微
生
物
学
综
述
题目：蓝细菌的应用与研究发展
班级：生物技术2013（生物制药）
蓝细菌的应用和研究发展旧名蓝藻或蓝绿藻，是一类进化历史悠久、革兰氏染色阴(Cyanobacteria)摘要：蓝细菌
性、无鞭毛、含叶绿素和藻蓝素（但不形成叶绿体）、能进行产氧性光合作用的大型原核微生物。本文就蓝细菌的光合作用、固氮作用、食品功用、医疗功效、环境监测等，以及其研究发展进行了综述。关键词：蓝细菌，光合作用，生物固氮，制氢研究，功能食品，环境监测
大多数蓝藻的细胞壁外面有胶质衣，因此又叫蓝绿藻，蓝细菌是原核生物，又叫蓝藻、粘藻。在所有藻类生物中，蓝藻是最简单、最原始的一种。其应用是多方面的，主要有光合作用、固氮作用、功能食品等。常见种类有蓝球藻、颤藻、念珠藻、鱼腥藻、螺旋藻等。蓝细菌是海洋生态系统的重要组成部分，在初级生产中占有重要地位，对海洋生态系统的稳定性和多样性具有重要意义。分布一．
种，由于可耐受恶劣的极端环境，因此广泛地分布在2 000目前蓝细菌约有淡水、湖沼和海洋等水体中以及潮湿土壤、岩石、树木等处，即使在寒冷的南极蓝细菌85和高达℃的温泉中，甚至在贫瘠的沙质海滩和荒漠的岩石上都能存在。在地球环境的演变和生物的进化中也起到非常重要的作用，因为蓝细菌是地球上最早的放氧型光养生物，担负着地球大气从无氧到有氧的转换功能。蓝细菌目前至少有三方面的开发应用：一是它可直接食用，蓝细菌是目前已知生物蛋白质含％以上，如发菜、螺旋藻等是极具开发前景的食品；二是在基量最高的，可达50因改造方面的应用，可将蓝细菌中能够抵抗恶劣环境的基因鉴定并分离出来，构建有更好地抵抗恶劣环境能力的转基因作物；三是在环保领域的应用。利用蓝细菌能结合并清除水中有害金属、有害化学物质以及利用其对海水淡化的能力，进营养成分、NP行环境污染监测和污染水的处理。但应注意，当淡水、海水中的增加造成水体富营养化时，蓝细菌会形成赤潮和水华这种自然生态现象，使水中含氧量降低和有毒物质积累，造成鱼类等水生生物死亡。另外，蓝细菌的次生代谢产物能损害肝，具有促癌效应，通过食物链和饮用水直接威胁人类的生存和健康。
应用. 二
光合作用2.1藻蓝蛋白，蓝细菌正是利用这种蛋白蓝细菌体内含有一种天蓝色的色素蛋白-但含有叶绿素，和植物中进质来捕光，进行光合作用。蓝细菌体内没有叶绿体,
类囊行光合作用的色素是一样的。蓝细菌细胞内进行光合作用的部位称类囊体,
胡萝卜素以及与光合电子传递链有关的组分。类囊体所体膜上含有叶绿素α、β-并把它转移到光系统Ⅱ中。由于光合蓝细菌能够特有的藻胆蛋白可以吸收光能,
进而经基因工程修饰后生产各作为唯一能源和碳源进行生长,利用太阳能和CO2种生物燃料以及精细化学品，因而作为“微生物细胞工厂”而备受关注。作为一蓝细菌拥有复杂的光合系统，个新兴的基因工程宿主菌，蓝细菌具有以下优势：1)
能够吸收广泛波长的太阳光并将其能量直接传递给其他形式的能量载体。同时，％。~3％)~9(蓝细菌光能利用率是陆生植物的数倍蓝细菌3％％，陆生植物≤0.25蓝细菌种类多样、分布广泛，培养不需要耕地，甚至可以在极端环境下生长。2)
、水、简单的无机盐和)N2来源和3) 蓝细菌的生长营养需求低，只需空气(CO2作为碳源，有希，降低了生产成本。同时，利用大气中的温室气体CO2能源光()生长密度高。培养周期短，蓝细菌生长比植物快，望扭转或减缓全球变暖进程。4)
伴随着对蓝细菌代谢途径理解的深入以及几十种蓝细菌基因组测序的完成，使得人工改造蓝细菌并将之利用于各种工业产品的规模化生产成为可能。固氮作用2.2
多数固氮蓝藻是水生植种。2000蓝藻的种类有多种，其中有固氮能力的只有20年发现的束毛藻目前固氮量最大的一种群体海25-100kg/ml物，每年能固氮。1961洋细菌。目前，蓝细菌仍然是
在藻类和豆类作物提供氮肥的重要来源。这已经在稻类的耕作中利用起来，如满江红被散布在水稻周围。蕨类植物的叶子为鱼腥蓝细菌提供生存场所，进行固氮作用；而蕨类植物在过季时死亡后则为稻物提供了一种低成本的天然化肥和氮源。实践表明对蓝细菌的固氮特性，若将其固氮能力转移到水稻、小麦等作物体内，使之实现氮肥自给，将导致农业生产的革命。2.3制氢研究蓝细菌具有很低的营养要求，能够利用太阳能直接光解水产生氢能。能够产氢的蓝细菌有丝状异形胞蓝细菌、丝状非异形胞蓝细菌、单细胞不固氮蓝细菌三大类。蓝细菌中参与氢代谢主要有固氮酶、吸氢酶和可逆氢酶，其中，固氮酶在催化固氮的同时催化氢的产生，吸氢酶可氧化固氮酶放出的氢，可逆氢酶可以吸收也可以释
放氢气。而蓝细菌放氢是这三种酶共同作用的结果。目前，蓝细菌氢的产率和光能转化效率尚未达到实际应用的要求，但已进行的研究工作为进一步提高蓝细菌产氢的效率奠定了基础。蓝细菌产氢的主要障碍在于：产氢酶受氧的抑制，产生的氢被吸氢酶消耗，以及氢的产率较低。提高蓝细菌的产氢率需要在蓝细菌遗传、生理和培养等方面进行深入的研究，这包括分离和研究更多的蓝细菌。值得注意的是蓝细菌可逆氢酶在进行催化作用时仅需要很少的能量，在理论上具有比固氮酶更强的放氢能力，蓝细菌可逆氢酶的放氢能力值得深入研究和利用。功能食品2.4
它的蛋白质含量非常的高，培,蓝细菌特别是螺旋藻被认为是最理想的功能食品养却非常简单。研究表明螺旋藻是所有已被发现的生物中营养最丰富、最全面均衡世纪人类最理想的保健食品。蓝细年被联合国粮农组织推荐为的海洋生物,198721是海洋生态系统的重要组成部分和海洋初级生产力的重要组成部分。功菌分布广泛,并可以对, 能食品最新定义为一种含有能对生理功能产生正面调节作用的有效成分身体健康提供超过基础营养功效的食品。功能性食品的市场已经遍及全球并且发展并宣称将, 年11月中国食品科学技术学会( CIFST)功能食品分会正式成立迅猛,2006大力加强国际国内功能食品领域的交流与合作。据调查显示螺旋藻蛋白质含量相当其所含的一般倍10~15;-20于大豆蛋白质含量的倍;β胡萝卜素含量是一般胡萝卜的亚麻酸含量更是一切天然食物; 其γ-植物中缺乏的VB12比牛肝所含的量高出2.5倍其叶绿素、叶黄素、中最丰富的。螺旋藻还含有铁、锌、铜、钙及其它微量元素,
螺旋藻易于被人藻蓝素的含量也是其它食物无法媲美的。作为最理想的功能食品,
促进细胞新陈代谢。长期食用体消化吸收, , , 可以调节人体生理机能2.5 保健功效螺旋藻多糖具有提高机体免疫力蓝细菌中的螺旋藻可以产生多糖，经试验证明，和抑制癌细胞增殖的能力。Richmond等报道，螺旋藻多糖能有效的提高淋巴细胞的活性，改善造血功能，还可以显著降低血清尿素氮增量，提高血清中乳酸脱氢酶活力，降低运动后血乳酸水平，具有明显的抗疲劳作用。最近发现硫酸化多糖能阻止病毒对宿主细胞的附着与融合，同样能够阻止受HIV感染的细胞与未感染的CD4+ 胸腺淋巴细胞的融合，大大降低了病毒的传染性。．
Microginins和Lawton 描述了一些从蓝细菌中获得的蛋白酶抑制剂，，Jaspars被用于治疗高血压，丝氨酸蛋白酶抑制Cyanopeptolins。Aeruginosins，Microginins
剂Cyanopeptolins被用于治疗哮喘和病毒性感染。 2.6 环境影响蓝细菌与水环境有着密切的关系，在水体生长旺盛时，能使水色变蓝或其他颜色，并且有的蓝细菌能发出草腥味或霉味。然而，有某些属如：微囊蓝细菌属、鱼腥蓝细菌属和水华束丝蓝细菌属在富营养化的海湾和湖泊中由于大量繁殖，引起海，导致水质恶化。有些属能分泌毒素，严重者引起水生) (华湾的赤潮和湖泊的水花动物大量死亡，引起一系列的环境问题。蓝细菌在污水处理、水体自净中可起到积极作用，用它可有效地去除氮和磷。在氮、磷丰富的水体中生长旺盛，可作水体富营养化的指示生物。具有生长速度快、光合效率高、易,蓝细菌是一类能进行放氧光合作用的原核微生物在解决于基因遗传操作等特点。它们能够将捕获的光能和二氧化碳转化为生物能源分子,当前社会面临的能源紧缺和环境污染等问题上有着重要的理论和应用研究价值。近年来,随着合成生物学的迅猛发展,构建以蓝细菌为底盘的人工细胞工厂用于合成各类生物能源和精细化学产品取得了令人瞩目的成绩。
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微生物学题库 绪论 1．非细胞型微生物所具有的生物学特点是( C ) A．必须用选择培养基进行培养 B．细胞壁的主要成分是肽聚糖 C．只有在活细胞内才能够增殖 D．结构中缺少RNA或者 DNA 2．以下哪种病原体不属于原核细胞型微生物( A ) A．病毒 B．衣原体 C．细菌 D．螺旋体 3. 原核细胞型微生物细胞结构中不包括（A） A.线粒体 B.DNA C.核糖体 D.RNA 4．真核细胞型微生物的生物学性状有( AC) A．细胞核内有核仁 B．细胞器中缺少线粒体 C．可在无生命的培养基中生长 D．紫外线照射不能破坏其DNA 5．原核细胞型微生物与真核细胞型微生物相比较不同处在于( AB) A．原核细胞型微生物细胞壁组成成分以肽聚糖为主 B．原核细胞型微生物核糖体结构与真核微生物不同 C．原核细胞型微生物只能在有生命的细胞体内增殖 D．原核细胞型微生物不会被毒性噬菌体感染而裂解 6．非细胞型微生物可引起以下哪些疾病( AD) A．乙型脑炎 B．风湿性心脏病 C．沙眼 D．流行性感冒 7．原核细胞型微生物包括细菌、放线菌、支原体、衣原体、立克次体和螺旋体。 8．微生物分为三大类：原核细胞型微生物、真核细胞型微生物和非细胞型微生物。 9．微生物是广泛存在于自然界形体微小、结构简单，用肉眼看不见而必须应用显微镜放大数百倍、数千倍、甚至数万倍才能观察的一类微小生物。 第 1 章细菌的形态与结构 1．使用油镜头观察细菌是其优点是( D ) A．可将细菌放大900 至 1000 倍 B．可在镜下观察到细菌的包涵体 C．油液可以固定细菌的游走范围 D．油镜下视野亮度比普通镜头高 2．青霉素可用来杀灭病原菌，但对动物细胞无毒性( 除可能引起过敏外 ) 的原因是 ( D ) A．青
2012级制药专业 工业微生物学实验报告 姓名: 刘甜甜学号: 2012304090 班级: 制药12-2班指导老师：王健 日期：2014.6.11
一、实验目的 1、抑制或杀死微生物的一些物理、化学及生物的因素抑菌、杀菌的原理。 2、掌握物理、化学及生物的因素抑菌、杀菌的试验方法。 3、了解细菌的形态特征、染色特点。 4、了解细菌在普通培养基、选择培养基、血平板上的菌落特征。 5、掌握细菌分离划线培养的方法。 6、掌握细菌的初步生化反应。 7、掌握细菌密集划线法，掌握细菌K-B药敏纸片法。 二、实验内容 1 细菌Gram’s stain染色，镜检，观察记录细菌形态和特色特征 1.1 实验原理：染色原理：G+菌与Gˉ菌细胞壁不同，G+菌比Gˉ菌细胞内核糖核酸镁盐含量高，G+菌比Gˉ等电点低。 1.2 实验步骤： 1.2.1.制片：○1涂片：取半滴生理盐水置一洁净玻片上，以无菌操作技术自平板上去菌落少许，与生理盐水混匀，均匀涂布约1cm2大小，自然干燥； ②固定：取含菌膜的玻片与酒精灯火焰上来回三次，使菌膜牢固附于玻片表面； 1.2.2染色：①初染：取结晶紫一到两滴覆盖于菌膜表面，轻微摇动，维持30〃~40〃,细流水冲洗，切勿直接冲洗涂片区域； ②媒染：取卢氏碘液1~2滴覆盖菌膜表面，轻微摇动，维持30〃~40〃,用上法细流水冲洗； ③脱色：取95%酒精2~3滴于菌膜表面，轻微摇动，局部接近无色即可, 用上法细流水冲洗； ④复染：取1：10稀释石炭酸复红覆盖涂片区域，轻微摇动，用上法细流水冲洗； ⑤吸水纸初步吸干玻片水分，然后自然干燥； 1.2.3 镜检：于涂片区域加半滴香波油，油镜（100倍目镜）下。 图1：Gram’s stain（1000×）图2：染色试验 三、分离培养 1实验原理：四区划线法是把混杂着在一起的微生物或同一微生物群体的不同细胞用接种环在平板培养基表面通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞，经培养繁殖后生成个菌落。有时这些单菌落并非由单个细胞繁殖而来，故必须反复分离多次才能得到纯种。其原理是微生物样品在固体培养基表面多次作“由点到线”稀释而达到分离的目的。
第一章 1.第一个观察并描述了微生物的人是（列文·虎克）。发明了外科消毒手术的人是（约瑟夫·李斯特）。 2.微生物学奠基人是（巴斯德、柯赫）， 3巴斯德的主要贡献是： （1）彻底否定了微生物“自然发生说” （2）提出了“疾病的病原微生物巴斯德，证实发酵是由微生物引起的； （3）创立了巴斯的消毒法； （4）发明了狂犬病毒疫苗制备方法。学说”；○ 4柯赫的主要贡献是P3 （1）证明了炭疽病和结核病的病原体，并因在结核病病原体方面的工作获得1905年诺贝尔奖； （2）建立“柯赫定律”： （3）在病原微生物的研究过程中发展了微生物无菌操作技术， （4）建立了微生物纯培养分离技术，发明了培养基特别是固体培养基制备方法。 5微生物与制药工程专业有什么关系？ （1）临床广泛应用的微生物药物及其开发 （2）抗菌药物的药物敏感性试验 （3）药物生产过程中微生物的对药品质量的影响 （4）药品生产质量管理规范（ＧＭＰ）中的微生物控制 （5）药物质量控制中的微生物学检查 6微生物的基本特征 1个体微小，结构简单。2吸收多，转化快。3生长旺，繁殖快。4分布广，种类多5适应强，易变异
第二章原核微生物 1.细菌个体的基本形态有哪些?（球状、杆状、螺旋状）球菌根据其分裂后的排列状况可分为哪六种类型?（单球菌、双球菌、四联球菌、八叠球菌、葡萄球菌、链球菌）螺旋菌根据其形态结构可分为哪几种？（弧菌、螺菌、螺旋体） 2.细菌的一般结构和特殊结构各有哪些？（一般结构：细胞壁、细胞膜、细胞质、原 核等；特殊结构：鞭毛、性菌毛、糖被、芽孢等；）特殊结构各有什么生理功能？（鞭毛的生理功能是运动，这是原核生物实现其趋性的有效方式；菌毛具有使菌体粘附于物体表面的功能；性毛功能是供体菌向受体菌传递遗传物质，有的性毛还是RNA噬菌体的特异性吸附受体；糖被功能有保护作用、作为透性屏障或离子交换系统、表面附着作用、细菌间的信息识别作用、堆积代谢废物、储存碳源和糖源；芽孢具有抗热、抗干燥、抗化学药物、抗酸碱、抗辐射和抗静水压等生理功能） 3.细菌和病毒大小的量度单位各是什么？（细菌：微米；病毒：纳米；） 4.革兰氏染色的机理？ 革兰氏染色是基于细菌细胞壁特殊化学组分基础上的一种物理过程。通过初染和媒染后，在细菌细胞膜或原生质上染上了结晶紫和碘的大分子复合物，革兰氏阳性菌由于细胞壁较厚，肽聚糖含量较高和其分子交联度较紧密且基本上不含类脂，故用乙醇洗脱时，肽聚糖网孔会因脱水而明显收缩，结晶紫与碘的大分子复合物不能透过网孔而留在细胞壁内，故显紫色。革兰氏阴性菌因其壁薄，肽聚糖含量低和交联疏松，类脂含量高，乙醇洗脱时，类脂溶解，细胞壁上出现较大空隙，结晶紫与碘的复合物易溶出细胞壁，因此，乙醇洗脱后，细胞又呈无色。这时，再经红色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈现红色。 5.缺壁细菌有哪几种类型？（原生质体、球状体或原生质球、L型细菌）它们是怎样产生的？（原生质体：在人工条件下用溶菌酶除尽原有细胞壁或用青霉素抑制细胞壁合成后，留下的仅由细胞膜包裹着的细胞； 球状体或原生质球：用溶菌酶或青霉素处理后还残留部分细胞壁的原生质体；L型细菌：在实验室中通过自发突变而形成的遗传稳定的细胞壁缺陷菌株） 6.细菌细胞质内有哪些内含物？（储藏物、磁小体、羧酶体、气泡）它们的成分各是 什么？（储藏物：聚-β-羟基丁酸、多糖类储藏物、聚磷酸颗粒、藻青素；磁小体：四氧化 三铁，外有一层磷脂、蛋白或蛋白膜包裹；羧酶体：1,5-二磷酸核酮糖羧化酶；气泡是充满气体的泡囊状内含物）各有什么功能？（储藏物主要功能是储存营养物；磁小体功能是导向作用，即借鞭毛游向对该菌最有利的泥、水界面微氧环境处生活；羧酶体是自养细菌固定二氧化碳的场所；气泡是调节细胞密度以使细胞漂浮在最适水层中获取光能、氧气和营养物质。） 7.放线菌的基本形态是什么？（放线菌菌体由丝状菌丝构成，由基内菌丝、气生菌丝、孢子丝、和孢子等部分组成。）是怎样进行繁殖的？（放线菌主要通过无性孢子进行繁殖，
［实验名称］:沉淀反应 ［实验目的］:通过单向琼脂扩散测定待测血清Ig 含量 ［实验材 料］: 打孔器 (1) 将溶解后的离子琼脂冷却到4 5 °C ，加入适 当浓度的抗原混 合均匀，吸取3—4毫升加在载玻片上，使其均匀布满载玻片 而又 不流失。 (2) 琼脂凝固后制成凝胶板，然后隔适当距离打孔。 (3) 在孔内滴加待测可溶性抗体。 (4) 将凝胶平板放入带盖瓷盘中，下面垫一湿纱布以保持湿度，置 于3 7 °0恒温箱中2 4小时，观察沉淀环。 单向琼脂扩散是一种定量试验，主要用来测定标本中各种免疫球 蛋白或补体成分的含量。 在孔中加入待测抗体使其向四周扩散，经一定时间后抗体与琼脂 中抗原相遇，在比例适宜处生成白色沉淀环。 沉淀环直径与抗体浓度成正比。根据测试样品沉淀环直径的大 小，可从已知的标准曲线中查出样品中抗体的含量。 实验二 ［实验名称］:间接凝集抑制试验（妊娠试验） ［实验目的］:测定待检尿液中是否含HCG （绒毛膜促性腺激素）以诊断妊娠 ［实验材料］:孕妇尿液、非孕妇尿液、HCG 致敏乳胶抗原、抗HCG 血清、载 实验一 1%离子琼脂、白喉类毒素、白喉抗毒素、载玻片、毛细吸管 ［试验步骤］: ［实验结果］: (沉淀环直径) 测量沉淀环直径: 毫米 ［实验分析］
玻片等 ［试验步骤］: （1）取一片载玻片，标记出左右。 （2）在载玻片左侧加一滴待检尿液，右侧加一滴非孕妇尿液。 （3）在两侧尿液中分别加一滴抗HCG血清，摇动混匀2 —3分钟。 （4）在两侧液滴中分别再加一滴HCG致敏乳胶抗原，摇动混匀2 — 3分钟。 （5）观察判定结果。 ［实验结果］:（凝集和非凝集的描述） 左侧（待检尿液侧）呈现均匀的乳状液状态，无凝集颗粒。间接凝集抑制阳性。 右测（非孕妇尿液侧）出现明显的凝集颗粒。间接凝集抑制阴性。 ［实验分析］:（结合实验原理） 孕妇尿液中的HCG含量显著增高。尿液中的HCG与加入的抗HCG结合, 抗HCG被消耗，使得加入的HCG乳胶抗原不能再与抗HCG结合，不出现乳胶抗原间接凝集反应（凝集被抑制），所以液滴呈现均匀乳状液，为乳胶间接凝集抑制阳性反应。 非孕妇尿液中HCG含量极少，不足以抑制抗HCG与HCG乳胶抗原发生间接凝集反应，所以出现乳胶颗粒的凝集，为乳胶间接凝集抑制阴性反应。
动物病原微生物的分类 根据病原微生物的传染性、感染人和（或）动物的危害程度，世界动物卫生组织（OIE）将动物病原分为1至4类。 1类动物病原为外来的或导致地方性流行的、并列入官方控制的、实验室释放存在高危险性的病原微生物。 2类动物病原为外来的或导致地方性流行的、并列入官方控制计划的、实验室释放中有中等危险的病原微生物。 3类动物病原为外来或导致地方性流行的、并列入官方控制计划但实验室扩散风险低的致病微生物。 4类动物病原为可导致地方性流行、但不列入官方控制计划的病原微生物。 我国农业部于2005年颁布了动物病原微生物分类名录，其中一类病原微生物危害最大，依次类推，四类最小。有少数寄生虫也列在名单之中。 中华人民共和国农业部 第 5 3号令公布动物病原微生物分类名录2005年5月24日，中华人民共和国农业部部长杜青林签署第53号令，发布《动物病原微生物分类名录》。 根据《病原微生物实验室生物安全管理条例》第七条、第八条的规定,对动物病原微生物分类如下： 一类动物病原微生物 口蹿疫病毒、高致病性禽流感病毒、猪水泡病病毒、非洲猪瘟病毒、非洲马瘟病毒、牛瘟病毒、小反刍兽疫病毒、牛传染性胸膜肺炎丝状支原体、牛海绵状脑病病原、痒病病原。
二类动物病原微生物 猪瘟病毒、鸡新城疫病毒、狂犬病病毒、绵羊痘／山羊痘病毒、蓝舌病病毒、兔病毒性出血症病毒、炭疽芽孢杆菌、布氏杆菌。 三类动物病原微生物 多种动物共患病病原微生物：低致病性流感病毒、伪狂犬病病毒、破伤风梭菌、气肿疽梭菌、结核分支杆菌、副结核分支杆菌、致病性大肠杆菌、沙门氏菌、巴氏杆菌、致病性链球菌、李氏杆菌、产气荚膜梭菌、嗜水气单胞菌、肉毒梭状芽孢杆菌、腐败梭菌和其他致病性梭菌、鹦鹉热衣原体、放线菌、钩端螺旋体。 牛病病原微生物：牛恶性卡他热病毒、牛白血病病毒、牛流行热病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、牛病毒腹泻／粘膜病病毒、牛生殖器弯曲杆菌、日本血吸虫。 绵羊和山羊病病原微生物：山羊关节炎／脑脊髓炎病毒、梅迪／维斯纳病病毒、传染性脓疱皮炎病毒。 猪病病原微生物：日本脑炎病毒、猪繁殖与呼吸综合症病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪丹毒杆菌、猪支气管败血波氏杆菌、猪胸膜肺炎放线杆菌、副猪嗜血杆菌、猪肺炎支原体、猪密螺旋体。 马病病原微生物：马传染性贫血病毒、马动脉炎病毒、马病毒性流产病毒、马鼻炎病毒、鼻疽假单胞菌、类鼻疽假单胞菌、假皮疽组织胞浆菌、溃疡性淋巴管炎假结核棒状杆菌。 禽病病原微生物：鸭瘟病毒、鸭病毒性肝炎病毒、小鹅瘟病毒、鸡传染性法氏囊病病毒、鸡马立克氏病病毒、禽白血病／肉瘤病毒、禽网状内皮组织增殖病病毒、鸡传染性贫血病毒、鸡传染性喉气管炎病毒、鸡传染性支气管炎病毒、鸡减蛋综合征病毒、禽痘病毒、鸡病毒性关节炎病毒、禽传染性脑脊髓炎病毒、副鸡嗜血杆菌、鸡毒支原体、鸡球虫。 兔病病原微生物：兔粘液瘤病病毒、野兔热土拉杆菌、兔支气管败血波氏杆菌、兔球虫。 水生动物病病原微生物：流行性造血器官坏死病毒、传染性造血器官坏死病毒、马苏大麻哈鱼病毒、病毒性出血性败血症病毒、锦鲤疱疹病毒、斑点叉尾鲴病毒、病毒性脑病和视网膜病毒、传染性胰脏坏死病毒、真鲷虹彩病毒、白鲟虹
《微生物学》复习思考题 第1章绪论 1.名词解释：微生物，微生物学 2.用具体事例说明人类与微生物的关系。 3.微生物包括哪些类群？它有哪些特点? 4.为什么说巴斯德和柯赫是微生物学的奠基人? 5.试根据微生物的特点，谈谈为什么说微生物既是人类的敌人，更是人类的朋友？ 6.简述21世纪微生物学发展的主要趋势。 第2章原核微生物 1.名词解释：肽聚糖、溶菌酶、核区、异形胞 2.根据革兰氏阳性细菌与革兰氏阴性细菌细胞壁通透性来说明革兰氏染色的机制。 3.什么是芽孢？它在什么时候形成？试从其特殊的结构与成分 说明芽孢的抗逆性。渗透调节皮层膨胀学说是如何解释芽孢耐热机制的？ 4.立克次氏体有哪些与专性活细胞内寄生有关的特性？它们有什么特殊的生活方式？衣 原体与立克次氏体都为专性活细胞内寄生，两者有何差别？ 5.螺旋体和螺旋菌有何不同？ 6.什么是缺壁细菌？试简述四类缺壁细菌的形成、特点和实践意义。 7.举例说明细菌的属名和种名。 8.试述古生菌和细菌的主要区别。 9.试根据细菌和古生菌细胞结构的特点，分析并举例说明为什么它们能在自然界中分布 泛。 10.细菌（狭义）、放线菌、霉菌、酵母在繁殖方式上各有什么特点？ 第三章真核微生物 1.名词解释：真菌、霉菌、酵母菌、真酵母、假酵母。 2.举例说明霉菌与酵母菌与人类的关系。 3.试列表说明真核微生物与原核微生物的主要区别。 4.试图示真核生物“9+2型”鞭毛的横切面构造，并简述其运动机理。 5.细菌(狭义)、放线菌、酵母菌和霉菌的菌落有何不同？ 6.试比较细菌(狭义)、放线菌、酵母菌和霉菌细胞壁成分的异同，并讨论它们的原生 质体的制备方法。 7.丝状真菌的营养菌丝和气生菌丝各有何特点？它们可以分化出哪些特殊结构？ 8.试述真菌的孢子类型和特点。 第4章病毒 1. 名词解释：病毒粒子、烈性噬菌体、温和噬菌体、溶源性转变、前噬菌体、溶源性细菌、 裂解量、类病毒、朊病毒。 2. 病毒区别于其他生物的特点是什么? 根据你的理解，病毒应如何定义? 3. 试述病毒的主要化学组成及其功能。 4. 病毒壳体结构有哪几种对称形式? 毒粒的主要结构类型有哪些?
环境微生物学实验报告 一、实验目的 （1）了解普通光学显微镜的构造及原理，掌握显微镜的操作及保养方法。（2）观察、识别几种原核微生物。真核微生物的个体形态，学会生物图的绘制。 二、实验器皿与材料 （1）器皿：显微镜、擦镜纸、二甲苯。 （2）材料：示范片：细菌三形（球状、杆状、螺旋状）、弧状（硫酸盐还原菌）、丝状（浮游球衣菌等）、细菌鞭毛及细菌荚膜。放线菌、颤蓝细菌、微囊蓝细菌或念珠蓝细菌等。 三、实验步骤 （1）将标本片放在载物台上，使观察的目的物置于圆孔正中央。（2）将镜头换成低倍镜，将粗调节器向下旋转（或载物台向上旋转），眼睛注视物镜。当物镜的尖端距离载玻片约0.5cm 处时停止旋转。 （3）左眼对着目镜观察，将粗调节器向上旋转，如果见到目的物，但不十分清楚，可用细调节器调节，直至目的物清晰。此时找到目的物并移至中央。（4）换成高倍镜，观察目的物，旋转细调节钮，直至视野清晰。（5）观察示范片，绘出其形态图。 四、思考题 （1）使用油镜时，为什么要先用低倍镜观察？答：为了
找到目的物并移动到中央。 （2）要使视野明亮，除采用光源外，还可采取哪些措施？ 答：调大孔径光阑，调整光源。如果是用反光镜的显微镜，用凹面镜可使视野明亮。 五、生物图 实验二、微生物培养基的配制与灭菌 一、实验目的 （1）熟悉玻璃器皿的洗涤和灭菌前的准备工作。 （2）了解配置微生物培养基的基本原理，掌握配置、分装培养基的方法。（3）学会各类物品的包装、配置（稀释水等）和灭菌技术。 二、实验器皿与材料 （1）实验器皿：高压蒸汽灭菌器、干燥箱、煤气灯、培养皿、试管、刻度移液管、锥形瓶、烧杯、两桶、药物天平、玻璃棒、玻璃珠、石棉网、药匙、铁架、表面皿、pH试纸和棉花等。 （2）材料：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、NaOH和琼脂等。 三、实验原理 培养基是微生物生长的基质，是按照微生物营养、生长繁殖的需要，由碳、氢、氧、氮、磷、硫、钾、钠、钙、镁、铁及微量元素和水，按一定的体积分数配置而成。调整合适的pH，经高温灭菌后以备培养微生物之用。由于微生物种类及代谢类型
．实验动物分级及其标准 根据实验动物微生物控制标准，可将实验动物分为四级： 一级普通动物（CV），系指微生物不受特殊控制的一般动物。要求排除人兽共患病的病原体和积少数的实验动物烈性传染病的病原体。为防止传染病，在实验动物饲养和繁殖时，要采取一定的措施，应保证其用于测试的结果具有反应的重现性（即无论不同的操作人员，在不同的时间，用同一品系的动物按规定的实验规程所做的实验，都能获得几乎相同的结果）。 二级清洁动物（CL），要求排除人兽共患病及动物主要传染病的病原体。 三级无特殊病原体动物（SPF），要求到二级外，还要排除一些规定的病原体。其除菌与灭菌的方法，可使用高效空气过滤器除菌法、紫外线灭菌法、三甘醇蒸气喷雾法及氯化锂水溶液喷雾法。 四级无菌动物（GF）或悉生动物（GN）。无菌动物要求不带有任何用现有方法可检出的微生物。悉生动物要求在无菌动物体上植入一种或数种已知的微生物。 在病理学检查上，四类实验动物也有不同的病理检查标准。 一级外观健康，主要器官不应有病灶。 二级除一级指标外，显微镜检查无二级微生物病原的病变。 三级无特殊病原体动物。无二、三级微生物病原的病变。 四级不含二、三级微生物病原的病变，脾、淋巴结是无菌动物组织学结构。 综合上述，对不同级别的实验动物在动物房设计上和管理上则有不同的要求。 无菌、已知菌以及无特殊病原体动物都需要在无菌或尽可能无菌的环境里饲养，这种环境，目前国际上通用称为屏障环境，即用一道屏障把动物与周围污染的环境隔开，就如胎鼠在母鼠子宫内一样。这种环境从控制微生物的角度分为隔离系统、屏障系统、半屏障系统、开放系统和层流架系统等五大类。 A 隔离系统 是在带有操作手套的容器中饲养动物的系统，用于饲养无菌动物和栖生动物。内部保持按微生物要求的100级的洁净度，但其设置的房间及操作人员不必按无菌室考虑。 B 屏障系统 把10000~100000级左右的无菌洁净室作为饲养室，主要用于无特殊病原体动物的长期饲养和繁殖。入室施行严格管理，如淋浴、换贴身衣服等。 C 半屏障系统
山东大学实验报告2012年 12 月 4日 姓名系年级 2011级生科2班组别四 科目微生物学实验题目微生物的生理生化反应 微生物的生理生化反应 一、【实验目的】 1. 证明不同微生物对各种有机大分子物质的水解能力不同，从而说明不同微生物有着不同的酶系统。 2.掌握进行微生物大分子物质水解试验的原理和方法。 3.了解糖发酵的原理和在肠细菌坚定中的重要作用。 4.掌握通过糖发酵鉴别不同微生物的方法。 5. 了解吲哚和甲基红试验的原理以及其在肠道细菌鉴定中的意义和方法。 二、【实验仪器与试剂】 菌种：枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、普通变形杆菌、产气肠杆菌培养基：培养基：固体淀粉培养基、固体油脂培养基（大分子水解试验）；葡萄糖发酵培养基、乳糖发酵培养基（内装有倒置的德汉氏小管）（糖发酵试验）；蛋白胨水培养基（吲哚试验）；葡萄 糖蛋白胨水培养基； 试剂：卢戈氏碘液、乙醚、吲哚试剂、甲基红试剂、蒸馏水、 仪器：酒精灯、接种针、培养皿、试管、试管架、烧杯、量筒、德汉氏小管 三、【实验原理】 1.在所有生活细胞中存在的全部生物化学反应称之为代谢，代谢过程主要是酶促反应过程，由于各种 微生物具有不同的酶系统，所以他们能利用的底物不同，或虽利用相同的底物但产生的代谢产物却不同，因此可以利用各种生理生化反应来鉴别不同的细菌，尤其是在肠杆菌科细菌的鉴定中，生理生化试验占有重要的地位。 2.淀粉的水解：由于微生物对淀粉这种大分子物质不能直接利用，必须靠产生的胞外酶将大分子物质 分解才能被微生物吸收利用.胞外酶主要为水解酶,通过加水裂解大的物质为较小的化合物,使其能被运输至细胞内.如淀粉酶水解淀粉为小分子的糊精,双糖和单糖；而淀粉遇碘液会产生蓝色，因此能分泌胞外淀粉酶的微生物，则能利用其周围的淀粉，在淀粉培养基上培养用碘处理其菌落周围不呈蓝色，而是无色透明圈，据此可分辨微生物能否产生淀粉酶。 3.油脂的水解：在油脂培养基上接种细菌，培养一段时间后观察菌苔的颜色，若出现红色斑点，则说 明此中菌可产生分解油脂的酶。 4.糖发酵试验：糖发酵试验是常用的鉴别微生物的生化反应,在肠道细菌的鉴定上尤为重要.绝大多数 细菌都能利用糖类作为碳源和能源,但是它们在分解糖类物质的能力上有很大的差异.有些细菌能分解某种糖产生有机酸(如乳酸,醋酸,丙酸等)和气体(如氢气,甲烷,二氧化碳等);有些细菌只产酸不产气. 例如大肠杆菌能分解乳糖和葡萄糖产酸并产气。产酸后再加入溴甲酚指示剂后会使溶液呈黄色，且德汉氏小管中会收集到一部分气体。若细菌不能使糖产酸产气，则最后溶液为指示剂的紫色，且德汉氏小管中无气体。 5.IMVC实验主要用于快速鉴别大肠杆菌和产气肠杆菌。 （1）吲哚试验：是用来检测吲哚的产生，在蛋白胨培养基中，若细菌能产生色氨酸酶，则可将蛋白胨中的色氨酸分解为丙酮酸和吲哚，吲哚与对二甲基苯甲醛反应生成玫瑰色的玫瑰吲哚。但并 非所有的微生物都具有分解色氨酸产生吲哚的能力，所以吲哚实验可以作为一个生物化学检测
动物病原微生物分类名录 （2005年农业部令第53 号） 依照《病原微生物实验室生物安全治理条例》第七条、第八条的规定，对动物病原微生物分类如下： 一、一类动物病原微生物 口蹄疫病毒、高致病性禽流感病毒、猪水泡病病毒、非洲猪瘟病毒、非洲马瘟病毒、牛瘟病毒、小反刍兽疫病毒、牛传染性胸膜肺炎丝状支原体、牛海绵状脑病病原、痒病病原。 二、二类动物病原微生物 猪瘟病毒、鸡新城疫病毒、狂犬病病毒、绵羊痘/山羊痘病毒、蓝舌病病毒、兔病毒性出血症病毒、炭疽芽孢杆菌、布氏杆菌。 三、三类动物病原微生物 多种动物共患病病原微生物：低致病性流感病毒、伪狂犬病病毒、破伤风梭菌、气肿疽梭菌、结核分支杆菌、副结核分支杆菌、致病性大肠杆菌、沙门氏菌、巴氏杆菌、致病性链球菌、李氏杆菌、产气荚膜梭菌、嗜水气单胞菌、肉毒梭状芽孢杆菌、腐败梭菌和其他致病性梭菌、鹦鹉热衣原体、放线菌、钩端螺旋体。 牛病病原微生物：牛恶性卡他热病毒、牛白血病病毒、
牛流行热病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、牛病毒腹泻/粘膜病病毒、牛生殖器弯曲杆菌、日本血吸虫。 绵羊和山羊病病原微生物：山羊关节炎/脑脊髓炎病毒、梅迪/维斯纳病病毒、传染性脓疱皮炎病毒。 猪病病原微生物：日本脑炎病毒、猪繁育与呼吸综合症病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪丹毒杆菌、猪支气管败血波氏杆菌、猪胸膜肺炎放线杆菌、副猪嗜血杆菌、猪肺炎支原体、猪密螺旋体。 马病病原微生物：马传染性贫血病毒、马动脉炎病毒、马病毒性流产病毒、马鼻炎病毒、鼻疽假单胞菌、类鼻疽假单胞菌、假皮疽组织胞浆菌、溃疡性淋巴管炎假结核棒状杆菌。 禽病病原微生物：鸭瘟病毒、鸭病毒性肝炎病毒、小鹅瘟病毒、鸡传染性法氏囊病病毒、鸡马立克氏病病毒、禽白血病/肉瘤病毒、禽网状内皮组织增殖病病毒、鸡传染性贫血病毒、鸡传染性喉气管炎病毒、鸡传染性支气管炎病毒、鸡减蛋综合征病毒、禽痘病毒、鸡病毒性关节炎病毒、禽传染性脑脊髓炎病毒、副鸡嗜血杆菌、鸡毒支原体、鸡球虫。 兔病病原微生物：兔粘液瘤病病毒、野兔热土拉杆菌、兔支气管败血波氏杆菌、兔球虫。 水生动物病病原微生物：流行性造血器官坏死病毒、传
一·什么是微生物 微生物是一切肉眼看不见货看不清的微小生物总称。他们都是一些个体微小，结构简单的低等生物。【23】由于划分微生物的标准仅仅是按照微生物的形态大小，所以微生物的成员就十分的庞大。按照粗分起来算，可以包括属于原核类的细菌（真细菌和古细菌），放线菌，蓝细菌（旧称’’蓝绿藻’’或’’蓝藻’’），支原体（又称枝原体），立克次氏体和衣原体；属于真核类的真菌（酵母菌，霉菌等），原生动物和显微藻类，以及属于非细胞类的病毒和亚病毒（类病毒，拟病毒和朊病毒）。【21】现表解如下： 微米级：光学显微镜下可见（细胞） 小（个体微小） 纳米级：电子显微镜下可见（细胞器，病毒） 单细胞 简（结构简单）简单多细胞 微生物 非细胞（即“分子生物”） 原核类：细菌（真细菌，古细菌），放线菌，蓝细 菌，支原体，立克次氏体，衣原体等低（进化地位低）真核类：真菌（酵母菌，霉菌），原生动物，显微 藻类 非细胞类：病毒，亚病毒（类病毒，拟病毒，朊 病毒） 二·人们对微生物的认识 人类对动物和植物的认识，可以追溯到人类的出现。可是，对于数量无比庞大，分布极其广泛并且始终包围在人体内外的微生物却长期缺乏认识。【17】例如，你是否会想到一个刚刚出生的新生儿，在其呱呱坠地的瞬间，就有多种微生物从其四周趁机赶上，争先恐后的前来“圈地”，“瓜分”和“占领”这么一个“无菌动物”的口腔，消化道，呼吸道，泌尿生殖道和皮肤等“风水宝地”，并且从此发展成为两者须臾不可分离的人体正常的菌群或终生伴生微生物？又如，你是否想到过，在我们每天的食物和饮料中，竟有这么多的微生物及其产物在默默地为我们提供可口的滋味，丰富的营养和健康的保障？原来，我们面前琳琅满目的食品——酸奶，酒类，馒头，面包，蛋糕，干酪，酱油，味精食醋，泡菜，腐乳和各种食用菌等都是由微生物加工而成的或者本身就有的微生物！再如，你是否想到过，在我们每天大有两万次呼吸活动中，有多少种微生物在进进出出，它们和人体会发生些什么关系？此外，在我们偶遇病原菌侵袭而不幸感染上传染病时，
2016年南方医科大学医学微生物学实验报告 日期 2016年5月22号 一、实验目的 1、掌握培养基制备的原则和一般方法。 2、掌握病原菌的分离与培养方法。 3、掌握油镜的正确使用、细菌涂片标本的制备、革兰氏染色法，熟悉细菌基本形态。 4、熟悉几种常用的细菌生化反应的名称、原理、方法、结果分析及用途。 5、掌握血浆凝固酶试验的原理、方法及用途。 6、熟悉药物敏感性试验方法的种类、原理及应用，掌握纸片扩散法。 7、掌握玻片凝集试验的原理、方法、结果观察与判断。 二、实验器材 1、天平、称量纸、干粉培养基、锥形瓶、量筒、15支试管、试管架、试管筐、5ml 刻 度吸管、平皿、洗耳球、酒精灯 2、脓汁标本1支，粪便标本1支；伊红美兰平板2个，营养琼脂平板2个，伊红美蓝 平板2个，接种环，酒精灯 3、斜面4支、细菌分离培养物（上次实验平板） 题目 脓汁和粪便标本中病原菌的检测 成绩 实验者 作者：马浩楠 3140020007 参与者名字：马浩楠 丁超 王尧鑫 桂文茁 年级专业 2014级医学影像专业 指导老师 罗军
4、斜面培养物4支，营养肉汤4支，生理盐水2支，镜油瓶、拭镜纸1套，吸水纸1 本，载玻片4张，染色瓶，染色架 5、斜面培养物4支，营养肉汤培养物（菌液）4支，半固体琼脂4支，营养琼脂平板4 个，糖发酵管1套，抗菌素纸片1套，眼科镊子2把 6、半固体培养物4支，药敏试验培养物4个，微量发酵管培养物1套。 三、方法与步骤 1、培养基的制备： 培养基称量干粉培 养基(g) 水量(ml) 煮沸(次）分装(ml) 备注 营养琼脂11.4 300 3瓶，500ml 瓶，平板 营养琼脂 2.7 70 3 5 14支×3，中试管，斜面 营养肉汤 1.3 60 1 3 20支×2，小试管，肉汤 半固体琼脂 1.7 60 3 4 14支×3，小试管，高层 （1）营养琼脂培养基的制备：称量11.4g琼脂，置于三角烧瓶中，加入300ml蒸馏水，分2瓶装，用于倒平板。 （2）营养琼脂培养基的制备（用于制作斜面）：称量2.9g琼脂，置于三角烧瓶中，加入75ml蒸馏水，放在电炉上，先后煮沸3次，分15支中试管装，每支试管5ml。 （3）肉汤培养基的制备（用于制作液体培养基）：称量1.1g琼脂，置于三角烧瓶中，加入50ml蒸馏水，放在电炉上，煮沸1次，分15支小试管装，每支试管5ml。 （4）半固体琼脂培养基的制备：称量1.7g琼脂，置于三角烧瓶中，加入60ml蒸馏水，放在电炉上，先后煮沸3次，分15支中试管装，每支试管4ml。 2、细菌的分离培养 平板划线分离法
根据《病原微生物实验室生物安全管理条例》第七条、第八条地规定，对动物病原微生物分类如下： 一、一类动物病原微生物 口蹄疫病毒、高致病性禽流感病毒、猪水泡病病毒、非洲猪瘟病毒、非洲马瘟病毒、牛瘟病毒、小反刍兽疫病毒、牛传染性胸膜肺炎丝状支原体、牛海绵状脑病病原、痒病病原. 资料个人收集整理，勿做商业用途 二、二类动物病原微生物 猪瘟病毒、鸡新城疫病毒、狂犬病病毒、绵羊痘山羊痘病毒、蓝舌病病毒、兔病毒性出血症病毒、炭疽芽孢杆菌、布氏杆菌. 资料个人收集整理，勿做商业用途 三、三类动物病原微生物 多种动物共患病病原微生物：低致病性流感病毒、伪狂犬病病毒、破伤风梭菌、气肿疽梭菌、结核分支杆菌、副结核分支杆菌、致病性大肠杆菌、沙门氏菌、巴氏杆菌、致病性链球菌、李氏杆菌、产气荚膜梭菌、嗜水气单胞菌、肉毒梭状芽孢杆菌、腐败梭菌和其他致病性梭菌、鹦鹉热衣原体、放线菌、钩端螺旋体. 资料个人收集整理，勿做商业用途 牛病病原微生物：牛恶性卡他热病毒、牛白血病病毒、牛流行热病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、牛病毒腹泻粘膜病病毒、牛生殖器弯曲杆菌、日本血吸虫. 资料个人收集整理，勿做商业用途 绵羊和山羊病病原微生物：山羊关节炎脑脊髓炎病毒、梅迪维斯纳病病毒、传染性脓疱皮炎病毒. 猪病病原微生物：日本脑炎病毒、猪繁殖与呼吸综合症病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪丹毒杆菌、猪支气管败血波氏杆菌、猪胸膜肺炎放线杆菌、副猪嗜血杆菌、猪肺炎支原体、猪密螺旋体. 资料个人收集整理，勿做商业用途马病病原微生物：马传染性贫血病毒、马动脉炎病毒、马病毒性流产病毒、马鼻炎病毒、鼻疽假单胞菌、类鼻疽假单胞菌、假皮疽组织胞浆菌、溃疡性淋巴管炎假结核棒状杆菌. 资料个人收集整理，勿做商业用途 禽病病原微生物：鸭瘟病毒、鸭病毒性肝炎病毒、小鹅瘟病毒、鸡传染性法氏囊病病毒、鸡马立克氏病病毒、禽白血病肉瘤病毒、禽网状内皮组织增殖病病毒、鸡传染性贫血病毒、鸡传染性喉气管炎病毒、鸡传染性支气管炎病毒、鸡减蛋综合征病毒、禽痘病毒、鸡病毒性关节炎病毒、禽传染性脑脊髓炎病毒、副鸡嗜血杆菌、鸡毒支原体、鸡球虫. 资料个人收集整理，勿做商业用途 兔病病原微生物：兔粘液瘤病病毒、野兔热土拉杆菌、兔支气管败血波氏杆菌、兔球虫. 水生动物病病原微生物：流行性造血器官坏死病毒、传染性造血器官坏死病毒、马苏大麻哈鱼病毒、病毒性出血性败血症病毒医学教`育网整理、锦鲤疱疹病毒、斑点叉尾鮰病毒、病毒性脑病和视网膜病毒、传染性胰脏坏死病毒、真鲷虹彩病毒、白鲟虹彩病毒、中肠腺坏死杆状病毒、传染性皮下和造血器官坏死病毒、核多角体杆状病毒、虾产卵死亡综合症病毒、鳖鳃腺炎病毒、综合症病毒、对虾白斑综合症病毒、黄头病病毒、草鱼出血病毒、鲤春病毒血症病毒、鲍球形病毒、鲑鱼传染性贫血病毒. 资料个人收集整理，勿做商业用途 蜜蜂病病原微生物：美洲幼虫腐臭病幼虫杆菌、欧洲幼虫腐臭病蜂房蜜蜂球菌、白垩病蜂球囊菌、蜜蜂微孢子虫、跗腺螨、雅氏大蜂螨. 资料个人收集整理，勿做商业用途 其他动物病病原微生物：犬瘟热病毒、犬细小病毒、犬腺病毒、犬冠状病毒、犬副流感病毒、猫泛白细胞减少综合症病毒、水貂阿留申病病毒、水貂病毒性肠炎病毒. 资料个人收集整理，勿做商业用途 四、四类动物病原微生物 是指危险性小、低致病力、实验室感染机会少地兽用生物制品、疫苗生产用地各种弱毒病原
微生物学题库
A．青霉素只能切断细菌的DNA链 B．青霉素只能作用于细菌的核糖体 C．青霉素只能抑制细菌的吸附细胞 D．青霉素只能抑制细菌肽聚糖合成 3．细菌核糖体大亚基可与以下哪种抗生素结合而终止蛋白质合成( B ) A．利福平 B．红霉素 C．链霉素 D．多粘菌素 4．能够使细菌在宿主体内运动的结构是( B ) A．荚膜 B．鞭毛 C．普通菌毛 D．性菌毛 5．卢戈氏碘液在革兰染色过程中的作用是( C ) A．杀灭标本中存在的活菌 B．析出菌体内多余的染液 C．使菌体与染液结合牢固 D．主要担当脱色剂的作用 6．某些细菌可形成L型变异，变异后的细菌丢失了哪种结构( A ) A．细胞壁 B．荚膜 C．鞭毛 D．菌毛 7. 控制细菌能否形成性菌毛的质粒是( D ) A．R质粒 B．col质粒 C．Vi质粒 D．F质粒 8．与细菌核糖体大亚基结合，抑制细菌蛋白质合成的抗生素是( C ) A．青霉素 B．溶菌酶 C．红霉素 D．链霉素 9. 细菌细胞壁的功能是（B） A. 菌蛋白质合成场所 B. 维持细菌固有形态 C. 耐药性的相互传递 D. 抵抗吞噬细胞吞噬 10. 革兰阳性细菌细胞壁所具有的结构成分是（A） A. 磷壁酸 B. 脂多糖 C. 几丁质 D. 胆固醇 11. 能够抑制细菌蛋白质合成的抗生素是（C） A. 青霉素
B. 溶菌酶 C. 红霉素 D. 利福平 12. 细菌普通菌毛的功能是（A） A. 粘附作用 B. 抗吞噬 C. 运动 D. 抵抗外界不良环境 13. 决定细菌能否运动的结构是（B） A. 荚膜 B. 鞭毛 C. 普通菌毛 D. 性菌毛 14. L-型细菌的生物学性状是（C） A. 缺少脂多糖 B. 缺少核糖体 C. 缺少细胞壁 D. 缺少磷壁酸 15．磷壁酸是以下哪种细菌细胞壁的组成成分( B ) A．大肠杆菌 B．金黄色葡萄球菌 C．伤寒杆菌 D．霍乱弧菌 16．对细菌进行革兰染色时应注意的事项是( BD ) A．添加结晶紫时一定要加热 B．乙醇脱色时间不能过长 C．媒染的时间应大于五分钟 D．复染时要用稀释复红染液 17．细菌大小的衡量单位是微米，病毒大小的衡量单位是纳米。 18．L-型细菌是一种细胞壁丢失的细菌，这类细菌只能在高渗环境中生存。 19．革兰染色法步骤：初染结晶紫；媒染碘液；脱色 95%乙醇和复染稀释复红或沙黄。20．细胞壁主要的化学组成成分是肽聚糖。 21．细胞壁功能是维持细菌外形，保护细菌不受外界低渗环境的破坏。 22．细菌质粒的基本定义是染色体外遗传物质，由DNA组成，控制细菌某些特定的生物学性状，非细菌存活所必须。 23．革兰染色法步骤中初染使用的试剂是结晶紫染液；媒染使用的试剂是碘液；脱色使用的试剂是乙醇以及复染使用的试剂是稀释复红。 24．细菌的三种形态是球菌、杆菌和螺形菌。细菌的测量单位是微米。 25. 细菌荚膜的功能是抗吞噬，鞭毛的功能是运动，普通菌毛的功能是助黏附，性菌毛的功能是传递遗传物质。 26．临床上常用的抗生素类药物如青霉素是通过抑制细菌细胞壁合成机制杀灭细菌的。 27．细菌的特殊结构包括荚膜、鞭毛、菌毛和芽胞。 抗生素杀菌机制 青霉素争夺转肽酶，作用于细胞壁的肽聚糖，抑制细胞壁合成
微生物学实验报告格式 专业学号 姓名 实验一、???培养基的配制和高压蒸汽灭菌 一、实验目的 二、实验原理 三、实验材料（实际用到哪些试剂、材料、玻璃器皿等都要写出，包括数量） 四、实验步骤（按照实际步骤填写,切忌抄袭） 五、注意事项（自己总结实验过程中的注意点） 六、思考题 1、简述培养基的配制原则？ 2.为什么湿热灭菌比干热灭菌法更有效？ 3.高压蒸汽灭菌时，为什么要先将灭菌锅锅内的冷空气完全排尽？ 实验二自生固氮菌的分离纯化 （这是个综合实验，请大家回顾三周来的所有操作步骤，将其整理成连贯完整的一份报告，注意每次实验的衔接，不要把其他的实验项目写进来，但也不要漏写该实验的相关步骤。） 一、实验目的
二、实验原理 三、实验材料（整个综合实验有涉及到的材料都要列出） 四、实验步骤（详叙每周所做的相关步骤） 五、注意事项（自己总结实验过程中的注意点） 六、思考题 1、划线分离时，为什么每次都要将接种环上多余的菌体烧掉？划线为何不能重叠？ 2、如何从自然界中分离自己所需要的纯培养？ 实验三平板培养测数法 一、实验目的 二、实验原理 三、实验材料（实际操作有涉及到的材料都要列出） 四、实验步骤（详叙相关步骤） 五、实验结果 六、注意事项（自己总结实验过程中的注意点） 七、思考题 1、平板菌落计数法中，为什么溶化后的培养基再冷却至45℃左右才能倒平板？
2、本次实验是否成功？如果失败，试分析原因。 实验四简单染色 一、实验目的 二、实验原理 三、实验材料（包括菌种、染料、玻璃器皿） 四、实验步骤 五、实验结果（黏贴染色结果图片并描述所观察到的细菌的显微形态） 六、思考题 1、简单染色要获得成功，有哪些问题需要注意，为什么？ 实验五革兰氏染色 一、实验目的 二、实验原理 三、实验材料（包括菌种、染料、玻璃器皿） 四、实验步骤 五、实验结果（黏贴染色结果图片并判断自己分离到的菌种是G还是G+-？） 六、思考题 1、革兰氏染色要获得成功，有哪些问题需要注意，为什么？
《临床微生物学及检验》期末复习题集 （第一部分） 一、名词解释 1.糖（醇、苷）类发酵试验 2.O/F试验 3.七叶苷水解试验 4.甲基红试验 5.VP 试验 6.吲哚试验 7.枸橼酸盐利用试验 8.硫化氢试验 9.尿素酶试验 10.氧化酶试验 11.触酶试验 12.凝固酶试验 13.克氏双糖铁（KIA）试验 14.MIU 15.胆汁溶菌试验 16.奥普托欣敏感试验 17.协同凝集试验
二、问答题 1.简述临床标本采集的一般原则和标本的处理。 2.哪些细菌可用不染色标本动力检查而作出判断？主要依据是什么？ 3.用于观察细菌动力及运动情况可用哪些方法？ 4.常用染料有哪些？其中哪些常用于细菌的染色。 5.简述常用的染色方法，其中有哪些是鉴别染色法？ 6.何为培养基，按性质和用途可分为哪几类？并举例说明。 7.细菌常用的分离培养基有哪些？ 8.细菌接种方法有哪些？有何用途？ 9.常用的细菌培养方法有哪些？ 10.如何检测细菌的内毒素和外毒素？ 11.简述细菌生化反应的概念。常见的碳水化合物代谢试验、蛋白质和氨基酸代谢试验、碳源和 氮源利用试验及酶类试验有哪些？ 第4章抗菌药物的敏感性试验 Antimicrobial Susceptibility Tests 一、名词解释 1. E试验 二、问答题 1.常见的药物敏感试验有哪些方法？简述其原理、方法及结果解释。 2.试述结核分枝杆菌的体外药敏试验所用培养基和细菌接种方法？ 3.厌氧菌体外药敏试验纸片扩散法和稀释法常用培养基是什么？孵育条件是什么？
第5章细菌的分类与命名 Classification and Gram Naming 1.细菌学名是如何命名的？ 2.细菌的分类方法常见的有那两类？其主要依据主要是什么？ 第6章革兰阳性球菌 Gram Positive Coccus 一、名词解释 1.SPA 2.血浆凝固酶 3.血浆凝固酶试验 4.玻片法凝固酶试验 5.试管法凝固酶试验 6.胆汁溶菌试验 7.optochin试验 8.M蛋白 9.链道酶 10.链激酶 二、问答题 1.简述金黄色葡萄球菌的致病物质。 2.简述葡萄球菌的培养特性和抵抗力。 3.致病性葡萄球菌有哪些重要特点？如何鉴别？
动物病原微生物的分类 Prepared on 22 November 2020
动物病原微生物的分类 根据病原微生物的传染性、感染人和（或）动物的危害程度，世界动物卫生组织（OIE）将动物病原分为1至4类。 1类动物病原为外来的或导致地方性流行的、并列入官方控制的、实验室释放存在高危险性的病原微生物。 2类动物病原为外来的或导致地方性流行的、并列入官方控制计划的、实验室释放中有中等危险的病原微生物。 3类动物病原为外来或导致地方性流行的、并列入官方控制计划但实验室扩散风险低的致病微生物。 4类动物病原为可导致地方性流行、但不列入官方控制计划的病原微生物。 我国农业部于2005年颁布了动物病原微生物分类名录，其中一类病原微生物危害最大，依次类推，四类最小。有少数寄生虫也列在名单之中。 中华人民共和国农业部 第53号令公布动物病原微生物分类名录2005年5月24日，中华人民共和国农业部部长杜青林签署第53号令，发布《动物病原微生物分类名录》。 根据《病原微生物实验室生物安全管理条例》第七条、第八条的规定,对动物病原微生物分类如下： 一类动物病原微生物 口蹿疫病毒、高致病性禽流感病毒、猪水泡病病毒、非洲猪瘟病毒、非洲马瘟病毒、牛瘟病毒、小反刍兽疫病毒、牛传染性胸膜肺炎丝状支原体、牛海绵状脑病病原、痒病病原。 二类动物病原微生物 猪瘟病毒、鸡新城疫病毒、狂犬病病毒、绵羊痘／山羊痘病毒、蓝舌病病毒、兔病毒性出血症病毒、炭疽芽孢杆菌、布氏杆菌。
三类动物病原微生物 多种动物共患病病原微生物：低致病性流感病毒、伪狂犬病病毒、破伤风梭菌、气肿疽梭菌、结核分支杆菌、副结核分支杆菌、致病性大肠杆菌、沙门氏菌、巴氏杆菌、致病性链球菌、李氏杆菌、产气荚膜梭菌、嗜水气单胞菌、肉毒梭状芽孢杆菌、腐败梭菌和其他致病性梭菌、鹦鹉热衣原体、放线菌、钩端螺旋体。 牛病病原微生物：牛恶性卡他热病毒、牛白血病病毒、牛流行热病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、牛病毒腹泻／粘膜病病毒、牛生殖器弯曲杆菌、日本血吸虫。 绵羊和山羊病病原微生物：山羊关节炎／脑脊髓炎病毒、梅迪／维斯纳病病毒、传染性脓疱皮炎病毒。 猪病病原微生物：日本脑炎病毒、猪繁殖与呼吸综合症病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪丹毒杆菌、猪支气管败血波氏杆菌、猪胸膜肺炎放线杆菌、副猪嗜血杆菌、猪肺炎支原体、猪密螺旋体。 马病病原微生物：马传染性贫血病毒、马动脉炎病毒、马病毒性流产病毒、马鼻炎病毒、鼻疽假单胞菌、类鼻疽假单胞菌、假皮疽组织胞浆菌、溃疡性淋巴管炎假结核棒状杆菌。 禽病病原微生物：鸭瘟病毒、鸭病毒性肝炎病毒、小鹅瘟病毒、鸡传染性法氏囊病病毒、鸡马立克氏病病毒、禽白血病／肉瘤病毒、禽网状内皮组织增殖病病毒、鸡传染性贫血病毒、鸡传染性喉气管炎病毒、鸡传染性支气管炎病毒、鸡减蛋综合征病毒、禽痘病毒、鸡病毒性关节炎病毒、禽传染性脑脊髓炎病毒、副鸡嗜血杆菌、鸡毒支原体、鸡球虫。 兔病病原微生物：兔粘液瘤病病毒、野兔热土拉杆菌、兔支气管败血波氏杆菌、兔球虫。 水生动物病病原微生物：流行性造血器官坏死病毒、传染性造血器官坏死病毒、马苏大麻哈鱼病毒、病毒性出血性败血症病毒、锦鲤疱疹病毒、斑点叉尾鲴病毒、病毒性脑病和视网膜病毒、传染性胰脏坏死病毒、真鲷虹彩病毒、白鲟虹彩病毒、中肠腺坏死杆状病毒、传染性皮下和造血器官坏死病毒、核多