微生物的生物多样性简介
微生物是地球上生物多样性最为丰富的资源。微生物的种类仅次于昆虫，是生命世界里的第二大类群。然而由于微生物的微观性，以及研究手段的限制，许多微生物的种群还不能分离培养，其已知种占估计种的比例仍很小。从下面的两张统计表中可以看出。
中国微生物已知物种数与世界已知物种数的比较
微生物的已知种数和估计总种数
微生物是生物中一群重要的分解代谢类群，没有微生物的活动地球上的生命是不可能存在的。它们是地球上最早出现的生命形式，其生物多样性在维持生物圈和为人类提供广泛而大量的未开发资源方面起着主要的作用。
微生物的多样性包括所有微生物的生命形式、生态系统和生态过程以及有关微生物在遗传、分类和生态系统水平上的知识概念。
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物种是生物多样性的表现形式，与其它生物类群相比，人类对微生物物种多样性的了解最为贫乏。以原核生物界为例，除少数可以引起人类、家畜和农作物
疾病的物种外，对其它物种知之甚少。人们甚至不能对世界上究竟存在多少种原核生物作出大概的估计。真菌是与人类关系比较密切的生物类群，目前已定名的真菌约有8万种，但据估计地球上真菌的数量约为150万种，也就是说人们已经知道的真菌仅为估计数的5％。
微生物的多样性除物种多样性外，还包括生理类群多样性、生态类型多样性和遗传多样性。
微生物的生理代谢类型之多，是动植物所不及的。微生物有着许多独特的代谢方式，如自养细菌的化能合成作用、厌氧生活、不释放氧的光合作用、生物固氮作用、对复杂有机物的生物转化能力、分解氰、酚、多氯联苯等有毒物质的能力，抵抗热、冷、酸、碱、高渗、高压、高辐射剂量等极端环境的能力，以及病毒的以非细胞形态生存的能力等。微生物产生的代谢产物种类多，仅大肠杆菌一种细菌就能产生2000－3000种不同的蛋白质。天然抗生素中，2/3（超过4000种）是由放线菌产生的。微生物所产酶的种类也是极其丰富的，从各种微生物中发现，仅II型限制性内切酶就有1443种。
微生物与生物环境间的相互关系也表现出多样性，主要有互生（和平共处，平等互利或一方受益，如自生固氮菌与纤维分解细菌）、共生（相依为命，结成整体，如真菌与蓝细菌共生形成地衣）、寄生（敌对，如各种植物病原菌与宿主植物）、拮抗（相克、敌对，如抗生素产生菌与敏感微生物）和捕食（如原生动物吞食细菌和藻类）等关系。
与高等生物相比，微生物的遗传多样性表现的更为突出，不同种群间的遗传物质和基因表达具有很大的差异。全球性的微生物基因组计划已经展开，截止2000年4月的统计，已有27个原核生物的全基因组序列全部完成发表，另有95个正在进行中；4个真核生物的全基因组序列已完成发表，21个正在进行中。基因组时代的到来，必然将一个崭新的、全面的和内在的微生物世界展现在人们面前。
微生物资源的开发，是21世纪生命科学生命力之所在。由于动植物物种消失是可以估计的，这就意味着微生物多样性的消失现象也在发生，如何利用和保护微生物多样性已成为亟待解决的问题。近年来，世界各国和国际组织已对此做
了许多努力，并提出了一项微生物多样性行动计划，随着这项计划的逐步实施，人类将从微生物生物多样性的利用和保护中受益。这项计划包括：
1.建立推动微生物多样性研究的国际组织；
2.召开关于微生物“种”的概念和分类指征研讨会；
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4.提出已知种的目录；
5.发展微生物分离、培养和保藏的技术；
6.发展微生物群落取样的标准；
7.提出选择自然保护区和其它需要长期保护的生态系等。
食品微生物检验的指标 食品在食用前的各个环节中，被微生物污染往往是不可避免的。评价食品被微生物污染的程度，要采用微生物检验指标采进行。常采用的微生物检验指标为三项细菌指标，即细菌数量(主要是菌落总数)、大肠菌群最近似数(MPN)和致病菌。 第一节菌落总数 一、菌落总数的概念及卫生意义 食品中细菌数量越多，则食品腐败变质的速度就越快，甚至可引起食用者的不良王应．如有人认为细菌数量达到100—1000万个／g时食品就可能引起食用者的食物中毒。 菌落：指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长物，它是由数以万计相同的细菌集合而成。 细菌数量的表示方法由于所采用的计数方法不同而有两种：菌落总数和细菌总数： 1、菌落总数 指一定数量或面积的食品样品，在一定条件下进行细菌培养，使每一个活菌只能形成一个肉眼可见的菌落，然后进行菌落计数所得的菌落数量。通常以lg或1ml或lcm2样品中所含的菌落数量来表示。 按国家标准方法规定，即在需氧情况下，37℃培养48h，能在普通营养琼脂平板上生长的细菌菌落总数，所以厌氧或微需氧菌、有特殊营养要求的以及非嗜中温的细菌，由于现有条件不能满足其生理需求，故难以繁殖生长。因此菌落总数并不表示实际中的所有细菌总数，菌落总数并不能区分其中细菌的种类，所以有时被称为杂菌数，需氧菌数等。 2、细菌总数 指一定数量或面积的食品样品．经过适当的处理后，在显微镜下对细菌进行直接计数。其中包括各种活菌数和尚未消失的死菌数。细菌总数也称细菌直接显微镜数。通常以1g或1m1或lcm2—样品中的细菌总数来表示。 菌落总数测定是用来判定食品被细菌污染的程度及卫生质量，它反映食品在生产过程中是否符合卫生要求，以便对被检样品做出适当的卫生学评价。菌落总数的多少在一定程度上标志着食品卫生质量的优劣 二、菌落总数的常规检验方法 菌落总数的常规检验方法(GB4789．2-84)： 一般将被检样品制成几个不同的10倍递增稀释液，然后从每个稀释液中分别取出1mL置于灭菌平皿中与营养琼脂培养基混合，在一定温度下，培养一定时间后（一般为48小时），记录每个平皿中形成的菌落数量，依据稀释倍数，计算出每克（或每ml）原始样品中所含细菌菌落总数。 基本操作一般包括：样品的稀释——倾注平皿——培养48（24）小时——计数报告。（一）样品的处理和稀释： 1．操作方法： 1）、以无菌操作取检样25g（或25ml)，放于225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内（瓶内预置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内，经充分振要或研磨制成1：10的均匀稀释液。 固体检样在加入稀释液后，最好置灭菌均质器中以8000~10000r/min的速度处理1min，制成1：10的均匀稀释液。 2）用1ml灭菌吸管吸取1：10稀释液1ml，沿管壁徐徐注入含有9ml灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内，振摇试管混合均匀，制成1：100的稀释液。
国内外微生物肥料的发展概况 一、微生物肥料的定义 微生物肥料是指一类含有活微生物的特定制，应用于农业生产中，能够获得特定的肥料效应。可将微生物肥料分为两类，一类是通过其中所含微生物的生命活动，增加了植物营养元素的供应量，导致村物营养状况的改善，进而产量增加，代表品种是要菌肥：另一类是广义的微生物肥料，其制品虽然也是通过其中所含的微生物生命活动作用使作物增产，但它不仅仅限于提高植物营养元素的供应水平，还包括了它们所产生的次生代射物质，如激素类物质对植物的刺激作用，促进植物对营养元素的吸收利用，或者能够拮抗某些病原微生物的致病作用，减轻病虫害而使作物产量增加。 二、微生物肥料的种类和作用机理 微生物肥料的种类很多，如果按其制品中特定的微生物种类可分为细菌肥料(如根病菌肥、固氮菌肥)、放线菌肥(如抗生菌类、5406)、真菌类肥料(如菌根真菌)等：按其作用机理又可分为根瘤菌肥料、固氮菌肥料、解磷菌类肥料、解钾菌类肥料等：按其制品中微生物的种类又可分为单纯的微生物肥料和复合微生物肥料。微生物肥料的功效主要是与营养元素的来源和有效性有关，或与作物吸收营养、水分和抗病有关，概况起来有以下几个方面： 1、增加土壤肥力，这是微生物肥料的主要功效之一。如各种自生、联合、共生的国氮微生物肥料，可以增加土壤中的氮素来源，多种解磷、解钾微生物的应用，可以将土壤中难溶的磷、钾分解出来，从而能为作物吸收利用。 2、产生植物激素类物质刺激作物生长，许多用作微生物肥料的微生物还可产生植物激素类物质，能刺激和调节作物生长，使植物生长健壮，营养状况和得到改善。 3、对有害微生物的生物防治作用，由于在作物根部接种微生物肥力，微生物在作物根部大量生长繁殖，在为作物根际的优势菌，限制了其它病原微生物的繁殖机会。同时有的微生物对病原微生物还具有拮抗作用，起到了减轻作物病害的功效。 三、我国微生物肥料的概况 我国微生物肥料的研究应用和国际上一样，是从豆科植物上应用根瘤菌接种剂开始的，起初只有大豆和花生根瘤菌剂：50年代，从原苏联引进自生固氮菌、磷细菌和硅酸盐细菌剂，称为细菌肥料：60年代又推广使用放线菌制成的“5406”抗生菌肥料和固氮蓝绿藻肥：70-80年代中期，又开始研究VA菌根，以改善植物磷素营养条件和提高水分利用率：80年代中期至90年代，农业生产中又相继应用联合固氮菌和生物钾肥作为拌种剂：近几年来又推广应用由固氮菌、磷细菌、钾细菌和有机肥复合制成的生物肥料做基肥施用。
生物菌肥的研究现状及进展 1.生物菌肥简介 生物菌肥又称微生物肥料。它是一种含有活体微生物,通过其生命活动增加植物营养元素的供应量,有的还能产生植物生长激素或抑制有害微生物的活体制品。微生物菌肥的作用机理主要表现为微生物肥料可以通过提高土壤供应营养元素的能力,改善植物营养条件,增 强根系活力,刺激植株生长,增加叶绿素含量和叶面积,减少呼吸作用,最终使作物获得增产；其次是微生物在生长、繁殖过程中所生成的植物激素,通过激素作用,使作物根系活力增强,光合作用效率提高,使作物获得充分的营养成分,最终提高产量。促成作物增产的另一因素 是通过改善作物的营养环境和释放的激素能够增强植物抗逆性,对植物病虫害也具有一定 的抑制作用,从而降低了产量损失。 2.生物菌肥的特点 生物菌肥作为一种生物产品,其与化学肥料相比具有如下几个特点： (1)不破坏土壤结构，不污染环境,且对人畜无害； (2)改善土壤肥力，肥效持久； (3)能促进某些作物的生长，增加产量，改善农产品的品质； (4)大多数生物菌肥原料多为废弃物、果渣、垃圾等。易于获取,变废为宝"而且配套生 产设备的要求不高，成本较低； (5)其使用效果要受到环境条件(如营养、水分、温度、pH等)的影响；当前由于生产技 术不够成熟，产品质量不高以及具体作用机制仍不十分清楚等原因，我国在生物菌 肥领域仍仅处于一个尝试性阶段，真正投入到大田生产应用的生物菌肥并不多，但 其已受到了许多农业生物专家的关注。 3.国内目前生物菌肥的发展现状 我国微生物肥料的研究和应用始于根瘤菌接种剂，近十年进入了稳定发展期。伴随着 菌种、剂型的不断开发，产业规模不断扩大，生产和检测标准体系不断完善。 近年来，随着对微生物类群的不断研究，微生物肥料所采用的菌种种类不断扩大。目 前所使用的菌种已达到110多种，包括细菌、真菌、放线菌及蓝藻等。菌种的开发直接促 进了新型微生物肥料种类的产生。据统计，我国现有的微生物肥料产品主要包括：根瘤菌 制剂、自生及联合固氮菌类制剂、溶磷细菌制剂、溶磷真菌制剂、硅酸盐细菌制剂、促生 细（真）菌制剂、光合细菌制剂、有机物料腐熟剂、土壤（水体）生物修复剂、放线菌制
微生物菌肥 乾界微生物菌剂实况调查：我用你家的微生物菌肥可以这么一个长时间，长势基本没啥时间变化，隔壁老王用的另外作为一家的肥料，人家刚用2天，长势呼呼的，你的微生物菌肥是不是有问题？ 农产品经销商经常遇到这样的问题，甚至一些农民店主在想，这次难道买到假的微生物菌肥吗？ 今天，乾界生物为大家普及: 快速肥效果不一定是好肥！ “快是一个很好的肥料”，我们从走访调查，许多农民认为如此固执。这是肥料的一个非常严重的误解，实际恰恰相反，快未必是很好的肥料。需要肥料的长期供应，该比率是根据作物的各个时期的生理特点最佳施肥，也没有必要对一味追求速效性。现在很多不法厂家想出农民的心理，加入了大量的激素或在其生产的添加了大量的低品质的氮肥，说氮磷钾比例是非常好的，如钾或含氮的指令标签，农民自然迅捷后适用。这边只能起到拔苗助长的作用。 微生物菌肥也不是滥用，但很少有农民没有注意到，这类化学肥料在施用后，常引起经济作物旺长、花芽分化差和早衰等问题。 这尤其是生物肥料产品，如土壤施药后，土壤中的细菌适应环境，繁殖需要一个过程，如果温度比较低，效果会慢一些数字，但你不能因此就认为这是一个糟糕的肥料。即使是使用生物肥料后一些作物，预增的，但不如普通肥料，尤其是小麦和蔬菜移栽的需要，这是什么原因呢？ 作物进行生长是有规律的，根深才能叶茂，前期中国生根，中期长茎杆，后期结果实，如果用肥不合理或使用不同激素，在该长根系的时候，茎叶旺长，根系衰弱，那么茎叶再旺盛也只是作为一个重要表象，结果学生只会影响导致经济作物早衰患者死亡。我们可以追求的是产量和质量，而不是茎叶，现在社会很多人开始抱怨我的庄稼长势这么旺，别人的长势一般般，为什么我的产量方面没有学习人家高？那应该积极思考分析一下他们自己用肥的问题。 总之，当我们选择使用微生物菌肥料时，我们不能仅仅通过生长来判断产品的质量，我们应该明白，最终的目标是产量和质量，能够增产和保证质量的微生物菌肥就是好微生物菌肥料。 乾界生物微生物菌肥采用的是生物发酵的形式做成，不添加任何对土壤，对农作物有刺激性的物质，对农作物产量有保证。您值得依赖，值得放心。
我是微生物菌肥，我的功能大家应该进一步了解，我对土壤有修复功能，对作物病害有预防、缓解功能，并对连茬种植作物根系有很好的保护作用。下面我给你介绍我的功能特点。 1）微生物菌：能够杀灭粪便中的病毒、病菌、虫卵、杂草种子等，有效遏制土壤中的病虫 害发生，减少农药用量。无异臭味，不烧根苗。 （2）改良土壤、利于吸收：增加土壤有益微生物活动，使其产生生物调节物质刺激根系生长和促进养分吸收，有效的提高营养物质的吸收利用率。施入土壤后，能保持土壤良好的团粒结构，其中的有机质和生物活性菌，能刺激作物体内各种酶的活性，加快作物的生长，减少病害，改善农作物产品品质. （3）缓速增效，增产增收：活化土壤，改善土壤板结和养分流失，提高土壤通透性和可耕性，疏松土壤，增加土壤含水量，减少养分吸收阻力，促进营养物质向作物的根际转移。增强抗旱能力。 （4）培肥地力，均衡营养：增强地力，提高肥料利用率，较高的有机质及腐殖质含量，能提高根际阳离子交换量，提高根际环境的缓冲能力。促进作物新陈代谢，改善品质，增强抗病能力，减少农药的使用量。均衡供应作物所需各种养分，提高肥料利用率，避免长期施用单质化肥引起的土壤营养失调，恢复土壤生命力。 （5）成本低：标美力克肥业有限公司研制的微生物菌肥，最大的特点是活菌包膜技术，让微生物菌在土壤内具备最大的繁殖条件，使用量比较小，防治效果而且很高，亩只需投入几 十元钱就，就能达到理想肥沃的土壤，提高作物产量，增加收入。 炭神奇 微生物菌肥 活菌包膜、疏松土壤、生根壮苗 调节土壤碳氮比、抗病增产 净含量：40公斤 主要功能： 1、有机碳复合微生物菌肥，培养微生物菌的繁殖，抑制土壤有害病菌，效果迅速，增强土壤、种子、根系抗病菌能力 2、改善土壤团粒结构，调节土壤碳氮比，平衡酸碱度，培肥土壤。固氮、解磷、解钾，减少20%大化肥施用量，增产增收。 3、增加土壤有机碳，控释氮肥，增效磷钾，螯合微量元素，维持营养均衡，刺激作物根系生长，增强抗病抗旱抗寒能力。 4、炭神奇在土壤内、根系周围分泌抗病菌和酶，保护根系，促进果实提早成熟，提高商品率。 使用方法： 基施：推荐亩施40-125公斤；追施、冲施：亩用量50-100公斤，与大化肥一起使用。（根据土壤状况增减使用量） 适用范围：各种果树、瓜果蔬菜、大田作物
1菌落总数 菌落总数是指示性微生物指标，并非致病菌指标。主要用来评价食品清洁度，反映食品在被加工过程中被污染的程度及卫生质量的重要指标。菌落总数超标可能是企业所使用的原辅料初始菌数较高，或未按要求严格控制生产加工过程的卫生条件，或包装容器清洗消毒不到位，还有可能是产品包装密封不严，储运条件控制不当等导致。如果食品的菌落总数严重超标，将会破坏食品的营养成分，加速食品的腐败变质，使食品失去食用价值。 2大肠菌群 大肠菌群是国内外通用的食品污染常用指示菌之一。食品中检出大肠菌群，提示被致病菌（如大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷伯氏菌和阴沟肠杆菌等）污染的可能性较大。大肠菌群超标可能由于产品的加工原料、包装材料受污染，或在生产过程中产品受人员、工具器具等生产设备、环境的污染而导致。大肠菌群，它不代表某一个或某一属细菌，而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌。 大肠菌群都是直接或间接地来自人和温血动物的粪便。一般食品中大肠菌群超标，表示食品受动温血动物的粪便污染，其中典型大肠杆菌为粪便近期污染，其他菌属则可能为粪便的陈旧污染。人吃了大肠菌群超标的食物可能会导致：肠道传染病、食物中毒等。 3霉菌 霉菌，是丝状真菌的俗称，意即"发霉的真菌"，它们往往能形成分枝繁茂的菌丝体，但又不像蘑菇那样产生大型的子实体。在潮湿温暖的地方，很多物品上长出一些肉眼可见的绒毛状、絮状或蛛网状的菌落，那就是霉菌。霉菌在我们的生活中无处不在，它比较青睐于温暖潮湿的环境，一有合适的环境就会大量的繁殖，必须采取措施来阻止霉菌的繁殖或切断其传播途径，就可以摆脱霉菌的污染。霉菌毒素对人主要毒性表现在神经和内分泌紊乱、免疫抑制、致癌致畸、肝肾损伤、繁殖障碍等。
微生物菌肥的十大误区 随着农户种植模式转变、施肥用药习惯的转变，农作物生产中出现了许多新问题，为了应对新问题，用户将注意力转向了微生物肥料产品。微生物肥料是指含有特定微生物活体的制品，应用于农业生产，通过其中所含微生物的生命活动，增加植物养分的供应量或促进植物生长，提高产量，改善农产品品质及农业生态环境。目前，微生物肥料包括微生物接种剂(微生物菌剂)、复合微生物肥料(菌肥)、生物有机肥(菌肥)三类。在使用过程中，微生物肥料在提高土壤生物肥力、防控根部病害、提高产品品质作用显著，但是也有用户反映效果不稳定，同一批次的品种在不同作物、不同时期、不同用量的情况下效果差异很大。经过调查发现，引起效果不稳定有产品本身的问题，也有储运和用户使用的问题。因用户不正确使用造成微生物肥料效果降低的现象十分常见，农户使用这类肥料中存在诸多误区，主要体现在观念和使用方法上。 第一部分：7个观念误区 误区1：靠见效速度评价产品好坏，认为见效快的就是好菌剂或菌肥。 微生物的生命活动，除了会分解土壤中难溶及被固定的元素，增加营养元素的供应量，利用自然界的物质转化为植物生长所必须的物质，促进作物产量提高外，还能产生植物生长刺激素和拮
抗某些致病微生物的作用，可减轻作物病虫害的发生，肥料效果的发挥与微生物菌群繁殖速度、菌群数量关系紧密，菌群生长存在周期，这一点是与化学肥料和植物调节剂的最大区别，这也就出现了微生物肥料速效性不如化学肥料与植物调节剂的现象。见效慢并无意味着菌剂及菌肥是无效果的，能在较短时间内就可以看到作物长势明显改善的品种也未必是好的菌肥或菌剂，其中也不乏一些添加了植物调节剂的品种。 误区2：种类混乱，分不清使用的是菌剂还是菌肥。 农用微生物菌剂是指目标微生物(有益菌)经过工业化生产扩繁后制成的活菌制剂，它具有直接或间接改良土壤、恢复地力，维持根际微生物区系平衡，降解有毒、有害物质等作用;应用于农业生产，通过其中所含微生物的生命活动，增加植物养分的供应量或促进植物生长，改善农产品品质及农业生态环境。 微生物菌肥包含复合微生物肥料和生物有机肥，复合微生物肥料是指目的微生物经工业化生产增殖后与营养物质复合而成的活菌制品;生物有机肥是指目的微生物经工业化生产增殖后与主要动植物残体(如畜禽粪便、农作物秸秆等)为来源并经无害化处理的有机物料复合而成的活菌制品。菌剂、菌肥最大的区别在于产品中营养物质及有机物料的含量，使用中需结合实际需求选择对路产品。 误区3：认为一种产品中菌的种类越多、菌种数量越大越好。
1 范围 本标准规定了公司生产过程中的微生物控制要求以及验证计划。 本标准适用于公司食品生产过程中对微生物控制的验证活动。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本均适用于本标准。 GB 5749 生活饮用水卫生标准 GB 14881 食品企业通用卫生规范 GB 15980 一次性使用医疗用品卫生标准 GB 4789.2 食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定 GB 4789.3 食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数 GB 4789.10食品安全国家标准食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验 GB 4789.15食品安全国家标准食品微生物学检验霉菌和酵母计数 3职责 工厂品管部对车间卫生状况进行监控，定期开展微生物验证，并根据检验结果对车间卫生进行管控，必要时，委托化验室抽样检测。 4 术语与定义 4.1食品接触面 指生产过程中与所生产食品直接接触的设备、工器具、人、水、空气、包材等；或间接接触的门把手、电源开关等。 5 验证计划 5.1工厂应按照GB 14881等相关国家规定，采取适宜的措施控制食品生产经营过程中微生物 5.2验证内容应包括食品生产经营过程中微生物控制的各个环节（如原材料、人员、生产环境等）及采取的各种措施（如清洗、消毒措施、提高生产车间洁净度要求等）。 5.3 微生物控制标准应符合食品安全国家标准要求；具体要求见附表1。 5.4 可通过以下环节的检测进行微生物控制效果验证 5.4.1 生产用水、冰 1）采样时间：生产过程中 2）生产用水取样：选定取样点，打开水阀门，5min后用灭菌的无菌塑料袋取约200mL水样，立即送检。3）生产用冰取样：直接取约200g的冰装入灭菌的无菌塑料袋中，立即送检。 5.4.2工作人员手 1）采样时间：在生产工人进入车间之前消毒后或加工过程中消毒后采样。 2）采样方法 被检人五指并拢，用浸湿无菌生理盐水的无菌棉签在双手指屈面从指根到指端往返涂擦2次（一只手涂擦面积约30cm2），并随之转动采样棉签，剪去操作者手接触部位，将棉签投入10mL 无菌生理盐水的采样管中，立即送检。 5.4.3 工作人员工作服 1）采样时间：在生产工人上班换工作服之前或生产过程中采样。 2）采样方法：用浸湿无菌生理盐水的无菌棉签在最可能接触产品的工作服的地方（如：袖口、门襟处）用10cm×10cm的标准灭菌规格板，放在被检物体表面，采样面积≥100cm2，用浸有无菌生理盐水的棉签1支，在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次，并随之转棉签，剪去手接触部位后，将棉签投入10mL 无菌生理盐水的采样管中，立即送检。 5.4.4设备、工器具 1）采样时间：在消毒处理后或生产过程中进行采样。
微生物学 绪论 1001 熟悉微生物学的概念、研究范畴。 1002 描述各类微生物的主要特征。 2003 认识微生物与人类的关系。 2004 了解微生物学的发展史、学习目的和意义。 细菌学总论 1011 掌握细菌的三种基本形态及细菌的测量单位。 1012 描述细菌基本结构及其功能, 掌握革兰阳性菌和阴性菌细胞壁的组成、结构和医学意义。 1013 掌握荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢的特性及其与医学的关系。 1014 掌握革兰染色的步骤、结果判定和医学意义 1021 熟悉细菌生长繁殖的基本条件及细菌依据氧的需求的分类。 1022 列出细菌主要产生的与医学有关的合成代谢产物，明确热原质的概念、本质、去除方法及与医学的关系。 1023 熟悉细菌常见的分解代谢产物。 1024 描述细菌个体繁殖方式及群体生长繁殖的规律。 1025 描述培养基的概念，分类及细菌在不同培养基上主要的生长现象，并了解细菌培养在医学上的应用。 2026 了解细菌的分类原则与层次及命名法。 1031 明确噬菌体的概念、形态、化学组成及主要应用。 1032 明确毒性噬菌体、温和噬菌体、前噬菌体及溶原性细菌的概念。 1033 明确细菌遗传物质的基础，描述质粒的概念、种类、特征。 1034 描述细菌遗传与变异的机制中转化、接合、转导、溶原性转换的概念、特点，并明确耐药质粒及与耐药性的关系。 1035 掌握正常菌群、条件致病菌、菌群失调、菌群失调症、医院感染、菌血症、败血症及脓毒血症的概念。 2036 掌握感染、致病菌、非致病菌、毒血症、毒力、内毒素血症、带菌者和带菌状态的概念。 1037 举例说明正常菌群的生理学功能及条件致病菌的致病条件。 1038 陈述细菌的致病机制，列表比较细菌内、外毒素的主要区别。 1039 熟悉宿主的免疫防御机制包括固有免疫的组成、吞噬细胞吞噬作用的后果以及胞外菌感染、胞内菌感染、外毒素致病的免疫特点。 1040 举例说明感染来源、传播途径以及感染的类型。 1041 熟悉医院感染的来源和控制。
微生物菌肥的秘密原来在这里 一般讲的微生物肥料，其实是一种菌剂，是一类微生物群体。这类微生物菌剂能够提供一种或多种对作物生长有益的微生物群落。由于农业上应用的微生物菌剂常常和草炭、泥炭、有机肥料等有机质含量较高的基质混合在一起，所以习惯上把微生物菌剂称为微生物肥料，人们俗称为“菌肥”- 沃宝生物科技。 微生物肥料的作用机理根本不同于化学肥料。能够提供一种微生物群落的叫“单一微生物肥料”或“专一微生物菌剂（肥料）”；能够提供两种以上多种微生物群落的叫“复合微生物菌剂（肥料）”。根据微生物的作用划分，可以将微生物菌剂划分为“固氮细菌（菌剂）”、“解磷细菌（菌剂）”、“解钾细菌（菌剂）”、“腐解细菌（菌剂）”等。这些微生物菌剂都可以选择性地为农业生产服务。 微生物肥料的作用主要是提供对作物生长有益的“微生物群落”，而不是“营养元素”。这些有益的微生物施到土壤中后，能产生各种不同作用。 1、以固氮细菌为主的微生物肥料能通过细菌的活动，固定空气中的氮元素，供作物生长时吸收利用——即“固氮”作用； 2、以解磷细菌为主的微生物肥料则通过细菌的活动，分解土壤中部分不能被作物吸收的磷元素，使磷从土壤中分解出来，供作物生长时吸收利用——即“解磷”作用； 3、以解钾细菌为主的微生物肥料主要作用是，通过细菌的活动，分解土壤中部分不能被作物吸收的钾元素，使钾从土壤中分解出来，供作物生长时吸收利用——即“解钾”作用。 同时，微生物在土壤中的生活、活动，可产生很多代谢产物或分泌物，这些分泌物对作物的生长有刺激作用。 总的来讲，微生物菌肥的作用就是细菌的固定、分解、分泌作用，影响到土壤中的营养养分的变化。土壤中营养养分变化了，生长在土壤中的作物的生长情况当然也要变化。 所以，微生物的作用是“作用”于土壤中、“反应”在作物上。如果土壤养分太低， 一、性菌剂 主要成分：固氮菌、解磷解钾菌 介绍： 产品所含的固氮菌定植土壤后产生大量固氮酶，可轻易地切断束缚氮分子的化学链，把氮分子变为能被植物消化、吸收的氮原子；所含的解磷解钾菌在生长代谢中会产生有机酸类物质，可将土壤中的长石、云母、磷灰石、磷矿粉等矿物的难溶性磷钾溶解出来为作物和菌体本身利用，菌体中富含的磷钾在菌死亡后又被作物吸收。除此以外，这些有益复合微生物还可释放土壤中原有的钙、镁、硅、
微生物学 名词解释 微生物（microorganism）是存在于自然界中的一大群形体微小、结构简单、肉眼看不见，必须借助光学显微镜或电镜放大数百倍至数万倍才能观察到的微小生物。 医学微生物学（medical microbiology）：主要是研究与医学有关的病原微生物学的生物学特性、致病性与免疫性、以及特异性诊断与防治措施的一门学科，其目的是控制和消灭感染性疾病和与之有关的免疫性损伤等疾病，从而达到保障和提高人类健康水平。 正常菌群（normal flora）是指寄居于正常人体内的一系列细菌。 条件致病微生物(conditionalmicroorganism）：是指机体免疫力下降、寄居部位改变和微生态失调时影响人类健康的微生物。 病原微生物（pathogenic microorganism）：少数能引起人与动植物致病的微生物，影响人类健康，是医学微生物研究的主要对象。 临床微生物学（clinical microbiology）：属医学微生物学的范畴，与临床医学密切结合，因侧重研究感染性疾病快速、准确诊断病原体的策略与方法，为临床诊断提供依据，故又名诊断微生物学（diagnostic microbiology）。临床微生物学是从事检出微生物和研究微生物与宿主相互作用的一门医学应用学科。 任务： 1. 研究感染性疾病的病原体特征：不仅对传统的病原体进行研究，而且要重视对新出现病原体的研究 2. 为临床提供快速、准确的病原学诊断 3. 指导临床医师合理使用抗生素 4. 对医院感染进行监控 地位：临床微生物学是临床检验诊断学（clinical laboratory diagnosis）的一门重要亚专业课程。 微生物分类： 原核细胞型微生物：细菌、放线菌、衣原体、支原体、立克次体和螺旋体。 真核细胞型微生物：真菌. 非细胞型微生物：病毒、亚病毒、朊粒. 简述对临床感染性疾病的实验室诊断的要求。 （一）明确诊断的对象和诊断的要求 1.以疾病病原学诊断为目的：一般只需鉴定到种。 2.为提供治疗方案为目的：可进行临床标本的直接药敏试验，尽早电话报告药敏结果， 并做进一步药敏试验，以期最终报告。 3.以作流行病学调查为目的：往往要鉴定到型（血清型或基因型），并追踪传染源。 4.以了解细菌与感染的关系为目的：要了解细菌的致病性（毒力和侵袭力），必须对细 菌进行详尽的鉴定。 （二）对诊断试验的选择 1.选择有价值的鉴定试验：阳性率＞90%，阴性率＜10% 2.选择简易、快速、方便的试验：可简化操作，节省人力物力。 3.综合考虑试验的敏感性和特异性：试验的敏感性和特异性成反比关系。 (三) 选择常用诊断流程 1.双歧索引 2.表解法 3.数字编码鉴定法 简述对临床感染性标本采集与处理的一般原则。
微生物菌肥的作用 近年来，随着化肥施用量的增加，出现了土壤结构破坏、有机质含量下降等现象，并在部分地区出现了诸如江河湖泊的富营养化、农产品质量下降等一系列较为严重的生态环境问题。因此，环保无污染的微生物菌肥越来越受人欢迎。微生物菌肥可有效利用大气中的氮素或土壤中的养分资源，可降低生产成本，提高作物产量、改善作物品质，减少环境污染，并在一定程度上改善土壤的理化性状等。在我国农业的长远、可持续发展道路上，微生物菌肥是不可或缺的一员。微生物菌肥的独特优势体现在以下几个方面： 1、“无中生有”，给作物可利用的营养，减少化肥用量，节约成本。微生物菌肥中含有不同的活性微生物，如固氮微生物、有机磷细菌等。固氮微生物可以通过固氮酶的作用将空气中的氮转化为农作物可以吸收利用的氨，以减少化肥的施用量。有机磷细菌则可以加速分解土壤中的有机物质为作物可以直接吸收的小分子营养物质。由于微生物菌肥充分利用微生物的独有特征，以增加土壤中有效养分为目的，施用量一般不大，在生产过程中所消耗的能量也很少，并且施用微生物菌肥的同时还可节省约30%的化肥施用量，因而在取得良好营养效果的同时，还最大程度的节约了施肥成本。 2、提高作物产量，改善作物品质，丰收、高品质效益好。微生物菌肥中所含的某些微生物，它们的代谢产物对作物生长具有刺激作用，并且还为农作物提供微量元素，有刺激作物根系生长发育，增强抗病抗体旱抗寒的能力。经多年验证，施用微生物菌肥的经济作物可增产30%以上，大田作物增产10%以上，增收效果显著。 由于抗逆性增强，农作物用药少，发病少，品质得到大大的改善提升，再加上微生物菌肥中的一些代谢产物有促早熟的功效，施用微生物菌肥的作物与未施用的相比，取得的经济效益非常可观。 3、培肥地力、活化土壤、减轻污染效果显著，是农业长远、可持续发展的必由选择。土壤中重金属的富集和污染一直是困扰农业生产的大难题。金宝贝微生物菌肥利用某些微生物对重金属的亲和吸附作用，通过产生有机酸溶解土壤矿物，将其转化为低毒产物，从而促进成土过程和有效态磷、钾的释放，起到减轻污染、活化土壤、培肥地力的效果。 微生物在农业上的作用已逐渐被人们所认识。现国际上已有70多个国家生产、应用和推微生物菌肥，金宝贝微生物菌肥适宜范围广，经济作物类、大田作物类、果树蔬菜类、苗木花奔、药材等均适宜，并且用法简单多样，可作底肥，也可追肥使用。
一、定义 通过一定的实验方法测定食品中的微生物，特别是致病微生物的数量、种类、性质，从而判断食品的卫生质量，保证消费者的身体健康。 二、食品微生物检验的内容 卫生指标菌检验 菌落总数测定 细菌检验 大肠菌群数测定 致病菌检验 霉菌、酵母菌数测定 真菌检验 产毒霉菌检验 霉菌毒素测定 三、食品微生物检验的特点 1、具有法规性 2、检验的范围广 3、杂菌含量多，要检验的菌少。 （1）需要增菌（2）抑制杂菌 4、检验结果具有数量界限 5、需要采样后尽快检验，快出结果 四、意义： 检出有害微生物，避免食物中毒，避免造成经济损失。 五、食品卫生细菌常规检验项目 卫生指标菌 菌落总数测定 大肠菌群测定 沙门氏菌检验 u 致病菌 志贺氏菌检验 金黄色葡萄球菌检验 溶血性链球菌检验 六、细菌污染食品的途径 1、食品加工原料的污染 2、产、储、运、销过程中的细菌污染 3、从业人员的污染 4、食品加工过程中的污染 第一章 食品微生物检验中的生理生化实验 设计生化实验的原则：在实验中加入某些化学物质，使细菌代谢途径中分解代谢产物与加入<的化学物质发生反应，产生某些变化或出现某种特征。 一、过氧化氢酶及过氧化物酶实验原理 1、2H 2O 2 过氧化氢酶 2H 2O+O 2 阳性 2、过氧化物酶： RH 2+H 2O 2 过氧化物酶 R+2H 2O 阳性：细菌变为黑褐色； 阴性： 不变色。 阳性 阴性 二、细胞色素氧化酶实验原理 细胞色素C 细胞色素氧化酶 氧化型细胞色素C +对苯二胺 + --奈酚 靛酚兰（蓝色） 阳性： 2分钟内生成蓝色为阳性； 阴性：无变化。 三、氰化钾实验 阳性： 不抑菌，变混浊 阴性：抑菌 无 蓝 四、硝酸盐还原实验原理 KNO 3 还原酶 KNO 2KNO 2 +对氨基苯磺酸+ a -萘胺 红色化合物（立刻或数分钟内）红色 无色 五、糖发酵实验 分解糖产酸，PH 值下降，使 培养基的 酸碱指示剂发生变化。 阳性：产酸产气 六、氧化发酵实验（O/F 实验 有些微生物分解葡萄糖 必须有氧参加，此种细菌菌称为氧化型； 阳 阴 有些细菌有氧无氧均可分解葡萄糖，称发酵型； 有些细菌任何条件都不能分解葡萄糖，称产碱型。 灭菌琼脂（厌氧） 七、甲基红实验（MR 实验）和V-P 实验 1、MR 实验原理：一些细菌分解葡萄糖产 生丙酮酸，丙酮酸可被进一步分解为甲酸、乙酸、乳酸和琥珀酸而使培养基的PH 值下降到4.5以下，加入甲基红指示剂出现红色反应 2、V-P 实验原理 一些细菌分解葡萄糖为丙酮酸，进一步脱羧产生乙酰甲基甲醇，乙酰甲基甲醇在碱性溶液中被空气中的氧氧化成二乙酰丁二酮，进而与培养基内蛋白胨中所含的精氨酸的胍基发生反应生成红色化合物。（实验结果同MR 实验） 阴 八 、柠檬酸盐实验（枸橼酸盐实验） 一些微生物可以以铵盐作为唯一 的氮源，以柠檬酸盐作为唯一的碳 源，在柠檬酸盐培养基上生长，分 解柠檬酸盐生成碳酸盐，使培养基 变成碱性，酸碱指示剂变色 九、丙二酸钠实验 一些微生物可以以丙二酸钠 作为唯一碳源，分解丙二酸钠生成碳酸钠，使培养基变成碱性，酸碱指示剂变色。 十、马尿酸盐实验 一些细菌可以水解马尿酸生成苯甲酸和甘氨酸，苯甲酸和Fe3+反应生成有色的苯甲酸盐沉淀。 十一、明胶液化实验 一些细菌可产生胞外酶，使明胶蛋白分解为氨基酸,而失去明胶的凝固能力。 十二、苯丙氨酸脱氨酶实验 一些细菌有苯丙氨酸脱氨酶， 可以脱氨 生成苯丙酮酸， 其与FeCl 3反应产生绿色 。 十三、氨基酸脱羧酶实验 一些细菌可以产生氨基酸 脱羧酶使氨基酸脱酸，产生胺类物质，使培养基
1、史前期（约8000 年前一1676 ) ,各国劳动人民,①未见细菌等微生物的个体；②凭 实践经验利用微生物是有益活进行酿酒、发面、制酱、娘醋、沤肥、轮作、治病等）。 在17世纪下半叶，荷兰学者吕文虎克用自制的简易显微镜亲眼观察到细菌个体之前，对于一门学科来说尚没形成。这个时期称为微生物学史前时期。在这个时期，实际上人们在生产与日常生活中积累了不少关于微生物作用的经验规律，并且应用这些规律，创造财富，减少和消灭病害。民间早已广泛应用的酿酒、制醋、发面、腌制酸菜泡菜、盐渍、蜜饯等等。古埃及人也早已掌握制作面包和配制果酒技术。这些都是人类在食品工艺中控制和应用微生物活动规律的典型例子。积肥、沤粪、翻土压青、豆类作物与其它作物的间作轮作，是人类在农业生产实践中控制和应用微生物生命活动规律的生产技术。种痘预防天花是人类控制和应用微生物生命活动规律在预防疾病保护健康方面的宝贵实践。尽管这些还没有上升为微生物学理论，但都是控制和应用微生物生命活动规律的实践活动。 2、初创期（1676 一1861 年）,列文虎克,①自制单式显微镜,观察到细菌等微生物的个 体；②出于个人爱好对一些微生物进行形态描述。微生物的形态观察是从安东·列文虎克（Antony Van Leeuwenhock 1632-1732）发明的显微镜开始的，它是真正看见并描述微生物的第一人，他的显微镜在当时被认为是最精巧、最优良的单式显微镜，他利用能放大50～300倍的显微镜，清楚地看见了细菌和原生动物，而且还把观察结果报告给英国皇家学会，其中有详细的描述，并配有准确的插图。1695年，安东·列文虎克把自己积累的大量结果汇集在《安东·列文虎克所发现的自然界秘密》一书里。他的发现和描述首次揭示了一个崭新的生物世界——微生物世界。这在微生物学的发展史上具有划时代的意义。这是首次对微生物形态和个体的观察和记载。随后，其他研究者凭借显微镜对于其它微生物类群进行的观察和记载，充实和扩大了人类对微生物类群形态的视野。但是在其后相当长的时间内，对于微生物作用的规律仍一无所知。这个时期也称为微生物学的创始时期。 3、奠基期（1861 一1897 年）,巴斯德,①微生物学开始建立；②创立了一整套独特的微生物学基本研究方法；③开始运用“实践―理论―实践”的思想方法开展研究； ④建立了许多应用性分支学科；⑤进入寻找人类动物病原菌的黄金时期。继列文虎克发现微生物世界以后的200年间，微生物学的研究基本上停留在形态描述和分门别类阶段。直到19世纪中期，以法国的巴斯德和德国的柯赫为代表的科学家才将微生物的研究从形态描述推进到生理学研究阶段，揭露了微生物是造成腐败发酵和人畜疾病的原因，
微生物菌肥简介 微生物菌肥是根据土壤微生态学原理、植物营养学原理、以及现代“有机农业”的基本概念而研制出来的。微生物肥料是以微生物的生命活动导致作物得到特定肥料效应的一种制品，是农业生产中使用肥料的一种。其在我国已有近50年的历史，从根瘤菌剂——细菌肥料——微生物肥料，从名称上的演变已说明我国微生物肥料逐步发展的过程。 土壤主要由矿物质、有机质和微生物三大部分组成，土壤微生态区系的微生物的活性大小，对植物根部营养非常重要，因为土壤中的有益微生物直接参与土壤肥力的形成，包括土壤中物质和能量的转化、腐植质的形成和分解、养分的释放、氮素的固定等等。但纯自然状态下有益微生物数量不够，作用力也有限。因此，采用“人为方式”向土壤中增加有益微生物数量，就能够增强土壤中微生物的数量和整体活性，从而明显提高土壤的肥力。这就是施用沃益多菌肥可以提高土壤肥力、减少化肥用量的科学原理。 沃益多-a的两种土壤接种菌，是阿坤纳斯科研团队经过数年从繁杂的菌群种严格筛选出的优秀的土壤接种菌，应用固定化细细胞培养技术生产，阿坤纳斯拥有该菌种及生产技术的多项专利。 沃益多---HYT(High Yield Technology“高产技术” 产品)是源于美国，来自墨西哥，由挪威Agrinos AS 全球推广的高效微生物菌肥系列产品。 沃益多(HYT)是由美国生物学家团队，经过数年研究开发出的高活性土壤微生物菌种，在上世纪90年代开始推广应用，在过去20年中不断发展成熟。沃益多产品实现了生物学和土壤微生物技术上的重大突破。 以挪威海德鲁集团公司高级副总裁、世界肥料工业协会主席托雷 福·安格博士（Dr. Thorleif Enger ，Agrinos董事会主席）领衔的世界顶级肥料营销团队---挪威阿坤纳斯公司，整合了全球在肥料领域的研发、生产和推广的各路精英，包括美国微生物学家威廉霍·普金斯博士（Dr. William Hopkins，Agrinos研究及发展总监），在微生物应用方面有20多年实践经验并取得重要研究成果的卡尔·菲克先生（Karl Fick，Agrinos 技术总监），商界精英亚伦·帕沃斯先生（Aaron Powers，Agrinos公司CEO），在对沃益多(HYT)产品进行了数年跟踪研究，在世界各地获得了大量的实验数据，得到满意的增产效果之后，证实“沃益多”产品是集营养转换吸收、抑菌防病和改良土壤等功效为一体的高新技术产品，对应对全球气候变化，减少化肥用量,降低温室气体排放，提高农作物产量和品质具有重要意义。 挪威阿坤纳斯公司（AGRINOS AS）是从事生物技术研发、生产的跨国公司。公司通过全资收购、兼并美国专业生物技术公司，在美国、墨西哥和马来西亚投资建厂，使其迅速发展成为全球领先的生物技术企业。
L 322/12 EN Official Journal of the European Union COMMISSION REGULATION (EC) No 1441/2007 of 5 December 2007 7.12.2007 amending Regulation (EC) No 2073/2005 on microbiological criteria for foodstuffs (Text with EEA relevance) THE COMMISSION OF THE EUROPEAN COMMUNITIES, Having regard to the Treaty establishing the European Community, Having regard to Regulation (EC) No 852/2004 of the European Parliament and of the Council of 29 April 2004 on the hygiene of foodstuffs (1), and in particular Article 4(4) thereof, Whereas: (1) Commission Regulation (EC) No 2073/2005 of 15 November 2005 on microbiological criteria for food- stuffs (2) lays down microbiological criteria for certain micro-organisms and the implementing rules to be complied with by food business operators when im- plementing the general and specific hygiene measures referred to in Article 4 of Regulation (EC) No 852/2004. Regulation (EC) No 2073/2005 also provides that food business operators are to ensure that foodstuffs comply with the relevant microbiological criteria set out in Annex I to that Regulation. (2) Chapters 1 and 2 of Annex I to Regulation (EC) No 2073/2005 set out food safety criteria and process hygiene criteria regarding dried infant formulae and dried dietary foods for special medical purposes intended for infants below six months of age (dried infant formulae and dried dietary foods). Part 2.2 of Chapter 2 of that Annex provides that where dried infant formulae and dried dietary foods are tested and Enterobacteriaceae are detected in any of the sample units, the batch is to be tested for Enterobacter sakazakii and Salmonella. (3) On 24 January 2007, the Scientific Panel on Biological Hazards (BIOHAZ Panel) of the European Food Safety Authority (EFSA) issued an opinion with regard to Enterobacteriaceae as indicators of Salmonella and Enterobacter sakazakii. It concluded that it is not possible (1) OJ L 139, 30.4.2004, p. 1, as corrected by OJ L 226, 25.6.2004, p. 3. (2) OJ L 338, 22.12.2005, p. 1. to establish a correlation between Enterobacteriaceae and Salmonella, and no universal correlation between Entero- bacteriaceae and Enterobacter sakazakii exists. At individual plant level, a correlation between Enterobacteriaceae and Enterobacter sakazakii may however be established. (4) Therefore the requirement laid down in Regulation (EC) No 2073/2005 as regards the testing of dried infant formulae and dried dietary foods for Salmonella and Enterobacter sakazakii where Enterobacteriaceae are detected in any of the sample units should no longer apply. Part 2.2 of Chapter 2 of Annex I to that Regu- lation should therefore be amended accordingly. (5) In line with the opinion on the microbiological risks in infant formulae and follow-on formulae issued by the BIOHAZ Panel of EFSA on 9 September 2004, micro- biological criteria on Salmonella and Enterobacteriaceae should be laid down for dried follow-on formulae. (6) The BIOHAZ Panel of EFSA issued an opinion on Bacillus cereus and other Bacillus spp. in foodstuffs on 26 and 27 January 2005. It concluded that one of the major control measures is to control temperature and to establish a system based on hazard analysis and critical control point principles. Dehydrated foods, in which the presence of spores of pathogenic Bacillus spp. is frequent, might permit the growth of Bacillus cereus once rehydrated in warm water. Some dehydrated foods, including dried infant formulae and dried dietary foods, are consumed by potentially fragile consumers. In line with the EFSA opinion, the numbers of Bacillus cereus spores in dried infant formulae and dried dietary foods should be as low as possible during processing and a process hygiene criterion should be laid down in addition to good practices designed to reduce delay between preparation and consumption. (7) Chapter 1 of Annex I to Regulation (EC) No 2073/2005 provides for the analytical reference method for staphy- lococcal enterotoxins in certain cheeses, milk powder and whey powder. That method has been revised by the Community reference laboratory for coagulase positive staphylococci. The reference to that analytical reference method should therefore be amended. Chapter 1 of Annex I to that Regulation should therefore be amended accordingly.