从中药大黄的鉴别谈薄层色谱法实验教学
一、实验原理薄层色谱法是将吸附剂或载有固定相的载体均匀地铺在玻璃板或塑料板上，铺成0.25-1mm 的薄层，各组分在展开剂的携带下在此薄层板上进行色谱分离、分析的方法。色谱分离的原理是利用组分在固定相和流动相中分配系数不同而进行分离。在该实验中要求按照几个步骤操作：对照液的配制，供试液的制备，制板、点样、饱和、展开、色谱鉴别、计算Rf 值。
二、学生实验中存在的问题
实验中如果按照药典[1] 规定，需要到有关单位去购买标准品配制对照液，价格昂贵，而根据学生实验的特点，对试剂的损耗和浪费不可避免；另外，学生在制备薄层板时的熟练程度和经验，直接影响薄层板的质量，比如板厚度不均匀，有气泡、凹凸不平等等原因，都会影响分离的效果；其次是药物的选择，如选择的药物不恰当，学生在进行色谱鉴别时，可能会出现斑点成像不圆，有拖尾现象，显色不清晰，分离时间过长，或由于药物成分复杂，而使分离的斑点较多，均不易鉴别。笔者总结经验，反复摸索，在该项实验教学中提出以下几方面的改进措施。
三、教学中改进措施
1.实验中对照液的制备，可以采用药典⑴规定的大黄粉末（过四号筛）代替标准品，由实验指导教师按要求预先配制成对照液，这样降低了成本，节约了学生配制对照液的时间，同时减少了该操作
的失误。
2.制作薄层板是学生该项实验操作难度之一，学生在短时间内是难以熟练掌握的。因此，笔者直接使用正规厂家生产的薄层板（CMC-N硅胶H板），这一改进措施，使实验时间缩短，是实验成功的关键因素[2] 。
3.中药大黄中含有 5 种蒽醌成分[1] ，即芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚，由于取代基不同，引起结构的极性不同，利用薄层色谱法可将 5 种成分分离，并利用对照品进行
鉴别；另外，由于大黄中成分具有多环共轭体系，因此可通过日光灯下检视斑点的黄色和紫外光灯下检视斑点的荧光进行鉴别。此外大黄中成分具有蒽醌结构还可以用氨熏使之变色鉴别。
4.手动点样的方法和点样的量也是影响实验效果的因素之一[2] ，笔者经过多次实验教学发现，用毛细管点样法需要注意几个问题。如果一个原点上只点一次样，时间停留短，容易造成点样量少；而时间停留长，点样的力度不易掌握，容易造成板破损。所以可由点一次样品改为连续点两次样品，并且要注意点样点的直径不大于3mm （第一次点样完成后，待溶剂挥发后再进行第二次点样）
5.实验成绩评定方法同样做了适当的改进，以前笔者仅以学生书写的实验报告和出勤率对学生实验成绩进行评定，这样使学生在
实验中具体操作优异程度难以体现。所以，笔者认为实验成绩评定
应该以实验操作和实验结果为主要内容，这就需要设立实验操作考
核项目和评定标准，并将其细化。例如, 实验操作考核项目包括点
样操作、点样位置、展开方法、展开剂极性调节、斑点鉴别情况、
Rf 值的计算；实验结果的考核项目主要是分离后的斑点数目及斑点形状。
四、改变实验条件，让学生学会分析问题，加深对理论知识的理解
该项试验所用的展开剂是混合成分（石油醚-甲酸乙酯-甲酸（15:5:1 ）），实验中把展开剂的混合组分改为单一组分，例如，只用石油醚作为展开剂，观察斑点分离情况，发现被测组分与起始线之间的距离太小甚至有一个斑点停留在原点上，只展开了四个斑点，说明展开剂的极性小，不利于分离。为了让学生直观地了解影响斑点展开的因素，学会如何分析问题，笔者首先让一组学生按正常条件完成实验，然后另一组学生改变任一实验条件，例如改变展开剂组分，缩短展开时间，或缩短展开剂蒸气饱和时间，再进行对比实验，结果改变实验条件的那一组学生得到的分离效果都不理想。通过这一对比实验，见证了哪些因素影响分离的效果，学生心理上有起伏，更加深了对理论知识的理解。
药物分析这门学科中一些重要的概念和规律，仅仅以讲授的形式传授给学生，往往比较抽象、空洞，学生很难掌握。用薄层色谱法鉴别中药大黄的主要成分，只是中药大黄鉴别项目的其中
一种方法，笔者旨在通过该项实验，使薄层色谱法的概念形象化，具体化。按照学生思维发展的特点，设计实验程序，并在实验教学中适当改进操作措施，以及通过改变实验条件，进行对比实验, 增加学生
分组实验和边教边实验的比重，使学生认识到理论知识
的重要性和实验操作的直观性。最后，根据设立的实验考核项目，当场进行实验评分，选出优秀实验小组，使学生在竞技中体会到做实验的乐趣，收到良好的教学效果。尽管我系药物分析实验课开设有限，但为了更好的利用实验教学条件，结合学生专业层次, 让学生学以受用，又能降低实验成本，节约资源，减少浪费，同时如何更好的开展药物分析实验教学，这是笔者继续思考的动力。