高压液相色谱法测定维生素C泡腾片中维
生素C的含量
摘要目的文章建立了高压液相色谱测定维生素C泡腾片中维生素C含量的方法，以检测所选用的Vc泡腾片产品中的Vc含量是否符合标示规格。方法采用0.02%的草酸溶液为溶剂；色谱中采用C18色谱柱，以0.02%的草酸溶液为流动相；流速1ml/min，检测波长为254nm，进样量20ul。结果维生素C在0.1mg/ml~0.9mg/ml的范围内，峰面积与浓度呈良好的线性关系，平均回收率为102.4%。结论应用该方法测定维生素C的含量具有简便、快速、可靠的有点，可重复性好；经测定，所选用的力度伸维生素C泡腾片每片所含维生素C约0.95g，与厂家标示的1g/片基本相符。
关键字维生素C泡腾片；高压液相色谱；维生素C
1 前言
高压液相色谱（HPLC）系统由输液泵，进样器，色谱柱，检测器，数据处理和计算机控制系统以及恒温装置组成。由于使用的色谱柱填料颗粒小而均匀，小颗粒具有高柱效，但会引起高阻力，需用高压输送流动相，所以称高压液相色谱。溶于流动相中的各组分经过固定相时，与固定相发生作用（吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和）的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出，在色谱图上出峰时间有先后，保留时间不同。本实验使用反相色谱法，采用C18柱，根据样品中各组分在固定相与流动相中分配系数的不同样品中各物质得到分离，在流出曲线上表现不同的峰及保留时间。
维生素C泡腾片作为一种保健品，具有崩解迅速、起效快、口服吸收良好、生物利用率高等优点，兼具固体制剂和液体制剂的特长且携带和使用方便。它可用于增强机体抵抗力, 预防和治疗各种急、慢性疾病、坏血病或其他疾病, 常用于病后恢复期、创伤愈合期及过敏性疾病的辅助治疗。
本次试验选择了力度伸维生素C泡腾片，希望通过高压液相色谱法来检测每片泡腾片维生素C的实际含量，以确定是否与厂家标示的Vc含量相符。
2 仪器与试药
高压液相色谱仪，紫外检测器，电子天平，研钵，烧杯，玻璃棒；0.02%草酸溶液（0.2g草酸粉末溶于1L去离子水,抽滤后超声脱气30min），维生素C标准对照品，甲醇（超声脱气30min），去离子水
3方法与结果
3.1色谱条件
色谱柱C18柱；流动相：0.02%的草酸溶液；流速：1ml/min；检测波长：254nm；柱温为室温；进样量：20ul。
3.2线性关系考察
精密称取维生素C标准品0.5mg，1.5mg，2.5mg，3.5mg，4.5mg分别加5ml流动相溶液即0.02%草酸溶液配制成浓度分别为100ug/ml，300ug/ml，500ug/mll，700ug/ml，900ug/ml的标准品溶液，用0.45um滤膜过滤。在上述色谱条件下准确进样20ul。以标准品溶液浓度对峰面积作图，其线性回归方程为y=32238x，R^2=0.9972，线性范围为0.1~0.9mg/ml。
图1 维生素C标准品色谱图
（棕色色谱峰：900ug/ml标准品溶液，深蓝色：700ug/ml，绿色：500ug/ml,
淡蓝色：300ug/ml,紫色：100ug/ml）
图2 维生素C的标准工作曲线
3.3精密度实验
精密吸取900ug/ml的标准品溶液20ul，连续进样3次，结果峰面积分别为29230578、29812116、29463544(见图3)，平均峰面积为29502079.33，RSD为0.9%。HPLC系统设备稳定性、精确性良好。
图3 精密度试验色谱图合成图
（红、黄、蓝色色谱峰分别为第一、第二、第三次进样结果）
3.4 稳定性实验
在标准品溶液（900ug/ml的标准品溶液）第一次进样后4小时再次进20ul。第一次进样测得900ug/ml的标准品溶液色谱峰面积为9155820，4小时后测得结果为8868664。结果显示，4个小时后维生素C样品溶液有3%
的损失。
图4 稳定性试验流出曲线对照图
（红色色谱峰由该标准品溶液第一次检测产生，蓝色色谱峰由同一样品
4小时候后再次进样产生）
3.5 重复性试验
取维生素C泡腾片样品两片，于干净研钵中研碎。精密称取4.6mg三份，
分别加5ml流动相溶液配置成供试品溶液1,2,3，使用0.46um滤膜过滤，
分别进样20ul。测得供试品溶液1,2,3的色谱峰面积分别为
6147210,6428546,6238013，RSD为0.22%（图5）。
图5 重复试验样品色谱图合成图
3.6 加样回收试验
称取样品4.6mg 与适量维生素C 标准品混合溶解成5ml ，使得配置好的溶液的维生素C 浓度分别比待测样品溶液的维生素C 浓度大100ug/ml 与大200ug/ml （分别编号a 、b ），均进样20ul 。测定回收率，结果如表一所示，得到本实验的平均回收率为102.4%。
表1 回收率试验数据表
3.7 样品含量测定
取维生素C 泡腾片样品两片，于干净研钵中研碎，精密称取4.6mg ，用0.02%的草酸溶液溶解，使用0.46um 滤膜过滤,进样20ul 。结果中色谱峰面积为6271256，结合2.2得到的线性回归方程计算得供试样品的Vc 浓度为194.53mg/ml 。
由于样品回收率为102.4%，所以一片维生素C 泡腾片（约为4.6g/片）含维生素C 0.95g 。
4 讨论
4.1
使用标准品溶液进行初始尝试的色谱条件流动相为0.02%草酸溶液：甲醇=95:5；流速1ml/min;检测波长：254nm;进样量：20ul 。得到的色谱图（图一）有三个部分交叠的峰，会对峰面积的积分产生影响，造成实验结果的不准确。出现杂峰的原因可能为使用的维生素C 标准品保存时间过长，已有部分Vc 氧化分解。当使用新鲜的Vc 标准品后，杂峰消失。也可能是第一次标准品称量等处理过程中带入了污染。
回收率结果
样品编号
样品（mg）标准品加入量（ug/ml）测得量（mg）回收率（%）平均回收率（%）a
4.6100298.1103.5b 4.6200397.2101.3102.4
图一
4.2
为了降低杂峰对目标峰峰面积积分的影响，实验中首先尝试更改流动相洗脱力,降低流速。通过降低甲醇的比例使各物质的保留时间发生不同程度的改变使杂峰与目标峰分离。色谱条件为甲醇：草酸=0.02：0.78, 流速为0.8ml/min，检测波长254nm。此时色谱图如图二所示，在目标峰后的一个杂峰消失。
图二
随后，将波长改为267nm,希望在此检测波长下，杂质的吸收减小、Vc的吸收加大从而使剩下的杂峰对目标峰峰面积积分的影响降低。从该条件下得到的色谱图表明（图二），在267nm波长下杂质与Vc的吸收均降低，尤其是Vc吸收降低剧烈。故此方案不可行。
图三
继续降低甲醇含量，即在甲醇：草酸=0：0.8,0.8ml/min，254nm,的色谱条件下得到图四。之前在色谱图中消失的第三个峰现在出现在了Vc的吸收峰之前（见图四）。
图四
产生上述现象的原因是流动相甲醇比例降低造成流动相洗脱力降低，各物质保留时间推迟，但产生第三个峰的物质对甲醇浓度的改变较不敏感，保留时间延长较其他两个物质少，于是相对的，出峰时间前移。图一中第三个峰在图二中消失可能就是在图二的条件下，第三个峰前移并入较大的第二个峰，使其不在色谱图中被区分。
4.3
从精密度试验、重复性试验结果看，本实验的误差受机器和操作影响较小。稳定性显示，四小时内标准品溶液中的Vc有3%的损失。维生素 C 分子中的烯二醇基具有极强的还原性，其水溶液在空气中极不稳定，易被氧化为二酮基而成为去氢抗坏血酸。本实验使用0.02%的草酸溶液保护Vc不被氧化。由于样品配置到测定进样的时间远小于4小时，故Vc损失对结果的影响不大。回收率实验得到的回收率大于100%可能是计算过程中线性回归曲线的使用带来了偏差，不影响实验结果的可信性。
4.4
本实验同样可以用碘量法、2, 4-二硝基苯肼法、荧光光度法等完成。碘量法测定时可能会在判断终点时产生人为的误差，使滴定结果误差较大。后两种方法试样前处理比较复杂。
虽然高压液相色谱法由于各种样品基体不同、干扰因素不同而使检测条件相对不够完善，但由于其具有高压、高速、高效的特点，必然会得到广泛应用。
参考文献
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创新性实验 ---苹果中维C含量的测定
前言： 苹果，又名柰、频婆、天然子，苹果为蔷薇科苹果属植物的果实。苹果酸甜可口，营养丰富，是老幼皆宜的水果之一。它的营养价值和医疗价值都很高。每100g鲜苹果肉中含糖类15g，蛋白质0.2g，脂肪0.1g，粗纤维0.1g，钾110mg，钙0.11mg，磷11mg，铁0.3mg，胡萝卜素0.08mg，维生素B1为0.01mg，维生素B2为0.01mg，尼克酸0.1mg，还含有锌及山梨醇、香橙素、维生素C等营养物质。中医认为苹果有生津、润肺；除烦解暑、开胃醒酒、止泻的功效。现代医学认为对高血压的防治有一定的作用。欧洲人说：“一天吃一个苹果，医生远离你”。加拿大人研究表明，在试管中苹果汁有强大的杀灭传染性病毒的作用，吃较多苹果的人远比不吃或少吃的人得感冒的机会要低。所以，有的科学家和医师把苹果称为“全方位的健康水果”或“全科医生”。 维生素是是我们经常听到的一个词语，我们每天都要通过食物摄入各种各样的维生素，维生素同我们的健康是密切相关的，维生素C 是心血管的保护神、心脏病患者的健康元素。维生素C（又称抗坏血酸）普遍存在于水果和蔬菜中，也是一种对人类而言至关重要的物质：人体缺乏维生素C 将导致坏血病，维生素C还能防止传染性疾病，甚至癌症。所以，食品饮料医药、医疗等行业都要测定食品、饮料、药品以及血液中的维生素C的含量。
苹果中含有Vc，不过含量比较低，每100克苹果中Vc的平均含量为4毫克。 维生素C含量的测定方法很多。一般方法有碘量法，2，6-二氯靛酚滴定法;2，4-二硝基苯肼比色法;荧光分光光度法;电化学法和高效液相色谱法。 维生素C广泛存在于植物组织中,新鲜的水果、蔬菜中含量较多。若采用2，6-二氯靛酚滴定法由于果汁具有一定的色泽,滴定终点不易辨认。二甲苯-二氯靛酚比色法虽然适用于测定深色样品还原型抗坏血酸,但由于萃取液二甲苯为有机溶剂,有很强的毒性,既不利于操作人员的健康,也不利于环境保护,故不推荐此测试方法。 而碘滴定法仅需常规滴定设备,条件易于满足。因此,在满足测定范围和测定精度要求的前提下,应尽可能选择不需要昂贵仪器设备条件、简单易行的方法。pH控制在3-5比较适合。 本次实验用的是直接碘量法测定维生素C。 在本次实验中，通过查找资料、设计实验、操作实施，等过程，预期达到如下目的： 1、掌握直接碘量法测定维生素C的原理和方法。 2、掌握维生素C的提取方法。 3、实践各种溶液的配制及其标定操作。 4、通过计算，了解同类但不同品种水果在微量物质的含量上 是否存在显著差异。
维生素C 药片中Vc 含量的测定（碘量法） 一、实验目的 1、 掌握直接碘量法测定Vc 的原理及其操作。 2、 掌握碘标准溶液的配制及标定。 3、 掌握维生素C 的测定方法。 二、实验原理 （一）碘量法 碘量法是以I 2的氧化性和I －的还原性为基础的滴定分析方法。在一定条件下，用碘离子来还原，定量的析出碘单质，然后用Na 2S 2O 3 标准溶液来滴定析出的I 2。这种方法叫做间接碘量法。本实验采用间接碘量法测碘的浓度。以淀粉为指示剂，Na 2S 2O 3 标准溶液来滴定析出的I 2，以蓝色消失为终点，即可算出碘的浓度。 维生素C 又称抗坏血酸Vc ，分子式C 6H 8O 6。Vc 具有还原性，可被I 2定量氧化， 因而可用I 2标准溶液直接测定。其滴定反应式： （二）碘溶液的配制与标定 I 2微溶于水而易溶于KI 溶液，但在稀的KI 溶液中溶解得很慢，所以配制I 2溶液时不能过早加水稀释，应先将I 2和KI 混合，用少量水充分研磨，溶解完全后再加水稀释。 I 2 溶液的标定可以用As 2O 3或Na 2S 2O 3标定，因为As 2O 3是剧毒物质，我们用Na 2S 2O 3来标定。 O HO O C H OH CH 2 OH +I 2 O O O O C H OH CH 2OH +2HI
（三）硫代硫酸钠溶液的配制与标定 Na2S2O3一般含有少量杂质，在PH=9-10间稳定，所以在Na2S2O3溶液中加入少量的Na2CO3，Na2S2O3见光易分解可用棕色瓶储于暗处，经一周后，用K2C2O7做基准物间接碘量法标定Na2S2O3溶液的浓度。根据K2C2O7标准溶液的物质的量浓度和滴定消耗的体积，就可计算出溶液中Na2S2O3的浓度。 其过程为：K2C2O7与KI先反应析出I2：析出的I2再用标准的Na2S2O3溶液滴定：从而求得Na2S2O3的浓度。这个标定Na2S2O3的方法为间接碘量法。 碘量法的基本反应式：2S2O32－＋I2=S4O62－＋2I－ 标定Na2S2O3溶液时有： 6I－＋Cr2O72－＋14H＋=2Cr3＋＋3I2＋7H2O 2S2O32－＋I2=S4O62－＋2I－ Na2S2O3标定时有:n(K2C2O7): n(Na2S2O3)=1:6 三、实验药品及仪器 实验药品和试剂： I2分析纯KI溶液100g·L-1Na2S2O3·5H2O溶液0.0170 mol.L-1K2C2O7溶液 淀粉指示剂5 g·L-1 Na2CO3固体HCl溶液6 mol.L-1冰醋酸维生素C药片主要仪器： 分析天平、天平、量筒、烧杯、酸式碱式滴定管、表面皿、容量瓶（250mL）、锥形瓶（250mL）、碘量瓶（250mL）、移液管（25mL）、洗瓶等常规分析仪器 四、实验步骤 （一）、Na2S2O3溶液的配制及标定 1、配制0.10mol/L Na2S2O3溶液500mL 称取13gNa2S2O3·5H2O，溶于500mL
诚信声明 本人郑重声明： 所呈交的毕业项目报告/论文《果汁饮料中维生素C含量的测定》是本人在指导老师的指导下，独立研究、写作的成果。论文中所引用是他人的无论以何种方式发布的文字、研究成果，均在论文中以明确方式标明。 本声明的法律结果由本人独自承担。 作者签名： 年月日
摘要：果汁饮料的主要原料就是水果，其中的主要营养成分是维生素C。维生素C又称为抗坏血酸，属于水溶性维生素，在水溶液中易被空气和其他氧化剂氧化，但在弱酸性条件下较稳定，所以本次用碘量法测定果汁中的维生素C的含量。本次方法简单，可靠，准确度较高，在实验室得到广泛应用。 关键词：果汁饮料；维生素C；碘量法
目录 1 绪论 (1) 1.1 果汁饮料的概念 (1) 1.2 果汁饮料的发展 (1) 1.3 对果汁饮料中维生素C测定意义 (1) 2. 实验部分 (3) 2.1实验原理 (3) 2.2实验仪器与试剂 (3) 2.3 实验步骤 (4) 2.4数据处理 (5) 3.结果与分析 (7) 3.1数据变动原因 (7) 3.2不同方法对比实验 (7) 3.3酸碱性对维生素C测定的影响....................................................................... 3.4含量影响因素................................................................................................... 4.结论........................................................................................................ 参考文献.. (11) 致谢 (12)
方法一、 2.6－二氯酚靛酚滴定法 二、原理 Vc又称抗坏血酸，还原型抗坏血酸能还原染料 2.6－二氯酚靛酚钠盐，本身则氧化成脱氢抗坏血酸。在酸性溶液中， 2.6－二氯酚靛酚钠离子呈红色，被还原后变为无色。 三、实验器材 锥形瓶、 微量滴定管、 研钵、 容量瓶、 吸量管等。 四、实验试剂 2% 草酸溶液：取2g草酸溶于100ml蒸馏水中。 1% 草酸溶液：取1g草酸溶于100ml蒸馏水中。 标准抗坏血酸溶液（ 0.1mg/ml ）：精确称取10mg抗坏血酸，以1%草酸溶解并定容到100ml。储存到棕色玻璃瓶中，最好临用前配制。 0.001N 2.6－二氯酚靛酚钠溶液：将50mg2.6－二氯酚靛酚钠溶解于约 的热蒸馏水中，冷却后定容到250ml，储存在棕200ml含有52mg NaHCO 3 色瓶中，保存在低温下。2.6－二氯酚靛酚钠不稳定，必须在一周内用完。 用前必须标定到1ml2.6－二氯酚靛酚钠相当于0.088mg抗坏血酸。 五、操作 1、植物样品Vc提取液的制备： 用电子天平准确地称取辣椒 0.5 g ，样品必须预先用温水洗去泥土，并在空气中风干，加25ml 2%草酸溶液匀浆，并将匀浆液转入50ml离心管中；用少量2%草酸溶液冲洗匀浆杯，一起转入离心管中进行离心（ 5min,4500rp ），将上清液移入 50ml 容量瓶，用少量2%草酸冲洗沉淀并离心保留上清，如此反复抽提 3 次，最后用 2% 草酸定容到50ml。 2、测定：
每次量取 5ml提取液放入小锥形瓶内进行滴定。用微量滴定管以 2.6－二氯酚靛酚钠溶液滴定到提取液呈现淡粉红色，并在 15～30 秒内不褪色，滴定过程必须迅速，不要超过 2 分钟。 另取 5ml 2%草酸作空白对照进行滴定。 平行进行 2-3 次，计算样品中Vc含量。 M=[(V A -V B ) × C × 0.088 × 100]/ （ D × W ） M ： 100g 样品中含抗坏血酸的质量 mg V A ：滴定样品管时所用去染料体积数 ml VB ：滴定空白管时所用去染料体积数ml C ：提取液总体积ml D ：滴定时所取的样品的提取液毫升数 W ：被检样品的重量 0.088 ： 0.001N2.6－二氯酚靛酚钠溶液 1ml 相当于 0.088mgVc 方法二、紫外快速测定法 （张波老师说用这个方法做实验） 一、原理： Vc的2.6—二氯酚靛酚容量法，操作步骤较繁琐，而且受其它还原性物质、样品色素颜色和测定时间的影响。紫外快速测定法，是根据Vc具有对紫外产生吸收和对碱不稳定的特性，于243nm处测定样品液与碱处理样品液两者消光值之差，通过查标准曲线，即可计算样品中Vc的含量。 二、实验器材： 紫外分光光度计、 离心机、 分析天平、 容量瓶（10ml, 25ml）、 移液管（0.5ml，1.0ml）、 吸管、 研钵。
研究性学习成果 关于果汁中VC的含量 浙江澄潭中学高一（x）班 指导教师： xxx 组长： xxx 小组成员： xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx 课题研究的时间：2008年12月到2009年4月
关于果汁中Vc含量的研究 新昌澄潭中学xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx 摘要：随着人们生活水平的提高。人们对营养摄取的要求也越来越高。水果中富含Vc。但也有一些同学影响着水果中Vc的含量。比如，一些水果为了防虫害日晒。在生长过程中常用纸袋包裹起来，结果造成维生素C含量减少；夏季水果丰收，储藏于冷库，冬天出售时，水果的维生素C含量也会减少；现代家庭一般都有冰箱，许多人喜欢买大量水果放入。但水果存放的时间越长，维生素C损失就越多。 关键词：Vc含量果汁 一：研究背景 随着人们的生活水平提高，有些同学养成了天天吃水果的习惯，但同学们对于哪些水果营养丰富，Vc含量较多还不是很清楚。因此我们想测出各种水果及果汁饮料中Vc含量，知道较好的水果品种和果汁饮料品牌。 二：研究过程 从2008年12月起，到2009年4为止，历时5个月，我们利用研究性学习时间和其他课余时间对果汁中Vc含量进行了初步研究。除采用文献研究法和访谈法以外，我们还进行了实验法。 实验1： 实验目的：测量果汁中Vc的含量。 实验器材：碘滴定液（0.05mol/L），淀粉指试液。 实验原理：将样品加冷水与稀醋酸使溶解，加淀粉指示液，立即用碘滴定液（0.05mol/L）滴定，至溶液显蓝色并在30秒内不褪色，读出碘滴定液使用量，计算Vc的含量。 实验步骤：取样品20g精密称量，加冷水100ml与稀醋酸10ml使其溶解，加淀粉指试液1ml，立即用碘滴定液（0.05mol/L）滴定，至溶液显蓝色并在30秒内不褪色，并将滴定结果用空白试验校正，记录消耗的碘滴定液的体积数（ml），每1ml碘滴定液（0.05mol/L） 相当于8.806mg的C 6H 8 O 6 。 实验记录：
水果中维生素C含量的测定 佛山三中高中部陈荣智招树满何衍健 指导老师丘晓琳 0 引言 维生素C的功效早已被人们广泛接受，从营养补充剂、维生素C糖果、到涂在脸上的含有维生素C的保养品，全都标榜着能让你更白皙、更健康。德国营养研究会建议，每人每天应摄取50~100mg的维生素C，才能刚好让血中的维生素C浓度达到饱和，如果摄取超过此范围，身体也无法多吸收，等于浪费。而30mg的维生素C是人体1天摄取维生素C的最少值，如果低于30mg，身体就会缺乏维生素C，使部份机能无法正常运作，长期下来，甚至出现坏血 症。当下，人们讲究“食疗”，倡导“天然”，认为从天然产物摄取维生素C 更安全、更能适应人体的需要。故，我们必须思考“吃什么，怎样吃”的问题。基于这点，本课题对普遍认为含维生素C较多的水果中的维生素C的含量以及对处理过的水果（如加热）中维生素C含量进行了测定，以求得从天然产物中摄取维生素C的较佳方案。 1 维生素C简介 1.1.1维生素C的结构及性质 维生素C （Vitamin C ，Ascorbic Acid，分子式： C6H8O6 ；分子量：176.12u；分子结构如左图）又叫抗坏血 酸，是一种水溶性维生素，水溶液呈酸性，在溶液中会氧化 分解。 1.1.2维生素C主要生理功能 1、促进骨胶原的生物合成。利于组织创伤口的更快愈合； 2、促进氨基酸中酪氨酸和色氨酸的代谢，延长肌体寿命。 3、改善铁、钙和叶酸的利用。 4、改善脂肪和类脂特别是胆固醇的代谢，预防心血管病。 5、促进牙齿和骨骼的生长，防止牙床出血。； 6、增强肌体对外界环境的抗应激能力和免疫力。 1.1.3维生素C的药物作用 近代研究表明VC对人体健康至关重要： 1．坏血病。血管壁的强度和VC有很大关系。微血管是所有血管中最细小的，管壁可能只有一个细胞的厚度，其强度、弹性是由负责连接细胞具有胶泥作用的胶原蛋白所决定。当体内VC不足，微血管容易破裂，血液流到邻近组
西红柿Vc含量的测定（直接碘量法的应用） 姓名：魏嘉 学号：33100620 吉林大学化学学院高分子材料与工程
前言 西红柿简介： （Solanum lycopersicum）是茄科茄属番茄亚属的多年生草本植物，又叫西红柿、洋柿子。番茄原产于中美洲和南美洲，中国各地均普遍栽培，夏秋季出产较多。现作为食用蔬果在全世界范围内广泛种植，通常认为是一种营养丰富的食品。 每100克番茄的营养成分 能量11千卡，维生素B60.06毫克，蛋白质0.9克，脂肪0.2克，碳水化合物3.3克 叶酸5.6微克，膳食纤维1.9克，维生素A63微克，胡萝卜素375微克，硫胺素0.02毫克
核黄素0.01毫克，烟酸0.49毫克，维生素C14毫克，维生素E0.42毫克，钙4毫克磷24毫克 钾179毫克，钠9.7毫克，碘2.5微克，镁12毫克，铁0.2毫克，锌0. 12毫克，铜0.04毫克 锰0.06 毫克 【食疗作用】 1．促进消化西红柿中的柠檬酸、苹果酸和糖类，有促进消化作用，番茄素对多种细菌有抑制作用，同时也具有帮助消化的功能。 2．保护皮肤弹性，促进骨骼发育西红柿中含有胡萝卜素，可保护皮肤弹性，促进骨骼钙化，还可以防治小儿佝偻病，夜盲症和眼干燥症。 3．防治心血管疾病胆固醇产生的生物盐可与西红柿纤维相联结，通过消化系统排出体外，并由于人体需要生物盐分解肠内脂肪，而人体需要用胆固醇补充生物盐，使血中胆固醇含量减少，起到防治动脉粥样硬化作用；西红柿的维生素B还可保护血管，防治高血压。 4．抗癌，防衰老西红柿内含有谷胱甘肽的一种物质，这种物质在体内含量上升时，癌症发病率则明显下降。此外，这种物质可抑制酪氨酸酶的活性，使人沉着的色素减退消失，雀斑减少，起到美容作用。 5．抗疲劳，护肝西红柿中所含的维生素B1有利于大脑发育，缓解脑细胞疲劳；所含的氯化汞，对肝脏疾病有辅助治疗作用。 【植物学分类】
果汁中Vc含量的测定 引言：随着科学技术的发展，食品中维生素C的测定方法很多，如高效液相色谱法、荧光分光光度法、原子吸收光谱法、紫外分光光度法、滴定分析法、钼蓝比色法、碘量法等，其中高效液相色谱法、荧光分光光度法和原子吸收光谱法要求样品的纯度较高，还需要有昂贵的仪器；紫外分光光度法中2，4-二硝基苯肼比色法操作麻烦，耗时较长；2，6-二氯靛酚法操作简便且应用最普遍，但是药品价格昂贵，而且多数果汁样品溶液都有颜色，使滴定终点不易判定，使用脱色剂也很难脱色完全，且造成VC的损失。相比之下，碘量法只需标定碘液，其后续操作方便简单，易操作，故本次试验采用碘量法测定果汁中维生素C的含量。 关键字：维生素C 碘量法碘溶液可溶性淀粉滴定 一、实验部分 (一)、实验原理 维生素C属水溶性维生素，分子式C6H8O6。分子中的烯二醇基具有还原性，能被I2定量地氧化成二酮基，因而可用I2标准溶液直接测定。 C6H8O6＋I2= C6H6O6＋2HI 使用淀粉作为指示剂，用直接碘量法可测定药片、注射液、饮料、汁菜、水果中维生素C的含量。 由于Vc的还原性很强，较容易被溶液和空气中的氧氧化，在碱性介质中这种氧化作用更强，因此滴定宜在酸性介质中进行，以减少副反应的发生。考虑到 I -在强酸性中也易被氧化，故一般选在pH为3~4的弱酸性溶液中进行滴定。 (二)、实验仪器及药品 材料：果汁。 仪器：烧杯多个、量筒、玻璃棒、滴管、容量瓶多个（250mL）、酸式滴定管、滤纸、锥形瓶等。 药品：0.02mol /L碘溶液、2% 可溶性淀粉溶液、2% HC l溶液。 (三)、试验步骤 1、购买市场上现成的果汁； 2、滴定果汁中vc的含量； （1）、移取50ml果汁注入250 ml锥形瓶中，三份，分别向三个锥形瓶中加人3m l淀粉溶液，再滴加10ml醋酸，将PH 值调至3左右； （2）、用0.02mol /L碘溶液滴定果汁，在滴定过程中，边滴边晃动锥形瓶，直到提取液呈现蓝色，且在30 秒不褪色；
0引言 近年来已报道的测定维生素C（Vc ）的含量的方法众多，遗憾的是一般的方法灵敏度低、仪器复杂、操作烦琐。据本小组人员查资料得知现在普遍采用光度法、荧光法、色谱法、电化学分析法等实验方法，实验结果比较准确。但考虑到本分析化学之课程要求，又鉴于本实验条件以及本小组实验人员的技术水平，仍然采用直接碘量法这一经典的测定方法。结合实际，本实验对不同厂家生产的维生素C药片中抗坏血酸的含量进行了测定并进行了比较。 1实验部分 1.1实验原理 维生素C为一酸性己糖衍生物，是烯醇式己糖内酯，有L，D型异构体，易溶于水或酒精，具有很强的还原性，在空气中极易被氧化，尤其在碱性介质中更甚。而在酸性条件下较为稳定。因此在测定时加HAc溶液使溶液呈弱酸性，减少维生素C的副反应。由于维生素C分子中的烯二醇基具有较强的还原性，能被I 2 定量地氧化成二酮基。 1.2实验仪器与试剂 1.2.1仪器 分析天平；250ml锥形瓶；量筒10ml、100ml；酸式滴定管；烧杯250ml；玻璃棒。 1.2.2试剂 医药维生素C片（厂家：上海医药有限公司信谊制药总厂、南京白敬宇制药 厂、湖北华中药业有限公司）；HAc溶液（2mol/L）；淀粉（0.5%）；Na 2S 2 O 3 标 准溶液（0.1038mol/L）；I 2 标准溶液。 1.3实验操作步骤 1.3.1I 2 标准溶液浓度的标定 I 2具有挥发性，因而易引起I 2 的损失，故直接碘量法要求每次测定维生素C 含量之前，首先要标定I 2 溶液的浓度。具体操作办法如下： 用25ml移液管吸取Na 2S 2 O 3 标准溶液25.00ml三份，分别置于250ml锥形瓶 中，加蒸馏水50.00ml，0.5%淀粉溶液2.0ml，用I 2 溶液滴定至呈现稳定的蓝色， 半分钟不褪色即为终点。计算I 2 溶液的浓度。 1.3.2样品称取 在分析天平上称取两组维生素C药片，每组取不同厂家的产品各三份，每份 0.2—0.3g。 1.3.3滴定维生素C中的抗坏血酸 在250ml锥形瓶中，加入新煮沸过的冷蒸馏水100ml，再加入2mol/LHAc1ml，0.5%淀粉溶液2ml，然后将称好的一份维生素C药片放入溶解，待完全溶解后， 立即用I 2 标准溶液滴定，至呈现稳定的蓝色即为终点。其余各份按此法进行测定，每个厂家测定两次，每次由不同的人平行测定三份。 2实验结果 2.1实验数据的处理结果 2.1.1I 2 标准溶液浓度的标定结果
饮料中维生素C的测定实验设计方案【实验原理】 1.维生素C又称抗坏血酸Vc，分子式C 6H 8 O 6 。Vc具有还原性，可被I 2 定量氧化，因 而可用I 2 标准溶液直接测定。其滴定反应式如下： C 6H 8 O 6 ＋I 2 = C 6 H 6 O 6 ＋2HI 用淀粉溶液作指示剂，若溶液突变成蓝色，则滴定终点到达。 2.I 2 标准溶液的标定（间接碘量法） 碘标准溶液可选用As 2O 3 直接标定，由于As 2 O 3 是有毒性物质，本实验选用Na 2 S 2 O 3 标定碘。而Na 2S 2 O 3 不是基准物质，不能直接配制标准溶液，需用K 2 Cr 2 O 7 来标定。故 I 2标准溶液的标定方法为：先用K 2 Cr 2 O 7 标定Na 2 S 2 O 3 的浓度，再用Na 2 S 2 O 3 标定I 2 标准 溶液的浓度。 ①用K 2Cr 2 O 7 做基准物质，间接碘量法标定Na 2 S 2 O 3 溶液的浓度。其过程为：K 2 Cr 2 O 7 与KI先反应析出I 2，析出的I 2 再用标准的Na 2 S 2 O 3 溶液滴定，从而求得Na 2 S 2 O 3 的浓 度。这个标定Na 2S 2 O 3 的方法为间接碘量法。 标定Na 2S 2 O 3 溶液时有：6I－＋Cr 2 O 7 2－＋14H＋ = 2Cr3＋＋3I 2 ＋7H 2 O； 2S 2 O 3 2－＋I 2 = S 4 O 6 2－＋2I－ 根据以上反应方程式可知Na 2S 2 O 3 标定时的计量系数比为： K 2C 2 O 7 :Na 2 S 2 O 3 = 1:6。 ②用标准的Na 2S 2 O 3 溶液标定I 2 标准溶液的浓度，用淀粉溶液作指示剂，若溶液 突变成蓝色，则滴定终点到达。 碘量法的基本反应式：2S 2O 3 2－＋I 2 = S 4 O 6 2－＋2I－ 根据以上原理可知各物质的定量关系比为： Vc ：I 2：Na 2 S 2 O 3 ：K 2 C 2 O 7 = 1 ：1 ：2 ：1/3 【实验内容】 测定不同饮料（统一鲜橙多，汇源橙汁）中维生素C的含量。 【实验用品】 1.实验试剂 （1）市售“统一鲜橙多”“汇源橙汁”饮料 溶液的配制依据：根据“统一鲜橙多”饮料包装上标明的维生素C的含量： 25mg/100ml，换算成摩尔浓度约为1.42×10-3mol/L（汇源橙汁含量与其近似）。由于其浓度太小，配制溶液所需药品的质量太小，称量时不准确，故将其扩大10倍，因此配制I 2 标准溶液的浓度大概为1.42×10-2mol/L，标定好后，再稀释10倍，测 定维生素C的含量。根据各物质的定量关系比：Vc：I 2：Na 2 S 2 O 3 ：K 2 C 2 O 7 = 1：1：2： 1/3，计算出所需溶液的浓度，再根据各物质的相对摩尔质量，计算出配制一定体积 的该浓度的溶液所需的称量质量。由于K 2C 2 O 7 是基准物质，需准确称量，其他药品 用托盘天平粗称即可。 (2)K 2Cr 2 O 7 标准溶液（约为1/3的2.83×10-2 mol/L）：用电子分析天平准确称 取0.34—0.35克的K 2Cr 2 O 7 基准物质，置于烧杯中加入适量蒸馏水，待其全部溶解 后转移至250mL容量瓶中，定容，摇匀，备用。 (3)I 2溶液（约为2.83×10-2 mol/L，控制滴定体积在25ml内）：称取1.8g I 2 ， 置于研钵中加少量水，充分研磨。待I 2 全部溶解后，将溶液转入棕色试剂瓶，加水稀释至250mL，摇匀，放置暗处保存。
橙汁饮料中Vc含量的测定 2010级环境科学1班 古娟（201008011138）黄俊杰（201008041141）实验原理： 1.维生素C又称抗坏血酸，分子式为C 6H 8 O 6 ，Vc呈酸性，具有较强的还原 性，加热或在溶液中易氧化分解，在碱性条件下更易被氧化。在弱酸性条件下，能与碘单质发生氧化还原反应，反应式为: C 6H 8 O 6 +I 2 =C 6 H 6 O 6 +2HI 可利用此性质滴定，以淀粉（遇碘变蓝）为指示剂。 2.Na 2S 2 O 3 见光易分解可用棕色瓶储于暗处，经8-14天后用K 2 Cr 2 O 7 做基准物 间接碘量法标定Na 2S 2 O 3 溶液的浓度，即称取一定量的K 2 Cr 2 O 7 ，在弱酸性溶液中 与过量的KI作用析出一定量的I 2用K 2 Cr 2 O 7 滴定。 Cr2O72-+6I-+14H+==2Cr3++3I2+7H2O 此时应考虑K2Cr2O7基准物的反应条件： 1）合适的酸度。溶液酸度高反应快，酸度太大，I-易被空气，且Na 2S 2 O 3 易 分解，故酸度一般在0.2?0.4 mol?L-1为宜。 2）K 2Cr 2 O 7 与KI的反应速率慢，所以应在带塞的锥形瓶中暗处放置一段时 间，使两者反应完全。 3）所用 KI溶液不得含有I 2或K 2 Cr 2 O 7 。 4) 滴定前需将溶液稀释。 若滴定到终点后，溶液迅速变蓝表示Cr 2O 7 2-离子反应不完全，可能是放置的 时间不够或溶液稀释过早。 3. I 2可以用已标定好的Na 2 S 2 O 3 进行标定，考虑到I 2 在强酸性中也易被氧 化，故一般选在PH为3-4的弱酸性溶液中进行滴定。 Na 2S 2 O 3 在弱酸性及KI存在条件下定量滴定I 2 ： I2+2S2O32-==2I-+S4O62- 实验试剂： 硫代硫酸钠（s） KI（s） HCl溶液（6 mol?L-1） HAc溶液 （2 mol?L-1） K 2Cr 2 O 7 标准溶液淀粉指示剂（5g/L） I 2 标准溶液 （0.005mol?L-1）橙子饮料样品（Vc含量约为25mg/100ml）。实验步骤： 一、溶液的配制 1、硫代硫酸钠（0.01 mol?L-1）： 称取1.3g Na 2S 2 O 3 ?5H 2 O溶于500ml新煮沸的蒸馏水中，加入0.1g，保存于 棕色试剂瓶中，放置一周后进行标定 2、K 2Cr 2 O 7 标准溶液： 称取重铬酸钾固体0.5-0.6g，加水溶解后移入250 ml容量瓶中，用水稀释至刻度线处，摇匀。 3、KI（20%水溶液） 称2.5g KI固体溶于50 ml蒸馏水中。
紫外分光光度法测定维生素C片中的V C含量 一、实验目的 1、了解紫外分光光度计的主要结构及工作原理。 2、掌握紫外分光光度计的操作方法及紫外定性定量分析方法 3．掌握紫外分光光度法测定水中维生素C含量的原理与分析条件的选择。 二、实验原理 维生素C是人体重要的维生素之一，它影响胶元蛋白的形成，参与人体多种氧化-还原反应,并且有解毒作用。人体不能自身制造Vc，所以人体必须不断地从食物中摄入Vc，通常还需储藏能维持一个月左右的Vc。缺乏时会产生坏血病，故又称抗坏血酸。 维生素C属水溶性维生素，分子式C6H8O6。分子结构中具有二烯醇结构，其结构如下： 它易溶于水，微溶于乙醇，不溶于氯仿或乙醚。分子中的二烯醇基具极强的还原性，性质活泼，易被氧化为二酮基而成为脱氢抗坏血酸。维生素C分子结构中有共轭双键，固在紫外光区有较强的吸收。 根据维生素C在稀盐酸溶液中，Vc吸收曲线比较稳定，在最大吸收波长处，其吸收值A的大小与维生素C的浓度c的大小成正比，符合郎伯—比尔定律： A=εbc 其中A为吸收度；c为试样中维生素C的浓度，mol·L-1；b为吸收池厚度，cm；ε为摩尔吸收系数，L·mol-1·cm-1。若在最大吸收波长下，首先绘制出维生素C在最大吸收波长下的标准曲线，然后在相同条件下测定出吸光度A，由测得的吸光度A在标准曲线上查得浓度,换算为药品中含量(mg/片)。。 三、实验仪器与试剂 1．仪器TU1810型紫外分光光度计。电子天平1台，研钵1个，50mL容量瓶7只和500mL容量瓶1只,10mL移液管2支，100mL、1000mL烧杯2只。 2．试剂维生素C标准品(抗坏血酸)，市售维生素C含片（100mg/片），冰醋酸，蒸馏水。 四、实验步骤 1.配制维生素C标准贮备液500mL(浓度约为1.5×10-4m ol/L): 称取约0.0132g维生素C标准品于100mL的烧杯中，用超声波助溶后定容于500mL容量瓶中，摇匀，配成贮备液。 2.配制标准系列： 分别吸取上述贮备液1.00、2.00、4.00、8.00、16.00mL于50mL容量瓶中，用蒸馏水定容。 3.确定最大吸收
第八章设计性实验 实验设计，就是要求学生设计实验方案，选择实验器材，安排实验步骤，进行数据处理及分析实验现象。它包括设计实验方案，设计实验步骤、设计实验改进方法等。实验设计，主要考察学生是否理解实验原理，是否具有灵活运用实验知识的能力，是否具有在不同情境下迁移知识的能力。 学生通过完成设计性实验，可以了解科学研究的思路、方法和步骤，使之具有严肃的科学态度、严密的科学思想和严谨的工作作风，培养学生的创新意识和创新精神，提高学生分析问题和解决问题的能力，提高学生综合素质，能有效地推动学生科研立项活动的开展，为将来从事科学研究打下良好的基础。 一、实验设计的目的 学生应在已掌握生物化学基础知识、基本理论和基本实验技能的基础上，在教师指导下，利用本实验室已有的设备条件和材料试剂等技术基础，自己从网络上获取相关资料，设计出综合性的、探索性的实验，在学生讨论、实验教师点评的基础上，学生修改实验设计方案，并在学生设计方案中选出最适合开展的方案若干个，将学生进行编组完成实验。因此实验中学生参与完成选题、设计实验、实验准备、实施实验和实验论文撰写等全过程。这种“理论-实践-理论-综合实践”的过程能使学生深刻理解生物化学实验技术与原理，能熟练运用已经学习的多种技术，学会充分利用本实验室已有的实验设备和条件，将自己的想法付诸于实践。 学生自主设计实验将技术性、综合性、探索创新性的实验融合在一起，通过学生的独立实验设计和实践，培养了学生的创新思维和独立分析问题、解决问题的能力。 二、实验设计的四个原则 1. 对照性原则 在实验设计中，通常设置对照组，通过干预或控制研究对象以消除或减少实验误差，鉴别实验中的处理因素同非处理因素的差异。 实验设计中可采用的对照方法很多，除了有阳性对照、标准对照、自身对照、相互对照之外，通常采用空白对照的原则，即不给对照组以任何处理因素，值得强调的是，不给对照组任何处理因素是相对实验组而言的，实际上对对照组还是要做一定的处理，只是不加实验组的处理因素。 2. 随机性原则 实验设计中的随机化原则，是指被研究的样本是从总体中任意抽取的，这样做的意义在于：一是可以消除或减少系统误差，使显著性测验有意义；二是平衡各种条件，避免实验结果中的偏差。 3. 平行重复原则 平行重复原则，即控制某种因素的变化幅度，在同样条件下重复实验，观察其对实验结果影响的程度。任何实验都必须能够重复，这是具有科学性的标志。上述随机性原则虽然要求随机抽取样本，这能够在相当大的程度上抵消非处理因素所造成的偏差，但不能消除它的全部影响。平行重复的原则就是为解决这个问题而提出的。 4. 单因子变量原则 单因子变量原则，即控制其他因素不变，只改变其中某一变量，观察其对实验结果的影响。除了整个过程中欲处理的实验因素外，其他实验条件要求做到前后一致。 三、实验设计的基本方法 1. 了解题目要求 选题首先要明确题意，只有明确题意才能方向明确，少走弯路。看清题意是要求设计实验方案、步骤还是分析实验结果。 2. 明确实验目的原理 明确实验到底要解决什么问题，要用到生物化学的什么原理。 3. 确定实验思路 根据原理对实验做出假设，并对可能产生的现象做出预期估计，并充分利用实验材料设计实验思路。 4. 设计实验步骤
Vc片中Vc含量的测定 Vc是人体重要的维生素之一，缺乏时会产生坏血病，故Vc又叫抗坏血酸,是一种水溶性维生素. Vc纯品为无色结晶，熔点在190~192℃，易溶于水。结晶抗坏血酸(C6H8O6)在空气中稳定，但它在水溶液中易被空气和其他氧化剂（酸性KMnO4、浓H2SO4 、I2、KIO3等）反应，生成脱氢抗坏血酸（C6H6O6）,由于Vc的还原性很强，即使在弱酸性条件下，上述反应也进行的相当完全。 表1 各年龄段每日摄入Vc参考量 测定Vc的方法和原理 测定方法: 氧化还原滴定法 测定原理: Vc具有较强的还原性,可以与一些氧化剂反应.如酸性高锰酸钾、浓硝酸、浓硫酸、碘单质、碘酸钾等。当Vc溶液中滴加碘酸钾溶液同时用淀粉作指示剂，当Vc 被碘酸钾氧化完时，则溶液变蓝，因此可以判断滴定终点。 3C6H8O6 + I O 3-3H20 + C6H6O6 + I- 5 I-+ I O 3- + 6H+3I2 + 3H20 这样，我们可以选用Vc与碘酸钾的氧化还原滴定，用淀粉作指示剂测出Vc片中Vc的含量。测定过程： 1、仪器和药品：酸式滴定管、滴定夹、锥形瓶、铁架台、量筒 V c溶液（1片V c药片溶于500mL水）、0.0010mol/LKI03溶液、 1mol/LH2SO4、淀粉。 2、测定过程： ①用量筒量取25.00ml试样于锥形瓶中，加入2滴管1mol/LH2SO4溶液、3滴淀粉。 ②在酸式滴定管内加入0.0010mol/LKI03溶液，调到“0”刻度。 ③一边控制酸式滴定管阀门，使KI03溶液逐滴滴入锥形瓶内，一边摇晃锥形瓶，直至锥 形瓶内试液变蓝且半分钟不褪色。 ④记录此时消耗0.0010mol/LKI03溶液的体积V1。 ⑤重复①~ ④，测得数据V2,并记录。 数据处理：
紫外分光光度法测定维生素 一、实验目的 1、了解紫外分光光度计的主要结构及工作原理。C片中的V C含量2、掌握紫外分光光度计的操作方法及紫外定性定量分析方法 3．掌握紫外分光光度法测定水中维生素C含量的原理与分析条件的选择。 二、实验原理 维生素C是人体重要的维生素之一，它影响胶元蛋白的形成，参与人体多种氧化-还原反应,并且有解毒作用。人体不能自身制造Vc，所以人体必须不断地从食物中摄入Vc，通常还需储藏能维持一个月左右的Vc。缺乏时会产生坏血病，故又称抗坏血酸。 维生素C属水溶性维生素，分子式C 6H 8O 6。分子结构中具有二烯醇结构，其结构如下：它易溶于水，微溶于乙醇，不溶于氯仿或乙醚。分子中的二烯醇基具极强的还原性，性质活泼，易被氧化为二酮基而成为脱氢抗坏血酸。维生素C分子结构中有共轭双键，固在紫外光区有较强的吸收。 根据维生素C在稀盐酸溶液中，Vc吸收曲线比较稳定，在最大吸收波长处，其吸收值A的大小与维生素C的浓度c的大小成正比，符合郎伯—比尔定律： A=εbc 其中A为吸收度；c为试样中维生素C的浓度，mol·L-1；b为吸收池厚度，cm；ε为摩尔吸收系数，L·mol-1·cm-1。若在最大吸收波长下，首先绘制出维生素C在最大吸收波长下的标准曲线，然后在相同条件下测定出吸光度A，由测得的吸光度A在标准曲线上查得浓度,换算为药品中含量(mg/片)。。
三、实验仪器与试剂 1．仪器TU1810型紫外分光光度计。电子天平1台，研钵1个，50mL容量瓶7只和500mL容量瓶1只,10mL移液管2支，100mL、1000mL烧杯2只。 2．试剂维生素C标准品(抗坏血酸)，市售维生素C含片（100mg/片），冰醋酸，蒸馏水。 四、实验步骤 1.配制维生素C标准贮备液500mL(浓度约为1.5×10-4mol/L): 称取约0.0132g维生素C标准品于100mL的烧杯中，用超声波助溶后定容于500mL容量瓶中，摇匀，配成贮备液。 2.配制标准系列： 分别吸取上述贮备液1.00、2.00、4.00、8.00、16.00mL于50mL容量瓶中，用蒸馏水定容。4.绘制标准曲线 以蒸馏水为参比，用上述标准系列溶液在 max处分别测出吸光度，并绘制标准曲线。 5．样品测定 取3片Vc片剂研细,准确称取0.02g于100mL烧杯中,以去离子水稀释至500mL。移取样品溶液 5.00mL于50mL容量瓶中,定容。在 max处测吸光度。 五、实验结果和讨论 1.绘制吸收曲线，确定最大吸收波长。 2.以标准溶液浓度为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线图。
饮料中维生素C的测定实验设计方案 【实验目标】 1.知识与技能目标 （1）掌握维生素C的分子式和结构简式，了解维生素C的还原性及其含量的测定方法。 （2）能将所学的“中和滴定”原理和操作技能应用于物质含量的测定，熟悉利用滴定技能测定物质含量的基本方法。 2.能力目标 （1）学生通过设计方案和实验，探究维生素C的还原性，设计维生素C含量测定的实验方案。培养学生的滴定实验操作能力。 （2）加深对科学探究一般过程的认识，进一步提高提出问题、作出假设、制定并实施探究计划、处理数据和分析探究结果的能力。 （3）通过研究维生素C的方案设计原理，培养学生获取和处理信息的能力。 3.情感态度与价值观目标 （1）让学生体验化学探究活动的乐趣，培养学生勤于思考、团结合作、勇于实践的科学精神。 （2）使学生对合理饮食与摄取营养物质的关系有初步认识。【实验原理】
1.维生素C又称抗坏血酸Vc，分子式C6H8O6。Vc具有还原性，可被I2定量氧化，因而可用I2标准溶液直接测定。其滴定反应式如下： C6H8O6＋I2 = C6H6O6＋2HI 用淀粉溶液作指示剂，若溶液突变成蓝色，则滴定终点到达。 2.I2标准溶液的标定（间接碘量法） 碘标准溶液可选用As2O3直接标定，由于As2O3是有毒性物质，本实验选用Na2S2O3标定碘。而Na2S2O3不是基准物质，不能直接配制标准溶液，需用 K2C2O7来标定。故I2标准溶液的标定方法为：先用K2C2O7标定Na2S2O3的浓度，再用Na2S2O3标定I2标准溶液的浓度。 ①用K2C2O7做基准物质，间接碘量法标定Na2S2O3溶液的浓度。其过程为：K2C2O7与KI先反应析出I2，析出的I2再用标准的Na2S2O3溶液滴定，从而求得Na2S2O3的浓度。这个标定Na2S2O3的方法为间接碘量法。 标定Na2S2O3溶液时有：6I － ＋Cr2O7 2－ ＋14H ＋ = 2Cr 3＋ ＋3I2＋7H2O； 2S2O32－＋I2= S4O62－＋2I－ 根据以上反应方程式可知Na2S2O3标定时的计量系数比为： K2C2O7:Na2S2O3 = 1:6。 ②用标准的Na2S2O3溶液标定I2标准溶液的浓度，用淀粉溶液作指示剂，若溶液突变成蓝色，则滴定终点到达。 碘量法的基本反应式：2S2O32－＋I2= S4O62－＋2I－ 根据以上原理可知各物质的定量关系比为： Vc ：I2：Na2S2O3：K2C2O7=1 ：1 ：2 ：1/3
水果中VC含量的测定 一实验仪器与试剂 紫外-可见分光光度计,电子天平，高速离心机， 抗坏血酸标准液（Vc标准液）1mg/ml（现用现配） 棕色容量瓶 提取剂1%HCL 二原理： 根据Vc对紫外线产生吸收和在碱性环境中不稳定容易被氧化的特性，于波长243nm处测样品溶液与碱处理样品（参照）的吸光度之差，通过查校准曲线，计算样品中Vc的含量。 三步骤 1波长的选择 分别对不同浓度的Vc与试剂空白溶液在200——400nm范围内扫描，测其最大吸收峰处的波长λ。 2.校准曲线的绘制 准确称取抗坏血酸（维生素C）10mg，用提取剂1%的HCL溶解，并定容到100ml，此时浓度为100μg/ml。分别吸取0.00 0.10 0.20 0.40 0.60 0.80 1.00 1.20ml标准液，用1%的HCL稀释10倍，浓度分别为0.00 1.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00μg/ml。以1%HCL为参照，在波长λ处，测其吸光度A，以各浓度Vc液与空白参照吸光度之差△A对抗坏血酸浓度C绘制校准曲线。 3.样品测定 样液制备：将水果样品洗净去皮，称取果肉100g，加入100ml提取剂，迅速搞成匀浆，称取10g浆状物，用提取剂将样品移入并定容到00ml容量瓶中，摇匀。若透明则可直接取样测定，若浑浊，可通过离心来消除。 样液的测定：准确移取澄清透明的0.5ml提取液于试管中，加9.5ml 1%HCL，以HCL 为对照，在波长λ处测定其吸光度。 待测碱处理样液的测定：取0.5ml透明提取液，加6滴0.5mol/l的NAOH溶液（约0.3ml），室温下放置40min后，加9.2mlHCL后摇匀，以6滴NAOH跟1%HCL的混合液为对照，测其λ波长下的吸光度。 4.结果计算 由待测样品与待测碱处理样的吸光度之差查校准曲线，即可计算出样品中Vc的含量，也可直接以待测碱处理液位对照，测得待测也的吸光值，查校准曲线，计算Vc含量。 Vc的含量：mg/100g=（200*C）/（m*V） 其中：m-——样品重量g; 200——稀释倍数；C——从校准曲线上查的的Vc含量μg/ml V——测试时吸取提取液体积ml 三结果与讨论 1.溶剂对吸光度的影响， 单独测1%HCL在波长λ出的吸光度，可通过扣除其作为对照的吸光值。 2.待测碱处理样的静置时间 每隔5分钟，取少量测其吸光度。 3.吸光度检测范围 对打吸光度值最好不要超过0.8,浓度过高容易造成校准曲线的弯曲 4.方法的精密度
果汁中维生素C含量的测定 杜格林 （华南师范大学化学与环境学院2010级化学一班20102401029） 【一、实验目的】 1、掌握分析化学设计实验思路； 2、熟悉掌握滴定操作； 3、掌握果汁中维生素C含量测定的方法。 【二、实验原理】 1、维生素C 维生素C是人体重要的维生素之一，缺乏时会产生坏血病，故维生素C又称抗坏血酸，属水溶性维生素。维生素C纯品为白色无臭结晶,熔点在190—192℃,易溶于水,微溶于丙酮,在乙醇中溶解度更低,不溶于油剂。结晶抗坏血酸在空气中稳定,但它在水溶液中易被空气和其他氧化剂氧化,生成脱氢抗坏血酸;在碱性条件下易分解,见光加速分解;在弱酸条件中较稳定。 2、滴定原理 维生素C(C6H8O6, E=0.18),分子结构中的烯二醇基具有还原性，能被I2定量地氧化成二酮基,抗坏血酸分子中的二烯醇基被I2完全氧化后,则I2与淀粉指示剂作用而使溶液变蓝,所以当滴定到溶液出现蓝色时即为终点。 由于维生素C的还原性很强，即使在弱酸性条件下，上述反应也进行得相当完全。维生素C在空气中极易被氧化，尤其在碱性介质中更甚，故该滴定反应在稀HAc中进行，以减少维生素C的副反应。 使用淀粉作为指示剂，用直接碘量法可测定药片、注射液、蔬菜、水果中维生素C的含量。 I2标准溶液采用间接配制法获得，用Na2S2O3标准溶液标定，反应如下： 2S2O32-+I2=S4O62-+2I-
【三、仪器和试剂】 1、器材： 天平（0.1mg），碱式滴定管(50 mL)、酸式滴定管（50mL），碘量瓶（250mL），移液管（20mL）锥形瓶（250ml）、量筒、棕色瓶（250mL）。 2、试剂： 果汁、K2Cr2O7（基准试剂），Na2S2O3（0.02mol·L-1），I2（0.01 mol·L-1），KI（20%）、HCl,（6mol·L-1），HAc（2mol·L-1），淀粉指示剂（0.5%），Na2CO3固体。 【四、实验步骤】 1、0.02mol·L-1Na2S2O3标准溶液的配制 称取5g Na2S2O3·5H2O，溶于1000mL新煮沸并冷却的蒸馏水中，加入0.2gNa2CO3使溶液呈碱性，以防止Na2S2O3的分解，保存于棕色瓶中，待用。 2、K2Cr2O7标准溶液的配制 准确称取基准试剂K2Cr2O7 0.26—0.28g于小烧杯中,加入少量蒸馏水溶解后,移入200ml容量瓶中,用蒸馏水稀释至刻度,摇匀。 3、0.02 mo l·L-1Na2S2O3标准溶液的标定 用移液管吸取上述标准溶液20. 00ml 于250ml 碘瓶中，加8ml 6 mol·L HCl,5－8ml 20%KI溶液,盖上表面皿,在暗处放5分钟后,加100ml水,立即以用待标定的Na2S2O3溶液滴定至淡黄色,再加入2ml 0.5%淀粉溶液, 继续滴至溶液呈亮绿色为终点.平行滴定3次。 4、I2标准溶液的配制与标定 （1）I2标准溶液的配制 称取1.3gI2和2.0gKI置于小烧杯中，加少量水，搅拌至I2全部溶解，转入250mL棕色瓶中，加水至250mL，混合均匀。 （2）0.05mol·L-1I2标准溶液的标定 准确移取20.00mLNa2S2O3溶液标准于250mL锥形瓶中，加50mL蒸馏水、0.5％淀粉指示剂5mL，用I2滴定至稳定的蓝色，30S不褪色即为终点，平行标定三次。