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法医用什么工具

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法医用什么工具

法医解剖尸体和医生动手术差不多。主要区别是刀口长短的区别,以及对象的新鲜程度。使用的器械基本相同。当然,动手术是有主刀、一二三助的,而法医没有。而且法医也不需要器械护士传递器械,都是自己取然后有手术刀、刀柄、大弯针、缝合线、持针器、有齿镊子、无齿镊子、止血钳、手术剪(多种)……常用的就很多,都是些小小的东西

在解剖过程中法医认为有必要进一步检查的,可以取下

一般的操作是取下心脏(回去病理是否有心脏病)

胃内容物及少量的胃组织,(回去做毒物分析是否中毒)

如果有必要的话,会取少量肝组织及部分肾脏,同样的目的是为了查明死亡的确切原因。

一般有能力做病理鉴定的公安,就不会少刑事案件,那病理室里的标本多的都没有地方放,说心理话,法医也不想取下!

但是为了确定死亡原因,因为看到的并非是正确的!

你只要怀着一颗救死扶伤的心,正气凛然,谁都侵害不了你,冥冥中会有一种神秘力量保护你。但就害怕心不正,因为灵体死后有些放不下他的肉身,经常会游离左右,也就是我们经常说的鬼魂,鬼魂具有他心通,如果你的心是正的,他们会理解而且靠近不了你,因为身正心正之人身上有光,阳气盛。

还有接触尸体时建议怀有一种慈悲心,像对待活人一样对待他们。因为他们在旁边看着的。说到这里你也许觉得很害怕,其实鬼没有人们想的那么恐怖,他们很苦,老老实实的,不像人口是心非,建议你看看地藏经,看完你就不害怕了,建议与灵界边界工作的朋友经常默念地藏菩萨圣号,会有很大帮助的。

也许你们科学工作者对这个还有这种那种怀疑,但轮回是绝对真实,建议看看此博客,共产党员写。

法医尸体检查

尸体解剖不仅是现代医学的主要研究方法,同时也是法医工作者重要的工作手段。法医尸体检查(Postmortem examination of forensic cases, Medicolegal autopsy)不同于正常的人体解剖,也不同于一般的病理解剖。法医尸体剖验检查可帮助解决民事(事故、灾害、疾病等)以及刑事(伤害、谋杀、投毒等)案件中所涉及的死因、死亡方式、致伤方式、死亡时间、致伤物推断,个体识别以及疾病与损伤关系等诸多问题。因此,系统地掌握尸体解剖检查的程序、方法以及要领对法医工作者十分重要。本章将详细介绍尸体解剖检查的有关内容。

第一节尸体解剖常用设备及注意事项

一、尸体解剖的和材料

(一)尸体解剖室

尸体解剖室应设在殡仪馆或太平间附近,以便尸体的运输和保存。解剖室应明亮、通风、照明设备齐全。目前国内已有许多较现代化、半自动化的尸体解剖室建成,解剖室装备有恒温、自动通风和自动喷水装置。大大地改善了法医工作者的工作环境。但由于法医工作的特殊性,有些尸体因条件限制(如交通不便、高度腐败、开棺等),也只能在荒野、山坡、水边进行,其工作环境十分艰苦,对此要有充分的思想准备。

(二)常用解剖器械

解剖刀类:大脏器刀、小脏器刀、脑刀、肋骨刀、截肢刀等;

剪刀类:圆头手术剪、尖头手术剪、眼科剪、骨剪、肠剪、指甲剪;

锯类:板锯(细齿锯)、电动开颅器、脊柱锯;

镊钳类:有齿镊、无齿镊、骨钳(备取小块骨)、弯血管钳、直血管钳;

凿类:窄刃或宽刃凿、丁字凿;

手套类:乳胶手套、纱手套、胶皮手套;

其他:锤子、钢尺、卷尺、不锈钢勺、注射器、量筒、舀勺、注射针头及穿刺针头、缝针及缝线、探针、手持放大镜、手术衣帽、纱布和脱脂棉、试管和吸管、不同规格的塑料袋、瓷盆、指纹擦印盒和指纹擦印纸等。

另外,滑石粉、海绵、塑料围裙、酒精灯、等也是常备品。如有可能尸检室应配备有照像机、摄像机,以便将特大或有纠纷的案件尸检的全过程录像或对尸检过程中发现内脏器官损伤、移位、病变、积液等即时摄制。在藏尸室内配备有冷藏设备,以备存放尸体,并要准备一架有滑轮并可放担架的推床,以运送尸体,床面应与解剖台同高,便于抬放。

(三)常用固定液

1.甲醛液(福尔马林):为最常用之固定剂,为一份原装(40%)甲醛液加9份水混合而成。可加入少量碳酸钙,以减轻甲醛液酸度配成磷酸盐缓冲福尔马林固定液,其ph值为7。用这种固定液固定可避免组织切片内产生福尔马林色素。固定时间以12~14h为宜。

2.乙醇:需显示组织内糖原或神经细胞内尼氏体时,可用95%的乙醇固定,但这种固定液浸透慢,组织染色不好。用酒精甲醛液(甲醛10份加95%的乙醇90份而成)染色较佳。

3.Zenker液:用于检查骨髓等造血组织的细胞,贮存液配方:重铬酸钾2.5g、升泵5g、蒸馏水100ml;用时应加5ml冰醋酸或甲醛(后者称Zenker甲醛液或Helly液)。如骨髓内含有少许骨小梁有碍切片时,可加入10ml冰醋酸,以促脱钙。

4.Bouin液:主要用于结缔组织三色染色时,并能较好的显示肺水肿。配方:苦味酸饱和水溶液75ml、40%甲醛液25ml、冰醋酸5ml。

戊二醛溶液为制作电镜超薄切片常用固定剂,应放冰箱贮存备用。

二、尸体解剖检查的注意事项

刑事案件的尸检可由公安机关强制执行进行,非刑事案件的尸检需经有关部门批准经死者亲属签字同意后方可进行。尸检中应注意的事项有:1.尊重死者尸检中必须严肃认真、尊重死者,尽量保证尸体的完整及清洁。

2.尸体检查要系统规范尸体检查时要避免粗心大意和粗暴操作,要系统规范,不要人为将一些证据遗漏或破坏。分离内脏器官须查清其相互之间的联系。保持脏器原有色泽,尽量避免用水冲洗。切开内脏器官要取最大切面,而且要自左向右一刀切开,避免拉锯式在一个切面上切多次。

3.高度的自我保护意识避免尸体血液、脓液以及粪便对周围环境的污染,尤其对传染病死者解剖时更应加以注意,解剖人员应有高度的自我保护意识。

4.尸体的保存尸体常温下保存一般不超过48小时,冷冻尸体一般不超过1周,若冷冻条件较好,可保存更长时间。尸检应尽早进行,避免组织自溶及腐败,尤其是医疗纠纷的尸检。

第二节尸体检查前的准备工作

法医学尸体检验是法医鉴定过程中非常重要的环节。在尸解前必须做好充分准备,方可顺利进行。

一、现场勘查

现场勘查是指侦查人员为了查明事件性质和犯罪事实,收集犯罪证据,依法对犯罪现场及有关人员进行勘验检查和调查访问的一项侦查活动。法医学现场勘查对尸检有重要的指导作用。

(一)现场勘查的内容

法医学现场勘验必须在勘验负责人员的统一指挥下,按照勘验步骤有条不紊地逐步进行。法医学现场勘验的步骤主要分为观察现场、初步勘验和详细勘验三个步骤。

1.观察现场指法医在勘查前对现场外围、对实施犯罪地点及周围环境所进行的有关法医学物证的全面观察。

2.初步勘查也称静态勘查,是指在不改变现场原貌、不触动现场物体的情况下所进行的勘查工作。

法医进入现场的,对于已发现的法医学痕迹、物品及尸体、人体分泌物、排泄物不做任何的触摸或移动,而是发现一处标记一处,即做出明显的保护框,防止受到破坏或变动。静止状态下的观察、研究和分析,主要应解决以下问题①确定现场的入口和出口;②确定勘查人员的出入通道;③进行现场照相和录像;④发现、固定明显的痕迹和物品;⑤注意发现反常情况。

3.详细勘查是指在初步勘查的基础上对现场的痕迹、物品进行逐一的检查,发现、研究、记录和提取的工作过程。

前一阶段工作是宏观的,这一阶段工作则是微观的。这时不仅可以对现场有关法医痕迹和物品进行触摸、碰动,而且可以翻转、移动,进行仔细观察和反复查看。

(1)仔细观察现场状况:对勘查的总体形势和状态有一个总的印象。如尸体所处位置、血迹分布及性状;犯罪嫌疑人触动了哪些物品,破坏了哪些部位;哪些部位提取的痕迹即刻可确定为犯罪嫌疑人所留。

(2)认真发现法医学物证:详细勘查时要利用各种技术手段对现场的各个部位、每件物品进行仔细的勘查。将肉眼常光下难以看到的法医学物证显现出来,尤其注意发现毛发、精斑、血迹、纤维、涂片、划痕等微量物证。特别要关注现场的隐蔽部位,如顶棚上、地板下、垃圾道等。

(二)现场勘查的注意事项

1.现场尸体检查时要与其他专业参加现场勘查人员明确分工、密切配合。

2.注意保护现场。既要尽量不破坏现场,又不能在工作中留下自己的痕迹物证。

3.收集有价值的文证、物证。

4.尽可能少搬动尸体,以减少和避免人为损伤。

5.注意保密。现场的一切情况不得随便议论和透露,现场的各种有价值的文证、物证不能遗失。

二、了解案件及案情调查

在未了解案情的情况下,不能漫无目的的动手进行尸体检查,必须对每宗尸检的案情进行深入细致的了解。在充分的掌握了尽可能详细的案情的基础上,尸检才能做到有的放矢。才能在尸检中有所侧重,寻找出对案件有价值的法律证据。

1.对死者一般情况的了解

尸检前需了解死者的年龄、籍贯、职业、文化程度、婚姻状况、经济状况、健康状况等;除对死者的一般情况了解外,有些案件还需了解死者生前的品德、作风、嗜好,是否还存在某些恶习等,这些情况的掌握对推断死者是自杀、他杀,还是意外或是疾病死亡可提供一定线索;同时,对尸检工作可起到某些提示作用。

2.对案情相关情况的了解

在案情了解过程中应了解死亡时间、死亡过程、死亡方式以及死亡情节。如凶杀案件死亡时,还需对加害人情况、使用凶器的性状等进行了解;交通事故死亡时,需要对肇事车辆的状况、路况、死者与车辆关系等进行了解;医疗纠纷死亡时,需对死者生前临床的症状、体征、诊断以及治疗、用药过程、是否有药物过敏史等进行了解;工伤事故死亡时,需要对死者生前的工作性质、工作现场状

况等进行了解。这些情况的了解不能仅限于案卷的提供,必要时,法医可以亲自走访和询问与死者相关的人员。

第三节尸体的衣着检查

人们的社会活动离不开衣着,我们在研究人体伤亡的过程中,当然也不能回避衣着这一问题。有时,衣着的检查对我们进行个体识别、推断致伤物、了解现场以及分析死因等,常可起到事半功倍的作用,但这一点常常被忽视,未能引起足够的重视,本章节着重衣着检查的重要性、检查方法以及其适用性进行介绍。

一、衣着检查的目的

(一)个体识别

衣着即穿戴、服饰与个体的生活习惯、年龄、性别、民族、宗教、职业、经济状况、社会地位等息息相关,对死者的衣着进行认真的检查,并加以分析,对个体识别有很好的“圈定”作用。比如,年轻人和老年人,无论是衣着的色彩、式样都有很大的差异,农村人和城市人衣着也有一定的差异,体力劳动者和脑力劳动者衣着有差别。社会地位、经济条件的差异,在死者的衣着式样、品质上也会有明显的差别。

衣着的磨损状况以及衣着上的附着物对进行个体识别也有很好的参考价值。比如挑担者常肩部磨损、伏案者常袖肘部磨损。纺织工人衣着上常附有纤维,建筑工人衣着上常附有水泥、石灰等。

宗教服饰、民族服饰可明显的标明死者的宗教种类以及民族分类。

(二)致死方式

在他杀案件中,死者生前挣扎、躲避、抵抗、搏斗、拉扯等,常会导致衣着的零乱、破损、钮扣脱落、鞋帽脱落等,自杀案件中死者衣着常较为完整,有些死者临死前甚至换上自己最喜欢的衣着,因此衣着的状况对我们判别死亡方式会有一定的帮助。

枪弹伤、爆炸伤的死者衣着上常有残留的火药以及弹片所致的破损痕迹,交通事故的死者衣着上有时会留有车轮的印痕以及粘附的泥土、植物、柏油、砂石等。

性强暴案件中常可见死者胸罩脱落、内裤撕裂、腰带折断等,这些对我们判断死亡性质都十分有利。

(三)致伤物的推断

衣着是包裹在人体的表面,损伤发生时首先是造成衣着的损伤。衣着损伤的形态常常可反映致伤物的性状。比如,①锐器损伤常造成衣着锐角的破口、钝器损伤常造成衣着粗糙的不规则破损;②交通事故死亡者衣着上常附有有车轮的印痕及柏油、泥土等,被车辆拉挂还会造成衣着拖擦地面的磨痕;③枪弹、爆炸伤衣着常见火药烟晕、火药烧灼、烟灰粘附等;雷电击伤时衣着有时会被撕成碎片。

(四)现场及物证

衣着损伤状况对现场分析有一定的参考价值。比如衣着损伤的程度与外力作用强度有一定的关联,可分析致伤物的距离及作用方向。衣着上的血迹的位置、血流方向、范围及状况(喷溅、滴落、浸染、浸渍等)可以推断致伤时的体位及过程。

交通事故时衣着拖挂处可与车辆突出部位进行比对,衣着上车辆印痕可与肇事车辆比对。

衣着上的附着物常可作为物证检材,如衣着上血迹、精斑、毛发、纤维、泥土、羽毛、纤维等,都可为案件的侦破提供物证线索。

二、衣着的检查方法

(一)保持原始状态进行初检

尽可能保持死者衣着的原始状态。衣着上的破损应减少对其牵拉、翻动,避免其形态变化,衣着上的附着物避免因搬运而脱落。移动尸体前必须就地进行初检,初检时必须迅速照像、记录,对易于消失的附着物必须认真提取。

(二)解脱衣着进一步检查

解脱衣着不宜用刀割、剪切,不可草率地撕扯剥离,必须剪开时,应沿衣缝小心的剪开,尽量避开有特征、有破损、有附着物的部位。

要逐层逐件地解脱,不可多层衣服一并脱下,特别要注意衣着有无破损、有无污染、有无附着物。钮扣、拉链有无松动、缺失。口袋内物品要彻底清点,逐一登记,妥善保管。

衣着上的附着物要抖落在白纸上,收集、包装、备检。衣着上污染物可用剪刀剪下部分备检。

第四节法医病理学尸表检查

尸表检查在尸体检验中是非常重要的,同时也是尸体检查重要的组成部分。尸表认真、仔细的检查有时会对尸检结果起到事半功倍的作用。其中有些案件通过尸表的检查已可对剖验结果作出预测性的推断。因此,一定不要轻视尸表的检查。

一、尸体的一般性检查

1.一般情况记录死者的姓名、年龄、性别、身长、体重、种族、发育及营养状况、畸形、皮肤颜色、纹身、疤痕、水肿、出血、黄疸等。

2.死后现象记录直肠尸温、尸斑的分布及颜色、尸僵及尸体痉挛的姿势、腐败程度等,以便分析死因、死亡性质和推断死亡时间。

3.体表各部状态从头到足,从前到后,从左到右,都要详细检查并记录。头皮及头发状况(有无血肿、肿块及秃发等);两侧瞳孔是否等大,并记录其直径;结膜是否充血、出血,巩膜有无黄染,眼睑有无水肿或血肿;鼻腔及外耳道有无内容物流出(记录其性状及颜色);口腔有无蟹沫或血性液体流出,牙齿有无龋齿、假牙或脱落(记录其上、下列位置),口唇粘膜是否青紫;唾液腺、甲状腺及颈部淋巴结是否肿大;胸廓平坦或隆起,左右是否对称;腹壁是否膨隆;背部及骶部有无褥疮;外生殖器有无畸形和瘢痕,处女膜有无新鲜破裂,阴道内

有无异物;腹股沟淋巴结是否肿大;肛门有无痔核;四肢有无断肢、残缺或疤痕;四肢指甲是青紫;体表有无残疾或畸形等。

4.体表损伤体表有损伤者,必须检查和记录下列各点:

(1)部位:按标准记录其正确的解剖位置,例如左面部损伤,应注明离左外眦若干厘米,距左鼻唇沟若干厘米等。

(2)类型:根据损伤的基本形态分擦伤、挫伤、创、骨折和肢体离断等。

(3)数目:可按不同部位或不同种类的损伤来确定损伤的数目。对损伤要用明确肯定的数字表明,如一处、二块或三条等;若为群集性、广泛性或散在性的损伤,应注明其范围。

(4)形状:最好用几何学名词记述,如圆形、卵圆形、线形、弧形、纺缍形、星芒形、犬牙形等;倘为不规则形,应摄影或绘图,并注明其轮廓。

(5)大小:以cm或mm记录损伤的长度、宽度、凸出于皮肤表面的高度(如肿胀或骨折端的突出、脱位关节端的突出等)和凹陷的深度等,避免以不确切的大小来比拟(蚕豆大、黄豆大等)。

(6)损伤形态学特征:要仔细观察体表损伤形态学的改变,根据体表损伤形态学的特征及损伤周围的性状,血液流注的方向、涂抹形态和沾染范围,可判断损伤性质是自杀、他杀还是意外所致;可推断暴力作用的方向;同时还可以推测损伤是何物所致,若致伤物不是一种,则应分析哪一种是造成致命伤的致伤物。

(7)颜色:对于表皮剥脱、皮下出血、组织坏死、炎症反应等,要指明其颜色,常常根据颜色变化可推断损伤后经过时间。

(8)其他:损伤部位附着的异物(如火药、烟灰、泥沙、植物、凶器碎片、弹头、铁锈、头发、布片、组织碎片等),应详细检查并记录之,然后采取这些异物进行检验,为推断致伤物提供证据。

二、体表各部位的检查

体表各部位的检查要全面、系统有步骤地进行。检查顺序应先静后动、从头到足、由左至右、自前而后。

(一)头部

1.头发测量头发长度,观察发型、颜色、分布和数量,检查有无染发、烫发及是否假发,观察和检验头发上有无附着物及其种类、数量和分布特点,同时应观察眉毛、胡须的类型及分布特点。

2.头皮依次分开头发,检查头皮有无损伤和病变,需要时应剃去头发再仔细检查。

3.头颅观察头颅有无变形,用双手挤压头颅前后左右,检查有无骨折。

4.颜面观察颜面肤色,检查有无肿胀、瘢痕、损伤及血迹分布特点。

5.眼眼睑有无水肿和皮下出血,眼裂开和闭情况,睑结膜、球结膜和穹窿部结膜是否有充血及出血斑点,巩膜有无黄染,角膜是否透明及混浊程序,瞳孔大小,左右是否对称。此外,检查有无义眼及其特点。

6.鼻观察鼻外形是否对称、偏位、塌陷,鼻孔周围有无泡沫及其性状和颜色,鼻腔有无异物、出血和分泌物。

7.耳观察耳廓形态及有无损伤,检查外耳道内有无异物、血液、脓液和脑脊液流出。

8.口腔观察口的开合情况、口唇粘膜颜色、口角及周围皮肤有无流注的腐蚀痕;检查口腔有无异物、血液及特殊气味,口腔粘膜有无溃疡、出血及损伤;牙齿的特异形状、数目、排列情况及磨损程度,有无义齿、龋齿、汞线,齿龈有无破损及色素沉着;舌尖在口腔内的位置,舌有无咬伤、溃疡及舌苔情况。

(二)颈项部

观察及检查颈部是否对称,甲状腺及颈部淋巴结是否肿大,有无肿块及颈静脉怒张;颈部有无损伤、索沟、扼痕及压痕等。如有创口要检查创口的部位、数目、方向、深度及有无试切创、创腔内有无异物。如有索沟应检查索沟的位置、数目、深浅、方向,有无出血斑点及水泡形成,索沟是否闭锁,有无绳索结扣压痕,多个索沟则要注意是否平行或交叉,索沟间有否嵴样突起和点状出血。颈部屈伸旋转状态,颈椎有无脱位及骨折现象。

(三)胸腹部

1.胸部观察胸部外形是否对称,胸壁有无损伤及注射针眼,检查肋骨有无骨折,腋窝淋巴结是否肿大,女性尸体需检查乳房发育状况,有无咬痕、肿块及损伤。

2.腹部观察腹部外形是否平坦、膨隆、有无舟状腹、腹壁有无损伤、瘢痕及皮下静脉曲张,检查腹部有无波动感、腹股沟淋巴结是否肿大。女尸应检查有无妊娠及妊娠纹。

(四)腰背部

观察腰背部有无损伤,腰骶部有无褥疮,臀部有无注射针眼。检查脊柱有无畸形或骨折。

(五)会阴部及肛门

观察会阴部及外生殖器的发育状况、有无畸形、有无损伤和病变。男性尸体应挤压阴茎,观察尿道口有无液体流出。女性尸体要观察外阴部有无血痕、精液及分泌物附着;检查处女膜完整程度:是否破裂,是否曾修补,阴道内有无异物,必要时采取阴道内容物备检。对疑为强奸而处女膜未破者,应详细检查处女膜的类型、厚薄、伸展性。

(六)四肢

观察肢体的形态、位置,有无肿胀、畸形,有无软组织损伤、骨折和关节脱位。上肢应检查手掌,手中是否抓有物体或附有异物;指甲颜色及是否脱落,甲沟内有无异物(如血痕、皮肉、毛发及衣物纤维等)。当上肢有损伤时,应根据其损伤特点,分析判断是否为防卫抵抗伤。下肢应检查有无水肿、趾甲颜色、静脉是否曲张。女尸还应注意大腿内侧有无擦伤和挫伤;精斑、血迹和毛发等附着物。

三、尸体外表的特殊检验

法医学尸体外表检验中,有些细微损伤或尸体表面附着物、创腔内的异物等用肉眼不能观察和确定,在案情需要时,可借助仪器进行辅助检查和特殊检验。

1.X线检查疑为空气栓塞、骨折、爆炸死亡、盲管枪弹创或散弹枪创案例,必要时可进行X线检查,了解骨折的形态特征以帮助分析损伤形成的原因和机理,寻找和发现体内弹粒或金属碎片的所在部位。

2.立体显微镜检查观察衣物服饰损伤部位纱线移位、压扁、断裂、变形情况及衣着附着物的种类、性质和特点;观察损伤部位表皮擦伤的形态特征,力

的作用方向;观察创腔内异物的种类、性质和特征。如检查电击死案例的电流斑、枪创的子弹射入口和出口等。

3.微量化学检测如检测持枪射击者手上沉着烟尘的铅、钡、锑等化合物,电击死时电流斑处皮肤金属化微粒,爆炸死亡者尸体附着物的化学元素测定等。

4.中子活化分析应用中子活化分析方法测定皮肤表面附着的粉尘,显示皮肤金属化时金属元素等。

5.扫描电镜如用扫描电镜加X线能谱分析可检测枪弹创皮肤射击残留物、手上沾染的底火粉尘、尸体表面损伤处致伤物的痕迹,电击伤、爆炸伤及化学烧伤引起的改变等。

6.分子生物学技术如对粘附尸体表面的人体组织和体液等作XY染色体检验,鉴定男女性别。用PCR技术对尸体表面的血痕、精斑或分泌物同一性认定等。

四、尸体外表检验的注意事项

1.对某些肉眼观察不清的微细损伤,如口鼻部及大腿内侧的表皮剥脱和皮肤上细小的附着物等可使用放大镜帮助观察。

2.疑有皮下出血的部位应切开检查以便与尸斑相鉴别。若切开后见组织内有凝血则可视为皮下出血。臀部等肌肉丰满部位宜深切检查。有时除出血外还要检查肌肉的受损情况,包括程度及范围等。

3.有些损伤,在伤后短时间内不易观察,待过一段时间后则较易观察,如表皮剥脱、枪弹损伤时皮肤挫伤轮等待干燥成皮革样化时较易观察。

4.注意体表较隐蔽部位的检查,如腋窝、会阴部等处。

5.枪弹创和刺创,仅作尸体外表检查则不完整,必须结合尸体解剖逐一完整地检查。

6.碎尸、爆炸死亡等特殊类型尸体的体表损伤检查可按尸块检验,与解剖检查同时进行。

7.尸体外表损伤取材时应注意尽量不影响尸体外貌,可作梭形或棱形切口取材,然后缝合。

8.进行尸体外表检验时仍须注意收集有关物证。如创腔异物和损伤处的附着物等。

9.尸体外表检查不能解决死因等问题时,必须进行法医学尸体解剖。

第五节法医病理学尸体解剖

法医学尸体解剖是法医学尸体检查工作中极为重要的一环。做好尸体解剖工作,对提高法医学鉴定水平、保证检案质量具有非常重要的意义。

一、法医病理学尸体解剖概述

为了确保法医病理学的鉴定质量,法医病理学尸体解剖应争取尽早进行,尸体解剖时应力求做到全面、系统。实践证明,仅做尸体表面检验或做局部尸体解剖,易致误诊、漏诊,从而导致冤案、假案、错案。所谓全面、系统的尸体解剖是指不仅应剖验颅腔、胸腔、腹腔这三大腔,而且还应剖验颈部、脊髓腔、盆腔及其他需要解剖的部位,以查明疾病或损伤的部位和范围。法医学尸体解剖一般以剖验颅腔、胸腔、腹腔、盆腔及颈部最常见,其他如脊髓腔、关节腔、骨骼和软组织只在需要时才进行剖验。

虽然法医学尸体解剖与病理学尸体解剖在技术操作方面基本相同,但由于解剖对象、目的和要求不同,故具体尸解方法步骤不尽一致。因此,每一案例,在进行法医学尸体解剖前应认真分析,采取适当的尸体解剖术式和程序,并在必要时采用一些选择性检验方法。

二、法医病理学尸体解剖的程序及方法

(一)解剖术式

1.直线切法从下颌下缘正中线开始,向下沿颈、胸、腹正中线绕脐左侧至耻骨联合上缘切开皮肤及皮下组织。必要时可自此向一侧或两侧腹股沟延长。一般常用此法。

2.T字弧形切法先从左肩经胸骨上切迹至右肩峰做一弧形横切口,再在该弧线中点向下作直线切口,绕脐左侧至耻骨联合上缘。此术式的优点是可保持颈部外形完整。

3.Y字切开法分别从左右耳后乳突垂直向下切至锁骨上缘,再向前内方切开至胸骨切迹处会合,其余胸腹部切口同直线切法。颈部有损伤(如索沟、扼痕和创伤)时,应采用本术式。

4.倒Y字形切开法先按直线切法切开颈、胸部皮肤至腹上部,再作半圆形切开腹部,将皮瓣向下翻转,腹壁有损伤时可作此术式(见图19-1)。

图19-1 细实线为直线切法

粗虚线为T字弧形切法

粗实线为Y型切法

(二)尸体解剖程序

法医学尸体解剖时应按操作程序进行规范化尸解。但因不同案例的要求不同,其操作程序可有区别。以一般最常用的解剖颅腔、颈部、胸腔、腹腔、盆腔的操作程序为例,大致有以下几种

1.腹腔→盆腔→颈部→胸腔→颅腔此顺序是将腹腔、盆腔内脏器官组织取出后再将颈部和胸腔内脏器官组织一起取出,最后解剖颅腔。比较常用。

2.胸腔→腹腔→盆腔→颅腔→颈部该解剖顺序是将胸、腹、盆腔内脏器官取出,再解剖颅腔取出脑后,使颈部组织的血液流净,然后才剖验颈部,以免在切开颈部软组织时被血液污染,影响颈部损伤、出血的观察。疑是缢、勒及扼颈致死者在采取此尸解程序。

3.颈部→胸腔→腹部→盆腔→颅腔这种操作顺序即可先将颈胸部内脏器官一起取出,再取腹腔、盆腔器官,也可将颈胸部连同腹盆腔内脏器官一起取出,然后在尸体外分别检查,最后解剖颅腔。

上述几种不同尸解程序,在特殊情况下,尸解者可以灵活应用,以不破坏损伤和病变,有利于寻找致死原因和死亡机制、确定致死方式为原则,再如右侧肾上腺的摘取,因它紧贴肝,可在分离肝的同时取出,以免损坏或在肝摘除后难以寻找,同时,还要注意一些应在原位检查的病变和法医学尸体解剖中的某些选择性检验的方法步骤,详见本章第六节。

三、法医病理学尸体解剖方法与内脏器官取出与检查

解剖术式有多种,但在一般情况下以各内脏器官联合取出法优点较多:①能保持各内脏器官联系,便于观察其相互关系;②保持各内脏器官血管联系,便于检查病变与血管病变的关系;③按系统将各内脏器官联合取出,便于教学讲解。

(一)暴露胸腹腔

胸腹腔一般的观察自下颌下缘正中开始,沿胸、腹正中线,绕脐左至耻骨联合部作直线形切开。分离胸壁皮肤及皮下组织,向左右外翻。切开腹壁皮肤及皮下组织时,注意腹壁脂肪层厚度(通常约1.5cm)、颜色、肌肉性状、颜色。然后以有钩镊子夹住腹膜向上提起,用小刀割破一孔,从孔中伸入左手的食指与中指,略向上提,以剪刀沿两指之间剪开腹膜。切断连于胸壁下缘的肌肉,暴露腹腔,注意腹腔内有无异常气味,腹腔内有无腹水、积血,大网膜情况及各内脏器官位置是否正常。大网膜在正常时呈灰白色,菲薄而透明,仅含少许成条的脂肪组织。查大网膜时要注意大网膜的颜色的位置、颜色、形状、有无脂肪坏死灶或肿瘤转移灶。当腹腔器官有损伤或炎症时,大网膜可向病灶部位移动,并与之粘连甚至形成包块所以有人称大网膜为“腹腔内的警察”。

检查肝、脾、胰等器官时,要注意肝右叶前缘是否超出肋缘,左叶前缘超出剑突下多少厘米;脾的前端是否超出肋缘,脾被膜是否皱缩。沿胃大弯剪去大网膜并将胃向上翻转暴露胰腺,检查胰腺周围脂肪组织有无坏死,胰被膜是否出血。注意膀胱的充盈度,其顶端是否已超出耻骨联合上方。因为一般人在临睡前有

排尿的习惯,从膀胱内残余尿的多少可以粗略估计该人于上床后多久死亡。胃肠有无胀气,注意各内脏器官之间有无粘连。如为中毒病例,应收集相关内脏器官(胃、膀胱)的内容物以供分析。注意横膈的高度,正常横隔的顶点,右侧为第四肋间(或肋骨),左侧为第五肋间(或肋骨)。

距肋软骨交界处约1cm的软骨上用软骨刀作斜向切断,切开胸锁关节,并用骨剪剪断第一肋骨。然后以左手持胸骨,右手用刀分离连于肋骨上的隔肌、结缔组织,缓缓揭去胸骨,暴露胸腔。注意胸腺大小,胸腺是否已为脂肪组织所代替。观察胸腔各内脏器官的位置及彼此关系,肺及胸壁、横膈或心包膜有无粘连。倘有胸腔积液,应注意两侧积液的量和性状。剪开心包膜,注意心脏的大小、心包积液含量和性状、心包有无粘连。若要取血液供化验或培养,可在此时抽取右心血液。将右肺向前翻转,用剪刀将主动脉及奇静脉分开,即可见胸导管并进行检查。检查后,将肺恢复原位。胸腔中的肺,因血管丰富,能保存毒物异味,在揭去胸骨时即应注意,不要到解剖结束才发现,为时已晚。取下的胸骨,用锯作纵形锯开,观察骨髓情况。

(二)颈部和胸腔器官取出与检查

(1)联合取出法:如胸部为Y形切开,须将胸前已剥离翻之皮瓣,再向上剥离翻转直到下颌弓处,以完全暴露颈部各器官(见图19-2),检查其各器官及血管后,于甲状腺后缘沿上下甲状腺动脉找出两对甲状旁腺取出固定。然后用颈刀自颈部切口插入下颌骨正中插入口腔,紧贴下颌骨内缘向两侧切断口腔底部的软组织,随后一手用有齿钳子自切口伸入口腔内夹住舌壁切断,这样就可与口腔壁及咽壁分离。进而再将气管(连同甲状腺)及食管等与周围组织、脊柱的连系加以分离,直达胸腔入口为止。然后在胸腔入口处或其上切断锁骨下动脉及颈总动脉等。随将口腔及颈部器官连同心肺一起向下拉,使胸腔器官与背部脊柱相连软组织互相分离,直达横膈为止(如胸膜有纤维粘连而不易剥离时,应从胸腔切口将胸膜壁层辖同肺一起剥下)。将上消化道(舌、偏桃体、咽、食管),上呼吸道(喉、气管连同甲状腺,支气管)连同心,肺一起取出。若需与腹腔盆腔内脏器官一起去处,则沿膈肌与胸壁相连处切断隔肌,并从后腹壁分离腹腔和分腔器官组织,即可联合取出全部内脏器官待查。

图19-2第三版图22-2

图19-2 翻转颈部皮瓣,暴露颈部结构

(2)器官分别取出法:即可先取颈部再取胸腔的器官,亦可先取胸腔再取颈部器官。

1)心脏及大血管检查:用左手提起心脏,在各大血管进出心包处剪断主动脉、肺动脉、肺静脉及上下腔静脉(其中主动脉距瓣膜5cm、肺动脉距瓣膜2 cm、上腔静脉距其入口处1cm)后取出心脏。可用电子秤秤心脏重量,心脏大小(可用死者右拳比喻或测量心脏纵长、横宽),心外形(有无改变,左右心有无扩张或延长)。心外膜情况(色,是否平滑、光亮,心外膜下脂肪有无增加)。如疑有空气栓或脂肪栓者,开胸时切断肋骨之位置可稍偏外(见图19-3),并暂不切断第一、二肋骨,以免切断内乳动、静脉。先严密结扎进出心脏这各大血管,取出心脏后置于水面下,剖开右心腔,如有气泡或油滴逸出,为空气和脂肪栓塞之证明。

图19-3第三版图22-3

图19-3 虚线为肋软骨切线

依血流方向剖开心脏(见图19-4)。先剪开上下腔静脉,然后自或心后外侧缘分别剪开右心房,右心耳,检查右心房内有无血栓,卵圆孔是否闭合。探针能否通过,心房内膜及三尖瓣表面有无增厚变形,检查瓣膜口是否狭窄(正常可通过二指),用长刀或肠剪之钝端插入右心室,沿心之右缘(相当于后室间沟)切开三尖瓣口。用长刀或肠剪托于前乳头肌与右心室前壁之间,沿室中隔往上剪开肺动脉。此时右心室完全暴露。然后剪开左右两对肺静脉口,观察左心房上部,再剪开左心耳,检查二尖瓣膜有无增厚变形,有无血栓。然后用长刀插入二尖瓣孔,刀尖突破心尖后,沿左心室左缘从里向外切开,然后沿室间隔前缘向上剪到主动脉口以至主动脉根部,但剪前须将其前之肺动脉稍向左剥离,以免被切断。检查各瓣膜及心内膜情况(各心瓣膜周径、色泽、质地、光滑情况、有无粘连、增厚或短缩,二尖瓣及三尖瓣的腱索有无变细或增粗、短缩;各房室内膜色泽、光滑情况。

冠状动脉之检查:先检查主动脉根部内膜之冠状动脉开口,自左右冠状动脉主干开始,沿冠状动脉主要分支与其纵轴相垂直以0.2cm间距做横切,观察各冠状动脉主要分支情况检查冠状动脉有无硬化、狭窄、闭塞或血栓等。

图19-4第三版图22-4

图19-4 实线箭头示顺血流方向剪开心脏线

2)上消化道舌(粘膜色淡,有无咬痕、有无糜烂、溃疡、白斑、舌苔),咽(粘膜色泽、湿润、有无病变),扁桃体(表、切面情况,有无肿大及炎性渗出物),颌下及舌下腺(有无肿大)。自上而下剪开食管后壁,检查粘膜(色泽、湿润、光滑情况、有无异物、凝血块、粘膜有无损伤、出血、溃疡及静脉曲张),然后用剪刀自下而上把食管分离到喉头。

3)上呼吸道用刀从正中线将舌和喉壁(包括会厌、甲状软骨、环状软骨等)切开,再用剪刀沿气管前面正中线剪开气管及左右支气管及其分支,检查管腔(有无异物、损伤、假膜、扩张、狭窄、粘膜色泽、光滑等情况),气管旁及气管分支处淋巴结(有无肿大、颜色)。

4)甲状腺及甲状旁腺观察其位置、大小、重量、左右两叶形状、色泽、质地、有无肿大。切面色泽,有无结节囊肿(甲状旁腺,必要时才进行检查)。

5)肺脏可以起取出气管、支气管及两肺、亦可在两肺肺门处切断支气管、血管等联系后分别取出左、右肺。观察左、右肺外形、肺膜情况,胸膜是否光滑,有无粘连,再用手摸肺实质有无捻发感,有无硬结、肿块或实变病灶、肺气肿区。切开肺叶之前需秤左、右肺重量。然后将肺摆成如在胸腔内位置状态,肺的外侧凸面向上,然后用脏器刀自肺外侧缘对准肺门作纵切面,一般切两刀(见图19-5)。切左肺时,肺底着解剖者。切右肺时,肺尖向关解剖者。检查各肺切面的色泽、有无硬结、实变、肿块或病灶。压肺切面,有无液体流出;有无内容物自小支气管溢出。检查支气管内有无异物阻塞,有无粘液、溺液及其颜色、性状和数量;粘膜有无损伤和出血及炎性渗出物;支气管壁是否增厚;支气管有无扩张。肺动脉及其分支有无血栓和栓子;肺门淋巴结颜色,是否肿大。

图19-5第三版图22-5

图19-5 纵切肺脏线

(三)腹腔及盆腔内脏器官的取出及检查

腹腔及盆腔脏器的取出可根据不同情况采用不同的方法。常用的有以下几种:①各器官分别取出法:即按一定顺序逐一将各个内脏器官分别取出。其顺序是脾、小肠、大肠、胃、十二指肠、胰肝和胆囊、肾上腺、肾和盆腔内脏器官。

②按系统局部联合取出法:即先分别拆除脾后,将消化系统之肝、胃、肠及肠系膜、大网膜一起取出待检,或将肝、胃、十二指肠联合取出,空肠、回肠与大肠联合取出,再取出泌尿生殖系统器官和直肠。③腹腔盆腔器官联合取出法:即将全部腹腔盆腔脏器一起取出再分别检查。甚或将腹、盆腔器官与颈部、胸腔器官一起取出。

各器官分别取出法如下:

1.脾将大网膜剪离,将胃向上翻后暴露小网膜囊,检查脾血管腔内有无血栓形成,若无血栓,将脾从左肋下拉出后,剪断脾门血管等组织后,取出脾。若有血栓,则将脾与胰、十二指肠和肝一同取出。脾重量、大小、外形(正常形态与切迹是否存在,质地如何)表面颜色、状态(脾被膜是否紧张、平滑或增厚);如有破裂应检查破裂的部位、形状、范围及程度。剖验脾使用脏器刀沿其长轴自外缘向脾门作一切面,再依次作数个平行切面。检查被膜的厚度,切面颜色、状态(红髓色泽、脾滤泡及脾小梁形态变化、脾髓质能否被刀背刮下、有无出血、梗死灶和结节形成)。

2.空肠、回肠及结肠将横结肠向上翻转,并将全部小肠移到尸体右腹外侧,即可找到十二脂肠曲的空肠开始段,在此结扎二线。在二结扎线之间切断肠管。左手执住断口下之空肠,右手执刀沿肠系膜与小肠相连外逐步切断肠系膜,使小肠与肠系膜分离。分离到回肓部时,宜用剪刀沿升结肠将其与腹后壁、腹膜组织分离。在横结肠剪断胃结肠网膜组织。在降结肠亦用剪刀分离其也腹后壁相连之组织到直肠。然后在乙状结肠与直肠交界上5厘米处切断,小肠及结肠即可取出。

新一代测序技术的发展及应用前景

2010年第10期杨晓玲等:新一代测序技术的发展及应用前景 等交叉学科的迅猛发展。 1.1第二代测序——高通量低成本齐头并进以高通量低成本为主要特征的第二代测序,不再需要大肠杆菌进行体内扩增,而是直接通过聚合酶或者连接酶进行体外合成测序¨】。根据其原理又可分为两类:聚合酶合成测序和连接酶合成测序。1.1.1聚合酶合成测序法Roche公司推出的454技术开辟了高通量测序的先河。该技术通量可达Sangcr测序的几百倍,而成本却只有几十分之一,因此一经推出,便受到了国际上基因组学专家的广泛关注。454采用焦磷酸合成测序法HJ,避免了传统测序进行荧光标记以及跑胶等繁琐步骤,同时利用乳胶系统对DNA分子进行扩增,实现了大规模并行测序。截止到2010年4月,已有700多篇文献是采用了454测序技术(http://454.com/publications.and—resources/publications.asp),对该技术是一个极大的肯定。 Illumina公司推出的Solexa遗传分析仪是合成技术的进一步发展与延伸。该技术借助高密度的DNA单分子阵列,使得测序成本和效率均有了较大改善。同时Solexa公司提出的可逆终止子”1也是该技术获得认可的原因之一。与454相比。Solexa拥有更高的通量,更低的成本。虽然片段长度较短仍是主要的技术瓶颈,但是对于已有基因组的物种来说,Solexa理所当然成为第二代测序技术的首选。2008年以来,利用该技术开展的研究大幅度上升,报道文献达400多篇(http://www.illumina.com/systems/genome—analyzer_iix.ilmn)o 1.1.2连接酶合成测序法2007年ABI公司在Church小组拍1研究成果的基础上推出了SOLID测序仪。该技术的创新之处在于双碱基编码…的应用,即每个碱基被阅读两次,因此大大减少了测序带来的错误率,同时可以方便的区分SNP和测序错误。在测序过程中,仪器自动加入4种荧光标记的寡核苷酸探针,探针与引物发生连接反应,通过激发末端的荧光标记识别结合上的碱基类型。目前SOLID3.0测序通量可达20G,而测序片段仅有35—50bp,这使得该技术与Solexa相比,应用范围还不够广泛。ABI公司正加快研发进度,争取在片段长度方面做出重大突破。 DanaherMotion公司推出Polonator¨1测序仪同样也是基于Church小组的研究成果,但是该设备的成本要低很多,同时用户在使用时可以根据自己的研究目的设置不同的测序条件。而CompleteGe—nomics公司推出的DNA纳米阵列与组合探针锚定连接测序法"1则具有更高的容错能力,试剂的消耗也进一步减少,目前已顺利完成3个个体基因组的测序工作。 1.2第三代测序——单分子长片段有望实现第二代测序技术虽然在各方面都有了较大的突破,但是仍然建立在PCR扩增的基础上。为了避免PCR扩增带来的偏差,科学家目前正在研制对DNA单个分子直接测序的第三代测序仪。最具代表性的包括Heliscope单分子测序仪,单分子实时合成测序法,纳米孔测序技术等。 Helicos技术仍然是基于合成测序原理¨…,它采用了一种新的荧光类似物和灵敏的监测系统,能够直接记录到单个碱基的荧光,从而克服了其他方法须同时测数千个相同基因片段以增加信号亮度的缺陷。PacificBioscienees公司研发的单分子实时合成测序法充分利用了DNA聚合酶的特性,可以形象的描述为通过显微镜实时观测DNA聚合酶,并记录DNA合成的整个过程。纳米孔测序技术[11’121则是利用不同碱基在通过纳米小孔时引起的静电感应稍有不同,或者不同碱基通过小孔的能力各有差异,来加以区分不同的碱基信号。 2应用与实践 Kahvejian在2008年的一篇综述中提到¨“:“如果你可以随心所欲地测序,你会开展哪些研究?”。人类基因组计划的完成和近年来高通量测序的兴起,使越来越多的科研工作者认识到,我们对于生物界的认识才刚刚起步。基因图谱的绘制并不意味着所有遗传密码的破解,癌症基因组的开展也没有解决所有的医学难题。DNA变异的模式和进化机制,基因调控网络的结构和相互作用方式,复杂性状及疾病的分子遗传基础等,仍是困扰生物学家和医学家的难题,而高通量测序的广泛应用,也许可以让我们知道的更多。 2.1DNA水平的应用 2.1.1全基因组测序新一代测序技术极大地推

多介质过滤器操作规程

多介质过滤器操作步骤: 1.设备制水: 1.1 正洗(当该过滤器一段时间不用,又投运时,需要进行正洗一下) 开正洗排水阀。 开进水阀。 当出水浊度小于3 度时正洗合格。 1.2 制水 开出水阀。 关正洗排水阀。 开始制水。 系统运行巡检。 2、设备反洗

2.1 排水 关闭进水阀、出水阀。 开上排阀。 开正洗排水阀,观测过滤器视镜,使排水至滤层面10-20cm。 关闭正洗排水阀。 2.2 空气擦洗 启动罗茨风机。 开进气阀。 气擦洗2-3 分钟。 关闭进气阀,关闭罗茨风机。 注:先开风机,再开进气阀;停止时先关进气阀,再停风。否则可能会造成水倒灌而损坏风机。 2.3 反洗 检查反洗水箱是否在高液位。 启动反洗泵。 开反洗进水阀,反洗5-1 2 分钟 2.4 静置 关反洗出水阀。 关反洗进水阀。 关反洗泵。 2.5 正洗 开进水阀门、下排阀。

当出水浊度小于3 度时正洗合格。 关下排阀、进水阀。 设备处于备用状态。 3、设备切换: 当多介质过滤器需要反洗时,备用过滤器依次按“1、设备制水”的序启动投用。原备用过滤器运行正常后,原运行过滤器按“2、设备反洗”的次序进行反洗,最后进入备用状态。 连续运行时间: 系统的设计运行时间12-24 小时,随后应对多介质过滤器进行反洗,并应依据季节不同、水质的变化等调整反洗周期,确保出水浊度小于3 度。当多介质过滤器进出压差达到0.05Mpa 时,应反洗。 反洗流量: 反洗的目的在于使石英砂和无烟煤反向松动,并将滤层上所截留的截留物冲走,达到清洁滤层的作用,通常控制反洗强度控制在10L/m2.s 左右,以颗粒多孔陶瓷不被冲跑为宜。 反洗时间: 反洗时间的长短和填料层的截污量有关。反冲洗时间可根据反洗排水浊度而定。一般情况下反洗浊度应小于3NTU,且时间不少于5 分钟,可根据运行情况进行适当调整。 运行时间:24 小时反洗一次(按实际调整) 反洗时间:约40min/次(包括气洗、正洗,按实际调整) 浊度:进水<20NTU;出水<3NTU

新一代测序法简介

新一代测序法简介 新一代测序方法是一种直接测序法,它既可以分析基因和DNA的组成(定性分析),也可以测定同一类型基因在表达过程中产生的数量(定量分析),以及不同类型基因或DNA 之间的差别所在(交叉对比分析)。自2004年,454测序技术发展以来,已经出现的测序产品超过六种之多。这些产品的技术特点见下表: 产家名称产品技术特点优缺点 化学反应测序方法误读率样品准备高通量程度 Roche (454 Life Science) 焦磷酸标记的链 反应 焦磷酸基 标记 <1% 较复杂,需PCR 中等 Illumina(Solexa)四色可逆终止码合成法1%—3% 较复杂,需PCR 中—高ABI(SOLID) 双色可逆终止码合成法1%—5% 较复杂,需PCR 中—高Helicos Bioscience 单色可逆终止码合成法2%—8% 简单,无需PCR 高—超高Intelligent Biosystm 四色可逆终止码合成法1%—5% 较复杂,需PCR 中—高 Pacific Bioscience 四色焦磷酸基标 记焦磷酸基 标记 3%—8% 简单,无需PCR 高 VisiGen 焦磷酸基标记 FRET 焦磷酸基 标记 3%—8% 简单,无需PCR 高 在这些技术中,从所分析的样本在测序前是否需要扩增,大致可以分为两类,即克隆扩增型和单分子测序型。两种类型在测序技术上区别并不大,但对结果的影响却有不小的差别。主要体现在两个方面:(1)单分子测序更能反应细胞或组织内分子的真实情况,尤其是在需要定量分析的情况下。而克隆扩增型中的PCR反应使得样品中DNA分子的扩增机会并不完全均等,这会对基因表达的定量分析造成影响;(2)单分子测序具有通量更高的优势。克隆扩增使得同一类型的分子数目急剧上升,在提高同类型分在在固相表面出现的几率同时,也降低了不同类型分子出现的机会。 面重点介绍Pacific Biosciences公司推出的Single Molecule Real Time (SMRT?) DNA Sequencing(单分子实时DNA测序)。 首先,在这一测序技术中有主要有两个关键的技术: 一、荧光标记的脱氧核苷酸避免了碱基的空间位阻效应。显微镜现在也无法实现实时看到“单分子”,但是它可以实时记录荧光的强度变化。当荧光标记的脱氧核苷酸被掺入DNA 链的时候,它的荧光就同时能在DNA链上探测到。当它与DNA链形成化学键的时候,它的荧光基团就被DNA聚合酶切除,荧光消失。这种荧光标记的脱氧核苷酸不会影响DNA聚合酶的活性,并且在荧光被切除之后,合成的DNA链和天然的DNA链完全一样; 二、纳米微孔(Zero-mode waveguide (ZMW))。因为在显微镜实时记录DNA链上的荧光的时候,DNA链周围的众多的荧光标记的脱氧核苷酸形成了非常强大的荧光背景,这种强大的荧光背景使单分子的荧光探测成为不可能。Pacific Biosciences公司发明了一种直径只有10nm的纳米孔,单分子的DNA聚合酶被固定在这个孔内。在这么小的孔内,DNA链周围的荧光标记的脱氧核苷酸有限,而且由于A,T,C,G这四种荧光标记的脱氧核苷酸非常快速地从外面进入到孔内又出去,它们形成了非常稳定的背景荧光信号。而当某一种荧光标记的脱氧核苷酸被掺入到DNA链时,这种特定颜色的荧光会持续一小段时间,直到新的化学

过滤岗位安全操作规程

行业资料:________ 过滤岗位安全操作规程 单位:______________________ 部门:______________________ 日期:______年_____月_____日 第1 页共5 页

过滤岗位安全操作规程 1目的 规范操作程序,强化环保意识,提高操作水平。 2适用范围 适用于过滤岗位。 3职责及职责范围 3.1 职责 3.1.1遵守厂纪厂规及上级有关规定。 3.1.2服从班长指挥,认真完成指令性任务。 3.1.3严格执行交接班制度。 3.1.4掌握本岗位的工艺流程、生产原理,不断提高操作技能。 3.1.5增强环境意识,保护生态环境,降低能耗,减少污染物排放量,确保本岗位环境达到环保要求。 3.2 职责范围 3.2.1严格按本操作法规定进行生产过程控制,确保过滤产品质量,加强设备和仪表的维护保养,提高设备和仪表的使用寿命。 3.2.2按照岗位责任区检查各个密封点,及时处理泄漏点。 3.2.3负责本岗位卫生区卫生,垃圾要求分类存放。 4岗位执行标准(略)5工艺操作顺序 5.1准备工作 (1)检查本岗位全部密封点,保证无泄漏或松动现象。 (2)检查本岗位设备的完好性。 (3)检查温度计、温度自动记录仪、压力表、色谱仪等仪表,保 第 2 页共 5 页

证仪表正常。 (4)检查电动设备保证正常运转。 (5)检查蒸汽管道,保证管道畅通。 6应急措施 6.1 停电 蒸馏过程时突然停电,要立即关闭蒸汽阀,打开釜上放空阀,然后打开釜底凝液排放阀;关气相色谱,待色谱冷却后再关蒸气阀门。 6.2 泄漏 6.2.1精馏过程中如出现产品泄漏,应立即紧固,或控制漏点,更换密封垫。如处理无效应立即将产品倒入其它釜中进行蒸馏,再作处理;若发生油气气泄漏,则应先关闭色谱,打开门窗通风,用肥皂水检漏,待色谱冷却后关闭氢油气气阀修理,然后重新开气检漏,正常后开启色谱。 6.2.2如真空系统出现泄漏要立即停止蒸馏处理。 过滤工安全技术操作规程 (1)作业前穿戴好劳动防护用品,上岗后,检查过滤机中心皮带机转(传)动部件、防护罩、护栏等是否完好,一切正常后,与浓缩机岗位、真空泵岗位联系好,方可启动运行。 (2)开机程序(停机相反): 开机时,先开动中心皮带机,检查过滤机周围无人和障碍物后,启 第 3 页共 5 页

新一代DNA测序技术总览

作者:尹银亮、陈会平、毛良伟译来源:生物谷 原文刊登于《分析化学》综述Analytical Chemistry 原文标题:Landscape of Next-Generation Sequencing Technologies 索引信息:https://www.doczj.com/doc/c54942727.html,/10.1021/ac2010857 | Anal. Chem. 2011, 83, 4327–4341 原文作者:Thomas P. Niedringhaus, Denitsa Milanova, Matthew B. Kerby, Michael P. Snyder,and Annelise E. Barro 译者资料: 尹银亮,香港华大基因研发中心有限公司email:stevenyinbio@https://www.doczj.com/doc/c54942727.html, 陈会平,毛良伟,武汉华大基因科技有限公司 【内容】 第二代测序 第二代测序成本 第三代测序技术 单分子测序法 边连接边测序法 边合成边测序法 纳米孔测序技术 蛋白质纳米孔测序法 固态纳米孔测序法 长距离阅读DNA的扩展方法 总结性评论 DNA测序正处在技术上天翻地覆剧变的阵痛之中,其突出特点是,测序通量(测序数据量)的大幅增长,原始数据中每个碱基的测序成本急剧下跌,并伴随着以巨资购买仪器以引进新技术的需求。以前看似高不可攀的奢侈性研究活动(如个人基因组测序,宏基因组学研究,以及对大量重要物种的测序),在短短几年之间,正以急速的步伐而变得越来越切实可行了。本篇综述将集中讨论在第三,第四代测序方法背后的故事:它们所面临的挑战;各种方法的局限性;以及它们带给我们的充满诱惑的前景。 第一代DNA测序技术用的是1975年由桑格(Sanger)和考尔森(Coulson)开创的链终止法或者是1976-1977年由马克西姆(Maxam)和吉尔伯特(Gilbert)发明的化学法(链降解). 在1977年,桑格测定了第一个基因组序列,是噬菌 体X174的,全长5375个碱基。其测序方法和历史过程以前已做过详细回顾。 后来的四色荧光桑格测序法(每一种荧光代表四种碱基中的一种)被用在自动毛细管电泳测序系统中,此系统由应用生物系统有限公司(Applied Biosystems Inc.)推上市场,后来该公司被整合入生命技术公司(Life Technologies)和贝克曼.考尔特公司(Beckman Coulter inc.)(见表1)。发表于2001年的第一个人类基因组

过滤岗位 安全作业指导书 - 制度大全

过滤岗位安全作业指导书-制度大全 过滤岗位安全作业指导书之相关制度和职责,一、岗位名称:过滤机二、作业人员数:3人三、岗位性质:一般操作四、工作范围:过滤机、精矿皮带、立式泵、回流泵;五、操作设备与工器具:1#、2#、3#过滤机、1#、2#、3#精矿皮带、立式泵、回流... 一、岗位名称:过滤机二、作业人员数:3人三、岗位性质:一般操作四、工作范围:过滤机、精矿皮带、立式泵、回流泵;五、操作设备与工器具:1#、2#、3#过滤机、1#、2#、3#精矿皮带、立式泵、回流泵;铁锹2把、大扫把2把、小扫把1把、长探仓钎钎2根、短捅仓钎2根、长把铲子1根六、工作内容:过滤机布矿均匀、精矿皮带布矿均匀、立式泵、回流泵上矿均匀、所属设备的操作、点检、润滑与维护;卫生清扫与维护七、安全作业标准:岗位过滤机防护器具劳保服、防砸鞋、手套、防尘口罩作业人员3人使用工具铁锹2把、大扫把2把、小扫把1把、长探仓钎钎2根、短捅仓钎2根、长把铲子1根作业名称作业内容存在危险源可能造成的伤害安全作业标准设备点检 1.按规定穿戴好本岗位劳动保护用品,工作服的上衣扣子必须从下到上扣好,不得敞胸露背2.冬季不得穿下摆过长的防寒服或棉衣3.确认各通道畅通无杂物;4、冬季生产时粉尘较大,点检时多加小心 1.由于工作服不系扣或上衣下摆过长被皮带转动的部位带入2.通道内堆放杂物或存有积料;3、冬季生产蒸汽大,点检不小心; 机械伤害、跌伤、其它伤害1.劳动保护用品穿戴符合本岗位规定,工作服的扣子要全部扣上;2、把通道内的过道清理干净;3、冬季点检加小心; 班中检查布料1、劳保用品穿戴齐全;2、确认探仓工具为合格;3、作业时确认脚下我杂物,一只手必须抓牢防护栏,另一只手抓牢探钎;1、劳保穿戴不齐全2、所用工具为不合格;3、作业时手不抓栏杆或抓不牢探钎;刺伤手部、高空坠落、损坏设备1、劳保用品穿戴齐全;2、确认探仓工具为合格;3、作业时确认脚下我杂物,一只手必须抓牢防护栏,另一只手抓牢探钎;清理皮带下方积料1、按照要求穿戴好劳保用品,佩戴好防护器具;2、确认工具合格; 3用铁锹把料铲到皮带上;1、劳保穿戴不齐全;2、所用工具为不合格;3、钯料时身体距皮带机太近;4、铲料时铁锹被带入运转的皮带机;刺伤手部、机械伤害、物体打击、矽肺病1、穿戴好劳保用品,佩戴好防护器具;2、检查确认工具合格;3、作业时身体距运转部位150mm以外;4、一旦铁锹被卷入皮带机,必须立即撒手,禁止强拉硬拽;清扫卫生1、清扫卫生前检查好工具合格2、清扫梯子卫生时,一手要抓好扶手小心跌落3、清理卫生时要配好防尘口罩1、由于工具不合格而造成作业者手刺伤2、清扫楼梯卫生不抓扶手造成跌伤3、清扫卫生时不佩戴防尘口罩工具刺伤、高空坠落、矽肺病1、作业前确认工具合格2、打扫楼梯卫生时一手抓紧扶手3、清扫卫生时必须佩戴好防尘口罩更换托辊1、正常开机状态下:1)先将所需更换的新托辊备好并准备2米的撬棍1根;2)两人或两人以上监护作业;3)联系配电室将皮带机开关打至零位,再卡掉该皮带机两道事故开关,并挂警示牌;4)作业时人员要配合好,防止挤伤事故发生;5)作业完毕后,将工具和旧托辊移至一旁,待开机后按要求处理;合上事故开关并联系配电室,将警示牌取掉并合上开关;2、停机状态下:按要求备好新托辊和工具后按照“正常开机状态下”的2、3、4条进行作业;1、所使用的工具不符合规定;2、单人作业3、开机状态下作业;4、不挂警示牌或不卡事故开关;5、作业时配合不好;机械伤害、碰伤、挤伤、其他伤害1、正常开机状态下:1)先将所需更换的新托辊备好并准备2米的撬棍1根;2)两人或两人以上监护作业;3)联系配电室将皮带机开关打至零位,再卡掉该皮带机两道事故开关,并挂警示牌;4)作业时人员要配合好,防止挤伤事故发生;5)作业完毕后,将工具和旧托辊移至一旁,待开机后按要求处理;合上事故开关并联系配电室,将警示牌取掉并

过滤岗位安全作业指导书(标准版)

( 安全技术 ) 单位:_________________________ 姓名:_________________________ 日期:_________________________ 精品文档 / Word文档 / 文字可改 过滤岗位安全作业指导书(标准 版) Technical safety means that the pursuit of technology should also include ensuring that people make mistakes

过滤岗位安全作业指导书(标准版) 一、岗位名称:过滤机 二、作业人员数:3人 三、岗位性质:一般操作 四、工作范围:过滤机、精矿皮带、立式泵、回流泵; 五、操作设备与工器具:1#、2#、3#过滤机、1#、2#、3#精矿皮带、立式泵、回流泵;铁锹2把、大扫把2把、小扫把1把、长探仓钎钎2根、短捅仓钎2根、长把铲子1根 六、工作内容:过滤机布矿均匀、精矿皮带布矿均匀、立式泵、回流泵上矿均匀、所属设备的操作、点检、润滑与维护;卫生清扫与维护 七、安全作业标准: 岗位

过滤机 防护器具 劳保服、防砸鞋、手套、防尘口罩 作业人员 3人 使用工具 铁锹2把、大扫把2把、小扫把1把、长探仓钎钎2根、短捅仓钎2根、长把铲子1根 作业名称 作业内容 存在危险源 可能造成的伤害 安全作业标准 设备点检 1.按规定穿戴好本岗位劳动保护用品,工作服的上衣扣子必须从下到上扣好,不得敞胸露背 2.冬季不得穿下摆过长的防寒服或棉

衣3.确认各通道畅通无杂物;4、冬季生产时粉尘较大,点检时多加小心 1.由于工作服不系扣或上衣下摆过长被皮带转动的部位带入 2.通道内堆放杂物或存有积料;3、冬季生产蒸汽大,点检不小心; 机械伤害、跌伤、其它伤害 1.劳动保护用品穿戴符合本岗位规定,工作服的扣子要全部扣上;2、把通道内的过道清理干净;3、冬季点检加小心; 班中检查布料 1、劳保用品穿戴齐全; 2、确认探仓工具为合格; 3、作业时确认脚下我杂物,一只手必须抓牢防护栏,另一只手抓牢探钎; 1、劳保穿戴不齐全 2、所用工具为不合格; 3、作业时手不抓栏杆或抓不牢探钎; 刺伤手部、高空坠落、损坏设备 1、劳保用品穿戴齐全; 2、确认探仓工具为合格; 3、作业时确认脚下我杂物,一只手必须抓牢防护栏,另一只手抓牢探钎; 清理皮带下方积料

下一代测序技术

下一代测序技术 摘要:DNA测序技术对生物学的发展有着最根本的意义。Sanger法测序经过了30年的应用和发展,而在过去三年中,以454, solexa, SOLiD为代表的高通量测序平台已经大幅度降低了测序成本,提高了测序速度,成为基因组测序市场的主流。在此基础上,各种下一代测序技术正在快速研发,将使基因组测序和重测序的通量和成本更加平民化,为基因组学、遗传学、生物医学和健康科学等领域的发展创造更加广阔的前景。本文将对所有新的测序技术的原理、优势和应用进行总结和展望。 1977年Maxim、Gilbert发明的化学降解法测序技术和Sanger发明的双脱氧末端终止法测序技术不仅为他们赢得了诺贝尔奖,也使得从DNA序列层面研究分子遗传学成为可能。特别是后者,从最开始的凝胶电泳到越来越高通量的毛细管电泳,从开始的手工操作到越来越多自动测序仪的出现,各种改进的Sanger 测序技术统治了DNA测序领域三十年,至今仍在长片段测序,大片段文库测序方面有广泛的应用。人类基因组计划(HGP)的完成就是靠Sanger测序法。 在耗费了庞大成本的人类基因组计划宣布完成之后,越来越多的物种基因组测序工作对测序成本和通量提出了更高的要求,新一代测序技术(也被称为第二代测序技术)开始登上历史舞台。2005年454 life science公司率先推出了焦磷酸测序技术,使测序成本较Sanger法降低了100倍,速度快了(提高)100倍,人类基因组测序逐步进入了100,000美元时代。如今,454 FLX测序仪(Roche Applied Science)、基于“边合成边测序”的Solexa测序仪(Illumina Inc.)和使用“边连接边测序”的SOLiD测序仪(Applied Biosystems)已经成为基因组测序市场的主流机型。除此之外,2008年一年内又有HeliScope单分子测序仪(Helicos)和Polonator(Dover/Harvard)两种测序机型商品化。 在NHGRI(美国人类基因组研究中心)的支持和推动下,未来几年内测序成本将在目前基础上再下降100倍,最终使个人基因组测序成本降至1000美元,人类将革命性的进入个人基因组时代。高通量和低成本的测序技术将进入到普通实验室,基因组测序的简单化将使分子生物学飞跃发展,个人基因组测序产业化也将对健康医学等领域产生革命性的影响。本文将首先对目前已经商品化的新一代测序技术(454、Solexa、SOLiD、HeliScope)做一介绍和比较,再对正在研发中的各种下一代测序方法(第三代测序技术)的原理和应用做一详细的介绍和展望。 1. Roche 454测序技术 2005年454生命科学公司在《自然》杂志发表论文,介绍了一种区别于传统Sanger法的全新高通量测序方法,将测序成本降低了100倍以上,开创了第二代测序技术的先河,454测序仪也成为最先商品化的第二代测序仪。正是在此基础上,其它如Solexa、SOLiD等第二代测序仪才相继问世。454测序技术的原理在于首先使用乳液PCR(emulsion PCR)技术(图一a)扩增已经连接上接头的基因组文库片段,扩增子结合在28 μm的磁珠表面,将乳液破坏后用变性剂处理磁珠,再将含有扩增子的磁珠富集到芯片表面,用测序引物进行测序。在测序过程中,454使用了一种“焦磷酸测序技术”(Pyrosequencing),即在合成DNA 互补链的过程中,每加入一种单核苷酸(dNTP),如与模板链配对结合,就会释放出一个焦磷酸,与底物腺苷-5’-磷酸硫酸(APS)在A TP硫酸化酶作用下合成A TP,与荧光素(Luciferin)一起在荧光素酶(Luciferase)的作用下,会发出一个光信号,由芯片背后连接的电荷耦合装置(CCD,Charge Coupled Device)捕捉。454测序技术合成DNA链使用的是普通单核苷酸,没有任何标记,合成中也没有切割基团等生化反应,因此读长可以达到300-400bp。但没有阻断(block)和去阻断(de-block)过程也意味着对连续重复单核苷酸的阅读只能根据信号强度来判断,容易对其中插入和缺失碱基阅读错误。454测序技术相比较其他第二代测序技术如Solexa和SOLiD, 在读长上有着巨大的优势,但是目前成本要略高。总体而言,高读长使得454技术比较利于De Novo拼接和测序。

薄膜过滤器操作规程

薄膜过滤器操作规程 一、使用说明 实验准备:取硅胶管一根,将一端套在过滤系统的出液口,另一端套在收集瓶的进液口(不锈嘴);再取另一根硅胶管,一端套在收集瓶的抽气端(白色塑料嘴),另一端 通过不锈钢宝塔接头与真空泵相连 (1)试验前,应先将滤杯清洗干净、晾干、取滤膜(50mm)浸泡到纯化水里3~5min,滤杯及滤膜支撑网消毒备用(可采用火焰灭菌器快速消毒)。 (2)用镊子夹住滤膜放在抽滤系统的滤网上并盖L过滤杯 (3)将其供试品注入过滤杯内,然后启动真空泵,再打开相应阀门,实施过滤集菌。 (4)供试品过滤集菌结束后(滤膜上没有水珠),关闭真空泵开关,用无菌镊子取出滤膜, (5)将滤膜贴到事先准备好的培养基上,菌面朝上,平贴,不得有气泡。相应的液体培养基注入过滤杯内,培养基覆盖滤膜表面即可。 (6)盖上盖I了放置在生化培养箱及恒温培养箱中,按规定温度和时间进行培养,逐日观察、计数。 (7)仪器jF常性检测:取600m1—1200ml纯化水,每个滤杯注入l00ml纯化水,接通真空泵电源,再分别打开相对应的阀门,实施抽滤(抽滤时间1~3min 为正常范围),根据速度将准备好的纯化水加入滤杯中,纯水顺畅地从排液口流出,即视为仪器可正常工作,如果过滤速度过慢或无法过滤,请检查: A.管路连接是否漏气,滤杯密封性是否良好; B.检品是否含有较多不溶性的颗粒,悬浮物等; C.检查不锈钢网片是否堵塞,不锈钢底座出液孔是否堵塞。若属其他原因,请与厂 家联系。 (8)清洗:仪器长期没有使用,再次使用前仪器管路应对管路进行消毒,可采用以下消毒剂:(1)乙醇(2)新洁尔灭(3)甲醛(4)次氯酸溶液.消毒方法:准备l00ml

新一代高通量测序技术SOLiD简介

新一代高通量测序技术SOLiD简介 目前市场上有四种高通量测序仪,分别是Solexa,454 (GS-FLX),SOLiD和Polonator。根据测序原理,它们可以被分为两大类:使用合成法测序(Sequencing by Synthesis)的Solexa和454,及使用连接法测序(Sequencing by Ligation)的Polonator和SOLiD。这些高通量测序仪的共同点是不需要大肠杆菌系统进行DNA模板扩增,且测序所得序列较短:其中的454序列最长,为200~300个碱基,其余三种序列都只有几十个碱基。测序原理及序列长度的差异决定了各种高通量测序仪具有不同的应用领域。这就要求我们在熟悉各种高通量测序仪内在技术特点的基础上进行选择。 基因组所引进的SOLiD (Sequencing by Oligonucleotide Ligation and Detection)是ABI(Applied Biosystems)公司生产的高通量测序仪。目前这台SOLiD运行稳定,SOLiD实验及数据分析小组也可以为大家提供专业的技术服务。所以接下来的关键是如何把SOLiD测序仪应用到符合其技术特点的科研项目中。本短文将简单介绍SOLiD测序流程,双碱基编码原理及数据分析原理,以帮助大家了解SOLiD测序仪的技术特点和应用范围。 1.SOLiD关键技术及其原理 SOLiD使用连接法测序获得基于“双碱基编码原理”的SOLiD颜色编码序列,随后的数据分析比较原始颜色序列与转换成颜色编码的reference序列,把SOLiD颜色序列定位到reference上,同时校正测序错误,并可结合原始颜色序列的质量信息发现潜在SNP位点。 1.1. SOLiD文库构建 使用SOLiD测序时,可根据实际需要,制备片段文库(fragment library)或末端配对文库(mate-paired library)。简单地说,制备片段文库就是在短DNA片段(60~110 bp)两端加上SOLiD 接头(P1、P2 adapter)。而制备末端配对文库,先通过DNA环化、Ecop15I酶切等步骤截取长DNA片段(600bp到10kb)两末端各25 bp进行连接,然后在该连接产物两端加上SOLiD接头。两种文库的最终产物都是两端分别带有P1、P2 adapter的DNA双链,插入片段及测序接头总长为120~180 bp。 1.2:油包水PCR 我们知道,文库制备得到大量末端带P1、P2 adapter但内部插入序列不同的DNA双链模板。和普通PCR一样,油包水PCR也是在水溶液进行反应,该水相含PCR所需试剂,DNA模板及可分别与P1、P2 adapter结合的P1、P2 PCR引物。但与普通PCR不同的是,P1引物固定在P1磁珠球形表面(SOLiD将这种表面固定着大量P1引物的磁珠称为P1磁珠)。PCR反应过程中磁珠表面的P1引物可以和变性模板的P1 adapter负链结合,引导模板合成,这样一来,P1引物引导合成的DNA链也就被固定到P1磁珠表面了。 油包水PCR最大的特点是可以形成数目庞大的独立反应空间以进行DNA扩增。其关键技术是“注水到油”,基本过程是在PCR反应前,将包含PCR所有反应成分的水溶液注入到高速旋转的矿物油表面,水溶液瞬间形成无数个被矿物油包裹的小水滴。这些小水滴就构成了独立的PCR 反应空间。理想状态下,每个小水滴只含一个DNA模板和一个P1磁珠,由于水相中的P2引物和磁珠表面的P1引物所介导的PCR反应,这个DNA模板的拷贝数量呈指数级增加,PCR反应结束后,P1磁珠表面就固定有拷贝数目巨大的同来源DNA模板扩增产物。A BI公司提供的SOLiD 实验手册已经把小水滴体积及水相中DNA模板和磁珠的个数比等重要参数进行了技术优化和流程固定,尽可能提高“优质小水滴”(水滴中只含一个DNA模板一个P1磁珠)的数量,为后续SOLiD 测序提供只含有一种DNA模板扩增产物的高质量P1磁珠。

过滤机安全技术操作规程示范文本

过滤机安全技术操作规程 示范文本 In The Actual Work Production Management, In Order To Ensure The Smooth Progress Of The Process, And Consider The Relationship Between Each Link, The Specific Requirements Of Each Link To Achieve Risk Control And Planning 某某管理中心 XX年XX月

过滤机安全技术操作规程示范文本使用指引:此操作规程资料应用在实际工作生产管理中为了保障过程顺利推进,同时考虑各个环节之间的关系,每个环节实现的具体要求而进行的风险控制与规划,并将危害降低到最小,文档经过下载可进行自定义修改,请根据实际需求进行调整与使用。 一、严格执行开停车顺序,加强上下工序的联系。 二、工作前检查安全设施,必须完整牢固,不得随意 拆除和损坏。严禁靠坐栏杆。 三、上下阶梯时,脚要站稳,手要把牢。 四、严禁从皮带上或设备转动部位跨越。 五、过滤机发生故障,需修理时必须停车,执行挂牌 断电拉闸制度,然后进行处理。 六、皮带机起动或处理压皮带时,不得使用在下层皮 带压杠子或手推、脚踏的方法处理。 七、皮带跑偏时,禁止用铁锹、铁棍清除转动中的皮 带滚筒上的粘矿。 八、不准用湿手起动设备。

九、皮带下的托辊不转时,严禁在皮带转动时用手搬或用铁棍撬。 十、开车时必须先通知周围人员才能起车。 请在此位置输入品牌名/标语/slogan Please Enter The Brand Name / Slogan / Slogan In This Position, Such As Foonsion

新一代测序技术组装拼接软件velvet使用简介

新一代测序技术组装拼接软件velvet使用简介 目前用于新一代的测序的主要仪器有Illumina/Solexa的Genome Analyzer、ABI的Solid和Roche的454,它们都能高通量的测序,产生大量的测序结果,接下来就要对序列进行拼接,用于拼接的软件也有很多,比如velvet、soap、abyss、maq等,454的还有专门的newbler。平时用velvet比较多,就简单介绍一下。 velvet对短序列的拼接效果比较好,所以多用于对Illumina等产生的短序列片段进行组装拼接。下面以Illumina的GAII产生的结果为例进行说明。 一、单端测序 单端测序可以直接对fastq格式的原始文件进行处理,首先是用velveth 命令建立hash表子集 输入./velveth会出来使用帮助: Usage: ./velveth directory hash_length {[-file_format][-read_type] filename} [options] directory : directory name for output files hash_length : odd integer (if even, it will be decremented) <= 75 (if above, will be reduced) filename : path to sequence file or – for standard input File format options: -fasta -fastq -fasta.gz -fastq.gz -eland

过滤器安全操作规程

过滤器安全操作规程 1.开机顺序: 1.1确保在开机前已经认真阅读本过滤器操作指导。 1.2检查过滤芯的门是否锁紧(从下往上,分为三级)。正常状态下,此门勿需打开,只有在更换滤芯时,维修组 负责打开进行更换。 1.3检查过滤器两侧的吸气主管道的阀门的开启状态(此处阀门的开启度,厂家已经设定好,勿动)。 1.4确认无误后,启动过滤器,按下绿色按钮,即启动,可听到过滤器上方风机启动的声音。 1.5过滤器正面有“FAN”旋钮,把旋钮拨到“AUTO”及“REMOTE”均可,设备开始正常工作。同时把其下面的旋 钮“PUMP”,拨到“AUTO”侧,表示过滤器自动排油,相反方向,则表明为手动排油 (仅适用“Asmoke40机型)。 1.6启动后30秒,查看电子压力表显示屏,在显示屏右侧有指示灯,从左往右分别是“绿灯-黄灯-红灯”。 绿灯:表示设备工作正常 黄灯:表示过滤器较脏,建议更换过滤芯。 红灯:表示必须立刻更换过滤芯。 注:发现黄灯亮起时,尽快联系维修,购买滤芯更换。 2.各生产设备的管道阀门 2.1过滤器运行后,根据各生产设备的订单情况,及时关闭机器上方的主阀门。设备工作时,把进入设备的管 道主阀门打开;设备不工作时,把进入设备的管道主阀门关闭,避免造成风量浪费。 2.2各设备的阀门开启度,根据标牌提示,调整其开启状态。 3.下班后,直接按下过滤器侧方的红色按钮,确认过滤器停机后即可。 下班后务必关掉过滤器,避免能源浪费。 4.注意事项: ●定期查看排油情况,在自动状态下,过滤器定期排油,操作者随时查看油桶内的油量,并更换空桶。--------适 用A smoke40. ●定期查看排油情况,在自动状态下,过滤器定期排油,操作者随时查看油桶内的油量,若过滤器右侧的油桶上 方的红色浮子上升到顶部,表明油桶内油已经满了,及时倒掉桶内的油----------适用A smoke20. ●过滤器出现异常情况,请尽快联系维修组。 Warning:This document is controlled, original copy is archived in the File Rom of BFC, and a pdf copy is accessible and viewed on the PC on BFC interna l server. All paper copy(except the original one) without red chop of “controlled”, may not the latest revision. 警告:本文件为受控文件,原件保存在BFC的资料室,通过个人办公电脑可以在在BFC内网服务器上查阅到本文件的pdf有效版本。所有未加盖红色“受控”印章的纸质文件(除原件)不能确保为最新版本。

一代至四代测序技术详细讲解

一、我们将如何应对海量的基因信息 新一代测序技术带给人们大量遗传信息的同时,却成为限制其广泛应用的一个障碍。 1980年,英国生物化学家Frederick Sanger与美国生物化学家Walter Gilbert建立了DNA测序技术并获得诺贝尔化学奖,至今已有近三十年了。在这三十年,DNA测序技术取得了令人瞩目的进展。目前已进入市场的循环阵列测序平台采用的是与Sanger生物化学测序方法完全不同的原理。在过去几年,应用极为广泛的毛细管电泳测序法采用的则是多线并行阵列格式,它运用尖端的荧光成像技术进行碱基识别。上述各类新技术为生物学研究领域开辟了新的视角,也使实验研究达到一个新的水平。学界对开发这类新技术的兴趣持续高涨,与此同时,人们却发现这些技术存在一定的不足——大量信息数据的产生限制了技术更加广泛的应用,并降低了其市场价值。 过去,研究人员使用Applied Biosystems(ABI)公司的3730XL毛细管电泳测序仪进行基因分析,每年至多能完成六千万碱基的测序量。随着测序技术日新月异的发展,这种情况已经成为历史。在2005年刚刚开始进行新一代测序技术开发时,Roche公司和454公司联合开发的焦磷酸测序仪的分析速度就已经达到了上述提及的ABI仪器速度的50倍之上。也就是从那时起,因基因数据过多而产生的问题凸显了出来,而且这个问题随着其他制造商开发出更多更快的测序仪而愈加严重。举个例子,ABI的新一代测序平台SOLiD(supported oligonucleotide ligation and detection)单次运行,便可以分析6Gb的碱基序列;而Roche/454测序仪单次运行可以将上述结果转换成12-15个千兆字节(gigabytes)的数据信息;Illumina Genome Analyzer(GAII)测序系统仅在两个小时的运行时间里,就得到10兆兆字节(terabytes)的信息。尽管对于像Applied Biosystems这样的制造商而言,可以为用户提供高达11.25TB的存储量,但对于多数实验室所具有的信息管理系统来说,规模如此庞大的数据信息,就好像是迎面而来的洪水,让人感到难以控制。 过量信息所带来的一个副作用在于,用户无法将初始图像数据进行分类存档,而必须交给相关公司,利用软件对数据进行读取,然后才能对数据进行保存。对于大多数研究人员来说,像这样在每次实验后对原始数据进行处理的方式既繁琐又不经济。与花费上万美元对每一段序列进行备份分析相比,对每一次测序结果进行重新测定显然是一个更简单、更便宜的选择。测序仪制造商称,对原始数据再次进行分析并不能得到更多新的信息。但是,对于454测序仪而言,用户至少可以通过更新的软件从原始数据得到质量更高的序列,从而提高碱基识别分辨率,减少误差。 除数据处理问题之外,研究人员还需要拥有一个足够强大的计算机平台,以便将来自多个测序技术的短小基因片段进行组合,形成基因组外显子。目前问题在于,测序仪生产商仅仅提供用于某些特定基因信息分析的软件,如靶标重测序、基因表达分析、染色质免疫沉淀反应或基因组从头测序等,而并未提供任何其它类型的下游生物学信息分析软件。研究界越来越熟悉这些测序平台对循证生物学的巨大潜力,这也就产生了新的研究问题以及全新类型的试验方法,而这单凭依赖目前的生物学信息是无法满足的。 从这个角度看,SOLiD软件研发公司(https://www.doczj.com/doc/c54942727.html,/gf/)于今年七月刚刚兼并了两个新的软件公司,这一举动无疑朝正确的方向迈进了一步。该公司在开放源码许可证下开发软件分析工具,目的就是为了给生物信息学领域提供支持,并为其开发新的算法。 对用户而言,如果能够将数据格式与不同测序平台获得的结果进行比较所得的统计数字进行标准化,无疑具有重大的意义。特别是由于目前以测序平台为核心的市场竞争激烈,因此每个生产商都努力提供最好的数据结果。

陶瓷过滤工安全操作规程示范文本

陶瓷过滤工安全操作规程 示范文本 In The Actual Work Production Management, In Order To Ensure The Smooth Progress Of The Process, And Consider The Relationship Between Each Link, The Specific Requirements Of Each Link To Achieve Risk Control And Planning 某某管理中心 XX年XX月

陶瓷过滤工安全操作规程示范文本使用指引:此操作规程资料应用在实际工作生产管理中为了保障过程顺利推进,同时考虑各个环节之间的关系,每个环节实现的具体要求而进行的风险控制与规划,并将危害降低到最小,文档经过下载可进行自定义修改,请根据实际需求进行调整与使用。 一、作业前准备:开车前首先检查风压(0.5- 0.6MPa)、真空泵的冷却水、槽体内有无大块异物、各运 转部件上是否有松散杂物及障碍物、各手动阀门是否开启 灵活、陶瓷板状况是否良好。 二、开车运行状态: 1. 确认正常后,将电气控制柜各支路断路器全部合 上,通电开车,此时主轴和搅拌运行,槽内应有物料进 入,当矿物料到达一定高位时,真空泵和循环泵开始工 作,全车处于正常运行中。 2. 观察冲洗压力是否正常(0.085-0.1MPa),如不在 要求范围中,应及时调整或更换滤芯,同时观察真空压力 (-0.09MPa以上),如达不到指标,请维修人员检查泄漏

点。 3. 运行中,主轴转连和搅拌转连随矿料浓度大小进行调整,浓度高调快,浓度低调慢,一般情况转连调整适中。 4. 当设备运行7-8小时后,要对陶瓷板进行联合清洗,清洗操作前,首先将砂泵启动,然后停车。待槽体内矿料全部流入回收池后,用槽洗水将槽体内剩余矿料全部冲净,方能清洗,随后等回收池内矿料抽完,将砂泵停止。 三、清理状态: 1. 清洗时,管道泵主轴和计量泵工作,当槽体内液位到一定高度时,超声波电源开始工作,其它设备处于停止状态。 2. 在清洗过程中,除对反冲洗压力进行调整(0.085-0.1MPa之间)外,还需观察超声波电流(在6-7A之间)

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