又一例同胞间干细胞移植成功
2017年3月14日上午8点左右，在中源协和旗下生命银行细胞资源库工作人员的精心呵护下，一份珍存了5年的脐带血造血干细胞被送达到上海儿童医学中心，为患有急性淋巴细胞白血病的16岁少年小叶带去了生命的希望。这份移植给小叶的造血干细胞来源于他的同胞妹妹。
2011年小叶的妹妹出生，小叶的父母将女儿的脐带血造血干细胞存储在了生命银行细胞资源库。令人庆幸的是，经过手术移植，这份保存了5年的干细胞，已经重新在小叶的体内生根发芽，开启了生命新的篇章。这也是中源协和又一例同胞间干细胞移植成功的案例。
急性淋巴细胞白血病(ALL)，是一种起源于淋巴细胞的B系或T系细胞在骨髓内异常增生的恶性肿瘤性疾病。异常增生的原始细胞可在骨髓聚集并抑制正常造血功能，同时也可侵及骨髓外的组织，如脑膜、淋巴结、性腺、肝等。
我国曾进行过白血病发病情况调查，ALL发病率约为0.67/10万。儿童期(0～9岁)为发病高峰，可占儿童白血病的70%以上;在成人中占成人白血病的20%左右。
今年16岁的小叶就是一位ALL患者，正值人生花季的他，本该和同龄人一样尽情享受大好年华，但是不幸却患上急性淋巴细胞白血病，鲜活的人生笼罩上一层阴影。
同胞间干细胞移植点燃生的希望
不幸中的万幸，小叶有一个5岁的妹妹，2011年妹妹出生的时候小叶的父母明智地选择了为妹妹储存脐带血造血干细胞，并将这份珍贵的干细胞保存在中源协和旗下生命银行细胞资源库。
自体储存的脐带血造血干细胞和自己配型完全相合，与父母配型至少半相合，并有四分之一的机率与兄弟姐妹配型全相合。通过对比，小叶和妹妹的配型相合度为9/10。
于是，这份在-196℃的液氮环境中存储了5年多的“生命的种子”，为了它的使命而被唤醒。3月14日上午，生命银行细胞资源库的工作人员将其送达到上海儿童医学中心，让其重新在小叶的体内生根发芽，开启新的生命篇章。
像小叶兄妹这样的同胞间干细胞移植案例，不在少数。自体储存的脐带血造血干细胞“救爸爸”、“救妈妈”、“救兄弟姐妹”的案例更是屡见不鲜，美国三大自体脐带库应用案例统计显示，已有近300份自体储存的脐带血造血干细胞用于家庭亲缘人群的临床应用。在我国，目前已有近140份自体存储的脐带血造血干细胞用于亲属疾病和自身疾病治疗。
一人存储“生命备份”，全家或可受益。存储新生儿脐带血造血干细胞不仅是为宝宝上一份“健康保险”，更是为全家人种下了一颗“生命的种子”。
非常庆幸小叶的父母做出一个明智的决定，同时我们祝愿小叶早日康复，重返校园。在健康路上，中源协和生命银行脐血库始终与您相伴，为您及家人的平安幸福保驾护航。
来自：脐带血干细胞健康之家
干细胞具有很强自我复制能力的分化细胞。它们在特定的微环境条件下，能够分化成多功能细胞而不产生排斥反应。 伴随着人类对干细胞认识的不断深入和干细胞治疗技术的日益成熟，干细胞在2型糖尿病治疗中显示了广阔的应用前景。 供体不足和免疫排斥阻碍了糖尿病治疗效果 糖尿病是一种慢性终身疾病。终生药物甚至每日注射胰岛素的残酷事实给患者及其家人带来了巨大的精神压力和经济负担。长期以来，科学家一直在为治疗2型糖尿病做出不懈的努力。 从胰腺器官移植到胰岛组织移植再到分泌胰岛素的β细胞移植，反复的努力导致了两个主要问题——供体不足和免疫排斥阻碍了该移植技术有效干预2型糖尿病并有利于患者的普及。 干细胞四大优点加快了干细胞治疗2型糖尿病的发展 近年来，随着干细胞技术飞速发展，使用干细胞治疗2型糖尿病的效果令人鼓舞。干细胞具有许多优点： 1、干细胞来源丰富，细胞活性强； 2、干细胞免疫成分的来源相对较低； 3、干细胞不会发生疾病传播； 4、脐带血含有各种各样的干细胞；
相比之下，脐带血富含造血干细胞和间充质干细胞，更是原始的干细胞。此外，脐带血中也富含抑制性T细胞，自然杀伤细胞活性较弱，回输后受体排斥反应的发生率和严重性低于骨髓。 干细胞治疗2型糖尿病三大机制 2型糖尿病是由于胰岛素抵抗或β细胞分泌缺陷导致胰岛素相对缺乏所致。干细胞治疗2型糖尿病的目的是： 1、诱导胰腺干细胞，，使其分化为胰岛的β细胞，防止β细胞功能下降，增加β细胞的数量，并最大化营救和恢复胰岛功能； 2、改善胰岛微环境，促进胰岛细胞再生； 3、改善糖尿病引起的副反应。 采用干细胞静脉滴注，治疗结果显示，所有患者的血糖水平和胰岛功能明显改善。有4例在回输后3个月内停止口服药物干预，有5例患者的血糖控制从高水平提高到理想水平而不增加药物剂量，有3例患者血糖水平控制在不增加药物剂量的水平。 通过治疗可以看到干细胞对2型糖尿病患者的β细胞功能恢复和血糖控制有一定作用。由于干细胞的具有自我复制、增殖能力、刺激后进入细胞周期的速度，以及自分泌生长因子的诸多优势，相信随着干细胞治疗的深入，干细胞在2型糖尿病中的应用前景将会愈加广阔。
间充质干细胞的免疫原性及其在移植中的应用目的：探讨研究间充质干细胞的免疫原性以及rMSCs在临床移植中的应用。 方法：使用免疫组化方法鉴定rMSCs表面rat LA-ABC、rat LA-DR、CD80、CD86分子，并使用流式细胞术检测其含量；免疫组化法rMSC表面MHCI、Ⅱ类分子的鉴定。结果：rat LA-ABC分子在大鼠间充质干细胞的表面的表达率为13.08%，同时rat LA-DR以及CD80、CD86分子在大鼠间充质干细胞的表面均未有不表达，而外周血淋巴细胞PBLs的表面对rat LA-ABC、rat LA-DR、CD80、CD86这些分子的表达率分别为92.71%、22.39%、14.08%、9.03%。光学显微镜下观察细胞染色情况，细胞核中有棕黄染色者为阳性细胞。结论：MSC具有多向分化潜能，特性稳定；MSC不表达MHCⅡ类分子,不表达或极低表达MHCI类分子，能逃脱宿主免疫系统的排斥，异基因MSC可以进入宿主细胞，并能长期存在。MSC具有低免疫原性，临床上大大降低移植排斥及移植物抗宿主病，提高临床移植的存活率。 [Abstract] Objective: To investigate the mesenchymal stem cells of the immunogenicity and rMSCs in clinical transplantation. Methods: Immunohistochemistry identified rMSCs surface rat LA-ABC, rat LA-DR, CD80, CD86 molecules, and using flow cytometry and their contents; immunohistochemistry rMSC surface MHCI, Ⅱmolecule identification. Results: rat LA-ABC molecules in rat mesenchymal stem cell surface expression was 13.08%, while rat LA-DR and CD80, CD86 molecules in rat mesenchymal stem cells are not expressed on the surface were not suits the week the surface of blood lymphocytes PBLs of rat LA-ABC, rat LA-DR, CD80, CD86 expression of these molecules were 92.71%, 22.39%, 14.08%, 9.03%. Cells were observed under light microscope staining, nuclei were stained in brown positive cells. Conclusion: MSC have multilineage differentiation potential, characteristics and stability; MSC did not express MHC Ⅱmolecules, did not express or very low expression of MHCI molecules, can escape the host immune system rejection, allogeneic MSC can enter the host cell, and long-term existence. MSC with low immunogenicity, greatly reduce the clinical transplant rejection and graft versus host disease, improve the survival rate of clinical transplantation. [Key words] Bone marrow-derived mesenchymal stem cells; Immunogenicity; Transplant; Clinical appication 间充质干细胞（mesenchymal stem cell，MSC）是指源自未成熟的胚胎结缔组织的细胞。是可形成多种细胞类型的多能干细胞[1]。大鼠间充质干细胞（Rats MSCs）作为中胚层发育的早期细胞，其具备自我更新与多向分化的能力，经体外培养后可以进一步分化为骨细胞、软骨细胞等[2]。rMSCs除了在骨髓中主要存在之外，在大鼠机体的脂肪、血液、肺以及脐血中都有存在，因此随着近年来组织细胞学的发展，间充质干细胞在临床移植方面的应用也正不断扩大[3]。为探讨研究间充质干细胞的免疫原性以及rMSCs在临床移植中的应用，本文将所
许多糖友对于日复一日的血糖监测、吃药打针感到厌烦和痛苦。尤其是家里有糖宝宝的家长们，那一针一针，简直都像扎在自己的心头一般痛。人们忍不住就想大喊：什么时候科技能进步？什么时候糖尿病能治愈？ 糖尿病引起哪些并发症？ 1.心血管疾病 研究显示，近半数糖尿病患者并发冠心病。糖尿病人患心肌梗塞的可能性是正常人的5～7倍。 2.脑血栓 糖尿病人脑血栓的发病率为非糖尿病人的12倍。 3.糖尿病性肠病 糖尿病性肠病是其中晚期主要并发症之一。 4.白内障 在白内障患者中，糖尿病患者约占30%。 5.难以控制的肺结核
据有关资料统计，糖尿病病人并发肺结核者占肺结核患者的10%～15%，比正常人高出3-5倍。 6.肾病 糖尿病肾病是糖尿病引起肾脏内的微血管病变，是糖尿病常见的合并症，一般发生于患糖尿病5～15年之后。近年研究表明，糖尿病肾病的早期常无任何肾病症状，一旦出现尿蛋白定性试验阳性，说明患者已有持续性蛋白尿，其肾脏内的肾小球硬化，基底膜增厚，此时的糖尿病性肾病已进入中、晚期，如不及时有效地治疗，三五年后将发展成肾衰。 7.性功能障碍 糖尿病患者通常容易发生动脉粥样硬化，阴茎动脉管腔变窄，供血量减少而造成勃起不坚或勃起难以持久，形成阳痿。据统计，男性糖尿病患者中伴发阳痿者高达50%以上，女性患者约50%有性欲减退现象。 8.糖尿病骨病 糖尿病患者成骨细胞的合成及分泌功能严重受损，临床出现严重的骨质疏松。 9.膀胱病 糖尿病人持续的高血糖可损害盆神经的感觉传入纤维以及支配膀胱逼尿肌和内括约肌的交感和副交感神经，使膀胱感觉缺损和逼尿肌张力下降，表现为尿意降低、膀胱容量增大、排尿次数减少，间隔时间延长。 10.感染 糖尿病患者代谢紊乱，抵抗力削弱，白细胞的防御和吞噬功能降低，高血糖又有利于致病菌繁殖，故处于体表的皮肤粘膜及与外界相通的组织器官，易发生感染。 干细胞治疗糖尿病原理 研究发现，当身体某处出现问题，80%的干细胞都会向该处聚集，完成修复功能。基本
据最新调查显示，我国18岁及以上成人糖尿病患病率为11．6％，预计2030年，世界糖尿病发病人数将达到40亿。 胰岛B细胞自身免疫破坏所致的胰岛素绝对缺乏是1型糖尿病(TIDM)的主要发病机制。而2型糖尿病(T2DM)则与胰岛素抵抗或进行性的胰岛B细胞功能减退有关。目前治疗糖尿病的方法无法针对糖尿病发病的关键环节，不能从根本上治愈糖尿病。 基于这一现状，各国学者们开始致力于一种新的治疗策略——向机体补充新的具有正常分泌功能的胰岛细胞，重建患者体内的胰岛功能。1980年Largiader等人首次报道同种异体胰岛移植成功，但是供体来源的缺乏以及免疫抑制剂的终身服用，均限制了胰岛移植在临床上的应用，促使研究者们将研究重点转向了干细胞移植技术近年来，干细胞治疗糖尿病的相关基础和临床研究的开展为彻底治愈糖尿病带来了希望。 干细胞是一群具有高度自我更新、多向分化潜能以及能够分泌多种细胞因子的细胞，具有独特的生物学特性，是重建胰岛功能的最佳种子。目前，已确定的可分化为胰岛细胞的干细胞类型主要有：胚胎干细胞(ESCs)、间充质干细胞(MSCs)和诱导多能干细胞(iPSCs)等。
干细胞治疗T1DM的临床试验： 2007年Voharelli等1报道了首个使用AHSCT方案治疗T1DM的临床试验获得初步成功，该研究组2009年进一步报道了该临床试验扩大随访后的结果”。研究结果显示，对于新诊断的T1DM患者通过AHSCT方案可以重建内源性胰岛素泌，诱导大部分患者脱离胰岛素治疗。 2008年8月，Voharelli等在美国芝加哥起草了一项国际多中心、随机对照AHSCT临床研究方案，以进一步证实AHSCT的“免疫重建”效应，这项研究已于2009年正式启动。2012年Li等在此基础上进行了有益的探索和研究。 2014年DAddio等研究中65例新发T1DM患者经AHSCT方案治疗后6个月，59％的患者停用胰岛素，随访48个月后仍有32％的患者维持不用胰岛素，对治疗有反应的患者血糖代谢状态和胰岛B细胞功能显著改善。
干细胞移植的饮食护理 Revised by BLUE on the afternoon of December 12,2020.
血干细胞移植后的饮食准备 七月19,2013// 造血重建期：0天～16天 免疫重建期：20天～8个月 病毒活化期：20天～75天 子饺子、馄炖、豆包等带馅食品、豆制品、鲜奶、含乳糖奶粉、奶酪、生菜、生水果、生冷饮料。 四阶段饮食设计适用于HSCT后临床表现中-重度肠道GVHD病人。症状的严重程度决定病人进入下述哪一阶段的饮食设计。 血便消失后开始进食。 腹泻病人早期进食有利于营养补充和促进肠道修复。进食准备是基于最低消化能力以及通过进食行为逐渐增加病人消化吸收能力的考虑。 乳糖、脂肪、以及纤维素属于限制摄入之列，直到腹泻改善以后方可考虑给予。 生的新鲜水果和蔬菜禁止食用。在第一，第二阶段，熟制蔬菜也是禁食的，直到第三、第四阶段方可开始食用。
注意：由于第一、二阶段的饮食所含营养素是不充分的，所以第一、二阶段饮食设计仅适用于暂时的、胃肠耐受性差的病人。然后尽快过渡至第三第四阶段（含高蛋白的饮食）饮食。有的病人需要液体的或者必需营养素支持。有的病人可能需要完全的肠外营养。直到能够耐受适宜的肠内营养。 原则：GVHD膳食应当明确按照以下阶段进行安排。严重腹泻病人初始选择易消化吸收的食物。随着病情改善食物逐渐由简到繁，过渡到多样化。 第一阶段（GVHD-1）：适用于因肠道排异（GI-GVHD）所致的严重腹泻。所对应的饮食是“完全液体饮食”。营养液或营养素使结肠内物质最少化。液体食物在室温下，进食后基本吸收消化殆尽，无残留。所需消化能力最小。无奶制品或咖啡因饮料。 GVHD-1膳食主要含水和碳水化合物，所以只适用于短时间使用。一旦情况改善，应尽早加用必需营养素。 汤：米汤、无脂肉汤、清炖肉汤、牛肉清汤。 经滤过的果汁（李子汁和桃汁除外）。 饮料：不含咖啡因和奶 如果能够耐受，加用口服营养素 第二阶段（GVHD-2）： 除了用于GVHD腹泻以外，GVHD-2饮食也可用于了解病人对于固体食物的耐受性。此时，脂肪的消化吸收仍然是紊乱的。 第二阶段添加少量的固体食物—混合的碳水化合物。：低脂、低纤维、低乳糖，在上述食物列表的基础上，添加面包、麦片（谷类）、面食、牛奶、奶制品等。 营养适宜：
干细胞移植治疗糖尿病肾病 目前，干细胞在治疗糖尿病肾病中有了新的研究进展。用胰岛干细胞治疗糖尿病，比以往很多传统治疗方法无法比拟的优点： ①能够获得大量胰岛B细胞的最佳种子细胞，高度增殖和多向分化的潜能干细胞，能极大的解决胰岛细胞来源不足的问题; ②干细胞分化的胰岛细胞能够对血糖的生理性起到调节作用; ③用自身干细胞分化的胰岛干细胞，可降低免疫排斥，而且不受应用胚胎干细胞的社会伦理方面的制约; ④随着细胞学、分子生物学等基础医学的飞速发展和应用，多种类型的干细胞作为种子细胞诱导分化为B细胞成为现实。 2.在治疗肾病中，目前认为，骨髓来源细胞参与各种肾细胞的修复，包括肾系膜细胞、内皮细胞、足细胞和小管细胞。 在治疗糖尿病肾病中间充质干细胞有哪些优势？ (1)作为成体干细胞，MSCs与胚胎干细胞相比，它规避了人类的伦理问题。 (2)MSCs只少量表达MHC-I型分子，极少表达或不表达MHC-II型或T细胞共刺激分子。间充质干细胞的低免疫原性，能够逃避宿主的免疫监视系统在宿主体内长期存活，能够抑制树突状细胞成熟，抑制T 细胞增殖，是一类免疫特许细胞。
(3)间充质干细胞的特性具有多向分化潜能，并且来源广泛，取材方便，展现了在细胞替代治疗中的良好应用前景，也期待成为构建肾脏修复的种子细胞。 (4)应用原位杂交法测MSCs端粒酶活性，细胞呈阳性反应，但强度弱于作为对照的大肠癌细胞株的端粒酶活性，说明MSCs较幼稚，生命周期长，不具有恶性肿瘤的无限增殖能力，作为移植细胞有安全保障。 干细胞移植治疗糖尿病为人类治疗糖尿病提供一种全新的解决方法，糖尿病人又多了一线希望，我相信在不久的将来，干细胞能够治疗更多的疾病。
间充质干细胞移植治疗系统系性硬皮病 对一名安省的硬皮病（scleroderma）的患者来说，一个实验性的干细胞治疗方式为其健康状况带来180度的转变。安省圣托马斯（St. Thomas）的49岁居民慕斯卡特（Dan Muscat，图）于2014年患上系统性硬皮病，由于他皮肤胶原增生，导致他全身皮肤变硬变紧。作为一名珠宝商，他的工作也变得困难而痛苦。 他说：我的手卷成一团并且僵硬，我的脸上和脖子上的皮肤都变硬，我无法转动我的脖子，甚至不能转动身躯。步行超过20步几乎变得不可能。」他还失去了开车的能力，因为他的膝盖不能弯曲，无法踩到刹车或者油门。 之前没有任何治疗方法可以阻止这一疾病的发展。他的医生认为他只有几个月的活命时间。导致这种自身免疫性疾病原因不清楚，而疾病最终会袭击肺部和其他内脏。 慕斯卡特开始研究在加拿大、美国和欧洲进行的干细胞治疗测试。他通过加拿大干细胞基金会（Canadian Stem Cell Foundation）找到了艾金斯医生（Dr. Harry Atkins），艾金斯是渥太华医院（Ottawa Hospital）的干细胞治疗专家，他愿意为慕斯卡特治疗。 艾金斯表示，对于合适的病人来说，这一治疗方法确实对改善他们的生活质量有重要影
响。一旦免疫系统能够正常运作并且停止损伤皮肤，皮肤就会自愈。为硬皮病做干细胞移植在加拿大还是很新的事物。其他国家特别是在欧洲对此作出很多研究，而效果令人鼓舞。艾金斯医生曾经为其他自身免疫性疾病做过干细胞移植，例如多发性硬化病、僵硬人综合症、重症肌无力等。 慕斯卡特是加拿大首个运用在美国和欧洲得到测试的治疗方法的病例。该治疗方法从去年6月开始，医生们从慕斯卡特身上获取干细胞。然后使用强效的化疗药物，杀死导致他出现硬皮病的失效免疫系统。经过淨化的干细胞重新植入他身体内，目标是重新启动他的免疫系统，以便能够停止他的疾病。 慕斯卡特说，自从接受治疗以来，身体一天天好起来。他发现从6月以来，他的动作有所改善，紧绷情况已经消失。他逐渐可以恢复使用自己双手，现在又可以开始驾驶他心爱的赛车。 加拿大干细胞基金会的总裁兼首席执行官普莱斯（James Price）表示，对那些目前没有其他治疗方法的多种疾病患者来说，干细胞治疗能够给他们带来希望。普莱斯说，基金会的目标是能够在10年内令新的干细胞治疗方法得到运用。 该基金会指出，有证据显示，干细胞移植可以令其他严重自身免疫性疾病例如多发性硬化病、狼疮、类风湿关节炎等疾病的情况得到持续缓解。干细胞疗法现在也正在被研究用于治疗肌萎缩性侧索硬化、感染性休克、骨关节炎、糖尿病、黄斑变性等疾病。 在慕斯卡特的病情明显缓和之后，加拿大的其他干细胞治疗中心将会考虑为那些符合相关治疗条件的硬皮病患者提供这种治疗方法，为其他遭受这一疾病折磨的病人们带来希望。
(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910216830.0 (22)申请日 2019.03.21 (71)申请人 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公 司 地址 510000 广东省广州市开发区广州国 际生物岛螺旋四路一号生产区第五层 502单元 (72)发明人 陈海佳 葛啸虎 王小燕 杨祖婷 (74)专利代理机构 北京集佳知识产权代理有限 公司 11227 代理人 温可睿 赵青朵 (51)Int.Cl. A01N 1/02(2006.01) A61K 35/28(2015.01) A61P 19/02(2006.01) A61P 19/08(2006.01) (54)发明名称 冻存液及其在脐带间充质干细胞冻存中的 应用 (57)摘要 本发明涉及干细胞技术领域，尤其涉及冻存 液及其在脐带间充质干细胞冻存中的应用。 本发明提供的组合物，能够显著性的提高脐带间充质 干细胞在冻存条件下的活性，而以其制得的干细 胞制剂，具有良好的成骨分化、成软骨分化的潜 能，从而能够具有良好的修复软骨损伤的作用， 从而起到治疗骨关节炎的效果。权利要求书1页 说明书6页 附图3页CN 110050780 A 2019.07.26 C N 110050780 A
1.一种冻存液， 其由如下体积份的液体组成： 2.根据权利要求1所述的冻存液，其特征在于， 由如下体积份的液体组成； 3.根据权利要求1或2所述的冻存液，其特征在于， 所述人血白蛋白注射液中人血白蛋白的质量分数为20％； 所述葡萄糖注射液中葡萄糖的质量分数为5％； 所述羟乙基淀粉注射液中羟乙基淀粉的质量分数为6％。 4.权利要求1～3任一项所述的冻存液在脐带间充质干细胞冻存中的应用。 5.一种脐带间充质干细胞冻存方法，其特征在于，以权利要求1～3任一项所述的冻存液重悬脐带间充质干细胞。 6.根据权利要求5所述的冻存方法，其特征在于，所述重悬至细胞密度为5×107cells/mL。 7.权利要求1～3任一项所述的冻存液在制备干细胞制剂中的应用。 8.一种干细胞制剂，其包括：脐带间充质干细胞和权利要求1～3任一项所述的冻存液。 9.根据权利要求8所述的干细胞制剂，其特征在于，所述脐带间充质干细胞的密度为5×107cells/mL。 10.权利要求7～9任一项所述的干细胞制剂在制备治疗骨关节炎的药物中的应用。 权 利 要 求 书1/1页2CN 110050780 A
干细胞策略与糖尿病彻底性治疗 段连宁副教授 干细胞 ?未分化成熟 ?自我更新 ?不断增殖 ?分化为一种或多种不同类型细胞潜能 干细胞概念 –全能干细胞（totipotent cell） ?完整个体潜能 –多能干细胞(pluripotent cell) ?一种器官的多种组织潜能 –专能干细胞（multipotent cell） ?某一类型细胞潜能（造血干细胞－红系、粒系等） –胚胎干细胞（embryonic stem cell） ?早期胚胎来源，可分化为胎儿和各种类型组织 –体细胞（somatic cell） ?除卵子和精子外的细胞 –体细胞核转移（somatic cell nuclear transfer） –成人组织干细胞（adult stem cell） ?存在于各种组织中，自我更新、分化专能和多能 干细胞大事记 ?1967年华盛顿大学托马斯《新英格兰杂志》说骨髓移植可以治疗造血功能障碍；?1967年Lacy从胰腺分离胰岛细胞并体外培养成功； ?1992年纽约世界第一家生命银行－脐血库； ?1997年Wilnut采用核移植技术克隆绵羊“多莉”； ?1998年威斯康星大学《科学》人胚胎干细胞可以体外生长和培养（美国当年10大科技新闻之一）； ?1999年美国小鼠肌肉组织成体干细胞横向分化为血液细胞； ?2000年日本“千年世纪工程”一年就投资干细胞108亿日元； ?2001年英国议会允许克隆人类早期胚胎研究用； ?2001年曹谊林用干细胞在兔耳上培育出人耳； ?2001年布什总统转变态度宣布有限投资干细胞研究； ?2001年中国首家自体脐血库在天津成立 ?2001年中山大学陈系古利用体细胞合转移技术，获得100多个人类克隆早期胚胎；?2001年开始确立干细胞研究为国家重点课题；
造血干细胞移植护理 发表时间：2014-07-24T16:35:54.857Z 来源：《中外健康文摘》2014年第20期供稿作者：罗慧娟1 韩静2 于敬茹[导读] 严格遵守无菌操作，选择锁骨下静脉输注。应用无滤网输液器，避免尼龙滤网吸附造血干细胞而影响移植效果。罗慧娟1 韩静2 于敬茹3 (1内蒙古一机医院健康体检中心内蒙古包头 014030) (2包头医学院第一附属医院内蒙古包头 014010) (3内蒙古医科大学药学院内蒙古呼和浩特 010110） 【摘要】经大剂量放化疗、免疫抑制剂预处理，清除患者体内肿瘤细胞、异常克隆细胞，继而回输自体或异体造血干细胞，重建正常造血和免疫功能的治疗手段为造血干细胞移植(HSCT)[1]。过程中，娴熟的护理技术可提高安全有效输血疗效，提高患者移植成功率。 【关键词】造血干细胞移植输血护理 【中图分类号】R473 【文献标识码】B 【文章编号】1672-5085（2014）20-0213-01 造血干细胞移植受者在重建正常造血和免疫功能之前，需要合理制定输注造血干细胞治疗方案，避免或减少并发症出现，辅以娴熟的护理技术可提高安全输血疗效，亦为移植成功的关键所在。 1.心理护理 大剂量的放化疗及免疫抑制剂预处理后患者造血系统、免疫系统完全被催垮，患者在渴望通过输注造血干细胞达到治愈病症目的的同时，难免会顾虑输注过程中出现的并发症及不良反应，为此要对患者进行详细讲解，包括供者干细胞采集过程，处理方式，输注过程中应注意的问题，以及预防、处理不良反应的方法等，继而建立良好的护患关系，使其消除顾虑，保持平稳、安定的情绪积极配合输注治疗。 2.常规护理 对隔离室墙壁、地板及所用物品进行彻底消毒，并做细菌培养，确定生物及微粒洁净度是否达到标准等级。患者入住前需无菌膳食，对肠道、皮肤、粘膜处清洁消毒，并对躯体皮肤用1:2000洗必泰进行粘膜保护。 3.输注前护理 严格遵守无菌操作，选择锁骨下静脉输注。应用无滤网输液器，避免尼龙滤网吸附造血干细胞而影响移植效果。检查输血器与静脉导管连接是否完好，确保通畅、安全。为预防输注过敏反应发生，给予地塞米松静脉滴注。此外，应准备好相关急救药品，应对输注过程中可能出现的不良反应及并发症。 4.输注护理 冷冻保存的造血干细胞，应放置40~42℃温水中摇摆融化，时间控制在1min以内，并在融化后10min内输入患者体内。输入前还应轻轻摇匀造血干细胞悬液，使其缓慢滴入，并密切观察患者病情变化，及时排除输血故障，保障输注通畅。20min后如无不适感及不良反应等，可根据患者年龄、状况、机体耐受情况调整滴速，以每分钟60~70滴速为宜。每隔30min测量患者体温、脉搏、呼吸、血压等生命体征，并做好记录。注意观察尿液情况，必要时遵医嘱使用利尿剂，确保尿液pH值在7~8范围内。骨髓液输入时，可在另外一管同时静脉输注适量鱼精蛋白以中和骨髓液中的大量肝素，骨髓液输至余下约10mL 时应停止输注，避免脂肪颗粒进入血管内。如为外周血和脐带血干细胞的输注，亦可采用60mL注射器抽吸后缓慢静脉注射[2]。 短时、大量输注造血干细胞，以及预处理使用的大剂量放化疗药物，极易引发受者心力衰竭和急性肺水肿，因此在输注护理时应合理控制滴注速度，患者如出现心悸、气促、胸闷、双肺呼吸音改变时，应即刻减慢输注速度，及时与临床医生联系，报告说明患者时时情况，给予强心、利尿、吸氧等治疗措施。 全程陪护，密切观察，监护造血干细胞输注全程，密切关注患者体温、脉搏、血压、呼吸等生命体征，避免移植排斥反应及并发症的发生[3]。 5.输注后护理 输注后6h内仍应密切观察患者的生命体征，问询有无不适感，观察有无过敏反应、溶血反应，便于对症治疗护理，同时记录输入的造血干细胞数量；输注后7d左右，患者外周血中的中性粒细胞逐渐降至0，机体抵抗力下降，极易发生感染，此时应采取全方位抗感染措施，加强全环境保护，密切观察感染先兆，及时处理，防患于未然；输注后两周内仍有发生迟发性溶血反应的可能，应及时配合医师进行强化免疫治疗，监测血液中抗体效价、尿液常规情况及机体胆红素水平等。 参考文献 [1] 李娟，罗绍凯．血液病临床诊断与治疗方案[M]．北京:科学技术文献出版社，2010: 677． [2] 达万明，裴雪涛.外周造血干细胞移植[M].中国使用内科杂志，2004，24(9):521. [3] 马秀峰，王贵菊，张红.脐血造血细胞移植护理体会.实用护理杂志，1997，13(12):625.
脐带间充质干细胞概述 医学实验班70080103 王雪彤 脐带是胎儿时期连接母体与胎儿的索状结构,其外被羊膜,内含2条脐动脉、1条脐静脉,在动静脉之间含有特殊的胚胎粘液样结缔组织———华尔通氏胶(Whartonps Jelly) ,从华尔通氏胶分离得到的基质细胞即为人脐带间充质干细胞(HUMSCs) 。 1人脐带间充质干细胞(HUMSCs) 的形貌分析: 倒置显微镜下观察人脐带间充质干细胞贴壁生长, 为形态相对均一的梭形细胞,呈平行排列生长或旋涡状生长,低密度时较扁平, 密度增加趋于融合时细胞变细长。扫描电镜下观察呈长条状纤维样, 细胞膜表面不光滑, 有小结节状物, 细胞无明显突起,细胞间无网络状连接。透射电镜观察核大, 不规则, 核仁明显, 常染色质多, 异染色质少, 胞浆少。胞质内细胞器较少, 以粗面内质网和线粒体为主, 内有大量游离核糖体, 部分细胞可见内质网肿胀。 ——植块法培养获得的人脐带间充质干细胞(×200) 例如三代细胞的形态学特征——人体脐带间充质干细胞离体培养后，培养至第三代。第三代人脐带间充质干细胞以均一长梭形的细胞为主，细胞周边有较多的丝状伪足，见图1，2；并形成毗邻细胞之间的网状连接，见图3；细胞核较大，核膜清晰，含两三个核仁，核质比较小，见图4。 图1图
2图3 图4 2人脐带间充质干细胞(HUMSCs) 的生物学特性： HUMSCs既非胚胎干细胞又非成体干细胞,是别于两者之间的一类新的多能间充质细胞,它们之间既有联系又有差异。根据国际细胞疗法间充质与组织干细胞委员会( the Mesenchymal and Tissue Stem Cell Committee of the Internation2 al Society for Cellular Therapy)制定的最低标准, 脐带间充质干细胞（MSCs）需满足以下条件: 1)MSCs在标准培养条件下呈贴壁生长; 2 )MSCs表达CD105, CD73和CD90,不表达CD45, CD34, CD14或CD11b, CD79a或CD19和HLA2DR; 3)MSCs在体外至少能向成骨细胞、脂肪细胞和软骨细胞分化。和其他来源的 MSCs一样HUMSCs呈长条梭形贴壁生长,表达CD73、CD90、CD105、CD166、CD10、CD13、CD29、CD44 及HLA2ABC ,不表达CD34、CD45、CD31等造血干细胞标记或CD33、CD14、CD56及HLA2DR、2DA、2DP、2DQ ,体外诱导培养能向多种成体细胞分化。比照这些条件,表明华尔通氏胶来源的间质细胞具有MSCs特性。HUMSCs还表达原始干细胞标记,如白血病抑制因子受体通路、胚胎干细胞特异基因Ⅰ及端粒逆转录酶及Nanog、STAT3、AP、Oct24、BMP4、PAX6、ADAM12、Nestin、HLA2Ⅰ。另外, HUMSCs低表达移植相关的细胞表面标记CD80、CD86、CD40 和CD40 l等。在混合淋巴细胞检测中呈免疫抑制,并抑制T细胞的增殖,异体移植该细胞可产生免疫耐受性,表明其为一类免疫缺陷细胞,异基因移植不会发生免疫排斥反应。 3脐带间充质干细胞(UMSCs)的移植治疗作用: 骨髓MSCs用于改善心、脑功能的机制主要在于其分泌SDF一1和VEGF 等局部细胞因子, 诱导微血管的生成, 改善缺血组织微环境。UMSCs表达SDF 一1和VEGF, 提示了UMSCs治疗心脑梗塞、脊髓损伤的可能。 1)UMSCs对脑损伤的治疗作用 外源性UMSCs对脑组织的修复机理可能涉及到诱导内源性VEGF表达, 局部微血管增生, 抑制细胞凋亡等。利用液压冲击脑损伤模型, 证明
(一)1.Sections of 8–10 cm of umbilical cords, which are routinely discarded, were internally washed with phosphate-buffered saline (PBS), supplemented with 3% penicillin/streptomycin (Invitrogen-Gibco, Grand Island, NY, https://www.doczj.com/doc/aa897691.html, ) and immediately immers ed in Dulbecco ’s modi fied Eagle ’s medium- low glucose (DMEM-LG; Invitrogen-Gibco) supplemented with 10% fetal bovine serum (FBS; Invitrogen-Gibco) and 3% penicillin/streptomycin (Invitrogen-Gibco). All samples were processed within 12 –15 h after collection. 2. UCs were fil led with 0.1% collagenase (Sigma-A ldrich, St. L oui s, https://www.doczj.com/doc/aa897691.html,/sigma-aldrich/home.h tml) in PBS and incuba ted at 37°C for 20 min. Each UC was washed wi th proli feration medium, and the detach ed cell s were harvested after gentl e mass age of the UC. Cells were centr ifuged at 300 g for 10 min, resus -pended in prolifera tion medium, and seeded in 25-cm^ 2 flasks at a densi ty of 5 × 10^7 cells per ml.After 24 h of incubation, non-adherent cells were removed, and culture medi um was replace d every 3 days. （二）HuMSCs were prepared as previously described.8 Wharton's jelly was processed within 24 hours of collection and cut into pieces of about 1 mm3 for culture. These pieces were placed in 24-well plates and cultured in DMEM supplemented with 10% fetal bovine serum (FBS), 5 ng/ml EGF, 5 ng/ml basic fibroblast growth factor, 100 U/ml penicillin and 100 mg/ml streptomycin, and 1 μg/ml amphoterin B. The culture plate was placed in an incubator with saturated humidity at about 37°C containing 5% (v/v) CO2. The medium was changed every three days and the cells were passaged when they reaching 70% confluence. Adherent cells were recovered by treatment with 0.25% trypsin for 3 to 5 minutes then centrifuged. (三) 脐带间充质干细胞的分离：脐带自手术台取下后，浸入含抗生素的生理盐水中，4 ℃保存，在操净台内取出脐带，用D-PBS冲洗净脐动脉和脐静脉内的残余血液，用止血钳和剪刀剔除上述血管，将脐带剪成1 mm^3大小的组织块后放入200 mL 蓝盖试剂瓶，加入质量/ 体积比为0.1%的Ⅱ型胶原酶30 mL，置于恒温振荡仪内持续消化6 h ，100 目筛网过滤收集细胞。加入D-Hank’s液冲洗细胞3 次，用含体积分数为10%胎牛血清的DMEM/F12重悬细胞，调整细胞密度为(4.8×10^3~1×10^4)/cm^2，接种于6 孔板内，于37 ℃、体积分数为5%的CO2孵箱内培养，24 h 后换液。 脐带间充质干细胞在不同培养体系中的体外扩增：待原代培养的脐带间充质干细胞贴壁后，在两个6 孔板中进行3 种培养体系的生长对比实验。第1 个6孔板中细胞密度为1×10^7 L^-1，采用连续适应法使细胞由原代培养时使用的DMEM/F12分别逐步过渡到低糖DMEM、MesenPRO RS?Medium 和STEMPRO?MSC SFM 3 种培养体系，即用含体积分数为10%胎牛血清的DMEM/F12培养基和相应的3种培养基按体积比1 ∶1 混合培养细胞，通过下列混合培养基的方式，连续几代减少当前培养基的量，即1 ∶2 ，1 ∶4 ，1 ∶16和100% 替代培养基，每次适应改变培养体系时，传代细胞一两次，其中孔 1 为原代培养时的DMEM/F12培养液，孔2为低糖DMEM，孔3 为MesenPRO RS?Medium ，孔4 为STEMPRO? MSC SFM。第2 个6孔板中细胞密度为2×10^7 L^-1，每孔培养液设置同上，目的是避免在不同时间消化传代间充质干细胞时出现实验操作上的误差。 (四)脐带间充质干细胞的体外分离培养 (1)脐带白手术台取下后，浸入含抗生素的0．9％生理盐水中，4"C保存； (2)在超净台内取出脐带，用生理盐水冲洗净脐动脉和脐静脉内的残余血液，用止血 钳和剪刀剔除上述血管，将脐带剪成1mm^3大小的组织块； (3)加入质量／体积比为0．1％的II型胶原酶至完全覆盖组织块，置于培养箱内持续消化
造血干细胞移植的护理常规 1、移植前的护理 1.1、供者准备选用HLA相合的同细胞作为最适合供者，移植前两周对供者进行循环采血。 1.2、无菌层流室的准备：室内一切物品需经清洁、消毒、灭菌处理，室内不同空间采样，行空气细菌检测合格后病人方可进入。 1.3、病人准备： 1.3.1、心理护理：对病人及家属详细讲解骨髓移植的方法，过程和相关知识，使其有充分的思想准备和经济准备，鼓励病人建立战胜疾病的信心。 1.3.2、进行全面的身体检查。 1.3.3、无菌护理：进行口、眼、耳、肠道的无菌准备，行药浴，更换无菌衣裤后进入无菌室。 1.3.4移植前一天行中心静脉插管。 1.3.5预处理：是指全身射线照射和使用免疫抑制剂。其目的是杀灭受者的免疫活性细胞，使之失去排斥外来细胞的能力，从而允许供者的骨髓植入而使造血功能重建，同时还可消灭体内的异常细胞起到一定的治疗作用。执行预处理方案时需密切观察病情变化，鼓励病人多饮水，每天入水量4000ml以上，防止尿酸性肾病的发生。 2、术中护理 2.1、正确采集骨髓或外周造血干细胞，并保证足够的细胞数。 2.2、骨髓液回输：在无菌层流室6小时输完，每袋骨髓液至最后5ml时应留在袋中弃去，以防脂肪颗粒进入血液循环引起肺栓塞，外周血干细胞不需要过滤。 2.3、病情观察：监测生命体征的变化，并注意观察病人有无胸闷，气促等情况，配合医生做好相应处理。 3、移植后护理 3.1、心理护理：护士应多与病人交谈，调节病人情绪，传递家属信息，以解除病人的恐惧心理和孤独感，充分调节病人的积极性。 3.2、并发症护理： 3.2.1、感染；是最常见的并发症，对骨髓移植病人必须实行全环境保护：a严格执行无菌环境的清洁及消毒隔离制度b严格落实病人的各项无菌护理c 加强扩胸运动，防止肺部感染ｄ严密观察生命体征及病情变化。
目录 摘要 (2) 关键词 (2) 引言 (2) 内容……………………………………………………………2——11 1、糖尿病的简介 (2) 2、糖尿病发病现状 (3) 3、目前常见的糖尿病治疗方法 (3) 4、糖尿病的干细胞治疗现状 (4) 4.1成体干细胞 (5) 4.1.1胰岛干细胞 (5) 4.1.2骨髓造血干细胞 (6) 4.1.3骨髓间充质干细胞 (6) 4.1.4胎儿胰腺来源的干细胞 (7) 4.1.5其他组织来源的干细胞 (7) 4.2胚胎干细胞(ES细胞) (7) 5、干细胞治疗糖尿病的优势 (8) 6、干细胞治疗糖尿病前景 (8) 参考文献 (9)
摘要：糖尿病是以慢性高血糖为特征的代谢紊乱，高血糖是由于胰岛素分泌不足或作用缺陷或两者同时存在而引起。目前糖尿病的治疗以药物和注射胰岛素为主，曾有学者应用胰岛移植的方法治疗糖尿病，但因组织来源匮乏制约了胰岛移植研究的开展。随着分子细胞学技术的发展，干细胞定向分化成胰岛素分泌细胞已成为现实，并有很好的发展前景。 关键词：糖尿病干细胞 引言：目前，糖尿病人的数量越来越多，并且II型糖尿病发病年龄趋于年轻化，传统的药物治疗及胰岛素注射治疗不方便、效果差，并且长期的治疗给患者带来很大痛苦，。随着分子细胞学技术的发展，干细胞定向分化成胰岛素分泌细胞已成为现实，并有很好的发展前景。 1、糖尿病的简介 糖尿病是一组由于胰岛素分泌缺陷和/或胰岛素作用障碍所致的以高血糖为特征的代谢性疾病。持续高血糖与长期代谢紊乱等可导致全身组织器官，特别是眼、肾、心血管及神经系统的损害及其功能障碍和衰竭。严重者可引起失水，电解质紊乱和酸碱平衡失调等急性并发症酮症酸中毒和高渗昏迷。分为以下两种： I型糖尿病是由于产生胰岛素的β细胞特征性的被破坏造成的自身免疫疾病，需要注射胰岛素治疗。 II型糖尿病也叫成人发病型糖尿病，多在35~40岁之后发病，占糖尿病患者90%以上[1]。2型糖尿病病人体内产生胰岛素的能力并非完全
造血干细胞移植护理 造血干细胞移植是经大剂量放疗、化疗或其他免疫抑制预处理，清除受体体内的肿瘤细胞、异常克隆细胞，阻断发病机制，然后把自体或异体造血干细胞移植给受体，使受体重建正常造血和免疫功能，从而达到治疗目的的一种治疗手段。 【护理常规】 1.休息运动卧床休息，根据病情取适当的卧位。活动适度，以不觉疲劳为宜。对重度贫血或血小板计数≤20×10°/L的患者要绝对卧床休息。必要时吸氧。 2.饮食护理进食高蛋白质、高维生素、易消化的无菌饮食。食物给予微波炉高火3～5min消毒。化疗期间及移植早期饮食清淡、少渣、易消化和少刺激性，少食多餐。口服化疗药时，进餐时间应与服药时间最少间隔lh。预处理期及白细胞零期的患者暂不进食水果，鼓励患者多饮水，准确记录出入量。 3.用药护理严密观察预处理药物作用及不良反应，尤其是有无移植并发症的发生。备好抢救物品和药品，配合医师进行抢救。发热患者密切监测生命体征变化。 4.病情观察及护理对患者实施保护性隔离措施，密切观察白细胞计数值变化情况，严格遵守各项无菌技术操作规程。每日密切观察易感染部位，按操作流程认真实施口、眼、鼻、肛周、会阴、皮肤护理。
5.干细胞回输护理按照外周血造血干细胞回输流程为患者准备输注通路，严格执行"三查八对"制度，遵医嘱用药，输注过程有专人守候，严密观察输液反应、生命体征变化、患者有无心悸、憋气等，如有应及时报告医师。 6.基础护理做好基础护理及生活护理，预防压疮、坠床等护理并发症的发生，保证患者安全。 7.心理护理了解患者心理需求，给予心理支持，做好耐心细致的解释安慰工作，增强患者的治疗信心，严格执行保护性医疗制度。 【健康教育】 1.休息与运动在自体移植后3～6个月避免工作和上学，同种异基因移植则需要更长时间充分休息和恢复。移植后几个月内避免接触植物，不去人多拥挤的场合及菌尘多的环境。 2.饮食指导加强营养，饮食制作过程清洁，原料新鲜，没有久置。 3.用药指导遵医嘱按时服药，不得私自停药或减药。不要滥用药物，用药前后仔细阅读说明书，最好遵医嘱使用。 4.心理指导讲解相关知识，尽量消除患者思想顾虑。 5.康复指导避免饮酒、不要吸烟。家中保持清洁，注意个人卫生，经常洗手。 6.复诊须知定期复诊。一般移植后1个月，每周至少看1次门诊，以后可以2周至1个月1次。移植后的前3年内需要与医师保持密切联系。