化学试剂实验方法中所用一般试剂的配制
1.范围：
本标准规定吉粮天裕化学试剂试验方法中所用一般试剂的制备方法。
本标准适用于吉粮天裕化学试剂分析中所需制剂，也可供其它行业选用。
2.规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不住日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
GB/T 601—2002化学试剂标准滴定溶液的制备
GB/T 602—2002化学试剂杂质测定用标准溶液的制备
GB/T 601—2002分析实验室用水规格和实验方法，（neq ISO 3696：1987）
GB/T 601—2002化学试剂羰基化合物测定通用方法（eqv ISO 6353-1:1982）
3.一般规定
3.1 本标准出另有规定外，所用试剂的纯度应在分析纯以上，所用标准滴定溶液、杂质测定用标准溶液，应按GB/T 601—2002、 GB/T 602—2002的规定制备，试验用水应符合GB/6682-1992种三级水的规格。
3.2 当溶液出现浑浊、沉淀或颜色变化等现象时，应重新制备。
3.3 本标准中所用溶液以（%）表示的均指质量分数；只有“乙醇（95%）”中的（%）为体积分数。
4．制备方法
4.1一般制剂
4.1.1无二氧化碳的水
将水注入烧瓶中，煮沸10分钟，立即用装有钠石灰管的胶塞塞紧，冷却。
4.1.2无氧的水
将水注入烧瓶中，煮沸1h后立即用装有玻璃导管的胶塞塞紧，导管与盛有焦性没食子酸碱性溶液（100g/L）的洗瓶连接，冷却。
4.1.3无羰基的甲醇
量取2000ml甲醇，加10g2,4-二硝基苯肼及0.5ml盐酸，在水浴上回流2h,加热蒸馏弃去最初的50ml 蒸馏液，收集馏出液贮存于棕色瓶中。
4.1.4饱和硫化氢水
将二氧化硫气体通入无二氧化碳的水中，至饱和为止。（此液体临用前制备）
4.2 试液
4.2.1裴林氏甲、乙液：
溶液甲:称取34.7g硫酸铜（CuSO4·5H2O）,溶于水，稀释至500 ml。
溶液乙:称取173g酒石酸钾钠（C4H4KNaO6·4H2O）和50g氢氧化钠，溶于水，稀释至500 ml。使用时将甲液与乙液按同体积混合。
4.2.2酒精溶液(75%(V/V))
4.2.3盐酸溶液(20%)
量取504 ml盐酸，稀释至1000 ml。
4.2.4氢氧化钠(20%)
取澄清的氢氧化钠饱和溶液280ml，加新煮沸过的冷水使成1000ml。
4.2.5重铬酸钾(饱和溶液)
在2000mL烧杯里，加入1800mL蒸馏水，然后将烧杯放在石棉网上加热，慢慢向烧杯中加入重铬酸钾固体，并用玻璃棒不断搅拌，当液面出现结晶时，停止加入重铬酸钾固体，这时往烧杯中加入50mL蒸馏水，继续加热使液面结晶重新溶解，即可停止加热，慢慢倒入结晶容器内。重复上法再制取，直到达所需的饱和溶液量为止。
4.2.6酸性氯化钙溶液
在热地去矿物质水中溶解2.5公斤CaCI2或33.0Be/(大约4.5公斤)加入浓乙酸1.5ml,使溶液的PH在1.6——1.7之间。
4.2.7四氯化锡-磷钨酸溶液
取80ml蒸馏水，用吸液管吸取0.83mlSnCl4溶液之水中，加入2.5g P2O5.24WO.NH2O,加入20ml冰醋酸（99.7%），加入100ml33.0Be/ CaCI2.
4.2.8氯化高汞酒精溶液
1g氯化汞，900ml水，100ml酒精.
4.2.9碘酸钾—碘化钾溶液（1ml相当于1mg亚硫酸根）
依次称取优级纯碘酸钾0.8918g,碘化钾7g,重碳酸钠0.5g，用蒸馏水溶解后，移入1000ml容量瓶中并稀释至刻度。
4.2.10混合催化剂
0.4 g硫酸铜，5个结晶水（GB665），6.0 g硫酸钾或硫酸钠（HG3-908），均为化学纯，磨碎混匀。
4.2.11氢氧化钠（GB629）：化学纯，40%水溶液（m/V）。
称取40g氢氧化钠，溶于水中，稀释至1000 ml。
4.2.12硼酸（GB628）：化学纯，2%水溶液（m/V）。
溶解20g硼酸于水中，稀释至1L.
4.2.13高锰酸钾标准使用溶液c(1/5KMnO4)=0.005mol/L
将0.1mol/L 高锰酸钾标准溶液准确稀释20倍。此溶液须现用现配。
4.2.14盐酸溶液（1+40）
量取4000 ml水，加入100 ml盐酸，混匀。
4.2.15氯化钴溶液c(CoCl2)=0.0500 g/mL
称取氯化钴（CoCl2·6H2O）5.000 g，精确至0.0002 g，用1+40盐酸溶液溶解，并定容至100 ml。
4.2.16盐酸溶液：0.1 mol/L，量取盐酸9ml，注入水中，用水稀释至1000ml。
4.2.17亚硫酸氢钠溶液(12 g/L)
称取12g亚硫酸氢钠，溶于少量水中，稀释至1000ml。
4.2.18碳酸氢钠溶液c(NaHCO3)=1mol/L
称取84 g碳酸氢钠，溶于少量水中，稀释至1000ml。
4.2.19碘标准使用溶液c(1/2I2)=0.01mol/L
使用时将0. 1mol/L碘标准溶液准确稀释10倍。
4.2.20高锰酸钾-磷酸溶液
称取3g高锰酸钾，溶于15 ml 85%（m/m）磷酸和70 ml水中，混合，用水稀释至100 ml。
4.2.21偏重亚硫酸钠（Na2S2O5）溶液(100 g/L)
称取偏重亚硫酸钠100 g，溶于少量水中，稀释至1000 ml。
4.2.22草酸（H2C2O4·H2O）溶液（50 g/L）
5g草酸溶于40℃左右1+1硫酸溶液中，并定容至100ml 。
4.2.23碱性品红亚硫酸显色剂
称取0.075 g碱性品红溶于少量80℃水中，冷却，加水稀释至75 ml，移入1L棕色细口瓶内，加50 ml 新配制的亚硫酸氢钠溶液（53.0 gNaHSO3溶于100 ml水中）、500 ml水和7. 5 ml密度为1.84 g/mL的硫酸，摇匀，放置10～12h至溶液褪色具有强烈的二氧化硫气味，置于冰箱中保存。
4.2.24对—二甲氨基苯甲醛显色剂
称取0.1g对—二甲氨基苯甲醛[（CH3）2N·C5H4CHO]溶于优级纯硫酸中，并定容至200ml，移入棕色瓶内，贮存于冰箱中。
4.2.25变色酸显色剂
称取0.1 g变色酸（C10H6O8S2Na2）溶于10 ml水中，边冷却，边加90 ml 90%（m/m）硫酸，移入棕色瓶中，置于冰箱保存，有效期为一周。
4.2.26碱性品红亚硫酸溶液
称取0.2 g碱性品红，溶于80℃的水中，加入100 g/L无水亚硫酸钠溶液20 ml、密度为1.19 g/ ml 盐酸2 ml ，加水稀释200 ml 。放置1h，使溶液褪色并应具有强烈的二氧化硫气味（不褪色者，碱性品红不能用），贮于棕色瓶中，置于低温保存。
4.2.27氢氧化钠溶液(3.5mol/L)
称取氢氧化钠140 g，溶于少量水中，稀释至1000 ml。
4.2.28盐酸羟胺溶液（NH2OH·HCl）(2mol/L)
称取137 g盐酸羟胺溶于少量水中，稀释至1000 ml。
4.2.29三氯化铁显色剂
称取50 g三氯化铁（FeCl3·6H2O）溶于约400 ml水中，加4 mol/L盐酸溶液12.5ml ，用水稀释至500ml 。
4.2.30试银灵（对-二甲基苄基罗丹宁）溶液
称取0.02 g试银灵，溶于100 ml丙酮中。
4.2.31异烟酸-比坐啉酮溶液
称取1.5g异烟酸,溶于24ml 20 g/L氢氧化钠溶液中.另称取0.25g比坐啉酮,溶于20 ml N-二甲基甲酰胺
中，合并上述两种溶液，摇匀。
4.2.32氯胺T溶液（10g/L）
称取1.0g氯胺T(有效氯应保证在11%以上)溶于100 ml水中,此溶液须现用现配。
4.2.33硫酸溶液(10%)
量取浓硫酸6mL，缓缓注入约60ml水中，冷却，稀释至100ml.
4.2.34氨水溶液(10%)
量取400 ml氨水，稀释至1000 ml。
4.2.35喹钼柠酮溶液
称取70g钼酸钠溶解于150ml水中（溶液I），另称取60g柠檬酸溶解于85ml浓硫酸和150ml不的混合液中（溶液II），在不断搅拌下，将溶液I缓慢地加到溶液II中（溶液III）。量取5ml喹啉注入35ml浓硝酸和100 ml不的混合液中（溶液IV），将溶液IV缓慢地加到溶液III中，混合后放置24h，过滤。量取280ml丙酮注入滤液中，用水稀释成1000ml，混匀，贮于聚乙烯瓶中。
4.2.36氢氧化钠GB629：(10%溶液)
按6.5：36.5体积比，将饱和NaOH清液与不含二氧化碳的蒸馏水混合后即可。
4.2.37氯化钡(10%（m/V）溶液)
称取10g氯化钡，用水溶解，稀释至100ml.使用前，以酚酞为指示剂，用氢氧化钠溶液调至微红色。
4.2.38碘化钾溶液(100g/L)
称取100 g碘化钾，溶于水中，稀释到1000 ml，摇匀。
4.2.39硫酸溶液(2N)
量取分析纯浓硫酸（比重1.84）5.6ml缓缓加入适量蒸馏水中,冷却后用蒸馏水定容至100ml ,摇匀. 4.2.40硫酸溶液(3+100)
量取15 ml硫酸，缓缓注入500 ml水中，冷却，摇匀。
4.2.41氢氧化钠溶液(20%)
称取20g分析纯氢氧化钠，用蒸馏水溶解定容至100 ml。
4.2.42原碘液
称取碘化钾22.0 g溶于约300 ml水中，加入碘11.0g，在不断搅拌下使其溶解，然后移入500ml容量瓶中，用水定容，贮于棕色瓶中备用（每月制备一次）。
4.2.43稀碘液
称取碘化钾20.0 g溶于约300 ml水中，准确加入原碘液2.00ml，全部移入500ml容量瓶中，用水定容，贮于棕色瓶中备用（需当天配制）。
4.2.44可溶性淀粉溶液(20g/L)
称取可溶液性淀粉（以绝干计）2.0000g，精确至0.0001g，用水调成浆状物，在搅动下缓缓倾入70ml 沸水中，然后以30ml水分几次冲洗盛淀粉的小烧杯，洗液并入其中，加热煮沸2min直至完全透明，冷却至室温，全部移入100ml容量瓶，用水稀释至刻线。此溶液必须当天配制。
注：采用浙江菱湖食品化工联合公司生产的、标有‘专供酶制剂测定’用的字样和批号的“可溶性淀粉”。
4.2.45蔗糖溶液(20 g/L)
称取2g蔗糖，溶于水，定容至100ml。
4.2.45硫酸溶液(10%（V/V）)
量取10ml硫酸，在搅拌状态下缓慢诸如90ml水中，冷却，稀释至100ml。
4.2.46氢氧化钠溶液(4mol/L)
称取110g氢氧化钠，溶于100ml无二氧化碳的水中，摇匀，注入聚乙烯容器中，密封放置至溶液清亮。用塑料管量取上层清夜54ml，用无二氧化碳的水稀释至250 ml，摇匀。
4.2.47无菌生理盐水
称取氯化钠0.85g，加水溶解，并定容至100 ml，在0.1MPa下灭菌20min。
4.2.48次甲基蓝染色液
称取次甲基蓝0.025 g、氯化钠0.9 g、氯化钾0.042 g、六水氯化钙0.048 g、碳酸氢钠0.02 g和葡萄糖1 g，加水溶解，并定容至100 ml。密封，室温保存。
4.2.49硫酸银-硫酸试剂
向1L硫酸中加入10 g硫酸银，放置1—2天使之溶解，并混匀，使用前小心摇动。
4.2.50氢氧化钠溶液(5%)
称取5 g氢氧化钠，溶于少量水中，稀释至100 ml。
4.2.51盐酸溶液(1+4)
量取1份盐酸溶于4份水中。
4.2.52氢氧化钾溶液(20%)
称取氢氧化钾20g，溶于少量水中，冷却后稀释至100ml。
4.2.53三乙醇胺溶液(1+2)
量取1份三乙醇胺，溶于2份水中。
4.2.54盐酸溶液(1+1)
量取1份盐酸，溶于1份水中。
4.2.55钼酸铵-硫酸混合溶液
于600 ml蒸馏水中徐徐加入167 ml浓硫酸（密度 1.84g/cm3），冷却至室温。称取20g钼酸铵[(NH4)6Mo7O24·4H2O]，研细后溶于上述硫酸溶液中，用蒸馏水稀释至1000ml。
4.2.56氯化亚锡溶液（甘油溶液）(1%)
称取1.5g优级纯氯化亚锡于烧杯中，加20 ml浓盐酸，加热溶解后，再加80 ml纯甘油（丙三醇），搅匀后将溶液转入塑料瓶中备用。
4.2.57硫酸溶液(0.05mol/L)
量取硫酸15 ml，在搅拌状态下，缓慢注入水中，冷却，定容至1000ml,此溶液浓度为0.5mol/L。稀释10倍即为0.05mol/L硫酸溶液。
4.2.58氢氧化钠溶液(0.1mol/L)
称取100g氢氧化钠，溶于100ml无二氧化碳的水中，摇匀，注入聚乙烯容器中，密封放置至溶液清
亮。用塑料管量取上层清夜5.4ml，用无二氧化碳的水稀释至1000 ml，摇匀。
4.2.59硝酸铜溶液(2%)
称取2g硝酸铜，溶于水中，稀释至100ml。
4.2.60硝酸溶液(1：1)
量取1份硝酸，溶于1份水中。
4.2.61硫酸(1+5)
量取1份硫酸，在搅拌状态下，缓慢注入5份水中。
4.2.62盐酸溶液(1+49)
量取1份盐酸，溶于49份水中。
4.2.63硝酸银溶液（m/V）(5%)
称取5g硝酸银，溶于水中，定容至100ml。
4.2.64磺基水杨酸（10%）
称取10g磺基水杨酸，溶于水中，定容至100ml.
4.2.65氨性靛蓝二磺酸钠缓冲溶液：
酸性靛蓝二磺酸钠储备液：称取0.8～0.9g靛蓝二磺酸钠于烧杯中，加1ml除盐水，使其润湿后架7ml 浓硫酸，在水浴上加热30min并不断搅拌，待其全部溶解后移入500ml容量瓶中，用除盐水稀释至刻度，混匀。若有不溶解物需过滤。标定后用除盐水按计算量稀释，使
T=0.04mgO2/ml(此处T应按1mol靛蓝二磺酸钠与1mol氧作用计算)。
注：配制酸性靛蓝二磺酸钠储备液时不可直接加热，否则溶液颜色不稳定。贮存时间不宜过长。如发现沉淀需重新配制。
氨性靛蓝二黄酸钠缓冲液：取T=0.04mgO2/ml酸性靛蓝二磺酸钠储备液50ml于100ml容量瓶中，假如50ml氨—氯化铵缓冲溶液（按1：1的比例混合）混匀，此溶液PH=8.5，缓冲液存放时间不得超过8h,否则应重新配制。
4.3缓冲溶液
4.3.1 PH标准缓冲溶液：
通常使用在25℃下，PH=4.008，PH=6.865，PH9.180三种标准缓冲溶液
PH=4.008；称取10.12g邻苯二甲酸氢钾（G.R）,定容至1000ml
PH=6.865；将磷酸二氢钾和磷酸氢二钠在110-130℃下烘2小时，冷却后，称取3.388gKH2PO4（G.R）和3.533gNa2HPO4（G.R）稀释于水中定容至1000ml
PH=9.180；称取3.80g硼砂（Na2B4O710H2O）定容至1000ml
亦可购置市售的PH标准缓冲溶液的固体试剂，按要求稀释配置。
4.3.2乙酸盐缓冲液（PH3.5）
称取25.0g乙酸铵于25 ml水中，加45 ml 6mol/L盐酸，用稀盐酸或氨水（6mol/L或1mol/L），在PH计上，调节PH值至3.5，用水稀释至100 ml。
4.3.3磷酸盐缓冲液（PH=7）(0.5mol/L)
称取34.0g无水磷酸二氢钾和35.5g无水磷酸氢二钠，用水溶解并稀释至1000 ml 。
4.3.4乙酸-乙酸钠缓冲溶液（PH4.6）(0.1mol/L)
称取6.7g乙酸钠（CH3COONa·3H2O），吸取冰乙酸2.6ml，用蒸馏水溶解定容至1000ml，上述缓冲溶液应以酸度计校正PH值。
4.3.5磷酸缓冲液（PH=6.0）
称取磷酸氢二钠（Na2HPO4·12H2O）45.23g、柠檬酸（C6H8O7·H2O）8.07g,用水溶解并定容至1000ml。配好后，用PH 计校正。
4.3.6硼砂缓冲溶液
称取硼砂（Na2B4O7.10H2O）40g溶于80ml高纯水中，假如氢氧化钠10g，溶解后用高纯水稀释至1000ml 混匀，取50.00ml，家0.1mol/L盐酸溶夜40ml,然后测定其硬度，并安上发往其余950ml缓冲溶液加入所需EDTA标准溶液，以抵消其硬度。
4.3.7氨-氯化铵缓冲溶液
称取54g氯化铵，溶于水，加350 ml氨水，稀释至1000 ml。
4.4指示剂
4.4.1酚酞指示剂(10g/L)
称取1g酚酞，溶于乙醇（95%），用乙醇（95%）稀释至100 ml。
4.4.2次甲基蓝指示剂(5g/L)
称取5g次甲基蓝，溶于少量水中，稀释至1000 ml。
4.4.3次甲基蓝指示剂(0.5g/L)
称取0.5g次甲基蓝，溶于少量水中，稀释至1000 ml。
4.4.4次甲基蓝指示剂(1.0g/L)
称取次甲基蓝1.0 g，溶于水并稀释至1000ml。
4.4.5混合指示剂
甲基红（HG3-958）0.1%乙醇溶液,溴甲酚绿（HG3-1220）0.5%乙醇溶液,两溶液等体积混合,在阴凉处保存期为三个月.
4.4.6淀粉指示剂
10 g/L，称取1 g淀粉，加5ml水使其成糊状，在搅拌下将糊状物加到90ml沸腾的水中，煮沸1min~2 min，冷却，稀释至100 ml。使用期为两周。
4.4.7甲基红指示剂（1g/L）
称取0.1 g甲基红，溶于乙醇（95%），用乙醇（95%）稀释至100ml。
4.4.8钙-羧酸指示剂
称取钙-羧酸指示剂0.5 g与氯化钠50 g在研钵中充分研细混均后,贮于广口磨顶塞瓶中。
4.4.9甲基橙
1g/L，称取0.1g甲基橙，溶于70℃的水中，冷却，稀释至100 ml。
4.4.10甲基红-次甲基蓝混合指示剂
溶解0.1g甲基红于50 ml乙醇中，再加亚甲基蓝0.05 g，用乙醇稀释至100ml。
4.4.11可溶性淀粉溶液(2%)
称取可溶性淀粉 2.00g，然后用少量蒸馏水调匀，徐徐倾入已沸的蒸馏水中，煮沸至透明，冷却，用蒸馏水定容至100 ml，此溶液需当天配制。
注：可溶性淀粉应符合HG3-3095质量标准要求。
4.4.121，10-邻菲罗啉指示剂溶液
溶解0.7g七水合硫酸亚铁(FeSO4·7H2O)于50 ml的水中，加入1.5g 1，10-邻菲罗啉，搅动至溶解，加水稀释至100ml。
4.4.13酸性铬蓝K指示剂(5g/L)
称取0.5 g酸性铬蓝K于4.5g盐酸羟胺混合，加10 ml氨-氯化铵缓冲溶液和40ml高纯水，溶解后用95%乙醇稀释至100ml。
4.4.14铬黑T指示剂（乙醇溶液）(0.5%)
称取0.5g铬黑T和2g氯化羟胺（盐酸羟胺），溶于乙醇（95%），用乙醇（95%）稀释至100ml。临用前制备。
4.4.15钙黄绿素酚酞混合指示剂
称取0.2 g钙黄绿素和0.07 g酚酞置于玻璃研钵中，加20 g氯化钾研细均匀，贮于磨口瓶中(或用该指示剂试纸片)。
4.4.16铬酸钾指示剂(10%)
称取10g铬酸钾，溶于少量水中，稀释至100ml。
4.4.17淀粉指示剂(0.2%)
称取0.2g淀粉，加5ml水使其成糊状，在搅拌下将糊状物加到90ml沸腾的水中，煮沸1min~2 min，冷却，稀释至100 ml。使用期为两周。
1、2，4－二硝基苯肼溶液 I．在15mL浓硫酸中，溶解3克2，4－二硝基苯肼。另在70mL95％乙醇里加20mL 水，然后把硫酸苯肼倒入稀乙醇溶液中，搅动混合均匀即成橙红色溶液（若有沉淀应过滤）。 Ⅱ．将1.2克2，4一二硝基苯肼溶于50mL30％高氯酸中，配好后储于棕色瓶中，不易变质。 I法配制的试剂，2，4－二硝基苯肼浓度较大，反应时沉淀多便于观察。Ⅱ法配制的试剂由于高氯酸盐在水中溶解度很大，因此便于检验水中醛且较稳定，长期贮存不易变质。2、卢卡斯（Lucas）试剂 将34克无水氯化锌在蒸发皿中强热熔融，稍冷后放在干燥器中冷至室温。取出捣碎，溶于23mL浓盐酸中（比重1.187）。配制时须加以搅动，并把容器放在冰水浴中冷却，以防氯化氢逸出。此试剂—般是临用时配制。 3、托伦（Tollens）试剂 I．取0.5mL10％硝酸银溶液于试管里，滴加氨水，开始出现黑色沉淀，再继续滴加氨水，边滴边摇动试管，滴到沉淀刚好溶解为止，得澄清的硝酸银氨水溶液，即托伦试剂。 Ⅱ．取一支干净试管．加入1mL5％硝酸银，滴加5％氢氧化钠2滴，产生沉淀，然后滴加5％氨水，边摇边滴加，直到沉淀消失为止，此为托伦试剂。 无论I法或Ⅱ法，氨的量不宜多，否则合影响试剂的灵敏度。I法配制的Tollens试剂较Ⅱ法的碱性弱，在进行糖类实验时，用I法配制的试剂较好。 4、谢里瓦诺夫（Seliwanoff）试剂 将0.05g间苯二酚溶于50mL浓盐酸中，再用蒸馏水稀释至100mL。 5、希夫（Schiff）试剂 在100mL热水中溶解0.2g品红盐酸盐，放置冷却后，加入2g亚硫酸氢钠和2mL浓盐酸，再用蒸馏水稀释至200mL。 或先配制l0mL二氧化硫的饱和水溶液，冷却后加入0.2g品红盐酸盐，溶解后放置数小时使溶液变成无色或淡黄色，用蒸馏水稀释至200mL。 此外，也可将0.5g品红盐酸盐溶于l00mL热水中，冷却后用二氧化硫气体饱和至粉红色消失，加入0.5g活性炭，振荡过滤，再用蒸馏水稀释至500mL。 本试剂所用的品红是假洋红（Para-rosaniline或Para-Fuchsin），此物与洋红（Rosaniline或Fuchsin）不同。希夫试剂应密封贮存在暗冷处，倘若受热或见光，或露置空气中过久，试剂中的二氧化硫易失，结果又显桃红包。遇此情况，应再通入二氧化硫，使颜色消失后使用。但应指出，试剂中过量的二氧化硫愈少，反应就愈灵敏。 6、0.1％茚三酮溶液 将0.1g茚三酮溶于124.9mL95％乙醇中，用时新配。 7、饱和亚硫酸氢钠 先配制40％亚硫酸氢钠水溶液，然后在每100mL的40％亚硫酸氢钠水溶溶液中，加不含醛的无水乙醇25mL，溶液呈透明清亮状。 由于亚硫酸氢钠久置后易失去二氧化硫而变质，所以上述溶液也可按下法配制：将研细的碳酸钠晶体（Na2CO3?10H2O）与水混合，水的用量使粉末上只覆盖一薄层水为宜，然后在混合物中通入二氧化硫气体，至碳酸钠近乎完全溶解，或将二氧化硫通入1份碳酸钠与3份水的混合物中，至碳酸钠全部溶解力止，配制好后密封放置，但不可放置太久，最好是用时新配。 8、饱和溴水 溶解15克溴化钾于100mL水中，加入10g溴，振荡即成。 9．莫利许（Molish）试剂
常用试剂的配制 1．无Ca2+、Mg2+Hanks液 NaCl 4.5g KCl 0.2g NaHCO 3 0.175g Na 2HPO 4 ·12H 2 O 0.076g KH 2PO 4 0.03g 葡萄糖 0.5g 0.4%酚红 2.5ml 将上述成分依次溶解或加入到双蒸水中, 最后补加双蒸水至500ml, 以5.6%NaHCO 3调整 pH 值至7.4，4℃冰箱保存备用。 2．甲基红试剂 （1）成份 甲基红 0.1g 蒸馏水 200ml 95％乙醇 300ml （2）用途：测定甲基红反应。 3．Hanks液（原液） 原液甲： NaCl 160g KCl 8g MgSO 4·7H 2 O 2g MgCl 2·6H 2 O 2g 上述试剂加入800ml双蒸水。溶解。 CaCl 2 2.8g溶于100ml双蒸水 上述二液混合，加双蒸水至1000ml，再加2ml氯仿防腐，4℃保存。 原液乙： Na 2NPO 4 ·12H 2 O 3.04g KH 2PO 4 1.2g 葡萄糖 20g 加入800ml双蒸水，溶解。 0.4%酚红溶液100ml 上述二液混合，加双蒸水至1000ml，再加2ml氯仿防腐，4℃保存。 使用时甲,乙原液按下列比例配成Hanks 液使用液：原液甲1份、原液乙1份、双蒸水18份滤过，8磅20min灭菌，放4℃冰箱保存，使用前用NaHCO 3 调整PH值。 4．0.4%酚红溶液 称取0.4g酚红置研钵中研碎，逐渐加入0.lmol/LNaOH并不断研磨，直到所有的颗粒
几乎完全解，加入0.lmol/LNaOHl0ml，然后倒入容量瓶中，并加蒸馏水至l00ml,棕色瓶保存备用。 5．pH7.2 Tris-NH 4 CI溶液(红细胞崩解液） Tris (三羟甲基氨基甲烷) 1.03g NH 4 Cl（氯化氨) 3.735g 加双蒸水至500ml，用浓HCl调pH=7.2，10磅15min灭菌后放4℃保存。 6．0.05moI/L pH8.6 巴比妥缓冲液 巴比妥 1.84g 加蒸馏水 200ml 加热溶解 巴比妥纳 10.3g 叠氮纳 0.2g 加蒸馏水溶解 , 并补加到 1000ml 。 7．磷酸盐缓冲液(PB) A 液：为 0.2mol/L 磷酸二氢钠水溶液 ,NaH 2PO 4 ·H 2 O 27.6g, 溶于蒸馏水中, 最 后补加蒸馏水至 1000ml 。 B 液：为 0.2mol/L 磷酸氢二钠水溶液 ,Na 2HPO 4 .7H 2 O 3.6g（或 Na 2 HPO 4 ·12H 2 O 71.6g, 或Na 2HPO 4 · 2H 2 O 35.6g ）, 加蒸馏水溶解，最后加水至 1000ml。若再加 蒸馏水至200ml则成为0.1mol/LPB。 8．0.1mol/LPH8.4 硼酸缓冲液（BBS） 硼酸钠（Na 2B 4 O 7 .10H 2 O） 0.46g 硼酸（H 2BO 3 ） 0.51g 加蒸馏水至100ml 溶解。9．PH7.4 0.01mol/L 磷酸盐缓冲液（PBS）配制方法一： 0.2mol/L Na 2HPO 4 （ Na 2 HPO 4 ·12H 2 O 71.6g加蒸馏水至1000ml） 0.2mol/L NaH 2PO 4 （NaH 2 PO 4 ·2H 2 O 35.6g加蒸馏水至1000ml） 取0.2mol/L Na 2HPO 4 81.0ml 加0.2mol/L NaH 2 PO 4 19ml,再加1900mlH 2 O和 17gNaCl即为PH7.4 0.01mol/L PBS。 PH7.4 0.01mol/L PBS再加入0.05%Tween-20即为ELISA试验的洗涤液。 配制方法二： 甲液（0.1mol/LKH 2PO 4 溶液）：KH 2 PO 4 13.608g，加蒸馏水至1000ml。 乙液（0.1mol/L Na 2HPO 4 溶液）：Na 2 HPO 4 35.814g，加蒸馏水至1000ml。 取甲液19ml，乙液81ml NaCl8.5g、Tween-20 0.5ml混合后加蒸馏水至1000ml即可。
实验室常用溶液及试剂配制 一、实验室常用溶液、试剂的配制-------------------------------------------------------1 表一普通酸碱溶液的配制 表二常用酸碱指示剂配制 表三混合酸碱指示剂配制 表四容量分析基准物质的干燥 表五缓冲溶液的配制 1、氯化钾-盐酸缓冲溶液 2、邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液 3、邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液 4、乙酸-乙酸钠缓冲溶液 5、磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲溶液 6、硼砂-氢氧化钠缓冲溶液 7、氨水-氯化铵缓冲溶液 8、常用缓冲溶液的配制 二、实验室常用标准溶液的配制及其标定-----------------------------------------------4 1、硝酸银（C AgNO3=0.1mol/L）标准溶液的配制 2、碘（C I2=0.1mol/L）标准溶液的配制 3、硫代硫酸钠（C Na2S2O3=0.1mol/L）标准溶液的配制 4、高氯酸（C HClO4=0.1mol/L）标准溶液的配制 5、盐酸（C HCl=0.1mol/L）标准溶液的配制 6、乙二胺四乙酸二钠（C EDTA =0.1mol/L）标准溶液的配制 7、高锰酸钾（C K2MnO4=0.1mol/L）标准溶液的配制 8、氢氧化钠（C NaOH=1mol/L）标准溶液的配制 三、常见物质的实验室试验方法 ----------------------------------------------------------6 1、柠檬酸（C6H8O7·H2O） 2、钙含量测定（磷酸氢钙CaHPO4、磷酸二氢钙Ca（H2PO4）2·H2O、钙粉等） 3、氟（Fˉ）含量的测定 4、磷（P）的测定 5、硫酸铜（CuSO4·5H2O） 6、硫酸锌（ZnSO4·H2O） 7、硫酸亚铁（FeSO4·H2O） 8、砷 9、硫酸镁（MgSO4） 四、维生素检测--------------------------------------------------------------------------------8 1、甜菜碱盐酸盐 2、氯化胆碱
1DEPC水(1‰) 1000ml 水 1ml DEPC 根据需要确定要配的体积，泡实验器具的DEPC水静止4小时后备用，泡24小时。配液体的DEPC水37℃过夜，送至高压，然后配相关溶液。 20.1M tris(ph 7.5) 12.114g tris 1000ml DEPC水 用HCL调ph至7.5，高压备用。 3 4%PFA的配制(ph 7.0)40g PFA 1000ml 0.1m tris(DEPC水配制高压) 将溶液持续加热至60℃左右，搅拌之至完全溶解，注意温度不要超过65℃，否则PFA降解失效。 30.2% 甘油/0.1M tris 20ml 甘油 980ml 0.1Mtris 4 20XSSC Nacl 175.3g （ph 7.0）柠檬酸钠88.2g DEPC水1000ml 分别稀释至2XSSC和0.2XSSC备用 5 HEPES 溶液HEPES 23.8g (ph6.8-8.0)DEPC H2O 100ml 6 50X Denhaldt′s 液 聚蔗糖（Ficoll 400）0.2g 聚乙烯吡咯烷酮(polyvinypyrrolidone) 0.2g 牛血清蛋白（BSA）0.2g DEPC 水20ml 7 预杂交buffer Deinoized formanmid 5ml 20X SSC 1.5ml 1M HEPES 0.5ml 50X Denhanldt′s液1ml 龟精DNA 0.6ml(4ug/ul) DEPC水 1.4ml 龟精DNA 要先95℃10-15min加热变性，随即冰浴。杂交buffer分装后-20℃保存。 8Washing buffer (ph7.5) maleic acid 5.8g NACL 4.4g Tween（吐温） 1.5ml 定容至500ml溶质浓度最后分别为0.1M maleic acid 0.15M nacl 0.3% Tween 9Maleic acid buffer (ph7.5) Maleic acid 5.8g Nacl 4.4g 定容至500ml 溶质的浓度最后分别为0.1M maleic acid 0.15M nacl 10Detection buffer
一.标准溶液配置 -------------------------------------------------------------------------------- 1. 0.0588mol/L高锰酸钾标准溶液 2. 0.1NＮa2S2O3·5H2O标准溶液的制备,24.82g/L 3. 6N醋酸(HAC) 4. １０％碘化钾溶液 二. 指示剂---------- ------------------------------------------------------------------ -------- 3 1. 甲基橙 2. 甲基红 3. 酚酞 4. １０％铬酸钾指示液 5. ０.５％淀粉指示液 6. 碘化钾淀粉试纸 7. 还原黄G试纸的制备 三、试剂的测定 ------------------------------------------------------------------------------- 4 1. 次氯酸钠质量浓度的测定 2. 漂白粉中有效氯的测定 3. 冰醋酸（HAC） 4. 硫化碱（Na2S） 5. 双氧水质量浓度及分解率的测定 6. 烧碱浓度测定 7. 双氧水浓度测定 四．测试方法--------------------------------------------------------------------------------- 6
1. 比移值测定法（滤纸／染液上升法） 2. 缩水率测定 3. pH值的测定 4. 生物整理用纤维素酶活力的测定方法 ４.１．滤纸崩溃法 ４.２．CMC粘度法 一. 标准溶液配置 1．0.0588mol/L高锰酸钾标准溶液 称取9.5g纯高锰酸钾(KMnO4)溶于1L蒸馏水中,再煮沸15min左右,待冷却后盖紧,避免与尘埃及有机物接触,同时不可与强光接触.静置数天后,用石棉过滤储存于棕色试剂瓶中,并放置暗处,然后用草酸钠标定. ２．０.１N Na2S2O3·5H2O标准溶液的制备24.82g/L 制备：称取２５g化学纯粹的硫代硫酸钠（Na2S2O3·5H2O），溶解于１Ｌ新煮沸（煮沸以驱除水中溶解的二氧化碳和防止微生物的作用，如有二氧化碳的存在，并与水反应生成碳酸，会使硫代硫酸钠起分解作用．）而冷却的，加有0.1g无水碳酸钠的蒸馏水中，搅动使溶解，移入暗色大瓶中保存，瓶口用塞子盖紧，待校准． 制备或保存时应注意下列几点：日光能促进Ｎa2S2O3 溶液分解作用，所以Ｎa2S2O3溶液应该保存在清洁的有色瓶中,尽可能避免和空气接触．制成的Ｎa2S2O3溶液，它的浓度随放置时间稍有改变，在最初１０－１４天中，浓度常常有些增加，过此以后浓度就会慢慢减小．若在配置溶液时加入Na2CO3，使其在溶液中的浓度约为0.01－0.02%，就可以防止溶液的分解．
常规试剂配制和测定方法 一、溶液的配制 1. Mandels营养盐溶液（1000 mL） 名称重量（g） 硫酸铵（(NH4)2SO4）14 磷酸二氢钾（KH2PO4）20 尿素（H2NCONH2） 3 硫酸镁（MgSO4·7H2O） 3 氯化钙（CaCl2·2H2O） 4 注：用煮沸10 min后的蒸馏水配制。 2. Mandels微量元素溶液（1000 mL） 名称重量（g） 氯化钴（CoCl2·6H2O） 硫酸锌（ZnSO4·7H2O） 硫酸锰（MnSO4·H2O） 硫酸亚铁（FeSO4·7H2O） 注：用煮沸10 min后的蒸馏水配制。 3. DNS试剂的配制（1000 mL） （1）取：3,5-二硝基水杨酸（C7H4N2O7）7.5 g 氢氧化钠（NaOH ）14.0 g 充分溶解于1000 mL 水中（水预先煮沸10 min） （2）加入：酒石酸钾钠（C4H4O6KNa·4H2O）216.0 g 苯酚（在50 ℃水浴中融化）mL 偏重亚硫酸钠（Na2S2O5） 6.0 g
（3）充分溶解后盛于棕色瓶中，放置5天后便可使用，平时盛一小瓶(250 mL)使用，要放在冰箱中冷藏。此溶液每月配制一次。 注意：倒入瓶中时要尽量装满！！ 4. 考马斯亮蓝G-250的配制（1000 mL） 称考马斯亮蓝G-250 100 mg即0.1g溶于50mL 95%乙醇中，加入100 mL 85 %磷酸，用蒸馏水稀释至1000 mL ，滤纸过滤。最终试剂中含%（w/v）考马斯亮蓝 G-250，%（w/v）乙醇，%（w/v）磷酸。 5. 1.0 M柠檬酸缓冲溶液的配制（1000 mL） 名称分子量Mn 重量(g) 柠檬酸（C6H8O7·H2O）210 210 NaOH 40 准确称取柠檬酸210 g，溶于约750 mL煮沸（10 min）蒸馏水中，待柠檬酸充分溶解后加入氢氧化钠74.5 g，完全溶解后将上述溶液转移到1000 mL容量瓶中，冷却后将容量瓶定容到1000 mL（原始）。（检验方法：取1.0 M柠檬酸缓冲溶液稀释20倍，测定稀释液的pH值，pH值应为） 6. 标准糖溶液的配制和标准方程的测定 （1）标准糖溶液的配制 准确称取2.000 g葡萄糖/木糖（葡萄糖/木糖需105 ℃烘干3 h），蒸馏水溶解，全部转移至1 L容量瓶内，摇匀，配制成2 g/L葡萄糖/木糖溶液。 取9个100 mL容量瓶、1支20 mL刻度吸管，分别吸取2 g/L葡萄糖/木糖溶液10 mL、20 mL、30 mL、40 mL、50 mL、60 mL、70 mL、80 mL、90 mL依次加入容量瓶，蒸馏水定容，摇匀。即为0.2 g/L、0.4 g/L、0.6 g/L、0.8 g/L、1.0 g/L、1.2 g/L、1.4 g/L、1.6 g/L、1.8 g/L、2.0 g/L葡萄糖/木糖标准溶液。 取6个30 mL容量瓶、1支20 mL刻度吸管，分别吸取2 g/L葡萄糖溶液10 mL、12 mL、14 mL、16 mL、18 mL、20 mL依次加入容量瓶，每瓶再加入mL柠檬酸缓冲液，蒸馏水定容，摇匀。即为1.0 g、1.2 g、1.4 g、1.6 g、1.8 g、2.0 g酶解葡萄糖。（2）标准方程的测定： ①葡萄糖/木糖标准方程的测定
实验室常用生化试剂配方 1.常用抗生素配制以及使用说明（参考链霉菌室操作手册2019版） 抗生素 英文名称及缩写 抗性基因 贮藏液浓度(mg/ml) 100 25(无水乙醇配) 50 25 50 50 25(DMSO配) 100 50 35 25(0.15M NaOH配) 50(DMSO配) 50 50 MM 使用终浓度（μg/ml）链霉菌 2CM YEME 大肠杆菌 LA或LB 氨苄青霉素氯霉素潮霉素卡那霉素壮观霉素链霉素硫链丝菌素红霉素阿泊拉霉素紫霉素萘锭酮酸 TMP Ampicillin, Amp bla Chloramphenicol, Cml Hygromycin, Hyg Kanamycin, Km Spectinomycin, Spc Streptomycin, Str Thiostrepton, Thio Erythomycin, Ery Apramycin, Am Viomycin,Vio Nalidixic acid Trimethoprim cat hyg aac/aph aadA str tsr ermE aac(3)IV vph －* 10 10 2 5 10 5 100 10 －－ 25 25 20 25 10 － 50 －－－－－－ 2.5 － 5 50-100 25 － 25 50 25 25 20 10-30
注意事项： (1) –表示无记录或不能使用，贮存液除特别说明外均用无菌水配制，配制过程请 确保抗生素粉末充分溶解混匀后再分装； （2）Km 和Am有交叉抗性，同时具有这两种抗性基因时应适当提高抗生素的量，并 设置阴性对照； （3）Hyg、Vio易见光分解，配制好后应用锡箔纸包好,使用过程中建议避光操作。有些抗生素需要在低盐的环境（如DNA培养基）下筛选效率较高，如Hyg, Km, Vio （4）用无菌水配制的抗生素需在超净工作台内用0.22 μm一次性过滤器过滤除菌并 分装；氯霉素、TMP、硫链丝菌素可以在超净工作台外配制分装，无需过滤除菌，但需确 保配制贮存液所用溶剂（无水乙醇、DMSO）未遭受污染，建议配制氯霉素时使用新的无水 乙醇，不要使用抽提质粒或总DNA时用的无水乙醇，以防止污染；DMSO，即二甲亚砜，易 挥发，有剧毒； （5）长期不用的抗生素请置于-20℃保存，抗生素粉末按照使用说明一般置于4℃保存，经常使用时可以暂置于4℃保存； （6）抗生素的实际使用浓度请结合实验经验进行适当调整； (7)配制抗生素时应尽量一次性称取抗生素粉末，配制过程中建议穿工作服，戴一次 性橡胶手套及口罩，及时清理称量配制抗生素时使用的台面及器具，以避免抗生素及溶剂 对自身的损伤及对工作环境的污染。 注意事项： (1)表中所列酶均可以用无菌水配制，也可以用相应的缓冲液配制，缓冲液配制方法 参考《分子克隆实验指南（第3版）》： 蛋白酶 K缓冲液：50 mM Tris（pH 8.0），1.5 mM 乙酸钙； RNase A缓冲液：TE （pH 7.6）：10 mM Tris-HCl，1 mM EDTA；溶菌酶缓冲液：10 mM Tris-HCl（pH 8.0）； (2) RNase A配制好后沸水浴处理5 min，取出贮存RNase A后首次使用时也需沸水 浴处理5 min后再使用； （3）制备原生质体时使用的溶菌酶配制时需过滤除菌，其他情况一般无需过滤除菌； （4）所有酶均应在-20℃保存，使用过程中避免反复冻融，配制过程中尽量避免外界 污染。 （1）IPTG用无菌水配制，0.22μm一次性滤膜过滤除菌，分装保存于-20℃；
一、流式细胞术常用试剂 1、10％NaN3：将10gNaN3溶解于100ml蒸馏水中，室温保存；活体实验或在辣根过氧化酶反应中可不使用NaN3。 2、3％BSA/PBS：100ml PBS中加入3g BSA，使之溶解，再加入0.2ml 10％的NaN3。 3、500mmol/L EDTA：将186g EDTA?Na2?2H2O溶解于400ml蒸馏水中，用NaOH将PH调至8.0，补充蒸馏水至500ml，分装，高压灭菌，室温保存。 4、4％多聚甲醛：在磁力搅拌下，将4g多聚甲醛溶于100ml PBS，加入数滴NaOH，在通风柜中于60度加热，使其溶解，调整PH至7.4，使用前新鲜配制。 5、消化液：0.25％胰蛋白酶（用培养液或PBS配制）或0.25％胰蛋白酶与0.02％EDTA的混合液。 6、红细胞裂解液：NH4Cl 4.16g，KHCO3 0.5g，EDTA?2Na 0.02g，溶于100ml水中，调PH 至7.2，补充蒸馏水至500ml，4度储存，使用时需恢复至室温。 7、流式细胞抗体稀释剂：0.1mmol/L PBS液（PH 7.4）＋1％BSA＋0.1％Na2N3。 8、常用细胞破膜剂：PBS液（PH 7.4）＋1％FBS（或BSA）＋0.1％NaN3＋0.1％saponin（Sigma 的效果不错）。 9、流式细胞染色洗涤液：含2％的BSA、0.1％NaN3的PBS（PH 7.4）。 10、PI染液（保存液，10×，用于细胞周期和凋亡检测）：10mg PI溶于10ml PBS，加入2mg 无DNA酶的RNA酶，4度保存备用。应用时，10倍稀释，每管加0.3ml～0.5ml PI染液。 11、Hanks液的配制（BSS，主要用于培养液、稀释剂和细胞清洗液，不能单独作为细胞、组织培养液） 原液A NaCl 160g MgSO4?7H2O 2g KCl 8g MgCl?6H2O 2g CaCl2 2.8g 溶于1000ml双蒸水 原液B 1）Na2HPO4?12H2O 3.04g KH2PO4 1.2g 葡萄糖20.0g 溶于800ml双蒸水 2）0.4％酚红溶液：取酚红0.4g置玻璃研钵中，逐滴加入0.1N NaOH并研磨，直至完全溶
盐酸标准溶液的标定 一．仪器与试剂 仪器：全自动电光分析天平 1台 （1）称量瓶 1只 （2）试剂瓶 1000ml 1个 （3）锥形瓶 250ml 3个 （4）酸式滴定管 50ml 1支 （5）量筒 50mL 1只 试剂： （1）0.1mol/L 盐酸待标定溶液 （2）无水碳酸钠（固基准物） （3）溴甲酚绿-甲基红混合指示剂 二、步骤 0.1mol/L 盐酸标准溶液的标定 1．标定步骤 用称量瓶按递减称量法称取在270~300℃灼烧至恒重的基准无水碳酸钠0.15~0.22g(称准至0.0002g)，放入250ml 锥形瓶中，以50ml 蒸馏水溶解，加溴甲酚绿-甲基红混合指示剂10滴（或以25ml 蒸馏水溶解，加甲基橙指示剂1~2滴），用0.1mol/L 盐酸溶液滴定至溶液由绿色变为暗红色（或由黄色变为橙色），加热煮沸2分钟，冷却后继续滴定志溶液呈暗红色（或橙色）为 终点。平行测定3次，同时做空白实验。以上平行测定3次的 算术平均值为测定结果。 2．计算 ()99 .52100001?-?=V V m C HCl 式中： m —基准无水碳酸钠的质量，g; V 1—盐酸溶液的用量，ml; V 0—空白试验中盐酸溶液的用量，ml; 52.99—1/2 Na 2CO 3摩尔质量，g/mol C HCL —盐酸标准溶液的浓度，mol/L.
氢氧化钠溶液的标定 1、试剂： （1）0.1000mol/L 氢氧化钠待标定溶液 （2）酚酞指示剂 2、仪器： （1）全自动电光分析天平 1台 （2）称量瓶 1只 （3）碱式滴定管 （50mL ） 1支 （4）锥形瓶 （250mL ） 3支 （5）烧杯 （250mL ） 2只 （6）洗瓶 1只 （7）量筒 （50mL ） 1只 3、测定步骤： 准确称取在110℃~120℃准确称取在110~120℃烘至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾0.5~0.6g(称准至0.0002g)，放入250ml 三角瓶中，加入250ml 的蒸馏水溶解，加酚酞指示剂2滴，用0.1mol/LNaOH 溶液滴定至由无色变为红色30秒不褪色为终点，平行测定3次，同时作空白试验。 4、计算：C (NaOH)=22 .204)(100001?-?V V m 式中：m —邻苯二甲酸氢钾的质量，g 1V —NaOH 溶液的用量，ml 0V —空白试验NaOH 溶液的用量，ml 204.22 —邻苯二甲酸氢钾的摩尔质量，g/mol NaOH C —NaOH 标准溶液的浓度，mol/L
实验常用试剂、缓冲液的配制方法 Ampicillin（氨卡青霉素）100mg/ml □组份浓度100mg/ml Ampicillin □配制量50mL □配置方法 1.称量5g Ampicillin置于50mL离心管中。 2.加入40mL灭菌水，充分混合溶解后，定容至50mL。 3.用0.22μm滤膜过滤除菌。 4.小份分装（1mL/份）后，-20℃保存。 Kan（卡那霉素）50mg/ml □组分浓度50mg/ml卡那霉素 □配制量50mL □配制方法 1.称取2.5g卡那霉素置于50ml塑料离心管中。 2.加入40ml灭菌水，充分混合溶解之后定容至50mL。 3.用0.22μm 滤膜过滤除菌。 4.小份分装（1mL/份）后，-20℃保存。 IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷) 24 mg/ml □组份浓度24mg/L IPTG □配制量50mL □配置方法 1.称量1.2gIPTG置于50mL离心管中。
2.加入40mL 灭菌水，充分混合溶解后，定容至50mL。 3.用0.22μm 滤膜过滤除菌。 4.小份分装（1mL/份）后，-20℃保存。 X- Gal 20mg/m □组份浓度20mg/L X-Gal □配制量50mL □配置方法 1.称取1gX-Gal置于50mL离心管中。 2.加入40mL DMF（二甲基甲酰胺），充分混合溶解， 定容至50mL。 3.小份分装（1mL/份）后，-20℃避光保存。 LB培养基 □组份浓度1％（W/V）Tryptone，0.5％（W/V）Yeast Extract，1％（W/V）NaCl □配制量1L □配置方法 1.称量下列试剂，置于1L烧杯中 Tryptone（胰化蛋白胨）10g Yeast Extract（酵母提取物）5g NaCl（氯化钠）10g 2.加入约800mL 的去离子水，充分搅拌溶解。 3.滴加5N NaOH（约0.2mL），调节pH值至7.2-7.3。
化验室化学试剂管理规定 1.范围和目的 本规程适用于品检科所有化学试剂以及配制试剂。 制定本规程的目的是为了建立化验室化学试剂的购买、接受、储存、发放、使用、销毁使用管理规程，使化验员能正确地使用试剂，保证化验工作质量。 2.化学试剂的购买： 技术员根据库存量及化学试剂检验需要量提出购买计划，经化验室负责人审核，公司厂长批准，交供应科采购员购买。 3.化学试剂的入库 购买后由采购员直接交给仓库管理员并办理入库手续。 技术人员根据购买计划办理出库手续并通知化学试剂管理员到出库接受。 化学试剂管理员先检查包装的完好性，封口是否严密,试剂无泄漏，标签是否粘贴牢固无破损，内容清晰,贮存条件明确，瓶签已部分脱胶的，应及时用胶水粘贴。无标签的试剂不得入库。严格按采购计划单内容，逐一核对。 化学试剂保管员必须每天检查一次温湿度表并记录。超出规定范围的应及时调整。 无标签的试剂应予销毁。 4.化学试剂的领用 化验员根据检验需要量提出领用要求。 化学试剂管理员根据化验员的要求发放化学试剂，并填写化学试剂领用记录。 5.化学试剂贮存 原装化学试剂贮存环境 55 5 55℃,相对湿度以45-75%为宜。 5应有良好的通风设备。 化验室内化学试剂的贮存 5 配制好的化学试剂应存放于试剂架上。性质不稳定的配制试剂应根据不同的性质存放，如放在阴暗处、冰箱等地方。使用化学试剂的过程中应特别注意其外观的变化。 配制化学试剂一般贮存1~2个月为宜,过期不得使用,须重新配制。在使用过程中发现有沉淀的，亦不得使用。 55需要冷藏保存的化学试剂应放在冷藏箱内保存。 易潮解、易失水风化、易挥发易吸收、二氧化碳、易氧化、易吸水变质化学试剂，需密闭保存或蜡封保存,应存放试剂柜下部柜中,平时应关门上锁；。 易爆炸品、易燃品、腐蚀品应单独存放,平时应关门上锁,剧毒品用后归还专用库（柜）。某些高活性试剂应低温干燥贮放。 保持室内清洁,通风和温湿度应符合规定。 每日检查一次消防灭火器材的完好状况,保证随时可以使用。
常用试剂的配制一、标准溶液的配制 1、硫酸（H 2SO 4 ）溶液的配制： 1000mL浓度c（1/2H 2SO 4 ）=0.1mol/L，即c（H 2 SO 4 ）=0.05mol/L的硫酸溶液的配制： 取3mL左右的浓硫酸缓缓注入1000mL水中，冷却，摇匀。 新配制的硫酸需要标定，其标定方法如下： 称取于270-300℃高温炉中灼烧至恒重的工作基准试剂无水碳酸钠0.2g，溶于50mL水中，加10滴溴甲酚绿-甲基红指示液，用配制好的硫酸溶液滴定至溶液由绿色变为暗红色，煮沸2min，冷却后继续滴定至溶液再呈暗红色。同时做空白试验（取50mL水，加10滴溴甲酚绿-甲基红指示液，同样用硫酸溶液滴定至溶液由绿色变为暗红色，煮沸2min，冷却后继续滴定至溶液再呈暗红色）。计算公式为： 式中： m：无水碳酸钠的质量，g； V 1 ：滴定时所用的硫酸的体积，mL； V 2 ：空白滴定时所用的硫酸的体积，mL； M：无水硫酸钠的相对分子质量，g/mol，[M（1/2Na 2CO 3 ）=52.994）]。 测定氨氮时，氨氮含量的计算： 式中： 氨氮：氨氮含量，mg/L； V 1 ：滴定水样时所用的硫酸的体积，mL； V 2 ：空白滴定时所用的硫酸的体积，mL； M：硫酸溶液的浓度，mol/L； V：水样的体积，mL。 2、重铬酸钾（K 2Cr 2 O 7 ）溶液的配制 1000mL浓度c（1/6K 2Cr 2 O 7 ）=0.2500mol/L，即c（K 2 Cr 2 O 7 ）=0.0417mol/L的重铬酸钾溶液的配 制： 称取12.258g于120℃下干燥2h的重铬酸钾溶于水中，并移入容量瓶中，定容至1000mL，摇匀，备用。 3、硫酸亚铁铵标准溶液的配制：
生物学常用试剂配制 HEN system office room 【HEN16H-HENS2AHENS8Q8-HENH1688】
常用试剂 储存注意事项：储存于阴凉、通风的地方；远离火种、热源。避免光照。室温不超过30℃，相对湿度不超过80％。包装必须密封，切勿受潮。应与易（可）燃物、还原剂、碱类、醇类、食用化学品分开存放，切忌混储，储区应备有合适的材料收容泄漏物。 操作注意事项：尽量在通风橱操作，加强通风，避免粉尘扩散。远离易燃、可燃物，避免与还原剂、碱类、醇类接触，防止包装及容器损坏。 EDTA（PH ） 组分浓度: mol/L EDTA（MW：） 配制量: 500ml 配制方法: 1．称取93g Na2EDTA·2H2O置于500ml蓝盖瓶中。 2．加入400ml的去离子水，置于磁力搅拌器上充分搅拌。 3．用NaOH调节调节pH值至（约需加入20g固体NaOH），当pH 接近时， EDTA方可完全溶解，加入去离子水定容至1L。 4．高温高压灭菌后，室温保存半年。 5M NaCl 组份浓度： 5mol/L NaCl (MW： 配制量： 1L 配制方法： 1.准确称取氯化钠，置于1L的蓝盖瓶中。 2.用去离子水溶解并稀释至1L。 3.高温高压灭菌后，常温保存。 CaCl2 组份浓度：L CaCl2 (MW： 配制量： 50ml 配制方法: 1.准确称取氯化钙 g于50ml的conical tube中。 2.用去离子水溶解并稀释至500ml，用μm滤膜过滤除菌滤膜过滤除菌到进口的conical tube。 3.贮存于4℃。 50% 甘油 组分浓度： 50%(V/V) glycerol 配制量： 100ml 配制方法: 1. 量取下列试剂，置于250ml蓝盖瓶中： 100% glycerol 50ml 2.加入50ml去离子水，充分搅拌溶解。 3.高温高压灭菌，4℃保存。 4.使用时，到超净台分装。 Amp-氨苄青霉素（钠盐） 放置：置于4°C冰箱
https://www.doczj.com/doc/b85587981.html, 常用试剂配制及显色方法 （一）通用显色剂 1．重铬酸钾——硫酸 一般有机物均能显色，不同化合物显示不同颜色。 喷洒剂：5克重铬酸钾溶于100ml，40%硫酸中。喷洒后加热至150o C斑点出现。2．碘：检查一般有机物 （1）碘蒸汽：在一个密闭玻璃皿先放入碘片，使缸内空气被碘蒸气饱和将薄层或纸层放入缸内数分钟即显色，有时在缸内放一盛水的小杯，增加缸内的湿度，可提高 显色的灵敏度。 （2）0.5%碘的氯仿溶液，取出挥发散过量的碘再喷1%淀粉的水溶液，斑点转成蓝色。3．碘——碘化钾溶液：很我有机物虽黄色（配法见后）。 4．5%——磷钼酸乙醇溶液：喷后120o C烤，还原性物质显兰色，再用氨气熏，则背景变为无色。 5．20%磷酸乙醇溶液：喷后120o C，还原性物质显兰色。 6．碱性高锰酸钾试剂：还原性物质在淡红背景上显黄色。溶液I:1%高锰酸钾溶液。 溶液II：5%碳酸钠溶液。 溶液I和溶液II等量混合使用。 7．中性0.05%高锰酸钾溶液：易还原性物质在淡红背景上显黄色。 8．硝酸银——氢氧化铵（Tollen’s--zoffaronl）试剂，喷后105o C烤5~10分钟，还原性物质显黑色。 溶液I：0.1N硝酸银溶液。溶液II：氢氧化铵溶液。 临用前溶液I和溶液II以1：5混合。注意：放久则形成爆炸性的叠氦化银。 9．硝酸银——高锰酸钾试剂：还原性物质在兰绿色背景上立即显黄色。 溶液I：0.1N硝酸银溶液：2N氢氧化铵溶液：2N氢氧化钠（1：1：2）。临用前配制。 溶液II：高锰酸钾0.5g，碳酸钠1g，加水成100ml溶液,临用前溶液I和溶液II等量混合。 10．四唑试剂：还原性物质，在室温或微加热时显紫色。 溶液I：0.5%四唑兰甲醇溶液。溶液II：6N氢氧化钠溶液。临用前溶液I和溶液II等量混合。 11．铁氰化钾：三氯化铁试剂：还原性物质显兰色，再喷射2N/L盐酸溶液，则兰色加深。 溶液I：1%铁氰化钾溶液。溶液II：2%三氯化铁溶液。临用前溶液I和溶液II
氨苄青霉素 ﹡组分浓度 100mg/ml 氨苄青霉素 ﹡配制量 50ml ﹡配制方法 1.称取 5g Ampicillin置于 50ml 塑料离心管中。 2.加入 40ml 灭菌水,充分混合溶解之后定容至 50ml 。 3. 0.22μm 滤膜过滤除菌,小份分装(1ml/管后,置于-20℃保存。卡那霉素 (可配 25mL ﹡组分浓度 50mg/ml卡那霉素 ﹡配制量 50ml ﹡配制方法 1.称取 2.5g 卡那霉素置于 50ml 塑料离心管中。 2.加入 40ml 灭菌水,充分混合溶解之后定容 50ml 。 3. 0.22μm 滤膜过滤除菌,小份分装(1ml/管后,置于-20℃保存。RNase A ﹡组分浓度 10mg/ml RNase A ﹡配制量 50ml ﹡配制方法 1.取 0.5g RNase A置于 50ml 塑料离心管中。
2.加入 40ml 灭菌水,充分混合溶解之后定容 50ml 。 3. 100℃煮沸 15min, 缓慢冷却至室温,小份分装(1ml/管后,置于-20℃保存。IPTG ﹡组分浓度 24mg/ml IPTG ﹡配制量 50ml ﹡配制方法 1.称取 1.2g IPTG置于 50ml 塑料离心管中。 2.加入 40ml 灭菌水,充分混合溶解之后定容 50ml 。 3.用0.22μm 滤膜过滤除菌,小份分装(1ml/管后,置于-20℃保存。 X-Gal ﹡组分浓度 20mg/ml X-Gal ﹡配制量 50ml ﹡配制方法 1.称取 1g X-Gal置于 50ml 塑料离心管中。 2.加入 40mlDMF (二甲基甲酰胺 ,充分混合溶解之后定容至 50ml 。 3.小份分装(1ml/管后,置于-20℃保存。 DTT ﹡组分浓度 1M DTT ﹡配制量 10ml
常用试剂的配制 【2,4-二硝基苯肼试剂】 Ⅰ．取3g 2,4-二硝基苯肼溶于15mL浓硫酸中。将此酸性溶液慢慢加入70mL95%乙醇中，再加蒸馏水稀释到90mL，搅动混合均匀即成橙红色溶液（若有沉淀应过滤）。 Ⅱ．将1.2g 2,4-二硝基苯肼溶于50mL30%高氯酸中。配好后储于棕色瓶中，不易变质。 I 法配制的试剂2,4-二硝基苯肼浓度较大，反应时沉淀多便于观察。Ⅱ法配制的试剂，由于高氯酸盐在水中溶解度很大，因此便于检验水溶液中的醛且较稳定，长期贮存不易变质。 【饱和亚硫酸氢钠溶液】 先配制40%亚硫酸氢钠水溶液。然后在每100mL的40 %亚硫酸氢钠水溶液中，加不含醛的无水乙醇25mL，溶液呈透明清亮状。如有少量的亚硫酸氢钠结晶析出，必须滤去或倾斜上层清液。 由于亚硫酸氢钠久置后易失去二氧化硫而变质，所以上述溶液也可按下法配制：将研细的碳酸钠晶体（Na2CO3·10H2O）与水混合，水的用量使粉末上只覆盖一薄层水为宜。然后在混合物中通入二氧化硫气体，至碳酸钠近乎完全溶解，或将二氧化硫通入1份碳酸钠与3份水的混合物中，至碳酸钠全部溶解为止。配制好后密封放置，但不可放置太久，最好是用时新配。 【Schiff（希弗）试剂】 配制方法有三种: 1．将0.2g对品红盐酸盐溶于100mL新制的冷却饱和二氧化硫溶液中，放置数小时，直至溶液无色或淡黄色，再用蒸馏水稀释至200mL，存在于玻璃瓶中，塞紧瓶口，以免二氧化硫逸散。 2．溶解0.5g对品红盐酸盐于100mL热水中，冷却后通入二氧化硫达饱和，至粉红色消失，加入0.5g活性炭，震荡过滤，再用蒸馏水稀释至500mL。 3．溶解0.2g对品红盐酸盐于100mL热水中，冷却后，加入2g亚硫酸钠和2mL浓盐酸，最后用蒸馏水稀释至200mL。 品红溶液原是粉红色，被二氧化硫饱和后变成无色的Schiff试剂。醛类与Schiff试剂作用后，反应液呈紫红色。 酮类通常不与Schiff试剂作用，但是某些酮类(如丙酮等)能与二氧化硫作用，故当它与Schiff 试剂接触后能使试剂脱去亚硫酸，此时反应液就出现品红的粉红色。 Schiff试剂应密封贮存于暗冷处，倘若受热见光或露置空气中过久，试剂中的二氧化硫易失，结果又显桃红色，遇此情况，应再通入二氧化硫，使颜色消失后使用。但应指出，试剂中过量的二氧化硫愈少，反应就愈灵敏。 【Fehling（斐林）试剂】 Fehling试剂由Fehling A和Fehling B组成，使用时将两者等体积混合，其配法分别是：Fehling A：将3.5g含有五结晶水的硫酸铜溶于100mL水中即得淡蓝色的Fehling A试剂。 FehlingB：将17g五结晶水的酒石酸钾钠溶于20mL热水中，然后加入含有5g氢氧化钠的水溶液20mL，稀释至100mL即得无色清亮的Fehling B试剂。 由于氢氧化铜是沉淀，不易与样品作用，因此，用酒石酸钾钠存在时氢氧化铜沉淀溶解，形成深蓝色的溶液：
GMP化学试剂、配制试剂管理制度 文件版本 1.0 文件编号：G10-SMP-030 修改状态 0 受控状态分发号生效日期 起草人审核人批准人文件领用人起草日期审核日期批准日期领用日期 1. 目的：为使试剂性质处于安全、稳定、有效状态，确保检测实验不受试 剂因素干扰，特建立本管理制度。 2. 适用范围：用于化验室化学试剂及用于定性检测的配制试剂贮存、领用的管 理。 3. 职责：QC检验员，质量管理部长 4. 内容 4.1 贮存条件 4.1.1 化验室化学试剂应单独贮藏于专用的药品贮存室内。该贮存室应阴 凉避光，防止由于阳光照射及室温偏高造成试剂变质、失效。 4.1.2 化学试剂贮存室应设在安全位置，远离实验室、办公室。室内严禁 明火，消防灭火设施器材完备。 4.1.3 化学试剂贮存室应有良好的耐腐蚀、防爆的排风装置，有恒温、除 湿装置，保证随时开启，运动良好。室温一般以10～25?，相对湿 度以50～75％为宜。 4.1.4 盛装化学试剂的贮存柜需用防尘、耐腐蚀、避光的材质制成，最好 顶部装有通风设施，取用方便。 4.1.5 化学性质或防护、灭火方法相抵触的化学危险物品，不得在同一柜 或同一贮存室内存放。 4.1.6 危险品应贮存于专室或专柜中。除符合上述要求外，还应门窗坚固 且朝外开。易燃液体贮藏于室温一般不得超过25?。照明设施采用 隔离、封闭、防爆型。 4.2 贮存 4.2.1 试剂管理员负责化学试剂的贮存工作。 4.2.2 该管理员应具有一定的专业知识，经过专业培训且考试合格，具有 高度责任心的专业技术人员担任，保证化学试剂按规定的要求贮存。 4.2.3 检验中使用的化学试剂种类繁多，须严格按其性质（剧毒、麻醉、 易燃、易爆、易挥发、强腐蚀等）和贮存要求分类存放。 4.2.4 分类：一般按液体、固体分类。每一类又按有机、无机、危险品、 低温贮存品等再次分类，按序排列，分别码放整齐。 4.2.5 易潮解吸湿、易失水风化、易挥发、易吸收二氧化碳、易氧化、易 吸水变质的化学试剂，须密塞或蜡封保存。 4.2.6 爆炸品、剧毒品、易燃等应单独存放。 4.2.7 溴、氨水等某些高活性试剂低温干燥贮存。 4.2.8 各种试剂均应包装完好，封口严密，标签完整。发现标签模糊或将 要脱落，应立即重新贴好标签。 4.2.9 化学试剂保管员至少每周检查一次试剂仓库温湿计。若超出规定范 围应及时调整。