试题
填空题
选择题(单选或多选)
1．因研究重组DNA技术而获得诺贝尔奖的科学家是（ c ）
（a）A.Kornberg (b)W.Gilbert (c)P.Berg (d) B.McClintock
2．第一个作为重组DNA载体的质粒是（ c ）
（a）pBR322 (b)Co1 E1 (c)pSC101 (d)pUC18
3．第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是（ a ）
(a)Eco RⅠ(b) )Eco B (c) )Eco C (d) Eco RⅡ
4．Ⅱ型限制性内切核酸酶：（ b ）
（a）有内切核酸酶和甲基化酶活性且经常识别回文序列
（b）仅有内切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供
（c）限制性识别非甲基化的核苷酸系列
（d）有外切核酸酶和甲基化酶活性
（e）仅有外切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供
5．下面有关限制酶的叙述哪些是正确的（bcde ）
（a）限制酶是外切酶而不是内切酶
（b）限制酶在特异序列（识别位点）对DNA进行切割
（c）同一种限制酶切割DNA时留下的末端序列总是相同的
（d）一些限制酶在识别位点内稍有不同的点切割双链DNA，产生黏末端
（e）一些限制酶在识别位点内相同的位置切割双链DNA，产生平末端
6．第一个被分离的Ⅱ类酶是：（ c ）
（a）Eco K (b) Hin dⅢ(c) Hin dⅡ(d) Eco B
7．双链DNA中一段自我互补的序列被称为回文序列，这种序列一般具有下列特征：（abc ）
（a）有对称轴（b）两条链的5＇→3＇方向的序列相同
（c）是Ⅱ类酶的识别序列(d) 可增强基因的表达
8．.限制性内切核酸酶可以特异性地识别：（ b ）
（a）双链DNA的特定碱基对（b）双链DNA的特定碱基序列
（c）特定的三联密码（d）以上都正确
9．限制性内切核酸酶的星号活性是指：（ a ）
（a）在非常规条件下，识别和切割序列发生变化的活性
（b）活性大大提高
（c）切割速度大大加快
（d）识别序列与原来的完全不同
10．下面哪一种不是产生星号活性的主要原因：（ d ）
（a）甘油含量过高（b）反应体系中含有有机溶剂
（c）含有非Mg 2+的二价阳离子（d）酶切反应时酶浓度过低
11．DNA被某种酶切割后，电泳后得到的电泳带有些扩散，下列原因中，那一项不太可能？
（ a ）
（a）酶失活(b)蛋白质（如BSA）同DNA结合
（c）酶切条件不合适(d)有外切核酸酶污染
12．.关于回文序列，下列各项中，（ d ）是不正确的
（a）是限制性内切核酸酶的识别序列（b）是某些蛋白的识别序列
（c）是基因的旁侧序列（d）是高度重复序列
13．关于宿主控制的限制修饰现象的本质，下列描述中只有（ b ）不太恰当（a）由作用于同一DNA序列的两种酶构成
（b）这一系统中的核酸酶都是Ⅱ类限制性内切核酸酶
（c）这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰
（d）不同的宿主系统具有不同的限制-修饰系统
14．T4DNA连接酶是从T4噬菌体感染的E.coli中分离的，这种连接酶（ b ）（a）催化连接反应时既能以A TP又能以NAD作为能量来源
（b）既能催化平末端连接又能催化黏性末端连接
（c）是一种单肽酶，分子量为74kDa
（d）既能催化单链DNA连接又能催化双链DNA连接
15. DNA连接酶在体内的主要作用是在DNA复制、修复中封闭缺口，（ a ）（a）将双链DNA分子中的5＇磷酸基团同3＇-OH末端重新形成磷酸二酯键
（b）作用时不消耗能量
（c）需要Mn2+等二价辅助离子
（d）也可以连接RNA分子
16. 在长模板链的指导下引物延伸合成长的DNA互补链时应选用（ d ）
（a）T4DNA聚合酶
（b）Klenow酶
（c）大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ
（d）T7 DNA聚合酶
17．在基因工程中，可用碱性磷酸酶（ab ）
(a)防止DNA的自身环化
(b)同多核苷酸激酶一起进行DNA的5＇末端标记
(c)制备突出的3＇末端
(d)上述说法都正确
18．从E.coli中分离的连接酶：（ b ）
（a）需要A TP做辅助因子
（b）需要NAD作辅助因子
（c）可以进行平末端和黏性末端连接
（d）作用时不需要模板
19．下列哪一种酶作用时需要引物？（ c ）
（a）限制酶
（b）末端转移酶
（c）反转录酶
（d）DNA连接酶
20．Klenow酶与DNA聚合酶相比，前者丧失了（ c ）的活性。
（a）5＇→3＇合成酶（b）3＇→5＇外切酶
（c）5＇→3＇外切酶（d）转移酶
21．下面关于松弛型质粒(relaxed plasmid)性质的描述中，（ c ）是不正确的。
（a）质粒的复制只受本身的遗传结构的控制，而不受染色体复制机制的制约，因而有较多的拷贝数
（b）可以在氯霉素作用下进行扩增
（c）通常带有抗药性标记
（d）同严紧型质粒融合后，杂合质粒优先使用松弛型质粒的复制子
22．下列哪种克隆载体对外源DNA的容载量最大？（ c ）
（a）质粒
（b）黏粒
（c）酵母人工染色体（YCA）
（d）λ噬菌体
（e）cDNA表达载体
23．松弛型质粒：（ d ）
（a）在寄主细胞中拷贝数较多（b）可用氯霉素扩增
（c）一般有选择标记(d) 上述（a）（b）两项正确
24．Co1 E1是唯一用作基因工程载体的自然质粒，这种质粒：（acd ）
（a）是松弛复制性（b）具有四环素抗性
（c）能被氯霉素扩增(d) 能产生肠杆菌素
25．同一种质粒DNA，以三种不同的形式存在，电泳时，它们的迁移速率是：（ b ）（a）OC DNA＞SC DNA＞L DNA(b) SC DNA＞L DNA＞OC DNA
(c) L DNA＞OC DNA＞SC DNA(d) SC DNA＞OC DNA＞L DNA
26．pBR322是一种改造型的质粒，含有两个抗性基因，其中四环素抗性基因来自：（ c ）(a) Co1 E1 (b)Ri质粒(c)pSC101 (d)pUC18
27．第一个作为重组DNA载体的质粒是：（ c ）
(a) pBR322 (b) Co1 E1 (c)pSC101 (d)pUC18
28．关于M13的IG区，下列说法中那一项不妥当？（ d ）
(a)具有正负链的复制起点
(b)具有噬菌体DNA被包装的信号
(c)具有150个碱基的A T富集区
(d)具有八个回文序列，可形成五个发夹环
29．有两种确定核酸中核苷酸序列的方法：化学序列分析法（Maxam-Glbert）和酶学序列分析法（Sanger）。酶学测序法的基本原理优点是：（ b ）
(a)碱基与特殊染料间不同的相互作用
(b)一个合成引物的延伸和DNA合成的可靠终止
(c)限制性位点与DNA末端标记的相关性
(d)可同时对DNA双螺旋的两条链进行测序
(e)反应是DNA特异的，RNA不会带来干扰。这样既减少纯化步骤，也节约了开支
30．用碱法分离质粒DNA时，染色体DNA之所以可以被除去，是因为：（ c ）(a)染色体DNA断成了碎片(b)染色体DNA分子量大，而不能释放
(c)染色体变性后来不及复性（d）染色体体未同蛋白质分开而沉淀
31．关于碱解法分离质粒DNA，下面哪一种说法不正确？（ d ）
(a)溶液Ⅰ的作用是悬浮菌体
(b)溶液Ⅱ的作用是使DNA变性
(c)溶液Ⅲ的作用是使DNA复性
(d）质粒DNA分子小，所以没有变性，染色体变性后不能复性
32．异戊醇的作用是：（ d ）
(a)使蛋白质脱水
(b)使DNA进入水相
(c)帮助DNA进入水相
(d)减少气泡，促进分相
33．关于PCR扩增停滞的原因有很多种，但下列各项中，（ a ）项不是主要原因。
(a)底物（模板）过剩
(b)dNTP的大量消耗
(c)产物的聚集
(d)非特异性产物的竞争性抑制
34．Clark做了一个有趣的实验，发现Taq DNA聚合酶可以不需要模版，在双链DNA的末端加一个碱基，主要是加（ b ）
(a)dGTP
(b)dA TP
(c) dCTP
(d) dTTP
35．下面关于多克隆位点（multiple clone site,MSC）的描述，不正确的一句是：（ a ）
(a)仅位于质粒载体中
(b)具有多种酶的识别序列
(c) 不同酶的识别序列可以有重叠
(d) 一般是人工合成后添加到载体中
36．cDNA文库包括该种生物的（ a ）
(a)某些蛋白质的结构基因
(b)所有蛋白质的结构基因
(c)所有结构基因
(d)内含子和调控区
38．Southern印迹的DNA探针（ c ）杂交。
(a)只与完全相同的片段
(b)可与任何含有相同序列的DNA片段
(c)可与任何含有互补序列的DNA片段
(d)可与用某些限制性内切核酸酶切成的DNA片段
(e)以上都是
39．用下列方法进行重组体的筛选，只有（ c ）说明外源基因进行了表达。(a) Southern印迹杂交(b) Northern印迹杂交
(c)Western印迹(d) 原位菌落杂交
40．下列哪一个不是Southern印迹法的步骤？（ b ）
(a)用限制酶消化DNA
(b)DNA与载体的连接
(c)用凝胶电泳分离DNA片段
(d) DNA片段转移至硝酸纤维素膜上
(e)用一个标记的探针与膜杂交
41．用菌落杂交法筛选重组体时，（bc ）
(a)需要外源基因的表达(b) 不需要外源基因的表达
(c)要根据克隆基因同探针的同源性(d) 上述说法都正确
42．切口平移可用于在（ b ）在作用下，使（b）带上放射性标记。
(a)ＤＮＡ聚合酶Ⅰ，ＲＮＡ(b)ＤＮＡ聚合酶Ⅰ，ＤＮＡ
(c)ＤＮＡ聚合酶Ⅲ，ＲＮＡ(d)ＤＮＡ聚合酶Ⅲ，ＤＮＡ
43．用于核酸分子杂交的探针可以是放射性标记的（ab ）
(a)DNA(b) RNA(c)抗体(d)抗原
44．在切口移位标记DNA探针时只能使用（ b ）
(a) Klenow酶(b)ＤＮＡ聚合酶Ⅰ
(c)ＤＮＡ聚合酶Ⅱ(d)ＤＮＡ聚合酶Ⅲ
判断题
1.限制与修饰现象是宿主的一种保护体系，它是通过对外源DNA的修饰和对自身DNA
的限制实现的。F
2.已知某一内切核酸酶在一环状DNA上有3个切点，因此，用此酶切割该环状DNA，
可得到3个片段。T
3.基因工程中使用的Ⅱ类限制性内切核酸酶不仅有内切核酸酶的活性，而且有甲基化酶的
活性。F
4.甘油会使很多限制性内切核酸酶的特异性发生改变，是导致一些酶的星活性的主要原因
之一，防止的办法是酶切反应体系中，将甘油的浓度控制在5%以下。T
5.T4DNA连接酶和E.coli连接酶都能催化平末端和黏性末端的连接。F
6.T4DNA连接酶和E.coli连接酶都能催化双链DNA和单链DNA的连接。F
7.迄今发现的质粒DNA都是环状的。F
8.能够在不同的宿主细胞中复制的质粒叫穿梭质粒。T
9.只有完整的复制子才能进行独立复制，一个失去了复制起点的复制子不能进行独立复
制。T
10.pBR322可以用于黏性末端连接、平末端连接和同聚物接尾法连接、无论用哪种方法连
接，都可以用同一种酶回收外源片段。T
11.一般情况下，质粒既可以整合到染色体上，也可以独立存在。F
12.某一染色体DNA经内切酶SalⅠ切割后，产生了若干个具有黏性末端的DNA片段，将
这些片段分别在T4 DNA连接酶的作用下自身连接成环，然后导入受体细胞，都可以进行独立地复制。F
13.基因克隆中，低拷贝数的质粒载体是没有用的。F
14.取代型载体（replacement vector）是指同一种限制性内切核酸酶在λDNA中具有两个切
点。外源DNA通过取代这两个切点间的片段被克隆。F
15.现在最常用的pUC载体是pUC18，它的分子量小，具有多克隆位点和易于选择的分子
标记，并且是松弛型复制。另外，这种载体可在辅助质粒的帮助下合成单链DNA.。F
16.λ噬菌体DNA和M13单链噬菌体DNA在成熟前的DNA复制都是用滚环模型。T
17.所谓引物就是同DNA互补的一小段RNA分子。F
18.PCR既能用于扩增任何天然存在的核苷酸序列，又能重新设计任何天然核苷酸序列的
两个末端。因此，任何两个天然存在的DNA序列都能快速有效的扩增，并拼接在一起。
T
19.密码的偏爱性是指不同种属的生物对简并密码具有不同的使用频率。T
20.外源基因（或DNA片段）插入到某一基因内的位点后，这个基因不再有任何功能。F
21.基因组DNA文库是含有某一生物中全部DNA序列随机克隆的克隆群，而cDNA文库
是含有某一生物中所有表达基因随机克隆的克隆群。F
22.cDNA克隆较之基因组克隆最重要的优越性就是它们含有一个基因的完整序列。F
23.以λ噬菌体为载体的筛选方法比较简便，凡能形成噬菌斑的就一定是重组体。F
24.核酸杂交探针就是带有放射性标记的DNA分子。F
25.在Northern 杂交中，为了防止RNA形成部分环状发夹结构，影响迁移率，所以要用变
性缓冲液进行电泳。T
26.切口移位法（nick translation）只能标记线性双链DNA不能标记环状双链DNA。F
27.通过原位菌落杂交得到的阳性克隆即是重组体，但不能判断插入的外源基因是否进行了
表达。T
28.在杂交之前先用凝胶电泳将粗提取物中的RNA或DNA分子进行分离，假定杂交后只
有一种或少数几种大小的片段被探针杂交上了，就能肯定这种杂交是特异性的。T
29.核酸杂交的原理是根据DNA分子间互补。F
30.X-gal显色反应的基本原理是使载体上与受体互补的α肽失活。T
31.Northern印迹和Southern印迹的基本原理是一样的，都是用于检测结构基因的表达。F
概念题
回文序列，同裂酶，同位酶，同尾酶，聚合酶链式反应，RT-PCR，Southern blot，Northern blot，Western blot，原位杂交，DNA Microarray，gene library，质粒，克隆载体，定向克隆，包涵体，T7 RNA聚合酶，质粒的稳定性
简答题
1.在序列5＇-CGAACATATGGAGT-3＇中含有一个6bp的Ⅱ类限制性内切核酸酶的识别序列，
该位点的序列可能是什么？
2.下面几种序列中你认为哪一个（哪些）最有可能是Ⅱ类酶的识别序列：
GAA TCG，AAA TTT，GA TA TC，ACGGCA？为什么？
3.列举质粒载体必须具备的4个基本特性。
4.PCR的基本原理是什么？用PCR扩增某一基因，必须预先得到什么样的信息？
5.酵母人工染色体要在酵母细胞中稳定存在，必须有哪些基本的结构？
6.欲将一真核生物的结构基因克隆后转移到原核生物（如E.coli）中进行表达，克隆时应
注意哪些问题？
7.切口平移（nick translation）标记探针的主要步骤有哪些？
8.什么是Western印迹？它与Southern印迹有什么不同？
9.碱裂解法制备质粒的基本原理是什么？
问答题
1.为什么野生型的λ噬菌体DNA不宜作为基因工程载体？
2.什么是蓝白斑筛选法？
3.蓝白斑筛选法为什么也会有假阳性？
4.λ噬菌体载体具有哪些优点与不足？
5.Northern印迹与Southern印迹有什么不同？
6.T7启动子驱动的大肠杆菌表达系统的工作原理是什么？
第五章转基因植物
一、单选题
1、转基因植物技术最基本的理论基础是：
A、植物细胞可形成愈伤组织
B、植物细胞具有细胞壁
C、植物细胞具有全能性
D、植物可产生花粉
2、下列关于细胞全能性的叙述错误的是：
A、植物体细胞具有全能性
B、动物体细胞与植物体细胞具有相同程度的全能性
C、动物受精卵的全能性大于卵细胞的全能性
D、植物幼嫩组织细胞的全能性大于衰老组织
3、分离基因组DNA不可能用到的技术是：
A、RT-PCR
B、高保真PCR技术
C、DNA提取技术
D、凝胶回收技术
4、分离cDNA基因可能用到的技术组合是
A、RNA提取技术、RT-PCR技术、电泳及凝胶回收技术
B、RNA提取技术、PCR技术、电泳及凝胶回收技术
C、DNA提取技术、PCR技术、电泳及凝胶回收技术
D、DNA提取技术、RT-PCR技术、电泳及凝胶回收技术
5、要将DNA片段定向插入载体中，下列操作或设计错误的是：
A、选择合适的限制性内切酶对载体和目的基因进行双酶切
B、在目的DNA片段的两个扩增引物中引入合适的限制性内切酶识别位点
C、酶切产物不经乙醇沉淀回收直接与载体相连接
D、阳性克隆的鉴定最好用双酶切鉴定配合凝胶电泳的方法进行
6、植物组织转基因受体系统的描述错误的是
A、取材广泛
B、转化效率低
C、再生植株变异大
D、转化的外源基因稳定性差
7、关于植物细胞原生质受体系统的描述错误的是：
A、是植物除去细胞壁后的部分
B、具有全能性
C、可通过融合捕获外源基因
D、稳定性好
8、关于植物生殖细胞受体系统的描述正确的是：
A、只有花粉可作为植物生殖细胞受体系统
B、具有更强的接受外源DNA的能力
C、不可以利用受精过程进行基因转化
D、无性繁殖的植物亦适合
9、关于叶绿体转化系统的优点描述错误的是：
A、便于外源基因定位整合
B、基因为单拷贝
C、导入的外源基因性状稳定性高，安全性好
D、能直接表达原核基因
10、下列必须以植物原生质系统为转化受体的植物基因转化方法是：
A、显微注射法
B、电击法
C、基因枪法
D、花粉通道法
11、基因枪法的特点是
A、只适合于农杆菌不能转化的植物
B、适合于原生质体系统
C、成本高
D、转化效率低
12、关于花粉通道法的描述错误的是;
A、被转化细胞具有较高的全能性
B、转化受到较强的季节限制
C、避免了细胞培养技术
D、转化方法简单，但育种时间较长
13、目前最常用的双子叶植物遗传转化的方法是：
A、基因枪法
B、花粉通道法
C、农杆菌Ti质粒介导法
D、电击法
14、Ti质粒中在农杆菌内不表达而被转移到植物受体细胞中表达的区段是
A、T-DNA区
B、Vir区
C、Con区
D、Ori区
15、天然Ti质粒中催进T-DNA转移的区段是：
A、T-DNA区
B、Vir区
C、Con区
D、Ori区
16、关于T-DNA的描述错误的是：
A、该区在农杆菌内不表达
B、没有毒区的产物，该区不转移
C、该区以双链方式转移
D、该区基因表达的产物可为农杆菌提供氮源
17、关于报告基因的描述正确的是：
A、报告基因都是安全的
B、报告基因都是不安全的
C、报告基因编码的产物不一定都是酶
D、GFP基因只能用在植物基因工程中
18、下列方法中可检测蛋白质表达水平的是：
A、Southern 杂交
B、Northern 杂交
C、Western 杂交
D、Eastern 杂交
19、下列何种检测结果说明基因沉默类型属于“共抑制”？
A、Southern 杂交阳性Northern 杂交阳性，Western 杂交阳性
B、Southern 杂交阳性Northern 杂交阴性，Western 杂交阴性
C、Southern 杂交阴性Northern 杂交阴性，Western 杂交阴性
D、Southern 杂交阳性Northern 杂交阳性，Western 杂交阴性
20、下列何种检测结果说明基因沉默类型属于位置效应？
A、Southern 杂交阳性Northern 杂交阳性，Western 杂交阳性
B、Southern 杂交阳性Northern 杂交阴性，Western 杂交阴性
C、Southern 杂交阴性Northern 杂交阴性，Western 杂交阴性
D、Southern 杂交阳性Northern 杂交阳性，Western 杂交阴性
二、填空题
三、是非题
1、所有的植物基因转化方法都建立在原生质体水平上
2、农杆菌介导的转化方法主要适用于单子叶植物。
3、T-DNA是存在于农杆菌染色体上
4、农杆菌Ti质粒的功能是将T-DNA转移到植物细胞中并且为之产生大量的氮源
5、基因沉默是指外源基因转录但不翻译的情况
6、病毒载体是目前基因工程中最常用的载体
四、名词解释
1、转基因植物
2、 Ti质粒
4、报告基因
五、简答题
1、转基因植物操作的一般路线是什么？
2、转基因植物的鉴定方法有哪些
5、什么是Ti 质粒，简述其四个功能区的名称及功能。
6、农杆菌Ti 质粒介导的植物转基因原理是什么？
第六章转基因动物
一、单选题
1、有关基因工程的叙述正确的是
A.限制性内切酶只在获得目的基因时才用
B.重组质粒的形成在细胞内完成
C.质粒都可以作为运载体
D.蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料
2、“转基因动物”是指
A．含有可利用基因的动物
B．基因组中插入外源基因的动物
C．本身具有抗体蛋白类的动物
D．能表达基因信息的动物
3、1982年面世的“超级小鼠”轰动了整个世界，获得超级小鼠的转基因方法及超级小鼠
中的外源基因分别是：
A. 逆转录病毒法、胰岛素基因
B、逆转录病毒法、生长素基因
C、显微注射法、胰岛素基因
D、显微注射法、生长素基因
4、下列关于逆转录病毒介导的基因转化特点描述错误的是：
A、操作简便
B、可大量感染细胞
C、形成单拷贝
D、转化效率低
5、下列关于显微注射法获得转基因动物的描述错误的是：
A、为提高DNA分子的整合率，通常将DNA线性化
B、提供受精卵的动物双亲最好来自不同品系
C、DNA通常被注射到细胞质中
D、注射后的受精卵最好尽快的移植入养母的输卵管内
6、以下关于动物转基因方法的描述正确的是：
A、显微注射法是对ES细胞的注射
B、逆转录病毒法通常不需要包装细胞参与
C、基因打靶技术通常建立在胚胎干细胞基础上
D、精子载体法最大的优点是实验结果稳定，可重复性强
7、以下哪种受体细胞适合做基因剔除技术？
A、卵细胞
B、精子细胞
C、受精卵
D、胚胎肝细胞
8、克隆羊“多莉”的产生曾经轰动了整个世界，请问该动物是通过下列哪种技术产生的？
A、精子载体法
B、逆转录病毒法
C、体细胞核移植法
D、受体介导法
9、以下关于基因打靶技术的描述不正确的是
A、该技术建立在胚胎干细胞的培养及同源重组基础上
B、外源基因导入细胞后不会出现随机整合
C、利用该技术可实现基因替换
D、利用该技术可实现基因剔除
10、以下关于Cre/lox系统的描述不正确的是
A、该系统来自噬菌体P1
B、Cre是一种重组酶
C、lox是一段34bp的DNA片段
D、Cre在lox位点的结合位置是位于其中间的一段对称序列
二、是非题
1、胚胎移植是动物基因工程必由之路
2、显微注射时DNA被注射入受精卵原核期的雄核中
3、逆转录病毒的包装细胞染色体上整合有病毒包装蛋白基因
4、Cre酶只对原核细胞的lox位点发挥作用
5、基因打靶技术操作中基因导入细胞后可随机整合，亦可能定位整合。
三、名词解释
5、基因剔除
6、基因替换
7、Cre/lox系统
四、简答题
5、什么是基因打靶技术？原理是什么/
五、问答题
1、举例说明转基因动物的应用
第7章基因治疗
一、单选题
1．理论上讲，基因治疗最理想的策略是（）
A、基因置换
B、基因替代
C、基因失活
D、免疫调节
E、导入“自杀基因”
2．利用反义核酸阻断基因异常表达的基因治疗方法是（）
A、基因置换
B、基因替代
C、基因矫正
D、基因失活
E、免疫调节
3．将白细胞介素-2基因导入肿瘤病人体内，提高病人IL-2的表达水平，进行抗肿瘤辅助治疗。这种基因治疗方法是（）
A、基因置换
B、基因替代
C、基因矫正
D、基因失活
E、免疫调节
4．下列哪种方法不是目前基因治疗所采用的方法（）
A、基因缺失
B、基因置换
C、基因替代
D、基因失活
E、免疫调节
5. 基因治疗的基本程序中不包括（）
A、选择治疗基因
B、选择载体
C、选择靶细胞
D、将载体直接注射体内
E、将治疗基因导入靶细胞
6．下列哪种方法不属于非病毒介导基因转移的物理方法（）
A、电穿孔法
B、脂质体法
C、DNA直接注射法
D、显微注射法
E、基因枪技术
7. 下列哪种方法属于非病毒介导基因转移的化学方法（E）
A、电穿孔法
B、基因枪技术
C、DNA直接注射法
D、显微注射
E、DEAE-葡聚糖法
8．将外源治疗性基因导入哺乳动物细胞的方法不包括（）
A、显微注射法
B、电穿孔法
C、脂质体法
D、CaCl2法
E、病毒介导的基因转移
9. 目前在基因治疗的临床实施中，最常使用的载体是（）
A、逆转录病毒载体
B、pBR322
C、λ噬菌体
D、pUC18
E、Y AC
10．逆转录病毒载体的特点中不包括（）
A、容量约10kb
B、有潜在危险性
C、基因转移效率较高
D、只感染分裂状态的细胞
E、感染细胞后产生高滴度病毒
11．在基因治疗时，目前哪一种细胞不能作为靶细胞（）
A、淋巴细胞
B、肿瘤细胞
C、生殖细胞
D、肝细胞
E、造血细胞
12．目前临床基因治疗方案中，针对的疾病最多的是（）
A、癌症
B、单基因遗传病
C、心血管疾病
D、糖尿病
E. 艾滋病
13. 目前下列哪类疾病基因治疗效果最确切（）
A、单基因遗传病
B、多基因遗传病
C、恶性肿瘤
D、感染性疾病
E、心血管疾病
14．苯丙酮尿症的治疗性基因可以是（）
A、苯丙氨酸羟化酶基因
B、次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶基因
C、腺苷脱氨酶基因
D、酪氨酸酶基因
E、1-磷酸半乳糖尿苷转移酶基因
15.基因治疗的步骤为（）
①治疗基因的表达②选择治疗基因
③将治疗基因转入患者体内④选择运输治疗基因的载体
A.②③①④
B.②③④①
C.③④②①
D.②④③①
16.ada缺乏症状不是被选为第一个基因治疗试验的原因是（）
A.这种疾病是由单个基因的缺陷导致，基因治疗成功的可能性高
B.这种疾病是由多个基因的缺陷导致，基因治疗成功的可能性高
C.基因调控很简单，总是“开启状态”，不象许多基因，调控很复杂
D.ada的数量无需精确调控，即使很少量的酶也能受益，即使数量很多也能忍受
17.基因治疗是把健康的外源基因导入（）
A.有基因缺陷的细胞中
B.有基因缺陷的染色体中
C.有基因缺陷的细胞器中
D.有基因缺陷的DNA分子中
18. 全世界第一例基因治疗成功的疾病是（）
A. β地中海贫血
B. 血友病
C. 重症联合免疫缺陷症
D. 高胆固醇血症
E. 糖尿病
二、填空题
三、名词解释
1.基因治疗：指应用DNA重组技术，将外源正常基因导入靶细胞，以矫正或置换致病基因，从而纠正或补偿因基因缺陷和异常引起的疾病,以达到治疗的目的.
2.基因置换：指用正常的基因原位置换病变细胞内的致病基因，使细胞内的DNA完全恢复正常状态。
四、判断题
1．基因治疗的靶细胞是是指接受外源基因的生殖细胞。（×）
2．采用反转录病毒进行基因治疗会增加肿瘤发生的机会。（√）
3．腺相关病毒载体只感染分裂状态的细胞。（×）
五、简答题
1．简述基因治疗的基本方式有哪些？
答：基因治疗的策略包括基因矫正、基因置换、基因替代、基因失活、免
疫调节等。
2．基因治疗选择靶细胞时应注意些什么？
答：理论上讲，无论何种细胞均具有接受外源DNA的能力。除了由于伦
理问题，禁止将生殖细胞作为靶细胞外，其它的体细胞还必须满足下
列条件才可能作为基因治疗的靶细胞
(1) 取材方便；
(2) 在人体内含量比较丰富；
(3) 易于在体外人工培养；
(4) 能够长期在体外培养传代。
3．简述基因治疗的基本程序。
答：基因治疗的一般程序包括
(1) 选择治疗基因；
(2) 选择基因治疗的靶细胞；
(3) 将治疗性基因导入细胞；
(4) 外源基因的筛检
(5) 将外源基因导入体内。
人教版高中生物选修三专题一基因工程测试题 一．选择题（共20小题，每题2分，共20分） 1．基因型为AaBbDd的二倍体生物，其体内某精原细胞减数分裂时同源染色体变化示意图如图．叙述正确的是（） A．三对等位基因的分离均发生在次级精母细胞中 B．该细胞能产生AbD、ABD、abd、aBd四种精子 C．B（b）与D（d）间发生重组，遵循基因自由组合定律 D．非姐妹染色单体发生交换导致了染色体结构变异 2．为了增加菊花花色类型，研究者从其他植物中克隆出花色基因C（图1），拟将其与质粒（图2）重组，再借助农杆菌导入菊花中． 下列操作与实验目的不符的是（） A．用限制性核酸内切酶EcoRⅠ和连接酶构建重组质粒 B．用含C基因的农杆菌侵染菊花愈伤组织，将C基因导入细胞 C．在培养基中添加卡那霉素，筛选被转化的菊花细胞 D．用分子杂交方法检测C基因是否整合到菊花染色体上 3．一对夫妇所生子女中，性状上的差异较多，这种变异主要来源于（） A．基因重组B．基因突变C．染色体丢失D．环境变化 4．不属于基因操作工具的是（） A．DNA连接酶B．限制酶C．目的基因D．基因运载体 5．下列哪一项不是基因工程工具（） A．限制性核酸内切酶B．DNA连接酶 C．运载体D．目的基因 6．下列关于基因重组和染色体畸变的叙述，正确的是（） A．不同配子的随机组合体现了基因重组 B．染色体倒位和易位不改变基因数量，对个体性状不会产生影响 C．通过诱导多倍体的方法可克服远缘杂交不育，培育出作物新类型
D．孟德尔一对相对性状杂交实验中，F1紫花植株自交后代发生性状分离的现象体现了基因重组 7．通常情况下，下列变异仅发生在减数分裂过程中的是（） A．非同源染色体之间发生自由组合，导致基因重组 B．非同源染色体之间交换一部分片段，导致染色体结构变异 C．DNA复制时发生碱基对的增添、缺失或改变，导致基因突变 D．着丝粒分开后形成的两条染色体不能移向两极，导致染色体数目变异 8．下列关于基因突变和基因重组的说法中，正确的是（） A．mRNA分子中碱基对的替换、增添、缺失现象都可称为基因突变 B．基因重组只发生有丝分裂过程中 C．非同源染色体上的非等位基因发生自由组合属于基因重组 D．基因型为DdEE的个体自交，子代中一定会出现基因突变的个体 9．基因工程的正确操作步骤是（） ①目的基因与运载体相结合②将目的基因导入受体细胞③检测目的基因的表达④提取目的基因． A．③④②①B．②④①③C．④①②③D．③④①② 10．如图为DNA分子的某一片段，其中①②③分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次是（） A．DNA连接酶、限制性核酸内切酶、解旋酶 B．限制性核酸内切酶、解旋酶、DNA连接酶 C．解旋酶、限制性核酸内切酶、DNA连接酶 D．限制性核酸内切酶、DNA连接酶、解旋酶 11．科学家利用生物技术将人的生长激素基因导入小鼠受精卵的细胞核中，经培育获得一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中，在医学研究及相关疾病治疗方面都具有重要意义．下列有关叙述错误的是（） A．选择受精卵作为外源基因的受体细胞是因为这种细胞具有全能性 B．采用DNA分子杂交技术可检测外源基因在小鼠细胞内是否成功表达 C．人的生长激素基因能在小鼠细胞表达，说明遗传密码在不同种生物中可以通用 D．将转基因小鼠体细胞进行核移植（克隆），可以获得多个具有外源基因的后代 12．用限制酶EcoRⅠ、KpnⅠ和二者的混合物分别降解一个1 000bp（1bp即1个碱基对）的DNA分子，降解产物分别进行凝胶电泳，在电场的作用下，降解产物分开，凝胶电泳结果如下图所示．该DNA分子的酶切图谱（单位：bp）正确的是（）
知识点一基因工程的概念 基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做DNA重组技术。 注意：对本概念应从以下几个方面理解： 知识点二基因工程的基本工具 1.限制性核酸内切酶——“分子手术刀” (1)限制性内切酶的来源：主要是从原核生物中分离纯化来的。 (2)限制性内切酶的作用：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并能将每一条链上特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键切开。 (3)限制性内切酶的切割方式及结果：①在中心轴线两侧将DNA切开，切口是黏性末端。②沿着中心轴线切开DNA，切口是平末端。 2.DNA连接酶——“分子缝合针” (1)来源：大肠杆菌、T4噬菌体 (2)DNA连接酶的种类：E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶。 (3)作用及作用部位：E.coliDNA连接酶作用于黏性末端被切开的磷酸二酯键，T4DNA 连接酶作用于黏性末端和平末端被切开的磷酸二酯键。 注意：比较有关的DNA酶 (1)DNA水解酶：能够将DNA水解成四种脱氧核苷酸，彻底水解成磷酸、脱氧核糖和含氮碱基 (2)DNA解旋酶：能够将DNA或DNA的某一段解成两条长链，作用的部位是碱基和碱基之间的氢键。注意：使DNA解成两条长链的方法除用解旋酶以外，在适当的高温(如94℃)、重金属盐的作用下，也可使DNA解旋。(3)DNA聚合酶：能将单个的核苷酸通过磷酸二酯键连接成DNA长链。 (4)DNA连接酶：是通过磷酸二酯键连接双链DNA的缺口。注意比较DNA聚合酶和DNA连接酶的异同点。 3.基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”
第一讲基因工程和细胞工程 1．(2014·广东卷，25)(双选)利用基因工程技术生产羧酸酯酶(CarE)制剂的流程如图所示，下列叙述正确的是( ) A．过程①需使用逆转录酶 B．过程②需使用解旋酶和PCR获取目的基因 C．过程③使用的感受态细胞可用NaCl溶液制备 D．过程④可利用DNA分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞 解析：过程①是以mRNA为模板合成DNA的过程，即逆转录过程，需要逆转录酶的催化，A正确；过程②表示利用PCR扩增目的基因，在PCR过程中，不需要解旋酶，是通过控制温度来达到解旋的目的，B错误；利用氯化钙处理大肠杆菌，使之成为感受态细胞。C错误；检测目的基因是否成功导入受体细胞的染色体DNA中，可以采用DNA分子杂交技术，D正确。 答案：AD 2．(2014·浙江卷，3)下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是( ) A．连续细胞系的细胞大多具有二倍体核型 B．某些癌细胞在合适条件下能逆转为正常细胞 C．由多个祖细胞培养形成的细胞群为一个克隆 D．未经克隆化培养的细胞系细胞具有相同的性状 解析：连续细胞系的细胞其核型已发生改变；一个祖细胞培养形成的细胞群才为一个克隆；未经克隆化培养的细胞系细胞可能是不同细胞分裂形成的，其性状可能不同。 答案：B
3．(2014·重庆卷，4)如图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述，正确的是( ) A．②的构建需要限制性核酸内切酶和DNA聚合酶参与 B．③侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到④的染色体上 C．④的染色体上若含抗虫基因，则⑤就表现出抗虫性状 D．⑤只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异 解析：构建载体需要限制酶和DNA连接酶，A错误；③侵染植物细胞后，重组Ti质粒上的T－DNA整合到④的染色体上，B错误；染色体上含有目的基因，但目的基因也可能不能转录或者不能翻译，或者表达的蛋白质不具有生物活性，C错误；植株表现出抗虫性状，说明含有目的基因，属于基因重组，为可遗传变异，D正确。 答案：D 4．(2014·江苏卷，23改编)下列关于基因工程技术的叙述，正确的是( ) A．切割质粒的限制性核酸内切酶均特异性地识别6个核苷酸序列 B．PCR反应中温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反应 C．载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因 D．抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达 解析：限制性核酸内切酶大多是特异性识别6个核苷酸序列，但也有识别序列由4、5或8个核苷酸组成的，A错误；PCR中耐高温的DNA聚合酶只是在延伸阶段发挥催化作用，B 项错误；载体质粒上抗生素抗性基因可作为标记基因，供重组DNA的鉴定和选择，不是抗生素合成基因，C错误；目的基因导入了受体细胞不一定就都能正常表达，D正确。 答案：D 5．(2014·广东卷，29)铁皮石斛是我国名贵中药，生物碱是其有效成分之一，应用组
第一章基因工程和蛋白质工程 第一节基因工程的原理 1．简述基因工程的诞生。 2．简述基因工程的原理及技术。(重点) 3．尝试DNA的提取与鉴定。(难点) 1．诞生历程 2. (1)核酸限制性内切酶——“基因手术刀” (2)DNA连接酶——“基因缝纫针” ①作用：将两个DNA片段连接起来，修复被限制性内切酶切开的切口，拼接成新的DNA 分子。 ②种类：T4DNA连接酶(把限制性内切酶切开的黏性末端的缝隙“缝合”起来)。 (3)载体——“分子运输车” ①载体的特点 ⅰ.外源DNA的插入不影响载体在宿主细胞内的自我复制。 ⅱ.有适宜的限制性内切酶酶切位点，最好是对多种限制性内切酶有单一切点。 ⅲ.具有某些标记基因。 ⅳ.载体应对受体细胞无害。
②载体的种类： ⅰ.质粒：它是细菌中独立于细菌DNA之外的小型环状DNA分子。 ⅱ.噬菌体或其他一些病毒。 [合作探讨] 探讨1：下图表示限制性内切酶切割某DNA分子的过程，从下图中可知，该限制性内切酶能识别的碱基序列及其切割位点是什么？ 提示：GAATTC，切点在G和A之间。 探讨2：结合DNA复制的过程分析，限制性内切酶和DNA解旋酶的作用部位有何不同？ 提示：限制性内切酶作用于磷酸和脱氧核糖之间的磷酸二酯键，DNA解旋酶作用于两个碱基之间的氢键。 探讨3：如图，两个核酸片段在适宜条件下，经X酶的催化作用，发生了下述变化，则X酶是什么？ 提示：DNA连接酶。 [思维升华] 1．核酸限制性内切酶 (1)来源和种类 切割DNA的工具是核酸限制性内切酶，又叫限制酶，这类酶主要是从原核生物中分离纯化出来的。迄今已分离出的约有4 000种。 (2)作用 限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 (3)识别序列的组成 一般由6个核苷酸组成，少数由4、5或8个核苷酸组成。 (4)作用结果 当限制酶在它识别序列的中心轴线两侧将DNA的两条链分别切开时，产生的是黏性末端；而当限制酶在它识别序列的中心轴线处切开时，产生的则是平末端。
高中生物选修三综合试题（原创） 1.下列有关限制性内切酶识别的叙述，不正确的是 ( ) A ．从反应类型来看，限制性内切酶催化的是一种水解反应 B ．限制性内切酶的活性受温度、pH 的影响 C ．一种限制性内切酶只能识别双链DNA 中某种特定的脱氧核苷酸序列 D ．限制性内切酶识别序列越短，则该序列在DNA 中出现的几率就越小 2.下图表示一项重要的生物技术，对图中物质a 、b 、c 、d 的描述，正确的是 （ ） A ．a 的基本骨架是磷酸和核糖交替连接而成的结构 B ．要获得相同的黏性末端，可以用不同种b 切割a 和d C ．c 连接双链间的A 和T ，使黏性末端处碱基互补配对 D ．若要获得未知序列d ，可到基因文库中寻找 3．科学家将人体皮肤细胞改造成了多能干细胞——“iPS 细胞”，人类“iPS 细胞”可以形成神经元等人体多种组织细胞。以下有关“iPS 细胞”说法正确的是 （ ） A ．“iPS 细胞”分化为神经细胞的过程体现了细胞的全能性
B ．“iPS 细胞”有细胞周期，它分化形成的神经细胞一般不具细胞周期 C ．“iPS 细胞”可分化形成多种组织细胞，说明“iPS 细胞”在分裂时很容易发生突变 D ．“iPS 细胞”分化成人体多种组织细胞，是因为它具有不同于其他细胞的特定基因 4.下图是利用某植物(基因型为AaBb)产生的花粉进行单倍体育种的示意图，据图判断正确的有 （ ） 花粉――→①植株A ――→②植株B A ．过程②通常使用的试剂是秋水仙素，作用时期为有丝分裂间期 B ．通过过程①得到的植株A 基因型为aaBB 的可能性为1/4 C ．过程①属于植物的组织培养，在此过程中必须使用一定量的植物激素 D ．与杂交育种相比，该育种方法的优点是能明显缩短育种年限 5.下列关于生物工程及其安全性评价的叙述中，正确的是 A ．从输卵管冲取的卵子都需经过人工培养成熟后才能与获能的精子在体外受精 B ．“三北防护林”松毛虫肆虐主要是由于违背了物种多样性的原理 C ．中国政府对于克隆技术的态度是不反对治疗性克隆，可以有限制的进行生殖性克隆研究 D ．由于存在生殖隔离，大田种植转基因抗旱、抗除草剂农作物不存在生物安全性问题 6．下列关于湿地生态恢复工程的叙述错误的是 ( ) A ．该工程采用工程和生物措施相结合的方法 B ．要建立缓冲带，以尽量减少人类的干扰 C ．对湿地的恢复，只注意退耕还湿地或建立自然保护区就可以 D ．湿地的恢复除利用生物工程手段外，还要依靠自然演替机制恢复其生态功能 7．下列措施中不符合城市生态工程建设基本原理的是 ( ) A ．城市规划，分区建设工业区、居民区、生态绿地等 B ．大力推广“环境友好技术”和低污染清洁生产工艺 C ．采用浮床工艺等手段治理水污染 D ．用法律手段严禁汽车上路，禁止造纸厂、酒厂生产，以断绝污染源头 二非选择题 8．农业科技工作者在烟草中找到了一抗病基因，现拟采用基因工程技术将该基因转入棉花，培育抗病棉花品系。请回答下列问题： (1)要获得该抗病基因，可采用__________、__________等方法。为了能把该抗病基因转入到棉花细胞中，常用的运载体是__________。 (2)要使运载体与该抗病基因连接，首先应使用__________进行切割。假如运载体被切割后，得到的分子末端序列为，则能与该运载体连接的抗病基因分子末端是( ) (3)切割完成后，采用__________将运载体与该抗病基因连接，连接后得到的DNA 分子称为__________。 (4)再将连接得到的DNA 分子导入农杆菌，然后用该农杆菌去__________棉花细胞，利用植物细胞具有的__________性进行组织培养，从培养出的植株中__________出抗病的棉花。 (5)该抗病基因在棉花细胞中表达的产物是( ) A ．淀粉 B ．脂类 C ．蛋白质 D ．核酸 (6)转基因棉花获得的__________是由该表达产物来体现的。
高中生物选修三基因工程知识点 基因工程：是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。 （一）基因工程的基本工具 1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶） （1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。 （2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。 （3）结果： 经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。 2.“分子缝合针”——DNA连接酶 （1）两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶）的比较： ①相同点：都缝合磷酸二酯键。 ②区别：E·coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。 （2）与DNA聚合酶作用的异同：
（2）目的：获取大量的目的基因 （3）原理：DNA双链复制 （4）过程： 第一步：加热至90～95℃DNA解链为单链； 第二步：冷却到55～60℃，引物与两条单链DNA结合； 第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始进行互补链的合成。 （5）特点：指数(2^n)形式扩增 第二步：基因表达载体的构建(核心) 1.目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。 2.组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因 （1）启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA 聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。 （2）终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。 第三步：将目的基因导入受体细胞 1.转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。 2.常用的转化方法：
基因工程的发展现状及前景 摘要： 从20世纪70年代初发展起来的基因工程技术，经过30多年来的进步与发展，已成为生物技术的核心内容。许多科学家预言，生物学将成为21世纪最重要的学科，基因工程及相关领域的产业将成为21世纪的主导产业之一近年来随着生物工程技术的发展，许多基因工程抗体陆续问世。基因工程研究和应用范围涉及农业、工业、医药、能源、环保等许多领域。 关键字： 基因工程；基因工程抗体；前景；现状；发展 一、基因工程介绍 1、基本定义 生物学家于20世纪50年代发现了DNA的双螺旋结构，从微观层面更进一步认识了人类及其他生物遗传的物质载体，这是人类在生物研究方面的一次重大突破。60年代以后，科学家开始破译生物遗传基因的遗传密码，简单地说，就是将控制生物遗传特征的每一种基因的核苷酸排列顺序弄清楚。在搞清楚某些单个基因的核苷酸排列顺序基础上，进而进行有计划、大规模地对人类、水稻等重要生物体的全部基因图谱进行测序和诠释。美国从1991年起，准备用15年时间完成人体基因组测序计划。[5] 基因工程（Genetic engineering）原称遗传工程。从狭义上讲，基因工程是指将一种或多种生物体（供体）的基因与载体在体外进行拼接重组，然后转入另一种生物体（受体）内，使之按照人们的意愿遗传并表达出新的性状。因此，供体、受体和载体称为基因工程的三大要素，其中相对于受体而言，来自供体的基因属于外源基因。除了少数RNA病毒外，几乎所有生物的基因都存在于DNA 结构中，而用于外源基因重组拼接的载体也都是DNA分子，因此基因工程亦称为重组DNA技术（DNA recombination）。另外，DNA重组分子大都需在受体细胞中
《选修3专题1基因工程》练习题 一、选择题 1.下列关于DNA连接酶的作用叙述正确的是（） A．将单个核苷酸加到某DNA片段末端，形成磷酸二酯键 B．将断开的两个DNA片段的骨架连接起来，重新形成磷酸二酯键 C．连接两条DNA链上碱基之间的氢键 D．只有将双链DNA片段互补的黏性末端之间连接起来，而不能将双链DNA片段末端之间进行连接 2.下列不属于基因工程常用载体的是（） A．核DNA B．动物病毒 C．λ噬菌体的衍生物D．植物病毒 3.下列说法正确的是（） A．基因表达载体的构建方法是一致的 B．标记基因也叫做抗生素基因 C．显微注射技术是最为有效的一种将目的基因导入植物细胞的方法 D．大肠杆菌是常用的微生物受体 4.要检测目的基因是否成功的插入了受体DNA中，需要用基因探针，基因探针是指 A．用于检测疾病的医疗器械 B．用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子β-球蛋白的DNA D．合成苯丙羟化酶的DNA片段 C．合成 5.目前科学家把兔子血红蛋白基因导入到大肠杆菌细胞中，在大肠杆菌细胞中合成了兔子的血红蛋白。下列哪一项不是这一先进技术的理论依据（） A．所有生物共用一套遗传密码子 B．基因能控制蛋白质的合成 C．兔子血红蛋白基因与大肠杆菌的DNA都是由四种脱氧核苷酸构成，都遵循相同的碱基互补配对原则 D．兔子与大肠杆菌有共同的原始祖先 6. 若要利用某目的基因(见图甲)和P1噬菌体载体(见图乙)构建重组DNA(见图丙)，限制性核酸内切酶的酶切位点分别是Bgl Ⅱ(A↓ GATCT)、EcoR Ⅰ(G↓ AATTC)和Sau3A Ⅰ(↓ GATC)。下
列分析合理的是( ) A.用EcoR Ⅰ切割目的基因和P1噬菌体载体 B．用Bgl Ⅱ和EcoR Ⅰ切割目的基因和P1噬菌体载体 C．用Bgl Ⅱ和Sau3A Ⅰ切割目的基因和P1噬菌体载体 D．用EcoR Ⅰ和Sau3A Ⅰ切割目的基因和P1噬菌体载体 7. 天然的玫瑰没有蓝色花，这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B，而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。现用基因工程技术培育蓝玫瑰，下列操作正确的是( ) A．提取矮牵牛蓝色花的mRNA，经逆转录获得互补的DNA，再扩增基因B B．利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因B C．利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞 D．将基因B直接导入大肠杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞 8．利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类所需的产品。下列选项中能说明目的基因完成表达的是( ) A．棉花细胞中检测到载体上的标记基因 B．山羊乳腺细胞中检测到人生长激素的基因C．大肠杆菌中检测到人胰岛素基因的mRNA D．酵母菌细胞中提取到人的干扰素 9. 基因治疗是指（）A．把健康的外源基因导入有基因缺陷的细胞中，达到治疗疾病的目的 B．对有缺陷的细胞进行修复，从而使其恢复正常，达到治疗疾病的目的 C．运用人工诱变的方法，使有基因缺陷的细胞产生基因突变回复正常 D．运用基因工程技术，把有缺陷的基因切除，达到治疗疾病的目的 10.下图表示细胞膜上乙酰胆碱(一种神经递质)受体基因的克隆技术操作过程，下列相关分析中错误的是( )
基因工程和细胞工程 一、单选题 1．如图是基因工程主要技术环节的一个基本步骤，这一步骤需要用到的工具是 A. DNA连接酶和解旋酶 B. DNA聚合酶和限制酶 C. 限制酶和DNA连接酶 D. DNA聚合酶和RNA聚合酶 【答案】C 【解析】图示表示基因表达载体的构建过程，该过程首先需要用限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和质粒，其次还需要用DNA连接酶将目的基因和质粒连接形成重组质粒，故选C。 2．下面关于植物细胞工程的叙述,正确的是（） A．叶肉细胞已经高度分化,无法表现出全能性 B．叶肉细胞经再分化过程可形成愈伤组织 C．融合植物叶肉细胞时,应先去掉细胞膜 D．叶肉细胞离体培养时,可以表现出全能性 【答案】D 【解析】 试题分析：叶肉细胞已经高度分化，但在体外培养的条件下也能表现出全能性，A错误；叶肉细胞经脱分化过程可形成愈伤组织，B错误；融合植物叶肉细胞时，应先去掉细胞壁，C错误；叶肉细胞离体培养时，可以表现出全能性，形成完整植株，D正确 考点：本题考查植物组织培养的相关知识，要求考生识记植物组织培养的原理、过程、条件等基础知识，掌握植物细胞具有全能性的原因，能结合所学的知识准确判断各选项。 3．如图为白菜一甘蓝杂种植株的培育过程。下列说法正确的是（） A．图示白菜一甘蓝植株不能结籽 B．愈伤组织的代谢类型是自养需氧型 C．上述过程中包含着有丝分裂、细胞分化和减数分裂
D．白菜一甘蓝杂种植株具有的性状是基因选择性表达的结果 【答案】D 【解析】白菜和甘蓝都是二倍体，它们的体细胞杂交后培育的“白菜-甘蓝”杂种植株中2个染色体组来自白菜，2个染色体组来自甘蓝，因为“白菜-甘蓝”属于异源四倍体，是可育的，能产籽，故A错误；愈伤组织是一种高度液泡化的呈无定型状态的薄壁细胞，不能进行光合作用产生有机物，因此愈伤组织的代谢类型是异养需氧型，故B错误；上述过程包括去壁、原生质体融合、植物组织培养等过程，其结果是形成“白菜-甘蓝”幼苗，并未发育到性成熟个体，因此整个过程中有有丝分裂和细胞分化，没有减数分裂过程，故C错误；任何性状都是基因选择性表达的结果，故D正确． 【考点定位】植物体细胞杂交的应用 【名师点睛】据图分析，植物细胞壁的成分是纤维素和果胶，去壁所用的是纤维素酶和果胶酶；原生质体融合所用的方法有物理法和化学法．物理法包括离心、振动、电激等，化学法一般是用聚乙二醇；再生细胞壁形成杂种细胞；脱分化形成愈伤组织，再分化形成“白菜一甘蓝”幼苗． 4．下列有关细胞工程的叙述中正确的一项是（） A．克隆不是无性繁殖 B．用体细胞克隆动物是通过核移植实现的 C．灭活病毒通过溶解磷脂双分子层诱导动物细胞融合 D．动物细胞培养与植物组织培养所用的培养基成分一样 【答案】B 【解析】 试题分析：克隆属于无性繁殖，故A错误。用体细胞克隆动物必须通过核移植才能实现，故B正确。灭活病毒诱导动物细胞融合不是溶解磷脂双分子层而是通过改变膜脂分子排列实现的，故C错误。动物细胞培养液通常需要加入血清，植物组织培养通常需要加入植物激素，故D错误。 考点：本题考查细胞工程相关知识，意在考察考生对知识点的识记理解掌握程度。5．以下哪种物质不可以用于植物细胞的诱导融合剂（） A．PEG B．灭活的病毒 C．离心 D．振动电激 【答案】B 【解析】 试题分析：灭活的病毒是动物细胞工程的诱导剂，不能用于植物细胞工程，故选B。 考点：本题考查植物细胞工程等相关知识，意在考察考生对知识点的识记理解掌握程度。6．下列有关植物细胞工程的叙述，正确的是（） A．在植物组织培养过程中，细胞的遗传物质一般都发生改变 B．植物细胞只要在离体状态下即可表现出全能性 C．植物组织培养过程中始终要保持适宜的光照 D．植物耐盐突变体可通过添加适量NaCl 的培养基培养筛选而获得 【答案】D 【解析】 试题分析：在植物组织培养过程中，细胞的遗传物质一般不发生改变，A错误；植物细胞的全能性指离体的组织器官的经过培养，发育成完整个体的潜能，B错误；植物组织培养过程中开始是要避光，C错误；植物耐盐突变体可通过添加适量NaCl 的培养基培养筛选而获得，D正确；答案是D。 考点：本题考查植物细胞工程的相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。 7．植物组织培养的过程可以归纳为：①? ?再分化③→④；对此叙述有错误的 ?→ ?→ ?脱分化②? 是( ) A．②→③的再分化过程中，培养基中需要添加细胞分裂素与生长素
高中生物选修3第一章基因工程习题 一．单选题：每小题只有一个选项最符合题意。 1．下列有关基因工程的叙述，正确的是：（） A．DNA连接酶的作用是将两个黏性末端的碱基连接起来 B．目的基因导入受体细胞后，受体细胞即发生基因突变 C．目的基因与运载体结合的过程发生在细胞外 D．常使用的运载体有大肠杆菌、噬菌体和动植物病毒等 2．下列关于基因工程的叙述，正确的是：（） A．基因工程经常以抗菌素抗性基因为目的基因 B．细菌质粒是基因工程常用的运载体 C．通常用一种限制性内切酶处理含目的基因的DNA，用另一种处理运载体DNA D．为育成抗除草剂的作物新品种，导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体 3．限制性内切酶的作用实际上就是把DNA上某些化学键打断，一种能对GAATTC专一识别的限制酶，打断的化学键是：（） A．G与A之间的键 B．G与C之间的键 C．A与T之间的键 D．磷酸与脱氧核糖之间的键 4．下面图中a、b、c、d代表的结构正确的是：（） A．a—质粒RNA B．b—限制性外切酶 C．c—RNA聚合酶D．d—外源基因 5．苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花细胞是否已表达，其检测方法是：（）A．是否有抗生素抗性 B．是否能检测到标记基因 C．是否有相应的性状 D．是否能分离到目的基因 6．科学家已能运用基因工程技术，让羊合成并由乳腺分泌抗体，相关叙述中正确的是 ①该技术将导致定向变异②DNA连接酶把目的基因与运载体黏性末端的碱基对连接起来③蛋白质中的氨基酸序列可为合成目的基因提供资料④受精卵是理想的受体A．①②③④ B．①③④Ｃ．②③④Ｄ．①②④ 7．随着转基因技术的发展,基因污染也逐渐产生。下列有关基因污染的说法不正确的是：（）A．转基因作物可通过花粉扩散到它的近亲作物上，从而污染生物基因库 B．杂草、害虫从它的近亲获得抗性基因，可能破坏生态系统的稳定性 C．基因污染是一种不能增殖的污染 D．基因污染较难清除 8．美国农业部指导农民在种植转基因农作物时，要求农民在转基因农作物的行间种植一些普通的非转基因农作物，供害虫取食，这种做法的主要目的是：（） A．保护物种多样性 B．保护害虫的天敌
高中生物选修三专题一试 题 篇一：高中生物选修三专题一基因工程知识点 专题一基因工程 基因工程的概念 基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。 （一）基因工程的基本工具 1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶） （1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位 的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。
黏性末端：当限制酶从识别序列的中心轴线两侧切开时，被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。 平末端：当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时，切开的DNA两条单链的切口，是平整的，这样的切口叫平末端。 2.“分子缝合针”——DNA连接酶 (1)两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶）的比较： ①相同点：都缝合磷酸二酯键。 ②区别：E·coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的 磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。 (2)与DNA聚合酶作用的异同: DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是 （1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。 ②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。 ③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。 ④对受体细胞无害。 （2）最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有
高中生物选修三基因工程主要知识点（1.1、1.2） 一、基因工程：按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。 一、基因工程的三大工具：限制性核酸内切酶—“分子手术刀”；DNA连接酶—“分子缝合针”；基因进入受体细胞的载体—“分子运输车”。 二、限制性核酸内切酶的特点：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且是每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。 三、限制酶识别序列的特点：反向对称，重复排列。 四、限制酶在原核生物中的作用：切割外源DNA，保护细菌细胞。 五、为什么限制酶不剪切原核生物自身的DNA分子？原核生物本身不含相应特异性序列；对DNA分子进行甲基化修饰。 六、两种常见的DNA连接酶：E〃coli DNA连接酶：源自大肠杆菌，只连接黏性末端；T4DNA连接酶：提取自T4噬菌体，两种末端均可连接，连接平末端效率低。 七、DNA连接酶和DNA聚合酶的相同点：都是蛋白质；都能生成3'磷酸二酯键。不同：前者在两个片段之间形成3'磷酸二酯键，后者只能将单个核苷酸连接到已有片段上；前者不需要模版，后者需要。 八、载体需要满足的条件：有一到多个限制酶切点；对受体细胞无害；导入基因能在受体细胞内复制和表达；有某些标记基因；分子大小合适。 九、质粒：一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的很小的双链环状DNA分子。 十、标记基因的作用：鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。 十一、三类载体：质粒；λ噬菌体的衍生物；动植物病毒。 十二、获取目的基因的方法：说法一：从自然界已有的物种中分体（鸟枪法、反转录法）、用人工的方法合成；说法二：从基因文库中获取（鸟枪法、反转录法）、利用PCR技术合成、用化学方法人工合成。 十三、基因库：一个物种中全部个体的全部基因的总和；基因文库：将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入受体菌的群体中储存，个个受体菌分别含有这种生物的不同的基因；基因组文库：含有某种生物全部基因的基因文库；部分基因文库：只含有一种生物部分基因的基因文库；cDNA文库：用某种生物发育的某个时期的mRNA反转录产生的多种互补DNA片段，与载体连接后储存在一个受体菌群中。 十四、 文库类型cDNA文库基因组文库 文库大小小大 启动子无有 内含子无有 基因多少某种生物的部分基因某种生物的全部基因 物种间基因交流可以部分基因可以 十五、人工合成目的基因的两个条件：基因比较小；核苷酸序列已知。 十六、目的基因：主要是指编码蛋白质的基因，也可以使一些具有调控作用的因
5 高二生物《基因工程和细胞工程》测试题姓名班级 （时间：90分钟分数：100分） 一．选择题（本大题包括25题，每题2分，共50分。每题只有一个选项符合题意。） 1．以下说法正确的是（） A.所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 B．质粒是基因工程中惟一的运载体 C．运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接D．质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器 2．植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术与原理不．相符的是（） A．纤维素酶、果胶酶处理和胰蛋白酶处理——酶的专一性 B．植物组织培养和动物细胞培养——细胞的全能性 C．植物体细胞杂交和动物细胞融合——生物膜的流动性 D．紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养——细胞分裂 3．有关基因工程的叙述正确的是（） A.限制性内切酶只在获得目的基因时才用 B.重组质粒的形成在细胞内完成 C.质粒都可作运载体 D.蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料 4．能克服远缘杂交障碍培育农作物新品种的技术是（） A.基因工程 B.组织培养 C.诱变育种 D.杂交育种 5．下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是( ) A．培养人的效应T细胞能产生单克隆抗体 B．培养人的B细胞能够无限地增殖 C．人的成熟红细胞经过培养能形成细胞株 D．用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞 6．PCR技术扩增DNA,需要的条件是( ) ①目的基因②引物③四种脱氧核苷酸 ④DNA聚合酶等⑤mRNA⑥核糖体 A、①②③④ B、②③④⑤ C、①③④⑤ D、①②③⑥ 7．以下对DNA的描述，错误的是（） A.人的正常T淋巴细胞中含有人体全部遗传信息 B.同种生物个体间DNA完全相同 C.DNA的基本功能是遗传信息的复制与表达 D.一个DNA分子可以控制多个性状 8. 蛋白质工程中直接需要进行操作的对象是（） A.氨基酸结构 B.蛋白质空间结构 C.肽链结构 D.基因结构 9．细胞工程的发展所依赖的理论基础是（） A.DNA双螺旋结构模型的建立 B.遗传密码的确立及其通用性的发现 C.生物体细胞全能性的证明 D.遗传信息传递的“中心法则”的发现 10．下列不是基因工程中的目的基因的检测手段的是：（） A.分子杂交技术 B.抗原—抗体杂交 C.抗虫或抗病的接种 D.基因枪法 11．在以下4种细胞工程技术中，培育出的新个体中，体内遗传物质均来自一个亲本的是（） A.植物组织培养 B. 单克隆抗体 C. 植物体细胞杂交 D.细胞核移植 12．动物细胞融合与植物细胞融合相比特有的是（） A.基本原理相同 B.诱导融合的方法类 C.原生质体融合 D.可用灭活的病毒作诱导剂 13．下列哪一项属于克隆（） A．将鸡的某个DNA片段整合到小鼠的DNA分子中 B．将抗药菌的某基因引入草履虫的细胞内 C．将鼠骨髓细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤细胞
基因工程与微生物 基因工程（genetic engineering）又称基因拼接技术和DNA重组技术，是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品。基因工程技术为基因的结构和功能的研究提供了有力的手段。 一、基因工程的概况 基因工程是生物工程的一个重要分支，它和细胞工程、酶工程、蛋白质工程和微生物工程共同组成了生物工程。所谓基因工程（genetic engineering)是在分子水平上对基因进行操作的复杂技术。是将外源基因通过体外重组后导入受体细胞内，使这个基因能在受体细胞内复制、转录、翻译表达的操作。它是用人为的方法将所需要的某一供体生物的遗传物质——DNA大分子提取出来，在离体条件下用适当的工具酶进行切割后，把它与作为载体的DNA分子连接起来，然后与载体一起导入某一更易生长、繁殖的受体细胞中，以让外源物质在其中“安家落户”，进行正常的复制和表达，从而获得新物种的一种崭新技术。它克服了远缘杂交的不亲和障碍。 1974年，波兰遗传学家斯吉巴尔斯基（Waclaw Szybalski）称基因重组技术为合成生物学概念，1978年，诺贝尔生医奖颁给发现DNA 限制酶的纳森斯（Daniel Nathans）、亚伯（Werner Arber）与史密斯（Hamilton Smith）时，斯吉巴尔斯基在《基因》期刊中写道：限制酶将带领我们进入合成生物学的新时代。2000年，国际上重新提出合成生物学概念，并定义为基于系统生物学原理的基因工程 二、基因工程的基本步骤 （1）提取目的基因 获取目的基因是实施基因工程的第一步。如植物的抗病（抗病毒抗细菌）基因，种子的贮藏蛋白的基因，以及人的胰岛素基因干扰素基因等，都是目的基因。 要从浩瀚的“基因海洋”中获得特定的目的基因，是十分不易的。科学家们经过不懈地探索，想出了许多办法，其中主要有两条途径：一条是从供体细胞的DNA中直接分离基因；另一条是人工合成基因。 直接分离基因最常用的方法是“鸟枪法”，又叫“散弹射击法”。鸟枪法的具体做法是：用限制酶将供体细胞中的DNA切成许多片段，将这些片段分别载入运载体，然后通过运载体分别转入不同的受体细胞，让供体细胞提供的DNA（即外源DNA）的所有片段分别在各个受体细胞中大量复制（在遗传学中叫做扩增），从中找出含有目的基因的细胞，再用一定的方法把带有目的基因的DNA片段分离出来。如许多抗虫抗病毒的基因都可以用上述方法获得。 用鸟枪法获得目的基因的优点是操作简便，缺点是工作量大，具有一定的盲目性。又由于真核细胞的基因含有不表达的DNA片段，一般使用人工合成的方法。 目前人工合成基因的方法主要有两条。一条途径是以目的基因转录成的信使RNA 为模版，反转录成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成双链DNA，从而获得所需要的基因。另一条途径是根据已知的蛋白质的氨基酸序列，推测出相应的信使RNA序列，然后按照碱基互补配对的原则，推测出它的基因的核苷酸序列，再通过化学方法，
(完整版)高中生物基 因工程试题 -CAL-FENGHAI-(2020YEAR-YICAI)_JINGBIAN
阶段质量检测(一) 基因工程 (时间：45分钟，满分：100分) 一、选择题(每小题3分，共45分) 1．下列有关基因工程技术的叙述，正确的是() A．重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和载体 B．所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列 C．只要是细菌中的质粒都可以直接作为基因工程中的载体 D．载体必须具备的条件之一是有多个限制酶切割位点，以便与外源基因进行连接2．(浙江高考)天然的玫瑰没有蓝色花，这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B，而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。现用基因工程技术培育蓝玫瑰，下列操作正确的是() A．提取矮牵牛蓝色花的mRNA，经逆转录获得互补的DNA，再扩增基因B B．利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因B C．利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞 D．将基因B直接导入大肠杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞 3．日本下村修、美国沙尔菲和钱永健因在发现绿色荧光蛋白(GFP)等研究方面做出突出贡献，获得2008年度诺贝尔化学奖。GFP在紫外光的照射下会发出绿色荧光。依据GFP 的特性，你认为该蛋白在生物工程中的应用价值是( ) A．作为标记基因，研究基因的表达 B．作为标记蛋白，研究细胞的转移 C．注入肌肉细胞，繁殖发光小白鼠 D．标记噬菌体外壳，示踪DNA路径 4．下列有关质粒的叙述，正确的是( ) A．质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器 B．质粒是细菌细胞质中能自主复制的小型环状DNA C．质粒只有在侵入宿主细胞后，才能在宿主细胞内复制 D．基因工程中常用的载体除了质粒外，还有核DNA、动植物病毒以及λ噬菌体的衍生物 5．下列有关基因工程的叙述正确的是( ) A．用同种限制性核酸内切酶切割载体与含目的基因的DNA片段可获得相同的黏性末端B．以蛋白质的氨基酸序列为依据合成的目的基因与原基因的碱基序列相同 C．检测到受体细胞中含有目的基因就标志着基因工程育种已经成功 D．质粒上抗生素的抗性基因有利于质粒与外源基因连接 6．下列有关基因工程和蛋白质工程步骤的叙述不．正确的是( )
专题八现代生物科技专题 第一讲基因工程和细胞工程 1.(2012·浙江卷，1)用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是() A．都需要用CO2培养箱 B．都需要用液体培养基 C．都要在无菌条件下进行 D．都可体现细胞的全能性 2．下列关于运用植物组织培养技术产生新个体的叙述，错误的是() A．属于无性生殖 B．主要理论依据是植物细胞具有全能性 C．培养过程中由于人工培养基含大量营养，不需光照就能发育成完整植株 D．人工培养基中含植物生长发育所需的全部营养物质，包括矿质元素、糖、维生素等3．(2012·安徽卷，4)2008年诺贝尔化学奖授予了“发现和发展了水母绿色荧光蛋白”的三位科学家。将绿色荧光蛋白基因的片段与目的基因连接起来组成一个融合基因，再将该融合基因转入真核生物细胞内，表达出的蛋白质就会带有绿色荧光。绿色荧光蛋白在该研究中的主要作用是() A．追踪目的基因在细胞内的复制过程 B．追踪目的基因插入到染色体上的位置 C．追踪目的基因编码的蛋白质在细胞内的分布 D．追踪目的基因编码的蛋白质的空间结构 4．限制酶是一种核酸内切酶，可识别并切割DNA分子上特定的核苷酸序列。下图为四种限制酶Bam HⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ和BglⅡ的识别序列和切割位点： 切割出来的DNA黏性末端可以互补配对的是() A．Bam HⅠ和EcoRⅠ B．Bam HⅠ和HindⅢ C．Bam HⅠ和BglⅡ D．EcoRⅠ和HindⅢ 5．对于不同的生物，将重组基因导入受体细胞的方法有差异，下列方法不合适的是 () A．以质粒为运载体，利用大肠杆菌生产人的胰岛素时，可用氯化钙处理大肠杆菌B．以噬菌体为运载体，利用大肠杆菌生产人的凝血因子时，可使其直接侵染大肠杆菌C．以质粒为运载体，利用转基因羊生产人的乳铁蛋白时，可用显微注射技术将重组基因导入受精卵