果覲综合大实验
摘要:一对同源染色体上的致死基因（I、Cy ）形成了平衡致死系，本实验研究在这种情况下的麋蝇基因分高定律、自由组合定律以及伴性遗传，选择研究的相对性状是正常翅（c）与卷翅（Cy\白眼（X-）与後眼（XB）,实验亲本为正常翅白眼与卷翅桜眼的正反交。通过使用X2检验（a=0.05）,聃定两个培养瓶（正交直翅杂交组与反交卷翅杂交组）中的果媲统计值与理论值差异不显着，另外两培养瓶（正交卷翅杂交组与反交直翅杂交组）中果蝇得统计值与理论價显着不符合。
第一部分果蝇性别鉴定、性状观察与饲养方法
一、实验目的
1、了解果蝇的生活史：
2、堂握果蝇的麻醉及观察方法：
3、通过实验7习掌握果蝇性别的鉴宦方法：
4、了解果蝇的饲养方法：
5、仔细观察并记录实验室备品系果蝇的性状.
二、实验内容
（-＞果觐的生活史
果蝇妃于昆虫纲，双翅目，与家蝇是不同的种.它的生活史包括：卵-幼虫-蛹-成虫。
果蝇的生活周期长短与隘度关系很密17J.30X?以上的温度能使果蝇不育和死亡，低沿则使它生活周期延长，
同时生活力也减低，果蝇培养的最适温度20-25，C o
从表中可以看出259时,从卵到成虫约10天：在259时成虫约活15天.
果蝇-般址培养在恒温箱内.盛复时.要注总降温.
（二）果蝇是遗传学分析的好材料
（1）生长迅速，生括史较短，短时间内可获得人虽子代：
C）容易饲养.在常温下以玉米粉做饲料就可使之生长繁殖：
（3）染色体数目少.加之唾腺染色体巨大，是细胞学观察的好材料；
（4）突变性状多，H多数是形态突变，便于观察。
（三）果規的麻醉及观察方法
（I）对果蝇进行检査时，可用乙瞇麻醉，使它保持挣止状态。因果蝇对乙张很敏感，易麻醉，麻醉的深度看实检要求而定（作种蝇以轻度麻醉为宜，做观察可深度麻醉，致死也无妨。果蝇翅膀外展45C角表示己死）。O）麻醉时将乙陋（2 — 3滴）滴到麻醉瓶塞的绵球上（注总不要让乙醍流到瓶内），同时麻醉瓶要保持「燥，否则会粘住果就翅脐。
（3）将培养瓶倒置，让果娓向瓶底部运动，然后打开麻醉瓶和培养精塞，迅速将两者瓶口相接（麻醉瓶在上，培养瓶在下），轻拍培养瓶壁使果蝇落入麻醉瓶中，迅速雀好两个瓶塞，并倒置麻醉瓶，一分钟后果蝇即处于昏迷状态.
（4）麻醉后的果蝇放在白瓷板匕用毛笔轻轻拨动进行观察。必要时可进行第二次麻貯。观察完毕后倒入煤油或酒楮瓶中（死蝇盛留器）。
（四）果铢的雌雄鉴别
（1）果蝇有雌椎之分，幼虫期区别较难，成虫区别容易.
（2）雌性体型较大，腹部环纹7节，末端尖，颜色浅，附节前端无黑色卑毛流苏。
（3）雄性体型较小，腹部环纹5节，末端钝而圆，颜色深。笫一对脚的附节前端农而有黑色景毛流苏，称性梳.
（五）果蝇的培养
A、培养基的制备
果蝇在水果摊或果园里常可见到.但它并不是以水果为生，而圧食生长在水果上的酵母菌，因此实验室内凡能发酵的基质，均可作为果蝇饲料.
口前本实验室所用的果蝇培养基配方如F：
A：匍简糖10克，琼脂15克，加水65毫升，煮沸溶解。
B：玉米粉12克，加水50亳升，混介均匀.
将B慢慢倒入A中，并不停搅动混合，加热成糊状后，再加一勺酵母膏，混合均匀，稍冷却后加入1亳升丙酸.调匀后即可分製到培养瓶中。
B、培养容器
培养果蝇的饲养粗?常用的有牛奶瓶，大中型指管，用纱布包袅的棉花球作瓶瘙（有条件的地方可改用泡沬型
料作瓶塞）-
饲养和先消帝，然后倒入饲料（2魁米卑），待冷却后，用酒梢棉擦瓶樂.然后滴入酵母菌液数滴，再插入消奇过
的吸水纸.作为幼虫化蛹时的干燥场所.
C、原种培养
在作为新的留种培养时.取先检査一下果婉冇没冇混杂.以防原种丢失。亲本的数目一般每瓶5-10对，移入新培养
瓶时，须将瓶横卧，然后将果娩挑入，待果姚消醍过来后，再把培养瓶竖起，以防果蝇粘在培养基上。
原种毎2—4周换一次培养基（按温度而定），毎一原种培养至少保留两套。培养瓶上标签要写明名称，培养口期等，作为原种培养，可控制到10-15*0，培养时避免H光11射。
第二部分果蝇设计实验
一、实验目的
1、理解基因分离定徐、门III组介定律的原理，正确认识件性遗传的正反交的筮别。
2、在有致死基因的条件下验证基因分离定律、白山组合定律以及伴性遗传.
3、掌握果蝇两对基因杂交试验，学习实验数据收集和统计处理方法。
二、实验原理
卷翅甚因（Cy＞控制果蝇的翅型为卷翅，位干常染色体上，隐性纯和致死.隐性基因（1）和卷翅基因（Cy）位于一对冋源染色体，也绘瞪性纯和致死.两个基因中间发生倒位，构建了平衡致死系，所以卷翅一FL绘永久杂合子。
实验采用用卷翅橙眼和血翅白眼为亲本验证基因分离、|'1山组合和伴性遗传定律，在实验过程中根据杂交后代的性状分离比來对各个定律进行验证.
1、验证基因分离定律：
在验证基因分离定律时，选择正交组的翅型的性状作为研究对象，正交亲本交配后，子一代产生性状分离，出现两种表型，呈1:1之比如图：
P 卷翅CyL/cl X cL/c/L 直翅
1
Fl 卷翅Cy L/cL d/cL II翅
1: 1
2、验证基因l：|由组合定律:
由于一对基因的分离与另一对基因的分离圧独立的.所以一对基因所决定的性状在杂种第二代产生一定的性状分离比.
在验证此定律时幾选择位「?非同源染色体上的两对基因。所以选择位『常染色体上的控制翅型的基因和位亍性染色体上的控制眼色的基冈作为研宛对仪.还兄以正交组为例?1兮瓶为FI的11翅杂交，2号瓶为F1 卷翅杂交.
P X B X B CyL/cl x cL/cLX w Y
橙卷雌I白正雄
Fl： X B X w CyL/cL X B YCyL/cL X B X w cL/cl X B YcL/cl
橙卷雌橙卷雄橙正雌橙正雄
1号：正帘翅杂交
Fl： X B X*cL/cl x X B YcL/d
橙正雌橙正雄
F2： 19正:白jl:=3： 1
2号：卷翅杂交
Fl： X B X'CyL/cL x X B YCyL/cL
橙卷雌橙卷雄
F2：橙卷：橙直:白卷：白直=6:32:1
3、验证伴性遗传：
伴性遗传定律：位于性染色体上的基因在遗传给子代时常伴随着性别的垫异。
由F果蝇控制眼色的基肉位r x染色体匕所以，以此果蝇眼色作为研究对象观察性状。
正交P X B X B x X W Y
橙雌1白雄
F1：X B X W X B Y
橙雌蚩雄
反交p X W X W x X B Y
白雌J橙傩
Fl：X B X W X W Y
橙雌白雄
三、实验材料：
1、橙眼卷翅果蝇、白眼直翅果蝇
2、器几：解剖镜、毛笔、白瓷板、麻醉瓶、25*C恒温培养箱
3、试剂：乙朋
四、实验流程
1.取橙眼卷翅雌性处女蝇与白眼正常翅雄性果蝇乞若F只作亲本置于1号培养瓶中，取橙眼卷翅雄性果蝇与白眼正侖翅雌性处女蝇若干只作亲木装入2号培养瓶.然后将培养瓶呂于25C恒温箱中培养.
2.待培养7-8天后，弃除亲本果蝇.继续培养.
3.再培养5天左右，收集F1代个体。准备4个心得培养啟.标号3、4、5、6。将1号瓶中的F1代果蝇转移到另-?瓶中进行麻醉.选取其中的雄果蝇"翅与卷翅*5-7只分别装入3、4号瓶，弃掉雌果蝇：将2号瓶中的F1代果蝇转移到另一瓶中进行麻醉?选収其中的雄杲撓n翅与卷翅各5-7只分别装入5、6弓瓶，弃抻雌果娩.将6个培养瓶放入恒温箱继续培养?Wh后，再次将1号瓶中的FI代果蝇转移到另一瓶中进行麻醉，选取其中的雌果蝇直翅与卷翅各5?7只分别装入3、4号对应培养瓶中，弃掉雄果蝇。将2号瓶中的F1代果蝇转移到另-?瓶中进行麻醉，选収其中的雌果蝇H翅与卷翅乞5-7只分别装入5、6 I；对应培养瓶中，弃掉雄果蝇.将4个培养瓶放入恒温箱进行培养.
4 培养7-8天后.弃除F7代果娓，放入恒温箱继续培养。
5.培养5天左右，开始对瓶中的F2代根据不同的性别和性状进行分类计数并进行记录。记录的总数应超过500只，一次记录的数目不到500只可以过几天进行第二次计数.但从弃抻F1代果蝇开始，不得超过20天，否则,F3代果蝇出现,影响结果。
6 利用卡方检验对记录的实验结果进行检验，足否符合遗传定律。
五、预期结果
15卷雌与白直雄正交：
P X B X B CyUcl x X w YcL/cL
橙卷雌I白直雄
F1： X B X w CyL/cL X B YCyL/cL X B X w cL/cl X B YcL/cl
橙卷雌橙卷雄橙ri雌橙直雄
1号：直翅杂交
Fi： X B X w cL/cl x X B YcL/cl
橙直雌橙宜雄
F2： ttUt 白n=3： i
2号，卷翅杂交
F1： X B X w CyL/cL x X B YCyL/cL
橙卷雌橙卷雄
F2：橙卷：橙直：白卷:白直=6 3:2:1
白n雌与橙卷雄反交：
P: X w X w cL/cL x X B YCyL/cl
白直雌1橙卷雄
F】：X B X w CyL/cL X w YCyL/cL X B X w cL/cl X w YcL/cl
橙卷雌白卷雄橙F〔雌白rr?雄
3号：亶翅杂交
F1： X B X w cL/cl x X w YcL/cl 橙H雌白宜雄
證直:白n=i 1
4号：卷翅杂交
使用R软件进行*2检验得到结果如卜?(该试验W F 2x2列联丧独立性检验问题，町 J进行X2检验须作连续性娇正)：
>A<-c(56J 68,64,160),
>data< -matnx(A 2),
>chisq test(data.TURE)?
Pearson's Chi-squared test with Yates* continuity correction
data: data
X-squared = 0.55772, df = 1, p-value = 0 4552
根据软件所得结果P>0 05.说明该组果巍表熨比例与预期理论比例1： 3圣异不显著.
二号瓶果蝇统计结果
表型统计数量理论比例正常翅白眼91
卷翅白眼442
正常翅橙眼473
卷翅橙眼1226
使用R软件进行X2检验得到结果如下：
> chisq test(x=c(l 22.47.44,9),p=c(6t3,2J).rescale p=T)
Clu-squared test for given probabilities
data c(122t 47, 44, 9)
X-squared = 8.5946, df = 3t p-value = 0 0352
根据软件所得结果0 01 三号瓶果蝇统计结果 表型统计数量理论比例 正常翅白眼 261卷翅白眼662 正常翅橙眼471 卷翅橙眼842 使用R软件进行*2检验得到结果如卜?： > chisq test(x=c(84,47,66,26),p=c(2,1,2,1),rescale p=T) Chi-squared test for given probabilities data c(84, 47. 66, 26) X-squared = 8.148, df= 3. p-value = 0 04305 根据软件所得給果0 01 使用R软件进行*2检验得到结果如卜?(该试验W f 2x2列联表独立性检验问题.町=1.进行X2检验须作连续性娇正)： >A<-c(70 5,70 5,66.75); >data<-matnx(A2). >chisq test(data.TURE), Pearson's Chi-squared test with Yates' continuity correction data: data X-squared = 0.17394, df = 1, p-value = 0 6766 根据伙件所得结果P>0 05?说明该组果蝇衣型比例与预期理论比例1：不显著。 七、注总审项及实验总结： 1.挑选果蝇时，除了要注意雌雄外，还要注意性状，防出因果蝇混杂而引起实验结果失败. 2.接种换瓶过程中，注总不要麻醉过度，如果蝇翅和蝇体成45°角翘起，表明麻醉过度已死亡。只有在统计性 状的数星时.可以直接麻醉处 死. 3.配制培养基时要将瓶中的水擦于净，培养基接果蝇时先将瓶身平放，待果蝇苏醍后再把精竖起来. 防止果蝇在麻醉状态被黏庄培养基或者湿润的瓶樂上，不能苏醍或自由活动。 4.培养基要注总灭菌，加足够的丙酸來抑制霉菌生长，若发现培养基农而产生霉菌，要立即处理、补救培养基. 5.挑果蝇时用毛笔，忌用其他尖锐匸具，以免影响果蝇的生长緊育. 6.需要挑处女蝇的地方要严格控制时间，羽化后12h Z内的雌蝇才能用。 7.培养箱温度要保持在20-25*C,不能随盘更改，以免形响实脸结果。 S.耍保证子代数冃足够多，进行统计学验证分析实验结果时才更冇说服力. 动物遗传学实验四川农业大学8/8 果蝇基因图距的测量 实验日期：2013年4月15日– 2013年5月31日 组号：2-3 生17班姚远同组搭档：赵心怡 一、实验目的 1.通过果蝇杂交实验计算在同一染色体上控制三对性状的基因的相对位置、图距等参 数，理解和验证基因的连锁和交换定律。 2.掌握果蝇杂交的方法，深入了解果蝇生活史、世代周期。 二、实验原理 广泛用于遗传学研究的果蝇为黑腹果蝇(Drosophila melanogaster) , 属于果蝇科、果蝇属, 它作为遗传学模式生物有如下特点： 1)生活史长短随温度而不同； 2)成年雌性蝇类长到12小时才成熟，便于确保雌性蝇类是处女蝇； 3)繁殖能力强； 4)突变种类多，染色体数目少。 位于同源染色体上的非等位基因在形成配子时，多数随所在染色体一起遗传，若发生非姊妹染色单体之间的交换可产生少量的重组型配子。位于同一条染色体上的基因连在一起的伴同遗传的现象称为连锁（linkage）。连锁现象是英国遗传学家（W. Bateson）等人于1906年在香豌豆(Lathyrus doratus )杂交过程中发现。1911年摩尔根用果蝇做杂交实验，发现了同类现象，提出了连锁与互换的概念，称之为遗传学第三定律。 基因的交换率反映了两基因之间的相对距离。1910年，Morgen TH提出假设：假定沿染色体长度上交换的发生具有同等的几率，那么两个基因位点间的距离可以决定减数分裂过程中发生重组染色体的发生率，即重组分数。人们规定同一染色体上两个位点间在一百次减数分裂发生一次重组的机会时，定义两位点间的相对距离为一个cM(centimorgan)。根据基因在染色体上有直线排列的规律，把每条染色体上的基因排列顺序（连锁群）制成图称为遗传学图(genetic map)，亦称基因连锁图(gene-linkage map )。 三点测交就是通过一次杂交和一次测交，同时确定三对等位基因（即三个基因位点）的排列顺序和它们之间的遗传距离，是基因定位的常用方法。主要过程是：用三杂合体和三隐性个体杂交，获得三因子杂种（F1），再使F1与三隐性基因纯合体测交，通过对测交后代表现型及其数目的分析，分别计算三个连锁基因之间的交换值，从而确定这三个基因在同一染色体上的顺序和距离。通过一次三点测验可以同时确定三个连锁基因的位置，即相当于进行三次两点测验，而且能在试验中检测到所发生的双交换。 通过对测交后代表型及其数目的分析，分别计算三个连锁基因之间的交换值，从而确定这三个基因在同一染色体上的顺序和距离，并通过双交换频率计算并发率（coefficient of coincidence）和干扰。 完全连锁现象：雄性果蝇具有较为罕见的基因完全连锁现象。在雄性果蝇同一染色体上的基因不论其实际图距有多少，都不会发生减数分裂同源重组的现象。 三、实验材料及仪器 1.实验材料： 果蝇杂交实验报告 实验日期：2012年9月28日 -2012年10月20日 小组编号：周五5组 小组成员：白坦蹊陈朱媛呼波王启明 【摘要】 实验利用果蝇，这一常用的遗传学模式生物，进行杂交实验，验证了基因的分离定律、自由组合定律、伴性遗传、基因连锁交换等遗传学规律。报告对实验数据进行了卡方检验，对三隐性状中的基因遗传距离进行了计算，证明实验数据基本符合假设的。 【实验原理】 一、遗传定律 1.基因分离定律 一对等位基因在杂合状态中保持相对的独立性，在配子形成时，按原样分离到不同的配子中去，理论上配子分离比是1∶1，F2代基因型分离比是1∶2∶1，若显性完全，F2代表型分离比是3∶1 。 控制体色性状的突变基因位于2号常染色体，正常体色对黑体完全显性，用正常体色果蝇与黑体果蝇交配，得到F1代都是正常体色，F1代雌雄个体之间相互交配，F2代产生性状分离，出现两种表现型。 2.基因自由组合定律 不同相对性状的等位基因在配子形成过程中，等位基因间的分离和组合是互不干扰，各自独立分配到配子中去，它们所决定的两对相对性状在F2代是自由组合的，在杂种第二代表型分离比就呈9∶3∶3∶1。 控制体色性状的突变基因位于2号常染色体，正常体色对黑体完全显性，控制眼色性状的突变基因位于性染色体。红眼对白眼完全显性，用黑体红眼果蝇(♀)与正常体色白眼果蝇(♂)交配，得到F1代都是正常体色，F1代雌雄个体之间相互交配，F2代产生性状分离，出现四种表现型。 3.伴性遗传 位于性染色体上的基因，其传递方式与位于常染色体上的基因不同，它的传递方式与雌雄性别有关，因此称为伴性遗传。 果蝇的性染色体有X和Y两种，雌蝇为XX，雄蝇为XY。红眼与白眼是一对相对性状，控制该对性状的基因(W)位于X染色体上，且红眼(W)对白眼(w)为完全显性。 当红眼雌蝇与白眼雄蝇杂交时，F1代雌性果蝇、雄性果蝇都为红眼，F2代雌性果蝇都是红眼，雄性果蝇红眼和白眼的比例为1∶1；当白眼雌蝇与红眼雄蝇杂交时，F1代雌性果蝇为红眼，而雄性果蝇为白眼，此现象又称为绞花式遗传，F2代雌性果蝇的红眼与白眼比例为1∶1，雄性果蝇的红眼与白眼比例也是1∶1 。 4.连锁与交换定律 连锁是指在同一同源染色体上的非等位基因连在一起而遗传的现象；互换是指同源染色体的非姊妹染色单体之间的对应片段的交换，从而引起相应基因间的交换与重组。同一条染色体上的基因是连锁的，而同源染色体基因之间可以发生一定频度的交换，因此在子代中将发现一定频度的重组型，但一般比亲组型少得多。 5.基因定位 基因定位就是确定基因在染色体上的位置，确定基因的位置主要是确定基因之间的距离和顺序，而它们之间的距离是用交换值来表示的。只要准确地估算出交换值，并确定基因在染色体上的相对位置就可以把它们标志在染色体上，绘制成图。 果蝇杂交实验 【实验目的】 通过实验验证分离规律、自由组合规律、伴性遗传和连锁互换规律，掌握果蝇杂交的实验技术和基因定位的三点测验方法，在实验中熟练运用生物统计的方法对实验数据进行分析。 【实验原理】 1. 果蝇（fruit fly）是双翅目（Diptera）昆虫，属果蝇属（genus Drosophila），约有3000多种，我国已发现800多种。大部分的物种以腐烂的水果或植物体为食，少部分则只取用真菌，树液或花粉为其食物。以果蝇作为遗传学研究的材料，利用突变株研究基因和性状之间的关系已近一百年，至今，各种研究遗传学的工具已达完善的地步，果蝇对今日的遗传学的发展有其不可磨灭的贡献；从1980年初，Drs. C. Nesslein-Volhard和E. Weichaus以果蝇作为发育生物学的模式动物，利用其完备的遗传研究工具来探讨基因是如何调控动物体胚胎的发育，也带动了其它模式生物（线虫、斑马鱼、小鼠和拟南芥等）的研究，且有非常具体的成果。 通常用作遗传学实验材料的是黑腹果蝇（Drosophila melanogaster）。用果蝇作为实验材料有许多优点： ⑴饲养容易。在常温下，以玉米粉等作饲料就可以生长，繁殖。 ⑵生长迅速。十天左右就可完成一个世代，每个受精的雌蝇可产卵400～500个，因此在短时间内就可获得大量的子代，便于遗传学分析。 ⑶染色体数少。只有4对。 ⑷唾腺染色体制作容易。横纹清晰，是细胞学观察的好材料。 ⑸突变性状多，而且多数是形态突变，便于观察。 果蝇的生活史： 果蝇的生活周期长短与温度有密切关系。一般来说，30℃以上温度能使果蝇不育或死亡，低温能使生活周期延长，生活力下降，饲养果蝇的最适温度为20～25℃。 生活周期长短与饲养温度的关系 果蝇在25℃时，从卵到成蝇需10天左右，成虫可活26～33天。果蝇的生活史如下： 雌蝇→减数分裂→卵 受精 雄蝇→减数分裂→精子 第一批成虫 羽化（第八天） （可活26～33天）产第一批卵 果蝇的形状观察和饲养管理 一、实验目的 了解果蝇的生活习惯，掌握果蝇饲养管理的方法，学习鉴定果蝇的雌雄性别，观察果蝇某些遗传性状。 二、实验原理 果蝇广泛存在于全球温带及热带气候区，在果园、菜市场等地皆可见其踪迹，目前已发现1000多种。果蝇以酵母菌为食，能发酵的水果或植物基质，都可用作果蝇的饲料。 黑腹果蝇，双翅目果蝇属。生活史短，每12天左右即可完成一个世代；饲养容易，以玉米粉等做饲料就可以生长繁殖；繁殖能力强，每只受精的雌蝇可以产卵500个左右；突变型多，突变性状多，多数是形态变异，容易观察；染色体少、个体小，是一种很好的遗传学实验材料，是一种模式生物。 1、果蝇的生活史 果蝇是完全变态昆虫，生活周期可分为4个时期：卵、幼虫、蛹和成虫。最适培养温度为25~30℃。果蝇在25℃时，从卵至蝇需10天左右。由蛹羽化成的成虫，雄性在12小时内为处女蝇，24小时后开始产卵，每天每个成虫可产50-75个卵，10天内最高产卵总股数为400-500个。 卵：白色，椭圆形，长约 0.5mm，前端背面伸出一触丝，附着在食物上。 幼虫：一龄——二龄——三龄，三龄体长4-5 mm，幼虫头尖尾钝，头上有一黑色钩状口器。 蛹：化蛹前三龄幼虫停止摄食，爬到相对干燥的瓶壁上，形成菱形的蛹，形状由淡黄、柔软逐渐硬化为深褐色。 成虫：刚羽化的果蝇虫体较肥大，体表呈半透明，颜色逐渐加深，硬化。 2、果蝇的雌雄鉴别 4、果蝇饲料的配制 果蝇是以酵母菌作为主要食料的，因此实验室内凡是能发酵的物质，都可用作果蝇的饲料，常用的饲料油玉米饲料、米粉饲料、香蕉饲料等。 三、动物与器材 黑腹果蝇品系：突变型（三隐性、黑体） 药品：乙醚、酒精、丙酸、酵母粉、琼脂、玉米粉、白糖。 培养箱、高压灭菌锅、电磁炉、解剖镜、搪瓷杯、玻棒、镊子、培养瓶、海绵塞、滤纸、酒精棉球、毛笔、麻醉瓶、白纸板。 四、实验内容 1、果蝇培养基配制 （1）清洁指管，盖上适当大小的瓶塞，置高压灭菌锅内，以121℃，1.5大气压消毒15分钟，冷却备用。 （2）按配方称取培养基各组分。先取一半水加入琼脂于电磁炉上加热溶解，再加入蔗糖煮沸。 （3）取剩余的水将玉米粉调成糊状边搅拌边加入到琼脂糖溶液中，煮沸。（4）待稍冷后加入酵母粉和丙酸，充分调匀、分装（20 ml/管）。 2、果蝇性别鉴定及形状观察 取白纸板平置于桌面，将麻醉的果蝇倒于白纸板上。于解剖镜下进行性状观察，并记录。 五、思考题及注意事项 1、通过对果蝇雌雄个体的鉴别，你认为哪几个特征在鉴别中是主要的？ 答：黑色条纹和性梳。在实体镜下即可清楚地观察到雄蝇的三条条纹（第三条较宽）和雌蝇的五条黑色条纹。肉眼可以观察到性梳为第一对附肢第二小节上的一个小黑点，若用显微镜观察则可以观察到清晰的梳状结构。 相比之下，其他几个特征就不太好观察。首先是体型，在实体镜下很难判断哪个个体体型大或小（放大倍数不同），除非将雌雄蝇一同对比看，而用肉眼基本看不出体型的区别。腹部形状也容易判断错。腹片由于没有特殊眼色，也较难观察数量差别。 2、叙述配制培养基以及果蝇观察时的注意事项。 答：(1)玉米粉一定要先用凉水拌匀后再加热，不能直接倒入加热的培养基中，否则容易聚集成团，不易溶解。配制的培养基容易出现块状，不易于果蝇的利用。 (2)酵母为活性物质，高温易失活。因此应当在培养基冷却到50℃左右时加入到培养基中，切勿将酵母粉加入到培养基中直接煮沸。 (3)将培养基倒入指瓶中时应悬空，不要把培养基沾到指瓶壁上。如不慎沾到，应用酒精棉球擦拭，擦拭过程中注意酒精不要滴到培养基上。 (4)本次观察所用果蝇为已麻醉过的果蝇，应注意如果在观察过程中果蝇醒来，要及时再麻醉，不要让其飞走。 果蝇杂交实验正式报告 姓名： 学号： 班级： 日期：年月日 果蝇的杂交实验 一、实验目的 1、了解伴性遗传和常染色体遗传的区别； 2、进一步理解和验证伴性遗传和分离、连锁交换定律； 3、学习并掌握基因定位的方法。 二、实验原理 红眼和白眼是一对相对性状，控制该对性状的基因位于X染色体上，且红眼对白眼是完全显性。当正交红眼雌蝇与白眼雄蝇杂交时，无论雌雄均为红眼；反交时雌蝇都是红眼，雄蝇都是白眼。 三、实验材料和器具 野生型雌蝇雄蝇，突变型雌蝇雄蝇、放大镜、麻醉瓶、毛笔、超净台、乙醚、酒精棉球、酵母、玉米粉、丙酸、蔗糖、琼脂 四、实验流程 配培养基→选处女蝇→杂交（正交，反交）→观察F1 五、实验步骤 1、配培养基 2、选处女蝇在超净台上选取野生型和突变型的雄蝇雌蝇 3、杂交 （1）正交取红眼雌蝇5个和白眼雄蝇4个，放入培养瓶中（♀）红眼（+ +x x w） x）×（♂）白眼（y （2）反交取红眼雌蝇3个和白眼雄蝇4个，（♀）白眼（w w x x）×（♂）红眼（y x+） 贴上标签，放于恒温箱饲养 4、观察并记录 分别将正反交的F1代用乙醚麻醉，倒在白纸上，分别数红白眼的雌蝇和雄蝇，记录数据。 六、实验结果与分析 在正交实验中，F1代雌雄硬都是红眼；在反交实验中，雌性都是红眼，雄性都是白眼，但也出现了个不该出现的雌性白眼分析：在伴性遗传中，也有个别例外产生，这是由于2条X不分离造成的，F1中出现的不该出现的雌性白眼，但是这种情况极为罕见。 七、注意事项 要经常观察，如果培养瓶内有生霉的，必须将果蝇转移到干净的培养瓶中 F1代幼虫出现即可将亲本放出或处死 要严格控制温度，偏高的温度或者偏低的温度都可能引起果蝇的死亡 亲本必须是处女蝇，其原因是雌蝇生殖器官有受精囊，可以保存交配所得的大量精子，能使交配后卵巢产生的卵受精。在杂交时若不是处女蝇，其体内已储有另一类型雄蝇的精子，会严重影响实验结果，导致整个实验失败。 在F1代羽化前，一定要将亲本全部清除干净并处死，以免出现回交现象，影响结果 果蝇的麻醉要适当，掌握好麻醉时间，麻醉过度会使果蝇直接死亡 取果蝇的时候用毛笔，避免用其他锋利的器具，避免戳伤果蝇，影响生长繁育 八、个人总结 第一次饲养果蝇，开始时感觉这么复杂和漫长的实验是一个很大 果蝇实验报告 班级：生物技术实验者：王茜同组人员：谢京合 一、实验目的 1. 通过实验验证分离规律、自由组合规律、伴性遗传和连锁互换规律，掌握果蝇杂交的实验技术和基因定位的三点测验方法，在实验中熟练运用生物统计的方法对实验数据进行分析。 2. 练习分离果蝇幼虫唾腺的技术，学习唾腺染色体的制片方法。 3. 观察了解果蝇唾腺染色体的形态学及遗传学特征。 二、实验原理 1.果蝇培养原理 果蝇（fruit fly）是双翅目（Diptera）昆虫，属果蝇属（genus Drosophila），约有3000多种，我国已发现800多种。 通常用作遗传学实验材料的是黑腹果蝇（Drosophila melanogaster）。用果蝇作为实验材料有许多优点： 1. 饲养容易。在常温下，以玉米粉等作饲料就可以生长，繁殖。 2. 生长迅速。十天左右就可完成一个世代，每个受精的雌蝇可产卵400～500个，因此在短时间内就可获得大量的子代，便于遗传学分析。 3. 染色体数少。只有4对。 4. 唾腺染色体制作容易。横纹清晰，是细胞学观察的好材料。 5. 突变性状多，而且多数是形态突变，便于观察。 果蝇的生活史： 果蝇的生活周期长短与温度有密切关系。一般来说，30℃以上温度能使果蝇不育或死亡，低温能使生活周期延长，生活力下降，饲养果蝇的最适温度为20～25℃。 生活周期长短与饲养温度的关系 果蝇在25℃时，从卵到成蝇需10天左右，成虫可活26～33天。果蝇的生活史如下： 雌蝇→减数分裂→卵 受精 雄蝇→减数分裂→精子 第一批成虫 羽化（第八天） （可活26～33天）产第一批卵 蛹（第四天） 第二次蜕皮第一批卵孵化 （第二天）（第零天） 第一次蜕皮幼虫 （第一天） 果蝇的生活周期和各发育阶段的经过时间 果蝇的性别及突变性状的鉴别： 果蝇的每一体细胞有8个染色体（2n=8），可配成4对，其中3对在雌雄果蝇中是一样的，称常染色体。另外一对称性染色体，在雌果蝇中是XX，在雄蝇中是XY。 果蝇的雌雄在幼虫期较难区别，但到了成虫期区别相当容易。雄性个体一般较雌性个体小，腹部环纹5条，腹尖色深，第一对脚的跗节前端表面有黑色鬃毛流苏，称性梳（Sex combs）。雌性环纹7条，腹尖色浅，无性梳。 实验中选用的果蝇突变性状一般都可用肉眼鉴定，例如红眼与白眼，正常翅与残翅等。而另一些性状可在解剖镜下鉴定，如焦刚毛与直刚毛等。现列表如下： 实验中使用的果蝇突变品系 焦刚毛的基因座为sn3, 本文简写为sn。 2.果蝇杂交原理 （1）野生型果蝇为红眼、灰身、长翅、直刚毛，与这些性状对应的突变性状很多，其中灰身（+）与黑身（b）是一对相对性状，且灰身对黑身为完全显性，控制这对相对性状的基因位于第二号染色体上。用具有这对相对性状的两纯合亲本杂交，性状的遗传行为应符合分离定律。 （2）黑体果蝇的体色为黑色（b），与之相对应的野生型果蝇的体色为灰色（+），灰色对黑色为完全显性，控制这对相对性状的基因位于第二号染色体上；果蝇另一突变性状为焦刚毛（sn），与之对应的野生型性状为直刚毛（+），控制这对相对性状的基因位于第一号染 实验四：果蝇的杂交 姓名：许哲同组者：李永久 班级：生科08级学号：200805140167 实验时间：周二下午 摘要经典遗传学的三大遗传定律分别是：分离定律，自由组合定律和连锁与交换规律。果蝇具有生活史短、繁殖率高、饲养简便等特点，是研究遗传学的好材料，尤其在基因分离、连锁、交换等方面，对果蝇的研究更是广泛而充分。本次通过自行设计实验方案，观察后代中果蝇的各种性状，结合各种统计处理方法，从而证明这三大定律。 1．引言 孟德尔定律是G.J.孟德尔根据豌豆杂交实验的结果提出的遗传学中最基本的定律，包括分离定律和独立分配定律。孟德尔最早选用豌豆，根据从简单到复杂的原则，提出了分离定律和自由组合定律。对之后遗传学的发展奠定了基础。 分离定律（law of segregation）是指在生物的体细胞中，控制同一性状的遗传因子成对存在，不相融合；在形成配子时，成对的遗传因子发生分离，分离后的遗传因子分别进入不同的配子中，随配子遗传给后代。其表现在两个具有相对性状的纯种个体进行杂交，F1代全部表现显性个体的性状，F1代自交，F2代出现隐性个体的性状。并且，在理论上，F2代中，显性个体与隐性个体的比例为3:1。孟德尔最初使用豌豆的花色（红花和白花来验证）。理论如图所示： 图一：分离定律图示 自由组合定律（the Law of Independent Assortment）是指非同源染色体上的决定不同对性状的基因在形成配子时等位基因分离，不同对基因（非等位基因）之间互不干扰，其实质是F1产生配子时，等位基因分离，非同源染色体上的非等位基因自由组合。最初由孟德尔在做两对相对性状（豌豆的子叶颜色黄色，绿色，圆粒和绉粒）的杂交实验时发现，基因分离比为9:3:3:1。（如图所示） 一、实验目的 了解果蝇的生活习惯，掌握果蝇饲养管理的方法，学习鉴定果蝇的雌雄性别，观察果蝇某些遗传性状。 二、实验原理 果蝇广泛存在于全球温带及热带气候区，在果园、菜市场等地皆可见其踪迹，目前已发现1000多种。果蝇以酵母菌为食，能发酵的水果或植物基质，都可用作果蝇的饲料。 黑腹果蝇，双翅目果蝇属。生活史短，每12天左右即可完成一个世代；饲养容易，以玉米粉等做饲料就可以生长繁殖；繁殖能力强，每只受精的雌蝇可以产卵500个左右；突变型多，突变性状多，多数是形态变异，容易观察；染色体少、个体小，是一种很好的遗传学实验材料，是一种模式生物。 1、果蝇的生活史 果蝇是完全变态昆虫，生活周期可分为4个时期：卵、幼虫、蛹和成虫。最适培养温度为25~30℃。果蝇在25℃时，从卵至蝇需10天左右。由蛹羽化成的成虫，雄性在12小时内为处女蝇，24小时后开始产卵，每天每个成虫可产50-75个卵，10天内最高产卵总股数为400-500个。 卵：白色，椭圆形，长约，前端背面伸出一触丝，附着在食物上。 幼虫：一龄——二龄——三龄，三龄体长4-5 mm，幼虫头尖尾钝，头上有一黑色钩状口器。 蛹：化蛹前三龄幼虫停止摄食，爬到相对干燥的瓶壁上，形成菱形的蛹，形状由淡黄、柔软逐渐硬化为深褐色。 成虫：刚羽化的果蝇虫体较肥大，体表呈半透明，颜色逐渐加深，硬化。 2、果蝇的雌雄鉴别 果蝇是以酵母菌作为主要食料的，因此实验室内凡是能发酵的物质，都可用作果蝇的饲料，常用的饲料油玉米饲料、米粉饲料、香蕉饲料等。 三、动物与器材 黑腹果蝇品系：突变型（三隐性、黑体） 药品：乙醚、酒精、丙酸、酵母粉、琼脂、玉米粉、白糖。 培养箱、高压灭菌锅、电磁炉、解剖镜、搪瓷杯、玻棒、镊子、培养瓶、海绵塞、滤纸、酒精棉球、毛笔、麻醉瓶、白纸板。 四、实验内容 1、果蝇培养基配制 （1）清洁指管，盖上适当大小的瓶塞，置高压灭菌锅内，以121℃，大气压消毒15分钟，冷却备用。 （2）按配方称取培养基各组分。先取一半水加入琼脂于电磁炉上加热溶解，再加入蔗糖煮沸。 （3）取剩余的水将玉米粉调成糊状边搅拌边加入到琼脂糖溶液中，煮沸。（4）待稍冷后加入酵母粉和丙酸，充分调匀、分装（20 ml/管）。 2、果蝇性别鉴定及形状观察 取白纸板平置于桌面，将麻醉的果蝇倒于白纸板上。于解剖镜下进行性状观察，并记录。 五、思考题及注意事项 1、通过对果蝇雌雄个体的鉴别，你认为哪几个特征在鉴别中是主要的？ 答：黑色条纹和性梳。在实体镜下即可清楚地观察到雄蝇的三条条纹（第三条较宽）和雌蝇的五条黑色条纹。肉眼可以观察到性梳为第一对附肢第二小节上的一个小黑点，若用显微镜观察则可以观察到清晰的梳状结构。 相比之下，其他几个特征就不太好观察。首先是体型，在实体镜下很难判断哪个个体体型大或小（放大倍数不同），除非将雌雄蝇一同对比看，而用肉眼基本看不出体型的区别。腹部形状也容易判断错。腹片由于没有特殊眼色，也较难观察数量差别。 2、叙述配制培养基以及果蝇观察时的注意事项。 答：(1)玉米粉一定要先用凉水拌匀后再加热，不能直接倒入加热的培养基中，否则容易聚集成团，不易溶解。配制的培养基容易出现块状，不易于果蝇的利用。 (2)酵母为活性物质，高温易失活。因此应当在培养基冷却到50℃左右时加入到培养基中，切勿将酵母粉加入到培养基中直接煮沸。 (3)将培养基倒入指瓶中时应悬空，不要把培养基沾到指瓶壁上。如不慎沾到，应用酒精棉球擦拭，擦拭过程中注意酒精不要滴到培养基上。 (4)本次观察所用果蝇为已麻醉过的果蝇，应注意如果在观察过程中果蝇醒来，要及时再麻醉，不要让其飞走。 六、实验结果 1、三隐形个体的观察 实验七果蝇的伴性遗传 14级生物技术1班王堽20140322142 一、目的 1、记录交配结果和掌握统计处理方法; 2、正确认识伴性遗传的正、反交的差别。 二、原理 1910年，摩尔根在实验室中无数红眼果蝇中发现了一只白眼雄蝇。让这只白眼雄蝇与野生红眼雌蝇交配，F1全是红眼果蝇。让F1的雌雄个体相互交配，则F2果蝇中有3/4为红眼，l/4为白眼，但所有白眼果蝇都是雄性的。这表明，白眼这种性状与性别相连系，外祖父的性状通过母亲遗传给儿子。这种与性别相连的性状的遗传方式就是伴性遗传。摩尔根等对这种遗传方式的解释是：果蝇是XY型性别决定动物，控制白眼的隐性基因（W）位在X性染色体上，而Y染色体上却没有它的等位基因。如果这种解释是对的，那么白眼雄蝇就应产生两种精子：一种含有X染色体，其上有白眼基因（W），另一种含有Y染色体，其上没有相应的等位基因；F1杂型合子（Ww）雌蝇则应产生两种卵子：一种所含的X染色体，其上有红眼基因（W）；另一种所含的X染色体，其上有白眼基因（W）；后者若与白眼雄蝇回交，应产生1/4红眼雌蝇，l/4红眼雄蝇，1/4白眼雌蝇，l/4白眼雄蝇。实验结果与预期的一样，表明白眼基因（W）确在X染色体上。 果蝇的性染色体有X和Y 两种类型.雌蝇细胞内有2条X染色体,为同配性别(XX),雄蝇为XY是异配性别.性染色体上的基因在其遗传过程中,其性状表达规律总是与性别有关.因此,把性染色体上基因决定性状的遗传方式叫伴性遗传。 果蝇的红眼与白眼是一对由性染色体上的基因控制的相对性状。用红眼雌果蝇与白眼雄果蝇交配，Ｆ１代雌雄均为红眼果蝇，Ｆ１代相互交配，Ｆ２代则雌性均为红眼，雄性红眼：白眼＝１：１；相反用白眼雌果蝇与红眼雄果蝇交配，Ｆ１代雌性均为红眼,，雄性都是白眼，Ｆ１相互交配得Ｆ２代，雌蝇红眼与白眼比例为１：１，雄蝇红眼与白眼比例亦为１：１。由此可见位于性染色体上的基因，与雌雄性别有关系。 伴性遗传可归纳为下列规律： 1. 当同配性别的性染色体（如哺乳类等为XX为雌性，鸟类ZZ为雄性）传递纯合显性基因时，F1雌、雄个体都为显性性状。F2性状的分离呈3显性：1隐性；性别的分离呈1雌：1雄。其中隐性个体的性别与祖代隐性体一样，即1/2的外孙与其外祖父具有相同的表型特征。 2.当同配性别的性染色体传递纯合体隐性基因时，F1表现为交叉遗传，即母亲的性状传递给儿子，父亲的性状传递给女儿，F2中，性状与性别的比例均表现为1：1。 3.存在于Y染色体差别区段上的基因 在进行伴性遗传实验时，也会出现例外个体，即在 B 杂交组合，F1 果蝇杂交实验实验报告 学号: 班级: 日期: 年 月 日果蝇得杂交实验 一、实验目得 1、了解伴性遗传与常染色体遗传得区别; 2、进一步理解与验证伴性遗传与分离、连锁交换定律; 3、学习并掌握基因定位得方法、 二、实验原理 红眼与白眼就是一对相对性状,控制该对性状得基因位于X染色体上,且红眼对白眼就是完全显性。当正交红眼雌蝇与白眼雄蝇杂交时,无论雌雄均为红眼;反交时雌蝇都就是红眼,雄蝇都就是白眼。 三、实验材料与器具 野生型雌蝇雄蝇,突变型雌蝇雄蝇、放大镜、麻醉瓶、毛笔、超净台、乙醚、酒精棉球、酵母、玉米粉、丙酸、蔗糖、琼脂 四、实验流程 配培养基→选处女蝇→杂交(正交,反交)→观察Ｆ１ 五、实验步骤 1、配培养基 2、选处女蝇 在超净台上选取野生型与突变型得雄蝇雌蝇 3、杂交 (1)正交 取红眼雌蝇5个与白眼雄蝇4个,放入培养瓶中(♀)红眼()×(♂)白眼()(2)反交 取红眼雌蝇３个与白眼雄蝇4个,(♀)白眼()×(♂)红眼() 贴上标签,放于恒温箱饲养4、观察并记录 分别将正反交得Ｆ1代用乙醚麻醉,倒在白纸上,分别数红白眼得雌蝇与雄蝇,记录数据。 六、实验结果与分析 在正交实验中,F1代雌雄硬都就是红眼;在反交实验中,雌性都就是红眼,雄性都就是白眼,但也出现了个不该出现得雌性白眼 分析:在伴性遗传中,也有个别例外产生,这就是由于2条X不分离造成得,F1中出现得不该出现得雌性白眼,但就是这种情况极为罕见。 七、注意事项 要经常观察,如果培养瓶内有生霉得,必须将果蝇转移到干净得培养瓶中F １代幼虫出现即可将亲本放出或处死要严格控制温度,偏高得温度或者偏低得温度都可能引起果蝇得 死亡亲本必须就是处女蝇,其原因就是雌蝇生殖器官有受精囊,可以保存交配所得得大量精子,能使交配后卵巢产生得卵受精。在杂交时若不就是处女蝇,其体内已储有另一类型雄蝇得精子,会严重影响实验结果,导致整个实验失败。 在F1代羽化前,一定要将亲本全部清除干净并处死,以免出现回交现象,影响结果果蝇得麻醉要适当,掌握好麻醉时间,麻醉过度会使果蝇直接死亡取果蝇得时候用毛笔,避免用其她锋利得器具,避免戳伤果蝇,影响生长繁育八、个人总结 第一次饲养果蝇,开始时感觉这么复杂与漫长得实验就是一个很大得担心,除此之外还有对于果蝇这种实验动物得畏惧也就是一个小小得障碍、但就是通过配培养基与随后得杂交等一系列得实验过程,我们越来越熟悉操作,感觉越来越得心应手。其实果蝇很干净,也很好饲养,更不烦人,渐渐地我们开始有些享受这一个长时间得实验,同时也在心里默默得感谢我们饲养得果蝇短暂得生命给我们带来得成果。实验过程长,要求也高。通过自己得全力以赴与与同伴得合作,我们最终完成了实验,我对自己得实验技能更加有信心,也体会到合作就是一件多美好得事情。另外还要真心得感谢邵老师与其她为我们实验前前后后付出辛劳得老师,在我们开始试验之前,您们已经为我们做了很多保证我们实验得成功与减轻我们得负担,实验过程中,还要随时回答我们无休止得奇怪问题,但老师始终都很 实验四果蝇的伴性遗传 PB12210261 徐导 中国科学技术大学生命科学学院 【摘要】 果蝇（Drosophila melanogaster）是研究遗传学的经典材料，因为它容易采集、培养；它繁殖率高，生活周期短，一般10－14天能繁殖一代；它的染色体数目是2n=8。本实验选取果蝇为实验材料了解其饲养条件，性状识别，观察完成伴性遗传的研究。 【关键词】 果蝇伴性遗传 【Abstract】 Drosophila melanogaster is a classic material of studying genetics. Firstly, it is easy for us to collect and to feed. Secondly, as we all know, Drosophila melanogaster has a 2n number of 8, which means we could easy to observe it, furthermore, it also has numerous of gene mutations. Finally, its biocycle is very short，therefore it can generate a generation in only 10-14 days. In this experiment we performed the Sex linked inheritance in Drosophila melanogaster. 【Key words】 Drosophila melanogaster Sex linked inheritance 【前言】 位于性染色体上的基因叫作伴性基因，其遗传方式与位于常染色体上的基因有一定差别，它在亲代与子代之间的传递方式与雌雄性别有关，伴性基因的这种遗传方式称为伴性遗传（sex-linked inheritance）。果蝇的染色体有X和Y两种，雌性是XX，为同配性别；雄性是XY，为异配性别。伴性基因主要位于X染色体上，而Y染色体上没有相应的等位基因，所以这类遗传也叫X—连锁遗传。【实验部分】 一、实验目的 1、正确认识伴性遗传的正、反交的差别，进一步认识伴性遗传的特点。 2、记录杂交结果，掌握统计处理方法。 3、认识黑腹果蝇的形态学特征，观察果蝇的生活史。 4、正确认识伴性遗传的正、反交的差别，对伴性遗传的特点有感性认知。 5、通过对结果的观察记录，掌握实验的统计学处理方法。 二、基本原理 位于性染色体上的基因叫作伴性基因，其遗传方式与位于常染色体上的基因有一定差别，它在亲代与子代之间的传递方式与雌雄性别有关，伴性基因的这种遗传方式称为伴性遗传（sex-linked inheritance）。 果蝇的染色体有X和Y两种，雌性是XX，为同配性别；雄性是XY，为异配性别。伴性基因主要位于X染色体上，而Y染色体上没有相应的等位基因，所以这类遗传也叫X—连锁遗传。 果蝇的红眼与白眼是一对相对性状，由单基因控制，位于X染色体上，基因之间的关系为红眼对白眼完全显性。当红眼果蝇（♀）和白眼果蝇（♂）杂交，F 1代中的果蝇均为红眼，F 代中红眼果蝇∶白眼果蝇=3∶1，但在雌果蝇中全为红 2 代中的雌果蝇为红眼，眼，在雄果蝇中红眼果蝇∶白眼果蝇=1∶1。当反交时，F 1 果蝇杂交实验——验证遗传学三大定律 1 实验目的： 1.1 通过对果蝇的一对相对性状的杂交试验，观察性状的显、隐性关系及其在后代中的 分离现象，验证孟德尔的第一定律——分离定律。 1.2 通过对果蝇两对相对性状的杂交试验，验证孟德尔第二定律：自由组合定律。 1.3 通过位于果蝇性染色体的基因控制的性状的杂交试验，验证遗传学第三个规律：连锁遗传。并了解伴性遗传与非伴性遗传的区别以及掌握伴性基因在正、反交中的差异。 2 实验原理 2.1 果蝇的生活史： 果蝇的生活周期长短与温度有密切关系。一般来说，30℃以上温度能使果蝇不育或死亡，低温能使生活周期延长，生活力下降，饲养果蝇的最适温度为20～25℃。 生活周期长短与饲养温度的关系 果蝇在25℃时，从卵到成蝇需10天左右，成虫可活26～33天。果蝇的生活史如下： 雌蝇→减数分裂→卵 受精 雄蝇→减数分裂→精子 羽化（第八天） （可活26～33天）产第一批卵 蛹（第四天） 第二次蜕皮第一批卵孵化 （第二天）（第零天） 第一次蜕皮幼虫 （第一天） 果蝇的生活周期和各发育阶段的经过时间 2.2 果蝇的性别及突变性状的鉴别： 果蝇的每一体细胞有8个染色体（2n=8），可配成4对，其中3对在雌雄果蝇中是一样的，称常染色体。另外一对称性染色体，在雌果蝇中是XX，在雄蝇中是XY。 果蝇的雌雄在幼虫期较难区别，但到了成虫期区别相当容易。雄性个体一般较雌性个体小，腹部环纹5条，腹尖色深，第一对脚的跗节前端表面有黑色鬃毛流苏，称性梳 （Sex combs）。雌性环纹7条，腹尖色浅，无性梳。 实验中选用的果蝇突变性状一般都可用肉眼鉴定，例如红眼与白眼，正常翅与残翅等。而另一些性状可在解剖镜下鉴定，如焦刚毛与直刚毛等。现列表如下： 实验中使用的果蝇突变品系 2.3 黑体果蝇的体色为黑色（b），与之相对应的野生型果蝇的体色为灰色（+），灰色对 黑色为完全显性，控制这对相对性状的基因位于第二号染色体上。用具有这对相对性状的两纯合亲本杂交，性状的遗传行为应符合分离定律。 2.4 黑体果蝇的体色为黑色（b），与之相对应的野生型果蝇的体色为灰色（+），灰色对 黑色为完全显性，控制这对相对性状的基因位于第二号染色体上；残翅（Vg）与野生型的正常翅果蝇为一对相对性状，控制这对相对性状的基因位于第二号染色体上，残翅对正常翅为完全显性。用具有这两对相对性状的纯合亲本杂交，其性状的遗传行为应符合自由组合定律。 2.5 生物某些性状的遗传常与性别联系在一起，这种现象称为伴性遗传（sex-linked inheritance），这是由于支配某些性状的基因位于性染色体上。果蝇属XY型生物，共有四对染色体，第一对为性染色体，其余三对为常染色体。雌果蝇的性染色体构型为XX，、雄果蝇为XY。控制果蝇眼色的基因位于X染色体上，在Y染色体则没有与之相应的等位基因。将红眼（+）果蝇和白眼（w）果蝇杂交，其后代眼色的表现与性别有关。而且，正反交的结果不同。 3 实验材料 3.1 四种类型的果蝇： 野生型果蝇（+）；残翅型果蝇Vg；黑檀体果蝇e；白眼型果蝇w 3.2 实验用具、药品 双筒解剖镜，镊子，解剖针，毛笔，白瓷板，吸水纸，培养箱，灭菌锅饲养瓶（指管），麻醉瓶，棉花，培养基等。 3、3试剂：乙醚，酒精，丙酸，琼脂，玉米粉，酵母粉，蔗糖，蒸馏水 4 实验步骤 4.1制作果蝇培养基 1）玉米饲料： i)取100ml水，加入1.5g琼脂，煮沸，使充分溶解，加蔗糖13g，煮沸溶解。 ii)取100ml水混和17g玉米粉，加热，调成糊状。 iii)将上述两者混和，煮沸。以上操作都要搅拌，以免沉积物烧焦。 iv）待稍冷后加入酵母粉1.4g及丙酸1ml，充分调匀，分装。按附表用量配制，可得饲料200毫升左右。 丙酸的作用是抑制霉菌污染，用量参照附表，每200毫升饲料约加1毫升左右。如无酵母粉，也可用酵母液代替，但用法不同。若用酵母菌液则在饲料分装到培养瓶中以后再加入，每瓶加数滴。 生命与环境科学学院实验报告 实验课名称遗传学实验实验名称果蝇综合实验成绩______________ 姓名王大锤实验报告系列年级学号组别时间温度 实验原理及目的 实验目的 1、掌握果蝇采集和饲养方法，了解果蝇的生活史； 2、掌握雌雄果蝇成虫的特征及性别鉴定方法； 3、掌握果蝇唾腺染色体的制备方法，熟悉其结构特征，理解其形成原因。 实验原理 1、生物学特征 果蝇（Drosophila melanogaster)，昆虫纲，双翅目，果蝇属，2n=2x=8 果蝇雌雄异体，幼虫期区分较难，成虫区别容易。 雄性的腹部环纹5节，末端钝而圆，颜色深。第一对跗节前端表面有性梳。 雌虫腹部环纹7节，末端尖，附节前端无性梳。 生活史（完全变态）：卵→幼虫→蛹→成虫。 2、唾腺染色体的特征 双翅目类昆虫（摇蚊、果蝇等）幼虫形成后，唾腺细胞数目不变，但染色体进行核内有丝分裂，染色单体数量增加，幼虫越大增加的量越大，最多一条染色体有5000条染色单体，所以称为多线染色体。 多线染色体处于间期，未高度螺旋化，经染色后，出现深浅不同、密疏各异的横纹，这些横纹的数目和位置往往是恒定的，代表着果蝇等昆虫的种的特征。如染色体的缺失、重复、倒位、易位等，容易在唾腺染色体上识别。 实验材料、仪器及试剂 仪器： 广口瓶（带棉塞、一个含有果蝇玉米粉饲料），解剖针，镊子，载玻片及盖坡片若干、显微境 材料： 用于采集果蝇的水果（皮），采集后、自己饲养的果蝇 试剂及其他： 乙醚，1%醋酸洋红，生理盐水，果蝇玉米粉饲料 实验步骤 （一）果蝇的采集 将腐烂的香蕉皮或其他含糖量高的水果装在广口瓶内，用一层白纸封口，在纸上开几个小洞，吸引果蝇进入。若将广口瓶置水果摊附近，更易采到果蝇。 （二）果蝇的饲养 将采集到的果蝇转入含有玉米粉饲料的广口瓶内（注意雌雄果蝇至少3对），室温下培养，观察并记录果蝇的生活史。 （三）果蝇的雌雄识别 1、果蝇麻醉：将果蝇成虫转至一个新的广口瓶内，在棉塞上滴几滴乙醚后迅速盖上，注意摇动广口瓶使乙醚在瓶内充分扩散。果蝇对乙醚很敏感，易麻醉。麻醉程度因需要而异，当翅膀外展45°表示已死亡。 2、成虫观察：腹部特征肉眼即可看到，性梳(♂)可在低倍境下观察。 （四）果蝇的杂交 目的：验证孟德尔定律（一、二）和伴性遗传规律。 过程：1、原种选择—纯合亲本，处女蝇挑选（成虫8h内） 2、杂交：麻醉，3～5对，20℃～25℃培养 3、根据生活史计算F1、F2的性状的数量，统计分析。 （五）果蝇唾腺染色体的制备 1、取一头三龄幼虫至干净的载玻片上，加一滴生理盐水，若虫体带有少量培养基则将其洗净。幼虫具一钝尾和带黑色口器的尖头端。 三龄幼虫是最大的幼虫，行动迟缓，贴壁，或在培养基表面爬行。 2、两手各握一把解剖针，左手的解剖针压住幼虫的后端1/3-1/2处，固定幼虫。右手的解剖针按住幼虫的头部，用力向右拉，把头部从身体拉开，唾腺随之而出，唾腺是1对透明的棒状腺体。 显微镜下，唾腺呈透明状态，由几十个单层细胞构成，细胞形状不规则，轮廓清晰，细胞核大。与脂肪体伴生存在。 3、在载玻片上除去幼虫其他组织部分，最好把唾腺周围的白色脂肪体剥离干净。 果蝇唾腺染色体的制备 果蝇的杂交 果蝇的雌雄识别 果蝇的饲养 果蝇的采集 图1雌雄果蝇对比 传学设计性实验报告 实验名称果蝇杂交实验 学院生命科学学院 专业生物技术 班级名称 学生姓名 学号 任课教师 完成日期2015年11月15日 教务处制 1前言 1.1 实验目的 通过实验验证分离规律、自由组合规律、伴性遗传和连锁互换规律，掌握果 蝇杂交的实验技术和基因定位的三点测验方法，在实验中熟练运用生物统计的方法对实验数据进行分析。 1.2 实验原理 果蝇（fruit fly）是双翅目（Diptera）昆虫，属果蝇属（genus Drosophila），约有3000多种，我国已发现800多种。大部分的物种以腐烂的水果或植物体为食，少部分则只取用真菌，树液或花粉为其食物。以果蝇作为遗传学研究的材料，利用突变株研究基因和性状之间的关系已近一百年，至今，各种研究遗传学的工具已达完善的地步，果蝇对今日的遗传学的发展有其不可磨灭的贡献；从1980年初，Drs. C. Nesslein-Volhard和E. Weichaus以果蝇作为发育生物学的模式动物，利用其完备的遗传研究工具来探讨基因是如何调控动物体胚胎的发育，也带动了其它模式生物（线虫、斑马鱼、小鼠和拟南芥等）的研究，且有非常具体的成果。 通常用作遗传学实验材料的是果蝇。用果蝇作为实验材料有许多优点： ⑴饲养容易。在常温下，以玉米粉等作饲料就可以生长，繁殖。 ⑵生长迅速。十天左右就可完成一个世代，每个受精的雌蝇可产卵400～500个，因此在短时间内就可获得大量的子代，便于遗传学分析。 ⑶染色体数少。只有4对。 ⑷唾腺染色体制作容易。横纹清晰，是细胞学观察的好材料。 ⑸突变性状多，而且多数是形态突变，便于观察。 果蝇的性别及突变性状的鉴别： 果蝇的每一体细胞有8个染色体（2n=8），可配成4对，其中3对在雌雄果蝇中是一样的，称常染色体。另外一对称性染色体，在雌果蝇中是XX，在雄蝇中是XY。 果蝇的雌雄在幼虫期较难区别，但到了成虫期区别相当容易。雄性个体一般较雌性个体小，腹部环纹5条，腹尖色深，第一对脚的跗节前端表面有黑色鬃毛流苏，称性梳（Sex combs）。雌性环纹7条，腹尖色浅，无性梳。 实验中选用的果蝇突变性状一般都可用肉眼鉴定，例如红眼与白眼，正常翅与残翅等。 2 实验材料 2.1果蝇品系 正交：2#（雌）×6＃（雄）反交：2#（雄）×6＃（雌） 2.2实验用具、药品 显微镜、培养瓶、棉塞、量筒、麦片、玉米粉、蔗糖、琼脂粉、丙酸、乙醚等 3实验方法 3.1、果蝇的饲养 3.1.1 培养基的配制（以100ml量为例） 70ml水 + 0.85g琼脂 + 果蝇综合大实验 The Standardization Office was revised on the afternoon of December 13, 2020 生命科学学院 遗传学 实 验 报 告 组员: 杨朝雄 () 张晓旭 () 赵慧佳（）杨明月（） 徐聪（）吴燕 () 张玮（） 单因子、双因子杂交、伴性遗传和三点测交实验 一、实验目的： 1、通过对果蝇的杂交实验，正确理解分离定律的实质，并验证与加深理解三个的遗传规律。 2、认识伴性遗传的正、反交差别，掌握伴性遗传的特点。 3、掌握绘制遗传学图的原理和方法，加深对重组值、遗传学图、双交换、并发率和干涉等概念的理解。 4、掌握果蝇的杂交技术，并学会记录交配结果和掌握统计处理的方法。 二、实验器材： 1、材料： 6号果蝇（灰体白眼短翅卷刚毛）和26号果蝇（黑檀体红眼长翅直刚毛） 2、试剂：乙醇、乙醚、果蝇培养基等 3、器具：麻醉瓶、酒精灯、白瓷板、毛笔、镊子、培养管、棉球等 三、实验原理： 果蝇具有生活史短、繁殖率高、饲养简便、染色体数目少（2n=8）和突变性状多等特点，是研究遗传学的好材料。本次设计实验就是利用果蝇进行一系列的遗传学验证实验和染色体基因相对顺序和距离的测定。 1、双因子杂交： 果蝇的灰体基因（E ）与黑檀体基因（e ）为一对相对性状，而长翅与短翅为另一对相对性状。这两对基因是没有连锁关系的，位于不同染色体上的非等位基因。 因此非同源染色体的这两对非等位基因可以很好的验证自由组合定律。 自由组合规律：位于非同源染色体上的两对非等位基因，其杂合体在形成配子时，等位基因彼此分离，进入不同的配子中，非等位基因可自由组合进入同一配子，结果产生4种比例相等的配子。若显性完全， F1自交产生F2代表现出4种表型，比例为3：3：1：1。 双因子杂交的遗传规律： 双因子杂交正交 6♀×26♂ 2、伴性遗传： 位于性染色体上的基因叫作伴性基因，其遗传方式与位于常染色体上的基因有一定差别，它在亲代与子代之间的传递方式与雌雄性别有关，伴性基因的这种遗传方式称为伴性遗传。 果蝇的红眼与白眼是一对相对性状，由单基因控制，位于X 染色体上，基因之间的关系为红眼对白眼完全显性。当白眼果蝇（♀）和红眼果蝇（♂）杂交，F1代中的雌果蝇为红眼，雄果蝇却为白眼。F2代中红眼果蝇∶白眼果蝇=1∶1，在雌果蝇或雄果蝇中红眼果蝇与白眼果蝇的比例均为1∶1。 伴性遗传的遗传规律： 灰长 黑短 F1 灰长 F2: 灰长：灰短：黑长：黑短=3：3：1：1 X w X w X +Y ♂白眼 ♀红眼遗传实验报告6_果蝇开放实验-图距的测量
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