合成工艺的优化 有机合成工艺优化是物理化学与有机化学相结合的产物，是用化学动力学的方法解决有机合成的实际问题，是将化学动力学的基本概念转化为有机合成的实用技术。 转化率是消耗的原料的摩尔数除于原料的初始摩尔数。 选择性为生成目标产物所消耗的原料摩尔数除于消耗的原料的摩尔数。 收率为反应生成目标产物所消耗的原料的摩尔数除于原料的初始摩尔数。 转化率×选择性= 收率 反应中消耗的原料一部分生成了目标产物，一部分生成了杂质，少量原料依然存在于反应体系中。 反应的目标是提高收率，但是影响收率的因素较多，使问题复杂化。 化学动力学的研究目标是提高选择性，即尽量使消耗的原料转化为主产物。 只有温度和浓度是影响选择性的主要因素。在一定转化率下，主副产物之和是一个常数，副产物减少必然带来主产物增加。 提高转化率可以采取延长反应时间，升高温度，增加反应物的浓度，从反应体系中移出产物等措施。
而选择性虽只是温度和浓度的函数，看似简单，却远比转化率关系复杂。因此将研究复杂的收率问题转化为研究选择性和转化率的问题，可简化研究过程。 2．选择性研究的主要影响因素 提高主反应的选择性就是抑制副反应，副反应不外平行副反应和连串副反应两种类型。平行副反应是指副反应与主反应同时进行，一般消耗一种或几种相同的原料，而连串副反应是指主产物继续与某一组分进行反应。主副反应的竞争是主副反应速度的竞争，反应速度取决于反应的活化能和各反应组分的反应级数，两个因素与温度和各组分的浓度有关。因此选择性取决于温度效应和浓度效应。可是，活化能与反应级数的绝对值很难确定。但是我们没有必要知道它们的绝对值，只需知道主副反应之间活化能的相对大小与主副反应对某一组分的反应级数的相对大小就行了。我们知道，升高温度有利于活化能高的反应，降低温度有利于活化能低的反应，因此选择反应温度条件的理论依据是主副反应活化能的相对大小，而不是绝对大小。 （1）温度范围的选择：在两个反应温度下做同一合成实验时，可以根据监测主副产物的相对含量来判断主副反应活化能的相对大小，由此判断是低温还是高温有利于主反应，从而缩小了温度选择的范围。实际经验中，一般采取极限温度的方式，低温和高温，再加上二者的中间温度，可判断出反应温度对反应选择性的影响趋势。 （2）某一组分浓度的选择：在同一温度下（第一步已经选择好的温度下），将某一组分滴加（此组分为低浓度，其他组分就是高浓
重要的抗氧化酶和抗氧化剂的作用 超氧化物歧化酶（SOD）是美国的McCord和Fridovich在1969年发现的一种清除超氧阴离子自由基的酶。SOD是一种广泛存在于生物体内的金属酶，按金属辅基的成分不同主要分成三类,第一类含铜和锌，称为CuZn-SOD，是最常见的一种，呈蓝绿色，主要存在于真核细胞的细胞浆内。第二类含锰，称为Mn-SOD，呈粉红色，主要存在于原核细胞体、真核细胞的细胞浆和线粒体内。第三类含铁，称为Fe-SOD，呈黄褐色，主要存在于原核细胞中。另外，在牛肝中还发现一种CoZn-SOD[8]。 正常生理状态下，机体产生的自由基和清除自由基的速率处于动态平衡状态。但当机体内自由基产生增多，就会对机体的蛋白质、脂质和DNA造成损伤，导致机体疾病的发生。SOD是生物体内对抗氧自由基的一种最重要的抗氧化酶，是专门清除超氧阴离子自由基的。它的作用是将氧自由基歧化，发生 2O 2-+2H+SOD H 2 O 2 + O 2 的反应。由于H 2 O 2 在SOD活性部位生成，会对SOD 本身产生杀伤。催化产生的H 2O 2 如果不被及时清除，它会与O 2 -反应生成毒性 更大的羟基自由基。衰老自由基学说认为，代谢产生的自由基对机体造成的损害可引起衰老，SOD可有效的清除自由基，在一定程度上延缓衰老。此外，SOD还具有增强机体免疫力，提高机体对自由基引发的疾病的抵抗力，消除运动性疲劳等生理功能[3]。 过氧化氢酶（CAT）是一种末端氧化酶，广泛存在于动植物和微生物体内，酶分子结构中含有铁卟啉环，1个分子酶蛋白中含有四个铁原子[9]。CAT的生 物学功能是催化过氧化氢分解为水和氧，2 H 2O 2 CAT 2H 2 O + O 2 。过氧化氢 酶（CAT），广泛存在于动植物和微生物体内的一种末端氧化酶。它的生物功能是 催化细胞内的过氧化氢分解，起抗氧化作用，即2H 2O 2 2H 2 O+O 2 ，它可防 止过氧化氢含量过高对机体组织造成损伤，对细胞起到保护作用。 本研究结果显示，力竭运动后，大鼠的心组织、肝组织和肺组织中CAT活性均表现出升高，这可能是由于运动应激造成大鼠组织过氧化物质增多，使得组织CAT活性对应升高。同时，结果显示，联合补充谷氨酰胺和番茄红素对力竭运动大鼠肝组织和肺组织的抗氧化能力提高的效果最为明显，而单纯补充番茄红素对心脏组织的抗氧化能力提高优明显作用。这说明对于力竭运动大鼠的肝和肺组织，联合补充这两种物质起到协同抗氧化的作用。对于心脏组织，联合补充的效果不如单独补充一种的效果好，此机理尚待探讨。 谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX），为水溶性四聚体蛋白，含有四个亚基，每个亚基含有一个硒原子[10]。主要存在生物体的线粒体和细胞液中，它的生理功能是不仅可以清除过氧化氢，同时还可以清除脂质过氧化物，所以说它也是机体内重要的抗氧化酶之一，在反应过程中还原性谷胱甘肽作为还原物
滤纸条降解试验 吸取纤维素降解菌种子液1ml接种到装有50ml赫奇逊培养液的250ml三角瓶中，瓶中放置1c m×6cm的新华Ⅰ号滤纸条，同时设置不加菌液的滤纸条作为对照，每个处理3个重复。置于30℃恒温摇床，200r/min振荡培养5d，观察各瓶中滤纸条溃烂情况。 赫奇逊培养液：KH2PO4 1.0g MgSO4·7H2O 0.3g CaCl2 0.1g NaCl 0.1g FeCl3 0.01g NaNO3 2.5g pH7.2～7.3 蒸馏水1000ml 纤维素酶活的测定 1CMC酶活测定 取培养好的发酵液于4000r/min的条件下离心15分钟，上清液即为粗酶液。分别加入相对应菌株的粗酶液1mL，加入柠檬酸缓冲液1ml，再加入0.8%的羧甲基纤维素钠溶液 1.5mL，震荡摇匀，将所有试管置于50℃的水浴锅中保温50min，保温完成后取出试管，加入2mL DNS显色剂，震荡摇匀，将各试管置于沸水浴中水浴加热5min，使DNS显色剂与还原糖充分反应，5min后取出试管用流水冷却，再用蒸馏水定容至20mL，将各试管摇匀后以葡萄糖标准曲线1号管作为对照，依次测定各菌株在紫外分光光度计540nm处的OD值，计算出平均值后，参照葡萄糖标准曲线查出还原糖的量。 2FPA酶活测定 取培养好的发酵液于4000r/min的条件下离心15分钟，上清液即为粗酶液。分别加入相对应菌株的粗酶液1mL，加入柠檬酸缓冲液1ml，再加入滤纸(1cm ×6cm) 一条，震荡摇匀，将所有试管置于50℃的水浴锅中保温50min，保温完成后取出试管，加入2mL DNS显色剂，震荡摇匀，将各试管置于沸水浴中水浴加热5min，使DNS显色剂与还原糖充分反应，5min后取出试管用流水冷却，再用蒸馏水定容至20mL，将各试管摇匀后以葡萄糖标准曲线1号管作为对照，依次测定各菌株在紫外分光光度计540nm处的OD值，计算出平均值后，参照葡萄糖标准曲线查出还原糖的量。 3Avicel cellulase (Avicelase) 500 uL of enzyme mixed with 1mL of Avicel (1%, w/v) for determining the Avicelase activity. 详细见给你的那篇文献 通过以上两种方法，测得复筛得到的酶活高的菌株每8 h的粗酶酶活产酶曲线，测到72h。确定酶活达到最大的最适时间。 产酶条件优化
期末考核 课程：Glycobiology 植物糖基转移酶研究进展 ：*** 学号：*** 班级：*** 时间：****
植物糖基转移酶研究进展 摘要:糖基转移酶一类是能够催化糖基从激活的供体转移到特定的受体分子上的一类酶，在生物体中普遍存在并形成了超基因家族。糖基转移酶广泛参与植物生命活动的各种生物学过程。本文综述了近年来的研究报道，综述了糖基转移酶的分类、分离鉴定方法及在生物学功能方面的研究进展，期望为相关研究工作提供参考。 关键词:植物糖基转移酶，分类，分离鉴定，生物学功能 糖基转移酶（Glycosyltransferases，GT，EC 2.4.x.y）是一类催化糖基转移的酶，通过产生糖苷键将供体糖分子或相关基团转移至特异的受体上。糖基转移酶几乎存在于所有的生物体中，其所催化的糖基化反应是最重要的生物学反应之一，直接参与二糖、单糖苷、聚糖苷等的生物合成。糖基供体分子包括双糖、多糖、1-磷酸糖、尿苷二磷酸葡萄糖醛酸，植物中最常见的供体为UDP-Glc。受体可以是糖类、脂类、蛋白质、抗生素和核酸。糖基转移酶催化供体-受体形成α、β两种糖苷键，产物为多糖、糖蛋白、糖脂以及糖苷化合物等。全基因组测序发现真核生物中约1%的基因编码糖基转酶。 1糖基转移酶的分类 目前，对糖基转移酶的分类主要根据Campbell等提出的GT Family 分类系统（数据收录在CAZy数据库中）。糖基转移酶作为高度分歧的多源基因家族，根据蛋白氨基酸序列的一致性、催化特性以及保守序列对其进行分类。因此，一特定的糖基转移酶既可以通过生物化学的方法鉴定其底物，也可以通过生物信息学方法研究其与已知酶基因或酶蛋白氨基酸序列的同源性对其进行分类。目前，依据这种分类方法，糖基转移酶被分为94个家族。根据其的折叠方式可将绝大多数酶分为两个超家族，GT-A超家族和GT-B超家族（图1）。根据催化反应机制、产物的立体化学异构性，在这两个超家族中糖基转移酶又分为反向型和保留型两大类（图2）。 GT-A型折叠的空间结构有两个紧密相连的β/α/β类Rossmann折叠区域。GT-A家族成员需要一个D-X-D基序用来结合二价金金属离子（多为Mn2+），这有助于UDP-糖供体的PPi在酶活性位点上的固定，对于催化反应是不可或缺的。GT-A难以识别UDP-糖供体以外的供体，所以受体的多样性较低。GT-B型折叠的空间含有两个正对的β/α/β类Rossmann折叠区域，连接方式灵活。GT-B成员无需二价金属离子维持活性，这是GT-B与GT-A家族成员的一个显著区别。此外，通过结构分析和PSI-BLAST发现了由跨膜GT组成GT-C超家族，其折叠方式全为反向型，活性位点位于长环部，一般含有8-13个跨膜螺旋。
有机合成工艺优化 1．合成工艺的优化主要就是反应选择性研究有机合成工艺优化是物理化学与有机化学相结合的产物，是用化学动力学的方法解决有机合成的实际问题，是将化学动力学的基本概念转化为有 机合成的实用技术。 首先分清三个基本概念转化率、选择性、收率。转化率是消耗的原料的摩尔数除于原料的初始摩尔数。选择性为生成目标产物所消耗的原料摩尔数除于消耗的原料的摩尔数。收率为反应生成目标产物所消耗的原料的摩尔数除于原料的初始摩尔数。可见，收率为转化率与选择性的乘积。可以这样理解这三个概念，反应中消耗的原料一部分生成了目标产物，一部分生成了杂质，为有效好的原料依然存在于反应体系中。生成目标产物的那部分原料与消耗的原料之比为选择性，与初始原料之比为收率，消耗的原料与初始原料之比为转化率。 反应的目标是提高收率，但是影响收率的因素较多，使问题复杂化。化学动力学的研究目标是提高选择性，即尽量使消耗的原料转化为主产物。只有温度和浓度是影响选择性的主要因素。在一定转化率下，主副产物之和是一个常数，副产物减少必然带来主产物增加。提高转化率可以采取延长反应时间，升高温度，增加反应物的浓度，从反应体系中移出产物等措施。而选择性虽只是温度和浓度的函数，看似简单，却远比转化率关系复杂。因此将研究复杂的收率问题转化为研究选择性和转化率的问题，可简化研究过程。 2．选择性研究的主要影响因素提高主反应的选择性就是抑制副反应，副反应不外平行副反应和连串副反应两种类型。 平行副反应是指副反应与主反应同时进行，一般消耗一种或几种相同的原料，而连串副反应是指主产物继续与某一组分进行反应。主副反应的竞争是主副反应速度的竞争，反应速度取决于反应的活化能和各反应组分的反应级数，两个因素与温度和各组分的浓度有关。因此选择性取决于温度效应和浓度效应。可是，活化能与反应级数的绝对值很难确定。但是我们没有必要知道它们的绝对值，只需知道主副反应之间活化能的相对大小与主副反应对某一组分的反应级数的相对大小就行了。我们知道，升高温度有利于活化能高的反应，降低温度有利于活化能低的反应，因此选择反应温度条件的理论依据是主副反应活化能的相对大小，而不是绝对大小。 （1）温度范围的选择：在两个反应温度下做同一合成实验时，可以根据监测主副产物的相对含量来判断主副反应活化能的相对大小，由此判断是低温还是高温有利于主反应，从而缩小了温 度选择的范围。实际经验中，一般采取极限温度的方式，低温和高温，再加上二者的中间温度， 可判断出反应温度对反应选择性的影响趋势。 （2）某一组分浓度的选择：在同一温度下（第一步已经选择好的温度下），将某一组分滴加（此组分为低浓度，其他组分就是高浓度）或一次性加入（此组分为高浓度，其他组分就是低 浓度）进行反应，就可根据监测主副产物的相对含量来判断该组分是低浓度还是高浓度有利于主 反应。确定了某一组分的浓度影响，接下来就是研究该组分的最佳配比问题。相同的条件下，再 确定其他组分浓度的影响。 （3）溶剂的影响： （4）酸碱强度的影响： （5）催化剂的影响： 3．定性反应产物 动力学研究方法要求副反应最小，而其他方法要求主反应最大。因此研究反应的选择性， 搞清副反应的产物结构是必要地前提。在条件允许的情况下，应尽量分析反应混合物的全部组 分，包括主产物，各种副产物，分析他们在气相色谱、液相色谱或薄层色谱上的相对位置和相对 大小。从而可以看出各组分的相对大小及各组分随温度和浓度条件不同的变化。对不同的副反应 采取不同的抑制方法。 （1）首先搞清反应过程中那些副产物生成；（2）重点找出含量较多的副产物的结构，因 为只有抑制了主要副反应，才能显著提高主反应的选择性；（3）根据主要副产物的结构，研究
沙虫 收藏172110方格星虫编辑沙虫一般指方格星虫方格星虫（Sipunculus nudus），又称为光裸星虫，俗称“沙虫”。它的形状很像一根肠子，呈长筒形，体长约10～20厘米，且浑身光裸无毛，体壁纵肌成束，每环肌交错排列，形成方块格子状花纹，方格星虫虽然没有海参、鱼翅、鲍鱼的名贵，但味道鲜美脆嫩，为海参、鱼翅所不及。生长在沿海滩涂，因为对生长环境的质量十分敏感，一旦污染则不能成活，因而有“环境标志生物”之称。中文学名方格星虫拉丁学名Sipunculus nudusLinne别称沙虫、沙肠子、沙肠虫、光裸星虫、海滩香肠等界动物界门星虫动物门纲星虫纲目方格星虫目科星虫科属方格星虫属分布区域中国福建、广东、广西、海南和台湾沿海目录1沙虫简介2主要分布3生存环境4繁殖情况5养殖方法海滩条件苗种放养与养成管理成虫收获6市场状况7营养价值8烹饪方法方格星虫干方格星虫粥方格星虫干牛鳅鱼汤方格星虫煲汤陵水酸粉1沙虫简介编辑【性味】味甘、咸，性平。【食疗功效[1] 】解烦渴、降血压[2] ，滋阴降火、清肺补虚。有阴虚劳损、肾虚腰痛、骨蒸潮热、阴虚盗汗、肺虚咳喘、胸闷痰多，小孩儿尿床（夜尿频繁）以及妇女产后乳汁稀少等症状，均可用沙虫食疗。现代营养学还证实了沙虫有降低血脂，破坏癌细
胞生长的作用。由于沙虫的酶解物具有抗氧化[3] ，抗菌[4] ，抗辐射[5] ，抗病毒[6] ，抗疲劳[7] ，防癌[8] ，调节免疫[9] ，延缓衰老[10] 的功效，因此，现代对沙虫的药用研究方向主要在溶栓药物[11] ，抗凝血药物以及抗衰老药物上。【习性】沙虫生活在沿海滩涂一带沙泥底质的海域，涨潮时钻出，退潮时潜伏在沙泥洞中，故名沙虫。沙虫的幼虫或成虫均没有分节现象，肌肉较发达，平时以蚕食沙粒等为生，但身体结构简单，故洗去肠内沙粒，全条虫都可食用。【简介】沙虫肉质脆嫩，味道鲜美，胜过海参、鱼翅。因为海参和鱼翅本身没有什么味道，故烹饪时一定要加鸡肉或瘦肉等其他配料，否则就索然无味。而沙虫具有鲜美味道，不必加别的配料，有“天然味精”的美誉。除味道鲜美外，沙虫营养价值和食疗价值较之海参、鱼翅有过之而无不及，被誉为“海洋虫草”，一些地方将其代替“冬虫夏草”用于食疗。它富含蛋白质，多肽成分，17种氨基酸，其中人体必需的氨基酸含量很高，除此之外还含有钙、磷、铁、锌、锰、镁等12种微量元素以及虫草素等具有抗氧化，抗菌，抗辐射，抗病毒，抗疲劳，防癌，调节免疫，延缓衰老作用的营养成分[12] 。沙虫做法有很多，爆炒，煮汤，熬粥，椒盐，油炸均可。其中“三色沙虫”已经成为海南的知名菜肴。方格星虫(6张)沙虫属海鲜类，而不属中药类，和海参一样，虽然有极高的食疗价值，具有药食两用，但其不具体用于某些病症的
有机合成工艺优化方法学---心得 1．合成工艺的优化主要就是反应选择性研究 有机合成工艺优化是物理化学与有机化学相结合的产物，是用化学动力学的方法解决有机合成的实际问题，是将化学动力学的基本概念转化为有机合成的实用技术。 首先分清三个基本概念转化率、选择性、收率。转化率是消耗的原料的摩尔数除于原料的初始摩尔数。选择性为生成目标产物所消耗的原料摩尔数除于消耗的原料的摩尔数。收率为反应生成目标产物所消耗的原料的摩尔数除于原料的初始摩尔数。可见，收率为转化率与选择性的乘积。可以这样理解这三个概念，反应中消耗的原料一部分生成了目标产物，一部分生成了杂质，为有效好的原料依然存在于反应体系中。生成目标产物的那部分原料与消耗的原料之比为选择性，与初始原料之比为收率，消耗的原料与初始原料之比为转化率。 反应的目标是提高收率，但是影响收率的因素较多，使问题复杂化。化学动力学的研究目标是提高选择性，即尽量使消耗的原料转化为主产物。只有温度和浓度是影响选择性的主要因素。在一定转化率下，主副产物之和是一个常数，副产物减少必然带来主产物增加。提高转化率可以采取延长反应时间，升高温度，增加反应物的浓度，从反应体系中移出产物等措施。而选择性虽只是温度和浓度的函数，看似简单，却远比转化率关系复杂。因此将研究复杂的收率问题转化为研究选择性和转化率的问题，可简化研究过程。 2．选择性研究的主要影响因素 提高主反应的选择性就是抑制副反应，副反应不外平行副反应和连串副反应两种类型。平行副反应是指副反应与主反应同时进行，一般消耗一种或几种相同的原料，而连串副反应是指主产物继续与某一组分进行反应。主副反应的竞争是主副反应速度的竞争，反应速度取决于反应的活化能和各反应组分的反应级数，两个因素与温度和各组分的浓度有关。因此选择性取决于温度效应和浓度效应。可是，活化能与反应级数的绝对值很难确定。但是我们没有必要知道它们的绝对值，只需知道主副反应之间活化能的相对大小与主副反应对某一组分的反应级数的相对大小就行了。我们知道，升高温度有利于活化能高的反应，降低温度有利于活化能低的反应，因此选择反应温度条件的理论依据是主副反应活化能的相对大小，而不是绝对大小。 （1）温度范围的选择：在两个反应温度下做同一合成实验时，可以根据监测主副产物的相对含量来判断主副反应活化能的相对大小，由此判断是低温还是高温有利于主反应，从而缩小了温度选择的范围。实际经验中，一般采取极限温度的方式，低温和高温，再加上二者的中间温度，可判断出反应温度对反应选择性的影响趋势。 （2）某一组分浓度的选择：在同一温度下（第一步已经选择好的温度下），将某一组分滴加（此组分为低浓度，其他组分就是高浓度）或一次性加入（此组分为高浓度，其他组分就是低浓度）进行反应，就可根据监测主副产物的相对含量来判断该组分是低浓度还是高浓度有利于主反应。确定了某一组分的浓度影响，接下来就是研究该组分的最佳配比问题。相同的条件下，再确定其他组分浓度的影响。 （3）溶剂的影响： （4）酸碱强度的影响： （5）催化剂的影响： 3．定性反应产物 动力学研究方法要求副反应最小，而其他方法要求主反应最大。因此研究反应的选择性，搞清副反应的产物结构是必要地前提。在条件允许的情况下，应尽量分析反应混合物的全部组分，包括主产物，各种副产物，分析他们在气相色谱、液相色谱或薄层色谱上的相对位
学术研讨109 方务1虫多糖故取所究综述刘伟强①陈文?王湘君?何鸿源①钱明①刘思慧① ①海南热带海洋学院理学院②海南热带海洋学院生命科学与水产学院 查阅文献可知，方格星虫富含多糖、蛋白质和钙、磷、铁等多种营养成分，营养 价值丰富，其中多糖具有多种活性和较高的药用功效。目前方格星虫多糖的提取方法 有水提法、酸提法、碱提法和醇提法。本文拟定用采用高压脉冲电场提取技术结合酶 法提取方格星虫粗多糖，通过单变量因素实验以及响应面优化法，研究PEF结合酶法 提取方格星虫多糖最佳工艺，利用高效液相色谱检测多糖含量，为后续方格星虫的研 究做铺垫。 1前言 方格星虫俗称沙虫，也称为海人参。分布于沿海滩涂泥沙之中，一般盛产在海 南沿海，北部湾的北海市、湛江市等地。查阅文献发现，方格星虫体内是含有多种 氨基酸、维生素、高蛋白、低脂肪的海产 品，是滋彳_品，在饮姑面，方格星 虫口感好，肉质稚嫩。多糖是糖苷键结合 成的糖链，超过的单糖组成聚合糖高分子碳水化合物，一般不溶于水，无甜 味，其中方格星虫多糖具有多种活性，如 免疫调节、抗菌、抗病毒、维持肠道健 康、清除自由基、延缓衰老、调节造血功 能等，对人体健康及生理调节作用巨大，使得多糖的研究具有广阔的市场前景，多 糖资源的开发和利用日益活跃。人们需求 量逐渐增加，能補赚方格星虫的高效开发和合理利用[1_a。 2方格星虫的研究状况 随着社会的发展和人民生活水平的提 高，人们对饮食和保健品的需求量也越来 越大。因此，方格星虫在药理及饮食中使 用频繁，使得国内夕卜对方格星虫的研究日 益增加，主要涉及代谢生理、生态特征等 研究，对于方格星虫多糖提取方法的探究 研究较少，P E#合酶法提取方格星虫多 糖的研究极少。陈文等131对方格星虫多糖 的研究，以海南三亚沿海方格星虫为对 象，利用酶进行酶解，采用响应面法研究 超声波辅助酶法提取方格星虫多糖最舡 艺条件；实_棘明：在超声波辅助酶 法提取方格星虫多糖的实验过程中，单因 素的最隹条件为酶底物比为2.5%、温度为50 t、浸提时间为2 h、料液比为1:17 g/m L、超声时间为l h、p H值为8、超声 功率为960 W,多糖的最大提取率3.24%。 刘玉明等[41对方格星虫多糖不同提取工艺 的研究，应用酶法、碱法以及酶法碱法联 合提取，实验结果酶法提取率为0.60%， 碱法提取率为1.47%,联合法提取率为 0.20%;三种工艺提取多糖的含量分别为 21.83%、87.30%、36.40%。董兰芳等[5_6] 酣赚提取方格星虫多糖，三氯乙酸脱 蛋白、透析、醇沉，最终提取率为 1.47%,多糖质量分数64.15%。 3 P E F结合酶提取法 3.1研究优点 目前多糖的提取有水提法、酸提法、 碱提法、醇提法，但提取聽没有达到最 佳，存在着提取时间长、纯度低、杂质多 等缺点。以P E F结合酶法作为提取的方 法，P E F又称高压脉冲电场，是采用高电 场强度、麵冲宽度和高脉冲频率对液体 进行处理，可以连续杀菌。该技术提取时 间短、操作简单、耗能少、赫低，撤 提高得率和经济亂且实紐理条件温 和，可有效维持提取物的生理活性，是一 种有发展前景的天然产物的提取技术，也 是一种機的提取手段。酶是一类生物催 化剂，能降低反应的活化能，多糖大多存 在于细胞间质间，通过酶的作用破坏方格 星虫的细胞膜结构，使溶液的渗透性增 强，有效提高多糖的提取率。响应面优化 (R S M)是一种优化实验条件的方法， 适合于解决非线性数据处理的相关问题， 通过对过程回归方程进行拟合和响应曲 面、绘制等高线、可直接地求出相应各因 素水平的响应值，在各因素水平的响应值 基础上，找出预测的响应值最优值以及对 应的实验条件，确定最佳工艺参数。提取 得到的方格星虫多糖含量利用高效液相色 谱法检测，计麟率；高效液相色谱又称 H P L C,在流动相为液体的基础上，引用 气相色谱法的理论，该法固相液相分离效 果明显，分析速度快，操作简单，能快速 测定多糖含量關。 3.2研究内容 方格星虫謝样品的撇理，配制反 应标准溶液，P E F结合酶法提取多糖，绘 制标准曲线等操作。高压电场、脉冲时 间、料液比、酶种类、添加酶量、酶解温 度、酶解时间、提取时间和温度都是影响 多糖提取率的因素，以单因素实验确定 P E F处理关键参数、高压电场、脉冲时 间、酶种类，在最优单因素变量基础上， 应用正交实验1141研究料液比、酶用量、提 取时间和温度对方格星虫多糖提取的影 响；响应面法确定酶解温度、酶解时间， 利用P E F结合胰蛋白酶法提取方格星虫多 糖，多糖含量用高效液相色谱法检测。对 力口标回收率的分析，减少实验误差，根据 实■贼析其线性关系、方数析、响 应面优化等，并辅以方差及响应面分析对 实验结论加以论证，确保实验结雜确性 与可行性，确定最隹提取職条件。 4结论 方格星虫在研究价值，尤其是 在医学领域的开发，目前关于方格星虫多 糖提取的方法较多，P E F (下转108页）
关于化工工艺流程优化的分析 摘要：工艺流程的优化属于化工系统工程学研究的范围，它主要是研究在一定的条件下，如何用最合适的生产路线和生产设备，以及最节省的投资和操作费用，合成最佳的工艺流程。工艺流程也是实现产品生产的技术路线，通过对工艺流程的研究及优化，能够尽可能的挖掘出设备的潜能，找到生产瓶颈，寻求解决的途径，以达到产量高、功耗低和效益高的生产目标。 关键字：工艺流程，优化 一、化学工艺、化工工艺流程基本概念 化学工艺，即化工技术或化学生产技术，指将原料物主要经过化学反应转变为产品的方法和过程，包括实现这一转变的全部措施。化学工艺在高等学校的课程设置中，有工业化学和化学工艺学，两种课程仅在名称上不同，其内容均与上述化学生产技术的一般内容大体相似。化学生产过程一般地可概括为三个主要步骤：①原料处理。为了使原料符合进行化学反应所要求的状态和规格，根据具体情况，不同的原料需要经过进化、提浓、混合、乳化或粉碎（对固体原料）等多种不同的预处理。②化学反应。这是生产的关键步骤。经过预处理的原料，在一定的温度、压力等条件下进行反应，以达到所要求的反应转化率和收率。反应类型是多样的，可以是氧化、还原、复分解、磺化、异构化、聚合、焙烧等。通过化学反应，获得目的产物或其混合物。③产品精制。将由化学反应得到的混合物进行分离，除去副产物或杂质，以获得符合组成规格的产品。以上每一步都需在特定的设备中，在一定的操作条件下完成所要求的化学的和物理的转变。 化工工艺流程是由若干个具有独立的化工过程的工序所组成的，其结构一般都比较复杂，如果对整个工艺流程寻优，则涉及的影响因素及变量的数目太多，而不容易做出优化结论，如果把流程分解成一若干化工过程表示的工序，先对每个单一的化工过程寻优，则可运用有关的化学工程理论进行优化分析。在生产过程控制中，工艺优化是以原有生产工艺为基础，通过对生产流程、工艺条件、原辅料的深入研究，针对生产关键、工艺薄弱环节,组织技术人员改进工艺，使生产成本降低，生产过程、工艺条件达到最优化。对生产工艺流程的优化，除了技术上的参数优化调整、设备优化改造外，要想获得更大的突破、尤其是解决瓶颈
资料海洋星虫 海洋星虫属于“星虫科”海洋生物，俗称“沙虫”。它的形状很像一根肠子，呈长筒形，体长约10～20厘米，且浑身光裸无毛，体壁纵肌成束，每环肌交错排列，形成方块格子状花纹，星虫虽然没有海参、鱼翅、鲍鱼的名贵，但味道鲜美脆嫩，为海参、鱼翅所不及。生长在沿海滩涂，因为对生长环境的质量十分敏感，一旦污染则不能成活，因而有“环境标志生物”之称。 目录 1星虫简介 2海洋星虫保健功能的民间及古方记载 ?保健功能 ?古方记载 ?海洋星虫保健功能的现代医学研究 3海洋星虫胶囊提高机体免疫功能的研究 4海洋星虫胶囊的抗疲劳作用 ?海洋星虫胶囊能够显著延长小鼠负重游泳时间 ?样品对小鼠负重游泳时间的影响（X±SD） ?海洋星虫胶囊能够显著加快动物血乳酸的消除 ?海洋星虫胶囊延缓衰老作用研究 ?海洋星虫胶囊抗辐射作用研究 ?项目前景展望 1星虫简介 【性味】味甘、咸，性平。 【食疗功效】解烦渴、降血压，滋阴降火、清肺补虚。有阴虚劳损、肾虚腰痛、骨蒸潮热、阴虚盗汗、肺虚咳喘、胸闷痰多，小孩儿尿床（夜尿频繁）以及妇女产后乳汁稀少等症状，均可用海洋星虫食疗。现代营养学还证实了海洋星虫有降低血脂，破坏癌细胞生长的作用。由于海洋星虫的酶解物具有抗氧化，抗菌，抗辐射，抗病毒，抗疲劳，防癌，调节免疫，延缓衰老的功效，因此，现代对海洋星虫的药用研究方向主要在溶栓药物，抗凝血药物以及抗衰老药物上。 海洋星虫具有丰富的营养物质。我国多种本草中记载了其食用和药用价值，有些地区用其代替中药－冬虫夏草，东南沿海民间称其为“海洋冬虫夏草”，将其作为一种高级补品。闽南人称之为“动物人参”。现代医药研究表明海洋星虫含有多种活性物质，能够调节机体多种机能，含有丰富的蛋白质、微量元素等。锌的含量达到2.3×10μg/g，牛磺酸含量是普通生物的70倍(达3%)，蛋白质含量为55%以上，精氨酸含量高达6.8%；具有显著的延缓衰老、抗氧化、抗疲劳、耐缺氧、耐高温等功效，对心血管系统具有明显的保护作用。本项目分析了海洋星虫的主要活性成分，从海洋星虫制备获得了海洋星虫胶囊，对其抗疲劳、抗辐射和延缓衰老功能进行了详细的研究。 海洋星虫胶囊是通过生化高新技术制备而成具有明确功效成分的产品。富含蛋白质、牛磺酸、微量元素、精氨酸等活性物质。 牛磺酸，又名2-氨基乙烷亚磺酸，是细胞内含量最高的游离氨基酸。研究证明它具有平衡细胞渗透压、维持细胞膜稳定性、调节细胞钙稳态和对抗氧自由基损伤等细胞保护作用。牛磺酸的主要药理作用活性有：A、解热、镇痛、消炎；B、镇静、安神；C、保护细胞膜、保肝利胆；D、抗病毒、抗病原菌；E、解毒、解化学中毒、预防中毒等。牛磺酸的主要生理调节作用有：A、促进大脑发育，调节神经传导，改善脑功能，抑制和治疗老年性痴呆；B、
开题报告 食品质量与安全 酶解法提取牛皮胶原蛋白的条件优化 一、选题的背景与意义 胶原蛋白，主要存在于动物的皮、骨、软骨、牙齿、肌腱、韧带和血管中，是结缔组织极重要的结构蛋白。由于胶原蛋白具有良好的物理性能和生物学特性，因而其被广泛的应用于化工、食品、医学、生物材料以及农业等诸多领域。因此，胶原蛋白的提取一直是研究的热点。 目前国际上已开发出许多胶原保健品和功能性胶原生物材料。相对于我国，其在胶原蛋白的基础研究上已经具有一些优势并拥有一定的国际专利，而且部分已经投入市场，形成一定的市场规模。而我国的高质量胶原蛋白基础研究还有差距，有关这方面的核心专利技术不多。 但就目前的消费趋势来看，我国胶原蛋白的需求量逐渐增加，特别是随着人们对饮食和健康的不断重视，因此市场前景较为关阔。另一方面在肉制品和制革加工过程中含有丰富胶原物质的副产物（皮、内脏、肉骨头）利用的附加值很低。这样既浪费资源又污染环境，利用这些废弃物生成胶原蛋白实现资源的合理和有价值的利用，实现经济和社会效益的双赢。 本实验的以牛肉制品的下脚料——牛皮为原料，利用酶解法提取胶原蛋白，同时通过试验条件的优化，得到较优的提取条件，为今后的进一步研究提供参考。 二、研究的基本内容与拟解决的主要问题： 基本内容： 1、对牛皮成分的测定：主要测其水分、脂肪、粗蛋白、胶原蛋白等。 2、酶制剂的选择和复合：选择两种胶原蛋白提取率比较高的酶，然后按一定比例进行复合试 验。 3、研究不同实验条件对胶原蛋白提取率的影响：通过对加酶量、水解pH、水解温度、水解 时间、固液比等因素进行单因素试验，并在此基础上进行正交试验得出优化的工艺条件。拟解决的问题： 1、如何选择合适的比例对两种单酶进行复合。 2、如何提高胶原蛋白的提取率。 三、研究的方法与技术路线： 研究的方法： 1、牛皮成分测定：水分测定采用直接干燥法；脂肪测定采用索式提取法；蛋白质测定采用凯 式定氮法；胶原蛋白的含量测定采用羟脯氨酸法
α-环状糊精生成酶的研究 材料和方法 环状糊精是由葡萄糖经α-1,4键首尾相连成环状结构的一组化合物。通常由6、7和8个葡萄糖残基组成，分别命名为α-、β-和γ-环状糊精。其环状分子结构可以包接其它化合物分子，形成包接化合物，使被包接的物质与外界环境隔绝，具有抗氧化、抗挥发、抗光分解、掩盖异味等作用，因此环状糊精广泛应用于食品、医药、化妆品等行业。β-环状糊精在水中的溶解度较低，应用受到一定的限制；α-和γ-环状糊精在水中的溶解度较高，更便于使用。我国目前仅有β-环状糊精实现工业化生产，α-环状糊精曾有人进行过一些研究，尚未投入生产。我们通过紫外线照射，使一株主要生产β-环状糊精的嗜碱芽孢杆菌发生变异，获得一株产α-环状糊精在50%以上的突变株。并对该突变株所产生的环状糊精生成酶(Cyclomaltodexdrin glucanotransferase,，简称CGTase)。的性质进行了研究，本文将报道研究结果。 一. 材料 菌种： α-CD、β-CD：购自Sigma公司。其余试剂均为国产市售分析纯 二．方法： （一）酶活力的测定 在10mL比色管，加0.3%可溶性淀粉0.2mL，0.2mol/L，pH10.0的硼酸缓冲液0.2ml，置40℃水浴中预热10分钟，加适当稀释的酶液0.1mL，准确反应10分钟。加4%的醋酸溶液0.5mL，然后加入0.0004mol/L的I2液3mL，摇匀，用蒸馏水定容至10mL。立即在700nm 处用光程1cm的比色杯测定吸光度A，以蒸馏水代替酶液作空白对照，测定淀粉液的吸光度A0。 酶活力的定义：在上述条件下，以使淀粉吸光度降低10%所需的酶量定义为一个酶的活力单位。 （A0-A） 酶活力u/mL == ————-×100×稀释倍数 A0 （二）环状糊精的测定： 1.纸层析定性测定 展开剂：65%正丙醇 显色剂：0.2%碘丙酮溶液 上行法，展开两次。显色后α-CD呈紫色，β-呈黄色，γ-呈褐黄色。 2. 比色法定量测定 ⑴试剂 ①3.75×10-3mol/L酚酞溶液 精确称取105℃烘干的酚酞0.0597克，溶解于95%的乙醇中，定溶至50mL。置4℃左右冰箱保存。使用前用蒸馏水稀释10倍。 ②4×10-2mol/L碳酸钠溶液 精确称取105℃烘干的无水碳酸钠1.0599g，用新煮沸冷却后的蒸馏水溶解并定容至250mL。 ③α-CD标准溶液 精确称取105℃烘干的α-CD20mg，用新煮沸并冷却的蒸馏水溶解并定容至25mL。
沙虫干功效竟然这样多！ 沙虫干是属于一种渔民比较常见的食物，是将沙虫经过人工加工晒干处理后的食物，味道比较香脆可口方面保存，可以当中配菜食用，而沙虫干对人体也有很大的好处，可以有效起到降压功效，还可以滋补身体，起到清热解毒的功效，对肺部疾病也有很大的好处，还可以有效起到降血脂预防癌症等功效。 ★简介 沙虫，动物学名称为“方格星虫”，非海肠子，产于沿海滩涂泥沙之中，外观长约两寸，状若芦芽，是一种高蛋白的补品。沙虫又叫沙肠虫，它的形状很像一根肠子，呈长筒形。沙虫看似没有海参、鱼翅名贵，主要原因是沙虫的被认知程度不高，
但其味道鲜美无比，这是海参、鱼翅所不能及，食疗价值也不输海参，被誉为“海洋虫草”。 沙虫属海鲜类，而不属中药类，沙虫含丰富蛋白质,味道尤其鲜美,可鲜食、亦可晒干后食。有降血压、治湿、防癌作用。干制后炸、炒、炖、烩、煮汤均可。营养价值高，在市场上十分畅销。价格上也比较昂贵，一般盛产于北部湾的北海市、湛江市等地。沙虫生长对海水环境要求极高，素有“海洋环境标志生物”之称。 ★食疗功效
解烦渴、降血压，滋阴降火、清肺补虚。有阴虚劳损、肾虚腰痛、骨蒸潮热、阴虚盗汗、肺虚咳喘、胸闷痰多，小孩儿尿床(夜尿频繁)以及妇女产后乳汁稀少等症状，均可用沙虫食疗。现代营养学还证实了沙虫有降低血脂，破坏癌细胞生长等作用。由于沙虫的酶解物具有抗氧化，抗菌，抗辐射，抗病毒，抗疲劳，防癌，调节免疫，延缓衰老的功效，因此，现代对沙虫的药用研究方向主要在溶栓药物，抗凝血药物以及抗衰老药物上。 ★营养价值 沙虫，其名不美貌不雅，但其营养、味道及医药与食疗价值都不亚于其他名贵海产珍品，有“海洋虫草”的美誉。它富含蛋白质，多肽成分，17种氨基酸，其中人体必需的氨基
植物多糖是普遍存在于自然植物界中的由许多相同或不同的单糖以α-或β-糖苷键所组成的化合物，由1O个以上的单糖分子通过聚合而成，其分子量较大，是一类大分子化合物。多糖还是一类重要的信息分子，结合了蛋白质和脂类的多糖，在有机体中参与多种生命活动。人们对多糖生物活性的研究可追溯到1936年Shear对多糖抗肿瘤作用的发现。以后陆续发现一些真菌多糖和高等植物多糖具有明显的抑菌抗肿瘤等活性。至今已有300多种多糖从自然界中得到分离与鉴定J。研究发现多糖及糖复合物参与和介导了细胞各种生命现象的调节，具有抗肿瘤、免疫调节、降血糖、抗病毒、降血脂、抗凝血等生物活性 J。因其来源广泛，没有毒副作用，而且药物质量通过化学手段容易控制等优点，成为当今新药及功能保健品和绿色食品添加剂发展的新方向。本文主要对植物多糖的提取分离技术、分析检测方法及生物学活性等研究发展进行综述。 1.植物多糖的提取分离 在植物多糖的研究中，如何建立最佳的提取工艺是多糖研究的基础．目前植物多糖提取方法甚多，每种方法都各有利弊，选择合适的植物多糖提取方法可满足不同的需要J，常用方法主要有水提取法、酸提法、碱提法、酶解法、超声法、微波法等。近些年多采用混合或辅助手段提高提取效率，降低溶剂用量。J 1.1 水提醇沉法 水提醇沉法是提取多糖最常用的方法。多糖是极性大分子化合物，根据相似相容原理，应使用水、醇等极性较强的溶剂，利用多糖溶于水而不溶于醇的性质，可以采用热水浸煮或冷水浸提渗滤提取多糖，用乙醇将多糖从提取液中沉淀出来，即为水提醇沉法。一般来说，醇含量在50％一60％可以去除淀粉，在75％时可除去蛋白质，在80％时基本可以除去全部蛋白质、多糖和无机盐。 影响水提醇沉法提取率的因素有：水的用量、提取温度、料液比、提取时间及提取次数。传统采用正交试验法确定上述几个因素的最佳比例，如孙莹等J用水提醇沉法对大黄多糖的工艺优化进行研究，发现在料液比1：10，提取温度95oC 二，提取1h的情况下，大黄多糖得到最佳浓度为80％，得到影响提取率的主次因素依次为料液比、提取温度和提取时间。 水提醇沉法提取多糖不需要特殊设备，但在提取多糖的同时也易将蛋白质、苷类等水溶性成分提出来，造成存放时易变质。此外该法耗时，提取率也不高。 1.2 酸碱提法 用稀酸或碱溶液提取多糖，在一些植物中得到更高的提取率．孟宪元J等用5％HC1和水2种方法提取茜草多糖，发现稀酸提取法产品纯度相对较高．赵宇等用0．1 mol／L HC1溶液提取海篙子多糖发现，粗多糖产率酸提方法优于水提方法．赵云平 Jmo．1 mol／L氢氧化钠提取知母多糖，多糖得率22．078％．虽然碱法提取会使多糖含量增加，但寡糖含量则相对减少，且提取后液体需要中和，程序繁琐．碱提多糖时，容易使多糖的糖苷键断裂，且这种提取方法只适用于含果胶物质少，黏度小的原料．酸会引起多糖降解及糖苷键的断裂，因此在稀酸提取时，时间不宜长、温度不宜太高． 酸提法和碱提法在反应结束后还要对酸、碱液进行迅速中和或透析，否则会减产。此外酸碱的残留会造成毒性隐患，不适宜大规模的生产。 1.3 酶解辅助提取 酶解辅助提取是利用酶反应的高度专一性的性质，将植物细胞壁水解或降解，使得有效成分充分释放而被提取的方法，常用的酶有纤维素酶、蛋白酶等。
1．合成工艺的优化主要就是反应选择性研究 有机合成工艺优化是物理化学与有机化学相结合的产物，是用化学动力学的方法解决有机合成的实际问题，是将化学动力学的基本概念转化为有机合成的实用技 术。 首先分清三个基本概念转化率、选择性、收率。转化率是消耗的原料的摩尔数除于原料的初始摩尔数。选择性为生成目标产物所消耗的原料摩尔数除于消耗的原料的摩尔数。收率为反应生成目标产物所消耗的原料的摩尔数除于原料的初始摩尔数。可见，收率为转化率与选择性的乘积。可以这样理解这三个概念，反应中消耗的原料一部分生成了目标产物，一部分生成了杂质，为有效好的原料依然存在于反应体系中。生成目标产物的那部分原料与消耗的原料之比为选择性，与初始原料之比为收率，消耗的原料与初始原料之比为转化率。 反应的目标是提高收率，但是影响收率的因素较多，使问题复杂化。化学动力学的研究目标是提高选择性，即尽量使消耗的原料转化为主产物。只有温度和浓度是影响选择性的主要因素。在一定转化率下，主副产物之和是一个常数，副产物减少必然带来主产物增加。提高转化率可以采取延长反应时间，升高温度，增加反应物的浓度，从反应体系中移出产物等措施。而选择性虽只是温度和浓度的函数，看似简单，却远比转化率关系复杂。因此将研究复杂的收率问题转化为研究选择性和转化率的问题，可简化研究过程。 2．选择性研究的主要影响因素 提高主反应的选择性就是抑制副反应，副反应不外平行副反应和连串副反应两种类型。平行副反应是指副反应与主反应同时进行，一般消耗一种或几种相同的原料，而连串副反应是指主产物继续与某一组分进行反应。主副反应的竞争是主副反应速度的竞争，反应速度取决于反应的活化能和各反应组分的反应级数，两个因素与温度和各组分的浓度有关。因此选择性取决于温度效应和浓度效应。可是，活化能与反应级数的绝对值很难确定。但是我们没有必要知道它们的绝对值，只需知道主副反应之间活化能的相对大小与主副反应对某一组分的反应级数的相对大小就行了。我们知道，升高温度有利于活化能高的反应，降低温度有利于活化能低的反应，因此选择反应温度条件的理论依据是主副反应活化能的相对大 小，而不是绝对大小。 （1）温度范围的选择：在两个反应温度下做同一合成实验时，可以根据监测主
Analysis of glk 12，15 葡萄糖通过葡萄糖激酶的ATP依赖的磷酸化是由通过根据弗兰克尔和Horecker 的使用过量的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶监测细胞提取物中NADPH的形成。反应体系为 2 ml，50 mM Tris buffer pH7.65；10 mM MgCl2；50mM甘露糖；加入0.1mL酶。在反应中，NADP+被还原生成NADPH，其产量与样品GLK活性呈正相关，NADPH在340nm处有一吸收峰，因此测吸光度，每分钟记录一次直至吸光度不再变化，测出每分钟光密度的增加值。根据以下公式计算：酶活性=吸光度变化（min）/6.22（NADPH吸光系数） Analysis of manB 中文 酶的测定原理是根D-甘露糖-l-磷酸作底物,反应后经酸水解无机磷的减少而测定。标准的反应溶液中,含有D-甘露糖-1-磷酸(0.5m mol/l) 、D-葡萄糖-2,6-二磷酸 ( 0.0 1mmo l/L),醋酸镁 (2.5m mol /L),组氨酸(5m mol /L),Tris -Hcl(10 mmol/ l,pH8.0 )的缓冲液和微克量的酶液。反应总体积为 50μL,在30 ℃下反应10分钟,然后加4.25 mL 0.74 mol /L H2SO4 .消化20 分钟,再加125 m1 钼酸铵和25 μL F -S试剂 ,在100℃水浴下煮沸7 -10分钟,冷却,在670 nm波长下测光密度。以酶液先消化后加底物经同样处理的样品作对照测光密度。以两者的光密度正差显示酶活性。 Analysis of gmd and wcaG 17 利用分光和色谱测定试验系统进行测量GDP-D-甘露糖4,6-脱水酶和GDP-4-酮-6-脱氧-D-甘露糖3,5-差向异构酶-4-还原酶的活性。GDP-D-甘露糖4,6-脱水酶标准测定体系含有50mM的Tris/盐酸缓冲液pH7.5，10mM的氯化镁，4mM的GDP-D-甘露糖，50μMNADPH+和GMD含粗提物终体积为100μL。该反应在37℃进行60分钟，每隔一段时间测量一次。最后加入1900μL 100mM NaOH终止反应并在37℃下孵育20min，然后在320nm下测吸光度。GDP-4-酮-6-脱氧-D-甘露糖3,5-差向异构酶-4-还原酶活性测量依靠加入在第一步骤中的反应，然后通过在340 nm和37℃下测量NADPH的消耗量测定。 Analysis of fuct 1-。。 标准测定混合物含有38nM寡糖受体，20mM的MnCl2，1％的Triton X-100，50mM的二甲胂-HCl缓冲液（pH值 5.8），0.37 μM GDP-岩藻糖（270.0 mCi/mmol），和酶（0.4 mg protein），100μL的终体积。温育在37℃，1h。终止反应用300μL氯仿/甲醇（2/1，v/v），然后将产物通过TLC，乙醇/吡啶/ 1-丁醇/水/乙酸(100/10/10/30/3, by vol)在下层相分离。掺入糖脂的放射性活度是用图像分析仪和并用液体闪烁计数器测定。