1 目的
规范安捷伦高效液相色谱仪及安捷伦Openlab 2.X 工作站的使用和维护。
2 适用范围
本规程适用于1260 lnfinity II 型安捷伦高效液相色谱仪及安捷伦Openlab 2.X 工作站的使用和维护。
3 编写依据
1260 lnfinity II 安捷伦高效液相色谱仪及安捷伦Openlab 2.X 工作站（安捷伦科技(中国)有限公司）使用说明书。
4 职责
4.1 仪器设备负责人负责对本标准操作规程的监督执行。
4.2 实验操作人员负责对本标准操作规程的具体执行。
5 内容
5.1 使用OpenLAB 控制面板设置和配置：
5.1.1首次使用，以管理员权限账户登录控制面板： 点击桌面图标，输入管理员账号与密码登录。
5.1.2在控制面板导航窗格，选中管理，可根据实际需要：创建/编辑“角色”，创建不同权限“用户”，编辑“安全策略”等。
5.1.3 OpenLAB 2.X 是基于项目为主导的使用，须先创建“项目”：
（1）导航窗格选中项目，创建 “项目”；
（2）在“CDS 设置”，可根据需要做必要设置（如开启审计跟踪等）：提示：“结果”的审计跟踪是默认开启的；
（3）创建在桌面创建项目分析（数据处理）的快捷方式：点击菜单栏，
5.1.4创建仪器并配置：
(1) 导航窗格选中仪器，创建 “仪器”
(2) 配置仪器：通过仪器IP地址或主机名配置仪器：
(3)添加或移除使用这个仪器的用户：
点击编辑权限点击添加或移除用户、组。
（4）设置LC自动关闭检测器：
可通过管理/仪器选项，设置关闭检测器的时间：（可先编好一冲柱方法和停泵方法（流速设为0ml/min），加在序列表最后，即可实现自动冲柱、停泵和关闭氘灯）
5.2联机操作、运行样品：
5.2.1 LC开机：开启LC各模块；
5.2.2开电脑，点击后桌面快捷图标，进入仪器控制界面（或从控制面板启动），在功能区/状态，仪器状态版面，点击总启动按钮启动仪器。“重置”可回复默认状态
5.2.3编辑方法：选中功能区/方法，可新建，调用（已有方法），保存，另存，上传、下载仪器运行方法：注：方法参数设置完成后须保存或另存方法，并下载到仪器。
（1）平衡仪器：在该方法下平衡仪器（柱子及灯），直至10分钟内基线漂移不超过0.5mAu（VWD），且仪器各模块（功能）均为绿色就绪状态；
（2）运行单个样品（单针进样）：选中功能区/单个样品，在“运行信息”、“自动进样器”、“处理部分”等填入样品相关信息，并运行（采集数据）；
（3）运行序列样品（多针连续自动进样）：
选中功能区/序列，在序列表中填入各样品对应信息，并运行。若需运行后关机，可通过控制面板/管理/仪器选项，设置关闭检测器的时间,再提前编好冲柱方法和停泵方法（流速设为0ml/min），加在序列表最后，即可实现自动冲柱、停泵和关闭氘灯。
（4）在运行中若需编辑序列（添加、删除序列行），点编辑后须“更新”或“取消”，否则序列将不会运行当前进样之下的序列行。
5.2.4冲柱和关机：
(1) 不使用缓冲盐时：可直接用100%甲醇冲洗系统30 分钟以上。
（2）使用缓冲盐时：
（a）10%甲醇+90%水冲洗系统60分钟以上；
（b）逐步过渡到100%有机相再冲洗系统30 分钟以上。
（c）冲柱时可关闭灯:
运行预先编好的冲柱方法和停泵方法实现（在序列最后设置）。
5.2.5 退出工作站，关闭LC各模块电源，关闭电脑。
5.3数据分析：
5.3.1 面积百分比：
点击Da图标“项目”进入数据分析，点击左下角导航栏的“数据选择”，并双击选择要处理的数据
文件。
（1）点击文件，选择并创建一个关联的新方法：
点击“新建”“新建方法”“GC/LC面积百分比”“创建方法”。
(2) 命名、保存方法：
点击“保存方法”“另存为”“GC/LC面积百分比报告”“保存”。
（3）关联需要处理的数据：点中要处理的数据和方法，右键“关联已选进样到已选方法”（对多个数据按ctrl或shift）。
5.3.2调整积分：
（1）在处理方法框（在右上方点中使其为蓝色），点“属性”/“通用”，选择Chemstataion积分器。（2）点“Chemstataion积分器”/“标准”，在积分事件表中调整修改积分。
（3）任何调整后须点“重新处理”。
5.3.3百分比报告：点“进样报告”/“常规”，选择报告模板，勾选打印机，并重新处理即可打印报告。
备注：首次使用项目数据分析须先导入默认报告模板，否则无报告模板可用（也可通过新编模板来使用），方法：点击“数据选择”“导入导出”“导入默认模板”“确定”。5.3.4对多信号的DAD数据，如果只想在报告中显示一个信号的色谱图和结果，如下操作：
（1）点击“报告”，双击选择对应的模；
（2）在谱图区域内右键选“属性”；
（3）在色谱图属性对话框，选筛选，表达式，选信号/名称；值，选表达式（双击），并输入：=”DAD1A”（注意：字符必须是英文字符）,确定并应用；
（4）在表区域，同样操作；
（5）存或另存模板：
方法：点击“保存模板”“命名”“保存”“确定”。
（6）返回数据处理，选择更改后的报告模板，并重新处理。
5.3.5外标法
（1）点击“项目”进入数据分析；
（2）点击左下角导航栏的“数据选择”，并双击选择要处理的数据文件；
（3）点击文件，选择并创建一个关联的新方法；
（5）命名、保存方法；
（6）关联需要处理的数据：点中要处理的数据和方法，右键“关联已选进样到已选方法”
（7）调整积分：
（a）在处理方法框（在右上方点中使其为蓝色），点“属性”/“通用”，选择Chemstataion积分器；
(b)点“Chemstataion积分器”/“标准”，在积分事件表中调整修改积分；
(8)任何调整后须点“重新处理”。
5.3.6 定义标准峰：
(1) 在处理方法框（在右上方点中使其为蓝色），点“识别”，选择并将标准物质峰添加到方法；
(2) 点“校正”，在“常规”中，选择标准曲线类型等；
（3）点“校正”，在化合物表中更改名称，输入浓度等。
5.3.7建立标准曲线：
（1）在进样列表框（在右上方点中使其为蓝色），选择样品类型、运行类型，输入对应级别（最低浓度为1，逐级增加）；
（2）选中对应的所有标准数据（多选），处理，并点“校正曲线”查看：
5.3.8选择报告模板：
（1）在处理方法框（在右上方点中使其为蓝色）点“进样报告”/“常规”，选择报告模板，勾选打印机。
（2）外标报告：选择样品数据（注意检查是否关联到曲线方法），重新处理即可打印报告：
5.4 Datastore网页的使用：
5.4.1点击IE，可以登录网页http://localhost，
5.4.2管理员权限用户登录后可以：（非管理员权限用户只能进行部分操作）查看、导出系统日志：5.4.3可以管理、归档文件（文件夹）
5.4.4可以导入、导出文件。
5.4.5可以查看审计跟踪等信息。
5.5维护保养及注意事项：
5.5.1溶剂和样品注意事项：溶剂和样品过滤非常重要，它会对色谱柱、仪器起到保护作用，消除由于污染对分析结果的影响。色谱柱：由于填料颗粒很细，色谱柱内腔很小，溶剂和样品中的细小颗粒会使色谱柱和毛细管容易堵塞。仪器：溶剂和样品中的细小颗粒会增加进样阀的堵塞和磨损，同时也会增加泵头内的蓝宝石活塞杆和活塞的磨损。
5.5.2 在线Seal-wash注意事项：HPLC用缓冲盐时,由于泵头内的缓冲盐溶液存在高压析盐现象,析出的细小盐粒非常坚硬,它附着在蓝宝石活塞杆上,随着蓝宝石活塞杆的往复运动,容易产生划痕,并磨损密封垫,造成漏液等故障现象。在线Seal-wash选项能有效的带走可能存在的缓冲盐结晶。缓冲盐的浓度在0.1mol或大于0.1mol时,必须使用该在线冲洗选项. 清洗液配制:90%水+10%异丙醇.该混合液可抑制菌类生长和减小水的表面张力，不能干涸。注意：Seal-wash不能长期运行，应设置运行周期（如2min,运行0.2min），防止电机损坏。
5.5.3 溶剂过滤器注意事项：溶剂的质量或污染以及藻类的生长会堵塞溶剂过滤器，从而影响泵的运行，尤其水溶液或磷酸盐缓冲液（PH=4-7）。以下几种方法可以有效防止溶剂瓶内溶剂过滤器的堵
塞。
请严格A:执行溶剂过滤。B：请勿使用多日存放的蒸馏水及磷酸盐缓冲液 C：如果应用许可，可在溶剂中加入0.0001---0.001M的叠氮化钠. D:在溶剂瓶内溶剂的上方小流量连续吹氩气,以隔绝空气。 E：避免使溶剂瓶暴露在直射阳光下，尽量使用琥珀色的溶剂瓶盛放水溶液或磷酸盐缓冲液。
5.5.4 泵维护：日常使用中至少应作到以下几点：A:流动相使用前请必须脱气、过滤。B：使用缓冲盐时，要加在线Seal-wash选项。C：关机前，用相应的溶剂充分冲洗系统。D：及时更换Purge Valve 内的过滤芯。（当打开Purge Valve时，压力高于10bar，表明过滤芯有堵塞）。
5.5.4使用梯度比例阀时注意事项：当盐溶液与有机溶剂溶液混合时，盐溶液能与有机溶剂溶液完全混溶，而不会出现沉淀。但是在比例阀的混合点，重力作用使盐颗粒沉淀下来，通常，阀A接水相/盐溶液，D接有机溶剂，此法连接可有效使盐回落到盐溶液中，并被溶解。若颠倒过来，盐可能落在有机溶剂中，出现问题。强烈建议：当使用缓冲盐溶液和有机溶剂时，推荐将缓冲盐通道接在A通道上，有机溶剂通道直接接在A通道的上方D通道上；定期用水冲洗所有的通道，以除去阀口上可能出现的盐沉淀。
5.5.5 更换色谱柱注意事项：在使用HPLC时，应特别注意柱外效应对分析结果的影响，由于样品分子在液体流动相中的扩散系数比在气体中小4～5个数量级，液体流动相的流速也比气相慢1-2个数量级。因此，样品进入色谱柱后，在柱子以外的任何死体积（进样器、柱接头、连接管、检测器）中，样品分子的扩散和滞留，都会引起色谱峰的展宽，而使柱效降低。为使柱外效应减之最小，获得理想的分析结果，仪器的流动相管路连接非常重要，当接不同的柱子时，要注意柱子接头处的形状和长度，否则会产生一个非常大的死体积。
6文件变更历史
安捷伦液相操作规程 一开机 1)打开计算机，登陆windows操作系统。 2)打开主机各模块电源（从上至下），待各模块完成自检后，再双击桌面“仪 器1联机”图标,进入化学工作站，从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面。 3)把各流动相放入溶剂瓶中。 4)旋开排气阀（逆时针），右单击“四元泵”图标出现快捷键，点击“方法” 选项进入泵编辑画面。将泵流量设到5ml/min，溶剂A设到100%，打开泵，排出管线中的气体2—3分钟，直到管线内由溶剂瓶到泵入口无气泡为止,查看柱前压力（若大于10bar，则应更换排气阀内过滤白头）。 5)依此切换到B、C、D溶剂分别排气。 6)将泵的流量设到0.5ml/min，多元泵则再设定溶剂配比，如A=80%，B=20%； 关闭排气阀（顺时针）。 7)再将泵的流量设到0.8ml/min，2分钟后将泵的流量设到1ml/min，冲洗色谱 柱20—30分钟。 8)把缓冲液换成流动相，待柱前压力基本稳定后,打开检测器灯，观察基线情 况。 二数据采集方法编辑 1)编辑样品信息：由“运行控制”进入“样品信息”，设定操作者姓名，样 品数据文件名等。 2)编辑完整方法：从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”项.选中项单击 “确定”入下一画面“方法注释”，编辑好单击“确定”进入下一画面“选择进样源”，选中Als单击“确定”入下一画面“设置方法”进行参数设定。 3)四元泵参数设定：在“流速”处输入流量,如1ml/min,在“溶剂”处选中 B输入80%(A=100-B-C-D)，在右面注释栏中标明各溶剂的名称；设置“停止时间”和“后运行时间”，在“压力限值”处输入柱子的最大耐高压以保护柱子如：250bar，在“时间表”添加编辑梯度。 4)进样器参数设定：在进样模式中输入进样量xxul。“标准进针”——只能 输入进样体积此方式无洗针功能。“针清洗后进样”——可以输入进样体积和洗瓶位置为xx，此方式针从样品瓶抽完样品后会在洗瓶中洗针。 5)进样器进样程序参数设定：选中使用进样程序，在“函数”中添加相应函 数即可按程序进样。 6)TCC检测器参数设定：在“温度”左侧下面的方框内输入所需温度,并选中 它,右侧选中“与左侧相同”——使柱温箱的温度左右一致。 7)VWD检测器参数设定：在“波长”下方的空白处输入所需的检测波长,如 254nm,在“峰宽(响应时间)”下方点击下拉式三角框,选择合适的响应时间,如>0.1min(2s),再设置“停止时间”和“后运行时间”。 8)仪器曲线设置：默认即可。 三数据处理 1)从“视图”菜单中单击“数据分析”进入数据分析画面
安捷伦1260液相 操作规程 一、开机 1)打开计算机，登陆windows操作系统。 2)打开主机各模块电源（从上至下），待各模块完成自检后，再双击 桌面“仪器1联机”图标,进入化学工作站，从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面。 3)把各流动相放入溶剂瓶中。 4)旋开排气阀（逆时针），右单击“四元泵”图标出现快捷键，点击 “方法”选项进入泵编辑画面。将泵流量设到5ml/min，溶剂A 设到100%，打开泵，排出管线中的气体2—3分钟，直到管线内由溶剂瓶到泵入口无气泡为止,查看柱前压力（若大于10bar，则应更换排气阀内过滤白头）。 5)依此切换到B、C、D溶剂分别排气。 6)将泵的流量设到0.5ml/min，多元泵则再设定溶剂配比，如A=80%， B=20%；关闭排气阀（顺时针）。 7)再将泵的流量设到0.8ml/min，2分钟后将泵的流量设到1ml/min， 冲洗色谱柱20—30分钟。
8)把缓冲液换成流动相，待柱前压力基本稳定后,打开检测器灯，观 察基线情况。 二、数据采集方法编辑 1)编辑样品信息：由“运行控制”进入“样品信息”，设定操作者 姓名，样品数据文件名等。 2)编辑完整方法：从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”项.选 中项单击“确定”入下一画面“方法注释”，编辑好单击“确定” 进入下一画面“选择进样源”，选中Als单击“确定”入下一画面“设置方法”进行参数设定。 3)四元泵参数设定：在“流速”处输入流量,如1ml/min,在“溶剂” 处选中B输入80%(A=100-B-C-D)，在右面注释栏中标明各溶剂的名称；设置“停止时间”和“后运行时间”，在“压力限值” 处输入柱子的最大耐高压以保护柱子如：250bar，在“时间表” 添加编辑梯度。 4)进样器参数设定：在进样模式中输入进样量xxul。“标准进针” ——只能输入进样体积此方式无洗针功能。“针清洗后进样” ——可以输入进样体积和洗瓶位置为xx，此方式针从样品瓶抽完样品后会在洗瓶中洗针。 5)进样器进样程序参数设定：选中使用进样程序，在“函数”中 添加相应函数即可按程序进样。
安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程
安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程一、开机 （1）打开计算机，登陆windows操作系统。 （2）打开主机各模块电源（从上至下），待各模块完成自检后，再双击桌面“仪器1联机”图标，进入化学工作站，从视图菜单中选择“方法和运行控制”画面。 （3）进行仪器配置，点仪器-仪器配置-选择所需模块-自动配置-输入IP地址：192.168.254.11。把各流动相放入相应的溶剂瓶中。 （4）编辑方法。方法-新建方法-方法-编辑完整方法-编辑各项（四元泵、TCC、VWD、仪器曲线参数设定，仪器参数默认），完成后，文件→方法另存为→编辑名称，保存方法。 （5）排气。旋开排气阀（逆时针），右单击“四元泵”图标出现快捷键，点击“方法”设置泵流速，排气可设置1.2ml/min，l流量梯度100，也可 5ml/min，流量梯度10。一般冲洗3-5min，注意倾斜储液瓶使过滤头处 的气体进入管道才可使气体排出，观察管路中气体位置，以其排净为目的。关泵，关闭排气阀（顺时针）。（注意：先开排气阀，再开泵，先关泵，后关排气阀）。 （6）在让液体进入柱子之前应将甁填充设置为实际值，谨防空进。将泵流速设置1ml/min,用过渡液即缓冲液冲洗色谱柱20—30分钟。 （7）换流动相，待柱前压力基本稳定后，打开检测器，视图，在线信号，选择信号，观察基线情况。 二、数据采集信息编辑及进样
（1）编辑样品信息：点“单次样品”小瓶，或点击运行信息-单次进样，设定操作者姓名，样品数据文件名，进样量等。 （2）编辑好样品信息后方可进样。 三、数据处理 （1）打开桌面“仪器1脱机”，单击“数据分析”进入数据分析画面。 （2）从“文件”菜单中选择调用信号，选择您的数据文件名，单击确定。（3）谱图优化。从“图形”菜单中选择“信号选项”从范围中选择“自动量程”及合适的显示时间，或选择“自定义量程”调整，反复进行，直到图比例合适 为止。 （4）积分。从“积分”中选择“自动积分”，若积分结果不理想，从菜单中选“积分事件”，更改数据为合适的“斜率灵敏度、峰宽、最小峰面积、最小峰 高”，从“积分”中选择积分选项，则数据被积分，如积分结果不理想则修改相应的积分参数直到满意为止。单击左边图标将积分参数存入方法。（5）校正表设计。点击“校正”菜单中的“校正设置”给出各个参数，点击确定，调出建立校正表所需的谱图并对谱图进行图形优化和积分优化。点击校正→新建校正表，选择自动设定→确定，在校正表中给出正确的“化合物名”和“含量”如需增加校正点数，校正→添加级别，给出第二校正点的含量，以此类推。校正表建立完成后点击“确定”点击“保存图标”将校正表存入方法中，或点击文件-方法另存为-找到对应文件夹，编辑日期及前缀 存入。
安捷伦12600高效液相色谱仪再确认方案 文件编码发放编号 颁发部门总工室 起草人日期年月日 审核人日期年月日 审核人日期年月日 批准人日期年月日 执行日期年月日 历次修订的原因、目的： 分发部门 厂长室[ ] 总工室[ ] 综合办[ ] 生产部[ ] 质量部[ ] 储运组[ ] 工程部[ ] 制剂车间[ ] 前提车间[ ] 外包车间[ ] G M P 办[ ] 检测中心[ ] 集采中心[ ]
5.内容 5.1安装确认 5.1.1仪器基本信息的确认（见表1） 表1 仪器基本信息确认记录 仪器基本信息 仪器名称Agilent1260高效液相色谱仪仪器编号制造商检测器型号检测器序列号购入时间安装时间安装地点
维修服务 单位名称联系电话 地址联系人 备件供应单位联系电话 技术资料检查 名称确认结果备注 Agilent1260高效液相色谱仪说明书□有□无 Agilent1260高效液相色谱仪采购合同□有□无 装箱单□有□无 计量检定证书（应在计量检定周期内）□有□无再确认时应具备 Agilent1260高效液相色谱仪SOP □有□无再确认时应具备 按采购合同对装箱单所列内容进行确认 品名型号及序列号数量确认结果 □有□无 □有□无 □有□无 □有□无 □有□无 □有□无 □有□无 □有□无 □有□无 检查人：日期：年月日 5.1.2安装环境条件的确认 表2 安装环境条件的确认记录 环境条件要求检查结果 □符合□不符合位置应清洁无尘，无易燃、易爆和腐蚀性气体， 排风良好 台面仪器应平稳地放在工作台上，周围无强烈机械震动□符合□不符合
和电磁干扰源，仪器接地良好。 环境温度15-30℃□符合□不符合湿度室内湿度在20%一85% RH范围内。□符合□不符合空调有温湿度控制措施□符合□不符合 排风通风良好□符合□不符合电路电源电源电压为(220士22)V，频率为(50土0.5)Hz □符合□不符合接地□符合□不符合 不间断电源□符合□不符合 检查人：日期：年月日5.2运行确认 严格按《Agilent-1260高效液相色谱仪标准操作规程》进行操作，对仪器进行运行试验，确认其运转性能，并将检查结果填于下表3 表3 运行确认记录 操作步骤合格标准检查结果 开机进入系统□符合□不符合系统值设置□符合□不符合打印机□符合□不符合退出系统关机□符合□不符合 检查人：日期：年月日 5.3性能确认 5.3.1试验条件的确认 表4 试验条件的确认记录 品名要求确认结果 电子分析天平最大称量不小于100g，最小分度不大于1mg。计量检定。□符合□不符合容量瓶校验□符合□不符合
文件内容： 1、目的 (1) 2、范围 (1) 3、职责 (1) 4、内容 (1) 5、变更记载和原因 (4) 颁发部门：质量部 发放范围： □质量部□生产部□物流部□人事行政部□设备动力部
1.目的：能正确使用仪器,确保化验结果的准确度、精密度，延长仪器 使用寿命。 2.范围：适用于Agilent1260高效液相色谱仪及色谱数据工作站的操 作。 3.职责：质量控制检验员。 4.内容： 4.1 开机： 4.1.1 打开计算机，登陆windows操作系统。 4.1.2 打开主机各模块电源（从上至下），待各模块完成自检后，再双 击桌面“仪器1联机”图标,进入化学工作站，从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面。 4.1.3 把各流动相放入溶剂瓶中。 4.1.4 旋开排气阀（逆时针），右单击“四元泵”图标出现快捷键，点 击“方法”选项进入泵编辑画面。将泵流量设到5ml/min，溶剂A设到100%，打开泵，排出管线中的气体2—3分钟，直到管线内由溶剂瓶到泵入口无气泡为止,查看柱前压力。 4.1.5 依此切换到B、C、D溶剂分别排气。 4.1.6 将泵的流量设到0.5ml/min，多元泵则再设定溶剂配比，如 A=80%，B=20%；关闭排气阀（顺时针）。 4.1.7 再将泵的流量设到0.8ml/min，2分钟后将泵的流量设到 1ml/min，冲洗色谱柱20—30分钟。 4.1.8 把缓冲液换成流动相，待柱前压力基本稳定后,打开检测器灯， 观察基线情况。
4.2 数据采集方法编辑： 4.2.1编辑样品信息：由“运行控制”进入“样品信息”，设定操作者 姓名，样品数据文件名等。 4.2.2编辑完整方法：从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”项.选 中项单击“确定”进入下一画面“方法注释”，编辑好单击“确 定”进入下一画面“选择进样源”，选中Als单击“确定”进入 下一画面“设臵方法”进行参数设定。 4.2.3四元泵参数设定：在“流速”处输入流量,如1ml/min,在“溶剂” 处输入比例，如：B：80%(A=100-B-C-D)，在右面注释栏中标明 各溶剂的名称；设臵“停止时间”和“后运行时间”，在“压力 限值”处输入柱子的最大耐高压以保护柱子如：250bar，在“时间表”添加编辑梯度。 4.2.4进样器参数设定：在进样模式中输入进样量xxul。“标准进针” ——只能输入进样体积此方式无洗针功能。“针清洗后进样”——可以输入进样体积和洗瓶位臵为xx，此方式针从样品瓶抽完样品后会在洗瓶中洗针。 4.2.5进样器进样程序参数设定：选中使用进样程序，在“函数”中添 加相应函数即可按程序进样。 4.2.6 TCC（柱温箱）参数设定：在“温度”左侧下面的方框内输入所 需温度,并选中它,右侧选中“与左侧相同”——使柱温箱的温 度左右一致。 4.2.7 VWD（紫外检测器）参数设定：在“波长”下方的空白处输入所 需的检测波长,如254nm,在“峰宽(响应时间)”下方点击下拉式
安捷伦1260高效液相色谱仪技术参数 1 梯度泵 *1.1 串联双柱塞往复泵，齿轮传动，20ul-100ul自动连续可变冲程设计； 1.2 四元梯度泵可设置的流速范围：0.001–10 mL/min，0.001 mL/min步进； 1.3 流速精密度：±0.07%RSD； 1.4 整个系统耐压：不小于400bar； 1.5 混合精度：< 0.2 % RSD 或< 0.04 min SD，流速1 mL/min； 1.6 含柱塞清洗附件。 2 集成在线真空脱气机 2.1 在线真空膜过滤技术，内置真空泵，压力传感器，实时监控真空腔压力变化； 2.2 4个通道，最大流速每个通道：10 mL/min。 3 自动进样器 3.1 进样精度：< 0.25% RSD； 3.2 交叉污染：≦0.05%； *3.3 进样瓶容量：不小于100位（2ml样品瓶），可配置扩展样品盘，实现无人值守自动扔瓶功能； 3.4 进样范围：0.1 - 100μL，增量为0.1μL； 3.5 计量工具：高压流路中采用计量泵； *3.6 具有样品柱前衍生、振荡稀释、复杂程序进样等功能。 *3.7操作压力：不小于600bar 4 柱温箱 4.1 半导体控温模式，控温范围：室温下10℃ - 80℃，带降温功能； 4.2 控温精度：±0.15℃； 4.3 控温准确度：±0.5℃； *4.4 柱容量：3根30cm色谱柱 4.5色谱柱识别模块，用于GLP记录色谱柱类型，可监测柱子使用情况。 5 高灵敏度可变波长紫外检测器 5.1 类型：双光束光路设计 5.2光源：氘灯； *5.3最大采样速率：80 Hz； 5.4 噪声：在230 nm 处，<±0.25×10-5 AU； 5.5 漂移：在230 nm 处，< 1×10-4 AU/小时；
安捷伦A操作规程 Coca-cola standardization office【ZZ5AB-ZZSYT-ZZ2C-ZZ682T-ZZT18】
（一）开机 1 打开载气(N2)，空气，氢气等气源的开关，调整载气输出气压为约0.5 M Pa。 2 启动电脑，进入Windows 系统后 3 打开气相色谱仪前左下方的电源开关，GC进入自检后，启动完成。 4. 双击电脑桌面的“仪器2联机”图标，进入GC化学工作站“方法和运行控制”界面 （二）7890A配置编辑: 1．点击“仪器”菜单,选择“GC 配置…” 2．点击“色谱柱”按钮，进入柱参数设定画面，在“”下方第一行空白按钮处，单击鼠标，在弹出的界面中选择“毛细柱”或“填充柱”，如为毛细柱，还应输入色谱柱的“长度”，“模厚”，“直径”，“最高使用温度”等。（三）数据采集方法编辑: 1、开始编辑完整方法: 从“方法”菜单中选择“编辑完整方法…”项，如下图所示，选中除“数据分析”外的三项，点击“确定”，进入下一画面。 2、方法信息: 在“方法注释”中输入方法的信息（如，this is for test!），点击“确定”进入下一画面。 3、进样器设置: 在“选择进样源/位置”画面中选择“GC 进样器”，并选择所用的进样口的物理位置(前或后)。点击“确定”，进入下一画面。 4、柱模式（CFT）设定： 点击“”图标，进入柱模式设定画面，选择控制模式，“流速”或“压力”。如：压力，25 psi；或流速，min。 5、分流不分流进样口参数设定: 点击“”图标，进入进样口设定画面。点击“模式”右方的下拉式箭头,选 择进样方式为“不分流”（或分流方式，分流）。输入进样口的温度（如250℃），输入隔垫吹扫流量（如3ml/min）。在“分流出口吹扫流量”下边的空白框内输入吹扫流量（如后60ml/min）; 如选择分流方式, 则要输入“分流比”。 6、柱温箱温度参数设定: 点击“”图标，进入柱温参数设定。在空白表框内输入温度，选中“柱温 箱温度为开”左边的方框；℃ /min—升温速率；输入合适的升温参数。 7、FID检测器参数设定： 点击“”图标，进入检测器参数设定。如检测器温度（如300℃）；氢气 30ml/min，空气400ml/min，尾吹25ml/min，火焰和静电计前打勾， NPD：检测器温度（如300℃）；氢气3ml/min，空气60ml/min，柱流量＋尾吹＝10ml/min，铷珠和静电计前打勾，
安捷伦1260高效液相色谱仪确认方案Verification Protocol for the Agilent 1260 HPLC
目录 1.目的 (3) 2.确认范围 (3) 3.背景 (3) 4.职责 (3) 5.预确认 (3) 6.运行确认 (4) 7.性能确认 (4) 8.偏差与变更 (10) 9.再确认周期 (10) 10.参考文献 (10) 11.历史 (10) 12.附录 (10)
1. 目的 通过建立Agilent 1260 HPLC的确认方案，以运行确认主要检查Agilent 1260 HPLC各单元的性能及整机运行是否达到供货单位设计要求；性能确认主要检查Agilent 1260 HPLC 四元泵、进样器、柱温箱、检测器的性能符合设计要求，保证仪器在后续运行检测的准确性。 2. 确认范围 本方案适用于位于制剂厂区质量管理部三楼仪器室固定资产编号为F02-QC00014的 Agilent 1260型高效液相液谱仪的确认。 3. 背景 可变波长检测器（VWD）联用，主要用于实验室日常检测。与示差折光检测器(RID)联用，主要用于依诺肝素钠原料药及注射液等分子量及分子量分布的检测。 4. 职责 5. 预确认 5.1. 参与测试人员培训确认 根据确认方案内容涉及的文件、仪器、人员的情况，以检查参与确认方案的人员是否都参加过相关文件、仪器及本方案的培训，记录培训号和相关的培训内容于附录1“测试人员培训记录”中。 接受标准：参与仪器确认的人员均应参加过方案涉及的文件、仪器、方案的培训。 5.2. 测试用试剂、试液确认 检查确认中使用到的标准品、试剂、计量容器信息，可用于仪器确认。 检查内容包括如下：
《设备维护保养记录》 编号:NO： 设备名称：使用部门维护人：年月 维护项目 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 异常情况 异常情况 记录 备注 注1：根据设备日常维护制度，用“√”表示该天进行维护，用“×”表示该天没有进行维护。 注2：异常情况栏，用“√”表示该日无异常情况，用“×”表示今日出现异常情况，并在异常情况记录栏内予以记录。
设备台帐 编号：BJJOD/JL/Q/E/S6.3-01NO：1 序号设备编号设备名称及规格型号验收日期放置地点备注 1 Sgsb001 切割机MH110 2 Sgsb002 切割机400A 3 Sgsb003 电焊机BX1 4 Sgsb004 电焊机BX1 5 Sgsb005 角磨机VG100-2D 6 Sgsb006 角磨机S1M-100 7 Sgsb007 角磨机S1M-100 8 Sgsb008 电钻D6-10 9 Sgsb009 电钻JIZ-KP07-10A 10 Sgsb010 电钻Mod.60006 11 Sgsb011 电钻6013BR 12 Sgsb012 云石锯EON永远110 13 Sgsb013 云石锯GDM12-34 14 Sgsb014 云石锯GDM13-34 15 Sgsb015 云石锯VG110 16 Sgsb016 云石锯VG110-2D 17 Sgsb017 气瓶 18 Sgsb018 氩弧焊机CW-3000 19 Sgsb019 氩弧焊机WS-400
20 Sgsb020 切铝机YJ-360ZC 21 Sgsb021 配电箱 22 Sgsb022 水平仪DSL01 23 Sgsb023 水平仪DSL01 24 Sgsb024 水平仪DSL01 25 Sgsb025 水平仪DSL01 26 Sgsb026 电锤GBH 4-32 DFR 27 Sgsb027 电锤GBH 4-32 DSC 28 Sgsb028 电锤GBH 3-28 E 29 Sgsb029 电锤GBH 3-28 E 30 Sgsb030 电锤日立DH45MR 31 Sgsb031 手电钻GBM 23-2 E 32 Sgsb032 手电钻GBM 23-2 E 33 Sgsb033 手电钻GBM 23-2 E 34 Sgsb034 手电钻日立D13 35 Sgsb035 手电钻威克士WORX WT101KE 36 Sgsb036 手电钻威克士WORX WT101KE 37 Sgsb037 吊车 38 Sgsb038 大型气泵 39 Sgsb039 空压机 40 Sgsb040 吊篮 41 Sgsb041 吊轮
1.目的：规范Agilent 1260高效液相色谱仪维修、保养、校正操作。 2.适用范围：本公司化验室Agilent 1260高效液相色谱仪的维修、保养。 3.有关责任：化验室精密仪器室 4.引用标准：仪器说明书及Agilent化学工作者现场操作培训教材 5.规程内容： 5.1开机前准备 5.1.1根据实验要求配制流动相，须经0.45μm滤膜过滤，之后再进行脱气处理，使用前必须用超声波振荡l0-15min，按无机相和有机相分开别装入溶剂瓶A（装有洗盐装置，最好固定盛放无机盐水相）、B中；对照品和样品溶液进样前要经0.45μm滤膜过滤。 5.1.2若流动相中含有缓冲盐,则必须以每分钟2～3滴的速度虹吸10%的异丙醇水冲洗seal-wash，以防有盐结晶在泵头产生而损坏泵头。 5.2.采样前准备 5.2.1打开计算机,进入 Windows 系统, 从上到下依次打开各模块电源。5.2.2待各模块自检完成后，双击桌面上的“仪器1联机”图标，将自动进入化学工作站画面。 5.2.3从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面,也可单击工作站画面左侧的“方法和运行控制”项，进入方法和运行控制窗口。 5.2.4打开Purge阀（逆时针），右击“泵”图标出现参数设定菜单单击“设定泵”选项进入泵编辑画面。 5.2.5设“流量”逐步增大流速至5ml/min ，A通道设到100%，单击“确
定
”。 5.2.6单击“泵”图标，出现参数设定菜单，单击“泵控制“选项选中“开”单击“确定”则系统开始Purge，直到管路内由溶剂瓶A到泵入口无气泡为止；切换B通道(B通道设到100%)继续Purge直到所有通道管路内均无气泡为止。(查看柱前压力，若大于10Bar，则应更换排气阀内滤芯/过滤白头。) 5.2.7将泵的流量设到0.5ml/min，若使用双泵则应设定溶剂配比，如A=80%，B=20%；关闭排气阀（顺时针）；再将流量设到0.8ml/min，2分钟后设定至方法所需流速，冲洗色谱柱20-30min。 5.2.8单击泵下面的瓶图标，输入溶剂瓶A、B内流动相的实际体积（为保护泵和色谱柱，请按实际体积输入）和停泵的体积单击“确定”，如果各溶剂瓶溶剂体积小于停泵体积，泵将自动停止。 5.2.9把缓冲液（用于柱子过渡的，与流动相等比例的乙腈/水、甲醇/水或10%的水溶液）换成流动相，排气后，逐步增加至所需流速，待柱压基本稳定后，打开检测器等，观察基线情况。 5.3.数据采集 5.3.1采集方法编辑 5.3.1.1编辑完整方法：从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”项，选中除“数据分析”外的三项，单击“确定”进入下一画面。 5.3.1.2方法信息：在“方法注释”栏中加入（如方法的用途等），单击“确定”进入下一画面。
1目的 规范Agile nt 1260系列高效液相色谱的日常使用和维护保养，保证仪器的正常运转，确保检测工作的顺利进行。 2适用范围 适用于Agile nt 1260系列高效液相色谱系统的日常使用和维护。 3职责 实验室分析人员负责Agile nt 1260系列高效液相色谱系统的日常使用和维护。 4系统组成 4.1 Agile nt 1260 系列四元泵（G1311C）和脱气机； 4.2可变波长紫外检测器（VWD G1314F ； 4.3 Chemstation A.01.04 色谱工作站 4.4国产柱温箱（AT-550）色谱柱； 4.5电脑、打印机等辅助设备。 5定义 无 6操作程序 6.1开机前的准备 6.1.1检查仪器校验标识，确认仪器处于校验周期内。 6.1.2检查上次《实验室仪器设备使用记录表》和仪器状态，确认仪器处于正常状态； 6.1.3流动相的制备： 6.1.3.1按《高效液相色谱法流动相配制标准操作规程》配制需要的流动相。 6.1.3.2用前超声脱气（一般10?20min）。 6.1.4更换流动相： 6.1.4.1将泵的吸滤器从旧流动相中取出，用新流动相冲洗后放入新流动相的储液瓶中，并盖好瓶盖； 6.1.4.2将排液管的出口端放入废液瓶中，并盖好瓶盖。 6.1.5供试溶液的配制：
6.1.5.1供试品用规定溶剂配制成供试品溶液。 6.1.5.2定量测定时，对照品溶液和供试品溶液均应分别配制 2份。 6.1.5.2如有必要，样品需预处理，如过滤等，以免对色谱系统产生污染和色谱干扰。 6.1.6选择色谱柱： 6.1.6.1根据待检供试品的检测方法确定所需的色谱柱； 6.1.6.2检查仪器上安装的色谱柱是否与其相同，若不同则需进行更换。 6.1.7更换色谱柱 6.1. 7.1拆卸原色谱柱： 先握住色谱柱，再松动色谱柱出口端螺帽，取下出口端的管线； 松动色谱柱入口端螺帽，取下入口端的管线； 用止动塞将色谱柱的进出口塞住拧紧后，将色谱柱放回原专用包装盒内 6.1. 7.2安装新色谱柱： 从专用包装盒内取出色谱柱，松动并取下色谱柱出入口的止动塞； 将与进样器相连的管线一端插入色谱柱入口端，拧紧螺帽； （注意：安装时色谱柱上的流向标志应与管路的流动相流向一致。 ） 将与检测器相连的管线一端插入色谱柱出口端，拧紧螺帽。 6.2开机 6.2.1通电前应检查仪器设备之间的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。 6.2.2接通电源，打开计算机和打印机开关 6.2.3等待计算机自检完毕后，进入 Windows 桌面，依次打开泵、进样器、检测器各模块电源。 打开柱温箱开关。 6.2.4待各模块自检完成后，点击 6.2.5确定仪器与工作站已连接，若未连接，需关闭工作站，重新连接。注意必须先打开检测器, 再连接 工作站。 6.2.6从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面 ，也可单击工作站画面左侧的“方法和运行 控制”项，进入方法和运行控制窗口。 6.3 操作 6.3.1泵的开启和设置 6.3.1.1打开Purge 阀（逆时针），右键点击四元泵下面的空白处，选择“方法”选项，进入泵 编辑画面。 Win dows 桌面 lc ”图标进入化学工作站画面
一、开机 1、开机前准备：流动相使用前必须过0.45um的滤膜（有机相的流动相必须为色谱纯；水相必须用新鲜注射用水，不能使用超过3天的注射用水，以防止长菌或长藻类）；把流动相放入溶剂瓶中。A瓶：为水相B瓶：为有机相。 2、打开电脑，选Win 2000，进入Win 2000界面。 3、双击CAG Boodp server图标，放大CAG Boodp server小图标，出现窗口，5min 内打开液相各部件电源开关，等待1100广播信息后，表示通讯成功连接，关闭CAG Boodp serve窗口。 4、双击online图标，仪器自检，进入工作站。 该页面主要由以下几部分组成： ——最上方为命令栏，依次为File，Run Control，Instrumen…等； ——命令栏下方为快捷操作图标，如多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、调用文件保存文件……等； ——中部为工作站各部件的工作流程示意图；依次为进样器-输液泵-柱温箱-检测器-数据处理-报告； ——中下部为动态监测信号； ——右下部为色谱工作参数：进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等。 4、从“View”菜单中选择“Method and control”画面。 二、编辑参数及方法 1、开始编辑完整方法： 从“Method”菜单中选择“New method”，出现DEF-LC.M，从“Method”菜单中选择“Edit entire method”，选择方法信息、仪器参数及收集参数、数据分析参数和运行时间表等各项，单击OK，进入下一画面。 2、方法信息： 在“Method Comments”中加入方法的信息，如方法的用途等。单击OK，进入下一画面。 3、泵参数设定： 进入“Setup pump”画面，在“Flow” 处输入流量，如1ml/min；在“Solvent B”处输入有机相的比例如70.0，（A=100-B），也可在Insert 一行“Timetable”，编辑梯度；输入保留时间；在“Pressure Limits Max”处输入柱子的最大耐高压，以保护柱子。单击OK，进入下一画面。 4、DAD检测器参数设定： 进入“DAD signals”画面，输入样品波长及其带宽、参比波长及其带宽（参比波长带宽默认值为100nm）；选择Stoptime：as Pupm； 在“Spectrum”中输入采集光谱方式“store”：选All；如只进行正常检测，则可选None；范围Range：可选范围为190~950nm；步长Step可选2.0nm； 阀值：选择需要的灯； Peak width（Response time）即响应值应尽可能接近要测的窄峰峰宽，可选“2s”或4s； Slit-：狭窄缝，光谱分辨率高；宽时，噪音低。可选4nm
四川中安检测有限公司 作业指导书 Agilent1260高效液相色谱仪 操作规程 文件编号ZAJC-3T-001 批准人 批准日期 编制人 编制日期
1.目的 正确使用仪器，确保化验结果的准确度、精密度，延长仪器使用寿命。2.范围 适用于Agilent1260高效液相色谱仪及色谱数据工作站的操作。 3.职责 3.1操作人员：按照本操作规程操作仪器，对仪器进行自检，作使用登记。 3.2负责人：负责监督仪器操作是否符合规程，对仪器进行定期自检、仪器综合管理。 4.要求 4.1开机 4.1.1溶剂准备 按要求准备所需流动相，每瓶均超声10min排气，将原来浸泡在甲醇中的滤头取出对应放在各个流动相中（A：二次蒸馏水；D:缓冲溶液；B:色谱纯甲醇C：色谱纯乙腈）。 4.1.2开启工作站 4.1.2.1启动计算机 打开计算机电源，登陆windows 操作系统。 4.1.2.2启动工作站 打开Agilent 1260 各模块电源，待Agilent 1260 各模块自检完成后(各模块右上角指示灯为黄色或者无色)，点击屏幕桌面图标“HPLC -1260（联机）”，则进入工作界面。 模块右上角状态灯颜色说明： 无色：未开电源或者模块准备就绪； 黄色：模块未准备就； 绿色：正在进样分析；
红色：模块出错； 所有模块红色：仪器有漏液 工作站图形颜色说明： 绿色：模块准备就绪； 黄色：模块未准备就绪； 蓝色：正在进样分析； 红色：出错或者不能联机； 灰色：此模块没启用。 将鼠标移至系统或各个模块的状态指示栏，系统会自动显示未就绪或出错的原因。 4.1.3冲洗流动相管路 反时针旋开泵模块上的溶液排空阀，右键单击泵视图的空白处，选择“方法”，设置“流速”为5ml/min。将实验中需要的各个通道分别设置“溶剂”为100%，点击确定开始冲洗，每个通道冲洗3-5分钟，若冲洗通道时压力显示超过10 bar，则可换过滤白头。 4.1.4平衡柱子 冲洗完柱子，按要求调整流动相速率及流动相比例，顺时针旋转排空阀，关闭溶液排空阀(确认泵流量为1ml/min)，然后右键点击需用检测器模块视图的空白处，选择“方法”进入检测器的参数设置界面，按要求设置参数（停止时间与泵一致），后点击右键，选择“控制”，在弹出的窗口选择打开，开始平衡柱子，监视信号基线和压力，等待平稳后即可进样（若用缓冲溶液和有机相作为流动相，先用水和有机相平衡30 min，比例与所要求的缓冲溶液和有机相比例一致），待基线平稳后换用所要求的缓冲溶液和有机相按比例混合平衡柱子30 min）。 4.1.5保存方法 将编辑好的方法保存起来。 4.2进样分析 在每个样品进样前，从“运行控制”菜单中点击“样品信息”，编辑好数据的保存路径。进样时，逆时针旋动进样器六通阀旋钮，进样完毕立即顺时针旋回该旋
安捷伦7890A的操作规程（供参考） 1、目的：建立安捷伦7890B型气相色谱仪标准操作程序。 2、范围：适用于Agilent 7890B，FID检测器及Chemstation软件的气相色谱仪。 3、责任者：操作者 4、程序： 4.1 操作前准备 4.1.1 色谱柱的检查与安装首先打开柱温箱门看是否是所需用的色谱柱，若不是则旋下毛细管柱按进样口和检测器的螺母，卸下毛细管柱。取出所需毛细管柱，放上螺母，并在毛细管柱两端各放一个石墨环，然后将两侧柱端截去1～2cm，进样口一端石墨环和柱末端之间长度为4～6mm，检测器一端将柱插到底，轻轻回拉1mm左右，然后用手将螺母旋紧，不需用板手，新柱老化时，将进样口一端接入进样器接口，另一端放空在柱温箱内，检测器一端封住，新柱在低于最高使用温度20～30℃以下，通过较高流速载气连续老化2小时以上。 4.1.2 气体流量的调节 4.1.2.1 载气(N2 or He)开启氮气钢瓶高压阀前，首先检查低压阀的调节杆应处于释放状态，打开高压阀，缓缓旋动低压阀的调节杆，调节至约0.4～0.6MPa。 4.1.2.2 氢气打开氢气钢瓶or氢气发生器主阀，调节输出压至0.4MPa。 4.1.2.3 空气启动的空气压主机，调节输出压至0.4MPa。 4.1.3 检漏用检漏液检查柱及管路是否漏气。 4.2 主机操作 4.2.1 接通电源，打开电脑，进入英文windows xp主菜单界面。然后开启主机，主机进行自检，自检通过主机屏幕显示power on successul，进入Windows系统后，双击电脑桌面的(Instrument Online)图标，使仪器和工作联接。 4.2.2 编辑新方法 4.2.2.1 从“Method”菜单中选择“Edit Entire Method”，根据需要钩选项目，“Method Information”（方法信息），“Instrument/Acquisition”（仪器参数/数据采集条件），“Data Analysis”（数据分析条件），“Run Time Checklist”（运行时间顺序表），确定后单击“OK”。 4.2.2.2 出现“Method Commons”窗口，如有需要输入方法信息（方法用途等），单击“OK”。 4.2.2.3 进入“Agilent GC Method: Instrument 1”（方法参数设置）。 4.2.2.4 “Inlet”参数设置。输入“Heater”(进样口温度)；“Septum Purge Flow”（隔垫吹扫速度）；拉下“Mode”菜单，选择分流模式或不分流模式或脉冲分流模式或脉冲不分流模式；如果选择分流或脉冲分流模式，输入“Split Ratio”（分流比）。完成后单击“OK”。 4.2.2.5 “CFT Setting”参数设置。选择“Control Mode”(恒流或恒压模式)，如选择恒流模式，在“Value”输入柱流速。完成后单击“OK”。 4.2.2.6 “Oven”参数设置。选择“Oven Temp On”(使用柱温箱温度)；输入恒温分析或者程序升温设置参数；如有需要，输入“Equilibration Time”(平衡时间)，“Post Run Time”（后运行时间）和“Post Run”（后运行温度）。完成后单击“OK”。 4.2.2.7 “Detector”参数设置。钩选“Heater”(检测器温度)，“H2 Flow”(氢气流速)，“Air Flow”(空气流速)，“Makeup Flow”(尾吹速度N2)，“Flame”(点火)和“Electrometer”(静电计)，并对前四个参数输入分析所要求的量值。完成后单击“OK”。
安捷伦1260型高效液相色谱仪操作规程 开机 1.1 打开计算机，输入用户名和密码，进入Windows XP画面。 1.2 打开1260 LC 各模块电源(不分先后)。待各模块自检完成后，双击“仪器2联机”图标，化学工作站自动与1260 LC通讯，进入工作站。（注意：在“仪器2脱机”关闭的情况下，“仪器2联机”方能打开。） 1.3 从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面，来调用所需的界面，正常情况会默认进入此界面。 1.4 确保对应溶剂瓶装入所要使用的流动相，左击“四元泵”模块下的“溶剂瓶”图标或右击“四元泵”下选择“瓶填充”，输入溶剂的实际体积和瓶总体积，可输入停泵的体积。单击“确定”。（注意：此操作很重要，以免气泡进入系统）。 1.5 轻轻旋开泵上的冲洗阀（缓缓旋开约1/4即可，不可用力太过）。右击“四元泵”图标，出现参数设定菜单，单击“方法”选项，进入泵编辑画面。设流量6ml/min，溶剂A设到100%；单击“确定”。右击“四元泵”图标，选择“控制”选项，选中“打开”，单击“确定”，则系统开始排气，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止；切换到通道同法继续排气，直到所有要用通道无气泡为止（只需排所用到的通道即可）。
1.6 右击“四元泵”图标，出现参数设定菜单，单击“方法”选项，进入泵编辑画面。设流量为：0ml/min，单击“确定”，轻轻关闭排气阀（旋紧即可）。 2. 数据采集方法、系列编辑： 2.1 编辑完整方法： 2.1.1. 从“方法”菜单中选择“编辑完整方法” 项，选中除“数据分析”外的三项，单击“确定”，进入下一界面“方法注释”。 2.1.2. 方法信息： 在“方法注释”中写入方法的相关信息。此项可忽略不写，单击“确定”，进入下一界面“选择进样源/位置”。 2.1. 3. 自动进样器参数设定: 选择“Als”的进样方式，单击“确定”，进入下一界面“设置方法”。 2.1.4. 方法参数设定： 在“设置方法”界面选择“四元泵”选项，在“流量”处输入所需流量，如：1ml/min，在溶剂“B”、“C”、“D”处输入流动相所占比例(A=100-B-C-D)，也可在右侧“时间表”项下选择“添加”，编辑梯度。在“停止时间”项下输入样品运行时间，在“压力限值”输入柱子的最大耐高压，如300bar，以保护柱子。
安捷伦液相1260高效液相色谱 操作规程 1.前期工作 查找资料（最好是外文文献）了解别人做该样品时常用的流动相和固定相。如果还不清楚样品是什么物质，最起码也应该对其极性进行了解，为选择合适的流动相和固定相打好基础。 流动相选择注意事项： ①避免使用高粘度的溶剂作为流动相； ②所选用的流动相一定要与样品相溶； ③各流动相之间可以很好的相溶； 固定相选择注意事项： a.正相色谱 正相色谱用的固定相通常为硅胶（Silica）以及其他具有极性官能团胺基团，如（NH2，APS）和氰基团（CN，CPS）的键合相填料。由于硅胶表面的硅羟基（SiOH）或其他极性基团极性较强，因此，分离的次序是依据样品中各组分的极性大小，即极性较弱的组份最先被冲洗出色谱柱。正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低，如正已烷（Hexane），氯仿（Chloroform），二氯甲烷（Methylene Chloride）等。 b.反向色谱 反向色谱用的填料常是以硅胶为基质，表面键合有极性相 对较弱官能团的键合相。反向色谱所使用的流动相极性较强，通常为水、缓冲液与甲醇、乙腈等的混合物。样品流出色谱柱的顺序是极性较强的组分最先被冲洗出，而极性弱的组分会在色谱柱上有更强的保留。常用的反向填料有：C18（ODS）、C8（MOS）、C4（Butyl）、C6H5（Phenyl）等。
2.准备工作 ①用于液相色谱分析的样品溶液使用前要经过0.15μm过滤器过滤，必须达到均匀而无颗粒的状态； ②流动相一定要选用色谱级别的（最好是默克、飞世尔、时联等牌子的），并且在使用之前一定要使用0.4μm过滤器过滤，再用超声波清洗仪脱气处理20-30min； ③在连接柱子和色谱仪之前，阀件或管路一定要清洗干净，（一般用异丙醇将管路清洗） 3.仪器操作 （一）将所选择的流动相加入相应的试剂瓶中：棕色瓶对应A 泵，该瓶中只能加双蒸水或娃哈哈纯净水；B、C、D泵根据需要添加。 注：若流动相中有水、乙腈最好现用现处理，不宜放置太长时间。 （二）先打开计算机登陆windows操作系统，再将仪器的泵、色谱柱、检测器打开，待计算机界面显示连接好后，双击桌面“联机”图标，进入化学工作站，从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面。
安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程 一、开机 （1）打开计算机，登陆windows操作系统。 （2）打开主机各模块电源（从上至下），待各模块完成自检后，再双击桌面“仪器1联机”图标，进入化学工作站，从视图菜单中选择“方法和运行控制” 画面。 （3）进行仪器配置，点仪器-仪器配置-选择所需模块-自动配置-输入IP地址：192.168.254.11。把各流动相放入相应的溶剂瓶中。 （4）编辑方法。方法-新建方法-方法-编辑完整方法-编辑各项（四元泵、TCC、VWD、仪器曲线参数设定，仪器参数默认），完成后，文件→方法另存为→编辑名称，保存方法。 （5）排气。旋开排气阀（逆时针），右单击“四元泵”图标出现快捷键，点击“方法”设置泵流速，排气可设置1.2ml/min，l流量梯度100，也可5ml/min，流量梯度10。一般冲洗3-5min，注意倾斜储液瓶使过滤头处的气体进入 管道才可使气体排出，观察管路中气体位置，以其排净为目的。关泵，关 闭排气阀（顺时针）。（注意：先开排气阀，再开泵，先关泵，后关排气阀）。（6）在让液体进入柱子之前应将甁填充设置为实际值，谨防空进。将泵流速设置1ml/min,用过渡液即缓冲液冲洗色谱柱20—30分钟。 （7）换流动相，待柱前压力基本稳定后，打开检测器，视图，在线信号，选择信号，观察基线情况。 二、数据采集信息编辑及进样 （1）编辑样品信息：点“单次样品”小瓶，或点击运行信息-单次进样，设定操作者姓名，样品数据文件名，进样量等。 （2）编辑好样品信息后方可进样。 三、数据处理 （1）打开桌面“仪器1脱机”，单击“数据分析”进入数据分析画面。 （2）从“文件”菜单中选择调用信号，选择您的数据文件名，单击确定。（3）谱图优化。从“图形”菜单中选择“信号选项”从范围中选择“自动量程” 及合适的显示时间，或选择“自定义量程”调整，反复进行，直到图比例