第二章：纯培养和显微技术
一、是非判断：
1．单个（或聚集在一起的一团）微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度可以形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体，称为菌落，一个菌落就是一个克隆。
2．不同微生物在特定培养基上生长形成的菌落或菌苔一般都具有稳定的特征（形状、颜色等），可以成为对该微生物进行分类、鉴定的重要依据。
3．稀释摇管法主要用于好氧微生物的分离。
4．沙土管法和滤纸片法可以直接用于微生物营养细胞的保藏。
5．目镜放大倍数越高，显微镜的分辨率越大。
6．相差显微镜常常用来观察活细菌的运动性，其聚光器上有中央遮光板。
7．不含氮物质但含有其它营养要素的培养基可用以分离固氮菌。
8．不含碳物质但含有其它营养要素的培养基可用以分离自养菌。
9．二元培养物是由两种微生物组成的混合培养物。
10．香柏油的折射率比空气小，所以使用香柏油能提高分辨率。
11．在进行菌种分离纯化时，通过划线得到的单菌落，是由一个细胞繁殖而成。12．对于同种样品，涂布平板法和倾注平板培养法检测到样品中的微生物数目不同。13．扫描隧道显微镜(STM) 只适合于观察具有一定程度导电性的样品，对于半导体的观测的效果较差，对于绝缘体则根本无法直接观察。
14．原子力显微镜（AFM）不能用于不具导电性或导电能力较差的样品的观察。
二、选择题：（如果需要，可多选）
1.纯培养是指含有（）的培养物。
（1）一种微生物；（2）一种营养物质；（3）一种代谢产物
2.利用固体平板获得纯培养，可采用（）：
（1）平板划线分离法；（2）稀释涂布平板法；（3）稀释倾注平板法；（4）都可以3.下列物质除（）外，可在冷冻法保藏菌种时作为保护剂，提高培养物的存活率。
（1）水；（2）甘油；（3）脱脂牛奶；（4）糊精
4.沙土管菌种保藏方法可用于保藏（）。
（1）细菌芽孢；（2）细菌营养细胞；（3）真菌菌丝；（4）真菌孢子
5.多数专业的菌种保藏机构的主要微生物保存手段（）。
（1）传代培养保存；（2）沙土管保藏；（3）冷冻真空干燥保藏；（4）纸片保藏6.常用的测量细菌大小的单位是（）。
（1）毫米；（2）微米；（3）纳米
7.常用的测量病毒大小的单位是（）。
（1）毫米；（2）微米；（3）纳米
8.显微镜的分辨率可通过（）参数计算获得。
（1）显微镜工作距离；（2）光波波长和数值孔径；
（3）物镜放大倍数；（4）目镜放大倍数
9.暗视野显微镜通过特殊的（）而产生不进入视野的斜射光线。
（1）物镜；（2）聚光镜；（3）目镜；（4）反光镜。
10.抗酸染色法主要应用于临床上（）的鉴别：
（1）大肠杆菌；（2）结核分支杆菌；（3）枝原体；（4）痢疾杆菌。
11.细菌的鞭毛可通过（）方法观察。
（1）染色和光学显微镜；（2）电子显微镜；
（3）暗视野显微镜；（4）上述方法都可能
12.相差显微镜配备有特殊的光学装置（），能将光的相位差转变为肉眼可以察觉的
振幅差（明暗差）。
（1）环状光阑；（2）遮光板；（3）相差板；（4）滤色系统发出紫外光
13. 观察微生物活的菌体特征，常用于一般细菌的显微制片方法是（）；常用于霉
菌的显微制片方法是（）。
（1）压滴法；（2）埋片法；（3）小培养法；（4）涂片固定染色法
14．革兰氏染色法中，确保染色结果可信性的关键操作步骤是（）：
（1）作大肠杆菌对照；（2）作金黄色葡萄球菌对照；
（3）酒精脱色时间；（4）番红复染时间。
15．在革兰氏染色过程中，使用（）进行初染，使用（）进行媒染，最后使用（）进行复染。
（1）结晶紫；（2）孔雀绿；（3）碘液；（4）荧光黄；（5）沙黄（番红）
答案：
是非判断：
1.(×);
2.(√);
3. (×);
4. (×);
5. (×);
6. (×);
7. (√);
8. (√);
9. (×); 10. (×); 11.(×); 12.(√); 13. (√); 14. (×)
选择题：
1.(1);
2.(4);
3.(1);
4.(1, 4);
5.(3);
6.(2);
7.(3);
8.(2);
9.(2); 10.(2); 11.(4); 12.(1, 3);
13.(1),(3); 14.(1, 2, 3);15.(1),(3),(5)
word格式 第一章原核生物的形态、构造和功能习题A部分 一、选择题 1.Bacillus subtilis 在生长发育的一定时期能形成：（） A.孢囊 B.芽孢 C.伴孢晶体 D.子实体 2.细菌的繁殖首先开始于：（） A.膜的分裂 B.壁的分裂 C. DNA的复制 3.细菌的繁殖主要靠：（） A.二分分裂 B.纵裂 C.出芽 4.下列微生物属于原核微生物的是：（） A.细菌 B.霉菌D.酵母菌D.单细胞藻类 5.自然界中分离到的细菌，形态各种各样，其中种类最多的是：（） A.球菌 B.螺旋菌 C.放线菌 D.杆菌 6.原核细胞中特有的C源贮藏颗粒是：（） A.异染粒 B.肝糖粒 C.淀粉粒 D.聚-3 -羟基丁酸 7.放线菌的菌体呈分枝丝状体，因此它是一种：（） A.多细胞的真核微生物 B.单细胞真核微生物 C.多核的原核微生物 D. 无壁的原核微生物 8.在细菌细胞中能量代谢场所是：（） A.细胞膜 B.线粒体 C.核蛋白体 D.质粒 9.细菌芽孢抗热性强是因为含有：（） A.聚-?-羟基丁酸 B. 2,6- 吡啶二羧酸 C.氨基酸 D.胞壁酸
. word格式 10.Bacillus thuringiensis 在形成芽孢同时，还能形成一种菱形或正方形的物质，称之为：（ ） A.孢囊 B.伴孢晶体 C.核蛋白质 D.附加体
word格式 11.G*细菌细胞壁的结构为一层，含有的特有成分是:（） A.脂多糖 B.脂蛋白 C.磷壁酸 D.核蛋白 12.革兰氏阴性细菌细胞壁中的特有成分是：（） A.肽聚糖 B.磷壁酸 C.脂蛋白 D.脂多糖 13.细菌的芽孢是：（） A. 一种繁殖方式 B.细菌生长发育的一个阶段 C. 一种运动器官 D. 一种细菌接合的通道 14.枝原体的细胞特点是：（） A.去除细胞壁后的细菌 B. 有细胞壁的原核微生物 C.无细胞壁的原核微生物 D. 呈分枝丝状体的原核微生物 15.蓝细菌中进行光合作用的场所是：（） A.羧酶体 B.类囊体 C.藻胆蛋白体 16.E.coli肽聚糖双糖亚单位交联间的肽间桥为：（） A.氢键 B.肽键 C.甘氨酸五肽 17.Staphylococcus aureus 肽聚糖双糖亚单位交联间的肽间桥为：（） A.肽键 B.甘氨酸五肽 C.氢键 18.下列微生物中能通过细菌滤器，并营专性寄生的是：（） A.苏云金杆菌 B.蛭弧菌 C.衣原体 D.类菌体 19.在下列原核生物分类中，属古细菌类的细菌是：（） A.大肠杆菌 B.枝原体 C.放线菌 D.产甲烷细菌 20.细菌的细胞核是：（） A.裸露的DNA分子 B. DNA与组蛋白结合的无核膜包围的染色体 C. RNA与组蛋白结合的无核膜包围的染色体
2012级制药专业 工业微生物学实验报告 姓名: 刘甜甜学号: 2012304090 班级: 制药12-2班指导老师：王健 日期：2014.6.11
一、实验目的 1、抑制或杀死微生物的一些物理、化学及生物的因素抑菌、杀菌的原理。 2、掌握物理、化学及生物的因素抑菌、杀菌的试验方法。 3、了解细菌的形态特征、染色特点。 4、了解细菌在普通培养基、选择培养基、血平板上的菌落特征。 5、掌握细菌分离划线培养的方法。 6、掌握细菌的初步生化反应。 7、掌握细菌密集划线法，掌握细菌K-B药敏纸片法。 二、实验内容 1 细菌Gram’s stain染色，镜检，观察记录细菌形态和特色特征 1.1 实验原理：染色原理：G+菌与Gˉ菌细胞壁不同，G+菌比Gˉ菌细胞内核糖核酸镁盐含量高，G+菌比Gˉ等电点低。 1.2 实验步骤： 1.2.1.制片：○1涂片：取半滴生理盐水置一洁净玻片上，以无菌操作技术自平板上去菌落少许，与生理盐水混匀，均匀涂布约1cm2大小，自然干燥； ②固定：取含菌膜的玻片与酒精灯火焰上来回三次，使菌膜牢固附于玻片表面； 1.2.2染色：①初染：取结晶紫一到两滴覆盖于菌膜表面，轻微摇动，维持30〃~40〃,细流水冲洗，切勿直接冲洗涂片区域； ②媒染：取卢氏碘液1~2滴覆盖菌膜表面，轻微摇动，维持30〃~40〃,用上法细流水冲洗； ③脱色：取95%酒精2~3滴于菌膜表面，轻微摇动，局部接近无色即可, 用上法细流水冲洗； ④复染：取1：10稀释石炭酸复红覆盖涂片区域，轻微摇动，用上法细流水冲洗； ⑤吸水纸初步吸干玻片水分，然后自然干燥； 1.2.3 镜检：于涂片区域加半滴香波油，油镜（100倍目镜）下。 图1：Gram’s stain（1000×）图2：染色试验 三、分离培养 1实验原理：四区划线法是把混杂着在一起的微生物或同一微生物群体的不同细胞用接种环在平板培养基表面通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞，经培养繁殖后生成个菌落。有时这些单菌落并非由单个细胞繁殖而来，故必须反复分离多次才能得到纯种。其原理是微生物样品在固体培养基表面多次作“由点到线”稀释而达到分离的目的。
第二章普通微生物学课后习题及答案2
1.试解释真菌、酵母菌、霉菌和蕈菌。 真菌：是一类不含叶绿素，不能进行光合作用，菌体主要以菌丝状态存在，异样生活的一类微生物。 真菌特点：1、有边缘清楚的核膜包围着细胞核，而且在一个细胞内有时可以包含多个核 2、不含叶绿素，不能进行光合作用，营养方式为异养吸收型。 3、产生大量无性和有性孢子进行繁殖 4、除酵母菌为单细胞外，一般具有发达的菌丝体。 酵母菌：一类非丝状真核微生物，泛指能发酵糖类的各种单细胞真菌。酵母菌一般具有以下五个特点：1、个体一般以单细胞状态存在 2、多数出芽繁殖，也有的裂殖， 3、能发酵糖类产能4细胞壁常含甘露聚糖，5、喜在含糖量较高、酸度较大的水生环境中生长。 霉菌：一些丝状真菌的通称，指那些菌丝体发达又不产生大型肉质子实体结构的真菌。 营养体：指真菌营养生长阶段的菌丝体。 霉菌的菌丝：霉菌的营养体由菌丝构成，可以无限伸长和产生分枝，分枝的菌丝相互交错在一起，形成菌丝体。 蕈菌：又称伞菌，指那些能形成大型肉子实体的真菌。 菌丝体：菌丝体是菇菌的营养器官，菌丝体是由无数纤维的菌丝组成。一边吸取营养，一边繁殖向四周扩展，并在一定季节、一定的发育阶段产生繁殖器官——子实体。 2、简述真菌与人类的关系。
真菌可以作为食品的来源，为人类提供美味的食品和蛋白质、维生素等资源，同时还可以为人类提供真菌多糖、低聚糖等提高免疫力、抗肿瘤的生物活性物质。有的真菌可以产生抗生素、酒精、有机酸、酶制剂等。用作名贵药材的灵芝、茯苓等。真菌可以将环境中的有机物降解为简单的复合物和无机小分子，在自然界的转化作用不容忽视。真菌还是基础生物学研究的重要研究工具。 真菌对人类有害的一面，许多真菌可以引起人畜的疾病、植物病害、导致工业原料及农产品的霉变、食品和粮食发霉，甚至在食品和粮食中产生毒素，给人类带来了极大的危害和损失。 3、简述酵母菌的一般构造及酿酒酵母的生活史，分析其生活史的特点。 特点：一般情况下都以营养体状态进行出芽繁殖，营养体既能以单倍体形式存在，也能以二倍体形式存在，在特定条件下进行有性繁殖。 4、解释：菌丝、菌丝体、菌丝球、真菌丝、牙痕、蒂痕。 菌丝: 单条管状细丝，为大多数真菌的结构单位，一些原核生物也有菌丝，如放线菌。 菌丝体：许多菌丝连结在一起组成地营养体。营养体：真菌营养生长阶段的菌丝体.
工业微生物学实验考卷A0708答案
一、填空题（共30分，其中8和11小题每空1分，其余每空0.5 分） 1. 显微镜物镜的放大倍数可由外形来辨别，镜头长度越短，口径越大，放大倍数越低。物镜的放大倍数都标在镜头上，常用的低倍镜为_ 10 ×、20×；高倍镜为 40 ×、45×；油镜为90×、 100 ×。若20×的目镜与45×的物镜配合使用，显微镜的总放大倍数为900倍，一般用 45×20 表示。 2. 新玻璃器皿含有游离碱，一般先将其浸于 2%盐酸溶液中浸泡数小时，然后用自来水清洗干净；用过的培养皿或试管若含有废弃 培养基或菌体，需先经高压蒸气灭菌或沸水煮沸后，倒掉污 物，方可清洗。 3. 微生物培养基的分类方法和种类很多，如按培养基中凝固剂含量的多少可分为固体、半固体和液体培养基；按照 培养基的原料来源可分为合成、半合成和天然 培养基，如PDA培养基根据其原料来源属于其中的半合成培养基。 仅供学习与交流，如有侵权请联系网站删除谢谢8
4. 固体培养基的配制过程可简单描述为：配料（称量）→溶解→校正pH→加凝固剂→融化→分装→加棉塞、包扎→灭菌→无菌检查，其中最后一步非常关键，可检测培养基的是否可用。 5．培养基的灭菌一般多采用高压蒸气灭菌，灭菌压力为0.1Mpa，即 121 ℃，时间20 min，若培养基中含糖成分的含量较高，一般多采用过滤除菌或减压灭菌，减压灭菌时温度为 115 ℃。 6．对不同的微生物进行斜面接种时，常根据需要采用不同的接种方法，如细菌和放线菌多采用密波状蜿蜒划线，酵母菌多采用中央划线法，用来观察菌种的形态和培养特征；霉菌多用点接法。 7．利用显微镜观察不同的微生物常采用不同的制片方法，如细菌需经过固定和染色后利用油镜（物镜）观察；酵母菌需制备水浸片，不需要染色，高倍镜下观察；霉菌制片时需要乳酸苯酚油作为一种介质，防止菌丝成团影响观察；另外，在观察假丝酵母和青霉菌时，需对菌体作小室培养以便观察到完整的菌体形态。 8．微生物学中可根据细菌的生理生化实验结果对未知菌进行鉴定，如利用MR实验和V-P实验可检测微生物利用葡萄糖产酸能力；明胶液化实验可检测细菌是否产蛋白酶；硝酸盐还原实验可检测细菌 仅供学习与交流，如有侵权请联系网站删除谢谢8
发酵技术指标 沃蒙特发酵技术服务平台 NO 项目英文技术名称名称指标 1他克莫司Tacrolimus 发酵单位：大于 1.0g/L, 发酵周期： 240 小时 , 提取收 率： 60-70% 2西罗莫司Sirolimus\Rapamyci 发酵单位： 1000±200 mg/L，发酵周期： 192hrs ，收率：35- 40% n产品含量：≥ 98% 3乳酸链球菌素Nisin 发酵水平 : 12-15g /L ，发酵时间：16-20小时，收率 :65% 以上。 4霉酚酸mycophenolate 发酵单位： 12g/L 以上，发酵时 间：160 小时，提取得率：mofetil, MMF 75% 5去甲金霉素DMCT,Demethylchlor 发酵单位： 10± 2g/L ，发酵时间： 200 小时，产品收率： 75％ tetracycline 6雄烯二酮Androstenedione 发酵时间 96 ± 24 hrs ，每 3- 3.3 公斤植物甾醇可获 得 1 公斤雄烯二酮。 7利福霉素Rifamycin 发酵周期 220 小时，发酵单位大于 20g/L ，收率 65% 86- 羟基烟酸6-Hydroxynicotinic 纯度：≥ 98%，用途说明：用于合成维 生素 A Acid 9L- 缬氨酸Valine 发酵产酸： 60±5 克 /L ，发酵周 期： 60 ± 5 小时，提取 收 率： 65%（医药级） 10 L- 异亮氨酸Isoleucine 发酵产酸： 25-30 克 / 升，发酵周期 : 60-72 小时， 提取收 率： 80% 发酵单位 :35 ± 3g/L ，发酵时间 :33-35 小时，产品 得率 : 饲 11 L- 色氨酸Tryptophan 料级≥ 85%，药品级 ≥ 70%，产品质量 :>98.0%( 纯度 ) ， 糖转化率： 18% 12 糖化酶Glucoamylase 发酵周期： 6～7 天，酶 活： 8 万- 10 万 U 13 耐高温淀粉酶Amylase 发酵周期： 140h，酶活： 17 万单位 14 纤维素酶Cellulase 发酵周期： 6～7 天，酶活： 80-100IU 15 超级泰乐菌素Super tylosin 发酵单位： 14000- 16000U/ml 发酵时间： 130-150 小时提 取 收率： 70-75%
填空题 1.动植物的研究能以体为单位进行，而对微生物的研究一般用体 2.在微生物学中，在人为规定的条件下培养、繁殖得到的微生物群体称为培养物、其中只有培养物能较好地被研究、利用和重复结果。 3.一般情况下，培养微生物的器具，在使用前必须先行，使容器中不含。 4.用培养平板进行微生物纯培养分离的方法包括、和。 5、微生物在特定培养基上生长形成的菌落或菌苔一般都具有稳定的特征，可以成为对该微生物进行、的重要依据。 6、微生物保藏的目标就是要使所保藏菌株在一段时间不、不和不 7、一般说来，采用冷冻法时，保藏温度越，保藏效果越。 8、、和是影响显微镜观察效果的3个重要因索。 9.光学显微镜能达到的最大有效放大倍数是，这时一般使用 x的目镜，和 x的物镜，并应在物镜镜头和玻片之间加。 10、采用明视野显微镜观察未经染色的标本(如活的细胞)时，光的和都没 有明显的变化，因此，其形态和内部结构往往难以分辨。 11.在的照射下，发荧光的物体会在黑暗的背景下表现为光亮的有色物体，这就是荧光显微技术的原理。 12.透射电子显微镜用电子作为，因此其分辨率较光学显微镜有很大提高，但镜筒必须是环境，形成的影像也只能通过或进行观察、记录。 13.在显微镜下不同细菌的形态可以说是千差万别，丰富多彩，但就单个有机体而言，其基本形态可分为、与 3种。 14.霉菌菌体均由分支或不分支的菌丝构成。许多菌丝交织在一起，称为。在固体培养基上，部分菌丝伸入培养基内吸收养料，称为；另一部分则向空中生长，称为。有的气生菌丝发育到一定阶段，分化成。 15. 是一类缺少真正细胞壁，细胞通常无色，具有运动能力，并进行吞噬营养的单细胞真核生物。它们个体微小，大多数都需要显微镜才能看见。 选择题（4个答案选1) 1.培养微生物的常用器具中，（）是专为培养微生物设计的。 (1)平皿(2)试管(3)烧瓶(4)烧杯 2.( )可用来分离培养出由科学家设计的特定环境中能生长的微生物，尽管我们并不知道什么微生物能在这种特定的环境中生长。 (1)选择平板(2)富集培养(3)稀释涂布(4)单细胞显微分离 3.下面哪一项不属于稀释倒平板法的缺点?( ) (1)菌落有时分布不够均匀 (2)热敏感菌易被烫死 (3)严格好氧菌因被固定在培养基中生长受到影响 (4)环境温度低时不易操作 4.下面哪一种方法一般不被用作传代保藏?( ） (1)琼脂斜面(2)半固体琼脂柱(3)培养平板(4)摇瓶发酵 5.冷冻真空干燥法可以长期保藏微生物的原因是微生物处于( )的环境，代谢水平大大降低。 (1)干燥、缺氧、寡营养(2)低温、干燥、缺氧 (3)低温、缺氧、寡营养(4)低温、干燥、寡营养 6.对光学显微镜观察效果影响最大的是( )。
第一章原核微生物的形态、结构与功能 一、填空题 1、细菌是单细胞原核生物，按其基本形态可分为_______、_______和_______三类。 2、球菌按分裂后产生的新细胞的排列方式可分为_______、_______、_______、_______、_______和_______。 3、细菌的基本结构包括_______、_______、_______和_______等四部分。 4、根据革兰氏染色技术可将细菌细胞壁分为两种类型，即_______和_______。 5、芽孢耐高温的原因是由于芽孢形成时可同时形成_______所致。 6、细菌的主要繁殖方式是_______。 7、放线菌是具多核的单细胞原核生物，革兰氏染色呈_______；典型的放线菌除发达的基质丝外，还有发达的_______和_______。 8、_______繁殖是放线菌的主要繁殖方式。 9、细菌的繁殖主要靠_______，放线菌的繁殖主要靠_______， 10、单个或多个微生物的细胞在适宜固体培养基上形成的群体称为_______。细 菌和酵母菌的菌落表面_______，放线菌和霉菌菌落表面_______。 二、判断是非 1、细菌荚膜都是由多糖组成。（） 2、所有细菌都有细胞壁。（） 3、微生物的芽胞或孢子含水量较多，抗干燥能力较强。（） 4、革兰氏阳性菌和阴性菌的差异在于细胞壁的构造和成分的不同。（） 5、磷壁酸是革兰氏阴性细菌细胞壁中的特有成分。（） 6、细菌的荚膜主要由多糖和果胶类物质组成，也有少数细菌的荚膜成分是纤维 素。（） 7、脂多糖是革兰氏阳性细菌特有的成份。（） 8、所的细菌的细胞壁中都含有肽聚糖。（） 9、鞭毛是鞭毛细菌的运动器官。（） 10、菌落的大小以厘米表示，记录时直接按菌落直径大小记录。（） 三、名词解释 1、原生质：指在人为条件下，用溶菌酶除尽原有细胞壁或用青霉素抑制新生细 胞壁合成后，所得到的细胞膜包裹的圆球状渗透敏感细胞。 2、PHB ：聚—β—羟丁酸，是一种存在于许多细菌细胞质内属于类脂性质的炭 源类贮藏物，不溶水，而溶于氯仿，可用尼罗蓝或苏丹黑染色，具有贮藏能量、炭源和降低细胞内渗透压等作用。 3、衰颓形：由于培养时间过长，营养缺乏，代谢的排泄物浓度积累过高等使细 胞衰老而引起的异常形态。 4、质粒：凡游离于原核生物核基因组以外，具有独立复制能力的小型共价闭合 环状的dsDNA分子，即cccDNA。
1?间歇培养或分批培养：微生物在化学成分一定的培养基中进行培养。 同步培养：培养基中所有细胞处于同一生长阶段，群体与个体的行为一致。 2?芽抱：某些细菌在生长的一定阶段，细胞内形成一个圆形、椭圆形或圆柱形，对不良环境条件具有较强抗性的休眠体。 3?伴抱晶体：有些芽抱杆菌在形成芽抱的同时，在细胞内产生晶体状内含物。 4. 连续培养：在对数生长期的培养容器中不断加入新鲜的培养基，同时不断放出代谢物，使微生物所需 的营养及时得到补充，有害的代谢产物及时排除，菌体的生长不受影响。 5. 发酵热：发酵过程中释放出来的净热量。 6. 原生质体融合：通过人工的方法，使遗传性状不同的两个细胞的原生质体发生融合，并产生重组子的过程。 7. 营养缺陷型菌株：野生菌株经过人工诱变处理后，丧失了合成某种营养物质的能力，这些菌株生长的培养基中必需添加该种营养物质。 8. 接合：通过供体菌和受体菌的细胞直接接触、传递大段DNA （包括质粒）遗传信息的现象。 整合：外来DNA片段插入染色体中的过程。 9. 转导：借助噬菌体，把供体细胞中DNA片段携带到受体细胞中，从而使后者获得前者部分遗传性状的现象。 10. 转染：将病毒的DNA （或RNA）人为地抽提分离出来，用它来感染感受态的受体细胞，并进而产生正常病毒的后代，是特殊的“转化”。 11. 转化：某一基因型的细胞直接从周围介质中吸收另一基因型细胞的DNA，并将它整合到自己的基因组中，造成基因型和表型发生相应变化的现象。 12. 巴斯德效应：指在厌氧条件下，向高速发酵的培养基中通入氧气，抑制糖酵解的现象。 13. 半合成抗生素：通过人工化学合成的方法对它的结构进行修饰与改造，把它的“短板”弥补上，扬长避短，发挥更好的效力。因为是基于它原有的结构作为起始原料。 14. 组成酶：它的合成与环境无关，随菌体形成而合成，是细胞固有酶，在菌体内的含量相对稳定。 15. 诱导酶：只有在环境中存在诱导剂时，才开始合成，一旦环境中没有了诱导剂，合成就终止。 同工酶：催化相同的化学反应，而酶蛋白的分子结构、理化性质乃至免疫学性质不同的一组酶。 16. 初级代谢产物：对微生物的生产是必需的，与微生物细胞的形成过程同步。如氨基酸、核苷酸、乙醇
第二章原核微生物 一、名词解释: 原核微生物;芽孢;菌落;细菌L型;伴孢晶体;糖被 二、填空题 I.证明细菌存在细胞壁的主要方法有_______,________,________与____等4种。 2.细菌细胞壁的主要功能为_____,______,______与______等。 3.革兰氏阳性细菌细胞壁的主要成分为_____与_____,而革兰氏阴性细菌细胞壁的主要成分则就是_____、_____、______与______。 4.肽聚糖单体就是由____与____以_____糖苷键结合的_____,以及_____与____3种成分组成的,其中的糖苷键可被_____水解。 5.G+细菌细胞壁上磷壁酸的主要生理功能为_____、_____、_____与_____等几种。 6.G-细菌细胞外膜的构成成分为_____、_____、_____与_____。 7.脂多糖(LPS)就是由3种成分组成的,即_____、_____与_____。 8.在LPS的分子中,存在有3种独特糖,它们就是_____、____与____。 9.用人为方法除尽细胞壁的细菌称为____,未除尽细胞壁的细菌称为____,因在实验室中发生 缺壁突变的细菌称为_____,而在自然界长期进化中形成的稳定性缺壁细菌则称为_____。 10.细胞质膜的主要功能有______、______、_____、______与______。 三、选择题: 1.G-细菌细胞壁的最内层成分就是( )。 (1)磷脂(2)肽聚糖(3)脂蛋白(4)LPS 2.G+细菌细胞壁中不含有的成分就是( )。 (1)类脂(2)磷壁酸(3)肽聚糖(4)蛋白质 3.肽聚糖种类的多样性主要反映在( )结构的多样性上。 (1)肽桥(2)黏肽(3)双糖单位(4)四肽尾 4.磷壁酸就是( )细菌细胞壁上的主要成分。 (1)分枝杆菌(2)古生菌(3)G+ (4)G- 5.在G—细菌肽聚糖的四肽尾上,有一个与G+细菌不同的称作( )的氨基酸。 (1)赖氨酸(2)苏氨酸(3)二氨基庚二酸(4)丝氨酸 6.脂多糖(LPS)就是G+细菌的内毒素,其毒性来自分子中的( )。 (1)阿比可糖(2)核心多糖(3)O特异侧链(4)类脂A 7.用人为的方法处理G—细菌的细胞壁后,可获得仍残留有部分细胞壁的称作( )的缺壁细 菌。 (1)原生质体(2)支原体(3)球状体(4)L型细菌 8.异染粒就是属于细菌的( )类贮藏物。 (1)磷源类(2)碳源类(3)能源类(4)氮源类 9.最常见的产芽孢的厌氧菌就是( )。 (1)芽孢杆菌属(2)梭菌属(3)孢螺菌属(4)芽孢八叠球菌屑 10.在芽孢的各层结构中,含DPA—Ca量最高的层次就是( )。 (1)孢外壁(2)芽孢衣(3)皮层(4)芽孢核心 四、判断题 1.古生菌也就是一类原核生物。 2.G+细菌的细胞壁,不仅厚度比G-细菌的大,而且层次多、成分复杂。
2008-2009学年第 一学期本科试卷 课程名称:工业微生物学实验(A) 答案 第 1 页 （共 8 页） 学 院: 专 业: 学号: 姓名: ―――――――――――――装――――――――――――订――――――――――――线―――――――――――――― 题号 一 二 三 四 五 六 七 八 总成绩 得分 得分 一、名词解释（共20分，每小题4分） 1. 无菌操作：培养基经灭菌后，用经过灭菌的接种工具在无菌条件下接种含菌材料于培养基上，这一操作称为无菌操作。 2. 培养基：是人工配制的能满足微生物生长繁殖和积累代谢产物的营养基质。 3. 假菌丝: 酵母生长旺盛时，出芽形成的芽细胞尚未脱离母细胞又长出了新芽，容易形成成串的细胞。如果各细胞之间连接处面积小于细胞直径，形成的这种藕节状的细胞串称为假菌丝。 4. 大肠菌群: 大肠菌群系指一群在37℃、24h 能发酵乳糖，产酸、产气，需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。 5. 细菌菌落总数: 指被检样品通过一定的处理方法，培养一段时间后，每毫升或每毫克样品中所含细菌的菌落数。由于经过适当稀释的样品中每个细胞可形成一个单菌落，所以菌落数即是细菌活菌总数。 得分 二、判断题（共10分，每题1分） 1．无菌吸管上端塞入棉花的主要目的是为了防止菌液吸入口中（ A ）。 A.错 B.对
年级：06级专业：生物工程（本科）课程号：S040101046 2．稀释平板计数时，细菌，放线菌，真菌的计数标准是选择每皿中菌落数在30-300个的稀释度进行计数（ A ）。 A.错 B.对 3．为了满足微生物对微量元素的需要，配制培养基所用的水最好使用自来水（ B）。 A.错 B.对 4．实验室通常使用血球计数板测酵母菌的总菌数或霉菌的孢子数（ B ）。 A.错 B.对 5．浸油的油镜镜头可用软的卫生纸擦净（ A ）。 A.错 B.对 6．稀释平板计数通常采用的是二倍稀释法（ A ）。 A.错 B.对 7．使用手提灭菌锅灭菌后，为了尽快排除锅内蒸汽，可直接打开排气阀排气（ A ）。 A.错 B.对 8．镜台测微尺每小格的实际长度是10微米（ B ）。 A.错 B.对 9．用血球计数板计数时，任数5个大方格(80个小格)的菌数即可（ A ）。 A.错 B.对 10．测微生物的细胞大小时，需要校正的是镜台测微尺每格的实际长度（ A ）。 A.错 B.对 15分，每空0.5分） 1. 检查乳品和饮料是否含有大肠杆菌(E.coli)等肠道细菌，可采用___伊红美兰 ____培养基，在这种培养基平板上___能分解乳糖产酸的菌_（大肠菌群）_____会形成具有___金属_______光泽的紫黑色小菌落。 第 2 页（共8 页）
浙江大学工业微生物92-97 1992 年攻读硕士学位研究生入学考试试题 一填空（共15分） 1、细菌一般进行a 繁殖，即b 。酵母的繁殖方式分为有性和无性两类，无性繁殖又可分为c ，d 两种形式，有性繁殖时形成 e ；霉菌在有性繁殖中产生的有性孢子种类有 f ，g ，h ；在无性繁殖中产生的无性孢子种类有i ，j ，k ；放线菌以l 方式繁殖，主要形成m ，也可以通过n 繁殖。 2、一摩尔葡萄糖通过EMP途径和TCA循环彻底氧化，在原核微生物中产生a 摩尔ATP，在真核微生物中产生b 摩尔ATP，这是因为在真核微生物中，c 不能通过线粒体膜，只能借助于d 将EMP途径产生的磷酸二羟丙酮还原成 e ，后者可进入线粒体，将氢转移给f ，形成g ，自身又回复到磷酸二羟丙酮。这一过程称为“穿梭”，每次穿梭实际损失h 个ATP。 3、微生物基因突变的机制包括a 、b 及c 。诱发突变的方法分为物理方法和化学方法，物理方法主要是d ， e ， f 和g ；化学诱变剂包括h ，i 和j 。 二是非题（叙述正确的在括号写T，错误的写F，共10分） 1、自养型、专性厌氧型微生物不是真菌（） 2、在酵母细胞融合时，用溶菌酶破壁（） 3、从形态上看，毛霉属细菌都有假根（） 4、营养缺陷型菌株不能在基本培养基上正常生长（） 5、产黄青霉在工业生产上只用于生产青霉素（） 6、分子氧对专性厌氧微生物的抑制和制死作用是因为这些微生物内缺乏过氧化氢酶（） 7、同工酶是指能催化同一个反应，有相同控制特征的一组酶（） 8、基因位移是借助于酶或定向酶系统实现的主动输送，因此不需要消耗能量（） 9、培养基中加入一定量NaCl的作用是降低渗透压（） 10、噬菌体的RNA必须利用寄主的蛋白质合成体系翻译，因此只能在寄主体内繁殖（） 三. 名词解释（共15分） 1、抗代谢物 2、温和噬菌体 3、阻遏酶 4、转化 5、活性污泥 四在恒化器中培养微生物，在稳态操作时，μ=D，D为稀释率，μ可用Monod公式描述：求：a. 恒化器出口底物浓度S0和微生物浓度X0 b. 当稀释率D增加到一定程度后会产生“清洗”现象，求发生清洗现象的最小稀释率Dcrit c. 单位体积细胞产率可以用细胞出口浓度X0与稀释率的乘积DX0表示。求当DX0达到最大值时的稀释率Dmax 五. 简要叙述工业微生物研究和实验中的微生物培养基必须具备的要素和对于大规模生产 时对培养基的基本要求。（15分） 六. 以肌苷酸生产菌为例，说明营养缺陷型菌株筛选的机理及筛选的方法。（15分） 七. 试述革兰氏阳性菌和阴性菌在细胞壁组成上的差别，并判断下述几种微生物的染色结果是什么。 a. 枯草芽孢杆菌 b. 金黄葡萄球菌 c. 大肠杆菌 d. 乳链球菌 e.假单孢菌 1993年攻读硕士学位研究生入学考试试题 一填空（共15分，每格0.5分）
第1章原核微生物习题 填空题 I．证明细菌存在细胞壁的主要方法有_______，________，________和____等4种。 2．细菌细胞壁的主要功能为_____，______，______和______等。 3．革兰氏阳性细菌细胞壁的主要成分为_____和_____，而革兰氏阴性细菌细胞壁的主要成分则是_____、_____、______和______。 4．肽聚糖单体是由____和____以_____糖苷键结合的_____，以及_____和____3种成分组成的，其中的糖苷键可被_____水解。 5．G+细菌细胞壁上磷壁酸的主要生理功能为_____、_____、_____和_____等几种。 6．G-细菌细胞外膜的构成成分为_____、_____、_____和_____。 7．脂多糖(LPS)是由3种成分组成的，即_____、_____和_____。 8．在LPS的分子中，存在有3种独特糖，它们是_____、____和____。 9．用人为方法除尽细胞壁的细菌称为____，未除尽细胞壁的细菌称为____，因在实验室中发生缺壁突变的细菌称为_____，而在自然界长期进化中形成的稳定性缺壁细菌则称为_____。 10．细胞质膜的主要功能有______、______、_____、______和______。 11．在细胞质内贮藏有大量聚β—羟基丁酸(PHB)的细菌有____、_____、____和等。 12 在芽孢核心的外面有4层结构紧紧包裹着，它们是_____、_____、______和______。 13．在芽孢皮层中，存在着____和______2种特有的与芽孢耐热性有关的物质，在芽孢核心中则存在另一种可防护DNA 免受损伤的物质，称为_____。 14．芽孢的形成须经过7个阶段，它们是______、________、_______、________、_______、______和________。15．芽孢萌发要经过______、______和______3个阶段。 16．在不同的细菌中存在着许多休眠体构造，如______、______、______和______等。 17．在细菌中，存在着4种不同的糖被形式，即______、______、______和______。 18．细菌糖被的主要生理功能为______、______、______、______、______和______ 等。 19．细菌的糖被可被用于______、______、______和______等实际工作中。 20．判断某细菌是否存在鞭毛，通常可采用______、______、______和______等方法。 21．G-细菌的鞭毛是由基体以及______和______3部分构成，在基体上着生______、______、______和______4个与鞭毛旋转有关的环。 22．在G-细菌鞭毛的基体附近，存在着与鞭毛运动有关的两种蛋白，一种称______，位于______，功能为______；另一种称______，位于______，功能为______。 23．借周生鞭毛进行运动的细菌有______和______等，借端生鞭毛运动的细菌有______和______等，而借侧生鞭毛运动的细菌则有______等。 24．以下各类真核微生物的细胞壁主要成分分别是：酵母菌为______，低等真菌为______，高等真菌为______，藻类为______。 25．真核微生物所特有的鞭毛称______，其构造由______、______和______3部分组成。 26．真核生物鞭毛杆的横切面为______型，其基体横切面则为______型，这类鞭毛的运动方式是______。 27．真核生物的细胞核由______、______、______和______4部分组成。 28．染色质的基本单位是______，由它进一步盘绕、折叠成______和______后，再进一步浓缩成显微镜可见的______。 29．细胞骨架是一种由______和______3种蛋白质纤维构成的细胞支架。 30．在真核微生物细胞质内存在着沉降系数为______s的核糖体，它是由______s和______s两个小亚基组成，而其线粒体和叶绿体内则存在着______S核糖体，它是由______s和______s两个小亚基组成。 3l，真核微生物包括______、______、______和______等几个大类。 32．长有鞭毛的真核微生物类如______、______、和______，长有纤毛的真核微生物 如______；长有鞭毛的原核生物如______、______和______等。 选择题（／4个答案选1／） 1．G—细菌细胞壁的最内层成分是( )。 (1)磷脂 (2)肽聚糖 (3)脂蛋白 (4)LPS 2．G+细菌细胞壁中不含有的成分是( )。 (1)类脂 (2)磷壁酸 (3)肽聚糖 (4)蛋白质 3．肽聚糖种类的多样性主要反映在( )结构的多样性上。
1.工业微生物育种在发酵工业中的作用如何？其目的是什么？ 工业微生物育种建立在： （1）遗传和变异（微生物遗传学）的基础之上； （2）物理和化学诱变剂的发现和应用； （3）工业自动化（自动仪表装置和微机）。 工业微生物育种在发酵工业中占有重要地位，是决定该发酵产品能否具有工业化价值及发酵过程成败与否的关键。 2.工业微生物发展经历了哪几个阶段？ 1)自然选育阶段 2)人工诱变选育阶段 3)杂交育种阶段 4)代谢控制育种阶段 5)基因工程育种阶段 3.工业微生物育种的核心指标有哪些？ 1)在遗传上必须是稳定的。稳定性。 2)易于产生许多营养细胞、孢子或其它繁殖体。 3)必须是纯种，不应带有其他杂菌及噬菌体。 4)种子的生长必须旺盛、迅速。 5)产生所需要的产物时间短。转化率。 6)比较容易分离提纯。 7)有自身保护机制，抵抗杂菌污染能力强。 8)能保持较长的良好经济性能。产率。
9)菌株对诱变剂处理较敏感，从而可能选育出高产菌株。 10）在规定的时间内，菌株必须产生预期数量的目的产物，并保持相对地稳定。 4.革兰氏阳性和阴性菌的细胞壁结构有何差异？它们对溶菌酶和青霉素的敏感有何不同？ 5.缺壁细菌有哪些类型和异同？制备缺壁细菌主要有哪些途径？原生质体：G+菌经溶菌酶或青霉素处理； 球状体：G-菌，残留部分细胞壁。 是研究遗传规律和进行原生质体育种的良好实验材料。 L型细菌：自发突变形成细胞壁缺陷菌株； 6.原生质体制备时，为什么不同微生物要选择不同的酶？举例说明。 酶在原生质体制备中主要用来酶解细胞壁的，不同的微生物其细胞壁成分及含量可能不同，所以要用不同的酶。 酵母菌的细胞壁主要成分有葡聚糖、甘露聚糖蛋白质、几丁质。霉菌的细胞壁：主要成分是纤维素、几丁质、葡聚糖等。
南京工业大学微生物实验课试题库及标准答案 选择题： 01.革兰氏染色的关键操作步骤是: A.结晶紫染色。 B.碘液固定。 C.酒精脱色。 D.复染。 答:(C) 02.放线菌印片染色的关键操作是: A.印片时不能移动。 B.染色。 C.染色后不能吸干。 D.A-C。 答:(A)。 03.高氏培养基用来培养: A.细菌。 B.真菌。 C.放线菌。 答:(C)。 04.肉汤培养基用来培养: A.酵母菌。 B.霉菌。 C.细菌。 答:(C)。 05.无氮培养基用来培养: A.自生固氮菌。 B.硅酸盐细菌。 C.根瘤菌。 D.A,B均可培养。 E.A,B,C均可培养。 答:(D)。 06.在使用显微镜油镜时,为了提高分辨力,通常在镜头和盖玻片之间滴加: A.二甲苯。 B.水。 C.香柏油。 答:(C)。 07.常用的消毒酒精浓度为: A.75%。 B.50%。 C.90%。 答:(A)。 08.用甲醛进行空气熏蒸消 毒的用量是: A.20ml/M3。 B.6ml/M3。 C.1ml/M3。 答:(B)。 09．高压蒸汽灭菌的工艺条 件是: A.121℃/30min。. B.115℃/30min。 C.130℃/30min。 答:(A)。 10．巴氏消毒的工艺条件 是: A.62-63℃/30min。 B.71-72℃/15min。 C.A.B.均可。 答:(C)。 11．半固体培养基的主要用 途是: A.检查细菌的运动性。 B.检查细菌的好氧性。 C.A.B.两项。 答:(C)。 12．半固体培养基的琼脂加 入量通常是: A.1%。 B.0.5%。 C.0.1%。 答:(B)。 13.使用手提式灭菌锅灭菌 的关键操作是: A.排冷气彻底。 B.保温时间适当。 C.灭菌完后排气不能太快。 D.A-C。 答:(A)。 14．目镜头上的"K"字母表 示: A.广视野目镜。 B.惠更斯目镜。 C.补偿目镜。 答:(C)。 15.目镜头上的"P"字母表 示: A.平场目镜。 B.广视野目镜。 C.平场补偿目镜。 答:(A)。 16.物镜头上的"PL"字母表 示: A.正低相差物镜。 B.正高相差物镜。 C.负高相差物镜。 答:(A)。 17.物镜头上的"UVL"字母 表示。 A.无荧光物镜。 B.照相物镜。 C.相差物镜。 答:(C)。 18．镜头上标有"对C"字母 的镜头是: A.相差调整望远镜。 B.摄影目镜。 C.相差目镜。 答:(A)。 19．"PA"表示: A.马铃薯培养基。 B.高氏培养基。 C.肉汤培养基。 答:(A)。 20.无菌室空气灭菌常用方 法是: A.甲醛熏蒸。 B.紫外灯照射。 C.喷石炭酸。 D.A.B.并用。 答:(D)。 21.干热灭菌的关键操作 是:
第一章绪论 4．什么是微生物？它主要包括哪些类群？ 答：微生物并不是生物分类学上的名词，他是包括所有形体微小的单细胞，或个体结构简单的多细胞，或没有细胞结构的低等生物的通称。它包括属于原核类的细菌（真细菌和古生菌），放线菌，蓝细菌，支原体，立克次氏体和衣原体，属于真核类的真菌（酵母菌，霉菌），原生动物和显微藻类；以及属于非细胞类的病毒和亚病毒（类病毒，拟病毒和阮病毒）。 13．微生物有哪五大共性？其中最基本共性的是哪个？为什么？ 答：微生物五大共性分别是：(1)体积小，面积大；(2)吸收多，转化快；(3)生长旺，繁殖快；(4)适应强，易变异；(5)分布广，种类多。其中最基本的特性是体积小，面积大。微生物是一个突出的小体积大面积系统，从而赋予它们具有不同于一切大生物的五大共性，因为一个小体积大面积系统，必然有一个巨大的营养物质吸收面、代谢废物的排泄面和环境信息的交换面，故而产生了其余四个共性。巨大的营养物质吸收面和代谢废物的排泄面使微生物具有了吸收多，转化快，生长旺，繁殖快的特点。环境信息的交换面使微生物具有适应强，易变异的特点。而正是因为微生物具有适应强，易变异的特点，才能使其分布广，种类多。 第二章微生物的结构与分类 8．微生物学名的命名原则有哪些？“Bacillus subtilis (Ehrenberg)Cohn”的含义是什么？ 答：命名原则在书本32页最后1行到33页倒数第3行或课件第二章（1）的37-41张（二、微生物的命名）。含义是：芽孢杆菌属的一种 9.试绘出细菌的结构简图，注明其一般结构和特殊结构，以及它们的主要生理功能。 答：细菌的结构简图（见图2.3.9） 一般构造：细胞壁、细胞膜、细胞质、核质体、核糖体等，是所有细菌都有的构造。 特殊构造：鞭毛、菌毛、性菌毛、荚膜和芽孢等，并非所有细菌都有的构造。 细胞壁的功能：1、决定了革兰氏染色的性质；2、决定细菌的基本形态；3、决定细胞的抗膨压（保护细胞免受渗透压变化的破坏）4、决定对溶菌酶的敏感性；5、决定了对青霉素的抗性；6、为鞭毛运动提供支点；7、决定细胞的抗原性；8、决定细菌的毒性（致病性） 细胞膜的功能：a控制细胞内外物质(营养物质和代谢废物)的运送、交换；b 维持细胞内正常渗透压的渗透屏障作用；c细胞壁各种组分（LPS、肽聚糖、磷壁酸）和荚膜物质等大分子的合成
一、填空题 (每小题2.5分，共25分) 1.微生物是指所有形体微小，单细胞或结构简单的多细胞，或没有细胞结构的一群最低等生物。 2.工业微生物主要包括细菌、放线菌、酵母菌、霉菌、噬菌体等五大类, 其主要特性是(l) 种类多 (2) 分布广(3) 繁殖快 (4) 代谢强 (5) 易变异。 3.细菌细胞壁的主要成分是肽聚糖，它是由许多肽聚糖单体聚合而成的大分子化合物, 其结构是由N—乙酰葡萄糖胺与N—乙酰胞壁酸重复交替连接构成骨架, 短肽接在N—乙酰胞壁酸上，相邻的短肽交叉相联而形成致密的多层网状结构。 4.原核生物的细胞核比较原始简单，没有核膜包住，不具核仁和典型染色体，故称拟核,它实际上是一条很长的环状双链DNA 与少量类组蛋白及RNA结合, 经有组织地高度压缩缠绕而成的一团丝状结构, 其功能是起贮存遗传信息和传递遗传性状的作用。 5.噬菌体是侵染原核生物(细菌、放线菌和蓝细菌)的病毒，它是一种超显微的，没有细胞结构的，专性活细胞寄生的大分子微生物, 其生长繁殖过程可分为吸附、侵入、增殖、成熟、裂解五个阶段。 6.微生物的四大营养类型是光能自养型、光能异养型、化能自养型、化能异养型。微生物的营养五要素是水、碳源、氮源、无机盐和生长因子。 7.从自然界中分离筛选菌种一般可分为样品采集、增殖培养、纯种分离、性能测定等四个步骤。营养缺陷型的选育过程一般可分为诱变、中间培养、淘汰野生型、营养缺陷型检出、营养缺陷型鉴定、变异株的筛选等六个步骤。 8.能够满足野生型菌株生长要求的最低成分合成培养基称为基本培养基。能够满足各种营养缺陷型菌株生长要求的培养基称为完全培养基。 9.化学诱变剂按其作用方式可分为天然碱基类似物、烷基化剂、移码诱变剂、亚硝酸等四大类。紫外线(uv)是物理诱变剂, 它引起DNA结构改变的形式主要有氢键断裂、DNA链断裂、水合作用、T二聚体形成。 10.常用的六种菌种保藏方法是斜面冰箱保藏法、石蜡油封藏法、麸曲保藏法、砂土管保藏法、甘油低温保藏法、冻干法。 二、名词解释 (每小题３分，共18分) 1.革兰氏染色法一种重要的细菌鉴别染色法。该染色法的步骤是：（1）先用结晶紫液初染；（2）再用碘液媒染（与结晶紫形成不溶于水的复合物）；（3）接着用95%乙醇进行脱色；（4）最后再用番红（沙黄）液复染。经过这种染色方法可以将所有细菌基本上区分为两大类：革氏阳性细菌被染上紫色，革氏阴性细菌被染上红色。 2.巴斯德消毒法一种低温消毒法，具体的处理温度和时间各有不同，一般在60~85℃下处理15s至30min。用于牛奶、啤酒、果酒和酱油等不宜进行高温灭菌的液体的消毒方法，主要目的是杀死其中无芽孢的病原菌，而又不影响它们的风味。 3.营养缺陷型是指在某些营养物质(如氨基酸、核苷酸、维生素等)的合成能力上出现缺陷，必须在培养基中外加这些营养成分才能正常生长的变异菌株。 4. 溶源性细菌受到温和噬菌体侵染而带有原噬菌体却又没有形态上可见到的噬菌体粒子的宿主菌，称为溶源性细菌，简称溶源菌。 5.活性污泥是由污水中繁殖的好气性微生物群体组成的絮状污泥，具有很强的吸咐、凝聚和氧化分解污水中有机物质和其它物质的能力。 6.生物传感器生物传感器是一种利用生物活性物质的分子识别能力, 选择性地识别和测定各种生物化学物质的传感器。它是分析生物学与传感器技术交叉的产物。 三、问题解答 (共57分) l.何谓大肠菌群? 简述食品中大肠菌群数的测定方法。(6分) 大肠菌群是指一群在37℃、24小时内能发酵乳糖、产酸产气、需氧或兼性需氧, 革兰氏阴性、无芽孢的杆状细菌。主要包括大肠杆菌、产气杆菌和一些中间类型的杆菌。 检测大肠菌群的方法有多管发酵法与滤膜法两种: 多管发酵法又称水的标准分析方法,大多数卫生单位与水厂均普遍采用此法。多管发酵法检测食品中大肠菌群数的操作过程为：(l) 培养基的制备, (2) 食品检样稀释, (3) 乳糖初发酵试验, (4) 平板分离培养, (5) 证实试验, (6) 报告MPN (大肠菌群的最可能数)。 滤膜法是一种快速的测定方法, 其结果重复性较好, 又能测定较大体积的水样, 目前巳有很多供水公司采用此法。其检测程序为：滤膜洗涤灭菌→滤膜过滤器安装→加水样抽滤→移滤膜贴于培养基上→培养与计数。 2.现有一培养基配方如下:可溶性淀粉5%、蛋白胨1.5%、磷酸二氢钾0.5%、硫酸镁0.1%、琼脂2%, pH5.0,试回答下列问题: (l)按营养物质来源分类, 属何种类型培养基? 为什么? (2)此培养基适于培养哪类微生物? 为什么? (3)简述配制200ml该斜面培养基的操作过程。 (7分) (1) 属半合成培养基。因培养基中，一部分采用天然材料，另一部分用已知的化学药品组成。 (2) 此培养基适于培养霉菌。因pH5.0适于培养霉菌和酵母菌, 但酵母菌不能直接利用可溶性淀粉为碳源。 (3) 操作过程：准确称量可溶性淀粉10g、蛋白胨3g、 磷酸二氢钾1g、硫酸镁0.2g、琼脂4g于500ml烧杯中→加入200ml水溶解→调节pH5.0 →加热融解→补足水分→分装试管→灭菌→摆斜面。 3.现拟从自然界中分离筛选出α-淀粉酶产量较高的枯草芽抱杆菌,试回答下列问题: (l)你认为应该到什么地方采集含此菌的样品较为适宜? (2)进行纯种分离时,为提高效率,根据该菌的何种特性可采用哪些相应的措施? (3)可采用哪些纯种分离方法? (4)在进行性能测定时, 可采用何种简化的初筛方法? (l) 应该到富含淀粉质的地方采集含此菌的样品。 (2) 根据该菌的耐热特性可采用将含菌样品加热80℃处理10min后，杀死不耐热杂菌, 再进行纯种分离的相应措施。 (3) 可采用划线分离、稀释分离、刮棒连续涂布等纯种分离方法。 (4) 可采用平皿淀粉透明圈法进行初筛。 4.对于分支合成途径, 怎样才能积累大量的末端产物? 试以简图表示并说明之。(4分)