放射科药物过敏应急预案 一、【过敏反应应急预案】 （一）护理人员给患者应用药物前应询问患者是否有该药物过敏史，按要求做过敏试验，凡有过敏史者禁忌做该药物的过敏试验。 （二）正确实施药物过敏试验，过敏试验药液的配制、皮内注入剂量及试验结果判断都应按要求正确操作，过敏试验阳性者禁用。 （三）该药试验结果阳性患者或对该药有过敏史者，禁用此药。同时在该患者医嘱单、病历夹上注明过敏药物名称，在床头挂过敏试验阳性标志，并告知患者及其家属。 （四）经药物过敏试验后凡接受该药治疗的患者，停用此药 3 天以上，应重做过敏试验，方可再次用药。 （五）抗生素类药物应现用现配，特别是青霉素水溶液在室温下极易分解产生过敏物质，引起过敏反应，还可使药物效价降低，影响治疗效果。 （六）严格执行查对制度，做药物过敏试验前要警惕过敏反应的发生，治疗盘内备肾上腺素 1 支。 （七）药物过敏试验阴性，第一次注射后观察20?30mi n,注意观察 巡视患者有无过敏反应，以防发生迟发过敏反应。 过敏性休克应急预案】
（一）患者一旦发生过敏性休克，立即停止使用引起过敏的药物，就地抢救，并迅速报告医生。 （二）立即平卧，遵医嘱皮下注射肾上腺素1mg小儿酌减。如症状不缓解，每隔30min 再皮下注射或静脉注射0.5ml ，直至脱离危险期，注意保暖。（三）改善缺氧症状，给予氧气吸入，呼吸抑制时应遵医嘱给予人工呼吸，喉头水肿影响呼吸时，应立即准备气管插管，必要时配合施行气管切开。（四）迅速建立静脉通路，补充血容量，必要时建立两条静脉通路。遵医嘱应用晶体液、升压药维持血压，应用氨茶碱解除支气管痉挛，给予呼吸兴奋剂，此外还可给予抗组织胺及皮质激素类药物。 （五）发生心脏骤停，立即进行胸外按压、人工呼吸等心肺复苏的抢救措施。 （六）观察与记录，密切观察患者的意识、体温、脉搏、呼吸、血压、尿量及其他临床变化，患者未脱离危险前不宜搬动。 （七）按《医疗事故处理条例》规定 6 h 内及时、准确地记录抢救过 三、【程序】（一）过敏反应防护程序： 询问过敏史T做过敏试验T阳性患者禁用此药T该药标记、告知家属T阴性患者接受该药治疗T现用现配T严格执行查对制度-首次注射后观20?30 min （二）过敏性休克急救程序：
抗体稀释液 牛血清白蛋白1g NaN3 0.08g 30% Triton 1ml（PBS） 定容PBS（1x）100ml 驴血清封闭液 血清5-10ml NaN3 0.05g 30% Triton 0.5ml（PBS） 定容PBS（1x）100m 抗原稀释液 A 18ml+ B 82 ml5 双蒸水1000ml ,PH=6 封片液 Na2CO3 0.689g NaHCO3 1.554g 溶于50ml 双蒸水 50ml 甘油加热混合 抗原修复液 A:柠檬酸2.1g----100ml ddH2O B:二水柠檬酸三钠14.7g-----500ml A 18ml+ B 82ml+900mlddH2O--------1L(PH=6.0) Neurobasal Media glutamine, 1%penicillin/streptomycin, 10 ng/mL platelet-derived growth factor, 10 ng/mL FGF, and 2% B27 BRDU BrdU is a brominated analog of thymidine. STABILITY / STORAGE AS SUPPLIED: BrdU should be stored at -0°C and desiccated. If properly stored, it will have a shelf-life of two years. SOLUBILITY / SOLUTION STABILITY: Sigma routinely tests the solubility at 50 mg/mL in 1 M ammonium hydroxide yielding a clear colorless solution. It can be dissolved in water at a concentration of up to 10 mg/mL. It is also soluble in DMF, DMSO and water (with heat) at 50-100 mg/mL. Solutions at neutral pH should be stable for at least 6 months when stored frozen at -20°C. APPLICATIONS: BrdU is selectively incorporated into cell DNA at the S phase of cell cycle. The use of BrdU as a thymidine analog has made possible the identification of DNA synthesis in suspensions of cells, cell smears and tissue sections. The incorporation of BrdU into DNA
临床常用药物过敏试验方法 1 青霉素G钠（钾） 1.1 皮试溶液的配制取青霉素皮试剂一支（含青霉素钠2500单位），加入氯化钠注射液5ml溶解稀释（含青霉素500单位／ml）。本品稀释后供24小时使用。 1.2 皮试方法及观察结果皮内试验：消毒前臂屈侧关节上2寸处皮肤，抽取皮试液约0.1ml作皮内注射(小儿注0.02~0.03ml)，20分钟后，如局部出现中心晕团、周围红斑，直径大于lcm，或局部红晕或伴有小水泡者为阳性；对于可疑阳性反应者，应在另一前臂用氯化钠注射液做对照试验。 1.3 注意事项极少数患者，可在皮肤试验时发生过敏性休克，常于注射后数秒至5分钟内开始，先皮肤瘙痒、四肢麻木，继则气急、胸闷、发绀、心跳加快、脉细、血压下降、大量出汗等，如不及时抢救，可导致病人死亡。故应做好抢救准备，如常备盐酸肾上腺素、氢化可的松、中枢兴奋药和抗过敏药。 2 其它青霉素类（氨苄西林、羧苄西林、苯唑西林、哌拉西林） 2.1 皮试溶液的配制： 0．5g/瓶加氯化钠注射液至1ml －→500mg/ml取0．1ml加氯化钠注射液至1ml － →50mg/ml取0．1ml加氯化钠注射液至1ml －→5mg/ml取0．1ml加氯化钠注射液至1ml －→0.5mg/ml2.2皮试方法及观察结果：取0.1ml（50 ug）皮内注射，阳性反应者禁用。 3 邦达（哌拉西林钠/他唑巴坦钠） 3.1 皮试溶液的配制： 取邦达（专供皮试用，每支含哌拉西林钠/他唑巴坦钠2.5mg）,注入5ml注射用水，配制成500ug/ml皮试液。 3.2 皮试方法及观察结果： 取0.1ml（50 ug）皮内注射，阳性反应者禁用。 4 头孢菌素类抗生素皮试液的配制方法 头孢菌素类在《中国药典》并无明确规定必须做过敏试验，但在有过敏史或是过敏体质者，根据情况做皮肤过敏试验。皮试液浓度现无统一规定，一般规定采用0.5mg／ml作皮试液。以下为头孢菌类皮试液的配制方法，供临床参考。 4.1 皮试溶液的配制： 4.1.1 1g头孢菌素+2ml氯化钠注射液，得500mg／ml溶液(A液)；4.1.2 用lml注射液吸取A液0.1ml+0.9ml氯化钠注射液得50mg／ml溶液(B液)；4.1.3 推掉0.9ml，余0.1ml+氯化钠注射液0.9ml得5mg／ml溶液(C液)；4.1.4 推掉0.9ml，余0.1ml+氯化钠注射液0.9ml得0.5mg／ml (D液)皮试液。 若头孢菌素为0.5g/瓶，则在首次稀释后取A液0.2ml+氯化钠注射液0.8ml得50mg／ml溶液(B液)，余同上3、4部得D液。 4.2 皮试方法及观察结果： 取上述D液0.1ml注入前臂掌侧下段内皮，15-20分钟后观察，局部皮肤红肿直径在lcm 以上者为阳性(+)。
实验室溶液的配制 一．蛋白试验 （1）4%的硼酸吸收液：分析纯硼酸，4g溶于50ml水，加热使其溶解，冷却，再用蒸馏水标至100ml。 （2）40%的氢氧化钠：分析纯氢氧化钠，40g溶于100ml水。 （4）0.1mol/L盐酸标准溶液：量取9ml盐酸（GB622，分析纯），用蒸馏水定容到1000ml，摇匀。 标定：在电子天平上准确称取5份烘干至恒重的基准无水碳酸钠，每份0.2g左右，记下所称的基准无水碳酸钠的质量m，将5份基准无水碳酸钠分别置于5个250ml锥形瓶中（提前标号），加入50ml水，加2~3滴甲基红指示剂，然后用待标定的0.1mol/L的HCL标准溶液滴定至溶液由黄色变为灰红色，记下消耗的盐酸标准液的体积Vo，然后将滴定完的锥形瓶在电炉上烧至沸腾，然后转小火保持沸腾2分钟,溶液中的二氧化碳被赶出后溶液又变为蓝绿色，冷却，再用盐酸标准溶液滴定至溶液变为灰红色，记下消耗的盐酸标准液体积Vi，两次滴定之和即为消耗的盐酸标准液体积。平行滴定5份基准无水碳酸钠，记录好 每份的数据。计算公式：C(Hcl)＝m/(V o+Vi)×0.05299，五次结果的平均值即为盐酸标准液的浓度，将盐酸标准液转入1000ml容量瓶保存即可。贴上标签标明配制时间，配制人，溶液浓度。 注：测凯氏定氮仪漏气不漏气的方法——取分析纯硫酸铵0.2g左右做蛋白试验，测其氮含量，作3个平行试验，测得硫酸铵含氮量为21.19%±0.2%，否则应检查加减，蒸馏，滴定各步骤是否正确。 二．钙的测定 （1）10%o淀粉溶液的配制：10g淀粉溶于水，加热使其溶解，冷却后转移到1000ml容量瓶，用蒸馏水定容到1000ml。 （2）1/1三乙醇胺溶液（即50%溶液）：取100ml三乙醇胺溶于100ml
配制溶液的一般实验步骤 配制溶液步骤因配置的溶液不同而有所不同，现举两个例 子： 举例 1：配置 0.05mol/L ，400mL NaOH 溶液的步骤：要准确配置氢氧化钠的浓度，则要用容量瓶定容，实验室没有 400 毫升的容量瓶，则选用 500 毫升的容量瓶。 1.计算需要氢氧化钠的质量：0.5L*0.05mol/L*40.01=1.000 克 2.称 1.000 克氢氧化钠于烧杯中，加少量水溶解，然后倒入 500 毫升容量瓶里，分 3 次洗烧杯，将溶液全部倒入容量瓶里，最后用水稀释至刻度线，摇匀，即，得到 0.05mol/L 的氢氧化钠溶液。 如果不需要很准确的话，可以直接用量筒量 400 毫升，称的时候只要称 0.8 克就可以了。举例 2：配置 1.5mol/L 的稀硫酸 200mL 步骤： 第 1 步：计算：根据 C1V1=C2V2 ，计算需要浓硫酸的体积；第 2 步：量取，利用刻度吸管吸取需要浓硫酸的体积；第 3 步：稀释，将浓硫酸转移到小烧杯中，加少量水稀释；第 4 步：转移 , 待溶液温度降低后，将烧杯中的硫酸转移到 200mL 容量瓶中； 第 5 步：洗涤，洗涤小烧杯，和转移的时候用到的玻璃棒， 至少三次，将洗涤的水一并转移到容量瓶中； 第 6 步：定容，加水定容到刻度线，在距离刻度线一厘米左右改
用胶头滴管定容； 第 7 步：摇匀 ,将溶液摇匀 ,如果液面下降也不可再加水定容；第 8 步：将配得的溶液转移至试剂瓶中，贴好标签；举例 3：配制 500mL ，0.1mol/L 碳酸钠溶液步骤及注意事项所需的仪器：烧杯、容量瓶、玻璃棒、胶头滴管、分析天平、药匙、量筒步骤：第一步：计算：所需碳酸钠的质量 =0.5*0.1*106=5.3 克；第二步：称量：在天平上称量 5.3 克碳酸钠固体，并将它倒入小烧杯中；第三步：溶解：在盛有碳酸钠固体的小烧杯中加入适量蒸馏水，用玻璃棒搅拌，使其溶解；第四步：移液：将溶液沿玻璃棒注入 500mL 容量瓶中；第五步：洗涤：用蒸馏水洗烧杯2?3次，并倒入 容量瓶中；第六步：定容：倒水至刻度线 1?2cm处改用胶头滴管滴到与凹液面平直；第七步：摇匀：盖好瓶塞，上下颠倒、摇匀；第八步：装瓶、贴签；误差分析：固体药品的称量与液体药品的量取是否准确；把溶液向容量瓶中转移，溶液洒了；未洗涤烧杯和玻璃棒；用待配液润洗了容量瓶；定容时水加多了或加少了；定容时未平视刻度线。仰视、俯视对溶液浓度有何影响？★俯视刻度线，实际加水量未到刻度线，使溶液的物质的量浓度增大；★仰 视刻度线，实际加水量超过刻度线，使溶液的物质的量浓度 减小。市售盐酸密度1.19,质量分数36%?38%以37%计 算：步骤： 1.计算：假若需要 2mol/L 的硫酸 100mL ，则需 37%
授课班级： 2010级临床本科2班 授课时间：第12周星期四 1、2节2学时 授课章节：第四章注射法 第五章药物过敏试验法 重点： 1、常用注射法的注意事项 2、各种药物皮试浓度及皮试结果判断 3、过敏性休克的临床表现及抢救措施 难点： 1、各种药物皮试浓度及皮试结果判断 2、过敏性休克的临床表现及抢救措施 教学方法：讲授法多媒体 学时分配： 第四章注射法 (1) 第一节注射原则 (1) 第二节药液抽吸法 (2) 第三节常用注射法 (2) 第五章药物过敏试验法 (7) 第一节青霉素过敏试验 (7) 第二节链霉素过敏实验法 (8) 第三节破伤风抗毒素过敏试验法 (8) 第四节普鲁卡因与碘过敏实验法 (8) 教学内容： 第四章注射法 第一节注射原则 注射原则是注射给药的总则，执行过程中必须严格遵守。 （一）严格遵守无菌操作原则 1.工作人员自身准备符合无菌操作要求，注射前必须洗手、戴口罩、保持衣帽整齐，注射后洗手。 2.注射部位常规皮肤消毒，保持无菌。 3.注射器空筒的内壁、活塞、乳头和针头的针梗、针尖、针栓内壁必须保持无菌。（二）严格执行查对制度： （三）严格执行消毒隔离制度： （四）选择合适的注射器和针头： （五）选择合适的注射部位 （六）注射药物要现配现用 （七）排空气注射前必须排尽注射器内空气，以防气体进入血管形成栓塞。排气时，防止药液浪费。 （八）检查回血 （九）掌握无痛注射技术 1.解除病人的思想顾虑，分散其注意力 2.取合适的体位，使肌肉放松，易于进针 3.注射时做到“二快一慢”即进针和拔针快而推药慢而且均匀 4.同时注射物的配伍禁多种药物时，应先注射刺激性较弱的药物，后注射刺激性较强的药物，同时注意药忌 5.注射刺激性较强的药物，针头宜粗长且进针要深
第十一章药物过敏试验法 临床上使用某些药物时，可引起不同程度的过敏反应，甚至发生过敏性休克，如不及时抢救，可危及生命，为了防止发生过敏反应，在使用某些药物前，除须详细询问过敏史外，还须做过敏试验，护士应正确掌握试验液配制和试验方法，认真观察，正确判断试验结果，同时要熟练掌握过敏反应的急救处理。 第一节青霉素过敏试验 青霉素具有杀菌力强、毒性低的特点，临床应用广泛。但青霉素易致过敏反应，人群中有5％－6％对青霉素过敏，而且任何年龄，任何剂型和剂量，任何给药途径，均可发生过敏反应。因此在使用各种青霉素前都应先做过敏试验，试验结果阴性者方可用药。 一、过敏反应的机理 过敏反应系抗原与抗体在致敏细胞上相互作用后引起组织损伤和生理功能紊乱。青霉素属于药物的半抗原物质，进入机体后，其降解产物――青霉噻唑和青霉稀酸与组织蛋白结合成全抗原――青霉噻唑蛋白，刺激机体产生特异性抗体IgE.，由于IgE与组织细胞具有特殊的亲和力，故形成的抗体固定在某些组织的肥大细胞上和血液中的白细胞表面，使机体呈致敏状态，当具有过敏体质的人再次接受类似抗原刺激后，即与特异性抗体（IgE）结合，发生抗原抗体反应，导致细胞破裂，释放组织胺、缓激肽、5－羟色胺等血管活性物质。这些物质作用于效应器官，使平滑肌痉挛、微血管扩张、毛细血管通透性增高、腺体分泌增多。由于血管活性物质作用的部位不同及个体差异，故临床表现也是多种多样。 二、过敏反应的临床表现 （一）过敏性休克 一般在作青霉素皮内试验或注射药物后数秒或数分钟内闪电式发生，也有的于半小时后出现，极少数病人发生在连续用药的过程中。 1．呼吸道阻塞症状由于缺氧和窒息，病人主观感觉胸闷，喉头堵塞伴濒危感，客观表现气急、紫绀、口吐白沫。 2．循环衰竭症状面色苍白，出冷汗，脉细弱、血压下降。 3．中枢神经系统症状由于脑组织缺氧，病人表现烦躁不安、头晕、面及四肢麻木、意识丧失，抽搐，大小便失禁。
实验室常用溶液配制示例 氢氧化钠滴定液(1、0.5或0.1mol/L) NaOH=40.00 40.00g→1000mL 20.00g→ 1000mL 4.000g→1000mL 【配制】取氢氧化钠适量，加水振摇使溶解成饱和溶液，冷却后，置聚乙烯塑料瓶中，静置数日，澄清后备用。氢氧化钠滴定液(1mol/L) 取澄清的氢氧化钠饱和溶液56mL，加新沸过的冷水使成1000mL，摇匀。氢氧化钠滴定液(0.5mol/L) 取澄清的氢氧化钠饱和溶液28mL，加新沸过的冷水使成1000mL，摇匀。 氢氧化钠滴定液(0.1mol/L) 取澄清的氢氧化钠饱和溶液5.6mL，加新沸过的冷水使成1000mL，摇匀。 【标定】氢氧化钠滴定液(1mol/L) 取在105℃干燥至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾约6g，精密称定，加新沸过的冷水50mL，振摇，使其尽量溶解；加酚酞指示液2滴，用本液滴定；在接近终点时，应使邻苯二甲酸氢钾完全溶解，滴定至溶液显粉红色。每1mL的氢氧化钠滴定液(1mol/L) 相当于204.2mg的邻苯二甲酸氢钾。根据本液的消耗量与邻苯二甲酸氢钾的取用量，算出本液的浓度，即得。氢氧化钠滴定液(0.5mol/L) 取在105℃干燥至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾约3g，照上法标定。每1mL的氢氧化钠滴定液(0.5mol/L)相当于102.1mg 的邻苯二甲酸氢钾。氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)，取在105℃干燥至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾约0.6g，照上法标定。每1mL的氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)相当于20.42mg的邻苯二甲酸氢钾。如需用氢氧化钠滴定液(0.05、0.02或0.01mol/L)时，可取氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)加新沸过的冷水稀释制成。必要时，可用盐酸滴定液(0.05、0.02或0.01mol/L)标定浓度。 【贮藏】置聚乙烯塑料瓶中，密封保存；塞中有2孔，孔内各插入玻璃管1支，1管与钠石灰管相连，1管供吸出本液使用。 盐酸滴定液(1、0.5、0.2或0.1mol/L) HCl=36.46 36.46g→1000mL；18.23g→ 1000mL 7.292g→1000mL；3.646g→1000mL 【配制】盐酸滴定液(1mol/L)：取盐酸90mL，加水适量使成1000mL，摇匀。 盐酸滴定液(0.5、0.2或0.1mol/L)：照上法配制，但盐酸的取用量分别为45、18或9.0mL。【标定】盐酸滴定液（1mol/L）取在270～300℃干燥至恒重的基准无水碳酸钠约1.5g，精密称定，加水50mL使溶解，加甲基红－溴甲酚绿混合指示液10滴，用本液滴定至溶液由绿色转变为紫红色时，煮沸2分钟，冷却至室温，继续滴定至溶液由绿色变为暗紫色。每1mL 的盐酸滴定液(1mol/L)相当于53.00mg的无水碳酸钠。根据本液的消耗量与无水碳酸钠的取用量，算出本液的浓度，即得。 盐酸滴定液(0.5mol/L)照上法标定，但基准无水碳酸钠的取用量改为约0.8g。每1mL的盐酸滴定液(0.5mol/L)相当于26.50mL的无水碳酸钠。 盐酸滴定液(0.2mol/L)：照上法标定，但基准无水碳酸钠的取用量改为约0.3g。每1mL的盐酸滴定液(0.2mol/L)相当于10.60mg的无水碳酸钠。
1．基本知识 1 2．技术14-1青霉素过敏试验法 1 3．技术14-2链霉素过敏试验法 技术14-3破伤风过敏试验法 1 4．技术14-4细胞色素C 过敏试验法 技术14-5普鲁卡因过敏试验法 技术14-5碘过敏试验法 1 5．本章小结 基本知识 一、常见药物过敏反应的发生机制
二、过敏反应的临床表现 （一）过敏性休克（allergic shock） 对机体威胁最大的反应 发生率约为5-10/万 发生于用药数秒或数分钟内，或半小时后，但大多发生在注射后30min内 主要表现有胸闷、气促、呼吸困难、面色苍白、冷汗、血压下降，甚至意识丧失，大小便失禁等。 （二）血清病型反应 一般于用药后7～14天发生， 临床表现和血清病型相似，有发热、关节肿痛、皮肤瘙痒、荨麻疹、全身淋巴肿大、腹痛等。 （三）器官或组织的过敏反应 1.皮肤反应瘙痒、荨麻疹，严重者发生剥脱性皮炎。 2.呼吸道反应哮喘或促使原有的哮喘发作。 3.消化系统反应恶心、呕吐、腹痛、腹泻等。 三、过敏性休克的急救 （一）立即停药，使病人平卧、保暖。 （二）立即皮下注射0.1%盐酸肾上腺素1ml，小儿剂量酌减，如症状不缓解，可每隔30min皮下或静脉注射该药0.5ml，直至脱离危险期。 （三）吸氧及对症处理立即氧气吸入2～4L/min。当呼吸受抑制时，应立即进行口对口人工呼吸，并肌肉注射尼可刹米或山梗菜碱等呼吸兴奋剂。有条件者可插入气管导管，借助人工呼吸机辅助或控制呼吸。喉头水肿影响呼吸致窒息时，应尽快配合施行气管切开。 （四）立即根据医嘱给予地塞米松5～10mg静脉推注，或氢化可的松200～400mg加5%或10%葡萄糖液500ml内静脉滴注；给予抗组胺类药物，如肌肉注射盐酸异丙嗪25～50mg或苯海拉明40mg。 （五）扩充血容量，静脉滴注10%葡萄糖溶液或平衡溶液，如血压仍不回升，可按医嘱给予升压药物，如多巴胺、间羟胺等静脉滴注。 （六）若发生心脏停搏，立即行心肺（气管内插管）复苏抢救。 （七）密切观察病情包括呼吸、脉博、血压、神志和尿量等变化，并认真做好记录。病人未脱离危险以前，不能搬运就诊。
实验室常用得指示剂配制 1 百里香酚蓝-酚酞混合指示液 取3份体积百里香酚蓝溶液(1g/L)与2份体积酚酞溶液(1g/L)混合均匀。 2 甲基红-亚甲基蓝混合指示液 将50mL甲基红溶液(2g/L)与50mL亚甲基蓝溶液(1g/L)混合。 3 酸性铬蓝K-萘酚绿B混合指示剂 称取0、1g酸性铬蓝K,0、1g萘酚绿B与20g干燥氯化钾,置于研钵中,充分研磨混匀,贮存于棕色广口瓶中。 4 溴百里(香)酚蓝-苯酚红混合指示液 0、08g溴百里酚蓝与0、1g苯酚红溶于20mL乙醇中,加水50mL,用氢氧化钠溶液(4g/L)调至pH为7、5(红紫色),再以水稀释至100mL。 5 溴甲酚绿-甲基橙混合指示液 6份体积溴甲酚绿溶液(1g/L)与1份体积甲基橙溶液(1g/L)混合。 6 溴甲酚绿-甲基红混合指示液 3份体积溴甲酚绿溶液(1g/L)与1份体积甲基红溶液(1g/L)混合,摇匀,贮存于棕色瓶中。 7 1,10-菲罗啉-硫酸亚铁铵混合指示液 称取1、6g1,10-菲罗啉及1g硫酸亚铁铵(或0、7g硫酸亚铁),溶于100mL 水中,贮存于棕色瓶中。 8 甲基红指示液(1g/L) 称取0、10g甲基红,溶于乙醇,用乙醇稀释至100mL。 9 溴甲酚绿指示液(2g/L)
称取0、20g溴甲酚绿溶解于6mL氢氧化钠溶液(4g/L)与5mL乙醇中,用水稀释至100mL。 10 甲基橙指示液(1g/L) 称取0、10g甲基橙,溶于70℃水中,冷却,用水稀释至100mL。 11 酚酞指示液(10g/L) 称取1、0g酚酞,溶于乙醇,用乙醇稀释至100mL。 12 溴(甲)酚蓝指示液(1g/L) 称取0、10g溴酚蓝,溶于乙醇,用乙醇稀释至100mL。 13 钙指示液(钙羧酸指示剂) 称取0、20g钙指示剂〔2-羟基-1-(2-羟基-4-磺酸-1-萘偶氮)-3-萘甲酸〕(C21H14N2O7S)或其钠盐与10g在105℃干燥得氯化钠,置于研钵中研细混匀。贮存于棕色磨口瓶中。 14 铬黑T指示剂 将1、0g铬黑T与100、0g干燥得氯化钠,置于研钵中,研细混匀。贮存于棕色磨口瓶中。 15 铬黑T指示液(5g/L) 称取0、50g铬黑T与4、5g氯化羟胺,溶于乙醇中,用乙醇稀释至100mL,贮存于棕色瓶中。可保持数月不变质。 16 百里香酚蓝指示液(1g/L) 溶解0、10g百里香酚蓝于2、2mL氢氧化钠溶液(4g/L)与5mL乙醇中,稀释至100mL。 17 孔雀绿指示液(1g/L)
实验室所需溶液配制 1.费休氏试液，购买； 2.氢氧化钠溶液，C=0.01mol/l。氢氧化钠分子量40.0，准确称取氢氧化钠固体 0.4g溶于200ml蒸馏水中，并在1L容量瓶中定容，即得到上述浓度溶液； 3.中性红溶液，C=1%。准确称取中性红固体1g溶于50ml蒸馏水中，并在100ml 容量瓶中定容，即得到上述浓度溶液； 4.溴百里香酚蓝溶液，C=1%。准确称取溴百里香酚蓝固体1g溶于50ml蒸馏 水中，并在100ml容量瓶中定容，即得到上述浓度溶液； 5.碘化钾溶液，C=10%。准确称取KI固体50g溶于50ml蒸馏水中，并在500ml 容量瓶中定容，即得到上述浓度溶液； 6.硫代硫酸钠溶液，C=0.1mol/l。硫代硫酸钠分子量158.11，准确称取硫代硫 酸钠固体15.811g溶于200ml蒸馏水中，并在1000ml容量瓶中定容，即得到上述浓度溶液； 7.硫酸溶液，C=2mol/l，硫酸分子量98.08，浓度98%时密度约1.84g/ml，准确 量取硫酸液体108.78ml稀释与500ml蒸馏水中，向水中加入硫酸而非向硫酸中加水，冷却后在1000ml容量瓶中定容即可得到上述浓度溶液； 8.淀粉溶液，C=0.5%。准确称取可溶性淀粉0.5g，溶于50ml水中，并在100ml 容量瓶中定容，即得到上述浓度溶液； 9.铬酸钾溶液，C=50g/L。准确称取铬酸钾固体50g，溶于500ml水中，并在 1000ml容量瓶中定容，搅拌下逐滴加入10%的硝酸银溶液,直至溶液出现棕红的悬浮物为止. 静置1昼夜,用干净的滤纸漏斗过滤即可，不一定用饱和硝酸银溶液,用10%硝酸银溶液即可.配制方法:1克硝酸银+10毫升纯水溶解,置于棕色瓶中； 10.氯化钠基准试剂，C=0.1mol/l，氯化钠分子量58.5，准确称取氯化钠固,5.85g 溶于500ml蒸馏水中，并在1000ml容量瓶中定容，即得到上述浓度溶液； 11.硝酸银溶液，C=0.1mol/l，硝酸银分子量169.87，准确称取硝酸银固体8.49g 溶于200ml蒸馏水中，并在500ml容量瓶中定容，即得到上述浓度溶液，用前采用基准氯化钠试剂（10）标定，需保存于棕色试剂瓶中；
药物过敏试验方法 （1）青霉素G钠（钾） ①皮试溶液得配制 a?用Iml注射器取每毫升含20万U得青霉素溶液0. 1ml,加注射用 水或生理盐水至1ml,摇匀即成（含青霉素2万0。 b.取上液0. Iral &上法稀释至1ml （含青霉素2000U）。 C.取每毫升含青霉素2000U得溶液0. 5ral按上法稀释至2ral,摇匀即 成（含青霉素500u） O ②皮试方法及结果观察（皮内试验） a.用75%酒精消毒前臂屈侧关节上6. 6cin处皮肤。 b?抽取皮试液0, 1ml （合青霉素5011）,作皮内注射成一皮丘（小儿注 射0. 02—0. 03ml）。 C.等20Qiiri后，如局部出现红肿，直径大于Icm或局部红晕或伴有小水 泡者为阳性。对可疑阳性者，应在另一前臂用生理盐水做对照试验。 ③注意事项 a.极少数患者可在皮肤试验时发生过敏性休克，常于注射后数秒至5in in 内开始。先就是皮肤蜃痒、四肢麻木,气急、胸闷、发给、心跳加 快、脉细、血压下降.大量出汗等。如不及时抢救，可导致病人死亡。 应做好抢救准备，如盐酸签上腺素肌注;氢化可得松静滴;及10%葡萄糖酸钙液与高渗葡萄糖液20ml缓慢静注；以及使用中枢兴奋药与抗过敏药。 b.试验用药含量要准,配制后在冰箱中保存不应超过24h,注射器应用
1ml刻度者。 C.更换同类药物或不同批号或停药3天以上，最好重新作皮内试验。（2）头胞菌素（先锋霉 素） ①皮试溶液得配制取头抱菌素0. 5g加生理盐水5ml溶解，然后抽取0. Iral稀释至5ml 后，再抽取0. 15ml稀释至5ml即成（每毫升含头抱菌素60ug）。 ②应试方法及结果观察侮次取应试液O.lml做皮内试验，具体操作及结果观察均同青霉素试验。 注:也有得医疗单位采用每毫升含0、25、0. 3s 0. 5mg 浓度得头泡菌素为皮试液。每次抽取0. 05-0. 1ml作皮试。 （3）链霉素 ①皮试溶液得配制 a.取链霉素IgdOO万U）加生理盐水3. sml溶液后即成4ml（每毫升 含25万U）。 b?取a液0. hnl加生理盐水稀释至Iral （每毫升含2. 5万0。 C?取b液0. 1ml加生理盐水稀释至Iml （每毫升含2500U）。 d?取C液0. Zml加生理盐水稀释至Iml （每毫升含500u）即得。 ②皮试方法及结果观察取度试液0.1ml做皮内试验，观察15-20min.具体皮试方法及结果 观察均同青霉素试验。 ③注意事项
实验室常用溶液及试剂配制 一、实验室常用溶液、试剂的配制-------------------------------------------------------1 表一普通酸碱溶液的配制 表二常用酸碱指示剂配制 表三混合酸碱指示剂配制 表四容量分析基准物质的干燥 表五缓冲溶液的配制 1、氯化钾-盐酸缓冲溶液 2、邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液 3、邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液 4、乙酸-乙酸钠缓冲溶液 5、磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲溶液 6、硼砂-氢氧化钠缓冲溶液 7、氨水-氯化铵缓冲溶液 8、常用缓冲溶液的配制 二、实验室常用标准溶液的配制及其标定-----------------------------------------------4 1、硝酸银（C AgNO3=0.1mol/L）标准溶液的配制 2、碘（C I2=0.1mol/L）标准溶液的配制 3、硫代硫酸钠（C Na2S2O3=0.1mol/L）标准溶液的配制 4、高氯酸（C HClO4=0.1mol/L）标准溶液的配制 5、盐酸（C HCl=0.1mol/L）标准溶液的配制 6、乙二胺四乙酸二钠（C EDTA =0.1mol/L）标准溶液的配制 7、高锰酸钾（C K2MnO4=0.1mol/L）标准溶液的配制 8、氢氧化钠（C NaOH=1mol/L）标准溶液的配制 三、常见物质的实验室试验方法 ----------------------------------------------------------6 1、柠檬酸（C6H8O7·H2O） 2、钙含量测定（磷酸氢钙CaHPO4、磷酸二氢钙Ca（H2PO4）2·H2O、钙粉等） 3、氟（Fˉ）含量的测定 4、磷（P）的测定 5、硫酸铜（CuSO4·5H2O） 6、硫酸锌（ZnSO4·H2O） 7、硫酸亚铁（FeSO4·H2O） 8、砷 9、硫酸镁（MgSO4） 四、维生素检测--------------------------------------------------------------------------------8 1、甜菜碱盐酸盐 2、氯化胆碱
药物过敏试验管理制 度
药物过敏试验管理制度 一、总则 1、医护人员在使用药品前，应详细询问以往用药史，应用后有无过敏症状，个人及家属有无药物过敏史或变态反应性疾病，并明示记载于病历（包括电子病历）或医嘱处方上。 2、根据药物说明书，对于使用前要求做过敏试验的药物，必须做药物过敏试验，试验结果记入病历（包括门诊病历、住院病历），并于处方医嘱上显示；药物过敏试验阳性者，禁用或慎用该试验药物。 3、不同药物过敏试验的方法按“药品说明书”或“临床用药须知”具体制定。 4、在使用药物过程中，如发现皮疹、瘙痒、胸闷等过敏症状，应严密观察或及时停药，同时填写“药物不良反应／事件报告表”报药学部。 5、凡证实病人对某药物过敏，应及时告知病人和家属，并在病历上明显标记该药物过敏。 二、适用范围 1、《中华人民共和国药典临床用药须知》（2005年版）必须做皮试的药物：细胞色素C注射液注射剂、降纤酶注射剂、青霉素钠注射剂、青霉素钾注射剂、青霉素v钾片剂、普鲁卡因青霉素注射剂、苄星青霉素注射剂、苯唑西林钠注射剂、氯唑西林钠（注射剂、胶囊、颗粒）、氨苄西林钠（注射剂、胶囊）、阿莫西林（片剂、胶囊、注射剂）、羧苄西林钠注射剂、哌拉西林钠注射剂、磺苄西林钠注射剂、胸腺素注射剂、白喉抗毒素注射剂、破伤风抗毒素注射剂、多价气性坏疽抗毒素注射剂、抗蛇毒血清注射剂、抗炭疽血清注射
剂、抗狂犬病血清注射剂、肉毒抗毒素注射剂、青霉胺片片剂、玻璃酸酶注射剂、α-靡蛋白酶注射剂、鱼肝油酸钠注射剂 2、药品说明书有规定必须做过敏试验的。 三、预防药物过敏须遵循以下原则 1、减少药物过敏反应危害的有效办法是在使用前仔细阅读药品说明书，详细询问病人过敏史，药物使用过程中密切观察病人的反应，出现异常反应及早发现，及早处理。 2、过敏性试验本身具有诱发严重过敏反应如呼吸衰竭、休克等的危险，试验过程中应严密观察病人反应，并做好急救准备。 3、过敏性试验结果具有临床参考价值，但存在假阳性或假阴性的情况。过敏试验阴性的病人用药过程中仍需密切观察，并做好急救准备。 4、如发生过敏性休克，应立即肌内或皮下注射0.1%肾上腺素注射液0.5～1ml（小儿酌减），必要时可数分钟重复注射一次或进行静脉注射。并根据需要进行输液、给氧、滴注肾上腺皮质激素、应用升压药和其他必要的急救措施。 四、医院内注射β-内酰胺类抗生素皮试原则 （一）凡使用青霉素类抗生素的病人均须作青霉素皮试： （1）皮试阴性者：可以应用所有青霉素类抗生素； （2）皮试阳性者：禁用青霉素类药物。 （二）凡使用除青霉素类外的其它β-内酰胺类抗生素，应询问有无以下两种情况： （1）青霉素类及以外药物过敏史； （2）高敏体质。
药物过敏试验管理制度 一、总则 1、医护人员在使用药品前，应详细询问以往用药史，应用后有无过敏症状，个人及家属有无药物过敏史或变态反应性疾病，并明示记载于病历（包括电子病历）或医嘱处方上。 2、根据药物说明书，对于使用前要求做过敏试验的药物，必须做药物过敏试验，试验结果记入病历（包括门诊病历、住院病历），并于处方医嘱上显示；药物过敏试验阳性者，禁用或慎用该试验药物。 3、不同药物过敏试验的方法按“药品说明书”或“临床用药须知”具体制定。 4、在使用药物过程中，如发现皮疹、瘙痒、胸闷等过敏症状，应严密观察或及时停药，同时填写“药物不良反应／事件报告表”报药学部。 5、凡证实病人对某药物过敏，应及时告知病人和家属，并在病历上明显标记该药物过敏。 二、适用范围 1、《中华人民共和国药典临床用药须知》（2005年版）必须做皮试的药物：细胞色素C注射液注射剂、降纤酶注射剂、青霉素钠注射剂、青霉素钾注射剂、青霉素v钾片剂、普鲁卡因青霉素注射剂、苄星青霉素注射剂、苯唑西林钠注射剂、氯唑西林钠（注射剂、胶囊、颗粒）、氨苄西林钠（注射剂、胶囊）、阿莫西林（片剂、胶囊、注射剂）、羧苄西林钠注射剂、哌拉西林钠注射剂、磺苄西林钠注射剂、胸腺素注射剂、白喉抗毒素注射剂、破伤风抗毒素注射剂、多价气性坏疽抗毒素注射剂、抗蛇毒血清注射剂、抗炭疽血清注射剂、抗狂犬病血清注射剂、肉毒抗毒素注射剂、青霉胺片片剂、玻璃酸酶注射剂、α-靡蛋白酶注射剂、鱼肝油酸钠注射剂 2、药品说明书有规定必须做过敏试验的。 三、预防药物过敏须遵循以下原则 1、减少药物过敏反应危害的有效办法是在使用前仔细阅读药品说明书，详细询问病人过敏史，药物使用过程中密切观察病人的反应，出现异常反应及早发
常用液体配制标准操作规程（SOP） 国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心 二〇〇八年九月修订
目录 一、细菌培养系统（责任人：郑子峥） 二、DNA操作系统（责任人：罗文新、陈瑛炜） 三、蛋白质操作系统（责任人：李少伟、顾颖、潘晖榕） 四、细胞培养相关（责任人：程通、张涛） 五、单克隆抗体制备系统（责任人：陈毅歆、） 六、EIA系统（责任人：葛胜祥、熊君辉） 一、细菌培养系统 1、LB培养基:
每1000mL加分析纯NaCl 10g ，蛋白胨 10g，酵母粉5g，用ddH2O 配制，再用10M NaOH调pH至(1000mL一般加450ul)，高压蒸汽灭菌15min冷却后使用。 2、固体培养基: LB培养基中加入琼脂至％，高压蒸汽灭菌15min后使用。 3、10%(g/V) 氨苄青霉素钠（Ap）： 注射用氨苄青霉素钠（粉末）50g溶于500ml无菌去离子水中，溶解后分装入4ml灭菌的EP管，全程超净工作台内操作，避免染菌，分装后－20度保存，培养细菌时做1000×使用。 注：如果购买的氨苄青霉素粉末不是无菌包装的，溶解后需用滤膜过滤除菌后再分装。 4、%(g/V)硫酸卡那霉素（Kan） 注射用硫酸卡那霉素（液体）通常是2ml/支，内含卡那霉素。取25支药剂（50ml），加入450ml无菌去离子水中，分装入4ml灭菌的EP管，全程超净工作台内操作，避免染菌，分装后－20度保存，培养细菌时做1000×使用。 注：如果购买的卡那霉素是粉末状的非无菌包装，溶解后需用滤膜过滤除菌后再分装。 5、细菌培养： 配制相应抗性培养基，每试管倒入3~4ml培养基（卡那霉素抗性培养采用标记试管），无菌牙签挑取单克隆至试管中，于37℃，220rpm 培养。剩余培养基做好抗性和日期标记，置于4℃保存。
药物过敏试验方法 ⑴青霉素G钠（钾） ①皮试溶液得配制 a.用山1注射器取每毫升含20万u得青霉素溶液0. 1ml,加注射用水或生理盐水至山1,摇匀即成（含青霉素2万U）。 b.取上液0. 1ml &上法稀释至1ml （含青霉素2000u）。 c.取每毫升含青霉素2000U得溶液0. 5ml按上法稀释至2ml,摇匀即成（含青霉素500u） o ②皮试方法及结果观察（皮内试验） a.用75%酒精消毒前臂屈侧关节上6. 6cm处皮肤。 b.抽取皮试液0. 1ml （合青霉素50u）,作皮内注射成一皮丘（小儿注射 0. 02—0. 03ml） o c.等20min后，如局部出现红肿，直径大丁? 1cm或局部红晕或伴有小水泡者为阳性。对可疑阳性者，应在另一前臂用生理盐水做对照试验。 ③注意事项 a.极少数患者可在皮肤试验时发生过敏性休克，常于注射后数秒至5m in 内开始。先就是皮肤蜃痒、四肢麻木,气急、胸闷、发给、心跳加快、脉细、血压下降、大量出汗等。如不及时抢救，可导致病人死亡。应做好抢救准备,如盐酸签上腺素肌注；氢化可得松静滴;及10%葡萄糖酸钙液与高渗葡萄糖液20ml缓慢静注；以及使用中枢兴奋药与抗过敏药。 b.试验用药含量要准,配制后在冰箱中保存不应超过24h,注射器应用lml
刻度者。 C.更换同类药物或不同批号或停药3天以上，最好重新作皮内试验。（2）头胞菌素（先锋霉 素） ①皮试溶液得配制 取头抱菌素0. 5g加生理盐水5ml溶解，然后抽取0. lml稀释至5ml 后，再抽取0. 15ml稀释至5ml即成（每毫升含头抱菌素60ug）。 ②应试方法及结果观察 每次取应试液0.1ml做皮内试验，具体操作及结果观察均同青霉素 试验。 注:也有得医疗单位采用每毫升含0、25、0、3、0、5mg 浓度得头泡菌素为皮试液。每次抽取0. 05-0. lml作皮试。 （3）链霉素 ①皮试溶液得配制 a.取链霉素lg（100万u）加生理盐水3. sml溶液后即成4ml （每毫升含25万u）。 b.取a液0. lml加生理盐水稀释至lml （每毫升含2. 5万U）。 c.取b液0. lml加生理盐水稀释至lml （每毫升含2500U）。 d.取c液0. Zml加生理盐水稀释至lml （每毫升含500u）即得。 ②皮试方法及结果观察 取度试液0.1ml做皮内试验，观察15-20min.具体皮试方法及结果 观察均同青霉素试验。 ③注意事项
常用药物过敏试验皮试液配制方法 药物是否须要皮试及所用皮试液的配制方法请按说明书为准则，原则上原药皮试。 1、青霉素80万U/瓶：(50u/0.1ml) 80万青霉素加生理盐水溶解至4ml；（20万U/ml） 取上液0.1ml+生理盐水至1ml；（2万U/ml） 取上液0.1ml+生理盐水至1ml；（2千U/ml） 取上液0.25ml+生理盐水至1ml；（500U/ml） 取上液0.1ml作皮试（即50U） 2、氨苄西林1g/瓶、氯唑西林1g/瓶、氨苄西林钠、氯唑西林钠1g/瓶、阿洛西林舒巴坦钠1g/瓶：以上所需药物加生理盐水溶解至4ml；（0.05mg/0.1ml）取上液0.1ml+生理盐水至1ml；（25mg/ml） 取上液0.1ml+生理盐水至1ml；（2.5mg/ml） 取上液0.2ml+生理盐水至1ml；（0.5mg/ml） 取上液0.1ml作皮试（即0.05mg） 皮试结果判断同青霉素。 3、氨苄西林钠、氯唑西林钠2g/瓶：（0.05mg/0.1ml） 以上所需药物加生理盐水溶解至8ml；（250mg/ml） 取上液0.1ml+生理盐水至1ml；（25mg/ml） 取上液0.1ml+生理盐水至1ml；（2.5mg/ml） 取上液0.2ml+生理盐水至1ml；（0.5mg/ml） 取上液0.1ml作皮试（即0.05mg） 皮试结果判断同青霉素。 4、美洛西林舒巴坦钠1.25g/瓶：（0.05mg/0.1ml） 以上所需药物加生理盐水溶解至5ml；（250mg/ml） 取上液0.1ml+生理盐水至1ml；（25mg/ml） 取上液0.1ml+生理盐水至1ml；（2.5mg/ml） 取上液0.2ml+生理盐水至1ml；（0.5mg/ml） 取上液0.1ml作皮试（即0.05mg） 皮试结果判断同青霉素。
实验室常用溶液的配制 1．30%丙烯酰胺溶液（100ml） 【配制方法】将29g丙烯酰胺和1g N,N'-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的蒸馏水中。加热至37℃溶解之，补加水至终体积为100ml。用Nalgene滤器（0.45μm孔径）过滤除菌，查证该溶液的pH值应不大于7.0，置棕色瓶中保存于4℃温度。 【注意】丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收，其作用具累积性。称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和面具。可认为聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为它还可能会含有少量未聚合材料。一些价格较低的丙烯酰胺和双丙烯酰胺通常含有一些金属离子，在丙烯酰胺贮存液中加入大约0.2体积的单床混合树脂（MB-1Mallinckrodt），搅拌过夜，然后用Whatman 1号滤纸过滤以纯化之。在贮存期间，丙烯酰胺和双丙烯酰胺会缓慢转化成丙烯酰和双丙烯酸，因此大于1年的溶液应该被丢弃。 2．40%丙烯酰胺（用于DNA测序，1L） 【配制方法】把380g丙烯酰胺（DNA测序级）和20g N,N'-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为600ml 的蒸馏水中。继续按上述配制30%丙烯酰胺溶液的方法处理，但加热溶解后应以蒸馏水补足至终体积为1L。置棕色瓶中保存于室温。 【注意】见上述配制30%丙烯酰胺的说明，40%丙烯酰胺溶液用于DNA序列测定。 3．0.1mol/L腺苷三磷酸（ATP）溶液（1ml） 【配制方法】在0.8ml蒸馏水中溶解60mg ATP，用0.1mol/L NaOH调至pH值至7.0，用蒸馏水稀释1ml 【注意】分装成小份保存于-70℃ 4．10mol/L乙酸铵溶液（1L） 【配制方法】把770g乙酸铵溶解于800ml蒸馏水中，加水稀释至1L后过滤除菌。在4°C 储存。 【注意】乙酸铵是热不稳定的。不要高压灭菌。 5．10%过硫酸铵溶液（10ml） 【配制方法】把1g过硫酸铵溶于8ml蒸馏水中，用蒸馏水补足体积至10ml。该溶液可在4℃保存数周。 6．1mol/L CaCl2溶液（200ml） 【配制方法】称取54g CaCl2·6H2O并溶解在170ml蒸馏水中，用蒸馏水补足体积至200 ml。用0.22μm滤器过滤除菌，分装成10ml小份贮存于-20℃。 【用法】制备感受态细胞时，将等分试样解冻，用蒸馏水稀释至100ml。通过Nalgene过滤器（0.45微米）过滤除菌，并在使用前冷却至0℃。 7．2.5mol/L CaCl2溶液（20ml） 【配制方法】称取13.5g CaCl2·6H2O并溶于15ml蒸馏水中，用蒸馏水补足体积至20ml。用0.22μm滤器过滤除菌，分装成1ml小份贮存于-20℃。 8．脱氧核苷三磷酸（dNTPs）溶液 【配制方法】把每一种dNTP溶解于水至浓度各为100mmol/L左右，用微量移液器吸取0.05mol/l Tris碱分别调节每一dNTP溶液的pH值7.0（用pH试纸检测），把中和后的每种 dNTP的实际浓度。