人类胚胎干细胞基础培
训教材
HEN system office room 【HEN16H-HENS2AHENS8Q8-HENH1688】
人类胚胎干细胞基础技术
高级培训班
2010-12
目录
1.绪论
本操作手册将为您详细介绍人胚胎干细胞/iPS细胞培养的基础知识、技术细节及相关的产品信息。目的是为了让您更好地培养您购买的细胞，请按照此手册进行培养操作直至获得可靠的冻存细胞。上海斯丹赛生物技术有限公司专业提供各类胚胎干细胞
/iPS细胞及成套产品服务，为您的干细胞研究提供一站式解决方案。
2.饲养层细胞的制备
材料与仪器
成纤维细胞完全培养基，货号EFM-01
胰酶，货号M-005-1
成纤维细胞冻存液（2x），货号EFFM-01
基质胶（Matrigel matrix），BD Pharmingen，货号356235
CF-1小鼠胚胎成纤维细胞（MEF），货号MEF-CF1-01
T25透气培养瓶，NUNC，货号156367
T75透气培养瓶，NUNC，货号156499
2 ml移液管，NUNC，货号159617
5ml移液管，NUNC，货号159625
10 ml移液管，NUNC，货号159633
15ml离心管，货号366036
50ml离心管，货号373660
冻存管，NUNC，货号377267
Thermo-Fisher Finnpipette F3移液器和灭过菌的枪头
生物安全柜，货号
CO2培养箱，Thermo，HERA cell 150i
电子计数器，millipore，货号PHCC00000
电动移液器，Thermo Scientific Finnpipette C1，货号4580800
低速离心机，Thermo Scientific CL10
液氮罐，Thermofisher，货号CN50900
2.1从胎鼠获得小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）
1. 拉断颈椎处死怀孕12-13天的CF-1小鼠，浸入70％的酒精中消毒。
2. 将小鼠放在超净台无菌的解剖盘中，在腹中线处做一横向切口。
3. 剪开的皮肤拉向切口的上下两侧，提起腹膜，将其剪开，充分暴露腹腔。
4. 找出子宫，一只手用无菌钝口镊子轻轻提起子宫，另一只手持无菌镊子小心分离子宫周围的结缔组织。当两侧子宫都与其相连的组织分离好后，用剪刀将左右两侧的子宫在输卵管与子宫角的衔接处剪下，小心剪下子宫的联体部分，置于无菌的60mm 培养皿中。
5. 用无菌的剪刀在子宫头与子宫尾分别剪去输卵管及子宫角部分。
6. 将子宫置于15ml离心管中，用10mlPBS洗三遍。
7. 用尖镊子撕开子宫壁和胎膜，取出胎鼠，放在新的培养皿中。
8. 用8mlPBS 将胎鼠洗三遍。
9. 用灭菌的眼科剪刀去除胎鼠的胚囊，释放胚胎，并胚胎计数。
10. 将胚胎移到干净的培养皿中，PBS洗三次。
11. 用镊子小心的去除胚胎的头和肝脏，PBS洗三次。
12. 将胚胎转移至新的培养皿中，用无菌剪刀将组织充分剪碎，加入％胰酶同时吹打几分钟使其消化均一并彻底酶解。
13. 用同样体积的MEF完全培养基中和胰酶。
14. 一个T75瓶加10ml MEF完全培养基，按照每2-3个胚胎一个T75瓶，将已消化的胚胎加入培养瓶中，放在5％CO2培养箱中培养，培养瓶注明细胞名称，代数及日期。
2.2MEF的传代
1. 将T75瓶中的MEF培养基吸出。
2. 加入大约3ml胰酶，于37℃的CO2培养箱中放置3-5分钟
3. 取出瓶子，轻轻晃动，可以看见白色的细胞层开始从瓶子的底壁掉落。确保瓶盖是拧紧的。用手掌根轻拍瓶侧3-5次。在灯下观察细胞是否已从瓶子上脱落。
4. 加入同等体积（3ml）的MEF培养基，混匀，吹打几次以形成单细胞悬浮液。
▲Note: 这一培养基是包含血清的，将会完全抑制胰酶的活性。
5. 补加42mlMEF培养基到瓶子中，使总体积达到50ml，混匀。
6. 将上述细胞悬浮液均分至5个新的T75瓶子中，每瓶10ml。
7. 放在5％CO2培养箱中培养，逐日观察。
2.3MEF的冻存
1. 吸去培养液，加％胰酶至完全覆盖瓶底（以T75为例）。
2. CO2培养箱中孵育3-5分钟，不时轻拍瓶壁，使细胞层脱落。
3. 加入同等体积的MEF培养液中和胰酶，吹打混匀。
4. 将其转移至15ml离心管，用电子计数器进行细胞计数后，以1000rpm的速度离心5分钟。
5. 移去上清，用少量新鲜的MEF培养液重悬细胞沉淀。
6. 缓慢加入等量的MEF细胞冻存液（2x）并混匀。
7. 分装上述细胞悬液于2ml冻存管中，每管。
8. 在冻存管上注明细胞名称，代数，数目，冻存时间。
9. 将冻存管放到冻存盒中，-80℃冰箱过夜。
10. 最后将冻存管转移至液氮罐中以便长期保存。
2.4MEF的失活
1. MEF传代到3－5代时，当细胞铺满培养瓶后（以T75为例），加3ml ％胰酶，放入37℃的CO2培养箱孵育3-5分钟。
2. 加入同等体积的MEF培养液中和胰酶，用移液枪吹打几次以形成单细胞悬浮液。
3. 将所有细胞悬液混合到一个50ml离心管中，补加适量新鲜的MEF培养液。
4. 取上述细胞悬液，转移至新的15ml离心管中，用培养液稀释，混匀。
5. 用电子计数器计数细胞。
6. 将原来的50ml离心管封口，使用gama射线辐照仪，50－80戈雷辐照。
7. 辐照完后，以1000rpm的速度离心5分钟。
8. 移去上清，用适量新鲜的MEF培养液重悬细胞。用于培养人胚胎干细胞的饲养层细胞标准浓度是～30,000 cells/cm2。按照此标准铺板。具体铺板步骤请见3饲养层细胞的准备。对于暂时不用的细胞，将其冻存，需要时复苏。具体冻存步骤请见 MEF 的冻存。
3.饲养层细胞的准备
材料和仪器
CF-1小鼠胚胎成纤维细胞（MEF），货号MEF-CF1-01
成纤维细胞完全培养基，货号EFM-01
基质胶（Matrigel matrix），BD Pharmingen，货号356235
CO2培养箱，Thermo，HERA cell 240
Thermo-Fisher Finnpipette F3移液器和灭过菌的枪头
T25透气培养瓶，NUNC，货号156367
2 ml移液管，NUNC，货号159617
5ml移液管，NUNC，货号159625
10 ml移液管，NUNC，货号159633
电动移液器，Thermo Scientific Finnpipette C1，货号4580800
加入足量的基质胶均匀铺到瓶（或孔板或皿）底部，以能覆盖全部底部为准，譬如
T25透气培养瓶以超过为宜。
37℃培养箱放置至少30min。
从培养箱中取出瓶（或孔板或皿），轻轻推送板子将未被基质胶覆盖的地方再次覆盖，然后立即吸弃基质胶。
加入适量成纤维细胞完全培养基（37℃预孵育超过10min），譬如T25透气培养瓶以加入4ml为宜。
从液氮中取出冻存的失活过的MEF细胞，立即投入37℃水浴中，迅速解冻（1min之内）。
根据预实验将相应数量的饲养层细胞加到之前已经准备好的瓶（或孔板或皿）中，混
匀。推荐的饲养层细胞密度为3万cells/cm2。
Point
饲养层细胞需在ES/iPS细胞传代前两至三天准备。
饲养层细胞的密度最适宜是80－90％, 太密或是太稀疏都容易使干细胞分化。
请在铺被前先做预实验估算细胞的复苏存活率，以一个T25培养瓶计算，若存活
率为90%，则铺入的细胞量应为万。
▲Note: 饲养层细胞铺了10天之后推荐不再使用。
培养容器的类型基质胶体积
24-well
35mm
Flask
105 cells/ml）
4.ES/iPS细胞的复苏
材料和仪器
人类ES/iPS细胞（SiDSH -01, SiDSH -03），货号HIPS-01/03
人类胚胎干细胞完全培养基，货号HESM-01-500
CO2培养箱，Thermo，货号HERA Cell 240
Thermo-Fisher Finnpipette F3移液器和灭过菌的枪头
电动移液器，Thermo Scientific Finnpipette C1，货号4580800
T25透气培养皿，NUNC，货号156367
5ml移液管，NUNC，货号159625
15ml离心管，NUNC，货号366036
解冻人ES/iPS细胞，从液氮中取出冰冻的人类ES/iPS细胞冻存管，立即投入37℃水浴中快速的旋转以迅速解冻（控制在1min之内）。
▲Note: 水不要淹没瓶盖
当只有一片冰晶存在时，从水中取出冻存管。用消毒酒精棉将冻存管外壁擦拭一遍，以去除水缸中的微生物。
将细胞转移到一个预装有2ml人类胚胎干细胞完全培养基的15ml离心管中，混匀。200×g（1000rpm）, 离心5 分钟。
吸弃上清液。用4ml的人类胚胎干细胞完全培养基重悬细胞沉淀。
转移悬浮液到一个预铺有饲养层细胞的T25瓶中，补加人类胚胎干细胞完全培养基至总体积为5ml。
将瓶放入37℃的CO2培养箱中，观察细胞每天的生长情况。
Point
复苏的第二天无需更换培养液，从第三天起每天更换新鲜的人类胚胎干细胞完全培养基。
复苏后第5天左右可以看见微小的克隆出现，之后逐渐长大。
复苏后第10-12天传代，具体情况视ES细胞生长情况而定。
5.ES/iPS细胞的传代
材料和仪器
人类胚胎干细胞培养液（含bFGF 货号 HESM-01-500 ；不含 bFGF 货号 HESM-02-500）
Ⅳ型胶原酶（货号 M-001）
已经包被好饲养层细胞的培养瓶/板
Thermo-Fisher Finnpipette F3移液器和灭过菌的枪头
T25透气培养皿，NUNC，货号156367
5ml移液管，NUNC，货号159625
15ml离心管，NUNC，货号366036
电动吸引器
Point
当出现以下情况之一即可以进行细胞传代：
1． MEF滋养层细胞生长超过两周。
2．克隆太大，或太密集。
3．当培养的ES克隆中出现越来越多的分化。
人的ES细胞传代（以T25培养瓶为例）
从培养瓶中吸出旧的人胚胎干细胞培养液
立即加入3-4ml的Ⅳ型胶原酶到瓶中，温柔的摇晃培养瓶使之覆盖到所有的细胞。▲Note: Ⅳ型胶原酶需在37度预热。
将T25瓶重新放回37度培养箱中，放置约20min－30min。
消化期间可以处理预铺了饲养层细胞准备用来传代的新的培养瓶，处理如下：吸弃里面的成纤维细胞完全培养基，加入1ml人类胚胎干细胞培养液（不含bFGF）洗涤feeder（只要将瓶底盖过），吸弃，然后加入4-5ml新的人类胚胎干细胞完全培养基，以备传代。
待克隆消化下来后，取出培养瓶，将瓶中液体连同脱落的克隆转移到15ml离心管里。加入2ml的人类胚胎干细胞培养液（不含bFGF），混匀。
待干细胞团块沉降下来后，吸弃上清液。
加入2ml新鲜的人类胚胎干细胞培养液（不含bFGF）洗涤细胞（即吹打重悬），待细胞沉降下来后，吸弃上清。
加入2ml新鲜的人类胚胎干细胞完全培养基重悬细胞，并用移液枪吹打克隆到适合
大小，然后根据自己需要按比例传代。
Point：
在消化过程中，最好每隔10min拿出来观察一下，看是否已经开始消化。随着克隆的消化，克隆边缘部分卷起，当克隆大部分卷起，直至轻轻晃细胞就会脱落时，表明消化充分。注意：消化时间约为20－30min，根据经验，这一时间段可以将未分化的干细胞克隆消化下来，而分化的克隆就不会消化下来，所以，消化时间不宜过长，这样可以剔除分化的克隆。而如果消化不充分，会导致传代后的细胞结块。所以，要掌握好时间。
如果细胞不易沉降，则可以1000－1200rpm离心30sec－1min使细胞沉降。
传代比例通常为1：6或1：8。
传代后的注意事项：
1．传代后的第一天，不需更换新的培养液，从第二天起，每天换液。
2．传代周期为6－7days，但要视细胞状态而定，传代可以改善细胞状态。3．传代的前两至三天预铺feeder。
6.ES/iPS细胞的冻存
材料和仪器
人ES/iPS细胞（生长到可传代的状态，同上描述）
人胚胎干细胞培养基（货号： HESM-01-500）
Ⅳ胶原酶（货号M-001）
人胚胎干细胞冻存液（2x）（货号：HESFM-01）
15ml离心管，NUNC，货号366036
液氮罐，Thermo，货号CN50900
冰
镊子
Thermo F3移液器和灭过菌的枪头
2ml冻存管，NUNC，货号377267
冻存管架，NUNC，货号376589
Point：
人的胚胎干细胞可以在液氮中长期冻存。
为了得到人类胚胎干细胞的高存活率，在开始冻存步骤之前，准备好所有的材料和仪器。冻存管在使用之前应该在冰上预冷，且应该事先将必须的信息（如细胞的名称，传代次数，细胞数目，冻存日期等）标记在管子的标签上。
冻存步骤（以T25瓶为例）：
当细胞生长良好时，消化细胞（具体步骤同上述传代过程）。
将消化下的细胞洗涤两次。
用2ml新鲜的人胚胎干细胞培养基重悬细胞并吹打至传代大小。
待克隆沉降下来后，吸弃上清。
加入新鲜的人胚胎干细胞培养基重悬细胞
加入人胚胎干细胞冻存液（2x），快速混匀。
将上述细胞悬液转移至2ml冻存管中。
迅速将冻存管放入冻存盒中，-80℃冰箱过夜。
最后将冻存管转移至液氮罐中以便长期保存。
7.人类胚胎干细胞的无滋养层培养
材料与仪器
7.1人类胚胎干细胞条件培养基（CM）的收集
1.配制人类胚胎干细胞培养液。
2.培养瓶加入适量明胶（覆盖瓶底即可），放入5％CO
培养箱孵育30分钟左右。
2
3.吸掉明胶，将辐照过的饲养层细胞按照55,000 cells/cm2浓度铺板。
4.待细胞贴壁后，换人类胚胎干细胞培养液培养液（按照 ml/cm2)。
5.24小时左右开始收集培养液，之后每天收集，可持续收集7-10天。
6.CM可存放在-20℃冰箱中一个月。
7.2无饲养层人胚胎干细胞系的培养及传代
1.在培养瓶中加入适量matrigel（覆盖瓶底即可）放入培养箱孵育 1小时左右。
2.吸去 matrigel，将饲养层培养的人胚胎干细胞传代洗涤后，最后细胞转移到此培养瓶中，加CM培养。
培养箱消3.在人胚胎干细胞克隆生长5天左右传代。吸去培养液，加 dispase 5％CO
2
化至克隆大部分脱壁。
4.加适量培养液，用移液管轻轻吹打使克隆脱壁。
5.将细胞悬液转移到15ml离心管中，用移液管吹打几次使细胞克隆至适当大小。
6.吸取适量混匀的悬液至小离心管中，离心沉淀，用胰酶消化成单细胞，加培养液中和，细胞计数。
7.以1000rpm的速度离心5分钟。
8.吸去上清，加CM培养液重悬细胞。
将细胞接种到已铺好matrigel的培养瓶中，9.按照～90,000–170,000 cells/cm
2
培养箱培养。补加适量CM。轻轻晃动培养瓶，使克隆均匀分布在瓶底，放入5％CO
2
8.拟胚体的形成
材料与仪器
拟胚体（embryonic body,EB）来源于多能干细胞，且由多种分化的细胞类型组成。它可以模拟胚胎早期发育的过程，是一种很好的在体外研究早期发育中细胞和分子间作用的模型。
拟胚体的制备：将得到的iPS细胞系扩增培养后，按正常传代步骤消化下来，洗涤去除MEF细胞，将细胞吹打至小团块（比正常传代大小再小一些），然后悬浮培养在MEF培养液中。3天后换第一次液，之后每2-3天换液一次，直至收集。收集EB后用TRIZOL裂解，抽提RNA, 反转录，通过real-time PCR的方法（见real-time PCR 检测的具体protocol）检测各胚层marker的表达情况。
9.胚胎干细胞全能性的鉴定
胚胎干细胞全能性的鉴定主要包括以下几个方面：
碱性磷酸酶活性检测
干细胞表面marker的免疫染色检测
干性因子的去甲基化分析
干细胞内源基因的表达分析
端粒酶活性检测
核型检测
拟胚体形成
畸胎瘤形成实验
下面分述各种鉴定的方法以及详细的操作步骤：
碱性磷酸酶活性检测
材料
PBS buffer
4% Paraformaldehyde
Alkaline Phosphatase Detection Kit：Sidansai，货号AP-1kit
1 x Rinse Buffer . TBST: 20mM Tris-HCl, pH , 0.15M NaCl, % Tween-20) 碱性磷酸酶染色步骤：
a.Aspirate media and fix ES or iPS cells with a fixative . 4%
Paraformaldehyde in PBS) for 1-2 minutes. Note: Do not overfix.
Fixing cells longer than 2 minutes will result in the inactivation of alkaline phosphatase.
b.Aspirate fixative and rinse with PBS buffer.
c.Aspirate and rinse with 1 X Rinse Buffer. DO NOT allow wells to dry.
d.Prepare reagents for Alkaline Phosphatase staining (BufferA: BufferB:
BufferC=100:38:28)
e.Add enough stain solution to cover each well . for a well of a 24-well
plate). Incubate in dark at room temperature for 15 minutes.
f.Aspirate staining solution and rinse wells with 1 X Rinse Buffer. Cover
cells with 1 X PBS to prevent drying and then count the number of
colonies expressing AP (red stem cell colonies), versus the number of differentiated colonies (colorless).
干细胞表面marker的免疫染色检测
Stage-specific embryonic antigen-3(SSEA3)
Stage-specific embryonic antigen-4(SSEA4)
Tumor-related antigen-1-60(TRA-1-60)
Tumor-related antigen-1-81(TRA-1-81)
OCT4
SOX2
Nanog
表达于小鼠ES/iPS细胞中的标志物包括：
Stage specific embryonic antigen-1(SSEA-1)
OCT4
SOX2
Nanog
免疫染色步骤：
1. 首先把细胞固定在4％多聚甲醛（4％PFA）中，室温放置30min;
2. 在无水乙醇中浸泡两次，每次20min（或3次，10min/次）
注意：此步骤仅限于核蛋白，如Oct4，Nanog或Rex1等，不能用于膜蛋白如SSEA 和Tra等
3. 将上述溶液吸干，先用1X PBS洗涤一次，再用抗体稀释液（%BSA和%TritonX100溶
于PBS）洗涤两次；
4. （此步骤可不操作，进行此步骤是为了更好的封闭非特异反应）用封闭液（含
1%BSA+4% normal serum+%TritonX100的PBS溶液）封闭细胞；
5. 将一抗稀释在抗体稀释液中，加到样品上，室温2h或4度放置过夜；
6. 用PBT（%TritonX100）洗涤细胞3－5次；
7. 将二抗稀释在抗体稀释液中，并加到细胞样品上，室温放置1h;
注意：从步骤7开始，样品要注意避光！
8. 用PBT洗涤3次；
9. 将DAPI (1mg/ml in PBS)母液以1:1000 用PBS稀释, 室温放置5min;
OR: 将JASMIN（hochest）母液以1:1000用PBS稀释，室温放置5min;
10. 用PBS洗涤5min,两次；
11. 再用4％多聚甲醛室温固定30min；
12. 最后再用PBS洗涤两次，每次5min.
干性因子的去甲基化程度分析
Bisulphite Squencing 法分析甲基化状态
（一）Bisulphite 处理基因组DNA
1、将基因组DNA置于冰上，液体石蜡冰上预冷。
2、给每个样品准备6个Ep管，每管加300ul液体石蜡。
3、准备样品：
1）每个样品取210ng的DNA，稀释到21ul。
2）新配2M的NaOH（用超纯水配，1.6g NaOH/20ml水），每管样品中加4ul（使之终浓度为0.3M）NaOH。
3）50℃，15min。
4、准备2％低熔点argrose：0.02g/ml，用双蒸水配。100℃ 5min，之后置于50℃待用。
5、向3中的DNA液中加入50ul 2％低熔点argrose，混匀（保持50℃）。
6、吸取上述argose和DNA混合液，加10ul/管于第二步预冷的矿物油中。冰上至少30min，使beads坚硬。
7、向beads中加入500ul 2.5M Sodium metabisulphite （新配），摇匀，使beads 位于分层上。离心甩一下。
8、50℃避光反应4h～12h，不超过16h～18h（一般12h）。
附：Sodium metabisulphite的配制总体积：20ml
I. Hydroquinone 220mg
O 2ml
H
2
50℃避光溶解（黄红色）
II. Sodium bisulphate 7.6g
O 8ml
H
2
2M NaOH 5ml
50℃避光溶解，每隔10min晃一次，溶30min
I，II分别配好后，在暗处混合，混合后颜色变浅，降为室温即可使用。
终止反应，洗脱：
电子基础知识培训资料-----------------------作者：
-----------------------日期：
电子知识培训资料 一、常用元器件的识别 1、电阻 电阻在电路中用“R”加数字表示，如：R1表示编号为1的电阻。电阻在电路中的主要作用为分流、限流、分压、偏置等。常用电阻的种类有碳膜电阻、金膜电阻、水泥电阻、陶瓷电阻、贴片电阻等。 1）参数识别：电阻的单位为欧姆（Ω），倍率单位有：千欧（KΩ），兆欧（MΩ）等。 换算方法是：1兆欧=1000千欧=1000000欧。 电阻的参数标注方法有3种，即直标法、色标法和数标法。 A、数标法主要用于贴片等小体积的电阻，数标法一般为三位数，前两位代表有效数，后一位 代表倍率。如上图所示的贴片电阻102表示1 KΩ。 B、色环标注法使用最多。有四色环电阻、五色环电阻（精密电阻），色环标注法的前两条色环 (四色环电阻)或前三条色环（五色环电阻）代表有效数字，倒数第二条代表倍率，最后一 条代表误差。如:上图所示的色环电阻，它的前三条色环棕、绿、黑表示有效数字150，倒数第二条金色表示倍率X0.1，它的阻值为150 X0.1=15Ω，最后一条棕色表示误差为±1%。 2 颜色有效数字倍率允许偏差（%） 银色X0.01 ±10 金色X0.1 ±5 黑色0 +0 棕色 1 X10 ±1 红色 2 X100 ±2 橙色 3 X1000 黄色 4 X10000 绿色 5 X100000 ±0.5 蓝色 6 X1000000 ±0.2 紫色7 X10000000 ±0.1 灰色8 X100000000 白色9 X1000000000
消防基础知识 “火”最早只被人们认为自然灾害的一种，但正是因为“火”的使用，才真正加速了我们的祖先的进化过程。然而，人们从怕火、用火至今“火”造成的灾害性事件从未停止过。时至今日，在物质文明高度发达的年代，直接用火的机会愈来愈少，但从全世界范围来看，火灾非但没有减少，反而呈逐年上升之势。有精品财会，给生活赋能 些悲观主义人士曾发出这样的感叹，称“人类文明付出的代价”。 这种说法虽过于悲观，但有一定道理，那就是现在的生产生活条件太多的火灾的必然性。 不过，可喜的是随着科技的进步，人们对“火”的认识正在不断加深，防火、灭火的技术产品也在不断完善，效率也越来越高。 一、燃烧与火灾的基本知识 1、什么是燃烧？ 燃烧是可燃物与氧化剂作用发生的放热反应，通常伴有火焰、发光和（或）发烟的现象。 2、燃烧有几种类型？ 四种类型：闪燃、着火、自燃、爆炸 3、燃烧形成的要素和条件是什么？ 可燃物、助燃物和引火源。 4、燃烧的本质是什么？ 自由基的连锁反应。 5、什么是火灾？ 在时间和空间上失去控制，对财物和人身造成一定损害的燃烧现象，叫火灾。 6、火灾造成人员伤亡的主要原因是什么？ 烟熏、火烧、跳楼等。 7、根据物质及燃烧特性划分，火灾可分为哪几类？ A类火灾：是指固体物质火灾。如：木材、棉、毛、麻、纸张、塑料制 品、化学纤维等火灾。 B类火灾：是指液体火灾和熔化的固体物质火灾。如：汽油、柴油、酒
精、植物油、变压器油、各种溶剂、沥青、石蜡等火灾。 C 类火灾：是指气体火灾。如：天然气、氢气、氨气等火灾。 D类火灾：是指金属火灾。如：钾、钠、铝、镁及合金材料等火灾。 电气类火灾 二、燃烧知识在消防工作中的运用 1、怎样控制火灾？ 根据物质燃烧原理，消除燃烧的三个基本条件中的一个或两个，以及限制其影响等而采取的相应措施。 2、初期火灾怎样扑救？ 使用灭火器对准火焰根部喷射，随着火势减小逐步靠近，直至火被扑灭。 3、灭火的方法有几种？ 冷却法、窒息法、隔离法、抑制法。 4、常用灭火器有哪几种？ 水、泡沫、干粉、二氧化碳、卤代烷灭火剂等类。 三、火场逃生基本知识和技能 1、建筑物内人员安全疏散一般要经历哪几个阶段？ 疏散路线一般可分为四个阶段：第一阶段从着火房间内到房间门，第二阶段是公共走道中的疏散，第三阶段是在楼梯间内的疏散，第四阶段为出楼梯间到室外安全区域的疏散。这四个阶段必须是步步走向平安，以保证不出现“逆流”。疏散路线的尽端必须是安全区域。疏散过程中不能乘坐电梯。 2、疏散通道的要求有哪些？ 疏散通道应保证其耐火性能；走道中的墙面、顶棚、地面的装修应符合《建筑内部装修设计防火规范》要求；疏散走道内不应设置阶梯、门槛、门垛、管道、踏步等突出物，以免影响疏散；疏散走道内不应堆放物品，以免影响疏散的通畅；疏散走道内应有火灾事故照明和疏散指示标志。 3、疏散注意事项有哪些？ 疏散的人员要听从引导沿最近的消防楼梯和消防通道撤离，严禁乘坐电梯；烟雾较大时，采取低位行走，用毛巾手帕等织物捂住口鼻，减少烟气进入呼吸道引起窒息；并避免因拥挤和人流堵塞造成人员伤害。
电子元件基础知识培训 一、电阻 1、电阻的外观、形状如下图示： 2、电阻在底板上用字母R （Ω）表示、图形如下表示： 从结构分有：固定电阻器和可变电阻器 3、电阻的分类： 从材料分有：碳膜电阻器、金属膜电阻器、线绕电阻器、热敏电阻等 从功率分有：1/16W 、1/8W 、1/4W(常用)、1/2W 、1W 、2W 、3W 等 4、电阻和单位及换算：1M Ω(兆欧姆)＝1000K Ω（千欧姆）＝1000'000Ω(欧姆) 一种用数字直接表示出来 5电阻阻值大小的标示 四道色环电阻 其中均有一 一种用颜色作代码间接表示 五道色环电阻 道色环为误 六道色环电阻 差值色环 四道色环电阻的识别方法如下图 五道色环电阻的识别方法如下图 常用四道色环电阻的误差值色环颜色 常用五道色环电阻的误差值色是 是金色或银色，即误差值色环为第四 棕色或红色，即第五道色环就是误 道色环，其反向的第一道色环为第一 差色环，第五道色环与其他色环相 道色环。 隔较疏，如上图，第五道色环的反 向第一道即为第一道色环。 四道色环电阻阻值的计算方法： 阻值＝第一、第二道色环颜色代表的数值×10 即上图电阻的阻值为：33×10＝33Ω（欧姆） 第三道色不订所代表的数值 0
五道色环电阻阻值的计算方法： 阻值＝第一、二、三道色环颜色所代表的数值×10 即上图电阻阻值为：440×10＝4.4Ω（欧姆） 7、电阻的方向性：在底板上插件时不用分方向。 二：电容 1、 电容的外观、形状如下图示： 2、 电容在底板上用字母C 表示，图形如下表示： 从结构上分有：固定电容和可调电容 3电容的分类 有极性电容：电解电容、钽电容 从构造上分有： 无极性电容：云母电容、纸质电容、瓷片电容 4、 电容的标称有容量和耐压之分 电容容量的单位及换算：1F ”(法拉)＝10 u F(微法)＝10 pF （皮法） 5、 电容容量标示如下图： 100uF ∕25V 47uF ∕25V 0.01 uF 0.01uF ∕1KV 0.022uF ∕50V 上图的瓷片电容标示是用103来表示的，其算法如下：10×10＝0.01 uF ＝10000 pF 另电容的耐压表示此电容只能在其标称的电压范围内使用，如超过使用电压范围则会损坏炸裂或失效。 6、 电容的方向性：在使用时有极性电容要分方向，无极性不用分方向。 三、晶体管 （一）晶体二极管 1、晶体二极管外形如下图： 第四道色不订所代表的数值 -2 6 12 3
会计基础知识培训 培训目的： 为了提高业务部及维护部的会计专业知识；为了更好地加强与帐务员及客户Z间的沟通，为了提高服务质量。 培训对象： 针对于各个分公司员?工。 培训内容： 对于新的客户首先要掌握哪些？ 二 、 维护人员需要客户提供哪些做帐资料。 三、银行帐户怎样走款才是合理的： 四 、 怎样合理避税？从哪几方面避税？ 五 、 帐簿的设置 六、怎样计算毛利率？为什么要核算毛利率？税负率与毛利率的关 系？ 七、会计基础知识（主管讲课内容） 会计基础知识培训内容 一、对于新的客户首先要掌握哪些？ a）对于业务员来说通过电话联系新的客户时，首先要用专业术语了解公司的基本情况。具体包括：公司的位置、公司完善和健
1. 全的财务制度、公司的纳税情况等。只有掌握了 这些才能首先使客户认为你是专业人员，才能掌握到客户 是否有财务和税务这方面的需求，有针对性地说服客户。 b ）对于维护人员来说，不仅仅要掌握以上儿方面，更重要的 是要了解公司的纳税情况及帐务情况。所谓纳稅情况是 扌旨，公司的纳 税期限、隶属哪个区哪个科室、公司的纳税 税种有哪些。维护人员要做到从税务登记证可以判断公司 的纳税稅种有哪些。所谓帐务情况，是指公司的销售收入有 多大，纳税额有多大,一般纳税人的税负率是多少，是否达到 税务局规定的税负率（不低于千分之八）公司经营项0有哪 些（即买的产品是什么，服务的项H 是什么）收入与成本是 否能配比。（进货发票是否缺）公司的银行帐是否混乱。等 等这些都是维护人员所要了解的。 二、维护人员需要客户提供哪些做帐资料。 A.需要客户准备的资料（新成立的公司） 成立公司时的投资款单，若投资款单丢失可提供验资报告 上的投资款单复印件。 2?银行对帐单 3. 银行单据（公司基本银行所有发生的银行单据，包括收款、付
成套电器设备安装接线基础知识培训教材 培训教材 成套安装接线基础知识 作为一个从事成套电气设备行业的员工：要做好本职工作，他必须要掌握有关成套电器设备在用电配电系统中起的作用。同时懂得一些技术知识及最基本的装配、接线技能要求，做到安全生产、文明生产。要学会看懂、领会有关的图纸。图纸是工程技术界的共同语言，设计部门用图纸表达设计思想意图；生产部门用图纸指导加工与制造；使用部门用图纸指导使用、维修和管理；施工部门用图纸编制施工计划、准备材料组织施工等。 从事成套设备行业的员工要想做好本职工作，就必需要树立文明生产的观念。 在日常生产过程中处处以有关工艺要求来提高质量意识，明确质量就是企业的生命的重要性，要讲究工作效益，创造一个良好的工作环境，有了一个舒畅的工作环境，才能更好地提高工作效益，也就是要处处注意周围的环境卫生，同时在日常的工作中，同事之间要互相配合、互相尊重、互相关照；在技术方面要相互交流经验，不断完善自己，养成对完工工作任务做到自检、互检、后报检的良好工作习惯，来确保质量，为企业创造更好的效益。 要想做好本职工作：（1）每个员工必须做到应该知道什么？熟悉什么？能看懂什么？就成套电器产品而言，每个员工应该知道产品的结构形式、用途；应该熟悉产品的性能、内部的结构、主要的技术参数；应该看懂系统图（一次方案图）、平面布置图、原理图、二次接线安装图。（2 ）每位员工必须知道什么是三按生产： 按图纸生产；按工艺生产；按技术规范生产。质量管理方面“五不”，①材料不合格不投料；②上道工序不 合格不流入下道工序；③零件、元器件不合格不装配；④装配不合格不检验；⑤检验不合格不出厂。在日常工作中要有一个比较合理的、完整的装配接线计划。电力的生产、输送、分配和使用，需大量的各种类型的电器设备，以构成电力发、输、配的主系统。这些设备主要是指发电机、变压器、隔离开关、断路器、电压互感器、电流互感器、电力电容器、避雷器、电缆、母 线等。它们在电力系统中通常称为一次设备，把这些设备连接在一起组成的电路称为一次接线，也称主接线， 也就是一次方案回路。为了使电力生产、传输、分 配和使用的各环节安全、可靠、连续、稳定、经济、灵活的运行，并随时监视其 工作情况，在主系统外还需装置相当数量的其它设备，如测量仪表、自动装置继电保护远动及控制信号器具等，这些设备通常与电流、电压互感器的二次绕组直流回路或厂用所用的低压回路连接起来，它们构成的回路称为二次回路，接线称二次接线。描述二次回路的图纸称为二次接线或二次回路（其中包括辅助回路）图。 二次接线的图纸一般有三种形式，即原理图、原理展开图和安装接线图（我们通常所用的是二次接线图）。 在二次接线图中所使用的图形符号和文字符号，它不但用于代表二次接线图中的各电器设备与元件的所在位置，而且反映它所发挥的作用。在二次接线图中，断路器、隔离开关、接触器的辅助触头及继电器的触点，所表示的位置是这些设备在正常状态的位置。所谓正常状态就是指断路器、隔离开关、接触器及继电器处于断路和失电状态。所谓常开、常闭触点是指这些设备在正常状态即断路或失电状态下辅助触点是短开或闭合 的。 二次接线的原理图是用来表示继电保护测量仪表、自动装置的工作原理的。通常是将二次接线和一次接线中与二次接线有关部分画在一起。在原理图上，所有仪表、继电器和其他电器都是以整体形式表示的，其相互联系的电流回路、电压回路、直流回路都是综合在一起，而且还表示有关的一次回路的部分。这种接线图的特点是能够使看图者对整个装置的构成和动作过程有一个明确的整体概念，
ISO9000质量管理体系基础知识培训教材 第一章重要术语
1.过程process 一组将输入转化为输出的相互关联或相互作用的活动。 注1：一个过程的输入通常是其他过程的输出。 注2：组织为了增值通常对过程进行策划并使其在受控条件下运行。 注3：对形成的产品是否合格不易或不能经济地进行验证的过程，通常称之为“特殊过程”。 2.产品product 过程的结果。 注1：有下述四种通用的产品类别： ——服务（如运输）； ——软件（如计算机程序、字典）； ——硬件（如发动机机械零件）； ——流程性材料（如润滑油）。 许多产品由不同类别的产品构成，服务、软件、硬件或流程性材料的区分取决于其主导成分。例如：外供产品“汽车”是由硬件（如轮胎）、流程性材料（如：燃料、冷却液）、软件（如：发动机控制软件、驾驶员手册）和服务（如销售人员所做的操作说明）所组成。 注2：服务通常是无形的，并且是在供方和顾客接触面上至少需要完成一项活动的结果。服务的提供可涉及，例如： ——在顾客提供的有形产品（如维修的汽车）上所完成的活动； ——在顾客提供的无形产品（如为准备税款申报书所需的收益表）上所完成的活动； ——无形产品的交付（如知识传授方面的信息提供）； ——为顾客创造氛围（如在宾馆和饭店）； 软件由信息组成，通常是无形产品并可以方法、论文或程序的形式存在。 硬件通常是有形产品，其量具有计数的特性。流程性材料通常是有形产品，其量具有连续的特性。硬件和流程性材料经常被称之为货物。 注3：质量保证主要关注预期的产品。 3.质量quality
一组固有特性满足要求的程度。 注1：术语“质量”可使用形容词如差、好或优秀来修饰。 注2：“固有的”（其反义是“赋予的”）就是指在某事或某物中本来就有的，尤其是那种永久的特性。 4.质量管理quality management 在质量方面指挥和控制组织的协调的活动。 注：在质量方面的指挥和控制活动，通常包括制定质量方针和质量目标以及质量策划、质量控制、质量保证和质量改进。 https://www.doczj.com/doc/ae13184042.html,中国最庞大的管理资料库下载 5.要求requirement 明示的、通常隐含的或必须履行的需求或期望。 注1：“通常隐含”是指组织、顾客和其他相关方的惯例或一般做法，所考虑的需求或期望是不言而喻的。 注2：特定要求可使用修饰词表示，如产品要求、质量管理要求、顾客要求。 注3：规定要求是经明示的要求，如在文件中阐明。 注4：要求可由不同的相关方提出。 第二章ISO9000介绍 ISO是国际标准化组织的简称，英文：International Organization for Standardization。 ISO的日常办事机构是中央秘书处，设在瑞士的日内瓦。它现有117个成员，包括117个国家和地区。 ISO是世界上最大的国际标准化组织之一。它成立于1974年2月23日。第一任主席：Howard Cooney先生(美国)。ISO的前身是1928年成立的“国际标准化协会国际联合会”（简称：ISA）。 ISO的宗旨是：在世界上促进标准化及其相关活动的发展，以便于商品和服务的国际交换，在智力、科学、技术和经济领域开展合作。 ISO9000不是指一个标准，而是一族标准的统称，它包括： 1.ISO9000：2000质量管理体系基础和术语； 2.ISO9001：2000质量管理体系要求
基础会计学习心得一：基础会计学习心得 学习基础会计要以教材为主认真学习每一章节的内容。首先，要了解教材的总体结构。其次，要准确地理解基本概念，掌握基本原理和原则。本课作为一门专业基础课，有关的基本概念很多，对于这些概念一定要准确地理解其含义。只有基本概念把握准确了，才能够更好地理解和掌握其他相关内容。 对于基本原理、原则和基本公式、固定名词，一方面要掌握其内容，另一方面要能够灵活运用。如复式记账原理、借贷记账法的记账规则、“资产＝负债＋所有者权益”的会计恒等式等，在编制会计分录和试算平衡表以及编制会计报表等业务中都有体现。 如借贷记账法的记账规则是“有借必有贷，借贷必相等”，在学习时不仅要了解其规则，同时还要了解为什么会出现此规则，此规则在具体操作中如何运用。 学习基础会计中名词解释主要是解释一些基本概念的含义，大多数的概念都是经过了反复的理论探讨而形成的，回答时力求准确，不能望文生义和似是而非。例如名词“预提费用”，有的学生认为“尚未发生预先提取出来，计入成本费用，在以后?段时间内分期摊销的费用。”这样解释“预提费用”有两个错误：一是“尚未发生”。会计核算的基本原则之一是真实性原则，要求会计核算要以实际发生的经济业务为核算内容，既然“尚未发生”，也就不需要核算。除了一些特殊事项如坏帐损失在没有实际发生时可以预计外，对尚未发生的经济业务是不能核算的。二是混淆了“预提费用”和“待摊费用”的概念。待摊费用是在发生一次支付款项后，按其受益期在本期和以后各期分期摊销，而预提费用则是已经发生了耗费而尚未支付的款项，因此不存在对这笔支出的分期摊销问题。预提费用的真实含义是本期已经发生了耗费，应由本期负担，但尚未支付，按照权责发生制原则预先提取计入成本费用的预用。 在名词解释中较有代表性的另一个问题是望文生义，没有很好地理解其含义。例如“借”和“貸”，这两个字在运用时虽具有的含义并不是生活当中所说的借贷，应该全面理解，不能望文生义。 理论联系实际，加强操作练习。由于本课程的实践性较强，而其理论又比较抽象，特别是对于从未接触过会计工作的同学来说，更是感到难以理解和掌握。因此，在学习中一定要注重理论联系实际，同时加强操作练习，培养动手能力。一定要认真完成布置的作业，通过练习加深对基本原理和基本方法的理解和掌握，否则就很可能出现看书时好象是懂了，但一做题就不会的情况。 完成一定量的作业习是学好本门课程的关键，因为基础会计涉及到大量的业务计算,只有通过练习才能理解并掌握。
DIP制程基础知识培训教材 DIP培训项目：一、手插件的原则与标准二、电子元件的单位及换算关系三、电子元件的识别四、电子元件的插件标准五、插装零件成型作业要求六、插件/补焊/后焊的作业要求七、无铅/恒温烙铁使用与管理名次解释：DIP：dual in-line package 双内线包装(泛指手插件) 一、DIP Manual Assembly Rule 1.双手并用:需左右手交替作业.如预备动作:当左手插件,右手要做好插件准备(极性识别),可以随时将零件插入,反之亦然,尽量缩短等待的间. 2.插件顺序原则: A、零件由小至大插件（可防止大零件挡手）. B、水平方向由右至左插件（输送带由左至右流线）. C、垂直方向由上至下插件（可避免手碰到下方零件） 3.外观相同但规格不同之零件,不排在同一站或相邻站. 4.含固定脚之零件,需于前3站插件完毕（防止引起跳件）. 5.有方向性零件之插件原则: A、方向相同之零件排于同一站. B、不同方向之零件不排在同一站. 6.PCB 板上无印刷及标识、防呆孔时,将正确插件及零件位置图片作标识. 7.同一站内零件种类（盒）以不超过五种为原则（可保持零件盒在正常作业范围内）. 8.零件盒摆放位置顺序需与双手动作顺序相符. 9.分开作业:左右手的零件要分开,不可右手抓左边零件槽的零件、左手抓右边的零件. 10.排站时,以一人插6-8 颗零件时，效率最佳. 最大工作区域 装配点 最佳工作区域 作业员插件标准作业范围：最佳工作范围：以肩算起水平180 度47.4CM. 正常工作范围：以肩算起水平180 度57.0CM. 最大工作范围：以肩算起水平180 度72.9CM. 二、生产中所用电子元件的单位及换算关系电阻：1Mohm=103Kohm=106oh 电容：1F=106μF=109nF=1012PF 电感：1H=103mH=106μH 电压：1KV=103V=106mV 电流：1A=103mA=106μA频率：1MHz=103KHz=106Hz 三、色环电阻中颜色与数值的对应关系 黑0 100 棕 1 101 ±1% 红 2 102 ±2% 橙 3 103 黄 4 104 绿 5 105 兰 6 106 紫7 1 07 灰8 108 白9 109 金银 有效值倍率误差 10-1 ±5% 10-2 ±10% ±0.5% ±0.2% ±0.1% 1.当为四环电阻时前二环为有效数字，第三环为倍乘数，第四环为误差，且误差只有金银两种。 2.当为五环电阻时，前三环为有效数字，第四环为倍乘数，第五环为误差，且误差有棕、红、绿、兰、紫、金、银。四、常用电阻、电容误差经常采用字母来表示：F：±1% J：±5% K：±10% M：±20% Z：+80%-20% 五、常用元件的符号表示方法：电阻：R 电容：C 电感：L 二极管：D 三极管：Q 集成电路：IC（U）晶振：Y或X 继电器：K 变压器：T 六、SMD 元件规格0603 、0805 、1206 等均以英制表示，如：0805 表示长 为0.08 英寸，宽为0.05 英寸。七、生产中常用有极性元件：1、电解电容2、钽电容3、集成电路4、二极管5、三极管6、继电器7、变压器8、排阻（DIP）1、电容（Capacitor）元件符号为C。电容单位为法：PF、M F、UF、NF、F 电容的容量换算关系：1F=103MF=106UF=109NF=1012 PF 2、分类：电解电容(有极性) 钽电容(有极性) 瓷片电容(无极性)
第一章总论第一节会计概述 一. 会计的概念 会计是人类社会生产经营活动进展的产物。 (一)会计的概念：会计是以货币为要紧计量单位，运用一系列专门方法，核算和监督一个单位经济活动的一种经济治理工作。(选择题) (二)会计的特点： 1. 以货币为要紧计量单位 2. 以凭证为依据 3. 所提供的会计信息具有完整性，连续性，系统性 (三)会计的分类：
会计按其报告对象的不同，又有财务会计与治理会计之分。 财务会计侧重于过去的信息，为外部有关各方提供所需数据;治理会计侧重于以后，为内部治理部门提供数据。 二会计的差不多职能 能包括，会计监督两个方面： (一) 进行会计核算 会计核算职能是指会计以货币为要紧计量单位，通过对特定主体的经济活动进行记账，算账和报账，为有关各方提供提供会计信息的功能。会计核算职能也称反映职能，是会计最差不多的职能，它贯穿经济活动的全过程。 1. 进行会计核算须经历的四个环节 (1) 确认 (2) 计量 (3) 记录 (4) 报告(最终环节)
2. 会计核算的具体表现形式： (1) (2) 算账 (3) 报账 4. 会计核算中运用的七种方法： (1)设置科目和账户 (2)复式记账 (3)填制记账凭证 (4)登记会计账簿 (5)成本计算 (6)财产清查 (7)编制财务会计报告 (二) 实施会计监督
会计的监督职能也称操纵职能，是指会计人员在进行会计核算的同时，对特定主体经济业务的合法性，合理性进行审查。 (三) 关系 会计核确实是会计监督的基础，没有核算提供的各种信息，监督就失去了依据;而会计监督又是会计核算质量的保障。 除上述差不多职能外，会计还具有预测经济前景，参与经济决策，进行经济操纵和评价经营业绩等功能。 三会计对象 是指会计核算和监督的内容。凡是特定主体能够以货币表现的经济活动，差不多上会计对象。以货币表现的特定的经济活动，通常又称为价值运动或资金运动。 企业资金运动表现为资金的投入，资金的运用和资金的退出三个过程。 资金的投入包括企业所有者投入的资金和债权人投入的资 金两部分。
冲压设备基础知识培训教材 压力机机械结构原理 一：压力机的种类 冷冲压用压力机主要分为：曲柄压力机，螺旋压力机（摩擦压力机），多 工位自动压力机，冲压液压机，冲模回转头压力机，高速压力机，精密冲裁压力机，电磁压力机等。钣金厂所用的压力机主要是曲柄压力机。 二：曲柄压力机的工作原理和特点 曲柄压力机主要是通过曲柄机构增力和改变运动形式（将旋转运动变成直线往复运动）。它主要是利用飞轮来储存和释放能量，使压力机产生工作压力来完成冲压作业。 曲柄压力机有曲拐式、曲轴式、偏心齿轮式等几种。 曲柄压力机一般由于曲轴、曲拐、偏心齿轮在设计加工时就确定了其偏心距，所以机床的工作行程是不可改变的。 三：曲柄压力机的形式和用途 1.通用冲床：适用于多种冲压工序，如冲裁、浅拉伸\弯曲和压印等。 2.拉伸冲床：有上传动和下传动之分，单动、双动、三动等拉延冲床。 3.专用冲床：用来专门冲压某个复杂零件用的冲床。 4.精冲冲床：专门用于冲裁精密零件的冲床。 5.精压机：用于精密挤压、校平、压印等。 6.高速冲床：多用于生产大批量制品自动成形作业。 四：曲柄压力机的构成 冷冲压用曲柄压力机的结构除曲轴形式（曲拐式、曲轴式、偏心齿轮式）有差异，其余部份基本相似，曲柄压力机一般由以下几部份组成： 1.工作机构：曲柄连杆机构，由曲轴、连杆、滑块组成。 2.传动系统：包括皮带传动、齿轮传动等机构。 3.操纵系统：离合器—制动器等。 4.支承部件：机身结构。 5.能源系统：电动机、飞轮。 6.除上述部份外，还有多种辅助装置，如润滑系统，保险装置，气垫等。五：压力机各组成部份的构成和作用说明 1.机身：机身是将压力机所有的机构联结起来，并保证全机所要求的精度 和强度。一般由床身、底座、工作台，立柱、上横梁等组成。有开式结构和闭式结构。 2.传动轴和曲轴：电动机通过皮带把能量传递给飞轮，再通过传动轴经小 齿轮、大齿轮传给曲轴并经曲轴、连杆，将曲轴的旋转运动变成滑块的直线往复运动。 3.连杆：连杆由上下轴瓦装在曲轴上，下端与滑块相连。是旋转运动与直
会计凭证、账簿及会计核算实务 1.会计确认与会计计量。 会计核算的实质就是对经济活动进行确认、计量、记录和报告，这也是会计核算工作的四个环节。对于企业发生的各种经济活动，首先要确认是否属于会计核算系统应该而且能够反映的内容，其次要确定用什么价值标准进行计量，第三是要对这些应该反映的经济活动用恰当的计量标准在一定的载体(如会计凭证、帐簿)中加以记录，最后是要定期地对已记载的各种经济活动信息进行加工汇总，提出报告，以满足各有关方面了解企业财务状况和经营成果的需要。 会计对象要素的确认，重点是理解和掌握资产、负债、所有者权益以及收入、费用和利润等各要素的概念及其特征。会计事项处理的两种标准──收付实现制和权责发生制，也是需要认真理解和掌握的重要基本问题。 2.资产、费用、成本、收入、利润、负债以及所有者权益的确认与计量。 教材中对这些问题用了较大篇幅来介绍，其中对于各要素所属具体项目的确认与计量的标准介绍的非常详细，这些内容对于初学的同学们来说掌握起来难度较大，而且似乎也可以放到后面的《财务会计》课程中去学习，因此我认为这里同学们应主要注意掌握各要素的核算方法，把教材中的例题真正理解了，并多做一些相关的练习题。 1.会计凭证。 学习这一章除了理解会计凭证的意义和作用以外，我认为主要有这样几个问题同学们需要注意掌握：(1)会计凭证的种类。会计凭证的种类繁多，各种凭证具有各种不同的格式和用途，同学们要在理解其各自含义的基础上注意它们的区别。如果有条件的话，可以找一些各种凭
证的实物来对照一下，增加一些感性认识。(2)原始凭证、记账凭证的填制方法及其审核的内容。这里涉及到一些会计操作技术规范，同学们一定要认真掌握。 2.会计凭证的作用 会计凭证是记录经济业务、明确经济责任，按一定格式编制的据以登记会计账簿的书面证明。会计凭证在会计核算工作中居于基础地位。填置和审核会计凭证，对于如实反映和有效监督经济业务，加强经济管理具有重要作用：(1)反映经济业务，提供记账依据；(2)明确经济责任，推行经济责任制；(3)监督经济业务，保护财产完整和合理使用。 3.原始凭证的基本内容 原始凭证的基本内容一般包括：(1)凭证的名称；(2)受证单位的名称；(3)填制凭证的日期； (4)经济业务的具体内容；(5)经济业务的金额（或数量与金额）；(6)凭证应具备的签字或盖章；(7)凭证的编号；(8)凭证的联次说明；(9)凭证的附件。 4.原始凭证的审核内容 原始凭证的审核主要从以下几个方面进行：(1)审核原始凭证的合法性；(2)舍核原始凭证的合理性；(3)审核原始凭证的完整性；(4)审核原始凭证的正确性。 5.记账凭证的基本内容及其填制要求 记账凭证的基本内容一般包括：(1)凭证的名称；(2)填制凭证的日期；(3)经济业务的内容摘要；(4)经济业务所涉及会计科目和明细科目的名称；(5)经济业务的金额；(6)凭证的类别和编号；(7)过账的标记；(8)所附原始凭证或其他资料的张数；(9)凭证应具备的签字与盖章。 记账凭证的填制要求是：依据正确；内容完整；书写清楚；填制及时。
设备基础知识
目录 第一章：泵的基础知识 第一节：离心泵 第二节：计量泵 第三节：螺杆泵 第四节：滑片泵 第五节：屏蔽泵 第二章：汽轮机 第三章：螺杆压缩机 第四章：搅拌器 第五章：换热器
第一章泵的基础知识 第一节：离心泵 1.离心泵的主要性能参数 离心泵的主要性能参数有流量、扬程、功率、汽蚀余量和效率等。 （1）流量：泵的流量有体积流量和质量流量之分，体积流量是泵在单位时间内所抽送的液体体积，即是从泵的 压出口截面所排出的液体体积。体积流量用Q表示,其 单位为m3/s、 m3 /min、m3/h或L/s。有时也用质量流 量表示，质量流量则是泵在单位时间内所抽送的液体质 量，质量流量q表示，单位为kg/s、kg/min、和t/h。（2）扬程：泵的扬程H——单位重量液体流过泵后的总能量的增值。或者作功元件对泵排出的单位重量液体所 作的有效功（单位为m—液柱）。 （3）功率：泵的功率是指泵的输入功率，以P表示，即是原动机传递给泵轴的功率，又叫轴功率。有时叫制动 功率BHP，是一台泵完成待定量的工作所需要的功率。
泵出输入功率外，还有输出功率，即是液体流过时由泵传递给它的有用功率，又叫水力功率HHP，输出功率有时叫做水功率，是泵输送液体所需要的功率，不包括损失。也就是质量流量ρQ与单位质量的流体通过泵时能量的增值gH 的乘积，以Pu表示： Pu= ρQH/1000（KW） (4) 效率：泵效率（总效率）η是衡量泵工作是否经济的指标，定义为： η= Pu/P, 即有效功率与轴功率的比值 除了以上所述，离心泵还有一个重要性能参数就是泵的允许吸上真空度〔H s〕或允许汽蚀余量〔NPSH〕，单位均以米——液柱表示。 离心泵的主要性能参数之间存在着一定的关系，可用实验测定。将实验结果标绘于坐标纸上，得出一组曲线，称为离心泵的特性曲线。图1-3-2为某型号离心泵在转速为 2900r/min时的特性曲线。 2．离心泵的汽蚀 2.1.汽蚀机理及其危害 在叶片入口附近的非工作面上存在着某些局部低压区，当处于低压区的液流压力降低到对应液体温度的饱和蒸汽压时，液体便开始汽化而形成气泡。气泡随液流在流道中流动
开平市富利来塑胶企业有限公司 ISO9000质量管理体系 基础知识培训教材 企业内部培训教材，请勿转载或复制 编辑：jack.shi 2005年4月15日
第一章重要术语 1.过程 process 一组将输入转化为输出的相互关联或相互作用的活动。 注1：一个过程的输入通常是其他过程的输出。 注2：组织为了增值通常对过程进行策划并使其在受控条件下运行。 注3：对形成的产品是否合格不易或不能经济地进行验证的过程，通常称之为“特殊过程”。 2.产品 product 过程的结果。 注1：有下述四种通用的产品类别： ——服务（如运输）； ——软件（如计算机程序、字典）； ——硬件（如发动机机械零件）； ——流程性材料（如润滑油）。 许多产品由不同类别的产品构成，服务、软件、硬件或流程性材料的区分取决于其主导成分。例如：外供产品“汽车”是由硬件（如轮胎）、流程性材料（如：燃料、冷却液）、软件（如：发动机控制软件、驾驶员手册）和服务（如销售人员所做的操作说明）所组成。 注2：服务通常是无形的，并且是在供方和顾客接触面上至少需要完成一项活动的结果。服务的提供可涉及，例如： ——在顾客提供的有形产品（如维修的汽车）上所完成的活动； ——在顾客提供的无形产品（如为准备税款申报书所需的收益表）上所完成的活动； ——无形产品的交付（如知识传授方面的信息提供）； ——为顾客创造氛围（如在宾馆和饭店）； 软件由信息组成，通常是无形产品并可以方法、论文或程序的形式存在。 硬件通常是有形产品，其量具有计数的特性。流程性材料通常是有形产品，其量具有连续的特性。硬件和流程性材料经常被称之为货物。 注3：质量保证主要关注预期的产品。 3.质量quality
企业财务基础知识培训 目的：了解财务管理的运作基础，基本看懂财务报表，为经营和管理更好服务 培训内容：财务基础知识 企业法知识 税法知识 会计电算化简述 培训对象：公司中层以上管理人员（包括仓管员、业务员、采购员、各部门文员） 培训方式：白话化培训，由于财务知识系统性和专业性较强，为了避免听课者打瞌睡，尽量用白话，不用专业术语。
财务基础知识（怎样读财务报告） 看样张： 资产负债表 损益表 现金流量表（略） 税务报表和财务报表不同（附部分样张）
会计要素 会计凭证：原始凭证与记账凭证几个主要原则 会计要素 资产 流动资产 货币资金 交易性金融资产 应收票据 应收账款 预付账款 应收利息 应收股利 其他就收款 存货
非流动资产 可供出售金融资产持有至到期投资长期应收款 长期股权投资 投资性房产 固定资产 在建工程 无形资产 长期待摊费用 负债 流动负债 短期借款 交易性金融负债应付票据 应付账款 预收账款 应付职工薪酬
应交税费 其他应付款 非流动负债(略所有者权益 实收资本 资本公积 盈余公积 未分配利润 收入 主营业务收入 利息收入 手续费及佣金收入保费收入 租赁收入 其他业务收入 汇况损益 公允价值变动损益投资收益 营业外收入
费用 销售费用 管理费用 财务费用 资产减值损失 利润 会计凭证：原始凭证与记账凭证 原始凭证的相关规定 原始凭证（Source documents） 也称单据。在经济业务发生时，取得或填制的，用以记录和证明经济业务的发生或完成情况，并作为记账原始依据的会计凭证。 原始凭证是会计核算的原始资料和重要的证明文件。如：销货发票、收货单、支票存根等。 分类 按来源: 外来原始凭证是在经济业务发生或完成时从其他单位或个人直接取得的凭证,如发票、送货单等
会计凭证、账簿及会计核算实务 1 1.会计确认与会计计量。 2 会计核算的实质就是对经济活动进行确认、计量、记录和报告，这也是会计3 核算工作的四个环节。对于企业发生的各种经济活动，首先要确认是否属于会4 计核算系统应该而且能够反映的内容，其次要确定用什么价值标准进行计量，5 第三是要对这些应该反映的经济活动用恰当的计量标准在一定的载体(如会计6 凭证、帐簿)中加以记录，最后是要定期地对已记载的各种经济活动信息进行加7 工汇总，提出报告，以满足各有关方面了解企业财务状况和经营成果的需要。8 会计对象要素的确认，重点是理解和掌握资产、负债、所有者权益以及收入、9 费用和利润等各要素的概念及其特征。会计事项处理的两种标准──收付实现10 制和权责发生制，也是需要认真理解和掌握的重要基本问题。 11 2.资产、费用、成本、收入、利润、负债以及所有者权益的确认与计量。 12 教材中对这些问题用了较大篇幅来介绍，其中对于各要素所属具体项目的确13 认与计量的标准介绍的非常详细，这些内容对于初学的同学们来说掌握起来难14 度较大，而且似乎也可以放到后面的《财务会计》课程中去学习，因此我认为15 这里同学们应主要注意掌握各要素的核算方法，把教材中的例题真正理解了，16 并多做一些相关的练习题。 17 1.会计凭证。 18 学习这一章除了理解会计凭证的意义和作用以外，我认为主要有这样几个问19 题同学们需要注意掌握：(1)会计凭证的种类。会计凭证的种类繁多，各种凭证20 具有各种不同的格式和用途，同学们要在理解其各自含义的基础上注意它们的21 区别。如果有条件的话，可以找一些各种凭证的实物来对照一下，增加一些感22
会计基础知识 会计要素划分为:资产、负债、所有者权益、收入、费用、利润。 资产、负债、所有者权益是资产负债表的要素，资产负债表反映企业在一定日期的财务状况 （会计等式：资产 =负债 +所有者权益）； 收入、费用、利润是利润表的要素，利润表反映的是企业在一定会计期间的经营成果（会计等式： 利润 =收入 -费用）。 一、资产负债表的组成 1、资产按流动性大小不同，分为流动资产和非流动资产两类。 流动资产类指可以在 1 年或者超过 1 年的一个经营周期内变现或者耗用的资产，由货币资金、 交易性金融资产（短期投资）、应收帐款、预付帐款、其他应收款、存货和待推费用等项目 组成。 A 、货币资金是指库存现金、银行存款、其他货币资金组成。 B、交易性金融资产指能够随时变现并切持有时间不准备超过 1 年的投资，包括股票、债券、 基金等。 C 、应收及预付款，指企业在日常生产经营过程中的各项债权，包括应收款项、预付款项、 其他应收款。 D 、存货，使指其日常经营过程中持有以备出售，或者仍然处在生产过程，或再生 产或提供劳务过程中将消耗的材料或者物料等，包括各种材料、商品、在产品、半 成品、产成品等。 E 、待摊费用是，指企业已经支出，但应当由本期和以后各期分别负担的、分摊其在 1 年以内 的各项费用。 非流动资产类由长期股权投资、固定资产、无形资产和长期待摊费用等项组成。 A 、长期投资是指处短期投资以外的投资，包括持有时间准备超过 1 年的各种股权性质的 投资、不能变现或者不准备变现的债券、其他债权投资和其他长期投资。 B、固定资产是指使用期限超过一年的机器、机械、运输工具，以及其他与生产有关的设备、 工具、器具。固定资产在使用过程中因损耗而转移到产品中去的那部分价值的一种补偿 方式，叫做折旧。固定资产净值等于固定资产原值减累计折旧。 C 、无形资产指企业为生产商品或者提供劳务，或者为出租给他人，或者为管理目的而持 有没有实物形态的非货币性质的长期资产。无形资产分为可辨认无形资产和不可辨认无 形资产。可辨认无形资产包括专利权、商标权、非专利技术、著作权、土地使用权等等。 不可辨认无形资产是指商誉。 D 、长期待摊费用是指长期待摊费用时指企业已经支出，但摊销期限在 1 年以上的各项费 用，如固定资产的大修理支出、开办费等。 2、负债按流动性不同，分为流动负债和非流动负债 流动负债类指将在 1 年内或者超过 1 年的一个营业周期内偿还的债务。由短期借款、应 付帐款、预收帐款、应付职工薪酬、应交税费、其他啊应付款、预提费用等项目组成。 A 、短期借款是指企业向银行或其他金融机构等外单位借入的、还款期限在一年或 一年以下的各种借款。 B 、应付帐款是指企业因购买材料、商品和接受劳务供应等经营活动应支付的款项。 C、预收帐款指提由买卖双方约定的，由购货方预先支付一部分货款给供应方的款项。 D 、应付工资是指企业对单位员工个人的一种负债，是企业使职工的知识、技能、时间、 精力，而应给予职工的一种补偿（报酬）；在企业给职工支付工资以后，这项负债即 行减少。 -
v1.0 可编辑可修改 电工基础知识 1.电是什么 答:有负荷存在和电荷变化的现象。电是一种和重要的能源。 2.什么叫电场 答:带电体形成的场,能传递带电体之间的相互作用。 3.什么叫电荷 答:物体或构成物体的质点所带的正电或负电。 4.什么叫电位 答:单位正电荷在某点具有的能量,叫做该点的电位。 5.:什么叫电压它的基本单位和常用单位是什么 答:电路中两点之间的电位差称为电压。它的基本单位是伏特。简称伏,符号v,常用单位千伏(kv),毫伏(mv) 。 6.什么叫电流 答:电荷在电场力作用下的定向运动叫作电流。 7.什么叫电阻它的基本单位和常用单位是什么 答:电流在导体中流动时,要受到一定的阻力,,这种阻力称之为导体的电阻。 它的基本单位是欧姆,简称欧,符号表示为?,常用的单位还有千欧( k? ),兆欧(m? ) 8.什么是导体绝缘体和半导体 答:很容易传导电流的物体称为导体。在常态下几乎不能传导电流的物体称之为绝缘体。导电能力介于导体和绝缘体之间的物体称之为半导体。 9.什么叫电容它的基本单位和常用单位是什么 答:电容器在一定电压下储存电荷能力的大小叫做电容。它的基本单位是法拉,符号为F,常用符号还有微法(MF),微微法拉(PF),1F=106MF=1012MMf(PF) 。 10.什么叫电容器 答: 储存电荷和电能(电位能)的容器的电路元件。 11.什么是电感它的基本单位和常用单位是什么 答:在通过一定数量变化电流的情况下,线圈产生自感电势的能力,称为线圈的电感量。简称为电感。 它的常用单位为毫利,符号表示为H,常用单位还有毫亨(MH) 。1H=103MH 12.电感有什么作用 答:电感在直流电路中不起什么作用,对突变负载和交流电路起抗拒电流变化的作用。13.什么是容抗什么是感抗什么是电抗什么是阻抗他们的基本单位是什么 答:电容在电路中对交流电所起的阻碍作用称为容抗。 电感在电路中对交流电所起的阻碍作用称为感抗。 电容和电感在电路中对交流电引起的阻碍作用总称为电抗。 电阻, 电容和电感在电路中对交流电引起的阻碍作用阻抗。
电子知识培训资料 一、常用元器件的识别 1、电阻 电阻在电路中用“R”加数字表示，如：R1表示编号为1的电阻。电阻在电路中的主要作用为分流、限流、分压、偏置等。常用电阻的种类有碳膜电阻、金膜电阻、水泥电阻、陶瓷电阻、贴片电阻等。 1）参数识别：电阻的单位为欧姆（Ω），倍率单位有：千欧（KΩ），兆欧（MΩ）等。 换算方法是：1兆欧=1000千欧=1000000欧。 电阻的参数标注方法有3种，即直标法、色标法和数标法。 A、数标法主要用于贴片等小体积的电阻，数标法一般为三位数，前两位代表有效数，后一位 代表倍率。如上图所示的贴片电阻102表示1 KΩ。 B、色环标注法使用最多。有四色环电阻、五色环电阻（精密电阻），色环标注法的前两条色环 (四色环电阻)或前三条色环（五色环电阻）代表有效数字，倒数第二条代表倍率，最后一条代表误差。如:上图所示的色环电阻，它的前三条色环棕、绿、黑表示有效数字150，倒数 第二条金色表示倍率X0.1，它的阻值为150 X0.1=15Ω，最后一条棕色表示误差为±1%。 2）电阻的色标位置和倍率关系如下表所示： 颜色有效数字倍率允许偏差（%） 银色X0.01 ±10 金色X0.1 ±5 黑色0 +0 棕色 1 X10 ±1 红色 2 X100 ±2 橙色 3 X1000 黄色 4 X10000 绿色 5 X100000 ±0.5 蓝色 6 X1000000 ±0.2 紫色7 X10000000 ±0.1 灰色8 X100000000 白色9 X1000000000 3）不同功率的电阻对应的相关尺寸：
功率 尺寸 ФD±0.5mm L±1.0mm 1/8W 1.5 3.2 1/4W 2.3 6 1/2W 3 9 1W 4 11 2W 5 15 3W 6 17 5W 8 24 4 封装 尺寸 对应功率L(mm)±0.2 W(mm)±0.2 H(mm)±0.1 0402 1.0 0.5 0.35 1/32W 0603 1.6 0.8 0.5 1/16W、1/10W 0805 2.0 1.25 0.55 1/10W、1/8W 1206 3.2 1.6 0.6 1/8W、1/4W 2、电容 1）电容在电路中一般用“C”加数字表示（如C13表示编号为13的电容）。电容是由两片金属膜紧靠，中间用绝缘材料隔开而组成的元件。电容的特性主要是隔直流通交流。电容容量的大小就是表示能贮存电能的大小，电容对交流信号的阻碍作用称为容抗，它与交流信号 的频率和电容量有关。 容抗XC=1/2πfc（f表示交流以信号的频率，c表示电容容量）。 常用的电容种类有电解电容、瓷片电容、独石电容、聚脂薄膜电容、聚苯烯薄膜电容、贴 片电容等。 2）识别方法：电容的识别方法与电阻的识别方法基本相同，分直标法、色标法和数标法3种。 电容的基本单位用法拉（F）表示，其它单位还有：毫法（mF）、微法（μF）、纳法（nF）、 皮法（PF）。