小鼠（Mouse, Mus musculus）
属于啮齿目（Rodentia）、鼠科（Muridae）、小鼠属（Mus）。
~95%的实验动物为啮齿类动物，其中~90%为小鼠和大鼠。
选择小鼠作为实验模型的原因：
?易于饲养；
?繁殖能力强；
?繁殖周期短；
?背景知识较为清晰、全面；
?与人类有相同的器官，并发挥相似功能；
?可作为人类疾病模型；
?大量自发基因突变品系，；
?成熟的规模化培育技术。
常用近交系（inbred strain）：
BALB/c—白色毛发，红眼
C3H—杂色，深棕色毛发，毛发末梢有黄色条纹
C57B1/6—黑色毛发
DBA—棕色毛发，最老的近交系
129，FVB—常用于转基因操作
常用远交系（outbred strain）
ICR—白色毛发
Black Swiss—黑色毛发
Swiss Webster—白色毛发
基因型鉴定
?小鼠尾尖（<5mm）可获得足够量DNA用于基因型鉴定。（小鼠小于21天时，无需麻醉。小鼠大于21天时，需麻醉。）
?鼠耳打孔或剪脚趾标记获得的组织可用于基因型鉴定。
?小鼠毛发、唾液、粪便也可用于基因型鉴定。
基本生理知识
?非常敏锐的听觉，对高频噪音非常敏感；
?非常敏锐的嗅觉；
?不同品系的小鼠视力有所差别；
?成年小鼠体重约为20-40克。成年雄性小鼠比成年雌性小鼠体型、体重略大；
?心跳约为300次/分钟；
?呼吸约为100次/分钟；
?平均寿命为1-3年；
?小鼠有16颗牙齿，包括2颗上门牙、2颗下门牙，左右各有3颗上侧及下侧臼齿；
?小鼠的门牙可不断生长。门牙只在外侧有珐琅质，小鼠通过碾磨上下侧门牙保持门牙的锋利；
?雌性小鼠有5对乳腺，包括3对胸部乳腺，2对腹部乳腺；
?乳腺组织延伸至雌性小鼠身体的背侧。可经常在小鼠的体侧或背部发现乳腺癌肿瘤；
?雄性小鼠的脾脏约比雌性小鼠的脾脏大50%。
行为学
?小鼠通常较为温顺；
?小鼠对声音非常敏感，其行为受到外界声音极大的影响（进行小鼠动物实验时应尽量保持安静！！）；
?小鼠通过排泄物中的信息素与其它小鼠交流，小鼠对信息素非常敏感；
?静止时，小鼠通常四足着地，并通过视觉与听觉感知外部环境变化；
?睡觉时，小鼠身体通常卷曲，将头部埋于身体下部，多只小鼠通常紧挨聚集在一起；
?小鼠夜间活动活跃。小鼠清醒时非常活跃，常见行为包括在笼具内走动、移动笼具内物品，及理毛；
?小鼠清醒时代谢非常旺盛；
?小鼠通常不会呕吐；
?脱毛现象：同笼具内占统治地位的小鼠有时会吞噬其它小鼠的毛发，导致其它小鼠明显的脱毛现象。这通常是无害的，将占统治地位的小鼠移出单独饲养后，其它小鼠的毛发会再度长出。应与打斗、皮肤疾病等引起的脱毛现象予以区分。在笼具内提供充足的玩具/做窝材料可以防止此类脱毛现象；
?同笼具内雌性小鼠通常不会互相打斗；
?同笼具内雄性小鼠经常会发生打斗现象，在笼具内提供充足的玩具及做窝材料有时可以防止此类现象。应密切观察此类小鼠，必要时应分开单独饲养。性成熟前（出生或断奶时）即同笼具饲养的雄性小鼠发生打斗的可能性会大大降低。性成熟雄性小鼠一旦分开饲养后，不应再在同一笼具内饲养。
性成熟及繁殖
?雄性小鼠肛门与生殖器之间的距离是雌性小鼠的两倍，通常可用于区分雄性及雌性小鼠；
?雌性小鼠可见乳腺，雄性小鼠的乳腺不明显；
?可以采用两种交配模式：一雄一雌或一雄多雌。绝对不允许一雌多雄或多雄多雌；
?性成熟期为40-60天；
?交配期可至12-18个月。年老小鼠的产仔数量可能会下降；
?雌性小鼠有发情期（每4~5天）；
?怀孕期为19-21天；
?产仔量为4-12只。不同品系的小鼠产仔量有显著区别。通常近交系、转基因和基因敲除小鼠的产仔量较少。
?仔鼠应于21-28天（体重10-12 g）时断奶；
?雌性小鼠在分娩后24小时内易再度怀孕。雌性小鼠再度分娩前，前次仔鼠应断奶，分笼，以避免笼具过度拥挤，并使母鼠可以全身心照顾新生小鼠；
?阴道栓是检测交配成功很好的指标；
?笼具内必须提供充足材料供繁殖期及哺乳期小鼠做窝；
?新生小鼠为粉红色，无毛发；
?新生小鼠眼睑及耳道是闭合的，外耳没有充分发育；
?出生后不久，应透过新生小鼠皮肤在腹部左侧看到白点，称为奶点。奶点是新生小鼠得到充分照顾和健康状况良好的重要指标；
?如母鼠受到惊吓，或幼鼠健康状况欠佳，母鼠可能会吃掉部分或全部的幼鼠。母鼠分娩后数天内不应打扰，如外界噪音、移动笼具、换笼等；
?如确需其它母鼠代乳，幼鼠应用代乳母鼠笼具内垫料擦拭以去除原母鼠/笼具气味，并与代乳母鼠一同移至新的笼具；
?幼鼠在2-3天时长出毛发；
?幼鼠耳朵于3-4天时张开；
?幼鼠眼睛于12-14天时张开。
小鼠饲养
操作时应保持安静！小鼠对尖锐的噪音非常敏感。轻柔的背景音乐有助于小鼠保持良好状态。
笼具
?鞋盒型笼具—铺有垫料，最为常用
?独立通风笼具（IVC）--可以更好地保持动物饲养环境，防止病原体传染
?实验动物平台工作人员应定期按照标准程序更换笼具。实验动物平台工作人员及科研人员应经常检查笼具卫生状况，必要时笼具应提前更换。?实验动物平台工作人员应定期按照标准程序打扫并消毒动物饲养间。
?确保饮水瓶畅通、无泄漏。
?移动笼具时，应取出饮水瓶或掉转饮水瓶方向，避免饮用水撒至笼具内。
饲料
?饲料及饮水通常稳定、持续供应。通常应提供可维持数天的饲料和饮水；
一般情况下饲料中无需添加额外营养成分，但对健康状况欠佳的小鼠和幼鼠可额外提供维生素等。
?饲料高压灭菌会破坏一部分维生素，应添加复合维生素。
?饲料通常为4-5克的紧密颗粒，同时可以帮助小鼠磨损门牙。成年小鼠日消耗约为3-6克。
?非颗粒状或粉末状的饲料通常只在需检测食物摄取量，或需添加其它食物添加剂时使用。
动物抓取
熟练掌握抓取小鼠是后续操作的基础。实验人员可以用以下方法进行操作：?用拇指和食指或镊子夹起小鼠尾巴的根部；（注意：小鼠的尾尖对温度敏感，应避免接触小鼠的尾尖部分。）
?或用拇指和食指或镊子夹起小鼠颈后的皮肤。（注意：小鼠颈后的皮肤较为松弛，如不能限制小鼠头部转动，小鼠可能会反咬。同时应注意不应影响小鼠的正常呼吸。）
?幼鼠可以用手掌环握的方式，或抓住幼鼠颈后的皮肤进行操作。利用手掌环握方式时，应同时抓取一部分垫料。
动物标识
?笼卡标识内容应醒目、清晰。应包括课题组、研究人员/联系人姓名、联系方式、实验方案编号、品系、性别、动物编号等；
?特殊需求应使用不同于普通笼卡（如颜色）的卡片清晰标明需求，如病鼠、孕鼠、分笼、特殊饲料、限制饮水等；
?小鼠标识
剪耳法或耳标法：小鼠无需麻醉；
刺身法：小鼠必须实施麻醉。
如何减少动物紧张情绪？
?应尽量每天同一时间进行维护工作；
?尽量减少人员进出；
?工作时保持安静；
?使用nestlets。
如何辨别动物是否不适？
?小鼠有自残行为；
?好斗—触碰时是否试图撕咬？
?焦虑—小鼠是否表现出不安？
?外观—小鼠的毛发应整齐，有光泽。小鼠的毛发是否散乱、无光泽、油腻，或脱毛？
?协调性—小鼠是否表现出摇晃、不能保持平衡？
?体重/脱水—饲料摄取量和/或饮水量是否有明显改变？
?情绪—小鼠是否表现出昏睡或对外界漠不关心？
?牙齿—小鼠的牙齿是否排列整齐？
?运动—小鼠是否移动缓慢或无停歇地移动？
?身体姿态—小鼠是否表现出弓背？
?排泄物—是否有异常（量）的尿液和/或粪便？
常见疾病和预防
预防
?严格按照标准操作程序进行操作
?保证只在超净台中打开笼具
?专人负责，避免各房间间交叉污染
?尽可能减少不必要的操作
?日常病理检测
常见疾病
一、病毒性疾病
（一）小鼠肝炎病毒（Mouse hepatitis virus, MHV）
1. 属冠状病毒。自然宿主为小鼠，也易感染免疫缺陷小鼠。发病时无明显症状或表现出昏睡、毛发粗刚、厌食，有时有神经系统症状。通过飞沫或经口传播。
2. 感染小鼠肝炎病毒将导致免疫系统异常，抑制淋巴细胞增殖、抑制小肠淋巴组织Peyer’s Patch中B细胞免疫球蛋白的分泌，从而可能影响相关的研究。
3. 控制方法：A.清除受感染小鼠；B.对所有新生小鼠实施安乐死，暂停繁殖，
成年小鼠应至少隔离6-8周；C.如确有必要，应实施剖腹产以防止感染。
（二）仙台病毒（Sendai virus）
1. 属RNA病毒中的副黏液病毒科。可导致小鼠最常见的呼吸器官疾病，通常呈潜伏性感染，不产生明显的临床症状。
2. 感染途径：由呼吸道进入体内，在上呼吸道复制后进入气管及小支气管中。仔鼠或某些品系小鼠，如DBA/2感染仙台病毒常发生肺炎。
3. 临床症状：皮毛粗刚、呼吸困难和气管啰音。
4. 预防及控制：避免让感染动物进入动物房内，定期对供应商作健康质量监控，隔离。
（三）小鼠肺炎病毒（Pneumonia virus of mice, PVM）
1. 自然宿主：小鼠、大鼠和仓鼠。属于副黏液病毒属的肺病毒。小鼠常见的感染（感染率> 50%），通常无临床症状。
2. 病变：引起慢性鼻炎，间质性肺炎。
3. 控制：使用剖腹产及良好的屏障系统。
（四）鼠痘Mouse pox（缺肢畸形ectromelia病毒）
1. 属正黏液病毒属。宿主为小鼠。鼠痘是非常严重的疾病，具高度传染性及死亡率。传染途径：直接接触和媒介物：如小鼠组织，小鼠血清，转移性小鼠肿瘤。
2. 有抵抗力的品系（不明显的感染）：C57BL/6和C57BL/10；易感染的品系（表现明显临床症状）：BALB/c、DBA/2、CBA和C3H。
3. 临床症状：可呈现急性、慢性或隐性等型。包括面部水肿、皮下丘疹、脚、面部、耳和尾巴皮肤糜烂，或者是四肢和尾巴坏死腐脱。急性会导致小鼠死亡。
4. 控制：
(1) 对引进的小鼠和小鼠组织作隔离及检测。
(2) 消除感染的小鼠和组织，以及消除房舍内的污染。
(3) 停止繁殖，怀孕期间子宫内的感染，导致剖腹产可能无法完全避免污染。
（五）乳鼠流行性腹泻（Epidemic Diarrhea of Mice，EDIM）
1. EDIM病毒属呼肠孤病毒科轮状病毒属，为双链RNA病毒,其外壳上具有区别于其它轮状病毒的特异性抗原。EDIM病毒对热敏感，pH3～9条件下稳定，无血凝素，对乙醚、氯仿、脱氧胆酸盐和胰酶有抵抗力。EDIM病毒不能在鸡胚中生长，也不能在体外细胞培养中传代。
2. 小鼠是EDIM病毒的唯一自然宿主，小鼠对本病的易感程度随日龄的增长及免疫力的提高而下降，一般15日龄内的小鼠最为易感。C3H对其敏感，而C57BL
则具有相对的抵抗力。EDIM通过消化道和呼吸道传播，是一种高度接触性传染病。
3. EDIM主要高发于第一胎15日龄以内的乳鼠。乳鼠感染后早期腹泻、脱水、消化不良、皮肤皱缩、肩背皮肤上有干燥白色痂皮，有时皮肤发绀，透过腹壁可看到胃内充满白色乳汁，身体粘附黄色稀便。后期粪便变干而阻塞肠道，可能引起直肠嵌塞而死亡。乳鼠可正常吃奶，但因消化不良而积于胃中。症状轻微时2～5天可自行康复。成年小鼠呈隐性感染并不断向外排毒。
4. 预防
采用剖腹产技术可建立无EDIM病毒的种子群。饲养室应安装高效空气过滤装置，进入饲养室的垫料、饲料、用具等应彻底消毒。一旦发生本病，应立即淘汰整个鼠群，焚烧尸体。饲养室应彻底消毒后重新引种建群。
（六）淋巴球性脑膜脉胳膜炎病毒（Lymphocytic Choriomeningitis Virus, LCMV)
1. 淋巴球性脉络丛脑膜炎病毒属沙状病毒科（Arenaviridae），为单链RNA病毒。
2. 病毒会由尿液、唾液及乳汁中排出。被病毒感染的动物所污染的垫料及其他的病媒（如寄生虫等）为潜在传染源。
3. 小鼠感染多为隐性无症状，发病小鼠出现伴随大量淋巴细胞浸润的脑脊髓膜炎和肝炎。
4. 感染LCMV会干扰实验结果：
(1) 造成生化物质的污染（肿瘤，细胞系，病毒种株－白血病和狂犬病）；
(2) 造成小鼠体液免疫和细胞免疫下降；
(3) 在感染初期诱发天然免疫细胞的活性；
(4) 增加其它病原体的感染力。
5. 预防：
(1) 针对新进无症状动物以及内部具感染风险的动物族群进行周期性的血清学
监测。
(2) 尽量避免过密饲养，给予良好的饲养环境。
（七）其它
小鼠也容易受到其他病毒感染，如K病毒、泰氏脑脊髓炎病毒、小鼠腺病毒等。这些病毒在健康小鼠体内呈隐性感染，无明显临床症状。但是这些病毒仍会对研究造成影响。一般应做定期血清学ELISA检验或病理学检查。
二、霉浆菌性和细菌性疾病
（一）霉浆菌症（Murine mycoplasmosis）
1. 又称慢性鼠类肺炎。为革兰氏阴性菌，在啮齿目常见菌种有Mycoplasma pulmonis。感染大鼠、小鼠。在开架饲养区动物中常见，在SPF屏障系统内饲养
第第九九章章 动动 物物实实验验基基本本操操作作技技术术动物实验是医学研究的基本手段,是药物安全性评价的必经途径三娴熟的动物实验操作技术和技巧,是顺利完成动物实验并取得准确二可靠的结果和较好的反应重复性的保证三对实验动物饲养管理人员和兽医技术人员来说,动物不会讲话,不领人情,具有自卫本能,随时准备攻击兽医及其他工作人员,更不会自动地服药和接受必要的检查和治疗,这无疑给平时的饲养管理和兽医治疗工作增添不少麻烦三所以无论是饲养人员还是动物实验人员都必须熟练掌握常规的和一些特殊的实验动物学技术,才能科学合理地养好实验动物,规范熟练地开展动物实验,有效地对患病动物进行检查二诊断和治疗三同时也不会造成动物的应激反应或伤害,也不致给饲养管理和动物实验技术人员自身造成意外的伤害三 第一节 实验动物的抓取与固定 一二大二小鼠的抓取固定法 1. 小鼠的抓取固定方法先用右手抓取鼠尾并提起(图91),置于鼠盒的笼盖或实验台上向后拉,在它向前爬时,用左手拇指和食指抓住小鼠的两耳和颈部皮肤,用左手小指钩起鼠尾,中指和无名指抵 住其背部即可,适宜作灌胃,皮下二肌肉二腹腔注射等实验操作(图92)三 图91 大、小鼠尾部抓取 图92 小鼠抓取固定 2.大鼠的抓取固定方法基本上与抓取小鼠相同,轻轻抓住鼠尾根部,将大鼠提起置于鼠盒笼盖上,迅速用左手
拇指和食指捏住鼠耳后下方,固定其头部,不让其转动,余下二指紧捏鼠背皮肤,置于左掌心,右手即可进行腹腔二肌肉二皮下注射与灌胃或其他实验操作三注意不要用袭击方法抓取大鼠,否则易被咬伤三进行解剖手术和心脏采血时,可先麻醉动物,取背卧位,再用细绳活结或大头针将鼠前后肢分别固定在板上三进行尾静脉注射或采血时,可用鼠静脉注射架固定,先选择合适固定架,打开鼠筒盖,将鼠尾提起,鼠身放入固定架,露出尾巴,盖好筒盖,即可进行尾静脉注射或尾静脉采血等操作三 二二豚鼠的抓取固定法 豚鼠的抓取固定法基本上与大鼠相同,只是由于豚鼠较胆小,易受惊,所以抓取时必须稳二准和迅速三可先用一手迅速抓住鼠背肩胛上方,用力下压固定后,以拇指和食指环握颈部,再用另一只手托住臀部即可三 三二家兔的抓取固定法 抓取家兔一般用右手抓住兔颈部的毛皮,并提起,用左手托其臀部或腹部,让其身体重量大部分集中在左手上三注意不能用手抓双耳或腹部,以免损伤动物三 家兔的固定分为盒式二台式两种三如做兔耳血管注射和兔耳采血,可用盒式固定;如做呼吸二血压测定试验和手术,则可用台式固定三台式固定的方法是将家兔固定在兔台上,四肢用粗棉绳活结绑住,拉直四肢,用绳绑在兔台四周的固定栓上,头用固定夹固定,或用一根粗棉绳兜住兔的切齿,绑在兔台铁柱上三 四二犬的抓取固定法 毕格犬能主动配合实验人员,抓取时动作要温柔,一般不会攻击人三抓取杂种狗时,为了防止其咬人,最好首先让饲养员帮助绑住狗嘴,或先轻轻抚摸其颈背部皮毛,然后用布带迅速兜住狗的下颌,绕到上颌打一个结,再绕回下颌打第二个结,然后将布带引至头后,颈项部再打两个结,这样就将狗嘴捆绑住了,注意松紧要适宜三如狗过于凶猛,可先用狗头钳夹住其颈部,将狗按倒在地,再扎其嘴三 犬的固定也可先将狗麻醉后,采用头部固定和四肢固定法三头部固定可用圆形铁圈的狗头固定器,铁圈中央有一弓形铁,与螺丝棒相连,下面有一根平直铁闩,操作时,先将狗舌拉出,把狗嘴插入固定的铁圈内,再用平直铁闩横贯于尖牙后部的上下颌之间,然后向下旋转螺丝棒,使弓形铁逐渐下压在狗的下颌骨上,把铁柄固定在实验台的铁柱上即可三四肢固定法与家兔相同三 五二猪的抓取固定法 猪身溜圆,力大,缺少控制部位,猪齿容易伤害固定者,在抓取猪时要注意保护自己三最有效的方法是实验者双手抓住猪的双后肢的小腿部,提起后腿,猪便无法移动,此时助手再用橡皮带固定或注射麻醉剂三猪亦可采用挤压式不锈钢笼固定法三不提倡采用抓猪尾巴来提举后身的方法,因抓猪尾巴易引起猪尖叫,且易滑脱三 六二猴的抓取固定法 一般采用网罩法和挤压式不锈钢笼固定法,后者与犬的方法相似三网罩法是实验人员一
动物实验室的设计布局是规范工作流程和人员、动物、物品等相互关系和移动，并确保实验室安全，此外，对形成屏障结构具有重要意义。本文将从三个防护区（外围防护区、建筑防护区、饲养防护区）和四条控制路线（人员控制路线、动物控制路线、物料控制路线、废物控制路线）等方面详细介绍。 动物实验室 1.外围防护区 外围防护区主要指建筑外围的区域。鉴于实验动物饲养的特殊性，外围可能需要设监控设备、人员进出的控制、卫生防护带等。如果设施内从事涉及高致病性病原微生物的动物实验活动，须考虑设施的安保要求，以及一旦发生意外事故后对周围控制区域、疏散和救援的需求。外围的防护主要通过设置栅栏、围墙等方式实现。鉴于景观的需求，使用栅栏更显人性化。栅栏不应低于2米，栏杆的间距不大于10厘米，栏杆要坚固、易于清洁。 此外，需要设置照明系统、报警系统和视频监控系统，更高级别的防护包括地下的电磁场报警、红外线报警和运动物体报警、低压电击等措施。防护区内一般不布置绿化，以免影响监控，同时也可减少昆虫、老鼠等。为保证正常的外来服务，如邮件、送货、访客等，通过风险评估决定是否需要建设安检、特殊通道、中转站等措施。对控制区域应设置警示牌，避免无意闯入。对防护要求高的设施，
应保证外来车辆不能靠近设施，距离保持至少30米。在外围防护区，宜设专用的外部人员和车辆入口。 2.建筑防护区 建筑防护区主要指动物实验室所在的建筑。建筑内有动物设施和其它设施之分，其它设施可以与动物设施有关，也可以无关;动物设施可以就是建筑的主体，也可以是其部分。需要考虑的主要问题是动物设施环境与建筑物内其它区域环境的相互隔离与相互关系，人员、动物、物料和废物的进出路线。使用时，动物设施及其相关的设施宜集中布置，从事感染动物活动的设施需要单独布置。建筑除主入口外，要考虑设置动物、大型设备和废物的出口和入口。 出于安全考虑，必须评估和明确对门窗的性能要求。在合理控制数量的前提下，对门窗的大小、形状、耐冲击能力、耐火性、保温性、光学特性等均要有要求。可能的风险来自于异常的气候、自然灾害、人为破坏、设备异常等，如，通风系统的异常可造成室内压力急剧变化，造成门窗损坏。 3.饲养防护区 饲养防护区设施基本的形态是由入口、走廊(或通道)、功能间和出口组成。走廊是连接各功能区的纽带，各种通道发挥快捷、隔离、消毒等作用。实验动物设施的特点是不相容的因素多，需要利用走廊和通道对不相容的因素作合理的安排。走廊的形式包括双走廊、单走廊、U型走廊、环廊等。设施内部的安排应根据工作流程和利于控制风险的原则确定，此外，还要考虑工程可行性和日常维护的方便性，可以组成相对独立的单元。 1.人员控制路线 进出动物实验室的人员主要包括动物管理人员、动物实验人员和清洁人员。此外，还有送货人员、维护人员、来访人员、检查人员、安保人员等。为保证各类人员的进出有序，需要合理设计路线和设置不同级别的物理限制。人员的移动具有主动性，可以到达任何区域，要通过SOP和物理控制措施管理人员的移动。
常用实验动物 1、小鼠 喜欢群居，怕热，高温容易中暑 雌雄性小鼠交配后10~12小时，在雌性小鼠阴道口会形成白色的阴道栓 主要解剖学特性 消化系统：食管内壁有角质化鳞状上皮，利于灌胃；有胆囊；胰腺分散，色淡红，似脂肪组织。 生殖系统：雌性小鼠为双子宫型，呈“Y”形，卵巢不予腹腔相通，无宫外孕。 骨髓为红骨髓，无黄骨髓，终身造血。 皮肤无汗腺。 小鼠常用品种、品系 １. 近交系小鼠 C3H：1975年从美国引进，野生色毛； ? C57BL/6：1975年从日本引进，黑色毛； ? BALB/c：Bagg1913年获得小鼠白化株，经近亲繁殖20代以上育成，毛色为白色； ? DBA：分为DBA/1和DBA/2两个品系，1977年由美国实验动物中心引进，毛色均为浅灰色。 2、封闭群小鼠 ①KM小鼠：我国使用量最大的远交种小鼠，白色，抗病、适应力强，繁殖、成活率高。 ②ICR：1973年由日本国立肿瘤研究所引入我国，白色，其显著特点是繁殖
力强。 ③LACA ：1973年由英国实验动物中心引入我国，白色。其实是小鼠改名而成。 ④NIH ：由美国国立卫生研究院培育，白色，繁殖力强，幼仔成活率高，雄性好斗 3、突变系 1、裸鼠：第11对染色体上的裸基因（nu）导致无毛裸体、无胸腺 2、SCID小鼠：第16对染色体上的Scid隐性基因突变基因导致T、B淋巴细胞联合免疫缺陷．外观与普通小鼠差别不大，被毛白色，体重发育正常 3、快速老化模型小鼠：4~6月龄以前与普通小鼠的生长一样，4~6月龄以后迅速出现老化症状。如心、肺、脑、皮肤等器官老化，出现骨质疏松和老化淀粉样变。侏儒症：比正常小鼠体型小，缺少生长素和促甲状腺素，用于内分泌研究。小鼠在医学、生物学的应用 1、重组近交系小鼠将双亲品系的基因自由组合和重组产生一系列的子系，是遗传分析的重要依据，用作基因定位及其连锁关系的研究 2、提供自然的动物模型 2、大鼠染色体数2n=42 喜独居，喜啃咬，性情较凶猛、抗病力强，对新环境适应力强，但对环境刺激、炎症反应敏感。强烈噪音可引起食仔或抽搐；湿度低于40%易发生环尾巴症。行为表现多样，情绪反应敏感，易接受通过正负强化进行的多种感觉指令的训练雌性2.5月龄达到性成熟，具有产后发情、产后妊娠的特点。寿命2.5～3年。解剖学特征
名词解释：实验动物（laboratory animal）：指经人工培育，对其携带的微生物、寄生虫进行严格控制，遗传背景明确，可用于科学实验、药品、生物制品的生产和检定及其它科学研究的动物。 实验用动物：是指一切用于实验的动物，除了符合严格要求的实验动物外，还包括家畜和野生动物等。 实验动物与实验用动物：遗传控制不同,微生物控制等级不同,培育的形质和目标不同。 人类疾病的动物模型：是指医学研究中建立的具有人类疾病模拟表现的动物实验对象和相关材料。 实验动物标准化：遗传质量标准化微生物质量标准化环境标准化营养标准化 按遗传控制标准，实验动物分为：近交系（CH3），突变系（裸鼠），杂交系（F1），封闭群（远交系）（KM小鼠，wister大鼠） 按基因型分：1、同基因型动物（如近交系、F1代） 2、不同基因型动物（如封闭群） 按微生物控制程度分级：普通级，清洁级，SPF级，无菌级（2001年版的国家标准中，大小鼠取消普通级动物，犬、猴只分普通级和SPF级，豚鼠、地鼠和兔仍然分4级） SPF动物定义：除清洁动物应排除的病原外，不携带主要潜在感染或条件致病和对科学实验干扰大的病原。（屏障环境中饲养，种子群来源于无菌动物或剖腹产动物。饲养管理同清洁动物） 无菌动物的特点：形态学及生理学特点： ①形态学：盲肠肥大（增大5～6倍），肠壁薄，易发肠扭转。心脏、肝脏、脾脏相对较小。 ②生理学: 血中无抗体，巨噬细胞吞噬能力弱。体内不能合成维生素B和K。无菌鸡生长较快、无菌豚鼠和无菌兔生长较慢。无菌大小鼠与普通大小鼠生长速度相同。
（3)饲养要求：隔离环境中饲养，种子群来源于剖腹产动物或无菌卵的孵化。由于肠道无菌，饲养困难，应注意添加各种维生素。每2～4周检查一次动物的生活环境和粪便标本。 悉生动物：概念：悉生动物是指在无菌动物体内植入已知微生物的动物。又称已知菌动物。植入一种细菌的动物叫单菌动物；植入两种细菌的动物叫双菌动物；植入三种细菌的动物叫三菌动物；植入多种细菌的动物叫多菌动物。（由于肠道接种有利于消化吸收的细菌，故饲养较无菌动物容易，形态学和生理学方面与普通动物无异。） 近交系：经至少连续20代的全同胞兄妹交配培育而成，品系内所有个体都可追溯到起源于第20代或以后代数的一对共同祖先。 特点： 1、其基因纯合度达到98.6%，个体差异小，似同卵双生反应一致重复性好，用少量动物即可获得精确度很高的实验结果，个体相互之间可以接受皮肤、器官移植。 2、隐性基因纯合使许多病态性状得以暴露，可获得大量先天性畸形及先天性疾病的动物模型.如高血压、白内障、糖尿病.动物模型。 缺点：出现近交衰退。近交衰退是近交过程中动物群体由于基因分离与纯合发生一系列不利于个体或群体发育的变化和现象。 F1代动物：两个无关近交系杂交形成的第一代动物。 特点：虽然基因杂合，但个体之间基因杂合的一致,个体差异小。除具有近交系的优点,还具有生命力强耐受性强,可长期进行观察，具有杂交优势，个体相互之间可以接受皮肤、器官移植。 封闭群动物（远交系）：以非近亲交配方式繁殖生产的一个实验动物种群，5年以上不从外部引新血缘或至少繁殖四代以上，在封闭条件下交配繁殖，保持了一定杂合性和群体遗传特征。每代近交系数增加量<1％。在人类遗传研究、药物筛选、毒物实验等方面起着不可代替的作用等。 突变系动物：指正常染色体的基因发生了变异，动物具有一种或多种遗传缺陷。例如：无胸腺裸鼠、严重联合免疫缺陷动物SCID小鼠。为肿瘤、免疫疾病的研究提供了理想的材料。
．实验动物分级及其标准 根据实验动物微生物控制标准，可将实验动物分为四级： 一级普通动物（CV），系指微生物不受特殊控制的一般动物。要求排除人兽共患病的病原体和积少数的实验动物烈性传染病的病原体。为防止传染病，在实验动物饲养和繁殖时，要采取一定的措施，应保证其用于测试的结果具有反应的重现性（即无论不同的操作人员，在不同的时间，用同一品系的动物按规定的实验规程所做的实验，都能获得几乎相同的结果）。 二级清洁动物（CL），要求排除人兽共患病及动物主要传染病的病原体。 三级无特殊病原体动物（SPF），要求到二级外，还要排除一些规定的病原体。其除菌与灭菌的方法，可使用高效空气过滤器除菌法、紫外线灭菌法、三甘醇蒸气喷雾法及氯化锂水溶液喷雾法。 四级无菌动物（GF）或悉生动物（GN）。无菌动物要求不带有任何用现有方法可检出的微生物。悉生动物要求在无菌动物体上植入一种或数种已知的微生物。 在病理学检查上，四类实验动物也有不同的病理检查标准。 一级外观健康，主要器官不应有病灶。 二级除一级指标外，显微镜检查无二级微生物病原的病变。 三级无特殊病原体动物。无二、三级微生物病原的病变。 四级不含二、三级微生物病原的病变，脾、淋巴结是无菌动物组织学结构。 综合上述，对不同级别的实验动物在动物房设计上和管理上则有不同的要求。 无菌、已知菌以及无特殊病原体动物都需要在无菌或尽可能无菌的环境里饲养，这种环境，目前国际上通用称为屏障环境，即用一道屏障把动物与周围污染的环境隔开，就如胎鼠在母鼠子宫内一样。这种环境从控制微生物的角度分为隔离系统、屏障系统、半屏障系统、开放系统和层流架系统等五大类。 A 隔离系统 是在带有操作手套的容器中饲养动物的系统，用于饲养无菌动物和栖生动物。内部保持按微生物要求的100级的洁净度，但其设置的房间及操作人员不必按无菌室考虑。 B 屏障系统 把10000~100000级左右的无菌洁净室作为饲养室，主要用于无特殊病原体动物的长期饲养和繁殖。入室施行严格管理，如淋浴、换贴身衣服等。 C 半屏障系统
动物实验室也叫实验动物房，它是指适宜于饲养、繁育实验动物的建筑物。这类建筑应具有特定的环境要求和实验手段，以保证动物的品质和实验研究的准确可靠性。根据对微生物的控制程度可分为：开放系统、屏障系统和隔离系统。 实验室根据实验动物微生物控制标准，可将实验动物分为四级，分别是普通动物、清洁动物、无特殊病原体动物、无菌或栖生动物。 实验动物房一般由饲养室、健康观察室、隔离检疫室、各种实验室（外科手术、实验处理解剖、术后管理、疾病诊断、治疗、生理生化检查、微生物检疫、饲料营养分析和特殊饲料的调制室等），以及贮藏室、清洁准备室、洗涤消毒室、工作人员用房（包括办公室、淋浴室、更衣室等）、走廊(清洁区和污染区)、废弃物处理设施、机房和变电所等组成。其平面布置，应使人、动物和物品的流动路线合理，作业方便。严格区分清洁区域和污染区域，以保证人和动物的健康，确保实验的准确性。 实验室动物饲养室的平面尺寸根据饲养量、饲养方式，笼具架规格、排列方式、室内环境、饲养管理及操作方式等综合研究确定。为了避免温、湿度在垂直方向出现梯度,笼架高度不宜超过1.8米,顶棚高应在2.2～3米范围内。走廊宽度要便于操作和搬运物料及器材,以不小于1.3米为宜。清洁准备室的大小,须根据
作业内容和消毒灭菌装置等设施占用的空间确定。清洁准备室、清洁走廊同洗涤室以墙壁隔开，墙壁不允许出现裂缝。 地面要平而不滑，不渗水、不漏水、耐药液腐蚀和耐磨损。对环境要求严格的房间，还要考虑选择发尘低的材料。墙地交角应圆滑无棱角。内墙壁应平滑、耐水、耐磨、耐消毒液腐蚀。墙与墙、墙与顶棚或梁的夹角应圆滑无棱角。顶棚一般不承受压力，使用涂有防水材料的薄水泥板，能经受水冲和消毒水腐蚀。饲养室通常不设外窗，饲养室之间也不设内窗，以避免干扰。饲养室的门，宜采用铝合金密封门，开启方向须注意室内外压差。屏障与非屏障之间的门，应设置非满足一定条件不能开启的装置。木结构一般只作为简易的临时建筑；混合结构多为单层建筑。钢筋混凝土框架结构的整体性好,变形小,宜在多层建筑中采用。钢骨架、用镀锌波纹金属板、内镶聚苯乙烯硬泡沫塑料板做保温层的围护结构具有较好的气密保温性能。 看了上面的文章相信大家都有所了解了吧，下面给大家推荐杭州威尔净化设备有限公司致力于实验台，通风柜，实验室家具，仪器台，天平台，药品柜，器皿柜，气瓶柜，净化工程、环保通风设备的研发、设计、生产、销售、工程安装
绪论实验动物科学管理练习题 1.我国第一部实验动物法规名称是《实验动物管理条例》；（P4） 2.动物福利法的核心可以概括为让动物在康乐的状态下生存（善待活着的动物）、在无痛苦的状态下死亡（减少死亡的痛苦）；（P6/百度） 3.普通动物只能用于教学实验、某些科研工作的预实验，不适用于科学研究和研究生毕业论文等实验；（P27） 4.实验动物环境因素包括物理因素、化学因素、生物因素和居住因素；（P47） 5.实验动物是指：其携带的微生物、遗传及营养环境因子实行控制，来源清楚，遗传背景明确；为满足科学研究，教学，药品，生物制品的生产和检定，及其他科学实验的需要而驯养，繁殖，育成的动物；（P2） 6.野生动物演变为实验动物的过程为：野生动物家畜化，家畜动物实验动物化和实验动物标准化；（P3） 7.《实验动物学》包含的内容可简述为：实验动物和动物实验两部分。（P1） 8.“3R”原则是指减少（Reduction）、优化（Refinement）、替代（Replacement）；（P152） 9.实验用动物包括：实验动物、经济动物、野生动物和观赏动物；（P2） 第二章实验动物遗传质量及其对动物实验的影响练习题 1.下列近交系小鼠命名书写不正确的是（B）。(P9-P10) A. 615 BALB/C C. C57BL/6 D. A 2.某小鼠毛色基因型为：A_BBC_,该小鼠毛色是（C）。（P18) A.白色 B. 黑色 C.野生色 D.棕色 3.在遗传检测中，观察皮肤移植成功与否，需要：（B）。(P17) A.60天 B.100天 C.10天 D.1年 4.下列正确书写的封闭群实验小鼠应为（B）。(P12) A．SHJTU：KM B. Shjtu:KM C.SHJTU/KM D. Shjtu/KM 5.下列不属于封闭群实验动物的遗传特性是（B）。(P12-P13) A.基因库大 B.多基因之间丧失平衡 C.个体间差异程度主要取决于其祖代起源 D.群体基因频率基本保持稳定 6.实验动物遗传质量的控制，包括和。 7.近交系动物每代近交系数上升率为19%。封闭群动物每代近交系数上升率应控制在1%以下。(PPT2/46) 8.下列不属于近交系小鼠遗传特性的是（C）。(P10-P11) A. 基因纯合性高 B.个体间均一性好 C.基因库大 D.背景资料多 9.简述“近交系动物”。 答：经至少连续20代的全同胞兄妹交配培育而成，同品系内所有个体都可追溯到起源于第20代或以后代数的一对共同祖先，该品系称为近交系。经连续20代以上亲代与子代的交配，与全同胞兄妹的交配有同等效果。近交系的近交系数应大于99%。（P9） 10.简述“封闭群动物”。 答：以非近交交配方式进行繁殖生产的一个实验动物种群，在不从其外部引入新个体的条件下，至少连续繁殖4代以上，称为一个封闭群，或叫远交群。（P12) 11.用复隐性有色小鼠DBA（雄性，毛色基因型为：aabbCC)对某白化小鼠（雌性）进行毛色基因交配试验，它们的F1代全都是野生色小鼠： 1）用简图叙述测定过程。 2）该白化小鼠毛色基因是否纯合？
动物实验标准操作规程 一、人流线路工作人员进入第一更衣室→脱去个人外衣（饰品）放入衣柜→脱去蓝色拖鞋后(→淋浴室)进入第二更衣室→穿上红色拖鞋→手消毒（0.1%新洁尔灭）→按操作规范穿上无菌连体衣，戴上一次性无菌口罩、手套→进入缓冲间→风淋→进入清洁走廊→进入洁净区域工作→进入饲养室或检疫室→所有工作结束后→进入污物走廊、脱掉红色拖鞋→进入缓冲间→穿上蓝色拖鞋，进入洗刷、消毒区域，取掉手套、口罩、连体衣，分别放入指定的回收桶中→进入第一更衣室，穿上个人衣（饰）→出屏障系统。 二、物流线路物品→高压蒸汽灭菌器或传递窗或渡槽→消毒传递间→清洁准备室→清洁走廊→饲养室或动物实验室→污物经包装处理→（后室缓冲间）→次清洁走廊→气闸（缓冲间）→清洗消毒室→外部区域。 三、动物流线路外来SPF级实验动物→传递窗→消毒传递间→清洁准备室→清洁走廊→饲养室或动物实验室→生产繁殖或实验处理后→（后室缓冲间）→次清洁走廊→气闸（缓冲间）→清洗消毒室→外部区域。 四、空气（压力）流程新风口→空气初效过滤器→空气中效过滤器→空气高效过滤器→屏障系统内各区域并产生压力梯度: ①清洁走廊→饲养室或动物实验室→（后室缓冲间）→次清洁走廊→气闸（缓冲间）→室外。②(进入屏障系统内)气闸(缓冲间)→第2更衣室→淋浴室→第1更衣室→室外。③(离开屏障系统内)气闸(缓冲间)→清洗准备间
(消毒室)→外部区域。④消毒传递间→传递窗→清洗消毒室→外部区域。 五、注意事项为了防止空气倒流，必须调节并保持4.4中各区域间的压力梯度，同时，必须时刻保证2更衣室、消毒传递间、气闸（缓冲间）至少20Pa的正压。 六、质量记录动物/物品传递管理记录表、动物饲养环境参数与异常情况记录表。
1.简述“近交系动物” 2.经至少连续20代的全同胞亲兄妹或亲子交配培育而成，同品系内所有个体都可追溯到 起源于第20代或以后代数的共同祖先，该品系称为近交系。 3.近亲交配的弊端 固定基因时，有害的隐性基因也会纯合，出现不利的性状而造成育种失败；近交可能导致多基因之间丧失平衡，从而使高度纯化的动物对不良环境的调节适应能力降低；近交使动物失去为保持足够生物适合度所必需的最低水平的基因杂合性，从而影响动物生长率，寿命，对疾病的感受性，生活力，体力及繁殖能力。 4.简述“封闭群动物” 以非近交交配方式进行繁殖生产的一个实验动物种群，在不从其外部引入新个体的条件下，至少连续繁殖4代以上，称为一个封闭群，或叫远交群。 5.简述“哨兵动物” 指为微生物检测所设置的指示动物，用于监控实验动物饲养环境中病原及病原感染的动物。哨兵动物一般采用来源于与被监测动物遗传背景相同的、免疫功能正常的清洁级或SPF级封闭群动物。通常有二个功能：1. 实验初期意外缺损时的补充；2. 微生物定期检测 6.简述空气洁净度“级”的含义，各种动物实验环境设施对“级”的要求是什么 级是空气洁净度的计量单位，含义:每立方英尺空气中含有大于等于0.5μm的尘埃粒子数。 屏障环境：洁净度7级(英美制一万级)；隔离环境：洁净度5级(英美制一百级) 7.简述营养 动物从外界摄取自身所需要的食物，经消化、吸收，用来维持生命活动的行为或作用。
8.简述标准化饲料 根据不同动物的营养需求和动物的食性，经人工配合、加工而成的营养全面、适口性好、符合微生物要求的饲料。 9.简述颗粒饲料优越性 ①原料配合合理，符合营养标准和不同动物的食性；②加工过程中经过高温、挤压，杀 灭了大量微生物和寄生虫，普通级动物可直接饲喂；③压制成型，避免了动物采食过程中的大量浪费；④大幅度减少了粉尘；⑤颗粒饲料有利于进一步包装灭菌处理。 10.简述人类疾病动物模型的定义和分类 定义：在生物医药研究中建立的具有人类疾病模拟表现的动物实验对象和材料。 分类：诱发性动物疾病模型、自发性动物模型、抗疾病型动物模型、生物医学动物模型11.简述安乐死 在动物实验过程中或结束时，对不欲保留的动物（动物承受不可缓解的疼痛、非存活手术和样本采集），实施痛苦感最低或者无痛苦感死亡的科学方法。 12.裸鼠的解剖生理特点 ①毛囊发育不良，外观几乎全身没有被毛，称裸体外表，故称“裸鼠”；②胸腺严重萎缩， 仅有胸腺残迹或异常的胸腺上皮。故不能分泌胸腺素，不能使T细胞正常分化，因而细胞免疫力低下；③IgG的产生需要T细胞和巨噬细胞的参与，因此其免疫球蛋白主要是IgM，只有极少量的IgG；④自发肿瘤现象罕见，可能与NK细胞的活性高有关；⑤裸鼠易患鼠肝炎和病毒性肺炎；⑥纯合裸鼠母性极差，且受孕率低，乳房发育不良。通常以纯合雄鼠与带有nu基因的杂合雌鼠交配，可获1/2裸小鼠；⑦必须饲养在屏障环境中。 13.在动物实验设计、实施和完成阶段，有关动物福利和保护环境方面我们应该注重哪些？
SPF级动物实验室的建设方案 动物实验室主要是用于针对动物的研究实验，其实验成果可以应用于各个领域，因此科学研究对实验动物质量的要求越来越高，许多人在建设动物实验室时更是要求必须使用SPF级及以上等级。作为专业的实验室建设工程公司，SAREN三仁实验室做过很多关于SPF级动物实验室建设的实例，下面为某次SPF级动物实验室建设方案的简单概述，希望可以帮到大家。 1.建筑卫生要求 SPF级动物实验室在卫生条件方面的要求特别高。建设时，在动物繁育、生产和实验场所里面的所有围护结构材料都必须是无毒、无放射性。建筑内墙表面要光滑平整，阴阳角均为圆弧形，便于工作人员日后的清洗以及消毒。注意墙面要采用不易脱落、耐腐蚀、无反光、耐冲击的材料。地面则应采用防滑、耐磨，不会渗漏的材料。天花板需要耐水、耐腐蚀。 2.空调系统 在整个实验过程中空调系统必须以稳定的环境条件来确保实验结果不受外部条件的影响，所以SAREN三仁建议采用全新风中央空调通风系统。空气需要经过初、中、高效三级过滤器后再进入到SPF级动物实验室内，使空气达到所要求的洁净级别。空调设备位于初、中效过滤器之间，由一套单元式机组，机组有两台压缩机，相互独立，一用一备，保证整个系统的正常运行。
3.通讯系统 避免因沟通而进出浪费时间，同时也可以应对突发事件，室内各房间均应安装内部电话机。建议按照房间顺序编排电话号码，不仅方便，还能避免混乱。各室内电话不仅需要相互连通，还需要与监控室总机保持联系，保证实验室内外信息的及时沟通。 4.供水系统要求 SPF级动物实验室的饮用水宜用纯净水。在建设时也可以设置接水槽和净化装置，为实验动物供应灭菌的饮用水和屏障系统内用水。但要记得经常更换和清洗输水管道，在清洗笼具时可以添加适当比例的84消毒液。 5.监控系统要求 为了能实时监测设施的运行状态和实验动物的反应，SAREN三仁建议在SPF级动物实验室的出入口、走道、实验动物饲养室、功能操作室等重要位置安装摄像机。这样也能有效督促实验人员严格执行操作规程，避免因人为因素造成的室内环境和设施的污染。 为了严格控制动物实验室的环境不受病源微生物的危害，保护动物的安全，动物实验室的建设方案一定要谨慎合理。
医学动物的应用以及影响因素 摘要：实验动物是指用于科研、教学、生产、检测、鉴定及其他科学实验的动物。合理地应实验动物对达到预定的实验目的起着至关重要的作用。不同种属和个体的动物影响外源化合物在其体内的代谢,因而影响外源化合物的作用。环境因素不仅影响实验动物,同时也影响外源化合物。简要介绍影响实验动物的几个主要因素,并结合学习实际,加深了对问题的理解。关键词：实验动物应用影响因素 引言：生命科学是21世纪的领衔学科群，目前从事这一行业的人是一群名副其实的21世纪追梦人，这群追梦人明天可能取得的成就无疑会造福于人类【1】。 （二）简述实验动物种类 我国将实验动按微生物等级分四级，即普通动物、清洁动物、无特定病原体动物(SPF)、无菌动物(BM)。按遗传学特性分类：将实验动物分为近交系动物、突变系动物、远交系动物、系统杂交动物和普通杂种动物五种类别。在生物医学研究领域里，进行实验研究的条件可概括为A EIR 四个基本要素。所谓A是指Animal（动物），E 是指Equipment（设备），I 是指Information（信息），R 代表Reagent（试剂）。[2]实验动物是实验研究中不可缺少的条件，由此可以看出实验动物是现代生物医学研究的重要支撑条件。 -0 （三）在现代生物医学研究领域的应用 .1 动物疾病模型 利用动物疾病模型可以探讨人类疾病的病因、病理、发病机制、预防和治疗。在人类的代谢病、传染病、寄生虫病以及新出现、新发现的病中，许多已经制成了相应的动物模型，且有些病的动物模型越来越准确。【3】 2.2 器官移植 灵长类动物与人类最接近，是理想的器官供应动物。但灵长类动物稀少昂贵，满足不了人类需求。猪繁殖量大、繁殖周期短，是人类进行器官移植的可行动物。利用猪心脏瓣膜修补人心脏瓣膜缺损，国外已普遍推广，我国也亦临床应用。【4】 2.3制药工业方面 实验动物在制药工业方面的应用非常广泛，新药的研制，必须通过安全性试验，其中包括动物的急性、亚急性及慢性毒性试验，三致试验（致癌、致畸、致突变），有的还要利用实验动物模型进行效果试验，证明对机体无毒性或安全可靠、有效后方能申请报批，否则可能会给人类造成不可挽回的恶果【5】 2.4畜牧科学方面 疫苗的制备和鉴定、生理试验、胚胎学研究、营养饮料的分析、保持健康群体以及淘汰污染动物等工作，都要使用实验动物。特别是在畜禽传染病的研究工作中，常急需要有合格的实验动物进行实验。【6】 数据。 2.5国防和军事科学方面 各种武器杀伤效果，化学、辐射、细菌、激光武器的效果和防护，以及在宇宙、航天科学试验中，实验动物都作为人类的替身而取得有价值的科学【7】 （一）影响动物实验结果的因素
第二节实验动物编号和标记 一、被毛染色法 常用于大鼠、小鼠、兔的编号标记。可用苦味酸（黄色）、复红（红色）的酒精饱和溶液在被毛上染色。不同的颜色及染色部位可以代表不同的编号，如红色代表十位数，黄色代表个位数。不同部位的被毛染色代表不同的数字。一般习惯上的部位顺序为：左前肢为1，左腹部为2，左后肢为3，头颈部为4，背部为5，尾根部为6，右前肢为7，右腹部为8，右后肢为9。用红、黄两种颜色组合，可编到99。被毛染色法简便、清晰，适用于短期实验。如做长期实验，为避免褪色，可每隔2~3周重染一次。 二、耳缘打孔法 用打孔器在动物耳缘的不同部位打孔，以表示一定的编号。一般左耳代表十位数，右耳代表个位数。耳缘打孔法适用于长期实验中作终生标记。缺点是需要专用打孔器。 三、刺数钳烙印法 用刺数钳在动物耳上刺上号码，然后用棉球蘸着溶于酒精中的黑墨在刺号上涂抹。此号码永久固定，作为该动物的终身编号，适用于长期或慢性实验的大动物编号。犬、兔等耳较大的实验动物尤为适用。 四、号牌法 用金属制的号牌固定于实验动物耳上，或系于大动物的项圈上。对猴、犬、猫等大动物数量较少时可以不做特别标记，只记录它们的外表和毛色特征即可。 五、电子标签法 将电子芯片装入玻璃管内，通过无线频率标识系统对电子芯片进行标志，包括动物的各种信息，消毒后通过注射植入动物体内，让每只动物均有一个唯一的身份证。阅读时将阅读器紧近动物，即可阅读出各个动物的信息。 第三节实验动物抓取与保定 一、小鼠 小鼠一般不会主动咬人，但抓取不当也会被其咬伤。抓取时先用右手将鼠尾提起，放在笼具盖或实验台上，轻轻拉尾。在其向前抓行时，用左手拇指和食指抓住小鼠两耳和头颈部废肤，将鼠体置于左手心中，把后肢拉直，用左手无名指和小指按住尾巴和后肢，即可作注射或其他实验操作用。操作熟练后，可采用左手一手抓取法更为方便。 二、大鼠 大鼠的牙齿很尖锐，当其受到威胁时，容易咬伤人，抓取时一定要特别小心。初学者应戴上纱手套以防被咬。抓取时右手轻轻抓住大鼠尾巴向后拉，左手迅速抓住鼠的头颈，将鼠固定在左手中，右手即可进行操作。较大的大鼠用一只手不容易固定，这时可用右手固定两后肢和尾巴，请另一人协助操作。 三、豚鼠 豚鼠生性胆小，不咬人，抓时不能太粗野，更不能用力抓腰腹，否则容易造成肝破裂引起死亡。抓取时先用手掌抓住背部，将手张开，用拇指和食指握住颈部，再拿起来。怀孕或体重较大的豚鼠，应以另一手托其臀部。 四、兔 免比较温顺，不咬人，但爪较尖，不正确的抓取容易被其抓伤。抓取时不要抓其两耳，也不要拖拉四肢或提握腰部。正确的方法县当兔子安静下来时，用右手抓住颈部的被毛与皮肤，提起兔，然后用左手托住臀部，使兔身的重量大部分落在手上。根据实验需要进行固定，如需免耳静脉采血，采血时可用兔盒固定;如要测量血压、呼吸等实验和手术时，可将兔固定在兔手术固定台上。兔头可用兔头固定夹固定。 五、犬
动物实验室管理规定 为加强对动物实验室的规范化管理，保证实验动物质量，确保实验研究和检测结果准确可靠以及安全评价符合标准，同时为了防止人畜共患病的发生及蔓延，根据我动物实验室实际情况规定如下： 1.实验动物的管理及使用必须严格按照《实验动物管理条例》和《广东省实验动物管理条例》的有关条款执行。 2.国家对实验动物生产和使用实行许可证制度。本动物实验室（屏障环境）已获得《广东省实验动物使用许可证》，面向广大科研工作者开放。需要开展动物实验的单位和个人，可向动物实验室提出申请，经审批通过并按规定办理相关手续后，即可进入实验室进行实验动物的饲养和实验操作。 3.本办法所称实验动物，是指经人工饲养培育，遗传背景明确或者来源清楚，对其质量实行控制，用于科学研究、教学、医药、生产和检定以及其他科学实验的动物。 4.在动物实验室进行动物实验活动的人员必须严格遵守动物实验实验室各项规章制度，服从工作人员的管理和安排。 5.深圳第三人民医院实验动物管理委员会负责指导和监督实验动物工作，动物实验室具体负责动物实验的管理、监督和检查工作。 6.动物实验室的工作人员（包括管理人员、实验动物技术人员和饲养人员）必须经过正规的实验动物培训，并持有“广东省实验动物学会”颁发的《实验动物技术培训班结业证书》或相关实验动物从业人员资格证书。实验动物从业人员实行定期健康体检制度，确认无传染病（含微生物和寄生虫）和其他影响实验动物工作疾病的人员方可上岗。 7.凡申请进入动物实验室进行动物实验操作的人员（包括研究生）必须提交相关实验动物从业人员资格证书，无证人员必须参加本动物实验室举办的岗前培训，经考核合格并取得深圳第三人民医院动物实验室颁发的《实验动物上岗培训合格证》后，方可申请进入动物实验室从事动物实验操作。 8.购买实验动物必须选择有资质的实验动物生产单位，在动物进入动物实验室的同时提交《实验动物生产许可证》复印件和《实验动物质量合格证》原件。
常见动物实验中实验动物的选择 一、药理学研究中的选择 1、临床药物代谢动物学研究：首选动物及性别，应尽量与药效量或毒理学研究所用动物一致。 药物动力学参数测定：最好使用犬、猴子等大动物，可在同一动物上多次采样。药物分布实验：大、小鼠较方便。药物排泄试验：一般首选大鼠，胆汁采集可在乙醚麻醉，胆管插管引流。 2、一般药理研究 主要药效作用以外广泛药理作用的研究。动物：小鼠、大鼠、猫、犬等性别不限。 3、作用于神经系统的药物研究： 促智药：成年大小鼠一般应用幼年、老年鼠。 镇静催眠药：成年小鼠便于分组。 抗痛药：成年大小鼠，以雄性为宜。 镇痛药：需在整体动物上进行，常用成年小鼠、兔，也可用豚鼠、犬等，雌雄兼用。 中枢性肌松药：小鼠、猫。 解热药：首选兔。兔：品种、年龄、室温、动物活动情况等不同，对发热反应速度和程度有明显影响，应按药典规定进行。 神经节传导阻滞影响药物：首选猫，最常用的是颈神经节，因其前后部易于区分。 4、心血管系统的药物研究： 抗心肌缺血药：狗、猫、兔、大小鼠。 抗心率失常药：豚鼠。小鼠不便操作。 降压药：狗、猫、大鼠。不宜用兔：外周循环对外界环境刺激极敏感，血压变化大。 治疗心功能不全药：狗、猫、豚鼠、兔。一般不用大鼠。 降血压药：大鼠、兔。模型动物：遗传性高脂血症WHHL兔。 抗动脉粥样硬化药：一般用兔、鹌鹑。 抗血小板聚集药、抗凝血药：大鼠、兔，个别也可用小鼠。 5、呼吸系统药物： 镇咳药筛选：首选豚鼠，对化学刺激或机械刺激都很敏感。猫：生理条件下很少咳嗽，可用于刺激喉上神经诱发咳嗽，在初筛基础上进一步肯定药物的镇咳作用。犬：适用于观察药物的镇咳作用持续时间。 兔：对化学、电刺激不敏感。大小鼠：实验可靠性差。 支气管扩张药：常用豚鼠：气道平滑肌对致痉剂药物反应敏感。大鼠：某些免疫和药理学特点与人类较近。 祛痰药：一般用雄性小鼠，兔、猫。 6、消化系统药物： 胃肠解痉药：大鼠、豚鼠、家兔、犬等，雌雄均可。 催吐、止吐：犬、猫、鸽等。兔、豚鼠、大鼠，无呕吐反射，故不选用。 7、泌尿系统药物： 利尿、抗利尿药：雄性大鼠或犬为好。 8、内分泌系统药物：
二、单项选择题（每题只有一个正确答案） 第一章医学实验动物学概论（5） 1．国际实验动物科学协会的简称是____。 (A) A．ICLAS B．CIOMS C．IUBS D．WHO 2．《实验动物管理条例》是____年经国务院批准，由国家科技部颁布的第2号令，这是我国政府颁布的一部实验动物管理法规，是全国实验动物工作的法律依据和管理准则。（D） A．1981年B．1983 年C．1986年 D．1988年 3．实验动物科学自____诞生以来，至今已成为一门具有自己理论体系的独立性学科。(C) A．19世纪50年代B．19世纪70年代 C．20世纪50年代D．20世纪70年代 4．____的出现，为分子生物学、特别是人类功能基因组学研究提供了最好的技术平台。(A) A．转基因动物B．无菌动物和悉生动物 C．免疫缺陷动物D．近交系动物 5．我国《实验动物质量管理办法》是国家科技部和国家技术监督局于____联合制发的。 (B) A．1993年12月 B．1997年12月C．2000年12月D．2004年12月 第二章医学实验动物学标准（16） 1．为保持封闭群动物的遗传异质性及基因多态性，引种动物数量要足够多，小型啮齿类封闭群动物引种数目一般不能少于____对。 (C) A．15 B．20 C．25 D．30 2．至少连续20代的全同胞兄妹交配培育而成，品系内所有个体都可追溯到起源于第20代或以后代数的一对共同祖先，是指____。 (A) A．近交系B．封闭群C．杂交群D．重组系 3．下列属于封闭群命名的是____。 (B) A．A(F87) B．NIH C．B6D2FI D．CXBl 4．以非近亲交配方式进行繁殖生产的一个实验动物种群，在不从其外部引入新个体的条件下，至少连续繁殖4代以上，称为____。 (B) A．近交系B．封闭群C．杂交群D．重组系 5．由不同品系或种群之间杂交产生的后代，称为____。 (C) A．近交系B．封闭群C．杂交群D．重组系 6．不携带所规定的人兽共患病病原和动物烈性传染病的病原的动物是——。 (A) A．普通级动物 B．清洁动物 C．无特定病原体动物 D．无菌动物 7．除普通动物应排除的病原外，不携带对动物危害大和对科学研究于扰大的病原的动物是——。 (B) A．普通级动物 B．清洁动物 C．无特定病原体动物 D．无菌动物 8．除清洁动物应排除的病原外，不携带主要潜在感染或条件致病和对科学实验干扰大的病原的动物是
常用实验动物的给药途径和方法 在动物实验中，为了观察药物对机体功能、代及形态的变化，常需将药物注入动物体。由于实验目的、动物种类、药物剂型不同，给药途径和方法也多种多样。 一经口给药法 (一)灌胃法 此法给药剂量准确，是借灌胃器将药物直接灌到动物胃的一种常用给药方法。 1、白鼠灌胃法：抓起小鼠，以左手拇指、食指固定头部，小指、无名指和掌心夹注尾巴，使腹部朝上，颈部拉直，右手持灌胃器，将灌胃针从鼠的口角插入口腔，从舌背沿上腭插入食道。灌胃量0.2～0.5ml/10g。 胃管可用适宜口径的硬质塑料管或磨去针头的8号注射针头弯成适当的弧度制成。 注意，操作时不要用力猛插，以免插破食道或误插入器官造成动物死亡。 2、白鼠灌胃法：左手戴上棉手套，用左手拇指和食指将大鼠头部固定，将大鼠 灌胃器沿腭后壁慢慢插入食道。灌胃针插入时应无阻力，如有阻力或动物挣扎则应退针或将针拔出，重新再插。灌胃器由注射器和特殊的灌胃针构成。灌胃量10～20ml/kg 3 兔、犬等:灌胃一般要借助于开口器、灌胃管进行。先将动物固定，再将开口器固定于上下门齿之间，然后将灌胃管(常用导尿管代替)从开口器的小孔插入动物口中，沿咽后壁而进入食道。插入后应检查灌胃管是否确实插入食道。可将灌胃管外开口放入盛水的烧杯中，若无气泡产生，表明灌胃管被正确插入胃中，未误入气管。此时将注射器与灌胃管相连，注入药液。 4、猪的胃灌注法：给猪下鼻饲管较困难，因猪的鼻翼与上唇联合形成吻突，鼻腔上下鼻夹与鼻中隔通道极窄，只能通过F10－12号的导尿管，F14号以上的导尿管不能插入，故一般均给猪采用经口入胃的灌胃方法。具体方法是，预先做好一矩形小木块，中间有一洞，让小猪咬住，将其固定，然后再由此洞下胃管。此种操作较为简便。 5、鸟类：包括鸽、鸡等，经口灌胃给药，可由助手将其身体用毛巾裹住固定好。实验者用左手将动物向后拉，使其颈部倾斜，用左拇指和食指将动物嘴撬开，其他三只手指固定好动物头部，右手取带有灌胃针头的注射器，将灌胃针头由动物舌后插入食管。不要象其它动物灌胃时插的太深，如动物不挣扎，插针头又很顺利，即可将药液经口或食管上端罐入胃。罐入速度要慢。
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