版计数培养基适用性检查
记录
Prepared on 22 November 2020
计数用培养基适用性检查记录
1．检查方法：《中国药典2015版》四部非无菌药品微生物限度检查法：微生物计数法（通则1105）。
2．验证用仪器型号及编号：
立式蒸汽灭菌锅：型号编号：
生化培养箱型号编号：
霉菌培养箱：型号编号：
3．菌液制备：验证用菌种第( )代
接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至胰酪大豆胨液体培养基上，于30～35℃培养18～24h；上述培养物用氯化钠蛋白胨缓冲液10倍递增稀释至1ml含菌数为50～100cfu的菌悬液备用。
接种白色念珠菌的新鲜培养物至沙氏葡萄糖液体培养基上，于20～25℃培养2～3天;上述培养物用氯化钠蛋白胨缓冲液10倍递增稀释至1ml含菌数为50～100cfu 的菌悬液备用。
将黑曲霉菌菌悬液用氯化钠蛋白胨缓冲液10倍递增稀释至1ml含菌数为50～
100cfu的菌悬液备用。
4.培养基配制
按相应培养基产品说明分别配制胰酪大豆胨琼脂培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基、玫瑰红钠琼脂培养基、R2A琼脂培养基、胰酪大豆胨琼脂对照培养基、沙氏葡萄糖琼脂对照培养基、玫瑰红钠琼脂对照培养基、R2A琼脂对照培养基，并按照相应的灭菌方式灭菌备用。
5、培养基计数适用性检查
胰酪大豆胨琼脂培养基适用性检查
分别接种不大于100cfu的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉菌的菌悬液置直径90mm的无菌平皿中各2皿，另一个皿不接种菌作为空白对照。倾注20ml温度不超过45℃熔化的胰酪大豆胨琼脂对照培养基，混匀，凝固。将接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的平皿倒置于30-35℃的生化培养箱培养不超过3天，计数；将接种白色念珠菌、黑曲霉菌的平皿倒置于30-35℃的生化培养箱培养不超过5天，计数。被检培养基同法操作。结果见表1。
表1 培养基适用性检查结果
且菌落形态大小与对照培养基上的菌落一致。判该培养基的适用性检查符合规定。
结果判定：_____________________
结论：_____________________
沙氏葡萄糖琼脂培养基适用性检查
分别接种不大于100cfu的白色念珠菌、黑曲霉菌的菌悬液置直径90mm的无菌平皿中各2皿，另一个皿不接种菌作为空白对照。倾注20ml温度不超过45℃熔化的沙氏葡萄糖对照琼脂培养基，混匀，凝固。将平皿倒置于20-25℃的霉菌培养箱培养不超过5天，计数。被检培养基同法操作。结果见表2。
表2 培养基适用性检查结果
落形态大小与对照培养基上的菌落一致。判该培养基的适用性检查符合规定。
结果判定：__________________________________
结论：________________________________________
玫瑰红钠琼脂培养基适用性检查。
分别接种不大于100cfu的白色念珠菌、黑曲霉菌的菌悬液置直径90mm的无菌平皿中各2皿，另一个皿不接种菌作为空白对照。倾注20ml温度不超过45℃熔化的玫瑰红钠对照琼脂培养基，混匀，凝固。将平皿倒置于20-25℃的霉菌培养箱培养不超过5天，计数。被检培养基同法操作。结果见表3
表3 培养基适用性检查结果
落形态大小与对照培养基上的菌落一致。判该培养基的适用性检查符合规定。
结果判定：__________________________________
结论：________________________________________
R2A琼脂培养基适用性检查
分别接种不大于100cfu的铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的菌悬液置直径90mm的无菌平皿中各2皿，另一个皿不接种菌作为空白对照。倾注20ml温度不超过45℃熔化的R2A琼脂对照培养基，混匀，凝固。将平皿倒置于30-35℃的生化培养箱培养不超过3天，计数。被检培养基同法操作。结果见表4。
表4 培养基适用性检查结果
落形态大小与对照培养基上的菌落一致。判该培养基的适用性检查符合规定。
结果判定：__________________________________
结论：________________________________________
实验人：复核人：
年月日年月日
计数用培养基适用性检查方案
起草人：复核人：试验日期：