HIV实验室检测方法和步骤
1.目的：为HIV实验室各技术人员统一实验操作程序，保证
实验质量，特制定本程序。
2.适用范围：适用于HIV实验室技术人员。
3.规范性引用文件：《全国艾滋病检测技术规范》（2004年
版）。
4．相关器材设备：人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒（双抗原夹心酶联免疫法）HIV（1+2）。
5 安全防护器材与措施：一次性乳胶手套、隔离衣、口罩、帽子，接收或取用试剂时应把试剂视作感染性材料对待。首先穿好一次性隔离衣，戴好口罩、帽子，最后戴好乳胶手套后再接触试剂。
6 检测方法与步骤
6.1双抗原夹心酶联免疫法
6.1.1 试剂名称：人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒
6.1.2试剂厂家：北京万泰生物试剂有限公司
6.1.3原理及用途：采用基因工程抗原gp41和gp36包被酶联板，用基因工程HIV-1和HIV-2嵌合抗原ENV18标记辣根过氧化物酶，与其他试剂组成试剂盒，应用双抗原夹心法检测人血清或血浆中的人类免疫缺陷病毒抗体，用于献血员及高危人群中人类免疫缺陷病毒感染的筛查。
6.1.4 试剂盒组成（96人份）
6.1.4.1. 预包被板条 12孔×8/8孔×
12
6.1.4.2. HIV酶标记物12ml×1瓶
6.1.4.3. 阴性对照1ml×1瓶
6.1.4.4. 阳性对照1ml×1瓶
6.1.4.5. 25倍浓缩洗液80ml×1瓶用去离子水或蒸馏水稀释
6.1.4.6. 底物缓冲液8ml×1瓶
6.1.4.
7. 底物液8ml×1瓶
6.1.4.8. 终止液7ml×1瓶
6.1.4. 9. 封口袋1个
6.1.4.10. 说明书1份
6.1.5操作方法
6.1.5.1. 加样：将预包被板条固定于板架上。每次试验设阴性对照2孔、阳性对照2孔，分别加入阴、阳性对照100ul；设空白对照1孔，不加样品。其余孔加入待测样品100ul。
6.1.5.2. 温育：置37℃温育60分钟。
6.1.5.3. 洗涤：弃去孔内液体，将稀释后的洗液注满各孔，静置30－60秒，弃去孔内洗液，扣干。重复洗5次。
6.1.5.4. 加酶：空白对照孔不加酶，其余孔加入酶标记物100ul。
6.1.5.5. 温育：置37℃温育30分钟。
6.1.5.6. 洗涤：弃去孔内酶标记物，重复洗5次（同操作步骤3）。
6.1.5.
7. 显色：每孔加入底物缓冲液50ul，再加入底物液50ul，振荡混匀，置37℃温育10分钟。
6.1.5.8. 终止：每孔加入终止液50ul，轻拍混匀。在单波长450nm或双波长450nm/630nm下，用空白孔校零，再读取各孔OD值。
6.1.6结果判读
9
6.1.6.1. 要求：阳性对照OD值应 > 0.80
阴性对照OD值应 < 0.08（空白校零后）
6.1.6.2. 临界值（C.O.）计算：
临界值（C.O.）＝阳性对照平均OD值×10%
备注：阳性对照OD值大于2.5按2.5计算。
6.1.6.3. 结果判定：
样品OD值＞临界值（C.O.）为HIV抗体阳性
样品OD值≤临界值（C.O.）为HIV抗体阴性
初筛试验阳性者应重新取样进行双孔复试，按照《全国艾滋病检测工作规范》需将血样或重新采血送“HIV筛查中心实验室”进行确认试验。
6.2.1试剂名称：人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒
6.2.2试剂厂家：英科新创(厦门)科技有限公司
6.2.3原理及用途:本试剂盒采用双抗原夹心两部法检测人血清或血浆样本中(HIV 1/2)型抗体.采用多种HIV-1和
HIV-2的特异性抗原制作预包被板及酶结合物.当待检样本中存在HIV抗体时,在反应过程中形成“固相HIV抗原-HIV 抗体-酶标记HIV抗原”的免疫复合物,加入底物后形成显色反应.适用于辅助诊断及献血员筛查。
6.2.4试剂盒组份
6.2.4.1. 测抗-HIV酶联板1块(96孔)
7. 显色剂
A 1瓶 (7ml)
6.2.4.2. 测抗-HIV样品稀释液1瓶(7ml) 8. 显色剂
B 1瓶(7ml)
6.2.4.3. 测抗-HIV酶标抗原1瓶(13ml) 9. 终止液 1瓶 (7ml)
6.2.4.4. 抗-HIV阳性对照(已灭活) 1瓶(1ml) 10.不干胶封片2张
6.2.4.5. 抗-HIV阴性对照(已灭活) 1瓶
(1ml) 11.说明书1份
6.2.4.6. 20×洗涤液1瓶(50ml) 12.密封袋、干燥剂1套
6.2.5标本要求血清或血浆(可用枸橼酸钠、肝素等作抗凝剂)
6.2.6仪器要求酶标仪洗板机恒温箱加液器等
6.2.7检测程序
6.2.
7.1．将各种试剂移到室温（18-25℃）平衡半小时后，取一瓶20×洗涤液，加蒸馏水至1000 ml，混匀后备用。6.2.7.2．将酶联板从密封袋中取出，每孔加入1000μl酶标抗体，设一个空白对照孔，两个阳性对照孔，两个阴性对照孔。取阳性对照和阴性对照分别充分混匀后各20μl 加入对照孔中，其余每个孔加待检血清20μl，充分混匀，将酶联反应板置微板振荡器上混合5－10秒，用不干胶封片封盖反应板。未用完的板条在密封袋中保存。
6.2.
7.3．酶联板置37℃温育60分钟, 小心吸干孔中血清，用洗涤液洗5次，然后在吸水纸上拍干。
6.2.
7.4．每孔加显色剂A 50μl ，显色剂B 50μl ，轻轻振荡后置37℃暗处显色30分钟，每孔加终止液50μl。
6.2.
7.5．选择酶标仪测定波长450nm，用空白孔调零点，测
定各孔OD值。也可选择630 nm作为参考波长，用双波长测定。
6.2.8结果判定
6.2.8.1．Cutoff值＝0.12＋N（阴性对照的平均值）
6.2.8.2．阴性对照OD值大于等于0.10。
6.2.8.3．阳性对照OD值大于等于0.80，阴性对照OD值大于0.1，则实验不成立，全部实验重做。
6.2.8.4．标本OD值小于Cutoff值为阴性，大于等于Cutoff 值为阳性。
6.2.8.5．阳性者须重新取样双孔复试，复试阳性者应按全国HIV管理规范，送HIV筛查中心实验室进行确认。
6.2.9注意事项
6.2.9.1. 本试剂的使用单位必须是经当地卫生行政部门批准的HIV初筛实验室。
6.2.9.2. 整个HIV检测必须符合《全国艾滋病检测技术规范》生物安全守则规定，严格防止交叉感染。操作时必须戴手套、穿工作服，严格健全和执行消毒隔离制度。
6.2.9.3. HIV-1/HIV-2抗体测定结果的判定必须以酶标仪读数为准。
6.2.9.4. 样品及各种试剂应用加液器加注，并经常校对其准确性。
6.2.9.5. 洗涤时各孔均需加满洗液，防止孔口有游离酶不
能洗净。
6.2.9.6. 所有样品、洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
6.2.9.
7. 微孔板条从冷藏环境中取出时应在室温中平衡至潮气干尽方可使用，未用完者须放入有干燥剂的密封袋中保存。
6.2.9.8. 用于检测的样品应保持新鲜。
6.2.9.9. 剩余样品及废弃物应经121℃高压蒸汽灭菌30分钟，或用5.0g/L次氯酸钠等消毒剂处理30分钟后废弃。
6.2.9.10. 若倍浓缩洗液出现结晶，请放置37℃至溶解。
6.2.9.11. 结果判读请在15分钟内完成。
6.2.9.12. 不同批号的试剂组份不可混用。
6.3.1 试剂名称：人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒
6.3.2试剂厂家：珠海丽珠试剂有限公司
6.3.3原理及用途：本品系用纯化基因工程人类免疫缺陷病毒Ⅰ型和Ⅱ型（HIV-1/HIV-2）抗原（合成肽或基因重组蛋白）包被的微孔板和酶标记的HIV-1/HIV-2抗原及其他试剂组成，应用双抗原夹心法原理（Sandwich ELISA）检测人血清或血浆中的HIV-1/HIV-2抗体。
6.3.4.1. HIV抗原包被板 12孔×8/8孔×
12
6.3.4.2. HIV酶标记物7ml×1瓶
6.3.4.3. 阴性对照1ml×1瓶
6.3.4.4. 阳性对照1ml×1瓶
6.3.4.5. 20倍浓缩洗液50ml×1瓶用去离子水或蒸馏水稀释至1000ml
6.3.4.6. 底物缓冲液7ml×1瓶
6.3.4.
7. 底物液7ml×1瓶
6.3.4.8. 终止液7ml×1瓶
6.3.4. 9. 封口袋1个
6.3.4.10. 说明书1份
6.3.5操作方法
6.3.5.1. 将试剂盒平衡至室温，取出所需的条板，剩余的即时封存。
6.3.5.2. 用去离子水和蒸馏水20倍稀释浓缩洗涤液。
6.3.5.3.将所需数量的条板固定于支架，按顺序编号，设置样品孔、空白对照孔、阳性对照孔和阴性对照孔（每次实验需设空白对照1孔，阳性对照2孔，阴性对照3孔。）。在样品孔中加入50ul待测样品，空白孔不加任何液体，阴性、阳性对照孔分别加入50ul阴性或阳性对照，轻拍混匀。
6.3.5.4.置37℃温育30分钟。
6.3.5.5. 将孔内液体甩干，置洗板机用洗涤液充分洗涤6遍，扣干。（注：洗涤时各孔要加满洗液，勿使孔间交叉污染。采用洗板机时应设定每遍有60秒的浸泡时间。）
6.3.5.6. 每孔加入50ul酶标记物（空白孔除外），轻拍混匀。
6.3.5.
7. 置37℃温育30分钟。
6.3.5.8. 将孔内液体甩干，置洗板机用洗涤液充分洗涤6遍，扣干。（注：洗涤时各孔要加满洗液，勿使孔间交叉污染。采用洗板机时应设定每遍有60秒的浸泡时间。）。
6.3.5.9. 每孔加入50ul底物缓冲液和50ul底物液，轻拍混匀，置37℃避光温育30分钟。
6.3.5.10. 每孔加入50ul终止液终止显色反应.
6.3.5.11. 用酶标仪单波长450nm（需设空白对照孔，并以空白对照孔调零）或双波长450nm/630nm测定各孔A值。6.3.6结果判定
6.3.6.1. 临界值（Cutoff）＝0.15＋阴性对照的平均A值6.3.6.2．样品的A值≥Cut off值为HIV抗体反应阳性。
6.3.6.3．样品的A值 6.3.6.5. 若阳性对照A值孔间之差大于30%，应重复实验。 6.3.6.6. 初次实验阳性者应重新取样进行双孔复试，按全国HIV检测管理规范的要求，须将血样或重新采血送HIV确认实验室做确认实验，确认报告阴性者，血可以发放使用； 凡确认实验阳性和可疑者，血不能发放使用，统一送确认实验室处理。 6.3.7注意事项 6.3. 7.1. 本试剂的使用单位必须是经当地卫生行政部门批准的HIV初筛实验室。 6.3. 7.2. 整个HIV检测必须符合《全国艾滋病检测技术规范》生物安全守则规定，严格防止交叉感染。操作时必须戴手套、穿工作服，严格健全和执行消毒隔离制度。 6.3. 7.3. HIV-1/HIV-2抗体测定结果的判定必须以酶标仪读数为准。 6.3. 7.4. 样品及各种试剂应用加液器加注，并经常校对其准确性。 6.3. 7.5. 洗涤时各孔均需加满洗液，防止孔口有游离酶不能洗净。 6.3. 7.6. 所有样品、洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 6.3. 7.7. 微孔板条从冷藏环境中取出时应在室温中平衡至潮气干尽方可使用，未用完者须放入有干燥剂的密封袋中保存。 6.3. 7. 8. 用于检测的样品应保持新鲜。 6.3. 7.9. 剩余样品及废弃物应经121℃高压蒸汽灭菌30分 钟，或用5.0g/L次氯酸钠等消毒剂处理30分钟后废弃。 6.3. 7.10. 不同批号的试剂组份不可混用。 6.4.1试剂名称：人类免疫缺陷病毒(HIV1/2)抗体诊断试剂（乳胶层析法） 6.4.2试剂厂家：艾康生物技术(杭州)有限公司 6.4.3实验原理：本品系用特异性重组HIV1/2抗原gp41和gp36及兔抗HIV1/2多克隆抗体包被硝酸纤维素膜,配以红色乳胶标记重组HIV1/2抗原pg41和pg36及其他试剂制成,应用双抗原夹心反应原理,定性检测血清/血浆标本忠HIV1/2抗体,用于无偿献血的现场筛查. 6.3.4.试剂组成 6.3.4.1. 说明书1份 6.3.4.2. 艾康人类免疫缺陷病毒(HIV1/2)抗体诊断试剂（乳胶层析法） 6.3.4.3. 一次性吸管. 6.3.5 试验方法: 6.3.5.1. 本试剂使用人血清或血浆。检测时应尽量使用新鲜的样本；样本出现浑浊时，通过离心或过滤取上清检测。 6.3.5.2. 不能检测含有悬浮纤维蛋白或聚集物、重度溶血的样品。 6.3.5.3. 样品中应无微生物，无菌分离的样品可以再2-8℃储存1周，长期储存应于-20℃或更底温度条件，避免反复冻融。 6.3.5.4. 使用前请将样品室温平衡30分钟以上，冷冻样品实验前需混匀。 6.3.5.5. 不能使用放置时间过常、长菌、发臭的标本，这样避免因标本污染而造成的非特异反应。 6.3.6 实验方法：在加样处滴加样品80ul，平置于室温，30分钟内看结果， 9.6.3.7结果判定 6.3. 7.1. 在30分钟后的结果无效。 6.3. 7.2. 样品视为传染品，注意安全操作。 6.3. 7.3. 测试卡上显示两条红线时，即可判为初筛实验阳性结果。 6.3. 7.4. 测试卡从包装中取出后，应在60分钟内使用，潮湿空气中暴露时间过长将影响检测结果。如测试卡储存于冰箱（2-8℃），取出后，应平衡至室温再开口使用。 6.3. 7. 注意事项 6.3. 7.1. 检测为阳性的标本药注意保藏，并需要进一步确正。 6.3. 7.2. 检测为阳性的样品，需要进行复检，复检为阳性的样品，应按《全国艾滋病检测技术规范》送HIV确证实验。 6.3. 7.3.测试卡应在HIV初筛实验室由经过HIV检测技术培训的人员进行操作使用。 7 附录 7.1 北京万泰双抗原夹心法试剂盒使用说明书 7.2 英可新创双抗原夹心法试剂盒使用说明书 7.3 珠海丽珠双抗原夹心法试剂盒使用说明书 7.4人类免疫缺陷病毒(HIV1/2)抗体诊断试剂（乳胶层析法））使用说明书 1 目的 为规范我省艾滋病检测实验室资质认定评审工作，明确资质认定的范围和形式；保证资质认定工作规范及评审结果客观、公正和准确，提高省艾滋病检测实验室管理工作质量，特制定本规程。 2 范围 本规程适用于湖北省艾滋病检测实验室资质认定工作，可供全省各级验收工作组相关工作人员和评审员使用。也可供各类艾滋病检测实验室在申请资质认定准备工作和日常管理中参考。 3引用文件及技术资料 1)《全国艾滋病检测工作管理办法》 2)《湖北省艾滋病检测工作管理实施办法》 3)《全国艾滋病检测技术规范》（2004年版） 4)《实验室生物安全通用要求（GB 19489－2004）》 5)《实验室资质认定评审准则》 6)《医学实验室质量和能力认可准则（CNAS-CL02:2006/ISO 15189:2007）》 7)《省疾病预防控制中心关于下发<湖北省艾滋病检测实验室相关操 作规程及检测工作记录（试行）>的通知》 4 艾滋病检测实验室的类型：分为艾滋病检测确证实验室和艾滋病检测筛查实验室两类，后者包括艾滋病筛查中心实验室、艾滋病筛查实验室和艾滋病检测点三种。 5 组织管理 5.1湖北省卫生厅是全省艾滋病检测实验室管理资质认定的主管部门，负责全省艾滋病检测实验室的监督管理和发证工作。 5.2各级验收工作组 5.2.1省艾滋病检测实验室验收工作组（以下简称“省验收工作组”）设在省疾病预防控制中心质量技术管理办公室，负责受理全省艾滋病确证实验室、市州级疾病预防控制机构筛查中心实验室的申请、资料审核和安排初审，对已完成初审的初筛实验室安排现场评审。 5.2.2市、州卫生行政部门应成立市级艾滋病检测实验室验收工作组（以下简称“市级验收工作组”）负责受理本辖区艾滋病筛查实验室的申请、资料审核和安排初审，对已完成初审的艾滋病检测点安排现场评审。 5.2.3 县(市、区)卫生行政部门应成立县级艾滋病检测实验室验收工作组（以下简称“县级验收工作组”），负责受理辖区内艾滋病检测点的申请、资料审核和安排初审。 5.3 评审组 5.3.1 评审员管理 5.3.1 评审员的基本条件：从事艾滋病相关管理人员；从事与艾滋病检测相关的技术人员；大专以上学历或中级以上技术职称；热爱艾滋病检测实验室管理工作；卫生行政主管部门审核并经培训考核合格者。 5.3.2 评审员的基本素质要求 5.3.2.1 熟悉《全国艾滋病检测工作管理办法》、《省艾滋病检测工作管理实施办法》、《全国艾滋病检测技术规范》（2004年版）、《实验室生物安 艾滋病知识试题 一、选择题 1、艾滋病是（） A、一种肿瘤； B、一种血液病； C、获得性免疫缺陷综合症； 2、当HIV侵入机体后，未进入发病期者被称为：（） A、艾滋病病人； B、艾滋病病毒感染者； C、窗口期 3、对于HIV/AIDS的诊断最重要的是根据（） A、临床表现； B、经确认HIV抗体阳性 C、具有高危行为 4、下列哪个不是艾滋病的传播途径：（） A、性接触； B、血、血制品、器官移植和污染的注射器： C、蚊虫叮咬： D、母婴垂直传播： 5、下列哪项不是急性HIV感染的临床表现（） A、发热； B、咽痛； C、淋巴结肿大； D、口腔真菌感染 6、HIV感染的确证实验是：（） A、免疫印迹法查HIV抗体； B、酶联免疫法查HIV抗体； C、PDR法检测HIV RNA D、流式细胞仪检测CD4细胞数 7、HIV感染人体后主要导致下列哪个系统损害：（） A、消化系统； B、免疫系统； C、循环系统 D、骨胳系统 8、HIV不可以用下列哪些方法杀灭：（） A、37度，10%漂白粉处理30分钟； B、56度，30分钟； C、焚烧； D、温室，3天 9、艾滋病不可以通过下列那些方式传播（） A、共用针头或注射器； B、性接触； C、日常生活接触； D、母婴传播 10、艾滋病的平均潜伏期为：（） A、1—2年； B、2—3年； C、3—4年； D、7—10年 11、艾滋病患者常见的肿瘤是（） A、霍奇金病； B、淋巴肉瘤； C、卡波济肉瘤； D、非霍奇金淋巴瘤 12、下列那类人群不属于艾滋病病毒感染的高危人群（） A、同性恋者； B、性乱交者； C、静脉吸毒者； D、医护人员 二、是非题 1、初筛检测结果为HIV阳性并伴有临床症状，可以诊断为HIV感染者。（） 2、与HIV感染者及AIDS病人日常生活和工作不会感染艾滋病。（） 3、一般用于乙型肝炎的消毒药物完全可以用于艾滋病病毒的消毒（ 4、性交时只要使用安全套就可以预防艾滋病。（） 5、保护HIV/AIDS患者的合法权益，是做好预防控制艾滋病的重要内容之一。（） 6、艾滋病(AIDS)是由人类免疫缺陷病毒(HIV)引起的以机会性感染和机会性肿瘤为特征的一种传染病，又称为获得性免疫缺陷综合症。（） 7、HIV感染的确诊需病原学检查，如两次初筛试验抗体阳性即可确诊HIV感染。（） 8、如母亲为艾滋病人，其新生儿血中HIV抗体阳性，即可确诊是感染了HIV。（） HIV 实验室诊断 人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒（酶联免疫法） 1 试剂信息 试剂厂家：北京万泰生物药业股份有限公司 2 样本要求 2.1 本试剂使用样品为人血清或血浆，含有EDTA、柠檬酸钠或肝素等抗凝剂的样品可用于本实验。 2.2 不能检测含悬浮纤维蛋白或聚集物，重度溶血的样品。 2.3 样品中应无微生物，可在2-8℃储存1周，长期储存应低温冻存，避免反复冻融。 2.4 使用前请将样品室温平衡30分钟以上，冷冻样品实验前需混匀。 3 检测步骤 3.1 配液：将浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水20倍稀释。 3.2 编号：将样品对应微孔板按序编号，每板应设阴性对照3孔，阳性对照1型、2型各1孔、空白对照1孔。 3.3 加样：分别在相应孔中加入待测样品或阴、阳性对照100μL。 3.4 温育：用封板膜封板后，置37±1℃温育60±2分钟。 3.5 洗板：小心揭掉封板膜，用洗板机洗涤5遍，最后一次尽量扣干。 3.6 加酶：每孔加入酶标试剂100μL，空白孔除外。 3.7 温育：用封板膜封板后，置37±1℃温育60±2分钟。 3.8 洗板：操作同步骤5。 3.9 显色：每孔加入显色剂A、B液各50μL，轻轻震荡混匀，37±1℃避光显色30±1分钟。 3.10 测定：每孔加入终止液50μL，轻轻振荡混匀，10分钟内测定结果。 4 参考值 临界值（CUTOFF）计算：临界值=阴性对照A均值+0.12. 5 检验结果的解释 5.1 阴性对照孔A值≦0.10，阳性对照A值≧0.80，否则试验无效。 5.2 若有1孔阴性对照A值大于0.1应舍弃，若两孔或两孔以上阴性对照A值大于0.1，应重复试验。 5.3 阴性判定：样品A值<临界值（CUTOFF）者为HIV抗体阴性。 5.4 阳性判定：样品A值≧临界值（CUTOFF）者为HIV抗体阳性。（注意：初试阳性应重新取样双孔复试。复试阳性者应按《全国艾滋病检测技术规范》送HIV确证实验室进行确证实验。） 艾滋病检测筛查实验室基本标准 艾滋病检测筛查实验室基本标准 （一）艾滋病筛查中心实验室及艾滋病筛查实验室。 1、人员条件 至少由3名医技人员组成，其中具有中级卫生技术职称人员至少1名。负责筛查试验的技术人员需具有2年以上从事病毒性疾病血清学检测工作经验，接受过省级以上艾滋病检测技术培训，并获得培训证书。 2、建筑条件：实验室或检测区域应分为清洁区、半污染区和污染区，应符合二级生物安全实验室（BSL-2）要求。 3、仪器设备条件 配备艾滋病病毒抗体筛查试验所需设备，至少包括酶标读数仪、洗板机、普通冰箱、水浴箱（或温箱）、离心机、加样器（仪）、消毒与污物处理设备、实验室恒温设备、安全防护用品和生物安全柜。 （二）艾滋病检测点。 1、人员条件：至少由2名经过艾滋病检测技术培训并获得培训证书的专业人员组成。 2、建筑条件：需有艾滋病检测区域或专用实验台，能开展简便、快速检测。 3、设备条件：需配备快速试验所必须的物品，包括普通冰箱、消毒与污物处理设备、一次性消耗品、安全防护用品。 艾滋病检测筛查实验室职能 包括艾滋病筛查中心实验室、艾滋病筛查实验室和艾滋病检测点。艾滋病筛查中心实验室设在市（地）级疾病预防控制中心；艾滋病筛查实验室和艾滋病检测点可设在疾病预防控制机构、医疗机构、采供血机构、计划生育技术服务机构等。 1、艾滋病筛查中心实验室职能。 （1）负责职责范围内艾滋病病毒抗体筛查试验，根据需要可开展其他艾滋病检测工作。 （2）负责将艾滋病病毒抗体筛查呈阳性反应的样品送艾滋病检测确证实验室。 （3）定期汇总艾滋病检测资料，并上报艾滋病检测确证实验室。配合艾滋病检测确证实验室做好个案调查、登记等随访工作。 （4）负责对职责范围内艾滋病检测筛查实验室的技术指导；协助艾滋病筛查实验室和艾滋病检测点开展自愿咨询检测工作，给予技术支持和指导。 2、艾滋病筛查实验室职能。 （1）开展艾滋病病毒抗体的筛查试验，根据需要可开展其他艾滋病检测工作。 （2）负责将艾滋病病毒抗体筛查呈阳性反应的样品送当地艾滋病筛查中心实验室或艾滋病检测确证实验室。 （3）定期汇总艾滋病检测资料，并上报当地艾滋病筛查中心实验室或艾滋病检测确证实验室。 （4）对自愿咨询检测工作提供技术支持。 3、艾滋病检测点职能。 （1）开展艾滋病病毒抗体的筛查试验。 （2）负责将艾滋病病毒抗体筛查呈阳性反应的样品送当地艾滋病筛查实验室或艾滋病筛查中心实验室。 （3）定期汇总艾滋病检测资料，并上报当地艾滋病筛查实验室或艾滋病筛查中心实验室。 （4）开展艾滋病自愿咨询检测工作。 艾滋病（HIV）检测方法汇总 一、艾滋病简介 艾滋病日的概念来源于1988年，全球卫生部大臣关于艾滋病预防计划的高峰 会议上(W orld Summit of Ministers of Health on Programmes for AIDS Prevention)提 出的。从此，这个概念被全球各国政府、国际组织和慈善机构采纳。从此，这个概念被全球各国政府、国际组织和慈善机构采纳。自1981年世界第一例艾滋病病 毒感染者发现至今，短短20多年间，艾滋病在全球肆虐流行，已成为重大的公共 卫生问题和社会问题，引起世界卫生组织及各国政府的高度重视。为号召全世界人民行动起来，团结一致共同对抗艾滋病，1988年1月，世界卫生组织在伦敦召开 了一个有100多个国家参加的“全球预防艾滋病”部长级高级会议，会上宣布每年的12月1日为“世界艾滋病日” (World Aids Day) ;1996年1月，联合国艾滋病规划署(UNAIDS)在日内瓦成立;1997年联合国艾滋病规划署将“世界艾滋病日”更名为“世 界艾滋病防治宣传运动”，使艾滋病防治宣传贯穿全年。 二、艾滋病（HIV）检测方法 (一)抗体检测 主要有酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫荧光试验(IFA)。ELISA用去污剂裂解HIV或感染细胞液提取物作抗原，IFA用感染细胞涂片作抗原进行抗体检测，如果 发现阳性标本应重复一次。为防止假阳性，可做Westernblot(WB，蛋白印迹法)进 一步确证。 WB法是用聚丙烯酰胺凝胶电泳将HIV蛋白进行分离，再经传移电泳将不同 蛋白条带转移于硝酸纤维膜上，加入病人血清孵育后，用抗人球蛋白酶标抗体染色，就能测出针对不同结构蛋白抗体，如抗gp120、gp41、P24抗体，特异性较高。 快速检测法，也称为金标法，也是抗体检测的一种方法，根据免疫层析法的原理，用于HIV抗体检测的定性检测。 (二)抗原检测 用ELISA检测P24抗原,在HIV感染早期尚未出现抗体时,血中就有该抗原存在.由于P24量太少,阳性率通常较低。现有用解离免疫复合物法或浓缩P24抗原， 来提高敏感性。 艾滋病防治知识试题 单项选择题 1、艾滋病病毒的英文缩写是（C） A、HAV B、AIDS C、HIV D、HBV 2、艾滋病的医学全名为（B） A、免疫缺陷综合征 B、获得性免疫缺陷综合征 C、先天性免疫缺陷综合征 D、继发性免疫缺陷综合征 3、我国目前艾滋病传播方式中所占比例最高的是（A） A、性接触 B、母婴传播 C、输血 D、共用针具注射毒品 4、感染艾滋病病毒的妇女会通过什么途径将病毒传染给婴儿（C） A、妊娠，分娩，亲吻 B、哺乳，亲吻，妊娠 C、妊娠，分娩，哺乳 D、搂抱，亲吻，呼吸 5、下列哪项是预防经性途径感染艾滋病的有效措施（ A ） A、坚持正确使用安全套 B、拒绝毒品 C、到正规医院拔牙 D、不与人共用牙刷 6、艾滋病病毒感染者是指（D） A、感染了艾滋病病毒而且已经出现AIDS临床症状和体征的人 B、接触过艾滋病病人的人 C、接触过艾滋病病毒的人 D、感染了艾滋病病毒但还没出现AIDS临床症状和体征的人 7、感染艾滋病病毒后，到血液中能检测出艾滋病病毒抗体的这段时间，称为什么期（ D ） A、急性感染期 B、无症状感染期 C、临床症状前期 D、窗口期 8、下列哪项不是艾滋病的传播途径（ D ） A、性传播 B、母婴垂直传播 C、血，血制品，器官移植和污染的注射器 D、蚊虫叮咬 9、HIV传播必须具备的条件有哪些? （ D ） A、有大量的病毒从感染者体内排出 B、排出的病毒要经过一定方式传递给他人 C、有足量的病毒进入体内 D、以上都是 10、艾滋病的治疗原则是（D） A、抗感染 B、免疫调节和免疫重建 C、抗病毒、抗肿瘤治疗 D、以上各项均是 11、已怀孕妇女预防艾滋病母婴传播的有效措施是( D ) A．给孕妇注射疫苗 B．鼓励母乳喂养 C．替婴儿注射疫苗 D．母亲在妊娠期及围产期、婴儿在出生后应用抗HIV药物 12、以下吸毒行为中最容易传播艾滋病病毒的是（ D ） A、鼻吸入毒品 B、口服毒品 C、静脉注射吸毒 D、数人共用注射针具静脉注射毒品 13、预防经性途径传染艾滋病的根本措施是（ D ） A、坚持使用安全套 B、拒绝毒品 C、避免与艾滋病病人发生性关系 D、洁身自爱、遵守性道德 14、我国预防控制艾滋病的工作机制是（A） A、政府组织领导、部门各负其责、全社会共同参与 B、政府组织领导、卫生部门负责、全社会共同参与 C、政府组织领导、加强宣传教育、全社会共同参与 D、以上都不是 15、我国预防控制艾滋病的工作方针是( A ) A、预防为主，防治结合，综合治理 B、政府主导，全社会参与 C、广泛发动群众，全社会动员 D、标本兼治，综合治理 16、下列哪种行为有传染艾滋病的危险（ A ） A、共用剃须刀 B、共用毛巾、马桶 C、共用茶杯和餐具 D、蚊 艾滋病检测实验室的安全防护措施和要求(一) 艾滋病检测实验室人员安全防护工作对预防及减少意外事故的发生，提供意外事故发生时的处理方法，明确制定“艾滋病实验室安全防护和要求”是十分必要的。 1艾滋病检测实验室的安全操作和防护措施除做好对临床实验室10条要求外，还应做到以下8点： 1.1具有高度的实验室全安防护意识： 1.1.1实验室审评专家验收考核时，应对设备和实验室安全时行评估，对提出的意见和指出的隐患要及时改进。 1.1.2建立本实验室的安全－标准操作程序，这些程序适用于现有实验条件，并与其他规则和操作过程相一致。 1.1.3无论是否有意外发生和新的危险出现，每年均要对安全－标准操作程序及实施情况进行检查。 1.2接受严格的培训和复训：所有工作人员都必须经过培训，并要接受实验管理人员的监督， 所有工作人员均有责任保证自己和他人的工作安全。 1.3注意个人保健： 1.3.1注意个人保健对于减少感染的危险性很重要。皮肤受损、患病都会增加感染的危险性。很小的伤口和擦伤都应以防水的敷料覆盖。 1.3.2进实验室前要摘除首饰，修剪长的、带刺的手指甲，以免刺破手套。 1.3.3进入实验室应穿隔离衣、戴手套，必要时戴两层手套和防护眼镜。 1.3.4切忌用嘴吸液，避免用锐利的器材和玻璃器皿，以减少刺伤机会。 1.3.5在脱去隔离衣，离开实验室前必须洗手。 1.4人员： 1.4.1实验室工作人员只限于被批准的、按艾滋病检测工作规范培训合格的人员。实验室工 作人员要有安全防护意识，熟悉生物安全知识和消毒技术。 1.4.2在安排工作人员的实验室区域时，要根据其工作的各类和所涉及的生物试剂，对实验室环境做好安全检查。 1.4.3严格执行实验室工作人员年度采血检测HIV抗体和备案制度。 1.5血清及其他体液样品：所有的样品均应严格按要求妥善保存，HIV抗体阳性样品应做好标记单独保存。 1.6带入及带出实验室的物品： 1.6.1所有带入实验室的包裹都应经过检查。 1.6.2装有样品、细菌或病毒株及有毒物的包裹应在安全柜或其他适当的消毒装置内打开。 1.6.3在将HIV/AIDS样品转到其他实验室时，实验室负责人和指定人员应确定样品送达哪个实验室。 1.6.4向实验室运送样品时，应防止对工作人员、患者或环境造成污染。 1.6.5应将样品放入可靠、安全防漏的容器中运输。所有样品应装入密封塑料管内，样品管外面套上塑料袋，一并装入有缓冲垫的冷藏瓶内，做好标记。 1.6.6护送者应了解接受者，并保证这些材料被转入安全位置，得到安全的处理。 艾滋病知识试卷 一、单选题 1、当hlv侵入机体后，未进入发病期者被称之为： a、艾滋病病人 b、艾滋病病毒感染者 c、窗口期 2、艾滋病病毒，是一种能生存于人的血液中并攻击的病毒。 a、免疫系统 b、神经系统 c、骨酪系统 d、肌肉系统 3、艾滋病病毒通过血液和血液制品传播的概率，大约是%。a、40 b、60 c、80 d、100 4、对艾滋病病毒易感的人群是： a、静脉吸毒者 b、性乱者 c、同性恋者 d、每个人 5、对于hiv/aids的诊断最重要的是根据： a、临床表现 b、经确认hiv抗体阳性 c、具有高危行为 6、下列哪个不是艾滋病的传播途径: a、性接触 b、血、血制品、器官移植和污染的注射器 c、蚊虫叮咬 d、母婴垂直传播 7、下例哪项不是急性hiv感染的临床表现： a、发热 b、咽痛 c、淋巴结肿大 d、口腔真菌感染 8、艾滋病常见合并症有: a、pcpp b、隐球菌脑膜炎 c、弓形体感染 d、以上都是 9、hiv感染的确证实验是: a、免疫印迹法查hiv抗体 b、酶联免疫法查htv抗体 c、pdr法检测hiv rna d、流式细胞仪检测cd4细胞数 10、pcp首选治疗是: a、氟康唑 b、复万新诺明 c、戊烷脒 d、乙胺嘧啶 11、hiv感染人体后主要导致下列哪个系统损害: a、消化系统 b、免疫系统 c、循环系统 d、骨胳系统 12、hlv不可以用下列哪种方法杀灭: a、37度，10%漂白粉处理30分钟 b、56度，30分钟 c、焚烧 d、温室，3天 13、艾滋病毒不可以通过下列哪种方式传播 a、共用针头或注射器 b、性接触 c、日常生活接触 d、母婴传播 14、下列哪项检查能够最终确定病人感染了艾滋病毒: a、血常规 b、尿常规 c、hiv抗体筛查试验 d、hiv抗体确诊试验 15、艾滋病患者常见的肿瘤是 a、霍奇金病 b、淋巴肉瘤 c、卡波济肉瘤 d、非霍奇金淋巴瘤 16、下列哪类人群不属于艾滋病毒感染的高危人群 a、同性恋者 b、性乱交者 c、静脉吸毒者 d、医护人员 二、是非题 1、初筛检测结果为hiv阳性并伴有临床症状，可以诊断为hiv感染者，( ) 2、于hiv感染者及aids病人日常生活和工作不会感染艾滋病。（） 3、一般用于乙型肝炎的消毒药物，完全可以用于艾滋病病毒的消毒。（） 4、性交时只要使用安全套就可以预防艾滋病。（） 艾滋病检测筛查实验室基本标准 （一）艾滋病筛查中心实验室及艾滋病筛查实验室。 1、人员条件 至少由3名医技人员组成，其中具有中级卫生技术职称人员至少1名。负责筛查试验的技术人员需具有2年以上从事病毒性疾病血清学检测工作经验，接受过省级以上艾滋病检测技术培训，并获得培训证书。 2、建筑条件：实验室或检测区域应分为清洁区、半污染区和污染区，应符合二级生物安全实验室（BSL-2）要求。 3、仪器设备条件 配备艾滋病病毒抗体筛查试验所需设备，至少包括酶标读数仪、洗板机、普通冰箱、水浴箱（或温箱）、离心机、加样器（仪）、消毒与污物处理设备、实验室恒温设备、安全防护用品和生物安全柜。 （二）艾滋病检测点。 1、人员条件：至少由2名经过艾滋病检测技术培训并获得培训证书的专业人员组成。 2、建筑条件：需有艾滋病检测区域或专用实验台，能开展简便、快速检测。 3、设备条件：需配备快速试验所必须的物品，包括普通冰箱、消毒与污物处理设备、一次性消耗品、安全防护用品。 艾滋病检测筛查实验室职能 包括艾滋病筛查中心实验室、艾滋病筛查实验室和艾滋病检测点。艾滋病筛查中心实验室设在市（地）级疾病预防控制中心；艾滋病筛查实验室和艾滋病检测点可设在疾病预防控制机构、医疗机构、采供血机构、计划生育技术服务机构等。 1、艾滋病筛查中心实验室职能。 （1）负责职责范围内艾滋病病毒抗体筛查试验，根据需要可开展其他艾滋病检测工作。 （2）负责将艾滋病病毒抗体筛查呈阳性反应的样品送艾滋病检测确证实验室。 （3）定期汇总艾滋病检测资料，并上报艾滋病检测确证实验室。配合艾滋病检测确证实验室做好个案调查、登记等随访工作。 （4）负责对职责范围内艾滋病检测筛查实验室的技术指导；协助艾滋病筛查实验室和艾滋病检测点开展自愿咨询检测工作，给予技术支持和指导。 2、艾滋病筛查实验室职能。 （1）开展艾滋病病毒抗体的筛查试验，根据需要可开展其他艾滋病检测工作。 （2）负责将艾滋病病毒抗体筛查呈阳性反应的样品送当地艾滋病筛查中心实验室或艾滋病检测确证实验室。 （3）定期汇总艾滋病检测资料，并上报当地艾滋病筛查中心实验室或艾滋病检测确证实验室。 （4）对自愿咨询检测工作提供技术支持。 3、艾滋病检测点职能。 （1）开展艾滋病病毒抗体的筛查试验。 （2）负责将艾滋病病毒抗体筛查呈阳性反应的样品送当地艾滋病筛查实验室或艾滋病筛查中心实验室。 （3）定期汇总艾滋病检测资料，并上报当地艾滋病筛查实验室或艾滋病筛查中心实验室。 （4）开展艾滋病自愿咨询检测工作。 《关于艾滋病的知识》 关于艾滋病的知识（一）： 关于艾滋病的十条基本知识和十条相关重要信息 一、十条基本知识： 1、艾滋病是一种病死率极高的严重传染病，目前还没有治愈的药物和方法，但能够预防。 2、艾滋病主要透过性接触、血液和母婴三种途径传播。 3、与艾滋病病人及艾滋病病毒感染者的日常生活和工作接触不会感染艾滋病。 4、洁身自爱、遵守性道德是预防经性途径传染艾滋病的根本措施。 5、正确使用避孕套不仅仅能避孕，还能减少感染艾滋病、性病的危险。 6、及早治疗并治愈性病可减少感染艾滋病的危险。 7、共用注射器吸毒是传播艾滋病的重要途径，因此要拒绝毒品，珍爱生命。 8、避免不必要的输血和注射，使用经艾滋病病毒抗体检测的血液和血液制品。 9、关心、帮忙和不歧视艾滋病病人及艾滋病病毒感染者是预防与控制艾滋病的重要方面。 10、艾滋病威胁着每一个人和每一个家庭，预防艾滋病是全社会的职责。 二、十条重要信息 1、艾滋病是一种病死率极高的严重传染病，目前还没有治愈的药物和方法，但能够预防。 ※艾滋病的医学全名为获得性免疫缺陷综合征（英文缩写AIDS），是由艾滋病病毒（人 类免疫缺陷病毒HIV）引起的一种严重传染病。 ※艾滋病病毒侵入人体后破坏人体的免疫功能，使人体发生多种难以治愈的感染和肿瘤， 最终导致死亡。 ※艾滋病病毒对外界环境的抵抗力较弱，离开人体后，常温下只可生存数小时至数天。高温、干燥以及常用消毒药品都能够杀灭这种病毒。 ※感染艾滋病病毒4-8周后才能从血液中检测出艾滋病病毒抗体，但在能测出抗体之前已 具有传染性。艾滋病病毒感染者的血液、精液、阴道分泌液、乳汁、伤口渗出液中内含超多艾滋病病毒，具有很强的传染性。 ※已感染艾滋病病毒的人平均经过7-10年的时间（潜伏期）才发展为艾滋病病人。在发 展成艾滋病病人以前外表看上去正常，他们能够没有任何症状地生活和工作很多年，但能够将病毒传染给其他人。 艾滋病检测方法有什么 艾滋病这种传染病一般是通过血液啊，母乳啊或者是性传播的方式传染来的，得了这种疾病的患者一般是治愈率还是比较低的，那么我们从生活中是否也对这方面的疾病有所了解呢，多了解一些关于艾滋病的知识可以更好的进行了解，也可以减少疾病的发生，而艾滋病检测方法有什么呢，很多人都不知道，我们来了解一下啊。 一、酶联免疫吸附试验（ELISA） 目前应用的ELISA法有8种之多。它们的特异性和敏 感性超过99%。 二、颗粒凝集法（PA） PA为快速、简便的一种筛选方法。如属阳性，应经WB 证实。PA不需任何特殊仪器，其结果用肉眼可判别。全过程仅需5分钟。缺点有假阳性，且价格昂贵。 三、快速试剂 (一)人类免疫缺陷病毒(HIV)1+2型抗体诊断试剂(胶体硒法) 雅培人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂(胶体硒法)是用于体外，肉眼观察，定性的免疫分析，检测血清或血浆中的HIV-1和HIV-2抗体，用于帮助受感染个体的HIV-1和HIV-2抗体。本品仅用于无偿献血员现场初筛及临床紧急情况的使用，本品检测阳性者，需进行进一步筛查确认。 (二)InstantCHEKTM-HIVl+2金标快速诊断试剂 InstantCHEKTM-HIV1+2是一种快速、简单、灵敏的检验方法，用以检测艾滋病病毒(HIV-1和HIV-2)的抗体。该方法 适用于初筛检测，凡由该试剂测定为阳性者，需用另一种方法检测如ELISA或用蛋白印记法确定。 四、HIV-抗体确认实验 免疫印迹试验（WB）、条带免疫试验（LIATEK HIVⅢ）、放射免疫沉淀试验（RIPA）及免疫荧光试验（IFA）。国内常用的确认试验方法是WB。 (一_免疫印迹实验(westernblot，WB)是广泛用于许多传染病诊断的实验方法，就HIV的病原学诊断而言，它是首选的用以确认HIV抗体的确认实验方法，WB的检测结果常常被作为鉴别其他检验方法优劣的“金标准”。 1.《中华人民共和国传染病防治法》将艾滋病列入哪类传染病？（B ） A.甲类 B.乙类 C.丙类 D.丁类 2 .当HIV侵入机体后，未进入发病期者被称为：( B) A.艾滋病病人 B.艾滋病病毒感染 C.窗口期 D.艾滋病 3.对于HIV/AIDS的诊断最重要的依据是：(B ) A.临床表现 B.经确认HIV抗体阳性 C.具有高危行为 D.免疫功能下降 4.某人到卫生疾病预防控制机构进行检测，初筛结果HIV抗体阳性，则可以判定为( C) A.感染了HIV B.没有感染HIV C.怀疑感染了HIV，需要确认实验才能判断 D.不能确定 5.我国预防控制艾滋病的基本原则是:（A ） A.预防为主、防治结合、综合治理 B.政府主导，全社会参与 C.广泛发动群众，全社会动员 D.标本兼治，综合治理 6．下列哪一项不属于国家“四免一关怀”政策的内容？( A ) A.对所有艾滋病病人实行免费抗艾滋病病毒药物治疗 B.为自愿咨询检测的人员免费提供咨询和初筛检测；对艾滋病病人的遗孤实行免费上学 C.对孕妇实施免费艾滋病咨询、筛查和抗病毒药物治疗，减少母婴传播 D.关心关怀艾滋病病毒感染者和病人 7.艾滋病病毒通过血液和血液制品传播的概率大约是：(D) A.40％ B.60％ C.80％ D.100％ 8.艾滋病患者常见的肿瘤是(C) A.霍奇金病 B.淋巴肉瘤 C.卡波氏肉瘤 D.非霍奇金淋巴瘤 9．艾滋病最常见的机会性感染是：(A) A.肺结核病 B.肝炎 C.感冒 D.心肌炎 10.我国于哪一年发现首例艾滋病？（B） A.1981年 B.1985年 C.1990年 11.我国艾滋病的流行现正处于：（C） A.传入期 B.扩散期 C.快速增长期 12、当HlV侵入机体后，未进入发病期者被称之为（B） A、艾滋病病人 B、艾滋病病毒感染者 C、窗口期 13、一般用于乙型肝炎的消毒药物，完全可以用于艾滋病病毒的消毒。（对） 14、PCP首选治疗是: B A、氟康唑 B、复方新诺明 C、戊烷脒 D、乙胺嘧啶 15、对艾滋病病毒易感的人群是。D A、静脉吸毒者 B、性乱者 C、同性恋者 D、每个人 16、我国HIV-l主要流行株是HIV-l的B，E亚型。（错） 17、从感染艾滋病病毒到抗体可测出的这段时间称为窗口期。 4、目前预防艾滋病病毒最好的办法是：（B） A、注射疫苗 B、改变危险行为 C、吃保健品 一、简答题 1、一般的接触不会，病毒不会通过空气、皮肤或者唾液传染。感染者的体液含 有病毒，但只存在于血液、精液、阴道分泌液中，同时母乳也含有病毒足够导致传播。成年人感染艾滋病病毒的途径必须是通过血液和血液接触（如通过注射器具、输血和血液制品）以及性接触传染 2、不会 3、在艾滋病病毒肆虐的国家里，男女感染的人数大致相等，然而，妇女通常是 在年纪较轻的时候感染上的. 4、目前还没有治愈的方法。疫苗的研制也遥遥无期 5、多数情况下，感染者是通过与他（她）信任的人有亲密接触后感染上病毒的 6、广泛存在于感染者的血液、精液、阴道分泌物以及唾液、尿液、乳汁、脑脊 液和有神经症状者的脑组织中，尤以血液、精液、阴道分泌物中的浓度高。 7、艾滋病传播的主要途径有三个：性接触传播、血液传播、母婴传播。 8、针灸、纹身、器官移植针灸、纹身时如共用或使用了被艾滋病病毒污染而 未彻底消毒的针器；接受艾滋病病毒感染者或艾滋病病人的器官移植，都有可能感染艾滋病病毒 9、这是因为一方难免有牙龈炎、口腔溃疡等口腔常见病；另一方的外生殖器又 难免在口交时被对方的牙齿划伤。即使双方或一方的操作是极浅表的，均便于艾滋病病毒渗出或侵人 10、是 11、1．洁身自爱、遵守性道德是预防经性途径传染艾滋病的根本措 施。2．进行安全的性行为，每次发生性行为时都正确使用安全 套。3．及时、规范地治疗性病可大大降低感染艾滋病病毒的可能 12、1，避免使用血液或血制品，必须使用时，要使用经艾滋病抗体检测的血 液和血制品；避免不必要的静脉注射，使用一次性或经过严格消毒的输液器。 2，不使用毒品，已有毒瘾者应尽量不要静脉吸毒，静脉吸毒者不要与他人共用注射器。3，不与他人共用牙刷、剃须刀等用品，不到消毒不严格的理发店、美容院剃须、修脚、纹身等 13、日常生活接触不会感染艾滋病病毒。下面这些行为，都不会传播艾滋病 病毒(1)与艾滋病病毒感染者握手、拥抱、抚摸、礼节性接吻(干的接吻又无口腔粘膜的破损，不会感染艾滋病，但如果带有大量唾液且有口腔粘膜破损，血液渗出，则可能传播艾滋病)。(2)与艾滋病病毒感染者一起吃饭、喝饮料以及共用碗筷、杯子。(3)与艾滋病病毒感染者一起使用公共设施，如厕所、游泳池、公共浴池、电话机、公共汽车。(4)与艾滋病病毒感染者一起居住、劳动，共用工具，上学校。5)购物、使用钞票；(6)咳嗽、打喷嚏、流泪、出汗、撒尿。(7)蚊子、苍蝇、蟑螂等昆虫叮咬。只要没有感染者的血液、精液、阴道分泌液和乳汁进入到血液里，是不会受到感染的 14、艾滋病病毒对外界环境的抵抗力较弱，离开人体后，常温下只可生存数 小时至数天。高温、干燥及常用消毒药品如漂白粉、酒精等都可以杀灭这种病毒 15、1、主要攻击人体的T淋巴细胞系统。2、一旦侵入机体细胞，病毒将会 和细胞整合在一起终生难以消除。3、病毒基因变化多样。4、广泛存在于感染者的血液、精液、阴道分泌物、唾液、尿液、乳汁、脑脊液、有神经症状的脑组织液，其中以血液、精液、阴道分泌物中浓度最高。5、对外界环境的 艾滋病检测实验室基本标准 一、艾滋病参比实验室 (一)人员条件。 由10名以上医技或科研人员组成,其中具有高级卫生技术职称人员至少5名,中级卫生技术职称人员至少3名。高级技术负责人需具有5年以上艾滋病病毒检测和研究经验,接受过国际或国家级艾滋病检测技术培训,并获得培训证书。 (二)建筑条件。 需有独立的符合二级生物安全实验室(BSL-2)要求的以下建筑区域,包括血清学检测、质量控制、核酸检测、基因序列测定及分析、免疫学检测、血清库和冷库等,并将建筑区域分为清洁区、半污染区和污染区。具有满足艾滋病病毒分离、培养与扩增、浓缩与纯化、中和试验等需要的三级生物安全实验室(BSL-3)。 (三)仪器设备条件。 配备血清学检测、病原学检测、核酸检测、基因序列测定、免疫学检测设备和三级生物安全实验室(BSL-3)所需仪器设备,至少包括酶标读数仪、洗板机、病毒载量测定仪、 基因序列测定仪和流式细胞仪、普通冰箱、低温冰箱、超低温冰箱、水浴箱、温箱、离心机、旋转震荡器、摇床、加样器(仪)、专用计算机和必要的摄像器材、消毒和污物处理设备、实验室恒温设备、安全防护用品和生物安全柜等。具有建立国家艾滋病病毒毒种库、检测样品库、质控品库、基因库、细胞库和数据库的设备条件。 二、艾滋病检测确证实验室 (一)人员条件。 至少由5名医技人员组成,其中专职人员至少2名,具有副高级卫生技术职称人员至少1名。负责确证试验的技术人员需具有3年以上从事艾滋病病毒抗体检测工作经验、接受过省级以上艾滋病检测技术培训,并获得培训证书。 (二)建筑条件。 需有独立的血清学检测实验室,分为清洁区、半污染区和污染区,符合二级生物安全实验室(BSL-2)要求。根据需要可设置核酸检测、免疫学检测等建筑区域。 (三)仪器设备条件。 配备血清学检测和二级生物安全实验室(BSL-2)所需仪器设备,至少包括酶标读数仪、洗板机、普通冰箱、低温 艾滋病检测方法有哪些如何检测艾滋病 一提起艾滋病，很多人都会避而远之，“谈艾色变”是很多人的第一反应。一些人怀疑自己感染了艾滋病，每天生活在恐惧与压力中，苦不堪言，这是人们对艾滋病相关知识缺乏了解所致。其实，艾滋病检测并不神秘，是一种非常普通与常见的检查。 艾滋病主要的检测方法： (一)抗体检测 主要有酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫荧光试验(IFA)。快速检测法，也称为金标法，也是抗体检测的一种方法，根据免疫层析法的原理，用于HIV抗体检测的定性检测。 (二)抗原检测 用ELISA检测P24抗原,在HIV感染早期尚未出现抗体时,血中就有该抗原存在.由于P24量太少,阳性率通常较低。现有用解离免疫复合物法或浓缩P24抗原，来提高敏感性。 (三)核酸检测 用PCR法检测HIV基因，具有快速、高效、敏感和特异等优点，目前该法已被应用于HIV感染早期诊断及艾滋病的研究中。 (四)病毒分离 常用方法为共培养法，即用正常人外周血液分离单个核细胞，加PHA刺激并培养后，加入病人单个核细胞诊断及艾滋病的研究中。 艾滋病常用的检测方法： (一)酶联法 即“酶联免疫法”，简称ELISA。它的中心就是让抗体与酶复合物结合，然后通过显色来检测。步骤其实很简单：ELISA用血清来检测，首先血液要经过至少半个小时的凝集，然后取血清(这是有些网友不理解为什么医院抽完了血对血置之不理的原因，其实是误会)。将酶复合物用稀释液稀释后，加血清及阴性、阳性对照，还有就是质控品(这是严格的要求，它的范围必须在质控范围内)。经过一个小时的孵育，然后洗板，加底物，半个小时避光反应后加终止液即完成反应部分，然后就是读数。由数值来判断结果的阴性或阳性。严格的讲，如果第一次检测为阳性的话，无论是哪个实验室，必须按照CDC的HIV操作规程来进行第二次检测，第二次的方法必须与第一次的不同，如还是阳性，将送艾滋病确认实验室确认。 (二)快速法 即“金标法”，又叫“胶体金法”，金标法是国际上较为先进的灵敏，特异，快速，简便，准确率高的体外诊断方法。测定结果仅凭特制的检测试纸在短时间内即可获得。金标法(艾滋病检测试纸)，取血后滴在试纸上，用15分钟的时间观察该试纸有无颜色变化。 艾滋病快速检测法可以在家里自己检测，操作简单方便，不需要特殊的仪器，在艾滋病试纸上先滴两滴血，再滴一滴稀释液，然后等待15分钟读取结果。结果判读也很简单，如果试纸上出现一条红色的直线，说明是阴性，如果是两条红线，就是阳性。如果检测出现阳性，按照HIV检测流程，需要进行复测。 使用快速法(艾滋病试纸)进行艾滋病自我检测应该在专业人员指导下进行，以确保整个自测操作过程规范正确，结果准确可靠。 (三)蛋白免疫印迹法(WB) 艾滋病确诊实验室常用的方法，主要用于确认试验，当初筛出现阳性时，需采用此方法进行确认实验。基本原理是HIV全病毒抗原经过SDS?PAGE电泳,将分子量大小不等的蛋白带分离开来,然后再把这些已经分离的不同蛋白带电转移到硝酸纤维素膜上。将此膜切割成条状,每一条硝酸纤维素膜上均含有经电泳分离过的HIV病毒抗原。将待检血清样品用稀释液稀释成1/100,再把它直接加到硝酸纤维素膜上,恒温震荡, 艾滋病、梅毒、乙肝实验室检测技术 岳阳市疾控中心白志永 艾滋病抗体检测及样品保存、运送 一、HIV抗体检测筛查方法 酶联免疫吸附试验（ELISA） 化学发光或免疫荧光试验 快速检测（RT） （建议配备合格的快速检测试剂，灰区。） 二、筛查程序 初筛和复检流程（图1） 样品 筛查试剂 初筛试验 阳性反应阴性反应 原有试剂+另一不同原理 （或厂家）试剂或另外两种 不同原理（或厂家）试剂 复检试验 均阳性反应一阴一阳均阴性反应 确证试验报告阴性 图1 HIV抗体筛查检测流程 三、筛查试验结果的报告（建议用修改后报告单附表3）（例） HIV抗体筛查试验用附表1、2进行报告，阴性反应报告为“HIV抗体阴性（-）”；阳性反应报告为“HIV抗体待复检”。 四、 HIV感染产妇所生儿童HIV抗体检测策略及流程 1、适用范围 HIV感染产妇所生婴幼儿；已满18个月的婴幼儿，其母亲HIV感染状态不详，儿童出现H IV相关临床表现，临床怀疑HIV感染的儿童。 2、检测程序 图4 艾滋病感染产妇所生儿童HIV抗体检测流程 五、样品的保存、运送 1、样品的保存 用于抗体和抗原检测的血清或血浆样品，短期（1周）内进行检测的可存放于2～8℃，一周以上应存放于-20℃以下。 2、样品的运送（例） （1）应符合生物安全要求； (2)应采用三层容器对样品进行包装。 第一层容器：直接装样品，应防渗漏。样品应置于带盖的试管内。在试管的周围应垫有缓冲吸水材料，以免碰碎。 第二层容器：容纳并保护第一层容器，可以装若干个第一层容器。要求不易破碎、带盖、防渗漏、容器的材料要易于消毒处理。 第三层容器：容纳并保护第二层容器的运输用外层包装箱。外面要贴上醒目的标签、联系方式，还应易于消毒。 (3) 用于抗体检测的血清和血浆样品应在冻存条件下运送。 质量控制 一、艾滋病抗体检测的统计学室内质量控制 1、试剂盒内部对照 即试剂盒提供的阳性和阴性对照血清。用于判断实验的有效性，不能作为室内质控品使用，内部对照结果无效，必须重新试验。 2、室内质控品 为非试剂盒组份的外部质控品，是为了监控检测的重复性而设置的，包括强阳性、弱阳性和阴性质控血清。也可以只设置一个弱阳性质控，以该试剂盒临界值（Cut-off）的2～3倍为宜。作用：判断该批临床样品检测的有效性，每次实验必须包含室内质控品，其结果无效，必须重新试验。 2017全国大学生预防艾滋病知识竞赛（样题） 判断题： 1. 我国首个艾滋病患儿学校是临汾红丝带学校。（对） 2. 如果身边发现了艾滋病病毒感染者,应远离他们。（错） 3. 在日常生活中,使用公共设施不会传播艾滋病病毒。（对） 4. 如果必须输血时,有权了解血液是否经过艾滋病病毒抗体检测。（对） 5. 通常艾滋病感染者在4个月后能检出抗HIV阳性。（错） 6. 中国现有艾滋病病毒感染者约近千万人。（错） 7. 艾滋病抗病毒治疗的最终目标是延长患者生命，提高生活质量。（错） 8. 安全套只要没有损坏就可以重复使用。（错） 9. 红丝带的含义是唤起全社会对艾滋病事业的关注,并用心参与。（对） 10. 广播、电视、报刊、互联网等新闻媒体应当开展艾滋广播、电视、报刊、互联网等新闻媒体应当开展艾滋病防治的公益宣传。病防治的公益宣传。（对） 11. 安全套预防艾滋病、性病的效果是100%。（错） 12. 关心关怀艾滋病病毒感染者和病人不属于国家“四免一关怀”政策的内。（错） 13. 对于HIV/AIDS的诊断最重要的依据是经确认HIV抗体阳性。（对） 14. 当HIV侵入机体后，未进入发病期者被称为窗口期。（错） 15. 《中华人民共和国传染病防治法》将艾滋病列入丙类传染病（错） 16. 艾滋病病毒抗体确诊试验检查能够最终确定病人感染了艾滋病病毒。（错） 17. 到公共泳池游泳、照顾艾滋病患者、与艾滋病病毒感染者握手、拥抱。（对） 18. 既能避孕又能预防艾滋病病毒和性病传播的措施是结扎。（错） 19. 艾滋病感染者和艾滋病患者的区别是严重程度不同。（错） 20. 预防艾滋病的错误方法是远离艾滋病感染者和艾滋病患者，不与他们接触。（对） 21. 艾滋病(AIDS)是由人类免疫缺陷病毒(HIV)引起的以机会性感染和机会性肿瘤为特征的一种传染病，又称为获得性免疫缺陷综合征。（对） 22. 保护HIV/AIDS患者的合法权益，是做好预防控制艾滋病的重要内容之一。（对） 23. 于HIV感染者及AIDS病人日常生活和工作会感染艾滋病。（错） 24. 避免不必要的输血和注射可以减少感染艾滋病的危险。（对） 25. 每个人都有感染艾滋病的可能性。（对） 26. 正确使用安全套可以减少感染性病和艾滋病的危险。（对） 27. 使用安全套可以很大程度上预防艾滋病的传播。（对） 28. 目前仍缺乏根治 HIV 感染的药物，多采用综合治疗:包括心理治疗、抗HIV 病毒治疗、预防和治疗机会性感染、支持疗法等，其中以抗病毒治疗最为关键。（对） 29. 艾滋病目前不能治愈，提高病人生存质量和延长生存期是治疗的最终目标。（对） 30. 因为艾滋病毒只感染少数有危险行为的人，因此我们需要进行大量的健康教育。（对） 31. 没有症状的带病毒者可以将病毒传染给他人。（对） 32. HIV 急性感染期中，患者不具备传染性，无任何症状。（错） 33. 与艾滋病患者共同进餐不可以感染艾滋病毒。（对）(工作规范)湖北省艾滋病检测实验室管理及资质认定工作规范
2014艾滋病知识试题以及答案
HIV检测方法
人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)及其相关标志的检测是预防 HIV 感染和艾滋病临床治疗中重要的环节，在艾滋病的防治工作中具有重要作用，如艾滋病的 诊断、HIV 感染的诊断、血源及器官供体的筛选、流行病学调查、艾滋病病人及 HIV 感染 者的病情动态观察、临床治疗疗效考核以及 HIV 疫苗的安全性和效果鉴定等。 HIV 感染标志分为病毒标志、免疫标志和相关标志三大类。病毒标志是指直接从 HIV 感染者体内分离出病毒或检出 HIV 组成成分(抗原或核酸)。免疫标志是指 HIV 感染所产生 的 HIV 抗原、抗体等免疫物质。相关标志是指 HIV 感染后与艾滋病病情进展有密切关系的 某些标志，如 CD4 细胞、CD8 细胞，β2 微球蛋白、有关细胞因子等。这些标志的测定可 为 HIV 感染及临床疗效的考核提供极为重要的诊断、治疗和预后指征。目前 HIV 抗体的检 测是艾滋病实验室检测中最常用的方法，因为 HIV 抗体是患者感染 HIV 后最容易检出并且 持续时间最长的免疫学标志，而且抗体的检测方法大多简便、经济，易于推广应用。 在介绍各种 HIV 实验室诊断方法之前，为了使实验室工作人员能够有效地确保结果准 确、可靠、优质，我们必须对作为一种感染因子的 HIV 以及由它所导致的致命性危害有基 本的认识。实验室工作人员应特别注意病毒的结构、抗原组成，人体的免疫反应，诊断试 验的基本原理、试验结果的解释，以及为了准确而有效地提供实验诊断所必需的质量保证 措施。如果由于缺乏技术专长或基本知识而造成不正确的试验结果是不可原谅的。现将有 关内容扼要介绍如下： 一、人类免疫缺陷病毒(HIV)概述 （一） 年份 1981 艾滋病病原体的发现和命名 事 由 命 名
美国首先在洛杉矶男性同性恋中发现 5 例以 往很罕见的卡氏肺囊虫肺炎和 26 例卡波济氏 肉瘤患者，这些病人均表现有严重的免疫缺 陷，但原因不明。
1982 年将这种新的疾病命名为 “获得性免疫缺陷综合征” Acquired Immuno Deficiency
Syndrome，AIDS，即艾滋病 淋巴结病相关病毒 Lym phadenopathy Associated
1983
从艾滋病流行学资料分析很可能是由病毒引 起的。 法国巴斯德研究所 Montagnier 等首先从 多发性淋巴结病综合症病人分离到一种新的 逆转录病毒
Virus，LAV
1984
美国国立癌症研究所 Robert Gallo 等报道从艾 滋病病人活检组织分离到一种新的逆转录病 毒与其以前发现的 HTLV-1 和 HTLV-Ⅱ不同。
人类嗜 T 淋巴细胞Ⅲ型病毒 Human T-cell Lymphatropic Virus
typeⅢ，HTLV-Ⅲ AIDS Related Virus， ARV
1984
美国加州大学分离出艾滋病相关病毒HIV实验室ELISA检测方法
艾滋病检测筛查实验室基本标准
艾滋病(HIV)检测方法汇总
艾滋病防治知识试题
艾滋病检测实验室的安全防护措施和要求(一)
艾滋病知识试卷
艾滋病检测筛查实验室基本标准
关于艾滋病的知识_资料阅读完美版
艾滋病检测方法有什么
艾滋病知识试卷
艾滋病问题答案
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艾滋病检测方法有哪些 如何检测艾滋病
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