《分子生物学》实验指导书
实验学时：32学时适用专业：生物科学、生物技术
实验目录
实验一质粒DNA的提取、酶切与电泳鉴定 (1)
实验二聚合酶链式反应扩增DNA片段 (3)
实验三大肠杆菌感受态细胞的制备与质粒DNA分子转化 (4)
实验四植物基因组DNA提取及电泳 (6)
实验五植物基因组R N A提取及电泳 (7)
实验一质粒DNA的提取、酶切与电泳鉴定
实验项目类型：综合性
一、实验目的
1. 学习质粒的相关基本知识，掌握碱裂解法提取质粒DNA的原理和方法。
2. 学习和掌握限制性内切酶的特性、掌握对重组质粒进行限制性内切酶酶切的原理和方法，并理解限制性内切酶是DNA重组技术的关键工具。
二、实验原理
碱裂解法提取质粒DNA的原理是根据共价闭合环状质粒DNA与线性染色体DNA的结构差异来实现分离的。在pH12-12.5时，线性DNA被彻底变性，但共价闭环质粒DNA虽然氢键也发生断裂，但两条互补链仍会紧密缠绕结合在一起。当在溶液体系中加入pH4.8的KAC时，溶液恢复中性，质粒DNA迅速复性，染色体DNA则由于变性而相互混乱缠绕，不能复性，从而离心即可以把
变性的染色体DNA沉淀和蛋白-SDS复合物沉淀分离出来。
三、实验仪器与材料
1. 材料：含pSV的E.coli JM109菌株、1.5ml塑料离心管、离心管架、EB、酚、氯仿、异丙醇、乙醇、琼脂糖、吸头等。
2. 溶液或试剂：LB培养基、溶液Ⅰ、溶液II（0.4mol/L NaOH、2%SDS用前等体积混合）、溶液Ⅲ、分离液：酚/氯仿/异戊醇＝25:24:1、无水乙醇、70%乙醇等。
3. 仪器或其他用具：微量移液器(20μl,200μl,1000μl)、恒温振荡摇床、高压蒸汽灭菌锅、涡旋振荡器、琼脂糖凝胶电泳系统、凝胶成像系统、恒温培养箱、制冰机等。
四、操作步骤
质粒DNA的提取步骤：
1. 用灭菌的牙签挑取白色单菌落接种于另外已制备好的LB琼脂平板上，保存菌种，并把牙签放入盛3 ml LB液体培养基的试管中，37℃振荡培养过夜。
2. 将1.5 ml菌液倒入EP管中，7,000 rpm离心2 min。
3. 去掉上清液，沉淀悬于100 μl Solution I 中,室温放置10 min。
4. 加入200 μl Solution II, 混匀，冰浴5 min。
5. 加入150 μl Solution III（冰上预冷）, 混匀，冰浴5 min。
6. 12,000 rpm离心10min，将上清转至另一离心管中。
7. 向上清中加入等体积氯仿（去蛋白），反复混匀，12,000 rpm离心5min，将上清转移到另一个离心管中。
8. 向上清液中加入预冷的2体积无水乙醇，混匀后，室温放置5~10min。1 2,000 rpm离心5min，倒去上清，把离心管倒扣在吸收纸上，吸干液体。
9. 用1ml 70%乙醇洗涤质粒DNA沉淀，倒去上清，空气中干燥。
10. 加20μl TE缓冲液, 使DNA完全溶解，-20℃保存。
11.电泳检测质粒,在10 μl反应体系中加入8μl质粒DNA，2 μl 10×Loadin
g Buffer, 1%琼脂糖电泳(5V/cm) 检测。
酶切：配制如下体系，37℃酶切质粒3 h后，电泳检测酶切结果。
10×K 1μL质粒DNA 1μL EcoRⅠ/BamHⅠ1μL 无菌水7μL
五、实验报告
绘出质粒DNA电泳图、酶切电泳图
六、思考题
酶液中甘油的用途是什么？
实验二聚合酶链式反应扩增DNA片段
一、实验目的
通过实验学习PCR反应的基本原理与实验技术。
二、实验原理
聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)，是一种在体外快速扩增特定基因或DNA序列的方法，故又称为基因的体外扩增法。在待扩增的DNA片断两侧和与其两侧互补的两个寡核苷酸引物，经变性、退火和延伸若干个循环后，DNA扩增2n倍。
三、实验仪器与材料
1. 材料：0.2mlPCR管、离心管架、EB、琼脂糖、吸头等。
2. 溶液或试剂：DNA模板、种dNTP、物1、引物2、Taq酶、DNA相对分子质量标准物等。
3. 其他用具：微量移液器(20μl,200μl,1000μl)、高压蒸汽灭菌锅、琼脂糖凝胶电泳系统、凝胶成像系统、制冰机、PCR仪等。
四、操作步骤
1. 在0.2ml RCR管内配制25ul反应体系：
质粒DNA 1μl 10×buffer 2.5 μl MgCI2 1.5μl dNTP 2μl 引物1 1μl 引物2 1μl Taq酶1μl 无菌水15μl。
2. 在下列条件下进行扩大增
（1）94℃变性3min
（2）94℃变性30S
（3）55 ℃退火30S
（4）72 ℃延伸30S
（5）重复2-4共25次
（6）72 ℃延伸10min
3. 扩增后，电泳检测PCR结果
五、实验报告
绘出PCR电泳图
六、思考题
PCR的原理是什么？
实验三大肠杆菌感受态细胞的制备与质粒DNA分子转化
一、实验目的
1. 学会CaCl2法制备大肠杆菌感受态细胞。
2. 学会质粒DNA转化感受态受体菌的技术。
二、实验原理
将处于对数生长期的细菌置入0℃的CaCl2低渗溶液中，使细胞膨胀，同时Ca2+使细胞膜磷脂层形成液晶结构，使得位于外膜与内膜间隙中的部分核酸酶离开所在区域，这就构成了大肠杆菌人工诱导的感受态；此时加入DNA，Ca2+又与DNA结合形成抗DNase的羟基-磷酸钙复合物，并粘附在细菌细胞膜的外表面上；经短暂的42℃热脉冲处理后，细菌细胞膜的液晶结构发生剧烈扰动，随之出现许多间隙，致使通透性增加，DNA分子便趁机进入细胞内。
三、实验仪器与材料
1. 材料：0.2mlPCR管、离心管架、EB、琼脂糖、吸头等。
2. 溶液或试剂：DNA模板、种dNTP、物1、引物2、Taq酶、DNA相对分子质量标准物等。
3. 其他用具：微量移液器(20μl,200μl,1000μl)、高压蒸汽灭菌锅、琼脂糖凝胶电泳系统、凝胶成像系统、制冰机、PCR仪等。
四、操作步骤
1. 从大肠杆菌DH5α平板上挑取一个单菌落接于2ml LB液体培养基的试管中，37度振荡培养过夜。
2. 取0.5ml菌液转接到一个含有50mL LB 液体培养基锥形瓶中，37度振荡培养2-3小时。
3. 将菌液转移到1.5 mLEP 中，冰上放置10min。
4. 离心10min（4000r/min），回收细胞。
5. 倒出培养液，将管倒置1min,使培养液流尽。
6.用冰冷的0.1mol/LCaCl2 300μL悬浮沉淀，立即放在冰上保温30 Min。
7.离心10min（4000r/min），回收细胞。
8. 用冰冷的0.1mol/LCaCl2 50μL悬浮细胞（放在冰上）。
9. 取50μL新配制的感受态细胞，加入质粒DNA 2μL混匀，冰上放置
30Min。
同时做两个对照：
受体菌对照：50μL感受态细胞+2μL无菌水
质粒对照：50μL0.1mol/LCaCl2溶液+2μL质粒DNA
10. 将管放到42度循环水浴1-2min。
11. 冰浴2min。
12. 每管加200μL LB 液体培养基，37度培养45min。
13. 将250μL转化的感受态细胞涂布在含氨苄青霉素（100μg/mL）的培养皿中。
14. 倒置平皿37度培养12~16H，出现菌落。
五、实验报告
绘出质粒DNA分子转化结果图
六、思考题
1．感受态细胞的制备原理？
2．影响转化率的因素有哪些？
实验四植物基因组DNA提取及电泳
一、实验目的
1．熟悉常用仪器。
2．学习、掌握植物基因组DNA提取原理、方法和DNA质量检测技术。二、实验原理
用液氮研磨植物组织，从而破碎细胞；细胞提取液中的SDS溶解膜蛋白而破坏细胞膜，并使蛋白质变性沉淀下来。EDTA抑制DNA酶的活性。再用酚和氯仿抽提的方法去除蛋白质，得到的DNA溶液用乙醇沉淀。
三、实验仪器与材料
1. 材料：Tris,EDTA,KCl,SDS,NaCl,EB，酚，氯仿，异丙醇，β巯基乙醇，乙醇，琼脂糖，50ml离心管，研钵、研杵，吸头，液氮，一次性手套，棉手套等。
2. 溶液或试剂：细胞提取液，5 mol/L KCl，TE等。
3. 其他用具：微量移液器(20μl,200μl,1000μl)、高低温离心机，台式离心机，琼脂糖凝胶电泳系统，凝胶成像系统，恒温金属浴等。
四、操作步骤
1. 取2g新鲜菠菜叶片，在液氮中研磨成粉末状(越细越好)。将粉末移到50 ml离心管中。
2. 加入16 mL细胞提取液，充分混匀，65℃水浴保温20min。
3. 从水浴锅中取出离心管，加入5 mL 5 mol/L的KCl溶液，混匀水浴20min。
4. 4000rpm/min离心20 min。（以上每小组做一管，以下步骤中每人做一小管）
5. 将上清液转移到1.5 mL的离心管中。
6. 加入等体积酚/氯仿混匀，12000 r/min离心5 min，取上清。
7. 加入等体积氯仿混匀，12000 r/min离心5 min，取上清。
8. 加入0.6-1倍体积的异丙醇（沉淀DNA），混匀。
9. 离心，去上清，获得沉淀，用70％乙醇洗涤沉淀3次，风干沉淀。
10. 加入500 uL TE缓冲液，溶解DNA。
11. 取3 uL 上清液，用琼脂糖凝胶电泳检测DNA。
五、实验报告
绘出琼脂糖凝胶电泳检测DNA图
六、思考题
1.SDS、液氮、异丙醇、氯仿等分别有什么作用？
实验五植物RNA的提取及电泳
一、实验目的
1. 学习植物总RNA的提取方法和RNA的琼脂糖凝胶检测。
2. 掌握RNA提取原理、方法和RNA质量检测技术。
二、实验原理
用液氮研磨植物组织，高浓度强变性剂异硫氰酸胍可溶解蛋白质、破坏细胞结构，使核蛋白与核酸分离，失活RNA酶。细胞裂解后，DNA、蛋白质和细胞碎片等可通过酚、氯仿等去除，得到总RNA。
三、实验仪器与材料
1. 材料：DEPC，NaAc,LiCl,MOPS,EDTA,异硫氰酸胍，氯仿，酚，乙醇，琼脂糖，50ml离心管，研钵、研杵，吸头，液氮，一次性手套，棉手套，甲醛等。
2. 溶液或试剂：4mol/L异硫氰酸胍；2mol/L NaAc（pH4.8）；4mol/L LiCl；3mol/L NaAc（pH5.0）；以上溶液用DEPC处理过的水配制。0.1% DEPC水；5×电泳缓冲液；变性琼脂糖凝等。
3. 其他用具：低温离心机，台式离心机，琼脂糖凝胶电泳系统，凝胶成像系统，制冰机，水浴锅，灭菌锅等。
四、操作步骤
1. 取2g新鲜菠菜叶片，在液氮中研磨成粉末状，将粉末移到50 ml离心管中。
2. 依次加入以下溶液，混匀：异硫氰酸胍溶液 4 mL 苯酚3mL
NaAc（pH4.8）0.3mL 氯仿0.6 mL
3. 冰浴30min后，8000rpm离心13 min。（以上每小组做一管，以下步骤中每人做一小管）
4. 弃沉淀，将上清液400 uL转移到1.5 mL的离心管中。
5. 加入2倍体积的无水乙醇，-20℃放置1h。
6. 4℃，8000 r/min离心13 min，弃上清。
7. 在沉淀中加入1mL LiCl溶液，使溶解，冰浴2h。
8. 13000 r/min离心15 min，弃上清。
9. 在沉淀中加入400 uL DEPC-H2O，再加入400 uL氯仿，混匀（去蛋白）。
10. 13000 r/min离心6 min，取上清，加入0.1倍体积NaAc（pH5.0），2倍体积无水乙醇，-20℃放置0.5h。
11. 13000 r/min离心13 min，弃上清。
12. 将沉淀RNA 用70％乙醇洗涤3次，风干沉淀。
13. 加入100 uL DEPC水溶解RNA。
14. 用琼脂糖凝胶电泳检测RNA。
五、实验报告
绘出琼脂糖凝胶电泳检测RNA图
六、思考题
1. 异硫氰酸胍、LiCl和DEPC等分别有什么作用？
前言 一、组织学与胚胎学实习的目的 实习的目的在于把讲课所学的基本理论与实习标本互相印证，以加深和巩固对理论部分的理解，并通过实习过程培养学生正确的科学作风及基本技术操作，逐步达到独立使用光学显微镜进行观察切片的能力，从而提高独立思考和分析综合的水平，为其他医学课程打下一定的形态学基础。 二、实习的要求 组织学实习主要是以自学为主，进行独立操作的原则，教师只是在实习方法和具体内容上予以指导，为此对参加实习的同学提出以下要求： 1.按时上下课，不得迟到、早退、遵守课堂纪律，穿白大衣。 2.实习前预习“实习指导”，实习时按要求认真观察。 3.用学生证，从显微镜室领取显微镜使用，并填好使用记录本中各项内容。 4.实习时要爱护显微镜及标本，损坏者要求及时报告，并给以赔偿。 5.固定座位，不得随意调动。实习桌少放物件，保持充分的工作空间。 6.班长负责从实验准备室借出切片标本，结束后如数归还。 7.组织学实习的绘图方法，为了加深认识和理解，应掌握绘图显示，镜下观察到的细胞，组织和器官的组织结构并注字。 工具：红蓝彩色铅笔与黑色铅笔各一支，将图画在实验报告纸上。 方法： 1.按照显微示教照片，选择典型。 2.确定画面 3.构画草图 4.着色注字，红色嗜酸性结构，蓝色示嗜碱性结构，黑色铅笔注字。 5.绘图顺序：画管状器官时，应从腔面向外侧画，画实质性器官，应从表面向内部画。 6.在图的左上角，应注明标本名称、取材与染色方法 三、观察切片标本的注意事项 在显微镜下所观察到的形态结构，与理论上所理解不一致时，应从以下几个方面考虑： 1.有机体生活时，机能状态不同：如腺细胞充满分泌物和完全排出后的形态不同，由柱状可以变为扁平或立方。 2.立体和平面，全面与局部和关系： 我们观察的标本是组织，器官的局部一个切面，不同的断面，应仔细体会把切面内容有机联系起来，建立整体观念。 3.在切片制作的过程中常见有以下几种人为现象： （1）组织的收缩现象：制作切片过程中，应用各种化学药品处理组织，可引起组织的收缩，所以在切片中，常看到一部分组织与另一部分组织分离，或看到细胞与周围有较大的空隙。（2）组织死后变化：动物死亡时间较长，或取材时刀不锋利，使组织受损，组织出现死后变化，在切片中看到细胞结构模糊不清，核固缩等情况。 （3）组织皱褶现象：石蜡切片很薄，在粘片时易皱褶没有展平，经染色后，皱褶处是染色深而厚的一条。 （4）固定液未洗尽，有时存异物，或染色液的渣子。 （5）刀痕，切片刀有缺口，使被切的组织出现直线样空白。
生物质压缩成型技术 1 压缩成型原理 生物质主要有纤维素、半纤维素和木质素组成。木质素为光合作用形成的天然聚合体，具有复杂的三维结构，属于高分子化合物，它在植物中的含量一般为15%~30%。木质素不是晶体，没有熔点但有软化点，当温度为70-110℃时开始软化，木质素有一定的黏度；在200-300℃呈熔融状、黏度高，此时施加一定的压力，增强分子间的内聚力，可将它与纤维素紧密粘接并与相邻颗粒互相黏结，使植物体变得致密均匀，体积大幅度减少，密度显著增加，当取消外部压力后，由于非弹性的纤维分子之间相互缠绕，一般不能恢复原来的结构和形状。在冷却以后强度增加，成为成型燃料。压缩时如果对生物质原料进行加热，有利于减少成型时的挤压力。 对于木质素含量较低的原料，在压缩成型过程中，可掺入少量的黏结剂，使成型燃料保持给定形状。当加入黏结剂时，原料颗粒表面会形成吸附层，颗粒之间产生引力，使生物质粒子之间形成连锁的结构。这种成型方法所需的压力较小，可供选择的黏结剂包括黏土、淀粉、糖蜜、植物油和造纸黑液等。 2 压缩成型生产工艺 压缩成型技术按生产工艺分为黏结成型、压缩颗粒燃料和热压缩成型工艺，可制成棒状、块状、颗粒状等各种成型燃料。 生物质—-干燥—-粉碎—-调湿—-成型—-冷却—-成型燃料 主要操作步骤如下： （1）干燥 生物质的含水率在20%-40%之间，一般通过滚筒干燥机进行烘干，将原料
的含水率降低至8%-10%。如果原料太干，压缩过程中颗粒表面的炭化和龟裂有可能会引起自燃；而原料水分过高时，加热过程中产生的水蒸气就不能顺利排出，会增加体积，降低机械强度。 （2）粉碎 木屑及稻壳等原料的粒度较小，经筛选后可直接使用。而秸秆类原料则需通过粉碎机进行粉碎处理，通常使用锤片式粉碎机，粉碎的粒度由成型燃料的尺寸和成型工艺所决定。 （3）调湿 加入一定量的水分后，可以使原料表面覆盖薄薄的一层液体，增加黏结力，便于压缩成型。 （4）成型 生物质通过压缩成型，一般不使用添加剂，此时木质素充当了黏合剂。生物质压缩成型的设备一般分为螺旋挤压式、活塞冲压式和换模滚压成型。 螺旋挤压机源于日本，是目前国内比较常见的技术，生产的成型燃料为棒状，直径50-70mm。将已经粉碎的生物质通过螺旋推进器连续不断推向锥形成型筒的前端，挤压成型。因为生产过程是连续进行的，所以成型燃料的质量比较均匀，外表面在挤压过程中发生炭化，容易点燃。但是，由于螺杆处在较高温度和压力下工作，螺杆与物料始终处于摩擦状态，导致压缩区螺纹的磨损非常严重。当螺杆磨损到一定程度，螺杆与出料筒失去尺寸配合，原料就无法完成成型。因此，压缩区螺纹的磨损决定了螺杆的使用寿命，螺杆使用寿命成为生物质压缩成型技术实用化决定性因素。对螺杆磨损，由于受工艺技术的制约，目前没有从根本上解决问题，平均寿命仅为60-80h。
细胞生物学实验 实验一不同显微镜的使用及细胞一般形态结构的观测[实验目的] 通过本实验，使学生巩固普通光学显微镜的使用，学习相差显微镜、暗视野显微镜和荧光显微镜的使用方法，学习显微测量及显微摄影的操作方法，增强对细胞的形态和真实大小的感性认识。 通过本实验操作，要求学生掌握细胞形态结构的基本观测方法与技术，为进一步的细胞生物学研究打好基础。 [实验原理] 应用显微镜的成像原理(详见翟中和等主编《细胞生物学》，第三章第一节)，同时借助显微镜的镜台测微尺和目镜测微尺，两尺配合使用，进行测量和运算，观察细胞形态，得出细胞的大小。 该实验完成需时6学时。 [实验材料、试剂和仪器] 一、仪器 普通光学显微镜、相差显微镜、暗视野显微镜、荧光显微镜、显微拍摄系统、37℃温箱、镜台测微尺、目镜测微尺等。 二、材料 洋葱根尖切片标本，念珠藻永久装片，兔肝细胞标本，夹竹桃花丝毛细胞，人口腔上皮细胞等。 三、试剂 生理盐水，10μg/mL罗丹明123染液（溶于甲醇，避光于4℃保存） [实验步骤] 一、暗视野显微镜观察夹竹桃花丝毛细胞 1、取一张清洁的载玻片，滴上一滴生理盐水。用镊子轻轻夹下一根夹竹桃花丝，置生理盐水中，盖上盖玻片，略微压片，用滤纸条吸去盖玻片四周多余的水分。 2、将上述装片置于显微镜载物台上，在10×物镜下找到夹竹桃花丝毛细胞清晰的图像。 3、换上暗视野聚光器，调节至最佳位置，通过聚光器上的调中螺旋调节聚光器的中心位置，得到最好的暗视野图像效果。 4、观察夹竹桃花丝毛细胞内部的显微结构和细胞质环流现象，并拍照。 5、换用高倍物镜观察时，要换用与高倍镜相匹配的暗视野聚光器，重复以上调节步骤。 二、相差显微镜观察夹竹桃花丝毛细胞 1、取一张清洁的载玻片，滴上一滴生理盐水。用镊子轻轻夹下一根夹竹桃花丝，置生
组织学与胚胎学 实验报告 专业班级 学号姓名 教师实验室 遵义医学院组织胚胎学教研室
目录 前言 (2) 实验一显微镜的正确使用和维护 上皮组织、固有结缔组织 (3) 实验二软骨与骨、血液 (7) 实验三肌组织、神经组织 (10) 实验四循环系统、免疫系统 (13) 实验五内分泌系统、眼和耳※ (17) 实验六消化系统 (20) 实验七呼吸系统、泌尿系统 (24) 实验八生殖系统、皮肤 (28) 实验九胚胎学总论 (31) ※实验十心脏发生 (34) ※为护理学、药剂、药检、影像医学等专业免修内容
前言 （一）书写实验报告，是组织学和胚胎学实验课教学的重要内容，也是对学生进行能力训练的基本手段。为了帮助学生了解、掌握组织学和胚胎学实验报告的规范式书写要求，克服过去使用单页实验报告纸易丢失、难保存、考核内容单一等缺点，我们根据《组织学和胚胎学实验教学大纲》的要求，帮助学生掌握人体细微结构和人胚发育的基本理论、基本知识及相应的基本技能，开发学生的智力，培养和训练学生独立观察、独立思考和独立工作的能力，提高学生分析问题和解决问题的能力。通过实验报告使用，希望能对本课程的学习起到积极作用。 （二）绘图是组织学实验的重要环节，认真观察组织切片后，准确绘出简图，加深对组织结构的理解，便于复习记忆，绘图时要注意各部结构之间的大小比例关系，一般用红、兰铅笔描绘常规染色的结构，用红色描绘嗜酸性结构，如：细胞质和纤维；用兰色描绘嗜碱性结构：如细胞核。注意色调的深浅，笔道均匀，正确反映镜下的结构特点，图中注字要规整；引线要平行、对齐；最后在图下注明标本名称、染色方法和放大倍数。 （三）每次课实验报告要求在课内完成，下课前交实验指导教师批改。本实验报告是评定学生平时成绩的重要依据，请同学们妥善保管，期末统一收回给予评分。 （四）本实验报告可供我院各专业本、专科医学生及研究生学习组织学和胚胎学实验课时选用，以训练和培养学生对实验内容的分析、整理、综合、归纳的能力，为今后的学习和科学研究，书写科研论文打下一定的基础。 （五）组织学与胚胎学考分比例：实验部分：35 % 理论部分：65% 2006年8月
名词解释 1）环境生物学：是研究生物与受人类干扰的环境之间的相互作用规律及其机理的科学，是环境科学的一个分支科学。 2）环境污染：是指有害物质或因子进入环境，并在环境中扩散、迁移、转化，使环境系统结构与功能发生变化对人类以及其他生物的生存和发展产生不利影响的现象。 3）优先污染物：在众多污染物中筛选出潜在危险大的作为优先研究和控制对象，称之为优先污染物。 4）污染物的生物地球化学循环：就是生物的合成作用和矿化作用所引起的污染物周而复始的循环运动过程。 5）生物运转：是指环境污染物经各种途径和方式同生物机体接触而被吸收、分布和排泄等过程的总称。 6）生物浓缩：是指生物机体或处于同一营养级上的许多生物种群从周围环境中蓄积某种元素或难以分解的化合物，是生物体内该物质的浓度超过环境中的浓度的现象，又称生物学浓缩，生物学富集。 7）生物积累：是指生物在其整个代谢活跃期通过吸收、吸附、吞噬等各种过程，从周围环境中蓄积某种元素或难以分解的化合物，以至随着生长发育，浓缩系数不断增大的现象，又称生物学积累。 8）生物放大：指在生态系统中，由于高营养级生物以低营养及生物为食物，某种元素或难分解的化合物在生物机体中的浓度随着营养级的提高而逐步增大的现象，又称生物学放大。 9）靶器官：污染物进入机体后，对各器官并不产生同样的毒作用，而只对部分器官产生直接毒作用，这些器官称为靶器官。 10）生物测试：指系统的利用生物的反应测定一种或多种污染物或环境因素单独或联合存在时，所导致的影响或危害。 11）毒性：是指有毒物质接触或进入机体后，引起生物体的易感部位产生有害作用的能力。 12）最大无作用剂量：指化学物在一定时间内，按一定方式与机体接触，按一定的检测方法或观察指标，不能观察到任何损害作用的最高剂量。 13）最小有作用剂量：是指能使机体发生某种异常变化所需的最小剂量，即能使机体开始出现毒性反应的最低剂量。 14）急性毒性试验：是研究化学物质大剂量一次染毒或24小时内多次染毒动物所引起的毒性试验。其目的是在短期内了解该物质的毒性大小和特点，并为进一步开展其他毒性试验提供设计依据。 15）亚慢性毒性试验：是在相当于生物周期1-30——1-20时间内使动物每日或反复多次受试物的毒性试验。其目的是为进一步对受试物的主要毒作用、靶器官和最大无作用剂量或中毒阈剂量作出评估。 16）慢性毒性试验：是指以低剂量外来化合物，长期与实验动物接触，观察其对试验动物所产生的生物学效应的实验。通过慢性毒性试验，可确定最大无作用剂量，为制定人体每日允许摄入量和最高容许浓度提供毒理学依据。17）蓄积毒性试验：低于中毒阈剂量的外来化合物，反复多次的与机体持续接触，经一定时间后使机体出现明显的中毒表现，即为蓄积毒性试验。 18）BOD：是指在20摄氏度条件下，微生物好氧分解水样（废水或受污染
生物质热解技术 按温度，升温速率，固定停留时间（反应时间）和颗粒大小等实验条件可将热解分为炭化（慢热解），快速热解和气化。由于液体产物的诸多优点和随之而来的人们对其研究兴趣的日益高涨，对液体产物收率相对较高的快速热解技术的研究和应用越来越受到人们的重视。快速热解过程在几秒或更短的时间内完成。所以，化学反应，传热传质以及相变现象都起重要作用。关键问题是使生物质颗粒只在极短的时间内处于较低温度（此种低温利于生成焦炭），然后一直处于热解过程最优温度。要达到此目的的一种方法是使用小生物质颗粒（应用于流化床反应器），另一种方法是通过热源直接与生物质颗粒表面接触达到快速传热（这一方法应用于生物质烧蚀热解技术中）。由众多实验研究得知，较低的加热温度和较长气体停留时间会有利于炭的生成，高温和较长停留时间会增加生物质转化为气体的量，中温和短停留时间对液体产物增加最有利。 秸秆发电商品化前景分析 解决浪费性生物质能资源的唯一出路在于商品化。生物质能秸秆发电技术，不仅为农村提供更多电力，更有意义的是将使生物质能资源的商品化成为可能，一方面农民可通过出售秸秆获得更多的收入；另一方面过去农村使用直接燃烧秸秆的方式进行炊事，要为秸秆的收集、运输、储存以及在直接燃烧时花费大量的时间和劳力。如果能使用秸秆发电，农村使用更多的商品能源，农民将获得更多的时间从事生产性劳动，以尽早脱贫致富。因此，将秸秆发电进行能源方式转化，是一件利国利民的好事。 1 生物质能秸秆发电的工艺流程 农作物秸秆在很久以前就开始作为燃料，直至1973年第一次石油危机时丹麦开始研究利用秸秆作为发电燃料。在这个领域丹麦BWE公司是世界领先者，第一家秸秆燃烧发电厂于1998年投入运行(Haslev，5Mw)。此后，BWE公司在西欧设计并建造了大量的生物发电厂，其中最大的发电厂是英国的Elyan发电厂，装机容量为38Mw。 1.1 秸秆的处理、输送和燃烧 发电厂内建设两个独立的秸秆仓库。每个仓库都有大门，运输货车可从大门驶入，然后停在地磅上称重，秸秆同时要测试含水量。任何一包秸秆的含水量超过25％，则为不合格。在欧洲的发电厂中，这项测试由安装在自动起重机上的红外传感器来实现。在国内，可以手动将探测器插入每一个秸秆捆中测试水分，该探测器能存储99组测量值，测量完所有秸秆捆之后，测量结果可以存入连接至地磅的计算机。然后使用叉车卸货，并将运输货车的空车重量输入计算机。计算机可根据前后的重量以及含水量计算出秸秆的净重。 货车卸货时，叉车将秸秆包放入预先确定的位置；在仓库的另一端，叉车将秸秆包放在进料输送机上；进料输送机有一个缓冲台，可保艚崭?分钟；秸秆从进料台通过带密封闸门(防火)的进料输送机传送至进料系统；秸秆包被推压到两个立式螺杆上，通过螺杆的旋转扯碎秸秆，然后将秸秆传
细胞生物学实验指导 细胞生物学的发展总是依赖于技术和实验手段的进步,所以学习细胞生物学的技术和方法至关重要。 实验一普通显微镜及其使用（装片观察） 一、目的要求： 1、掌握显微镜的构造、油浸系的原理、使用方法、保护要点。 2、参观了解其他各类显微镜。 二、材料：普通光学显微镜及其他显微镜、细菌标本片、香柏油、二甲苯、擦镜纸。 三、方法和步骤： 1、介绍普通光学显微镜的构造 机械部分：镜座、镜臂、镜筒、转换器、载物台、调焦螺旋。 光学部分：接目镜、物镜、反光镜、聚光器。 2、油镜的原理及使用方法 原理：油镜头的晶片细小，进入镜中的光线亦少，光线经聚光器，通过载玻片进油镜时，由于空气介质和玻璃介质的折射率不一样，光线因折射而损失，使视野更暗。在载玻片和油镜之间加上和玻璃折光系数相同的香柏油，光线直接进入镜头，不发生折射，视野明亮，便于观察。 3、如何维护显微镜：机械部分的维护，光学部分的维护。 4、注意事项： （1）观察油镜载片时，先在载片上有菌影的地方滴1-2滴香柏油，然后放载物台中央，眼侧面看，慢慢降低油镜浸入香柏油中，镜头几乎接触标本。再用左眼在接目镜观察，同时慢慢旋动粗螺旋提起镜筒至能模糊看到物象时，再转动微调螺旋，直至看清晰为止。注意镜头离开油，就不能看清，重新按刚才的步骤进行。 （2）油镜使用过后，立即用擦镜纸擦拭镜头，如油渍已干，则可用香柏油粘二甲苯擦拭镜
头，再用干净擦镜纸擦去二甲苯。 5、观察几种细菌标本片。 6、示教看相差显微镜和荧光显微镜。 四、作业及思考题： 1、油镜的原理是什么？ 2、光线强弱如何调节？与哪些部件有关？ 实验二、细胞膜的渗透性 实验目的 了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度。 实验原理 将红细胞放入数种等渗溶液中，由于红细胞对各种溶质的透性不同，有的溶质可以渗入，有的不能渗入，渗入的溶质能够提高红细胞的渗透压，所以促使水分进入细胞，引起溶血，由于溶质透入速度互不相同，因此溶血时间也不相同。 实验用品 一、器材 50ml烧杯, 试管（1～10cm）, 10ml移液管, 试管架。 二、材料 羊血。 三、试剂0.17mol/L氯化钠，0.17mol/L氯化胺，0.17mol/L醋酸胺，0.17mol/L硝酸钠，0.12mol/草酸胺，0.12mol/硫酸钠，0.32mol/葡萄糖，0.32mol/甘油，0.32mol/乙醇，0.32mol/丙酮。 实验方法 一、羊血细胞悬液 取50ml小烧杯一个，加1份羊血和10份0.17mol/L氯化钠，形成一种不透 明的红色液体，此即稀释的羊血。
第一版，大家先认识一下，回来给你们备注。这些都是最具特征的图，仔细看。 睾丸 卵巢
食管胃
十二指肠低倍镜：管壁由内向外分别为黏膜层、黏膜下层、肌层、浆膜。
胰 岛 胰脏低倍镜：被结缔组织分隔成许多小叶，每个小叶内有许多深染为紫红色的腺泡，其间染色淡部分为胰岛。高倍镜：腺泡由锥状细胞构成，胞核圆，位于细胞中央偏底部。细胞游离端浅紫红色，基底部深紫色。 肾低倍镜：结缔组织被膜、皮质、髓质。皮质有肾小体、近曲小管、远曲小管。肾小体呈球形，染成紫红色；近曲小管染成红色，管径较大；远曲小管染色较浅，管径较小。髓放线：紫红色，髓质伸向皮质的直行肾小管。
高倍镜：肾小体：肾小球，一团动脉毛细血管球，可见稍粗入球小动脉和稍细出球小动脉。肾小囊壁层为单层扁平上皮，紧贴肾小球不易区分。脏层和壁层之间腔隙为肾小囊腔。近曲小管：深红色，管壁上皮细胞呈锥状，细胞间界限不清。胞核大而圆，多位于基底部。细胞游离端有刷状缘，管腔小而不规则。远曲小管：胞质染色淡，呈立方形或低柱状，细胞分界清楚，核圆位于中央，管腔大。球旁复合体：位于肾小体血管极，在入球和出球微动脉之间，包括：致密斑（椭圆形斑，细胞染色浅，核椭圆形，排列紧密）、球外系膜细胞、球旁细胞（胞体大，立方或多边形，核大而圆或卵圆，着色浅。胞质弱嗜碱性。）。髓质：细段：扁平上皮。3-4个细胞围成的管腔。集合管：立方上皮移行为柱状上皮，细胞界限清楚，胞质染色淡，核圆形，居中。乳头管：复层柱状上皮。 肝脏
肝脏低倍镜：肝小叶：多角形小叶。中央静脉：小叶中央管腔。肝细胞索：以中央静脉为中心放射状排列，呈索状。肝血窦：肝细胞索之间的不规则腔隙。门管区（相邻几个肝小叶间的结缔组织中）：小叶间动脉（管腔小而圆，管壁厚）、小叶间静脉（管腔大而不规则，管壁薄）、小叶间胆管（管腔小而圆，单层立方上皮，胞核圆）。高倍镜：肝细胞：多角形，核大而圆，有的为双核。贴近肝细胞的扁平上皮细胞、多突起或呈梭形的枯否氏细胞。 肺脏
一、名词解释： 1.优先污染物P26 ：在众多的污染物中筛选出的潜在危险大的作为优先研究和控制对象的污染物，称之为优先污染物或称为优先控制污染物。 2.污染物的迁移P28：指污染物在环境中发生的空间位置的移动及其引起的富集、分散和消失的过程。 3.生物污染P59：生物污染是指对人和生物有害的微生物、寄生虫等病原体和变应原等污染水、气、土壤和食品，影响生物产量和质量，危害人类健康，这种污染称为生物污染。 4.环境激素P87：环境中存在一些天然物质或人工合成的环境污染物具有动物和人体激素的活性，这些物质能干扰和破坏野生动物和人体内分泌功能，导致野生动物繁殖障碍，甚至能诱发人类重大疾病。这些物质被称为环境激素，或外源性雌激素，或环境内分泌干扰物。 5.生物迁移P29：污染物通过生物的吸收、代谢、生长、死亡等过程所实现的迁移，是一种非常复杂的迁移形式。 6.污染物的转化P34：污染物在环境中通过物理、化学或生物的作用改变形态或转变成另一种物质的过程称为污染物的转化。 7.生物转化P43：生物转化指外源化合物进入生物机体后在有关酶系统的催化作用下的代谢变化过程。 8.生物转运P38：是指环境污染物经各种途径和方式同生物机体接触而被吸收、分布和排泄等过程的总称。 9.生物浓缩P51：指生物机体或处于同一营养级上的许多生物种群，从周围环境中蓄积某种元素或难分解化合物，使生物体内该物质的浓度超过环境中的浓度的现象，又称生物学浓缩，生物学富集。 ! 10.生物积累P51：指生物在其整个代谢活跃期间通过吸收、吸附、吞食等各种过程，从周围环境中蓄积某些元素或难分解化合物，以致随着生长发育，浓缩系数不断增大的现象，又称生物学积累。 11.生物放大P52：指在生态系统中，由于高营养级生物以低营养级生物为食物，某种元素或难分解化合物在生物机体中浓度随营养级的提高而逐步增大的现象，又称为生物学放大。 12.生物测试P95：指系统地利用生物的反应测定一种或多种污染物或环境因素单独或联合存在时所导致的影响或危害。 13.半数致死浓度（LC50）P100：指能引起一群动物的50%死亡的最低剂量或浓度。 14.半数效应浓度（EC50）P101：指引起50%受试生物的某种效应变化的浓度。通常指非死亡效应。 15.剂量—效应（反应）关系P100： 剂量-效应关系：不同剂量的化学物质在个体或群体中表现来的量效应大小之间的关系。 剂量-反应关系：不同剂量的化学物质与其引起的质效应发生率之间的关系 16.生物监测P140：生物监测是利用生物个体、种群或群落对环境污染或变化所产生的反应阐明环境污染状况，从生物学角度为环境质量的监测和评价提供依据。 17.指示生物P157：指示生物是指环境中对某些物质（包括进入环境中的污染物）能产生各种反应或信息而被用来监测和评价环境的现状和变化的生物。（不考） \ 18.环境生物技术P306：就是应用于认识和解决环境问题过程的生物技术体系，包括对环境污染效应的认识、环境质量评价和环境污染的生物处理技术等。 19.生物强化技术P333：生物强化技术（Bioaugmentation）或生物增强技术就是为了提高废水处理系统的处理能力，而向该系统中投加从自然界中筛选的优势种群并通过基因组合技术
第十章生物质热解技术 1 概述 热化学转化技术包括燃烧、气化、热解以及直接液化，转化技术与产物的相互关系见图10-1。热化学转化技术初级产物可以是某种形式的能量携带物，如，木炭（固态）、生物油（液态）或生物质燃气（气态），或者是能量。这些产物可以被不同的实用技术所使用，也可通过附加过程将其转化为二次能源加以利用。 图10-1 热化学转化技术与产物的相互关系 生物质热解、气化和直接液化技术都是以获得高品位的液体或者气体燃料以及化工制品为目的，由于生物质与煤炭具有相似性，它们最初来源于煤化工（包括煤的干馏、气化和液化）。本章中主要围绕热解展开。 1.1生物质热解概念 热解（Pyrolysis又称裂解或者热裂解）是指在隔绝空气或者通入少量空气的条件下，利用热能切断生物质大分子中的化学键，使之转变成为低分子物质的过程。可用于热解的生物质的种类非常广泛，包括农业生产废弃物及农林产品加工业废弃物、薪柴和城市固体废物等。 关于热解最经典的定义源于斯坦福研究所的J. Jones提出的，他的热解定义为“在不向反应器内通入氧、水蒸气或加热的一氧化碳的条件下，通过间接加热使寒潭有机物发生热化学分解，生成燃料（气体、液体和固体）的过程”。他认为通过部分燃烧热解产物来直接提供热解所需热量的情况，严格地讲不应该称为部分燃烧或缺氧燃烧。他还提出将严格意义上的热解和部分燃烧或缺氧燃烧引起的气化、液化等热化学过程统称为PTGL（Pyrolysis，Thermal Gasification or Liquification）过程。 生物质由纤维素、半纤维素和木质素三种主要组分组成，纤维素是β-D-葡萄糖通过C1-C4苷键联结起来的链状高分子化合物，半纤维素是脱水糖基的聚合物，当温度高于500℃时，纤维素和半纤维素将挥发成气体并形成少量的炭。木质素是具有芳香族特性的，非结晶性的，具有三度空间结构的高聚物。由于木质素中的芳香族成分受热时分解较慢，因而主要形成炭。此外，生物质还含有提取物，主要由萜烯、脂肪酸、芳香物和挥发性油组成，这些提取物在有机和无机溶剂中是可溶的。三种成分的含量茚生物质原料的不同而变化，生物质热裂解产
细胞生物学实验指导
细胞生物学实验指导目录 一．显微镜的使用 实验一、几种光学显微镜的使用 实验二、参观电子显微镜及生物超薄切片标本制备 二．细胞形态结构 实验三、细胞大小的形态观察——测微尺的使用 实验四、细胞活体染色技术 实验五、植物细胞骨架光学显微观察 实验六、胞间连丝观察 三．细胞化学 实验七、鉴定RNA的细胞化学方法——Branchet反应 实验八、DNA显色的观察——Feulgen反应 实验九、固绿染色法鉴定细胞内酸性蛋白与碱性蛋白 实验十、多糖及过氧化酶的显示 实验十一、核仁组成区的银染显示与观察 四．细胞生理 实验十二、细胞膜的通透性 实验十三、细胞电泳 五．细胞和组织培养技术 实验十四、植物原生质体的分离和融合 实验十五、植物细胞的培养与观察 实验十六、动物细胞融合 实验十七、动物细胞的培养与观察 六．细胞化学成分的分离 实验十八、细胞器的分离、纯化——细胞分级分离 实验十九、荧光的细胞化学测定 实验二十、细胞活力的鉴别 实验一几种光学显微镜的使用
一、实验目的 了解几种光学显微镜的结构、工作原理、主要用途和使用方法；掌握使用普通显微镜提高分辨力的方法。 二、实验原理 (一)基本原理 一般实验室经常使用的光学显微镜都是由物镜、目镜、聚光器和光阑组成，普通显微镜它们的放大原理及光路图如下： AB物体．A1B l第一次成像，A2B2第二次成像，O l目镜．O2物镜， F1为O l的前焦点，F2为O2的前焦点 各种光学显微镜的光学放大原理基本相同，各种特殊用途的光镜不过只是在光源、物镜、聚光器等方面作了改动，或在其它方面增设了某些特殊的设备。 (二)几种光学显微镜 l、普通光学显微镜： 普通光学显微镜也叫复式显微镜，是最常见，最简单的显微镜。它适于观察一般固定的，有色的透明度较高的标本。其最大分辨力一般为0.2微米，从构造上可分光学、机械和电子三大系统。 2、暗视野显微镜： 暗视野显微镜是以丁达尔现象(Tyndall phenomenon)(即光的微粒散射现象)为基础设计的,它使用了特殊的聚光器进行斜射照明,因光源中心束不直入物镜，所以视野黑暗，而被检细胞器因斜射照明发生衍射和反射，所以发亮可见。暗视野显微镜可用增加光照方法增加物体与背景的反差，因而可观察到0．2—0．004微米直径的微小粒子，但它分不清被检物的细微构造，它常用于观察物体的存在与运动。而暗视野显微镜与普通光学显微镜的区别，主要在于聚光器的不同，致使照明方法有别。确切地说，称暗视野显微镜为暗视野照明更为贴切。它是照明光线仅照亮被检样品而不进入物镜。使视野背景暗黑，样品明亮的照明方法。 3、相差显微镜： 相差是指同一光线经过折射率不同的介质其相位发生变化并产生的差异。相位是指在某一时间上，光的波动所达到的位置。
组织学与胚胎学实验报告 专业临床五年制 班级 2012级8班 姓名路海燕 学号 6 电子信箱 完成日期
实验一上皮组织 报告主题：假复层纤毛柱状上皮 主题属性：指定 标本号：27# 染色：HE 材料：豚鼠气管横切片 教学要求：掌握假复层纤毛柱状上皮的侧面形态结构 杯状细胞 柱状细胞 纤毛 基膜 假复层纤毛柱状上皮（豚鼠气管切片，HE染色，40×10） 假复层纤毛柱状上皮由柱形细胞、梭形细胞、锥体形细胞和杯状细胞组成。光镜下杯状细胞最多，游离面有大量纤毛。所有细胞基底面均附着在基膜上，细胞高矮不一，核的位置高低不齐地排列在不同水平面上，垂直切面观形似复层，实为单层。此种上皮以保护功能为主。
实验二软骨和骨 报告主题：骨单位 主题属性：指定 标本号：6# 染色：Schmorl式染色 材料：脱钙骨切片 教学要求：掌握光镜下骨组织的结构特点 骨陷窝 骨单位骨板 中央管 骨小管 骨单位（骨切片，Schmorl氏法块染，40×10） 骨单位是长骨起支持作用的主要结构单位，光镜下可见骨单位中央为圆形的中央管，多层骨板围绕中央管呈同心圆排列，骨单位间还有一些不规则的间骨板，骨板之间或骨板中可见可见棕黄色的小腔，为骨陷窝。骨陷窝之间有细小的骨小管相连通，最内层的骨小管开口于中央管。
实验三肌组织 报告主题：心肌 主题属性：指定 标本号：12# 染色：HE染色 材料：人心肌切片 教学要求：掌握人心肌纤维纵断面和横断面的结构特点 闰盘 心肌（人心肌切片，HE染色，40×10） 心肌分布于心壁和邻近心脏的大血管壁上，光镜下可见心肌纤维走向无一定规则，心肌纤维连接处为闰盘，闰盘染色深。心肌纤维也呈明暗相间的周期性横纹。
绪论 1.三个环境的概念，尤其是“环境科学”中的“科学” 一般工具书中定义的“环境”是指人以外的客观事物，将环境作为一种人以外的客观存在来加以定义，如新华字典中定义为：周围的一切事物。 环境科学术语的“环境”的中心事物是“人”，是以人类为主体的外部世界，是“人类生存的环境”，在此基础上定义：影响人类生存和发展的各种天然的和经过人工改造的自然因素的总和。 生态学中“环境”研究的中心事物是“生物”，则环境是以整个生物界的生命为主体，是“生物生存的环境”，可定义：直接或间接影响生物生存和发展的各种因素的总和。 2.“环境”具有相对性，在不同的学科中含义不同，主体的改变往往导致环境概念含义的不同。人类是环境发展到一定阶段的产物，环境是人类生存的物质基础，环境在影响人类生产、生活的同时，人类也在不断地利用和改造自然环境。故人类和环境密切联系，相互作用。 3.环境问题：主要分为环境污染和生态破坏。指由于人类活动作用于人们周围的环境所引起的环境质量变化，以及这种变化反过来对人类生产、生活和健康的影响问题。其产生是人类社会发展到一定阶段人类与环境矛盾激化的产物。其实质是由于人类活动超出了环境的承受能力，对其所赖以生存的自然生态系统的结构和功能产生了破坏作用，导致人与其生存环境的不协调。 重大环境问题 （1）温室效应：大气中的温室气体（二氧化碳、甲烷等）覆盖在地球表层，它们能吸收来自太阳的短波辐射，同时吸收地球发出的长波红外辐射，因而可以像玻璃温室一样使地球保持与积蓄热量，引起地球表面温度上升，发生所谓的“温室效应” 危害：：（1）海平面上升（2）影响农业和自然生态系统（3）加剧洪涝、干旱等气候灾害（4）影响人类健康 （2）臭氧层的破坏：臭氧层的减少是人类活动所引起的，尤其是氯原子能催化抽样的分解，因而打破了臭氧的自然平衡。（到达平流层的氯主要是人们排放的氯氟烷烃CFC和含溴卤代烷烃，如应用在冷冻机、电冰箱及高级电子元件做清洁剂的弗利昂，均对臭氧层产生威胁）危害：1）使皮肤癌和白内障患者增加，损坏人的免疫力，使传染病的发病率增加。（2）破坏生态系统，植物减产，减少动物寿命，水生系统破坏；（3）引起新的环境问题。 （3）酸雨：酸雨是有于大气中二氧化硫和一氧化氮在强光照射下，进行光化学作用，并和水汽结合而形成。主要成分为硫酸和硝酸。这些强酸在雨水中解离，是雨雪的pH下降，一般将小于5.6的雨称为酸雨 危害：酸雨能直接伤害植物，导致农作物明显减产。也能引起土壤性质改变，主要是使土壤酸化，影响生物数量和群落结构，抑制硝化菌、固氮菌等的活动，是有机物的分解、固氮过程减弱，因而土壤肥力降低，生物生产力明显下降。 （4）有毒物质污染：有毒物质是指对生态系统和人类健康有毒害作用的物质排放到环境中而引起的危害。 环境生物学的研究方法主要有以下三类：野外调查和试验、实验室试验、模拟研究 4.解决环境问题的根本途径是调节人类社会活动与环境的关系。要真正实现这种调节必须具备下列条件：掌握自然生态规律，通晓环境变化过程，能预测人类活动引起的环境影响，运用规律去利用自然资源、改造自然。 第一章环境污染物在生态系统中的行为 1.环境污染分类：按环境要素分——大气污染、水体污染、土壤污染；污染物性质——生
实验一普通光学显微镜的构造和使用 一、目的要求 1了解显微镜的基本构造和使用方法 2 掌握油镜的原理和使用方法 二、显微镜的基本结构及油镜的工作原理 1．显微镜的基本构造 光学部分：接目镜、接物镜、照明装置（聚光镜、虹彩光圈、反光镜等）。 机械部分：镜座、镜臂、镜筒、物镜转换器、载物台、载物台转移器、粗调节器、细调节器等部件。 2．显微镜的放大倍数和分辨率 放大倍数=接物镜放大倍数×接目镜放大倍数 显微镜的分辨率：表示显微镜辨析物体（两端）两点之间距离的能力3．油镜的使用原理 当光线由反光镜通过玻片与镜头之间的空气时，由于空气与玻片的密度不同，使光线受到曲折，发生散射，降低了视野的照明度。若中间的介质是一层油（其折射率与玻片的相近），则几乎不发生折射，增加了视野的进光量，从而使物象更加清晰。 三、器材 1．永久切片 2. 溶液或试剂：香柏油、二甲苯。 3. 仪器或其他用具：显微镜、擦镜纸等。 四、操作步骤 1．观察前的准备 （1）显微镜的安置，检查零件是否齐全，镜头是否清洁。 （2）调节光源 2．显微镜观察
（1）低倍镜观察 （2）高倍镜观察 （3）油镜观察：高倍镜下找到清晰的物象后，提升聚光镜，在标本中央滴一滴香柏油，使油镜镜头浸入香柏油中，细调至看清物象为止。3．显微镜用毕后的处理 观察完毕，上升镜筒，用擦镜纸和二甲苯清洗镜头，后将镜体全部复原。 五、思考题 1．用油镜观察时应注意哪些问题？在载玻片和镜头之间滴加什么油？起什么作用？ 2．为什么在使用高倍镜及油镜时应特别注意避免粗调节器的误操作？ 实验二胞间连丝的观察 一、实验目的 观察植物细胞的胞间连丝，加深对胞间连丝功能的认识． 二、实验原理 植物细胞的细胞壁上有许多原生质的细丝，称胞间连丝。相邻细胞的胞间连丝相互联接，在细胞间的物质运输与信息传递中起桥粱作用，并使细胞的各种生理活动协调一致，使植物体成为统一的有机体。用合适的植物细胞为材料，经简单处理，即能方便地看到胞间连丝。 三、实验材料 红辣椒表皮细胞临时装片、柿胚乳细胞间胞间连丝切片 四、实验步骤
组织学与胚胎学实验考试图及答案照片名称：14平滑肌 照片名称：15尼氏体 照片名称：16轴丘 照片名称：17郎飞结 照片名称：21淋巴小结 照片名称：19小静脉小动脉 照片名称：18毛细血管 照片名称：1单层柱状上皮 照片名称：22皮质 照片名称：23淋巴小结生发中心 照片名称：24脾白髓 照片名称：28皮肤 照片名称：27腺垂体 照片名称：26肾上腺皮质
照片名称：25甲状腺滤泡照片名称：29胃(四层) 照片名称：31主细胞 照片名称：30胃 照片名称：32壁细胞 照片名称：36粘液性腺泡照片名称：35潘氏细胞照片名称：34小肠绒毛照片名称：33小肠 照片名称：37浆液性腺泡照片名称：39胰岛 照片名称：40肝 照片名称：38胰腺 照片名称：44肺泡 照片名称：43肝门管区
照片名称：42肝血窦 照片名称：41中央静脉 照片名称：45肾小体 照片名称：46近曲小管（近端小管曲部）照片名称：48致密斑 照片名称：52生精小管 照片名称：51滤过屏障 照片名称：49足细胞 照片名称：56初级卵泡 照片名称：55精子 照片名称：54支持细胞 照片名称：53精原细胞 照片名称：60胚泡 照片名称：59卵丘
照片名称：58次级卵泡 照片名称：57原始卵泡初级卵泡照片名称：61胚泡 照片名称：62二胚层胚盘 照片名称：63二胚层胚盘 照片名称：64脐带 照片名称：3杯状细胞 照片名称：红细胞白细胞 照片名称：65胎盘 照片名称：5浆细胞 照片名称：7嗜酸性粒细胞 照片名称：6中性粒细胞 照片名称：4肥大细胞 照片名称：12骨骼肌 照片名称：10单核细胞
一、绪论和上皮组织 （一）绘图：单层柱状上皮（略） （二）填空 1．观察被覆上皮时，是根据上皮的层数和细胞形态来判断上皮类型的。 2．HE染色法最为常用，通过苏木精和伊红两种染料染色后，前者主要把 细胞核内的染色质和胞质内的核糖体染成蓝紫色。后者主要把细胞质和细 胞外基质中的成分染成粉红色。易于被碱性或酸性染料着色的性质分别称 为嗜碱性和嗜酸性。 （三）名词翻译并解释带*的名词 epithelial tissue(上皮组织)microvillus( 微绒毛) cilium( 纤毛)tight junction( 紧密连接) intermediate junction( 中间连接) desmosome( 桥粒) endothelium( 内皮) hemidesmosome( 半桥粒) gap junction( 缝隙连接) junctional complex(连接复合体) plasma membrane infolding ( 质膜内褶) *basement membrane (基膜) basement membrane（基膜）：是位于上皮与结缔组织间之间的薄层均质膜状结构， 电镜下由基板和网板构成；具有支持、连接；细胞增殖分化等作用和半透膜的功能。 （四）思考题 1．结合本次实验观察到的上皮组织（被覆上皮和腺上皮）切片，归纳上皮组织的结构特点？ 上皮组织的特点包括：1）细胞排列紧密，细胞间质少；2）细胞有明显极性 3）上皮组织内无血管。
2．列表说明所观察的被覆上皮类型与分布。 单层上皮 复层上皮 二、固有结缔组织 （一）绘图：疏松结缔组织（略） （二）填空 1．光镜下，浆细胞呈 圆形 或 卵圆 形，核内异染色质呈 车轮状 分布，胞质 嗜碱 性，染成 蓝紫色 ，近核旁的胞质有一 浅染 区。 2．固有结缔组织包括 疏松结缔组织 、 致密结缔组织 、 脂肪组织 和 网状组织 ；但 网状 组织需银染才能观察到 网状 纤维。 （三）名词翻译并解释带* 的名词 loose connective tissue ( 疏松结缔组织 ) fibroblast ( 成纤维细胞) fibrocyte ( 纤维细胞 ) macrophage ( 巨噬细胞 ) plasma cell ( 浆细胞 ) mast cell ( 肥大细胞 ) fat cell ( 脂肪细胞 ) collagenous fiber (胶原纤维 ) *reticular fiber (网状纤维 ) elastic fiber (弹性纤维 ) reticular fiber (网状纤维)：主要分布于网状组织内，纤维细小，分支较多并互相交织成网，银染呈棕黑色。网状纤维构成细小的支架结构。 内皮：心血管、淋巴管腔面 间皮：胸、腹膜及胸腹腔器官(脾等)外表面 单层扁平上皮 单层立方上皮：甲状腺滤泡等 单层柱状上皮：胃、肠道等腔面 假复层纤毛柱状上皮上皮：呼吸道腔面 复层扁平上皮： 变移上皮：膀胱等 角化：皮肤表皮 未角化：食管等
复习题 一、名词解释（5个，10分） 光化学烟雾：参与光化学反应过程的一次污染物和二次污染物的混合物所形成的烟雾污染现象叫做光化学烟雾。 氧化应激（OS）是指体内氧化与抗氧化作用失衡，倾向于氧化，导致中性粒细胞炎性浸润，蛋白酶分泌增加，产生大量氧化中间产物。氧化应激是由自由基（活性氧自由基(ROS)和活性氮自由基RNS)在体内产生的一种负面作用，并被认为是导致组织损伤、衰老和疾病的一个重要因素。 共代谢作用：只有在初级能源物质存在时微生物才能进行有机物的生物降解过程。 硝化作用：是好氧条件下在无机化能硝化细菌作用下氨被氧化成硝酸盐的过程。 生物转化：指污染物进入生物机体后在有关酶系统的催化作用下, 发生一系列化学变化并形成一些分解产物或衍生物的代谢变化过程。 氧垂曲线：在河流受到大量有机物污染时，由于有机物这种氧化分解作用，水体溶解氧发生变化，随着污染源到河流下游一定距离内，溶解氧由高到低，再到原来溶解氧水平，可绘制成一条溶解氧下降曲线，称之为氧垂曲线。 固定化酶：通过物理吸附法或化学键合法将水溶性酶和固态的不溶性载体相结合，使酶变成不溶与水但仍保催化活性的衍生物。 BOD5 每日容许摄入量（ADI）最高容许浓度（MAC）PM2.5 混合功能氧化（MFO）相Ⅰ反应相Ⅱ反应污泥负荷（Ls）污泥沉降比（SV） 二、填空（每空1分，共约40分） 1．土壤中，硫酸盐在硫酸盐还原菌的作用下，将硫酸盐还原成硫化氢。 2．污染物经完整皮肤吸收，脂／水分配系数接近的化合物最容易经皮肤吸收。 3.微宇宙法是研究污染物在生物、、生态系统和生物圈水平上的生物效应的一种方法。标准化水生微宙的实验容器为L。 4.大肠菌群是较好的水质粪便污染的指示菌，其检验方法有和两种。 5.MFO代谢有机化合物，转化成低毒易溶的代谢产物排出体外，但有的则变成高毒甚至致癌物。 6.劣质磷肥，除含大量重金属外，三氯乙醛的含量也很高；氯乙醛在土壤微生物的作用下，迅速转为，其毒性大于三氯乙醛。 7.排泄主要途径是，随尿排出；其次是经通过消化道，随粪便排出，挥发性化学物还可经呼吸道，随呼出气排出。 8.对于能发生生物浓缩的外源性物质必须满足以下两个条件：(1) 难以生物降解(2) 具有亲脂性。 9．铅被机体吸收后90%沉积在骨骼中；有机氯农药蓄积在脂肪组织中。 10．生物对环境的污染效应有①病原微生物的危害，能使人动物及植物致病；②水体富营养化；③污染生物的代谢产物，使其他生物中毒，食品污染等。 11．评价微生物污染状况的指标可用细菌总数和链球菌总数；测定大气污染的细菌总数的方法有：沉降平皿法；吸收管法；撞击平皿法；滤膜法。 12．一定剂量的化学物质A和B分别引起某动物15％和40％的死亡率，经A和B同时作用于100只活的动物，若A和B具有独立作用，那么将死亡只；若A和B具有相加作用，那么将死亡只。 13.为了探明环境污染物对机体是否有蓄积毒作用，致畸、致突变、致癌等作用，随着毒理
一、热解分类 根据反应温度和加热速率的不同，生物质热解工艺可分成慢速、常规、快速或闪速几种。慢速裂解工艺已经具有了几千年的历史，是一种以生成木炭为目的的炭化过程川，低温和长期的慢速裂解可以得到30%的焦炭产量;低于600℃的中等温度及中等反应速率(0.1-1℃)的常规热 裂解可制成相同比例的气体、液体和固体产品: 快速热裂解大致在10-200℃/S的升温速率，小于5秒的气相停留时间;闪速热裂解相比于快速热裂解的反应条件更为严格，气相停留时间通常小于1秒，升温速率要求大于1护'C/S.并以102-1护Vs的冷却速率对产物进行快速冷却。但是闪速热裂解和快速热裂解的操作条件并没有严格的区分，有些学者将闪速热裂解也归纳到快速热裂解一类中，两者都是以获得最大化液体产物收率为目的而开发。 事实上，现在人们在考虑生物质的热解机理时，常常假设生物质的三种主要组成物独立进行裂解。纤维素主要在325℃-375℃之间裂解，半纤维素主要在225℃-325℃之间发生裂解，而木质素则在250℃-500℃之间发生裂解(大多数木质素裂解发生在310℃-400℃之间)(shafizadch和Chin. 1977)。纤维素和半纤维素的裂解产生大多数的挥发物，而木质素裂解产生大多数的碳。 二、纤维素热解机理 1、纤维素结构 纤维素是由D-葡萄糖通过β(1-4)一糖苷键相连形成的高分子聚合物。不同的分子通过氢键形成大的聚集结构。目前的研究表明纤维素存在五种结晶变体，即纤维素I，Ⅱ，Ⅲ, IV和V。其中纤维素I是纤维素的天然存在形式。 纤维素是自然界中大量存在的天然高分子物质，是自然界分布最广、含量最多的一种多糖。纤维素是植物细胞壁的主要成分，它是由吡喃葡萄糖普通过0-1, 4-搪昔联结成的线性大分子，一般可用通式(C6HioO5)n表示, n称为聚合度，通常情况下在104左右. 纤维素是由β-D-葡萄糖为聚合单元构成的直状高聚物, 分子通式为(C6H10O5)n。它是具有饱和糖结构的典型碳水化合物，为生物质细胞壁的主组成部分。在高温作用下, 纤维素会发生一系列复杂的脱水、解聚、脱挥发分和结构重整等变化。纤素热解动力学涉及这一系列复杂变化中包含的各反应机理。但是, 由于热解过程中并行或者顺序发生的反应数目众多，实际上不可能、对工程应用来说没有必要建立一个考虑了所有这些反应的详尽的动力学模型. 因此, 该领域内的研究者关注的大多是谓的“准机理模型(pseudo－mechanistic model) ”, 在这一类模型中, 热解产物被笼统地划分为挥发分、固定碳等几大类. 总体上, 准机理模型有两种：单步全局模型和半全局动力学模型[]。 [ 7 ]余春江, 骆仲泱, 方梦祥, 廖燕芬, 王树荣, 岑可法；一种改进的纤维素热解动力学模型；浙江大学学报（工学板），2002：36，509-515 2、纤维素热解机理 由于纤维素在生物质原料中占据了几乎一半的含量，其热裂解行为在很大程度上体现出生物质整体的热裂解规律，纤维素具有最为简单的结构且在不同的材质中其结构和化学特性变化最小，因而当前研究基本上都从纤维素的热解行为入手开展工作。 纤维素热解动力学模型体现了纤维素热解化学反应的本征过程，是整个热解模型的核心部分。动力学模型的可靠性对于颗粒热解模型是否能正确反映真实过程至关重要。 2.1源于对纤维素燃烧过程的研究 纤维素热裂解机理的探索，最早源于对纤维素燃烧过程的研究，通过纤维素燃烧试验，Broido发现纤维素在低温加热条件下，经由吸热反应一部分纤维素转化为脱水纤维素。热裂解