Regulatory volume increase is associated with p38 kinase-dependent actin cytoskeleton remodeling in

网络出版时间：２０２１－９－７１４：４７　网络出版地址：ｈｔｔｐｓ：／／ｋｎｓ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｉｌ／３４．１０６５．Ｒ．２０２１０９０７．１４０５．０３１．ｈｔｍｌＣＰ ２５调控ＧＲＫ２／ｐ３８ＭＡＰＫ信号在血管紧张素Ⅱ诱导小鼠系膜细胞增殖中的作用王　祥，袁晓阳，徐　靓，江　丽，王盛付，黄李娜，魏　伟，严尚学２０２１－０６－０４接收基金项目：国家自然科学基金（编号：８１３３００８１）作者单位：安徽医科大学临床药理研究所，抗炎免疫药物教育部重点实验室，抗炎免疫药物安徽省协同创新中心，合肥　２３００３２作者简介：王　祥，男，硕士研究生；魏　伟，男，教授，博士生导师，责任作者，Ｅ ｍａｉｌ：ｗｗｅｉ＠ａｈｍｕ．ｅｄｕ．ｃｎ；严尚学，男，副研究员，硕士生导师，责任作者，Ｅ ｍａｉｌ：ｙａｎ ｓｈｘ＠１６３．ｃｏｍ摘要　目的　研究芍药苷 ６′ Ｏ 苯磺酸酯（ＣＰ ２５）在血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）诱导的肾小球系膜细胞（ＭＣｓ）增殖中的作用及相关机制。

方法　体外培养ＳＶ４０ＭＥＳ１３系膜细胞，以ＡｎｇⅡ诱导ＭＣｓ增殖，高内涵成像显微镜检测不同浓度ＣＰ ２５（１０、１００、１０００ｎｍｏｌ／Ｌ）对ＡｎｇⅡ诱导的ＭＣｓ增殖的影响；Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测ＭＣｓ中Ｇ蛋白偶联受体激酶 ２（ＧＲＫ２）和磷酸化ｐ３８（ｐ ｐ３８）蛋白表达水平；激光共聚焦显微镜检测ＧＲＫ２和ｐ ｐ３８蛋白的荧光信号并分析二者共定位率；成像流式细胞仪检测ＭＣｓ中ＧＲＫ２入胞质的细胞比例。

结果　与对照组比较，ＡｎｇⅡ可诱导ＭＣｓ的增殖，增加ＧＲＫ２和ｐ ｐ３８蛋白表达，上调ＧＲＫ２和ｐ ｐ３８ＭＡＰＫ共定位率，提高ＧＲＫ２入胞比例，差异有统计学意义（Ｐ＜０ ０１）。

ＣＰ ２５（１０、１００、１０００ｎｍｏｌ／Ｌ）可不同程度地抑制ＡｎｇⅡ诱导的增殖，抑制ＧＲＫ２、ｐ ｐ３８蛋白表达及ＧＲＫ２和ｐ ｐ３８的共定位水平，降低ＧＲＫ２入胞比例。

p38 MAPK通路在造血系统调节中的作用李德冠;樊飞跃;孟爱民【摘要】Mitogen-activated protein kinase( MAPK ) superfamily is an important signal mediating many cellular reactions. The subfamily p38 MAPK plays an important role in the regulation of hematopoietic system. Inhibition of p38 MAPK pathway can alleviate the function decline of hematopoietic cells caused by senescence or deseases. To further research the substrates of p38 MAPK pathway in hematopoietic cells will provide new ideas for the clinical application of hematopoietic stem cells and mechanisms of hematopoietic system diseases.%丝裂原活化蛋白激酶( MAPK)超家族是介导细胞反应的重要信号系统.研究发现,该超家族亚族p38 MAPK通路在造血细胞调节过程中占据重要地位,抑制p38 MAPK通路可一定程度缓解衰老或者疾病引发的造血细胞功能下降.深入研究p38 MAPK通路在造血系统中的下游作用底物,将对临床造血干细胞的应用以及造血系统疾病发病机制研究提供新的思路.【期刊名称】《中国药理学通报》【年(卷),期】2011(027)001【总页数】3页(P4-6)【关键词】造血系统;丝裂原活化蛋白激酶;p38;活性氧;刺激;造血干细胞【作者】李德冠;樊飞跃;孟爱民【作者单位】中国医学科学院放射医学研究所、天津市核医学重点实验室,天津,300192;中国医学科学院放射医学研究所、天津市核医学重点实验室,天津,300192;中国医学科学院放射医学研究所、天津市核医学重点实验室,天津,300192【正文语种】中文【中图分类】R-05;R329.25;R331.23;R345.57;R977.3丝裂原活化激酶(mitogen-activated protein kinase，MAPK)是哺乳细胞内广泛存在的一类丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，是细胞重要的应激通路，在细胞生长、发育、分化、凋亡等许多生理过程中占据重要地位。

磷脂酰肌醇-3-激酶家族与急性肺损伤研究新进展华中科技大学同济医学院附属协和医院麻醉科（430022）王月兰姚尚龙摘要磷脂酰肌醇-3-激酶以其广泛的分布，参与并产生酯类第二信使，激活细胞内大量酶联级反应，调节多种细胞的生存、激活、分化和繁殖而成为研究细胞信号转导机制的热点。

该文重点介绍PI3K结构与功能、激活途径及参与急性肺损伤的机制及其临床意义。

关键词肺损伤；磷脂酰肌醇脂激酶；机制近年来对急性肺损伤（ALI）机制的研究发现，除了目前正在研究的MAPK信号转导通路对ALI影响外，越来越多的试验和临床发现PI3K在急性肺损伤的形成中有着不可忽视的作用。

并且还发现PI3K是肺细胞重要的调节酶之一，影响着肺组织的生理和病理变化【1】。

因此对PI3K及其下游底物的研究，可将成为研究和治疗肺部疾病的新靶点。

1 PI3Ks结构、功能与生物活性磷脂酰肌醇－3－激酶（phosphatidylinositol 3-kinases，PI3K）的研究始于1980s后期。

近年来对PI3Ks家族的构成、功能研究有了新的突破。

PI3Ks 是普遍存在于体内各类细胞，属于酯类的激酶（或酶），能磷酸化与膜相关的磷脂酸肌醇家族，它可以募集和激活下游的靶物质而启动一系列信号联级反应，其在细胞的有丝分裂发生、细胞存活、分化和激活、细胞骨架的构型与重塑以及囊胞的运输起着重要的作用[1]。

1. 1 结构与分类据其结构、特异底物和不同调节功能PI3Ks可分为三大类[2，3]。

其中PI3-Ks家族已有9个成员从哺乳类生物细胞中分离出来。

I类：由P110催化亚基和调配亚基（regulatory adapter subunit）：P50、P55、P85、P101构成的异二聚体，其中P110又有四种亚型分别为：P110α、P110β、P110γ和P110δ。

目前已经明确的I类PI3Ks又有两个亚家族，分别为：IA和IB。

IA是由p110α、p110β和p110δ催化亚单位和调节亚基（P85α、P85β、P55γ）构成，对酪氨酸激酶相关受体（tyrosine kinase-lingked receptor ）的信号转导系统比较敏感。

20解剖学研究2021年第43卷第丨期Anat Res，2021，Vol.43, No.l•论著•PI3K/Akt诱导激活F0X03a可防止TNF-〇a秀导的GnRH下降郭晗，张本斯，施荣杰、施雨辰*12*，石纯(大理大学基础医学院人体解剖学教研室，云南大理671003)【摘要】目的探究P13K/Akt通路对T N F-a介导的下丘脑GnRH释放减少的调节作用和机制。

方法采用F0X03a敲低的GT1 -7细胞系，用P I3K激活剂740Y-P和T N F-a处理细胞，采用ELISA检测培养基中的GnRH水 平。

用Western blot检测细胞中(p)-lKBot和p-A kt的磷酸化蛋白含量，用免疫荧光法对F0X03a和NF-k B的核定位 进行检测。

结果PI3K/Akt通路的激活可促进F0X03a核易位，进而逆转了 T N F-a诱导的GNRH1基因抑制和NF-k B激活。

通过这一机制可防止TNF-tx对GT1-7细胞释放GnRH的抑制效应。

结论PI3K/Akt通路的激活有助于 防止衰老相关的下丘脑GnRH释放减少。

【关键词】促性腺激素释放激素；衰老；NF-k B;F0X03aPI3K/Akt-induced activation of F0X03a prevents TNF-a-induced GnRH decline GUO Han, ZHANG Ben-si, SHI Rong-jie, SHI Yu-chen t SHI Chun.Department o f Human Anatomy of Basic Medical College, Dali University, Dali, Yunnan Province 671003, ChinaCorresponding author: SHI Chun, E-mail:*******************【Abstract】Objective To investigate the effect of PI3K/Akt on TNF-a-induced hypothalamic GnRH decline. Meth-ods GT1-7 cells were treated with PI3K activator (740 Y-P) and TNF-a. GnRH level in the medium was detected by ELI­SA method. p-lKBa and p-Akt were analyzed using western blot. The nuclear localization of F0X03a and NF-k B were ana­lyzed by using western blot and immunofluorescence. Results The current study revealed that PI3K/Akt-induced F0X03a nuclear translocation protects GnRH neurons from TNF-a-induced decrease of GnRH release through preventing TNF-a-in­duced GNRH1 gene inhibition and NF-k B activation. Conclusion The results of the present study provided novel insights into the mechanisms underlying aging-associated hypothalamic GnRH decline.【Key words】Gonadotropin-releasing hormone; Aging; Nuclear factor-k B; Forkhead box protein 03a下丘脑是中枢神经内分泌系统的重要组成部 分，可调节脑与周围神经系统之间的相互作用'_2]。

hippocampus after hyp〇xia-ischemia(J]. Glia, 2015,63(12): 2220-2230. [18] Wang S, Xue H, Xu Y, et al. Sevoflurane postconditioning inhibitsautophagy through activation of the extracellular signal-regulated kinase cascade, alleviating hypoxic-ischem ic brain injury in neonatal rats[J]. Neurochem Res, 2019, 44(2):347-356.[19] Li X, Wang MH, Qin C, et al. Fingolimod suppresses neuronalauophagy through the mTOR/p70S6K pathway and alleviates ischemic brain damage in mire[J]. PLoS One, 2017, 12(1 l):e0188748.[20] Yan YQ, Zhang B, Wang L, et al. Induction of apoptosis andautophagic cell death by the vanillin derivative 6-brom ine-5-hydroxy-4-methoxybenzaldehyde is accompanied by the cleavage ofDNA-PKcs and rapid destruction of c-Myc oncoprotein in HepG2cells[J]. Cancer Lett, 2007, 252(2):280-289.[21 ]Requejo-Aguilar R, Lopez-Fabuel I, Fernandez E, et al. PINK1deficiency sustains cell proliferation by reprogramming glucosemetabolism through HIF1[J]. Nat Commun, 2014,5: 4514.[22] Devireddy S, Liu A, I^ampe T, et al. The organization of milochondrialquality control and life cycle in the nervous system in vivo in theabsence of PINKlfJ]. J Neurosci, 2015, 35(25): 9391-9401.(收稿日期：2020-10-10)•论著•芍药苷对急性脑梗死大鼠小胶质细胞激活调节的神经元焦亡的作用祖力菲亚•艾克木麦合莆热提•乌莆尔邢辉辉樊明新张俊江【摘要】目的研究芍药苷对急性脑梗死（AC1)大鼠神经元焦亡的影响。

Cell正刊都在用的——高纯度活性Actin蛋白(G-Actin）F-Actin（Fibros Actin）的组装过程，与细胞的生理状态有密切关联。

多个G-肌动蛋白以双螺旋结构聚合形成纤维化肌动蛋白，称为F-肌动蛋白，又称为微丝。

它基本上存在于所有真核细胞中，进化过程中高度保守，是细胞骨架最主要的结构组分之一。

近日Cell上一篇《Secreted gelsolin inhibits DNGR-1-dependent cross-presentation and cancer immunity》就揭示了，分泌型凝胶蛋白（sGSN）可以抑制DNGR-1与F-actin结合，抑制DNGR-1活性，同时也抑制了cDC1 对肿瘤中出现的死细胞相关抗原的DNGR-1 依赖性交叉呈递，从而促进了癌症的免疫逃避。

在体外组装高纯度，高稳定性的F-Actin，是研究团队推进研究进程的重要基石。

另一方面，越来越多的医药企业对于有活性的Actin蛋白的纯度要求越来越高，98%以下纯度根本不用考虑。

作为专业的生命科学医药原料供应商，艾美捷科技为您推荐：Cell正刊都在用的，药物研发级超高纯度Actin活性蛋白（＞99%）100ug的Actin蛋白（CSK-AKL99）在12%的SDS-PAGE电泳，考马斯亮蓝染色，并用蛋白定量试剂盒测定。

细胞骨架以冻干粉的形式提供肌动蛋白，以便它们可以Cell文章结果验证Actin Protein ( >99% Pure): Rabbit Skeletal Muscle：（A-C）体外聚合F-肌动蛋白（最高浓度0.2 mM）或无F-肌动蛋白（PBS；箭头）的连续（2 倍）稀释（箭头）被点到膜上。

在用(A) 指定剂量的FCS、(B) ABP 耗尽或模拟耗尽FCS 和(C) sGSN 预处理膜后，检测到DNGR-1 ECD (5 mg/mL) 与点的结合或cofilin（均为10mg/ml）。

细胞增殖信号通路调控机理细胞增殖是生物体维持生命所必需的过程之一，人体在成长、修复、繁殖和癌症等多个方面均需要细胞增殖。

细胞增殖不仅仅涉及到称为“阀门”的基因的开关，还需要增殖信号通路的精准调控。

细胞增殖信号通路调控机理是一个重要的研究领域，在医学上具有广泛的应用前景。

1.细胞增殖信号通路的基本架构细胞增殖信号通路是一个信号转导网格，由许多元件组成。

当外来信号或细胞自身环境的信号引发细胞内的分子反应时，就会产生一系列级联反应，从而引起细胞核内的基因表达变化，最终导致细胞增殖。

其中较为典型的细胞增殖信号通路包括：MAPK信号通路、PI3K-Akt信号通路和Wnt/beta-catenin信号通路。

MAPK信号通路是由ERK、JNK和p38组成的，这些酶是在细胞外信号激活后，经过磷酸化而激活的。

PI3K-Akt信号通路是一条反应细胞的营养水平的通路，主要是指抑制自噬和促进增殖之间的平衡调节。

Wnt/beta-catenin信号通路是关键的调节发育和细胞增殖的信号通路之一。

2.蛋白激酶与细胞增殖信号通路蛋白激酶是组成细胞增殖信号通路的基本分子，在细胞内发挥重要作用。

除了MAPK并不是一类特殊的酶之外，蛋白激酶的分类非常多。

在细胞增殖信号通路中主要涉及到的激酶包括：ERK1/2、JNK、p38MAPK、AKT、mTOR、EGFR、PI3K等。

3.信号转导通路的调控细胞增殖信号通路完整的调控网络是由多个分子的相互作用而构成的。

细胞环境的变化会导致信号转导通路的扰动，进而影响到分子通路的活动。

细胞增殖信号通路的调控可以分为两种类型：内在调控和外在调控。

内在调控主要涉及到细胞分子自身的反应过程，包括蛋白酶的磷酸化、内质网的应答、RNA后期修饰和基因表达的调控等。

而外在调控则是对细胞外的刺激做出反应，从而影响信号转导通路的活动。

4.细胞增殖信号通路与疾病细胞增殖信号通路在人体生理、病理以及临床诊断和治疗中都扮演着重要的角色。