金属硫蛋白检测方法研究进展
梁 鹏，吴晓萍，廖爱琳
（广东海洋大学食品科技学院，湛江 524025）
作者：梁鹏（1985～ ），硕士研究生，研究方向：食品质量与安全。通讯作者：吴晓萍
摘 要：金属硫蛋白是一种富含金属和半胱氨酸的低分子蛋白质，主要包括A g、A u、B i、C d、H g、Z n等硫蛋白，具有在体内可被金属和其他因素诱导合成的生物学特性。本文综述了目前7种常用的金属硫蛋白检测方法。
关键词：金属硫蛋白；金属结合法；电化学法金属硫蛋白(Metallothionein,简称MT)是一类广泛存在于生物体内的低分子量（约6500D a）金属结合蛋白，富含半胱氨酸，又叫金属硫氨酸甲基内盐，能被金属诱导。主要存在于动物的肝脏、肾脏、胰腺和小肠中。近年来，很多实验表明，金属硫蛋白参与体内微量元素的储存、转运和代谢，具有拮抗电离辐射、清除自由基以及对重金属解毒的作用，还与机体生长发育、延缓衰老及某些疾病有关。到目前有几种方法已用于生物组织和体液中M T的定量，但尚无标准方法。本文重点综述7种方法，介绍其特点，有助于在进行有关研究时选择和建立适宜的检测方法。
1 金属结合法
金属结合法(Metal binding )主要基于MT对金属的高亲合力、且不同金属的亲合力具有差异性及其热稳定性而建立。主要通过测定M T结合金属—竞争性替换金属含量来检测M T中金属含量的增高，从而计算出MT的含量。
1973年，P i o t r o w s k i等首先建立了金属结合法(203H g-T C A法)用于测定组织中的M T。由于H g 2+在酸性环境下不仅可与M T结合而且还可置换其他金属离子(如p H=2.1时，分别有98％的H g 2+和1％的C d 2+与M T 结合)。因此，本法适用于在利用酸沉淀其他蛋白而将M T分离出来时的测定[1]。但此法的203H g的加入量极其重要，如加入量过小，反应体系中尚有未与203H g结合的M T，而导致测定结果偏低；相反，加入量过大, 则
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H g呈游离状态或与不被T C A所沉淀的低分子量组分
相结合，又可使测定结果偏高。
张保林等[2]运用银饱和分析法结合原子吸收光谱(A A S)检测了兔肝Z n-M T，具体方法为：向含M T的溶液中加入过量的A g +，待反应完全后，再逐次加入血红蛋白，以结合剩余的A g +，加热使血红蛋白沉淀，与M T结合的A g +则完全存在于上清液中，通过A A S测定其中A g +含量，便可计算出M T的浓度。该方法与其他方法比较，不需要去除样品中共存的其它蛋白质和含S H基剂，可直接计算出M T含量，且不需特殊的仪器设备，操作简便，具有很高的重复性和准确性，该法检测的最低限为1μg/ml。
金属结合法具有一定的缺陷，如H g饱和法中H g +
除与M T结合外, 还与其他一些小分子量化合物结合；A g +不能置换已与M T结合的H g，且由于利用金属含量间接推算MT含量，特异性较差。
2 电化学法
电化学方法(Electrochemical )是利用巯基（-SH）在汞滴电极表面产生氧化还原反应出现的电位变化建立的，通过测定巯基以计算M T的含量。运用检测M T 的电化学方法有：示差脉冲极谱法(DPP)、微分脉冲极谱法、示差脉冲阳极溶出伏安法(DPASV) 和循环伏安法(CV)等。1979年Olafson等建立了示差脉冲极谱法[3]测定M T，检出限为10-8M，且不受分子中金属含量的影响。因此, 此法或许更能特异地反映M T而不是金属的量。1992年，Bebianno等人应用差分微分脉冲极谱法测定了贻贝组织中MT的浓度[4]；后来Bordin等通过改变体系的p H值，利用D D P方便的检出了多种形式的M T，并快速分析出还原型的M T；B e b i a n n应用微分脉
2010年第09期
No.09，2010
中国食物与营养Food and Nutrition in China
冲极谱法测定了贻贝整个软件组织中的C d-M T浓度。铁峰[5]报道用电化学分析仪单扫极谱法测定-S H基含量，李明春[6]采用组织化学方法，用简化的巯基试剂(DTNB)测定-SH含量。
3 免疫法
免疫法具有灵敏、特异的优点，所以近年来许多学者们建立了放射免疫分析法(RIA)和酶联免疫吸附分析法(ELISA)用于MT的检测。
Mallie等人于1979年首先应用RIA检测大鼠血清中的M T。此方法的检测范围在0.1～100n g/m l之间，但此方法要用到放射性同位素，另外需时过长(3d),给常规检测带来不便。
1986年T h o m a s等首先建立了E L I S A，测定速度快、无需接触放射性同位素，与R I A无显著差异，灵敏度可达100pg/ml，与RIA相似，但ELISA的测定相对迅速，且无需昂贵的仪器设备和接触放射性同位素。郑军恒[7]等于1999年用E L I S A法测定人血液中的M T，直接型E L I S A检测范围为1～10n g，竞争性E L I S A[8]检测范围为50～500ng。随后Anderse等人采用二抗改进Western Blotting法检测MT，检测限可达1ng。任宏伟[9]等用E L I S A测定鱼类体内的M T，结果表明比金属C d血红素饱和法具有更高的特异性，检测范围为10～40ng/ m l；黄波[10]等用竞争型E L I S A法测定人尿中的M T，检测限为20n g/m l。对免疫检测方法，有学者[11]认为M T 具有较多的二硫键易被氧化，从而使共免疫性发生改变，进而影响免疫法的测定结果。
4 色谱分析法
对M T中不同亚型的检测，色谱分析法(L a w chromatography)较为适合, 应用的色谱分析法主要有H P L C、R P H P L C、H P L C-I C P-M S、H P L C-A A S。Hunziker等[12]使用RPHPLC从兔组织样品中分离出7种亚型, 通过A A S来检测样品的金属含量，对M T定量测定。鉴于常规色谱层析法分辨力差, 洗脱费时，Suzuki 使用凝胶渗透柱的H P L C将C d诱导大鼠的肝组织样品的M T分离出来，经直接联于A A S来检测样品的金属含量，对M T定量测定。本法可在1h内检出浓度小于1μg/m l的1m l上柱样品中的M T含量，而且，可分别测定不同型的M T。J i n等[13]利用H P L C分离M T，然后根据样品对250n m紫外吸收特性来直接对M T定量。该法的灵敏度小于1μg/ml。5 蛋白质印迹分析法
1986年，Aoki等利用蛋白质印迹分析法(Western Blotting Analysis)检测MT，检测限为0.6ng, 不仅可检测M T，而且可检测其它与镉结合的蛋白质。随后，A n d e r s e n等建立了以兔抗鼠M T抗体为一抗，过氧化物酶联羊抗兔I g G为二抗，4-氯-萘酚作显色剂的蛋白质印迹技术用于检测M T，其检测限可达1n g[14]。本法主要用于M T同分异构体的特性以及M T与各种金属离子相互作用的研究[15]。
6 巯基显色法
巯基显色法(SH Color Code)适合于检测MT含量较高的样品，对含量较低的样品灵敏度较差。李立丽等[16]用Z n S O
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诱导猪肝产生M T，然后将M T粗提液加入巯基试剂(1:1)，在分光光度计420nm处读取吸光度A 值。用自制的M T纯品制作标准曲线，根据A值可在标准曲线上读出M T浓度。诱导后的猪肝中因M T含量较高采用其它方法均不能灵敏地进行检测，相对而言更适合采用巯基显色进行检测，并且巯基显色法操作简单、特异性较好，又可以避免放射性接触。
7 偶联技术
金属饱和分析对单一M T亚型缺乏选择性：免疫学分析不能定量混合物中单一M T亚型，不能给出原始金属组成，根据U U信号或染色定量灵敏度相对较低, 不能测定非诱导M T s。若将高效分离技术和灵敏特异的选择性检测器联合起来， 将是一种理想的M T s检测策略。最近发展的电喷离子化M S、碰撞诱导分离(C I D) M S和离子喷射源加强片段分别根据分子量、氨基酸序列、金属含量给出MT的详细特征。偶联技术(coupled techniques)是快速灵敏、全面定性定量生物标本中MT 亚型的一种最具吸引力的工具，未来能有效代替金属饱合分析、免疫分析而进入生化和临床实验室[17]。高效的分离技术与灵敏的检测技术“杂交”形成的偶联技术，恰能克服以前各种方法的缺点，快速、有效测定M T。因此，偶联技术的应用与发展，必将成为未来MT检测方法的发展方向。
综上所述，灵敏性（即最小检出量）是选择检测MT 方法的一个重要指标。因而测定组织器官中的M T的含量，首推HPLC-AAS法，测定体液(如血液、尿液等)中的MT含量，选用RIA和ELISA法为佳。每种检测方法其结果
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梁鹏等：金属硫蛋白检测方法研究进展
都可能会受到某些因素的影响：（1）样品的处理方法；（2）M T结合金属的种类；（3）M T同形体的多态性；（4）大量MT蛋白和非MT蛋白中MT的高比例等。
金属结合法适于测定M T含量较高的样品；H P L C 适于分离和检测M T的同分异构体，此外，电化学法和蛋白印迹分析还可用于研究M T的构型变化及其与金属离子相互作用的关系；免疫法则适于检测M T含量较低的样品；M T检测方法需要标准化，对所测得的结果作出适当的解释，如所测得的M T是总量还是其中的一种类型或亚型，或者是氧化状态还是还原状态，有待进一步探讨。◇
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289.
Advancement of Metallothionein Detection Methods
LIANG Peng，WU Xiao-ping，LIAO Ai-lin
(College of food science and technology,Guangdong Ocean University,Zhanjiang 524025)
Abstract：Metallothionein was a kind of low-molecular-weight protein rich in metals and 2-amino-3-thiopropionic acid such as sulfurprotein with Ag，Au，Bi，Cd，Hg，Zn，etc., which had biocharacteristics of been indued synthesis by metals and other factors. Seven methods to detect MT were discussed in the paper.
Keywords：Metallothionein；Metal-binding Method；Electrochemical Method
58中国食物与营养
方面可能具有更为重要的意义。将来人们重点将是对这些调节途径的详细信号机制的探索,明确这些机制对掌握许多疾病的发生机制、选择针对性治疗手段具有重要的意义。 参考文献: [1] W ang G L,Jiang BH,Rue E A,et al.Hypoxia2inducible factor1is a ba2 sic2helix2loop2helix2PAS heterodimer regulated by cellular O2tension[J]. Proc Natl Acad Sci US A,1995,92(12):5510-5514. [2] M axwell PH,W iesener MS,Chang G W,et al.The tum our suppress or protein VH L targets hypoxia2inducible factors for oxygen2dependent prote2 olysis[J].Nature,1999,399(6733):271-275. [3] Berra E,Benizri E,G inouves A,et al.HIF prolyl2hydroxylase2is the key oxygen sens or setting low steady2state levels of HIF21alpha in norm oxia [J].E M BO J,2003,22(16):4082-4090. [4] M cNeill LA,Hewits on K S,G leadle JM,et al.The use of dioxygen by HIF prolyl hydroxylase(PH D1)[J].Bioorg M ed Chem Lett,2002,12 (12):1547-1550. [5] M etzen E,Zhou J,Jelkmann W,et al.Nitric oxide im pairs norm oxic degradation of HIF21alpha by inhibition of prolyl hydroxylases[J].M ol Biol Cell,2003,14(8):3470-3481. [6] Haddad JJ,Land SC.A non2hypoxic,ROS2sensitive pathway mediates T NF2alpha2dependent regulation of HIF21alpha[J].FE BS Lett,2001,505 (2):269-274. [7] Zhong H,Chiles K,Feldser D,et al.M odulation of hypoxia2inducible factor1alpha expression by the epidermal growth factor/phosphatidyli2 nositol32kinase/PTE N/AK T/FRAP pathway in human prostate cancer cells:im plications for tum or angiogenesis and therapeutics[J].Cancer Res,2000,60(6):1541-1545. [8] Laughner E,T aghavi P,Chiles K,et al.HER2(neu)signaling increases the rate of hypoxia2inducible factor1alpha(HIF21alpha)synthesis:novel mechanism for HIF212mediated vascular endothelial growth factor expres2 sion[J].M ol Cell Biol,2001,21(12):3995-4004. [9] Jung Y J,Isaacs JS,Lee S,et al.I L21beta2mediated up2regulation of HIF2 1alpha via an NFkappaB/COX22pathway identifies HIF21as a critical link between in flammation and oncogenesis[J].FASE B J,2003,17(14): 2115-2117. [10] Qian D,Lin HY,W ang H M,et al.N orm oxic induction of the hypoxic2 inducible factor21alpha by interleukin21beta inv olves the extracellular signal2regulated kinase1/2pathway in normal human cytotrophoblast cells [J].Biol Reprod,2004,70(6):1822-1827. [11] S troka DM,Burkhardt T,Desbaillets I,et al.HIF21is expressed in nor2 m oxic tissue and displays an organ2specific regulation under systemic hy2 poxia[J].FASE B J,2001,15(13):2445-2453. [12] K im CH,Cho Y S,Chun Y S,et al.Early expression of my ocardial HIF2 1alpha in response to mechanical stresses:regulation by stretch2activated channels and the phosphatidylinositol32kinase signaling pathway[J].Circ Res,2002,90(2):E25-33. [13] K uwahara F,K ai H,T okuda K,et al.Hypoxia2inducible factor21alpha/ vascular endothelial growth factor pathway for adventitial vasa vas orum formation in hypertensive rat aorta[J].Hypertension,2002,39(1):46 -50. (收稿日期:2004-07-07 修回日期:2004-10-25) 文章编号:1000-6486(2005)01-0055-03【综 述】甲醛及其检测方法的研究进展 张志虎, 邵华 关键词:甲醛;检测方法 中图分类号:R134+.4 文献标识码:A 甲醛广泛存在于环境中,对机体有诸多不利的影响。随着 生活水平的提高和卫生意识的增强,人们现在越来越关注它在 环境中的存在(尤其是在室内装修方面),因此对它的研究也较多。国内外建立了许多空气中甲醛的检测方法,而对甲醛的生 物检测方法研究却很少,本文旨在探索有效的检测方法。 1 甲醛的理化性质 甲醛常温下是一种无色、具有强烈刺激性的气体,易溶于水,比重01815,沸点-1915℃。其40%的水溶液称为福尔马林,它能使蛋白凝固,具有杀菌和防腐作用,常用来保存动物标本。甲醛的化学性质很活泼,能和氢氰酸、亚硫酸氢钠、氨的衍生物(如2,4-二硝基苯肼、苯肼、羟胺等)以及醇类发生加成 基金项目:国家自然科学基金资助(30471429);山东省自然科学基 金资助(Y2002C30) 作者单位:山东省劳动卫生与职业病防治研究院,山东济南250062 作者简介:张志虎(1973-),男,在读硕士研究生,主要从事职业卫 生和环境卫生研究 通讯作者:邵华反应;经催化氢化,甲醛被还原成甲醇;甲醛可以被氧化剂氧化生成甲酸;它在浓碱的作用下,能发生自身的氧化还原作用,此即所谓的歧化反应。 2 甲醛的来源 甲醛广泛存在于环境中,它有众多的来源:许多工业生产活动如石化工业、药物制造、燃煤工业等可产生甲醛;甲醛是树脂、橡胶、塑料等合成工业的重要原料;一些燃烧产物(如机动车尾气、烹调油烟、香烟烟雾等)、生活用品(如香水、喷发水、空气清新剂等)、建筑、装饰材料(如脲醛树脂、夹合板、粒子板、泡沫绝缘材料、油漆、染料、新家具等)也可产生甲醛;空气中碳氢化合物在光化学作用下可以生成甲醛。体内脂质的氧化或过氧化,丝氨酸、甘氨酸、胆碱等的代谢,以及一些脱甲基反应都可产生甲醛;甲醛还是嘌呤、胸腺嘧啶生物合成的中间产物。 3 甲醛的代谢 人体内的甲醛(包括外界进入的和内生的)有多种代谢途径,主要有:①经肺直接呼出;②进入尿液被排出[1];③与体内组织蛋白质、细胞DNA反应形成加合物而贮存在体内;④在肝脏和红细胞中的甲醛脱氢酶、醇脱氢酶的催化下,生成甲酸。
肝素钠效价检测方法 试剂：羊血浆（冰冻保存）、0.9%生理盐水、0.25%CaCl2（用生理盐水配置）、8%柠檬酸钠溶液、8IU∕mg肝素钠标准溶液。 4.2.2.2 待检样品溶液的配置：精确称取肝素钠固体待检样品M mg，溶解并用0.9%生理盐水定容至100ml，再取V ml定容至25ml即得待检样品溶液，冷藏保存。 估计M及V的计算公式为：样品估计效价×MV∕100=25×8 估算时V只尽量小于10且取整数，从而计算出M值。 4.2.2.3检测方法：将恒温水域调制37℃恒温，取出冰冻羊血浆，融化，并过滤，待 用。取2组10只试管，分别加入标样110ul、120ul……200ul，然后每管加 入8%柠檬酸钠溶液20ul、0.25%CaCl2 0.8ml 及过滤后的羊血浆1ml，另一组 加入待检样品溶液110ul、120ul……200ul，同样每管加入8%柠檬酸钠溶液 20ul 、0.25%CaCl2 0.8ml及过滤后的羊血浆1ml。并将每只试管盖好管盖， 倒转3—4次混匀，使内壁湿润，垂直放入37℃水域1h。1h后取出各管，检 查各管的凝固程度，并记录确定标样及待检样的1∕2凝固点及体积。 凝固程度标准： ①完全凝固：溶液完全凝固，倒转试管并猛敲一下时，凝块不从管壁脱落。 ②3∕4凝固：溶液完全凝固，但当猛敲一下时，凝块能从管壁脱落。 ③1∕2凝固：大约一半体积的溶液凝固。 ④1∕4凝固：少量溶液凝固。 ⑤0凝固：溶液悟凝固现象。 若相邻两管跳过1∕2凝固点则1∕2凝固点的计算公式为 V=V2-（V2-V1）×（0.5-S1）∕(S2-S1) (S1：小凝固度；S2：大凝固度；V1：相邻两管大凝固度加入的微升数；V2：相邻两管小凝固度加入的微升数。) 待检样品效价计算公式： 4.2.2.4F=待检样品估计效价×标品1∕2凝固点微升数÷样品1∕2凝固点微升数4.2.2.5 注意事项： 4.2.2.6.1 实验室操作环境必须控制在30℃以下。 4.2.2.6.2在使用新开启羊血浆前，需检测羊血浆是否能够正常使用。取试管一只，加入0.8ml 0.25%CaCl2及过滤后的羊血浆1ml ，盖好管盖，倒转3—4次混匀，使内壁湿润，垂直放入37℃水域5min，5min后检查血浆是否凝固，如血浆凝固则可使用，未凝固则不能使用。 4.2.2.6.3 如在检测过程中，标样的1∕2凝固点高于200ul，则需重新调整羊血浆的1∕2凝固点。方法如下：取3组各10只试管 组一： 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 标样 110 120 130 140 150 160 170 180 190 200 ul 8%柠檬酸钠 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 ul 0.25%CaCl2 0.8 0.8 0.8 0.8 0.8 0.8 0.8 0.8 0.8 0.8 ml 羊血浆 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 ml
室内甲醛检测方法 甲醛现在被各界普遍认为是室内第一污染，它的释放期较长，轻微超标时居住者不易察觉。超标四五倍时，居住者才能嗅出气味。找正规的检测机构做甲醛检测已成为现在入住新居的一项必不可少的程序。下面金标准小编介绍以下目前在测定甲醛常采用以下6种检测方法： 1、测定工业废气和环境空气中甲醛的乙酰丙酮分光光度法，本法使用与树脂制造、涂料、人造纤维、塑料、橡胶、染料、制药、油漆、制革等行业的排放废气以及做医药消毒、防腐、熏蒸时产生的甲醛蒸汽测定。测量范围在0.5~800mg/m3。 2、测定居住区和公共场所空气大气中甲醛浓度的AHMT(4-氨基-3-联氮-5-硫基-1，2，4-三氮杂茂)分光光度法。测量范围为0.01~0.16mg/m3。 3、适用于公共场所空气中甲醛浓度的酚试剂（MBTH）分光光度法，测量范围为0.01~0.15mg/m3。 4、气相色谱法 5、用于测定纺织品中游离甲醛含量的水萃取法。适用为游离甲醛含量为20mg/kg到3500mg/kg之间的纺织品。 6、用于测定纺织品中释放的甲醛含量的蒸气吸收法。适用为游离甲醛含量为20mg/kg 到3500mg/kg之间的纺织品。 目前，甲醛气体的检测方法按精确度划分，大致可分为两种，其一种为精密度测定法（仪器分析法），包括世界卫生组织推荐的高效液体色谱法（HPLC），气相色谱法（DNPH-GC 法）及分光光度法等；其二为简易测定法，该法主要用于快速检测，其精确度要求不高。主要有电法学方法，可以显示测定数据，以及检测管方式和测定纸方式，即通过检测气体与指示剂发生法学反应而表现出的颜色变化来测定检测气体浓度。 室内甲醛检测方法——酚试剂分光光度法 一、原理 空气中的甲醛与酚试剂反应生成嗪，嗪在酸性溶液中被高铁离子氧化成蓝绿色化合物，根据颜色深浅，比色定量。 二、仪器设备 1．气泡采样管或多孔玻板采样管； 2．QC-2A大气采样仪或TMP1500电子控时采样器；
甲醛的基本知识
甲醛 甲醛是一种无色，有强烈刺激型气味的气体。易溶于水、醇和醚。甲醛在常温下是气态，通常以水溶液形式出现。易溶于水和乙醇，35～40％的甲醛水溶液叫做福尔马林。甲醛分子中有醛基生缩聚反应，得到酚醛树脂(电木)。甲醛是一种重要的有机原料，主要用于塑料工业(如制酚醛树脂、脲醛塑料—电玉)、合成纤维(如合成维尼纶—聚乙烯醇缩甲醛)、皮革工业、医药、染料等。 基本信息 别称：蚁醛（formaldehyde） 产品别名：福尔马林(35～40％的甲醛水溶液) 英文名称：Formaldehyde 英文别名：Formalin; Methanal 化学式：CH2O, HCHO 结构简式：HCHO 分子量：30.03 CAS登录号：50-00-0 EINECS登录号：200-001-8
密度： 1.083 折射率： 1.3755-1.3775 闪点：60 ℃ 水溶性：soluble 沸点：-19.5 ℃ 熔点：-118 ℃ 性质 物理性质 一种无色，有强烈刺激性气味的气体。易溶于水、醇和醚。甲醛在常温下是气态，通常以水溶液形式出现。 易溶于水和乙醇，35～40％的甲醛水溶液叫做福尔马林。甲醛分子中有醛基生缩聚反应，得到酚醛树脂(电木)。 甲醛是一种重要的有机原料，主要用于塑料工业(如制酚醛树脂、脲醛塑料—电玉)、合成纤维(如合成维尼纶—聚乙烯醇缩甲醛)、皮革工业、医药、染料等。福尔马林具有杀菌和防腐能力，可浸制生物标本，其稀溶液(0.1—0. 5％)农业上可用来浸种，给种子消毒。工业上常用催化氧化法由甲醇制取甲醛。甲醛可与银氨溶液产生银镜反应[1]，使试管内壁上附着一
金属硫蛋白研究进展 【摘要】金属硫蛋白(metallothionein，MT)是近来发现的人类肿瘤细胞表面表达的一个生物学标记。本文就MT与肿瘤的关系等方面的研究进行了综述，并对MT研究中存在的问题进行探讨及展望。 【关键词】金属硫蛋白;肿瘤;进展 金属硫蛋白(metallothionein，MT)于1957年由哈佛大学的Margoshes和Valee 从马的肾脏中首次分离出来，发现其相对分子质量低，富含半胱氨酸，具有丰富的金属蛋白结合位点及独特的分子生物学结构。大部分哺乳动物细胞的生长、繁殖都需要基础水平的MT来完成金属调节过程。目前MT在肿瘤的发生、发展及预后治疗中的作用愈来愈受到各国学者的关注。并且有研究报道高水平MT 表达与肿瘤发展过程中的基因产物甲胎
蛋白相似[1]。 1 MT的分类及基本特性 哺乳动物MT有61个氨基酸,相对分子质量为6～7 kD，其中20个氨基酸为半胱氨酸,这样每一个MT分子就可以结合7～12个金属离子(主要为+2价金属离子)。 MT的生理作用主要是参与微量元素的储存、转运和代谢;拮抗电离辐射;清除自由基、拮抗脂质过氧化作用，对生物膜具有保护作用;对重金属具有解毒作用;与机体的生长发育、延缓衰老、中枢神经系统修复及某些疾病的发生有关[2-3]。 2 MT基因结构及其调控 动物的MT基因属多基因类，具有基本相似的结构。MT基因分为5侧翼区(5′-UT)、5′非翻译区(5′-UTR)、3个外显子、2个内含子、3′-UTR和3′端。3个外显子被2个内含子所分隔。MT基因在3′非翻译区均有一个典型的多腺苷酸信号序列AATAAA。比较人和鼠的MT基因
第19卷第5期2009年10月 皮革科学与工程LEATHER SC I ENCE AND ENG I N EER ING V ol 119,N o 15O ct 12009 文章编号:1004-7964(2009)05-0033-03 甲醛的检测方法与研究进展 胡逸飞,张新申* ,俞凌云 (四川大学制革清洁技术国家工程实验室,四川成都610065) 摘要:甲醛含量是环境监测与皮革工业的一项重要指标。本文综述了国内外近些年来常用的甲醛测定的方法的优 缺点及其实际应用。 关键词:甲醛;检测方法;皮革 中图分类号:TS 57 文献标识码:A 收稿日期:2008-09-05 第一作者简介:胡逸飞(1988-),男,新疆乌鲁木齐市人,本科生,专业:轻化工程。 *通讯联系人,张新申,教授,博士生导师,E-m a i:l zhangx -i nsheng @126.co m 。 Research Progress i n AnalysisM et hods for For mal dehyde H U Yi -fei ,Z HANG X in-s hen * ,YU L ing-yun (N ational Engineering Laboratory for Cle an T echno l ogy of L eather M anufact ure ,S ic huan Uni versit y,Che ngdu 610065,Chi na )Abstrac t :The content o f fo r ma l dehyde is a very i m po rtant i ndex i n env iron m entalm onitor i ng and l ea t her i ndustry .T he re -cent co mmon de ter m i nati ons of f o r m aldehyde i n the wo rl d are briefl y su mma rized and t he ir practical appli ca tions a re dis -cussed . K ey word s :for m aldehyde ;analysis m ethods ;leather 甲醛是日益受到重视的环境污染物之一,在我 国有毒化学品优先控制名单,甲醛居第二位[1] 。甲醛对人体有害,主要因为甲醛可以和人体内的蛋白质结合,改变蛋白质的内部结构并使其凝固,因而 具有杀伤力[2] 。因此建立易操作,精密度高的甲醛测定方法尤其重要。 1 分光光度法 111 酚试剂分光光度法 鲍军等[3] 采用酚试剂分光光度法测定人造板及其制品、木家具的微量甲醛释放量(干燥器法)。甲醛浓度在0~3.50mg /L 范围内,与吸光度呈线性关系,相关系数为0.9993。检测灵敏度是GB 18584、GB /T 17657乙酰丙酮分光光度法的5倍,显色过程耗时约为后者的1/5,样品测定结果与乙酰丙酮分光光度法相符合。尤其对于甲醛释放量不 大于115mg /L 的样品,酚试剂分光光度法测定结果 的重复性好于乙酰丙酮光度法,测定结果的相对标准偏差小于乙酰丙酮光度法。112 变色酸分光光度法 变色酸法是测定甲醛的较为成熟的分析方法,美国职业安全卫生研究所N I O SH 把其列为标准的 分析方法(N I O SH 方法3500)[4] 。甲醛在浓硫酸溶液中与变色酸作用形成紫色化合物,检出限为011mg /L 。其中当乙醛在017m g 以下时不干扰测定,量大时使溶液发黄,醇共存时不干扰测定;酚含量 为2L g 以上时测定结果偏低[5] 。Petreas M 等提出了改良变色酸法,以1%的亚硫酸钠溶液吸收甲醛,变色酸浓度改为5%,使该法在应用中更稳定、更灵敏。 113 分光光度法测定微量甲醛 崔成民等[6] 研究了分光光度法测定微量甲醛的方法,并对显色剂的使用条件进行了系统研究,得出显色剂用量为1100mL 以上时,甲醛显色溶液的吸光度值基本保持稳定,此方法在测定食品等固形物中的甲醛有很好的应用。114 AHMT 法 AHMT 法 [7]指空气中的甲醛与AHMT (4-氨基-
1208 肝素生物测定法
本法系比较肝素标准品（Ｓ）与供试品（Ｔ）延长新鲜兔血或兔、猪血浆凝 结时间的作用，以测定供试品的效价。
标准品溶液的制备 精密称取肝素标准品适量，按标示效价加灭菌注射用水 溶解使成每 1ml 中含 100 单位的溶液，分装于适宜的容器内，4～8℃贮存，经验 证保持活性符合要求的条件下，可在 3 个月内使用。
标准品稀释液的制备 试验当日，精密量取标准品溶液，按高、中、低剂量 组（dS3、dS2、dS1）用 0.9％氯化钠注射液配制成 3 种浓度的稀释液，相邻两浓度 的比值（r）应相等；调节剂量使低剂量组各管的平均凝结时间较不加肝素对照 管明显延长，一般以大于 1.5 倍空白血浆的凝固时间为宜。高剂量组各管的平均 凝结时间，用兔全血法者，以不超过 60 分钟为宜，其稀释液一般可制成每 1ml 中含肝素 2~5 单位，r 为 1：0.7 左右；用血浆复钙法者，以不超过 30 分钟为宜， 其稀释液一般可制成每 1ml 中含肝素 0.5~1.5 单位，r 为 1：0.85 左右；用活化 部分凝血活酶时间测定法（APTT 法）者，一般以不超过 90 秒为宜，其稀释液浓 度一般可制成每 1ml 含肝素 0.4～1.7 单位，r 为 1:0.85 左右，可根据实验情况 调整。
供试品溶液与稀释液的制备 按供试品的标示量或估计效价（AT），照标准 品溶液与稀释液的制备法制成高、中、低（dT3、dT2、dT1）3 种浓度的稀释液。相 邻两浓度之比值（r）应与标准品相等，供试品与标准品各剂量组的凝结时间应 相近。
血浆的制备 迅速收集兔或猪血至预先放有 109mmol/L 枸橼酸钠溶液的容 器中，枸橼酸钠溶液与血液容积之比为 1：9，边收集边轻轻振摇，混匀，室温 下 1500×g 离心不少于 15 分钟（g 为重力常数）。立即吸出血浆，并分成若干份 分装于适宜容器内，低温冻结贮存。临用时置 37±0.5℃水浴中融化，用两层纱 布或快速滤纸过滤，使用过程中在 4～8℃放置。血浆复钙法可使用兔或猪血浆； APTT 法使用兔血浆。
测定法 （1）兔全血法 取管径均匀（0.8cm×3.8cm 或 1.0cm×7.5cm）、清洁干燥的 小试管若干支，每管加入一种浓度的标准品或供试品稀释液 0.1ml，每种浓度不
金属硫蛋白的生理作用 张俊燕 （化学化工学院云南师范大学昆明650500） 摘要： 金属硫蛋白（MT）在1987年根据MT命名委员会规定，具有：低分子量，6000-7000道尔顿，含有60~63个氨基酸残基；高金属含量，每个蛋白质分子可结合7~12个金属离子；氨基酸特征组成，半胱氨酸的含量占23%~33%，不含芳香族氨基酸和组氨酸；独特的氨基酸序列结构，即半胱氨酸残基的分布有特征性分布的保守性很强；所有的半胱氨酸残基均为还原态出现，并以金属离子通过巯基结合，从而具有金属巯基化合物的光谱特性；具有金属硫醇簇结构。特征的蛋白质或多肽被称MT。 本文重点介绍金属硫蛋白在，清除自由基、解除重金属的毒素、抗辐射、调节机体内的微量元素等方面的生理作用。 关键词：金属硫蛋白、自由基、抗辐射、重金属、微量元素、生理作用。 引言： 一、金属硫蛋白简介 金届硫蛋白(metaHothioneins，MT)是一类富含金属与巯基的非酶蛋白，广泛存在于生物界它与“硬梆榔”的金属有着一种奇妙的亲缘关系．它能和许多金属元素结台成各种金属斑蛋白，所以又称为“重金属结台蛋白”。 二、金属硫蛋白的结构
现代生化丹1f『技术的应用．使研究者对MT 的分干结构有了较深捌的了解不管从何种生物悼中分离出来的MT，分子量6000~7000，比一般蛋白质的分子量低，为低分子量蛋白质哺乳动物的MT分子一般为61～62个氨基酸残基所组成的多肽链。其中含半胱氪酸20个，约占l／3；6～8个赖氪酸，7～10十丝氪酸在氨基酸末端是单一的乙酰甲硫氪酸在MT分子中，含有2个金属硫簇，分别螯合4个和3十二价金属离子。金属离子与半胱氪酸残基的琉基共价结台令人惊奇的是．MT 的20个半胱氨酸琉基均处于还原状态[1]。 三、金属硫蛋白的一般特征 经实验表明，金属硫蛋白具有很强抗热变性和抗蛋白酶消化作用，并且不宜失活，在0~4℃条件下可存活2-3年，在常温条件下也可保存1.5年[1]。 四、金属硫蛋白的生理作用 1、解除重金属的毒性： MT的巯基基团（-SH）能强烈螯合有毒金属汞、银、铅、镉、砷、铬、镍等[2, 3]，其中螯合铅的强度比锌大200倍，而螯合镉的强度又比铅大10倍，并可将之排出体外，从而使它们无法毒害人体，同时对体内锌等微量元素无影响。MT是目前临床是最理想的生物整合解毒剂。 2、清除体内自由基、防止机体衰老： MT是细胞中防御自由基伤害的一种重要机制，可藉由自由基的清除来达到防止DNA伤害的发生[4]；是体内清除自由基能力最强的一种，其清除自由基的能力约为SOD的1,000倍[5]，而也是谷胱甘（GSH）
空气净化器对甲醛净化效率的测试方法 集团企业公司编码：（LL3698-KKI1269-TM2483-LUI12689-ITT289-
空气净化器对甲醛净化效率的测试方法 国家空调设备质量监督检验中心王宏恩邓高峰唐冬芬王智超 摘要本文分析了室内甲醛的主要来源，介绍了常用的甲醛净化处理技术。为了评 价目前市场上的净化器对甲醛的净化效果，提出了环境舱检测方法，分析对比了 几种常用的甲醛检测技术，得出了检测甲醛时合理的组合方法。 关键词空气净化器甲醛净化效率测试方法 1室内甲醛的主要来源 随着室内装修的日益普及和密闭程度的增加，室内空气污染越来越严重，甲 醛(HCHO)是主要污染物之一。据统计，装修后1～6个月内，甲醛超标率居室内达 80%，会议室和办公室内接近100%；装修3年后，超标率仍可能达50%以上[1]，这 直接影响到人们的身体健康，世界各国对此都非常关注。在2004年的“致癌公 报”上，国际癌症研究中心(IARC)公布甲醛能引起鼻腔癌和鼻窦癌，并将甲醛列 为致癌物。长期接触低剂量甲醛可引起慢性呼吸道疾病、鼻咽癌、结肠癌、脑 瘤、月经紊乱、妊娠综合症、新生儿染色体异常、白血病、青少年记忆力和智力 下降，同时还会造成细胞核的基因突变、DNA单链内交连和DNA与蛋白质交连及抑 制DNA损伤的修复等严重后果。 自然界中的甲醛是甲烷循环中的一个中间产物，背景值很低，仅有几个 μg/m3的水平。城市空气中甲醛的年平均浓度大约是0.005～0.01mg/m3，一般不超 过0.03mg/m3。而新建楼房室内的污染水平波动于0.1mg/m3上下(WHO推荐的室内指 导限值)[2]。室内甲醛主要来源于以脲醛树脂为粘合剂的各种胶合板、刨花板、中
甲醛的基本知识及危害-CAL-FENGHAI-(2020YEAR-YICAI)_JINGBIAN
甲醛的基本知识及危害 甲醛分子的球棍模型 甲醛是一种无色，有强烈刺激型气味的气体。易溶于水、醇和醚。甲醛在常温下是气态，通常以水溶液形式出现。易溶于水和乙醇，35～40%的甲醛水溶液叫做福尔马林。据研究和使用证明：据研究和使用证明：晶体石膏灯有一种天然的负离子散播功能，可以有效清除室内甲醛等有害气体，净化室内空气。中科院经实验证实：小粒径负离子清除甲醛的有效率达%以上，长期使用达99%。 中文名称：甲醛 中文别名：福尔马林、甲醛水、蚁醛溶液 英文别名：Formalin，Formol ，Methanal solution ，Oxymethylene solution ，Methyl aldehyde solution 化学式：HCHO 分子空间构型：平面型 相对分子质量： CAS：50-00-0 EINECS号： 200-001-8
InChI： InChI=1/CH2O/c1-2/h1H2 性状 无色水溶液或气体。有刺激性气味。液体在较冷时久贮易混浊，在低温时则形成三聚甲醛沉淀。蒸发时有一部分甲醛逸出，但多数变成三聚甲醛。本品为强还原剂，在微量碱性时还原性更强。在空气中能缓慢氧化成甲酸。能与水、乙醇、丙酮任意混溶。 pH ～。相对密度(d2525)～。熔点-118℃，沸点℃。折光率(n20D)。闪点60℃。易燃。低毒，半数致死量(大鼠，经口)800mG/kG。其蒸气能强烈刺激粘膜。 储存 水溶液密封避光在16℃以上的温处保存，低温处不宜久贮。 用途 分析测定铵盐和氨基酸。显微分析中各种制剂的固定剂、消毒剂、杀菌剂、还原剂。 安全措施 贮于阴凉干燥处，远离火种、热源。与氧化剂、酸碱类等分储分运。皮肤(眼睛)接触，用流动清水冲洗。 灭火：雾状水、抗溶性泡沫、干粉、二氧化碳、砂土。
金属硫蛋白检测方法研究进展 梁 鹏，吴晓萍，廖爱琳 （广东海洋大学食品科技学院，湛江 524025） 作者：梁鹏（1985～ ），硕士研究生，研究方向：食品质量与安全。通讯作者：吴晓萍 摘 要：金属硫蛋白是一种富含金属和半胱氨酸的低分子蛋白质，主要包括A g、A u、B i、C d、H g、Z n等硫蛋白，具有在体内可被金属和其他因素诱导合成的生物学特性。本文综述了目前7种常用的金属硫蛋白检测方法。 关键词：金属硫蛋白；金属结合法；电化学法金属硫蛋白(Metallothionein,简称MT)是一类广泛存在于生物体内的低分子量（约6500D a）金属结合蛋白，富含半胱氨酸，又叫金属硫氨酸甲基内盐，能被金属诱导。主要存在于动物的肝脏、肾脏、胰腺和小肠中。近年来，很多实验表明，金属硫蛋白参与体内微量元素的储存、转运和代谢，具有拮抗电离辐射、清除自由基以及对重金属解毒的作用，还与机体生长发育、延缓衰老及某些疾病有关。到目前有几种方法已用于生物组织和体液中M T的定量，但尚无标准方法。本文重点综述7种方法，介绍其特点，有助于在进行有关研究时选择和建立适宜的检测方法。 1 金属结合法 金属结合法(Metal binding )主要基于MT对金属的高亲合力、且不同金属的亲合力具有差异性及其热稳定性而建立。主要通过测定M T结合金属—竞争性替换金属含量来检测M T中金属含量的增高，从而计算出MT的含量。 1973年，P i o t r o w s k i等首先建立了金属结合法(203H g-T C A法)用于测定组织中的M T。由于H g 2+在酸性环境下不仅可与M T结合而且还可置换其他金属离子(如p H=2.1时，分别有98％的H g 2+和1％的C d 2+与M T 结合)。因此，本法适用于在利用酸沉淀其他蛋白而将M T分离出来时的测定[1]。但此法的203H g的加入量极其重要，如加入量过小，反应体系中尚有未与203H g结合的M T，而导致测定结果偏低；相反，加入量过大, 则 203 H g呈游离状态或与不被T C A所沉淀的低分子量组分 相结合，又可使测定结果偏高。 张保林等[2]运用银饱和分析法结合原子吸收光谱(A A S)检测了兔肝Z n-M T，具体方法为：向含M T的溶液中加入过量的A g +，待反应完全后，再逐次加入血红蛋白，以结合剩余的A g +，加热使血红蛋白沉淀，与M T结合的A g +则完全存在于上清液中，通过A A S测定其中A g +含量，便可计算出M T的浓度。该方法与其他方法比较，不需要去除样品中共存的其它蛋白质和含S H基剂，可直接计算出M T含量，且不需特殊的仪器设备，操作简便，具有很高的重复性和准确性，该法检测的最低限为1μg/ml。 金属结合法具有一定的缺陷，如H g饱和法中H g + 除与M T结合外, 还与其他一些小分子量化合物结合；A g +不能置换已与M T结合的H g，且由于利用金属含量间接推算MT含量，特异性较差。 2 电化学法 电化学方法(Electrochemical )是利用巯基（-SH）在汞滴电极表面产生氧化还原反应出现的电位变化建立的，通过测定巯基以计算M T的含量。运用检测M T 的电化学方法有：示差脉冲极谱法(DPP)、微分脉冲极谱法、示差脉冲阳极溶出伏安法(DPASV) 和循环伏安法(CV)等。1979年Olafson等建立了示差脉冲极谱法[3]测定M T，检出限为10-8M，且不受分子中金属含量的影响。因此, 此法或许更能特异地反映M T而不是金属的量。1992年，Bebianno等人应用差分微分脉冲极谱法测定了贻贝组织中MT的浓度[4]；后来Bordin等通过改变体系的p H值，利用D D P方便的检出了多种形式的M T，并快速分析出还原型的M T；B e b i a n n应用微分脉 2010年第09期 No.09，2010 中国食物与营养Food and Nutrition in China
甲醛及其检测方法的研究进展 【摘要】甲醛（HCHO）是高挥发性有机化合物，是一种无色、具有强烈刺激性的气体。它是一种原生质毒。对眼部、呼吸道、致敏性和免疫、神经、内分泌系统均具有毒性，此外还有遗传、致癌和生殖毒性。甲醛污染主要来源于与人民生活密切相关的必须品的制造，如塑料、橡胶、脲醛泡沫、树脂、隔热材料、黏合剂、皮革、纺织、制药、汽车尾气等。近年来，随着新的装璜材料、家具、防腐剂、杀菌剂、化妆品等广泛使用，甲醛已成为重要污染物之一，严重影响人体健康，因此，甲醛的分析检测显得尤为重要。本文就近年来国内在食品、空气和水质等样品中甲醛的分析方法研究进展作一综述。 【关键词】甲醛；检测 甲醛广泛存在于环境中，对机体有诸多不利的影响。随着生活水平的提高和卫生意识的增强，由甲醛造成的室内空气、大气环境、公共场所空气、生活饮用水和食品等污染越来越受到人们的关注，因此对它的研究也较多。本文就甲醛污染的危害及检测方法作一综述。 1 甲醛的理化性质、污染来源及毒性 1.1甲醛的理化性质 甲醛又名蚁醛，分子式为HCHO，高挥发性有机化合物，是最简单的醛，分子质量30.03，常温下是一种无色、具有强烈刺激性的气体；溶点-92℃，沸点-19.5℃，相对密度0.815（-20℃，水=1）；易溶于水和乙醇等多种有机溶剂，35%~40%的甲醛水溶液称作“福尔马林”，常用作组织防腐剂。甲醛的化学性质很活泼，能和氢氰酸、亚硫酸氢钠、氨的衍生物（如2，4-二硝基苯肼、苯肼、羟胺等）以及醇类发生加成反应；经催化氢化，甲醛被还原成甲醇；甲醛可以被氧化剂氧化生成甲酸；它在浓碱的作用下，能发生自身的氧化还原作用，此即所谓的歧化反应［1］。 1.2甲醛的主要来源 大气中的甲醛主要来源于工业生产以及广泛运用的塑料、橡胶、脲醛泡沫、树脂、隔热材料、黏合剂、皮革、纺织、制药、汽车尾气等。室内环境中甲醛主要来源于用作室内装饰的胶合板、细木工板、中密度纤维板和刨花板等人造板材以及用人造板制造的家具；其它各类装饰材料，如贴墙纸、化纤地毯、泡沫塑料、塑料地板砖，油漆、涂料以及某些纺织品；厨房内使用的燃料液化气、煤气、木、煤等不完全燃烧后会产生甲醛和其它污染物；日常使用的化纤纺织品、化妆品、清洁剂、杀虫剂等日用品中也含有甲醛［2］。生活饮用水中的甲醛主要来源于所接触的输配水管、蓄水容器、供水设备和漆酚、环氧（酚醛）树脂为涂料，内衬等防护材料的溶出及环境水的污染［3］。食品中甲醛的主要来源为一些不法厂商向水产品中添加甲醛，以达到延长保存时间、改善口感的目的。 1.3甲醛的毒性 甲醛的毒性包括一般毒性和特殊毒性。一般毒性涉及对眼部、呼吸道、致敏性和免疫、神经、内分泌系统的影响；特殊毒性主要指遗传、致癌和生殖毒性［4］。 1.3.1甲醛的一般毒性 第一，甲醛对人体的急性毒作用，主要是对眼睛、皮肤、黏膜的刺激作用，引起眼痛、流泪、皮炎等症状。第二，甲醛是一种环境致敏原，接触高浓度甲醛溶液（2%）可引起皮肤过敏。同时，甲醛也可引起变态反应，主要是过敏性哮喘，大量接触时可引起过敏性紫癜。第三，甲醛具有一定的免疫毒性，可抑制机体某些免疫分子和免疫细胞的功能。第四，较高浓度甲醛的吸入能引起较强的神经毒性，如疲劳、记忆困难或性绪波动等。低浓度甲醛对接触者的短时记忆力、注意力、视感知、感知运动速度和手运动速度准确度等神经行为功能都有一定程度的影
国家物价局财政部 关于发布中央管理的卫生系统行政事业性收费项目及标准 的通知 价费字[1992]314号 卫生部： 根据中发［1990］16号《中共中央、国务院关于坚决制止乱收费、乱罚款和各种摊派的决定》的精神，对中央管理的卫生系统行政事业性收费进行了重新审定，经全国治理“三乱”领导小组同意，就有关规定通知如下： 一、卫生监督防疫收费。卫生监督防疫（包括食品卫生监督、公共场所卫生监督、劳动卫生监督、学校卫生监督、放射性同位素与射线装置防护监督、化妆品卫生监督和传染病防治等）收费按《卫生监督防疫收费管理办法》（附件一）执行。 二、药品审批监督检验费 （一）证件工本费根据国务院有关规定，卫生部印制、颁发《药品生产企业许可证》、《药品经营企业许可证》、《制剂许可证》，每证可收取工本费3元；考虑到证件发放过程中的损耗及有关费用支出，经省级物价、财政部门批准，省级卫生管理部门发放过程中可以适当提高收费标准，但最高不得超过10元。 （二）新药审批费新药审批（包括新药临床研究审批、生产审批和试生产转正式生产审批）收费按《新药审批收费标准》（附件二）执行。 （三）已生产药品注册登记费生产企业：每个品种20元； 医院制剂：每个品种2元。 （四）首次进口药品审批费每个品种50元。 （五）国外药品在中国注册费每种500至1000美元。 （六）麻醉药品、精神药物进出口准许证费每份100元。
（七）特殊化学品出口准许证费签发醋酸酐、乙醚、三氯甲烷三种化学品出口准许证，每份100元。 （八）药品检验费法定药品检验实行抽验制度，包括对药品生产企业、经营企业和医疗单位药品的抽验。药品的抽验由受检单位交纳检验费，抽验无论合格与否，均按《药品检验收费标准》（附件三）执行。 （九）新药技术复核审查检验费一类：600至800元；二类：500至700元；三类：300至500元；四、五类：200至300元。 （十）进口药品检验费按《进口药品检验收费标准》（附件四）执行。 （十一）出口药品检验费。出口药品检验按药品检验项目收费标准执行。 （十二）申请生产《中华人民共和国药典》、《卫生部药品标准》收载品种的审批费，每个品种250元。 生产省、自治区、直辖市药品标准收载品种的审批费，由省级物价部门会同财政部门制定。 三、新生物制品审批检验费。 （一）新生物制品审批费。申请新生物制品审批（包括申请人体观察审批、申请生产审批、试生产转正式生产审批）的单位，在提交申报资料的同时，应向卫生部药品审评委员会办公室交纳新生物制品审批费，收费标准见附件五。 （二）新生物制品检验费。研制单位在申请新生物制品人体观察或生产时，应向中国药品生产制品检定所交纳检验费。收费标准按附件六执行。 四、生物制品检验费按《生物制品检验收费标准》（附件七）执行。 生物制品检验机构利用受检单位的仪器设备，并由受检单位提供水、电、材料进行检验时，不得收取检验费，只收取每人每天20元劳务费；利用自带仪器设备或部分使用受检单位仪器设备的，在检验成本核算时应扣除受检单位所提供的仪器设备和水电材料费用，远程（单程200公里以外）抽样或检验的差旅费另行计收，但同一地区多家抽样或检验的差旅费应分摊，不得重复计算；远程样品的运输费，由被检单位支付。
生物和新医药类doc工程机械举荐项目汇编 北京技术交易促进中心 二零零八年十月
目录 生物和新医药1 No 1.项目名称：小肽血红素1 No 2.项目名称：猪肝金属硫蛋白的提取技术1 No 3.项目名称：治疗败血症及自身免疫性疾病的抗体药物1 No 4.项目名称：治疗NHL的抗体药物2 No 5.项目名称：药物纳米输送系统2 No 6.项目名称：心血管疾病干细胞临床治疗技术与产品3 No 7.项目名称：病原快速检测装置-分子马达微动力生物传感器3 No 8.项目名称：促分化抑增殖抗癌新药—CF 4 No 9.项目名称：生物发酵法番茄红素生产技术4 No 10.项目名称：壳聚糖的水溶性改性技术4 No 11.项目名称：维生素K2的合成5 No 12.项目名称：发酵法生产谷胱甘肽5 No 13.项目名称：酵母高密度发酵生产S-腺苷-L-蛋氨酸5 No 14.项目名称：细菌发酵法生产L-乳酸6 No 15.项目名称：治疗腰间盘突出的药酒6 No 16.项目名称：一种黑曲霉菌株及其在果胶酶固态发酵生产中的应用6 No 17.项目名称：口服新型缓控释制剂产业化关键技术平台7 No 18.项目名称：芍甘片7 No 19.项目名称：一种治疗支气管哮喘和过敏性鼻炎的复合物7 No 20.项目名称：治疗老年痴呆中药组合物8 No 21.项目名称：肿瘤抗体导向治疗新药8 No 22.项目名称：癌症基因治疗药物ZL-2 9 No 23.项目名称：伽马T细胞制剂9 No 24.项目名称：兽用狂犬病毒基因工程疫苗9 No 25.项目名称：治疗肾功能不全新药－硝克柳胺10 No 26.项目名称：类风湿性关节炎治疗药物－盐酸氯苯哌酮10 No 27.项目名称：抗焦虑药－布格呋喃11 No 28.项目名称：治疗脑卒中药物－DL 0108 11 No 29.项目名称：帕金森氏病和抗老年性痴呆治疗药物－FLZ 11 No 30.项目名称：降血脂药物－CCS 12 No 31.项目名称：治疗哮喘、过敏、变应性鼻炎的中药新药-Vams 12 No 32.项目名称：糖尿病治疗药物－SZ-A 12 No 33.项目名称：治疗艾滋病创新药物－V9722 13 No 34.项目名称：重组水蛭素13 No 35.项目名称：Ⅰ类抗艾滋病新药AEBL-2 14 No 36.项目名称：具有细胞凋亡促进活性的多肽15 No 37.项目名称：抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）的检测15 No 38.项目名称：Alport综合征的基因诊断试剂16 No 39.项目名称：潜在的肿瘤分子标记物——DD1-6基因16 No 40.项目名称：生物I类新药——肝癌多肽疫苗17 No 41.项目名称：乳腺癌患者手术、化疗后血清HER-2 ECD 水平变化——对乳癌患者预后具有临床意义17 No 42.项目名称：新抗骨质疏松复方中药17 No 43.项目名称：促神经再生复方中药18 No 44.项目名称：国家I类基因工程新药——抗血栓多肽18 No 45.项目名称：山香圆叶综合开发项目18