其中红色区域为CDS序列
Rabbit IL-4:
AF169170.1
1 ccactgcact attg atgggg ctccctgccc agctgcctgt cactctgctc tgcctcctcg
61 caggcaccgc gcacttcatc caggggcgca ggggcgacat catcctaccc gaagtcatca
121 aaaccctgaa catcctcaca gagagaaaga acacaaccga gagagaggcc gtctgcaggg 181 ccgcgactgc actccggcag ttctacctcc accacaaggt gtcttggtgc ttcaaggagc
241 acggagagct cggtgacctc agactcctga gaggactcga caggaacctc tgcagcatgg
301 cgaagctgag caactgtcct gggaaggaag ccagacagac tacactggaa gacttcttag
361 acaggctaaa gaccgccatg caagagaaat actcaaagcg tcagagctga
Rabbit IL-10:
GenBank: AF068058.1
1 aaagcaaacc acaaggcgga ctcgtagaag caggcagagt tccacc atgc tcagctcagc
61 tctgctatgt tgcctggtct tcctgggtgg gacaggggcc agccgaggcc aggacacccc
121 tgctgagaac agctgcattc actttccagg cggcctgccc cacatgctcc gcgagctccg
181 tgctgccttt ggcagggtga agactttctt tcaatcgaag gatcagctga acagcatgtt
241 gttaaccgag tccctgctgg aggaccttaa gggttacctg ggatgccaag ccttgtcgga
301 gatgatccag ttttacctga aggacgtgat gccgcaagct gagaaccaca gtccagccat
361 cagggagcac gtgaactccc tgggggaaaa cctgaagacc ctcaggctga ggctgcgaca
421 atgtcaccga tttctcccct gtgaaaacaa gagcaaggca gtggagcagg tgaagagcgc
481 cttcagcaag ctgcaagagg aaggcgtcta caaagccatg agtgagtttg acatcttcat
541 caactacata gaaacctaca tgacaatgaa gataaaaagc taaa agcccc aggatggcaa
601 ctcggctaga gtctaggaca tcagttaggg acctgcacac cctgggtcag ctgacccagc
661 accttggaaa gctgttgtac ctctcaatat ttattacctc tgatacctca gctcccgatc
721 ctatttattt accgagcttc tctgtgaact ctttagaaag aagcccacta ttataatttt
781 ttcagtattt attattttca cctgcattta agctgtaccc atggggtgat gccctgtggg
841 atttgagtgt cttaggagaa attataattt atgtgaaagg gaaaatgtgc cttggggagc
901 cgactgaggc ttccattcct tctgtgcctg accacacttt ctaactccta agccgagctc
961 cctcttaccc tctggagccc ggacctgggt ctcgagtgtt ccagagactc ctagcctctt
1021 aggaagagag accggaagcc cttgggtggt gaccttccgg cagctcagag ggaggctcct 1081 gacctcgat
Rabbit TNF-α :
GenBank: M12845.1
1 aagctccctc agtgaggaca cgggcaccag ctaggaggga gagcagcaac tccaggctac
61 cccggcagta actcccagac gccgccccgc cagacaagct gccagccggt gtgccgtctt
121 cctctctcac gcaccagccc ccggttccac cacctccctc tggagagagc gcc atgagca
181 ctgagagtat gatccgggac gtcgagctgg cggaggggcc gctccccaag aaggcagggg 241 ggccccaggg ctccaagcgc tgcctctgcc tcagcctctt ctctttcctg ctcgtggctg
301 gagccaccac gctcttctgc ctgctgcact tcagggtgat cggccctcag gaggaagagt
361 ccccaaacaa cctccatcta gtcaaccctg tggcccagat ggtcaccctc agatcagctt
421 ctcgggccct gagtgacaag cctctagccc acgtagtagc aaacccgcaa gtggagggcc
481 agctccagtg gctgagccag cgtgcgaacg ccctgctggc caacggcatg aagctcacgg
541 acaaccagct ggtggtgccg gccgacgggc tgtacctcat ctactcccag gttctcttca
601 gcggtcaagg ctgccgctcc tacgtgctcc tcactcacac tgtcagccgc ttcgccgtct
661 cctacccgaa caaggtcaac ctcctctctg ccatcaagag cccctgccac cgggagaccc
721 ccgaggaggc tgagcccatg gcctggtacg agcccatcta cctgggcggc gtcttccagt
781 tggagaaggg tgaccggctc agcaccgagg tcaaccagcc tgagtacctg gaccttgccg
841 agtccgggca ggtctacttt gggatcattg ccctgtga gg ggactgacca ccactcctcc
901 ccctctccca ccccagcccc ctcactctgg gcgccctcag cccctctcat cctcctctag
961 cttagaaaca gaaatgaggg gctcagaatc agacctcaga atttttaaca ccaccactta
1021 gaaacctgga ccatggtggt gtaggcctgc acagtcaggg ccctggccac accaaagcat
1081 tcaaactgag gcttccagga ctcactgggg ccttcagaac tccattctca gattgagccc
1141 ggaacatccg gatgtgggga ccacgtagcc gtgttcaggc cagaaccttc tagaagagcc
1201 cttgagagaa gttgtcaccc agacctaggc cttcctctcc tcagatgttt ctacactctt
1261 ctctgcaatg tggagccccg ccccccgccc agggcagggc ccctctattt atagttgcac
1321 tggtgattat tgattattta ttatttattt aatatttatt tatttgccga tgaatgtatt
1381 tatttggaag ctcagcgcat cctggggtac ccagcgtagg agctgccttg gttctcacac
1441 gttttccgtg aaaacagagc agaaccatgg gtcgatccca cctggccccc tggcccctgt
1501 gcctcccttc acttatgttt ttaagaagat atttatctga tcaggttgtc tcactaatgc
1561 tgatttggtg actgacccgt cgctacatca ccgaacctct gctccctaag ggagttgtgt
1621 tggtaaccgc cctactggtc agtggcgaga aataaagact ccttaaaaaa t
Forward CATCATCCTACCCGAAGTCA
Reverse GTAGTCTGTCTGGCTTCCT
Forward AGAACACAACCGAGAGAGAG
Reverse AGTCTGTCTGGCTTCCTTC
CEBPA rabbit 克隆区域最好包括整个CDS区序列中的阴影部分cctggccatt cgcgacccgg agcagcgcgg gcgcgggcga gcagggactc cgggcgggcg
61 ggcggcggca gcggcgcccc gcgcaggctg gaggccgccg aggctcgcca tgccgggaga
121 actctagctc cccc atggag tcgtccgact tctacgaggc ggagccgcgg cccctgatga
181 gcagtcacct ccagagcccc ccgcacgcgc ccagcagcgc cgccttcggc tttccccggg
241 gcgcgggccc cgcgcagccc ccagccccac ctgccgcccc ggagcccctg ggcggcatct
301 gcgaacacga gacgtccatc gacatcagcg cctacatcga cccggccgcc ttcaacgacg
361 agttcctggc cgacctgttc cagcacagcc ggcagcagga gaaggccaag gcggccgcgg
421 ctgctgccgc ggccccggcg ggcggcggcg gcgactttga ctacccaggc gcccccgtgg
481 gccccggcgg cgccgtcatg cccgggggcg cgcacggccc gcccgccggc tacggctgcg
541 cggcggccgg ctacctggac ggcagactgg agcctctgta cgagcgcgtc ggggcgccga
601 cgctgcggcc gctggtgatc aagcaggagc cccgggagga ggacgaagcg aagcagctgg
661 cgctggccgg cctcttcccc taccaaccgc cgccgccgcc gccgccggcg cacccgcacc 721 cgccccccgc gcacctggcc gccccgcacc tgcagttcca gatcgcacac tgcggccaga 781 ccaccatgca cctgcagccc ggccacccca cgccaccgcc tacgcccgtg cccagcccac 841 acccggcccc cgcgctcggc gctgcgggcc tgccgggtcc aggcggcgcg ctcaaggggc 901 tggcggctgg gcaccccgat ccccgcgcgg gcggcggcag cggctcgggt aaggccaaga 961 agtcggtgga caagaacagc aacgagtacc gggtgcggcg ggaacgcaac aacatcgcgg 1021 tgcgcaagag ccgcgacaag gccaagcagc gcaacgtgga gacgcagcag aaggtgctgg 1081 agctgaccag tgacaatgac cgcctgcgca agcgggtgga acagctgagc cgcgaactgg 1141 acaccctgcg gggcatcttc cgccagcttc cggagagctc cttggtcaag gccatgggca 1201 actgcgcgtg a ggcgcgcgc ggaggcggga ctgccctggg ccggctcttg gctgggggct 1261 tggggtgcac ctggggagtg atttcgggtc cccaggtctc caggccgccg ccctcccctc 1321 accgggccgt gcaagccagg actaggagat tccggtgccg accaaaagcc cggcccgctg 1381 gacgcctccc cctccctccg cgccggactt ggtgcgtgtt gagacgaggg gacccggcag 1441 tggtttcttc ccgcgggaga ggaagagttc tccgggggct gagctggagc ccggcaaact 1501 ccggtattca ggagtaaccg tgtgccttgg aaatgcaaac tcgctgctcc agttcctacc
1561 gagtaggggg agcaaatacg tgccttgtca ttttacttgg agggtttctg ccgcccctgg
1621 gacagcagcg gcccccgtga gagggggcag gcccgggacg ggaggagtgt acagggagca 1681 accagtccta gccagacctc agcgtcggcc ctcagagggg agcaaacatg gggacttggg 1741 gctctgagcc taaggtggtt cccctagtta taatgaagtt gaagggtccc tagttcctca
1801 cctacccctc ccatagcctg cagcaggctt ggcttcccgg agcagcgctt actgagacgg 1861 gggtcatcag gtttcaagga gcccctccaa ccccattcag accacccagc caggacgggt 1921 gttggaggga gtggtggctt ggcggaagaa cctggagatc tggtagtggg gtgcggtgcg 1981 gggtgcaggg accgggggcc cagccttgtc tgtaccgtgc ggacatgaag tgcagtcagc 2041 ccatcccaga gggacccggg ccatgacaaa ctttccaaat attctgcttt atcagccgat
2101 atcttgtatc tagcctctct ccgtcccggc gctgccttgt gcagtgtccg tgtgcacgtc
2161 tacgctccac caccattgta tttggttttt gttttggttt ggttttgctc agatacttgc
2221 caaaatgaga ctcttggttg gccgctgggg gaaggctctg aggtcctctt tccttctggt
2281 ttgggggttg cttttgctcc cggggaccaa tgaggtgagg tgggcgtccc ctccccccct 2341 ccccgggttc tccctggctg cagctgtgag ccccagccct gaggcccggg ctcctggtct 2401 ggaagggcag tggcctctgg ccagggcgtg cacgtcgctg gggccggcag cacagcagga 2461 agacttggtt ctcttcctct ggggagaaca tgagtttcat gctagaagtt ttatgtatta
2521 tgtctataat ataaacgtat caaagtcaa
2019-2020年公务员考试备考行测《其他常识》练习题资料 含答案解析(四十六)[湖北] 一、第1题： 现代生活中，手机的普及和应用给人们的生活带来了极大的便利，但在现实生活中，使用手机时也需要注意安全。以下安全问题中不是由手机无线通讯引起的是（____） A.在加油站不能打手机 B.坐飞机时不能打手机 C.驾驶机动车时不能打手机 D.在使用医疗器械的病区不能打手机 【答案】：C 【来源】：2012年国家 【解析】 驾驶机动车时打手机会分散驾驶员的注意力，可能引发交通事故，C项符合题意。 二、第2题： 关于古琴，下列说法不正确的是（____ ）
A.“高山流水”的故事与该乐器有关 B.古琴通常以桐木为琴材 C.“竹林七贤”中的阮咸善弹古琴 D.“目送归鸿，手挥五弦”说的是古琴 【答案】：C 【来源】：2013年河南 【解析】 阮咸善弹琵琶，精通音律。据说阮咸改造了从龟玆传入的琵琶，后世亦称为阮咸，简称阮。中书监荀勖常与阮咸讨论音律，自叹弗如，由此嫉恨在心，迁阮咸为始平太守，故后人称之为阮始平。 三、第3题： 关于下列各组人物说法错误的是：( ) A.苏格拉底、柏拉图和亚里士多德被称为“古希腊三贤” B.颜回、曾子都属孔子七十二门徒 C.荀子及其弟子韩非子都是法家学派的代表人物 D.康有为、梁启超都是“公车上书”的发起人 【答案】：C 【来源】：2014年陕西 【解析】
C项中荀子是儒家学派的代表人物 四、第4题： 北京时间2011年9月29日，“天宫一号”目标飞行器发射后大约10分钟，到达了近地点约200千米、远地点约346千米的轨道该运行轨道所处大气层的特点是( ) A.气温随高度的增加而递减 B.对流现象显著，多云雨现象 C.气流平稳，天气晴朗，有利于航空发射 D.存在电离层，可反射无线电波 【答案】：D 【来源】：2012年北京 【解析】 大气层次从接近地表排序依次为对流层、平流层、中间层、热层、外层。其中，热层大约距地球表面80至300千米，属于题目中所提的该运行轨道所处大气层。热层的特点是，①气温随高度增加而增加，②电离程度较强烈，可反射无线电波。因此，本题选择D选项 五、第5题： 下列古代典籍中，哪一部不是以年号命名的？( )
mi引物设计原则 1. 引物的长度一般为15-30 bp，常用的是18-27 bp，但不应大于38，因为过长会导致其延伸温度大于74℃，不适于Taq DNA聚合酶进行反应。 2. 引物序列在模板内应当没有相似性较高，尤其是3’端相似性较高的序列，否则容易导致错配。引物3’端出现3个以上的连续碱基，如GGG或CCC，也会使错误引发机率增加。 3. 引物3’端的末位碱基对Taq酶的DNA合成效率有较大的影响。不同的末位碱基在错配位置导致不同的扩增效率，末位碱基为A的错配效率明显高于其他3个碱基，因此应当避免在引物的3’端使用碱基A。另外，引物二聚体或发夹结构也可能导致PCR反应失败。5’端序列对PCR影响不太大，因此常用来引进修饰位点或标记物。 4. 引物序列的GC含量一般为40-60%，过高或过低都不利于引发反应。上下游引物的GC含量不能相差太大。 5. 引物所对应模板位置序列的Tm值在72℃左右可使复性条件最佳。Tm值的计算有多种方法，如按公式Tm＝4(G+C)＋2(A+T)，在Oligo软件中使用的是最邻近法(the nearest neighbor method)。 6. ΔG值是指DNA双链形成所需的自由能，该值反映了双链结构内部碱基对的相对稳定性。应当选用3’端ΔG值较低（绝对值不超过9），而5’端和中间ΔG 值相对较高的引物。引物的3’端的ΔG值过高，容易在错配位点形成双链结构并引发DNA聚合反应。 7. 引物二聚体及发夹结构的能值过高（超过4.5kcal/mol）易导致产生引物二聚体带，并且降低引物有效浓度而使PCR反应不能正常进行。 8. 对引物的修饰一般是在5’端增加酶切位点，应根据下一步实验中要插入PCR 产物的载体的相应序列而确定。 引物序列应该都是写成5-3方向的， Tm之间的差异最好控制在1度之内， 另外我觉得扩增长度大一些比较好，500bp左右。 要设计引物首先要找到DNA序列的保守区。同时应预测将要扩增的片段单链是否形成二级结构。如这个区域单链能形成二级结构，就要避开它。如这一段不能
应用文体 1. 信 一般书信（包括请柬）包括五个部分： （1）称呼。信纸第一行顶格写，后面加冒号。 （2）正文。第二行空两格写起，转行顶格。可有若干段落。 （3）结尾。正文写完，如果正文最后一行空格比较多，可以接着写“此致”、“祝”等词语，否则，另起一行空两格或四格写“此致”、“祝”等词语。然后另起一行顶格写“敬礼”、“进步”等祝颂语。 （4）署名。一般写在祝颂词下行的后半行。 （5）日期。写在署名下一行，靠右边写上年月日。 2．通知 （1）标题：第一行居中写明“通知”或“关于XX 的通知”。 （2）称呼：换行顶格写明被通知方的名称，后用冒号。 （3）正文：另起一行空两格写通知内容，如会议通知包括会议内容、时间、地点、出席对象和有关准备事项等。（4）署名：正文下一行的右下方写发出通知的单位或组织。 （5）日期：写在署名下一行的右边。 例文：通知 各班班主任和政治老师： 兹定于X月X日（星期X）下午三时在党支部办公室召开班主任和政治老师会议，讨论研究怎样加强学校政治思想工作问题。请充分准备意见，准时参加。 党支部办公室（盖章） X年X月X日3.启事 启事不具备法令性、政策性、因而也没有强制性和约束性。启事有招领启事、寻物启事、招聘启事、征稿启事等多种。格式如下： （1）标题：第一行居中写明“XX启事”。 （2）正文：另起一行空两格写启事内容，交代有关事情的原委和目的，提出要求和希望，说明有关注意事项及办理程序等。有些内容则不应写具体明确，如“招领启事”中有关失物的详情，以防冒领。 （3）署名：正文下一行的右下方写发出启事的单位或组织。 （4）日期：写在署名下一行的右边。 例文：《国庆特刊》征稿启事 为了欢庆中华人民共和国XX华诞，班委会讨论决定，我班出一期“国庆特刊”。希望全班同学踊跃投稿。具体要求： 一、内容能表达我们年轻一代对祖国对党的无限热爱之情，体裁不拘。 二、500字左右，要用稿纸誊写清楚。 三、稿件请于9月20日前交给宣传委员黄玲玲同学。 六（1）班墙报编辑组 X月X日
请注意这些技巧和秘籍大部分针对目前最主流的Android 2.1系统，只是绝大部分在其他版本的Android系统上同样适用。 1.使用Android电源治理widget 从Android 2.1系统开始内置了一个特不强大的带能源治理widget,通过那个widget你能够快速开启或者关闭Wi-Fi,蓝牙，GPS，同步这些手机耗电大户，还能够方便的设定手机屏幕亮度，长按手机屏幕，就能够在widgets目录选择启用。 2.Android手机拨号屏幕 假如你对手机拨号屏幕功能性有专门要求，Android绝对会满足
你，点击联系人列表里任意一个用户，按手机menu >选项，里面有关于单个联系人的详细设置。 3.为每个联系人定制铃声 能够为女朋友或者家人设置单独的铃声，如此听到铃声就明白谁来电话了。设置方法点击联系人列表里任意一个用户，然后就能够设置铃声。 4.不要把手机闹钟(alarm clock)加入进程查杀列表里 这是一个经典的错误，专门多用户都喜爱用进程治理程序自动杀掉一些程序以节约电量或者腾出手机内存，只是假如不小心alarm clock进程也杀掉了，后果确实是第二天早晨10:30才醒过来惊慌失措的奔向公司。 5.用文件夹组织内容 尽管乔布斯花了专门久才决定放开iOS用户通过文件夹组织内容的权限，事实上Android从面世开始就支持那个功能，Android 文件夹不但支持放入程序图标，还能够存放通讯录，甚至facebook联系人等信息，长按手机屏幕就能够在桌面建立文件夹。 6.重命名文件夹 建立了文件夹后你可能需要修改它的名称，只需要打开文件夹，
长按顶部的名称就能够调出重命名文件夹的窗口。 7.查看系统日期 Android新用户可能觉得查看系统日期有点苦恼，事实上只要按住屏幕顶部左上方的提醒栏，就会显示今天的日期，赶快试试吧。 8.挂载你的SD卡 Android系统基于Linux内核，因此使用外部磁盘之前必须要mount挂载后才能够正常使用。使用USB线连接手机和电脑时，手机会提示挂载SD卡，必须点击完成挂载后才能够在SD卡里拷贝或者删除数据。 9.设置键盘快捷方式 专门多用户迷恋物理全键盘的另外一个重要缘故确实是Android 支持大量的键盘快捷键，通过快捷键能够快速调用相关程序，能够在系统设置>应用程序>快速启动里设置 10.下载更多Android动态壁纸 Android 2.1开始系统支持的另外一个功能确实是动态壁纸，尽管动态壁纸可能会让你的手机耗电量增加，只是却能让你的手机看起来更酷，假如你喜爱耍酷，在Android Market搜索live wallpaper,会有专门多动态壁纸等待你选择。 11.快速切换主屏
第三章操作系统应用知识 一、选择题 1. 在 Windows “任务栏”中除“开始”按钮外，它还显示_____。 A. 当前运行的程序名 B. 系统正在运行的所有程序 C. 已经打开的文件名 D. 系统中保存的所有程序 2. 在 Windows 中，使用_____里的“磁盘碎片整理程序”可以完成磁盘碎片整理。 A. 控制面板 B. 系统工具 C. 我的电脑 D. 资源管理器 3. Windows 的“资源管理器”窗口分为_____部分。 A. 2 B. 4 C. 1 D. 3 4. 在选定文件夹后，下列_____操作不能完成剪切操作。 A. 在“编辑”菜单中，选择“剪切”命令 B. 左双击该文件夹 C. 单击工具栏上的“剪切”按钮 D. 在所选文件夹位置上单击右键，打开快捷菜单，选择“剪切”命令 5. Windows 的下列操作中，_____不能查找文件或文件夹。 A. 用“开始”菜单中的“查找”命令 B. 右单击“开始”按钮，在弹出的菜单中选择“查找”命令 C. 右单击“我的电脑”图标，在弹出的菜单中选择“查找”命令 D. 在“资源管理器”窗口中，选择“查找”菜单中的“查找”命令 6. 在 Windows 环境中，用户可以同时打开多个窗口此时_____。 A. 只能有一个窗口处于激活状态，它的标题栏的颜色与众不同 B. 只能有一个窗口的程序处于前台运行状态，而其余窗口的程序则处于停止运行状态 C. 所有窗口的程序都处于前台运行状态 D. 所有窗口的程序都处于后台运行状态 7. 在 Windows 环境下，_____。 A. 不能进入 MS-DOS 方式 B. 能进入 MS-DOS 方式，并能再返回 Windows 方式 C. 能进入 MS-DOS 方式，但不能再返回 Windows 方式 D. 能进入 MS-DOS 方式，但必须先退出 Windows 方式 8. 下列关于 Windows 对话框的描述中，_____是错误的。 A. 对话框可以由用户选中菜单中带有(…)省略号的选项弹出来 B. 对话框是由系统提供给用户输入信息或选择某项内容的矩形框 C. 对话框的大小是可以调整改变的 D. 对话框是可以在屏幕上移动的 9. 下面关于 Windows 窗口的描述中，_____是不正确的。 A.Windows 窗口有两种类型：应用程序窗口和文档窗口 B. 在 Windows 中启动一个应用程序，就打开了一个窗口 C. 窗口在应用程序窗口中出现的其他窗口,称为文档窗口 D. 每一个应用程序窗口都有自己的文档窗口 10.在 Windows 环境中，每个窗口的“标题栏”的右边都有一个标有空心方框的方 形按钮，用鼠标左键单击它，可以_____。 A. 将该窗口最小化 B. 关闭该窗口 C. 将该窗口最大化 D. 将该窗口还原 11. 在 Windows 中，允许用户将对话框_____。 A. 最小化 B. 最大化 C. 移动到其他位置 D. 改变其大小 12. 在 Windows 的“开始”菜单的“文档”菜单项中，包含最近使用的_____ A. 文本文件 B. 全部文档 C. 15个图形文件 D. 15个 Word 文档 13.在 Windows 中使用系统菜单时，只要移动鼠标到某个菜单项上单击，就可以选 中该菜单项。如果某菜单项尾部出现_____标记，则说明该菜单项还有下级子菜单。 A. 省略写( … ) B. 向右箭头( ) C. 组合键 D. 括号 14.在 Windows 的各项对话框中，有些项目在文字说明的左边标有一个小方框，当小方框里有“√”时，表示_____。 A. 这是一个单选按钮，且已被选中 B. 这是一个单选铵钮，且未被选中 C. 这是一个复选按钮，且已被选中 D. 这是一个多选按钮，且未被选中
2019-2020年公务员考试备考行测《其他常识》试题精选含 答案解析(二十三)[甘肃] 一、第1题： 下列关于火山的表述错误的是（） A.喷出的物质有气态，液态和固态三种 B.可分为死火山，活火山和休眠火山 C.五大连池的形成与火山喷发有关 D.页岩是最常见的岩浆岩 【答案】：D 【来源】：2014年上半年联考 【解析】 D选项中的并不是岩浆岩，而是花岗岩与玄武岩。岩浆岩：花岗岩、玄武岩；沉积岩：砾岩、砂岩、页岩、石灰岩；变质岩：大理岩。因此正确答案为D选项。二、第2题： 国家积极支持北部湾经济区发展，审批和核准了不少有利于带动和帮助北部湾经济发展的重要政策，但不包括（） A.设立钦州保税港区 B.设立凭祥综合保税区
C.设立北海自由贸易港区 D.设立南宁保税物流中心 【答案】：B 【来源】：2014年上半年联考 【解析】 略 三、第3题： 以下变化使事物性质发生改变的是（____ ）。 A.酒精挥发 B.矿石粉碎 C.冰雪融化 D.白磷自燃 【答案】：D 【来源】：2010年黑龙江 【解析】 使事物性质发生改变的是化学反应。A、B、C都是物理变化；D项属于化学变化。故答案为D。 四、第4题：
今天人们经常以“姓氏笔画”为序来排名，其实古代特别是先秦时期“姓”与“氏”是有严格区别的。一下关于“姓”“氏”表述错误的一项是( ) A.“姓”源于母系社会，“氏”源于父系社会 B.秦汉以后，出现姓名合一的倾向，姓和氏不再是贵族的专利，平民也能 有姓氏了 C. 中国最早的氏，大都从“女”旁，如姬、姚、姜、嬴等 D.一般女子称“姓”用来“别婚姻”，男子称“氏”用来“明贵贱” 【答案】：C 【来源】：2014年吉林甲 【解析】 《通志·氏族略》曰：三代（夏商周）以前，姓氏分而为二，男子称氏，女子称姓。“氏”用来“别贵贱”，尊贵的人才有氏，卑贱的人有名无氏。“姓”用来“别婚姻”。根据《通志·氏族略》，A选项说法正确，女子为“姓”在母系社会，男子为“氏”在父系社会；而D选项，古时女子嫁人之后从夫姓，男子用氏来区别贵贱的说法正确，D说法正确；B选项秦汉以后，出现姓名合一的倾向，姓和氏不再是贵族的专利，平民也能有姓氏了，说法正确；中国有上古八大姓：姬、姚、妫、姒、姜、嬴、姞、妘。都是从“女”旁，如姬、姚、姜、嬴等，说明在母系氏族公社时期的妇女地位举足轻重，是“姓”而不是“氏”。 五、第5题： 下列现象中，其本质与其他三个现象的本质不同的现象是（）。
1.引物最好在模板cDNA的保守区内设计。 DNA序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的。在NCBI上搜索不同物种的同一基因，通过序列分析软件（比如DNAman）比对（Alignment），各基因相同的序列就是该基因的保守区。 2.引物长度一般在15~30碱基之间。 引物长度（primer length）常用的是18-27 bp，但不应大于38，因为过长会导致其延伸温度大于74℃，不适于Taq DNA 聚合酶进行反应。 3.引物GC含量在40%~60%之间，Tm值最好接近72℃。 GC含量（composition）过高或过低都不利于引发反应。上下游引物的GC含量不能相差太大。另外，上下游引物的Tm值（melting temperature）是寡核苷酸的解链温度，即在一定盐浓度条件下，50%寡核苷酸双链解链的温度。有效启动温度，一般高于Tm值5~10℃。若按公式Tm= 4（G+C）+2（A+T）估计引物的Tm值，则有效引物的Tm为55~80℃，其Tm 值最好接近72℃以使复性条件最佳。 4.引物3′端要避开密码子的第3位。 如扩增编码区域，引物3′端不要终止于密码子的第3位，因密码子的第3位易发生简并，会影响扩增的特异性与效率。 5.引物3′端不能选择A，最好选择T。 引物3′端错配时，不同碱基引发效率存在着很大的差异，当末位的碱基为A时，即使在错配的情况下，也能有引发链的合成，而当末位链为T时，错配的引发效率大大降低，G、C 错配的引发效率介于A、T之间，所以3′端最好选择T。 6. 碱基要随机分布。 引物序列在模板内应当没有相似性较高，尤其是3’端相似性较高的序列，否则容易导致错误引发（False priming）。降低引物与模板相似性的一种方法是，引物中四种碱基的分布最好是随机的，不要有聚嘌呤或聚嘧啶的存在。尤其3′端不应超过3个连续的G或C，因这样会使引物在GC富集序列区错误引发。 7. 引物自身及引物之间不应存在互补序列。 引物自身不应存在互补序列，否则引物自身会折叠成发夹结构（Hairpin）使引物本身复性。这种二级结构会因空间位阻而影响引物与模板的复性结合。引物自身不能有连续4个碱基的互补。 两引物之间也不应具有互补性，尤其应避免3′ 端的互补重叠以防止引物二聚体（Dimer与Cross dimer）的形成。引物之间不能有连续4个碱基的互补。 引物二聚体及发夹结构如果不可避免的话，应尽量使其△G值不要过高（应小于4.5kcal/mol）。否则易导致产生引物二聚体带，并且降低引物有效浓度而使PCR 反应不能正常进行。 8. 引物5′ 端和中间△G值应该相对较高，而3′ 端△G值较低。 △G值是指DNA 双链形成所需的自由能，它反映了双链结构内部碱基对的相对稳定性，△G 值越大，则双链越稳定。应当选用5′ 端和中间△G值相对较高，而3′ 端△G值较低（绝对值不超过9）的引物。引物3′ 端的△G 值过高，容易在错配位点形成双链结构并引发DNA 聚合反应。（不同位置的△G值可以用Oligo 6软件进行分析） 9.引物的5′端可以修饰，而3′端不可修饰。 引物的5′ 端决定着PCR产物的长度，它对扩增特异性影响不大。因此，可以被修饰而不影响扩增的特异性。引物5′ 端修饰包括：加酶切位点；标记生物素、荧光、地高辛、Eu3+等；引入蛋白质结合DNA序列；引入点突变、插入突变、缺失突变序列；引入启动子序列等。引物的延伸是从3′ 端开始的，不能进行任何修饰。3′ 端也不能有形成任何二级结构可能。 10. 扩增产物的单链不能形成二级结构。
PCR引物设计原则 引物(Primer)是人工合成的两段寡核苷酸序列。 1、引物的长度一般为15-30bp，常用的是18-27bp，但不应大于38，因为过长会导致其延伸温度大于74℃，不适于Taq DNA聚合酶进行反应。 2、G十C含量：应在40%-60%之间，PCR扩增中的复性温度一般是较低Tm 值引物的Tm值减去5-10度。引物长度小于20时，其Tm恒等于4(G十C)十2(A十T)。 3、碱基分布的随机性：应避免连续出现4个以上的单一碱基。尤其是不应在其3’端出现超过3个的连续G或C，否则会使引物在G十C富集序列区错误引发. 4、引物自身：不能含有自身互补序列，否则会形成发夹样二级结构. 5、引物之间：两个引物之间不应有多于4个的互补或同源碱基，不然会形成引物二聚体，尤应避免3’端的互补重叠。引物3’端最好选T，错配的几率与A 相比大大的降低了。G、C之间错配的概率小于A、T. 6、引物的5’端可以修饰，而3’端不能进行修饰。5’端的修饰包括：加酶切位点，标记生物素，荧光，地高辛、Eu3+等，引入蛋白质结合的DNA序列，引入点突变，插入突变、缺失突变序列、引入启动子序列。因为引物的延伸是从3’端开始的，因而3’端不能进行任何修饰，另外3’端也不能有形成任何二
级结构的可能。 如何设计引物 不同的核苷酸序列表达的氨基酸氨基酸序列是相同的，所以氨基酸序列才是真正保守的。 引物最好在模板cDNA的保守区域内设计（DNA的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的，在NCBI上搜索不同物种的同一基因，通过序列分析软件比对（Alignment）,各基因相同的序列就是该基因的保守区）。 PCR引物设计 PCR反应中有两条引物，即5′端引物和3′引物。设计引物时以一条DNA单链为基准（常以信息链为基准），5′端引物与位于待扩增片段5′端上的一小段DNA序列相同；3′端引物与位于待扩增片段3′端的一小段DNA序列互补。 引物设计软件 Primer Premier5.0 （自动搜索）* vOligo6 （引物评价） vVector NTI Suit vDNAsis vOmiga vDNAstar vPrimer3 （在线服务）
病毒及安全软件的应用常识 怎么样用最少的精力做好网络安全?我的理解是：最好的办法是防患于未然!因为你一旦中毒或者感染木马，查不查的出来先不说，就算查出来了，理论上没有任何杀毒软件敢说一定能杀掉。为什么这么说呢?因为病毒和杀毒软件都运行在操作系统上，完全是平级的，杀软能中止病毒的进程，病毒当然也能中止杀软的进程(最近的杀软也都是这样做的)，杀软能干掉病毒的启动项，病毒当然也能干掉杀软的启动项。而且病毒出现在前，杀软跟进在后，永远都是被动的。系统已经中毒之后，再说如何做好系统安全是没有意义的，这时候最好最节省时间精力的办法是重装或者恢复系统。 所以我说：最好的办法是防患于未然!! 当一个电脑格盘重装或者ghost恢复之后，电脑一定是干净的，后来是如何中毒的呢?今天我就来给大家一个情景重现：假设一个菜鸟用户群众演员叫小A，假设我是导演，当小A的日常操作引起中毒的时候，我就喊“CUT”，然后给大家讲讲原因和教训。 一重装系统篇 重现：被病毒折磨的死去活来，不得不又重装系统了，小A心想，先下一个QQ再说，下着下着，CUT 原因：系统刚刚重装的时候有很多漏洞，在你下载QQ的时候，网络上的各种病毒和黑客就已经攻破系统的脆弱防线了。 教训：切记切记装机后第一件事，下载安装金山清理专家，修补系统漏洞。也许有朋友会问，下载QQ的时候系统会中毒，难道下载金山清理专家的时候系统就不会中毒吗?答案是也会，但是金山清理专家比较小，中毒概率小很多。当然如果有条件的话最好把金山清理专家做好的漏洞补丁备份下来，装好系统后第一时间拔网线(最好干脆别插)打补丁。 二下载篇 重现：小A终于给系统打上了补丁，打开百度要下载一些常用软件，看到一个什么很靠谱，点击，CUT 原因：现在很多流氓下载站，本身甚至不提供任何好软件下载，只是通过SEO得到比较好的百度排名，当用户点击下载的时候，其实是在下载木马!还有一些正常的下载站把广告位卖给木马，广告的样子就是“下载按钮”，很可能眼花了一不小心就点上去了。 三 U盘篇甲 重现：小A要拷一份资料，跟人借了一个优盘，插上电脑，CUT。 原因：小A也许还很不服气，我靠，搞什么啊?我一动都没动呢，就中毒了?是的，插上
全国导游资格统一考试知识点 第十七章：其他常识 动晕症（晕车、机、船） 预防常识: ①避免在旅途中过度疲劳 ②在搭乘交通工具之前避免喝酒，避免过度饱食，尤其不能吃高蛋白和高脂食 物，可吃简单清淡的食物 ③照顾“动晕症”的游客在前排较平稳的位置就座，座位方向应与行驶方向一 致 ④不要在搭乘交通工具时阅读书报杂志，不要直视某个近物或看窗外快速移动 的景物，最好闭目养神 ⑤建议“动晕症”严重的游客，可以在搭乘交通工具前30分钟服用抗晕药物处理常识: ①关心游客身体状况，及时调整到合适的位置 ②将风油精涂抹于游客的太阳穴上 ③提醒游客将腰带束紧，减少腹腔内脏的震荡，缓解不适 ④准备好食品袋和纸巾，尽快清除呕吐物 ⑤“动晕症”游客症状严重，及时联系乘务人员 中暑 中暑：轻症、重症 轻症中暑：头晕、眼花、耳鸣、面色潮红、胸闷、皮肤灼热、体温升至38℃以上、甚至可出现面色苍白、恶心、呕吐、汗多、脉搏细弱、呼吸浅快重症中暑：晕倒、痉挛、皮肤干热、体温超过40℃ 预防措施： ①做好防护工作（打遮阳伞、戴遮阳帽、戴太阳镜、涂抹防晒霜，衣服尽量选 用棉、麻、丝类织物，最好穿白色、浅色、素色衣服，少穿深色的化纤品类服装） ②避免在烈日下活动（高温无风地方不能逗留过久） ③多喝淡盐开水（少量多次地喝） ④准备防暑用品（十滴水、人丹、霍香正气、清凉油、风油精） 处理常识： ①迅速将患者抬到通风、阴凉、干爽的地方，使其仰卧并解开衣柜，松开或脱
去衣服，如衣服被汗水湿透最好能更换干衣服 ②面部发红的患者可将头部稍垫高，面部发白者头部略放低，使其周身血液流 通 ③最好在患者头部捂上一块冷毛巾，可用浓度50℃的酒精、冰水、冷水进行 全身擦浴，；用扇子或者电扇吹风，促进散热 ④若患者已失去知觉，可让其嗅一些有刺激气味的东西或掐其人中，刺激其苏 醒，醒后可喂一些清凉饮料或淡盐水 ⑤轻症患者经上述处理后，待体温降到38℃后，体征平稳可送其回酒店休息， 重症中暑患者应该迅速与医院联系 中风 中风症状： 突发头痛、恶心呕吐、言语不清、小便失禁、肢体活动障碍和意识障碍、严重时昏迷，甚至突然呼吸停止而死亡 预防常识： ①注意劳逸结合，时刻提醒旅游安全（合理安排旅游活动、保证足够的睡眠和 休息时间、注意老年游客旅游过程的安全是预防的关键） ②注意饮食安全，改变不良生活习惯（忌食高糖高脂食物、忌暴饮暴食、忌酗 酒和大量抽烟、不宜进食过于辛辣的刺激性食物和过浓的咖啡、茶饮料，多次少量饮水） ③注意保持心情舒畅 ④注意身边的症状警告 高血压病的中老年发病征兆： ①突发头痛加重或由间断性变成持续性 ②突发头晕或原有头晕明显加重 ③突发一侧肢体或头面、舌部短暂性发麻、乏力或活动欠领灵活 ④突发嘴角流水漏气、舌头发硬、咬字不准、吐字不清 ⑤突发血压持续升高不降等症状 处理常识： ①导游人员切勿惊慌失措,不能大声叫喊或猛烈摇动昏迷者,不能随便挪动患者, 因为随意挪动会扩大脑出血范围。若患者坐在地上尚未倒地,可直接上前将其扶住;若患者已倒地,可缓慢地将其挪正到仰卧,同时小心地将其头偏向一侧,以防呕吐物误入气管产生窒息 ②立即用冰袋、冰水或冷水毛巾冷敷其头部,也可用雪糕(冰棍、冰棒)替代。这 样可减少脑出血量,降低颅内压,保护脑细胞,减少后遗症的发生
引物设计原则及酶切位点选择和设计 [整理]：最初的时候，由于害怕设计酶切位点最后且不开，所以经常采用最通用的方法，用T载体克隆解决问题，但后来发现她也有问题，就是浓度提不上去，你需要体大量的载体来酶切，所以感到还是直接扩增好一点。但这就需要你仔细设计引物。连入质粒中的重要目的就是进行酶切和连接，当然首先就是在想要合成或者是进行PCR扩增出靶基因的时候在核酸的两端接入酶切位点，酶切位点是与你的质粒的特点相关的，可以在质粒的图谱说明书上找取相应的位点，进行设计。 （一）设计引物前应做的准备工作： 准备载体图谱，大致准备把片断插在那个部分 对片断进行酶切分析，确定一下那些酶切位点不能用 准备一本所买公司的酶的商品目录，便于查酶的各种数据及两种酶是否可以配用 （二）设计引物所要考虑的问题 两个位点应是载体上的，，所连接片断上没有这两个位点，且距离不能太近，往往导致两个酶都切不好。因此，紧挨在一起，只能切一个，除非恰好是与上面两个酶在一起的酶切位点。我看promega的说明书上说，最好隔四个。还有一种情况是：不能有碱基的交叉，比如AGATCTTAAG，这样的位点比较难切。 两个酶切点最好不要是同尾酶（切下来的残基不要互补），否则效果相当于单酶切。 最好使用酶切效率高的。 最好使用双酶切有共同buffer的酶。 最好使用较常用的酶（如hind3，bamh1，ecor1等），最好使用自己实验室有的酶，这样可以省钱。 Tm的计算，关于Tm的问题，很多的战友都有疑惑。其实园子里有很多的解释了。 Tm叫溶解温度（melting temperature, Tm），即是DNA双链溶解所需的温度。大家可以理解，这个温度是由互补的DNA区域决定的，而不互补的区域对DNA的溶解是没有作用的。因此，对于引物的Tm，只有和模板互补的区域对Tm才有贡献。计算Tm时，只计算互补的区域（除非你的酶切位点也与模板互补）。不少战友设计的引物都Tm过低，是因为他们误把保护碱基和酶切位点都计算到Tm里了，最后的结果是导致了PCR反应的诸多困难。所以，设计引物的时候，先不管5'端的修饰序列，把互补区的Tm控制在55度以上（我喜欢控制在58以上，具体根据PCR的具体情况，对于困难的PCR，需要适当提高Tm），再加上酶切位点和保护碱基，这样的引物通常都是可用的，即使有小的问题，也可以挽回。Tm温度高的引物就比较容易克服3‘发卡、二聚体及3'非特异结合等问题。简单的计算公式可以用2+4的公式。若你计算的Tm值达到了快90 ，不包括酶切位点。引物公司给你发的单子是包括酶切位点的。自己可以再估计一下。如你设计了带酶切位点的引物，总长分别为29、33个碱基，去掉酶切位点和保护碱基，分别为17、21个碱基。引物公司给的单子是70多度，实际用的只有50度，用55度扩的结果也差不多。 其它关于Tm值的计算，有用PP5.0进行评价的，需要考虑的参数包括：base number、GC%、Tm、hairpin、dimer、false priming、cross dimer。退一般退火温度为Tm-5度，退火温度的计算可以不把加入的酶切位点及保护碱基考虑进去，如上所言，PCR几个循环后，引物外侧的序列已经参入了扩增片断中，所以你可以在预变性后多加几步，温度比你Tm值低些（这样可能会增加非特异性），Tm值是你包括酶切位点及保护碱基的Primer计算出来的。1.一般在5'端加保护碱基,如果你扩增后把目的条带做胶回收转入T-VECTOR或者其它的载体的话,酶切时可以不需加保护碱基2.有人的经验加入酶切位点的引物可以和未加入时使用相同的退火温度,结果也还是令人满意。
mi引物设计原则 1、引物的长度一般为15-30 bp,常用的就是18-27 bp,但不应大于38,因为过长会导致其延伸温度大于74℃,不适于Taq DNA聚合酶进行反应。 2、引物序列在模板内应当没有相似性较高,尤其就是3’端相似性较高的序列,否则容易导致错配。引物3’端出现3个以上的连续碱基,如GGG或CCC,也会使错误引发机率增加。 3、引物3’端的末位碱基对Taq酶的DNA合成效率有较大的影响。不同的末位碱基在错配位置导致不同的扩增效率,末位碱基为A的错配效率明显高于其她3个碱基,因此应当避免在引物的3’端使用碱基A。另外,引物二聚体或发夹结构也可能导致PCR反应失败。5’端序列对PCR影响不太大,因此常用来引进修饰位点或标记物。 4、引物序列的GC含量一般为40-60%,过高或过低都不利于引发反应。上下游引物的GC含量不能相差太大。 5、引物所对应模板位置序列的Tm值在72℃左右可使复性条件最佳。Tm值的计算有多种方法,如按公式Tm＝4(G+C)＋2(A+T),在Oligo软件中使用的就是最邻近法(the nearest neighbor method)。 6、ΔG值就是指DNA双链形成所需的自由能,该值反映了双链结构内部碱基对的相对稳定性。应当选用3’端ΔG值较低(绝对值不超过9),而5’端与中间ΔG值相对较高的引物。引物的3’端的ΔG值过高,容易在错配位点形成双链结构并引发DNA聚合反应。 7、引物二聚体及发夹结构的能值过高(超过4、5kcal/mol)易导致产生引物二聚体带,并且降低引物有效浓度而使PCR反应不能正常进行。 8、对引物的修饰一般就是在5’端增加酶切位点,应根据下一步实验中要插入PCR产物的载体的相应序列而确定。 引物序列应该都就是写成5-3方向的, Tm之间的差异最好控制在1度之内, 另外我觉得扩增长度大一些比较好,500bp左右。 要设计引物首先要找到DNA序列的保守区。同时应预测将要扩增的片段单链就是否形成二级结构。如这个区域单链能形成二级结构,就要避开它。如这一段不
1.陕西岐山凤雏的西周早期遗址：是我国已知最早，形制最严整的四合院建筑。 2.西周建筑技术上的突出成就：是瓦的发明。 4.汉代砖石建筑技术也有巨大进步。墓室中出现了砖砌筒拱。 12.北魏河南登封嵩岳寺塔是我国现存最高的佛塔。 13.三国时期曹魏邺城是已知中国最早的轮廓方正的都城。 15.隋至宋是我国古建筑的成熟时期。 17.唐代建筑成就首先表现为宏大严整的城市规划，长安是构图最为严整的里坊制城市典范。 19.唐代木构建筑解决了大面积，大体量的技术问题。大明宫麟德殿面积相当于明清故宫太和殿的3倍。 20.隋唐时期佛教进入鼎盛时期，现存最早的木构佛殿是山西五台山公元782年修建的南禅寺大殿，建 于公元857年的佛光寺东大殿则是现存唐代木构建筑中规模最大的一座。 21.唐代的砖石佛塔多有存世，有楼阁式塔（西安大雁塔，长安县兴教寺玄奘墓塔），密檐式塔（如河 南登封法王寺塔，先荐福寺小雁塔，云南大理崇圣寺千寻塔），单层塔。 24.两宋时期由于手工业和商业发达，引起了城市结构和布局的根本变化，封闭的里坊制被开放的街巷 制取代，形成商业城市的面貌。这是我国城市建设史上一个重要转折点。 25.北宋时颁布《营造法式》是第一个用文字确定下来的政府颁布令。其中“以材为祖”的木作做法是木 架建筑采用了古典的模数制的重要例证。一些单体建筑体量及屋顶组合复杂，显示了极高的建筑技艺。建筑群体空间组合方面进一步发展了隋唐以来强调纵深轴线的做法（如河北正定隆兴寺）。26.宋代流传至今的木构殿堂不少，山西晋祠圣母殿，河北正定隆兴寺摩尼殿等。砖石建筑以佛塔为主。 28.辽代现存最着名的木构建筑有两大处，一是天津蓟县独乐寺的山门和观音阁（现存最大的木构楼阁）， 另一处是山西应县佛宫寺释迦塔（现存唯一的楼阁式木塔，高67.31m）。 31.元代木构建筑趋于简化，用料及加工都比较粗放，斗拱缩小，柱与梁多直接联络，常用砌上明造及 减柱法。宗教建筑盛行，藏传佛教建筑兴起。 35.清朝官式建筑在明代的基础上进一步定型化，出现了官方规范《工程做法》，改宋代的“材”，“栔” 模数系统为“斗口”模数系统。 38.宋《营造法式》中记载有材分制（即古代的模数制）。材分制一直沿用到元末。明初，已不再用材 分制，清初颁布的清工部《工程做法》基本上是用了斗口制。 54.中国古代建筑在唐初定型化，标准化。宋营造法式中，已载有一套包括设计原则，编着规范并附有图 样的材分制（即古代的模数制）。材分制一直沿用到元末。明初已不再用材分制。清初颁布的清工部《工程做法》基本上使用了斗口制。 61.大木作按功能可分为12类。其中栱，昂，爵头，斗4类属于铺作构件。其余是柱，额枋，梁，替木， 檩，阳马（角梁），椽子飞子。 65.清代官式建筑抬梁式构架有大式，小式之分。大式等级较高，多用斗栱。 66.穿斗式特点是沿房屋的进深方向按檩数立一排柱，每柱上架一檩，檩上布椽，屋面荷载直接由椽传至 柱，不用梁。每排柱子靠穿透柱身的穿枋横向贯穿起来，成一榀的构架。每两榀构架之间使用斗枋和纤子连接起来。 69.石作与瓦作主要指台基，墙壁，屋顶等部位的结构或构造做法。 70.木构建筑墙体完全采用砖砌大约从明初开始，明中叶以后才比较普遍。 71.庑殿顶演变自四坡顶。唐代佛光寺大殿是最早的木构建筑庑殿顶实例。歇山顶出现晚于庑殿顶，南 禅寺大殿是现存最早的实例。悬山顶主要用于民间建筑。硬山顶出现于宋代，明清时期较为普遍。 72.中国古代官式建筑多用陶瓦（筒瓦和板瓦）和琉璃瓦作为屋面材料。 73.琉璃瓦的正式使用于屋面是南北朝时期。宋之后使用渐渐广，明代进入高潮期。 75.古代室内屋顶有彻上明造和设置顶棚两大类，后者又有天花，藻井，卷棚等形式。 76.小木作的栏杆是指木质栏杆。
1.引物应用核酸系列保守区内设计并具有特异性。最好位于编码区5’端的300-400bp区域 内，可以用DNAman,Alignment 软件看看结果。 2. 产物不能形成二级结构（自由能小于58.61KJ/mol）。 3.引物长度一般在17-25碱基之间,上下游引物不能相差太大。 4.G+C含量在40%~60%之间，45-55％最佳。 5.碱基要随机分布，尽量均匀。 6.引物自身不能有连续4个碱基的互补。 7.引物之间不能有连续4个碱基的互补。 8.引物5′端可以修饰。 9.3′端不可修饰，而且要避开AT,GC rich的区域，避开T/C,A/G连续结构（2-3个）。 10. 引物3′端要避开密码子的第3位。 11.引物整体设计自由能分布5‘端大于3’端，且3‘端自由能最好小于9KJ/mol。 可用oligo 6 软件进行比对看结果的情况。 12.做荧光定量产物长度80-150bp最好，最长是300bp. 13.引物设计避免DNA污染，最好跨外显子接头区。 14.引物与非特异性扩增序列的同源性最好小于70％或者有8个互补碱基同源。 15.查看有无假基因的存在。假基因就是无功能的DNA序列，与需要扩增的目的片段长 度相似。 16.TM值在58-62度之间。 17.引物设计的软件Primer 5.0 有专门针对荧光的。 设计的目的是在两个目标间取得平衡：扩增特异性和扩增效率。引物分析软件将试图通过使用每一引物设计变化的预定值在这两个目标间取得平衡。设计引用有一些需要注意的基本原理： ①引物长度 一般引物长度为18~30碱基。总的说来，决定引物退火温度（Tm值）最重要的因素就是引物的长度。有以下公式可以用于粗略计算引物的退火温度。 在引物长度小于20bp时：[4(G+C)+2(A+T)]-5℃ 在引物长度大于20bp时：62.3℃+0.41℃(%G-C)-500/length-5℃ 另外有许多软件也可以对退火温度进行计算，其计算原理会各有不同，因此有时计算出的数值可能会有少量差距。为了优化PCR反应，使用确保退火温度不低于54℃的最短的引物可获得最好的效率和特异性。
充电电池的应用常识 充电电池的种类 铅酸电池（Sealed）单节电压：2V （就是一般车用电瓶使用寿命为：200～300次 免维护型使用寿命可达10年放电温度为：0度～40度 但体积和重量是最大的。）充电温度为：0度～45度 镍镉电池（Ni-Cd）单节电压：1.2V （是使用较早的充电电池使用寿命为：500次 耐过充、过放电能力较强放电温度为：- 20度～60度 但金属镉会造成污染。）充电温度为：0度～45度 镍氢电池（Ni-Mh）单节电压：1.2V （属于绿色环保型电池使用寿命为：1000次 记忆效应小，但瞬间放电放电温度为：-10度～45度 能力小于镍镉电池。）充电温度为：10度～45度 锂离子电池（Li-lon）单节电压：3.6V （比镍氢电池重量轻，容使用寿命为：500次 量大，但对于充电要求较放电温度为：-20度～60度 高，过充易损甚至爆炸）充电温度为：0度～45度 锂聚合物电池（Li-polymer）单节电压：3.7V （锂电的改良型，用聚合物使用寿命为：500次 电解质代替电池液，可以做成放电温度为：-20度～60度 各种形状，比锂电池稳定。）充电温度为：0度～45度 电池充电的名词解释 充电率(C-rate) C是Capacity(容量)的第一个字母，它代表电池的容量，也可以用来间接表示电池充、放电电流对于容量的倍率，以决定持续时间。例如：充电电池的额定容量为1100mAh时，即表示以1100mA（1C）放电，时间可持续1小时，如以220mA（0.2C）放电，时间可持续5小时，充电也可按此对照计算出一定电流下所需要的充电时间，但一般要乘以1.2-1.5的系数。 终止电压（Cut-off discharge voltage CDV） 指电池放电时，电压下降到电池不宜再继续放电的最低工作电压值。 根据不同的电池类型及在不同的放电条件下，电池放电的终止电压也不相同，否则会造成过放电。 开路电压（Open circuit voltage OCV） 电池不放电时，电池两极之间的电位差被称为开路电压。 电池的开路电压，会依电池正、负极与电解液的材料而异，同种材料制造的电池，不管电池的体积有多大，几何结构如何变化，其开路电压都一样的。 放电深度（Depth of discharge DOD） 在电池使用过程中，电池放出的容量占其额定容量的百分比，称为放电深度。 放电深度的高低和二次电池的充电寿命有很深的关系，当二次电池的放电深度越深，其充电寿命就越短，因此在使用时应尽量避免深度放电。 过放电（Over discharge OD）
PCR引物设计原理及原则 PCR引物设计原理 PCR引物设计的目的是为了找到一对合适的核苷酸片段，使其能有效地扩增模板DNA序列。因此，引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否。 要设计引物首先要找到DNA序列的保守区。同时应预测将要扩增的片段单链是否形成二级结构。如这个区域单链能形成二级结构，就要避开它。如这一段不能形成二级结构，那就可以在这一区域设计引物。 现在可以在这一保守区域里设计一对引物。一般引物长度为15~30碱基，扩增片段长度为100~600碱基对。 让我们先看看P1引物。一般引物序列中G+C含量一般为40%~60%。而且四种碱基的分布最好随机。不要有聚嘌呤或聚嘧啶存在。否则P1引物设计的就不合理。应重新寻找区域设计引物。 同时引物之间也不能有互补性，一般一对引物间不应多于4个连续碱基的互补。 引物确定以后，可以对引物进行必要的修饰，例如可以在引物的5′端加酶切位点序列；标记生物素、荧光素、地高辛等，这对扩增的特异性影响不大。但3′端绝对不能进行任何修饰，因为引物的延伸是从3′端开始的。这里还需提醒的是3′端不要终止于密码子的第3位，因为密码子第3位易发生简并，会影响扩增的特异性与效率。 PCR引物的设计原则： ①引物应用核酸系列保守区内设计并具有特异性。 ②产物不能形成二级结构。 ③引物长度一般在15~30碱基之间。 ④G+C含量在40%~60%之间。 ⑤碱基要随机分布。 ⑥引物自身不能有连续4个碱基的互补。 ⑦引物之间不能有连续4个碱基的互补。 ⑧引物5′端可以修饰。 ⑨引物3′端不可修饰。 ⑩引物3′端要避开密码子的第3位。 PCR引物设计的目的是找到一对合适的核苷酸片段，使其能有效地扩增模板DNA序列。如前述，引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否。对引物的设计不可能有一种包罗万象的规则确保PCR的成功，但遵循某些原则，则有助于引物的设计。 1.引物的特异性 引物与非特异扩增序列的同源性不要超过70%或有连续8个互补碱基同源。 2.避开产物的二级结构区 某些引物无效的主要原因是引物重复区DNA二级结构的影响，选择扩增片段时最好避开二级结构区域。用有关计算机软件可以预测估计mRNA的稳定二级结构，有助于选择模板。实验表明，待扩区域自由能（△G°）小于58.6lkJ/mol时，扩增往往不能成功。若不能避开这一区域时，用7-deaza-2′-脱氧GTP取代dGTP对扩增的成功是有帮助的。 3.长度 寡核苷酸引物长度为15~30bp，一般为20~27mer。引物的有效长度：Ln=2（G+C）+（A+T+，Ln值不能大于38，因为>38时，最适延伸温度会超过Taq DNA聚合酶的最适温度（74℃),不能保证产物的特异性。 4.G+C含量