生物反应工程原理复习资料
生物反应过程与化学反应过程的本质区别在于有生物催化剂参与反应。
生物反应工程是指将实验室的成果经放大而成为可提供工业化生产的工艺工程。
酶和酶的反应特征
酶是一种生物催化剂，具有蛋白质的一切属性；具有催化剂的所有特征；具有其特有的催化特征。
酶的来源：动物、植物和微生物
酶的分类：氧化还原酶、水解酶、裂合酶、转移酶、连接酶和异构酶
酶的性质：1）催化共性：①降低反应的活化能②加快反应速率③不能改变反应的平衡常数。
2)催化特性：①较高的催化效率 ②很强的专一性 ③温和的反应条件 易变性和失活
3）调节功能：浓度、激素、共价修饰、抑制剂、反馈调节等
固定化酶的性质
固定化酶：在一定空间呈封闭状态的酶，能够进行连续反应，反应后可以回收利用。
与游离酶的区别：
游离酶----一般一次性使用（近来借助于膜分离技术可实现反复使用）
固定化酶--能长期、连续使用（底物产物的扩散过程对反应速率有一定的影响；一般情况下稳定性有所提高；以离子键、物理吸附、疏水结合等法固定的酶在活性降低后，可添加新鲜酶溶液，使有活性的酶再次固定，“再生”活性）
固定化对酶性质的影响：底物专一性的改变 、稳定性增强 、最适pH 值和最适温度变化、动力学参数的变化
单底物均相酶反应动力学
米氏方程
快速平衡法假设：（1）CS>>CE ，中间复合物ES 的形成不会降低CS （2）不考虑
这个可逆反应（3） 为快速平衡， 为整个反应的限速阶段，因此ES 分解成产物不足以
破坏这个平衡
稳态法假设：（1）CS>>CE ，中间复合物ES 的形成不会降低CS （2）不考虑
这个可逆反应（3）中间复合物ES 一经分解，产生的游离酶立即与底物结合，使中间复合物ES 浓度保持衡定，即
P E ES S E k k k +→+?-211P E ES +←ES S E ?+P E ES +→P E ES +←0=dt dC ES
双倒数法（Linewear Burk）：
对米氏方程两侧取倒数
得以作图
得一直线，直线斜率为，截距为
根据直线斜率和截距可计算出Km和rmax
抑制剂对酶反应的影响：
失活作用（不可逆抑制）
抑制作用（可逆抑制）：竞争抑制、反竞争抑制、非竞争抑制、混合型抑制竞争抑制反应机理：
非竞争抑制反应机理：
S
m
C
r
K
r
r
1
1
1
max
max
+
=
S
C
r
1
~
1
max
r
K
m
max
1
r
P
E
ES
S
E
k
k
k
+
→
+?
-
2
1
1
EI
I
E I
K
?
+
P
E
ES
S
E
k
k
k
+
→
+?
-
2
1
1
EI
I
E I
K
?
+
ESI
I
ES I
K
?
+
可逆抑制各自的特点：P37
多底物均相酶反应动力学(这里讨论：双底物双产物情况)
强制有序机制
顺序机制西-钱氏机制
双底物双产物反应机制：随即有序机制
乒乓机制
注意
在工业级反应中，反应速度一般是由改变所用酶浓度和（或）反应时间，而不是改变底物浓度来控制的，并且要测定的最重要参数是可测的转化率，而不是反应速度
酶失活的因素有哪些？
酶会由于种种因素发生失活。其中热失活最重要。酶的热失活随温度升高而失活程度加剧。物理因素有：加热、冷却、机械力化学因素有：酸、碱、盐、溶剂、表面活性剂、重金属、蛋白酶。
酶失活过程的动力学
未反应时的失活动力学
表征方法（数学模型）：一级失活模型
注: E--具有活性的酶
D--失活的酶
kd--衰变常数
模型中：
Q
P
B
A+
→
+
D
E d
k
→
0<δ<1时，底物对酶有部分保护作用
δ>1时，底物加速酶的失活
因此，称δ为底物对酶稳定性影响系数
影响固定化酶促反应的主要因素:
子构象的改变、位阻效应、微扰效应、分配效应（可用Kp 定量描述）、扩散效应（可定量描述）
评价酶反应器指标：转化率、产率、选择性、停留时间
均相酶反应器的分类：
批式反应器（间歇反应器）
按操作方式连续反应器
半间歇反应器
批式反应器将底物一次加入反应器内，在反应的过程中无底物和产物的输入和输出，底物和产物的浓度随反应时间变化
连续反应器底物等连续输入反应器，产物连续从反应器输出，反应器的任何部位的各组分均不随反应时间变化（稳定态）
半连续反应器在一次反应的过程中，底物分次补入
批式全混型反应器（间歇式搅拌罐反应器）（batch stirred-tank reactor，BSTR）
连续全混型反应器（连续式搅拌罐反应器）（continuous stirred-tank reactor，CSTR ）
活塞流反应器（plug flow reactor，PFR）
全混流——流入的液体在装置内瞬间完全混合。也就是说，各组分的浓度及粒子的分散无论在什么地方都完全相同。
活塞流——反应器内反应液象活塞样的流动。通过装置的液体在垂直于从入口到出口的流向的方向上的速率完全相同，在流动方向上既没有混合也没有扩散。
非均相酶反应器
用于由固定化酶催化的非均相反应的反应器
非均相酶反应器的类型及结构设计要考虑：固定化酶更换操作难易底物性质反应体系粘度PH值范围控制等因素
非均相酶反应器有：
搅拌罐反应器
可以是：批式的BSTR（一般只适用于实验室研究，如用于工业生产，则每批反应结束都要进行固液分离）
缺点：对固定化酶颗粒的强度要求高；液相的连续流动致温度和PH 控制难。
优点：连续操作、负载力大、效率高、生产能力大等
操作：液相的流速和Re 数都采用较小值、延长停留时间将有利于达到一定的转化率
流化床反应器 流化流速范围窄，不易工业应用。
缺点：流化态要求流体流速必须提高到一定程度致停留时间不足、转化率不能足够高（克服办法：部分反应液回补再循环）
优点：1液相和固相的微环境较易控制2传热、传质性能好3不会堵塞4 能处理微小粉末状底物
5固定化酶颗粒可以做得足够小（ 可以足够高）
细胞反应工程
细胞的基本特征：
菌体成分：由80%左右的水分，以及蛋白质、糖、脂类、核酸、维生素和无机物等构成。
物理性质：
密度：单细胞微生物的密度会因培养条件而异；菌体絮凝物及菌丝团的湿密度近似于水（流化速率低）；低浓度单细胞菌体悬浮液为牛顿流体；一般，含菌丝的培养液显示非牛顿流体特性；分泌了大量高分子化合物的菌体悬浮液为非牛顿流体（非牛顿流体的搅拌和通气效果很差）
微生物反应的特征：
特点：常温常压不爆炸、主要原料碳源价廉源广、反应过程受生物的自控 、产高分子和特异反应易进行、细胞本身也是产品、遗传改变可大幅度改良性能或获得新性能
但是 ：1底物相当多地用于繁殖；2副产物较多、反应条件影响产品品质；
3容易发生遗传变异，有利于维持性能稳定的固定化技术不成熟
细胞反应的计量
得率系数
细胞（菌体）得率：
YX/S=生成菌体的干重 / 消耗底物的质量=微生物生长速率 / 底物消耗速率
产物得率：YP/S=代谢产物的生成量 / 底物消耗量
碳得率（碳转化率）：
YC=生成物含碳量/消耗的碳量=生成的菌体量×菌体含碳量/消耗的碳源量×碳源的含碳量
细胞反应的化学平衡通式
对忽略产物生成的细胞生长过程的计量关系可表示为
C m H n O l +a O2+b NH3 c C αH βO δN γ+d CO2+e H2O
底物碳源 氮源 细胞
对C 元素： （1）
对H 元素： （2）
对O 元素： （3）
对N 元素： （4）
上述4个细胞反应的计量方程，不足以计算a 、b 、c 、d 、e 等5个未知量，因而再寻找1个方程
如在好氧型培养时，可定义呼吸商（仪器测定）作为第5个方程；
（5）
或采用还原度平衡的方法（C=4，H=1，N=-3，O=-2，P=5，S=6）
联立1～5式，有 解得细胞反应方程的a 、b 、c 、d 、e 等5个系数
例：某以葡萄糖为底物的微生物细胞培养过程，有2/3的碳转化为细胞。其细胞培养的反应方程为
d c m +?=α
e c b n 23+?=?+βe d c a l ++?=+22δc b ?=γ
a d RQ /=???????? ??=???????? ??????????? ??----0001000010120220300100l n m e d c
b a RQ γδβα
（1）试确定计量系数a 、b 、c 、d 、e ；
（2）试计算其细胞对底物的得率YX / S ；
（3）试计算呼吸商RQ 。
解：（1）细胞反应的方程式系数的计算
1mol 葡萄糖所含有的C 元素为72g ，根据题意
1mol 葡萄糖转化为微生物细胞的C 元素为： g 则有：转化为CO2的C 元素为： g
则： ，
对N 元素平衡，有：
对H 元素平衡，有：
对O 元素平衡，有： ，
所以：
a = 0.782，
b =1.473，c=0.909，d =3.855，e =2
即：
C6H12O6+0.782NH3+1.473O2=0.909C4.4H7.3O1.2N0.86+3.855H2O+2CO2
（2）细胞对底物的得率YX / S 的计算
（3） 呼吸商RQ 的计算
呼吸商的计算
比消耗速率
比生成速率
微生物反应动力学
模型的分类： 有，按是否对细胞的生长进行平衡生长化假设，分的类型：结构模型、非结构模型（非平衡生长时，采用结构()483/272=?909.012
4.448=?=c 244872=-e 1224=2=e 782.086.0==c a d c a 23.7312+
=+855.32
909.03.7782.031223.7312=?-?+=-+=c a d e d c b 22.126++=?+473.12622855.3909.02.12622.1=-?++?=-++=e d c b 葡萄糖细胞葡萄糖细胞)(g /g 461.0180028.83/mol g 028.83134.91909.011486.0162.113.7124.4909.0/===?=?+?+?+?=S X Y 358.1473
.12O CO 22====b e RQ 的消耗速率的生成速率
104个/ml 以下时，需足够重视个体的影响，采用随机性模型如，灭菌动力学；发酵过程中，细胞浓度经常在107~1010个/ml 范围内，可忽略个体的影响，采用确定性模型）
平衡生长条件下微生物细胞的生长速率rx 的定义式为
式中X 为微生物的浓度，μ为微生物的比生长速率，其除受细胞自身遗传信息支配外，还受环境因素所影响。
由上式可知，μ与倍增时间(doubling time) td 的关系为： 定义，比生长速率 （1/h ）： 为细胞的生长速率（g.DCW/L.h ）； 为细胞的质量浓度（g.DCW/L ）
Monod 方程
注： --------比生长速率（h-1）
--------最大比生长速率（h-1） --------
饱和常数（g/L ） --------限制性底物浓度（g/L ）
代谢产物的生成动力学根据产物生成速率与细胞生成速率之间的关系，将其分成三种类型。
相关模型,是指产物生成与细胞生长呈相关的过程。产物是细胞能量代谢的结果。此时产物通常是基质的分解代谢产物。例如：乙醇、葡萄糖酸等。
部分相关模型,反应产物生成与基质消耗仅有间接的关系。产物是能量代谢的间接结果。在细胞生长期内，基本无产物生成。属于这类的有柠檬酸和氨基酸的生产等。
非相关模型,产物的生成与细胞的生长无直接关系。在微生物生长阶段，无产物积累，当细胞停止生长，产物却大量生成。属于这类的有青霉素等二级代谢产物的生产。
微生物反应器操作
深层培养的几种方式：
? 分批式操作（batch operation ）：是指基
质一次性加入反应器内，在适宜条件下将微
生物菌种接入，反应完成后将全部反应物料
取出的操作方式
? 半分批式操作（semi-batch operation ）：又
称流加操作，是指先将一定量基质加入反应器
内，在适宜条件下将微生物菌种接入反应器中，
反应开始，反应过程中将特定的限制性基质按
照一定要求加入到反应器内，以控制限制性基
质保持一定，当反应终止时取出反应物料的操
作方式 。
? 反复分批式操作（repeated batch operation ）：
指分批操作完成后，不全部取出反应物料，剩余部分重新加入一定量的基质，再按照分批式操作方式，反复进行。
? 反复半分批式操作（repeated semi-batch operation ）：是指流加操作完成后，不全部取出反应物料，剩余部
分重新加入一定量的基质，再按照流加操作方式进行，反复进行。
? 连续式操作（continuous operation)：是指在分批式操作进行到一定阶段，一方面将基质连续不断地加入
反应器内，另一方面又把反应物料连续不断的取出，使反应条件（如反应液体积等）不随时间变化的操作方式。
X dt
dX r x μ==d
d t t 693.02ln ==μ][X r X ≡μX r ]
[X [][]
S K S S +=max μμμmax
μS K []S
PART B 生物分离工程实验 实验十二香菇多糖的分离提取 一、实验目的 让学生了解香菇多糖的理化性质及提取工艺流程，掌握真空浓缩技术。 二、实验原理 香菇是一种药食两用真菌，具有提高免疫力、抗癌、降糖等多种生理功能。水溶性多糖作为香菇主要活性成分之一，主要以β-1,3-葡聚糖的形式，分子量从几万到几十万不等。通过有机溶剂提取，真空浓缩技术进行分离提取。 三、实验材料与试剂 原料：干香菇500g 试剂：氯仿、正丁醇、医用纱布、浓硫酸、重蒸酚、工业酒精 四、实验仪器 组织捣碎机、水浴锅、旋转蒸发器、1cm比色皿、751分光光度计、电子天平、台式离心机、试管、量筒、烧杯、玻璃棒 五、提取工艺流程 1. 1kg干香菇切成小块，以1：10（重量比）加入水，用组织捣碎机进行均质； 2. 取200mL均质液放入1L烧杯中，再加入300mL蒸馏水，加热至沸后，温 火煮沸1小时，（注意：煮沸过程中用玻璃棒不断搅拌，以免烧杯底部发生糊结；并间歇加入少量水，使杯内液体体积保持在500mL左右； 3. 加热完毕后，将杯内液体用8层纱布过滤，除去残渣，上清液转入另一烧杯 中； 4. 将上清液倒入圆底烧瓶中，在旋转浓缩仪上进行浓缩，浓缩条件为-0.1MPa 、 60℃，浓缩液体积至100mL左右停止； 5. 将浓缩液在1×10000g离心10min，将上清液转入另一烧杯，除去残渣； 6. 上清液中加入等体积的氯仿正丁醇浓液（体积比为4：1），搅拌5min，静置 30分钟； 7. 将混合液体在1×5000g下离心20min,分离水相；
8. 在水相中加入终浓度为80%的酒精，搅拌均匀，静置20min，1×5000g下离 心10min； 9. 取出沉淀物，放入已称重的干燥表面皿中，在真空干燥箱中80℃下真空干燥； 10. 干燥后，称重，计算多糖的产率； 11. 准确称取干燥后多糖20mg于500ml容量瓶中，加水定容； 12. 取定容液2ml加入6%苯酚1ml，混匀，再加入浓硫酸5ml，混匀，放置20min 后，于490nm测吸光度； 13. 葡萄糖标准曲线的制定：准确称取葡萄糖20mg定容于500ml容量瓶中，分 别取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6及1.8ml，补水至2ml，依12步骤反应液，并分别测吸光度，根据葡萄糖浓度和吸光度绘制标准曲线； 14. 根据香菇多糖吸光度和葡萄糖标准曲线，计算多糖纯度。 六、思考题 1. 根据以上实验步骤，表达多糖产率及纯度的计算公式； 2. 利用所学生物化学知识，分析多糖沉淀原理。
试卷编号： 一、名词解释题（本大题共3小题，每小题3分，总计9分） 1.Bioseparation Engineering：回收生物产品分离过程原理与方法。 2.双水相萃取：某些亲水性高分子聚合物的水溶液超过一定浓度后可形成两相， 并且在两相中水分均占很大比例，即形成双水相系统(two aqueous phase system)。 利用亲水性高分子聚合物的水溶液可形成双水相的性质，Albertsson于50年代 后期开发了双水相萃取法(two aqueous phase extraction)，又称双水相分配法(two aqueous phase partitioning)。 3.电渗：在电场作用下，带电颗粒在溶液中的运动。 二、辨别正误题并改正，对的打√，错的打×（本大题共15小题，每小题2分，总计30分） 1.壳聚糖能应用于发酵液的澄清处理是由于架桥作用。错（不确定） 2.目前国内工业上发酵生产的发酵液是复杂的牛顿性流体,滤饼具有可压缩性。错 3.盐析仅与蛋白质溶液PH和温度有关，常用于蛋白质的纯化。错 4.超临界流体是一种介于气体和液体之间的流体，可用于热敏性生物物质的分离。 对 5.膜分离时，当截留率δ=1时,表示溶质能自由透过膜。错 6.生产味精时，过饱和度仅对晶体生长有贡献。对 7.阴离子纤维素类离子交换剂能用于酸性青霉素的提取。对 8.卡那霉素晶体的生产可以采用添加一定浓度的甲醇来沉淀浓缩液中的卡那霉 素。 9.凝胶电泳和凝胶过滤的机理是一样的。错 10.PEG-硫酸钠水溶液能用于淀粉酶的提取。对 11.乙醇能沉淀蛋白质是由于降低了水化程度和盐析效应的结果。对 12.冷冻干燥一般在-20℃—-30℃下进行，干燥过程中可以加入甘油、蔗糖等作为保 护剂。对 13.反相层析的固定相和流动相都含有高极性基团，可用来分离生物物质。错 14.大网格吸附剂由于在制备时加入致孔剂而具有大孔径、高交联度，高比表面积 的特点。错（不确定） 15.PEG沉淀蛋白质是基于体积不相容性。错 三、选择题（本大题共10小题，每小题2分，总计20分） 1.对于反胶束萃取蛋白质，下面说法正确的是：A A 在有机相中，蛋白质被萃取进表面活性剂形成的极性核里 B 加入助溶剂，可用阳离子表面活性剂CTAB萃取带正电荷的蛋白质 C 表面活性剂浓度越高越好 D 增大溶液离子强度，双电层变薄，可提高反胶束萃取蛋白质的能力 2.能进行海水脱盐的是：C A 超滤 B 微滤
建筑工程资料管理试题 一、单项选择题： 1、建筑工程资料的组卷厚度，一般不超过（ D ）mm。 A、10 B、20 C、30 D、40 2、对列入城建档案馆接受范围内的工程，工程竣工验收后的（ D ）内向城建档案馆移交一套符合规定的工程档案。 A、15天 B、1个月 C、2个月 D、3个月 3、施工单位对工程实行总承包的，总包单位负责收集、汇总各分包单位形成的工程档案并及时向（B）移交。 A、监理单位 B、建设单位 C、城建档案馆 D、质量监督站 4、一个建设工程由多个单位工程组成时，工程文件应按（B）组卷。 A、单项工程 B、单位工程 C、分部工程 D、分项工程 5、（B）是施工单位用以指导、规范和科学化施工的资料。 A、施工管理质量 B、施工技术资料 C、施工物资资料 D、施工监测资料 6、水泥的强度应以标养（C）d试件结果为准。 A、7 B、3 C、28 D、56 7、建筑节能产品进场时应有出厂质量证明文件，并应按规定见证取样和（ D ），有试验报告。 A、检测 B、监测 C、试验 D、送检 8、检验批施工质量验收记录表由施工项目（B）填写，监理工程师（建设单位项目技术负责人）组织质量检查员等进行验收。 A、资料员 B、质量检查员 C、施工员 D、技术负责人 9、分部工程施工质量验收记录，勘察单位只可确认（A）分部工程。
A、地基基础 B、主体结构 C、屋面工程 D、装饰装修工程 10、单位工程施工质量控制质量核查记录，核查人栏由（B）签认。 A、建设单位项目负责人 B、总监理工程师亲自 C、总监理工程师委托专业监理工程师 D、专业监理工程师 11建筑工程材料，简称为（B） A.施工材料 B.工程资料 C.交工资料 D.竣工资料 12、在组织工程竣工验收前，应提请（C）对工程档案进行验收。 A.建设单位 B.监理单位 C.城建档案馆管理机构 D.质量监督机构 13、对于游泳池、消防水池等蓄水工程、屋面工程和有防水要求的地面工程，应进行（B）。 A.防水试验 B.淋（蓄）水检验 C.质量检验 D.浇水试验 14、施工单位的文件资料采用（C）的英文编号。 A.“A” B.“B” C.“C” D.“D” 15、对于重要和大型的工程应由（D）委托有资质的测量单位进行沉降观测。 A.监理单位 B.建设单位 C.管理部门 D.施工单位 16、（D）资料是建筑施工单位按照安全生产的有关规定要求，在施工安全管理过程中形成和建立的技术资料。 A.建筑施工技术 B.建筑施工安全技术 C.建筑施工交工技术 D.建筑安全管理技术 17、如果预制构件的合格证是抄件（如复印件），则应注明原件的（A）、存放单位、抄件的时间，并有抄件人、抄件单位的签字和盖章。 A.编号 B.日期 C.生产单位 D.厂家的地址
生物分离工程实验 实验一茶多酚标准曲线的测定 仪器：紫外分光光度计，比色皿，天平，容量瓶，移液管，pH计、试管 药品：没食子酸丙酯或茶多酚，酒石酸钾钠，硫酸亚铁，磷酸氢二钠，磷酸二氢钾。 方法： A溶液配制 没食子酸丙酯标准溶液配制 准确称取25mg没食子酸丙酯，蒸馏水溶液，移入25mL容量瓶并稀释至刻度，摇匀，配制成1mg/mL的标准溶液 酒石酸亚铁溶液配制 准确称取0.1g硫酸亚铁，和0.5g酒石酸钾钠，混合，蒸馏水溶解后移入100mL容量瓶，稀释至刻度，摇匀。 pH7.5磷酸盐缓冲液配制 磷酸氢二钠：准确称取分析纯磷酸氢二钠2.969g，蒸馏水稀释溶解，移入250mL容量瓶，加水稀释至刻度，摇匀，为a液 磷酸二氢钾：准确称取分析纯磷酸二氢钾，、2.2695g，蒸馏水溶解，移入250mL容量瓶，定容，B。 取A液体85mL，B液体15mL混合均匀，即成。 B．标准曲线绘制 分别吸取0、0.25、0.50、0.75、1.0、1.25mL的没食子酸丙酯标准液于25mL容量瓶中，加入蒸馏水4mL，再加入酒石酸亚铁溶液5mL，用pH7.5的磷酸盐缓冲溶液稀释至刻度，摇匀，分光光度计在540nm处，1cm比色皿，分别测定吸光度。空白参比操作同上，不加没食子酸丙酯。以容量瓶中没食子酸丙酯的绝对含量mg为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，做线性回归。 C 样品测定 取适量样品加入容量瓶，操作同上，没食子酸丙酯含量乘以换算系数1.5，求得茶多酚。
实验二超声法和回流法提取茶多酚的比较 实验仪器： 超声提取器、布氏漏斗、抽滤瓶、真空泵、烧瓶、量筒、分光光度计、比色皿、容量瓶等、实验试剂 茶叶、纯净水、茶多酚（没食子酸丙酯）、硫酸亚铁、酒石酸钾钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾等 操作方法 1、材料准备 称取一定量的茶叶，研钵粉碎。备用 2、提取 A、超声提取法 称取5g粉碎后茶叶末，放入烧瓶（塑料袋密封），加入100mL水，于超声提取器，50℃提取20min，抽滤，定容至100mL，待测。 B、回流提取法 称取10g粉碎后茶叶末，放入圆底烧瓶，加入100mL水，80℃提取40min，分别在1、3、5、7、10、15、20、30、40min取3mL样品，小漏斗过滤后，待测。测得茶多酚含量（mg/mL）以茶多酚含量为纵坐标，时间为横坐标绘制曲线。 3. 含量测定 按照标准曲线的方法测定含量。 所需试剂及仪器 试剂： 没食子酸丙酯或者茶多酚，酒石酸钾钠，硫酸亚铁，磷酸氢二钠，磷酸二氢钾， 仪器： 紫外分光光度计，水浴锅，电子天平，pH计，超声提取器，量筒（100mL*1），容量瓶（25mL*8，100mL*4, 250mL*2），比色皿*5，移液管（1.0mL*2, 0.5mL*2, 2mL*2, 5mL*4） 三角瓶250mL*2，小漏斗*2，试管架
生物分离工程复习题 第一章绪论 简答题： 1、简述生物分离技术的基本涵义及内容。 答：基本涵义：生物分离技术是指从动植物与微生物的有机体或器官、生物工程产物（发酵液、培养液）及其生物化学产品中提取、分离、纯化有用物质的技术过程。 内容主要包括：离心分离、过滤分离、泡沫分离、萃取分离、沉淀（析）分离、膜分离、层析（色谱）分离、电泳分离技术以及产品的浓缩、结晶、干燥等技术。 2、物质分离的本质是有效识别混合物中不同溶质间物理、化学和生物学性质的差别，利用能够识别这些差别的分离介质和扩大这些差别的分离设备实现溶质间的分离或目标组分的纯化。请从物质的理化性质和生物学性质几个方面简述生物活性物质分离纯化的主要原理。 答：生物大分子分离纯化的主要原理是： 1）根据分子形状和大小不同进行分离，如差速离心与超离心、膜分离、凝胶过滤等； 2）根据分子电离性质（带电性）差异进行分离，如离子交换法、电泳法、等电聚焦法； 3）根据分子极性大小及溶解度不同进行分离，如溶剂提取法、逆流分配法、分配层析法、盐析法、等电点沉淀及有机溶剂分级沉淀等； 4）根据物质吸附性质的不同进行分离，如选择性吸附与吸附层析等； 5）根据配体特异性进行分离，如亲和层析法等。 填空题： 1.为了提高最终产品的回收率：一是提高每一级的回收率，二是减少操作 步骤。 2、评价一个分离过程效率的三个主要标准是：①浓缩程度②分离纯化程
度③回收率。 判断并改错： 原料目标产物的浓度越高，所需的能耗越高，回收成本越大。(×)改：原料目标产物的浓度越低。 选择题： 1. B 可以提高总回收率。 A.增加操作步骤 B.减少操作步骤 C.缩短操作时间 D.降低每一步的收率2．分离纯化早期，由于提取液中成分复杂，目的物浓度稀，因而易采用（ A ） A、分离量大分辨率低的方法 B、分离量小分辨率低的方法 C、分离量小分辨率高的方法 D、各种方法都试验一下，根据试验结果确定 第二章细胞分离与破碎 概念题： 过滤：是在某一支撑物上放多孔性过滤介质，注入含固体颗粒的溶液，使液体通过，固体颗粒被截留，是固液分离的常用方法之一。 离心过滤：使悬浮液在离心力作用下产生离心压力，使液体通过过滤介质成为滤液，而固体颗粒被截留在过滤介质表面，从而实现固液分离，是离心与过滤单元操作的集成，分离效率更高。 填空题： 1.在细胞分离中，细胞的密度ρ S 越大，细胞培养液的密度ρ L 越小，则细 胞沉降速率越大。 2.过滤中推动力要克服的阻力有介质阻力和滤饼阻力，其中滤饼占主导作 用。 3.重力沉降过程中，固体颗粒受到重力，浮力，摩擦阻力的作用，当 固体匀速下降时，三个力的关系重力=浮力+摩擦阻力。 4.区带离心包括差速区带离心和平衡区带离心。
1、质量管理统计方法:排列图和直方图的绘制 绘制排列图步骤： 1）收集一定期间的数据 2）把数据根据原因、部位、工序、人员等分层 3）绘图：左方纵坐标为频数、右方纵坐标为百分数 4）按频数大小由左至右依次用直方形表示 5）分别将各因素频率的百分比累加起来连接成曲线 6）0～80%为A区，是主要因素； 7）80%～90%为B区，是次要因素； 8）90%～100%为C区，一般因素。 绘制直方图步骤： 1)确定组数、组距和组界 为了将数据的最大值和最小值都包含在直方图内，并防止数据落在组界上，将最小值减去半个测量单位，最大值加上半个测量单位。 2）编制频数分布表 计算分布在各个区间段的频数及频率 3）绘制直方图 3、项目经理在项目管理中的主要职责是什么? 1）合同履约的负责人2）项目计划的制定和执行监督人3）项目组织的指挥员4）项目协调工作的纽带5）项目控制的中心6）领导项目部全面管理工作7）领导项目安全生产与质量管理工作8）组织项目质量目标的制定与贯彻实施 4、我国工程建设项目建设程序分为哪几个阶段？简要说明各个阶段的主要内容? 项目建议书阶段业主向国家提出的要求建设某一建设项目的建议文件，项目的轮廓 设想 可行性研究阶段分析和论证建设项目在技术上与经济上是否可行，通过多方案比 较，推荐最佳方案。 设计工作阶段初步设计和技术设计、施工图设计 建设准备阶段征地、拆迁、场地平整、临时用电、用水、路，组织招投标，选择 施工单位，材料、设备订货 建设实施阶段项目决策实施、建设投产发挥投资效益的关键环节 竣工验收阶段投资成果转入生产或使用的标志、交付新增固定资产的过程 5、单项与单位工程的含义。 单位工程————具有独立的设计文件，具备独立施工条件并能形成独立使用功能，但竣工后不能独立发挥生产能力或工程效益的工程，是构成单项工程的组成部分。建筑工程还可以细分为一般土建工程、设备安装工程等 单项工程————具有独立的设计文件，竣工后可以独立发挥生产能力或效益的一组配套齐全的工程项目。如办公楼、住宅；学校中的教学楼、食堂、宿舍等。
填空题 1. .根据吸附剂与吸附质之间存在的吸附力性质的不同，可将吸附分为物理吸附、化学吸附和交换吸附； 2. 比表面积和孔径是评价吸附剂性能的主要参数。 3. 层析操作必须具有固定相和流动相。 4. 溶质的分配系数大，则在固定相上存在的几率大，随流动相的移动速度 小。 5. 层析柱的理论板数越多，则溶质的分离度越大。 6. 两种溶质的分配系数相差越小，需要的越多的理论板数才能获得较大的 分离度。 7. 影响吸附的主要因素有吸附质的性质，温度，溶液pH值，盐的浓度和吸附物的浓度与吸附剂的用量； 8. 离子交换树脂由网络骨架（载体），联结骨架上的功能基团（活性基）和可交换离子组成。 9. 电泳用凝胶制备时，过硫酸铵的作用是引发剂（提供催化丙烯酰胺和双丙烯酰胺聚合所必需的自由基）；甲叉双丙烯酰胺的作用是交联剂（丙烯酰胺单体和交联剂甲叉双丙烯酰胺催化剂的作用下聚合而成的含酰胺基侧链的脂肪族长链）；TEMED的作用是增速剂（催化过硫酸胺形成自由基而加速丙烯酰胺和双丙烯酰胺的聚合）； 10. 影响盐析的因素有溶质种类，溶质浓度，pH 和温度； 11. 在结晶操作中，工业上常用的起晶方法有自然起晶法，刺激起晶法和晶种起晶法； 12. 简单地说离子交换过程实际上只有外部扩散、部扩散和化学交换反应三步；
13. 在生物制品进行吸附或离子交换分离时，通常遵循Langmuir 吸附方程，其形式为c K c q q 0+= 14. 反相高效液相色谱的固定相是 疏水性强 的，而流动相是 极性强 的； 15. 等电聚焦电泳法分离不同蛋白质的原理是依据其 等电点 的不同； 16. 离子交换分离操作中，常用的洗脱方法有 静态洗脱 和 动态洗脱 ； 17. 晶体质量主要指 晶体大小 ， 形状 和 纯度 三个方面； 18. 亲和吸附原理包括 配基固定化 ， 吸附样品 和 样品解析 三步； 19. 根据分离机理的不同，色谱法可分为 吸附、离交、亲和、凝胶过滤色谱 20. 蛋白质分离常用的色谱法有 免疫亲和色谱法， 疏水作用色谱法 ， 金属螯合色谱法 和 共价作用色谱法 ； 21. SDS-PAGE 电泳制胶时，加入十二烷基磺酸钠（SDS ）的目的是消除各种待分离蛋白的 分子形状 和 电荷 差异，而将 分子量 作为分离的依据；加入二硫叔糖醇的目的是 强还原剂，破坏半胱氨酸间的二硫键 ； 22. 影响亲和吸附的因素有 配基浓度 、 空间位阻 、 配基与载体的结合位点 、 微环境 和 载体孔径 ； 23. 阳离子交换树脂按照活性基团分类，可分为 强酸性阳离子交换树脂 、 弱酸性 和 中强酸性 ；其典型的活性基团分别有 3 、 COOH - 、2)(OH PO -； 24. 阴离子交换树脂按照活性基团分类，可分为强碱性、 弱碱性 和 中强碱 性 ；其典型的活性基团分别有-+OH CH RN 33)(、2NH -、兼有以上两种基团； 25. 影响离子交换选择性的因素有 离子水合半径 、 离子价 、 离子强度 、 溶液pH ，温度 、溶液浓度 、 搅拌速率 、和 交联度、膨胀度、颗粒大小 ；
建筑施工项目管理 简答题（含小蓝本及作业册） 07年7月试题 1)什么是流水施工? 答：流水施工是建筑工程项目施工有效的科学组织方法，其实质就是连续作业和均衡施工实现节约工作时间和提供生产效率的目的。 2)试述流水施工使用的各项参数的概念？ 答：在组织流水施工时，用以表达流水施工在工艺、空间和时间等方面开展状态的参数，称为流水施工参数。主要包括施工过程数量、施工段数、流水节拍和流水步距等。 3)造成工程质量事故的原因有哪些？ 答：①违背建设程序；②工程地质勘察原因；③未加固处理好地基；④设计计算问题；⑤建筑材料及制品不合格；⑥施工和管理问题；⑦自然条件影响；⑧建筑结构使用问题；⑨生产设备本身存在缺陷。 08年1月试题 4)简述建筑工程合同订立的原则？ 答：①合同自由原则（意思自治原则）；②诚实信用原则：当事人在从事民事活动时，应诚实守信（降低交易风险和交易费用），以善意的方式履行其义务，不得滥用权利及规避法律或合同规定的义务；③合法原则；④平等、公平原则；⑤不得损害社会公共利益、扰乱社会经济秩序、违背社会公德； 5)怎样判别双代号网络计划的关键工作和关键线路? 答：①总时差为零的工作称为关键工作。②全部由关键工作组成的线路或线路上总的工作持续时间最长的线路应为关键线路。 6)建筑工程质量不符合要求时怎样处理？ 答：①对其中的严重缺陷应返工重做，对一般缺陷则通过翻修或更换器具、设备进行处理，通过返工处理的检验批，应重新进行验收。②在发现试块强度等不满足要求，但经具有资质的法定检测单位检测鉴定能够达到设计要求的，应认为检验批合格，应予以验收；③经检测鉴定达不到设计要求，但经原设计单位核算，认为能够满足结构安全和使用功能时，则该检验批可予以验收。④经返修或加固处理的分项、分部工程，虽然改变外形尺寸，但仍能满足安全使用要求，可按技术处理方案和协商文件进行验收。通过返修或加固处理仍不能满足安全使用要求的分部工程、单位(子单位)工程，则严禁验收。 08年7月试题 7)简述项目和项目管理的含义。 答：项目指具有独特的过程，有开始和结束日期，由一系列相互协调和受控的活动组成。过程的实施是为了达到规定的目标，包括满足时间、费用和资源等约束条件。项目管理是指为了达到项目目标，对项目的策划(规划、计划)、组织、控制、协调、监督等活动过程的总称。 8)试述流水施工的种类及各自的定义。 答：通常所说的流水施工基本方式是指等节奏流水、异节拍流水和无节奏流水三种。 等节拍流水是指在组织流水施工时，如果所有的施工过程在各个施工段上的流水节拍彼此相等。 异节奏流水是指组织流水施工时，同一个施工过程在各施工段上的流水节拍都相等，不同施工过程在同一施工段上的流水节拍不完全相等的一种流水施工组织方式。 9) 5）管理的系统方法（6）持续改进（7）基于事实的决策方法（8）与供方互利的关系 09年1月试题 10)简述项目组织的特点。 答：（1）项目组织的一次性；（2）项目组织的类型多、结构复杂；（3）项目组织的变化较大；（4）项目组织与企业组织之间关系复杂。 11)施工成本控制的依据包括哪些内容？ 答：（1）工程承包合同；（2）施工成本计划；（3）进度报告；（4）工程变更;(5)施工组织设计；（6）分包合同。 12)简述建设工程职业健康安全事故的处理原则。 答：（1）事故原因不清楚不放过；（2）事故责任者和员工没有搜受到教育不放过；（3）事故责任者没有处理不放过；（4）没有制定防范措施不放过。 补充题 13)国家规定哪些工程必须实行监理? 答：（1）国家重点建设工程；（2）大中型公用事业工程；（3）成片开发建设的住宅小区工程：（4）利用外国政府或者国际组织贷款、援助资金的工程；（5）国家规定必须实行监理的其他工程。 14)政府对建设工程质量监督的职能包括哪些方面？ 答：一是监督工程建设的各方主体；二是监督检查工程实体的施工质量。 15)职能式组织结构有什么优缺点? 答：优点：由于将项目委托给企业某一部门组织，不需要设立专门的组织机构，所以项目的运转启动时间短；职能专一，关系简单，便于协调；有利于充分发挥资源集中的优势；。 缺点：由于责任不明，容易导致协调困难和局面混乱；由于在项目和客户之间存在多个管理层次，容易造成对客户的响应迟缓；不利于调动参与项目人员的积极性；跨部门的交流沟通有时比较困难。 16)项目式组织结构有什么优缺点？ 答：优点：项目经理对项目全权负责，享有较大的自主权，可以调用整个组织内外的资源；命令单一，决策速度快；团对精神得以充分发挥；对客户的响应较快；组织结构简单灵活，易于操作；易于沟通协调；同时弱化了项目组织与企业职能部门之间的协调关系，减少或避免了本位主义和行政干预。 缺点：每个项目都有自己独立的组织，资源不能共享，会造成一定程度的资源浪费；各类人员来自不同的部门，缺乏合作经验，易造成配合不当，影响积极性的发挥；项目与专业部门的联系少，专业职能部门的优势无法发挥，且职能部门也无法对专业人员进行有效的培训和指导，难于形成专业优势；项目处于相对封闭的环境中，容易造成不同项目在执行组织规章制度上的不一致；项目一旦结束，项目成员的工作没有保障，不利于员工的职业发展。 17)施工项目管理组织机构设置的原则 答：目的性原则；集权与分权统一的原则；专业分工与协作统一的原则；管理跨度与层次的原则；系统化管理的原则；弹性结构原则；精简高效原则 18)项目经理素质要求有哪些？施工项目经理有哪些职、权、利？ 答：项目经理素质要求有：能力要求、经验和业绩要求、知识要求、道德品质要求。 施工项目经理的职责：（1）代表企业实施施工项目管理（2）签订和组织履行“施工项目管理目标责任书”（3）建立质量管理体系和安全管理体系并组织实施（4）组
《生物分离工程》题库 一、填充题 1. 生物产品的分离包括R 不溶物的去除 ，I 产物分离 ，P 纯化 和P 精 制 ； 2. 发酵液常用的固液分离方法有 过滤 和 离心 等； 3. 离心设备从形式上可分为 管式 ， 套筒式 ， 碟片式 等型式； 4. 膜分离过程中所使用的膜，依据其膜特性（孔径）不同可分为 微滤膜 ， 超滤膜 ， 纳滤膜 和 反渗透膜 ； 5. 多糖基离子交换剂包括 离子交换纤维素 和 葡聚糖凝胶离子交换剂 两大类； 6. 工业上常用的超滤装置有 板式 ， 管式 ， 螺旋式和 中空纤维式 ； 7. 影响吸附的主要因素有 吸附质的性质 ， 温度 ， 溶液pH 值 ， 盐的浓度 和 吸附物的浓度与吸附剂的用量 ； 8. 离子交换树脂由 网络骨架 （载体） ， 联结骨架上的功能基团 （活性基） 和 可 交换离子 组成。 9. 电泳用凝胶制备时，过硫酸铵的作用是 引发剂（ 提供催化丙烯酰胺和双丙烯酰胺聚 合所必需的自由基） ； 甲叉双丙烯酰胺的作用是 交联剂（丙烯酰胺单体和交联剂甲叉双丙烯酰胺催化剂的作 用下聚合而成的含酰胺基侧链的脂肪族长链） ； TEMED 的作用是 增速剂 （催化过硫酸胺形成自由基而加速丙烯酰胺和双丙烯酰胺的 聚合 ）； 10 影响盐析的因素有 溶质种类 ， 溶质浓度 ， pH 和 温度 ； 11.在结晶操作中，工业上常用的起晶方法有 自然起晶法 ， 刺激起晶法 和 晶种起晶法 ； 12.简单地说离子交换过程实际上只有 外部扩散 、内部扩散 和化学交换反应 三步； 13.在生物制品进行吸附或离子交换分离时，通常遵循Langmuir 吸附方程，其形式为c K c q q 0+= 14.反相高效液相色谱的固定相是 疏水性强 的，而流动相是 极性强 的；常用的固定相有C 8 辛烷基 和 十八烷基C 18 ；常用的流动相有 乙腈 和 异丙醇 ； 15.超临界流体的特点是与气体有相似的 粘度和扩散系数 ，与液体有相似的 密度 ； 16.离子交换树脂的合成方法有 加聚法 和 逐步共聚法 两大类；
第一章 1．生物分离工程的一般过程P4 答：①发酵液的预处理主要采用凝聚和絮凝等技术来加速固相，液相分离，提高过滤速度。过滤、离心是其最基本的单元操作。 ②产物的提取采用沉淀、吸附、萃取、超滤等单元操作。 ③产物的精制常采用色谱分离技术，有层析、离子交换、亲和色谱、吸附色谱、电色谱。 ④成品的加工处理浓缩、结晶、干燥 第二章 一、概念： 1.发酵液的预处理：指采用凝聚和絮凝等技术来加速固相、液相分离，提高过滤速度。 2.凝集（凝聚）：指在投加的化学物质（如水解的凝聚剂，铝、铁的盐类或石灰等）作用下，发酵液中的 胶体脱稳并使粒子相互凝集成为1mm大小块状絮凝体的过程。 3.絮凝：指某些高分子絮凝剂能在悬浮粒子之间产生桥梁作用，使胶粒形成粗大絮凝团的过程。 4.离心分离：指在离心场的作用下，将悬浮液中的固相和液相加以分离的方法。主要用于颗粒较细的悬 浮液和乳浊液的分离。（分为差示离心、均匀介质离心、密度梯度离心、等密度梯度离心和平衡等密度离心。） 5.等电点沉淀法：利用蛋白质等两性化合物在等电点时溶解度最低，易产生沉淀的性质，用酸化剂或碱化 剂调节发酵液的pH，使其达到菌体蛋白的等电点而产生沉淀。 二、填空： 1、按过滤时料液流动方向的不同，分为常规过滤和错流过滤。 2、可溶性杂蛋白的去除法包括：等电点沉淀法、热处理法、化学变性沉淀法和吸附法 三、问答 1、发酵液的一般特征？ ①组成大部分为水； ②发酵产物的浓度较低； ③发酵液中的悬浮固形物主要是菌体和蛋白的胶状物； ④含有培养基中的残留成分，如无机盐类、非蛋白质大分子及其降解产物； ⑤含有其他少量代谢副产物；
⑥含有色素、毒性物质。热原质等有机杂质。 2、常用的絮凝剂有什么？ 无极絮凝剂：Al2(SO4)3·18H2O (明矾)、氯化钙、氯化镁碱式氯化铝、高分子无机聚合物等。 有机絮凝剂：壳多糖及其衍生物、明胶、丙烯酰胺类、聚苯乙烯类、聚丙烯酰类聚乙烯亚胺类。 3、影响絮凝效果的因素？ 答：①絮凝剂的种类； ②絮凝剂浓度； ③ pH; 最关键因素，影响絮凝剂活性基团的解离度。 ④搅拌转速和时间。 4、发酵液预处理的方法？ 答：①凝聚和絮凝方法 ②加热法 ③调节PH法 ④加水稀释法 ⑤加入助滤剂法 ⑥加吸附剂法或加盐法 ⑦高价态无机离子去除法 Ca2+——草酸、草酸钠→形成草酸钙沉淀 Mg2+——三聚磷酸钠(Na5P3P10)→形成三聚磷酸钠镁可溶性络合物 Fe3+——黄血盐(K4Fe(CN)6) →普鲁士蓝淀 ⑧可溶性杂蛋白的去除法 3、VB12发酵液絮凝预处理的研究 答：由正交试验确定影响絮凝的主要因素，结果表明，最佳絮凝条件：絮凝剂为聚合氯化铝、加入体积分数7%，pH6、搅拌速度14r/min、搅拌时间45s。通过加压过滤实验，得到絮凝后
建筑工程资料管理试卷 一、单项选择题： 1、建筑工程资料地组卷厚度，一般不超过（ D ）mm. A、10 B、20 C、30 D、40 2、对列入城建档案馆接受范围内地工程，工程竣工验收后地（ D ）内向城建档案馆移 交一套符合规定地工程档案. A、15天 B、1个月 C、2个月 D、3个月 3、施工单位对工程实行总承包地，总包单位负责收集、汇总各分包单位形成地工程档 案并及时向（B）移交. A、监理单位 B、建设单位 C、城建档案馆 D、质量监督站 4、一个建设工程由多个单位工程组成时，工程文件应按（B）组卷. A、单项工程 B、单位工程 C、分部工程 D、分项工程 5、（B）是施工单位用以指导、规范和科学化施工地资料. A、施工管理质量 B、施工技术资料 C、施工物资资料 D、施工监测资料 6、水泥地强度应以标养（C）d试件结果为准. A、7 B、3 C、28 D、56 7、建筑节能产品进场时应有出厂质量证明文件，并应按规定见证取样和（ D ），有实 验报告. A、检测 B、监测 C、实验 D、送检 8、检验批施工质量验收记录表由施工工程（B）填写，监理工程师（建设单位工程技术 负责人）组织质量检查员等进行验收. A、资料员 B、质量检查员 C、施工员 D、技术负责人 9、分部工程施工质量验收记录，勘察单位只可确认（A）分部工程. A、地基基础 B、主体结构 C、屋面工程 D、装饰装修工程 10、单位工程施工质量控制质量核查记录，核查人栏由（B）签认. A、建设单位工程负责人 B、总监理工程师亲自 C、总监理工程师委托专业监理工程师 D、专业监理工程师 11建筑工程资料，简称为（B） A.施工材料 B.工程资料 C.交工资料 D.竣工资料
生物分离工程复习题 一、名词解释 1.凝聚：在电解质作用下，破坏细胞菌体和蛋白质等胶体粒子的分散状态，使胶体粒子聚集的过程。 2.分配系数：在一定温度、压力下，溶质分子分布在两个互不相溶的溶剂里，达到平衡后，它在两相的浓度为一 常数叫分配系数。 3.絮凝：指在某些高分子絮凝剂存在下，在悬浮粒子之间发生架桥作用而使胶粒形成粗大的絮凝团的过程 4.过滤：是在某一支撑物上放过滤介质，注入含固体颗粒的溶液，使液体通过，固体颗粒留下，是固液分离的常 用方法之一。 5.萃取过程：利用在两个互不相溶的液相中各种组分（包括目的产物）溶解度的不同，从而达到分离的目的 6.吸附：是利用吸附剂对液体或气体中某一组分具有选择性吸附的能力，使其富集在吸附剂表面的过程。 7.反渗析：当外加压力大于渗透压时，水将从溶液一侧向纯水一侧移动，此种渗透称之为反渗透。 8.离心沉降：利用悬浮液或乳浊液中密度不同的组分在离心力场中迅速沉降分层，实现固液分离 9.离心过滤：使悬浮液在离心力场作用下产生的离心力压力，作用在过滤介质上，使液体通过过滤介质成为滤液， 而固体颗粒被截留在过滤介质表面，从而实现固液分离，是离心与过滤单元操作的集成，分离效率更高 10.离子交换：利用离子交换树脂作为吸附剂，将溶液中的待分离组分，依据其电荷差异，依靠库仑力吸附在树脂 上，然后利用合适的洗脱剂将吸附质从树脂上洗脱下来，达到分离的目的。 11.固相析出技术：利用沉析剂（precipitator）使所需提取的生化物质或杂质在溶液中的溶解度降低而形成无定 形固体沉淀的过程。 12.助滤剂：助滤剂是一种具有特殊性能的细粉或纤维，它能使某些难以过滤的物料变得容易过滤 13.色谱技术：是一组相关分离方法的总称，色谱柱的一般结构含有固定相（多孔介质）和流动相，根据物质在两 相间的分配行为不同（由于亲和力差异），经过多次分配（吸附-解吸-吸附-解吸…），达到分离的目的。 14.有机溶剂沉淀：在含有溶质的水溶液中加入一定量亲水的有机溶剂，降低溶质的溶解度，使其沉淀析出。 15.等电点沉淀：调节体系pH值，使两性电解质的溶解度下降，析出的操作称为等电点沉淀。 16.膜分离：利用膜的选择性（孔径大小），以膜的两侧存在的能量差作为推动力，由于溶液中各组分透过膜的迁 移率不同而实现分离的一种技术。 17.化学渗透破壁法：某些化学试剂，如有机溶剂、变性剂、表面活性剂、抗生素、金属螯合剂等，可以改变细胞 壁或细胞膜的通透性，从而使胞内物质有选择地渗透出来。 18.超临界流体：超临界流体是状态超过气液共存时的最高压力和最高温度下物质特有的点——临界点后的流体。 19.反渗透：在只有溶剂能通过的渗透膜的两侧，形成大于渗透压的压力差，就可以使溶剂发生倒流，使溶液达到 浓缩的效果，这种操作成为反渗透。 20.树脂工作交换容量：单位质量干树脂或单位体积湿树脂所能吸附的一价离子的毫摩尔数称为树脂交换容量，在 充填柱上操作达到漏出点时，树脂所吸附的量称为树脂工作交换容量。 21.色谱阻滞因数：溶质在色谱柱（纸、板）中的移动速率与流动相移动速率之比称为阻滞因数，以Rf表示。 22.膜的浓差极化：是指但溶剂透过膜，而溶质留在膜上，因而使膜面浓度增大，并高于主体中浓度。 23.超滤：凡是能截留相对分子量在500以上的高分子膜分离过程称为超滤，它主要是用于从溶剂或小分子溶质中 将大分子筛分出来。 24.生物分离技术：是指从动植物与微生物的有机体或器官、生物工程产物（发酵液、培养液）及其生物化学产品 中提取、分离、纯化有用物质的技术过程。 25.物理萃取：即溶质根据相似相溶的原理在两相间达到分配平衡，萃取剂与溶质之间不发生化学反应。 26.化学萃取：则利用脂溶性萃取剂与溶质之间的化学反应生成脂溶性复合分子实现溶质向有机相的分配。 27.盐析：是利用不同物质在高浓度的盐溶液中溶解度的差异，向溶液中加入一定量的中性盐，使原溶解的物质沉 淀析出的分离技术。 28.有机聚合物沉析：利用生物分子与某些有机聚合物形成沉淀而析出的分离技术称为有机聚合物沉析。 29.离子交换平衡：当正反应、逆反应速率相等时，溶液中各种离子的浓度不再变化而达平衡状态，即称为离子交 换平衡。 30.功能基团：离子交换树脂中与载体以共价键联结的不能移动的活性基团，又称功能基团 31.平衡离子：离子交换树脂中与功能基团以离子键联结的可移动的平衡离子，亦称活性离子。 32.树脂的再生：就是让使用过的树脂重新获得使用性能的处理过程，树脂的再生反应是交换吸附的逆反应。 33.层析分离：是一种物理的分离方法，利用多组分混合物中各组分物理化学性质的差别，使各组分以不同的程度 分布在两个相中。 34.流动相：在层析过程中，推动固定相上待分离的物质朝着一个方向移动的液体、气体或租临界体等，都称为流 动相。 35.正相色谱：是指固定相的极性高于流动相的极性，因此，在这种层析过程中非极性分子或极性小的分子比极性 大的分子移动的速度快，先从柱中流出来。
填空题 1. 为了提高最终产品的回收率一是（提高每步分离效率），二是（减少分离步骤）。 2. 评价一个分离过程效率的三个主要标准是：（浓缩率），（分离系数）和（产品回收程度） 3?生物产品的分离过程包括发酵液的预处理和（液固分离），（产品的提取），（产品的精制） 和（产品的加工处理）。 4?生化反应所起的作用是产生目的产物，指标是（产率）和（转化率），而生物分离解决的 是如何从反应液中获取这些物质，涉及的是（收率）和（纯度）。 5?生物分离的主要任务：从发酵液和细胞培养液中以（最高的效率），（理想的纯度）和（最小的能耗）把目的产物分离出来。 6?生物分离过程的特点包括：（生物分离过程的体系特殊），（生物分离过程的工艺流程特殊），（生物分离过程的成本特殊）。 7. 物质分离的本质是识别混合物中不同溶质间（物理），（化学）和（生物）性质的差别利用 能识别这些差别的（分离介质）和扩大这些差别的（分离设备） 8. 性质不同的溶质在分离操作中具有不同的（传质速率）和或（平衡状态） 9. 平衡分离是根据溶质在两相间（分配平衡）的差异实现分离；溶质达到分配。平衡为扩散 传质过程，推动力仅取决于系统的（热力学性质）。 10. 差速分离是利用外力驱动溶质迁移产生的（速度差）进行分离的方法。 1. 在细胞分离中，细胞的密度越（大），细胞培养液的密度越（小），则细胞沉降 2. 区带离心包括（差速）区带离心和（等密度）区带离心。
3. 为使过滤进行的顺利通常要加入（惰性助滤剂）。 4. 发酵液常用的固液分离方法有（离心）和（过滤）等。 5?常用离心设备可分为（离心沉降）和（离心过滤）两大类； 6?常用的工业絮凝剂有（无机絮凝剂）和（有机絮凝剂）两大类。 7. 工业生产中常用的助滤剂有（硅藻土）和（珍珠岩粉）。 8. 重力沉降过程中，固体颗粒受到（重力），（浮力），（摩擦阻力）的作用， 固体匀速下降时，三个力的关系（重力=浮力+摩擦阻力）。 9. 发酵液预处理的方法包括：（凝集），（絮凝），（加热法）；（调节pH法），（加水稀释法），加入（助滤剂）和（吸附剂）。 10. 发酵液中胶粒保持稳定的原因：（双电层）和（蛋白质周围水化层）结构。 11. 发酵液预处理过程中的相对纯化主要包括去除（高价态无机离子），（可溶性杂蛋白质），（色素）和（多糖类物质）。 12. 发酵液中杂蛋白的去除方法主要有（等电点沉淀法），（热处理法）和（化学变性沉淀法）。 13. 差速区带离心用于分离（大小）不同的颗粒，与颗粒（密度）无关。等密度区带离心包 括（预形成梯度密度离心）和（自形成梯度密度离心）两种方式。离心达到平衡后，样品颗粒的区带形状和平衡位置（不再发生变化）。 1?单从细胞直径的角度，细胞（直径越小），所需的压力或剪切力越大，细胞越 2. 常用的化学细胞破碎方法有（.酸碱法），（盐法），（表面活性剂处理），（有机溶剂法）和（螯合剂）。 3. 包涵体的溶解需要打断蛋白质分子和分子间的（共价键），（离子键），疏水作用及静电 作用等，使多肽链伸展。因此，包涵体的溶解需要强的变性剂，如（8mol/L尿素）和（6mol/L 盐
管理学原理重点 第一章 1.管理的定义:管理是根据组织的内外环境条件，通过计划、组织、领导、控制等 一系列活动，对组织所拥有的资源进行合理配置和有效使用，以 实现组织预定目标的过程。 2.管理的性质：管理的二重性原理 （1）自然属性：与生产力和社会化大生产相联系 由共同劳动的社会化的性质产生的，它要求管理必须根据现代大生产的客观规律，合理地组织生产力，使组织资源得到最佳组合和合理利用，取得最大经济效益。 （2）社会属性：与生产关系和社会制度相联系 由共同劳动所采取的社会结合方式的性质产生的，它要求管理必须体现社会制度的本质特征，不断维护和完善生产关系。 … （3）现实意义：管理的两重性原理是马克思主义管理理论的主要内容，是指导人们探索和掌握管理体系的特点和规律性、实现管理任务的有力武器，是建立社会主义管理科学的理论基础和基本出发点。 认识和掌握管理的两重性原理，可以使我们分清资本主义管理和社会主义管理的共性和个性，正确地处理批判与继承、学习与独创、吸收国外管理经验与结合中国实际之间的关系，实事求是地研究和借鉴国外先进管理中有益的东西，做到兼收并蓄，古为今用，洋为中用。这对于解决管理中的实践问题，实现组织目标，有着重要的理论意义和现实意义。 3.管理的特征：（1）管理的目的是实现组织的预定目标 （2）管理是一个过程 （3）管理是对组织拥有的各种资源的优化整合 （4）管理的核心是协调人际关系 （5）管理活动是在一定的环境条件下开展的 4.管理的职能：（1）计划职能：对企业未来活动如何进行的预先筹划。 ^
（2）组织职能：设计和维持一整套职位系统，合理分工与合作， 协调企业的人力、物力等资源，使企业活动顺畅 进行。 （3）领导职能：指挥、影响和激励下属为实现企业目标而努力工 作。 （4）控制职能：确保企业活动朝着规定的企业目标运行而进行的 监察及修正活动。 5.管理者的分类： （1）按管理者在组织中所处的层次分类： A.高层管理人员：决策性工作 B.中层管理人员：执行性工作 C.基层管理人员：作业性工作 { ①高层管理者:对组织负全责，主要侧重于沟通组织与外部的联系和决定组 织的大政方针，注重良好环境的创造和重大决策的正确性。 （高层管理者，计划和控制职能的发挥显得更为重要） ②中层管理者:承上启下，主要职责是正确领会高层的指示精神，创造性地 结合本部门的工作实际，有效指挥各基层管理者开展工作， 注重的是日常管理事务。 ③基层管理者:主要职责是直接指挥和监督现场作业人员，保证完成上级下 达的各项计划和指令，他们主要关心的是具体任务的完成。 （基层管理者，领导职能的发挥更为重要） （2）按管理者所负责的组织活动范围分类： A.综合管理者 B.专业管理者 ` 6.管理者的技能：（1）技术技能：使用某一专业领域有关的工作程序、技术和知 识完成组织任务的能力。 （2）人际技能：管理者处理人与人之间关系的技能，即理解、
第一章绪论 一、生物分离工程在生物技术中的地位？ 二、生物分离工程的特点是什么？ 1．产品丰富产品的多样性导致分离方法的多样性 2．绝大多数生物分离方法来源于化学分离 3．生物分离一般比化工分离难度大 3.生物分离工程可分为几大部分，分别包括哪些单元操作？ 三、生物分离过程一般分四步： 1.固-液分离（不溶物的去除） 离心、过滤、细胞破碎 目的是提高产物浓度和质量 2.浓缩（杂质粗分） 离子交换吸附、萃取、溶剂萃取、反胶团萃取、超临界流体萃取、双水相萃取 以上分离过程不具备特异性，只是进行初分，可提高产物浓度和质量。 3．纯化 色谱、电泳、沉淀 以上技术具有产物的高选择性和杂质的去除性。 4．精制结晶、干燥 四、在设计下游分离过程前，必须考虑哪些问题方能确保我们所设计的工艺过程最为经济、可靠？ （1）产品价值 （2）产品质量 （3）产物在生产过程中出现的位置 （4）杂质在生产过程中出现的位置 （5）主要杂质独特的物化性质是什么？ （6）不同分离方法的技术经济比较 上述问题的考虑将有助于优质、高效产物分离过程的优化。 五、.生物分离效率有哪些评价指标？ 1.目标产品的浓缩程度——浓缩率m 2．系数α回收率REC 第二章细胞分离与破碎
1．简述细胞破碎的意义 一、细胞破碎的目的 由于有许多生化物质存在于细胞内部，必须在纯化以前将细胞破碎，使细胞壁和细胞膜受到不同程度的破坏（增大通透性）或破碎，释放其中的目标产物，然后方可进行提取。 二、细胞破碎方法的大致分类 破碎方法可归纳为机械破碎法和非机械破碎法两大类，非机械破碎法又可分为化学（和生物化学）破碎法和物理破碎法。 1．机械破碎 处理量大、破碎效率高速度快，是工业规模细胞破碎的主要手段。 细胞的机械破碎主要有高压匀浆、研磨、珠磨、喷雾撞击破碎和超声波破碎等。 2．化学（和生物化学）渗透破碎法 （1）渗透压冲击法（休克法）（2）酶溶（酶消化）法 3．物理破碎法 1）冻结－融化法（亦称冻融法）（2）干燥法 空气干燥法真空干燥法冷冻干燥法喷雾干燥法 三、化学渗透法和机械破碎法相比有哪些优缺点？ 化学渗透破碎法与机械破碎法相比优点：化学渗透破碎法比机械破碎法的选择性高，胞内产物的总释放率低，特别是可有效地抑制核酸的释放，料液的粘度小，有利于后处理过程。 化学渗透破碎法与机械破碎法相比缺点：化学渗透破碎法比机械破碎法速度低，效率差，并且化学或生化试剂的添加形成新的污染，给进一步的分离纯化增添麻烦。 第三章初级分离 一、常用的蛋白质沉淀方法有哪些？ 盐析沉淀,等电点沉淀,有机溶剂沉淀,热沉淀 二、影响盐析的主要因素有哪些？ （1）离子强度：Ks和β值, 强度越大,蛋白质溶解度越小； （2）蛋白质的性质:因相对分子质量和立体结构而异,结构不对称、相对分子质量大的蛋白质易于盐析； （3）蛋白质的浓度：蛋白质浓度大，盐的用量小，共沉作用明显，分辨率低；蛋白质浓度小，盐的用量大，分辨率高；2.5%～3.0% 时最适合； （4）pH值：通常调整到pI附近，盐浓度较大会对等电点产生较大影响，pH对不同蛋白质的共沉影响；