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分子生物学重点整理

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第一章绪论

DNA测序谁发明?

1975-1977年,Sanger.Masam.Gilbert发明了DNA序列测定技术.

1 细胞学说的奠基人是谁?

德国植物学家Schleiden和德国动物学家Schwann,证明动植物都是由细胞组成。

2 英国科学家Griffith证明了什么?

肺炎链球菌感染实验证明了DNA是遗传物质

3 Hershy和Chase通过噬菌体侵染细菌实验证明了什么?

分别用15S和32P标记噬菌体蛋白质外壳和核酸,感染未百哦机细菌,观察子代是否有标记。证实噬菌体DNA侵染细菌的实验流程,证明侵染过程中发挥作用的是DNA不是蛋白质(遗传物质是DNA而非蛋白质)。

4 1965年Jacob和 Monod提出了什么重要理论?

提出并证实了操纵子作为调节细菌细胞代谢的分子机制(与Iwoff分享了诺贝尔生理医学奖),并且首次提出存在一种与染色体脱氧核糖核酸序列互补,能将编码在染色体DNA 上的遗传信息带到蛋白质合成场所(细胞质)并翻译产生蛋白质的信使核糖核酸,即mRNA分子。

5 Crick和 Watson为什么获得了诺贝尔生理学奖?

在1953年提出DNA的反向平行双螺旋模型。(与通过X射线衍射证实该结构的Wilkins 共享诺贝尔生理医学奖。

分子生物学的分科:

功能基因学

蛋白质组学

生物信息学

DNA三种构型的异同及其主要存在方式(填空选择)

右手螺旋A-DNA和B—DNA

左手螺旋有Z-DNA

B-DNA: DNA的水溶液丰富, A-T丰富

DNA的双链中一条被相应的RNA所取代,就会形成A-DNA。如,在杂交分子或DNA处于转录状态时。

A-DNA和B-DNA两者的糖环的折叠方式不同.A为C3内式,B为C2内式.AB均为反式构象.不同:A碱基对倾斜角大,深窄的大沟,宽浅的小沟,螺旋体宽而短.B型适中.Z型细长,大沟平坦,核苷酸顺反相间,螺旋骨架Z字形. B-DNA中的多聚G-C区易形成左手螺旋DNA,即Z-DNA。其中B-DNA是最常见的DNA构象,而A-DNA和Z-DNA似乎不具有生物活性。

糖苷酸构象:A反式 B反式 Z:C.T反式 G顺式

大沟:A深窄 B深宽 Z平坦

小沟:A浅宽 B深窄 Z深窄

每圈碱基数:A 11 B 10.4 Z 12

轴心与碱基对:A不穿过碱基对 B穿过碱基对 Z不穿过碱基对

动态变化:

1.B向A转.增加盐浓度(Nacl)可使B型转向A型.当DNA为钠盐时,存在ABC,为锂盐时,存在BC.

2.Z中必须有G,且嘌呤与胞嘧啶减交替排列.

3.B向Z转.DNA的甲基化,使大沟表面暴露的C形成5-甲基胞嘧啶,即可导致B转向Z.

4.B向A转.B型在环境水的活度降低(加水,加入乙醇或盐)时,转向A型.

5.B向Z转.在阳离子较多的环境中,交替的GC区段一般处于B型,而在C被甲基化之后转Z型,甲基化导致B型的亲水区转成Z型的疏水区.

6.B向Z转.某些Z型DNA结合蛋白能作为一种特异识别信号,使B转Z.

DNA模型常见: 双螺旋模型三股螺旋(三链结构) 四链结构(了解)—结构单元为鸟嘌呤四联体

双螺旋模型特征

DNA的二级结构:是指两条多核苷酸链反向平行盘绕所形成的双螺旋结构。

基本特点:

(1)是由两条反向平行的脱氧核苷酸链盘绕所形成的;

(2)DNA分子中的脱氧核糖与磷酸交替连接并排列在外侧,构成基本骨架,碱基排列在内侧;

(3)两条链上的碱基之间通过氢键结合形成碱基对,它们之间的规律是嘌呤与嘌呤配对;嘧啶与嘧啶配对。

当双链核酸的一条链为全嘌呤核苷酸链,另一条链为全嘧啶核苷酸链时,DNA分子能转化为三链结构.

第三股链可以来自分子间或者分子内.

(1)分子内的DNA三螺旋结构通常是在一条自身回折的寡嘧啶核苷酸与寡嘌呤核苷酸双螺旋的大沟内结

合了第三股寡核苷酸链.

第三股链的碱基与原双螺旋Watson-Crick碱基对中的嘌呤碱形成Hoogsteen配对.即T·A*T

T·A*A C·G*G C·G*G+ (C质子化)

且第三股链与寡嘌呤核苷酸之间为同向平行.

(2)分子内的DNA三螺旋结构在一定条件下,DNA一条单链能插入另一条DNA双螺旋结构大沟的特定

区域,通过氢键形成局部的分子间DNA三螺旋结构.

(3)平行的DNA三螺旋结构指三螺旋结构中的第三条链的序列与第一条链的序列相同,方向也相同.这种

结构因为与基因的重组相关,故称R-DNA.

? 同向平行反向平行结构式P15

反向重复序列:

当同一个核酸分子中的一段碱基序列附近紧接着一段它的互补序列时,核酸链有可能自身回折配对产生反平行的双螺旋结构,称发夹.

反向重复序列又称回文序列,指在双链DNA序列中按确定的方向5’—3’阅读双链中每条单链的序列都相同的DNA结构.

在双链DNA中,如果两条互补链分开,每条链上的互补序列都有机会发生碱基配对而形成一个发夹结构(对单链而言).两个相对的发夹结构形成了一个十字架形结构(对双链而言).

凡有回文结构的DNA分子,由于同一条链内有互补序列,因此单链DNA或RNA形成发夹结构,双链DNA 形成十字架结构.

核小体构成真核生物染色质的基本结构单位,先由四种蛋白H2A H2B H3 H4构成八聚体,作为核小体的核心颗粒,再由DNA缠绕在颗粒表面形成核小体.

△RNA的结构与功能

?核酸组成:A、G、U、C

?单链线型分子,自身形成二级或三级结构。除tRNA外,几乎都与蛋白质结合。

?根据功能分类:(1)携带遗传信息分子;(2)功能分子;

细胞内的RNA分子种类繁多,各个层次的结构不尽相同。

重要功能:1)参与蛋白质合成;m/t/rRNA

2)具有生物催化剂的功能, 参与RNA剪接加工,核酶RNA;

3)参与基因的表达调控;microRNA,snRNA等;

4)与生物体的进化有关;rRNA。

5)逆转录合成DNA

RNA复合物功能: 核糖体,信息体, 信号识别颗粒,剪接体,编辑体等。

△RNA结构特点及与DNA的区别

?1)碱基组成不同;RNA分子中有许多稀有碱基;

?2)RNA分子中的戊糖是D-核糖,而DNA不是;

?3)RNA分子中的碱基不严格遵守Chargaff法则;

?4)RNA分子是多聚核苷酸单链;

?5)RNA分子在碱性溶液中敏感,易水解;

?6)RNA分子内只有部分双链区域;

?7)RNA分子是遗传信息的传递体;

?8)某些RNA病毒,是以RNA分子作为遗传信息的载体;

?9)核酶RNA分子具有催化功能;

?10)有些小分子RNA具有基因表达调控功能;

成熟的RNA主要分布在细胞质中.

三大类: 转运RNA—rRNA 信使RNA—mRNA 核蛋白体RNA—rRNA

细胞核内的RNA--nRNA①核内mRNA tRNA和rRNA 的初始转录混合物(hnRNA 45SRNA)

②核内小分子RNA—snRNA

·snRNA主要参与hnRNA以及rRNA前体的加工

·mRNA tRNA rRNA各自的前体是其基因的初始转录产物.如mRNA的前体是蛋白质编码基因的初始转录产物,统称核不均一RNA—hnRNA

·scRNA是细胞质中的一类RNA ; tmRNA是一类普遍存在于各种细菌及细胞器(线粒体叶绿体等)中长度为260-430bp的稳定小分子RNA,兼有tRNA和mRNA的双重功能.

RNA在细胞中特性与功能

mRNA(5%)在蛋白质合成中起关键作用,作为蛋白质合成的模板.真核细胞mRNA是单顺反子,原核多顺.. tRNA(15%)主要功能是在蛋白质生物合成中特异性地运载氨基酸.

rRNA(80%)在蛋白质生物合成以及mRNA前体的剪接中发挥重要作用.

snRNA主要参与基因初始转录产物加工.

sonRNA

microRNA

非编码mRNA

修饰碱基最多? tRNA

哪种参与蛋白质合成?

哪种结构最复杂? rRNA (p27)

哪种携带遗传信息? 氨基酸?tRNA

哪种参与RNA剪接编辑? rRNA

△核酸的变性,复性与分子杂交( 之间的关系?)

变性:双链DNA中配对碱基的氢键不断处于断裂和再生的状态中,特别是稳定性较低富含A-T的区段,氢键的断裂再生更明显. 凡事破坏双螺旋结构的作用力(氢键碱基堆积力)的因素都可使DNA双螺旋解链,导致DNA变性.

引起DNA变性的主要因素:

①加温;

②极端的pH值;

pH=12, 碱基的酮式变烯醇式

pH=2-3, 碱基上的氨基发生质子化

主要影响氢键的形成。

③有机溶剂、尿素、酰胺等;

它们与DNA分子的碱基形成氢键。使DNA保持单链状态。

复性: 两条彼此分开的变性DNA链在适当条件下重新缔合成为双螺旋结构的过程称为复性.

条件: ①一定的离子强度用以削弱两条链中的磷酸基团之间的排斥力

②较高的温度用以避免随机形成的无规则氢键,但不能太高,否则不能形成有效的氢键.

影响复性速度的因素:

①简单分子真核生物DNA的复杂度很高,在同样条件下寻找到互补链时间较久.复性慢.

②同一种DNA 分子浓度越高,互补链碰撞机会越大,复性越快.

③DNA片段大小. 较大的线状单链分子,由于扩散受妨碍,减少了发现互补链的机会.一般剪成400bp

④温度的影响不宜过低,一般在Tm-25°

⑤阳离子浓度阳离子的存在能降低表面带负电荷DNA链之间的排斥力. 0.18mol/L

复性实验的标准条件下,复性速度K2约等于5*10五次方[L/(mol·s)]

Tm指: 使DNA双螺旋结构解开一半的链时的温度.

分子杂交

双螺旋结构的各种性质在DNA复性后可得到恢复.利用这一特性可将两个不同来源的互补序列退火形成双链,这个过程为分子杂交.

①溶液杂交: 将不同来源的DNA变性后,在溶液中进行杂交称溶液杂交

②滤膜杂交: 用硝酸纤维素制成的滤膜,可以吸附单链DNA或RNA,将变性DNA或RNA吸附到滤膜上再

进行分子杂交,为滤膜杂交.

第四章DNA的复制

n 半保留复制DNA在复制过程中碱基之间的氢键断裂,双螺旋解旋并以分开每条单链DNA分子为模板,产生互补的两条链,新合成出两条与亲代DNA分子完全相同,每个子代DNA分子中的一条链来自亲代DNA,另一条链则是新合成的,这种复制方式称为半保留复制。

半不连续复制DNA复制时,因为复制的方向必须是从5’到3’,一条链可以连续复制,而它的反义链复制则是不连续的,会产生冈崎片断,所以称为半不连续复制。

复制子是指基因组DNA中能够独立复制的单位,含有DNA复制的起始区和终止区的一个DNA复制单位。

复制起点的结构特征

复制时,双链DNA要解开成两股链分别进行,所以,这个复制起点呈现叉子的形式,被称为复制叉。对一个生物体基因组而言,复制起点是固定的,表现为固定的序列,并识别参与复制起始的特殊蛋白质。

(E.coli复制起始的最小功能片段长245bp,包含4个9bp的反向重复序列和3个13bp正向重复序列,称为OriC)

·在oriC区域内含有一系列对称排列的反向重复序列,即回文结构,它富含AT。与复制酶系统的识别有关。

·在oriC区域内含有两个转录启动子区,这暗示转录可能在DNA复制时起着重要的作用。

1. oriC 包含4个9bp 反向重复序列TTATTCACA,和3个富含A T 的13bp重复序列GATCTNTTNTTTT。4个9bp 反向重复序列是起始蛋白DnaA的结合位点;DnaA的合成与大肠杆菌的生长率相偶联,所以,复制的起始也与大肠杆菌的生长率相偶联。

2. 30-40 DnaA分子形成复合分子后,使DNA链弯曲,DnaB结合使之解链。

3. oriC 也包含有11个GATC. A 被甲基化,则复制起点被活化,复制才能开始。

复制叉复制开始时,在复制起点处形成的一个特殊的叉形结构,是复制有关的酶和蛋白质组装成的复合体和DNA新链合成的部位,这个部位称为复制叉。

复制的方式(p80) ?型复制滚环式复制D-环式复制

DNA复制的酶系

RNA聚合酶引发酶解旋酶解链酶DNA聚合酶链接酶…

DNA聚合酶能催化脱氧核糖核苷三磷酸合成DNA.反应特点:①以4种dNTP作为底物②反应需模板指导③新链的延伸需引物3’-OH存在④链延伸方向5’-3’⑤产物DNA的极性与模板相对.

DNA聚合酶1有哪些活性? 聚合酶活性3’-5’外切核酸酶活性5’-3’外切核酸酶活性,不是DNA复制的主要聚合酶.切除引物、修复

DNA聚合酶II,为多亚基酶,活性比聚合酶I高,无5’-3’外切核酸酶活性,是E.coli主要的修复酶.

DNA聚合酶III全酶(10种亚基),亚基酶, ,无5’-3’外切核酸酶活性,是E.coli主要的复制酶. 由αεθ构成核心酶,γ复合体由γ,δ, δ’,χ,ψ五种6个亚基组成,主要作用是“夹子”装置器DNA连接酶只能催化多核苷酸链的延长反应,不能使链间头尾链接.

2、都有3’→5’外切活性,起核对作用。

3、Ⅰ有Ⅱ、Ⅲ无5’→3’外切活性。

4、Ⅰ为单一多肽链,Ⅱ、Ⅲ为亚基酶。

4.2细菌DNA复制的机制

4.2.1 大肠杆菌复制的起始

引发体:参与引物合成的蛋白质复合体称为引发体,主要指DnaG和DnaB这两种蛋白.

参与细菌DNA复制的几个蛋白功能:

DnaA蛋白是起始因子1、与负超螺旋DNA结合在OriC处,形成复合物

2、促使OriC中的3个富含A T的13bp重复序列解链,需要ATP和Hu蛋白的促进作用;

3、引导DnaB-DnaC进入局部解链区。

DnaB的功能有两个1.是解链酶;促进DNA双链的解链;

2.促进DnaG蛋白的结合,活化DnaG,促使其在后随链上合成RNA引物。

DnaC促进DnaB-DnaC复合体的形成,起一个分子伴侣的作用,帮助DnaB 进入复制起始位点的作用。DnaG蛋白是引起发酶作用的DNA结合蛋白.

回环模型(要点?作用?解释啥的?)

?在复制叉处同一个DNA聚合酶III 负责协同复制前导链和后随链的合成;

?DNA聚合酶III全酶是一个二聚体;回环模型能够解释在连续复制和不连续复制的延伸过程中,前导链和后随链之间的复制关系以及DNA聚合酶的移动和后随链复制的方向的灰机性.

?当两条链同时复制时,后随链经过复制叉的部位就形成一个回环,以适应双链同时向前进行这种复制模型称为回环模型。

真核生物DNA聚合酶与原核的对应关系

真核细胞的核染色体复制由α和δ共同完成. α相当于III中的滑行钳.

ε相当于I, 是修复酶

β也是修复酶

γ线粒体DNA合成酶

4.3.2 真核染色体端粒的复制

△端粒酶复制机理:

端粒酶是由RNA和蛋白质组成的一种核糖核蛋白(RNP)复合体,具有逆转录酶活性,能够利用自身的RNA 为模板,以反转录的方式,催化与其互补的DNA链的合成. 与细胞的衰老和肿瘤有关.

机制:

1)端粒酶的RNA的3’端AAC与DNA的3’ 端TTG反向互补结合;

2)端粒酶发挥反转录酶的活性,以其RNA为模板合成DNA;

3)当G足够长时,引发酶合成RNA引物;

4)DNA聚合酶用DNA 为模板以RN A 3’端为引物合成DNA。

5)切除引物在富含G的端粒链上又合成12-16碱基片段。

端粒酶的功能

1.真核生物通过端粒酶形成端粒(Telomere)结构防止染色体末端缩短;

2.端粒酶活性与早老症与肿瘤有关;

第七章RNA转录概述

RNA转录的一般特点:

1)转录具有选择性;

2)RNA链的转录起始和终止于DNA上特定的部位;

3)催化反转录的酶是依赖DNA的RNA聚合酶;

4)被转录的DNA双链中有一条参与转录;

5)转录的起始由DNA分子上的启动子控制;

6)合成RNA的底物是ATP,GTP,CTP和UTP;

7)新合成的RNA是以5’→3’方向延伸。

n 单顺反子大多数真核生物的mRNA为单顺反子结构, 每种mRNA分子只编码一个蛋白质分子的亚基或只编码由单肽链构成的蛋白质分子.

多顺反子原核生物转录产物为多顺反子.一个mRNA分子含有集中蛋白质的信息,可以编码几种蛋白质. 启动子是RNA聚合酶识别,结合和启动转录的一段DNA序列.

模板链用于转录的链称为模板链或负链,又称反义链.

编码链用于转录的链为模板链,对应的链为非模板链,即正链,又称有义链.因为非模板链与合成的RNA产物链从一个方向阅读时序列完全相同,所以有义链又称编码链.

转录方向一定要清楚RNA聚合酶合成RNA方向5’-3’而RNA聚合酶本身是沿着DNA的模板链(反义) 3’-5-滑动新合成的RNA链总是以5’-3’方向延伸,底物5’-NTP总是加到新生的3’-OH. RNA5’-3’的合成反向与模板DNA方向反平行.

原核与真核基因转录的差异

1)只有一种RNA聚合酶参与原核基因的转录,真核生物有3种以上的RNA聚合酶负责不同类型的基因转录。

2)转录产物差别很大,原核生物初始转录产物大多数都是编码序列,而真核生物的初始转录产物有内含子序列,成熟的mRNA只占初始转录产物的一小部分。

3)真核的转录产物需要经过剪接,加工成熟,而原核转录产物几乎不需要加工。

4)原核转录产物为多顺反子,大多数真核生物的mRNA是单顺反子;

5)在原核生物细胞中,转录产物可以直接作为蛋白质合成的模板,转录mRNA与蛋白质的翻译相互偶联。真核生物细胞的转录是在细胞核进行的成熟后通过核孔进入细胞质在此翻译出蛋白质。

△P139 启动子结构原核核心启动子

启动子上游部位(UP元件)

真核

核心启动子:RNApol能直接识别并结合的启动子

启动子上游部位: 在RNApol结合时需要辅因子协助,这类启动子除了有RNApol结合位点外,还有位于核心启动子上游的辅助子结合位点,称启动子上游部位.

在原核基因中启动子不被转录, 核心启动子和启动子上游部位(UP原件)两者共同构成原核启动子

细菌启动子的结构: 转录起始点-10序列-35序列在-10序列与-35序列之间较严格的距离

-10 区序列(DNA解旋的重要部位)

?–10 区是在–10位左右的6bp的核苷酸序列,被称为;-10 区或(Pribnow box)或TATA Box; ?共同的保守序列是TATAAT;

?在大肠杆菌中的其他启动子中,头两个碱基(TA)和最后一个T 是高度保守的;

?这个6个核苷酸的保守序列被6~9(5~8)bp从转录起始位点+1的地方所分开,这个距离对基因的转录水平是非常重要的;

-35区序列(识别区域, sigma因子识别的重要部位)

?在–35位左右处存在一个6bp的保守序列,称为–35区或Sextama Box;

?共同的保守序列是TTGACA

?在大肠杆菌中的其他启动子中,头三个碱基(TTG )是高度保守的;

?在所有的启动子中,有约90%是被15~20(16-19)bp 从–10 区分隔开来;间距为17bp转录效率最高

?该区有主要是与RNA聚合酶σfactor 相互作用,增强识别DNA和相互作用;

-35 ~ -10 核心启动子(core promoter)

RNApol. 结合位点

-60 ~ -40 启动子上游元件(up element)

CAP–cAMP 结合位点

CAP:环化AMP受体蛋白CAP:降解物激活蛋白

-35区突变,影响RNA聚合酶与启动子的结合速度,但不影响转录起点处的解链。

-10区突变,不影响RNA聚合酶与启动子的结合速度,但影响双链的解链速度。

大肠杆菌RNA聚合酶这是一个DNA模板指导的RNA聚合酶。

主要组成成分: RNA聚合酶核心酶 亚基或因子

大肠杆菌RNA聚合酶: α亚基

1.在核心酶中两个a亚基是相同的;

2.a亚基是由rpoA基因编码;

3.对于RNA聚合酶核心蛋白的组装是必需的;

4.在启动子识别上可能起着重要的作用;

大肠杆菌RNA聚合酶:β亚基

1. β亚基由rpoB基因编码;

2. RNA聚合酶的催化中心;

Rifampicin (利福平):与β亚基结合可以抑制转录的起始,rpoB基因突变导致对利福平的抗性;

Streptolydigins(利迪链菌素):抗性突变也定位于rpoB基因,它抑制转录延伸,但不抑制起始;

3. β亚基可能含有两个结构域负责转录的起始和延伸;

大肠杆菌RNA聚合酶: β’亚基

1. b 亚基由rpo C 基因编码;

2. 与两个Zn2+ 离子结合参与RNA聚合酶的催化功能;

?Heparin (肝素):在体外与β’ 亚基结合并抑制转录;

?Heparin 与DNA竞争结合RNA聚合酶;

3. β’ 亚基可能是负责与DNA模板的结合;

大肠杆菌RNA聚合酶: σ亚基(起始亚基)

1. 在启动子的识别上σ因子至关重要,对于非特异性DNA位点核心酶的亲和力会降低(104),而对于相

应的启动子亲和力会增加;

2. 当起始后(RNA chain is 8-9 nt) ,σ因子会从RNA聚合酶中释放出来;

3. 在细胞中σ因子的需要量比RNA聚合酶其他亚基的需要量少;

核心酶加σ因子变全酶

α亚基的功能:α亚基是在C端结构域的参与下才与启动子的UP区结合,使相互作用加强,进行高水平转录。P145

核心酶β和β′亚基的功能:共同构成RNA Pol的催化亚基。β′亚基结合DNA模板;β亚基催化3’-5’磷酸二酯键的合成。

核心酶的结构:嗜热水生菌核心聚合酶像一只半张的“蟹钳”一侧由β亚基组

成,另一侧由β′亚基组成,两个α亚基位于节点,ω亚基位于底部,覆盖β′

亚基C端。两个“蟹钳”中间有27?的通道,DNA模板位于其中。

RNA聚合酶全酶的结构. σ亚基与核心酶的β和β′亚基之间有较大的接触

面。

终止子两类:

①非依赖rho因子(ρ因子)终止子,无需特异的蛋白质就能终止转录,又叫强终止子、内原性终止子

②依赖rho因子的终止子,需要在rho因子存在时才发挥终止作用。

①非依赖rho因子的终止子

②依赖rho因子的终止子

7.4 真核生物RNA聚合酶3类

△7.5 真核生物转录的启动子p159

1. 类型I基因的启动子

RNA Pol I 识别的启动子:控制rRNA前体基因的转录,转录产物经过加工后成为各种成熟的rRNA。

增强子元件:是在DNA上可以增强一些真核基因启动子利用效率的一个顺式作用序列,他能以不同的方向、和相对启动子来说不同的位置起作用。

类型I 和I I I 基因转录因子p169

第八章RNA转录后的剪接与加工

mRNA在不同的分化细胞,不同的发育阶段甚至是不同的生理状态下,由于剪接的方式不同而使相同的RNA翻译成不同的产物。

3’加尾信号新合成的mRNA的3′端含两个明显的加尾信号。第一个加尾信号位于poly (A)上游,序列为5′AAUAAA3′;第二个加尾信号位于该序列的下游约15-24 nt 位置处,有一段富GU序列,紧随其后通常有一串富U的顺序。

第九章遗传密码的破译

翻译起始密码子为AUG, GUG ,终止密码子为UAA,UAG,UGA。61个密码子对应于20种氨基酸。

N 简并性: 同一种氨基酸受2个以上codon编码的遗传现象

变偶性:是指tRNA上反密码子与mRNA密码子相互配对时在一定范围内的变动这一现象被称之为密码子的变偶性(或称为“摆动”)。

9.3.1蛋白质合成

蛋白质合成的分子基础

(1)mRNA 是蛋白质合成的模板

(2)tRNA转运活化的氨基酸

(3)密码子与反密码子的相互作用

(4)核糖体与核糖体蛋白

? 氨基酸的活化(啥地方活化?)

活化意义

(1)氨基酸与tRNA结合使aa本身被活化,以利于肽键形成。

(2)tRNA携带aa到核糖体上mRNA的指定位点,参与肽链形成。

多聚核糖体:是位于mRNA分子上,处于不同翻译阶段的多个核糖体的复合体

氨酰-tRNA合成酶结合位点

非特异结合位点DHU,特异结合位点paracodan

? 有哪作用?

蛋白质合成的延伸

有三个步骤

1)进位反应:氨酰-tRNA进入核糖体A位点。

2)转肽反应:A位点aa的-NH3对P位点肽酰-tRNA上酯键的羰基进行的亲核攻击而形成的肽键。

3)转位反应:tRNA和mRNA相对于核糖体的移动。

转肽反应(从哪转到哪? 相互作用?)

肽键的生成

在核糖体·mRNA·AA-tRNA复合物中,AA-tRNA占据A位,fMet-tRNA fMet占据P位。

在肽基转移酶的催化下,A位上的AA-tRNA转移到P位,与fMet-tRNA fMet上的氨基酸生成肽键。

转位腾空A位点准备接受新的AA-tRNA,进行下一轮合成反应。起始tRNA则离开了核糖体P位点。

蛋白质运输的主要途径1)通过核孔进入细胞核2)信号肽引导蛋白质到达靶部位3)翻译完成后被运输的蛋白质

信号肽什么时候结合什么时候跑到内质网里?

蛋白质翻译后的共价修饰包括:

1.肽链N端残基fMet或Met的切除,由氨肽酶催化

2.二硫键的形成

3.氨基酸侧链的修饰

4.蛋白质成熟过程中多肽链部分肽段切除的修饰

Other

起始密码子: AUG GUG(少)

终止密码子:UAA UAG UGA

线粒体终止子: AGA AGG

通用密码子vs 线粒体

甲硫氨酸/色氨酸1个密码子2个密码子

Met AUG AUA(原编码一亮氨酸)

Trp UGG UGA(原终止子)

第三章基因与基因组的结构与功能

?基因的概念

基因与DNA

基因与多肽链

?基因组的概念、结构与特性

病毒基因组

细菌基因组

真核生物基因组(人类基因组)

?蛋白组学与功能蛋白组学

基因的结构: 基因包括一个蛋白质或RNA的全部编码序列和编码区以外对编码区转录功能所必须的非编码的调控区组成;

顺反子反式构型中不能互补的各个突变位点在染色体上所占的一个区域称一个顺反子

内含子—真核生物基因中,,无编码功能不编码区段为内含子

外显子在一个不连续基因中有编码功能的区段.

基因组指生物体或细胞中,一套完整单体的遗传物质总和。

功能基因组学

蛋白质组学是以蛋白质组为研究对象,研究细胞内所有蛋白质及其动态变化规律的科学.

生物信息学主要研究生物学的各类数据,研究方法主要从各种计算软件衍生而来.

断裂基因基因内部插入不编码序列使一个完整的基因分隔成不连续的若干区段的基因, 也叫不连续基因重叠基因不同的基因共用一段核苷酸序列,按照不同的可读框表达的现象称为基因的重叠.

病毒基因组的一般特性 6

?基因组小,所含遗传信息少。

?可以由DNA或RNA组成,但每种病毒只含一种核酸。

?重叠基因-同一个DNA序列可以编码2种或2种以上的蛋白质。

?基因间隔序列短

?功能基因簇和多顺反子mRNA

?有部分真核生物基因的特性。

真核生物基因组(与other基因组的区别) 6

?基因组大, 107 ——1011 bp;

?有多条线状染色体,每条上有多个复制起始点;

?有大量重复序列

?蛋白质基因一般为单拷贝,转录产物为单顺反子mRNA;

?基因组存在可移动的序列;

?含有内含子序列。

分子生物学试题整理

一、植物组织培养:狭义指对植物体组织或由植物器官培养产生的愈伤组织进行培养直至生成完整植株。广义:无菌操作分离植物体一部分(即外植体)接种到培养基,在人工条件下培养直至生成完整植株。生物技术中的一个基本技术。 MS:MS培养基是Murashige和Skoog于1962年为烟草细胞培养设计的,特点是无机盐和离子浓度较高,是较稳定的离子平衡溶液,它的硝酸盐含量高,其营养丰富,养分的数量和比例合适,不需要添加更多的有机附加物,能满足植物细胞的营养和生理需要,因而适用范围比较广,多数植物组织培养快速繁殖用它作为培养基的基本培养基。 愈伤组织愈伤组织callus在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则细胞,多在植物体切面上产生。 cDNA文库:包含细胞全部的mRNA信息的反转录所得到的cDNA的集合体。 胚状体:是指植物在离体培养条件下,非合子细胞经过胚胎发生和发育的过程形成的胚状结构,又称体细胞胚。 体细胞杂交:体细胞杂交又称体细胞融合,指将两个GT不同的体细胞融合成一个体细胞的过程。融合形成的杂种细胞,兼有两个细胞的染色体。 分子标记:是指在分子水平上DNA序列的差异所能够明确显示遗传多态性的一类遗传标记。 基因工程原称遗传工程,亦称重组DNA技术,是指采用分子生物学手段,将不同来源的基因,按照人类的愿望,在体外进行重组,然后将重组的基因导人受体细胞,使原有生物产生新的遗传特性,获得新品种,生产新产品的技术科学。 细胞培养指动物、植物和微生物细胞在体外无菌条件下的保存和生长。过程:①取材和除菌;②培养基的配制;③接种与培养。 生物反应器是适用于林木细胞规模化培养的装置。 生物技术biotechmlogy:也称生物工程,是指人们以现代生命科学为基础,结合其他基础学科的科学原理,采用先进的工程技术手段,按照预先的设计改造生物体或加工生物原料,为人类生产出所需产品或达到某种目的。 外植体explant:从植物体上分离下来的用于离体培养的材料。 植物细胞的全能性:植物每一个具有完整细胞核的体细胞,都含有植物体的全部遗传信息,在适当条件下,具有发育成完整植株的潜在能力。 再分化:脱分化的分生细胞(愈伤组织)在一定的条件下,重新分化为各种类型的细胞,并进一步发育成完整植株的过程。 器官发生organogenesis:亦称器官形成,一般指脊椎动物个体发育中,由器官原基进而演变为器官的过程。各种器官形成的时间有早有晚,通过器官发生阶段,各种器官经过形态发生和组织分化,逐渐获得了特定的形态并执行一定的生理功能 体细胞胚胎发生:单细胞或一群细胞被诱导,不断再生非合子胚,并萌发形成完整植株的过程。 PCR:聚合酶链式反应是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链,低温(经常是60°C左右)时引物与单链按碱基互补配对的原则结合,再调温度至DNA聚合酶最适反应温度(72°C左右),DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。Recombinant DNA重组DNA:是指采用分子生物学手段,将不同来源的基因,按照人类的愿望,在体外进行重组,然后将重组的基因导人受体细胞,使原有生物产生新的遗传特性,获得新品种,生产新产品的技术科学。 细胞融合:两个或多个细胞相互接触后,其细胞膜发生分子重排,导致细胞合并、染色体等遗传物质重组的过程称为细胞融合。 悬浮培养:悬浮培养是细胞培养的基本方法,不仅为研究细胞的生长和分化提供了一个

分子生物学复习题

1、分子生物学的定义。 从分子水平研究生物大分子的结构与功能从而阐明生命现象本质的科学,主要指遗传信息的传递(复制)、保持(损伤和修复)、基因的表达(转录和翻译)与调控。 2、简述分子生物学的主要研究内容。 a.DNA重组技术(基因工程) (1)可被用于大量生产某些在正常细胞代谢中产量很低的多肽 ; (2)可用于定向改造某些生物的基因组结构 ; (3)可被用来进行基础研究 b.基因的表达调控 在个体生长发育过程中生物遗传信息的表达按一定时序发生变化(时序调节),并随着内外环境的变化而不断加以修正(环境调控)。 c.生物大分子的结构和功能研究(结构分子生物学) 一个生物大分子,无论是核酸、蛋白质或多糖,在发挥生物学功能时,必须具备两个前提: (1)拥有特定的空间结构(三维结构); (2)发挥生物学功能的过程中必定存在着结构和构象的变化。 结构分子生物学就是研究生物大分子特定的空间结构及结构的运动变化与其生物学功能关系的科学。它包括3个主要研究方向: (1) 结构的测定 (2) 结构运动变化规律的探索 (3) 结构与功能相互关系 d.基因组、功能基因组与生物信息学研究 3、谈谈你对分子生物学未来发展的看法? (1)分子生物学的发展揭示了生命本质的高度有序性和一致性,是人类认识论上的重大飞跃。生命活动的一致性,决定了二十一世纪的生物学将是真正的系统生物学,是生物学范围内所有学科在分子水平上的统一。 (2)分子生物学是目前自然学科中进展最迅速、最具活力和生气的领域,也是新世纪的带头学科。

(3)分子生物学是由生物化学、生物物理学、遗传学、微生物学、细胞学、以及信息科学等多学科相互渗透、综合融会而产生并发展起来的,同时也推动这些学科的发展。 (4)分子生物学涉及认识生命的本质,它也就自然广泛的渗透到医学、药学各学科领域中,成为现代医药学重要的基础。 1、DNA双螺旋模型是哪年、由谁提出的?简述其基本内容。 DNA双螺旋模型在1953年由Watson和Crick提出的。 基本内容: (1) 两条反向平行的多核苷酸链围绕同一中心轴相互缠绕,两条链均为右手双螺旋。 (2) 嘌呤与嘧啶碱位于双螺旋的内侧,3′,5′- 磷酸与核糖在外侧,彼此通过磷酸二酯键相连接,形成DNA分子的骨架。 (3) 双螺旋的平均直径为2nm,两个相邻碱基对之间相距的高度即碱基堆积距离 为0.34nm,两个核苷酸之间的夹角为36。。 (4) 两条核苷酸链依靠彼此碱基之间形成的氢键相连系而结合在一起,A与T相配对形成两个氢键,G与C相配对形成3个氢键。 (5) 碱基在一条链上的排列顺序不受任何限制,但根据碱基互补配对原则,当一条多核苷酸的序列被确定后,即可决定另一条互补链的序列。

分子生物学与基因工程主要知识点

分子生物学与基因工程复习重点 第一讲绪论 1、分子生物学与基因工程的含义 从狭义上讲,分子生物学主要是研究生物体主要遗传物质-基因或DNA的结构及其复制、转录、表达和调节控制等过程的科学。 基因工程是一项将生物的某个基因通过载体运送到另一种生物的活体细胞中,并使之无性繁殖和行使正常功能,从而创造生物新品种或新物种的遗传学技术。 2、分子生物学与基因工程的发展简史,特别是里程碑事件,要求掌握其必要的理由 上个世纪50年代,Watson和Crick提出了的DNA双螺旋模型; 60年代,法国科学家Jacob和Monod提出了的乳糖操纵子模型; 70年代,Berg首先发现了DNA连接酶,并构建了世界上第一个重组DNA分子; 80年代,Mullis发明了聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)技术; 90年代,开展了“人类基因组计划”和模式生物的基因组测序,分子生物学进入“基因组时代”; 目前,分子生物学进入了“后基因组时代”或“蛋白质组时代”。 3、分子生物学与基因工程的专业地位与作用:从专业基础课角度阐述对专业课程的支 撑作用 第二讲核酸概述 1、核酸的化学组成(图画说明) 2、核酸的种类与特点:DNA和RNA的区别 (1)DNA含的糖分子是脱氧核糖,RNA含的是核糖; (2)DNA含有的碱基是腺嘌呤(A)、胞嘧啶(C)、鸟嘌呤(G)和胸腺嘧啶(T),RNA含有的碱基前3个与DNA完全相同,只有最后一个胸腺嘧啶被尿嘧啶(U)所代替; (3)DNA通常是双链,而RNA主要为单链;

(4)DNA的分子链一般较长,而RNA分子链较短。 3、DNA作为遗传物质的直接和间接证据; 间接: (1)一种生物不同组织的细胞,不论年龄大小,功能如何,它的DNA含量是恒定的,而生殖细胞精子的DNA含量则刚好是体细胞的一半。多倍体生物细胞的DNA含量是按其染色体倍数性的增加而递增的,但细胞核里的蛋白质并没有相似的分布规律。 (2)DNA在代谢上较稳定。 (3)DNA是所有生物的染色体所共有的,而某些生物的染色体上则没有蛋白质。(4)DNA通常只存在于细胞核染色体上,但某些能自体复制的细胞器,如线粒体、叶绿体有其自己的DNA。 (5)在各类生物中能引起DNA结构改变的化学物质都可引起基因突变。 直接:肺炎链球菌试验、噬菌体侵染实验 4、DNA的变性与复性:两者的含义与特点及应用 变性:它是指当双螺旋DNA加热至生理温度以上(接近100oC)时,它就失去生理活性。这时DNA双股链间的氢键断裂,最后双股链完全分开并成为无规则线团的过程。简而言之,就是DNA从双链变成单链的过程。增色效应:它是指在DNA的变性过程中,它在260 nm的吸收值先是缓慢上升,到达某一温度后即骤然上升的效应。 复性:它是指热变性的DNA如缓慢冷却,已分开的互补链又可能重新缔合成双螺旋的过程。复性的速度与DNA的浓度有关,因为两互补序列间的配对决定于它们碰撞频率。DNA复性的应用-分子杂交:由DNA复性研究发展成的一种实验技术是分子杂交技术。杂交可发生在DNA和DNA或DNA与RNA间。 5、Tm的含义与影响因素 Tm的含义:是指吸收值增加的中点。 影响因素: 1)DNA序列中G + C的含量或比例含量越高,Tm值也越大(决定性因素);2)溶液的离子强度 3)核酸分子的长度有关:核酸分子越长,Tm值越大

分子生物学问题

1.分子生物学的定义。 2.简述分子生物学的主要研究内容 广义:是研究蛋白质及核酸等生物大分子特定的空间结构及结构的运动变化与其生物学功能关系的科学。从分子水平阐明生命现象和生物学规律。 狭义:主要研究基因或DNA的复制、转录、表达和调节控制等过程 分子生物学的主要研究内容 生物大分子本质:一切生物体中的各类有机大分子都是由完全相同的单体,如蛋白质分子中的20种氨基酸、DNA及RNA中的8种碱基所组合而成的。 生物大分子结构功能(结构分子生物学) DNA重组技术(基因工程) 基因表达调控(核酸生物学) 基因组学 ?2章DNA双螺旋模型是哪年、由谁提出的?简述其基本内容。 ?1953 DNA的双螺旋结构有哪几种不同形式,各有何特点?细胞内最常见的是哪一类构象? ?B-DNA构象: 相对湿度为92%时,DNA钠盐纤维为B-DNA构象。在天然情况下,绝大多数DNA 以B构象存在。最常见 ?A-DNA构象: 当相对湿度改变(75%以下)或由钠盐变为钾盐、铯盐,DNA的结构可成为A构象。它是B-DNA螺旋拧得更紧的状态。DNA-RNA杂交分子、RNA-RNA双链分子均采取A构象。

?Z-DNA构象: 在一定的条件下(如高盐浓度),DNA可能出现Z构象。Z-DNA是左手双螺旋,磷酸核糖骨架呈Z字性走向。不存在大沟,小沟窄而深,并具有更多的负电荷密度。Z-DNA的存在与基因的表达调控有关 第四节DNA的变性和复性 简述DNA的C-值、C-值矛盾(C Value paradox);核小体、断裂基因 C-值是一种生物的单倍体基因组DNA的总量 ?C-值矛盾(C-value paradox): 形态学的复杂程度(物种的生物复杂性)与C-值大小的不一致,称为C值矛盾(C-值悖理) 核小体(nucleosome)定义:用于包装染色质的结构单位,是由DNA链缠绕一个组蛋白核心构成的 简述真核生物染色体上组蛋白的种类,组蛋白修饰的种类及其生物学意义 组蛋白:H1 H2A H2B H3 H4 如甲基化、乙酰化、磷酸化、泛素化及ADP核糖基化等。修饰作用只发生在细胞周期的特定时间和组蛋白的特定位点上。 H3、H4的修饰作用较普遍。 所有这些修饰作用都有一个共同的特点,即降低组蛋白所携带的正电荷。这些组蛋白修饰的意义:一是改变染色体的结构,直接影响转录活性;二是核小体表面发生改变,使其他调控蛋白易于和染色质相互接触,从而间接影响转录活性 、

分子生物学题库重点

一. 名词解释 1. C值及C值反常反应:所谓C值,通常是指一种生物单倍体基因组DNA的总量。真核细胞基因的最大特点是它含有大量的重复序列,而且功能DNA序列大多被不编码蛋白质的非功能DNA所隔开,这就是C值反常现象。 2. 半保留复制:DNA生物合成时,母链DNA解开分为两股单链,各自为模板按碱基互补规律,合成与模板互补的子链。子代细胞的DNA,一股从亲本完全接受过来,另一股则完全从新合成。两个子细胞的DNA碱基序列一致。 3 半不连续复制:前导链连续复制而随从链不连续复制,就是复制的半不连续性。 4 引发体:复制的起始含有解螺旋酶.DNA C蛋白.引物酶和DNA复制起始区域的复合结构称为引发体。 5. DNA损伤:在复制过程中发生的DNA突变体称为DNA损伤。 6 转座子:是存在于染色体DNA上可自主复制和位移的基本单位。 7. 中心法则:通过DNA的复制把遗传信息由亲代传递给子代,遗传信息由DNA传递到RNA,最后翻译成特异的蛋白质.RNA还以逆转录的方式将遗传信息体传递给DNA分子。这种遗传信息的流向称为中心法则。 8 编码链:双链DNA中,不能进行转录的那一条DNA链,该链的核苷酸序列与转录生成的RNA的序列一致,又称意义链。 9. 转录因子:能直接或间接辨认和结合转录上游区段DNA的蛋白质,称反式作用因子。在反式作用因子中,直接或间接结合DNA聚合酶的,则称为转录因子。 10 RNA编辑:是某些RNA,特别是mRNA前体的一种加工方式,如插入,删除或取代一些核苷酸残基,导致DNA所编码的遗传信息发生改变,因为经过编辑mRNA序列发生了不同于模板DNA的变化。 11 cDNA:互补DNA,是以mRNA为模板,按碱基互补规律,合成与mRNA互补的DNA 单链。 12 RNA选择性剪接:是指不同的剪切方式从一个mRNA前体产生不同的mRNA剪接异构体的过程。 13 GU-AG法则:多数细胞核mRNA前体中内含子的5’边界序列为GU,3’边界,序列为AG。因此,GU表示供体先借点的5’端,AG代表接纳体衔接点3’端序列。习惯上,这种保守序列模式称为GU-AG法则。 14. 顺反子:遗传学上将编码一个多肽链的遗传单位,称为顺反子。真核mRNA只编码一种蛋白质,为单顺反子。 15. 翻译:以mRNA为模板,氨酰-tRNA为原料直接供体,在多种蛋白质因子和酶的参与下,在核糖体上将mRNA分子上的核苷酸顺序表达为有特定氨基酸顺序的蛋白质的过程。 16. 摆动假说:Crick为解释反密码子中某些稀有成分的配对以及许多氨基酸有2个以上的密码子的问题而提出的假说。 17. 氨酰-tRNA合成酶:是一类催化氨基酸和tRNA相结合的特异性酶。 18. SD序列:早在1974年,Shine就发现,几种细菌小亚基rRNA3’末端顺序为:5’—ACCUCCUA—3’,它可以和mRNA中离AUG顺序5’侧约9-13个碱基处有一段富含嘌呤碱基AGGA或GAGG互补,后来称此区域为SD。 19. 多核糖体:mRNA同时与若干个核糖体结合形成的念珠转结构,称为多核糖体。 20 核定位序列:蛋白质中的一种常见的结构域,通常为一短的氨基酸序列,它能与核载体相互作用,将蛋白质运进细胞核内。 21. 基因打靶:是指通过DNA定点同源重组,改变基因组中的某一特定基因,从而在生物活体内研究此基因的功能。

南昌大学最新完整分子生物学复习资料

南昌大学分子生物学复习资料 杨光焱南昌大学生物科学141班 5601114030 一、名词解释 1)分子生物学:从分子水平上研究生命现象物质基础的学科。研究细胞成分的 物理、化学的性质和变化以及这些性质和变化与生命现象的关系,如遗传信息的传递,基因的结构、复制、转录、翻译、表达调控和表达产物的生理功能,以及细胞信号的转导等。 2)移动基因:又称转座子。由于它可以从染色体基因组上的一个位置转移到另一个位置,是指在不同染色体之间跃迁,因此也称跳跃基因。 3)假基因:有些基因核苷酸序列与相应的正常功能基因基本相同,但却不能合 成出功能蛋白质,这些失活的基因称为假基因。 4)重叠基因:所谓重叠基因是指两个或两个以上的基因共有一段DNA序列,或是指一段DNA序列成为两个或两个以上基因的组成部分。 5)基因家族:是真核生物基因组中来源相同、结构相似、功能相关的一组基 因。 6)基因:能够表达和产生蛋白质和RNA的DNA序列,是决定遗传性状的功能单位. 7)基因组:细胞或生物体的一套完整单倍体的遗传物质的总和. 8)端粒:以线性染色体形式存在的真核基因组DNA末端都有一种特殊的结构叫 端粒.该结构是一段DNA序列和蛋白质形成的一种复合体,仅在真核细胞染色体末端存在. 9)操纵子:是指数个功能上相关的结构基因串联在一起,构成信息区,连同其上游的调控区 (包括启动子和操纵基因)以及下游的转录终止信号所构成的基因表达单位,所转录的RNA为多顺反子. 10)顺式作用元件:是指那些与结构基因表达调控相关,能够被基因调控蛋白特异性识别和结合的特异DNA序列.包括启动子,上游启动子元件,增强子,加尾信号和一些反应元件等. 11)反式作用因子:是指真核细胞内含有的大量可以通过直接或间接结合顺式作用元件而调节基因转录活性的蛋白质因子. 12)启动子:是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列. 13)增强子:位于真核基因中远离转录起始点,能明显增强启动子转录效率的特殊DNA序列. 它可位于被增强的转录基因的上游或下游,也可相距靶基因较远. 14)转录因子:直接结合或间接作用于基因启动子、形成具有RNA聚合酶活性 的动态转录复合体的蛋白质因子。有通用转录因子、序列特异性转录因子、辅助转录因子等。

生物化学与分子生物学复习归纳笔记

生物化学与分子生物学重点(1) https://www.doczj.com/doc/c52576168.html, 2006-11-13 23:44:37 来源:绿色生命网 第一章绪论 一、生物化学的的概念: 生物化学(biochemistry)是利用化学的原理与方法去探讨生命的一门科学,它是介于化学、生物学及物理学之间的一门边缘学科。 二、生物化学的发展: 1.叙述生物化学阶段:是生物化学发展的萌芽阶段,其主要的工作是分析和研究生物体的组成成分以及生物体的分泌物和排泄物。 2.动态生物化学阶段:是生物化学蓬勃发展的时期。就在这一时期,人们基本上弄清了生物体内各种主要化学物质的代谢途径。 3.分子生物学阶段:这一阶段的主要研究工作就是探讨各种生物大分子的结构与其功能之间的关系。 三、生物化学研究的主要方面: 1.生物体的物质组成:高等生物体主要由蛋白质、核酸、糖类、脂类以及水、无机盐等组成,此外还含有一些低分子物质。 2.物质代谢:物质代谢的基本过程主要包括三大步骤:消化、吸收→中间代谢→排泄。其中,中间代谢过程是在细胞内进行的,最为复杂的化学变化过程,它包括合成代谢,分解代谢,物质互变,代谢调控,能量代谢几方面的内容。 3.细胞信号转导:细胞内存在多条信号转导途径,而这些途径之间通过一定的方式方式相互交织在一起,从而构成了非常复杂的信号转导网络,调控细胞的代谢、生理活动及生长分化。 4.生物分子的结构与功能:通过对生物大分子结构的理解,揭示结构与功能之间的关系。 5.遗传与繁殖:对生物体遗传与繁殖的分子机制的研究,也是现代生物化学与分子生物学研究的

一个重要内容。 第二章蛋白质的结构与功能 一、氨基酸: 1.结构特点:氨基酸(amino acid)是蛋白质分子的基本组成单位。构成天然蛋白质分子的氨基酸约有20种,除脯氨酸为α-亚氨基酸、甘氨酸不含手性碳原子外,其余氨基酸均为L-α-氨基酸。 2.分类:根据氨基酸的R基团的极性大小可将氨基酸分为四类:① 非极性中性氨基酸(8种); ② 极性中性氨基酸(7种);③ 酸性氨基酸(Glu和Asp);④ 碱性氨基酸(Lys、Arg和His)。 二、肽键与肽链: 肽键(peptide bond)是指由一分子氨基酸的α-羧基与另一分子氨基酸的α-氨基经脱水而形成的共价键(-CO-NH-)。氨基酸分子在参与形成肽键之后,由于脱水而结构不完整,称为氨基酸残基。每条多肽链都有两端:即自由氨基端(N端)与自由羧基端(C端),肽链的方向是N端→C端。 三、肽键平面(肽单位): 肽键具有部分双键的性质,不能自由旋转;组成肽键的四个原子及其相邻的两个α碳原子处在同一个平面上,为刚性平面结构,称为肽键平面。 四、蛋白质的分子结构: 蛋白质的分子结构可人为分为一级、二级、三级和四级结构等层次。一级结构为线状结构,二、三、四级结构为空间结构。 1.一级结构:指多肽链中氨基酸的排列顺序,其维系键是肽键。蛋白质的一级结构决定其空间结构。 2.二级结构:指多肽链主链骨架盘绕折叠而形成的构象,借氢键维系。主要有以下几种类型: ⑴α-螺旋:其结构特征为:①主链骨架围绕中心轴盘绕形成右手螺旋;②螺旋每上升一圈是3.6个氨基酸残基,螺距为0.54nm;③ 相邻螺旋圈之间形成许多氢键;④ 侧链基团位于螺旋的外侧。 影响α-螺旋形成的因素主要是:① 存在侧链基团较大的氨基酸残基;② 连续存在带相同电荷的氨基酸残基;③ 存在脯氨酸残基。 ⑵β-折叠:其结构特征为:① 若干条肽链或肽段平行或反平行排列成片;② 所有肽键的C=O和

分子生物学试题及答案

分子生物学试题及答案

分子生物学试题及答案一、名词解释 1.cDNA与cccDNA:cDNA是由mRNA通过反转录酶合成的双链DNA;cccDNA是游离于染色体之外的质粒双链闭合环形DNA。 2.标准折叠单位:蛋白质二级结构单元α-螺旋与β-折叠通过各种连接多肽可以组成特殊几何排列的结构块,此种确定的折叠类型通常称为超二级结构。几乎所有的三级结构都可以用这些折叠类型,乃至他们的组合型来予以描述,因此又将其称为标准折叠单位。3.CAP:环腺苷酸(cAMP)受体蛋白CRP(cAMP receptor protein ),cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP(cAMP activated protein ) 4.回文序列:DNA片段上的一段所具有的反向互补序列,常是限制性酶切位点。 5.micRNA:互补干扰RNA或称反义RNA,与mRNA序列互补,可抑制mRNA的翻译。 6.核酶:具有催化活性的RNA,在RNA的剪接加工过程中起到自我催化的作用。 7.模体:蛋白质分子空间结构中存在着某些立体形状和拓扑结构颇为类似的局部区域 8.信号肽:在蛋白质合成过程中N端有15~36个氨基酸残基的肽段,引导蛋白质的跨膜。

除了5’ 3’外切酶活性 19.锚定PCR:用于扩增已知一端序列的目的DNA。在未知序列一端加上一段多聚dG的尾巴,然后分别用多聚dC和已知的序列作为引物进行PCR扩增。 20.融合蛋白:真核蛋白的基因与外源基因连接,同时表达翻译出的原基因蛋白与外源蛋白结合在一起所组成的蛋白质。 二、填空 1. DNA的物理图谱是DNA分子的(限制性内切酶酶解)片段的排列顺序。 2. RNA酶的剪切分为(自体催化)、(异体催化)两种类型。3.原核生物中有三种起始因子分别是(IF-1)、( IF-2 )和(IF-3 )。4.蛋白质的跨膜需要(信号肽)的引导,蛋白伴侣的作用是(辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质)。 5.启动子中的元件通常可以分为两种:(核心启动子元件)和(上游启动子元件)。 6.分子生物学的研究内容主要包含(结构分子生物学)、(基因表达与调控)、( DNA重组技术)三部分。 7.证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是(肺炎球菌感染小鼠)、( T2噬菌体感染大肠杆菌)这两个实验中主要的论点证据是:(生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能)。 8.hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点:( hnRNA在转变为mRNA 的过程中经过剪接,)、

分子生物学知识点整理知识讲解

分子生物学知识点整 理

一、名词解释: 1. 基因:基因是位于染色体上的遗传基本单位,是负载特定遗传信息的DNA 片段,编码具有生物功能的产物包括RNA和多肽链。 2. 基因表达:即基因负载遗传信息转变生成具有生物学功能产物的过程,包括基因的激活、转录、翻译以及相关的加工修饰等多个步骤或过程。 3.管家基因:在一个生物个体的几乎所有组织细胞中和所有时间段都持续表达的基因,其表达水平变化很小且较少受环境变化的影响。如GAPDH、β-肌动蛋白基因。 4. 启动子:是指位于基因转录起始位点上游、能够与RNA聚合酶和其他转录因子结合并进而调节其下游目的基因转录起始和转录效率的一段DNA片段。 5.操纵子:是原核生物基因表达的协调控制单位,包括有结构基因、启动序列、操纵序列等。如:乳糖操纵子、色氨酸操纵子等。 6.反式作用因子:指由其他基因表达产生的、能与顺式作用元件直接或间接作用而参与调节靶基因转录的蛋白因子(转录因子)。 7.顺式作用元件:即位于基因附近或内部的能够调节基因自身表达的特定DNA 序列。是转录因子的结合位点,通过与转录因子的结合而实现对真核基因转录的精确调控。 8. Ct值:即循环阈值(cycle threshold,Ct),是指在PCR扩增过程中,扩增产物的荧光信号达到设定的荧光阈值所经历的循环数。(它与PCR扩增的起始模板量存在线性对数关系,由此可以对扩增样品中的目的基因的模板量进行准确的绝对和(或)相对定量。)

9.核酸分子杂交:是指核酸分子在变性后再复性的过程中,来源不同但互不配对的核酸单链(包括DNA和DNA,DNA和RNA,RNA和RNA)相互结合形成杂合双链的特性或现象,依据此特性建立的一种对目的核酸分子进行定性和定量分析的技术则称为分子杂交技术。 10. 印迹或转印:是指将核酸或蛋白质等生物大分子通过一定的方法转移并固定至尼龙膜等支持载体上的一种方法,该技术类似于用吸墨纸吸收纸张上的墨迹。 11. 探针:是一种用同位素或非同位素标记核酸单链,通常是人工合成的寡核苷酸片段。 12. 基因芯片:又称DNA芯片或DNA微阵列,是基于核酸分子杂交原理建立的一种对DNA进行高通量、大规模、并进行分析的技术,其基本原理是将大量寡核苷酸分子固定于支持物上,然后与标记的待测样品进行杂交,通过检测杂交信号的强弱进而对待测样品中的核酸进行定性和定量分析。 13. 基因文库:是指通过克隆方法保存在适当宿主中的一群混合的DNA分子,所有这些分子中的插入片段的总和,可代表某种生物的全部基因组序列或全部的mRNA序列,因此基因文库实际上是包含某一生物体或生物组织样本的全部DNA序列的克隆群体。基因文库包括两类:基因组文库和cDNA文库。 14. 克隆:是来自同一始祖的相同副本或拷贝的集合。 15. 载体:为携带的目的基因,实现其无性繁殖或表达有意义的蛋白质所采用的一些DNA分子。 16. 限制性核酸内切酶:识别DNA的特意序列,并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类内切酶。

分子生物学复习资料 绝对重点

分子生物学复习资料 (第一版) 一名词解释 1 Southern blot / Northern blot—DNA斑迹法 / RNA转移吸印技术。是为了检测待检基因或其表达产物的性质和数量(基因拷贝数)常用的核酸分子杂交技术。二者均属于印迹转移杂交术,所不同的是前者用于检测DNA样品;后者用于检测RNA样品。 2 cis-acting element / trans-acting factor—顺式作用元件 / 反式作用因子。均为真核生物基因中的转录调控序列。顺式作用元件是与结构基因表达调控相关、能被基因调控蛋白特异性识别和结合的特定DNA序列,包括启动子和上游启动子元件、增强子、反应元件和poly (A)加尾信号。反式作用因子是能与顺式作用元件特异性结合、对基因表达的转录起始过程有调控作用的蛋白质因子,如RNA聚合酶、转录因子、转录激活因子、抑制因子。 3VNTR / STR—可变数目串联重复序列 / 短串联重复。均为非编码区的串联重复序列。 前者也叫高度可变的小卫星DNA,重复单位约9~24bp,重复次数变化大,变化高度多态性;后者也叫微卫星DNA,重复单位约2~6 bp,重复次数约10~60次,总长度通常小于150bp 。(参考第7题) 4 viral oncogene / cellular oncogene—病毒癌基因 / 细胞癌基因。病毒癌基因指存在于逆转录病毒中、体外能使细胞转化、体内能导致肿瘤发生的基因;细胞癌基因也叫原癌基因,指存在于细胞内,与病毒癌基因同源的基因序列。正常情况下不激活,与细胞增殖相关,是维持机体正常生命活动所必须的,在进化上高等保守。当原癌基因的结构或调控区发生变异,基因产物增多或活性增强时,使细胞过度增殖,从而形成肿瘤。 5 ORF / UTR—开放阅读框 / 非翻译区。均指在mRNA中的核苷酸序列。前者是特定蛋白质多肽链的序列信息,从起始密码子开始到终止密码子结束,决定蛋白质分子的一级功能;后者是位于前者的5'端上游和3'端下游的、没有编码功能的序列,主要参与翻译起始调控,为前者的多肽链序列信息转变为多肽链所必需。 6 enhancer / silencer—增强子 / 沉默子。均为顺式作用元件。前者是一段含多个作用元件的短DNA序列,可特异性与转录因子结合,增强基因的转录活性,可以位于基因任何位置,通常在转录起始点上游-100到-300个碱基对处;后者是前者内含的负调控序列,结合特异蛋白因子时,对基因转录起阻遏作用。 7 micro-satellite / minisatellite—微卫星DNA / 小卫星DNA 。卫星DNA是出现在非编码区的串联重复序列,特点是有固定重复单位且重复单位首尾相连形成重复序列片段,串联重复单位长短不等,重复次数大小不一。微卫星DNA即STR;小卫星DNA分为高度可变的小卫星DNA(即VNTR)和端粒DNA。(参考第3题) 8 SNP / RFLP—单核苷酸多态性 / 限制性片段长度多态性。前者是指在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的DNA序列多态性,它是人类遗传变异中最常见的一种,占所

分子生物学小问题整理

第一章 1.蛋白质氨基酸构成氨基羧基H原子R 2.碱性赖精组酸性天谷Asp Glu 3.肽键是有刚性的酰胺键部分双键防止肽键自由旋转 4.N-末端正电荷C-末端负电荷 5.多肽肽键连接起来的聚合物 6.一级结构氨基酸顺序 7.二级结构多肽中的区域通过折叠产生 8.三级结构由不同二级结构组成 9.四级结构几条多肽链组成的蛋白质形状 10.二级结构a螺旋b折叠helix and sheet 11.疏水相互作用非极性分子远离水分子而互相聚集在一起 第二章 1.核酸长的小分子聚合物 2.核苷酸含氮碱基糖三磷酸 3.一环嘧啶2N 4.二环嘌呤4N 5.大小沟major minor 蛋白质大多结合在大沟 6.一圈3.4nm 10bp 宽度大约2nm 7.变性260nm 单链DNA吸收很多光复性了解一下 8. 1.DNA链中的碱基序列可以用来保存生产蛋白质的氨基酸序列信息

9. 2.提供了作为遗传物质需要的稳定性 10.3.对某些类型的损伤进行修复 11.4.一定的脆弱性 第三章 1.原核生物转录 2.起始:闭合启动子复合体开放启动子复合体取得立足点启动子清空 3.延伸:局部分开两条链,RNA聚合酶创造了一个开口转录泡 4.终止内在型重视和ρ依赖型终止结合到RNA上形成发夹 5.对基因的表达进行调控何时该表达什么蛋白特殊时期特殊表达。。 6.操纵子:被协同调控的基因组织起来的结构包含一个启动子和操纵基因(operator) 7.乳糖操纵子:没有乳糖时乳糖会与lac阻遏蛋白结合别构调控 8.正调控CAP能感应葡萄糖水平低->激活lac基因的转录不与葡萄糖直接结合与 CAMP 这样的小分子结合而发挥作用成反比(CAMP和葡萄糖) 9.乳糖诱导物诱导了转录 10.色氨酸操纵子trp阻遏蛋白辅阻遏物 11.衰减作用:确保转录被彻底阻遏 12.边转录边翻译偶联转录-翻译 第四章 1.RNA聚合酶I rRNA 2.III tRNA 5S rRNA U6 RNA

陈阅增普通生物学重点整理

第一、二、三章 1生物的特征:①特定的组构②新陈代谢③稳态与应激④生殖与遗传⑤生长与发育 ⑥进化与适应 2、生物界的分界以及阶元:原核生物界、原生生物界、真菌界、植物界与动物界。 分类阶元:界、门、纲、目、科、属、种 3、生物界的结构层次特点:生物界就是一个多层次的有序结构,生命的基本单位就是细胞,在细胞这一层次上还有组织、器官、系统、个体、种群、群落、生态系统。 4、生物学的研究方法:科学观察、假说与实验、模型实验。 5、多样性中存在着高度统一的特点。 6、同位素示踪:利用放射性同位素显示某种原子在生物体内的来去踪迹。 7、多聚体:由相同或相似的小分子组成的长链 8、单糖的结构与功能:①有许多羟基,所以单糖属于醇类②有羰基 细胞中用作燃料的分子主要就是葡萄糖,葡糖糖与其她单糖也就是细胞合成别的有机分子的的原料。 9、脂肪的功能:①脂质中主要的贮能分子②构成一些重要的生理物质③维持体温与保护内脏,缓冲外界压力④提供必需的脂肪酸⑤脂溶性维生素的来源,促进脂溶性维生素的吸收⑥增加饱腹感。 10、磷脂的结构:结构与脂肪内似,分子中只有两个脂肪酸,另一个酸就是磷酸。 11、蛋白质的结构与功能:蛋白质就是生物大分子,通过酸、碱或者蛋白酶的彻底水解。可以产生各种氨基酸。因此,蛋白质的基本结构单位就是氨基酸。 12、生物体离不开水的七个特征:①水就是极性分子②水分子之间会形成氢键③液态水中的水分子具有内聚力④水分子之间的氢键使水能缓与温度的变化⑤冰比水轻⑥水就是极好的溶剂⑦水能够电离。 13、DNA双螺旋的结构特点:两个由磷酸基团与糖形成的主链缠绕在一起,含氮碱基主动伸出,夹在双螺旋之间。①两条DNA互补链反向平行②DNA双螺旋的表面存在一个大沟与一个小沟,蛋白质分子通过这两个沟与碱基识别③两条DNA链依靠彼此之间形成的碱基结合在一起④DNA双螺旋结构比较稳定。 14、细胞生物学的发展趋势:①“一切生物学的关键问题必须在细胞中找寻”细胞就是一切生命活动结构与功能的基本单位。②细胞生物学研究的核心内容:遗传与发育的关系问题,两者的关系就是,遗传在发育过程中实现,发育又以遗传为基础。③细胞生物学的主要发展趋势:用分子生物学及其它相关学科的方法,深入研究真核细胞 基因表达的调节与控制,以期从根本上揭示遗传与发育的关系、细胞衰老、死亡及癌变的机理等基本的生物学问题,为生物工程的广泛应用提供理论依据。④两个基本点:一就是基因与基因产物如何控制细胞的生命活动,包括细胞内外信号就是如何传递的;二就是基因表达产物——蛋白质如何构建与装配成细胞的结构,并使细胞正常的生命活动得以进行。⑤蛋白质组学:生命科学的研究已经进入后基因组时代,随着一大批模式生物基因组结构的阐明,研究的重心将回归到在细胞的水平研究蛋白质的结构与功能,即蛋白质组学的研究,同时对糖类的研究将提升到新的高度。 15、原核细胞与真核细胞的差异:最大的区别就是原核细胞没有核膜包裹形成的细胞核,而真核就有;另外原核细胞中只有核糖体这一种细胞器,而真核细胞中有多种细胞器。 16、真核细胞细胞核的结构;细胞核包括核被膜、核基质、染色质与核仁。核被膜就是包在核外的双层膜,外膜可延伸于细胞质中的内质网相连;染色质就是核中由DNA与蛋白质组成,含有大量的基因片段,就是生命的遗传物质;核仁就是核中颗粒状结构,富含蛋白质与RNA,产生核糖体的细胞器。染色质与核仁都被液态的核基质所包围。

分子生物学课件整理朱玉贤

1、广义分子生物学:在分子水平上研究生命本质的科学,其研究对象是生物大分子的结构和功能。2 2、狭义分子生物学:即核酸(基因)的分子生物学,研究基因的结构和功能、复制、转录、翻译、表达调控、重组、修复等过程,以及其中涉及到与过程相关的蛋白质和 酶的结构与功能 3、基因:遗传信息的基本单位。编码蛋白质或RNA等具有特定功能产物的遗传信息 的基本单位,是染色体或基因组的一段DNA序列(对以RNA作为遗传信息载体的 RNA病毒而言则是RNA序列)。 4、基因:基因是含有特定遗传信息的一段核苷酸序列,包含产生一条多肽链或功能RNA所必需的全部核苷酸序列。 5、功能基因组学:是依附于对DNA序列的了解,应用基因组学的知识和工具去了解 影响发育和整个生物体的特定序列表达谱。 6、蛋白质组学:是以蛋白质组为研究对象,研究细胞内所有蛋白质及其动态变化规律的科学。 7、生物信息学:对DNA和蛋白质序列资料中各种类型信息进行识别、存储、分析、模拟和转输 8、蛋白质组:指的是由一个基因组表达的全部蛋白质 9、功能蛋白质组学:是指研究在特定时间、特定环境和实验条件下细胞内表达的全部蛋白质。 10、单细胞蛋白:也叫微生物蛋白,它是用许多工农业废料及石油废料人工培养的微 生物菌体。因而,单细胞蛋白不是一种纯蛋白质,而是由蛋白质、脂肪、碳水化合物、核酸及不是蛋白质的含氮化合物、维生素和无机化合物等混合物组成的细胞质团。 11、基因组:指生物体或细胞一套完整单倍体的遗传物质总和。 12、C值:指生物单倍体基因组的全部DNA的含量,单位以pg或Mb表示。 13、C值矛盾:C值和生物结构或组成的复杂性不一致的现象。 14、重叠基因:共有同一段DNA序列的两个或多个基因。 15、基因重叠:同一段核酸序列参与了不同基因编 码的现象。 16、单拷贝序列:单拷贝顺序在单倍体基因组中只出现一次,因而复性速度很慢。单 拷贝顺序中储存了巨大的遗传信息,编码各种不同功能的蛋白质。 17、低度重复序列:低度重复序列是指在基因组中含有2~10个拷贝的序列 18、中度重复序列:中度重复序列大致指在真核基因组中重复数十至数万(<105)次的重复顺序。其复性速度快于单拷贝顺序,但慢于高度重复顺序。 19、高度重复序列:基因组中有数千个到几百万个拷贝的DNA序列。这些重复序列 的长度为6~200碱基对。

现代分子生物学考研复习重点

现代分子生物学考研复习资料整理 第一章绪论 分子生物学:是研究核酸、蛋白质等所有生物大分子的形态、结构及其重要性、规律性和相互关系的科学 分子生物学的主要研究内容 1、DNA重组技术 2、基因表达调控研究 3、生物大分子的结构功能研究——结构分子生物学 4、基因组、功能基因组与生物信息学研究 5、DNA的复制转录和翻译 第二章染色体与DNA 半保留复制:DNA在复制过程中碱基间的氢键首先断裂,双螺旋解旋并被分开,每条链分别作为模板合成新链,产生互补的两条链。这样新形成的两个DNA分子与原来DNA分子的碱基顺序完全一样,因此,每个子代分子的一条链来自亲代DNA,另一条链则是新合成的,所以这种复制方式被称为DNA半保留复制 DNA半不连续复制:DNA双螺旋的两条链反向平行,复制时,前导链DNA的合成以5′-3′方向,随着亲本双链体的解开而连续进行复制;后随链在合成过程中,一段亲本DNA单链首先暴露出来,然后以与复制叉移动相反的方向、按照5′-3′方向合成一系列的冈崎片段,然后再把它们连接成完整的后随链,这种前导链的连续复制和后随链的不连续复制称为DNA 的半不连续复制 原核生物基因组结构特点:1、基因组很小,大多只有一条染色体2、结构简练3、存在转录单元,多顺反子4、有重叠基因 真核生物基因组的结构特点:1、真核基因组庞大,一般都远大于原核生物的基因组2、真核基因组存在大量的重复序列3、真核基因组的大部分为非编码序列,占整个基因组序列的90%以上,该特点是真核生物与细菌和病毒之间最主要区别4、真核基因组的转录产物为单顺反子5、真核基因是断裂基因,有内含子结构6、真核基因组存在大量的顺式作用元件,包括启动子、增强子,沉默子等7、真核基因组中存在大量的DNA多态性8、真核基因组具有端粒结构 DNA转座(移位)是由可移位因子介导的遗传物质重排现象 DNA转座的遗传学效应:1、转座引入插入突变2、转座产生新的基因3、转座产生的染色体畸变4、转座引起生物进化 转座子分为插入序列和复合型转座子两大类 环状DNA复制方式:θ型、滚环型和D-环型 第三章生物信息的传递(上)从DNA到RNA 转录:指拷贝出一条与DNA链序列完全相同的RNA单链的过程 启动子:是一段位于结构基因5′段上游区的DNA序列,能活化RNA聚合酶,使之与模板DNA准确地结合并具有转录起始的特异性 原核生物启动子结构:存在位于-10bp处的TATA区和-35bp处的TTGACA区,其是RNA聚合酶与启动子的结合位点,能与σ因子相互识别而具有很高的亲和力 终止子:是给予RNA聚合酶转录终止信号的DNA序列(促进转录终止的DNA序列) 终止子的类型:不依赖于ρ因子和依赖于ρ因子 增强子:能增强或促进转录起始的序列 增强子的特点:1、远距离效应2、无方向性3、顺式调节4、无物种和基因的特异性5、具

分子生物学问题汇总

Section A 细胞与大分子 简述复杂大分子的生物学功能及与人类健康的关系。 Section C 核酸的性质 1.DNA的超螺旋结构的特点有哪些? A 发生在闭环双链DNA分子上 B DNA双链轴线高卷曲,与简单的环状相比,连接数发生变化 C 当DNA扭曲方向与双螺旋方向相同时,DNA变得紧绷,为正超螺旋,反之变得松弛为负超螺旋。自然界几乎所有DNA分子超螺旋都为负的,因为能量最低。 2.简述核酸的性质。 A 核酸的稳定性:由于核酸中碱基对的疏水效应以及电荷偶极作用而趋于稳定 B 酸效应:在强酸和高温条件下,核酸完全水解,而在稀酸条件下,DNA的核苷键被选择性地断裂生成脱嘌呤核酸 C 碱效应:当PH超出生理范围时(7-8),碱基的互变异构态发生变化 D 化学变性:一些化学物质如尿素,甲酰胺能破坏DNA和RNA二级结构中的 而使核酸变性。 E 粘性:DNA的粘性是由其形态决定的,DNA分子细长,称为高轴比,可被机械力和超声波剪切而粘性下降。 F 浮力密度:1.7g/cm^3,因此可利用高浓度分子质量的盐溶液进行纯化和分析 G 紫外线吸收:核酸中的芳香族碱基在269nm 处有最大光吸收 H 减色性,热变性,复性。 思考题:提取细菌的质粒依据是核酸的哪些性质? 质粒是抗性基因,,在基因组或者质粒DNA中用碱提取法。 Sectio C 课前提问 1.在1.5mL的离心管中有500μL,取出10 μL稀释至1000 μL后进行检测,测得A260=0.15。 问(1):试管中的DNA浓度是多少? 问(2):如果测得A280=0.078, .A260/A280=?说明什么问题? (1)稀释前的浓度:0.15/20=0.0075 稀释后的浓度:0.0075/100=0.75ug/ml (2)0.15/0.078=1.92〉1.8,说明DNA中混有RNA样品。 2.解释以下两幅图

分子生物学终极复习资料汇总

《分子生物学》复习题 1、染色体:是指在细胞分裂期出现的一种能被碱性染料强烈染色,并具有一定 形态、结构特征的物体。携带很多基因的分离单位。只有在细胞分裂中才可见的形态单位。 2、染色质:是指细胞周期间期细胞核内由DNA、组蛋白、非组蛋白和少量RNA 组成的复合结构,因其易被碱性染料染色而得名。 3、核小体:染色质的基本结构亚基,由约200 bp的DNA和组蛋白八聚体所组 成 4、C值谬误:一个有机体的C值与它的编码能力缺乏相关性称为C值矛盾 5、半保留复制:由亲代DNA生成子代DNA时,每个新形成的子代DNA中, 一条链来自6、亲代DNA,而另一条链则是新合成的,这种复制方式称半保留复制 6、DNA重组技术又称基因工程,目的是将不同的DNA片段(如某个基因或基 因的一部分)按照人们的设计定向连接起来,在特定的受体细胞中与载体同时复制并得到表达,产生影响受体细胞的新的遗传性状。 7、半不连续复制:DNA复制时其中一条子链的合成是连续的,而另一条子链的 合成是不连续的,故称半不连续复制。 8、引发酶:此酶以DNA为模板合成一段RNA,这段RNA作为合成DNA的引 物(Primer)。实质是以DNA为模板的RNA聚合酶。 9、转坐子:存在与染色体DNA上可自主复制和位移的基本单位。 10、多顺反子:一种能作为两种或多种多肽链翻译模板的信使RNA,由DNA 链上的邻近顺反子所界定。 11、基因:产生一条多肽链或功能RNA所必需的全部核甘酸序列。 12、启动子:指能被RNA聚合酶识别、结合并启动基因转录的一段DNA序列。 13、增强子:能强化转录起始的序列 14、全酶:含有表达其基础酶活力所必需的5个亚基的酶蛋白复合物,拥有σ因子。 (即核心酶+σ因子) 15、核心酶:仅含有表达其基础酶活力所必需亚基的酶蛋白复合物,没有σ因子。 16、核酶:是一类具有催化功能的RNA分子 17、三元复合物:开放复合物与最初的两个NTP相结合,并在这两个核苷酸之间形成磷酸二酯键后,转变成包括RNA聚合酶,DNA和新生的RNA的三元复合物。 18、SD序列:mRNA中用于结合原核生物核糖体的序列。30S亚基通过其

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