植物组培过程中污染产生的原因及防治措施
一、污染的原因
污染是指在培养过程中，培养基或培养材料上滋生真菌、细菌等微生物，使培养材料不能正常生长和发育的现象。组织培养中污染是经常发生的，常见的污染病原是细菌和真菌两大类。细菌污染常在接种1-2d后表现，培养基表面出现黏液状菌斑。真菌污染一般在接种后3d以后才表现，主要症状时培养基上出现绒毛状菌丝，然后形成不同颜色的孢子层。
造成污染的原因也很多，主要有
(1) 培养基及各种使用器具灭菌不彻底
(2) 外植体消毒不彻底
(3) 接种时不严格无菌操作
(4) 接种和培养环境不清洁
(5) 培养容器原因，包括盖子和封口膜等。
二、材料带菌或培养基灭菌不彻底会造成成批接种材料被细菌污染，操作人员不严格遵守无菌操作规程也是造成细菌污染的重要原因。培养环境不清洁、超净工作台的过滤装置失效、培养容器的口径过大以及封口膜破损等主要引起真菌污染。2 污染的预防措施
2.1灭菌要彻底
在组培生产中，各种培养基以及接种过程中使用的各种器具都要严格灭菌。首先是培养基的灭菌，耐高温的培养基需要在121-123℃条件下灭菌20-30min。若出现灭菌时间不足或温度不够，培养一段时间后就会在培养基表面产生细菌性的污染。一些不耐高温的物质，可采取细菌过滤器除去其中的微生物。其次，接种用的器具除了经过高温霉菌外，在接种的过程中，每使用1次后，都要蘸酒精在酒精灯火焰上灼烧灭菌，特别是在不慎接触到污染物时，极易由于器具引起污染。第三，对于被污染的培养瓶和器皿要单独浸泡，单独清洗，有条件的灭菌后再清洗。
2.2环境消毒
不清洁的环境也会使培养的污染率明显增加，尤其是在夏季，高温高湿条件下污染率更高。接种和培养环境要保持清洁，定期进行熏蒸或喷雾消毒。高锰酸钾和甲醛熏蒸效果好，但对人体有一定的伤害，一般每年熏蒸2-3次。平时读接种室和培养室可采用紫外线照射消毒或喷2%来苏尔消毒。臭氧消毒机对环境消毒效果较好，而且使用灵活方便，对人体的伤害也相对较小。
2.3严格无菌操作
在接种时要严格无菌操作，避免人为因素造成污染。为了使超净工作台有效工作，防止操作区域本身带菌，要定期读一过滤器进行清洗和更换。对内部的过滤器，不必经常更换，但每隔一定时间要检测操作区的带菌量，如果发现过滤器失败，则要整块更换。此外还需要测定操作区的风速，通过调压旋钮使操作区的风速达到无菌操作需要的20-30m/min。
植物组培过程中培养物的玻璃化及其防治方法
当植物材料不断地进行离体繁殖时，有些培养物的嫩茎、叶片往往会呈半透明水渍状，苗体趋于透明，其茎、叶表面无蜡质，这种现象通常称为玻璃化。玻璃化为组培苗的生理失调症，它的出现会使组培苗生长缓慢、繁殖系数有所下降，玻璃化的嫩茎不宜诱导生根。
1 导致玻璃化的主要因素：
① 材料差异，在不同的种类、品种间，组培苗的玻璃化程度有所差异。
② 激素水平过高,若细胞分裂素浓度过高或细胞分裂素与生长素相对含量高，易引起玻璃化现象。
③ 培养基水势，培养基中离子种类,比例不适。
④ 环境温度、光照强度和通气性。温度过低或过高,光照时间强度不足及培养容器中空气湿度过高，透气性较差所造成的通气不良,易造成组培苗含水量高,从而发生玻璃化现象。
⑤ 琼脂浓度降低、有杂质等。
2 常用的防治措施有
① 增加光照强度和光照时数。
② 降低细胞分裂素含量。在培养基中添加少量聚乙烯醇、脱落酸等物质，能够在一定程度上减轻玻璃化的现象发生
③ 增大培养基中琼脂的含量，以降低培养基的水势
④ 降低NH4+浓度，减少培养基中含氮化合物的用量
⑤ 增加容器通风，最好进行 CO2施肥，这对减轻组培苗玻璃化的现象有明显的作用；
降低培养温度，进行变温培养，有助于减轻组培苗玻璃化的现象发生；
组培苗瘦弱或徒长的防治措施
正常的组培苗应当叶色浓绿、植株粗壮。如果在增殖阶段出现芽苗瘦弱、徒长或节间过长，这种苗转入生根培养时能够生根，在环境条件较好的情况下，也会稍转粗壮，但总体看来，苗的株型、叶色、叶片大小等性状还是差于生长正常的增殖苗；有时即便是正常或健壮的增殖苗，若生根阶段培养基不适宜或培养的环境条件得不到保障，往往根原基及根还未形成，就很快表现出小苗徒长，节间明显伸长，叶片变细、变薄、变嫩并出现黄化。这样的苗进行过渡培养时，会出现萎蔫和烂根，很容易死亡，过渡成活率极低。
对组培苗瘦弱的原因分析如下。
(1)细胞分裂素浓度过高，产生了过多的不定芽，这些密集的芽若不及时进行转移和分切，很快就开始变成瘦弱苗。
(2)温度过高，高温有利于苗的生长，多数品种适宜的温度是25℃左右，在过高的温度条件下，苗木的伸长速度快，叶片变薄、变长。
(3)光照不足，组培苗会变黄、变弱、变细并加速生长，使苗在短时间内变得更瘦弱。
(4)培养基水分过多，在琼脂含量不足会引起植株徒长变弱。
(5)通气不良，在使用不透气膜时，会增加瓶内湿度，从而使苗表现嫩弱。
以上因素同时出现时，对苗的不良影响明显大于单一因素，各个因素之间相互促进又相互制约。因此控制瘦弱苗，培养粗壮苗应通过多个因素共同调节才可能获得理想的效果。
减少和避免徒长和瘦弱苗的产生，可从以下几个方面考虑。
(1)根据品种特点减少细胞分裂素用量，加速继代转瓶的速度，适当降低接种密度。
(2)利用空调降低培养室温度。
(3)提高光照强度和延长光照时间，充分利用较强的自然光做光源，调整摆放位置和密度。
(4)调整培养基硬度，改用透气膜做封口，进行培养基及环境因子的综合调控，力求获得最优质
健壮的组培瓶
苗。
名词解释 1、微绒毛：是上皮细胞游离面的细胞膜和细胞质共同形成的细小 指状突起，电镜下可见。 2、同源细胞群：在软骨组织深部，软骨细胞逐渐长大成熟，变为 椭圆形，多成群分布，每群2~8个细胞，这些细胞是由一个软骨细胞分裂增殖而来的，故称同源细胞群。 3、软骨囊：软骨陷窝周围的基质因富含硫酸软骨素,呈强嗜碱性， 染色深，称为软骨囊。 4、结间体：相邻两个朗飞结之间的一段有髓神经纤维称结间体， 一个结间体的髓鞘由一个胶质细胞形成。 5、动脉周围淋巴鞘：位于脾的白髓中，是环绕在中央动脉周围的 弥散淋巴组织，主要是T淋巴细胞和一些巨噬细胞。在细胞免疫应答时可增大变厚。 6、浆膜：浆膜由疏松结缔组织和外表面被覆的间皮构成。 7、皱壁：皱壁是小肠粘膜层和粘膜下层共同向肠腔突出所形成的 突起。 8、泡心细胞：位于胰腺外分泌部腺泡腔内的一些扁平或立方形细 胞，是闰管上皮伸入腺泡腔内形成的。 9、门管区：在相邻肝小叶之间的结缔组织内，常伴行小叶间动脉 和静脉及小叶间胆管3种管道，该区域称为门管区。 10、肺小叶:每一细支气管连同它的各级分支和肺泡，组成了肺小 叶。 11、气血屏障：肺泡腔内O2与肺泡隔毛细血管内血液携带的CO2间 进行气体交换所通过的结构，即肺泡表面液体层，Ⅰ型肺泡细胞及基膜，薄层结缔组织，毛细血管基膜与连续内皮。
12、滤过屏障（滤过膜）：当血液流过血管球毛细血管时，管内血压 较高，血浆内的某些物质，经有孔内皮、基膜、裂孔膜滤过到 肾小囊腔，这三层结构称为滤过屏障。 13、分泌类固醇激素细胞：分泌类固醇激素，胞质内有丰富的滑面 内质网，管泡状嵴线粒体和大量脂滴，无分泌颗粒。 14、分泌含氮激素细胞：分泌含氮素激素，细胞内有丰富的粗面内 质网，高尔基体和膜包颗粒。 15、精子形成：精子细胞不再分裂，经过复杂的形态变化演变成精 子，这一过程称为精子形成。 16、黄体：排卵后，残留于卵巢内的卵泡壁随同血管一起向卵泡腔 塌陷，在促黄体生成素的作用下，逐渐发育成一个体积较大又 富有血管的内分泌细胞团，新鲜时呈黄色，故称黄体。 17、受精：成熟获能后的精子与发育正常的卵子结合形成受精卵的 过程。 18、卵裂：受精卵进行的有丝分裂。 19、胚泡：桑椹胚进入子宫腔后，细胞继续分裂，卵裂球数目增加 到100个左右时，细胞按一定规律排列，形似泡状。由滋养层、胚泡腔和内细胞群构成。 20、植入（着床）：胚泡逐渐埋入子宫内膜功能层的过程称为植入或 着床。 21、蜕膜：胚泡植入后，子宫内膜的功能层称蜕膜。 22、原条：胚胎第三周初，胚盘的上胚层细胞增殖，并由胚盘两侧 向尾侧中轴线迁移，形成一条细胞增厚区，称原条。 简答题 1、结合功能简述成纤维细胞的微细结构。
服务中的常见问题处理 1．给客人上错了菜怎么办 ⑴先表示歉意，若客人还没有下锅，应及时撤掉，撤回厨房部核实，及时上应该上的菜 ⑵若客人已下锅，则不必再撤，尽量婉转地动员客人买下，若客人执意不肯，可通知主管作为赠送菜。 2．发现客人损坏了店内物品怎么办 ⑴马上清理碎片、杂物。 ⑵关切地询问客人有无碰伤，如有碰伤应马上采取相应医疗救助措施。 ⑶通知吧台，婉言向客人收取赔偿。 3．在服务中，服务员不小心弄脏客人衣服（物）怎么办 ⑴诚恳地向客从道歉（视情节，可由领班、主管或前厅经理出面）。 ⑵设法替客人清洁（可能的情况下，征得客人同意，留下联系电话、地址，替客人干洗后送回）。 ⑶主管、领班视具体情况给客人一些优惠。 4．对较晚来就餐的客人应该怎样接待 ⑴要更加热情，不能有任何不耐烦、不高兴的表示。 ⑵要先请客人入座，迅速为客人点菜下单。 ⑶自始至终热情服务，不得以下班、清洁卫生等方式催促客人。 5．客人需要的菜品菜单上没有怎能么办 ⑴首先说；“请稍候，我到厨房问一下，是否能做。”然后和厨房联系，最大限度地满足客人的需求。 ⑵如厨房没有原料或不能做，首先表示诚挚的歉意，然后主动介绍本店类似的其他菜品。6．客人点菜时菜单缺菜怎么办 ⑴先向客人表示歉意。 ⑵然后推荐类似的菜（注意：推荐的菜一定要有，否则客人点的菜接二连三没有，会引起客人反感）。 7．客人为了向服务员表示谢意，要给服务员敬酒怎么办 ⑴首先表示谢意。
⑵婉言向客人说明工作时间不允许喝酒，从而谢绝，同时主动地为其服务，如撤餐具、加茶水等，转移客人的注意力，不使其感到难堪。 ⑶如确实难于推辞，应接过杯来，告知客人工作结束后再饮，然后换个酒杯斟满酒给客人，同时表示谢意。 8．客人正在谈话，而又有事要问客人怎么办 ⑴很有礼貌的站立在客人身旁，乘客人说话空隙俯身轻言：“对不起，打扰一下，”然后说事，说完事表示谢意。 ⑵如要讲的事不便让其他客人知道，可将客人请到一旁，说完事要致谢。 9．遇到个别客人故意刁难服务员怎么办 ⑴应态度和蔼，更加细致耐心地为客人服务。 ⑵满足客人的合理要求。 ⑶委婉地求助同桌通情达理的客人的帮助。 ⑷通知主管、领班采取必要措施，如调整服务员服务区域等。 ⑸任何情况下服务员不得对客人态度、口气生硬，更不能发生口角。 10．客人要求以水代酒时怎么办 ⑴对碍于情面，又酒量有限或不想喝酒的客人，在他们希望服务员提供以水代酒的帮助时，应给予同情和支持，并不露痕迹地满足客人愿望。 ⑵但若是以自已喝水来达到灌醉他人之目的者，则应婉拒并规劝。 11．对待醉酒的客人怎么办 ⑴上点清口、醒酒的食品。 ⑵更加耐心细致地服务。 ⑶通知主管、领班随时注意发生的问题，必要时通知保安。 ⑷如有损坏酒店物品，应对其同桌的清醒者讲明要求赔偿。 12．客人吃出杂物来怎么办 ⑴以最诚恳的语言向客人表示歉意。 ⑵尽量减少其他客人的注意，减少影响。 ⑶按客人要求退回有问题的菜品或更换锅底。 ⑷必要时通知主管、领班以其他方式如送果盘等给客人以补偿。 13．如何正确对待客人投诉
一、填空题 1、植物组织培养成功与否，一方面取决于培养材料本身的性质；另一方面取决于培养基的种类和成分。 2.一个已停止分裂的成熟细胞转变为____分生______状态，并形成___细胞团_______的现象称为"脱分化"。 3植物组织培养技术的三大难题分别为褐变、污染和玻璃化。 4具有防止褐变作用的维生素是_____维生素C____。 5病毒在植物体内的运转方式有短距离运转和长距离运转两种，前者经过胞间连丝向邻近细胞中扩散，速度很慢。后者通过寄主植物韧皮部的疏导组织随着营养输送进行转移，速度很快。 6、6-BA / NAA的高低决定了外植体的发育方向，比值低时促进_____根_____的生长，这时___分化_____占主导地位；比值高促进__苗___的生长，这时__分裂__占主导地位；悬浮培养的材料必须达到悬浮培养物质分散性多、细胞核较小均一性好和生长迅速等三个要求。 7、连续培养是指在培养过程中，以不断抽取用过的培养基并注入新鲜的培养基，使培养不断得到养分补充，保持其稳定状态的培养。 8．培养基的母液一般是配成大量元素，微量元素，维生素和＿氨基酸＿４类存放备用。ＭＳ培养基中组成大量元素的盐类分别是＿硝酸钾＿和＿硝酸铵＿。 9．一般情况下，细胞分裂/生长素的比值高，有利于愈伤组织长＿芽＿，比值低有利于长＿根＿。 10．在植物的材料灭菌中，酒精的浓度用70%~75%，处理时间一般在几秒至几十秒范围，是靠_使蛋白质凝固_杀菌的；升汞的浓度一般用1%~2%，处理的时间在5~10min范围，升汞是靠_Hg2+_杀菌的；杀菌剂中的次氯酸钠是靠_ClO-_杀菌的。11．培养植物适宜的温度大多在＿25±2℃＿，光照强度在＿1000lx＿，光照时间在＿16h＿。 12、进行热处理植物脱毒的温度在__85℃___左右。 13、配制螯合态铁盐需要的成分是__FeSO4·7H2O__和_Na2-EDTA_。 14、培养基中有机态N素营养主要是硝态氮和铵态氮。 15、原生质体的融合可实现_体细胞_的杂交，其融合的方式分为_自发融合_和_诱导融合__两类。 16、从再生植株倍性来看，小孢子培养通常产生单倍体植株，胚培养通常产生二倍体植株，胚乳培养通常产生三倍体植株。 17.进行植物组织培养最基本的前提条件是配置培养基。 18.离体叶片在诱导愈伤组织的培养基上培养，一般从叶缘或叶脉处容易发生愈伤组织。 19.某些生长调节物质及抗生素、酶类物质遇热不稳定，对其灭菌时不能进行高压蒸汽灭菌，而要进行过滤方法除菌。20配制培养基时，一般先配制母液，其目的在于__使用方便__和__用量准确_。 21分生区域内无维管束，病毒只能通过___胞间连丝__传递。 22在无毒苗的组织培养中，外植体的大小与其成活率成__正比__，而与脱毒效果成_反比_。 二、单项选择题
植物组织培养实验报告 一、实验目的 1．掌握无菌操作的植物组织培养方法； 2．通过配置ms培养基母液，掌握母液的配置和保存方法； 3．通过诱导豌豆根、茎、 叶形成愈伤组织学习愈伤组织的建立方法； 4．通过诱导豌豆茎、叶形成愈伤组织学习愈伤组织的建立方法； 5．了解植物细胞通 过分裂、增殖、分化、发育, 最终长成完整再生植株的过程, 加深对植物细胞的全能性的理 解。 二、实验原理（一）植物组织培养 植物组织培养是把植物的器官，组织以至单个细胞，应用无菌操作使其在人工条件下， 能够继续生长，甚至分化发育成一完整植株的过程。植物的组织在培养条件下，原来已经分 化停止生长的细胞，又能重新分裂，形成没有组织结构的细胞团，即愈伤组织。这一过程称 为“脱分化作用”，已经“脱分化”的愈伤组织，在一定条件下，又能重新分化形成输导系统 以及根和芽等组织和器官，这一过程称“再分化作用”。（二）植物细胞的全能性 植物细胞的全能性即是每个植物的本细胞或性细胞都具有该植物的全套遗传基因，在一 定培养条件下每个细胞都可发育成一个与母体一样的植株。（三）组织的分化与器官建 成 外植体诱导出愈伤组织后，经过继代培养，可以在愈伤组织内部形成一类分生组织即具 有分生能力的小细胞团，然后，再分化成不同的器官原基。有些情况下，外植体不经愈伤组 织而直接诱导出芽、根。 （四）培养基的组成 培养基中各成分的比例及浓度与细胞或组织的生长或分化所需要的最佳条件相近，似成 功地使用该培养基进行组织培养的主要条件。营养培养基一般由无机营养、碳源和能源、维 生素、植物激素（生长调节剂）和包括有机氮、酸和复杂物质的添加剂组成。 三、实验器材 高压灭菌锅、超净工作台、烘箱、培养室镊子、记号笔、橡皮筋、玻 璃器皿、三角烧瓶、烧杯、量筒、剪刀、棉塞、绳子、牛皮纸、酒精灯、喷雾器等。 四、实验材料 豌豆种子 五、实验药品 药品、70% 酒精、 0.1% 升汞、ms培养基、蒸馏水、naoh、 84消毒液、蔗糖、琼脂 等。 六、实验步骤 （一）培养基母液的配制 表1.ms培养基个成分的含量（单位：mg/l） 表2.ms培养基所需母液以及扩大倍数 名称大量元素微量元素 ca盐 mg盐 fe盐有机肌醇激素 扩大倍数 50 50 50 50 50 100 100 100 定容体积(ml) 500 500 500 500 500 200 200 50 吸取毫升数/l 20 20 20 20 20 10 10 5 （注：吸取毫升数为每升培养基所吸取的母液的体积） 表3.配制母液所需的药品及称取量
1.（2014广东卷）（16分）铁皮石斛是我国名贵中药，生物碱是其有效成分之一，应用组织培养技术培养铁皮石斛拟原球茎（简称PLBs，类似愈伤组织）生产生物碱的实验流程如下： 在固体培养基上，PLBs的重量、生物碱含量随增殖培养时间的变化如图17所示，请回答下列问题： ⑴选用新生营养芽为外植体的原因是，诱导外植体形成PLBs的过程称。 ⑵与黑暗条件下相比，PLBs在光照条件下生长的优势体现在，，。 ⑶脱落酸（ABA）能提高生物碱含量，但会抑制PLBs的生长。若采用液体培养，推测添加适量的ABA可提高生物碱产量。同学们拟开展探究实验验证该推测，在设计实验方案是探讨了以下问题： ①ABA的浓度梯度设置和添加方式：设4个ABA处理组，1个空白对照组，3次重复。因ABA受热易分解，故一定浓度的无菌ABA母液应在各组液体培养基后按比例加入。②实验进程和取样：实验50天完成，每10天取样，将样品（PLBs）称重（g/瓶）后再测定生物碱含量。如初始（第0天）数据已知，实验过程中还需测定的样品数为。 ③依所测定数据确定适宜的ABA浓度和培养时间：当某3个样品（重复样）的时，其对应的ABA浓度为适宜浓度，对应的培养时间是适宜培养时间。
【答案】（1）细胞分化程度低，容易诱导形成PLBs（2分）；细胞的脱分化（2分）（2）生长起始快（2分），快速生长时间较长（2分）；PLBs产量较高（2分）；（3）①灭菌、冷却（2分）；②75（2分）；③PLBs重量和生物碱含量乘积的平均值最大（3分） 【解析】（1）新生营养芽分裂能力强，全能性容易表达；根据题干可知，PLBs类似愈伤组织，外植体形成愈伤组织的过程是脱分化。（2）据图分析，光照下PLBs的重量高于黑暗条件下，原因可能是光照有利于细胞增殖、叶绿体的形成和进行光合作用制造有机物。（3）①由于ABA受热易分解，所以各种液体培养基灭菌后，冷却，再加入不同浓度的ABA ②根据题干可知，实验50天完成，每10天取样，需要取样5次，4个ABA处理组，1个空白对照组，3次重复，因此每次取样需要记录15个样品中的数据，共需要测定样品数75 ③适量的ABA可提高生物碱产量，当样品的平均值最大时，所对应的ABA浓度和时间为最适。 2.（2014江苏卷）（9分）为了获得植物次生代谢产物，先用植物外植体获得愈伤组织，然后在液体培养基中悬浮培养。请回答下列问题： （1）外植体经诱导后形成愈伤组织的过程称为。 （2）在愈伤组织悬浮培养时，细胞干重、蔗糖浓度和pH的变化如右图所示。细胞干重在12d后下降的原因有；培养液中蔗糖的作用是、。 （3）多倍体愈伤组织细胞产生的次生代谢产物量常高于二倍体。二倍体愈伤组织细胞经处理，会产生染色体加倍的细胞。为检测愈伤组织细胞染色体数目，压片前常采用纤维素酶和酶解离愈伤组织。若愈伤组织细胞（2n）经诱导处理后，观察到染色体数为8n的细胞，合理的解释是、。 （4）为了更好地获得次生代谢产物，生产中采用植物细胞的固定化技术，其原理与酵母细胞固定化类似。下列说法正确的有（填序号）。 ①选取旺盛生长的愈伤组织细胞包埋②必须在光照条件下培养
第一章 1、植物组织培养：是指在离体条件下，利用人工培养基对植物的器官、组织、细胞、原 生质体等进行培养，使其长成完整植株 2、外植体：在植物组织培养中，由活体（in vivo）植物上提取下来的、接种在培养基上的 无菌细胞、组织、器官等均称为外植体。 3、愈伤组织：指在人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞。 4、应用 一、农业上的应用 1. 种苗快速繁殖(rapid propagation) 2.无病毒苗(virus free)的培养 3.在育种上的应用(breeding) （1）倍性育种，缩短育种年限，杂种优势明显； （2）克服远缘杂交的不亲合性和不孕性（胚培养）； （3）保存种质 （4）创造变异 二、在遗传学、分子生物学、细胞生物学、组织学、胚胎学、基因工程、生物工程等方面的应用。用于基因工程技术创造植物新种质。用于植物生长发育理论研究，包括生理学、病理学、胚胎学和细胞与分子生物学等。 三、利用组织培养材料作为植物生物反应器 第二章 1、细胞全能性（Totipotency）：指任何具有完整的细胞核的植物细胞都拥有形成一个完整植 株所必须的全部遗传信息和发育成完整植株的能力。 2、细胞分化（cell differentiation）：指导致细胞形成不同结构，引起功能或潜在的发育方式 改变的过程。 3、脱分化（Dedifferentiation）：指离体条件下生长的细胞、组织或器官逐渐失去原来的结构 和功能而恢复分生状态，形成无组织结构细胞团或愈伤组织 的过程。 4、再分化（Redifferentiation）：指脱分化的细胞重新恢复分化能力，形成具有特定结构和功 能的细胞、组织、器官甚至植株的过程。 5、植物组织培养中常遇到的问题以及解决措施 一、污染及防治： 1、真菌污染后，如果已形成孢子，则必须经高压灭菌后扔掉。但若是细菌污染，只 要及时发现，将材料上部未感菌的部分剪下转接，材料仍可使用。 2、用抗生素等杀菌药剂的处理，会影响植物材料正常生长。 二、褐变及防止 （1）选择合适的外植体 （2）合适的培养条件 （3）使用抗氧化剂 （4）连续转移 三、玻璃化问题及其防止
组织与胚胎知识重点 1 浆细胞分泌—浆细胞能合成和分泌免疫球蛋白即抗体。 2 巨噬细胞能分泌—上百种生物活性物质，如溶菌酶，补体，干扰素，肿瘤，坏死因子，血管生成因子和白细胞介素一样。 3 肥大细胞能分泌—肝素，组胺，白三烯，嗜酸性粒细胞趋化细胞。 4 吞噬细菌的细胞是—中性粒细胞。 5 吞噬抗原抗体复合物的细胞—单核-巨嗜细胞系统，嗜酸性粒细胞。 6 维持血管壁完整性的细胞是—血小板。 7 调节三大营养物质的激素是—糖皮质激素。 8 升高血钙的激素—甲状旁腺素。 9 促新陈代谢与生长发育激素是—甲状腺激素。 10 分泌盐酸的细胞是—壁细胞，分泌胃蛋白酶原细胞是—主细胞。 11 分泌内因子的细胞是—壁细胞。 12 毛细血管是—组织细胞和血液进行物质交换的场所。 13 肝细胞之间的管道是—胆小管，肝板与血窦内皮之间的结构是—窦周间隙。 14 参与构成肺小叶的结构是—细支气管连同它的分支上的肺泡。 15 管壁及不完整的结构是—肺泡管。 16 参与呼吸膜形成的细胞是—I型肺泡细胞。 17 能分泌肺泡表面火星的物质的细胞是—II型肺泡细胞。 18 围成肾小管壁细段的上皮—单层扁皮上皮。 19 近端小管壁的上皮是—单层立方成锥体形细胞构成。 20 精原细胞位于—生精小管上皮。 21 完成精子形态成熟的部位是—附睾管。 22 次级卵母细胞位于—成熟细胞。 23 含丰富毛细血管和细胞的卵泡—次级卵泡的卵泡膜的内层。 24 膜黄体细胞分泌—雌激素。 25 粒黄体细胞分泌—孕激素松弛素。 26 黄体—排卵后，残留的颗粒层细胞和卵泡膜内层细胞在LH的作用下，形成一个富含血管的内分泌细胞团，新鲜的呈黄色，称为黄体。 27 肺小叶—一条细支气管连同它的分支以及分支上的所有肺泡，组成一个锥体形的尖端指向肺门，底朝向肺表面的结构称肺小叶。 28 血清—血凝块静置后所析出的淡黄色透明的液体。 29 滤过膜—位于肾小囊腔与毛细血管腔之间，为毛细血管内的血浆成分滤过到肾小囊腔形成原尿所要经过的结构。 30 透射电镜—主要用于观察样本的内部结构，其电子发射器发射电子束，电子束穿透样品经过磁场的聚合放大，在荧光屏上显象。 31 扫描电镜—用于观察细胞与组织的立体结构和表面结构。 32 单层柱状上皮的分布—分布于胃肠，子宫，输卵管，胆囊及胆道的黏膜和肾集合小管等处。 33 结缔组织的特点—是人体分布最广，种类最多，功能最复杂的一类组织。包括固有结缔组织，软骨组织，骨组织和血液四种。结缔组织的细胞少，种类多，无极性，间质多，基质形式多样。 34 胞质内粗面内质网RER—最丰富的结缔组织细胞是—浆细胞，成纤维细胞 35 单核巨噬细胞系统—1血液中的单核细胞2结缔组织3淋巴组织中的巨噬细胞4骨组织中的破骨细胞5神经组织中的小胶质细胞6肝巨噬细胞7肺巨噬细胞 36 成熟的RBC特点—1直径为7.0-8.5μm，呈双凹圆盘形，无细胞核和细胞器，胞质中含大量的血红蛋白。 37 血小板的结构特点与功能—直径为2-4μm，呈双凹圆盘形，无细胞核，有止血凝血，维持血管内皮完整性的作用。 38 肌肉丝滑行的结果—骨骼肌纤维的收缩，舒张—I带缩短，H带缩短或消失 39 血管壁分为—内膜，中膜，外膜，中膜变化最大。 40 中动脉中膜的主要成分是—平滑肌，大动脉中膜的主要成分是—弹性膜。
会议服务中的常见问题 1.指引客人到会议室-----班前会了解所有会议预定名称 2.客人是手机或电脑连接无线网-----PATTYA WIFI 3.客人电脑连接投影-----同时按fn+f?(不同的电脑不同的F几)，所有 客人会议均需自己带电脑，我们公司没有电脑出租 4.如果客人要播放PPT，我们可以借翻页笔给客人使用，但不是所有 笔记本电脑都适用 5.加茶水-------25到30分钟加一次茶水 6.烟灰盅-------2个以上烟头马上换烟盅 7.空调不够冷或暖气不够热-----因为是中央空调，需要提前一小时以 上开启机器，如果早上有会议的情况下，必须提前一天通知工程部，打电话8507/8526/短号6317（值班电话） 8.如果客人说太冷-----我们有披肩客人借给客人保暖 9.每个小会议室的麦克风最好不要超过4个，会议中不要加麦，以 免产生噪音影响客人开会，可以在客人茶歇或休息的时候增加，客人提出问题的时候要跟客人及时说清楚 10.如果客人要回房间，或有多的物资行李要拿，打电话8025礼宾部 叫电瓶车接送 11.如果客人要小推车推东西到停车场，因酒店道路斜坡较多，建议 客人将车开到宴会厅门口 12.如果客人要单点几杯咖啡，打电话8211西餐厅叫送餐服务，10 杯以上，可以本部冲给客人，并说明是雀巢咖啡，15元/杯
13.如果客人要临时加茶点，10份以下的，建议客人到西餐饼屋点小 点心，10份以上的我们通知西厨出品 14.客人电脑电源下不够长-----拿插线板给客人接电源 15.客人要矿泉水-----我们免费提供热茶水，矿泉水需要5元/支收费， 通知上司拿矿泉水，并现金收取费用，如要挂会议账一起，必须要会务负责人同意，如果是旅行社已付款会议团，必须现金收费，客人如果挂房帐，必须出示房卡到收银处读卡结账 16.客人手机没电了------我们有3个多功能充电器可接给客人，不可带 离宴会厅范围使用，离开必须收回，实行谁拿谁负责。遗失按50元赔偿 17.客人如要播放音乐，可以连接音频线（优先选择）或DVD播放 18.客人临时带横幅来，通知工程部小李，电话短号：669712 19.客人带水果，茶点来，要收取服务费15元一个人（EO单免收服 务费除外） 20.客人在会议抽烟要及时告诉客人会议室里面不可以抽烟，请让客 人到吸烟区 21.客人如需要贴东西要通知客人不可以用透明胶，双面胶。可以用 美纹胶布 22.客人要钉东西到墙上请及时阻止，墙面是不可以用钉子钉，我们 可以提供橡皮泥粘到墙上
题型：填空15分 选择20分 判断10分 名词解释20分 简答35分 附加题未知 一般培养基不含哪种维生素：培养基中的维生素属于B 族维生素，其中效果最佳的有维生素B1、维生素 B6、生物素、泛酸钙和肌醇等。 培养基部分 名称解释： 微室悬滴培养：利用表面张力将细胞培养液置于一张盖玻片表面制成悬滴，将组织或器官外植块接种 培养液中，然后翻转盖玻片使外植块及培养液悬挂在盖玻片下，再置放于一凹形载片之上，最后用熔蜡密封盖玻片四周后放入培养箱中培养的技术。 外植体 由活植物体上切取下来的可以用于组织培养的组织或器官。外植体是指植物离体培养中的各种接种材料。包括植物体的各个器官、组织、细胞和原生质体等。 愈伤组织在人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞（细胞排列疏松、无规则）。 体细胞胚（体胚） 体胚-离体培养下没有经过受精过程，但经历了胚胎发育过程所形成的胚的类似物，统称为体细胞胚或胚状体。 体胚还可以从花药或花粉培养、离体器官培养、单细胞悬浮培养中产生。 体胚来源于根、茎、叶和它们的组织和细胞，经离体培养而发生的类胚结构，染色体组为两套，可发育成为正常植物体。 胚性感受态 植物组织或器官对外界环境条件所存在的特殊反应状态。 脱分化再分化 脱分化：由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程，又称去分化。再分化：脱分化产生的愈伤组织在培养过程中重新分化根或芽等器官的过程。 指示植物 对病毒反映敏感，症状特征显著的植物 指示植物法 将一些对病毒反映敏感，症状特征显著的植物作为指示植物，用以检验待测植物体内特定病毒的存在。即指示植物法。特点：条件简单，操作方便，经济而有效，只能测出病毒的相对感染力。 试管内生根试管(瓶)内诱导茎芽生根形成小苗时期 试管外生根 瓶外生根技术把生根诱导与驯化培养有机地结合起来，有效缩短育苗周期，节约生产成本，提高了移栽成活率，是一项值得应用与推广的技术。 植物离体保存 将离体培养的植物细胞、组织、器官或试管苗，保存于人工环境下，一般需要在低温或超低温条件下进行，以抑制其生长，达到长期保存的目的。 植物&种质保存 种质保存:在适宜的环境条件下，贮存植物种质，使其保持生命力与遗传性的技术。一般有两种方式，即就地保存与迁地保存。 植物种质资源低温保存意义:防止资源灭绝、节约人力物力、便于交流 范与规
姓名班级学号实验日期 科目植物生理学实验实验名称Effects of Hormones on Morphogenesis in Plant Tissue Culture 合作者指导教师成绩 Effects of Hormones on Morphogenesis in Plant Tissue Culture Introduction The technology of plant tissue culture is based on the principle of totipotency which means the capacity to generate a whole plant from any cells or an explant.During the plant tissue culture,the hormones affect largely on morphogenesis,such as Auxin and Cytokinin.And the content and ratio of these hormones can make different results.NAA is the routine reagent of auxine and6-BA is the reagent of cytokinin.For the tissue culture,we prepare the Murashige and Skoog’s medium(MS medium).The MS medium contains hormones,macronutrients and micronutrients(detailed ingredients are in Table 2-1).The pH in the medium will be adjusted with1M NaOH.We should prepare10MS media with hormones. During the whole operation of tissue culture,six potential source of contamination are air,water, growth media,equipment,explant and people.We use the laminar flow hood to remove most of microbes from air flow.The water and the media have been autoclaved.The tools should be kept sterile in the70%alcohol and flamed by alcohol burner.And we sterilize the explants with Ca(ClO)2and70% ethanol and sterile water. We use the NAA to induce the callus to generate root. Materials Fresh young leaves of tobacco(Nicotiana tabacum) MS medium:NH4NO3,KNO3,CaCl2,MgSO4,KH2PO4,MnSO4?H2O,ZnSO4?7H2O,KI,Na2MoO4?2H2O,CuSO4?5H2O,CoCl2?6H2O,Na2EDTA,FeSO4?7H2O,Nicotinic acid,Pyridoxine HCl(VB6), Thiamine HCl(VB1).Glycine,Mesoinositol. Agar,HgCl2,NAA,6-BA.2%Ca(ClO)2,sterile distilled water,70%ethanol,Beaker,Balance,10 Bottles,pH test strips,Laminar flow hood,Tween-80,Scissor,Forceps,Scalpels,Alcohol lamp. Method Part1:Prepare10bottles of culture. 1.Wash10bottles and dry them for a group. 2.Our group’s task:Weigh50mg6-BA and mix with sterile distilled water to be50mL1mg/ml solution in a bottle and mark the stock solution name,the date,and our group number. 3.Other groups prepare the MS medium culture,agar,NAA and sugar.In Table2-1,MS=100ml A+ 1ml B+10ml C+5ml D+10ml E.Every3group prepare1L medium=MS+1mg/ml6-BA+ 0.2mg/L NAA+3%sugar+0.7%agar.Boil the solution with induction cooker to mix thoroughly. 4.Adjust the pH of medium to 5.8with1M NaOH or HCl. 5.Repackage the1L medium to the bottles of3groups.10bottles of each group,30ml for each bottle. 6.Sterilize the culture bottles by autoclaving at115℃for30min.Store them at room temperature. Part2:Operation of plant tissue culture. 1.The space in the laminar flow hood has been sterilized by UV light for15min.We place all items in well order to start working. 2.Rinse4young leaves as explants in tap water for10-30min.The next operations are all aseptic.
1. 绪论 组织的定义和类型；常用的石蜡切片技术；HE染色的概念，嗜酸性，嗜碱性。 2.上皮组织 1.上皮特点； 2.分类：层数/形态---内皮、间皮； 3.微绒毛，纤毛的概念，光镜结构及功能； 4.上皮细胞侧面连接结构的名称和作用； 3. 疏松结缔组织 1.结缔组织的特点和分类 2.疏松结缔组织的细胞组成及各种细胞的光镜结构特点和功能 3.胶原纤维、弹性纤维的光镜结构、理化特性 4.基质的主要组成，分子筛功能 4. 软骨和骨 1. 软骨—软骨陷窝，软骨囊，同源细胞群 2. 软骨类型 3. 骨板的定义 4. 骨组织四种细胞的分布、结构及功能 5. 骨干（密质骨）构成 6. 骨单位的定义 5．血液 1. 血液的组成，血浆、血清的区别 2. 红细胞形态结构与功能 3. 血液中五种白细胞比例，光镜结构特点与功能（能够在血涂片中辨别） 4. 血小板功能 6．肌组织 1.骨骼肌纤维的光镜、电镜结构 2.肌原纤维、肌节的概念 3.粗肌丝、细肌丝构成 4.心肌纤维的光镜结构（闰盘） 7．神经组织 1.神经元光镜结构与超微结构，尼氏体与神经原纤维的概念。 2.树突和轴突的结构特点。 3.突触的概念、分类、结构。 4.神经胶质细胞分类与功能。 5.有髓神经纤维的光镜结构与功能。 6.神经末梢分类及功能。 8．循环系统 1.血管的一般结构特点 2.动脉的结构与功能的区别 3.毛细血管的类型、结构（LM+EM) 4.心脏的结构：三层（心内膜，心肌膜，心外膜） 9．免疫系统 1.淋巴细胞的种类及参与的免疫反应种类 2.淋巴组织的分类及特点
3.淋巴结的结构及功能 4.脾的结构和功能 10．内分泌系统 1. 内分泌腺的结构特点 2. 何种细胞分泌何种激素（细胞光镜特点，激素类型及功能） 11．消化管和消化腺 1.消化管的一般结构，小肠绒毛的概念 2.胃粘膜的结构层次 3.胃底腺的形成，主细胞、壁细胞的光镜结构特点和功能 4.小肠粘膜的结构层次，粘膜上皮的细胞构成 5.小肠绒毛、小肠腺、十二指肠腺的结构特点及相互区别 6.胰腺外分泌部的组成及功能 7.胰腺内分泌部（胰岛）细胞构成、分泌激素及作用 8.肝小叶的概念 9.肝小叶的构成：5个 10.肝门管区的构成 12．呼吸系统 1.肺小叶的概念 2.肺内支气管导气部包括哪些，结构渐变规律 3.肺内呼吸部包括哪些，与导气部的区别 4.二种肺泡上皮结构及功能 5.气血屏障的概念（包括组成） 13．泌尿系统 1.肾单位的概念。 2.肾小体（血管球、肾小囊）的结构特点和功能 3.滤过屏障的概念：组成和功能 4.肾小管（近端小管、细段、远端小管）的结构特点和功能 14．男性生殖系统 1.生精小管中各级生精细胞的位置排列规律、结构特点 2.精子形成和精子发生的区别，精子光镜结构特点 3.支持细胞光镜结构和功能 4.睾丸间质细胞光镜结构和功能 5.血-睾屏障组成及功能 15．女性生殖系统 1.卵泡的概念 2.各期卵泡的结构特点 3.排卵的概念 4.黄体分泌的激素 5.月经周期的概念及分期 16．人体早期发育 1.获能的概念 2.受精，顶体反应，透明带反应的概念 3.受精的过程及意义 4.卵裂的概念和胚泡的结构 5.植入的概念及蜕膜反应 6.二胚层和三胚层的形成 7.绒毛膜，羊膜和脐带的结构8.胎盘的定义（组成与功能） 9.胎盘屏障定义和组成
植物组织培养知识点总结第一、二章 1植物组织培养概念、分类、应用、创始人、奠基人 2实验室各分室名称、主要设备、主要功能 3无菌操作技术流程 4表面消毒剂种类及作用效果 5培养基成分及各成分的作用 6植物组织培养三大难题 7那些成分要抽滤灭菌 第三、四章 8植物细胞全能性原理 9名词解释：愈伤组织、脱分化、体细胞胚、人工种子 10体细胞胚的特点 11愈伤组织形成发育的三个时期，两种类型，良好愈伤组织的特点 12植物离体微繁，一般过程，各阶段注意事项 13褐变，影响褐变的因素，克服褐变的措施；玻璃化，无糖培养技术第五、六、七章 14植物脱毒方法、原理 15脱毒率包括两种方面含义 16人工诱导单倍体的三种途径 17花药培养得到的再生植株倍性如何，为什么 18花药培养的应用，花药培养力，一般培养过程。 19离体幼胚培养，胚发育有几种类型各有何特点 20离体授粉离体受精 21简述胚乳培养的意义
第八、九章 22原生质体概念，两种分离方法，纯化方法。 23酶法分离植物原生质体的酶液组成及作用 24简述植物原生质体培养基的特点 25原生质体融合，融合的主要方法 26体细胞杂交过程 27融合产物的种类及特点 28植物细胞无性系变异，特点 29提高植物细胞无性系变异频率的方法 30细胞突变体的类型及对应的筛选方法 植物组织培养知识点总结 第一、二章 1植物组织培养概念、分类、应用、创始人、奠基人 概念：是一种将植物的器官、组织或细胞在适当的培养基上进行无菌培养，并重新再生细胞或植株的技术。 分类：（1）按外植体来源和特性分：植株培养胚胎培养器官培养组织或愈伤组织培养细胞或原生质体培养；（2）按培养方法分：固体培养液体培养固体液体两相培养 应用：（1）克服远缘杂交中杂种不育性，种子无活力或配发育不全的植物获得后代，一年多代育种（2）培育三倍体（3）单倍体育种（4）提高突变频率，筛选变异类型（5）经过细胞融合得到体细胞杂种（6）种质资源保存 2实验室各分室名称、主要设备、主要功能 化学实验室（准备室）
植物组织培养实验报告 摘要：以大豆子叶为外植体，在MS培养基上附加不同浓度、不同种类的植物激素，以研究不同激素组合和不同浓度对大豆子叶愈伤诱导率的影响，并练习无菌操作。实验结果显示第2组即MS+6-BA（2.0mg/L)+NAA(1.0mg/L)和第 3 组即MS+KT（0.5mg/L)+2,4-D(1.0mg/L) 培养基中愈伤组织诱导率较高，为较佳的愈伤组织诱导组合。 关键词：大豆；植物组织培养；无菌操作；愈伤组织 1.材料与方法 1.1实验材料：大豆子叶 1.2实验试剂与仪器 （1）试剂：75%酒精、MS干粉、蔗糖、琼脂、植物生长调节剂（NAA、2，4-D、KT、6-BA）、无菌水、升汞、NaOH溶液 （2）仪器：超菌净工作台、圆纸片、培养皿、封口膜、称量纸、千分之一天平、不锈钢杯子、移液枪、试管、高压灭菌锅、注射器、酒精灯、镊子、手术刀、搁置架、烧杯、电炉。 1.3实验方法 1.3.1培养基的配制与灭菌 1.3.1.1 配制培养基的准备阶段 （1）准备80个培养试管及封口膜，2个小培养皿、1个大培养皿，用洗衣粉、自来水洗净，再用蒸馏水把每个培养试管、润洗一下。带晾干后将试管编号1-80；（2）在称量纸上用百分之一天平分别称取1.5g 琼脂4份，7.5g 蔗糖4份，在烧杯里用千分之一天平上称取1.185g MS干粉4份（烧杯不要清洗）；
（3）剪小圆纸片40，均分在两个小培养皿小能从中自由取出为宜；剪大圆纸片10，均分在两个大培养皿中。然后分别用报纸包好。 （4）把接种工具手术刀、镊子、剪刀等用报纸包好。 1.3.1.2 配制培养基 （1）在装有MS干粉的烧杯中按下表加入植物生长调节剂 实验所用的所有激素浓度均为0.5mg/mL 激素的加样量(ml) 编号培养基配置 6-BA NAA KT 2,4-D 1 MS+6-BA（1.0mg/L)+NAA(0.5mg/L) 0.5 0.25 2 MS+6-BA（2.0mg/L)+NAA(1.0mg/L) 1.0 0.5 3 MS+KT（0.5mg/L)+2,4-D(1.0mg/L) 0.25 0.5 4 MS+KT（1.0mg/L)+2,4-D(2.0mg/L) 0. 5 1.0 （2）用量筒量取250ml（稍多）蒸馏水，取一个不锈钢杯子加入150ml蒸馏水和称量好的琼脂，在电炉子加热沸腾2min，再加入混合好的MS培养基1号和蔗糖，混合沸腾2min，用剩余的蒸馏水定容至250ml； （3）当温度降到60℃左右时，将溶液pH 调至5.8，一般加4滴NaOH溶液即可；（4）取编号1-20的培养试管，用大量注射器以每瓶12.5ml 左右培养基分装在培养试管中，用封口膜封口，4支一捆捆扎好。 （5）用相同的方法配置2-4号培养基，并分装、捆扎。 1.3.1.3高压湿热灭菌 （1）将包好的接种工具，包好的培养皿，以及分装好的试管一起放到高温灭菌
器官培养：即离体器官的培养。植株培养：对完整植株材料的培养。 组织或愈伤组织培养:是对植物体的各部分组织进行培养或对由植物器官培养产生的愈伤组织进行培养，二者均通过再分化诱导形成植株. 细胞培养:是对由愈伤组织等进行液体振荡培养所得到的能保持较好分散性的离体单细胞或花粉单细胞或很小的细胞团的培养. 原生质体培养:是用酶及物理方法除去细胞壁的原生质体的培养。 初代培养：芽、茎段、叶片、花器等外植体在离体培养条件下诱导愈伤组织、侧芽或不定芽、胚状体过程植物组织培养：是指通过无菌操作分离植物体的一部分（外植体），接种到培养基上，在人工控制的条件下（包括营养、激素、温度、光照、湿度）进行培养，使其产生完整植株的过程。 愈伤组织：原指植物在受伤之后于伤口表面形成的一团薄壁细胞，在组培中则指在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则细胞，多在植物体切面上产生。 外植体：从植物体上分离下来的用于离体培养的材料。 植物细胞全能型：任何具有完成细胞核的植物细胞，能拥有形成一个完整植株所必须的全部遗传信息和发育成完整植株的能力。 脱分化:已分化好的细胞在人工诱导条件下，恢复分生能力，回复到分生组织状态的过程。 再分化:脱分化后具有分生能力的细胞再经过与原来相同的分化过程，重新形成各类组织和器官的过程。胚状体：在离体过程中产生一种形似胚（具有明显的根端和芽端），功能与胚相同的结构。 褐变现象：指在接种后，其表面开始褐变，有事甚至会使整个培养基褐变的现象。 继代培养材料的玻璃化：当植物材料不断的进行离体繁殖时，有些培养物的嫩芽，叶片往往会呈半透明水迹状，这种现象通常成为玻璃化。 人工种子：通过植物组织培养的方法获得的具有正常发育能力的材料，外被有特定的物质，在适宜的条件下可以发芽成苗的植株幼体。 植板密度：形成的细胞团数/植板的细胞总数×100% 对称融合：双方原生质体均带有核基因组和细胞质基因组的全部遗传信息。 非对称融合：指一方亲本的全部原生质与另一方亲本的部分核物质及细胞质物质重组产生不对称杂种。 继代培养：是初代培养之后的连续数代的扩繁培养过程。目的：繁殖出相当数量的无菌苗，最后达到边繁殖边生根的目的。 细胞悬浮培养：将游离的植物细胞按一定的细胞密度悬浮在液体培养基中进行培养的方法。根据培养基的类型分为: 固体培养（琼脂、卡拉胶等固化），半液半固体培养(固液双层)，液体培养（震荡、旋转或静置培养）。 液体培养的优点：不使用凝固剂，节约生产成本，营养吸收充分；操作过程简化。 组织培养按培养对象可分为：植株培养，器官培养，组织培养，细胞培养，原生质体培养。 植物组织培养一般过程:初代培养，继代培养，生根培养，驯化移栽。 植物组织培养的特点：培养条件可以人为控制，生长周期短，繁殖率高，管理方便，利于工厂化生产和自动化控制。 组织培养技术在农业生产上的应用主要体现于以下几个方面：快速繁殖优良苗木；获得脱毒苗；育种上应用；工厂化育苗。 1902年，德国著名的植物生理学家和植物学家哈伯兰特提出了高等植物细胞全能性。1958年，美国植物学家斯图尔德等人，用胡萝卜根韧皮部的细胞进行培养，得到了完整植株，证明了细胞全能性。 怀特于1943年发表了《植物组织培养手册》专著，使植物组织培养开始成为一门新兴的学科。 腺嘌呤与生长素的比例是控制芽和根形成的主要条件之一，这一比例高时，产生芽，这一比例低时，则形成根，相等则不分化。 标准的组培实验室包括：1、洗涤室，器具的洗涤，干燥和消毒，2、配置室，进行药品的保存，配置，消毒，分装等，3、灭菌室，培养基及使用器具的消毒与灭菌，4、接种室，进行材料的接种，内置超净工作