Agilent 1200 LC [Agilent Chemstation B.04.02 Classic (中文)]
现场培训教材
安捷伦科技有限公司
一、 目录
二、 培训目的 (3)
三、 培训准备 (3)
1. 仪器准备 (3)
2. 溶剂准备 (3)
四、 方法建立 (3)
1. 开机准备 (3)
2. 数据采集方法编辑 (5)
9 G1310A(单元泵) (5)
9 G1312A，G1312B XL(二元泵)/G1311A(四元泵)： (7)
9 G1313A(标准型自动进样器)，G1329A/B(自动控温自动进样器) (8)
9 G1367B/C/D(高性能自动进样器) (9)
9 G1328A(手动进样器) (11)
9 G1316A,G1316B XL(柱温箱) (11)
9 G1314A/B/D/E,G1314C XL(可变波长紫外检测器) (13)
9 G1315B/D ,G1315C XL(二极管阵列检测器)/ G1365B/D ,G1365C XL(多波长紫外检
测器) (15)
9 G1362A(示差检测器) (17)
9 G1321A(荧光检测器) (19)
9 G4218A(蒸发光散射检测器) (23)
3. 数据分析方法编辑 (25)
9 谱图优化 (25)
9 积分参数优化 (25)
9 校正 (27)
9 打印报告 (28)
9 光谱 (29)
4. 建立全新完整方法向导 (31)
9 新建完整方法： (32)
9 保存方法： (36)
9 保存即时改变的方法 (36)
9 调用方法： (36)
5. 进样 (36)
9 单针进样 (36)
9 序列进样 (37)
五、 关机 (37)
1. 关闭检测器的灯 (41)
2. 冲洗系统 (41)
3. 封存色谱柱 (41)
4. 关闭电脑 (41)
5. 关闭模块 (41)
六、 RRLC(快速液相)注意事项 (41)
七、 Agilent 1200保养维护 (43)
八、 Agilent 1200常见问题解决方法 (45)
二、 培训目的
9基本了解1200LC硬件操作。
9掌握化学工作站的开机，关机，参数设定,学会数据采集,数据分析的基本操作。
三、 培训准备
1.仪器准备： Agilent 1200
9G1310A(单元泵)；G1312A，G1312B XL(二元泵)；G1311A(四元泵)
9G1313A(标准型自动进样器)；G1329A/B(自动控温自动进样器)；G1367B/C/D(高性能自动进样器)
9G1328A(手动进样器)
9G1316A,G1316B XL(柱温箱)
9G1314A/B/D/E,G1314C XL(可变波长紫外检测器)
9G1315B/D ,G1315C XL(二极管阵列检测器)
9G1365B/D ,G1365C XL(多波长紫外检测器)
9G1362A(示差检测器)
9G1321A(荧光检测器)
9G4218A(蒸发光散射检测器)
9色谱柱：Zorbax Eclipse XDB-C18 150 x 4.6 mm, 5um column (P/N 993967-902 /5063-6600)
2.溶剂准备：
9色谱级纯或优级纯乙腈或甲醇。
9二次蒸馏水
四、 方法建立
Agilent方法建立包括：数据采集方法(仪器设置方法)以及数据分析方法(积分方法、校正方法等)两部分，下面分述这两部分的方法建立以及序列模板建立。
1.开机准备：
9启动计算机：打开计算机电源，登陆windows操作系统
9启动液相：打开Agilent 1200各模块电源。待Agilent 1200各模块自检完成后(各模块右上角指示灯为黄色或者无色)，双击“仪器 1 联机”图标，或
者“开始->所有程序->Agilent Chemstation->仪器 1 联机”
9开启工作站：工作站打开， 点击“方法和运行控制”或者在“视图”中选择“方法和运行控制”。打开仪器控制视图：选择“视图->系统视图”，即可
显示仪器控制视图，选择“视图->样品视图”，即可显示样品信息视图
模块右上角状态灯颜色说明：无色，未开电源或者模块准备就绪
黄色，模块未准备就绪
绿色，正在进样分析
红色，模块出错
所有模块红色，仪器有漏液
工作站图形颜色说明： 绿色，模块准备就绪
黄色，模块未准备就绪
蓝色，正在进样分析
红色，出错或者不能联机
灰色, 此模块没启用
单击鼠标左键，出现图形，点击“溶剂瓶填充量”
设置溶剂瓶中流动相实际体积
9冲洗流动相管路：旋开溶液排空阀。左键单击泵图
标，点击“设置泵”，设置“流速”为
3ml/min(脱机机为G1379A/B)或者5ml/min(脱气机为G1322A)，对于
G1311A(四元泵)分别将A,B,C,D四个通道设置“溶剂”为100%(点击
中灰色按钮，即可开启“%”设置框，输入需要设置的数值
百分比后，单击右侧的空白框，A相即可自动配
置为100%-(%B+%C+%D)的百分比)，冲洗；对于G1312A/B(二元泵)，冲洗A、
B两个通道；对于G1310A(单元泵)，冲洗一个通道即可
9开启模块：单击每个模块右下角的按钮，可以单独启动模块、或者 。
单击检测器按钮灯未点亮，检测器图形为黄色或者单击“启动”按钮，
启动全部模块，检测器灯也将点亮
9监视基线：点击按钮或者“视图->在线信号”打开“在线图谱”。点击“改变”按钮，选择“可选信号”中需要监视的信号，“添加”到“选定
信号中”。调整“窗口”中“X周范围”，如需要画“0”点基线，请选择“画
零线”。调整Y轴“Y轴范围”与“偏移量”或者选择“Y轴自动调整”来
选择合适的监视图形
9平衡色谱柱、进样分析：关闭溶液排空阀(确认泵流量为1ml/min)，监视压力基线等待平稳后，可以进样采集分析
2.数据采集方法编辑：
9G1310A(单元泵)：
设置泵
左键单击泵图标，出现，点击“设置泵”
或者点击“仪器”的下拉菜单中选取“设置泵”后进入泵的参数设置菜
单
流速---设置泵的流速，在“压力限-上限”>200时，流速设置范围为：0~5.00ml/min；在“压力限-上限”<=200时，流速设置范围为：
0~10.00ml/min
停止时间---设置泵停止分析的时间，时间范围为：0.0~99999.00min
或“无限制”
后运行时间---泵在后运行时间保持后运行状态，从而延迟下一个分析的开始。在溶剂成分改变后(例如，在梯度洗脱后)，可以使用“后运行时间”是色谱柱达到平衡，时间范围为：0.0~99999.00min或“无限制”
压力限---“上/下限”是最大/小压力限制，达到“上限”或者“下限”
值时，泵将自动关闭，从而防止分析系统压力超限
时间表---通过在“时间”字段中输入时间并在时间表的以下字段中输入适当的值，可以使用时间表对分析过程中参数进行设置。泵时间表中的值随时间从初始值到时间表中定义的时间所对应的值发生线性变化
(例如，溶剂梯度)
控制
左键单击泵图标，出现，点击“控制”
或者点击“仪器”的下拉菜单“更多泵”中选取“控制”后进入泵的控制菜单
泵---控制泵的“启动”，“关闭”或者“待机”状态
9G1312A，G1312B XL(二元泵)/G1311A(四元泵)：
泵参数设置与控制请参考G1310A(单元泵)方法，下面介绍G1312A，G1312B XL(二元泵)/G1311A(四元泵)参数设置不同之处
G1312A/B(二元泵)
溶剂---溶剂B的百分比可以设置为0到100%之间的任何值。“溶剂A”
通常输送剩余的量：100%-%B。
时间表---“溶剂B”为非“关闭”状态时，“时间表”的参数“%B”为
黑色可以编辑，否则为灰色不可编辑状态
G1312B XL(二元泵)
可以“设置泵->溶剂”中，通过独立的安捷伦LC诊断软件对单个溶剂
进行泵校正
G1311A(四元泵)
溶剂---溶剂B、C和D的百分比可以设置为0到100%之间的任何值。“溶
剂A”通常输送剩余的量：100%-(%B+%C+%D)
时间表---“溶剂B/C/D”为非“关闭”状态时，“时间表”的参数“%B”、
“%C”、 “%D”为黑色可以编辑，否则为灰色不可编辑状态
9G1313A(标准型自动进样器)，G1329A/B(自动控温自动进样器)： 设置进样器
左键单击自动进样器图标，出现，点击“设
置进样器”或者点击“仪器”的下拉菜单“设置进样器”后进入进样器
的参数设置菜单
标准进样---简单的进样，在“进样量”字段中制定进样量。进样量取
决于自动进样器的配置设置
洗针进样---可以指定进样包括在抽取样品后，将针移动到针座之前进
行针清洗，在“清洗瓶针清洗”字段中指定装有清洗溶剂的位置(瓶)
使用进样器程序---可以使用当前的进样器程序，将显示当前进样器程
序中的行数。选择“编辑”可以显示“进样器程序”，以进行编辑
最优化---请参看在线帮助
G1329A/B(自动控温自动进样器)
保存温度---保存自动调温控制的自动进样器的温度设置
9G1367B/C/D(高性能自动进样器)：
设置进样器请参看G1313A(标准型自动进样器)的配置方法，下面介绍
G1367B/C/D(高性能自动进样器) 参数设置不同之处
设置进样器
左键单击自动进样器图标，出现，点击
“设置进样器”或者点击“仪器”的下拉菜单“设置进样器”后进入进
样器的参数设置菜单
停止时间---一般设置为“与泵一致”即可
自动延迟体积减小---用于进样开始后将自动进样器的流路从主路自动切换到旁路。这样可以减少延迟体积。可以通过设置“辅助功能”组中“样品冲洗因子”来完成分析过程中阀切换到旁路的时间点
启用重叠进样---在完成当前进样时准备下一次进样，以提高样品通量。
选择“冲洗样品后”，新的样品在前一个样品进样冲洗结束后开始抽取；
选择“min之后”，那么可以在一定时间段后开始抽取(0.0到100min) 最小化的交叉污染---指定在重叠进样模式下抽取新样品之前阀自动切换三次(旁路-主路-旁路)
洗针组---仅当在“进样”组中选择了“洗针进样”时，针清洗组中的参数才可用。选择“冲洗口”并指定以秒为单位的时间(0.0~100.0s)。
通过将针留在冲洗口中以使用当前流动相冲洗针
进样阀清洗---可以在重叠进样或者样品冲洗结束时切换进样阀。“设置”指定阀切换时间，具体方法请参考在线说明
自动调温器
左键单击自动进样器图标，出现，点击
“自动调温器”或者点击“仪器”的下拉菜单“更多进样器”后进入“样
品自动调温器”的参数设置菜单
温控箱---打开和关闭温度控制
温度---设置温度或者关闭温度控制，限值：4.0~40.0度
打开电源时---在一起打开时，选择“开启温控箱”可以开启温度控制
9G1328A(手动进样器)：
在设置“运行控制->样品信息”后，将手动进样阀扳至“load”状态进样(将样品装入到定量环内)。对于7725i或者3725(i)手动进样阀，样品
进样量为定量环体积的50%以下或者满定量环进样，对于7750(i)或者
3750(i)手动进样阀，只能满定量环进样，否则进样量不准确。进样后，
将手动进样器扳至“inject”状态，工作站自动开始记录采集数据。
分析完成后，将手动进样阀扳至“load”状态，用定量环的5倍体积左右的甲醇清洗定量环，再在“inject”状态下清洗排空管路。清洗进样口，
防止残留样品污染下次进样
9G1316A,G1316B XL(柱温箱)：
左键单击柱温箱图标，出现，点击“设置柱温箱”或者点击“仪器”的下拉菜单“设置柱温箱”后进入柱温箱的参数设置菜单
温度---控制柱温箱温度。限值：-5.0到80.0度(G1316A)或者-5.0到100.0度(G1316B)。柱温箱只能冷却到比环境温度低10度的温度
与检测池相同(G1316B)---可将温度设置为与配置检测器的池温度。只有在配置了G1315C/D DAD SL或者G1365C/D MWD SL的情况下，才会启用此选项 停止时间---设置柱温箱停止分析的时间。一般设置为“与泵一致”即可
更多信息
可进行分析---在任何温度下，选项可以指定是否开始分析与柱温箱温
度无关；当温度在设定值之内，可以指定仅当温度位于指定的温度范围
内时才开始分析
9G1314A/B/D/E,G1314C XL(可变波长紫外检测器)：
设置可变波长紫外检测器
左键单击可变波长紫外检测器图标，出现
，点击“设置VWD信号”或者点击“仪器”的下拉菜单“设置VWD 设置信号”后进入可变波长紫外检测器的参
数设置菜单
波长---设置VWD检测波长
峰宽---设置为色谱图中的预期的最窄峰。峰检测器将忽略比峰宽设置窄很多或者宽很多的所有峰
停止时间---设置VWD停止分析时间。一般设置为“与泵一致”即可 当VWD与其他检测器一起工作时，关闭检测器的灯，分析将停止。如果希望关闭检测器的灯时也能进行分析，请在“设置VWD信号->更多信息->特殊设置值(设置)”中选择“当灯关闭时也进行分析”
控制
左键单击可变波长紫外检测器图标，出现
，点击“控制”或者点击“仪器”的下拉菜单“更多VWD”中选取“控制”后进入可变波长紫外检测器的控制菜单
灯---控制检测器灯的开关
开灯---选择，则在打开电源的同时也点灯。为了延长灯的寿命，建议
不选此项，以便在冲洗系统或者其他不需要检测器工作的情况下节省灯
的消耗
9G1315B/D ,G1315C XL(二极管阵列检测器)/ G1365B/D ,G1365C XL(多波长紫外检测器)：
设置二极管阵列检测器
左键单击二极管阵列检测器图标，出现，
点击“设置DAD信号”或者点击“仪器”的下拉菜单“设置DAD 设置信
号”后进入二极管阵列检测器的参数设置菜单
信号---样品：检测到的样品吸光度所对应的波长。参比波长对应的吸光度将从样品波长对应的吸光度中扣除；带宽：样品波长的带宽。带宽决定了检测吸光度的波长范围通常小于20nm，例如，样品波长为254nm，样品带宽为20nm，则从244到264nm的波长范围检测吸光度；参比：参比吸光度对应的波长。参比波长可以补偿由于基线吸光度中的变化(例如，由于梯度洗脱中溶剂组成的变化)而引起的波动；带宽：参比波长的带宽通常设定为小于100nm。G1315A/B二极管阵列检测器可以存储5个信号；G1315C/D二极管阵列检测器可以存储8个信号
停止时间---设置DAD停止分析时间。一般设置为“与泵一致”即可
光谱---存储：定义了在信号A上提取并保存光谱的点。“无”，未提取光谱；“顶点+基线”，在风的顶点和基线处提取光谱；“顶点+斜率+基线”，在峰的顶点、基线、上升斜率和下降斜率提取光谱；“峰中的全部”，提取峰内的所有光谱；“每个一条光谱”，选择“全部”，将连续提取光谱，但是只每个一条光谱存储一条光谱，其他光谱将被弃用，这样可以减少必要的数据存储量；“全部”，根据“峰宽”设置连续提取光谱。每个峰宽采集八条光谱，一条光谱的采集时间略少于峰宽除以8，即大于或者等于0.01s且小于或等于2.55s
范围---定义光谱存储的波长范围。从190nm到950nm
步长---定于光谱存储的波长分离度。从0.10nm到100.00nm
阈值---预期的最小峰高度。峰检测器忽略低于阈值的所有峰且不保存光谱。限值：0.001到1000.00mAU，步长为0.001mAU
狭缝---设置检测器的光学带宽；狭缝越窄，仪器的光学带宽就越小，但其灵敏度也越低。光学带宽越小，光谱的分离度就越高
温度控制---G1315C/D二极管阵列检测器的光学设备的温度控制
。保持光学设备在一个恒定的温度可以提高不稳定高温环境下的基线稳定性
设置多波长紫外检测器
多波长紫外检测器的设置于二极管阵列检测器相类似，但是没有“光谱”
部分选项
G1365A/B多波长紫外检测器可以存储5个信号；G1365C/D多波长紫外
检测器可以存储8个信号
9G1362A(示差检测器)：
设置示差检测器
左键单击示差检测器图标，出现，点
击“设置RID信号”或者点击“仪器”的下拉菜单“设置RID信号”后
进入示差检测器的参数设置菜单
光学部件温度---设置光学设备温度。限值：高出环境5度到55度之间，建议为高出环境5度，以提高基线稳定性
极性---设置RID信号的极性。由于分析物和洗脱液的特性，即使在一个运行内示差折光检测器也可以显示负峰和正峰。从“正极性”或“负极性”数据中选择需要的“信号极性”
自动循环---选择在运行后是自动循环排出物(打开)还是直接将其排除到RID的废液口(关闭)
停止时间---设置RID停止分析时间。一般设置为“与泵一致”即可
峰宽---设置为色谱图中的预期的最窄峰。峰检测器将忽略逼峰宽设置窄很多或者宽很多的所有峰
控制
左键单击示差检测器图标，出现，点
击“控制”或者点击“仪器”的下拉菜单“更多RID->控制”后进入示差检测器的参数“控制”菜单
加热器---可以打开RID加热器，控制光学设备温度。限值：高出环境5
度到55度之间，建议为高出环境5度，以提高基线稳定性
再循环阀---“打开”可以打开排出物的循环；“关闭”，打开RID的
废液出口
清洗参比池---“打开”，在溶剂发生变化或者参比池被污染时交换参
比池的内容物
打开电源时---打开电源是即“打开加热器”
9G1321A(荧光检测器)：
设置荧光检测器
左键单击荧光检测器图标，出现，点击
“设置FLD信号”或者点击“仪器”的下拉菜单“设置FLD信号”后进
入荧光检测器的参数设置菜单
Agilent 1290 超高效液相色谱仪标准操作规程Ⅰ目的：制定Agilent 1290超高效液相色谱仪使用操作规程，确保操作人员能正确规范地操作液相色谱仪。Ⅱ范围：适用于Agilent1290超高效液相色谱仪的使用。Ⅲ规程： 1 开机 1.1 打开计算机，进入 Windows画面。 1.2 打开 1290INFINITY HPLC 各模块电源。 1.3 待各模块自检完成后，双击“Instrument 1 Online”图标，化学工作站自动与12001290INFINITY HPLC 通讯。 1.4 从“View”菜单中选择“方法和运行控制”画面，点击”视图”菜单中的“样品视图“系统视图”，使其命令前有“√”标志，来调用所需的界面。 1.5 点击泵下面的瓶图标，选择‘瓶填充‘如下图所示，输入溶剂的实际体积和瓶体积。也可输入停泵的体积。点击“Ok”。 1.6 从菜单“视图”中，选中“在线信号”，选中“信号窗口1”，然后点击“改变…” 钮，将所要绘图的信号移到右边的框中，点击“确定”。(如同时检测二个信号，则重复选中“信号窗口2”) 2 排气 2.1 首先在方法编辑中，泵的参数设置部分，选好需要排空的通道（保证是开的） 2.2 点击仪器状态视图中泵的图标，选择控制，出现如下图 2.3 勾上吹扫，并且输入流速，
时间，比例就可以 purge 泵头。排空的时候阀会自动切换，无需人为介入。 2.4 当我们发现泵头里面有气泡出不来的时候，选择预备---开。然后点击确定。此时泵会用很强烈的方式朝外泵液体，并持续20 次自动停止。 3 编辑数据采集方法 3.1 开始编辑完整方法： 从“方法”菜单中选择“编辑完整方法…” 项，如下图所示选中除“数据分析”外的三项，点击“确定” ，进入下一画面。 3.2 方法信息：在“方法注释”中加入方法的信息（如：This is for test!）。点击“确定” ，进入下一画面。 3.3 进样方式选择根据自动进样器的类型，选择合适的进样方式。 3.4 泵参数设定：在“流速”处输入流量，如 1.5ml/min，停止时间：10 min。在“溶剂B”处输入70.0，(A=100-B) ，也可“插入”一行“时间表” ，编辑梯度。在“压力限”处输入柱子的最大耐高压，以保护柱子。 3.5 自动进样器参数设定: 选择合适的进样方式，如图所示，进样体积1.0ul ，标准进样”----只能输入进样体积，此方式无洗针功能。“洗针进样”----可以输入进样体积和洗瓶位置，此方式针从样品瓶抽完样品后，会在针座旁边中洗针。 3.6 柱温箱参数设定: 在“温度”下面的空白方框内输入所需温度，如：40度。并选中它，点击“更
高效液相色谱实验报告 一、实验目的 1了解液相色谱的发展历史及最新进展 2 学习液相色谱的基本构造及原理 3 掌握液相色谱的操作方法和分析方法，能够通过HPLC分离测定来对目标化合物的分析鉴定。 二、实验原理 液相色谱法采用液体作为流动相，利用物质在两相中的吸附或分配系数的微小差异达到分离的目的。当两相做相对移动时，被测物质在两相之间进行反复多次的质量交换，使溶质间微小的性质差异产生放大的效果，达到分离分析和测定的目的。液相色谱与气相色谱相比，最大的优点是可以分离不可挥发而具有一定溶解性的物质或受热后不稳定的物质，这类物质在已知化合物中占有相当大的比例，这也确定了液相色谱在应用领域中的地位。 高效液相色谱可分析低分子量、低沸点的有机化合物，更多适用于分析中、高分子量、高沸点及热稳定性差的有机化合物。80%的有机化合物都可以用高效液相色谱分析，目前以已经广泛应用于生物工程、制药工程、食品工业、环境检测、石油化工等行业。 三、高效液相色谱的分类 吸附色谱法、分配色谱法、空间排阻色谱法、离子交换色谱法、亲和色谱法、化学键合相色谱法 四、高效液相色谱仪的基本构造 高效液相色谱至少包括输液系统、进样器、分离柱、检测器和数据处理系统等几部分。 1 输液系统： 包括贮液及脱气装置、高压输液泵和梯度洗脱装置。贮液装置用于存贮足够量、符合HPLC要求的流动相。高效液相色谱柱填料颗粒比较小，通过柱子的流动相受到的流动阻力很大，因此需要高压泵输送流动相。 2 进样系统： 将待测的样品引入到色谱柱的装置。液相色谱进样装置需要满足重复性好、死体积小、保证柱中心进样、进样时引起的流量波动小、便于实现自动化等多项要求。进样系统包括取样、进样两项功能。 3 分离柱： 色谱柱是色谱仪的心脏、柱效高、选择性好、分析速度快是对色谱柱的一般要求。商品化的HPLC微粒填料，如硅胶和以硅胶为基质的键合相、氧化铝、有机聚合物微球（包括离子交换树脂）等的粒度通常在3μm、5μm、7μm、以及10μm。采用的固定相粒度甚至可以达到1μm，而制备色谱所采用的固定相粒度通常大于10μm。HPLC填充柱效的理论值可以达到50000/m～160000/m理论板，一般采用100-300mm的柱长可满足大多数样品的分析的需要。由于柱效内、外多种因素的影响，因此为使色谱柱达到其应有的效率。应尽量的减小系统的死体积。 4 检测系统： HPLC检测器分为通用型检测器和专用型检测器两类。通用型检测器可连续测量色谱柱流出物（包括流动相和样品组分）的全部特性变化。这类检测仪器包括示差折光检测器、介
镇江恒源汽车零部件有限公司立式收口机使用说明书 立式收口机 使 用 说 明 书 镇江市恒源汽车零部件有限公司
非常感谢您选择使用镇江市恒源汽车零部件有限公司生产的立式收口机,请详细阅读本品的使用说明书，以便于您的安全使用。 目录 1.安全说明 (3) 2.设备用途和适用范围 (7) 3.设备参数 (7) 4.设备动力系统 (8) 5.设备操纵系统 (12) 6.设备电气系统 (16) 7.设备冷却系统 (26) 8.设备运输、安装及试车 (27) 9.设备维护与保养 (29) 10.设备的结构及调整 (37) 11.设备易损零件及加工图 (38) 12.设备功能简介 (39)
1.安全说明 1.1安全规则概要 操作者使用设备前必须认真阅读安全说明，安全人员要确告操作者设备的要求。 1）设备的操作、维护和修理人员必须经过专业培训，有能力预见风险、有安全意识并能预测风险的人才能操作设备。 2）操作和维护人员必须认真阅读和掌握操作说明。 3）设备停止操作后，主油缸由于液压惯性还有短暂动作时间，应注意在工件停止前身体部位不得进入加工区域和触摸工件。 4）各种安全防护罩不得随意拆卸或改装，维护和修理时，应切断主电源。 5）设备上的各种安全警示标志不得随意拆卸，并要经常保持其干净、清晰。 警告：设备通电后，千万不要用手触摸模具和运动部件 6）设备的操作、维修和调整必须由专业人员进行，其他人员不得随意起动设备。 7）应按工艺规程操作设备，应由专业维修人员修理设备。 8）调整和维修设备时所用的扳手和钳子等工具必须是标准工具。 9）设备出现异常现象时应立即停机，并由专业维修人员及时检查和维修。 10）在拆卸和装配设备时，应使用有足够承载能力的起吊装置。 11）严格遵守设备上的安全说明和安全警告，并且确保其完整、清晰。 12）操作设备前要进行安全检查，确定各行程及限位开关、撞块、急停按钮、光栅安全可靠。 13）维修或调整设备前一定要在开关关闭、电源切断、工件完全停止的状态下进行。 14）操作人员不要穿宽松的衣服、袖口必须扎紧，不要戴领带、珠宝（戒指、手表等），必须戴护目镜和穿劳保鞋。 15）操作设备时，不论男女，长发必须戴工作帽并将其包裹在内。 16）整机噪音不大于75dB。建议穿戴适当的劳保用品，例如，戴听力保护器以减少听力的损失。 17）设备周围工作区要保持干净、明亮整洁、光线适宜，附近不能放置杂物，以免给操作者带来不便。 18）设备运行、加工时，不许移动各处防护罩。 19）离开设备时，必须关闭设备主电源开关。 20）设备重新起动时，必须对设备进行重新复位。 21）设备上，特别是设备的运动部件周围不能放置工件、工具等物件。 22）主油缸动作前一定要将工件（工装）固定牢靠，人员离开工作区域后才可起动设备。
岛津液相色谱仪使用注意事项 1.流动相必须用HPLC级的试剂，使用前过滤除去其中的颗粒性杂质和其他物质(使用0.45um或更细的膜过滤)。 2.流动相过滤后要用超声波脱气，脱气后应该恢复到室温后使用。 3.不能用纯乙腈作为流动相，这样会使单向阀粘住而导致泵不进液。 4.使用缓冲溶液时，做完样品后应立即用去离子水冲洗管路及柱子一小时，然后用甲醇(或甲醇水溶液)冲洗40分钟以上，以充分洗去离子。对于柱塞杆外部，做完样品后也必须用去离子水冲洗20ml以上。 5.长时间不用仪器，应该将柱子取下用堵头封好保存，注意不能用纯水保存柱子，而应该用有机相(如甲醇等)，因为纯水易长霉。 6.每次做完样品后应该用溶解样品的溶剂清洗进样器。 7.C18柱绝对不能进蛋白样品，血样、生物样品。 8.堵塞导致压力太大，按预柱→混合器中的过滤器→管路过滤器→单向阀检查并清洗。清洗方法；①以异丙醇作溶剂冲洗：②放在异丙醇中间用超声波清洗；⑧用10％稀硝酸清洗。 9.气泡会致使压力不稳，重现性差，所以在使用过程中要尽量避免产生气泡。 10.如果进液管内不进液体时，要使用注射器吸液：通常在输液前要进行流动相的清洗。 11.要注意柱子的pH值范围，不得注射强酸强碱的样品，特别是碱性样品。 12.更换流动相时应该先将吸滤头部分放入烧杯中边振动边靖洗，然后插入新的流动相中。更换无互溶性的流动相时要用异丙醇过渡一下。 液相色谱柱使用经验谈 色谱柱在使用前，最好进行柱的性能测试，并将结果保存起来，作为今后评价柱性能变化的参考。但要注意：柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同；另外，在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是最佳条件)，只有这样，测得的结果才有可比性。 1、样品的前处理： a、最好使用流动相溶解样品。 b、使用预处理柱除去样品中的强极性或与柱填料产生不可逆吸附的杂质。 c、使用0.45μm的过滤膜过滤除去微粒杂质。 流动相的配制 液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分离的目的，因此要求流动相具备以下的特点： a、流动相对样品具有一定的溶解能力，保证样品组分不会沉淀在柱中(或长时间保留在柱中)。
实验七高效液相色谱(HPLC)法测定邻苯二甲酸酯 一.实验目的 1、学习高效液相色谱仪的基本操作方法。 2、了解高效液相色谱仪原理和条件设定方法。 3、了解高效液相色谱法在日常分析中的应用。 二.实验原理 高效液相色谱法是以液体作为流动相，借助于高压输液泵获得相对较高流速的液流以提高分离速度、并采用颗粒极细的高效固定相制成的色谱柱进行分离和分析的一种色谱方法。 在高效液相色谱中，若采用非极性固定相，如十八烷基键合相，极性流动相，即构成反相色谱分离系统。反之，则称为正相色谱分离系统。反相色谱系统所使用的流动相成本较低，应用也更为广泛。 定量分析时，为便于准确测量，要求定量峰与其他峰或内标峰之间有较好的分离度。分离度（R）的计算公式为： R＝ 2[t (R2)-t (R1) ] /1.7*(W 1 ＋W 2 ) 式中 t (R2)为相邻两峰中后一峰的保留时间； t (R1) 为相邻两峰中前一峰的保留 时间； W 1及W 2 为此相邻两峰的半峰宽。除另外有规定外，分离度应大于1.5。 本实验对象为邻苯二甲酸酯，又称酞酸酯，缩写PAE，常被用作塑料增塑剂。它被普遍应用于玩具、食品包装材料、医用血袋和胶管、乙烯地板和壁纸、清洁剂、润滑油、个人护理用品，如指甲油、头发喷雾剂、香皂和洗发液等数百种产品中。但研究表明，邻苯二甲酸酯在人体和动物体内发挥着类似雌性激素的作用，是一类内分泌干扰物。待测物性质见表1。 表1色谱柱测试条件 如果要检测不同条件对谱图分离的影响，可按表1配制几种物质的混合溶液，在不同条件下进行HPLC分离检测。
三.仪器与试剂 1、仪器 Agilent 1100高效液相色谱仪，50ul微量注射器。 2、试剂 甲醇（色谱专用），高纯水 四.实验步骤 1、色谱条件 色谱柱：辛烷基硅烷键合硅胶（C8） 柱温：室温 流动相：初始为高纯水：30％，甲醇：70％ 检测器：DAD检测器; 检测波长：220nm； 进样体积：100μl定量环，实际注射每次可控制在200μl。 2、待测溶液的配制 首先用甲醇做溶剂配制储备液：邻苯二甲酸二甲酯（0.3880g/L），邻苯二甲酸二乙酯（0.2770g/L），邻苯二甲酸二丁酯（0.3776g/L）。然后各取1mL储备液用水和甲醇（20：80）稀释至10mL，作为待测溶液。 3、色谱测定 (1) 按操作规程开启电脑，开启脱气机、泵、检测器等的电源，启动Agilent 1100在线工作软件，设定操作条件。流量为1.000ml/min。 (2) 待仪器稳定后，开始进样。将进样阀柄置于“LOAD”位置，用微量注射器吸取混合物溶液50ul，注入仪器进样口，顺时针方向扳动进样阀至“INJECT”位置，此时显示屏显示进样标志。 (3) 记下各组分色谱峰的保留时间及峰面积及分离比。 (4) 实验完毕，清洗系统及色谱柱。依次用甲醇-水（60：40）、甲醇-水（70：30）……直到纯甲醇作流动相清洗，每次清洗至基线走稳，至少清洗15min。 五.实验结果
废水处理设备 系统操作说明书 苏州万科环境工程有限公司 2014年2月（第一版） 操作和维护该系统时，必须遵守该手册中的操作程序。本手册仅针对本系统，如对其它水处理系统按照本手册操作引起损失，本公司恕不负责。 目录 1 人身安全注意事项.............................................................................................. 1.1电气................................................................................................................ 1.2机械................................................................................................................ 1.3开停机............................................................................................................ 1.4通道............................................................................................................... 1.5安全用具....................................................................................................... 1.6安全检查表................................................................................................... 2 废水处理工艺...................................................................................................... 3处理设备构筑物的运行与控制参数................................................................... 3.1地坑................................................................................................................ 3.2调节池............................................................................................................ 3.3气动隔膜泵.................................................................................................... 3.4管道混合器.................................................................................................... 3.5沉淀池............................................................................................................ 3.6回用水池........................................................................................................ 3.7除油过滤器.................................................................................................... 4加药系统............................................................................................................... 4.1加碱系统....................................................................................................... 4.2混凝剂加药系统........................................................................................... 4.3絮凝剂加药系统........................................................................................... 5. 压滤机系统........................................................................................................ 6. 触摸屏操作说明................................................................................................
仪器分析实验报告实验名称：高效液相色谱分析实验
一、实验目的 1. 了解HPLC的结构，了解仪器的开、关程序。 2. 了解流动相的制备和样品溶液的制备。 3. 知道仪器的运行程序和进行样品分析。 二、仪器和试剂 仪器：美国安捷伦1200型HPLC、10μL的微量注射器 试剂：磷酸乙腈溶液(PH=3)、重蒸水、邻氯苯甲酸 三、实验步骤 1.流动相的准备 流动相只有一组：PH=3的磷酸乙腈溶液，进过脱气，用蠕动泵输送。2.开机，色谱柱平衡 当1完成后，开机，待色谱柱平衡。 3.样品溶液的准备 配置好邻氯苯甲酸溶液，按要求选好滤纸的孔径大小。用低压过滤装置过滤，由于美国安捷伦1200型HPLC配有脱气装置，因此滤液无需事先脱气就可以进行分析。 4.基线的查看 由于仪器内部压力的变化可以引起基线的不断波动，因此，需等待压力稳定后，基线平稳才能进行进样。 5.样品进样分析
用10μL的微量注射器取5μL的邻氯苯甲酸，微量注射器中不能有气泡，将微量注射器的针头插入到注射的孔时，打开微量注射阀，将邻氯苯甲酸注射进去后，迅速关闭阀门，抽出针头，等待仪器的分析结果。 6.色谱柱的清洗 分析工作结束后，要清洗进样阀中的残留样品，也要用适当的液体来清洗色谱柱。 7.关机 实验完毕后，关闭仪器和电脑。 四、实验数据及处理 1.LC参数 2.色谱柱参数 3.四元泵状态 A：0.0％流速：1.000ml/min B：0.0％压力：91bar C：0.0％ D：0.0％
5.色谱分析谱图见附页，经过注射5μL的邻氯苯甲酸，得到三组实验色谱图， 根据谱图列表数据如下： 色谱柱长(L)、理论塔板高度(H)与理论塔板数(n)三者的关系为： n = L / H 理论塔板数和色谱参数之间的关系为： n = 16 ( t R / W b ) 2 = 5.54 ( t R / Y1/2 ) 2 则取第五组数据计算得： t R=2.437 min = 146.22s Y1/2 = 2.354(0.1375min / 4 ) = 4.855125 s n = 5.54 ( t R / Y1/2 ) 2 =5025 (块)
超高效液相色谱仪技术参数 原装进口 1. 工作条件 1.1 电源：220V，50Hz 1.2 操作环境 15?C-28?C 1.3 湿度：20-80% 2.技术参数 *2.1 二元高压泵结构：四压力传感器，数控直线驱动色谱双泵。四个压力传感器能够准确的监控泵系统的压力，并对泵做出相应调整，保证流量精度的重复性和稳定性。（需在投标文件中提供泵结构示意图予以证明并加盖仪器制造商公章，并标明四压力传感器示意图位置和真实位置）。 2.1.1 泵类型：数控直线驱动色谱双泵 2.1.2 泵输出压力：≥20000 psi *2.1.3 泵驱动马达：≥4 2.1.4 柱塞杆与马达联接方式：刚性直连 *2.1.5 泵压力传感器数量：≥4 2.1.6 1-4路溶剂任意混合 2.1.7可配内置溶剂选择阀，扩展到9路溶剂 #2.1.8 真空脱气:六通道在线真空脱气机 #2.1.9 流量：最小流量范围≥0.0100，最大流量范围≤2.000mL/min，以0.001mL/min 为增量 *2.1.10 最大操作压力：≥17,800psi（须提供厂家英文官方原版指标及应用证明文件，并加盖仪器制造商公章。 #2.1.11 梯度模式：线性、步进、凹线、凸线四种类型 2.1.12 柱塞清洗：自动，可编程 2.1.13 流量精度：+/-0.02min SD,（全流速范围内）,不随反压变化 2.1.14 流速准确度：±1.0% 2.1.15 梯度准确度：± 0.5%，不随反压变化 2.1.16 梯度精度：±0.15%RSD，不随反压变化
#2.1.17缓冲盐浓度和pH值调节：自动配置缓冲盐浓度和自动调节pH值2.1.17.1配置方式:自动比例混合 2.1.17.2计算方式:梯度曲线 2.1.17.3 pH精度: ±0.01 2.2 自动进样器系统 2.2.1密封在线针进样 2.2.2 耐压: 18,000psi 2.2.3 进样模式：任意体积直接注射进样 2.2.4 样品瓶数：≥90 位 2.2.5 进样精度：<0.3%RSD #2.2.6 样品交叉污染度：<0.001% 2.2.7 进样体积：0.1-50μL，以 0.1μL 为增量 2.2.8 进样线性度：>0.999 2.2.9 自动进样循环时间：<30 秒 2.3 柱温箱及色谱柱 2.3.1 温度范围：室温以上 5℃-90℃，增量：0.1℃ 2.3.2加热方式:电加热 2.3.3 预热方式：主动式 2.3.4 色谱柱颗粒度：≤1.7 um 2.3.5 色谱柱与柱温箱上带有使用信息记录装置 2.4紫外/可见光检测器 *2.4.1波长范围：190～700nm 2.4.2波长准确度：±1nm 2.4.3测量范围：0.0001～4.0000AUFS 2.4.4基线噪音：6.0×10-6 AU, 2.4.5基线漂移: ≤5.0x10-4AU/hr/℃ 2.4.6线性范围：2.5AU 2.4.7吸收范围：0.0001 to 4.0000 AUFS 2.4.8光源：氘灯，寿命2000小时
反渗透设备操作说明书 目录 一、工艺简介 (2) 1、工艺流程简图 (2) 2、工艺说明 (2) 二、反渗透主机说明 (4) 三、设备启动 (5) 四、停机 (6) 五、注意事项 (6) 六、常见故障 (6) 七、产水量温度校正 (7) 7.1产水量的温度校正参数 (7) 7.1温度对产水量的影响 (7) 八、污染与清洗 (7) 8.1 清洗特别提示 (7) 8.2 膜污染 (7) 8.3 污垢成份 (10) 8.4 物理清洗 (11) 8.5 化学清洗 (14) 8.5.1 化学清洗药品的选择与使用 (14) 8.5.2 推荐的清洗药品 (15) 8.5.3 化学清洗系统 (19) 8.5.4 化学清洗过程 (21) 8.5.5 系统杀菌 (22) 8.5.6 清洗中物理手段与化学手段结合 (23) 一、工艺简介 1、工艺流程简图 原水à进水电动阀à原水箱à原水变频恒压供水系统à石英砂过滤器à活性炭过滤器à还原性杀菌剂添加à阻垢剂添加à保安过滤器à高压泵à反渗透膜组件à纯水箱à纯水变频供水系统à用水 2、工艺说明 进水电动阀 原水箱中设有液位控制系统，通过液位控制系统控制进水电动阀的开启与关闭，实现对原水箱的自动补水。 注意：当原水箱在补水过程中断电，需要操作人员手动关闭电动阀，否则在断电的情况下电动阀不能关闭会发生原水箱冒水事故。 原水箱 用于存储原水，对原水进行缓冲，平衡供水量与后续设备用水量。水箱设有补水液位控制、低水位液位控制，自动控制进水电动阀向原水箱补水，同时当进水电动阀或自来水供水出现故障而原水箱中水位低于液位控制浮球低位时，后续设备自动停止工作，当故障解决后水位高于低位浮球后设备自动转入工作状态。
高效液相色谱法（HPLC） 一、方法原理 1、液相色谱法概述 高效液相色谱分析法
其工作流程为：高压输液泵将贮液器中的流动相以稳定的流速(或压力)输送至分析体系，在色谱柱之前通过进样器将样品导人，流动相将样品依次带入预柱、色谱柱，在色谱柱中各组分被分离，并依次随流动相流至检测器，检测到的信号送至数据处理系统记录、处理和保存。
HPLC仪器的基本结构 2、高效液相色谱法的特点（HPLC） 与经典柱色谱原理相同，是由液体流动相将被分离混合物带入色谱柱中，根据各组分在固定相及流动相中吸附能力、分
配系数、离子交换作用或分子尺寸大小的差异来进行分离。 由于高压输液泵、高灵敏度检测器和高效固定相的使用，提高了柱效率，降低了检出限，缩短了分析时间。 特点是选择性高、分离效能高、分析速度快的特点。 高沸点有机物的分析、离子型化合物、高分子化合物、热稳定性差的化合物以及具有生物活性的物质，弥补了气相色谱法的不足。 高效液相色谱法与气相色谱法相比，各有所长，互相补充。 如果能用气相色谱法分析的样品，一般不用液相色谱法，因为气相色谱法分析速度更快、更方便、成本更低。 3、高效液相色谱法的固定相和流动相 （1）固定相 表面多孔型和全多孔型两大类。 （2）流动相（淋洗液） 流动相的选择对改善分离效果产生重要的辅助效应。 从实用，选用的流动相具有廉价、易购的特点外，还应满足下列要求： ①与固定相互不相溶，并能保持色谱柱的稳定性。 ②高纯度，以防所含微量杂质在柱中积累，引起柱 性能的改变。 ③与所用的检测器相匹配。 ④应对样品有足够的溶解能力，以提高测定的灵敏 度。 ⑤具有低的黏度（可减少溶质的传质阻力，提高柱 效）和适当低的沸点。
高效液相色谱法： 系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱，对供试品进行分离测定的色谱方法。 注入的供试品，由流动相带入色谱柱内，各组分在柱内被分离，并进入检测器检测， 由积分仪或数据处理系统记录和处理色谱信号。 1.对仪器的一般要求和色谱条件 高效液相色谱仪由高压输液泵、进样器、色谱柱、检测器、积分仪或数据处理系统组成。 色谱柱内径一般为3.9～4.6mm，填充剂粒径为3～10μm。 超高液相色谱仪：是适应小粒径（约2μm）填充剂的耐超高压、小进样量、低死体积、 高灵敏度检测的高效液相色谱仪。 （1）色谱柱 反相色谱柱： 以键和非极性基团的载体为填充剂填充而成的色谱柱。常见的载体有硅胶、聚合物复合硅胶和聚合物等；常用的填充剂优十八烷基硅烷键合硅胶、辛基硅烷键合硅胶和苯基键合硅胶等。 正相色谱柱： 用硅胶填充剂，或键合极性基团的硅胶填充而成的色谱柱。常见的填充剂有硅胶、氨基键合硅胶 和氰基键合硅胶等。氨基键合硅胶和氰基键合硅胶也可用作反向色谱。 离子交换色谱柱：用离子交换填充剂填充而成的色谱柱。有阳离子交换色谱柱和阴离子交换色谱柱。 手性分离色谱柱：用手性填充剂填充而成的色谱柱。
色谱柱的内径和长度，填充剂的形状、粒径与粒径分布、孔径、表面积、键合基团的表面覆盖度、载体表面基团残留量，填充的致密与均匀程度等均影响色谱柱的性能，应根据被分离物质的性质来选择合适的色谱柱。 温度会影响分离效果，品种正文中未指明色谱柱温度时系指室温，应注意室温变化的影响。为改善分离效果可适当提高色谱柱的温度，但一般不宜超过60℃。 残余硅羟基未封闭的硅胶色谱柱，流动相的pH值一般应在2～8之间。残余硅羟基已封闭的硅胶、聚合物复合硅胶或聚合物色谱柱可耐受更广泛pH值的流动相，适合于pH值小于2或大于8的流动相。 （2）检测器 最常用的检测器为紫外-可见分光检测器，包括二极管阵列检测器， 其他常见的检测器有荧光检测器、蒸发光散射检测器、示差折光检测器、电化学检测器和质谱检测器等。 紫外-可见分光检测器、荧光检测器、电化学检测器为选择性检测器， 其响应值不仅与被测物质的量有关，还与其结构有关； 蒸发光散射检测器和示差折光检测器为通用型检测器， 对所有物质均有响应，结构相似的物质在蒸发光散射检测器的响应值几乎仅与被测物质的量有关。 紫外-可见分光检测器、荧光检测器、电化学检测器和示差折光检测器的响应值与被测物质的量在一 定范围内呈线性关系， 但蒸发光散射检测器的响应值与被测物质的量通常呈指数关系，一般需经对数转换。 不同的检测器，对流动相的要求不同。 紫外-可见分光检测器所用流动相应符合紫外－可见分光光度法（通则0401）项下对溶剂的要求； 采用低波长检测时，还应考虑有机溶剂的截止使用波长，并选用色谱级有机溶剂。 蒸发光散射检测器和质谱检测器不得使用含不挥发性盐的流动相。 （3）流动相
. 立式收口机 使 用 说 明 书 镇江市恒源汽车零部件有限公司
.
非常感谢您选择使用镇江市恒源汽车零部件有限公司生产的立式收口机,请详细阅读本品的使用说明书，以便于您的安全使用。 目录 1.安全说明 (3) 2.设备用途和适用范围 (7) 3.设备参数 (7) 4.设备动力系统 (8) 5.设备操纵系统 (12) 6.设备电气系统 (16) 7.设备冷却系统 (26) 8.设备运输、安装及试车 (27) 9.设备维护与保养 (29) 10.设备的结构及调整 (37) 11.设备易损零件及加工图 (38) 12.设备功能简介 (39)
1.安全说明 1.1安全规则概要 操作者使用设备前必须认真阅读安全说明，安全人员要确告操作者设备的要求。 1）设备的操作、维护和修理人员必须经过专业培训，有能力预见风险、有安全意识并能预测风险的人才能操作设备。 2）操作和维护人员必须认真阅读和掌握操作说明。 3）设备停止操作后，主油缸由于液压惯性还有短暂动作时间，应注意在工件停止前身体部位不得进入加工区域和触摸工件。 4）各种安全防护罩不得随意拆卸或改装，维护和修理时，应切断主电源。 5）设备上的各种安全警示标志不得随意拆卸，并要经常保持其干净、清晰。 警告：设备通电后，千万不要用手触摸模具和运动部件 6）设备的操作、维修和调整必须由专业人员进行，其他人员不得随意起动设备。 7）应按工艺规程操作设备，应由专业维修人员修理设备。 8）调整和维修设备时所用的扳手和钳子等工具必须是标准工具。 9）设备出现异常现象时应立即停机，并由专业维修人员及时检查和维修。 10）在拆卸和装配设备时，应使用有足够承载能力的起吊装置。 11）严格遵守设备上的安全说明和安全警告，并且确保其完整、清晰。 12）操作设备前要进行安全检查，确定各行程及限位开关、撞块、急停按钮、光栅安全可靠。 13）维修或调整设备前一定要在开关关闭、电源切断、工件完全停止的状态下进行。 14）操作人员不要穿宽松的衣服、袖口必须扎紧，不要戴领带、珠宝（戒指、手表等），必须戴护目镜和穿劳保鞋。 15）操作设备时，不论男女，长发必须戴工作帽并将其包裹在内。 16）整机噪音不大于75dB。建议穿戴适当的劳保用品，例如，戴听力保护器以减少听力的损失。 17）设备周围工作区要保持干净、明亮整洁、光线适宜，附近不能放置杂物，以免给操作者带来不便。 18）设备运行、加工时，不许移动各处防护罩。 19）离开设备时，必须关闭设备主电源开关。 20）设备重新起动时，必须对设备进行重新复位。 21）设备上，特别是设备的运动部件周围不能放置工件、工具等物件。 22）主油缸动作前一定要将工件（工装）固定牢靠，人员离开工作区域后才可起动设备。
高效液相色谱仪操作步骤： 1)．过滤流动相，根据需要选择不同的滤膜(0.45um)。 2)．对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。 3)．打开HPLC工作站（包括计算机软件和色谱仪），连接好流动相管道，连接检测系统。 4)．进入HPLC控制界面主菜单，点击manual，进入手动菜单。 5)．有一段时间没用，或者换了新的流动相，需要先冲洗泵和进样阀。冲洗泵，直接在泵的出水口，用针头抽取。冲洗进样阀，需要在manual菜单下，先点击purge，再点击start，冲洗时速度不要超过10 ml/min。 6)．调节流量，初次使用新的流动相，可以先试一下压力，流速越大，压力越大，一般不要超过2000。点击injure，选用合适的流速，点击on，走基线，观察基线的情况。 7)．设计走样方法。点击file，选取select users and methods，可以选取现有的各种走样方法。若需建立一个新的方法，点击new method。选取需要的配件，包括进样阀，泵，检测器等，根据需要而不同。选完后，点击protocol。一个完整的走样方法需要包括：a.进样前的稳流，一般2-5分钟；b.基线归零；c.进样阀的loading-inject转换；d.走样时间，随不同的样品而不同。 8)．进样和进样后操作。选定走样方法，点击start。进样，所有的样品均需过滤。方法走完后，点击postrun，可记录数据和做标记等。全部样品走完后，再用上面的方法走一段基线，洗掉剩余物。 9)．关机时，先关计算机，再关液相色谱。 10)．填写登记本，由负责人签字。 注意事项： 1)．流动相均需色谱纯度，水用20M的去离子水。脱气后的流动相要小心振动尽量不引起气泡。 2)．柱子是非常脆弱的，第一次做的方法，先不要让液体过柱子。 3)．所有过柱子的液体均需严格的过滤。
高效液相色谱定量分析实验 一、实验目的 ⑴进一步熟悉HPLC仪器的基本构造及工作原理，熟悉HPLC的基本操作； ⑵了解色谱定量操作的主要方法以及各自特点； ⑶学习未知样品中甲苯的定量分析方法。 二、实验原理 ⑴校正因子： （1）绝对校正因子；（2）相对校正因子。 ⑵常见的色谱定量分析方法主要有： （1）归一化法。特点：简单、方便、准确，但要求所有组分必须全部出峰。 （2）内标法。特点：使用相对校正因子定量，结果准确，但操作繁琐，由于需要增加内标物，增大分离的难度。 （3）标准曲线法（外标法）。简单、方便，由于采用绝对校正因子定量，结果受到操作技术因素以及具体色谱条件影响较大。 （4）内标标准曲线法。 三、仪器与试剂 LC-1000型高效液相色谱仪、甲醇(色谱纯)、二次去离子水、甲苯、系列甲苯标准溶液、平头微量注射器（100 l）、待测溶液 四、LC-1000型高效液相色谱仪操作步骤 ⑴流动相的预处理 用甲醇和二次去离子水配成500 mL (V/V=90:10)的甲醇溶液，用0.45μm 有机滤膜过滤，超声波清洗器脱气10～20 min，装入流动相贮液瓶。 ⑵高效液相色谱仪操作 （1）依次打开高压输液泵、紫外检测器电源开关 （2）打开色谱N2000在线工作站，选择通道，建立运行方法。 （3）打开三通阀(逆时针半圈)，按“Purge”排除流路中的气泡。排气完毕后，按“Stop” 键，停泵，关闭三通阀。按“Flow”设置流速1.0 mL/min，“Enter”确认。 （4）按“设定”键，检测波长254 nm。按“↓”键，输入“1”，开启氘灯。 （5）按“Run”键，启动输液泵。 （6）检查基线，零点校正，待基线稳定后，用平头微量注射器取试液20 μL，将进样阀柄置于“Load”位置时注入样品，转动阀柄至“Inject”位置，同时点击软件“采集数据”。注意！平头微量注射器用甲醇清洗3次后，再用试液清洗3次，避免气泡。 （7）待所有色谱峰流出完毕后，按“停止采集”键，保存数据并在N2000离线工作站处理数据，记录组分的峰面积。 注意！注射器进不同样品前，使用专用清洗注射器在进样阀的“Load”和“Inject”位置，用流动相清洗2～3次。 (4) 结束工作：所有样品分析完毕后，流动相继续流动10～20 min，至基线稳定。关闭检测器，按“Stop”停泵。关闭泵电源。 五、实验内容 ⑴分别采集系列甲苯溶液以及未知试样的色谱图，根据保留时间定性，确定甲苯组分峰的位置，并测定各自的峰面积。 ⑵根据实验数据，利用外标法绘制标准工作曲线，并计算待测溶液中甲苯的含量。
超高效液相色谱(UPLC) 超高效液相色谱技术（ultra performance liquid chcromatography，简称UPLC）是一种综合了小颗粒填料、非常低系统体积(死体积)及快速检测手段等全新的检测技术。在全面提升HPLC的速度、灵敏度及分离度的同时，保留其原有的实用性及原理。基于小颗粒技术的UPLC，并非普通HPLC系统改进而成。它不但需要耐压、稳定的小颗粒填料（可达1.7μm），而且需要耐压的色谱系统(>15,000psi)、最低交叉污染的快速进样器、快速检测器及优化的系统体积等诸多方面的保障，以充分发挥小颗粒技术优势。这就需要对系统所有硬件和软件的进行全面创新。世界第一个商品化UPLC产品是Waters ACQUITY UPLC TM超高效液相色谱系统，它于2004年3月投入市场。 图1：填料技术的沿革 1．小颗粒填料改善分离的理论与科学基础 液相色谱30年的发展史是颗粒技术的发展史。颗粒大小的改变直接影响到柱效，从而对分离结果产生直接影响。由上图可知：随着颗粒度的不断降低，色谱分
离度不断提高。事实上，上述规律的理论基础是著名的Van Deemeter方程。Van Deemeter方程是色谱科学家预测颗粒度变化而引起的色谱变化的根本依据。Van Deemeter曲线（见图2）预测最佳柱效与相应的流动相流速。由Van Deemeter方程得知：随着颗粒度减小，相应的理论塔板高度（HETP）也下降，得到的柱效会更高。还应该注意到1.7 μm颗粒的HETP最小值区域扩大了（见图2），这表明可以在比大颗粒更宽的流量范围内得到最高的柱效，结果可以不损失高分离度的同时来适当提高流动相的流速（分析速度）。小颗粒填料为色谱分离带来如此的高柱效和速度优势，使得利用小颗粒技术成为色谱科学家梦寐以求的目标。然而HPLC系统的设计，一直难于发挥出最小颗粒的优点。小颗粒技术的运用，不但要求仪器在超出目前限度（6000 psi/ 400 bar）的压力下工作，同时要求仪器系统的死体积要更小，以便不影响梯度性能，而且还要检测器能高速检测出峰宽只有几秒的色谱峰。 在利用杂化颗粒技术合成出耐压的新一代小颗粒色谱填料之后，UPLC超高效液相色谱系统的设计，充分利用了小颗粒填料的所有优点，弥补传统HPLC系统的不足。
設備操作手冊......步進式指導 安全 設備概觀 人機介面 三色燈 開機與登入 產品換線 印刷產品 耗材補充 物品更換 登出與關機 錯誤訊息
警告與小心 為了確保印刷機操作狀況在任何時間均保持安全,所有職員必須廣泛地遵守並接受除在手冊描述之特別安全注意事項外之安全規範. 警告標示引起作業員與保養員對可造成死亡,重傷或病症的可能危險的注意.這些危險不是設備固有就是在設備操作時產生出來的.在機器上使用的警告標籤的範例展示於另一邊的表格內. 底下展示的結合警告和小心預防的標籤,貼於機台上意味著使用者嘗試在設備上執行此作業前應先參閱技術參考手冊內相關章節內容. 小心標示警告職員隨著偏離描述步驟所可能引發的人或料可能的損害.小心標示並不意味對職員的危險. 一個小心標示的例子如下: 小心 攝影機損毀..不要留下任何未用治具於升降平台的後軌道後方區域.如有任何物體留在升降平台的PC板印刷區域外,當平台上升至印刷高度時,它將可能與攝影機相撞.安全 警告: 驚嘆號 應用於未被特殊警示所涵蓋的一切危險的一般警示. 警告: 切割物 在警示標籤附近存在銳利邊緣傷害的危險.當在指定 區域工作時需特別小心. 警告: 刺激物 存在會立即產生發炎的物質,並會重複或延長與黏膜 或皮膚的接觸. 警告: 易燃物 存在易燃物質,應遠離熱,燃燒源與靜電放電,使用於通 風良好區域. 警告: 移動物 在警示標籤附近存在移動物件,這些物件有能力造成 傷害.設備外蓋不可移開. 警告: 輻射物 在標籤附近存在因雷射光造成眼睛傷害的危險.不要 直視光源或物體表面之直接反射光. 警告: 受壓物 高壓存在並可能造成傷害.不要企圖直接開啟系統至 大氣下. 警告: 電力危險 高電壓存在並可能造成傷害或死亡.不要從設備外罩 移除保護蓋或不顧保護裝置. 警告定義
高效液相色谱法测定水体中的苯酚和α-萘酚 一、实验目的 1、了解色谱法的分离原理，初步学会使用高效液相色谱仪； 2、利用高效液相色谱仪分离测定水体中的苯酚及α-萘酚。 二、实验原理 1、色谱法的分离原理 溶于流动相中的各待测组分经过色谱柱固定相时，由于各组分与固定相发生作用（吸附、分配、离子吸收、排阻、亲和）的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出，达到分离的目的，又称色层法、层析法。 2、高效液相色谱仪使用原理 高效液相色谱仪由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成四个系统即高压输液系统、进样系统、分离系统和检测系统。 储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱(固定相)内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动时，经过反复多次的吸附-解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来。 正是根据物质的定性与定量关系，不同的物质顺序离开色谱柱，通过检测器得到不同的峰信号，最后通过分析比对这些信号来判断待测物所含有的物质。 3、苯酚及α-萘酚的分离原理及标准溶液准备 对于一些组分比较简单的已知范围的混合物，或无已知物的情况下，可以利用保留值定性。保留值的大小取决于分配系数之比，即与组分的性质、固定液的性质及柱温有关，与固定液的用量、柱长、流速及填充情况无关。在一定操作条件下，用对照品配成不同浓度的对照液，定量进样，用峰面积或峰高对对照品的量（或浓度）做校正曲线，求回归方程，然后在相同条件下分析试样，计算含量，这种方法称为校正曲线法。通常截距近似为零，若截距较大，说明存在一定的系统误差。本实验，苯酚的波长为270nm，α-萘酚的波长为295nm。使得两种物质