专题二 微生物的培养与应用 知识点
微生物的实验室培养
1
养基质，是进行微生物培养的物质基础。
2.
（应用于微生物的分离和鉴定）
（常用于观察微生物的运动及菌种保藏等）
例明确，
用于微生物的分离鉴定）（用化学成分不明的天然物质配制而成，用于实际工业生产）
抑制不需要微生物生长，促进所需微生物的生长）
（根据微生物的特点，加入某种指示剂或化学药品，来鉴别不同类别的微生物）。
3.CO 2、NaHCO 3等无机碳源和糖类、石油、花生粉饼等有机碳源。异养微生物只能
N 2、NH 3、NO 3-、
NH 4+
用N 2。
4.培养基还需满足
维生素；培养霉菌需将pH 调至酸性；培养细菌需将pH
调至中性或微碱性；培养厌氧型微生物需提供无氧的条件。
5.无菌操作技术包括：
进行清洁和消
毒。
③为避免周围环境中微生物的污染，
④实验操作时应
6.消毒与灭菌的区别是：
7.
所用器械是干热灭菌箱；
蒸汽灭菌法，所用器械是高压蒸汽灭菌锅；
灭菌法，所用器械是紫外灯 。 8.制作牛肉膏蛋白胨固体培养基
（
1）方法步骤：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。
（2）倒平板操作的步骤包括：
（灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基）
的缝隙，再将锥形瓶中的培养基（约
）倒入培养皿，立即盖上培养皿
在上（目的：
。
9.倒平板时若不慎将培养基溅在皿盖与皿底上，则这个平板不能用来培养微生
10.
从而能在培养基表面形成单个的菌落（生态学上称
，以达纯化菌种的目的。
11.平板划线操作时第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环的原因是：前者避
使菌种逐渐变少以便得到单个菌落。在划线操作结束时，
仍然需要灼烧接种环的原因是及时杀死接种环上残留的菌种，
在灼烧接种环之后，
12.液，滴加到培养基表面。
8～10s
。④用
13.4
℃下保存。
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
1.不能直接被植物吸收。
2.实验室中微生物筛选的原理是：
（包括营养、温度、PH 等）
3.在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，例如，
自养微生物；
可以选择培养能固氮的微生物；
4.
5.原理是：
培养基表面生长的一个菌落，
统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择
6.
时，平板上看到的只是一个菌落，因此，统计结果一般用菌落数而不是活菌数来
表示。
7.提高实验
其作用是比照试验组，排除任何其他可能原因的干扰，
引起相应的结果。
8.
时间安排等的综合考虑和安排。
9.土壤取样：铲去表层土，在距地表约
pH≈
7的土壤中取样。
104、105、106
103、104、105
；
102、103 、104）的样品液进行培养，以保证获得菌落数在
之间、适于计数的平板。
11.不同种类的微生物，往往需要不同的培养温度和培养时间。
细菌30-37℃ 1-2
天；放线菌25-28℃5-7天；霉菌25-28℃3-4天。
12.
每隔24小时统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样
一般来说，在一定的培养条件
下（相同的培养基、唯独及培养时间）
状、大小、隆起程度和颜色基本一致）
13. 每克样品中的菌落数（C
：某一稀释度下平板上生长的平均
菌落数；V：涂布平板时所用的稀释液的体积（ml
）；M：代表稀释倍数）
14.
PH
分解纤维素的微生物的分离
1.
是地球上含量最丰富的
也富含纤维素。
2.
纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即
3.
培
根据是否产生透明圈就可以来筛
4.刚果红（染料）
应。
5.实验流程：土壤取样→选择培养（此步是否需要，应根据样品中目的菌株数量的多少来确定）
6.为确定得到的是纤维素分解菌，
纤维素酶的测定方法，定。
7.
8.将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对聚集，实际上是人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境。一般应将纸埋于深约10cm 左右腐殖土壤中。
9.
刚果红染色法种类：
另一前者的缺点是操作繁琐，
加入刚果红溶液会使菌
用。方法二的优点是操作简便，
不存在菌落混杂问题，缺点是由于纤维素和琼脂、
但因为培养基中纤维素占主要地位，
方法二的另一缺点是：
它们在长时间培养过程中会降解刚果红形成明显的透明圈，与纤维素分解菌不易区分。
10.
繁殖，
因此可以起到的作用。