法系二元猪

母猪生产性能带来经济效益的对比针对近几年来客户对法系二元猪、法系原种猪生产性能的认可，对于部分省市养猪户在种猪选择方面还存在误区，过分重视体形外貌、注重高瘦肉率，从而造成生产上操作困难，造成经济损失，现对母猪生产性能对养猪经济效益举例分析如下：序：现代工厂化养猪以周为单位安排生产1)母猪的繁殖周期为：21.5周1.妊娠期：16.5周2.哺乳期：4周3.待配期：1周2)母猪年产窝数1.按繁殖周期测算：每头母猪年产窝数为2.422.按受胎率测算:A.母猪断奶后第一情期受胎率为80%B.第二情期受胎率为60%C.第二情期未受胎者淘汰实际生产中每头母猪年产仔窝数为2.18窝一.料肉比对养猪经济效益的影响例：A猪B猪料肉比:2.12料肉比：2.221相差0.1每头猪生长到100公斤可以节约饲料:0.1×100公斤=10公斤可以节约资金:10公斤×1.8元/公斤=18元饲养100头母猪的猪场年可节约资金:1600头/年出栏×18元/头=28800元饲养600头母猪的猪场年可节约资金:10000头×18元/头=180000元二、繁殖性能对养猪经济效益的影响例：A猪产健仔：9.5头B猪产健仔：9头，每窝相差0.5头，每头母猪每年可以多产：每头2.18窝/年×0.5头=1.09头饲养100头母猪年可多产:100头×1.09=109头A.增加效益1.可以降低仔猪成本:2000元（耗料）+2000元×0.2（其他费用）=2400元备注：2000元为母猪的饲料成本。

2400元/（2.18×9.5头）=115.89元2400元/（2.18×9头）=122.33元每头仔猪可以降低成本:122.33元-115.89元=6.44元每窝仔猪可以降低成本:6.44元×9.5头=61.18元每养100头母猪年可以降低成本：100头×2.18窝×61.18元=13337.24元B.可以增加获利每饲养100头母猪年可产窝数:100头×2.18窝/头=218窝每饲养100头母猪年可增效:可多出栏：218×0.5=109头109×100元/头=10900元每饲养100头母猪可多获利：13337.24元+10900元=24237.24元若饲养600头母猪可获利:24237.24×6=145423.44元结论高繁殖性能低料肉比的母猪会产生高效益。

二元母猪的饲养管理作者：张冬梅周自强来源：《现代畜牧科技》2015年第02期1后备二元母猪的饲养管理1.1饲养一洋一土二元母猪4月龄、洋二元母猪5月龄前可小群饲养，根据其体重大小、肥瘦和性情强弱，每圈饲养4～6头母猪。

保证充足的饮水，饲喂自配配合饲料，采用湿拌料，自由采食，让其充分发育。

本阶段的饲养目标是要确保大多数一洋一土二元母猪4～5月龄、洋二元母猪5～6月龄第一次发情。

而后，饲料质量要下降，减少蛋白饲料，增加青绿多汁饲料，同时将饲料日喂量限制在2.5～3.0kg，控制体重，调整膘情，保持八成膘，促使早发情、早配种，但一定要坚持在第三情期第一次配种。

1.2防疫除常规猪瘟、猪丹毒、猪肺疫、高致病性猪蓝耳病等烈性传染病的免疫外，为防止死胎与流产等繁殖障碍发生，所有后备母猪必须在配种前2周注射1次细小病毒疫苗，若春季配种还要在配种前注射乙脑疫苗，5月龄以下母猪注射2次（间隔2周），5月龄以上母猪注射1次。

1.3管理母猪应加强运动，增强体质，防止过肥及肢蹄发育不良，保持圈舍干燥，尽量避免冲洗，湿度过高易引起蹄疾、关节风湿病。

对5月龄以上的、含外血超过50%的杂种母猪，尤其是纯外种母猪要定期与公猪接触，增加刺激，促进母猪正常发情。

2妊娠期的饲养管理2.1妊娠前期此阶段重点是保胎。

因此，要保证供给母猪充足营养，促进胎儿整齐发育。

这时期要特别注意，妊娠母猪应保持安静，避免机械性刺激、高温热应激、高热性疾病，禁止饲喂腐败、发霉、变质、冰冷、有毒性或有强烈刺激性或营养严重不全的和高能量的饲料，饲料变换也不能频繁，以免引起死胎和流产。

2.2妊娠中期每头母猪供应饲料2.0～2.5kg，冬季供应2.5kg，每天2次，饲喂妊娠期料。

禁止使用发霉、变质饲料。

控制母猪的膘情，防制母猪过肥或过瘦。

2.3妊娠后期这阶段胎猪生长发育特别快，其增重占全期的2/3左右，母猪体重很快增加，所需营养物质明显增加。

因此，此时要注意加强营养，保证饲料质量，逐渐减少青、粗饲料，增加精饲料饲喂量，对膘情中等的母猪要将饲料加至2.7～3.0kg，冬季供应3.2kg，每天2次，膘情很好的不要加料。

规模养猪场二元杂交母猪饲养技术所谓二元杂交母猪，即长白公猪与大白母猪或者是大白公猪与长白母猪杂交所产生的一代杂种（长大或大长）母猪。

如果再与杜洛克杂交，所生产的杜长大或杜大长三元杂交商品猪，由于二元杂交猪的父母代属于国外引入品种，在饲养管理上有其独特的技术要求。

笔者根据多年规模猪场选育种技术管理的实践，现归纳如下：一、后备母猪的饲养管理1、后备母猪的选择：①身体健康和无遗传疾患：后备猪应是生长发育正常，精神活泼，健康无病，并来自无任何遗传疾患的家系。

猪的遗传病有多种，常见的有疝气、乳头排列不整齐、瞎乳头等。

遗传疾病影响生产性能的发挥，给生产管理带来不便，严重的造成死亡。

②体型外貌的选择：后备猪体形外貌应具有品种特征，例如，毛色、耳型、头型、背腰长短、体躯宽窄、四肢粗细高矮等均要符合品种要求。

2、选择后备母猪的时间① 2月龄选择：2月龄选种是窝选，就是选留大窝中的好个体。

窝选是在父母亲都是优良个体的相同条件下，从产猪头数多、哺育率高、断奶和育成窝重大的窝中选留发育良好的仔猪。

② 4月龄选择：主要是淘汰那些生长发育不良或者是有突出缺陷的个体。

③ 6月龄选择：后备猪达6月龄时各组织器官已经有了相当发育，优缺点更加突出明显，可根据多方面的性能进行严格选择，淘汰不良个体。

④配种前选择：后备猪在初配前进行最后一次挑选，淘汰性能器官发育不理想、发情周期不规律、发情症状不明显的后备母猪。

3、后备母猪的饲养：饲喂时要定时定量，日喂2次，每头猪平均日喂量2kg，并要视其膘情进行适当加料或减料，原则上是必须达到八成膘情。

如果存在营养不够，体况偏瘦，影响了发情、配种、怀孕和哺乳。

4、后备母猪的防疫：六月龄时注射口蹄疫疫苗3ml/头、猪瘟疫苗3头份/头、蓝耳病疫苗2 ml/头、链球菌苗2ml/头。

配种前一个月注射细小病毒疫苗和乙脑疫苗，各1-1.5头份/头。

二、怀孕母猪的饲养管理1、后备母猪的配种后备母猪年龄达8月龄，体重达110kg时即可配种，当其中一项指标不到时，以体重为准，比较简易的操作办法是后备母猪第一、第二个情期不配种，等到第三个情期时进行。

猪场科学引种引种是每个猪场生产经营者都要考虑的问题，它是实现品种改良和迅速提高养猪效益的有效途径，在养猪企业中，品种的改良速度是牵制企业发展速度的重要因素。

无论是到国外引种，还是在国内引种，都应该树立一种科学的引种理念，即三个意识：品牌意识、健康意识、良种意识。

在现代化养猪生产中，一个养猪场经济效益的好坏除了跟市场行情、猪场的投资环境及饲养管理等有关外，种猪的引入便是**为重要的环节了。

优良的种猪是提高养猪效益的基础要素，而种猪质量却是关系养猪成败的关键环节。

引种是每个猪场生产经营者都要考虑的问题，它是实现品种改良和迅速提高养猪效益的有效途径，在养猪企业中，品种的改良速度是牵制企业发展速度的重要因素。

无论是到国外引种，还是在国内引种，都应该树立一种科学的引种理念，即三个意识：品牌意识、健康意识、良种意识。

1 品牌意识品牌是实力的象征，实力是品牌的支柱。

有品牌、有实力的养猪企业，有自己独特的政策优势、雄厚的资金优势和过硬的技术优势，从客观的角度来讲，这样的种猪企业有可能、也有能力生产出更为优良的种猪。

更不可忽视的是，在种猪引进的同时，其所附带的品牌附加值，如完善的、更为人性化的售前、售中、售后服务，内容包括围绕养猪生产各个环节的培训及指导等。

品牌意识作为现代种猪生产企业，标准化生产是很重要的品牌标志之一。

推行标准化生产是促进养殖业从数量型到质量型转变，提高产品质量，增强企业竞争力的重要措施。

温家宝总理指出，“建立农业标准化体系并通过示范加以推广，是农业结构战略性调整的一项基础性工作，直接关系到实现农业的市场化、产业化、集约化、现代化”。

种猪企业品牌经营的基础就是标准化生产。

2 健康意识目前猪病让太多的养猪生产者无奈、苦闷和彷徨，有时一旦发病简直是防不胜防，因此健康的养猪理念显得尤其重要。

猪群保健掰开了揉碎了讲是一个庞大的系统工程，它涉及养猪生产的各个环节，包括猪场设计、饲料因素、环境因素、气候因素、饲养管理因素、品种因素及整个猪群的健康水平和免疫状况等。

二元母猪的选育方法作者：王明忠黄忠燕谭建春来源：《农家科技下旬刊》2014年第11期摘要：饲养二元母猪生产三元商品猪，增强我县生猪的市场竞争力提高经济和社会效益，促进我县养猪业持续快速发展具有重要作用。

选育二元母猪的科技推广也就成了我们基层畜牧工作站的重要指导工作。

关键词：选育目标与方法；引种；组建基础群；二元母猪的选择；培育技术一、选育目标与方法技术路线预期初产母猪产仔9头以上，经产母猪13头以上，乳头7对以上，，初生窝重16.9公斤以上，21日龄断乳窝重初产40千克以上经产45千克以上，2月龄仔猪窝重达195公斤，后备母猪165日龄达80公斤以上，抗病力强。

利用长白公猪与大约克母猪重复选配结合窝选法迅速扩大基础群。

坚持场内性能测定严格选择相对稳定环境条件、严格免疫程序，坚持“防重于治、防治并举”的制度保证猪群健康。

二、组建基础群1. 方法一般的小型猪场饲养长大（LY）二元母猪的目的就是要与杜洛克公猪为终端父本经济杂交生产杜长大（DLY）三元商品猪，这也是该厂的生产项目。

该猪场建立核心群母猪用了两种方法，一是直接引进5—9月龄的初产长约二元母猪和杜洛克种猪，此种方法投资少见效快适宜实力相对弱的小猪场；二是自己生产LY二元母猪。

做法是引进了2头长白公猪，40头约克母猪组建基础群，先进行纯种培育，再经两品种选配杂交生产出845头二元杂母猪，然后才选择80头二元母猪、其他的淘汰为商品猪小猪出售收回投资。

2.引种新美系长白猪新台系杜洛克大约克猪不仅都具有生长速度快、瘦肉率高、饲料报酬高的优点，新台系杜洛克猪还具有体质健壮、适应永胜程海高温高湿、抗病力强的优点，用它作三元商品猪的父本是成熟普遍有效的选择，也是当前和今后养猪业生产的趋势。

本人指导永胜县振兴养殖合作社2012年从三川集团引进146头种猪（其中新美系长白公猪2头、4头杜洛克公猪，大约克母猪40头，100头二元母猪养殖）、组建基础情。

3.LY二元母猪的选择方法应用个体选择、外貌评分选择和生产性能选择相结合的方法：（1）初生重、断乳重、双月重、100公斤日龄体重、5月龄以后发情情况5个方面按统一标准分别给分值，从得分高的选择；（2）体型外貌评分选择法头4分、腮颈8分、前驱20分、背腰长16分、背宽14分、臀部宽25分、四肢13分、腹部12分，选择得分高者还要经过（3）七看：一看眼睛，眼毛短、眼睛亮有神而且饱；：二看躯干肩背要宽且平坦而直长、腹板宽平稍下垂、腹形以“黄瓜肚”为好；三看四肢，要求四肢强健、圆直粗长、大腿肌肉丰满但不显臃肿蹄叉大而明显大小一致底部无伤、体长与体高比例适中；四看皮毛，皮肤红润干净、被毛整齐、毛稀疏平滑光亮；五看粪尿，粪便排出落地成条形或圆形、尿液色清；六看奶头，母猪奶头排列整齐、没有瞎奶和副奶头及内陷乳头、奶头不少于6对、前稀后密；七看外阴，外阴要较大且下垂的；（4）经产母猪生产性能选择；从总产仔猪数初产母猪9头以上、经产母猪13头以上、窝重、死胎数、木奶伊数、发情、配种前体重、体尺、受胎率、流产率、母性好与差等9个方面选择。

论养猪丨“美加丹法台配套”6大品系养猪人该如何选择养猪人常说“猪的品种决定着猪场生产成绩的上限”，目前在我国常见猪的品种有长白猪、大白猪、杜洛克猪三种，通常使用长白和大白杂交（或大白和长白杂交），获得二元母猪后再同杜洛克杂交获得三元猪，利用杂交优势使得育肥猪保持较高的生长速度、瘦肉率，较低的料肉比以及良好的体型和抗应激能力。

但即使是同一品种，不同品系之间也有各自的优劣势，目前世界上公认种猪质量比较好的主要有6大品系，分别为美系、加系、丹系、法系、台系、英系和配套系，因每个品系在育种时选育的方向不同，所以各品系的优势也不同。

比如美系猪体型好，抗应激能力强；配套系虽然没有突出的优点，但是它的优点就是各方面比较平均；丹系猪的产仔数高，但抗应激能力弱。

下面就各个品系的优缺点进行简单点评，以供养猪朋友选择时进行参考。

一、美系美系猪群最大的优点为体型好，生长速度快，120公斤出栏时全程料肉比较低。

但美系猪整体产仔数不高，虽然有传言说目前美系猪已经引入了我国太湖猪的血缘，但是美系猪的产仔数依然比丹系和法系偏低。

因美系猪体型好，后肢粗壮，抗应激能力比较强，而且美系猪的雄性意识比较强，再考虑到美系猪的后备母猪利用率低、泌乳性能相对较差的缺点，所以美系猪更适合作为种猪（公猪）在猪场使用。

二、加系加系同美系的品种特点较为雷同，在育种时的主要培育方向为体型和抗应激能力，所以相对产仔数比较低，比较适合作为种公猪使用而不适合作为母猪使用。

三、丹系丹系猪最大的优势就是产仔数高，平均窝产仔猪数可达到14-15头，产仔数过高会导致仔猪初生重偏低，可能会影响到哺乳仔猪的成活率，但母猪的PSY（母猪一年提供的断奶仔猪数）整体较高，另外后备母猪的生长发育性能比较好。

但丹系猪的体型较差，尤其是肢蹄不够结实，比较容易发生肢蹄型疾病，而且赫尔尼亚基因频率在丹系猪群体中略大，所以所产仔猪阴囊疝的比例比较高。

因丹系猪的主要优点就在于后备母猪的利用率以及产仔数，而缺点主要集中在体型、生长性能方面，所以丹系猪更适合作为母猪使用，利用其高产仔数，提高整个猪群的PSY和MSY。

中国畜牧兽医 2024,51(3):1160-1170C h i n aA n i m a lH u s b a n d r y &V e t e r i n a r y Me d i c i n e 一种外三元纯种猪㊁二元猪㊁三元猪和多元回交猪的鉴定方法研究郑春婷1,2,胡云洋1,2,张春光1,叶子源1,张 琛1,罗云燕1,秦 蕾1,彭子璇1,于亦飞1,冼旺莹1,楚 菡1,洪 亮1,2,张建斌1,2,蒲 蕾1,2(1.天津市绿色生态饲料重点实验室,天津301800;2.天津农学院动物科学与动物医学学院,天津市农业动物繁育与健康养殖重点实验室,天津300392)摘 要:ʌ目的ɔ获得外三元猪品种鉴定的有效基因型并建立系统的猪种质鉴定方案,为外三元猪种质鉴定提供思路㊂ʌ方法ɔ本研究对613头杜洛克猪I l l u m i n a 60K 芯片㊁503头长白猪I l l u m i n a 中芯一号50K 芯片及10头大白猪重测序数据进行纯合位点统计分析,筛选获得常染色体上杜洛克猪㊁长白猪㊁大白猪的特异性单核苷酸多态性(S N P )位点㊂以120头不同品系不同品种猪耳组织D N A 为模板进行P C R 扩增,并测序验证特异性S N P 位点,筛选有效的特异性基因位点,通过位点联合分析建立外三元纯种㊁二元㊁三元及多元回交猪品种鉴定方案㊂ʌ结果ɔ通过芯片数据比对共获得6个长白猪特有S N P s 位点,8个杜洛克猪特有的S N P s 位点,1个大白猪特有S N P 位点㊂测序验证结果显示有效S N P s 位点分别为S S C 13:57293969A>G ㊁S S C 11:47494227T>G ㊁S S C 6:110653413T>C 和S S C 6:110653219T>C ㊂根据位点突变类型及遗传规律,制定了三位点联合分析的种质鉴定方案,并鉴定出长白纯种猪㊁多元回交长白猪等多个猪种㊂ʌ结论ɔ本研究利用猪种特异性S N P 位点制定了外三元纯种㊁二元㊁三元及多元回交猪品种鉴定方案㊂试验结果为外三元猪种质鉴定提供参考和技术支撑㊂关键词:外三元猪;芯片比对;单核苷酸多态性(S N P );种质鉴定中图分类号:S 813.3文献标识码:AD o i :10.16431/j .c n k i .1671-7236.2024.03.028 开放科学(资源服务)标识码(O S I D ):收稿日期:2023-08-30基金项目:天津市科技计划项目(23Z Y C G S N 00230);大学生创新创业训练项目(202310061006);天津市绿色生态饲料重点实验室(T J 202302);天津市生猪产业技术体系创新团队(I T T P R S 2024006)联系方式:郑春婷,E -m a i l :z c t i n g 0216@163.c o m ;胡云洋,E -m a i l :782776064@q q.c o m ㊂郑春婷和胡云洋对本文具有同等贡献,并列为第一作者㊂通信作者蒲蕾,E -m a i l :pu l e i 87@126.c o m R e s e a r c ho n I d e n t i f i c a t i o n M e t h o d o f F o r e i g nT e r n a r y Pu r e b r e d ,B i n a r y ,T e r n a r y a n dM u l t i p l eB a c k c r o s s P i gs Z H E N GC h u n t i n g 1,2,HU Y u n y a n g 1,2,Z H A N GC h u n g u a n g 1,Y EZ i yu a n 1,Z H A N GC h e n 1,L U O Y u n y a n 1,Q I N L e i 1,P E N GZ i x u a n 1,Y U Y i f e i 1,X I A N W a n g y i n g 1,C HU Ha n 1,H O N GL i a n g 1,2,ZH A N GJ i a n b i n 1,2,P U L e i 1,2(1.T i a n j i nK e y L a b o r a t o r y o f G r e e nE c o l o g i c a lF e e d ,T i a n j i n 301800,C h i n a ;2.T i a n j i nK e yL a b o r a t o r y o f A g r i c u l t u r a lA n i m a lB r e e d i n g a n d H e a l 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C6:110653413T>C a n d S S C6:110653219T>C,r e s p e c t i v e l y.A c c o r d i n g t ot h e m u t a t i o n t y p e s a n d g e n e t i c r u l e s o f t h e l o c i,t h e g e r m p l a s m i d e n t i f i c a t i o n s c h e m e o f t h r e e-l o c i j o i n ta n a l y s i sw a sd e v e l o p e d,a n ds e v e r a l p i gb r e e d ss uc ha s L a nd r a ce p u r eb r e e d p i g sa n d m u l t i-b ac k c r o s sL a nd r a ce p i g sw e r e i d e n t if i e d.ʌC o n c l u s i o nɔI n t h i s s t u d y,t h e i d e n t i f i c a t i o n s c h e m e s o f f o r e ig n t e r n a r yp u r eb r e e d,b i n a r y,t e r n a r y a n dm u l t i p l e xb a c k c r o s s p i g b r e e d sw a sd e v e l o p e db y p i g-s p e c i f i c S N P.Th e r e s u l t s p r o vi d e d r e f e r e n c e a n d t e c h n i c a l s u p p o r t f o r g e r m p l a s m i d e n t i f i c a t i o no f f o r e i g n t e r n a r yp i g s.K e y w o r d s:f o r e i g n t e r n a r y p i g;c h i p c o m p a r i s o n;s i n g l e n u c l e o t i d e p o l y m o r p h i s m(S N P);g e r m p l a s mi d e n t i f i c a t i o n中国是传统的猪肉消费大国,当受到猪周期㊁非洲猪瘟及其他疫病影响时,将导致能繁母猪数量下降,生猪存栏量大幅度降低,猪价暴涨[1-3]㊂为了快速增加能繁母猪的数量,一些养殖企业以二元猪或二元回交猪充当外三元纯种猪,以及三元猪充当二元猪售卖,造成市场上二元猪㊁三元猪或多元回交猪种质混乱[4-8]㊂相较于纯种猪和二元猪,三元猪存在发情不明显㊁屡配不孕㊁母性差㊁产仔数低㊁泌乳力低等问题,导致猪群整体生产水平下降,对中国生猪养殖行业造成了重大影响[9]㊂猪群种质混乱,导致无法精准制定猪群生产计划,无法更加科学地选种选配,严重阻碍着生猪产业发展[10-11]㊂虽然猪价降低后,生产性能不好的三元母猪又逐步淘汰,种质混乱问题有所缓解,但影响无法彻底消除㊂所以外三元猪种质鉴定技术,具有巨大的市场需求和应用空间[12]㊂随着现代分子生物学的迅速发展,从D N A分子角度对物种进行鉴定成为一种更加准确和高效的方法㊂目前报道的猪品种鉴定的大都是外种猪和国内猪种区别的鉴定,且主要集中于个别地方猪种的鉴定㊂黄进杰[13]基于高密度S N P芯片利用6种不同方法对9个华南猪种㊁5个外国猪种以及3个杂交品种的猪进行了个体品种鉴定,结果显示,不同方法的鉴定效果各不相同,且鉴定准确率会随参考群大小㊁S N P位点数增大而逐渐提高㊂于辉等[14]采用P C R-R F L P方法探讨了3个引进种猪S L A-D Q A 基因第2外显子的群体遗传结构,发现在E c o RⅠ酶切位点上大白猪仅有B B和A B基因型,在A l uⅠ酶切位点上长白猪仅有N N基因型,杜洛克猪MN基因型频率高于MM和N N基因型㊂目前市场上缺乏用于外三元猪种质鉴定的有效标记基因,能用来鉴别大白猪㊁长白猪㊁杜洛克猪和二元㊁三元及多元回交猪的基因型非常少[15-16]㊂尽管基因组选择技术在动物育种上取得了良好的效果,但它需要一个庞大的参考群体,参考群越大,品种鉴定的成本越高[17-18]㊂商业化的全基因组芯片测序,比对获得猪源信息的方法较为常见,但是对鉴定的设备和技术要求比较高,检测数量有限㊂目前市场上缺乏相对简单㊁快捷的外三元猪品种鉴定的方法㊂因此本研究通过有效单核苷酸多态性(S N P)位点探索猪种质鉴定方案,以期建立一种快速㊁高效㊁成本低的外三元猪的品种鉴定方法㊂1材料与方法1.1数据来源503头长白猪(丹系长白猪种)康普森I l l u m i n a 中芯一号50K芯片位点数据,来自天津农业科学院畜牧兽医研究所;613头杜洛克猪(美系猪种) I l l u m i n a60K芯片位点数据和10头大白猪(5头法系㊁5头加系猪种)重测序数据均来自中国农业科学院北京畜牧兽医研究所㊂1.2样品采集试验所用120头不同品系㊁不同品种猪耳组织分别由中国农业科学院北京畜牧兽医研究所㊁天津农业科学院畜牧兽医研究所㊁西北农林科技大学㊁泾1611中国畜牧兽医51卷阳百川合汇农业开发有限公司㊁广西金陵集团和陕西正能种猪基因科技有限公司提供,每个样品取约0.5g,分别装入含75%酒精的离心管中,―80ħ保存备用㊂其中丹系长白猪㊁大白猪㊁杜洛克猪各5头;加系长白猪㊁大白猪各5头;美系杜洛克猪5头㊁大白猪15头;法系长白猪15头;二元猪40头;三元猪20头㊂1.3主要试剂及仪器2ˑT a q M a s t e rM i x㊁D L2000D N A M a r k e r㊁双蒸水均购自上海捷瑞生物工程有限公司;琼脂糖和50ˑT A E㊁基因组D N A提取试剂盒均购自北京索莱宝生物科技有限公司㊂高速冷冻离心机(C T15R E)购自上海合商科学仪器有限公司;―80ħ超低温冰箱(DW-86L388J)购自H a i e r公司;P C R扩增仪(T C-961G1H C)购自杭州博日科技股份有限公司;凝胶自动成像分析仪(A z u r eC300)购自北京深蓝云生物科技有限公司;核酸定量仪(N a n o D r o p2000)购自赛默飞世尔科技公司㊂1.4特异性S N P位点筛选通过613头杜洛克猪I l l u m i n a60K芯片㊁503头长白猪I l l u m i n a中芯一号50K芯片以及10头大白猪重测序数据,借助V L O O K U P工具筛选统计杜洛克猪㊁长白猪和大白猪1~18号常染色体90%以上纯合位点数,比对分析获取各猪种纯合率较高的特异性S N P位点㊂1.5特异性S N P位点验证利用长白猪㊁杜洛克猪㊁大白猪㊁二元猪㊁三元猪对相应的特异性S N P位点进行验证㊂通过批量测序数据对比筛选分析,最终验证获得外三元猪种质鉴定有效S N P位点,制定外三元猪种鉴定方案㊂1.5.1 D N A提取取120头猪耳组织样品,放入2m LP E管中,采用基因组D N A提取试剂盒提取每头猪耳组织基因组D N A,将检测合格的D N A样品使用双蒸水稀释至100n g/μL,―80ħ保存备用㊂1.5.2 P C R扩增及测序根据筛选所得长白猪㊁大白猪㊁杜洛克猪特有S N P位点信息,在E n s e m b l数据库中寻找该位点前后各500b p序列,通过P r i m e rP r e m i e r5.0软件设计相关基因位点的扩增引物,引物序列见表1㊂引物由金唯智生物科技有限公司合成㊂以120头猪基因组D N A为模板进行P C R扩增㊂P C R反应体系30μL:D N A模板4μL,上㊁下游引物(10μm o l/L)各1.5μL,双蒸水补足至30μL㊂P C R反应程序:95ħ预变性4m i n; 94ħ变性10s,55ħ退火30s,72ħ延伸1m i n,共40个循环;72ħ延伸5m i n;4ħ保存㊂P C R产物经1.0%琼脂糖凝胶电泳分离,电泳条件为220V㊁30m i n,将条带明亮㊁大小正确且单一的P C R扩增产物送至生工生物工程(上海)股份有限公司进行S a n g e r测序(正向测序)㊂表1引物信息T a b l e1P r i m e r i n f o r m a t i o n位点L o c i引物序列P r i m e r s e q u e n c e s(5'ң3')产物大小P r o d u c t s i z e/b p退火温度A n n e a l i n g t e m p e r a t u r e/ħS S C1:245929901T>G F:G T A G G C A A C A A T A C A T C A51555R:T C A C C C T G C T T C A A T AS S C5:54508761T>C F:T T C C A G A T G C A G G T C A31755R:G G G T C A A G T C A G A G G CS S C7:36423562A>G F:G G G G A G T T G G T C A G T T82555R:T A A G G G C A T T G T A A G AS S C11:47494227T>G F:G G G T G G G A A G G A A G T C T38555R:A A G C C A G A C G G T G A A G A TS S C11:59078297A>G F:A G T T G A T T A T G C C T A T G A G45255R:T T C T G G G T A G A T G T G G AS S C13:57293969A>G F:T T A C G G A G T A G A A G C A A58655R:G A T G G C A G G A A A G A A AS S C4:76266691C>A F:C G G G C T G G T A G G C A A A G58555R:A T G G G T C T G G T T C T T AS S C6:108144616G>A F:T G G G C A G C G T G T T G A T82555R:A C A G G G C A G A G G A A A G26113期郑春婷等:一种外三元纯种猪㊁二元猪㊁三元猪和多元回交猪的鉴定方法研究续表位点L o c i引物序列P r i m e r s e q u e n c e s(5'ң3')产物大小P r o d u c t s i z e/b p退火温度A n n e a l i n g t e m p e r a t u r e/ħS S C6:108163702G>A F:A G A A A C G A C C A C A A T G59855R:A A A G G C T A A G C A C T C AS S C6:110653219T>C F:A A T C T C C G A C T C T G G55755R:G A G C T G C A A A T G T G A GS S C6:110653413T>C F:A A T C T C C G A C T C T G G55755R:G A G C T G C A A A T G T G A GS S C12:11844496T>C F:G C A G A A G C A G C A G A G T G71355R:C A G A G C C A T A G A A G G A A CS S C15:50355005T>G F:C A T A G T G G G A T T T G A G82355R:C A T C T T C T T A G G G T G AS S C16:68589226A>C F:C A A C C T C T G G C T C G61955R:C T C G G A C A A G G A A A T G AS S C4:108521060T>C F:C T T G C T G G C T G T C45755R:G A A C C C T C C C T G T1.5.3 有效S N P位点信息确定利用D N AMA N软件对扩增产物测序结果对比分析,验证S N P位点在外三元猪种质鉴定中的特异性,获得有效S N P位点㊂在芯片数据库中查寻已获得的有效S N P位点,根据位点在芯片中显示的核苷酸信息,统计各位点相对应的基因型频率,依据各S N P 位点相应的基因分型情况,计算有效S N P位点在杜洛克猪㊁长白猪㊁大白猪中的基因型频率㊂1.6种质鉴定方案制定采用三位点联合分析的方式制定猪种质鉴定方案,选择2个长白猪特有S N P s位点与1个杜洛克猪特有S N P位点组合分析,通过3个S N P s位点制定2套种质鉴定方案㊂本方案中选用猪种特异性S N P位点,如长白猪特异性S N P位点,在长白猪中该位点有近似纯合的一种基因型,在大白猪和杜洛克猪中该S N P位点展现出近似纯和的另一种基因型㊂后续基因检测中根据S N P位点的突变类型,达到种质初步鉴定的目的㊂为了提高检测的准确度,选用3个S N P s位点联合的形式进行鉴定,将3个S N P s位点对应的基因分型依据排列组合方式,列出所有基因型组合㊂根据位点突变特征和在不同猪种中的遗传规律,分析出每个基因型代表的猪种,进而联合分析3个S N P s位点组合的基因型,对所得27种基因型组合类型进行详细分析,分别鉴定出对应的猪种,获得三位点联合分析的种质鉴定方案㊂2结果2.1常染色体特异性S N P位点筛选结果由表2可知,在1~18号常染色体上共获得杜洛克猪S N P s为52258个,90%以上纯合位点数17948个;长白猪总S N P s为48036个,90%以上纯合位点数11919个;大白猪总S N P s为19989824个, 90%以上纯合位点数5108549个㊂表2外三元纯种猪芯片测序数据结果T a b l e2R e s u l t s o f c h i p s e q u e n c i n g d a t a o f f o r e i g n t e r n a r yp u r e b r e d p i g s染色体C h r o m o s o m e杜洛克猪D u r o c p i g s长白猪L a n d r a c e p i g s大白猪Y a r k s h i r e p i g s总位点数T o t a l S N P s90%以上纯合位点数M o r e t h a n90%o fp u r e l y c o m p a t i b l e l o c i总位点数T o t a l S N P s90%以上纯合位点数M o r e t h a n90%o fp u r e l y c o m p a t i b l e l o c i总位点数T o t a l S N P s90%以上纯合位点数M o r e t h a n90%o fp u r e l y c o m p a t i b l e l o c i165122962577313221850089441762 23392106331666991430465273666 32805944279283412593382955283611中国畜牧兽医51卷续表染色体C h r o m o s o m e杜洛克猪D u r o c p i g s长白猪L a n d r a c e p i g s大白猪Y a r k s h i r e p i g s总位点数T o t a l S N P s90%以上纯合位点数M o r e t h a n90%o fp u r e l y c o m p a t i b l e l o c i总位点数T o t a l S N P s90%以上纯合位点数M o r e t h a n90%o fp u r e l y c o m p a t i b l e l o c i总位点数T o t a l S N P s90%以上纯合位点数M o r e t h a n90%o fp u r e l y c o m p a t i b l e l o c i43551107928407471122913293973 523619502046590994379276582 63216132532477681449653317828 73348112125406381133861267916 8277789731328191292341355160 93213108731155341243536374827 1017964951444361907454191358 1118905011656459887258316145 1215624981287327706797148004 1340901451454411301397362344076 143906123430365581252175341902 152906842318111321055685315363 1618775601761407769855253399 1717205521291365700443171152 1813363871185229536220129908总计T o t a l522581794848036119191998982451085492.2外三元纯种猪常染色体特异性S N P位点由表3可知,长白猪共有6个特异性S N P s位点,分别位于1㊁5㊁7㊁11㊁13号染色体;杜洛克猪在4㊁6㊁12㊁15㊁16号染色体上共获得8个特异性S N P s 位点;大白猪仅在4号染色体上筛选获得1个特异性S N P位点㊂表3外三元纯种猪特异性S N P位点信息T a b l e3S p e c i f i c S N P i n f o r m a t i o no f f o r e i g n t e r n a r yp u r e b r e d p i g s品种B r e e d s染色体C h r o m o s o m e核苷酸位置N u c l e o t i d e p o s i t i o n/b p突变碱基N u c l e o t i d em u t a t i o n突变类型M u t a t i o n t y p e s 长白猪1245929901(T)T>G基因间L a n d r a c e p i g s554508761(T)T>C内含子736423562(A)A>G内含子1147494227(T)T>G上游基因1159078297(A)A>G基因间1357293969(A)A>G基因间杜洛克猪476266691(C)C>A内含子D u r o c p i g s6108144616(G)G>A内含子6108163702(G)G>A内含子6110653219(T)T>C基因间6110653413(T)T>C基因间1211844496(T)T>C上游基因1550355005(T)T>G内含子1668589226(A)A>C基因间大白猪4108521060(T)T>C内含子Y a r k s h i r e p i g s46113期郑春婷等:一种外三元纯种猪㊁二元猪㊁三元猪和多元回交猪的鉴定方法研究2.3 不同品种、不同品系猪种质鉴定候选S N P 位点验证从长白猪㊁杜洛克猪和大白猪15个候选位点中共检出4个突变类型及遗传规律符合猪种质鉴定要求的S N P s 位点,分别为:S S C 13:57293969A>G ㊁S S C 11:47494227T>G ㊁S S C 6:110653219T>C 和S S C 6:110653413T>C ㊂进一步对4个特异性S N P s 位点进行验证,1.0%琼脂糖凝胶电泳检测结果显示,条带清晰且无杂带,特异性较好,大小与预期相符(图1),表明引物设计合理㊁特异性较高,满足后续测序要求,可用于下一步试验㊂①A ,S S C 6:110653219T>C 和S S C 6:110653413T>C 位点;B ,S S C 13:57293969A>G 位点;C ,S S C 11:47494227T>G 位点㊂②M ,D L 2000D N A M a r k e r ;1~10,依次为丹系长白猪㊁丹系大白猪㊁丹系杜洛克猪㊁加系长白猪㊁加系大白猪㊁美系杜洛克猪㊁美系大白猪㊁法系长白猪㊁二元猪㊁三元猪①A ,S S C 6:110653219T>Ca n dS S C 6:110653413T>Cl o c i ;B ,S S C 13:57293969A>Gl o c u s ;C ,S S C 11:47494227T>Gl o c u s .②M ,D L 2000D N A M a r k e r ;1-10,D a n i s h L a n d r a c e ,D a n i s h Y a r k s h i r e ,D a n i s h D u r o c ,C a n a d i a n L a n d r a c e ,C a n a d i a n Y a r k s h i r e ,A m e r i c a nD u r o c ,A m e r i c a nY a r k s h i r e ,F r e n c hL a n d r a c e ,b i n a r y a n d t e r n a r yp i g s ,r e s p e c t i v e l y 图1 不同S N P 位点P C R 扩增产物电泳图F i g .1 E l e c t r o p h o r e s i sm a p o fP C Ra m pl i f i c a t i o n p r o d u c t s a t d i f f e r e n t S N P 分别选择S S C 6:110653219T >C ㊁S S C 6:110653413T>C ㊁S S C 13:57293969A>G ㊁S S C 11:47494227T>G 位点特异性较好的P C R 扩增产物进行测序,结果见表4㊂大白猪㊁长白猪㊁杜洛克猪㊁二元猪㊁三元猪在S S C 13:57293969A>G位点的突变类型分别为A A ㊁G G ㊁A A ㊁A G 和A G 基因型;在S S C 11:47494227T>G 位点的突变类型分别为T T ㊁G G ㊁T T ㊁T G 和T G 基因型;在S S C 6:110653219T>C 位点的突变类型分别为T T ㊁T T ㊁C C ㊁T T 和T C 基因型;在S S C 6:110653413T>C 位点的突变类型分别为T T ㊁T T ㊁C C ㊁T T 和T C 基因型㊂表4 不同猪种不同S N P 位点基因型T a b l e 4 G e n o t y p e s o f d i f f e r e n t S N P i nd i f f e r e n t p i g s p e c i e s 品种B r e e d s 基因型G e n o t y pe s S S C 13:57293969A>G S S C 11:47494227T>G S S C 6:110653219T>CS S C 6:110653413T>C大白猪Y a r k s h i r e p i g s A A T T T T T T 长白猪L a n d r a c e p i g s G GG G T T T T 杜洛克猪D u r o c p i gs A A T T C CC C二元猪B i n a r yp i g s A G T G T T T T 三元猪T e r n a r yp i g s A G T GT C T C 依据特有S N P 位点在不同猪种中的验证结果,本研究最终选用纯合率较高的杜洛克猪特有的S S C 6:110653413T>C 和S S C 6:110653219T>C位点㊁长白猪特有的S S C 13:57293969A>G 位点和大白猪特有的S S C 11:47494227T>G 位点,作为外三元猪种质鉴定的优选位点,结果见表5㊂杜洛克猪在6号染色体S S C 6:110653219T >C 和S S C 6:110653413T>C 位点存在T>C 突变,基因型表现为C C 型,大白猪和长白猪基因型均表现为T T 型;长白猪在13号染色体S S C 13:57293969A >G 位点存在A >G 突变,基因型表现为G G 型,大白猪和杜洛克猪基因型均表现为A A 型;长白猪在11号染色体S S C 11:47494227T >G 位点存在T >G 突变,基因型表现为G G 型,大白猪和杜洛克猪均表现为T T 型㊂5611中国畜牧兽医51卷表5不同猪种不同S N P位点基因型频率T a b l e5G e n o t y p e f r e q u e n c y o f d i f f e r e n t S N P i nd i f f e r e n t p i g s p e c i e sS N P s基因型频率G e n o t y p e f r e q u e n c y杜洛克猪D u r o c p i g s长白猪L a n d r a c e p i g s大白猪Y a r k s h i r e p i g s S S C6:110653219T T T C C C T T T C C C T T T C C C T>C0.002(1)0(0)0.998(607)0.982(436)0.016(7)0.002(1)1.000(10)0(0)0(0) S S C6:110653413T T T C C C T T T C C C T T T C C C T>C0.002(1)0(0)0.998(607)0.982(436)0.016(7)0.002(1)1.000(10)0(0)0(0) S S C13:57293969A A A G G G A A A G G G A A A G G G A>G1.000(613)0(0)0(0)0.007(3)0.009(4)0.984(451)1.000(10)0(0)0(0) S S C11:47494227T T T G G G T T T G G G T T T G G G T>G0.987(448)0(0)0.013(6)0.002(1)0.010(5)0.988(497)1.000(10)0(0)0(0)2.4三位点联合分析种质鉴定方案制定通过筛选比对和验证,明确S S C6:110653219 T>C㊁S S C6:110653413T>C㊁S S C13:57293969 A>G㊁S S C11:47494227T>G位点为外三元纯种㊁二元㊁三元及多元回交猪品种鉴定的有效S N P位点㊂根据杜洛克猪特有的S S C6:110653413T>C 位点,结合长白猪特有的S S C13:57293969A>G和S S C11:47494227T>G位点进行联合分析,初步制定了外三元猪种质鉴定方案㊂由表6可知,当所测猪个体在S S C6:110653413 T>C位点的基因型为T T型,同时在S S C13: 57293969A>G和S S C11:47494227T>G位点的基因型为G G㊁T G型时,则所检测猪品种可鉴定为多元回交长白猪㊂按照本方案设计依次类推,可对外三元猪品种进行鉴定㊂表6S S C6:110653413T>C㊁S S C13:57293969A>G㊁S S C11:47494227T>G位点联合分析方案T a b l e6C o m b i n e da n a l y s i s s c h e m e f o r t h e S S C6:110653413T>C,S S C13:57293969A>Ga n dS S C11:47494227T>Gl o c i编号I D基因型G e n o t y p e sS S C6:110653413T>C S S C13:57293969A>G S S C11:47494227T>G结果R e s u l t s1T T G G T T不会出现2T T G G T G多元回交长白猪3T T G G G G长白纯种猪㊁多元回交长白猪4T T A G T T多元回交大白猪5T T A G T G二元猪㊁多元回交大白猪或长白猪6T T A G G G多元回交长白猪7T T A A T T大白纯种猪㊁多元回交大白猪8T T A A T G多元回交大白猪9T T A A G G不会出现10C C G G T T不会出现11C C G G T G不会出现12C C G G G G不会出现13C C A G T T三元及以上多元回交杜洛克猪14C C A G T G三元及以上多元回交杜洛克猪15C C A G G G不会出现16C C A A T T杜洛克纯种猪㊁三元及以上多元回交杜洛克猪17C C A A T G三元及以上多元回交杜洛克猪66113期郑春婷等:一种外三元纯种猪㊁二元猪㊁三元猪和多元回交猪的鉴定方法研究续表编号I D基因型G e n o t y p e sS S C6:110653413T>C S S C13:57293969A>G S S C11:47494227T>G结果R e s u l t s18C C A A G G不会出现19C T G G T T不会出现20C T G G T G三元及以上多元回交长白猪21C T G G G G三元及以上多元回交长白猪22C T A G T T三元猪㊁三元及以上多元回交大白猪或杜洛克猪23C T A G T G三元猪㊁三元及以上多元回交猪(大白猪㊁长白猪或杜洛克猪)24C T A G G G三元及以上多元回交长白猪25C T A A T T三元及以上多元回交大白猪或杜洛克猪26C T A A T G三元猪㊁三元及以上多元回交大白猪或杜洛克猪27C T A A G G不会出现根据杜洛克猪特有的S S C6:110653219T>C 位点,结合长白猪特有的S S C13:57293969A>G和S S C11:47494227T>G位点,联合分析制定了外三元猪种质鉴定方案二㊂由表7可知,当待测猪S S C6:110653219T>C位点的基因型为T T型,同时在S S C13:57293969A>G位点的基因型表现为G G型,在S S C11:47494227T>G位点的基因型表现为T G型时,则待测猪种为多元回交长白猪㊂按照本方案设计依次类推,可对外三元猪品种进行鉴定㊂表7S S C6:110653219T>C㊁S S C13:57293969A>G㊁S S C11:47494227T>G位点联合分析方案T a b l e7C o m b i n e da n a l y s i s s c h e m e f o r t h e S S C6:110653219T>C,S S C13:57293969A>Ga n dS S C11:47494227T>Gl o c i编号I D基因型G e n o t y p e sS S C6:110653219T>C S S C13:57293969A>G S S C11:47494227T>G结果R e s u l t s1T T G G T T不会出现2T T G G T G多元回交长白猪3T T G G G G长白纯种猪㊁多元回交长白猪4T T A G T T多元回交大白猪5T T A G T G二元猪㊁多元回交大白猪或长白猪6T T A G G G多元回交长白猪7T T A A T T大白纯种猪㊁多元回交大白猪8T T A A T G多元回交大白猪9T T A A G G不会出现10C C G G T T不会出现11C C G G T G不会出现12C C G G G G不会出现13C C A G T T三元及以上多元回交杜洛克猪14C C A G T G三元及以上多元回交杜洛克猪15C C A G G G不会出现16C C A A T T杜洛克纯种猪㊁三元及以上多元回交杜洛克猪17C C A A T G三元及以上多元回交杜洛克猪18C C A A G G不会出现7611中国畜牧兽医51卷续表编号I D基因型G e n o t y p e sS S C6:110653219T>C S S C13:57293969A>G S S C11:47494227T>G结果R e s u l t s19C T G G T T不会出现20C T G G T G三元及以上多元回交长白猪21C T G G G G三元及以上多元回交长白猪22C T A G T T三元猪㊁三元及以上多元回交大白猪或杜洛克猪23C T A G T G三元猪㊁三元及以上多元回交猪(大白猪㊁长白猪或杜洛克猪)24C T A G G G三元及以上多元回交长白猪25C T A A T T三元及以上多元回交大白猪或杜洛克猪26C T A A T G三元猪㊁三元及以上多元回交大白猪或杜洛克猪27C T A A G G不会出现3讨论3.1猪种质特异性S N P位点筛选目前种质鉴定相关研究很少,且主要集中于个别地方猪种的鉴定,对于外三元猪的种质鉴定,传统表观鉴定方式无法对猪种进行准确的区分鉴定㊂随着高密度芯片和全基因组重测序技术的快速发展,大量的遗传标记信息使基因组遗传变异分析得以更为准确和精准地实施[19-23],越来越多的研究开始从D N A分子层面揭示畜禽遗传多样性㊂但目前有关三元猪种质鉴定的特异性S N P位点的研究鲜见报道,市场缺乏外三元纯种猪㊁二元猪㊁三元猪和多元回交猪的鉴定技术和方案㊂猪品种鉴定无论是在品种资源保护还是在日常动物生产繁殖中都发挥着巨大作用㊂本研究根据基因芯片及重测序数据,经过位点筛选,分别获得长白猪㊁大白猪和杜洛克猪1~ 18号常染色体90%以上纯合位点数分别为11919㊁5108549㊁17948个㊂通过比对分析获得6个长白猪特有S N P s位点,8个杜洛克猪特有S N P s位点以及1个大白猪特有S N P位点㊂通过验证发现大白猪特有突变位点显示的纯合率并不是很高,本研究未选择其位点作为品种鉴定的有效标记S N P位点㊂最终确定了更加准确可靠的S S C13:57293969A>G㊁S S C11:47494227T>G㊁S S C6:110653413T>C和S S C6:110653219T>C4个有效S N P s突变位点㊂顿桂玲等[24]对杜洛克猪㊁长白猪㊁大白猪M C1R基因进行研究发现了5个S N P s位点并推测668G>C㊁1318C>T和1554G>A位点可能与杜洛克猪的红毛色存在相关性,而导致1197G>A突变无意义的894位点C C插入可能与长白猪㊁大白猪白毛色存在相关性㊂目前通过比对商业化的全基因组芯片测序获得猪源信息的方法较为常见,且鉴定是否具有杜洛克猪血缘,或者通过黑斑基因鉴定来推断的外三元纯种猪的方法较多㊂但能用来鉴别大白猪㊁长白猪㊁杜洛克猪㊁二元㊁三元及多元回交猪的基因型非常少,也没有系统有效的鉴定方案㊂本研究结果获得的4个S N P s位点可用于对外三元纯种猪㊁二元猪㊁三元猪及多元回交猪的种质鉴定,同时克服了过于复杂繁琐的基因鉴定法(如全基因组芯片扫描)来进行品种鉴定㊂3.2外三元猪种质鉴定方案目前关于品种鉴定的研究通常包括2个步骤:①品种信息的S N P位点选择;②使用这些S N P位点来拟合分类模型[25-26]㊂本研究在芯片数据比对筛选的基础上,对所获得的特异性位点进行创新型联合分析,制定了三位点联合分析方案,用于外三元纯种猪㊁二元猪和三元猪的种质鉴定㊂已有研究表明,以3个S N P s位点组合的鉴定方式为种质鉴定体系中最优的位点组合方案,相较于单S N P位点㊁双S N P s位点和4个S N P s位点的遗传标记组合,3个S N P s位点的鉴定方案具有准确㊁稳定且成本低等优点[27]㊂因此本研究分别选用S S C13:57293969 A>G㊁S S C11:47494227T>G和S S C6:110653413 T>C三位点联合分析(方案一)以及S S C6: 110653219T>C㊁S S C13:57293969A>G和S S C11:47494227T>G三位点联合分析(方案二)鉴定的方法用于外三元猪种质的鉴定㊂86113期郑春婷等:一种外三元纯种猪㊁二元猪㊁三元猪和多元回交猪的鉴定方法研究方案一中,猪种鉴定结果标记为不存在的,是代表此种基因型组合方式不会出现任何猪种,如当所测猪在S S C6:110653413T>C位点基因型表现为T T型,同时在S S C13:57293969A>G和S S C11:47494227T>G位点基因型表现为G G㊁T T型时,即以T T G G T T组合形式的猪种不存在;当所测猪在S S C6:110653413位点的基因型表现为T T型,同时在S S C13:57293969A>G和S S C11:47494227 T>G位点的基因型表现为G G㊁T G型时, T T G G T G组合所检测的猪可鉴定为多元回交长白猪㊂依照方案中位点排列顺序,出现基因型T T G G G G组合所检测的猪可鉴定为长白纯种猪或多元回交长白猪㊂T T A G T T组合所检测的猪可鉴定为多元回交大白猪㊂依次类推,按照本方案设计可对外三元猪品种进行鉴定㊂方案二鉴定方法同方案一㊂2套鉴定方案均可用于外三元猪种质的鉴定㊂本研究的鉴定方法成本低㊁操作简便,且能够鉴定多品种㊁多品系猪种,可以更有效便捷地得出鉴定结果,同时适合于养殖场内的推广和使用,具有一定现实意义和应用意义㊂本研究验证过程中猪品系数量有限,下一步还需要采集更多不同品系来源的猪进行验证㊂另外本研究获得的有效位点较少㊂想要获得更加准确可靠的种质鉴定方案,还需要更多品种品系的参考芯片数据,通过大数据P C A聚类或样本血统分析的方法,获得相应结果,这也是本研究未来探索的方向㊂4结论本研究通过芯片数据比对分析获得特异性S N P位点,确定了S S C13:57293969A>G㊁S S C11:47494227T>G㊁S S C6:110653413T>C和S S C6:110653219T>C4个特异性S N P s位点,并初步制定出三位点联合分析猪种质鉴定方案㊂研究结果为外三元猪的纯种㊁二元㊁三元及多元回交猪的鉴定方法提供借鉴,同时也为外三元猪品种鉴定的研究提供了方向㊂参考文献(R e f e r e n c e s):[1]杨厚德.猪育种存在的问题及育种方式的选择[J].湖北畜牧兽医,2020,41(11):28-29.Y A N G H D.P r o b l e m s i n p i g b r e e d i n g a n d s e l e c t i o n o fb r e e d i n g m e t h o d s[J].H u b e i J o u r n a l o f A n i m a la n dV e t e r i n a r y S c i e n c e s,2020,41(11):28-29.(i nC h i n 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解读法系种猪的发展史2012-12-14 23:47 来源：爱猪网【原创】查看：32382次2011年-2010年，用国外种猪“侵袭”我国养猪业一点都不哗然，对于这些外来的“猪客”我们了解多少，我们通过什么途径了解，了解到的客观与否？或许我们只能从生产技能上了解细枝末叶，而缺乏宏观整体的认识。

今天，我们来关注法系种猪，以法国养猪业的发展为背景，通过还原法国猪业的历史，让我们共同感受法国养猪业的历史。

法国养猪的生产模式技术性能虽然在过去的30年里，劳动力、建筑以及设备的成本在不断盘旋式的上升，但是法国养猪业的生产成本依旧保持相对地稳定。

过去30年法国养猪生产成本变化已有充分的证据表明，法国的养猪场通过不断提自身的技术性能来保持其核心竞争力。

此外，法国养殖场已逐渐适应不断地提高猪肉生产链中的每一个环节，从应用遗传技术来选育种猪到养猪舍的设计，以及可以追溯到日常饮食与环境卫生的控制。

全进全出系统为了可以尽量提高生产的效率，以及能够把养猪场内拟定的生产日程，与管理相类似规模的批次的猪群有机地融合起来，这就需要采用“全进全出”的体制。

部门组织体系：这能够规划处每批次猪群的运转情况，使得管理者能够精确地了解可运送到预定销售市场的生产总量。

选择性育种和繁殖阶段可提前确定未来种畜的需求。

优化养殖场设施及繁殖循环周期：全进全出系统使得有可能只要投建生产所需的栏舍，努力把使用率超过90%，这会让养猪舍具有更高的成本效益。

另外，全进全出系统还可以有效地提前安排工作和选择猪群运转方式。

母猪也能够更有效地进行轮换，从而避免了由于母猪群老化而导致对全面的多产性所造成的影响。

每头母猪每胎活产仔猪数会不断上升，直至第四胎，随后会逐渐下降。

全进全出猪群管理系统，可有效定期地淘汰母猪，以尽可能的平均母猪群的年龄，使其达到最佳的生产性能。

母猪群老化对多产性的影响全进全出系统已经历了多个发展阶段。

首先，只引进一个类型的批次管理系统，与母猪的内分泌周期相关联。

解读法系种猪的发展史2012-12-14 23:47 来源：爱猪网【原创】查看：32382次2011年-2010年，用国外种猪“侵袭”我国养猪业一点都不哗然，对于这些外来的“猪客”我们了解多少，我们通过什么途径了解，了解到的客观与否？或许我们只能从生产技能上了解细枝末叶，而缺乏宏观整体的认识。

今天，我们来关注法系种猪，以法国养猪业的发展为背景，通过还原法国猪业的历史，让我们共同感受法国养猪业的历史。

法国养猪的生产模式技术性能虽然在过去的30年里，劳动力、建筑以及设备的成本在不断盘旋式的上升，但是法国养猪业的生产成本依旧保持相对地稳定。

过去30年法国养猪生产成本变化已有充分的证据表明，法国的养猪场通过不断提自身的技术性能来保持其核心竞争力。

此外，法国养殖场已逐渐适应不断地提高猪肉生产链中的每一个环节，从应用遗传技术来选育种猪到养猪舍的设计，以及可以追溯到日常饮食与环境卫生的控制。

全进全出系统为了可以尽量提高生产的效率，以及能够把养猪场内拟定的生产日程，与管理相类似规模的批次的猪群有机地融合起来，这就需要采用“全进全出”的体制。

部门组织体系：这能够规划处每批次猪群的运转情况，使得管理者能够精确地了解可运送到预定销售市场的生产总量。

选择性育种和繁殖阶段可提前确定未来种畜的需求。

优化养殖场设施及繁殖循环周期：全进全出系统使得有可能只要投建生产所需的栏舍，努力把使用率超过90%，这会让养猪舍具有更高的成本效益。

另外，全进全出系统还可以有效地提前安排工作和选择猪群运转方式。

母猪也能够更有效地进行轮换，从而避免了由于母猪群老化而导致对全面的多产性所造成的影响。

每头母猪每胎活产仔猪数会不断上升，直至第四胎，随后会逐渐下降。

全进全出猪群管理系统，可有效定期地淘汰母猪，以尽可能的平均母猪群的年龄，使其达到最佳的生产性能。

母猪群老化对多产性的影响全进全出系统已经历了多个发展阶段。

首先，只引进一个类型的批次管理系统，与母猪的内分泌周期相关联。