第十章 紫外—可见分光光度法
一、选择题
1.所谓真空紫外区,所指的波长范围是( )。
A 、200~400nm
B 、400~800nm
C 、1000nm
D 、100~200nm
2.在紫外可见分光度计中,用于紫外光区的光源是( )
A 、钨灯
B 、卤钨灯
C 、氘灯
D 、能斯特灯
3.指出下列化合物中,哪个化合物的紫外吸收波长最大( )
A 、CH 3CH 2CH 3
B 、CH 3CH 2OH
C 、 CH 2=CHCH 2CH =CH 2
D 、 CH 3CH =CHCH =CHCH 3
4.符合比耳定律的有色物质溶液稀释时,其最大吸收峰的波长位置( )
A 、向长波方向移动
B 、不移动,但峰高值降低
C 、向短波方向移动
D 、不移动,但峰高值增大
5.下列化合物中,同时有n→л﹡、л→л﹡、 σ→σ﹡跃迁的化合物是( )
A 、一氯甲烷
B 、丙酮
C 、 l ,3丁二烯
D 、甲醇
6.双光束分光光计与单光束分光光计相比,其突出的优点是( )
A 、扩大波长的应用范围
B 、可以采用快速响应的监测系统一
C 、可以抵消吸收池所带来的误差
D 、可以抵消因光源强度的变化而产生的误差
7.某化合物入max (正己烷为溶剂)= 329nm ,入max (水为溶剂)= 305nm ,该跃迁类型为( )
A 、n→л﹡
B 、л→л﹡
C 、σ→σ﹡
D 、 n→σ﹡
8.丙酮在乙烷中的紫外吸收λmax =279nm ,ε=14.8,此吸收峰由( )能级跃迁引起的。
A 、n →л﹡
B 、л→л﹡
C 、n →σ*
D 、σ→σ*
9.下列四种化合物中,在紫外光区出现两个吸收带的是( )
A 、乙烯
B 、l ,4一戊二烯
C 、1,3一丁二烯
D 、丙烯醛
10.助色团对谱带的影响是使谱带( )
A 、波长变长
B 、波长变短
C 、波长不变
D 、谱带蓝移
11.某物质在给定波长下的摩尔吸光系数(ε)很大,则表明( )
A 、物质对该波长光的吸收能力很强
B 、物质的摩尔浓度很大
C 、光通过物质溶液的光程长
D 、物质的摩尔质量很大
12.符合比耳定律的溶液稀释时,其浓度、吸光度和最大吸收波长的关系为( )
A 、减小,减小,减小
B 、减小,减小,不变
C 、减小,不变,减小
D 、减小,不变,增加
13.下列叙述正确的是( )
A 、透光率与浓度成线性关系
B 、一定条件下,吸光系数随波长变化而变化
C 、浓度相等的x ,y 两物质,在同一波长下,其吸光度定相等
D 、质量相等的x ,y 两物质,在同一波长下,其吸光系数一定相等
14.吸光性物质的摩尔吸光系数与下列( )因素有关。
A 、比色皿厚度
B 、该物质浓度
C 、吸收池材料
D 、入射光波长
15.下列说法中正确的是( )。
A 、Beer 定律,浓度c 与吸光度A 之间的关系是一条通过原点的直线
B 、Beer 定律成立的必要条件是稀溶液,与是否单色光无关
C 、E 1cm
1%称比吸光系数,是指用浓度为1%(质量浓度)的溶液,吸收池厚度为lcm 时的吸收值
D 、同一物质在不同波长处吸光系数不同,不同物质在同一波长处的吸光系数相同
16.在乙醇溶剂中,某分子的K 带计算值λmax 为385nm ,λmax 测定值为388nm ,若改用二氧六环及水为溶剂,λmax 的计算值估计分别为( )。已知在二氧六环和水中的λmax 校正值 分别为-5和+8。
A 、二氧六环中390nm ,水中377nm
B 、二氧六环中380nm ,水中393nm
C 、二氧六环中383nm ,水中396nm
D 、二氧六环中393nm ,水中380nm
17.下列化合物中,( )不适宜作紫外光谱测定中的溶剂。
A 、甲醇
B 、苯
C 、碘乙烷
D 、正丁醚
18.在紫外-可见分光光度分析中,极性溶剂会使被测物的吸收峰( )。
A 、消失
B 、精细结构更明显
C 、位移
D 、分裂
19.在紫外一可见分光光度法的多组分定量中,用等吸收双波长消去法测定a 和b 二元组分,若只测定组分a ,消除b 组分的干扰吸收,则λ1和λ2波长的选择应该是( )。
A 、在组分a 的吸收光谱曲线上选择A λ1=A λ2
B 、在组分b 的吸收光谱曲线上选择A λ1=A λ2
C 、分别在组分a 和组分b 的吸收光谱曲线上选择A
a max 和A
b max 作为A λ1和A λ2
D 、可任意选择A λ1和A λ2
20.分光光度计测量有色化合物的浓度相对标准偏差最小时的吸光度为 ( )。
A 、0.368
B 、0.334
C 、0.443
D 、0.434
21.已知KMn04的相对分子质量为158.04,ε545mn
=2.2×103,今在545nm 处用浓度为0.0020%、KMn04
溶液,3.00cm 比色皿测得透光率为( )。 A 、15% B 、83% C 、25% D 、53%
22.某有色溶液,当用lcm 吸收池时,其透光率为T ,若改用2cm 吸收池,则透光率应为( )。
A 、2T
B 、21gT
C 、T
D 、T 2
23.某被测物质的溶液50mL ,其中含有该物质1.0mg ,用1.0cm 吸收池在某一波长下测得百分透光率为10%,则百分吸光系数为( )。
A 、1.0 × 102
B 、2.0 ×102
C 、5.0×102
D 、1.0×103
24.有A 、B 两份不同浓度的有色溶液,A 溶液用1.0cm 吸收池,B 溶液用3.0cm 吸收池,在同一波长下测得的吸光度值相等,则它们的浓度关系为( )。
A 、A 是
B 的1/3 B 、A 等于B
C 、B 是A 的3倍
D 、B 是A 的1/3
25.双波长分光光度计与单波长分光光度计的主要区别在于( )
A 、光源的种类
B 、检测器的个数
C 、吸收池的个数
D 、使用单色器的个数。
26.双波长分光光度计的输出信号( )
A 、试样吸光度与参比吸光度之差
B 、试样在两波长处的吸光度之差
C 、试样在两波长处的吸光度之和
D 、试样吸光度与参比吸光度之差
27.在光度分析中,参比溶液的选择原则是( )
A 、通常选用蒸馏水
B 、通常选用试剂溶液
C 、根据加入试剂和被测试液的颜色、性质来选择
D 、通常选用褪色溶液
28.在光度分析中若采用复合光,工作曲线会发生偏离,其原因是( )
A 、光强度太弱
B 、光强度太强
C 、有色物质对各光波的摩尔吸光系数相近
D 、有色物质对各光波的摩尔吸光系数相差较大
29.在分光光度法中,测得的吸光度值都是相对于参比溶液的,是因为( )
A 、吸光池和溶液对入射光有吸收和反射作用
B 、入射光为非单色光
C 、入射光不是平行光
D 、 溶液中的溶质产生离解、缔合等化学反应
30.不能用做紫外-可见光谱法定性分析参数的是( )
A 、最大吸收波长
B 、吸光度
C 、吸收光谱的形状
D 、吸收峰的数目
二、填空题
1.Lambert -Beer 定律是描述-------与---------和--------的关系,它的数学表达式为----------。
2.异丙叉丙酮CH 3COCHC (CH 3)2分子中的n→л﹡跃迁在氯仿中的吸收波-------于在甲醇中的吸收波长。
3.紫外分光光度法中的增色效应指------------,减色效应指---------------。
4.紫外-可见分光光度法定性分析的重要参数是---------和--------;定量分析的依据是--------。
5.在不饱和脂肪烃化合物分子中,共轭双键愈多,吸收带的位置长移愈多,这是由于--------。
6.可见-紫外分光光度计的光源,可见光区用---------,吸收池可用--------------材料的吸收池,紫外光区光源用----------灯,吸收池必须用-----------------材料的吸收池。
7.丙酮分子的紫外吸收光谱上,吸收带是由分子的---------结构部分的---------跃迁产生的,
它属于--------吸收带。
8.在紫外吸收光谱中,K 带由于共轭---------跃迁产生,R 带由于---------跃迁产生。
9.在极性溶剂中,n→л﹡跃迁的能量变化△E ,比在非极性溶剂中的△E --------,使吸收峰峰位产生----------移,而л→л﹡跃迁的能量变化△E 比在非极性溶剂中的△E-----------,而使吸收峰位向----------移动。
10.分光光度法的定量原理是--------定律,它的适用条件是--------和---------,影响因素主要有------------、--------------。
11.可见-紫外分光光度计的主要部件包括---------、---------、------------、-------和----------五个部分。在以暗噪音为主的检测器上,设△T =0.5%,则吸收度A 的测量值在----------之间,由于测量透光率的绝对误差,使结果相对误差△C /C 的值较小。
12.比尔定律为A = EC l ,其中C 代表--------,l 代表---------, E 代表----------。当 C = 1g /100ml ,l = 1cm 时,这时的吸光度应称为--------。.
13.在分光光度法中,通常采用----------为测定波长。此时,试样浓度的较小变化将使吸收度产生---------变化。
14.吸光光度法中,吸收曲线描绘的是---------和---------间的关系,而工作曲线表示了----------和-----------间的关系。
15.在吸收光谱上,一般都有一些特征值:--------叫吸收峰,---------谷,--------------叫肩峰 ----------叫末端吸收。
三、简答题
1.紫外吸收光谱中的主要的吸收带类型及特点是什么?
2.什么叫选择吸收?它与物质的分子结构有什么关系?
3.电子跃迁有哪几种类型?跃迁所需的能量大小顺序如何?具有什么样结构的化合物产生紫外吸收光谱?
4.紫外吸收光谱中,吸收带的位置受哪些因素影响?
5.紫外-可见分光光度法的定量分析中,误差的来源有几个方面?如何避免?
四、计算题
1.卡巴克洛(安络血)的相对分子质量为236,将其配成每100mL 含0.4962mg 的溶液,
盛于lcm 吸收池中,在λmax 为355nm 处测得A 值为0.557。试求卡巴克洛的E 1cm
1% 及ε值。
2.称取维生素C 0.0500g 溶于100mL 0.005mol/L 的硫酸溶液中,再准确量取此溶液2.00mL 定容至lOOmL 容量瓶中。取此溶液于lcm 吸收池中,在λmax 为245nm 处测得A 值为0.551。求样品中维生素C 的质量分数。(已知在245nm 处E 1cm
1%=560) 3. 取1.000g 钢样溶解于HN03,其中的锰用碘酸钾氧化成KMn04并稀释至100mL ,用1.00cm 吸收池在波长545nm 处测得此溶液的吸光度为0.700。用1.52×lO -4mol /L 的KMn04溶液作为标准,在同样条件下测得吸光度为0.350,计算钢样中锰的质量分数。(M Mn =54.94)
4.精密称取安定样品14.40mg 于100mL 容量瓶中,在用0.5%H 2S04-甲醇溶解,并稀释至刻度,摇匀。精确吸取10.00mL 上述溶液,稀释至刻度。取该溶液在284nm 处,
用lcm 吸收池测得吸光度A 值为0.642,已知摩尔吸光系数为1.30×104,试求安定的E 1cm
1%及样品中安定的质量分数。(M=284.8)。
5.将2.481mg 的某碱(BOH)的苦味酸(HA)盐溶于100mL 的乙醇中,在lcm 的吸收池中测得其在380nm 处吸光度为0.598。已知苦昧酸的相对分子质量为229,求该碱的相对分子质量。(已知其摩尔吸光系数为2.00×104)
6.金属离子M +与配位剂X -形成络合物MX ,其他种类络合物的形成可以忽略,在350nm 处MX 有强烈吸收,溶液中其他物质的吸收可忽略不计。含0.000 500mol /L M +和0.200mol /L X -的溶液,在350nm 和lcm 比色皿中,测得吸光度为0.800;另一溶液由0.000 500mol /L M +和0.0250mol /L X -组成,在同样条件下测得吸光度为0.640。设前一种溶液中所有M +均转化为络合物,而在第二种溶液中并不如此,试计算MX 的稳定常数。
7.含有Fe 3+的某药物溶解后,加入显色剂KSCN 生成红色络合物,用1.00cm 吸收池在420nm 波长处测定,已知该化合物在上述条件下ε=1.8×104,如该药物含铁约为0.5%,现欲配制50mL 试液,测定时再稀释10倍,为使测定结果相对误差最小,应称量药物多少克?(M Fe =55.85)
8.精密称取0.0500g 样品,置250mL 容量瓶中,加入0.02ml /L HCl 溶解,稀释至刻度。准确吸取2.00mL ,稀释定容至100mL 。以0.02mol /L HCl 为空白,在263nm 处用lcm 吸收池测得透光率为41.7%,其ε为1.20×104,被测物摩尔质量为100.0g /mol 。
试计算263nm 处的E 1cm
1%和样品的质量分数。 9.用分光光度法测定铜的有色络合物,其摩尔吸光系数为2.00×105。试液中铜离子浓度在5.0×10-7~5.00×10-6mol /L 范围内,使用lcm 吸收池进行测量,吸光度和透光率的范围如何?若光度计的透光率读数误差△T 为0.005,可能引起的浓度测量相对误差为多少?
10.精密称取维生素B 12标准品20.0mg ,加水准确稀释至1000mL ,将此溶液置厚度为lcm 的吸收池中在λ=361nm 处测得其吸光度值为0.414,另有两个样品,一为维生素B 12的原料药,精密称取20.0mg ,加水准确稀释至1000mL ,同样在l=1cm ,λ=361nm 处测得其吸光值为0.400。另一为维生素B 12注射液,精密吸取1.00mL ,稀释至10.0mL ,在1=lcm ,λ=361nm 处测得其吸光值为0.518。试分别计算维生素B 12原料药的质量分数及注射液的标示量(mg /mL)。
参考答案
一、选择题
1.A 2.C 3.D 4.B 5.B 6.D 7.A 8.A 9.D 10.A
11.A 12.B 13.B 14.D 15.A 16.B 17.C 18.C 19.B 20.D
21.A 22.D 23.C 24.D 25.D 26.B 27.C 28.D 29.A 30.B
二、填空题
1. 吸光度;浓度;光程;A=KC l
2. 大
3. 由于化合物结构改变或其他原因,使吸收带强度增大的效应;由于化合物结构改变或其
他原因,使吸收带强度减少的效应
4. 最大吸收波长;相应的吸光系数;Lambert -Beer 定律
5. 共轭双键愈多,л→л﹡跃迁所需的能量越小
6. 钨或卤钨;光学玻璃;氢或氘;石英
7. 羰基;n→л﹡;R
8. л→л﹡;n→л﹡
9. 大;短(蓝);小;长波方向
10.朗伯-比尔定律;稀溶液;单色光;化学因素;光学因素
11.光源;单色器;吸收池;检测器;信号处理和显色器;0.2-0.7
12.被测物浓度;比色皿厚度;吸光系数;百分吸光系数
13.λmax ;较小
14.波长;吸光度;浓度;吸光度
15吸光度最大处;峰与峰之间吸光度最小处;一个吸收峰旁边产生的一个曲折;图谱短波端强吸收而不成峰形
三、简答题
1.紫外吸收光谱中的主要的吸收带有R 、K 、B 、E 带及电荷迁移跃迁、配位场跃迁产生的吸收带等。
R 带:处于较长波长范围,弱吸收,摩尔吸光系数值一般在100以内。
K 带:摩尔吸光系数值一般大于104 ,为强带。
B 带:芳香族化合物的特征吸收带,苯蒸气在230~270nm 处出现精细结构的吸收峰。苯溶液谱带较宽。
E 带:芳香族化合物的特征吸收带,分为E 1和E 2,都属于强带吸收。
电荷迁移跃迁:强度大,ε一般大于104。
配位场跃迁:吸收一般位于可见光区,强度较小。
2.略
3.电子跃迁有σ→σ* 、л→л﹡、n →л﹡、n →σ* 类型。
四种类型跃迁所需能量σ →σ* >n →σ*≥л→л﹡>n →л﹡
有机化合物分子结构中含有л→л﹡或n →л﹡跃迁基团,能在紫外-可见光产生光谱。
4. 紫外吸收光谱中,吸收带的位置受分子结构因素和测定条件等因素影响。如空间位阻、
跨环效应、溶剂效应和pH 的影响。
5.略
四、计算题
1.解 A= E
1cm 1%c l E 1cm 1%=cl A =1
104962.0557.3??-o =1123≈1.12×103 ε=10M ×E 1cm 1%=10
236×1123=2.65×104
2.解 c(x)=100
05.0×2.00= 0.001 00(g /lOOmL) A(s)= E
1cm 1%(s) c l =560×0.001 00×1=0.560 ω样品=)()(s c x c ×100%=560
.0551.0×100%=98.4% 3.在相同条件下测定样品和标准品的吸光度A1和A2,ε和1值相同,可以消去,故 2
121
c c A A = c 1=350
.01052.1700.04
221-??=?A c A =3.04×10-4(mol/L)=[KMnO4]=[Mn] ωMn =000
.194.54101001004.3%1003411????=???--样品m M V c Mn =0.167% 4.解 E 1cm 1% =ε×8
.284101030.1104??=M =456.5≈457 E 样=
100101040.14642.03??=-l c A 样样
= 445.8 %7.971005
.4568.445100=?=?=标样安定E E ω 5.解 BOH + HA → BA + H 2O
ε= E 1cm 1%×10
M 2.00×104 =1012291
10481.2598.03B +-???- B=602
M = BOH = 602+17= 619
6.解 A=εc l ε=1
000500.0800.011?=l c A =1600
c 2=1
1600640.02?=l A ε=0.000400 K 稳=)
000400.00250.0()000400.0000500.0(000400.0]][[][-?-=X M MX =162.6≈163 7.解 当A=0.434时,测定结果的相对误差最小
c=1
1080.1434.04??=l A ε=2.411×10-5(mol/L) 1000
105010411.285.55%5.05???=?-m m =0.135(g)
8. 解 A=﹣lgT=﹣lg0.417 = 0.380
E 1cm 1% =3102.1100
.1001200010?=?=?M ε ω样 =%1000500
.02250100110011020.1380.0%1000500.0225010011003??????=????El A =79.2% 9.解 A 1=εC 1l =2.00×105×5.00×10-7×1=0.100
A 2=εC 2l =2.00×105×5.00×10-6×1=1.00
T 1=10-A =10-0.100=0.794
T 2=10-1.00=0.100
计算表明:吸光度范围为0.100~1.00,相应的透光率范围为0.794~0.100 c
c ?=794.0lg 794.0005.0434.0lg 434.0??=?T T T = -0.0273 = -2.73% c
c ?=100.0lg 100.0005.0434.0lg 434.0??=?T T T = -0.0217 = -2.17% 10.解 E 1cm 1% = cl A =11001000
100.20414.03
???-=207 ω原料药= %100100.2010010003%11???-l E A cm =%6.96%10010
0.20101207400.03=????- 标示量注射液=250.01.0101
207518.01011033%11=???=??l E A cm (mg/mL )
1、什么是透光率?什么是吸光度?什么是百分吸光系数和摩尔吸光系数 2、举例说明生色团和助色团,并解释长移和短移。 4、电子跃迁有哪几种类型?跃迁所需的能量大小顺序如何?具有什么样结构的化合物产生紫外吸收光谱?紫外吸收光谱有什么特征? 5、以有机化合物的基团说明各种类型的吸收带,并指出各吸收带在紫外—可见吸收光谱中的大概位置和各吸收带的特征。 6、紫外吸收光谱中,吸收带的位置受哪些因素影响? 8、用紫外光谱法定量,测量最适宜的吸光度范围为0.2-0.7的依据是什么?为什么用高精度的仪器此范围可以扩大? 11、简述用紫外分光光度法定性鉴别未知物的方法。 13、说明双波长消去法的原理和优点。怎样选择λ1λ2? 15、为什么最好在λmax处测定化合物的含量? 2、Lambert-Beer定律是描述与和的关系,它的数学表达式是 3、紫外-可见分光光度法定性分析的重要参数是和;定量分析的依据是 4、在不饱和脂肪烃化合物分子中,共轭双键愈多,吸收带的位置长移愈多,这是由于 6、可见--紫外分光光度计的光源,可见光区用灯,吸收池可用材料的吸收池,紫外光区光源用灯,吸收池必须用材料的吸收池 10、分光光度法的定量原理是定律,它的适用条件是和,影响因素主要有、。 11、可见-紫外分光光度计的主要部件包括、、、、和5个部分。在以暗噪音为主的检测器上,设△T=0.5%,则吸收度A的测量值在间,由于测量透光率的绝对误差小,使结果相对误差△c/c的值较小。 15、在分光光度法中,通常采用作为测定波长。此时,试样浓度的较小变化将使吸光度产生变化 1、紫外-可见分光光度法的合适检测波长范围是( ) A.400-800 nm B.200-400nm C.200~800nm D.10~200nm 2、下列说法正确的是( )o A.按比尔定律,浓度C与吸光度A之间的关系是一条通过原点的直线 B.比尔定律成立的必要条件是稀溶液,与是否单色光无关 C.E称吸光系数,是指用浓度为1%(W/V)的溶液,吸收池厚度为lcm时所测得吸光度值 D.同一物质在不同波长处吸光系数不同,不同物质在同一波长处的吸光系数相同 3、在乙醇溶液中,某分子的K带λmax计算值为385nm, λmax测定值388nm,若改用二氧六环及水为溶剂,λmax计算值估计分别为( ) (已知在二氧六环和水中的λmax校正值分别为-5和+8) A .二氧六环中390nm,水中37 7nm B.二氧六环中380nm,水中393 nm C.二氧六环中383nm,水中396nm D.二氧六环中393nm,水中380nm 6、1,3-丁二烯有强紫外吸收,随着溶剂极性的降低,其λmax将( ) A.长移 B.短移 C.不变化,但ε增强D.不能断定 8、在紫外-可见光谱分析中极性溶剂会使被测物吸收峰()
紫外-可见分光光度法 一、单项选择题 1.可见光的波长范围是 A、760~1000nm B、400~760nm C、200~400nm D、小于400nm E、大于760nm 2.下列关于光波的叙述,正确的是 A、只具有波动性 B、只具有粒子性 C、具有波粒二象性 D、其能量大小于波长成正比 E、传播速度与介质无关 3.两种是互补色关系的单色光,按一定的强度比例混合可成为 A、白光 B、红色光 C、黄色光 D、蓝色光 E、紫色光 4.测定Fe3+含量时,加入KSCN显色剂,生成的配合物是红色的,则此配合物吸收了白光中的 A、红光 B、绿光 C、紫光 D、蓝光 E、青光 5.紫外-可见分光光度计的波长范围是 A、200~1000nm B、400~760nm C、1000nm 以上 D、200~760nm E、200nm以下 6.紫外-可见分光光度法测定的灵敏度高,准确度好,一般其相对误差在 A、不超过±% B、1%~5% C、5%~20%
D 、5%~10% E 、%~1% 7.在分光光度分析中,透过光强度(I t )与入射光强度(I 0)之比,即I t / I 0称 为 A 、吸光度 B 、透光率 C 、吸光系数 D 、光密度 E 、 消光度 8.当入射光的强度(I 0)一定时,溶液吸收光的强度(I a )越小,则溶液透过光的 强度(I t ) A 、越大 B 、越小 C 、保持不变 D 、等于0 E 、以 上都不正确 9.朗伯-比尔定律,即光的吸收定律,表述了光的吸光度与 A 、溶液浓度的关系 B 、溶液液层厚度的关系 C 、波长的关系 D 、溶液的浓度与液层厚度的关系 E 、溶液温度的关系 10.符合光的吸收定律的物质,与吸光系数无关的因素是 A 、入射光的波长 B 、吸光物质的性质 C 、溶 液的温度 D 、溶剂的性质 E 、在稀溶液条件下,溶液的浓度 11.在吸收光谱曲线上,如果其他条件都不变,只改变溶液的浓度,则最大吸收波长的位置和峰的 高度将 A 、峰位向长波方向移动,逢高增加 B 、峰位向短波方向移 动,峰高增加
【含量测定】照紫外-可见分光光度法(附录V A)测定。 1.仪器与测定条件:室温:____℃相对湿度:____% 分析天平编号:;水浴锅编号:; 紫外可见分光光度计编号:; 2.对照品溶液的制备: 取西贝母碱对照品适量,精密称定,加三氯甲烷制成每1ml含_______mg的溶液,即得。 3. 供试品溶液的制备: 取本品粉末(过三号筛)约______g,精密称定,置具塞锥形瓶中,加浓氨试液3ml,浸润1小时。加三氯甲烷-甲醇(4:1)混合溶液40ml,置80℃水浴加热回流2小时,放冷,滤过,滤液置50ml量瓶中,用适量三氯甲烷-甲醇(4:1)混合溶液洗涤药渣2~3次,洗液并入同一量瓶中,加三氯甲烷-甲醇(4:1)混合溶液至刻度,摇匀,即得。 4.标准曲线的制备: 精密量取对照品溶液0.1ml、0.2ml、0.4ml、0.6ml、1.0ml,置25ml具塞试管中,分别补加三氯甲烷至10.0ml,精密加水5ml、再精密加0.05%溴甲酚绿缓冲液(取溴甲酚绿0.05g,用0.2mol/L氢氧化钠溶液6ml使溶解,加磷酸二氢钾1g,加水使溶解并稀释至100ml,即得)2ml,密塞,剧烈振摇,转移至分液漏斗中,放置30分钟。取三氯甲烷液,用干燥滤纸滤过,取续滤液,以相应的试剂为空白。 5.测定法: 照紫外-可见分光光度法(附录ⅤA),在nm波长处测定吸光度,以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线。依法测定吸光度,从标准曲线上读出供试品溶液中含西贝母碱的重量,计算,即得。 6.结果与计算 6.1 标准曲线制备:
对照品批号 纯 度 S 对照品来源 干燥条件 对照品称重W 对(mg) 各浓度点稀释倍数f 对 溶液浓度C 对(ug/ml) 吸光度A 对 线性回归方程 A=( )C +/-( ) r =( ) 计算公式: W S C f ?= 对对对 C 对= 6.2 样品测定: 水分Q 取样量W 样(g ) 样品稀释倍数f 样 样品吸光度A 样 样品平均吸光度A 样 浓度C(ug/ml) 含量X (%) 平均含量X (%) 计算公式:() %100Q 110W f C X 6 ?-???= 样样 样 X 1= X 2= 7.本品按干燥品计算,含总生物碱以西贝母碱(C 27H 43NO 3)计,不得少于0.050%。 结果: 规定 检验人: 检验日期: 复核人: 复核日期:
第十一章紫外-可见分光光度法 思考题和习题 1.名词解释:吸光度、透光率、吸光系数(摩尔吸光系数、百分吸光系数)、发色团、助色团、红移、蓝移。 2.什么叫选择吸收?它与物质的分子结构有什么关系? 物质对不同波长的光吸收程度不同,往往对某一波长(或波段)的光表现出强烈的吸收。这时称该物质对此波长(或波段)的光有选择性的吸收。 由于各种物质分子结构不同,从而对不同能量的光子有选择性吸收,吸收光子后产生的吸收光谱不同,利用物质的光谱可作为物质分析的依据。 3.电子跃迁有哪几种类型?跃迁所需的能量大小顺序如何?具有什么样结构的化合物产生紫外吸收光谱?紫外吸收光谱有何特征? 电子跃迁类型有以下几种类型:σ→σ*跃迁,跃迁所需能量最大;n →σ*跃迁,跃迁所需能量较大,π→π*跃迁,跃迁所需能量较小;n→ π*跃迁,所需能量最低。而电荷转移跃迁吸收峰可延伸至可见光区内,配位场跃迁的吸收峰也多在可见光区内。 分子结构中能产生电子能级跃迁的化合物可以产生紫外吸收光谱。 紫外吸收光谱又称紫外吸收曲线,是以波长或波数为横坐标,以吸光度为纵坐标所描绘的图线。在吸收光谱上,一般都有一些特征值,如最大吸收波长(吸收峰),最小吸收波长(吸收谷)、肩峰、末端吸收等。 4.Lambert-Beer定律的物理意义是什么?为什么说Beer定律只适用于单色光?浓度C 与吸光度A线性关系发生偏离的主要因素有哪些? 朗伯-比耳定律的物理意义:当一束平行单色光垂直通过某溶液时,溶液的吸光度A 与吸光物质的浓度c及液层厚度l成正比。 Beer定律的一个重要前提是单色光。也就是说物质对单色光吸收强弱与吸收光物质的浓度和厚度有一定的关系。非单色光其吸收强弱与物质的浓度关系不确定,不能提供准确的定性定量信息。 浓度C与吸光度A线性关系发生偏离的主要因素 (1)定律本身的局限性:定律适用于浓度小于0.01 mol/L的稀溶液,减免:将测定液稀释至小于0.01 mol/L测定 (2)化学因素:溶液中发生电离、酸碱反应、配位及缔合反应而改变吸光物质的浓度等导致偏离Beer定律。减免:选择合适的测定条件和测定波长 (3)光学因素: 非单色光的影响。减免:选用较纯的单色光;选max的光作为入射光 杂散光的影响。减免:选择远离末端吸收的波长测定 散射光和反射光:减免:空白溶液对比校正。 非平行光的影响:减免:双波长法 (4)透光率测量误差:减免:当±0.002<ΔT< ±0.01时,使0.2 紫外-可见分光光度法 紫外-可见分光光度法是在190~800nm波长范围内测定物质的吸收度,用于鉴别、杂质检查和定量测定的方法。当光穿过被测物质溶液时,物质对光的吸收程度随光的波长不同而变化。因此,通过测定物质在不同波长处的吸光度,并绘制其吸光度与波长的关系图即得被测物质的吸收光谱。从吸收光谱中,可以确定最大吸收波长λmax和最小吸收波长λmim。物质的吸收光谱具有与其结构相关的特征性。因此,可以通过特定波长范围内样品的光谱与对照光谱或对照品光谱的比较,或通过确定最大吸收波长,或通过测量两个特定波长处的吸收比值而鉴别物质。用于定量时,在最大吸收波长处测量一定浓度样品溶液的吸光度,并与一定浓度的对照溶液的吸光度进行比较或采用吸收系数法求算出样品溶液的浓度。 仪器的校正和检定 1.波长由于环境因素对机械部分的影响,仪器的波长经常会略有变动,因此除应定期对所用的仪器进行全面校正检定外,还应于测定前校正测定波长。常用汞灯中的较强谱线237.83nm、253.65nm、275.28nm、296.73nm、313.16nm、334.15nm、365.02nm、404.66nm、435.83nm、546.07nm与576.96nm,或用仪器中氘灯的486.02nm与656.10nm谱线进行校正,钬玻璃在波长279.4nm、287.5nm、333.7nm、360.9nm、418.5nm、460.0nm、484.5nm、536.2nm与637.5nm处有尖锐吸收峰,也可作波长校正用,但因来源不同或随着时间的推移会有微小的变化,使用时应注意;近年来,尝试由高氯酸狄溶液校正双光束仪器,以10%高氯酸溶液为溶剂,配置含氧化狄(Ho2O3)4%的溶液,该溶液的吸收峰波长为241.13nm,278.10nm,287.18nm,333.44nm,345.47nm,361.31nm,416.28nm,451.30nm, 485.29nm,536.64nm和640.52nm。 仪器波长的允许误差为:紫外光区±1nm,500nm附近±2nm 2.吸光度的准确度可用重铬酸钾的硫酸溶液检定。取在120℃干燥至恒重的基准重铬酸钾约60mg,精密称定,用0.005mol/L硫酸溶液溶解并稀释至1000ml,在规定的波长处测定并计算其吸收系数,并与规定的吸收系数比较, 一、选择题(18分) 1.在紫外-可见分光光度计中,强度大且光谱区域广的光源是:( ) A、钨灯 B、氢灯 C、氙灯 D、汞灯 2.紫外-可见吸收光谱曲线呈高斯分布的是:( ) A、多普勒变宽 B、自吸现象 C、分子吸收特征 D、原子吸收特征 3.某化合物的浓度为1.0×10-5mol/L,在l max=380nm时,有透射比为50%,用1.0cm吸收池,则在该波长处的摩尔吸收系数e /[L/(mol×cm)]为 ( ) max A、5.0×104 B、2.5×104 C、1.5×104 D、3.0×104 5.按一般光度法用空白溶液作参比溶液,测得某试液的透射比为10%,如果更改参比溶液,用一般分光光度法测得透射比为20%的标准溶液作参比溶液,则试液的透光率应等于: ( ) A、8% B、40% C、50% D、80% 6.在310nm时,如果溶液的百分透射比是90%,在这一波长时的吸收值是:( ) A、1 B、0.1 C、0.9 D、0.05 7.化合物中CH3--Cl在172nm有吸收带,而CH3--I的吸收带在258nm处,CH3--Br的吸收带在204nm,三种化合物的吸收带对应的跃迁类型 是 ( ) A、s→s* B、np* C、n→s* D、各不相同→ 若此二种物质的某溶液在l1时在1.00cm吸收池中测得A=0.754,在l2时于10.0cm吸收池中测得A=0.240,问B的浓度是多少?() A、0.64×10-5mol/L B、0.80×10-5 mol/L C、0.64×10-4mol/L D、 0.80×10-4mol/L 9.双波长分光光度计和单波长分光光度计的主要区别是() A、光源的个数 B、单色器的个数 C、吸收池的个数 D、单色器和吸收池的个数 10.对某特定的仪器,其透射比的标准偏差为0.006,当测得溶液的吸光度A=0.334时,则浓度的相对标准偏差是() A、+0.6% B、+1.7% C、+3.5% D、+7.6% 11.比较下列化合物的UV-VIS光谱λmax大小() 第二章 紫外-可见分光光度法 一、选择题 1 物质的紫外 – 可见吸收光谱的产生是由于 (B ) A. 原子核内层电子的跃迁 B. 原子核外层电子的跃迁 C. 分子的振动 D. 分子的转动 2 紫外–可见吸收光谱主要决定于 (C ) A.原子核外层电子能级间的跃迁 B. 分子的振动、转动能级的跃迁 C. 分子的电子结构 D. 原子的电子结构 3 分子运动包括有电子相对原子核的运动(E 电子)、核间相对位移的振动(E 振动)和转 动(E 转动)这三种运动的能量大小顺序为 (A ) A. E 电子>E 振动>E 转动 B. E 电子>E 转动>E 振动 C. E 转动>E 电子>E 振动 D. E 振动>E 转动>E 电子 4 符合朗伯-比尔定律的一有色溶液,当有色物质的浓度增加时,最大吸收波长和吸光度分别是 (C ) A. 增加、不变 B. 减少、不变 C. 不变、增加 D. 不变、减少 5 吸光度与透射比的关系是 (B ) A. T A 1= B. T A 1lg = C. A = lg T D. A T 1lg = 6 一有色溶液符合比尔定律,当浓度为c 时,透射比为T 0,若浓度增大一倍时,透光率的对数为 (D ) A. 2T O B. 021T C. 0lg 2 1T D. 2lg T 0 7 相同质量的Fe 3+和Cd 2+ 各用一种显色剂在相同体积溶液中显色,用分光光度法测定,前者用2cm 比色皿,后者用1cm 比色皿,测得的吸光度值相同,则两者配合物的摩尔吸光系数为 (C ) 已知:A r(Fe) = ,A r(Cd) = A. Cd Fe 2εε≈ B. e d F C 2εε≈紫外-可见分光光度法
紫外可见分光光度法试题
紫外-可见分光光度法-答案
10紫外可见分光光度法课后习题答案