微生物实验室标准操作程序质量手册实验操作者：XXXXXXXX
执行日期：X年X月X日
启用日期：XX年X月X日
标准操作程序文件
01 试剂贮存和配制区工作制度
02 标本处理区工作制度
03 细菌自动分析区工作制度
04 试剂贮存和配制区标准操作程序
05 标本处理区标准操作程序
06 细菌自动分析区标准操作程序
07 紫外消毒标准操作程序
08 消毒液配制使用标准操作程序
09 普通冰箱使用标准操作程序
10 超低温冰箱标准操作规程
11 洁净工作台使用操作规程
12 VITEK32型自动分析系统标准操作程序
13 移液器使用标准操作程序
14 高速离心机操作标准操作程序
15 冰箱维护和保养标准操作程序
16 电热恒温水浴箱操作程序
17 洁净工作台维护和保养程序
18 可移动紫外消毒车使用操作程序
19 加样器校准标准操作程序
20 离心机维护保养操作程序
21 温度计校准程序
22 试剂的质检操作程序
23_微生物实验室岗位职责(暂行)
24 临床标本的保存程序
25 临床检验及收费程序
26 微生物检验收收费价格
27 普通培养阴性操作程序
28 真菌培养阴性操作程序
29 苛养菌培养阴性操作程序
30 抗酸杆菌培养阴性操作程序
31 支原体培养检验操作程序
标本处理区工作制度
进入本区需穿工作服、工作鞋。
本区只能进行：临床标本的保存，标本接种、培养、及其菌株检验前处理、菌悬液制备、染色标本检查、非上机鉴定与药敏试验操作等危险操作，其它操作不得在此区进行。
在整个本区的实验操作过程中，操作者必须戴手套、口罩和帽子，严格按照操作规程进行。
工作结束后必须立即对工作区进行清洁或消毒。
非本实验室工作人员未经允许不得进入。
试剂配制和无菌区工作制度
进入该区需穿专用工作服和工作鞋。
本区只能进行贮存试剂的制备、试剂的分装和平板的制备。
在整个本区的实验操作过程中，操作者必须戴手套和帽子，严格按照操作规程进行。
工作结束后必须立即对工作区进行清洁和消毒。
非本实验室工作人员未经允许不得进入。
无菌室公能用于分装培养管或倒制平板培养基操作。
使用前以紫外灯消毒至少30分钟，定期用乳酸熏蒸，彻底消毒。
无菌室仅限操作者进入，操作时严格关门。
室内备有空调设备，以保证不因温度而影响工作。
仪器自动分析区工作制度
进入本区需穿专用工作服和工作鞋。
本区只能进行：微生物上机鉴定与药敏分析、血培养仪增菌培养、培养基溶解与保温、相关实验记录与报告书写、打印；其它操作不得在此区进行。
在整个本区的实验操作过程中，操作者必须戴手套和帽子，严格按照操作规程进行。
工作结束后必须立即对工作区进行清洁。
非本实验室工作人员未经允许不得进入。
试剂贮存和配制区标准操作程序
目的：规定在本区进行的工作，确保试剂正确贮存和制备。
适用范围：试剂的贮存和制备。
职责：
3.1 实验室工作人员均应熟知并遵守本室相关SOP。
3.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
4 程序：
4.1 实验人员进入该区须穿本区专用工作服。实验中须戴手套、工作鞋。
4.2 实验室所购试剂经验收登记后，按说明书中的要求贮存。
4.3 记录温湿度计读数。
4.4 记录冰箱的温度计读数。根据当天的标本验收登记表，取出当天实验须配制和使用的试剂放置于即用冰箱，其余试剂要立即收好放回贮藏冰箱内。
4.5 不同厂家的试剂勿混用，同厂家的不同检测项目试剂盒中的相同试剂也不宜混用，除非厂家有特别说明。
4.6 做好详细实验记录。
4.7 实验完毕，清洁实验台面。
4.8 每周一清点库存试剂，看有无过期或将近到期的试剂，或作报废处理或排列优先使用，避免浪费，然后记录试剂的详细保存情况。
5. 引用的文件及表格：
5.1 项目SOP：sop -tb;sop_tc;sop_ng;sop_hbv;sop_hcv
5.2 实验室清洁程序：proc_lab_7
5.3 冰箱温度记录表：Tab-temp_record
5.4 温湿度计记录表：Tab-temp_record
标本处理区标准操作程序
目的：规定在标本制备区内所进行的工作及其操作。
适用范围：所有在本区内进行的工作。
职责：
3.1 实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP。
3.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
标准操作：
1.1 实验人员进入该区须穿本室专用工作服1.2 。实验中须使用一次性鞋套，1.3 戴手手套，1.4 手套需常更换每四小时换一次。
4.2从试剂贮存和准备区取出的试剂放入即用冰箱室试剂存放专区暂存。
4.3记录温湿度计读数。
4.4记录恒温箱的温度计读数。
4.5 临床标本的接收、保存，细菌手工鉴定或上机前处理在本区内进行。
4.6 标本的接收处理和保存按临床标本的管理程序进行：Pro-Sam。
4.7 不同检测项目的样本核酸的提取和保存按相应检测项目的SOP进行。
4.8 标本接种或涂片在本区的标本处理台内进行，接种后培养基按要求进行培养。菌落观察和处理在生物安全柜内进行。
4.9 详细做好实验记录和仪器使用记录。
4.10 保持室内空气流通，且在实验完毕后，按实验室清洁消毒程序进行清洁、消毒工作。
引用的文件及表格
5.1临床标本的管理程序进行：proc_smpl_1
1.2 项目SOP：sop -tb;sop_tc;sop_ng;sop_hbv;sop_hcv
1.3 实验室清洁程序：Pro-Cle。
5.4 恒温箱温度记录表：Tab-temp_record
5.5 温湿度计记录表：Tab-temp_record
细菌自动分析区标准操作程序
目的：规定在本区进行的工作，确保靶核酸扩增的准确性和有效性。
适用范围：血培养、自动分析和报告签发。
职责：
3.1 实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP。
3.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
标准操作：
4.1 实验人员进入该区须穿本区工作服。实验中须戴手套、帽子，手套需常更换。
4.2本实验室采取VITEK32微生物自动分析技术，因此，微生物自动鉴定和分析和肥达氏试验、
外菲氏试验等均在本区内进行。
4.3 鉴定板在标本处理区准备后带入该区，放入充液箱充填，充填菌悬液后加塞，余液连同试管放入消毒桶中消毒，由工人过后洗涤回收试管。
4.4 每月必须进行至少一次所有试卡的质控，每新到的批号试剂要进行质控，过关方能投入使用。
4.5 依据不同检测项目SOP要求设定微生物检验工作程序，并记录备案；未经实验室负责人允许，不得随意更改。
4.6 检测报告的签发依据检测结果报告程序：Pro-Rep。
4.7 做好仪器和实验记录。
4.8 保持室内空气流通，且在实验完毕后，清洁、消毒工作台面。
引用的文件：
5.1 检测结果报告程序：proc_rept_1
5.2 项目SOP：sop -tb;sop_tc;sop_ng;sop_hbv;sop_hcv
5.3 实验室清洁程序：proc_lab_7
紫外消毒标准操作程序
目的：每天实验后，下班后对工作区进行必要的紫外线消毒一小时，保正实验室的清洁。
适用范围：适用于本室各工作区中按装于天化板上的紫外线消毒灯。
职责：
3.1 实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP。
3.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
操作程序：
4.1 实验结束后先对实验室进行必要的清洁工作；
4.2 根据需要设定时间，通常为30分钟，根据需要适当延长时间。
4.3 关闭电源开关；
4.4 整个紫外线消毒过程中，相关工作人员不能离开实验室，以防火灾发生。
消毒液配制使用标准操作程序
1、目的：
配制消毒液，用消毒液擦拭实验台面、用具及浸泡实验废弃物。
2、适用范围：
分子生物实验室的工作人员
3、职责：
3.1实验室工作人员应及时配制消毒液，熟知并遵守本SOP，严防污染发生。
3.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
4、工作程序：
4.1确定要配制消毒液的量。
4.2 将36%的次氯酸钠配制成10%的稀溶液。以1000毫升为例，取278毫升的36%的次氯酸钠母液，加蒸馏水至1000毫升。
4.3 消佳净：20g加水4000ml,作用20-30分钟。
4.4 所配制的消毒液只限在当天内使用，隔夜如使用时应根据本SOP重新配制。
普通冰箱使用标准操作程序
目的：确保冰箱的正常使用。
适用范围：本SOP适用于本室各类用途使用的普通冰箱、冰柜。
职责：
3.1 实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP。
3.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
操作程序：
4.1 开、关机：试剂冰箱按说明书要求放好后，插上电源线，冷藏室温度开关置于4℃，冷冻室温度开关置于 -20℃，2小时后用温度计确认。系统进入正常运行状态后即可正常使用。
4.2关机：若冰箱较长时间不用或需要送修时需按以下步骤操作：
（1）关闭冰箱电源，并拔下电源插头。
（2）清空冰箱内的所有贮存物，并妥善放置到其它冰箱内。打开冰箱门，等待冰箱内的霜化完。（3）用肥皂水擦洗干净冰箱内胆，后用10%次氯酸钠液擦洗一次。
（4）保持冰箱门打开待其自然干燥。
引用的表格
5.1 冰箱温度记录表：Tab-temp_record
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超低温冰箱标准操作规程
确保低温冰箱的正常使用。
适用范围：本SOP适用于公司的型超低温冰箱。
职责：
3.1 实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。
3.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
操作程序
4.1 接通电源，将冰箱的开关置ON位置，此时温度显示屏显示冰箱的实际温度，且数字不停地闪烁。
4.2 温度设定：以调节冰箱温度为-70℃为例说明，按SET键，温度指示显示-85℃，且“8”闪烁，按“↑”键直至“8“变为“7”；按“→”键，此时温度指示为“-75℃”，“5”闪烁，按“↑”键直至“5“变为“0”，按SET键，此时温度指示“-70℃”，且不闪烁。
4.3 设定温度时应注意，一般应以10℃递减方式进行，即每次设定的温度低于冰箱实际温度10℃，待冰箱达到设定温度时再进行调节，直至达到所需温度。
4.3 如超低温度遇较长时间停电，其温度显示会不断闪烁，且报警指示灯（ALARM）也闪烁，此时应按上述方法调节。
4.4 由冰箱管理人或其委托人每工作日记录冰箱温度，冰箱温度记录表贴于冰箱门，每月更换1次，存档。
4.5 超低温冰箱由专人保管，试剂和物品应按指定位置存放。
4.6 超低温冰箱全室共用，若室外人员需存放试剂或标本，须经管理人同意。
引用的表格：
5.1冰箱温度记录表：tab_temp_record
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洁净工作台使用操作规程
目的：正确使用洁净工作台。
本SOP适用于实验室使用的所有国产医用洁净工作台。
职责：
3.1 实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。
3.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
操作程序：
4.1 新安装或长期未使用的工作台，使用前必须用超净真空吸尘器或不产生纤维的物品认真进行清洁工作。
4.2 接通电源，使用前应提前15~30分钟同时开启紫外灯和风机组工作。
4.3 当需要调节风机风速时，用工作台操作面板上的风速调节钮进行调节。风机、照明均由批示灯指示其工作状态，工作时，发光。
4.4 工作台面上禁止存放不必要的物品，以保持工作区的洁净气流不受干扰。
4.5 禁止在工作台面上记录书写，工作时应尽量避免作明显扰动气流的动作；禁止在预过滤进风口部位放置物品，以免挡住进风口造成进风量减少，降低净化能力。
4.6 使用结束后，用消毒液清理工作台面后打开紫外灯，15~30分钟后关闭紫外灯，关闭洁净台电源。
4.7长期不使用的工作台请拨下电源插头。
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VITEK32全自动微生物分析系统标准操作程序
（待补充）
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移液器使用标准操作程序
目的：正确使用移液器，确保移液的精确性。
适用范围：本实验室使用的可调式移液。
职责：实验室工作人员必须严格按照本SOP进行操作。
操作程序：
4.1 转动旋钮设定移液量，设定的移液量不可超出该移液器规定的范围。
4.2 装上配套的Tip。
4.3 前进移液法
4.3.1 将按钮压至第一停点位置；
4.3.2 将移液管管嘴浸入液面下2~3mm深处，然后慢慢松开按钮吸入液体。待移入管嘴吸满液体后，将管嘴撤出液面，擦掉管嘴外侧的所有液滴。
4.3.3 轻轻压下操作按钮至第一停点位置，放出液体。约1秒钟后，继续将操作按钮向下压至第二停点位置。待管嘴液体放干净后，将管嘴贴在容器瓶壁上防止形成液滴滴入瓶中，撤出管嘴。
4.3.4 松开按钮使之回到起点位置。需要时，可更换管嘴继续移液操作。
4.4 倒退移液法：适用于高粘度液体及/或易起泡沫液体的移液。
4.4.1 将操作按钮向下压至第二停点位置。
4.4.2将移液管管嘴浸入试剂瓶液面下2~3mm深处，然后慢慢松开钮吸入液体。待移入管嘴吸满液体后，将管嘴撤出液面，擦掉管嘴外侧的所有液滴。
4.4.3 轻轻压下操作按钮至第一停点位置，放出液体。
4.4.4遗留在管嘴时的液体或者随管嘴一起扔掉，或者放回原来的容器中。
4.5重复操作法：重复操作移液法可以快速、简便地重复转移同体积的同种液体。
4.5.1将操作按钮向下压至第二停点位置。
4.5.2将移液管管嘴浸入液面下2~3mm深处，然后慢慢松开按钮吸入液体。待移入管嘴吸满液体后，将管嘴贴在容器瓶壁上防止形成液滴滴入瓶中。
4.5.3 轻轻压下操作按钮至第一停点位置，放出液体。待放完所需体积液体后，把按钮停在第一停点位置，不包括在移液量之内的少量液体仍留在管嘴内，管嘴外的液滴则需包括在移液量之内。
4.5.4将管嘴浸入试剂液面下不远处，然后慢慢松开按钮使管嘴重新吸入液体。
4.5.5重复步序4.5.3和4.5.4继续移液操作，就可重复转移相同体积液体。
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离心机操作标准操作程序
目的：使每个工作人员能正确地使用本仪器。
范围：本SOP仅适用于各类普通离心机。
职责：
3.1 实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。
3.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
操作：
4.1 开机：接通电源，打开仪器电源开关，离心机自检。
4.2 按“Open”键，打开机盖，旋开转子盖，平衡放入离心管，旋紧转子盖，关上机盖，此时“Open”键的指标灯亮。（如果接通电源后，机盖为开的状态，则无需此步操作）。
4.3 离心条件的设定：通过按“Temp”、“Speed”、“Time”键的上下箭头分别设定离心的温度、速度和时间。其中离心速度可分为每分钟转速（rpm）和离心力（cfg）两种，可通过同时按下“Speed”键的上下键头相互转换。
4.4 运行：离心条件设定好后，按“Start/Stop”键，离心机启动，“Open”键的指标灯灭。当达到设定的时间后，离心机自动停止，并发出提示音，“Open”键的指标灯亮，按“Open”键，打开机盖，旋开转子盖，取出离心管。
*若进行样本的短暂离心，只需按“Short”键数秒即可。
*若需在离心过程中停止离心，则需再按一次“Start/Stop”键。
4.5 关机：离心完毕后，应及时用干的软布拭去离心室的冷凝水，关闭离心机电源，并记录离记机使用情况。
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冰箱维护和保养标准操作程序
目的：对冰箱进行适当的维护，以确保冰箱的正常使用。
适用冰箱范围：本实验室使用的各种品牌、型号的冰箱。
职责：
3.1 实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。
3.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
操作方法
4.1 冰箱应放置于水平地面并留有一定的散热空间。
4.2 外接电源电压必须匹配，并要求有良好的接地线。
4.3 冰箱内禁止存放与本实验室无关的物品。
4.4 放入冰箱内的所有试剂、样品、质控品等必须密封保存。
4.5 保持冰箱出水口通畅；非自动除霜冰箱应定期除霜；定期清洁冰箱，清洁时切断电源，用软布蘸水擦拭冰箱内外，必要时可用中性洗涤剂。
4.6 每日由专人负责观察冰箱内温度并记录于表中，记录表贴于门上，每月一张，一年装订成册存档。
4.7 若温度超出规定范围，调节温控使其回到正常范围，并进行记录。
4.8 若温控调节无效，报请设备科维修，修理后须验收合格并签字后方能正常使用。
引用的表格
5.1 冰箱温度记录表：tab_temp_record
电热恒温水浴箱操作程序
1 目的：保证水浴箱工作温度恒定。
2 该SOP变动程序：本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室技术负责人。
3 适用水浴箱范围：电热恒温水浴箱
4 标准操作：
4.1水浴箱应置于坚固的水平台上，电源电压须匹配。
4.2在水浴箱内注入清洁温水至总高度1/2～1/3处。
4.3打开电源开关，把温度控制器的温度调节旋钮至设定温度。
4.4当水槽内测定温度达到设定温度时，加热中断、指示灯熄灭，温度保持稳定。
4.5在每次水浴箱使用前，放入标准温度计同时监测实际水温，以校正温度。
4.6水浴箱工作温度波动范围是：预设+2 ℃范围。
4.7每天应使用水银温度计水浴箱应记录每天温度；如温度超出正常范围，该温度应划上红圈，并把修正操作记录下来。
4.8水浴箱内外应保持清洁，外壳忌用腐蚀性溶液擦拭。
4.9仪器不用时，需套好防尘罩，以免温度控制器受潮影响使用。
5.0 引用的表格：tab_temp_bath
洁净工作台维护和保养程序
目的：对洁净工作台进行适当维护，以保证净化能力。
适用范围：本SOP适用于实验室使用的医用洁净工作台（BC1300型）。
职责：
3.1 实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。
3.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
程序：
4.1 根据环境洁净程度，定期将预过滤器中的滤料拆下清洗，一般间隔时间为3~6个月。
4.2 每次使用洁净台后，均需对洁净台进行清洁。
4.3 定期（一般每半年1次）计测工作区风速，如发现不符合技术参数要求，则可调大风机供电电压。当风机组电压调到最大时，工作区风速仍达不到0.3m/s，则必须更换高效空气过滤器。（由厂家或院仪器维修人员进行）
4.4 做好维护记录。
引用的表格：
5.1 仪器设备维护保养记录表：sop_cl_1
可移动紫外消毒车使用操作程序
1 目的：正确使用紫外消毒车进行消毒。
2 适用范围：适用于本室使用的ZXC型紫外线消毒车（上海跃进医用光学器械厂生厂）。
3 职责：
3.1 实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。
3.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
操作程序：
4.1 打开保护门；
4.2 用手托住灯臂往上抬至需要位置；
4.3 插上电源，打开带灯开关；
4.4 根据需要设定时间；
4.5 使用完毕将按钮摁到底，同时另一手托住灯臂慢慢将灯管放进灯箱内关上保护门。
4.6 不同实验区的紫外线消毒车勿混用。
5 消毒记录表：tab_cl_record
加样器校准标准操作程序
目的：保证加样器加样的准确性。
加样器范围：各种品牌、型号的固定、可调和多通道加样器。
职责：本SOP由室负责人执行落实。
校准程序
4.1校准环境和用具要求：
4.1.1 室温：20～25℃，测定中波动范围不大于±0.5℃。
4.1.2电子天平：放置于无尘和震动影响的台面上，房间尽可能有空调。称量时为保证天平内的湿度（相对湿度60～90％），天平内应放置一装有10ml蒸馏水的小烧杯。
4.1.3 小烧杯：5～10ml体积。
4.1.4 测定液体：温度为20～25℃的去气双蒸水。
4.1.5 选择校准体积：⑴拟校准体积；⑵加样器标定体积的中间体积；⑶最小可调体积（不小于拟校准体积的1％）。(4)如为固定体积加样器，则只有一种校准体积。
4.2校准步骤：
4.2.1 将加样器调至拟校准体积，选择合适的吸头；
4.2.2 调节好天平；
4.2.3 来回吸吹蒸馏水3次，以使吸头湿润，用纱布拭干吸头；
4.2.4 垂直握住加样器，将吸头浸入液面2～3mm处，缓慢（1～3秒）一致的吸取蒸馏水；
4.2.5 将吸头离开液面，靠在管壁，去掉吸头外部的液体；
4.2.6 将加样器以30℃角放入称量烧杯中，缓慢一致地将加样器压至第一档，等待1～3秒，再压致第二档，使吸头里的液体完全排出；
4.2.7 记录称量值；
4.2.8 擦干吸头外面；
4.2.9 按上述步骤称量10次；
4.2.10取10次称量值的均值作为最后加样器吸取的蒸馏水重量，按附表Ⅰ所列蒸馏水Z因子计算体积：体积=重量/Z因子
4.2.11按校准结果调节加样器
4.3 新购的合格的移液器出厂前经过厂家校准，使用前无需校准。
4.4 每年移液器进行校准一次，自校或由厂家有关部门校准。
4.5 做好校准记录。
引用的表格
仪器设备校准记录表：tab_pipt_cal
离心机维护保养操作程序
目的：对离心机进行正确的维护，以保证仪器正常运转。
适用范围：本SOP仅适用于本室使用的离心机。
职责：
3.1 实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。
3.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
操作程序：
4.1 离心室的清洁：为了避免样本等残留物的污染，应经常对离心机外壳和离心室进行清洁处理。对离心室清洁，应先打开离心机盖，拨掉电源线，用专用设备将离心机转子旋下，再用中性去污剂（70%的异丙醇/水混合物或乙醇去污染）清洁离心室；离心室内的橡胶密封圈经去污剂处理后，用水冲洗，再用甘油润滑。
4.2 转子的清洁：转子会被样本残留物污染，也可能会被某些化学试剂腐蚀，因此应对转子每月进行清洁维护。每月用中性的清洁剂清洁转子一次，并在仪器使用记录本上作好记录，以延长转子的寿命。
4.3 离心完毕后，应及时用干的软布拭去离心室的冷凝水。（此步仅适用于冷冻离心机）
4.4 离心结束后，使离心机盖打开，然后关机。
温度计校准程序
目的：保证温度计的精确性。
适用范围：适用于本实验室所使用的温度计。
职责：本SOP由室负责人落实。
程序
4.1 由设备科人员送质检局对温度计进行校准。
4.2 每年进行1次。
4.3 经校准过的温度计可作为微量恒温器温度校温的参照。
引用表格：
5.1 仪器设备校准记录：tab_inst_cal
临床非培养标本的采集及处理操作程序
目的：规范临床待检标本的正确采集、送检和处理。
适用范围：微生物检验实验室的所有临床检测标本。
职责：
3.1 所有采集标本的人员均需按本SOP操作，实验室工作人员有责任向临床医生、护士或病人宣教。
3.2 本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
操作程序
4.1 本实验室检测标本为：血清或血浆、痰、生殖道拭子标本、尿液及脑脊液和胸腹水。
4.2 做好标本签收，核对检验单与标本标签是否清楚无误，送检标本是否正确、合格，给所有标本按顺序编号，按如下操作规程操作。
4.3 查找抗酸菌操作:将标本置于水浴蒸箱加温杀菌30分钟，取标本残留物或沉淀物加温涂布玻片，液性标本以3000转/分钟离心5分钟，取标本残留物或沉淀物加温涂布玻片并标注编号后固定，行抗酸染色，先滴加抗酸染色第一液加温(用酒精灯在玻片下来回加温置染色液冒热气，但无气泡产生为宜)染色10分钟，自来水冲洗净染液，以硫酸美兰复染2分钟，水洗凉干。
镜检与报告：油镜下查找分枝、不规则红色杆菌，按如下标准进行结果报告。
1)、镜检100-300个视野（时间不少于4分钟）未发现抗酸菌，继续观察至300个视野仍未发现抗酸菌者报告抗酸菌（—）；
2)、镜检100个视野找到抗酸菌1-2条者，报告抗酸菌可疑（±），或重涂片或重送标本检查；
3)、镜检100个视野找到抗酸菌3-9条者，报告抗酸杆菌阳性（＋）；
4)、镜检10个视野找到抗酸菌1-9条者，报告抗酸杆菌阳性（2＋）；
5)、镜检每个视野找到抗酸菌1-9条者，报告抗酸杆菌阳性（3＋）；
6)、镜检每个视野找到抗酸菌多于9条者，报告抗酸杆菌阳性（4＋）。
4.4 查找普通细菌操作：液性标本取离心沉淀物涂片，拭子或脓性标本直接涂布玻片并标注编号后固定。同时取大肠标准株(ATCC25922)和金黄色葡萄球菌标准株（ATCC25922）涂片，一起行革兰氏染色，先滴加第一液染色1分钟，水洗，加第二液媒染1分钟，水洗干净；以95%酒精脱色30秒钟后立即水洗，再加第四液复染30秒钟，水洗后凉干。油镜下查找菌体并观察球杆比例；观察质控菌是否合格。
4.5 墨汁染色查找隐球菌：液性标本离心取沉淀物涂片，脓性或拭子标本直接涂片并写号，以无菌接种环粘取少量印度墨汁与玻片上标本混匀，压盖玻片，先低倍镜下找到视野再转离倍镜观察。若找到透亮，圆形强折光，有厚荚膜的菌体报告墨汁染色阳性；否则报告阴性。
4.6 白带常规检查：盐水管直接将棉签点至玻片后以高倍镜检有无滴虫；涂片标注编号后固定，行革兰氏染色，先滴加第一液染色1分钟，水洗，加第二液媒染1分钟，水洗干净；以95%酒精脱色30秒钟后立即水洗，再加第四液复染30秒钟，水洗凉干后镜检查找革兰氏阴性双球菌、霉菌或阳性球菌、线索细胞等。阴道清洁度的按如下判断标准报告：
Ⅰ度：阴道杆菌为主，并可见大量上皮细胞。
Ⅱ度：有部份阴道杆菌，但亦有部份脓细胞和杂菌，上皮细胞少见。
Ⅲ度：仅见少量阴道杆菌和上皮细胞，有大量脓细胞和杂菌。
Ⅳ度：镜下无阴道杆菌，除少量上皮细胞外，主要的几乎全是脓细胞和大量杂菌。
4.7 肥达试验：标本标明编号，以3000转/分钟离心5分钟；取试管架，按每标本排5排试管，每排5支；各标本用加样器取100μl血清置于一支稀释用试管(注明检验号)中，加入1.9ml 0.9%生理盐水混匀，第一排加入1：20倍稀释血清各0.2ml，成1：40倍；后稀释管再加入1.0ml 0.9%生理盐水，成1：40倍稀释，加入第二排试管各0.2 ml。同样方法对倍稀释至第四排试管，第五排各加入0.2ml 0.9%生理盐水作阴性对照。从冰箱中拿出肥达反应试验稀释菌悬液，第一列各加入H诊断菌液0.2 ml,第二列各加入O诊断菌液0.2 ml，第三列各加入甲型诊断菌液0.2 ml,第四列各加入乙型诊断菌液0.2 ml, 第五列各加入丙型诊断菌液0.2 ml,混匀，置37℃水浴箱18-24小时。
结果判断：菌体沉淀至试管底成圆点为阴性管，出现散在颗粒状凝集为阳性管。以最高稀释管出现散在颗粒状凝集为报告滴度。若阴性对照出现凝集则需重新稀释配制诊断菌悬液重做试验。
4.8 外菲氏试验：标本标明编号，以3000转/分钟离心5分钟；取试管架，按每标本排3排试管，每排5支；各标本用加样器取100μl血清置于一支稀释用试管(注明检验号)中，加入1.9ml 0.9%生理盐水混匀，第一排加入1：20倍稀释血清各0.2ml，成1：40倍；稀释管留1.0ml再加入1.0ml 0.9%生理盐水，成1：40倍稀释，加入第二排试管各0.2 ml。同样方法对倍稀释至第四排试管，第五排各加入0.2ml 0.9%生理盐水作阴性对照。从冰箱中拿出外菲氏反应试验稀释菌悬液，第一列各加入OX19诊断菌液0.2 ml,第二列各加入OX2诊断菌液0.2 ml，第三列各加入OXK诊断菌液0.2 ml,混匀，置37℃水浴箱18-24小时。
结果判断：菌体沉淀至试管底成圆点为阴性管，出现散在颗粒状凝集为阳性管。以最高稀释管出现散在颗粒状凝集为报告滴度。若阴性对照出现凝集则需重新稀释配制诊断菌悬液重做试验。5.2拒收标本记录表：tab_rejec
临床标本的保存程序
目的：临床标本正确保存，以便必要是复查。
适用范围：微生物检验实验室的所有临床检测标本。
职责：
3.1 实验室工作人员必须熟知并遵守本SOP，室负责人监督管理。
3.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
程序：
4.1 未检测的标本经预处理后及时置-20℃保存。
4.2标本当天检测可置4℃保存，如当天不检测应置-20℃保存。报告发出后丢弃。
4.3 原始样本在报告发出前均需置4℃保存，不得丢弃。报告发出后保存2天，以备查。保存2天后标本由室负责人酌情处理。
实验室岗位职责运行程序(暂行)
1. 目的：确保日常工作的顺利进行。
2. 适用范围：本实验室工作人员。
3. 职责：
3.1 实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP。
3.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
4 为更好的使日常工作有序进行，尽可能以负责的态度，连续地完成每一个检验的发报，保证结果的可靠性，每日尽可能安排两个工作人员上班，分为两个岗位，各自的工作岗位职责如下。1岗位班、2岗位班采用轮转制。如遇有当班同事休息或值班，第3人就顶上其所上的班。
4.1岗位1班(负责样本接收、核对、接种以及上日进行的鉴定和药敏结果进行分析、发报等工作)。
4.1.1 上班后检查细菌自动分析仪、血液自动培养仪工作是否正常，并做好记录。
4.1.2 从冰箱内取出当天所需的各种平板：5%绵羊血平皿、中国蓝培养皿、淋病奈瑟菌培养皿、麦康凯平皿等。
4.1.3 负责对上日进行的鉴定和药敏结果进行分析。
4.1.4 负责报告单的打印、核对、登记与录入等工作，签发已核对的所有报告。
4.1.5做好菌种的保存，对一些难得的菌株、标准菌株等要注意保存，并做好记录。
4.1.6接收样本：核对各样本与化验单名是否一致，核查各送检样本是否符合要求，否则立即与病房联系以便作出相应的处理，如退单或重送样本等，并做好联系情况的记录。
4.1.7 样本编号：对合格的样本作出编号。
4.1.8 普通培养样本的接种选择：
①痰液、咽拭子分别接种：血平皿、麦康凯平皿；
②尿液接种：取100μl接种血平皿、麦康凯平皿；
③泌尿生殖道：血平板、麦康凯平板；
④大便：SS或中国兰、血平板；
⑤各种无菌体液、脑脊液、脓液等标本：血平皿、麦康凯平皿，用增菌肉汤增菌；
⑥衣原体、支原体培养+药敏，按说明书接种支原体专用培养基；
⑦真菌培养，各种标本均接种沙保弱平皿和真菌斜面培养基；
⑧所有标本在接种的同时应进行涂片或对其沉渣进行革兰或抗酸染色，并做相应的记录。
⑨规定：临床申请单未明确注明培养目的时，一律按普通培养进行处理。标本送到实验室后特殊培养标本需在1小时内接种，普通培养标本不得超过2小时。
4.1.9 培养：一般标本接种后，平板应置于35OC培养箱培养，接种过脑脊液标本、泌尿生殖道标本的血平板还应置于5%-10%CO2环境中；结核培养置于37OC培养箱培养，每星期检查两次有否可疑菌落生长。收到的普通血培养瓶(如AER)应进行瓶内气压平衡处理，厌氧培养瓶直接放入培养箱中。
4.1.10 对新到岗的实习或进修人员应认真交代本岗位的一切事宜并且认真作好带教工作。
4.1.11 厌氧培养应接种血平皿或厌氧平皿置于厌氧袋中培养，同时接种BMP进行普通培养。4.1.12 标本培养处理后帮助2班将需要的各种标本收集并灭菌处理。
4.1.13 负责配制培养基，并做好记录。
5.1 岗位2班（负责菌株鉴定与药敏的分析、涂片检查标本的报告、室内质控等）。
5.1.1上班后首先核查各个培养箱、冰箱的工作温度是否在设定的范围内，并做好记录；检查各种培养基及试剂的库存量，做好需配制的培养基或需领出的试剂的记录工作，对需购买的试剂、平板、培养基、染色液等应及时记录并告诉室组长，以便及时计划报主任批准。
5.1.2 做好室内常用实验试剂如触酶、凝固酶、氧化酶或蛋白胨水的质量控制，并做好记录。5.1.3 负责处理上日接种标本的菌种鉴定与药敏试验，观察血液增菌培养瓶，如发现有细菌生长，应按三级报告制度处理。观察培养平板，分析、挑取可疑菌落涂片革兰染色，能上机的做好触酶、凝固酶、氧化酶或接种蛋白胨水等相应的检查后上机，还不能上机或手工试验的则选用相应的平板分纯。用于鉴定或药敏试验的菌落应选取培养18-24小时的纯菌落进行试验。
5.1.4 对一些不适合用仪器检测的细菌，改用手工签定或用标准的K-B法进行药敏。碰到异常的耐药模式，如碰到耐万古霉素的葡萄球菌、粪肠球菌，耐泰能的大肠埃希菌、克雷伯菌属、肠杆菌属等报告时一定要慎重。遇到可疑多重耐药菌株时，加做特殊的药敏纸片帮助鉴定。
5.1.5负责控感标本的处理与报告，物体表面菌落计数标本应于收到标本后2小时内处理，消毒液标本应于4小时内处理。处理方法按控感监控标本处理与报告进行。
5.1.6涂片染色：
①抗酸染色严格按照操作规程，胸腹水、尿液、脑脊液等标本应在5000转/分高速离心10分钟后，取沉淀涂厚片，自然干燥后固定，按要求染色后镜检。
② G-双球菌涂片，应用滚动式涂片法从波片一端涂向另一端，反复几次，火焰固定后进行革兰氏染色。
③脑脊液隐球菌涂片，应快速离心后倒去上清液，沉淀涂片、加相应的优质墨汁混匀后镜检。
5.1.7 对新到岗的实习或进修人员应认真交代本岗位的一切事宜并且认真作好带教工作。
6 注：岗位职责分开是相对的，同事间需要互相协作，互相帮助，共同完成当天的工作。如遇到三个人上班，则其中一个做好室内日常记录的检查完善和控制感染标本的处理工作。如遇一个人上班，则担负1岗位班、2岗位班的所有工作。
普通培养阴性操作程序
1、仔细查对标本标签与检验单是否正确，标本质量是否合格，若收检标本与检验单查对正确，标本质量合格则进行接收检验，否则查找原因并在有关记录本上记录。
2、标本处理、检验与结果报告：
1)拭子、分泌物标本标本涂于普通血平板、麦康凯平板成原始线，再以无菌接种环画线分离后置35℃温箱培养。
培养第24、48小时观察各平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至72小时未见可疑菌落，则报告未培养出普通致病细菌。
2)尿液标本取5ml尿液,3000转/分离心5分钟，取离心沉淀物，接种环取样涂于普通血平板、麦康凯平板成原始线，再以无菌接种环画线分离后置35℃温箱培养。
培养第24、48小时观察各平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至72小时未见可疑菌落，则报告未培养出普通致病细菌。
3)引流液标本3000转/分离心5分钟，取离心沉淀物，接种环取样涂于普通血平板、麦康凯平板成原始线，再以无菌接种环画线分离后置35℃温箱培养。
培养第24、48小时观察各平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至72小时未见可疑菌落，则报告未培养出普通致病细菌。
4)痰液或咽拭子标本无菌接种环可疑处采样涂于普通血平板、麦康凯平板成原始线，再以无菌接种环画线分离后置35℃温箱培养。
培养第24、48小时观察各平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至72小时未见可疑菌落，则报告未培养出普通致病细菌。
5)粪便或肛拭子等肠道标本以无菌接种环桃取可疑处标本涂于普通血平板、麦康凯平板成原始线，再以无菌接种环画线分离后置35℃温箱培养。
培养第24、48小时观察各平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至72小时未见可疑菌落，则报告未培养出普通致病细菌。
6)留置针头、小导管等标本标本置无菌管中，加入增菌液2ml，35℃温箱培养48小时观察培养液有无混浊，采样涂于普通血平板、麦康凯平板成原始线，再以无菌接种环画线分离后置35℃温箱培养。
培养第24、48小时观察各平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至72小时未见可疑菌落，则报告未培养出普通致病细菌。
真菌培养阴性操作程序
1、仔细查对标本标签与检验单是否正确，标本质量是否合格，若收检标本与检验单查对正确，标本质量合格则进行接收检验，否则查找原因并在有关记录本上记录。
2、标本处理、检验与结果报告：
1)拭子、分泌物标本标本涂于TTC-沙保罗平板成原始线，再以无菌接种环画线分离后置25℃温箱培养。
培养第24、48、72小时观察平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至第4天未见可疑菌落，则报告未培养出真菌。
2)尿液标本取5ml尿液,3000转/分离心5分钟，取离心沉淀物，接种环取样涂于TTC-沙保罗平板成原始线，再以无菌接种环画线分离后置25℃温箱培养。
培养第24、48、72小时观察平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至第4天未见可疑菌落，则报告未培养出真菌。
3)引流液标本3000转/分离心5分钟，取离心沉淀物，接种环取样涂于TTC-沙保罗平板成原始线，再以无菌接种环画线分离后置25℃温箱培养。
培养第24、48、72小时观察平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至第4天未见可疑菌落，则报告未培养出真菌。
4)痰液或咽拭子标本无菌接种环可疑处采样涂于TTC-沙保罗平板成原始线，再以无菌接种环画线分离后置25℃温箱培养。
培养第24、48、72小时观察平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至第4天未见可疑菌落，则报告未培养出真菌。
5)粪便或肛拭子等肠道标本以无菌接种环桃取可疑处标本涂于TTC-沙保罗平板成原始线，再以无菌接种环画线分离后置25℃温箱培养。
培养第24、48、72小时观察平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至第4天未见可疑菌落，则报告未培养出真菌。
6)留置针头、小导管等标本标本置无菌管中，加入增菌液2ml，35℃温箱培养48小时观察培养液有无混浊，采样涂于TTC-沙保罗平板成原始线，再以无菌接种环画线分离后置25℃温箱培养。
培养第24、48、72小时观察平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至第4天未见可疑菌落，则报告未培养出真菌。
苛养菌培养阴性操作程序
1、仔细查对标本标签与检验单是否正确，标本质量是否合格，若收检标本与检验单查对正确，标本质量合格则进行接收检验，否则查找原因并在有关记录本上记录。
2、标本处理、检验与结果报告：
1)拭子、分泌物标本标本涂于普通血琼脂平板、巧克力(含V、X因子)平板成原始线，再以无菌接种环画线分离后置C02缸，35℃温箱培养。
培养第24、48、72小时观察各平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至第5天未见可疑菌落，则报告未培养出奈瑟氏菌、嗜血杆菌等苛养菌。
2)尿液标本取5ml尿液,3000转/分离心5分钟，取离心沉淀物，接种环取样涂于普通血平板、巧克力(含V、X因子)平板成原始线，再画线分离后置C02缸，35℃温箱培养。
培养第24、48、72小时观察各平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至第5天未见可疑菌落，则报告未培养出奈瑟氏菌、嗜血杆菌等苛养菌。
3)引流液标本3000转/分离心5分钟，取离心沉淀物，接种环取样画线分离接种普通血平板、巧克力(含V、X因子)平板，置C02缸，35℃温箱培养。
培养第24、48、72小时观察各平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至第5天未见可疑菌落，则报告未培养出奈瑟氏菌、嗜血杆菌等苛养菌。
4)痰液或咽拭子标本无菌接种环可疑处采样涂于普通血平板、巧克力(含V、X因子)平板原始线，再画线分离后置C02缸， 35℃温箱培养。
培养第24、48、72小时观察各平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至第5天未见可疑菌落，则报告未培养出肺炎球菌、嗜血杆菌等苛养菌。
5)粪便或肛拭子等肠道标本以无菌接种环桃取可疑处标本涂于血平板、布氏血平板成原始线，再分离画线后置于C02缸，放入35℃温箱培养。另取约1g标本接种碱性蛋白胨水中，35℃温箱培养24-72小时，再转种高盐平板、中国兰平板、山梨醇麦康凯平板。
培养第24、48、72小时观察各平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至第5天未见可疑菌落，则报告未培养出弧菌、螺杆菌等细菌。
6)留置针头、小导管等标本标本置无菌管中，加入增菌液2ml，35℃温箱培养48小时观察培养液有无混浊，采样转种血平板、巧克力(含V、X因子)平板成原始线，再画线分离后置于C02缸，35℃温箱培养。
培养第24、48、72小时观察各平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至第5天未见可疑菌落，则报告未培养出奈瑟氏菌、嗜血杆菌等苛养菌。
抗酸培养阴性操作程序
1、仔细查对标本标签与检验单是否正确，标本质量是否合格，若收检标本与检验单查对正确，标本质量合格则进行接收检验，否则查找原因并在有关记录本上记录。
2、标本处理、检验与结果报告：
液性引流标本(如腹水、尿液、CSF等)直接离心留沉淀物，杂菌污染标本(如大便、痰等)取样置无菌管，加入1N NaOH1ml作用30分钟，再加入1N HCl1ml中和，3000转/分钟离心5分钟，取沉淀物100μl量接种罗氏培养基，置37℃温箱培养。
每星期观察一至两次培养基斜面，结果连续观察七个星期以上未发现有可疑菌落生长，报告未培养出分枝杆菌。
支原体培养检验操作程序
一、接收标本：标本与检验单查对正确，标本质量合格。
二、标本处理：接种Uu、Mh培养药敏一体试剂盒：操作前将所需试剂取出置室温30分钟。1、A排第一孔加入培养液100μL作为阴性对照；2、将标本拭子直接放入培养液中充分振荡并在瓶壁挤干拭子，若为男性尿液取离心沉淀物150μL或阳性标本取50μL于培养液中混匀。3、将混有标本的培养液各100μL加入A排余下及B排各孔中；4、各孔加矿物油覆盖，置于37℃温箱培养。
第24、48小时分别观察记录结果。结果判断原理：培养基含有相应支原体生长所需的蛋白质、马血清、生长因子、底物及酚红指示剂，当有支原体生长时，底物被分解，使PH值升高，培养基由橙黄色变成红色，且清亮为阳性。培养基不变色为阴性。B1孔阳性为解脲支原体阳性；B2孔阳性为人型支原体阳性。药敏孔A排为高浓度，B排为低浓度，变红则耐药，不变红示敏感而不生长。当高浓度与低浓度两孔均不生长(不变色)为该药敏感；高浓度不变色低浓度变红为该药物中介；高浓度与低浓度均变红为该药物耐药。
结果一：第24 小时B1孔由橙黄色变成红色示解脲支原体阳性，药敏看结果判断；第24小时、48小时观察B2孔均不变色，示无人型支原体生长或浓度极低，报告培养出解脲支原体，未培养出人型支原体。
结果二：第24 小时B1孔不变色示解脲支原体阴性；第48小时观察B2孔由橙黄色变成红色示人型支原体阳性，药敏看结果判断。报告未培养出解脲支原体，培养出人型支原体附药敏结果。结果三：第24 小时B1孔由橙黄色变成红色示解脲支原体阳性，药敏看结果判断；第48小时观察B2孔由橙黄色变成红色示人型支原体阳性，药敏看结果判断，报告培养出解脲支原体与人型支原体附药敏结果。
结果四：阳性对照孔由橙黄色变成红色示支原体阳性，药敏看结果判断；第24小时、48小时观察B1孔、B2孔均不变色，示无解脲、人型支原体生长或浓度极低，报告培养出非解脲、人型支原体或嘱病人重留标本复查。
结果五：第24、48小时观察B1孔、B2孔均不变色，示无支原体生长或浓度极低，报告未培养出解脲及人型支原体。
9203药品微生物实验室质量管理指导原则 药品微生物实验室质量管理指导原则用于指导药品微生物检验实验室的质量控制。 药品微生物的检验结果受很多因素的影响，如样品中微生物可能分布不均匀、微生物检验方法的误差较大等。因此，在药品微生物检验中，为保证检验结果的可靠性，必须使用经验证的检测方法并严格按照药品微生物实验室质量管理指导原则要求进行检验。 药品微生物实验室质量管理指导原则包括以下几个方面：人员、培养基、试剂、菌种、环境、设备、样品、检验方法、污染废弃物处理、检测结果质量保证和检测过程质量控制、实验记录、结果的判断和检测报告、文件等。 人员 从事药品微生物试验工作的人员应具备微生物学或相近专业知识的教育背景。 实验人员应依据所在岗位和职责接受相应的培训，在确认他们可以承担某一试验前，他们不能独立从事该项微生物试验。应保证所有人员在上岗前接受胜任工作所必需的设备操作、微生物检验技术等方面的培训，如无菌操作、培养基制备、消毒、灭菌、注平板、菌落计数、菌种的转种、传代和保藏、微生物检查方法和鉴定基本技术等，经考核合格后方可上岗。 实验人员应经过实验室生物安全方面的培训，保证自身安全，防止微生物在实验室内部污染。 实验室应制定所有级别实验人员的继续教育计划，保证知识与技能不断的更新。 检验人员必须熟悉相关检测方法、程序、检测目的和结果评价。微生物实验室的管理者其专业技能和经验水平应与他们的职责范围相符，如：管理技能、实验室安全、试验安排、预算、实验研究、实验结果的评估和数据偏差的调查、技术报告书写等。 实验室应通过参加内部质量控制、能力验证或使用标准菌株等方法客观评估检验人员的能力，必要时对其进行再培训并重新评估。当使用一种非经常使用的方法或技术时，有必要在检测前确认微生物检测人员的操作技能。
1.目的: 规范从原料进厂到产品出柜过程中微生物质量控制过程，保证从原料到产品各环节之微生物质量。 2.适用范围： 从原材料进柜、进厂到产品出柜之微生物质量控制过程。 3.程序: 3.1进料包装材料检验。 3.1.1无论是台湾来柜、美国来柜还是大柜采构的包装材料，均到货仓开具 《来料验收单》，货仓验收后将《来料验收单》传到IQC处。 3.1.2 IQC人员据《来料验收单》及相关取样制度对包装材料进行取样，并 开具送检记录，送到化验室待检，必要时可贴上待微检标签。 3.1.3化验室人员收集、核对送检之包装材料与送检记录之准确性，将送检 记录保存作为微生物检验原始记录。 3.1.4化验室人员按相关检验方法及时（当日样品，当日完成）对送检之包装 材料进行五大微生物指标（细菌总数、霉菌总数、金黄色葡萄球菌、绿 脓杆菌、粪大肠菌群）之检验，待检验结果出来后将结果反馈到送检之 IQC与货仓处，不人合格物料需发出不合格通知单。 3.1.5 IQC据微生物检验结果：合格或不合格，在相应包装材料外箱上贴具 微检合格或微检不合格标签，并同时将信息知会货仓，货仓只有在确认 来料合格，且外箱上贴具微检合格标签后(按批次贴)才能认可批箱产品 微生物质量合格，方可发放生产部使用，不合格物料作好标示后待报废
或退回供应产处理。 3.2进料生产原料检验程序。 3.2.1进料后，货仓开具《来料验收单》传送到化验室。 3.2.2化验室根据《来料验收单》据相关规定对生产原料进行编号取样、并作 好原始检验，必要时可贴上待微检标签。 3.2.3对取好样之产品，化验室进行五大微生物指标（细菌总数、霉菌总数、 金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、粪大肠菌群）检验，待检验结果出来后 填具结果报告单发送到相应仓管处，并在生产原料包装上贴具微生物 合格或微生物不合格标签。 3.2.4货仓据化验室发出之检验结果，微检合格并贴具了微检合格标签的物 料方可发放给生产使用，不合格原料作好标示后待报废或退供应商处 理。 3.3制程过程控制， 3.3.1 制程中标出的每一工序流程，其生产之产品均需进行微生物检验， 由相应车间IPQC按取样制度进行取样，并填具送检记录送化验室 待检，结果出来后，化验室将检验结果反馈给车间IPQC与生产人 员，不合格产品需发出不合格通知单，IPQC据检验结果按批次作 好合格或不合格标示，合格之后的产品方可进入下一工序生产。不 合格之产品，可经过处理再使用的则由品管部门会同相关部门进行 处理（如辐射消毒），处理后再进行微生物检验，合格产品则可投 入使用，不合格则报废处理。
病原微生物实验室生物安全 质量手册
目录 一、总则 二、实验室生物安全管理体系 三、生物因子生物危害评估 四、实验室人员准入制度 五、人员培训考核制度 六、人员健康监护制度 七、生物安全检查制度 八、实验室人员生物安全行为规范及内务管理制度 九、实验室菌种安全保管制度 十、生物安全实验室资料档案管理制度 十一、实验室废弃物管理制度 十二、实验室消毒隔离制度 十三、实验室生物危险标识使用规定 十四、事件、伤害、事故和职业性疾病报告制度 十五、实验室应急处置预案 十六、生物安全标准操作规程 （一）生物洁净安全柜标准操作规程 （二）HH.BII.500电热恒温培养箱操作规程 （三）JY--B型生化培养箱操作规程 （四）MJ-Ⅱ型霉菌培养箱操作规程 （五）SHJ系列净化工作台操作规程 （六）立式压力蒸汽灭菌器操作规程 （七）YXQ.WY.22.600ⅡR型卧式圆形压力蒸汽灭菌器操作规程（八）YX930D电动吸引器操作规程 （九）离心机操作规程 （十）微生物实验室操作人员洗手、消毒操作规程 十七、其他必要的管理性和技术性文件
（二）防火安全制度 （三）实验室用电安全制度（四）微生物实验室安全保卫制度
一、总则 1、目的 为确保实验室全体员工熟悉生物安全法律、法规，建立生物安全意识，保证相关工作人员掌握开展工作必需的生物安全知识和技术，避免实验室感染，防止实验室事故，特制定此手册。 2、依据 《病原微生物实验室生物安全管理条例》、《医疗废物管理条例》、《实验室生物安全通用要求》、《实验室生物安全手册》、《生物安全实验室建筑技术规范》 3、适用范围 适用于进入微生物检查实验室所有工作人员。 4、修订 国家及卫生部门涉及生物安全的法律法规发生修订更改时，本手册应相应作出修订。 二、实验室生物安全管理体系 1、公司成立生物安全委员会，全面负责公司生物安全工作。 责任人：公司法人 2、QC实验室成立生物安全三级管理组织。 一级生物安全管理：质量部部长 （1）由质量部部长全面负责科内生物安全管理文件的制定。 （2）督促、检查各个专业组遵守、落实生物安全情况。 （3）设立生物安全监督员一名。 （4）组织全科定期、不定期的学习生物安全的相关法律、法规。 二级生物安全管理：责任人QC主管 （1）负责本专业组生物安全工作。 （2）全面落实生物安全管理有关本组的相关制度。 （3）对本组的生物安全工作要有管理、有检查、有落实记录。
目得：规范微生物室管理规范，以保证微生物实验得顺利进行。 范围：适用于微生物实验室 依据:GB/T 1９4８9-2008《实验室生物安全通用要求》； 执行部门:化验室微生物检验室 职责：1、微生物检验员负责微生物实验室得管理。 2、实验室主管负责对微生物实验室管理情况进行检查。 内容: 本中心微生物实验室管理制度包括微生物实验室人员管理制度、微生物室出入管理制度、微生物室环境管理制度、微生物室得使用管理制度。 ??微生物实验室药品管理制度。 １、微生物实验室得人员管理 １、１微生物实验室由微生物检验员管理及使用,其她人员须经主管人员批准后方可进入与使用。 1、２微生物实验室得人员需经过相关得培训。 2、微生物实验室出入管理 2、１人员出入管理： 2、1、1 人员进入微生物实验室洁净区前,需要洗手消毒;在一级缓冲室换实验服、戴帽子、换鞋后，进入风淋室，风淋后,进入二级缓冲室准备实验。 2、1、2 实验操作前须带上无菌手套与口罩. ２、２物料出入管理: 2、2、1 物料进入微生物实验室以前，脱去外包装或者用酒精棉球擦拭后,放置于传递窗中。
2、2、２物料放置于传递窗后，开启紫外0、5小时，同时将微生物实验室内得净化系统、紫外灯打开. 2、2、3紫外开启0、５小时以后，关闭紫外，并将物品转移于实验操作台上。 2、2、4 实验完毕后,微生物实验室物品经传递窗传出后，经高温灭菌后废液、废物倒入废液桶处理。 ３、微生物实验室得环境管理 3、１微生物实验室得清洁管理 微生物实验室得清洁分为一般清洁及彻底清洁，其具体得清洁部位、方式方法、频率见下表所示: ３、2 微生物实验室常用消毒剂及其配制 4、微生物实验室得使用管理 4、1 微生物实验室使用之前,应先开启微生物实验室自净系统30分钟.每次使用前应用消毒液擦拭超净工作台及其她一切可能引起污染得死角,
微生物实验室质量手册 姓名：白海波 班级：10级预防二班 学号：10501010201
第一章绪论 一切肉眼看不见或看不清的微小生物，个体微小，结构简单，通常要用光学显微镜和电子显微镜才能看清楚的生物，统称为微生物。微生物包括细菌、病毒、真菌以及一些小型的原生生物、显微藻类等在内的一大类生物群体，它个体微小，与人类关系密切，涵盖了有益和有害的众多种类，广泛涉及食品、药品等诸多领域。 第一节微生物的危害 微生物对人类最重要的影响之一是导致传染病的流行，世界卫生组织公布资料显示：传染病的发病率和死亡率在所有疾病中占据第一位，微生物导致人类疾病的历史，也就是人类与之不断斗争的历史，在疾病的预防和治疗方面，人类取得了长足的进展，但是新现和再现的微生物感染还是不断发生。 第二节微生物实验室的作用 一、在医院感染控制中的作用：正确鉴定医院感染中所涉及的微生物。 二、在食品、医药等诸多领域的作用：由于微生物的特殊生物学特征，对致病性微生物的检测必须在特定的食品微生物实验室进行，对抗菌药物的临床微生物检验应在特定的临床微生物实验室进行。 第二章微生物实验室质量管理体系 质量管理体系是实施质量管理所必须的组织结构、程序、过程和资源。实施质量管理体系必须首先得到实验室主管的承诺，形成知道
原则和实施宗旨，即质量方针；需要相应的一套程序来支持质量方针、目标和指标的实现，并制定质量管理方案。 第一节质量管理体系和质量体系文件的建立 一、质量管理体系的建立 1.质量管理体系是实施质量管理所必需的组织结构、程序和资源。 2.建立质量管理体系的步骤： 确定顾客和其他相关方面的要求和期望； 制定质量方针和质量目标； 识别过程、确定控制对象； 组织结构及组员配置； 质量管理体系的文件化； 纠正预防措施； 持续改进质量管理体系。 3.质量方针与质量目标制定： 质量方针有组织的最高管理者正式发布的该组织的质量宗旨和方向，不是任何地方都准的理论，应有各实验室的特色。 质量目标是质量方针的具体化，是可以度量的，具有可挑战性、可测量性、可实现性。 二、质量体系文件的确定 1.质量体系文件的构成：质量手册、程序文件、标准操作程序和质量记录。
微生物实验室安全操作规范 微生物实验室的布局和设计应考虑良好的微生物操作和安全。本质是最大程度的减少微生物菌种的交叉污染，微生物样本的处理环境也是重要，因为环境也能引起也污染的可能。规范微生物实验室内仪器、设备的安全操作及染菌的微生物培养物处理程序，保证微生物实验室安全操作意义重大。 一、员工安全操作规范 1、实验室主任（对实验室直接负责的人员）负责制订和采用生物安全管理计划以及安全或操作手册。 2、实验室安全主管（向实验室主任汇报）提供常规的实验室安全培训。 3、接触微生物或含有微生物的物品后，脱掉手套后和离开实验室前要洗手。 4、禁止在工作区饮食、吸烟、处理隐形眼镜、化妆及储存食物。 5、只有经批准的人员方可进入实验室工作区域。实验室的门应保持关闭。 6、实验过程中，严格按有关操作规程操作，降低溅出和气溶胶的产生。 7、每天至少消毒一次工作台面，活性物质溅出后要随时用75%乙醇或巴氏消毒液消毒。
二、高压灭菌锅的安全使用操作规范： 1、堆放：将需灭菌的物品予以妥善包扎，依次堆放在灭菌锅。需灭菌物品外需黏上高压指示胶带以检验灭菌温度是否达到要求。 2、加水：在锅体内注入生活用水，水位一定要超过电热管2厘米以上（不宜过多）；连续使用时，每次操作前，必须补足上述水位，以免烧坏电热管和意外发生。 3、密封：在每次使用高压锅前，都必须认真检查高压锅的出气伐和安全阀，确保其状态完好，如有故障，在故障排除之前不得使用高压灭菌锅。把堆放好物品的灭菌桶放在锅体内，盖上锅盖并锁紧。 4、加热灭菌：将灭菌器接通电源，指示灯亮，表示电源已正常输入，按下开始按纽电热管开始加热工作；灭菌期间工作人员需监视高压锅指示面板上的压力、温度和时间等。 5、开盖：灭菌结束后，切勿立即将灭菌锅内的蒸汽排出，应待压力表指针归零位后，方可开启锅盖。 三、电炉使用操作程序及注意事项： 1、将盛有液体的玻璃容器（应垫石棉网）或不锈钢器皿置于电炉上，方可打开电炉加热。
授权令 本实验室是本公司的隶属机构。为保证实验室的工作顺利进行，特授权如下：1.除本公司按规定对实验室的领导干部任免、组织机构进行管理外，实验室 主任全权负责实验室日常管理和业务工作。 2.质检部经理有权对实验室的资产进行配置和使用。 3.质检部经理有权对实验室人员进行调配。 保定佳益食品有限公司总经理： 年月日
发布令 本实验室《质量手册》是按ISO/IEC17025：1999《检测和校准实验室能力的通用要求》编制的。本实验室的质量体系、质量方针、目标、各项质量和技术活动的工作程序、操作方法、各种记录以及该手册的使用和管理作了具体描述和规定，是本实验室各项质量和技术活动所依据的准则。现经实验室领导班子研究批准，从即日起发布并实施。实验室全体人员必须遵守并认真执行。 保定佳益食品有限公司实验室 年月日
公正声明 本实验室为了提高服务质量，维护客户合法权益，保持客户对本实验室的良好信心，特作如下声明： 1.本实验室坚决站在公正立场，依据各国相关的法律、法规以及合同和契 约的规定，客观、公正的为各个车间提供检测方面的服务。 2.实验室的一切检测活动不受上级行政管理部门或人员以及外界的压力和 影响，保证独立进行检验，做到结果公正。 以上声明，愿接受各方面的检查和监督。 保定佳益食品有限公司实验室 年月日
前言 本实验室的全称是保定佳益食品有限公司质检部实验室，隶属于质检部，是公司的自检机构，不对外负责检验。 本手册编写的目的是为了加强本公司质检部实验室的管理，提高检验业务水平和检验工作质量，保证各种检验工作公正有序的进行，并提供准确真实可靠的检验数据和鉴定结果，指导生产，服务生产，促进产品质量提高，弘扬公司品牌形象，满足出入境检验检疫局对出口水产企业实验室的要求，以及达到认证要求。 本手册阐述了本实验室的职责，配备的资源，质量管理制度及质量保证程序，作为本实验室工作的准则，也是对实验室工作人员的基本要求。 本手册所列内容将依据本公司业务的发展，检验测试技术的进步以及实验室认证制度的发展情况作为相应的修正，以适应提高检验工作质量，促进本公司业务发展。
微生物实验室生物安全操作规程 tiger 一、目的 制订本规则，保证实验室工作人员的健康安全、实验设备安全卫生以及防止对外界环境造成污染。 二、适用范围 适用于微生物实验室人员人身安全、卫生健康安全管理及设备安全。 三、职责 实验室工作人员必需严格遵守安全操作规程。 四、安全操作规程： 1.员工安全操作规程 1.1 实验室入口处须贴上生物危险标志，注明危险因子、生物安全级别、负责人姓名和电话、进入实验室的特殊要求及离开实验室的程序。 1.2 禁止非工作人员进入实验室。参观实验室等特殊情况须经实验室负责人批准后方可进入，做好卫生防护，并在有关人员陪同下方可进入，同时注意做好环境维护及保密工作。 1.3 进行感染性实验时，禁止他人进入实验室，或必须经实验室负责人同意后方可进入。免疫耐受或正在使用免疫抑制剂的工作人员必须经实验室负责人同意方可在实验室工作。 1.4 接触微生物或含有微生物的物品后，脱掉手套后和离开实验室前要洗手。 1.5 禁止在工作区饮食、吸烟、处理隐形眼镜、化妆及储存食物。 1.6 尽量以移液器吸取液体，禁止口吸。 1.7 实验过程中，严格按有关操作规程操作，降低溅出和气溶胶的产生。 1.8 每天至少消毒一次工作台面，活性物质溅出后要随时用75%乙醇或巴氏消毒液消毒。 1.9 工作人员应接受必要的免疫接种和检测(如乙型肝炎疫苗、卡介苗等)。工作人员要接受有关的潜在危险知识的培训，掌握预防暴露以及暴露后的处理程序。每年要接受一次最新的培训。人员暴露于感染性物质时，及时向实验室负责人汇报，并记录事故经过和处理方案。 1.10禁止将无关动物带入实验室。 2.无菌室安全操作规程 2.1无菌培养室每天都要用0.2%的新洁尔灭拖洗地面一次(拖布专用)，紫外线照射消毒30min以上，超净工作台台面每次实验前要用75％酒精擦洗。然后紫外线消毒30min。操作用具如移液器、废液缸、污物盒、试管架等用75%酒精擦洗后置于台内同时紫外线消毒。 2.2无菌室应保持清洁，严禁堆放杂物，以防污染。 2.3无菌室应备有工作浓度的消毒液，如5％的甲酚溶液，75％的酒精，0.1％的新洁尔灭溶液，等等。 2.4无菌室应定期用适宜的消毒液灭菌清洁，以保证无菌室的洁净度符合要求。 2.5需要带入无菌室使用的器械、平皿等一切物品，均应包扎严密，并应经过适宜的方法灭菌。 2.6工作人员进入无菌室前，必须用肥皂或消毒液洗手消毒，然后在缓冲间更换专用工作服，鞋，帽子，口罩和手套(或用75% 乙醇等消毒剂再次擦拭双手)，方可进入无菌室进行操作。 2.7无菌室使用前必须打开无菌室的紫外灯辐照灭菌30分钟，并且同时打开超净台进
临床微生物SOP-室内质量控制管理程序 1.目的： 规范微生物实验室管理程序，确保临床报告的质量。 2.适用范围： 微生物实验室的所有检验项目。 3.职责： 实验室检验人员均必须熟知并遵守本程序。 4.程序： 4.1 分析前质量管理 4.1.1 检验申请单临床医生应按照《微生物检测项目申请程序》申请临床微生物检测。口头申请追加样本检验项目，必须在样本有效期内申请，并补正式的检验申请单。 4.1.2 生成微生物检验标本标签护士应在核对医嘱、病人信息和检验申请信息后，按照《微生物标本检验标签程序》生成申请单和微生物检验项目标签，并将微生物检验项目标签正确贴于容器上。 4.1.3 标本的采集手册实验室应制定样本采集手册，指导正确采集和处理样本。 4.1.4 样本采集和运输样本采集人员应按照《采样前病人识别程序》确认病人，按照《标本采集、运输程序》采集样本，并在规定的时间和温度范围内，使用指定的运输培养基，安全运送到微生物室。 4.1.5 样本的接收样本接收人员应严格按照《标本接收、识别程序》《标本拒收程序》对标本接收或拒收，并记录。 4.1.6 微生物检验标本信息输入微生物实验室接种实验室岗位检验人员严格按照《微生物标本信息输入程序》录入、核对病人信息和标本信息等质料。 4.1.7 样本储存微生物实验室接种岗位检验人员按照《微生物标本检验前储存程序》正确储存未能及时处理的标本。已经检验的样本应在保证性质稳定的条件下，将样本以适当的方式保留到规定时间内，以便能在出具结果报告后可以复查，
或做补充检验。 4.2 分析中质量管理 4.2.1 试剂的质量控制 4.2.1.1 所有试剂用于检测标本前，必须做质控以评估质量并记录质控结果，只 有质控合格才可以使用。下列试剂每进一批新批号或货号要求用阴、阳性标准菌 株或质控菌株评估其质量（表2-1）。 触酶、氧化酶、凝固酶、β-内酰胺酶、Optochin、X、V 和XV 纸片； 细菌鉴定系统使用的每一种鉴定卡及相关试剂； 表2-1 常用实验试剂质量控制 试剂阳性对照阴性对照监测频率 氧化酶铜绿假单胞菌A TCC27853 大肠埃希菌A TCC25922 每次新配制时及使用中每个工作日 触酶金黄色葡萄球菌A TCC25923 A群链球菌A TCC19615 每次新配制时及使用中每个工作日 靛基质大肠埃希菌A TCC25922 肺炎克雷伯菌A TCC13883 1%蛋白胨水及靛基质试剂:每次新配制 时及使用中每个月1次直接用于检测病人标本有内标准的抗原试验如：金黄色葡萄球菌乳胶凝集试 剂（每天或每次做质控）； 抗血清（至少每半年用阴、阳性质控菌株做质控）； 革兰染液（每周一次用阴、阳性质控片做质控）； 抗酸染液（每次使用要求用阴、阳性质控片做质控）； 自制试剂（每配制一批新试剂做质控）。 4.2.1.2 平行试验新批号试剂使用前必须用老试剂或参考材料平行试验。 4.2.1.3 无厂家商特别说明时，不同批号的试剂不可混用。 4.2.1.4 缺陷或失控试剂只能用于培训员工业务能力，否则报废处理。培训试剂 应明显标记“仅培训使用”，并与检验试剂分开放置。 4.2.2 培养基的质量控制 4.2.2.1 购买的有质量保证标准的培养基实验室应保存制造商所遵循的质量保 证标准，以及每批号产品完成无菌试验、生长试验、生化试验及质量控制性能的 合格证明等文件；无质量保证标准的培养基，每批号和（或）每次购买的产品应 检测相应的性能，包括生长试验或与旧批号平行试验、生长抑制试验（适用时）、 生化反应（适用时）等。
微生物实验室操作规程 LEKIBM standardization office【IBM5AB- LEKIBMK08- LEKIBM2C】
微生物实验室操作规程【SOP 】细菌室工作守则（微生物室SOP 之一） 细菌室消毒隔离措施（微生物室SOP 之二） 微生物实验室安全与防护（微生物室SOP 之三） 细菌室内质控制度（微生物室SOP 之四） 细菌室操作技术规范（微生物室SOP 之五） 无菌间规章制度（微生物室SOP 之六） 菌（毒种）管理办法（微生物室SOP 之七） 细菌室仪器维护保养及质控措施（微生物室SOP 之八）标准菌株保存及使用（微生物室SOP 之九） 细菌室内务管理规定（微生物室SOP 之十） 标本采集及保存要求（微生物室SOP 之十一） 室内质控失控处理程序（微生物室SOP 之十二） 标本拒收标准（微生物室SOP 之十三） 温度失控处理措施（微生物室SOP 之十四） 超净工作台作业指导（微生物室SOP 之十五） 标本的接种和移种法（微生物室SOP 之十六）
细菌室工作守则 （微生物室SOP之一） 1.每日工作前用紫外线照射实验室半小时以上。 2.入室前应穿工作服，并做好实验前的各项准备工作。 3.实验室内应保持肃静，不准吸烟、吃东西及用手触摸面部。尽量减少室内活动，以免引起风动，无关人员禁入。 4.非必要物品禁止带入实验室，必要资料和书籍带入后，应远离操作台。 5.做好标本的登记、编号及试验记录。未发出报告前，请勿丢弃标本。 6.标本处理及各项试验应在操作间进行，接种环用完后应立即火焰灭菌，沾菌吸管、玻片等用后应浸泡在消毒液内。 7.实验时手部污染，应立即用过氧乙酸消毒或浸于3%来苏儿溶液中5-10分，再用肥皂洗手并冲洗干净；如误入口内，应立即吐出，并用1:1000 高锰酸钾溶液或3%双氧水漱口，根据实际情况服用有关药物。 8.实验过程中，如污染了实验台或地面，应用3%来苏儿覆盖其上半小时，然后清洗；如污染工作服，应立即脱下，高压灭菌。 9.若出现着火情况，应沉着处理，切勿慌张，立即关闭电闸，积极灭火。易燃物品（如酒精、二甲苯、乙醚和丙酮等）必须远离火源，妥善保存。
9203药品微生物实验室质量管理指导原则药品微生物实验室质量管理指导原则用于指导药品微生物检验实验室的质量控制。涉及生物安全的操作，应符合相应国家、行业、地方的标准和规定等。 药品微生物的检验结果受很多因素的影响，如样品中微生物可能分布不均匀、微生物检验方法的误差较大等。因此，在药品微生物检验中，为保证检验结果的可靠性，必须使用经验证的检测方法并严格按照药品微生物实验室质量管理指导原则要求进行检验。 药品微生物实验室质量管理指导原则包括以下几个方面：人员、培养基、试剂、菌种、设施和环境条件、设备、样品、检验方法、污染废弃物处理、检测结果质量保证和检测过程质量控制结果有效性的保证、实验记录、结果的判断和检测报告、文件等。 人员 微生物实验室应设置质量负责人、技术管理者、检验人员、生物安全责任人、生物安全监督员、菌种管理员及相关设备和材料管理员等岗位，可通过一人多岗设置。 从事药品微生物试验工作的人员应具备微生物学或相近专业知识的教育背景。 检验人员必须熟悉相关检测方法、程序、检测目的和结果评价。微生物实验室的管理者其专业技能和经验水平应与他们的职责范围相符，如：管理技能、实验室安全、试验安排、预算、实验研究、实验结果的评估和数据偏差的调查、技术报告书写等。 实验人员上岗前应依据所在岗位和职责接受相应的培训，在确认他们可以承担某一试验前，他们不能独立从事该项微生物试验。应保证所有人员在上岗前接受培训内容包括胜任工作所必需的设备操作、微生物检验技术等方面的培训，如无菌操作、培养基制备、消毒、灭菌、注平板、菌落计数、菌种的转种、传代和保藏、洁净区域的微生物监测、微生物检查方法和鉴定基本技术等，经考核合格后方可上岗。 实验人员应经过实验室生物安全方面的培训，熟悉生物安全操作知识和消毒
食品微生物检测实验室质量控制规范 1 范围 本标准规定了食品微生物检测实验室的管理要求、技术要求、过程控制要求、结果的质量保证/操作的质量保证以及检测报告。 本标准适用于食品微生物检测实验室的质量控制，对食品微生物检测实验室进行认可的机构可参照执行本标准。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本准则的引用而成为本准则的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版不适用于本准则，然而，鼓励根据本准则达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本准则。 CNAL AC23-2003 idt ISO/IEC 15189:食品微生物检测实验室认可准则 GB 19489-2004 实验室生物安全通用要求 GB/T15481—2000/ISO/IEC17025:1999 检测和校准实验室能力的通用要求EA—04/10 Accreditation for microbiological laboratories FAO Food and nutrition papers—1991 Manuals of food quality control-12.Quality assurance in the food control microbiological laboratory USDA FSIS Microbiological Laboratory Guideline chp36（3rd ,1998） 3 术语和定义 3.1 食品微生物检测实验室 food microbiological laboratory 以质量管理、卫生以及监控HACCP计划的有效性进行评价为目的，进行检测、鉴定或描述食品中致病微生物存在与否的实验室。实验室可以提供其检查范围内的咨询性和技术性服务，包括结果解释和为进一步适当检查提供建议以及相应的措施。 3.2 校准 calibration 在特定条件下，采取一系列步骤建立测量仪器、测量系统，标准物质或参考菌株
微生物实验室的安全操作规程 1 实验室安全 1.1 微生物实验室的生物安全性 1.2 科室安全文档 （a）生物危害防护：实际操作规程见（《实验室生物安全通用要求》，中华人民共和国国家标准GB19489-2004。2004-01-05发布，2004-10-01实施。）（b）实验室安全：原则和措施见（《微生物和生物医学实验室生物安全通用准则》，中华人民共和国卫生行业标准WS 233-2002。2002-12-03发布，2003-08-01实施。） 1.3 应用： 以上的操作规程应用于微生物科室的所有部门。工作人员或访问人员必须遵守各项规定。 1.4 关于新规定或现行规定的修改案： 任何新规定或现行规定的修改案必须通知负责科室安全的人员及相关人员，他们将建议科室主任考虑实施。 1.5 生物性危害 1.5.1 与各种操作有关的生物危害水平取决于： a.处理的传染性物质的本身： 按照传染性物质对个人和社区和潜在危险性以及经空气传播的可能性，其划分成不同等级。所采用的等级划分详见”《实验室生物安全通用要求》”；原则和措施（见《微生物和生物医学实验室生物安全通用准则》）。 b.使用的设备和设施： 处理不同等级的传染性物质的要求在”实验室安全”中已规定。这些符合要求的设备都要承担重要临床工作，科室负责人必须保证中应污染物水平。 c.培训，特别是员工的安全性培训和安全性经验积累。所有员工应该接受一定训练，能安全处理任何实验室可能碰到的物质，避免将实验不能处理或规定之外的传染性物质暴露在实验室，即使暴露事故在实验室，即使暴露事故发生也要会正确处理。 1.5.2 传染性物质的分类 1.5. 2.1分类系统 生物危害防护：〔见1.2 (a)〕，根据生物因子对个体和群体的危害程度将其分为4级，危害等级Ⅳ最具危害性。 1.5. 2.2危险群/生物安全水平：1－4 a.危险群/生物安全水平：1——对健康成人无致病性，对社区无危害性。通常一般微生物操作就足够，不需特殊安全设备，工作的附近要有洗手设施。培养基上包含未鉴定物，因此，妥善处理对各级安全水平都至着重要。 b.危险群/生物安全水平：2——人类疾病相关物质，这种物质对实验室工作人员有中度危险，并具有一定程度社区危险性。医院微生物室所涉及的绝大多数物质属此安全水平，生物危害警告应张贴，并且限制接近，应用醒目标语，若是能产生空气传播或飞溅的I，II类物质都就使用相就的操作台。实验室就提供类似防
微生物实验室的质量控制管理(一) 【摘要】目的探讨实验室质量控制管理的注意重点及意义。方法联系疾病预防控制中心微生物实验室的实际情况，诠释了实验室质量控制管理的要点。结果与结论通过实施微生物实验室质量控制的几个方面，加强实验室质量控制，提高了微生物实验室检验技术和管理水平。【关键词】微生物；实验室；质量控制；管理 微生物检验在感染性疾病及相关病患的预防、诊断治疗中起着越来越重要的作用，为了保障检验结果的准确性，在日常工作中要注意开展质量控制，包括室间质量控制和室内质量控制。室间质量控制是各实验室之间进行质量控制的一种方式，也是上级实验室对各实验室进行质量管理的手段。室间质控是建立在一个较好的室内质控基础上的，做好室内质控直接关系到日常检验工作的质量。室内质控主要包括以下几个方面：技术人员的质量控制、培养基的质量控制、标本的质量控制、常用仪器设备的质量控制。 1室内质量控制 1.1检验人员的质量控制要求参加检验的人员应具备一定的理论知识、实际操作和分析判断能力。应积极参加上级部门组织的培训，加强理论学习，不断提高检验水平和处理各种样品的能力。实验室应统一检验方法，按照国家标准进行操作。制订各项规章制度，对各级人员的职责和权限做出明确规定。 1.2培养基的质量控制配置培养基一般质量要求：(1)培养基应有明确标
记与配制日期。液体培养基应清澈。含倒管者，倒管内应液体充盈，无气泡；固体培养基应保持适当的硬度，接种前无菌落。(2)不定期检查pH值，要求在规定的pH值±0.2内。有指示剂的培养基要保持应出现的颜色。(3)倾注琼脂平板的体积一般为15ml，斜面不超过试管的2/3。 (4)无菌分装的培养基应在培养箱(36℃)过夜，无菌生长才能使用，高压灭菌培养基应随机抽样5%～10%作无菌试验。(5)培养基应放在适当温度下保存。(6)需在有效期内使用，使用时观察培养基是否变质。 1.3标本检验的质量控制标本的合格与否是检验结果准确与否的关键，所以标本的正确采集、保存、运送和处理至关主要。 1.3.1标本的采集(1)注意选择采样的时间，一般选择疾病的早期、急性期或症状典型时或用药前采集，食物中毒的标本应及时采集可疑食物等；(2)注意采集方法，根据待测微生物种类的不同，采用不同的采样方法，如需氧菌、厌氧菌或兼性厌氧菌、真菌、L-型细菌以及其他微生物的检验均须用不同的方法采样；(3)盛装标本的容器，除大便、肛拭子、咽拭子和痰等标本外，其他标本均应无菌操作采集，并以无菌容器盛装；(4)标本量，所采集的标本应具有合理的布点；(5)注意安全，标本采集时必须采取有效的措施防止污染、传播和自身感染。
编号：CZ-GC-02517 ( 操作规程) 单位：_____________________ 审批：_____________________ 日期：_____________________ WORD文档/ A4打印/ 可编辑 微生物实验室生物安全操作规 程 Biosafety operation procedures of Microbiology Laboratory
微生物实验室生物安全操作规程 操作备注：安全操作规程是要求员工在日常工作中必须遵照执行的一种保证安全的规定程序。忽视操作规程在生产工作中的重要作用，就有可能导致出现各类安全事故，给公司和员工带来经济损失和人身伤害，严重的会危及生命安全，造成终身无法弥补遗憾。 一、目的 制订本规则，保证实验室工作人员的健康安全、实验设备安全 卫生以及防止对外界环境造成污染。 二、适用范围 适用于所有进入微生物实验室人员。实验室工作人员必需严格 遵守安全操作规程。 三、安全操作规程： 1.员工安全操作规程 1.1实验室入口处须贴上生物危险标志，注明危险因子、生物安 全级别、负责人姓名和电话、进入实验室的特殊要求及离开实验室 的程序。 1.2禁止非工作人员进入实验室。参观实验室等特殊情况须经实 验室负责人批准后方可进入，做好卫生防护，并在有关人员陪同下
方可进入，同时注意做好环境维护及保密工作。 1.3进行感染性实验时，禁止他人进入实验室，或必须经实验室负责人同意后方可进入。免疫耐受或正在使用免疫抑制剂的工作人员必须经实验室负责人同意方可在实验室工作。 1.4接触微生物或含有微生物的物品后，脱掉手套后和离开实验室前要洗手。 1.5禁止在工作区饮食、吸烟、处理隐形眼镜、化妆及储存食物。 1.6尽量以移液器吸取液体，禁止口吸。 1.7实验过程中，严格按有关操作规程操作，降低溅出和气溶胶的产生。 1.8每天至少消毒一次工作台面，活性物质溅出后要随时用75%乙醇或巴氏消毒液消毒。 1.9实验人员在配制培养基过程中，需尽量避免接触性或吸入性危害，特别是配制TTB和碘液等对人体有害的培养基或试剂时，要穿戴工作服、口罩和手套，并在通风橱中进行。 1.10工作人员应接受必要的免疫接种和检测(如乙型肝炎疫苗、
山东省医疗产品研究检验中心 质量手册 ****-QM- -2016 （第一版） 编制：体系编写小组 审核： 批准人： 持有人：2016年1月1日发布 2016年1月2 日实施
关于质量手册的换版说明 为了确保山东省医疗产品研究检验中心（以下简称“中心”或“本中心”）的实验室管理体系运行的有效性、适宜性；出具报告的公正性、科学性和权威性；使各项活动均处于受控状态，减少和预防管理体系和管理活动缺陷；并满足最新发布的第163号《检验检测机构资质认定管理办法》和《检验检测机构资质认定评审准则》的要求，特编制质量手册。 本质量手册是为规范山东省医疗产品研究检验中心检验检测机构资质认定质量管理体系活动的内部文件，所描述的管理体系符合质检总局第163号《检验检测机构资质认定管理办法》、《山东省质量技术监督行政许可发证检验机构管理办法》、《检验检测机构资质认定评审准则》和《山东省实验室资质认定管理办法》的要求。它阐述了本中心的质量方针和目标，并对其管理要求和技术要求应达到什么水平、要做什么、应有什么做了进一步的规范及描述，是山东省医疗产品研究检验中心全体人员在检验检测机构资质认定质量管理体系活动中必须严格遵循的基本准则，是保证体系活动有效开展的依据，是其管理体系中的纲领性文件。 为了方便使用和管理，本手册以活页形式装订。 特批准发布！ 山东省医疗产品研究检验中心 发布人：
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山东省医疗产品研究检验中心修订状态：1/0 文件编号：****-QM- 0.1-2016 质量手册修订页文件页码：共 1 页，第1 页颁布日期：2016年1月1日修订日期：/年/月/日实施日期：2016年1月2日 序号章节号修订 次序 修订 内容 修订人审核人批准人批准日期
微生物检验实验室操作技术要求 第一节实验室管理制度 一、实验室管理制度 1．实验室应制定仪器配备管理、使用制度，药品管理、使用制度，玻璃器皿管理，使用制度，并根据安全制度和环境条件的要求，本室工作人员应严格掌握，认真执行。 2．进入实验室必须穿工作服，进入无菌室换无菌衣、帽、鞋，戴好口罩，非实验室人员不得进入实验室，严格执行安全操作规程。 3．实验室内物品摆放整齐，试剂定期检查并有明晰标签，仪器定期检查、保养、检修, 严禁在冰箱内存放和加工私人食品。 4．各种器材应建立请领消耗记录，贵重仪器有使用记录，破损遗失应填写报告；药品、器材、菌种不经批准不得擅自外借和转让，更不得私自拿出，应严格执行《菌种保管制度》。 5．禁止在实验室内吸烟、进餐、会客、喧哗，实验室内不得带入私人物品，离开实验室前认真检查水、电、暖气、门窗，对于有毒、有害、易燃、污染、腐蚀的物品和废弃物品应按有关要求执行。 6．科、室负责人督促本制度严格执行，根据情况给于奖惩，出现问题立即报告，造成病原扩散等责任事故者，应视情节直至追究法律责任。 二、仪器配备、管理使用制度 1．食品微生物实验室应具备下列仪器：培养箱、高压锅、普通冰箱、低温冰箱、厌氧培养设备、显微镜、离心机、超净台、振荡器、
普通天平、千分之一天平、烤箱、冷冻干燥设备、匀质器、恒温水浴箱、菌落计数器、生化培养箱，电位pH计、高速离心机。 2．实验室所使用的仪器、容器应符合标准要求，保证准确可靠，凡计量器具须经计量部门检定合格方能使用。 3．实验室仪器安放合理，贵重仪器有专人保管，建立仪器档案，并备有操作方法，保养、维修、说明书及使用登记本，做到经常维护、保养和检查，精密仪器不得随意移动，若有损坏需要修理时，不得私自拆动、应写出报告、通知管理人员，经科室负责人同意填报修理申请、送仪器维修部门。 4．各种仪器（冰箱、温箱除外），使用完毕后要立即切断电源，旋钮复原归位，待仔细检查后，方可离去。 5．一切仪器设备未经设备管理人员同意，不得外借，使用后按登记本的内容进行登记。 6．仪器设备应保持清洁，一般应有仪器套罩。 7．使用仪器时，应严格按操作规程进行，对违反操作规程的因管理不善致使仪器械损坏，要追究当事者责任。 三、药品管理、使用制度 1．依据本室检测任务，制定各种药品试剂采购计划，写清品名、单位、数量、纯度、包装规格，出厂日期等，领回后建立帐目，专人管理，每半年做出消耗表，并清点剩余药品。 2．药品试剂陈列整齐，放置有序、避光、防潮、通风干燥，瓶签完整，剧毒药品加锁存放、易燃、挥发、腐蚀品种单独贮存。
【摘要】注射剂是一种直接进入人体血液循环而发生作用的药品，为此要严格控制注射液微生物污染。因此本文从注射剂选择适应的灭菌参数、f0值灭菌应用、灭菌效果验证方面进行探究注射剂生产过程中微生物的质量风险控制,以此保障灭菌过程均匀完善，提高注射液的安全性、稳定性、有效性。在探究后总结，注射剂生产过程中微生物的质量风险控制主要还是保证生产过程中应用适当的灭菌工艺，并且严格执行gmp管理，以此保障良好的无菌生产体系，这就要求注射液在生产的各个环节应采取有效措施严格控制微生物污染，确保无菌安全，避免微生物风险，在生产过程中尽可能的完全灭菌，以此保证注射液产品的无菌安全。 【关键词】注射剂；生产过程；微生物；质量风险控制 注射剂是一种直接进入人体血液循环而发生作用的药品，为此要严格控制注射液微生物污染，就显得尤为重要。因此全部生产过程中的灭菌成为保障该注射液药品质量安全的关键工序，同时灭菌过程均匀完善程度直接关系到注射液的安全性、稳定性、有效性[1]。 1注射剂选择适应的灭菌参数 要根据药物的理化性质、稳定性和生物学特性及临床用药的顺应性来保证制剂无菌水平。一般湿热灭菌条件采用121℃×15min、121℃×30min、116℃×40min的程序，以此必须保证邪君后的微生物存活率≤10-6，即没100万个注射剂中存活微生物不得超过1个，以此保证灭菌后制剂的无菌保证水平。 注射剂生产过程中，为保证灭菌效果，应在密闭的制剂灭菌容器内，进行加压高温灭菌，若压力和灭菌时间不当，则不能有效杀死所有芽孢和细菌繁殖体。对于含糖类注射剂和氨基酸类营养性注射液，高温灭菌条件会影响药物产生不稳定性，因此注射剂选择适应的灭菌参数时，要保障高温灭菌的安全性，也要保障注射剂的稳定性，以此能够即可有效去除微生物，确保药剂治疗的稳定性。若灭菌方式方法不当，灭菌温度低、灭菌时间短，达不到灭菌目的；灭菌温度高、时间长，注射剂会产生杂质。因此，要正确选择适当的灭菌温度，保证注射剂质量[2]。 2 f0值灭菌应用 f0值是灭菌周期验证中所应用的术语。高温高压灭菌程序中，121℃下的等效灭菌时间，是标准灭菌时间，是一个可靠的灭菌参数。f0值的计算直接作用于生产灭菌过程的设计和灭菌效果。通常包装材料性能等因素会引起不同的升温速度，包括容器大小、形状及热穿透系数；灭菌产品溶液的粘稠度和容器的填充量；容器在灭菌器中的数量和分布。溶蚀由于f0值会随上述因素温度变化而呈现出的指数也不同，也就是说温度即使有很小的差别也会影响f0值，由此测定灭菌物的实际温度有利于灭菌器和灭菌技术的验证。 3灭菌效果验证 为控制注射剂生产过程中微生物的质量风险，必须进行全效可行的灭菌效果验证，高温高压灭菌时，需要对灭菌器的空载、满载分布进行试验、热穿透试验、生物指标试剂挑战试验，同时，再采用蒸汽灭菌生物指示剂进行验证。 3.1空载、满载分布试验空载、满载分布试验是为了检查灭菌器内腔的热分布情况，检查灭菌器内腔是否有冷点，达不到高温高压灭菌的目的。试验中，将温度探头均匀分布在灭菌器内腔各处，再进行灭菌操作，操作过程中，记录各个温度点[3]。 3.2热穿透试验热穿透试验是在热分布基础之上，确定灭菌器内腔中的“最低温度点”，检查该点f0值是否在无菌保证值之上。试验中，按照注射液的工艺灭菌温度进行操作，检测出“最低温度点”，将此点与注射液接触，监测其温度，记录数据作为热穿透试验数据。 3.3生物指示剂试验生物指示剂能够有效确认监控的灭菌效果。根据热分布试验和热穿透试验的结果，通过生物指示剂试验，对灭菌器内腔中的“最低温度点”进行验证，以此检查确认灭菌效果。通过灭菌器内腔中的“最低温度点”进行灭菌，灭菌后再进行无菌过滤，