医学院技能实验设计
对医学科研实验课题的探究我们一般都需要通过相应的科研实验来论证我们的课题。但是这并不意味着随意的一个实验就能成为验证课题的根据，需要我们对这次的实验进行相应的设计。因而我们在做医学科研实验设计的时候应该注意把握其三个要素：处理因素、受试对象和试验效应。
科研的基本要素包括处理因素、受试对象和实验效应。如用某种传统西药或中成药治疗缺铁性贫血病人，观察比较两组病人血红蛋白的上升趋势，该研究中所用的两种药物称为处理因素，缺铁性贫血病人称为受试对象，血红蛋白称为实验效应。如何正确选择三大要素是科研中专业设计的关键问题。
1、处理因素(受试因素)。通常指由外界施加于受试对象的因素，包括生物的、化学的、物理的或内外环境的。但是生物本身的某些特征(如性别、年龄、民族、遗传特性、心理因素等)也可作为处理因素来进行观察。因此，研究者应正确、恰当地确定处理因素。
一般应注意以下几点：①抓住实验研究中的主要因素。研究中的主要因素是按以往研究基础上(本人或他人)提出的某些假设和要求来决定的。一次实验涉及的处理因素不宜太多，否则会使分组增多，受试对象的例数增多，在实施中难以控制误差。然而，处理因素过少，又难以提高实验的广度和深度。因此，需根据研究目的的需要与实施的可能来确定带有关键性的因素。
②找出非处理因素。除了确定的处理因素以外，凡是影响实验结果的其他因素都称为非处理因素，所产生的混杂效应也影响了处理因素产生的效应对比和分析，这些非处理因素又称混杂因素。
例如上述两种不同药物治疗缺铁性贫血病人的试验，非处理因素可能有年龄、性别、营养状况等。如果两组病人的年龄、性别、营养等构成不一，则可能影响药物疗效的比较。因此设计时便设法控制这些非处理因素，只有这样才能消除它们的干扰作用，减小实验误差。
③处理因素必须标准化。处理因素的强度、频率、持续时间与施加方法等，都要通过查阅文献和预备试验找出各自的最适条件，然后订出有关规定和制度，并使之相对固定，否则会影响试验结果的评价。如处理因素是药物，必须正确选择批号，给药途径和时间也应标准化和相对固定化。
2、受试对象(研究对象)。受试对象的选择十分重要，对实验结果有着极为重要的影响。大多数医学科研的受试对象是动物和人，也可以是器官、细胞或分子。但中药种植中培育品系的研究则将药用植物列为受试对象。
在医学科研中，作为受试对象的前提是所选对象必须同时满足两个基本条件：①必须对处理因素敏感;②反应必须稳定。
因此，在观察新药的临床疗效试验中，应当选择中等程度中青年患者，只有这样才能显示疗效率高低的差别。受试对象的疾病应诊断明确(依照国内或国际统一的诊断标准)，且表现具有典型性。
研究者必须深知病人的心理状况、情绪起落、病情程度、病程长短、生活习惯、个人嗜好、家庭经济收入、食品种类等都不同程度地影响疗效，这些影响因素必须很好地加以控制，使组间均衡化。
根据研究目的不同，对实验动物的选择要求也不同。动物的选择应有针对性地注意种类、品系、年龄(月龄)、性别、体重、窝别和营养状况等。为保证实验效应的精确性，某些动物的生活环境还有严格要求。
3、试验效应。试验效应内容包括试验指标的选择和观察方法两个部分。
指标的选择有以下要求：①指标的关联性，选用的指标必须与所研究的题目具有本质性联系，且能确切反映被试因素的效应。所选指标是否具有关联性，充分反映了研究者的专业知识与技术水平。
②指标的客观性，指标数据来源决定它的主、客观性质。主观性指标来自观察者或受试对象，易受心理状态与暗示作用的影响，在科研中一般尽量少用。客观性指标是指通过精密设备或仪器测定的数据，能真实显示试验效应的大小或性质;排除了人为因素的干扰。
③指标的灵敏度，通常是由该指标所能正确反映的最小数量级或水平来确定。如溶液中物质含量的测定，除测出下限值以外，还可测出最低改变浓度来反映灵敏度。一般要求其灵敏度能正确反映处理因素对受试对象所引起的反应就够了，并非灵敏度越高越好。
④测定值的精确性，精确性具有指标的精密度与准确度双重含义。准确度是测定值与真实值接近的程度。精密度是重复测定值的集中程度。
从设计角度来分析，第一强调准确，第二要求精密。既准确又精密最好，准确但精密度不理想尚可，而精密度高但准确度低则不行。应当强调指标的精确性除与检测指标的方法、仪器、试剂及试验条件有关外，还取决于研究者的技术水平及操作情况。
⑤指标的有效性，指标的有效性是由该指标的敏感性(敏感度)与特异性(特异度)来决定的。
医学中，理想的试验是阳性只出现在患有本病的条件下，未患本病时的试验是阴性。但是绝大多数生物学与医学试验，由于生物个体之间存在差异与试验结果呈正态分布或偏态分布，从试验结果来分析，患者与非患本病者通常在分布上存在不同程度的交错重叠现象。
例如测定年龄、性别、民族、地区相同三群人的身高(巨人症、正常人、呆小病)，不难发现正常人中个别高个子与巨人症中的矮个子的身高值有重叠，正常人中的矮个子又与呆小症中的高个子身高值有重叠。对于大多数试验而言，在样本含量确定的条件下，敏感性与特异性存在反变关系。因此，在选择指标时，宜将二者综合起来考虑。
氯丙嗪的镇吐、降温作用及对电刺激小鼠激怒反应的影响一、目的 1．观察氯丙嗪对电刺激小鼠激怒反应的影响 2．了解催吐作用的试验方法，观察氯丙嗪的镇吐作用。 3．观察氯丙嗪对小鼠的降温作用及其特点 二、作用机制 1.氯丙嗪的镇静作用是通过阻断中脑-边缘叶及中脑-皮质通路中的多巴胺 受体。（镇静） 2.氯丙嗪可以阻断了延脑第四脑室底部的催吐化学感受区的D2受体，大剂 量的氯丙嗪直接抑制呕吐中枢。（镇吐） 3.氯丙嗪对下丘脑的调节中枢的抑制。（降温） 三、实验材料 动物：小白鼠，体重18～22g，雌雄不拘。 药品：0.08%氯丙嗪，生理盐水，0.4%氯丙嗪，0.4%酒石酸锑钾，生理盐水，0.03%氯丙嗪，生理盐水，液体石蜡。 器材：药理生理多用仪及附件激怒盒、万用电表、小动物电子秤、鼠笼、1ml 注射器、5号针头，小铁丝笼、小动物电子秤（或天平）、5ml注射器，口腔温度计、1ml注射器、小铁丝笼。 四、实验步骤 将小鼠编号0——11 （一）电刺激激怒实验 实验装置的连接和调置：将药理生理多用仪后板上的开关拔向“激怒”一边，交流电输出电压的电位调节旋钮逆时针旋转至最小，交流电输出接线一端插入“交流输出”插座，另一端分别夹在附件激怒盒的红、黑柱上，即与刺激盒的导电铜丝板相联。交流输入线一端插入“交流输入”插座，另一端接实验室电源。刺激方式拨到“连续B”，“B时间”置于1s，“A频率”置于4Hz，然后用万用表测其阈电压。 诱发小白鼠激怒反应：取异笼喂养的小白鼠各1只，称重后将2只小白鼠放入附件激怒盒的导电铜丝板上，把盖子盖上后，将电源打开，顺时针调节交流电压输出旋钮，直至引起小白鼠激怒反应，刺激电压一般为30V左右。激怒现象表现为：两鼠对应、前肢离地、对峙、互相撕咬等。若刺激1min以上仍未出现者弃之不用。以上法挑选有激怒反应的合格小白鼠两对，并记录其刺激电压。 给药及观察：取一对小白鼠腹腔注射0.08%氯丙嗪 0.1ml/10g，另一对腹腔注射生理盐水0.1ml/10g。给药后20min，先用万用电表调节刺激输出电压至给
基础医学机能实验设计 班级：临床1202 姓名：汪茜 学号：2 题目：卡托普利、硝苯地平和硝普钠对血压的影响 （一）材料与方法 1、实验对象及分组 （1）实验对象的种类：家兔8只。 （2）家兔的条件：家兔体重2.0~3.0kg，体重不应相差10%，雌雄各半，健康状况良好。 健康标准：1、一般状况：发育良好，反应灵活，食欲尚佳 2、皮毛与爪趾：被毛浓密而有光泽，紧贴体表。 爪趾无溃疡、结痂。 3、头部：眼睛明亮而灵活，眼结膜无充血，眼鼻部 无过多分泌物，呼吸均匀，无鼻翼扇动。 4、腹部与外生殖器：腹部无膨胀，肛门周围毛色洁 净，无损伤、脓痂与分泌物。 （二）实验器材与药品 BL-410型生物信号处理系统、哺乳类动物手术器械一套、听诊器、兔固定台、玻璃分针、注射器（5ml、2ml、1ml）、针头、头皮针、有色丝线、缚腿带、纱布、压力转化器、气管插管、动脉插管、动脉夹、保护电极、婴儿秤。20%氨基甲酸乙酯溶液（乌拉坦溶液）、0.08%
卡托普利(2.10 ml/kg) 、0.004%硝苯地平(0.84 ml/kg) 、0.002%硝普钠(0.54 ml/kg)、0.5%肝素生理盐水、生理盐水。 （三）实验步骤 1、麻醉固定：选取合适家兔后，称重，用20%氨基甲酸乙酯溶 液5ml/kg，从耳缘静脉缓慢注入（用头皮针），麻醉后仰卧固定于手术台上。可保留耳缘静脉以待给药。麻醉过程中若发现药量不够可适当增加麻醉药量（不宜超过原量的10%） 2、气管插管：剪去兔子颈部手术部位被毛，在甲状软骨至胸骨上 凹作一切口，用止血钳分离肌肉至暴露气管，并穿一根浸过生理盐水的丝线备用。于甲状软骨下1~2cm处的两个软骨环之间，用手术剪将气管横向切开，再想头端作一纵向切口，使呈’’⊥’’型，将口径适当的气管插管由切口向肺段插入气管腔内，用备用线结扎，再在插管的侧管上打结固定，以防插管滑出。3、颈总动脉分离与插管：在气管左侧，分离两条肌肉之间的结缔 组织，找到呈粉红色较粗大的血管，用手触之有搏动感，即为颈总动脉。用拇指和示指抓住颈皮和颈肌，以中指顶起外翻，另一手持玻璃分针，顺血管走行方向分离出颈总动脉。用长大约1.5cm，内径约为0.1~0.2的塑料管插入（管头为斜面），另一头连接的换能器腔中应充满肝素抗凝剂。游离的颈总动脉段应有两根备用线，一根结扎动脉远心端，用动脉夹夹住近心端，另一根线打一活结于动脉夹与远心端结扎线之间。用眼科剪在动脉靠远心端结扎线处剪一“V”形切口，插入导管。插
实验一、小肠平滑肌生理特性的观察与分析 一、实验目的—— 1. 观察温度、乙酰胆碱、肾上腺素等药物对离体家兔小肠平滑肌的作用； 2. 观察消化道平滑肌的一般生理特性及分析理化环境改变对其舒缩活动的影响。 二、实验原理 消化道平滑肌和骨骼肌、心肌一样，也具有兴奋性、传导性和收缩性，有些也具有自律性。相比之下消化道平滑肌的兴奋性低，收缩慢，伸展性大，具有紧性收缩，对化学物质、温度变化及牵刺激较敏感等特性。小肠离体后，置于适宜的溶液中，观察其收缩活动及环境变化的影响，观察分析上述生理特性。 三、实验材料—— 1、实验动物：家兔 2、器械、药品：电热恒温水浴锅、浴槽、力换能器(量程为25g以下)、BL-410生物记录系统、L型通气管、道氏袋、注射器、培养皿、温度计、烧杯、螺丝夹、三维调节器、台氏液、0.01%去甲肾上腺素、0.01%乙酰胆碱、1mol/L NaOH溶液、lmol/L HCl溶液、2%CaCl2溶液。 四、实验方法和步骤 1、标本制备流程： ①击昏家兔： 用木槌猛击兔头枕部，使其昏迷。 ②剖开腹腔快速取出肠管： 立即剖开腹腔，找出胃幽门与十二指肠交界处，快速取长20~30cm的肠管，先将与该肠管相连的肠系膜沿肠缘剪去，置于供氧台氏液中轻轻漂洗，把肠容物基本洗净。 ③制作离体肠标本： 将肠管分成数段，每段长2-3cm，两端各系一条线，保存于供氧的38℃左右的台氏液中 2、仪器安装与调试实验安装（如图）： 恒温水浴锅控制加热，恒温工作点定在38℃。将充满氧气的道氏袋与通气钩相连接，将肠段一端系在通气管钩上，另一端与力换能器相连。控制通气量，使氧气从通气管前端呈单个而不是成串逸出。 仪器调试：BL-410系统的使用，选择“实验项目”中的“消化实验”选中“消化道平滑肌生理特性”。相关参数设置的参考值：时间常数t→DC，高频滤波 F→30Hz，显速→4.00s/div，增益→100g。用鼠标左键单击工具条上的“开始”按钮，调节参数至波形幅度、密度适当，待收缩曲线稳定后，单击记录按钮。 观察项目现象及解释 1．待标本稳定后，记录小肠平滑肌收缩的对照曲线。 2．乙酰胆碱的作用用滴管吸入0.01%乙酰胆碱向灌流浴槽滴1~2滴。观察到明显效应后，立即从排水管放出浴槽含乙酰胆碱的台氏液，加入新鲜温台氏液，由此反复3次，以洗涤或稀释残留的乙酰胆碱，使之达到无效浓度，待小肠运动恢复后进行下一项。 3．肾上腺素的作用按上述方法将0.01%肾上腺素加入浴槽1~2滴，观察小肠运动的反应。当效果明显后，立即更换台氏液。 4．氯化钙的作用加2%CaC12溶液2~3滴入灌流浴槽，观察其反应，效果明显后迅速冲洗。5．盐酸的作用加1~2滴1mol/L HCl溶液入浴槽，观察其反应。
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交流输入线一端插入“交流输入”插座，另一端接实验室电源。刺激方式拨到“连续B”，“B时间”置于1s，“A频率”置于4Hz，然后用万用表测其阈电压。 诱发小白鼠激怒反应：取异笼喂养的小白鼠各1只，称重后将2只小白鼠放入附件激怒盒的导电铜丝板上，把盖子盖上后，将电源打开，顺时针调节交流电压输出旋钮，直至引起小白鼠激怒反应，刺激电压一般为30V左右。激怒现象表现为：两鼠对应、前肢离地、对峙、互相撕咬等。若刺激1min以上仍未出现者弃之不用。以上法挑选有激怒反应的合格小白鼠两对，并记录其刺激电压。 给药及观察：取一对小白鼠腹腔注射0.08%氯丙嗪0.1ml/10g，另一对腹腔注射生理盐水0.1ml/10g。给药后20min，先用万用电表调节刺激输出电压至给药前引起激怒反应的阈电压，然后断开电源，将该对小白鼠置于导电铜丝板上，再打开电源，刺激1min。观察给药前后反应的差异。 （二）镇吐作用 取小白鼠4只，称重，随机分为两组，并观察动物活动情况及有无呕吐现象。给甲组小白鼠腹腔注射0.4%氯丙嗪0.8mg/10g （0.2ml/10g），1min后灌服0.4%酒石酸锑钾1.2ml/10g （0.3ml/10g）。给药后将小白鼠分别置于小铁笼中，记录给药时间，密切观察小白鼠出现何种反应，比较二组反应有何不同。 （三）降温作用 挑选合格动物：取小白鼠置小铁笼上，用左手拇指盒食指捏住其后头颈部之皮肤，翻转使之腹向上，以左手无名指将鼠尾压再拇指基部，右手拿口腔温度计，将水银柱甩到35oC以下，末
药理学实验方案
元胡止痛片对小鼠镇痛抗炎镇痛活性研究 ——药理实验设计 设计人：级药学一班 张礼杰 515010 信盼 515024 陈茂琴 515026 何朵朵 515028 药学四班 杨森 515101 冯禹 515110 王同月 515102
元胡止痛片中抗炎和镇痛作用研究 1.实验目的：探讨元胡止痛片的镇痛和抗炎作用 2.实验原理：（1）元胡止痛片收载于《元胡止痛片收载于《中国药典》是由元胡、白芷两味药组成的中药复方制剂为行气活血止痛剂临床用于治疗气滞血瘀胃痛、胁痛、头痛及月经痛等症疗效确切。本实验是为验证元胡止痛片的镇痛和抗炎作用进行验证。实验对四川禾邦阳光制药厂家生产元胡止痛片不同剂量进行了药效学研究采用小鼠醋酸扭体法、小鼠热板法和耳肿胀法实验分别测定小鼠扭体反应抑制率、小鼠痛阂值提高率和肿胀率从而确定不同剂量的镇痛和抗炎作用效果。 在基础医学研究中筛选镇痛药的常见致痛方法概括有物理法（热、电、机械）和化学法。动物的疼痛反应常表现出嘶叫、舔足、翘尾、蹦跳及皮肤、肌肉抽搐。化学法，即将某些化学物质，如强酸、强碱、钾离子、缓激肽等，涂布于动物的的某些敏感部位或腹腔注射。腹腔注射损伤物质引起受试动物腹痛，动物表现出“扭体反应”（即腹部内凹、躯干与后肢伸张、臀部高起）。 3.实验方法 :使用小鼠热板法、醋酸扭体法、耳肿胀法 ,并分别建立小鼠疼痛和炎症模型 ,灌胃给予不同剂量元胡止痛片配成的溶液，观察对动物的镇痛和抗炎作用。 4.实验过程： 1.内容
4.1 药品与试剂 元胡止痛片：四川禾邦阳光制药股份有限公司，国药准字z51021658，规格：片芯重0.25g,12片 阿司匹林: 浙江金华市第三制药厂, 国药准字: H13023716, 临用前用蒸馏水配制为适当浓度的混悬液。 4.2动物：健康昆明种小白鼠，雌性，32只 4.3 器材：数控超级恒温槽，烧杯、1ml 注射器、电子秤 4.4分组： 空白对照组 (灌胃0.9%生理盐水 10 mL/kg) 元胡止痛片高、低剂量组 (0.2，0.4mg ／10g) 阳性药阿司匹林对照组 (灌胃阿司匹林 0. 4 g/kg) 4.5人和动物剂量换算公式 小白鼠=20 0026 .0?人/g 2 方法 （1）热板法 1.动物筛选：致痛潜伏期 (痛阈值)为 5~30s 之间的合格雌性小鼠。32只，热板法镇痛试验筛选痛阈值合格的小鼠，取♀小鼠于给药前先用热板仪于55 ± 0． 5 ℃分别测定每只小鼠的正常痛阈值［将小鼠放于智能热板仪上至出现舔后足的所需时间作为痛阈值( s) ，连续 2 次，间隔30 s ，测定平均值即为正常痛阈值］。将舔后足时间＜ 5 s 或＞30 s ，或跳跃者不用于此实验
药理学设计性实验 药理学实验设计 1( 实验项目名称:奥美拉唑对抗利血平引起的胃溃疡作用 2.国外研究现状:胃溃疡是临床常见病，为研究其发病和治疗机制，国内外业已建立起多种胃溃疡小鼠动物模型，有的模型在中医药研究中亦被广泛引用。但研究中存在的突出。奥美拉唑对小鼠水浸应激性溃疡的形成具有很强的抑制作用，表现为溃疡数和溃疡发生率下降，且呈量效关系。 国外临床研究表明，奥美拉唑钠对胃溃疡的疗效明显优于H+受体拮抗剂，表现为起效快，症状消失迅速，用H+受体拮抗剂无效的患者改用本药可得到满意的疗效。 3.实验原理 :利血平是肾上腺素能神经元阻断性抗高血压药。用药后交感神经系统的功能受到遏制，副交感神经系统的功能相对占优势，结果出现利血平的副作用，引发溃疡，因此在本实验中引用利血平制作小白鼠的胃溃疡模型。 奥美拉唑选择性性地作用于胃粘膜壁细胞，抑制处于胃壁细胞顶端膜构成的分泌性微管和胞浆内的管状泡上的H+-K+-ATP酶的活性，从而有效地抑制胃酸的分泌，起效迅速，适用于胃及十二指肠溃疡，返流性食管炎和胃泌素瘤。由于H+、K+-ATP酶是壁细胞泌酸的最后一个过程，故本品抑酸能力强大，有强而持久的抑制基础胃酸及食物、五肽胃酸泌素所致的胃酸分泌的作用。它不仅能非竞争性抑制促胃液素、组胺、胆碱及食物、刺激迷走神经等引起的胃酸分泌，而且能抑制不受胆碱或H2受体阻断剂影响的部分基础胃酸分泌，对H2受体拮抗剂不能抑制的由二丁基环腺苷酸(DcAMP)刺激引起的胃酸分泌也有强而持久的抑制作用。显效快，可逆，且无H2受体拮抗剂诱发精神方面的副作用。本品对胃蛋白酶分泌也有抑制作用，对胃黏膜血流量改变不明显，也不影响体温、胃腔温度、动脉血压、静脉血
影响尿液生成的因素 【目的和原理】 尿生成的过程包括肾小球的滤过、肾小管和集合管的重吸收和分泌三个过程。凡能影响上述过程的任何因素，均可影响尿的生成并可引起尿量及尿的性质、成分的改变。本实验以家兔为实验对象，采用膀胱插管术收集并记录尿量，主要观察不同因素或药物对尿量的影响。实验目的： 1．学习膀胱插管术、尿量记录及尿糖鉴定等泌尿实验的方法。 2．进一步学习并熟悉大动物实验的基本方法和技术。 3．观察影响尿生成的若干因素，加深理解尿生成的机理。 【实验材料】 1．动物家兔 2．试剂和药品生理盐水、20％氨基甲酸乙酯溶液、20％葡萄糖注射液、100单位／毫升肝素生理盐水（或6％枸橼酸钠）、1∶10，000去甲肾上腺素、垂体后叶素、速尿、20％甘露醇、班氏（Benedict）尿糖定性试剂。 3．装置和器材微型计算机及生物信号采集与处理系统、血压换能器、保护电极、兔手术台和手术器械、动脉插管、动脉夹、膀胱漏斗、注射器（2ml 、5ml 、10ml 、20ml）及针头、酒精灯、试管架、试管和试管夹、输液装置、手术灯、纱布、丝线等。 【实验方法】 1．麻醉固定将兔称重后，自耳缘静脉缓慢注入20%氨基甲酸乙酯（5ml/kg），待动物麻醉后仰卧固定于兔手术台上，剪去颈部和下腹部手术野的毛。 2．手术 1）颈总动脉插管在颈部正中切开皮肤6～7厘米，分离皮下组织及肌肉，暴露出气管。在气管的两边分别分离出左颈总动脉和右迷走神经，在其下穿线备用。按颈动脉插管方法将充满肝素生理盐水的动脉插管插入左颈总动脉，动脉插管的另一端经血压换能器连接于生物信号采集、处理系统的某一通道上，用于观察动脉血压的变化。手术完毕后用温的生理盐水纱布覆盖创面。 2）膀胱插管在下腹部正中线脐下方作一长约3～4厘米的皮肤切口，其下端直达耻骨联合。分离皮下组织并沿腹白线切开腹壁。将膀胱翻出腹外，辨认清楚输尿管，并向肾侧仔细地分离两侧输尿管2～3厘米，在其下方穿一条线，将膀胱上翻用线结扎膀胱颈部以阻断它同尿道的通路；然后在膀胱顶部选血管较少处，做一环形的荷包缝合，缝合线两端要足够长，暂不结扎；在荷包缝合的中央剪一纵行小切口，插入膀胱漏斗，然后用荷包缝合线将切口边缘固定于膀胱漏斗的凹槽上，膀胱漏斗的延伸管与引流导管相连。动物所产生的尿液经膀胱漏斗、引流导管流出后直接观察。手术完毕用温热的生理盐水纱布覆盖腹部创口。3．实验记录 生物信号采集与处理系统：与上次实验相同 4. 观察项目 待尿量和血压稳定后，即可进行下列各项观察。注意每项实验开始前都必须先记录一段正常尿量和血压曲线作为对照，然后进行注射或刺激，并连续观察和记录至效应明显后再等待恢复至原来水平时，才能开始下一项实验。 1）耳缘静脉快速注射37OC生理盐水20ml，观察血压和尿量的变化。 2）结扎并剪断右侧迷走神经，用中等强度的电流刺激其外周段20～30 秒，使血压维持在40～50mmHg，观察尿量的变化。 3）先收集尿液2滴进行尿糖定性实验*作为对照，然后自耳缘静脉注射20%葡萄糖溶液10ml，观察血压和尿量的变化，在尿量变化最明显时，再收集尿液2滴作尿糖定性实验。
机能学实验设计 ——探究纳豆激酶是否有降血压作用 专业：医学检验与技术 年级及班级：14级本科一班 学号：1415030104 姓名：李天佑 组数：1班2组 日期：2015年12月12日
【立题依据】 1、研究背景： 纳豆源于中国。纳豆类似中国的发酵豆、怪味豆。古书(和汉三才图会)记载有：“纳豆自中国秦汉以来开始制作。”纳豆初始于中国的豆豉。据《食品文化·新鲜市场》(石毛直道著，第101页)一书介绍，两种纳豆都与中国有缘。特别是咸纳豆，大约在奈良、平安时代由禅僧传入日本。日本也曾称纳豆为“豉”，平城京出土的木简中也有“豉”宇。与现代中国人食用的豆豉相同。由于豆豉在僧家寺院的纳所制造后放入瓮或桶中贮藏，所以日本人称其为“唐纳豆”或“咸纳豆”。纳豆激酶(nattokinase简称NK)是一种枯草杆菌蛋白激酶，是在纳豆发酵过程中由纳豆枯草杆菌(Bacillus subtilislnatto)产生的一种丝氨酸蛋白酶。近年来，关于纳豆降血压的相关广告在国内十分盛行，但真正的有科学依据关于报道还未出现，日本生物科学研究所与韩国首尔延世大学研究院心脑血管疾病中心共同研究关于纳豆激酶对高血压的效果。该研究报告的结论是：“总之，纳豆激酶会导致收缩压和舒张压下降。这个结果表明增加纳豆激酶的摄入，可能对于预防和治疗高血压起着重要的作用。” 随着中国高血压病人的增多，有相关报道中国高血压患者达2亿人，每年新增加1000万人！市面上的降血压药物在降低血压的同时，也带来了一些副作用，因此寻找一种食物让人们在日常生活中预防控制血压及有益于健康是广大人民普遍的需求。 2、研究目的： 本实验旨在探讨纳豆激酶是否有降低血压的功效，如果有，那对于病情不同程度的病人效果又是否有不同。 【研究内容与方法】 研究方法：本实验将先从小鼠入手，观察是否有降血压作用，如有作用再推广及人类，探究其对对于病情不同患者的作用效果。即实验二是在实验一的基础上进行的。 研究内容： 实验一： 1、实验对象与分组： 大鼠9只、体重100克左右、雄性、健康状况良好。 按血压、体重随机分成3组，设正常组（A组），高血压组（B组），高血压纳豆激酶组（C组）。 2、实验器材和药品： 大鼠、台秤、音频震荡器、扬声器、血压换能器、20%氨基甲酸乙酯、生理盐水。 3、高血压大鼠造模： 采用大鼠，4月龄，放入隔音室内笼养，噪音刺激可由电铃或扬声器发出，发音器是一个音频振荡器，连接一个20W高音扬声器。噪音刺激应经常在700～1000周/秒中变换，噪音刺激每30秒一次，亦可每隔1分钟刺激30秒。可随时变换毋须恒定，但噪音干扰须日夜不止，连续数月。噪音刺激连续3个月后血压普遍升高，大灰鼠正常平均收缩压为113±8mmHg，此时可升高到130～140mmHg，有40%动物收缩压可高达160mmHg。 4、实验步骤： 大鼠进入实验室先喂养1-2天，然后选血压在130—140的小鼠进行实验，AB组
机能学实验报告 实验一、小肠平滑肌生理特性的观察与分析 一、实验目的—— 1.观察温度、乙酰胆碱、肾上腺素等药物对离体家兔小肠平滑肌的作用； 2.观察消化道平滑肌的一般生理特性及分析理化环境改变对其舒缩活动的影响。 二、实验原理 消化道平滑肌和骨骼肌、心肌一样，也具有兴奋性、传导性和收缩性，有些也具有自律性。相比之下消化道平滑肌的兴奋性低，收缩慢，伸展性大，具有紧张性收缩，对化学物质、温度变化
及牵张刺激较敏感等特性。小肠离体后，置于适宜的溶液中，观察其收缩活动及环境变化的影响，观察分析上述生理特性。 三、实验材料--- 1、实验动物：家兔 2、器械、药品：电热恒温水浴锅、浴槽、张力换能器（量程为25g以下）、BL-410生物记录系统、L型通气管、道氏袋、注射器、培养皿、温度计、烧杯、螺丝夹、三维调节器、台氏液、0.01%去甲肾上腺素、0.01%乙酰胆碱、1mol/L NaOH溶液、lmol/L HCl 溶液、2%CaCI2溶液。 四、实验方法和步骤 1、标本制备流程： ①击昏家兔： 用木槌猛击兔头枕部，使其昏迷。 ②剖开腹腔快速取出肠管： 立即剖开腹腔，找出胃幽门与十二指肠交界处，快速取长20~30cm的肠管，先将与该肠管相连的肠系膜沿肠缘剪去，置于供氧台氏液中轻轻漂洗，把肠内容物基本洗净。 ③制作离体肠标本： 将肠管分成数段，每段长2-3cm，两端各系一条
线，保存于供氧的38C左右的台氏液中 2、仪器安装与调试实验安装（如图）： 恒温水浴锅控制加热，恒温工作点定在38C。 将充满氧气的道氏袋与通气钩相连接，将肠段一端系在通气管钩上，另一端与张力换能器相连。控制通气量，使氧气从通气管前端呈单个而不是成串逸出。 仪器调试：BL-410系统的使用，选择“实验项目”中的“消化实验”选中“消化道平滑肌生理特性”。相关参数设置的参考值：时间常数t -DC 高频滤波 F —30Hz,显速—4.00s/div，增益—100g。用鼠标左键单击工具条上的“开始” 按钮，调节参数至波形幅度、密度适当，待收缩曲线稳定后，单击记录按钮。 观察项目现象及解释 1.待标本稳定后，记录小肠平滑肌收缩的对照曲线。 2?乙酰胆碱的作用用滴管吸入0.01%乙酰胆碱向灌流浴槽内滴1~2滴。观察到明显效应后，立即从排水管放出浴槽内含乙酰胆碱的台氏液，加入新鲜温台氏液，由此反复3次，以洗涤或稀释残留的乙酰胆碱，使之达到无效浓度，待小肠运动恢复后进行
药理学综合设计性实验 实验一氯丙嗪的降温作用（设计性实验，4学时） 实验简介：本实验使学生掌握实验设计的基础理论和方法（包括动物选择、实验分组、对照原则、处理因素的标准化等多方面知识），并通过观察氯丙嗪的降温作用，掌握其降温特点，联系临床应用。 实验辅导：至少双人辅导 【实验目的】掌握实验设计的基础理论，通过观察氯丙嗪的降温作用，掌握其降温特点，联系临床应用。 【实验器材】小鼠、注射器、体温计、冰箱、氯丙嗪等。 【实验过程】 一、首先介绍实验设计的基础理论 （一）实验设计是科学研究计划中关于研究方法与步骤的一项内容，是实验研究所涉及的各项基本问题的合理安排。严密合理的实验设计是顺利进行研究工作的保证，同时也能最大限度地减少实验误差以获得精确可靠的实验结论，甚至可以使研究工作事半功倍。 药理学实验设计的三大要素，即处理因素、实验对象与实验效应。 1.处理因素 (1)处理因素实验中根据研究目的确定的由实验者人为施加给受试对象的因素称为处理因素，如药物、某种手术等。 一次实验涉及的因素不宜过多，否则会使分组增多，受试对象的例数增多，在实际工作中难以控制。但处理因素过少，又难以提高实验的广度和深度。 (2)明确非处理因素：非处理因素虽然不是我们的研究因素，但其中有些因素可能会影响实验结果，产生混杂效应，所以这些非处理因素又称混杂因素。设计时明确了这些非处理因素，才能设法消除它们的干扰作用。 (3)处理因素的标准化：处理因素在整个实验过程中应做到标准化，即保持不变，否则会影响实验结果的评价。如实验设计中处理因素是药物时，则药物的剂型、给药途径、质量(成分、出厂批号等)必须保持不变。 2.实验对象 实验对象的选择十分重要，对实验结果有着极为重要的影响。药理学实验主要实验对象包括整体动物(正常动物、麻醉动物和病理模型)、离体器官、组织及细胞等。 3.实验效应 实验效应是指受试对象在处理因素作用后呈现的反应或受到的影响，其具体表现形式是指标。这些指标包括计数指标(或定性指标)和计量指标(或定量指标)等。指标的选定需符合特异性、客观性、重复性、灵敏性、精确性、可行性等原则。 (二)药理学实验设计的基本原则 为了提高研究效率，控制误差和偏倚，药理学实验设计同其它科学研究一样必须遵循三大基本原则，即对照、随机和重复原则。 1.对照原则 对照是比较的前提。在生物学实验中存在许多影响因素，为消除无关因素对实验结果的
医学机能学实验-学生创新性实验设计题目汇编 饮食控制对AD大鼠学习、记忆能力的影响 Nm23-H1基因对宫颈癌转移的影响雄性素对大鼠心肌却血型损伤的保护作用比较不同血管生成抑制剂对抗肿瘤效果一氧化氮对肿瘤的作用芹菜提取物对肾性高血压大鼠血管重构的影响盐是天然的抗抑郁剂（探究实验）绿茶对家兔急性心力衰竭模型的保护和治疗作用咖啡对大鼠学习记忆的影响氨基比林咖啡因片（脑清片）致死性研究及对其有效成分进行配比优化芦荟与治疗高血压的相关性探究银杏叶对高血压左心肥厚逆转作用氨茶碱对小鼠心肺复苏的作用注射用碟脉酮对垂体后叶素诱发大鼠心肌缺血的影响血红素加氧酶 1 对哮喘的抗炎作用新型利尿药托拉塞米的利尿作用探究阿司匹林对高血压的治疗作用大蒜素对小鼠结肠癌抗肿瘤作用茶多酚对心律失常的作用口服异丙酚与部分常用麻醉药效果比较的研究高盐饮食对家兔血压和心肝肾组织中自由基的影响实验
u型高血压时交感神经活性及其相应受体敏感性的变化 艾叶油对离体豚鼠气管平滑肌的影响白术对在体小鼠胃肠运动的作用及其机制的探讨不同比例的高渗盐溶液对失血性休克家兔的抢救效果丹参注射液、参麦注射液和大蒜素对大鼠心肌缺血再灌注的保护作用的对比实验毒蕈碱对离体大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用急性右心衰竭与ANP在急性心力衰竭治疗中的作用决明子对家兔的降血脂作用的研究 咖啡因对大鼠工作记忆促进作用的定性研究 硫化氢和胃肠道疾病硫化氢对胃肠道的扩张及其机制的简单探讨 迷迭香对小鼠脑缺血再灌注的影响 纳洛酮对家兔失血性休克血压的影响生姜汁的降血糖作用生姜油对病毒性肝炎小鼠肝损伤的预防作用研究生姜油对豚鼠气管平滑肌的作用研究酸樱桃提取物软膏剂镇痛抗炎作用的初步研究探究腺苷在大鼠心肌缺血后适应中的保护作用桃仁对未孕大鼠子宫平滑肌收缩的影响小鼠中毒性休克模型及其救治药物 血管紧张素n对不同年龄大鼠心脏al肾上腺素受体介导正性变力效应的影响 乙醇联合安定对血压、心率和微循环的影响 丹参、川芎、穿山甲的活血性气作用比较应激性因素致大鼠胃溃疡作用及药物预防不同的送服溶液对药物吸收的影响天麻素对血压影响途径的研究抗生素联合用药的优势褪黑素对大鼠应激性胃溃疡的影响花椒毒酚不同给药途径镇痛作用的比较研究白萝卜提取物（MIGB对小肠平滑肌运动的影响绿豆球蛋白对血浆胆固醇的影响苦瓜提取物的降血糖作用阿嗪米特对血铅浓度的影响1, 2-二甲基-3-羟基4吡啶酮（DHPO对铅中毒小鼠学习记忆能力的影响 多巴胺在治疗急性肾功能衰竭中疗效评价甘油溶血实验鸡蛋对大鼠胃溃疡的预防作用及其机制探讨失血性休克腹腔复苏最佳给药浓度的研究甜菊苷的降压作用 实验性铅中毒对子代大鼠学习记忆能力的影响山莨菪碱及IL-13 预处理对肾脏缺血/ 再灌注的影响硝酸异山梨酯对急性右心功能衰竭的治疗作用缩宫素对离体子宫平滑肌的兴奋作用主、被动吸烟的危害有机磷及解毒剂对蟾蜍离体坐骨神经腓肠肌肌标本的作用失血性休克的生理指标观察利尿药对家兔尿量的影响布鲁卡因、利多卡因对BaCI2 致心律失常的治疗效果的比较理化因素对红细胞脆性的影响精神性灼口综合征的临床心理治疗海水浸泡对创伤性脑水肿影响的实验研究缺铁对大鼠胃排空功能的影响及机制新斯的明对箭毒和琥珀胆碱肌松作用的影响清开灵注射液防治酒精中毒性肝损伤碘化钾预防孢子丝菌病的实验研究冷热环境中蟾蜍肠系膜微循环血流速度改变兔肾内是否存在乙酰胆碱能舒血管纤维灭滴灵、乙醇对甲醇中毒的解救对比一种联合药膏治疗烧伤的疗效判断巧克力的镇咳作用烟碱对家兔血
机能实验设计 - 机能实验设计 课题名称：咖啡因对青蛙骨骼肌收缩的影响选题目的和意义 1、实验目的 本实验的目的为探究咖啡因任氏液对青蛙骨骼肌收缩的影响。 2、临床应用 咖啡碱是茶叶、咖啡豆、可可、可拉果等植物中的主要生物碱，化学名为1，3，7－三甲基黄嘌呤，分子式为C8H10O2N4。咖啡碱是重要的医药原料，对人体机体的作用非常复杂。咖啡碱能刺激神经系统，提高大脑记忆和识别能力，促进胰岛素分泌和降低Ⅱ型糖尿病风险，能刺激呼吸系统，可用于治疗早产婴儿呼吸暂停，具有抗癌效果，同时也会引起高血压和心率不齐导致钙流失和骨质疏松以及流产［1］等不良反应 3、研究意义 李淑翠等［2］报道咖啡因能提高小鼠运动耐力，使运动后小鼠肝糖原储备增加，血乳酸和血尿素氮水平降低，并抑制运动引起的脂质过氧化反应，表明咖啡因具有抗运动性疲劳作用；而运动依靠骨骼肌的收缩，肌肉收缩乏力时表现出运动疲劳。本次实验拟观察咖啡碱处理后，蟾蜍坐骨神经腓肠肌标本在不同的刺激形式下，对肌肉收缩性的影响，进一步深入探讨咖啡因在缓解运动疲劳，提高运动耐受力作用
的具体机制。实验动物 青蛙实验材料 1、器械：手术器械一套 2、仪器：生物机能实验系统、张力换能器、刺激电极、肌动器等 3、药品：任氏液、咖啡因原液1支，100μg/ml咖啡因任氏液、1000μg/ml咖啡因任氏液。 4、其他：烧杯、棉线、纱布、培养皿、吸管等。实验步骤与方法 1、手术操作：制备青蛙坐骨神经腓肠肌标本。 2、试剂配制：制备1000μg/ml咖啡因任氏液；制备100μg/ml咖啡因任氏液。 3、实验准备：制备标本，先在任氏液中浸泡10分钟，然后再将实验组的标本分别在1000μg/ml 咖啡因任氏液与100μg/ml咖啡因任氏液中浸泡10分钟；对照组浸泡在任氏液中10分钟，进行两组对照实验。 4、仪器装置：准备好生物机能实验系统及张力换能器。 5、观察与记录：观察青蛙坐骨神经腓肠肌标本在不同浸泡环境下，其收缩性的影响，记录并对比阈刺激与最大刺激收缩曲线的幅度的百分比。 给肌肉的负荷增加2g后，测量肌肉收缩的阈刺激与最大刺激收缩曲线的收缩幅度，并计算它们增加的比例。 再给肌肉不完全强直收缩，重复3次后，再次测量阈刺激与最大刺激收缩曲线收缩的幅度，并计算它们增加的比
通过实验设计培养能力 发表时间：2011-08-19T12:29:39.827Z 来源：《学习方法报教研周刊》2011年44期作者：吕美儿 [导读] 有些实验成功率又不高，更抑制了学生学习科学的兴趣和积极性。 浙江省永康市第三中学吕美儿 培养学生能力是现代教育的主要标志和根本任务。科学成为未来世纪的中心学科，更应重视对学生能力的培养。科学实验是科学教学的主要内容，是科学老师常用的教学手段，也是学生学好科学的有效方法。所以，以科学实验为突破口，探索一条培养学生能力的有效途径是必要的，也是可行的。在我国，现行中学教材中的科学实验大多是照方抓药式的验证性实验，启发性、探索性不强，影响了对学生能力的培养。有些实验成功率又不高，更抑制了学生学习科学的兴趣和积极性。 一、传统实验与设计实验 中学生所做过的绝大多数科学实验都是教材中预先设计好的实验。学生只是通过实际操作，观察一下实验现象，得出事先已确定的结论。这种实验，我们称之为传统实验。现行传统科学教材中安排的实验对学生形成、理解、巩固所学的科学知识有一定的作用，但由于实验安排始终处于概念理论的领队地位，实验仅仅作为验证科学知识的手段，而缺乏对知识信息作纵向和横向的反馈，因此会阻碍学生创造思维的发展，不利于能力的培养。 与传统实验相对应的是自己设计实验，这种实验只给出实验目的，要求学生自己设计实验方案、选择实验器材、药品、确定实验步骤、分析实验结果。设计性实验是传统实验的延续和发展，是克服学生普遍存在的理论高分、实验低能的有效手段。实验设计是一个动手动脑、培养学生多方面能力的过程，是寻方治病的过程。在实验设计过程中常常会有别有天地的实验现象和心理感觉，学生兴趣盎然。同时学生也会遇到挫折和失败，这也是对学生进行挫折教育、发展学生非智力因素的一种有效手段，这也是我们现代教育中所必须的。 二、实验设计的定义界定和作用 实验设计是根据实验课题所提出的实验目的，让学生在学得的科学知识和实验技能技巧的基础上，选择恰当的实验方案来解决问题的过程。实验设计的课题一旦提出，学生作为认识主体必定要经历思考步骤（想法）和操作步骤（做法）两个科学认识过程。首先需要分析课题所要得到的科学事实是什么，再依次选取欲得到这些事实应采取的正确方法，所使用的仪器设备，应控制的外界条件，对实验结果的分析评估等等，这一系列的思考步骤为认识主体指明和制定了正确的认识方向和道路，是主体顺利达到科学认识目的的主观手段和工具。作为操作步骤则是为主体提供具体的行为方法途径，是主体顺利达到科学目的的现实手段和工具。因此，实验设计这一方法的实施恰恰就是借助于问题情境下，思考步骤和操作步骤两方面的强化实践，使学生在科学知识的学习中有效地提高解决问题的能力，从而也就有效地落实中学科学教学大纲中所提出的“要重视能力培养和科学方法教育”的要求。 三、实验设计能力的培养目标 1. 对实验原理、方法、装置的进一步完善，会提出改进意见； 2. 对于给出的各种方案，能分析和优选出最佳实验方案； 3. 综合运用已学过的科学基础知识和实验基本技能，根据确定的实验目的，自行设计科学实验方案，验证结论，得出规律，探索新知识，解决新问题。 四、实验设计实验的几点说明 1．在平行班中进行试验，结果是试验班与对照班相比，试验班学生的自学能力、思维能力、观察能力、动手能力及意志品质等方面均强于对照班。中考时试验班学生实验题失分率明显降低。 2．实验设计给学生创造了一个良好的学习氛围和最佳的学习心境，大大提高了学习效率。尤其是设计“失败实验”，经过“失败—成功”的多次反复，对学生的震撼力深刻、持久。在这一过程中，学生获得了科学知识，培养了能力，促进了身心发展，培养了良好的意志品质和实事求是勇于探索的精神。同时使学生受到科学研究方法的训练，对他们以后的工作和学习都打下一定的基础。 3．在实验设计过程中，寻找了许多生活及工业废旧物资，如废塑料瓶、废干电池等，来代替科学仪器和药品，这样既减少了环境污染，又做了科学实验，变废为宝，一举两得。这一做法对改善偏远、落后的农村中学的办学条件和实验条件，提高实验的开课率，无疑是一条可行的路子。 可见，在中学科学教学中，加强实验设计，是培养学生能力的有效途径，我们应予以重视、研究和发展，以培养更多的既掌握一定科学知识，又具备一定能力的社会主义建设人才，使科学教育更好地为祖国的科学事业和经济建设服务。
机能实验报告文档 Functional experiment report document 编订：JinTai College
机能实验报告文档 小泰温馨提示：实验报告是把实验的目的、方法、过程、结果等记录下来，经过整理，写成的书面汇报。本文档根据实验报告内容要求展开说明，具有实践指导意义，便于学习和使用，本文下载后内容可随意修改调整及打印。 Ach对离体家兔小肠运动作用 摘要 目的：观察乙酰胆碱对离体家兔小肠肠肌的影响和机制。方法：将离体小肠固定在离体小肠灌流装置里，在保证各影响因素不相互干扰的情况下,分别给予家兔离体肠肌标本生理盐水（Nacl）、Ach、阿托品、阿托品+乙酰胆碱刺激，完成每次刺激并出现明显现象后用38℃的台氏液冲洗肠肌标本，观察其收缩活动的特点并记录。结果：结果显示当滴加生理盐水（Nacl）刺激离体肠肌时，张力曲线没什么变化；当用乙酰胆碱刺激离体肠肌时，张力曲线则明显上升，且频率加快；当滴加阿托品刺激时，张力曲线明显下降，且频率减慢；当滴加乙酰胆碱加上阿托品刺激时，张力曲线变化较不规则。结论：乙酰胆碱（Ach）对离体家兔肠肌有增强其运动的作用，且作用
于M受体。中文关键词：离体家兔小肠肠肌；乙酰胆碱；张 力曲线 Abstract： Objective: to observe the acetylcholine on the influence and mechanism of intestinal muscle of rabbit small intestine in vitro. Methods: in vitro small intestine in vitro intestinal perfusion device fixed, in guarantee under the condition of each influence factor does not interfere with each other, in vitro intestinal muscle specimens were given the rabbit saline （Nacl）, Ach, atropine, atropine + acetylcholine stimulation, complete with 38 ℃ after each stimulus and a significant phenomenon of Taiwan's fluid colonics muscle specimens and observe the characteristics of its contraction activities and record. Results: the results showed that when add saline （Nacl） stimulation in vitro intestinal muscle, nothing change tension curve; When using the acetylcholine stimulation in vitro intestinal muscle, tension curves are obvious rise, and the frequency to speed up; When add atropine stimulation, tension curve
本科临床医学专业《机能实验学》 集体备课教案（3） --“设计性实验” 设计性实验（一） 教学内容：1、实验设计概论 2、实验设计讲座 教学时数：5学时 教学方法：讲授、讨论 教学安排： 集中讲授，实验设计概论（约100分钟）→实验设计讲座（约100分钟）→学生讨论、提问、教师答疑（约25分钟）。 实验设计概论 §1 概述 ﹡机能实验学是一门什么课程？基础医学范畴？ 机能实验学是融合传统的生理学、病理生理学和药理学三门实验内容为一体的新型课程，是实验性很强的医学基础课程。 ﹡实验教学的主要手段？ 人体实验：有一定局限性 动物实验：主要是应用模拟人类疾病的动物模型进行实验研究，是生命科学领域研究正常机体机能代谢规律、疾病发生、发展、转归以及药物作用和机制的主要手段。 ﹡实验教学的主要目的？ 培养学生动手能力、科学思维及创新能力。 ﹡实验教学的主要内容？ 基础性实验：掌握基本实验技术及仪器，设备的使用，培养动手能力。 综合性实验：促进各学科知识的融会贯通。 设计性实验：掌握基本的科研工作方法。 §2 设计性实验 给定实验目的要求和实验条件，由学生自行设计实验方案并加以实现的实验。 以学生为主，导师带教，学生自己选择题目、开题设计、实施实验、观察记录、论文答辩等，即创设“发现情景”，培养学生个性，让学生积极主动的去探索未知世界。 ﹡实验设计目的 1、充分认识实验在科学理论产生和发展中的作用。 2、培养创新能力 3、培养一定的科研能力 ﹡实验设计三个基本要素 1、处理因素： 2、受试对象： 3、实验效应： 如：观察巯甲丙脯酸对肾性高血压大鼠的疗效（动脉血压变化是实验效应） ﹡实验设计的基本原则 1、对照原则：可使处理因素和非处理因素的差异有一个科学对比。 空白对照标准对照处理对照自身对照
新药药理学 ——支气管哮喘病特效药研究方案及临床前筛选和实验方法概述 四川大学华西药学院 2012级 8班 周鹏翔 2012141661009
一、研究背景概述 1．选题及意义 支气管哮喘是由多种细胞（如嗜酸性粒细胞、肥大细胞、T淋巴细胞、中性粒细胞、气道上皮细胞等）和细胞组分参与气道慢性炎症性疾患。这种慢性炎症导致气道高反应性的产生，通常出现广泛多变的可逆性气流受限，并引起反复发作的喘息、气急、胸闷或咳嗽等症状，常在夜间和（或）凌晨发作、多数患者可自行缓解或经治疗缓解[1]。而有关支气管哮喘，众多细胞因子参与其发作，其中白介素23（IL23）水平和哮喘发作密切相关。IL-23是2000年发现的细胞因子，具有多种生物学功能，并在多种疾病中发挥重要作用。近年来，IL-23 在支气管哮喘中的作用得到了关注。因此，以IL-23为作用靶点的药物可能对支气管哮喘产生积极的疗效。 2.作用因子及靶点 IL-23由p19和IL-12中的p40 两个亚基组成，它们之间以二硫键相联结。人和鼠的p19 相应蛋白质中均含有5个半胱氨酸残基，无N-糖基化位点，两者有70％同源，其蛋白质组成大部分与IL-12p35、IL-6和G-CSF相近，因而在小鼠体内的药理学实验结果对人有一定的借鉴意义。IL-23的受体由IL-12R中的一个亚基IL-12Rβ1和IL-23R两个亚基组成。人IL-23R的基因定位于人1号染色体距离IL-12Rβ2大约150 kb的地方。人T细胞、自然杀伤细胞（NK）包括NK白血病细胞均可以表达IL-23R[2]。因此，本“新药X”（下称X药）选择以肺组织细胞中IL-23R为作用靶点，特异性竞争性地抑制IL-23和其受体结合，减少其表达蛋白产物的生成，从而缓解支气管哮喘。 3．靶点选择的文献依据 通过构建动物模型，分为正常组、哮喘组，应用ELISA 法检测两组小鼠外周血IL-23 水平、RT-PCR 法检测肺组织中IL-23p19mRNA 表达、免疫组化法检测肺组织中IL-23 表达;分离小鼠脾脏T淋巴细胞进行体外培养，应用RT-PCR 法检测小鼠脾脏T淋巴细胞IL-23p19mRNA 表达水平、Western blot检测IL-23p19蛋白表达情况[3]（图片以及表格数据均引用于该文章）。结果表明哮喘小鼠中，IL-23 在血清、肺组织、脾脏T淋巴细胞中表达均较正常小鼠明显增高（P<0.01）。另一篇文献也做了类似的研究，将45只雌性C57/6J小鼠随机分为哮喘组、肥胖哮喘组（肥哮组）和对照组各15只。卵白蛋白激发致敏和高脂饮食制作肥胖哮喘模型，计 [1]引自百度百科“支气管哮喘”词条 [2]李艳春，鲁继荣.白介素-23的生物学功能.临床儿科杂志。2010.3：295-299 [3]李艳春，孙萌，赵丽娜，鲁继荣.白细胞介素23在哮喘小鼠动物模型中表达的研究.中国免疫学杂