植物生理学实验科技论文题目逆境胁迫对植物生理生化指标的影响学号 104120122
姓名白雪洁
学院生命科学学院
专业、班级生科10C
指导教师王莎莎
云南师范大学教务处编印
逆境胁迫对植物生理生化代谢的影响
摘要：干旱、盐碱和低温是强烈限制作物产量的三大非生物因素,其中干旱造成的损失最大, 其损失超过其他逆境造成损失的总和。对植物产生伤害的环境称为逆境，又称胁迫。常见的逆境有寒冷、干旱、高温、盐渍等。逆境会伤害植物，严重时会导致植物死亡。逆境对植物的伤害主要表现在细胞脱水、膜系统受破坏，酶活性受影响，从而导致细胞代谢紊乱。有些植物在长期的适应过程中形成了各种各样抵抗或适应逆境的本领，在生理上，以形成胁迫蛋白、增加渗透调节物质（如脯氨酸含量）、提高保护酶活性等方式提高细胞对各种逆境的抵抗能力。以小麦幼苗为材料，设置对照组，探究了干旱胁迫下脯氨酸（pro）、谷胱甘肽(GSG、丙二醛(MDA、H2O2的含量变化以及抗氧化酶(POD、PPO活性的变化。结果表明：在干旱胁迫下，脯氨酸（pro）、谷胱甘肽(GSG、丙二醛(MDA、H2O2的含量相对于对照组均有较明显的上升趋势，POD和PPO活性也表现出较大水平的提高。
关键词：干旱胁迫,抗逆性，脯氨酸，丙二醛，样品，细胞膜透性，过氧化物酶活性，叶绿素，可溶性糖。谷胱甘肽；抗氧化酶；H2O2
引言：干旱是我国农业可持续发展面临的主要问题之一, 【1】干旱胁迫对植物的影响是一个复杂的生理生化过程，涉及到许多生物大分子和小分子植物细胞膜起调节控制细胞内外物质交换的作用，它的选择透性是其最重要的功能之一。【2】研究表明，游离的脯氨酸在植物细胞抵抗非生物胁迫过程中扮演着越来越重要的角色，许多新的生理功能也逐渐被发现，近几年来有关脯氨酸的研究倍受科学工作者
的关注【9】。干旱是一种最常见的胁迫，遇此逆境作物除进行气孔调节外，渗透词节也不夹为一种有效方法。原理是通过加强合成代谢，增加细胞内渗透物质浓度，降低渗透势，维持膨压和细胞正常生理功能。脯氨酸作为水溶性最大的氮基酸(162．3g· (100g。H 2O，25 oC具有较强水合能力，是理想的渗透介质。作物遇旱时它的大量积累有助于细胞或组织持水，防止脱水，故可视为作物对干早环境的一种保护性适应。已经证明了在逆境条件下脯氨酸的积累来抵抗植物对非生物胁迫的伤害，植物体内的抗氧化酶系统也能将伤害细胞的活性氧控制在可忍耐水平内，通过各种过氧化酶的协同作用，可以把细胞内产生的具有很强氧化活性的活性氧如氧负离子、H2O2等直接或间接地清除，防止了活性氧放大级联作用，保证了细胞内生命活动的正常进行。丙二醛（MDA）是由于植物官衰老或在逆境条件下受伤害，其组织或器官膜脂质发生过氧化反应而产生的，对干旱也具有抵抗作用。GSH作为生物体内主要的还原态硫之一，在生物体抵抗各种胁迫(冷害、干旱、重金属、真菌等的过程中起着重要的作用，其含量水平的高低与植物对各种环境胁迫的忍耐程度密切相关。近些年来，它在高等植物代谢过程中的生理作用，尤其是在植物抵御活性氧伤害过程中的作用及其与植物抗逆性关系的研究进展很快。前人研究进展植物在正常生长情况下, 活性氧的产生和清除处于动态平衡状态。当植物在逆境条件下( 如干旱胁迫生长时, 这种平衡被打破, 体内负责清除活性氧的抗氧化系统能力下降, 从而造成活性氧的大量积累, 并引发或加剧膜脂过氧化作用, 导致生物膜系统受损。过氧化物酶( POD 、多酚氧化酶（PPO）、过氧化物GSH(谷胱甘肽等能够有效地清除这些自由基, 是酶促防御系统的重要组成成分。人们根据这一理论对干旱胁迫下的许多作物如小麦【3-4】、大豆【5】、辣椒【6】、胡杨
【7】等逆境生理过程进行了研究。本实验切入点与其它作物相比, 小麦在干旱胁迫下具有独特的生存策略, 是一种公认抗逆性较强的作物, 利用干旱胁迫处理小麦幼苗, 测定其丙二醛( MDA 含量、GSH含量、脯氨酸含量、H2O2含量及 PPO、 POD 活性变化, 探讨干旱胁迫对小麦幼苗膜脂过氧化及酶保护系统的影响, 为进一步明确大麦抗旱的生理机理提供一定理论依据。
植物细胞膜对维持细胞的微环境和正常的代谢起着重要作用。在正常情况下，细胞膜对物质具有选择透性能力。当植物受到逆境影响时，如高温、干旱、盐渍、病原菌侵染后，细胞膜遭到破坏，膜透性增大，从而使细胞内的电解质外渗，以至于植物细胞侵提液的电导率增大。膜透性增大的程度与逆境胁迫强度有关，也与植物抗逆性的强弱有关。
1 材料与方法
1.1 种子发芽率的测定的材料培养和处理
品种为晴3或鲁玉13的玉米种子或小麦种子（购于西山种子公司），用
0.1%HgCL2消毒10min后，用蒸馏水漂洗干净，再用蒸馏水于26℃下吸胀12h后即可用于实验。
1.2 主要试剂：0.1% HgCl2 ，TTC，3%磺基水杨酸（SSA），冰乙酸，茚三酮，PBS(pH=7.8 ，0.6%TBA（用0.6% TCA配制）， PBS (pH=6.8，内含1mMHA，
0.1%Ti(SO42 [用20%(v/v H2SO4配制] ，PBS, （pH=5.8,内含0.１mmol/ LEDTA, 1%PVP）， POD反应混合液（10 mmol/L愈创木酚，5 mmol/L H2O2,用PBS溶
解），PPO反应混合液（ 20 mmol/L邻苯二酚，用PBS溶解）5%三氯乙酸，PBS (pH=7.7 ，4 mM DTNB (用0.1M pH=6.8PBS现配。主要仪器：分光光度仪，离心机，试管，微量加样器，研钵等。
1.3 余下实验材料培养和处理
小麦种子吸胀12h，在湿润滤纸上培养7天，正常组即对照组继续正常培养，干旱组即实验组再干旱处理五天后用于实验。
2方法
2.1 种子发芽率的测定
所采用的种子发芽率的测定方法是曙红染色法和TTC染色法。凡是有生命活力的种子胚部，在呼吸作用过程中都有氧化还原反应，而无生命活力的种子胚则无此反应。当TTC渗入种胚的活细胞内，并作为氢受体被脱氢辅酶（NADH2或NADPH2）上的氢还原时，便由无色的TTC变为红色的TTF【8】。用曙红染色的，凡是全部着色或胚已着色的种子表示失去了生活力,播后不能发芽，生活力强的种子是不会着色的,因为活细胞具有半透性膜,可防止染料分子通过而不着色，死亡细胞,其壁膜失去半透性,染料分子易进入,使原生质着色。
各取50粒吸胀的小麦种子→沿胚的中心线切成两半（严格区分两个半粒），进行下列实验：其中50个半粒进行TTC染色（30℃水浴 20 min）; 另50个半粒进行曙红染色（室温染色10 min）。根据两种方法的染色情况，分别计算发芽率。
2.2 脯氨酸含量的测定
用茚三酮法测定脯氨酸含量，在酸性条件下，茚三酮与脯氨酸反应生成红色化合物，在520nm下有最大吸收值。【13】分别取0.1 g实验组和对照组的胚芽鞘→加入3 mL 3%磺基水杨酸（SSA）和少许石英砂→充分研磨→用2 mL 3% SSA洗研钵→5000 rpm离心10 min →上清液定容至5 mL。上清液各2 mL →分别加入2 mL 冰乙酸和2 mL茚三酮试剂→煮沸15 min→冷却后→5000 rpm离心10 min →分别测定A520。
2.3 MDA含量
用硫代巴比妥酸法测定丙二醛含量【18】。
分别取0.1 g实验组和对照组→加入3 mL 50mM PBS (pH=7.8和少许石英砂→充分研磨→用2 mL PBS洗研钵→5000 rpm离心10 min →上清液定容至5 mL。
测定：分别取上清液各2 mL →加入0.6%TBA（用0.6% TCA配制） 2 mL→煮沸12 min→冷却后→5000 rpm离心10 min →分别测定OD450和OD532.
计算公式：OD450=C1×85.4
OD532= C1×7.4+155000×C2
求解方程得：C1/（mmol/L）=11.71 OD450
C2/（mol/L）=6.45 OD532- 0.56OD450,式中，C1为可溶性糖的浓度，C2为MDA 的浓度。
2.4 抗氧化酶活性的测定
用愈创木酚法测定POD活性，用邻苯二酚法测定PPO活性。在有过氧化氢存在的条件下过氧化物酶能使愈创木酚氧化，生成茶褐色物质，可用分光光度计测量其含量，进而计算POD的活性。多酚氧化酶能使邻苯二酚氧化生成醌，用比色法测量其产物的形成，进而计算出PPO的活性。
POD测定：取POD反应混合液（10mmol/L愈创木酚，5 mmol/L H2O2,用PBS溶解）3.00 ml，加入酶液100 ml（空白调零用PBS取代），立即记时，摇匀，读出反应3 min时的A470。
PPO测定：取PPO反应混合液（ 20 mmol/L邻苯二酚，用PBS溶解）2.8 ml，加入酶液0.2 ml（空白调零用PBS取代），立即记时，摇匀，读出反应 2 min时的
A410。
计算公式：POD activities = (mmol.g-1FWmin-1
PPO activities = (U.g-1FW
2.5 H2O2含量测定
H2O2提取：分别取0.5 g实验组和对照组→加入3 mL 50 mM PBS (pH=6.8，内含1mM HA和少许石英砂→充分研磨→用2 mL PBS洗研钵→5000 rpm离心10 min →上清液定容至5 mL。
测定：分别取上清液各3 mL →加入0.1%Ti(SO42 [用20%(v/v H2SO4配制] 1 mL→摇匀→ 5000 rpm离心10 min → OD410
计算公式：H2O2 content = (mmol.g-1FW
样品 TCC方法署红染色法
50粒小麦种子2 35粒具生命力 38粒具生命
力
50粒玉米种子1 36粒具生命力 32粒具生命
力
3、结果与分析。
3.1种子发芽率的测定
分别计算两种方法的发芽率：
玉米：TTC法中， 36／50=72%；曙红染色法中，32／50=64%。
小麦：TTC法中， 35／50=70%；曙红染色法中，38／50=76%
3.2脯氨酸含量的测定
实验组：A520=0.088, 对照组：A520=0.060，
计算公式：Pro content=(mol.g-1FW
其中，V显=6ml，V总=5ml，V用=2ml，520=3.24mol-1.cm-1,L=1cm,W=0.1g. 计算结果：实验组脯氨酸含量为4.074mol.g-1FW，对照组脯氨酸含量为
2.777mol.g-1FW.
表一 Pro正常组和实验组的A520和Pro content 干旱胁迫正常
A520=0.088
Procontent=4.074(μmol.g-1FW A520=0.060
Procontent =2.777(μmol.g-1FW
由上表可知，干旱胁迫下，脯氨酸的量是正常值的1.47倍，由此可以得到，干旱胁迫会造成脯氨酸的积累。但是，植物合成、累积及代谢是一个受非生物胁迫的一个过程，因此，脯氨酸的积累可能是生物受胁迫的一个信号。当植物处于干旱条件下时，为了保护植物对干旱逆境的反应，在干旱胁迫下，脯氨酸的质量分数会急剧上升。而脯氨酸是水溶性最大的氨基酸，这表明它具有易于水合的趋势或具有较强的水合能力。它的增加可能是植物对干旱胁迫的一种保护性反应。
3.3、MDA含量
测得的结果如下表所示：
OD450 OD532
实验组 1.500A 0.454A
对照组0.380A 0.201A
计算公式：OD450=C1×85.4
OD532= C1×7.4+155000×C2
求解方程得：C1/（mmol/L）=11.71 OD450
C2/（mol/L）=6.45 OD532-0.56OD450,式中，C1为可溶性糖的浓度，C2为MDA 的浓度。
最后计算得出浓度如下表：
实验组对照组
C1/（mmol/L）17.565 4.446
C2/（mol/L） 2.088 1.084
由上表可知，干旱胁迫下，丙二醛的浓度是正常情况下得2倍，因此，在干旱胁迫也会造成MDA的积累，MDA的最大特点是对细胞质膜和细胞中的许多物质均有很强的破坏作用，因此，植物组织可能是通过产生并积累MDA等对细胞有害物质，进而破坏植物组织，使植物在逆境坏境中生长不好。
3.4、抗氧化酶的测定
POD活性：实验组为85.51 U.g-1FW，对照组为40.73 U.g-1FW.
PPO活性：实验组为4.385×10-4 mmol.g-1FWmin-1，
对照组为4.002×10-4 mmol.g-1FWmin-1。
表三正常组和实验PPO和POD不同时间所测得值PPO和POD
正常干旱胁迫
PPO A410=0.115（1 min20S）PPO A410=0.126（1 min20S）
POD A470= 1.16（1min20S）POD A470=2.457（1 min20 s）
PPO activities =4320(U.g-1FW PPO activities = 4737(U.g-1FW PODactivities=807.4(mol.g-1FWmin-1PODactivities=1710.2(mol.g-1FWmin-1
以上数据是通过以下方程计算而得
(mol.g-1FWmin-1
(U.g-1FW
由上表可知，在干旱胁迫下，也会造成PPO和POD的积累。抗氧化酶的主要作用是消除ROS对植物的伤害，使抗氧化酶与ROS处于一个动态平衡。在干旱胁迫下，抗氧化酶总体增加，说明，这一个动态平衡体系被打破，使植物不能消除ROS 对自身的伤害，因而，逆境下植物生长不好。
3.5、 H2O2 的测定
表五正常组和实验组H2O2的A410和H2O2 content
正常干旱胁迫
A410=0.623 A410=1.781
H2O2content=10.09(μmol.g-1FW H2O2 content=28.86(μmol.g-1FW
以上H2O2 content是通过以下公式计算而得：
(mol.g-1FW
由上表可知，干旱胁迫下，也会造成过氧化氢的积累。过氧化氢是植物体内重要的代谢产物，其积累对细胞具有氧化破坏作用，其含量的高低，一定程度上反映了CAT活性的高低。因此，在干旱胁迫下，使PPO和POD的积累，MDA的积累造成过氧化氢在植物体内的积累，从而破坏了细胞的氧化作用，使植物不利于在逆境中生长。
4 小结与讨论
逆境会伤害植物，严重时会导致植物死亡。逆境对植物的伤害主要表现在细胞脱水、膜系统受破坏，酶活性受影响，从而导致细胞代谢紊乱。从实验中我们可以看到在干旱胁迫处理下，引起的一系列生理生化指标的差异性变化，相比于未作处理的小麦,经过干旱胁迫处理的小麦色素浓度明显增大，脯氨酸含量积累，也会造成过氧化氢的积累，抗氧化酶积累，MDA含量积累。此次实验，实验现象相对较明显，实验结果也很符合植物抗性的机理，PPO与POD的含量从实验结果来看是明显积累了，说明经过干旱胁迫后，该植物对干旱胁迫作出了有效地相应。此次实验的不足之处在于在计算实验数据时，有时不会灵活的运用公式，或实验数值不准确，导致实验结果会有差异，得到实验结果后，不能以一种很明显的形式表现出来，所以做出来的科技论文有许多的不足之处。植物逆境胁迫对于农业生产有着重要的研究意义，对于植物逆境胁迫还有许许多多的研究方向，从科研意义和应用方面都有潜在的研究价值。
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致谢
本论文从立题到论文撰写整个过程都是在指导教师王莎莎的悉心指导下完成的。特别是对于实验过程中出现的问题的耐心指导与讲解。在此，感谢老师的悉心指导与
帮助，让我从知识上和精神上都受益匪浅。也要感谢与我一起做实验的小杨同学和其他三位小组成员，我们一起做实验，合作的很成功，一起互相学习，互相讨论，一起解决问题。我将会以更认真的更严谨的科学态度，对待以后的科学研究来表达我对我的指导老师和我的同学们的诚挚谢意。
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11．某植物制造100g干物质消耗了75kg水，其蒸腾系数为 A．750 B．75 C．7．5 D．0．75 12．下列蛋白质中，属于植物细胞壁结构蛋白的是 A．钙调蛋白B．伸展蛋白C．G蛋白D．扩张蛋白 13．在植物的光周期诱导过程中，随着暗期的延长 A．Pr含量降低，有利于LDP开花 B．Pfr含量降低，有利于SDP开花C．Pfr含量降低，有利于LDP开花D．Pr含量降低，有利于SDP开花 14．根据花形态建成基因调控的“ABC模型”，控制花器官中雄蕊形成的是A．A组基因B．A组和B组基因 C．B组和C组基因D．C组基因15．未完成后熟的种子在低温层积过程中，ABA和GA含量的变化为 A．ABA升高，GA降低 B．ABA降低，GA升高 C．ABA和GA均降低 D．ABA和GA均升高 二、简答题：16—18小题，每小题8分，共24分。 16．把一发生初始质壁分离的植物细胞放入纯水中，细胞的体积、水势、渗透势、压力势如何变化? 17．简述生长素的主要生理作用。 18．简述韧皮部同化物运输的压力流动学说。 三、实验题：19小题，10分。 19．将A、B两种植物分别放置在密闭的光照生长箱中，定期抽取生长箱中的气体样品，分析其中的C02含量。以C02含量对光照时间作图，得到下列曲线图。据图回答： (1)分析图中曲线变化的原因。 (2)推测两种植物的光合碳同化途径。 (3)请用另一种实验方法验证你的推测。
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? C. 呼吸链各组分按特定的位置排列在线粒体内膜上 ? D. H +返回膜内时可以推动ATP 酶合成ATP 纠错 得分：0 知识点： 6.2 生物氧化(下) 展开解析 答案A 解析 3. (5分) ? A. 氢键断裂 ? B. 相对分子质量变小 ? C. 生物学性质丧失 ? D. 亚基解聚 纠错 得分：0 知识点：1.4 蛋白质结构与功能的关系 展开解析 答案B 解析 4. (5分) ? A. 核糖相同，部分碱基不同 ? B. 碱基相同，核糖不同 ? C. 碱基不同，核糖相同 下列何种变化不是蛋白质变性引起的？（ ） RNA 和DNA 彻底水解后的产物（ ）。
? D. 碱基不同，核糖不同 纠错 得分：0 知识点： 9.1 核苷酸代谢(上) 展开解析 答案D 解析 5. (5分) ? A. 经磷酸甘油穿梭系统进入线粒体氧化 ? B. 以上都对 ? C. 经苹果酸穿梭系统进入线粒体氧化 ? D. 使丙酮酸还原为乳酸 纠错 得分：0 知识点：5.2 糖代谢(中) 展开解析 答案B 解析 6. (5分) ? A. 脱氢，水化，再脱氢，水化 ? B. 脱氢，水化，再脱氢，硫解 糖酵解过程中NADH+H + 的去路（）。 脂酰CoA 的β-氧化过程顺序是（ ）。
2.1.8转基因植株在盐胁迫下的超氧化物歧化酶(SOD)活性测定 将转基因植株与非转基因对照植株继代于含有0.5% NaCl的MS固体培养上进行胁迫培养，培养条件为27±1℃，每天13 h、3000 lux光照。胁迫培养4 w后，取其叶片测定其SOD 活性，每个样品设3次重复，求其平均数，并进行多重比较。 2.1.8.1主要试剂及配方 （1）0.1 mol/l pH 7.8磷酸钠（Na2HPO4-NaH2PO4）缓冲液 A液（0.1 mol/l Na2HPO4溶液）：称取Na2HPO4·12H2O 7.163 g，用少量蒸馏水溶解后定容至200 ml，4℃冰箱中保存备用； B液（0.1 mol/l NaH2PO4溶液）：称取NaH2PO4·2H2O 0.780 g，用少量蒸馏水溶解后定容至50 ml，4℃冰箱中保存备用； 取上述A液183 ml与B液17ml充分混匀后即为0.1 mol/l pH 7.8的磷酸钠缓冲液，4℃冰箱中保存备用。 （2）0.026 mol/l甲硫氨酸（Met）磷酸钠缓冲液 称取甲硫氨酸（C5H11NO2S）0.388 g，用少量0.1 mol/l pH 7.8的磷酸钠缓冲液溶解后，再用相同磷酸钠缓冲液定容至100 ml，现用现配，4℃冰箱中保存可用1～2 d。 （3）7.5 × 10-4 mol/l NBT溶液 称取NBT（C40H30Cl2N10O6）0.153 g，用少量蒸馏水溶解后，定容至250 ml，现用现配，4℃冰箱中保存可用2～3 d。 （4）含1.0 μmol/l EDTA的20 μmol/l核黄素溶液 A液：称取EDTA 0.003 g，用少量蒸馏水溶解； B液：称取核黄素0.075 g，用少量蒸馏水溶解； C液：合并A液和B液，定容至100 ml，此溶液即为含0.1 mmol/l EDTA的2 mmol/l 核黄素溶液，避光保存（可用黑纸将装有该液的棕色瓶包好），4℃冰箱中可保存8～10 d，当测定SOD酶活时，将C液稀释100倍，即为含1.0 μmol/l EDTA的20 μmol/l核黄素溶液。 （5）含2% PVP的0.05 mol/l pH7.8磷酸钠缓冲液 取0.1 mol/l pH7.8的磷酸钠缓冲液50 ml，加入2 g PVP（聚乙烯吡咯烷酮），充分溶解后移入100 ml容量瓶中用蒸馏水定容至刻度，充分混匀，4℃冰箱中保存备用。 2.1.8.2提取及测定方法 （1）称取1.0 g样品叶片于预冷的研钵中，加入4 ml预冷的提取介质（含2% PVP的0.05 mol/l pH7.8磷酸钠缓冲液），冰浴研磨匀浆，转入10 ml离心管，并用提取介质定容至
植物生理学与生物化学国家重点实验室中科院光合作用与环境分子生理学重点实验室 植物基因组学国家重点实验室 中科院分子发育生物学重点实验室 联合学术交流会日程 会议地点：中央民族干部学院（百望山南，见附图）一号楼三层报告厅会议时间：2005年7月5日（星期二） 时间安排： 8:50 交流会开始，简单介绍交流会的安排 （每个报告20分钟，讨论交流10分钟） 8:55 中科院院士匡廷云先生讲话 9:00 ~ 10:30 学术报告1 ~ 3（报告人员和题目见附件） 10:30 休息 10:40 ~ 12:10 学术报告4 ~ 6 12:10 中餐（一层清真自助餐厅，二层自助餐厅） 14:00 ~ 16:00 学术报告7 ~ 10 16:00 休息 16:10-17:40 学术报告11 ~ 13 17:40 自由发言、点评 18:00 晚餐（一层清真自助餐厅，二层自助餐厅） 20:00 会议结束
会议地点
学术会议报告人员及报告题目 主持人：张文正（植物生理学与生物化学国家重点实验室） 1、9:00—9:30 毛同林（植物生理学与生物化学国家重点实验室） 两种拟南芥65kDa微管结合蛋白的功能分析 2、9:30—10:00 韩广业（中科院光合作用与环境分子生理学重点实验室） 光系统II放养复合物的光组装研究 3、10:00—10:30 杨春英（中科院分子发育生物学重点实验室） The VCO1 Gene May Encode a Eukaryotic MutH That Is Required for Homologous Recombination and DNA Mismatch Repair in Arabidopsis Mitochondria 休息（10:30—10:40） 主持人：（中科院光合作用与环境分子生理学重点实验室） 4、10:40—11:10 郑文光（植物基因组学国家重点实验室） Genetics dissection of the Jasmonate-signaled defense response in Arabidopsis 5、11:10—11:40 夏然（植物生理学与生物化学国家重点实验室） ROR1 encoding a replication protein A2 is required for maintaining epigenetic gene silencing and regulating the development of root and shoot meristems in Arabidopsis 6、11:40—12:10 王晓华（中科院光合作用与环境分子生理学重点实验室） Imaging vesicle trafficking in living pollen tube with evanescent wave microsopy 午餐（12:10—14:00） 主持人：（中科院分子发育生物学重点实验室） 7、14:00—14:30 陈艳红（中科院分子发育生物学重点实验室） The AtMPTG1 Gene Is Required for Micropylar pollen tube Guidance in Arabidopsis and Encodes a Nuclear Protein
植物生理学试题及答案 一、名词解释(每题3分，18分) 1. 渗透作用 2. 生物固氮 3. 叶面积指数 4. 抗氰呼吸 5. 源与库 6. 钙调素（CaM） 二、填空（每空0.5分，10分） 1. 蒸腾作用的途径有、和。 2. 亚硝酸还原成氨是在细胞的中进行的。对于非光合细胞，是在中进行的；而对于光合细胞，则是在中进行的。 3. 叶绿素与类胡萝卜素的比值一般是，叶绿素a/b比值是：c3植物为，c4植物为，而叶黄素/胡萝卜素为。 4. 无氧呼吸的特征是，底物氧化降解，大部分底物仍是，因释放 。 5. 类萜是植物界中广泛存在的一种，类萜是由组成的，它是由经甲羟戌酸等中间化合物而合成的。 6. 引起种子重量休眠的原因有、和。 三、选择题（每题1分，10分） 1. 用小液流法测定植物组织水势时，观察到小液滴下降观象，这说明 A.植物组织水势等于外界溶液水势 B.植物组织水势高于外界溶液水势 C.植物组织水势低于外界溶液水势 D.无法判断 2. 植物吸收矿质量与吸水量之间的关系是 A.既有关，又不完全一样 B.直线正相关关系 C.两者完全无关 D.两者呈负相关关系 3. C4植物CO2固定的最初产物是。 A.草酰乙酸 B.磷酸甘油酸 C.果糖—6—磷酸 D.核酮糖二磷酸 4. 在线粒体中，对于传递电子给黄素蛋白的那些底物，其P/O比都是。 A.6 B.3 C.4 D.2 5. 实验表明，韧皮部内部具有正压力，这压力流动学说提供发证据。 A.环割 B.蚜虫吻针 C.伤流 D.蒸腾 6. 植物细胞分化的第一步是。 A、细胞分裂 B、合成DNA C、合成细胞分裂素 D、产生极性 7. 曼陀罗的花夜开昼闭，南瓜的花昼开夜闭，这种现象属于。 A、光周期现象 B、感光运动 C、睡眠运动 D、向性运动 8. 在影响植物细胞、组织或器官分化的多种因素中，最根本的因素是。 A.生长素的含量 B.“高能物质”A TP C.水分和光照条件 D.遗传物质DNA 9. 在植物的光周期反应中，光的感受器官是 A. 根 B.茎 C.叶 D.根、茎、叶 10. 除了光周期、温度和营养3个因素外，控制植物开花反应的另一个重要因素是 A.光合磷酸化的反应速率 B.有机物有体内运输速度 C.植物的年龄 D.土壤溶液的酸碱度 四、判断题（每题1分，10分） 1、在一个含有水分的体系中，水参与化学反应的本领或者转移的方向和限度也可以用系统中水的化学势来反映。 2、植物吸收矿质元素最活跃的区域是根尖的分生区。
小黑豆相关生理指标测定 1.表型变化：鲜重、株高、主根长和叶面积 鲜重：取处理好的植株，擦干根和叶表面水分，测量整株植物的重量，每个测6个重复。 株高：取处理好的植株，测量从根和茎分隔处到植株最高点的高度，记录，每个测6个重复。 主根长：取处理好的植株，测量从根和茎分隔处到主根最远点长度，记录，每个测6个重复。 叶面积：取处理好的植株，选择第二节段的叶片，测量叶面积，叶面积测量方法是测每个叶片最宽处长度作为叶的长，测叶片最窄处长度作为叶的宽，叶片长和宽的乘积即为叶表面积。每个测6个重复。 2.总蛋白、可溶性糖、丙二醛（MDA）和H2O2含量测定 样品处理：取0.5g样品（叶片要去除叶脉、根要先用清水清洗干净），速在液氮中冻存，在遇冷的研钵中加液氮研磨，然后加入1.5ml的Tris-HCl（pH7.4）抽提，将抽提液转移到2ml的EP管中，于4℃，12000rpm离心15min，取上清，保存在-20℃下，上清液可用于总蛋白、丙二醛（MDA）、可溶性糖和H2O2含量测定。 总蛋白测定（Bradford法）：样品反应体系（800ul H2O+200ul Bradford+5ul 样品），空白对照为（800ul H2O+200ul Bradford）。测定后带入标准曲线Y=32.549X-0.224(Y代表蛋白含量，X代表OD595)，计算得出蛋白含量。 可溶性糖测定：样品反应体系（1ml蒽酮+180ul ddH2O+20ul样品提取液）；空白对照（1ml蒽酮+180ul ddH2O），测定OD625后带入标准曲线：Y=0.0345X+0.0204(Y代表OD625，X代表可溶性糖含量（ug）) 蒽酮配方：称取100mg蒽酮溶于100ml稀硫酸（76ml浓硫酸+30mlH2O）.注意：浓硫酸加入水中时，一点一点递加，小心溅出受伤。 丙二醛（MDA）测定：在酸性和高温条件下，丙二醛可与硫代巴比妥（TBA）反应生成红棕色的3,5,5-三甲基恶唑2,4-二酮，在532nm处有最大吸收波长，但该反应受可溶性糖的极大干扰，糖与TBA的反应产物在532nm处也有吸收，但其最大吸收波长在450nm处。采用双组分分光光度法，可计算出MDA含量。MDA的计算公式为：MDA（umol/L）=6.45OD532-0.56OD450. 反应体系为：400ul 0.6%TBA+350ul H2O+50ul样品，80℃水浴10min后，测OD532和OD450。对照用Tris-HCl. 0.6%TBA配方：称取硫代巴比妥0.6g，溶于少量1M NaOH中，待其完全溶解后用10%TCA（称取10gTCA三氯乙酸，溶于100ml蒸馏水中，待其溶解即可）定容至100ml。 H2O2测定（二甲酚橙法）：样品反应体系（82ul溶液A+820ul溶液B （A:B=1:10）+150ul样品提取液），30℃水浴30min，测OD560。标准曲线为:Y=0.01734X-0.0555(Y代表OD560，X代表H2O2含量)
农学门类联考 植物生理学与生物化学 植物生理学 一、单项选择题：l～15小题，每小题1分，共15分。下列每题给出的四个选项中，只有一个选项是符合题目要求的。 1. G-蛋白是一类具有重要生理调节功能的蛋白质，它在细胞信号转导中的作用是 A. 作为细胞质膜上的受体感受胞外信号 B. 经胞受体激活后完成信号的跨膜转换 C. 作为第二信号 D. 作为蛋白激酶磷酸化靶蛋白 2. 植物细胞进行无氧呼吸时 A. 总是有能量释放，但不一定有CO2释放 B. 总是有能量和CO2释放 C. 总是有能量释放，但不形成ATP D. 产生酒精或乳酸，但无能量释放 3. 以下关于植物细胞离子通道的描述，错误的是 A. 离子通道是由跨膜蛋白质构成的 B. 离子通道是由外在蛋白质构成的 C. 离子通道的运输具有一定的选择性 D. 离子通道的运输只能顺电化学势梯度进行
4. C3植物中，RuBp羧化酶催化的CO2固定反应发生的部位是 A. 叶肉细胞基质 B. 叶肉细胞叶绿体 C. 维管束鞘细胞机制 D. 维管束鞘细胞叶绿体 5. 细胞壁果胶质水解的产物主要是 A. 半乳糖醛酸 B. 葡萄糖 C. 核糖 D. 果糖 6. 叶片衰老过程中最先解体的细胞器是 A. 高尔基体 B. 内质网 C. 叶绿体 D. 线粒体 7. 某种长日植物生长在8h光期和16h暗期下，以下处理能促进其开花的是 A. 暗期中间用红光间断 B. 光期中间用黑暗间断 C. 暗期中间用逆红光间断 D. 按其中间用红光-远红光间断 8. 在其它环境条件适宜时，随环境温度升高，植物光和作用的光补偿点 A. 下降 B. 升高 C. 不变 D. 变化无规律 9. C4植物光和碳同化过程中，从叶肉细胞通过胞间连丝运输到维管束鞘细胞的C4-二羧酸是 A. 天冬氨酸或草酰乙酸 B. 草酰乙酸或苹果酸
植物生理生化作业题参 考答案
东北农业大学网络教育学院 植物生理生化网上作业题参考答案 第一章参考答案 一、名词解释 1．蛋白质一级结构：多肽链中氨基酸种类和排列顺序。 2．简单蛋白：水解时只有氨基酸的蛋白质。 3．结合蛋白：水解时不仅产生氨基酸还产生其他化合物，即结合蛋白质由蛋白质和非蛋白质部分组成，非蛋白质部分成为附因子。 4．盐析：在蛋白质溶液中加大量中性盐使蛋白质沉淀析出的现象。 5．天然蛋白质受到某些物理或化学因素影响，使其分子内部原有的空间结构发生变化时，生物理化性质改变，生物活性丧失，但并未导致蛋白质一级结构的变化，该过程称为蛋白质变性。 二、填空题 1．零负正 2．两条或两条以上三级 3．α-螺旋、β-折叠、β-转角 4．碱基磷酸戊糖 5．超螺旋 三、单项选择题 3. B 四、多项选择题 1．ABCD 2．AD 五、简答题 1．简述RNA的种类及功能。 答： RNA: 包括mRNA：信使RNA，蛋白质合成的模版。 tRNA：转运RNA，蛋白质合成过程中运转氨基酸的。 rRNA: 核糖体RNA，合成蛋白质的场所。 2．简述蛋白质的二级结构及其类型。
答：蛋白质的二级结构是指蛋白质多肽链本身折叠、盘绕而形成的局部空间结构或结构单元。如α-螺旋、β-折叠、β-转角、自由回转等。 3．比较DNA 和RNA化学组成和结构的主要区别。 （1）构成DNA 的碱基为A、T、G、C；而RNA 的碱基为A、U、C、G； （2）构成DNA 的戊糖是β-D-2-脱氧核糖；而构成RNA 的戊糖为β-D-核糖。 （3）DNA 的结构是由两条反向平行的多聚核苷酸链形成的双螺旋结构；而RNA 的结构以单链为主，只是在单链中局部可形成双链结构。 第二章参考答案 一、名词解释 1．达到最大反应速度一半时的底物浓度，叫米氏常数。 2．只有一条多肽链的酶叫单体酶。 3．由几个或多个亚基组成的酶。 4．与酶蛋白结合较松驰的辅因子。 5．与酶蛋白结合牢固的辅因子。 二、填空题 1．绝对专一性、相对专一性立体专一性 2．酶蛋白辅因子 三、单项选择题 1．B 2．C 3．D 四、多项选择题 1．A B C 2．D EK 五、简答题 1．酶不同于其他催化剂的特点有哪些？ 答：酶所催化的反应条件都很温和（常温、常压下）； 酶催化据有高效性； 酶催化具有专一性； 酶的催化活性可控制。 六、论述题 1．论述影响酶促反应速度的因素。 答：底物浓度；酶浓度；温度；pH影响；抑制剂影响（竞争性抑制，非竞争性抑制；不可逆抑制）；激活剂影响。 第三章参考答案
逆境胁迫对植物质膜透性的影响（电导率法） 【实验目的】 1.学习电导仪法测定膜相对透性的方法。 2.理解逆境对植物膜透性的影响。 【实验原理】 植物细胞膜对维持细胞的微环境和正常的代谢起着重要的作用。在正常情况下，细胞膜对物质具有选择透性能力。 当植物受到逆境影响时，如高温或低温，干旱、盐渍、病原菌侵染后，细胞膜遭到破坏，膜透性增大，从而使细胞内的电解质外渗，电导率增大。 膜透性增大的程度与逆境胁迫强度有关，也与植物抗逆性的强弱有关。 这样，比较不同作物或同一作物不同品种在相同胁迫温度下膜透性的增大程度，即可比较作物间或品种间的抗逆性强弱。 因此，电导法目前已成为作物抗性栽培、育种上鉴定植物抗逆性强弱的一个精确而实用的方法。 相对电导率根据公式计算得出：Relative ion leakage = (C1 - C0) / (C2 - C0) ×100％（注C0为双蒸水的电导率） 【实验材料及仪器】 材料：小麦幼苗：对照、100mM NaCl处理、100mM NaCl处理、5%PEG-6000处理、15%PEG-6000处理 仪器设备：电导仪、温箱、水浴锅 【实验步骤】 1.取0.1g对照和盐或PEG6000处理的小麦叶片，切成约1cm小段，每种处理做两个平行； 2.用双蒸水冲洗3 遍以除去表面粘附的电解质； 3.加10 ml双蒸水，25℃振荡温育1小时，期间经常摇动，测定此时的电导率为C1；
4.将盛有根的试管100℃煮沸15 min，冷却到室温后，测定此时的电导率为C2； 5.相对电导率根据公式计算得出：Relative ion leakage = (C1 - C0) / (C2 - C0) ×100％（注C0为双蒸水的电导率） 【数据记录及结果处理】 双蒸水的电导率C0＝1.6 根据公式Relative ion leakage = (C1 - C0) / (C2 - C0) ×100％，计算各根尖的相对电导率 对照：①Relative ion leakage = 6.72％ ②Relative ion leakage = 8.33％平均=7.53％ 100mM NaCl处理：①Relative ion leakage = 13.16％ ②Relative ion leakage = 10.22％平均=11.68％ 200mM NaCl处理：①Relative ion leakage = 29.93％ ②Relative ion leakage = 29.10％平均=29.51％ 5%PEG-6000处理：①Relative ion leakage = 6.69％ ②Relative ion leakage = 6.95％平均=6.82％
植物生理生化课程（生化部分）教学大纲 一、课程基本概况 1.课程名称：植物生理生化（生化部分） 2.课程名称（英文）：physiology and Biochemistry of plant 3.课程编号：B16034 4.课程总学时：40学时（均为理论教学） 5.课程学分：2学分 6.课程分类：必修课 7.开设学期：第3学期 8.适用专业：农学教育（S）、植保教育（S）本科。 9.先行课：《物理学》、《化学》、《分析化学》、《植物学》等。 二、课程性质、目的和任务 植物生物化学是农学类各专业必修的一门专业基础课，是各专业的主干课之一，其先行课为物理学、化学、植物学。本课程的作用是为后续植物生理学及专业课的学习打下理论基础。其任务是掌握植物生物化学的基本概念，认识和掌握植物细胞的基本组成物质及其结构、性质和功能，了解和掌握有机物代谢的途径和基本条件，了解代谢调控的方式、过程及意义。从而为更好地认识植物、利用植物、影响和改造植物奠定必要的理论基础，能运用基本理论指导相关的实践过程。 三、主要内容、重点及难点 绪论 （一）目的要求：掌握植物生物化学的定义、内容和任务；了解植物生化的发展和现状；了解植物生化与其它学科的关系。 （二）主要内容：植物生化的定义；植物生化的内容；植物生化的任务；植物生理生化的发展及现状；植物生化与其它学科的关系；学习生物化学的方法。 （三）重点：植物生化的定义、内容及其在生物科学中的重要地位。 （四）难点：植物生化与其它学科的关系。 第一章蛋白质的化学 （一）目的要求：掌握蛋白质的基本组成单位——氨基酸的结构特点、性质；了解蛋白质的结构、性质和功能，理解蛋白质的结构与功能的关系。 （二）主要内容： 第一节氨基酸：氨基酸的化学结构与分类；氨基酸的重要理化性质。 第二节蛋白质的结构：一级结构；空间结构；蛋白质分子中的重要化学键；蛋白质结构和功能的关系 第三节蛋白质的性质：蛋白质的分子量；蛋白质的胶体性质；两性性质及等电点；蛋白质的沉淀；蛋白质的变性；蛋白质的颜色反应。 （三）重点：氨基酸的结构特点和性质；蛋白质的结构和性质。 （四）难点：蛋白质的结构；蛋白质结构与功能的关系。 第二章核酸 （一）目的要求：了解核酸的种类、存在位置及其在生物界的地位与作用；掌握核酸的组成、结
2018农学门类414植物生理学与考纲 I.考试性质 农学门类联考植物生理学与生物化学是为高等院校和科研院所招收农学门类的而设置的具有选拔性质的全国联考科目。其目的是科学、公平、有效地测试考生是否具备继续攻读农学门类各专业学位所需要的知识和能力要求，评价的标准是高等学校农学学科优秀本科毕业生所能达到的及格或及格以上水平，以利于各高等院校和科研院所择优选拔，确保硕士研究生的质量。 II.考查目标 植物生理学 1.了解植物生理学的研究内容和发展简史，认识植物生命活动的基本规律，理解和掌握植物生理学的基本概念、基础理论知识和主要实验的原理与方法。 2.能够运用植物生理学的基本原理和方法综合分析、判断、解决有关理论和实际问题。 生物化学 1.了解生物化学研究的基本内容及发展简史，理解和掌握生物化学有关的基本概念、理论以及实验原理和方法。 2.能够运用辩证的观点正确认识生命现象的生物化学本质和规律，具备分析问题和解决问题的能力。 III.考试形式和试卷结构 一、试卷满分及考试时间 本试卷满分为150分，考试时间为180分钟。 二、答题方式 答题方式为闭卷、笔试。 三、试卷内容结构 植物生理学50% 50% 四、试卷题型结构 单项选择题30小题，每小题1分，共30分 简答题6小题，每小题8分，共48分 实验题2小题，每小题10分，共20分 分析论述题4小题，每小题13分，共52分 IV.考查范围 植物生理学 一、植物生理学概述 (一)植物生理学的研究内容 (二)植物生理学的发展简史 二、植物细胞生理 (一)植物细胞概述 1.细胞的共性 2.高等植物细胞特点 (二)植物细胞的亚显微结构与功能 1.植物细胞壁的组成、结构和生理功能 2.植物细胞膜系统 3.细胞骨架
东北农业大学网络教育学院 植物生理生化网上作业题参考答案 第一章参考答案 一、名词解释 1．蛋白质一级结构：多肽链中氨基酸种类和排列顺序。 2．简单蛋白：水解时只有氨基酸的蛋白质。 3．结合蛋白：水解时不仅产生氨基酸还产生其他化合物，即结合蛋白质由蛋白质和非蛋白质部分组成，非蛋白质部分成为附因子。 4．盐析：在蛋白质溶液中加大量中性盐使蛋白质沉淀析出的现象。 5．天然蛋白质受到某些物理或化学因素影响，使其分子内部原有的空间结构发生变化时，生物理化性质改变，生物活性丧失，但并未导致蛋白质一级结构的变化，该过程称为蛋白质变性。 二、填空题 1．零负正 2．两条或两条以上三级 3. a -螺旋、B -折叠、B -转角 4 ．碱基磷酸戊糖 5．超螺旋 三、单项选择题 1. D 2.D 3. B 4.C 四、多项选择题 1 ．ABCD 2 ．AD 五、简答题 1. 简述RNA的种类及功能。 答：RNA:包括mRNA信使RNA蛋白质合成的模版。 tRNA:转运RNA蛋白质合成过程中运转氨基酸的。 rRNA:核糖体RNA合成蛋白质的场所。 2. 简述蛋白质的二级结构及其类型。 答：蛋白质的二级结构是指蛋白质多肽链本身折叠、盘绕而形成的局部空间结构或结构单元。如a 螺旋、B -折叠、B -转角、自由回转等。 3 .比较DNA和RNAE学组成和结构的主要区别。 (1)构成DNA的碱基为A T、G C;而RNA的碱基为A U、C、G;
（2）构成DNA的戊糖是B -D-2-脱氧核糖；而构成RNA的戊糖为B -D-核糖。 （3）DNA 的结构是由两条反向平行的多聚核苷酸链形成的双螺旋结构；而RNA 的结构以单链为主，只 是在单链中局部可形成双链结构。 第二章参考答案 一、名词解释1．达到最大反应速度一半时的底物浓度，叫米氏常数。 2．只有一条多肽链的酶叫单体酶。3．由几个或多个亚基组成的酶。 4．与酶蛋白结合较松驰的辅因子。5．与酶蛋白结合牢固的辅因子。 二、填空题 1．绝对专一性、相对专一性立体专一性2 ．酶蛋白辅因子 三、单项选择题 1．B 2 ．C 3 ．D 四、多项选择题 1．A B C 2 ．D EK 五、简答题1．酶不同于其他催化剂的特点有哪些？答：酶所催化的反应条件都很温和（常温、常压下）； 酶催化据有高效性； 酶催化具有专一性；酶的催化活性可控制。 六、论述题1．论述影响酶促反应速度的因素。 答：底物浓度；酶浓度；温度；pH影响；抑制剂影响（竞争性抑制，非竞争性抑制；不可逆抑制）； 激活剂影响。 第三章参考答案 一、名词解释：1．相邻活细胞的原生质借助胞间连丝联成的一个整体，也叫内部空间。2．胞间层、细胞壁、细胞间隙 也连成一体，也叫外部空间（自由空间或无阻空间）。 3．指由核膜、内质网、高尔基体及质膜所组成连续的膜系统。 4．指由单层膜包裹的小颗粒，内含有几十种酸性水解酶类。根据是否含有底物可分为初级溶酶体和次级溶酶体。 5．细胞质中存在的纤维状无膜结构的微管、微丝和中间纤维，它们都由蛋白质组成，并相互联结成 主体的网络，对细胞起支持作用，所以叫细胞骨架，也叫微粱系统。 、填空题 1 胞间层初生壁次生壁 2 ．粗面内质网滑面内质网 3 ．运输囊泡扁平囊泡分泌囊泡 4 ．初级溶酶体次级溶酶体 5 ．蛋白质 6 ．微管微丝中间纤维 7 ．液泡叶绿体细胞壁 8 ．不饱合脂肪酸 9 ．水膜电荷 三、单项选择题 1．C 2 ．D 四、多项选择题 1．ABD 2 ．ABCD 3．ABC 4．BD 五、论述题
逆境胁迫对植物生理生化代谢的影响 20093391 魏晓明农学0901 摘要：对植物产生伤害的环境称为逆境，又称胁迫。常见的逆境有寒冷、干旱、高温、盐渍等。逆境会伤害植物，严重时会导致植物死亡。逆境对植物的伤害主要表现在细胞脱水、膜系统受破坏，酶活性受影响，从而导致细胞代谢紊乱。有些植物在长期的适应过程中形成了各种各样抵抗或适应逆境的本领，在生理上，以形成胁迫蛋白、增加渗透调节物质（如脯氨酸含量）、提高保护酶活性等方式提高细胞对各种逆境的抵抗能力。 关键词：逆境胁迫,抗逆性，相对电导率，脯氨酸，丙二醛，样品，细胞膜透性，过氧化物酶活性，叶绿素，可溶性糖。 前言：植物细胞膜起调节控制细胞内外物质交换的作用，它的选择透性是其最重要的功能之一。当植物遭受逆境伤害时，细胞膜受到不同程度的破坏，膜的透性增加，选择透性丧失，细胞内部分电解质外渗。膜结构破坏的程度与逆境的强度、持续的时间、作物品种的抗性等因素有关。因此，质膜透性的测定常可作为逆境伤害的一个生理指标，广泛应用在植物抗性生理研究中。 当质膜的选择透性被破坏时细胞内电解质外渗，其中包括盐类、有机酸等，这些物质进入环境介质中，如果环境介质是蒸馏水，那么这些物质的外渗会使蒸馏水的导电性增加，表现在电导
率的增加上。植物受伤害愈严重，外渗的物质越多，介质导电性也就越强，测得的电导率就越高（不同抗性品种就会显示出抗性上的差异）。 在植物胁迫处理过程中，叶绿素含量会下降，可以把叶绿素含量下降看作是胁迫发展中由功能性影响到器质性伤害的一个中间过程。 过氧化物酶是植物体内普遍存在的、活性较高的一种酶，他与呼吸作用、光合作用及生长素的氧化等都有密切关系，在植物生长发育过程中，他的活性不断变化，因此测量这种酶，可以反映某一时期植物体内代谢的变化。 植物体内的碳素营养状况以及农产品的品质性状，常以糖含量作为重要指标。植物为了适应逆境条件，如干旱、低温，也会主动积累一些可溶性糖，降低渗透势和冰点，以适应外界环境条件的变化。 植物器官衰老时，或在逆境条件下，往往发生膜脂过氧化作用，丙二醛（MDA）是其产物之一，通常利用它作为脂质过氧化指标，表示细胞膜脂过氧化程度和植物对逆境条件反应的强弱。 植物细胞膜对维持细胞的微环境和正常的代谢起着重要作用。在正常情况下，细胞膜对物质具有选择透性能力。当植物受到逆境影响时，如高温、干旱、盐渍、病原菌侵染后，细胞膜遭到破坏，膜透性增大，从而使细胞内的电解质外渗，以至于植物细胞侵提液的电导率增大。膜透性增大的程度与逆境胁迫强度有
小黑豆相关生理指标测定 1. 表型变化:鲜重、株高、主根长和叶面积 鲜重 :取处理好的植株,擦干根和叶表面水分,测量整株植物的重量,每个测 6个重复。 株高 :取处理好的植株,测量从根和茎分隔处到植株最高点的高度,记录,每个测6个重复。 主根长 :取处理好的植株,测量从根和茎分隔处到主根最远点长度,记录,每个测6个重复。 叶面积 :取处理好的植株,选择第二节段的叶片,测量叶面积,叶面积测量方法是测每个叶片最宽处长度作为叶的长, 测叶片最窄处长度作为叶的宽, 叶片长和宽的乘积即为叶表面积。每个测 6个重复。 2. 总蛋白、可溶性糖、丙二醛(MDA 和 H2O2含量测定 样品处理:取 0.5g 样品(叶片要去除叶脉、根要先用清水清洗干净 ,速在液氮中冻存,在遇冷的研钵中加液氮研磨,然后加入 1.5ml 的 Tris-HCl (pH7.4 抽提, 将抽提液转移到 2ml 的 EP 管中, 于 4℃, 12000rpm 离心 15min , 取上清, 保存在 -20℃下,上清液可用于总蛋白、丙二醛(MDA 、可溶性糖和 H2O2含量测定。 总蛋白测定(Bradford 法 :样品反应体系(800ul H2O+200ul Bradford+5ul样品 , 空白对照为(800ul H2O+200ul Bradford 。测定后带入标准曲线 Y=32.549X-0.224(Y代表蛋白含量, X 代表 OD595 ,计算得出蛋白含量。 可溶性糖测定:样品反应体系(1ml 蒽酮 +180ul ddH2O+20ul样品提取液 ; 空白对照 (1ml 蒽酮 +180ul ddH2O , 测定 OD625后带入标准曲线 : Y=0.0345X+0.0204(Y代表 OD625, X 代表可溶性糖含量(ug
注：装订线内禁止答题，装订线外禁止有姓名和其他标记。 东北农业大学成人教育学院考试题签 植物生理生化（A） 一、单项选择题(每题2分，共30分) 1．下列元素缺乏时，导致植物幼叶首先出现病症的元素是（） A．N B．P． C.Ca D．K 2．能诱导果实发生呼吸跃变的植物激素是（） A．ABA B．IAA C．ETH D．CTK 3．植物一生的生长进程中，其生长速率的变化规律是（） A．快一慢一快 B．快一慢 C．慢一快一慢 D．慢一快 4．植物细胞中质子泵利用ATP水解释放的能量，逆电化学势梯度跨膜转运H+，这一过程称为（）A．初级主动运输 B．次级主动运输 C．同向共运输 D．反向共运输 5．植物叶片中进行亚硝酸还原的主要部位是（） A．线粒体 B．细胞基质 C．液泡 D．叶绿体 6．高等植物光系统Ⅱ的作用中心色素分子是（） A．P680 B．P700 C．A0 D．Pheo 7．植物光呼吸过程中，氧气吸收发生的部位是（） A．线粒体和叶绿体 B．线粒体和过氧化物酶体 C．叶绿体和乙醛酸循环体 D．叶绿体和过氧化物酶体 8．类胡萝卜素对可见光的吸收范围是（） A．680～700nm B．600～680 nm C．500～600 nm D．400～500nm 9．1mol NADH + H+经交替氧化途径将电子传给氧气时，可形成（） A．4molATP B．3molATP C．2.molATP D．1molATP 10．若某一植物组织呼吸作用释放C02摩尔数和吸收O2摩尔数的比值小于1，则该组织在此阶段的呼吸底物主要是（） A．脂肪 B．淀粉 C．有机酸 D．葡萄糖 11．某植物制造100g干物质消耗了75kg水，其蒸腾系数为（） A．750 B．75 C．7．5 D．0．75 12．下列蛋白质中，属于植物细胞壁结构蛋白的是（） A．钙调蛋白 B．伸展蛋白 C．G蛋白 D．扩张蛋白 13．在植物的光周期诱导过程中，随着暗期的延长（） A．Pr含量降低，有利于LDP开花 B．Pfr含量降低，有利于SDP开花 C．Pfr含量降低，有利于LDP开花 D．Pr含量降低，有利于SDP开花
本科学生综合性实验报告 学号姓名 学院专业、班级 实验课程名称植物生理学实验 教师及职称 开课学期2012 至2013 学年上学期 填报时间2012 年12 月15 日
云南师范大学教务处编印 逆境胁迫对植物生理生化指标的影响 作者： （，云南昆明650092） 摘要：对植物产生危害的环境称为逆境，又称胁迫。干旱是制约植物生长的主要逆境因素，以小麦幼苗在模拟干旱胁迫下，植株体内的生理生化指标会发生变化。实验采用PEG处理小麦幼苗，对抗氧化酶；脯氨酸；谷胱甘肽；过氧化氢；可溶性糖；丙二醛在植物体内的含量变化进行了研究，实验通过分光光度计分别在不同的波长中测出吸光率，间接计算出其含量，而通过对正常条件下的和逆境胁迫下一定量小麦体内以上各种物质含量的对比，从而了解小麦体内生理生化指标发生的变化。 关键词：小麦（Triticum aestivumLinn）；干旱胁迫；生理生化 1 引言 干旱是自然界常见的逆境胁迫因素，而且干旱也是植物最容易受到的胁迫之一。干旱不仅制约植物的生长发育与产量，也会引起植被结构与功能的时空变化。因此植物对干旱胁迫的适应及机制一直是植物逆境适应策略研究的一个热点【1-3】作物抗旱性的研究方法有多种，适应能力进行了研究：植物对干旱胁迫的适应过程和受伤害程度与干旱胁迫的强度以及植物自身的抗性紧密联系，并从生化代
谢、生理功能、形态适应、生长发育以及生物生产力等多种形式表现出来【1-5】。土壤有效水分状况与植物之间的关系一直是植物生理生态学研究领域的热点问题。大多数植物在短期或轻度土壤缺水情况下叶片水势下降，气孔关闭。限制CO2 摄取和光合作用速率：长期严重干旱条件下可限制植物生长,引起形态结构发生变化。甚至导致植物死亡【6】。大多实验是在人工控制的干旱或人工模拟干旱条件下进行。其主要方法是室外盆栽控制水分，苗期室内水培或砂培采用PEG 渗透胁迫、人工控制的温室、气候室和培养箱等。其中，PEG渗透胁迫法简单易行、条件容易控制、重复性好、试验周期短。本试验采PEG溶液模拟干旱胁迫的方法，研究干旱胁迫对小麦幼苗发芽率、抗氧化酶、脯氨酸、谷胱甘肽、过氧化氢、可溶性糖、丙二醛等生理生化指标含量的变化，并初步探讨小麦的抗逆机理，期望能够应用于农业生产实践中，为干旱农业生产提供理论依据。 2、材料与方法 2.1、实验材料 小麦种子：购于西山种子公司，供实验备用。（适宜条件下，选购的小麦种子发芽率较高的，所选购的实验材料较理想的，有利于用作实验材 料。） 培养条件：室温，充足水分、充足阳光供给，PEG干旱处理。 用水：自来水。 2.2、种子生命力（发芽率）的快速测定 将待测种子在适宜水中浸种，以增强种胚的呼吸强度。使显色迅速。 2.3、其它实验种子处理一致如下; 小麦种子→用0.1% HgCl2消毒10 min后→用蒸馏水漂洗干净→用蒸馏水于26℃下吸涨12 h →播于垫有6层湿润滤纸的带盖白磁盘（24cm×