多一定基因水平的片段，其中即含有人们感兴趣的基因片段。将这些片段分子与适当的克隆载体拼接成重组的DNA 分子，继而转入受体菌，使每个细菌内都携带一种重组的DNA分子。不同细菌所包含的重组DNA分子可能为不同的染色体DNA片段，这样全部的转化细菌所携带的各种染色体片段就代表了染色体的整个基因组。这些存在于转化细菌内、由克隆载体所携带的所有基因组DNA片段的集合称为基因组DNA文库。基因组DNA文库涵盖了基因组的全部基因信息。粘性末端：双链DNA被限制性内切酶切割后，形成的两条链错开几个碱基，而不是平齐的末端。
回文结构：大部分限制性核酸内切酶属于Ⅱ类酶，它们识别DNA位点的核苷酸序列呈二元旋转对称，这种特殊的结构顺序通常被称为回文结构。
目的基因：应用重组DNA技术为分离、获得某一感兴趣的基因或DNA序列，或者为获得感兴趣基因的表达产物-蛋白质。这些感兴趣的基因或DNA序列就是目的基因，又称目的DNA。有两种类型的目的DNA，即cDNA和基因组DNA。
restriction endonuclease：限制性核酸内切酶，为识别DNA的特异序列，并能在识别位点或其周围切割双链DNA的一类核酸内切酶。限制性核酸内切酶存在于细菌体内，与相伴存在的甲基化酶共同构成细菌的限制-修饰体系，能够限制外源DNA，保护自身DNA，对细菌遗传性状的稳定遗传有着重要意义。分为三类，重组DNA技术中常用的限制性核酸内切酶为Ⅱ类酶。
vector载体：即基因载体，或克隆载体，是在基因工程中为携带感兴趣的外源DNA，实现外源DNA的无性繁殖或者表达有意义的蛋白质而采用的一些DNA分子，具有自我复制和表达的功能。其中，为使插入的外源DNA序列可以转录、进而翻译成多肽链而特意设计的克隆载体又称为表达载体。克隆载体有质粒DNA、噬菌体DNA和病毒DNA，它们经适当改造后仍具有自我复制的能力，或兼有表达外源基因的能力;
plasmid 质粒：存在于细菌染色体外的小型环状双链DNA分子。分子本身有复制功能的遗传结构，能在宿主细胞内独立自主的进行复制，并在细胞分裂时恒定的传给子代细胞。质粒带有某些遗传信息，因此会赋予宿主细胞一些遗传性状。因质粒DNA有自我复制功能及携带遗传信息等特性，可作为重组DNA操作的载体。
Yac 载体酵母人工染色体，用于大片段的DNA克隆。
cosmid（柯斯质粒/粘粒）；为COS序列与质粒载体的结合产物，可以用作克隆大片段基因组DNA的一种载体。如pJB8.
COS序列：γ噬菌体为线状的双链DNA病毒，野生型的γ噬菌体基因组两端各有12个核苷酸的5’突出，碱基互补，是极有效的粘性末端，称为COS序列。
同源重组：发生在同源序列间的重组，又称基本重组。其发生依赖于两个分子之间序列的相同性或相似性。如果通过转化或转导获得的外源DNA与宿主DNA同源，那么此外源DNA 就可以通过同源重组方式整合进宿主染色体。
转化：受体细胞被导入外源DNA并使其生物性状发生改变的过程。
转染：指真核细胞主动摄取或被动导入外源DNA片段而获得新的表型的过程。
转化子：被导入了载体的受体细胞。
重组子：导入了重组载体分子的受体细胞。
转座：在基因组内有些基因可以从一个位置移动到另一位置。这些可以移动的DNA序列包括插入序列和转座子。由插入序列和转座子介导的基因移位或重排现象即为转座。
感受态细胞：经低温CaCl2处理后，容易导入外源DNA分子的受体细胞。；
蓝白斑实验：肠杆菌的LacZ基因常被用作遗传标记，此基因编码的半乳糖苷酶能够分解X-gal，使其从无色变成蓝色。在含有X-gal的培养基中，在乳糖操纵子的诱导物IPTG的作用下，细菌合成半乳糖苷酶，分解X-gal，此菌落即为蓝色，若LacZ基因被外源DNA的片段插入而破坏，则不能制造半乳糖苷酶，菌落即为白斑。
问答题：
1.什么是基因克隆？简述基因克隆的基本过程。
为研究基因的结构和功能，从构建的基因组DNA文库或cDNA文库中分离扩增某一感兴趣的基因（目的基因）就是基因克隆或分子克隆，又称重组DNA技术。例：以质粒为载体进行DNA克隆的过程，包括：目的基因的获取，基因载体的选择与构建，目的基因与载体的拼接，重组DNA分子导入受体细胞，筛选并无性繁殖含有重组分子的受体细胞。
2.什么是目的基因？其主要的来源或途径是什么？
应用重组DNA技术为分离、获得某一感兴趣的基因或DNA序列，或者为获得感兴趣基因的表达产物-蛋白质。这些感兴趣的基因或DNA序列就是目的基因，又称目的DNA。有两种类型的目的DNA，即cDNA和基因组DNA。
3.试述获得目的基因的方法。
①限制性内切酶法；
②cDNA合成法；
③基因人工合成法；
④PCR法以特异的引物扩增目的基因。
4.什么是限制性核酸内切酶？大多数限制性核酸内切酶识别DNA序列的结构特点如何？
限制性核酸内切酶，为识别DNA的特异序列，并能在识别位点或其周围切割双链DNA 的一类核酸内切酶。限制性核酸内切酶存在于细菌体内，与相伴存在的甲基化酶共同构成细菌的限制-修饰体系，能够限制外源DNA，保护自身DNA，对细菌遗传性状的稳定遗传有着重要意义。分为三类，重组DNA技术中常用的限制性核酸内切酶为Ⅱ类酶。
大多数限制性核酸内切酶识别DNA位点的核苷酸序列呈回文结构。
5. 载体的种类和特性是什么？
①质粒：能自我复制，可含有抗性基因，β-半乳糖基因。
②γ噬菌体：线性双链，两端有粘性末端，裂解生长，可包装成颗粒释放出，与溶源生长有关的较大区域可以被外源DNA取代。
③柯斯质粒（cosmid或粘粒）：COS序列与质粒载体结合的产物，可以作为克隆大片段基因组DNA的一种载体。
④M13mp系列：一种丝状双链的噬菌体，侵犯宿主菌后借助宿主的酶系统把单链DNA复制成双链DNA，此双链DNA称为复制型。
⑤动物病毒：可以被导入真核细胞，混合型病毒既可以转染原核细胞，又可以转染真核细胞。
⑥酵母人工染色体：具有真核生物染色体特点，可以克隆很大的外源片段和表达真核生物的基因。
6.什么是基因载体？哪些DNA可作为基因的载体？
载体即基因载体，或克隆载体，是在基因工程中为携带感兴趣的外源DNA，实现外源DNA的无性繁殖或者表达有意义的蛋白质而采用的一些DNA分子，具有自我复制和表达的功能。其中，为使插入的外源DNA序列可以转录、进而翻译成多肽链而特意设计的克隆载体又称为表达载体。克隆载体有质粒DNA、噬菌体DNA和病毒DNA，它们经适当改造后仍具有自我复制的能力，或兼有表达外源基因的能力;
7. 什么是质粒？为什么质粒可作为基因载体？
质粒是存在于细菌染色体外的小型环状双链DNA分子。分子本身有复制功能的遗传结构，能在宿主细胞内独立自主的进行复制，并在细胞分裂时恒定的传给子代细胞。质粒带有某些遗传信息，因此会赋予宿主细胞一些遗传性状。因质粒DNA有自我复制功能及携带遗传信息、具有表达功能、选择标志基因等特性，可作为重组DNA操作的载体。
8. 简述α互补的原理。
许多载体（如PUC系列）带有一段大肠杆菌的DNA片段，为β-半乳糖苷酶（LacZ）的调控序列和N端16个氨基酸的编码序列（编码LacZ的α肽）。某些特定的宿主菌可表达LacZ的C端（即ω肽）。单独存在的α肽和ω肽都没有活性，但当它们同时在宿主细胞表达时，可互补产生LacZ的活性，将底物X-gal水解，形成蓝色化合物，这种现象称为α互补。
9. 试述E.coli 和真核表达体系的优缺点。
原核表达体系如E.coli为当前采用最多的原核表达体系，优点是培养方法简单、迅速、经济而又适合大规模的生产工艺；不足之处为只能表达克隆的cDNA，不适合表达真核生物的基因组DNA（即含有内含子的DNA）；表达的真核蛋白质不能形成适当的折叠或进行糖基化修饰；表达的蛋白质经常形成不溶性的包涵体，欲使其具有活性还需要进行复杂的复行处理；故很难用E.coli表达体系表达大量的可溶性蛋白。真核表达体系如酵母、昆虫及哺乳动物细胞的表达体系，特别是哺乳类动物细胞的表达体系，不仅可以表达克隆的cDNA，还可以表达真核基因组DNA；哺乳类细胞表达的蛋白质通常已被适当修饰，因此表达产物已有功能。操作技术较难、耗时较多、不经济是哺乳类动物表达体系的缺点。
10.简述基因位点特异的重组和同源重组的差别。
细菌中，可以通过接合、转化、转导和细胞融合四种方式，在不同DNA分子间发生共价连接，也即基因转移；并通过基因重组以适应随时改变的环境，其中，如外来基因与内在基因部分同源，此基因重组即为同源重组；由整合酶催化，在两个DNA序列的特异位点间发生的整合，称为位点特异性重组。
位点特异性重组需要整合酶、发生在两个DNA序列的特异位点之间；同源重组不需要特异DNA序列，而是依赖两个分子之间序列的相同或类似性，但也需要特异的酶催化。
第十五章细胞信息转导
?思考题
1.cAMP能别构调节下列哪种酶？
A.磷脂酶A；
B.蛋白激酶A；
C.蛋白激酶C；
D.蛋白激酶G；
E.酪氨酸蛋白激酶
2.G蛋白是指
A.蛋白激酶A；
B.鸟氨酸环化酶；
C.蛋白激酶G；
D.Grb2结合蛋白；
E.鸟氨酸结合蛋白
3.PKA磷酸化的底物是
A.蛋白质或酶分子中的谷氨酸/天冬氨酸残基；
B.蛋白质或酶分子中的酪氨酸残基；
C.蛋白质或酶分子中的丝氨酸/苏氨酸残基；
D.蛋白质分子中的精氨酸/组氨酸残基
4.表皮生长因子的信号转导通路与下列哪种物质有关
A.受体型酪氨酸蛋白激酶；
B.G蛋白偶联受体；
C.腺苷酸环化酶；
D.cGMP.
5.不能作为细胞内信号转导第二信使的物质有
A.UMP；
B.cGMP；
C.IP3；
D.Ca2+；
6.霍乱毒素的作用机理是
A.Gsα的ADP核糖化；
B. Giα的ADP核糖化；
C.Gq的ADP核糖化；
D.Gβγ的ADP 核糖化；
7.将下述分子按信号传递通路中的先后顺序进行排列，居第三位的是
A.Raf；
B.Ras；
C.PEK（MAPKK）；
D.受体
8.将下述分子按信号传递通路中的先后顺序进行排列，居第四位的是
A.IP3；
B.磷脂酶C；
C.G蛋白；
D.受体.
9.可磷酸化蛋白质上酪氨酸残基的蛋白激酶是
A.蛋白激酶C；
B.依赖于cAMP的蛋白激酶；
C.依赖于cGMP的蛋白激酶；
D.Src蛋白激酶；
E.磷酸化酶b激酶
10.能使GTP结合蛋白中的Gs亚基丧失GTP酶活性的是
A.霍乱毒素；
B.百日咳毒素；
C.白喉毒素；
D.抗霉素A；
E.鱼藤酮.
11.通过胞内受体发挥作用的激素是
A.肾上腺素；
B.甲状腺激素；
C.胰高血糖素；
D.胰岛素；
E.促肾上腺皮质激素.
12.下列哪种酶激活后会直接引起cAMP浓度降低
A.蛋白激酶A；
B.蛋白激酶C；
C.磷酸二酯酶；
D.磷脂酶C；
E.蛋白激酶G.
13.下列因素中，与Ras1的是
A.GTP；
B.GRB2；C鸟苷酸交换因子；D.鸟苷酸环化酶
14.直接影响细胞内cAMP含量的酶是
A.磷脂酶；
B.蛋白激酶A；
C.腺苷酸环化酶；
D.蛋白激酶C；
E.酪氨酸蛋白激酶.
15.A.cAMP；B.cGMP；C.甘油一酯；D.甘油二酯.
（1）能促进蛋白激酶C活性的第二信使是（2）哪项不是细胞内传递信息的第二信使16.A.细胞膜受体；B.胞内受体；C.两者都是；D.二者都不是
（1）肾上腺皮质激素是与细胞的何类受体相结合（2）胰高血糖素是与肝细胞的何类受体相结合
17.能与GTP/GDP结合的蛋白质
A.Ras蛋白；
B.Raf蛋白；
C.G蛋白；
D.Myc蛋白
18.磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C可使磷脂酰肌醇4，5-二磷酸水解产生
A.cAMP；
B.cGMP；
C.IP3；
D.DAG
19.能使蛋白质中酪氨酸残基磷酸化的蛋白激酶是
A.PTK；
B.MAPK；
C.JAK;
D.Ca2+-CaM激酶
20.膜受体酪氨酸蛋白激酶的信息传递途经主要经
A.PKA；
B.Ras；
C.PLC-PKC；
D.PKG
1.A（2005）；
2.E（2002）；
3.C；
4.A；
5.A；
6.A；
7.A；
8.A；
9.D（1997）Src蛋白激酶可特
异的催化蛋白质上酪氨酸残基磷酸化；10.A（1997）；11.B（2003）通过胞内受体调节的激素有糖皮质激素、盐皮质激素、雄激素、孕激素、雌激素、1，25-（OH）2D3和甲状腺激素等。12.C（2006）；13.D（2007）；14.C（2004）；15.DC（1991）；16.BA；17.AC；18.CD；
19.AC；20.BC
?名词解释
受体：位于细胞膜上或细胞内能特异识别配体并与之结合，进而引起生物学效应的特殊蛋白质，个别是糖脂。膜受体绝大多数是跨膜糖蛋白，其胞外部分负责信号的传导；胞内受体（包括胞浆受体和核受体）为DNA结合蛋白。
SH2结构域：与酪氨酸蛋白激酶src分子中一个结构域结构相类似的一种功能结构域，能识别和结合蛋白分子中磷酸化的酪氨酸及其相邻的3-6个氨基酸残基所构成的特殊模体，即SH2结合位点。具有SH2结合位点的蛋白质可以被具有SH2结构域的蛋白质识别并结合。G蛋白偶联受体：在结构上均为单体蛋白，有7个跨膜区段，故又名跨膜受体。胞外结构负责结合外源信号，胞内信号与异源三聚体G蛋白相结合而存在。基本的信号转导方式是通过不同的G蛋白影响腺苷酸环化酶、磷脂酶C等效应分子活性，从而改变细胞内第二信使浓度，实现跨膜信息传递。
G蛋白：即鸟苷酸结合蛋白。结合有GDP的G蛋白是非活性形式，而结合有GTP的G蛋白是活性形式。G蛋白一般固有GTP酶活性，可以水解结合的GTP，使分子恢复非活性形式。异源三聚体G蛋白就是一类非常重要的转导七跨膜受体信号的G蛋白。
小G蛋白：即低分子量G蛋白。第一个被发现的分子是Ras，故又称Ras超家族。低分子量G蛋白具有GTP/GDP转换、GTP酶活性等G蛋白的共同特征，是重要的细胞内信号转导分子。
信号转导通路：细胞外信号经由受体在细胞内引起的有序分子变化，信号转导通路由各种信号转导分子相互作用而形成。各种信号转导通路不是孤立存在于细胞中，而是具有广泛的交叉联系。信号转导通路的形成是动态过程，将随着信号的种类和强度而不断变化。
第二信使指激素等细胞外化学信号与靶细胞受体结合后，细胞内迅速发生浓度或分布改变的一大类小分子化合物，如cAMP、cGMP、Ca2+、IP3等。它们作用于蛋白激酶等靶分子，改变其活性，进而改变细胞功能。上述变化实现了对细胞外信号的跨膜转换和传递，因而这些分子被称为第二信使。
蛋白质相互作用结构域：指存在于蛋白质中的一些特殊结构域，如SH2、SH3等。它们可以识别其他蛋白中的一些特殊模体，与之结合并影响其活性、稳定性或亚细胞分布等。现已发现几十种不同的蛋白质相互作用结构域。
衔接蛋白：又名接头蛋白，介导蛋白质信号转导分子之间或蛋白质信号转导分子与脂类分子间相互作用，具有特殊的结构域和结合位点，通过变构效应调节下游分子活性。
钙调蛋白：是一种钙结合蛋白。细胞质中Ca2+浓度低时，钙调蛋白不易结合Ca2+，随着细胞质中Ca2+浓度增高，钙调蛋白可以结合不同数量的Ca2+，形成不同构象的Ca2+/钙调蛋白复合物。钙调蛋白本身无活性，形成Ca2+/钙调蛋白复合物后则具有调节功能。
蛋白激酶：是催化A TP的γ-磷酸基转移到靶蛋白的特定氨基酸残基上的一类酶。业已发现的蛋白激酶主要有蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶和蛋白酪氨酸激酶。蛋白激酶活性受各种第二信使或蛋白分子调节。
?问答题
1.细胞如何对外源信号产生应答反应？
细胞经由特异性受体接受细胞外信号，细胞内众多分子参与信号转导。主要的细胞内生物化学变化是小分子第二信使浓度和分布变化和蛋白质构象变化。这些变化控制着细胞的代
谢变化、基因转录方式、基因复制及细胞分裂速度等多种行为。
2.列举在G蛋白偶联受体介导的信号转导通路上可能产生信号放大作用的步骤。
受体活化G蛋白、G蛋白活化AC和PLC等效应分子、效应分子催化第二信使的生成、第二信使激活靶蛋白等步骤均有放大效应。
3.细胞膜受体可以分为哪几类？各自的结构和信号转导机制是什么？
细胞膜受体可以分为三大类，离子通道受体、G蛋白偶联受体又名七跨膜受体和酶活性相关受体。与离子通道受体结合的主要是神经递质，介导离子通道的打开和关闭，改变膜通透性，能迅速准确的传递神经冲动，影响G蛋白的胞内段与G蛋白结合存在，通过G蛋白的活化影响腺苷酸环化酶或磷脂酶C等效应分子活性，改变细胞内第二信使浓度，以实现跨膜信息传递；酶活性相关受体均属单跨膜受体，有的自身固有酶活性，有的直接与酶结合，它们的信号转导依赖于酶活性的变化和蛋白质相互作用。
4.列举EGFR介导的EGFR-Ras-MAPK信号通路的主要构成和作用方式。
EGF结合于受体EGFR、EGFR发生二聚体化、受体的激酶被活化并发生酪氨酸的磷酸化、募集衔接分子Grb-2、募集低分子量G蛋白调节分子SOS、SOS活化低分子量G蛋白Ras、RAs活化Raf（MAPKKK）启动MAPK级联活化、MAPK进入细胞核使特定转录因子磷酸化、基因表达改变。
5.列举影响细胞对外源信号应答的因素。
细胞对相应信号的受体数目、细胞内信号转导分子的种类和含量、效应分子的种类和含量决定细胞对外源信号的反应。不同细胞对同样的信号将有不同的反应，同一种细胞在不同时间和不同状态下也将有不同反应。
6.什么是细胞间信息物质？包括哪几类，有什么特点？
细胞间信息物质主要是指细胞分泌的调节靶细胞生命活动的化学物质。根据作用特点分为四类：一是局部化学物质，又名旁分泌信号，不进入血循环，通过扩散作用到达附近的靶细胞发挥作用；二是神经递质又名突触分泌信号，由神经元突触前膜囊泡释放，作用的距离和时间极短；三是内分泌信号，由特殊分化的内分泌细胞释放，通过血循环到达靶细胞，大多数对靶细胞作用时间较长，除细胞分泌释放的化学信号外，相邻细胞表面分子也可以作为细胞间信息物质影响细胞的功能。
7.导致疾病发生信号转导通路异常的原因有哪些？
信号转导分子的基因突变导致其蛋白结构变化；信号转导分子基因表达调控异常；外源物质，如细菌毒素等直接修饰信号转导分子，使其丧失部分或全部功能。
8.细胞信号转导通路复杂性体现在哪些方面？
不严格遵从逐级的信号传递顺序，信号分子可能越级传递信号；相同信号分子可以通过不同途径转导信号；不同信号转导通路可以介导相同的生物学效应；不同信号转导途径形成网络，交互作用，彼此影响。
9.受体作用有哪些特点？
高度专一性、高度亲和力、可饱和性、可逆性、特定的作用模式。
第十六章血液的生物化学
思考题
1.电泳分离血浆清蛋白（pI=4.9）和球蛋白（pI=6.6）时，为达到分离效果最好应选择电泳缓冲液的pH值是
A.pH6.6；
B.pH7.6；
C.pH5.9；
D.pH4.9
2.将血清蛋白质置于pH8.6缓冲液中进行醋酸纤维薄膜电泳时，可从正极到负极出现下列5条区带，其中排列顺序恰当的是
A.清蛋白，α1，α2，β，γ-球蛋白；
B.α1，α2，β，γ-球蛋白；清蛋白；
C.清蛋白，β，α2，α1，γ-球蛋白；
D.β，α1，α2，γ-球蛋白，清蛋白；
3.通常血清中酶活性升高的主要原因是
A.体内代谢降低使酶的降解减少；
B.细胞受损使细胞内酶释放入血；
C.细胞内外某些酶被激活；
D.酶由尿中排出减少；
E.在某些器官中制造增加
4.血清与血浆的区别在于血清内无
A.维生素；
B.糖类；
C.代谢产物；
D.纤维蛋白原.
5.正常人血清清蛋白/球蛋白之比值为
A.1.0-1.5；
B.0.5-1.5；
C.1.5-2.5；
D.3.0-3.5；
6.成熟红细胞内由磷酸戊糖途径生成的NADPH的主要作用是
A.维持GSH的正常水平；
B.促进脂肪酸的合成；
C.使高铁Hb（MHb）还原；
D.提供细胞所需能量
7.成熟红细胞中能量主要来源于
A.糖的有氧氧化；
B.糖酵解；
C.糖异生作用；
D.脂肪酸氧化；
E.氨基酸分解代谢
8.成熟红细胞中只保存两条对其生存和功能发挥重要作用的代谢途径，其一是糖无氧酵解，其二是
A.DNA合成；
B.RNA合成；
C.蛋白质合成；
D.三羧酸循环；
E.磷酸戊糖途径
9.稳定血红蛋白结构，调节血红蛋白带氧功能的是
A.1，3-二磷酸甘油酸；
B.2，3-二磷酸甘油酸；
C.磷酸二羟丙酮；
D.3-磷酸甘油酸
10.下列关于2，3-二磷酸甘油酸（2，3-BPG）的叙述不正确的是
A.其在红细胞中含量高；
B.是由1，3-二磷酸甘油酸转变而来；
C.2，3-BPG经水解，脱去磷酸后生成3-磷酸甘油酸；
D.2，3-BPG是一种高能磷酸化合物；
E.它能降低Hb对氧的亲和力；
11.影响红细胞成熟的因素有
A.叶酸；
B.维生素B2；
C.维生素B12；
D.泛酸.
12.ALA合酶的辅酶
A.VitB2；；
B. VitB12；
C. VitB6；
D. VitPP；
13.合成血红素的部位在
A.胞液和微粒体；
B.胞液和线粒体；
C.线粒体和微粒体；
D.胞液和内质网
14.血红素合成的原料为
A.苏氨酸、甘氨酸、天冬氨酸；
B.甘氨酸、琥珀酰CoA、Fe2+；
C.甘氨酸、辅酶A、Fe2+；
D.甘氨酸、天冬氨酸、Fe2+.
15.铅中毒导致
A.ALA增加；
B.血红素增加；
C.胆色素原增加；
D.尿卟啉增加
16.琥珀酰CoA的代谢去路是
A.氧化成CO2和H2O；
B.转变成亚油酸；
C.参与酮体氧化；
D.合成血红素.
17.A乙酰CoA；B.CO2及H2O；C.胆汁酸；D.铁卟啉；E.胆色素.
（1）体内胆固醇代谢的终产物是（2）体内血红素代谢的终产物是
18.下列不含血红素的物质为
A.过氧化氢酶；
B.过氧化物酶；
C.细胞色素；
D.铁硫蛋白；
E.肌红蛋白.
1.C；
2.A；
3.B（1997）；
4.D；
5.C；
6.A；
7.B（1999）；
8.E（1998）；
9.B；10.D（2000）；
11.AC（1989）；12.C；13.B；14.B；15.A；16.AC；17.CE（1994）；18.D（1989）；
名词解释
急性时相蛋白质：在急性炎症或某种组织损伤时某些血浆蛋白的水平会增高，称其为急性时
一、选择题 1、蛋白质一级结构的主要化学键就是( E ) A、氢键 B、疏水键 C、盐键 D、二硫键 E、肽键 2、蛋白质变性后可出现下列哪种变化( D ) A、一级结构发生改变 B、构型发生改变 C、分子量变小 D、构象发生改变 E、溶解度变大 3、下列没有高能键的化合物就是( B ) A、磷酸肌酸 B、谷氨酰胺 C、ADP D、1,3一二磷酸甘油酸 E、磷酸烯醇式丙酮酸 4、嘌呤核苷酸从头合成中,首先合成的就是( A ) A、IMP B、AMP C、GMP D、XMP E、ATP 6、体内氨基酸脱氨基最主要的方式就是( B ) A、氧化脱氨基作用 B、联合脱氨基作用 C、转氨基作用 D、非氧化脱氨基作用 E、脱水脱氨基作用 7、关于三羧酸循环,下列的叙述哪条不正确( D ) A、产生NADH与FADH2 B、有GTP生成 C、氧化乙酰COA D、提供草酰乙酸净合成 E、在无氧条件下不能运转 8、胆固醇生物合成的限速酶就是( C ) A、HMG COA合成酶 B、HMG COA裂解酶 C、HMG COA还原酶 D、乙酰乙酰COA脱氢酶 E、硫激酶 9、下列何种酶就是酵解过程中的限速酶( D ) A、醛缩酶 B、烯醇化酶 C、乳酸脱氢酶 D、磷酸果糖激酶 E、3一磷酸甘油脱氢酶
10、DNA二级结构模型就是( B ) A、α一螺旋 B、走向相反的右手双螺旋 C、三股螺旋 D、走向相反的左手双螺旋 E、走向相同的右手双螺旋 11、下列维生素中参与转氨基作用的就是( D ) A、硫胺素 B、尼克酸 C、核黄素 D、磷酸吡哆醛 E、泛酸 12、人体嘌呤分解代谢的终产物就是( B ) A、尿素 B、尿酸 C、氨 D、β—丙氨酸 E、β—氨基异丁酸 13、蛋白质生物合成的起始信号就是( D ) A、UAG B、UAA C、UGA D、AUG E、AGU 14、非蛋白氮中含量最多的物质就是( D ) A、氨基酸 B、尿酸 C、肌酸 D、尿素 E、胆红素 15、脱氧核糖核苷酸生成的方式就是( B ) A、在一磷酸核苷水平上还原 B、在二磷酸核苷水平上还原 C、在三磷酸核苷水平上还原 D、在核苷水平上还原 16、妨碍胆道钙吸收的物质就是( E ) A、乳酸 B、氨基酸 C、抗坏血酸 D、柠檬酸 E、草酸盐 17、下列哪种途径在线粒体中进行( E ) A、糖的无氧酵介 B、糖元的分解 C、糖元的合成 D、糖的磷酸戊糖途径 E、三羧酸循环 18、关于DNA复制,下列哪项就是错误的( D ) A、真核细胞DNA有多个复制起始点 B、为半保留复制 C、亲代DNA双链都可作为模板 D、子代DNA的合成都就是连续进行的
《生物化学》题库 习题一参考答案 一、填空题 1蛋白质中的苯丙氨酸、酪氨酸和__色氨酸__3种氨基酸具有紫外吸收特性,因而使蛋白质在 280nm处有最大吸收值。 2蛋白质的二级结构最基本的有两种类型,它们是_α-螺旋结构__和___β-折叠结构__。前者的螺距为 0.54nm,每圈螺旋含_3.6__个氨基酸残基,每个氨基酸残基沿轴上升高度为__0.15nm____。天然 蛋白质中的该结构大都属于右手螺旋。 3氨基酸与茚三酮发生氧化脱羧脱氨反应生成__蓝紫色____色化合物,而脯氨酸与茚三酮反应 生成黄色化合物。 4当氨基酸溶液的pH=pI时,氨基酸以两性离子离子形式存在,当pH>pI时,氨基酸以负 离子形式存在。 5维持DNA双螺旋结构的因素有:碱基堆积力;氢键;离子键 6酶的活性中心包括结合部位和催化部位两个功能部位,其中前者直接与底物结合,决定酶的 专一性,后者是发生化学变化的部位,决定催化反应的性质。 72个H+或e经过细胞内的NADH和FADH2呼吸链时,各产生3个和2个ATP。 81分子葡萄糖转化为2分子乳酸净生成______2________分子ATP。 糖酵解过程中有3个不可逆的酶促反应,这些酶是己糖激酶;果糖磷酸激酶;丙酮酸激酶9。 10大肠杆菌RNA聚合酶全酶由σββα'2组成;核心酶的组成是'2ββα。参
与识别起始信号的是σ因子。 11按溶解性将维生素分为水溶性和脂溶性性维生素,其中前者主要包括V B1、V B2、V B6、 V B12、V C,后者主要包括V A、V D、V E、V K(每种类型至少写出三种维生素。) 12蛋白质的生物合成是以mRNA作为模板,tRNA作为运输氨基酸的工具,蛋白质合 成的场所是 核糖体。 13细胞内参与合成嘧啶碱基的氨基酸有:天冬氨酸和谷氨酰胺。 14、原核生物蛋白质合成的延伸阶段,氨基酸是以氨酰tRNA合成酶?GTP?EF-Tu三元复合体的形式进 位的。 15、脂肪酸的β-氧化包括氧化;水化;再氧化和硫解4步化学反应。 二、选择题 1、(E)反密码子GUA,所识别的密码子是: A.CAU B.UG C C.CGU D.UAC E.都不对 2、(C)下列哪一项不是蛋白质的性质之一? A.处于等电状态时溶解度最小 B.加入少量中性盐溶解度增加 C.变性蛋白质的溶解度增加 D.有紫外吸收特性 3.(B)竞争性抑制剂作用特点是:
《生物化学》练习题及答案 纵观近几年来生化自考的题型一般有四种：(一)最佳选择题，即平常所说的A型多选题，其基本结构是由一组题干和A、B、C、D、E 五个备选答案组成，其中只有一个是最佳答案，其余均为干扰答案。 (二)填充题，即填写某个问题的关键性词语。(三)名词解释，答题要做到准确全面，举个例来说，名解“糖异生”，单纯回答“非糖物质转变为糖的过程”这一句话显然是不够的，必需交待异生的场所、非糖物质有哪些等，诸如此类问题，往往容易疏忽。(四)问答题，要充分理解题意要求，分析综合，拟定答题方案。现就上述四种题型，编写了生物化学习题选，供大家参考。 一、最佳选择题：下列各题有A、B、C、D、E五个备选答案，请选择一个最佳答案。 1、蛋白质一级结构的主要化学键是( ) A、氢键 B、疏水键 C、盐键 D、二硫键 E、肽键 2、蛋白质变性后可出现下列哪种变化( ) A、一级结构发生改变 B、构型发生改变 C、分子量变小 D、构象发生改变 E、溶解度变大 3、下列没有高能键的化合物是( )
A、磷酸肌酸 B、谷氨酰胺 C、ADP D、1，3一二磷酸甘油酸 E、磷酸烯醇式丙酮酸 4、嘌呤核苷酸从头合成中，首先合成的是( ) A、IMP B、AMP C、GMP D、XMP E、ATP 5、脂肪酸氧化过程中，将脂酰～SCOA载入线粒体的是( ) A、ACP B、肉碱 C、柠檬酸 D、乙酰肉碱 E、乙酰辅酶A 6、体内氨基酸脱氨基最主要的方式是( ) A、氧化脱氨基作用 B、联合脱氨基作用 C、转氨基作用 D、非氧化脱氨基作用 E、脱水脱氨基作用 7、关于三羧酸循环，下列的叙述哪条不正确( ) A、产生NADH和FADH2 B、有GTP生成 C、氧化乙酰COA D、提供草酰乙酸净合成 E、在无氧条件下不能运转 8、胆固醇生物合成的限速酶是( ) A、HMG COA合成酶 B、HMG COA裂解酶 C、HMG COA还原酶 D、乙酰乙酰COA脱氢酶 E、硫激酶 9、下列何种酶是酵解过程中的限速酶( )
生物化学试题及答案（6） 默认分类2010-05-15 20:53:28 阅读1965 评论1 字号：大中小 生物化学试题及答案（6） 医学试题精选2010-01-01 21:46:04 阅读1957 评论0 字号：大中小 第六章生物氧化 【测试题】 一、名词解释 1.生物氧化 2.呼吸链 3.氧化磷酸化 4. P/O比值 5.解偶联剂 6.高能化合物 7.细胞色素 8.混合功能氧化酶 二、填空题 9．琥珀酸呼吸链的组成成分有____、____、____、____、____。 10．在NADH 氧化呼吸链中，氧化磷酸化偶联部位分别是____、____、____，此三处释放的能量均超过____KJ。 11．胞液中的NADH+H+通过____和____两种穿梭机制进入线粒体，并可进入____氧化呼吸链或____氧化呼 吸链，可分别产生____分子ATP或____分子ATP。 12．ATP生成的主要方式有____和____。 13．体内可消除过氧化氢的酶有____、____和____。 14．胞液中α-磷酸甘油脱氢酶的辅酶是____，线粒体中α-磷酸甘油脱氢酶的辅基是____。 15．铁硫簇主要有____和____两种组成形式，通过其中的铁原子与铁硫蛋白中的____相连接。 16．呼吸链中未参与形成复合体的两种游离成分是____和____。 17．FMN或FAD作为递氢体，其发挥功能的结构是____。 18．参与呼吸链构成的细胞色素有____、____、____、____、____、____。 19．呼吸链中含有铜原子的细胞色素是____。 20．构成呼吸链的四种复合体中，具有质子泵作用的是____、____、____。 21．ATP合酶由____和____两部分组成，具有质子通道功能的是____，____具有催化生成ATP 的作用。 22．呼吸链抑制剂中，____、____、____可与复合体Ⅰ结合，____、____可抑制复合体Ⅲ，可抑制细胞色 素c氧化酶的物质有____、____、____。 23．因辅基不同，存在于胞液中SOD为____，存在于线粒体中的 SOD为____，两者均可消除体内产生的 ____。 24．微粒体中的氧化酶类主要有____和____。 三、选择题
生物化学试题库 蛋白质化学 一、填空题 1．构成蛋白质的氨基酸有种，一般可根据氨基酸侧链（R）的大小分为侧链氨基酸和侧链氨基酸两大类。其中前一类氨基酸侧链基团的共同特怔是具有性；而后一类氨基酸侧链（或基团）共有的特征是具有性。碱性氨基酸（pH6～7时荷正电）有两种，它们分别是氨基酸和氨基酸；酸性氨基酸也有两种，分别是氨基酸和氨基酸。 2．紫外吸收法（280nm）定量测定蛋白质时其主要依据是因为大多数可溶性蛋白质分子中含有氨基酸、氨基酸或氨基酸。 3．丝氨酸侧链特征基团是；半胱氨酸的侧链基团是 。这三种氨基酸三字母代表符号分别是 4．氨基酸与水合印三酮反应的基团是，除脯氨酸以外反应产物的颜色是；因为脯氨酸是α—亚氨基酸，它与水合印三酮的反应则显示色。 5．蛋白质结构中主键称为键，次级键有、、 、、；次级键中属于共价键的是键。 6．镰刀状贫血症是最早认识的一种分子病，患者的血红蛋白分子β亚基的第六位 氨酸被氨酸所替代，前一种氨基酸为性侧链氨基酸，后者为性侧链氨基酸，这种微小的差异导致红血蛋白分子在氧分压较低时易于聚集，氧合能力下降，而易引起溶血性贫血。 7．Edman反应的主要试剂是；在寡肽或多肽序列测定中，Edman反应的主要特点是。 8．蛋白质二级结构的基本类型有、、 和。其中维持前三种二级结构稳定键的次级键为 键。此外多肽链中决定这些结构的形成与存在的根本性因与、、 有关。而当我肽链中出现脯氨酸残基的时候，多肽链的α-螺旋往往会。 9．蛋白质水溶液是一种比较稳定的亲水胶体，其稳定性主要因素有两个，分别是 和。 10．蛋白质处于等电点时，所具有的主要特征是、。 11．在适当浓度的β-巯基乙醇和8M脲溶液中，RNase（牛）丧失原有活性。这主要是因为RNA酶的被破坏造成的。其中β-巯基乙醇可使RNA酶分子中的键破坏。而8M脲可使键破坏。当用透析方法去除β-巯基乙醇和脲的情况下，RNA酶又恢复原有催化功能，这种现象称为。 12．细胞色素C，血红蛋白的等电点分别为10和7.1，在pH8.5的溶液中它们分别荷的电性是、。 13．在生理pH条件下，蛋白质分子中氨酸和氨酸残基的侧链几乎完全带负电，而氨酸、氨酸或氨酸残基侧链完全荷正电（假设该蛋白质含有这些氨基酸组分）。 14．包含两个相邻肽键的主肽链原子可表示为，单个肽平面及包含的原子可表示为。 15．当氨基酸溶液的pH＝pI时，氨基酸（主要）以离子形式存在；当pH＞pI时，氨基酸
生物化学各章练习题及答案
生化练习题 一、填空题： 1、加入高浓度的中性盐，当达到一定的盐饱和度时，可使蛋白质的溶解度__________并__________,这种现象称为 __________。 2、核酸的基本结构单位是_____________。 3、____RNA 分子指导蛋白质合成，_____RNA 分子用作蛋白质合成中活化氨基酸的载体。 4、根据维生素的溶解性质，可将维生素分为两类，即 ____________和____________。 5、___________是碳水化合物在植物体内运输的主要方式。 6、糖酵解在细胞的_____________中进行 7、糖类除了作为能源之外，它还与生物大分子间识别有关，也是合成__________，___________，_____________等的碳骨架的共体。 8、脂肪是动物和许多植物主要的能源贮存形式，是由甘油与3分子_____________酯化而成的。 9、基因有两条链，作为模板指导转录的那条链称 _____________链。 10、以RNA 为模板合成DNA 称_____________。 二、名词解释 1、蛋白质的一级结构： 2、糖的有氧氧化： 3、必需脂肪酸： 4、半保留复制： 三、问答题 1、蛋白质有哪些重要功能？
1、蛋白质的一级结构：指蛋白质多肽链中氨基酸的排列顺序，以及二硫键的位置。 2、糖的有氧氧化：糖的有氧氧化指葡萄糖或糖原在有氧条件下氧化成水和二氧化碳的过程。是糖氧化的主要方式。 3、必需脂肪酸：为人体生长所必需但有不能自身合成，必须从事物中摄取的脂肪酸。在脂肪中有三种脂肪酸是人体所必需的，即亚油酸，亚麻酸，花生四烯酸。 4、半保留复制：双链DNA 的复制方式，其中亲代链分离，每一子代DNA 分子由一条亲代链和一条新合成的链组成。 三、问答题 2、DNA 分子二级结构有哪些特点？ 答：按Watson-Crick 模型，DNA 的结构特点有：两条反相平行的多核苷酸链围绕同一中心轴互绕；碱基位于结构的内侧，而亲水的糖磷酸主链位于螺旋的外侧，通过磷酸二酯键相连，形成核酸的骨架；碱基平面与轴垂直，糖环平面则与轴平行。两条链皆为右手螺旋；双螺旋的直径为2nm，碱基堆积距离为0.34nm，两核酸之间的夹角是36°，每对螺旋由10 对碱基组成；碱基按A=T，G=C 配对互补，彼此以氢键相连系。维持DNA 结构稳定的力量主要是碱基堆积力；双螺旋结构表面有两条螺形凹沟，一大一小。 3、怎样证明酶是蛋白质？ 答：（1）酶能被酸、碱及蛋白酶水解，水解的最终产物都是氨基酸，证明酶是由氨基酸组成的。 （2）酶具有蛋白质所具有的颜色反应，如双缩脲反应、茚三酮反应、米伦反应、乙醛酸反应。 （3）一切能使蛋白质变性的因素，如热、酸碱、紫外线等，同样可以使酶变性失活。
第一章蛋白质结构与功能复习题 一、单选题 1. 维系蛋白质二级结构稳定的化学键是 A. 盐键 B. 二硫键 C. 肽键 D. 疏水键 E. 氢键 2．关于蛋白质二级结构错误的描述是 A. 蛋白质局部或某一段肽链有规则的重复构象 B. 二级结构仅指主链的空间构象 C. 多肽链主链构象由每个肽键的两个二面角所确定 D. 整条多肽链中全部氨基酸的位置 E. 无规卷曲也属二级结构范畴 3．蛋白质分子中的肽键 A. 是由一个氨基酸的α-氨基和另一个氨基酸的α-羧基形成的 B. 是由谷氨酸的γ-羧基与另一个α-氨基酸的氨基形成的 C. 是由赖氨酸的ε-氨基与另一分子α-氨基酸的羧基形成的 D. 氨基酸的各种氨基和各种羧基均可形成肽键 E. 以上都不是 4．以下有关肽键的叙述错误的是 A. 肽键属于一级结构 B. 肽键具有部分双键的性质
C. 肽键中C-N 键所连的四个原子处于同一平面 D. 肽键中C-N 键长度比C-Cα单键短 E. 肽键旋转而形成了β-折叠 5．蛋白质多肽链具有的方向性是 A. 从5′端到3′端 B. 从3′端到5′端 C. 从C 端到N端 D. 从N端到C 端 E. 以上都不是 6．蛋白质分子中的α-螺旋和β-片层都属于 A. 一级结构 2 B. 二级结构 C. 三级结构 D. 四级结构 E. 结构域 7．在各种蛋白质中含量相近的元素是 A. 碳 B. 氢 C. 氧 D. 氮 E. 硫 8．完整蛋白质分子必须具有
A. α-螺旋 B. β-片层 C. 辅基 D. 四级结构 E. 三级结构 9. 蛋白质吸收紫外光能力的大小，主要取决于 A. 含硫氨基酸的含量 B. 碱性氨基酸的含量 C. 酸性氨基酸的含量 D. 芳香族氨基酸的含量 E. 脂肪族氨基酸的含量 10. 蛋白质溶液的稳定因素是 A. 蛋白质溶液的粘度大 B. 蛋白质分子表面的疏水基团相互排斥 C. 蛋白质分子表面带有水化膜 D. 蛋白质分子中氨基酸的组成 E. 以上都不是 11. 维系蛋白质四级结构主要化学键是 A. 盐键 B. 二硫键 C. 疏水作用 D. 范德华力
生物化学试题带答案． 一、选择题 1、蛋白质一级结构的主要化学键是( E ) A、氢键 B、疏水键 C、盐键 D、二硫键 E、肽键 2、蛋白质变性后可出现下列哪种变化( D )
A、一级结构发生改变 B、构型发生改变 C、分子量变小 D、构象发生改变 E、溶解度变大 3、下列没有高能键的化合物是( B ) A、磷酸肌酸 B、谷氨酰胺 C、ADP D、1，3一二磷酸甘油酸 E、磷酸烯醇式丙酮 酸 4、嘌呤核苷酸从头合成中，首先合成的是( A ) A、IMP B、AMP C、GMP D、XMP E、ATP 6、体内氨基酸脱氨基最主要的方式是( B ) A、氧化脱氨基作用 B、联合脱氨基作用 C、转氨基作用
D、非氧化脱氨基作用 E、脱水脱氨基作用 7、关于三羧酸循环，下列的叙述哪条不正确( D ) A、产生NADH和FADH2 B、有GTP生成 C、氧化乙酰COA D、提供草酰乙酸净合成 E、在无氧条件下不能运转 8、胆固醇生物合成的限速酶是( C ) A、HMG COA合成酶 B、HMG COA裂解酶 C、HMG COA还原酶 D、乙酰乙酰COA脱氢酶 E、硫激酶 9、下列何种酶是酵解过程中的限速酶( D ) A、醛缩酶 B、烯醇化酶 C、乳酸脱氢酶 D、磷酸果糖激酶一磷酸甘油脱氢酶3、E． 10、DNA二级结构模型是( B ) A、α一螺旋 B、走向相反的右手双螺旋 C、三股螺旋 D、走向相反的左手双螺旋 E、走向相同的右手双螺旋11、下列维生素中参与转氨基作用的是( D )
A、硫胺素 B、尼克酸 C、核黄素 D、磷酸吡哆醛 E、泛酸 12、人体嘌呤分解代谢的终产物是( B ) A、尿素 B、尿酸 C、氨 D、β—丙氨酸 E、β—氨基异丁酸 13、蛋白质生物合成的起始信号是( D ) A、UAG B、UAA C、UGA D、AUG E、AGU 14、非蛋白氮中含量最多的物质是( D ) A、氨基酸 B、尿酸 C、肌酸 D、尿素 E、胆红素 15、脱氧核糖核苷酸生成的方式是( B )
生物化学试题库及其答案——糖类化学 一、填空题 1.纤维素是由________________组成,它们之间通过________________糖苷键相连。 2.常用定量测定还原糖的试剂为________________试剂和 ________________试剂。 3.人血液中含量最丰富的糖是________________,肝脏中含量最丰富的糖是 ________________,肌肉中含量最丰富的糖是________________。 4.乳糖是由一分子________________和一分子________________组成,它们之间通过________________糖苷键相连。 5.鉴别糖的普通方法为________________试验。 6.蛋白聚糖是由________________和________________共价结合形成的复合物。 7.糖苷是指糖的________________和醇、酚等化合物失水而形成的缩醛(或缩酮)等形式的化合物。 8.判断一个糖的D-型和L-型是以________________碳原子上羟基的位置作依据。 9.多糖的构象大致可分为________________、________________、 ________________和________________四种类型,决定其构象的主要因素是 ________________。 二、是非题 1.[ ]果糖是左旋的，因此它属于L-构型。 2.[ ]从热力学上讲,葡萄糖的船式构象比椅式构象更稳 定。 3.[ ]糖原、淀粉和纤维素分子中都有一个还原端,所以它们都有还原性。 4.[ ]同一种单糖的α-型和β-型是对映体。 5.[ ]糖的变旋现象是指糖溶液放置后,旋光方向从右旋变成左旋或从左旋变成右旋。 6.[ ]D-葡萄糖的对映体为L-葡萄糖,后者存在于自然界。 7.[ ]D-葡萄糖,D-甘露糖和D-果糖生成同一种糖脎。 8.[ ]糖链的合成无模板,糖基的顺序由基因编码的转移酶决定。 9.[ ]醛式葡萄糖变成环状后无还原性。 10.[ ]肽聚糖分子中不仅有L-型氨基酸,而且还有D-型氨基酸。 三、选择题
生化练习题 一、填空题： 1、加入高浓度的中性盐，当达到一定的盐饱和度时，可使蛋白质的溶解度__________并__________,这种现象称为__________。 2、核酸的基本结构单位是_____________。 3、____RNA 分子指导蛋白质合成，_____RNA 分子用作蛋白质合成中活化氨基酸的载体。 4、根据维生素的溶解性质，可将维生素分为两类，即____________和____________。 5、___________是碳水化合物在植物体内运输的主要方式。 6、糖酵解在细胞的_____________中进行 7、糖类除了作为能源之外，它还与生物大分子间识别有关，也是合成__________，___________，_____________等的碳骨架的共体。 8、脂肪是动物和许多植物主要的能源贮存形式，是由甘油与3分子_____________酯化而成的。 9、基因有两条链，作为模板指导转录的那条链称_____________链。 10、以RNA 为模板合成DNA 称_____________。 二、名词解释 1、蛋白质的一级结构： 2、糖的有氧氧化： 3、必需脂肪酸： 4、半保留复制： 三、问答题 1、蛋白质有哪些重要功能 2、DNA 分子二级结构有哪些特点 3、怎样证明酶是蛋白质 4、简述酶作为生物催化剂与一般化学催化剂的共性及其个性 5、什么是必需氨基酸和非必需氨基酸 6、遗传密码如何编码有哪些基本特性 简答： 2、DNA 分子二级结构有哪些特点 3、怎样证明酶是蛋白质 4．简述酶作为生物催化剂与一般化学催化剂的共性及其个性 5、什么是必需氨基酸和非必需氨基酸 6．遗传密码如何编码有哪些基本特性 一、 1、减小；沉淀析出；盐析 2、核苷酸 3、m ; t 4、水溶性维生素；脂溶性维生素 5、蔗糖 6、细胞质 7、蛋白质；核酸；脂肪 8、脂肪酸 9、有意义链 10、反向转录 1、蛋白质的一级结构：指蛋白质多肽链中氨基酸的排列顺序，以及二硫键的位置。 2、糖的有氧氧化：糖的有氧氧化指葡萄糖或糖原在有氧条件下氧化成水和二氧化碳的过程。是糖氧化的主要方式。 3、必需脂肪酸：为人体生长所必需但有不能自身合成，必须从事物中摄取的脂肪酸。在脂肪中有三种脂肪酸是人体所必需的，即亚油酸，亚麻酸，花生四烯酸。 4、半保留复制：双链DNA 的复制方式，其中亲代链分离，每一子代DNA 分子由一条亲代链和一条新合成的链组成。 三、问答题 2、DNA 分子二级结构有哪些特点
第一章蛋白质 选择题 1．某一溶液中蛋白质的百分含量为45％，此溶液的蛋白质氮的百分浓度为：E A．8.3% B．9.8% C．6.7% D．5.4% E．7.2％ 2．下列含有两个羧基的氨基酸是：D A．组氨酸B．赖氨酸C．甘氨酸D．天冬氨酸E．色氨酸 3．下列哪一种氨基酸是亚氨基酸：A A．脯氨酸B．焦谷氨酸C．亮氨酸D．丝氨酸E．酪氨酸 4．维持蛋白质一级结构的主要化学键是：C A．离子键B．疏水键C．肽键D．氢键E．二硫键 5．关于肽键特点的错误叙述是：E A．肽键中的C-N键较C-N单键短 B．肽键中的C-N键有部分双键性质 C．肽键的羰基氧和亚氨氢为反式构型 D．与C-N相连的六个原子处于同一平面上 E．肽键的旋转性，使蛋白质形成各种立体构象 6．关于蛋白质分子三级结构的描述，其中错误的是：B A．天然蛋白质分子均有这种结构 B．有三级结构的多肽链都具有生物学活性 C．三级结构的稳定性主要是次级键维系 D．亲水基团聚集在三级结构的表面 E．决定盘曲折叠的因素是氨基酸残基 7．具有四级结构的蛋白质特征是：E A．依赖肽键维系四级结构的稳定性 B．在三级结构的基础上，由二硫键将各多肽链进一步折叠、盘曲形成 C．每条多肽链都具有独立的生物学活性 D．分子中必定含有辅基 E．由两条或两条以上具有三级结构的多肽链组成 8．含有Ala，Asp，Lys，Cys的混合液，其pI依次分别为6.0，2.77，9.74，5.07，在pH9环境中电泳分离这四种氨基酸，自正极开始，电泳区带的顺序是：B A．Ala，Cys，Lys，Asp B．Asp，Cys，Ala，Lys C．Lys，Ala，Cys，Asp D．Cys，Lys，Ala，Asp E．Asp，Ala，Lys，Cys 9．变性蛋白质的主要特点是：D A．粘度下降 B．溶解度增加
生物化学练习题 （供五年制临床医学、口腔、麻醉及影象等专业使用） 第一章蛋白质的结构与功能 一、A型题（每小题1分） 1．有一混合蛋白质溶液，各种蛋白质的pI分别为4.6、5.0、5.3、6.7、7.3。电泳时欲使其中4种泳向正极，缓冲液的pH应该是(D) A．5.0 B．4.0 C．6.0 D．7.0 E．8.0 2．下列蛋白质通过凝胶过滤层析柱时最先被洗脱的是(B) A．血清清蛋白(分子量68 500) B．马肝过氧化物酶(分子量247 500) C．肌红蛋白(分子量16 900) D．牛胰岛素(分子量5 700) E．牛β乳球蛋白(分子量35000) 3．蛋白质分子引起280nm光吸收的最主要成分是(D) A．肽键 B．半胱氨酸的-SH基 C．苯丙氨酸的苯环 D．色氨酸的吲哚环 E．组氨酸的咪唑环 4．含芳香环的氨基酸是(B) A．Lys B．Tyr C．Val D．Ile E．Asp 5．下列各类氨基酸中不含必需氨基酸的是(A) A．酸性氨基酸B．含硫氨基酸C．支链氨基酸 D．芳香族氨基酸E．碱性氨基 6．变性蛋白质的特点是(B) A．黏度下降B．丧失原有的生物活性C．颜色反应减弱 D．溶解度增加E．不易被胃蛋白酶水解 7．蛋白质变性是由于(B) A．蛋白质一级结构改变B．蛋白质空间构象的改变 C．辅基的脱落D．蛋白质水解E．以上都不是 8．以下哪一种氨基酸不具备不对称碳原子(A) A．甘氨酸B．丝氨酸C．半胱氨酸D．苏氨酸E．丙氨酸 9．下列有关蛋白质β折叠结构的叙述正确的是（E） A．β折叠结构为二级结构B．肽单元折叠成锯齿状C．β折叠结构的肽链较伸展 D．若干肽链骨架平行或反平行排列，链间靠氢键维系E．以上都正确 10．可用于蛋白质定量的测定方法有（B） Ａ．盐析法Ｂ．紫外吸收法C．层析法D．透析法E．以上都可以11．镰状红细胞贫血病患者未发生改变的是（E） Ａ．Hb的一级结构Ｂ．Hb的基因Ｃ．Hb的空间结构 Ｄ．红细胞形态Ｅ．Hb的辅基结构 12．维系蛋白质一级结构的化学键是（B）
核酸化学及研究方法 一、名词解释 1.正向遗传学：通过研究突变表型确定突变基因的经典遗传学方法。 2.核小体组蛋白修饰：组成核小体组蛋白，其多肽链的N末端游离于核小体之外，常被化学基团修饰，修饰类型包括：乙酰化、甲基化、磷酸化和泛素化，修饰之后会改变染色质的结构和活性。 3.位点特异性重组：位点特异性重组是遗传重组的一类。这类重组依赖于小范围同源序列的联会，重组只发生在同源短序列的范围之内，需要位点特异性的蛋白质分子参与催化。 4.转座机制：转座酶上两个不同亚基结合在转座子的特定序列上，两个亚基靠在一起形成有活性的二聚体，切下转座子，转座酶-转座子复合物结合到靶DNA上，通过转座酶的催化将转座子整合到新位点上。 5.基因敲除：利用DNA同源重组原理，用设计的外源同源DNA与受体细胞基因组中序列相同或相近的靶基因发生重组，从而将外源DNA整合到受体细胞的基因组中，产生精确的基因突变，完成基因敲除。 6.Sanger双脱氧终止法：核酸模板在核酸聚合酶、引物、四种单脱氧碱基存在的条件下复制或转录时，如果在四管反应系统中分别按比例引入四种双脱氧碱基，若双脱氧碱基掺入链端，该链便停止延长，若单脱氧碱基掺入链端，该链便可继续延伸。如此每管反应体系中便合成了以共同引物为5’端，以双脱氧碱基为3’端的一系列长度不等的核酸片段。反应终止后，分四个泳道进行电泳，以分离长短不一的核酸片段（长度相邻者仅差一个碱基），根据片段3’的双脱氧碱基，便可依次阅读合成片段的碱基排列顺序。 7.荧光实时PCR技术原理 探针法：TaqMan探针是一小段可以与靶DNA序列中间部位结合的单链DNA，它的5’和3’端分别带有一个荧光基团，这两个荧光基团由于距离过近，相互发生淬灭，不产生绿色荧光。PCR反应开始后，靶DNA变性，产生单链DNA，TaqMan探针结合到与之配对的靶DNA序列上，之后被Taq DNA聚合酶切除降解，从而解除荧光淬灭，荧光基团在激发光下发出荧光，最后可根据荧光强度计算靶DNA的数量。染料法：荧光染料（如SYBR GreenⅠ）能与双链DNA发生非序列特异性结合，并激发出绿色荧光。PCR反应开始后，随着DNA的不断延伸，结合到DNA上的荧光染料也相应增加，被激发产生的荧光也相应增加，可根据荧光强度计算初始模板的数量。 8.双分子荧光互补(BiFC)技术原理 将荧光蛋白在某些特定的位点切开，形成不发荧光的N片段和C片段。这2个片段在细胞内共表达或体外混合时，不能自发地组装成完整的荧光蛋白，不能产生荧光。但是，当这2个荧光蛋白的片段分别连接到一组有相互作用的目标蛋白上，在细胞内共表达或体外混合这两个目标蛋白时，由于目标蛋白质的相互作用，荧光蛋白的2个片段在空间上互相靠近互补，重新构建成完整的具有活性的荧光蛋白分子，并在该荧光蛋白的激发光激发下，发射荧光。 简言之，如果目标蛋白质之间有相互作用，则在激发光的激发下，产生该荧光蛋白的荧光。反之，若目标蛋白质之间没有相互作用，则不能被激发产生荧光。 二.问答题： 1.怎样将一个基因克隆到pET32a载体上；原核表达后，怎样纯化该蛋白？ 2.通过哪几种方法可以获得cDNA的全长？简述其原理。 （一）已知序列信息 1.同源序列法：根据基因家族各成员间保守氨基酸序列设计简并引物，利用简并引物进行RT-PCR扩增，得到该基因的部分cDNA序列，然后再利用RACE（cDNA末端快速扩增技术）获得cDNA全长。 2.功能克隆法：cDNA文库；基因组文库 （二）未知序列信息： 1.基于基因组DNA的克隆：是在鉴定已知基因的功能后，进而分离目标基因的一种方法。
121.胆固醇在体内的主要代谢去路是（ C ） A.转变成胆固醇酯 B.转变为维生素D3 C.合成胆汁酸 D.合成类固醇激素 E.转变为二氢胆固醇 125.肝细胞内脂肪合成后的主要去向是（ C ） A.被肝细胞氧化分解而使肝细胞获得能量 B.在肝细胞内水解 C.在肝细胞内合成VLDL并分泌入血 D.在肝内储存 E.转变为其它物质127.乳糜微粒中含量最多的组分是（ C ） A.脂肪酸 B.甘油三酯 C.磷脂酰胆碱 D.蛋白质 E.胆固醇129.载脂蛋白不具备的下列哪种功能（ C ） A.稳定脂蛋白结构 B.激活肝外脂蛋白脂肪酶 C.激活激素敏感性脂肪酶 D.激活卵磷脂胆固醇脂酰转移酶 E.激活肝脂肪酶 131.血浆脂蛋白中转运外源性脂肪的是（ A ） （内源） 136.高密度脂蛋白的主要功能是（ D ） A.转运外源性脂肪 B.转运内源性脂肪 C.转运胆固醇 D.逆转胆固醇 E.转运游离脂肪酸 138.家族性高胆固醇血症纯合子的原发性代谢障碍是（ C ） A.缺乏载脂蛋白B B.由VLDL生成LDL增加 C.细胞膜LDL受体功能缺陷 D.肝脏HMG-CoA还原酶活性增加 E.脂酰胆固醇脂酰转移酶（ACAT）活性降低 139.下列哪种磷脂含有胆碱（ B ） A.脑磷脂 B.卵磷脂 C.心磷脂 D.磷脂酸 E.脑苷脂
二、多项选择题 203.下列物质中与脂肪消化吸收有关的是（ A D E ） A.胰脂酶 B.脂蛋白脂肪酶 C.激素敏感性脂肪酶 D.辅脂酶 E.胆酸 204.脂解激素是（ A B D E ） A.肾上腺素 B.胰高血糖素 C.胰岛素 D.促甲状腺素 E.甲状腺素 206.必需脂肪酸包括（ C D E ） A.油酸 B.软油酸 C.亚油酸 D.亚麻酸 E.花生四烯酸208.脂肪酸氧化产生乙酰CoA，不参与下列哪些代谢（ A E ） A.合成葡萄糖 B.再合成脂肪酸 C.合成酮体 D.合成胆固醇 E.参与鸟氨酸循环 216.直接参与胆固醇合成的物质是（ A C E ） A.乙酰CoA B.丙二酰CoA 217.胆固醇在体内可以转变为（ B D E ） A.维生素D2 B.睾酮 C.胆红素 D.醛固酮 E.鹅胆酸220.合成甘油磷脂共同需要的原料（ A B E ） A.甘油 B.脂肪酸 C.胆碱 D.乙醇胺 E.磷酸盐222.脂蛋白的结构是（ A B C D E ） A.脂蛋白呈球状颗粒 B.脂蛋白具有亲水表面和疏水核心 C.载脂蛋白位于表面、VLDL主要以甘油三酯为核心、HDL主要的胆固醇酯为核心
生物化学试题（1） 第一章蛋白质的结构与功能 [测试题] 一、名词解释：1．氨基酸 2．肽 3．肽键 4．肽键平面 5．蛋白质一级结构 6．α-螺旋 7．模序 8．次级键 9．结构域 10．亚基 11．协同效应 12．蛋白质等电点 13．蛋白质的变性 14．蛋白质的沉淀 15．电泳 16．透析 17．层析 18．沉降系数 19．双缩脲反应 20．谷胱甘肽 二、填空题 21．在各种蛋白质分子中，含量比较相近的元素是____，测得某蛋白质样品含氮量为15.2克，该样品白质含量应为____克。 22．组成蛋白质的基本单位是____，它们的结构均为____，它们之间靠____键彼此连接而形成的物质称为____。 23．由于氨基酸既含有碱性的氨基和酸性的羧基，可以在酸性溶液中带____电荷，在碱性溶液中带____电荷，因此，氨基酸是____电解质。当所带的正、负电荷相等时，氨基酸成为____离子，此时溶液的pH值称为该氨基酸的____。 24．决定蛋白质的空间构象和生物学功能的是蛋白质的____级结构，该结构是指多肽链中____的排列顺序。25．蛋白质的二级结构是蛋白质分子中某一段肽链的____构象，多肽链的折叠盘绕是以____为基础的，常见的二级结构形式包括____，____，____和____。 26．维持蛋白质二级结构的化学键是____，它们是在肽键平面上的____和____之间形成。 27．稳定蛋白质三级结构的次级键包括____，____，____和____等。 28．构成蛋白质的氨基酸有____种，除____外都有旋光性。其中碱性氨基酸有____，____，____。酸性氨基酸有____，____。 29．电泳法分离蛋白质主要根据在某一pH值条件下，蛋白质所带的净电荷____而达到分离的目的，还和蛋白质的____及____有一定关系。 30．蛋白质在pI时以____离子的形式存在，在pH>pI的溶液中，大部分以____离子形式存在，在pH 生物化学复习 一、单选题： 1. 能出现在蛋白质分子中的下列氨基酸，哪一种没有遗传密码E.羟脯氢酸 2. 组成蛋白质的基本单位是α-氨基酸 3. 蛋白质所形成的胶体颗粒，在下列哪种条件下不稳定C.溶液PH值等于PI 4. 下列关于对谷胱甘肽的叙述中，哪一个说法是错误的C.是一种酸性肽 5. 核酸对紫外线的吸收是由哪一结构所产生的C.嘌呤、嘧啶环上的共轭双键 6. 核酸分子中储存、传递遗传信息的关键部分是B.碱基序列 7. 镰刀型红细胞患者血红蛋白β-链第六位上B.缬氨酸取代谷氨酸 8. 酶加快化学反应速度的根本在于它E.能大大降低反应的活化能 9. 临床上常用辅助治疗婴儿惊厥和妊娠呕吐的维生素是C.维生素B6 10. 缺乏下列哪种维生素可造成神经组织中的丙酮酸和乳酸堆积D. 维生素B1 11. 关于蛋白质分子三级结构的描述，其中错误的是B.具有三级结构的多肽链都具有生物学活性 12.下列哪种因素不能使蛋白质变性E.盐析 13. 蛋白质与氨基酸都具有A A.两性 B.双缩脲胍 C.胶体性 D.沉淀作用 E.所列都具有 14. 天然蛋白质中不存在的氨基酸是C A.甲硫氨酸 B.胱氨酸 C.羟脯氨酸 D.同型半胱氨酸 E.精氨酸 15. 镰刀型红细胞患者血红蛋白β-链第六位上B A.赖氨酸取代谷氨酸 B.缬氨酸取代谷氨酸 C.丙氨酸取代谷氨酸 D.蛋氨酸取代谷氨酸 E.苯丙氨酸取代谷氨酸 16. 关于竞争性抑制剂作用的叙述错误的是D A.竞争性抑制剂与酶的结构相似 B.抑制作用的强弱取决与抑制剂浓度与底物浓度的相对比例 C.抑制作用能用增加底物的办法消除 D.在底物浓度不变情况下，抑制剂只有达到一定浓度才能起到抑制作用 E.能与底物竞争同一酶的活性中心 17. 下列关于酶的活性中心的叙述正确的是A A.所有的酶都有活性中心 B.所有酶的活性中心都含有辅酶 C.酶的必须基团都位于活性中心之内 D.所有抑制剂都作用于酶的活性中心 E.所有酶的活性中心都含有金属离子 18. 下列关于酶的变构调节，错误的是C A.受变构调节的酶称为变构酶 B.变构酶多是关键酶(如限速酶)，催化的反应常是不可逆反应 C.变构酶催化的反应，其反应动力学是符合米-曼氏方程的 D.变构调节是快速调节 E.变构调节不引起酶的构型变化 一、名词解释 1、同聚多糖：由一种单糖组成的多糖，水解后生成同种单糖，如淀粉、纤维素等 2、氧化磷酸化；在真核细胞的线粒体或细菌中，物质在体内氧化时释放的能量供给ADP与无机磷合成ATP 的偶联反应。 3、多酶复合体: 几种功能不同的酶彼此嵌合在一起构成复合体，完成一系列酶促反应 4、限制性内切酶；一种在特殊核甘酸序列处水解双链DNA的内切酶。Ⅰ型限制性内切酶既能催化宿主DNA 的甲基化，又催化非甲基化的DNA的水解；而Ⅱ型限制性内切酶只催化非甲基化的DNA的水解 5、结构域：多肽链在二级结构或超二级结构的基础上形成三级结构的局部折叠区域，它是相对独立的紧密球形实体，称为结构域 6、脂肪酸ω-氧化：脂肪酸的ω-碳原子先被氧化成羧基，再进一步氧化成ω-羧基，形成α、ω-二羧脂肪酸，以后可以在两端进行α-氧化而分解。 7、戊糖磷酸途径：又称为磷酸已糖支路。是一个葡萄糖-6-磷酸经代谢产生NADPH和核糖-5-磷酸的途径。该途径包括氧化和非氧化两个阶段，在氧化阶段，葡萄糖-6-磷酸转化为核酮糖-5-磷酸和CO2，并生成两分子NADPH；在非氧化阶段，核酮糖-5-磷酸异构化生成核糖-5-磷酸或转化为酵解的两用人才个中间代谢物果糖-6-磷酸和甘油醛-3-磷酸。 ( 是指从6-磷酸葡萄糖开始,经过氧化脱羧、糖磷酸酯间的互变，最后形成6-磷酸果糖和3-磷酸甘油醛的过程) 8、竞争性抑制作用：通过增加底物浓度可以逆转的一种酶抑制类型。竞争性抑制剂通常与正常的底物或配体竞争同一个蛋白质的结合部位。这种抑制剂使Km增大而υmax不变。 9、肉毒碱穿梭作用：活化后的脂酰CoA是在线粒体外需要一个特殊的转运机制才能进入线粒体内膜。在膜内外都含有肉毒碱，脂酰CoA和肉毒碱结合，通过特殊通道进入膜内然后再与肉毒碱分离(脂酰CoA 通过形成脂酰肉毒碱从细胞质转运到线粒体的一个穿梭循环途径。) 10、呼吸链：又称电子传递链，是由一系列电子载体构成的，从NADH或FADH2向氧传递电子的系统 11 增色效应；当双螺旋DNA熔解（解链）时，260nm处紫外吸收增加的现象。 12、半不连续复制；半不连续复制是指DNA复制时，前导链上DNA的合成是连续的，后随链上是不连续的，故称为半不连续复制。 13、尿素循环: 是一个由4步酶促反应组成的，可以将来自氨和天冬氨酸的氮转化为尿素的循环。循环是发生在脊椎动物的肝脏中的一个代谢循环。 14、信号肽: 常指新合成多肽链中用于指导蛋白质夸膜转移（定位）的N-末端氨基酸序列（有时不一定在N端）。 15、核酶：具有催化功能的RNA分子,是生物催化剂。核酶又称核酸类酶、酶RNA、核酶类酶RNA。 16、半保留复制：DNA复制的一种方式。每条链都可用作合成互补链的模板，合成出两分子的双链DNA， 一、名词解释 二、选择题（每题1分，共20分） 1、蛋白质多肽链形成α-螺旋时，主要靠哪种次级键维持（） A：疏水键；B：肽键： C：氢键；D：二硫键。 2、在蛋白质三级结构中基团分布为（）。 A B C： D： 3、 A： C： 4、 A B C D 5 A B C D 6、非竟争性抑制剂对酶促反应动力学的影响是（）。 A：Km增大，Vm变小； B：Km减小，Vm变小； C：Km不变，Vm变小； D：Km与Vm无变化。 7、电子经FADH2呼吸链交给氧生成水时释放的能量，偶联产生的ATP数为（）A：1；B：2；C：3；D：4。 8、不属于呼吸链组分的是（）A：Cytb；B：CoQ；C：Cytaa3；D：CO2。 9、催化直链淀粉转化为支链淀粉的是（） A：R酶；B：D酶； C：Q酶；D：α—1，6糖苷酶10、三羧酸循环过程叙述不正确的 1 。C：脱氨基作用；D：水解作 用。 15、合成嘌呤环的氨基酸是（）。A：甘氨酸、天冬氨酸、谷氨酸；B：甘氨酸、天冬氨酸、谷氨酰胺；C：甘氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺；D：蛋氨酸、天冬酰胺、谷氨酸。 16、植物体的嘌呤降解物是以（） -来源网络，仅供个人学习参考 形式输送到细嫩组织的。 A：尿酸；B：尿囊酸； C：乙醛酸；D：尿素。 17、DNA复制方式为（）。 A：全保留复制； B：半保留复制； C：混合型复制； D：随机复制。 18、DNA复制时不需要下列那种A： B C： D： 19 A： 20、 A B C D 三、 1 （ 2 （ 3、生物氧化是（）在细胞中（），同时产生（）的过程。 4、麦芽糖是（）水解的中间产物。它是由两分子的（）通过（）键连接起来的双糖。 5、磷酸戊糖途径是在（）中进行的，其底物是（），产物是（）和（）。 6、核糖核酸的合成有（）和（）。 7、蛋白质合成步骤为（）、（）、（）。 四、是非判断题（每题1分，共10分） 1、蛋白质分子中的肽键是单键，因此能够自由旋转。() 2、复性后DNA分子中的两条链依然符合碱基配对原则。() ) 。 蛋白质的空间结构遭到破坏，性质发性改变，生物活性丧失的现象。 2、减色效应：指DNA分子复性时其紫外吸收减少的现象。 3、活性中心：酶分子上直接与底物结合并进行催化的部位。 4、电子传递体系：代谢物上的氢原子经脱氢酶激活脱落后，经过一系列的传递体传递给最终受体氧形成二氧化碳和水的全部过程。 5、必需脂肪酸：是指人体不能合成，必需由食物提供的脂肪酸。 6、遗传密码：mRNA中的核苷酸和肽链中氨基酸的对应方式。 7、生糖氨基酸：分解产物可以进入糖异生作用生成糖的氨基酸。 8、逆转录：是指以RNA为模板指导DNA生物合成的过 -来源网络，仅供个人学习参考生物化学复习题及答案
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